CH439587A - Verfahren zur Herstellung von antibiotisch wirksamen Stoffen - Google Patents

Description

      Verfahren    zur Herstellung von antibiotisch     wirksamen    Stoen    Die     Erfindung        betrifft    die     Herstellung    von neuen       Antibiotica.    Diese     Antibiotica    können     durch    Züchtung  von neu isolierten     Mikroorganismen    erzeugt werden,

    die der     iGattung    der     thermophilen        Actinomyceten        ange-          hören.        Kulturen    der neuen     Stämme    von     thermophilen          Actinomyceten    sind in der     American    Type     Culture          Collection    unter Aden Nummern     ATCC    14760,     ATCC     14761 und     ATCC    14762 hinterlegt.  



  Die neuen     thermophilen        Actinomycetenstämme    kön  nen nach den üblichen bakteriologischen     Verfahren     zur Isolierung reiner Kulturen gewonnen werden. Bei       Züchtung    in dem von     Tendler    und     Burkholder    in        Applied        Microbiology ,    9, 394-399 (September 1961)  als     .Medium        Ia    beschriebenen Erhaltungsmedium weist  das     Mycel    der     Mikroorganismen        .kurze    spiralförmige       Sporophoren    :

  auf, bei     Verwendung    des weiter unten       beschriebenen    Mediums     erhält        man    ein- oder zwei  sporige Gebilde.     Dir,    Färbung der Kolonien verschiebt  sich     auf    oder     sporulierenden    Seite beim     .Altern    von weiss  über creme, grau nach schwarz. Auf der     Rückseite     erfolgt eine Farbverschiebung von gelb, grau nach  schwarz.

   Das     Spektrum    der     Exoenzyme    einer Kultur       enthält        Caseinlase,        Gelatinase,        Amylase        und        Lipase.     



  Die     neuen    antibiotisch wirksamen Substanzen wer  den erfindungsgemäss dadurch hergestellt, dass man die       Mikroorganismen        ATCC    14760,     ATCC    14761 oder       ATCC    14762 in     einem    .sterilen flüssigen     Nährmedium,     das     eine        assimilierbare    Kohlenstoff- und Stickstoffquelle  enthält, bei einer Temperatur     zwischen    37 und 56  C  kultiviert.

   In einem folgenden Arbeitsgang kann das       Antibioticum        aus    der Gärlösung isoliert     werden.    Opti  male     Wachstumsbedingungen    für :diese     Mikroorganis-          men    liegen bei     ungefähr    48  C und in einem     pH-Be-          reich    von     ungefähr   <B>6,1</B> bis 8,4.  



  Ein geeignetes Nährmedium ist z.     B.    wie folgt zu  sammengesetzt:    Bestandteile  
EMI0001.0077     
  
    Casein <SEP> digeriert <SEP> mit <SEP> pankreasferment <SEP> (Sheffield
<tb>  Chemical <SEP> Co. <SEP> N-Z <SEP> Amine <SEP> Type <SEP> B) <SEP> 0,5
<tb>  Soyaproteinhydrolysat <SEP> (Soytone) <SEP> 0,2
<tb>  Hefeextrakt <SEP> 0,2
<tb>  Lösliche <SEP> Stärke <SEP> 1,0
<tb>  D-Mannitol <SEP> 0,5
<tb>  MgS04. <SEP> 7H20 <SEP> 0,05
<tb>  Spurenelementlösung <SEP> 0,1 <SEP> m1100 <SEP> ml       Zusammensetzung der     Spurenelement-Stammlösung    (pro  ml):

    
EMI0001.0079     
  
    Fe <SEP> als <SEP> Fe(NH4)2S04 <SEP> 1,0 <SEP> mg
<tb>  Zn <SEP> als <SEP> ZnS04 <SEP> 1,0 <SEP> mg
<tb>  Mn <SEP> als <SEP> MnS04 <SEP> 0,5 <SEP> mg
<tb>  Cu <SEP> als <SEP> CUS04 <SEP> 0,08 <SEP> mg
<tb>  Co <SEP> als <SEP> C0S04 <SEP> 0,1 <SEP> mg
<tb>  B <SEP> als <SEP> H3B03 <SEP> 0,1 <SEP> mg       Die erhaltenen antibiotisch wirksamen     Substanzen     können     in        üblicher    Weise, z. B. durch Fällung, isoliert       werden.        Vorzugsweise    können .sie nach Filtrieren oder       Zentrifugieren    der Nährlösung oder nach teilweisem  Ausfrieren aus der verbleibenden Flüssigkeit durch Aus  salzen, z.

