CH658786A5

CH658786A5 - Medicaments qui contiennent d'alpha-(n-pyrrolyl)-acides ou de leurs sels ou esters.

Info

Publication number: CH658786A5
Application number: CH2667/83A
Authority: CH
Inventors: Francisco Salto Maldonado; Luis Costa Pla; Jose Luis Fernandez Puentes; Jose Maria Fernandez-Far Sousa
Original assignee: Antibioticos Sa
Priority date: 1982-05-17
Filing date: 1983-05-17
Publication date: 1986-12-15
Also published as: US4563477A; FR2526793B1; ES8404325A1; JPS5910563A; BE896769A; GB2122189A; DE3317666C2; DE3317666A1; GB8312804D0; GB2122189B; FR2526793A1; ES512268A0

Description

La présente invention concerne des médicaments présentant en particulier une activité analgésique et d'anti-agrégation plaquettaire.

Selon l'invention, les médicaments sont caractérisés en ce qu'ils contiennent comme substance active une quantité thèrapeutiquement efficace d'un ou plusieurs composés de formule générale

Ri

R,

R3

N-CH-COOR' I

R

(I)

R4

dans laquelle R, R,, R2, R3 et R4 représentent des atomes d'hydrogène ou des radicaux alkyles, aryles, alkylaryles ou hétérocycliques substitués ou non substitués et R' représente un atome d'hydrogène, un cation métallique, une base organique ou un radical organique, en association avec des excipients et/ou d'autres substances actives pharmaceutiquement acceptables.

Les médicaments peuvent en particulier contenir au moins un des composés suivants:

le DL(±)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle, le DL(±)-a.-(N-pyrrolyl)-p-hydroxy-phénylacétate de dibenzylamine,

l'acide DL(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique,

l'acide D(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique, et l'acide L(—)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique.

Les composés de formule générale I peuvent être préparés par transformation du radical amino d'un amino-acide ou d'un ester correspondant de formule générale:

R

dans laquelle R et R' sont comme définis ci-dessus pour le pyrrole s N-substituê, par réaction avec un dialcoxytétrahydrofuranne ou un de ses dérivés^

Clauson-Kaas et Tyle [Acta Chem. Scand. 6, 667 (1952)] ont décrit la méthoxylation du 2-acétamidométhyl-furanne (formule II) en 2,5-diméthoxy-2-acétamidométhyl-2,5-dihydrofuranné (formule io III). On hydrogène ce composé avec un catalyseur pour obtenir le 2,5-dimêthoxy-2-acétamidométhyl-tétrahydrofuranne (formule IV) qui, avec l'aniline dans l'acide acétique, fournit le l-phényl-2-acét-amidométhylpyrrole (formule V) avec un rendement moyen de 80% selon le schéma réactionnel suivant:

OCH

CH 2-NH-Ac och3 //

CH2-NH-Ac

.OCH-

CH2-NH-Ac

Ensuite, Clauson-Kaas et Tyle ont décrit un procédé général de préparation des pyrroles N-substitués par réaction d'un 2,5-dial-30 coxytêtrahydrofuranne avec des aminés primaires.

R50'

X+ R6-nh2 ACOH R5

+ 2R.-0H P

où R5 représente un radical méthyle ou éthyle et R6 représente un radical alkyle ou aryle. Kaas et coll. ont appliqué la réaction précé-40 dente à diverses aminés aromatiques et aliphatiques.

On peut préparer les composés auxquels l'invention se rapporte, à partir d'a-amino-acides ou de leurs esters, par réaction avec un 2,5-dialcoxy-tétrahydrofuranne généralement dans l'acide acétique à la température d'êbullition. Les alcoxy-tétrahydrofurannes les plus 45 utilisés sont le 2,5-dimêthoxy- et le 2,5-diéthoxytétrahydrofuranne. On obtient généralement des rendements de conversion plus élevés avec le premier. Lorsqu'on emploie dans le mélange réactionnel un grand excès d'acétate de sodium dissous dans l'acide acétique glacial, la durée de réaction peut être considérablement réduite. On so peut représenter schématiquement ces réactions comme suit:

R-CH-NH

60

CO OR

R-CH-N

+ 2CH30H

où R, Rj, R2, R3 et R4. sont comme précédemment définis et R" a la même définition qu'eux.

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Comme précédemment indiqué, on peut employer les amino-acides correspondants comme produits de départ, mais on obtient des rendements accrus lorsqu'on emploie leurs esters comme produits de départ. Bien qu'en principe on puisse employer l'un quelconque des esters (benzylique, nitrobenzylique, méthylique, etc.), on emploie le plus fréquemment les esters méthyliques et éthyliques.