   B. mit     AmmonIumsulfat,        abgetrennt    werden.  



  Die     erfindungsgemäss    erhältlichen     Produkte    weisen       oncostatische    und     oncolytische    Eigenschaften auf     und     können deshalb zur     Behandlung    von Tumoren bei  Mensch und Tier eingesetzt werden.  



       Beispiel     Das oben     erwähnte        Nährmedium        wird    mit einer  Ausgangskultur des     Mikroorganismus        ATCC    14760 ge  impft     und        während    171/2 Stunden bei 48  C     bebrüttet.     Die     filtrierte    oder zentrifugierte     Gärbrühe    wird unter       ständigem        Rühren    fast vollständig eingefroren,     dann     bis zu ungefähr     1/1o    des gesamten Volumens aufgetaut,

        der .aufgetaute Anteil durch     Dekantierung    -und     Filtrie-          rung        abgetrennt    und durch     Zentrifugation        geklärt.    Die  verbleibende Lösung     wird    mit     ungefähr    30 %     igem        Am-          moniumsulfat    behandelt und der entstehende Nieder  schlag in physiologischer Salzlösung gelöst.

   Durch Va  riieren der     Konzentration        und    Messung der antibioti  schen     .Aktivität    gegen     Staphylococous        aureus        ATCC     13680     aufgrund    !des Plattentestes mit     Filberpapierron-          dellen    kann ein Präparat     mit    der gewünschten Aktivität  hergestellt     werden.     



  Ein Präparat, :das im     Plattentest    eine     Hemmzone     von 4 mm     zeigt,    kann nach Sterilisierung für     intramus-          kuläre    oder subkutane Injektionen in     einer    täglichen  Dosis von 2,0     m1    verwendet werden.     Zweckmässig    ver  abreicht man diese Dosis erst nach langsamer     Steige-          rung.     



       Ähnliche        tumorhemmende    Präparate erhält man  z. B.     :durch    Kultivierung von     ATCC    14761 und     ATCC     14762     unter    den     vorstehend    gegebenen Bedingungen.  Es treten keine toxischen     Nebenwirkungen,    die einer       medizinischen        Verwertung    der Verbindungen entgegen  stehen, zutage.

Claims (1)

1. PATENTANSPRUCH Verfahren zur Herstellung von antibiotisch wirk samen Substanzen, dadurch gekennzeichnet, dass man die ,Mikroorganismen ATCC 14760, ATCC 14761 oder ATCC.14762 in einem sterilen flüssigen Nährmedium, ,das eine assimilierbare Kohlenstoff- .und Stickstoffquelle enthält, bei einer Temperatur zwischen 37 und 56 C kultiviert.

   UNTERANSPRÜCHE 1. Verfahren nach Patentanspruch, dadurch gekenn zeichnet, dass man das Antibiotiaum aus der Gärlösung isoliert. 2. Verfahren nachPatentanspruch, dadurch gekenn zeichnet, dass .man die Mikroorganismen bei einer Tem peratur von ungefähr 48 C wachsen lässt.

   3. Verfahren nach Patentanspruch, dadurch gekenn zeichnet, dass man die Mikroorganismen bei einem pH Bereich von ungefähr 6,1-8;4 wachsen lässt. 4. Verfahren nach Patentanspruch, dadurch gekenn zeichnet, dass man die antibiotische Substanz durch teilweises Einfrieren und Abtrennen der flüssigen Anteile konzentriert. 5. Verfahren nach Patentanspruch oder einem oder Unteransprüche 1-4, dadurch gekennzeichnet, ,dass man als Mikroorganismus ATCC 14760 verwendet.