Pour préparer les esters méthyliques, éthyliques, etc., des amino-acides, on prépare une suspension de l'amino-acide dans l'alcool absolu approprié et on y insuffle un courant d'acide chlorhydrique gazeux sec. Après la dissolution, qui s'accompagne de la libération d'une quantité importante de chaleur, on refroidit la solution dans un bain glacé et on poursuit l'apport d'acide chlorhydrique gazeux sec jusqu'à saturation. On laisse ensuite séjourner la solution pendant 3 à 4 heures à la température ordinaire en la protégeant de l'humidité. Finalement, on concentre à sec et on dissout dans l'alcool correspondant puis on cristallise par addition d'éther.

On fait réagir les esters des a-amino-acides (sous la forme libre et sous forme des chlorhydrates) dans l'acide acétique glacial ou dans un mélange d'acide acétique glacial et d'acétate de sodium, à la température d'ébullition pendant dés durées comprises entre 1 minute et environ 1 heure. Lorsque la durée de réaction s'est écoulée, on refroidit le mélange et on élimine le dérivé de type N-pyrrolyl par distillation fractionnée sous vide ou par extraction liquide-liquide.

Dans le second cas, bien qu'on puisse utiliser d'autres solvants, on obtient de bons résultats par dissolution du mélange réactionnel avec de l'eau et extraction du N-pyrrolyl-ester avec de l'acétate d'éthyle. On chasse ensuite le solvant pour obtenir le N-pyrrolyl-ester avec une pureté acceptable.

On peut hydrolyser le N-pyrrolyl-ester selon l'un quelconque des procédés connus. On obtient de bons rendements lorsqu'on dissout l'ester dans un mélange de dioxanne et d'eau et qu'on ajoute un léger excès d'un hydroxyde alcalin. A la température ordinaire, l'hydrolyse s'effectue rapidement en des durées comprises entre 15 minutes et plusieurs heures. On peut, au lieu du mélange de dioxanne et d'eau, employer de façon semblable d'autres mélanges de solvants.

Dès que le solvant organique a été chassé par évaporation sous vide, on extrait la solution alcaline aqueuse de l'a-(N-pyrrolyl)-acide avec un solvant organique (acétate d'éthyle, chlorure de méthylène, chloroforme, méthylisobutylcétone, etc.), à un pH acide, puis on cristallise par concentration et/ou addition d'un solvant d'insolubili-sation tel que l'éther de pétrole, l'hexane normal, etc.

Comme précédemment indiqué, on peut également partir de l'amino-acide libre. Dans ce cas, on solubilise l'amino-acide dans le diméthylformamide par addition d'acide p-toluène-sulfonique puis on ajoute la quantité stœchiométrique du dialcoxytétrahydrofuranne en chauffant à reflux pendant 20 à 60 minutes. Lorsque la réaction est achevée, on refroidit le mélange et on dilue par l'eau, on extrait par l'éther sulfurique et, après élimination de la totalité de l'éther sulfurique, on laisse la phase de diméthylformamide et d'eau cristalliser au réfrigérateur pour obtenir le N-pyrrolyl-acide correspondant.

On peut également préparer les pyrroles N-substitués en employant des métallo-pyrroles comme intermédiaires. Les plus fréquemment employés sont les dérivés de pyrrolyl-magnésium formés par réaction du pyrrole avec des réactifs de Grignard.

h Mg-y où Y est un atome d'halogène et R7 a la même signification que R, si ce n'est qu'il ne représente pas un atome d'hydrogène.

On peut également partir des a-halogéno-acides en les faisant réagir avec le pyrrole ou un de ses dérivés.

Dans les exemples ci-après, on se réfère aux figures 1 à 3 dans lesquelles:

la figure 1 est le spectre infrarouge à 0,5% dans le KBr de l'a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle,

la figure 2 est semblable mais concerne l'acide a-(-pyrrolyl)-phénylacétique,

la figure 3 est semblable mais concerne l'acide a-(N-pyrrolyl)-p-chlorophényl-propionique.

Dans toutes les figures, le pourccentage de transmission est représenté en ordonnées et le nombre d'onde (cm' ') et la longueur d'onde en |im sont représentés en abscisses.

Exemple 1

Chlorhydrate de l'a-phénylglycinate d'éthyle

On insuffle un courant d'acide chlorhydrique sec sur une suspension de 50 g d'a-phénylglycine dans 500 ml d'éthanol absolu. L'amino-acide se dissout avec un dégagement important de chaleur.

Après dissolution de l'amino-acide, on refroidit le mélange réactionnel avec un bain glacé et on poursuit l'insufflation de l'acide chlorhydrique sec jusqu'à saturation à une température de 0-5 ' C. Ensuite, on arrête le courant d'acide chlorhydrique, et on laisse le mélange réactionnel, convenablement protégé de l'humidité, reposer pendant 3 à 4 heures à la température ordinaire. On concentre ensuite le mélange réactionnel sous vide à une température inférieure à 50° C jusqu'à ce qu'il soit sec. On dissout le résidu dans 200 ml d'éthanol absolu et on répète la concentration à sec.

On dissout le résidu dans 150 ml d'éthanol absolu et on cristallise par addition de 600 ml d'éther éthylique. On laisse le mélange au réfrigérateur jusqu'au lendemain. Finalement, on filtre et on lave avec 50 ml d'éther sulfurique. Le produit obtenu pèse 62,8 g (88%).

Exemple 2

a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle

On dissout 52,8 g (0,24 mol) de phénylglycinate d'éthyle dans 136 ml d'acide acétique glacial. On ajoute ensuite 39 g (0,24 mol) de 2,5-diéthoxytétrahydrofuranne en 10 à 15 minutes en agitant. On chauffe le mélange à reflux pendant une heure. Ensuite, on laisse le mélange refroidir et on chasse la majeure partie de l'acide acétique sous pression réduite. Finalement, on distille le résidu sous vide et on recueille la fraction distillant à 115-118 C/0,26 mbar. On obtient le produit sous la forme d'une huile incolore qui cristallise par refroidissement en prenant un aspect cireux et qui pèse 46,5 g (70%). P.f. 51-53° C. Composition centésimale: 73,31% C; 6,08 N; 6,53% H. Le spectre IR à 0,5% dans le KBr est illustré par la figure 1.

Exemple 3

Acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacëtique

On dissout à chaud 18,5 g (0,33 mole) d'hydroxyde de potassium dans un mélange de 65 ml d'éthylèneglycol et 13 ml d'eau. On ajoute à la solution ci-dessus, en agitant, 52,2 g (0,23 mole) d'a-(N-pyrro-lyl)-phénylacétate d'éthyle en agitant et en chauffant à reflux (112-120° C) pendant 5 heures.

Ensuite, on refroidit le mélange réactionnel et on le verse sur une solution de 100 ml d'eau et 100 ml d'éthanol à 96%. On acidifie le mélange à pH 2 avec de l'acide chlorhydrique 2N. Après une heure d'agitation avec refroidissement (5° C), on filtre le mélange et on le sèche. Le produit sec pèse 36 g, ce qui correspond à un rendement de 80%.

On dissout le produit obtenu dans 100 ml de chloroforme, on traite avec du charbon activé et on filtre.

On concentre le filtrat sous vide au tiers du volume initial puis on ajoute 70 ml de méthylcyclohexane. Le produit obtenu pèse, après séchage, 27 g (75%); p.f. 127° C. Equivalent de neutralisation 204. Composition centésimale 71,6% C; 5,52% H; 6,90% N (théorique: 71,64% C; 5,47% H; 6,97% N). Le produit n'a pas d'activité optique. Le spectre infrarouge à 0,5% dans le KBr est illustré par la figure 2. 730 cm-1 (déformation asymétrique de CH du cycle); 1090 cm" ' (déformation symétrique de CH du cycle).

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Exemple 4

Acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique

On ajoute 21,6 g (0,1 mole) de chlorhydrate de phénylglycinate d'éthyle à une solution de 50 g d'acétate de sodium dans 50 ml d'acide acétique glacial et on chauffe à reflux. Après dissolution, on ajoute 16,5 ml (0,1 mole) de 2,5-diméthoxytétrahydrofuranne.

On chauffe le mélange réactionnel pendant une minute. A la fin de cette période, on verse le mélange réactionnel sur environ 1000 g de glace. On extrait deux fois la solution aqueuse avec de l'acétate d'éthyle, la première fois avec 550 ml et la seconde fois avec 250 ml. On mélange ensemble les phases organiques et on lave avec 350 ml d'une solution aqueuse à 5% de carbonate de sodium puis avec 350 ml d'une solution saturée de chlorure de sodium (deux fois). On évapore la phase organique à sec avec un appareil Rotovapor à une température inférieure à 50° C. On dissout le résidu dans 250 ml d'un mélange à 50% de dioxanne et d'eau et on ajoute une quantité suffisante d'hydroxyde de sodium 2N pour obtenir une alcalinité élevée constante. On poursuit l'agitation pendant une heure puis on laisse reposer le mélange jusqu'au lendemain.

Le pH est alors de 13 et on l'abaisse à 6,5 avec de l'acide chlorhydrique 5N. On concentre le mélange avec un Rotovapor pour chasser le dioxanne. On porte le volume à 250 ml avec de l'eau. On extrait deux fois le mélange avec 200 ml de chloroforme, chaque fois à un pH de 1,5-2. On mélange ensemble les phases chloroformiques et on concentre avec un Rotovapor à environ 100 ml puis on cristallise par addition d'éther de pétrole. Le produit obtenu pèse 12,9 g (rendement 64%) après séchage.

Exemple 5

Acide a- (N-pyrrolyl)-phénylacêtique

On met en suspension 15,1 g (0,1 mole) d'a-phénylglycine dans 450 ml de diméthylformamide puis on ajoute 15 g d'acide p-toluène-sulfonique et 13,2 g (0,1 mole) de 2,5-diméthoxytétrahydrofuranne. On chauffe le mélange à ébullition, à environ 95° C tout le produit solide se dissout, et on maintient la température d'ébullition pendant environ 60 minutes. Ensuite, on refroidit le mélange, on ajoute 400 ml d'eau froide et on refroidit la totalité du mélange entre 0 et 5° C. On extrait deux fois le mélange avec chaque fois 200 ml d'éther éthylique et on rejette les phases éthérées. On extrait la phase aqueuse avec 500 ml de chloroforme à pH 1,5. On traite l'extrait chloroformique avec 600 ml d'eau et on ajuste le pH à 11. Après séparation des phases, on ajoute 500 ml de chloroforme à l'extrait aqueux et on ajuste le pH à 1,5 avec de l'acide chlorhydrique 2N. On concentre la phase chloroformique pour obtenir une huile qu'on cristallise dans un mélange de méthanol et d'eau. Après séchage, on obtient 5,8 g d'acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique.

Exemple 6

DL( ±)-a-(N-pyrrolyl)-p-hydroxyphénylacëtate de dibenzylamine

On dissout 50 g d'acétate de sodium dans 500 ml d'acide acétique. On ajoute à la solution 23,2 g (0,1 mole) de p-hydroxyphényl-glycinate d'éthyle. On chauffe la solution obtenue à ébullition puis on ajoute 15,3 g (0,11 mole) de diméthoxytétrahydrofuranne en maintenant l'ébullition pendant une minute.

Ensuite, on ajoute le mélange réactionnel à 1,5 kg d'un mélange de glace et d'eau puis on extrait deux fois par l'acétate d'éthyle.

On réunit les extraits dans l'acétate d'éthyle et on lave d'abord avec du carbonate de sodium à 5% puis avec une solution saturée de chlorure de sodium. Enfin, on concentre sous vide l'extrait dans l'acétate d'éthyle pour éliminer la majeure partie du solvant, on ajoute 150 ml de dioxanne et 100 ml d'hydroxyde de sodium 2N et on maintient l'agitation pendant 2 heures à la température ordinaire. On laisse le mélange réactionnel reposer pendant une nuit, également à la température ordinaire.

On ajoute 190 ml d'eau et on neutralise le mélange à pH 7,5 avec de l'acide chlorhydrique 6N puis on chasse le dioxanne par distillation du mélange sous vide.

On ajoute 180 ml de chloroforme et on ajuste le pH à 2 avec de l'acide chlorhydrique 6N puis on sépare les phases. On extrait à nouveau la phase aqueuse avec 60 ml de chloroforme. On rassemble les extraits chloroformiques et on rejette la phase aqueuse.

On ajoute 200 ml d'eau à l'extrait chloroformique, on ajuste le pH à 7,5 avec de l'hydroxyde de sodium 5N et on sépare ensuite les phases.

On extrait à nouveau la phase chloroformique avec 100 ml d'eau. On réunit les extraits aqueux et on dilue à environ 600 ml.

On ajoute lentement 180 ml d'une solution aqueuse à 15% d'acétate de dibenzylamine à la solution précédente. On effectue l'addition sous agitation et refroidissement en 1,5 heure puis on filtre et on lave à l'eau froide.

On sèche le produit sous vide à 40° C pour obtenir 7,3 g du sel de dibenzylamine de l'acide a-(N-pyrrolyl)-p-hydroxyphénylacétique, p.f. 175-179° C. Le spectre infrarouge à 0,5% dans le bromure de potassium montre les bandes typiques des dérivés de type N-pyrro-lyle (1080 cm"', déformation symétrique de CH du cycle et 730 cm-1, déformation asymétrique).

Exemple 7

Séparation des énantiomères de l'acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique

On dissout 35,1 g de chlorhydrate de yohimbine dans 1800 ml d'eau chaude à 40-50° C. Après dissolution, on précipite la yohimbine base par addition d'ammoniaque 2N jusqu'à un pH constant de 9. Après deux heures au réfrigérateur (4° C) on filtre et on lave à l'eau, puis on laisse le gâteau s'égoutter fortement. Sans séchage, on verse la totalité de la yohimbine base précipitée sur un mélange constitué de 1381 ml d'eau et 284 ml d'éthanol contenant 18 g d'acide a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique dissous.

On porte la suspension à reflux pendant une heure puis on filtre à chaud et on sépare la matière solide insoluble qui pèse 17 g après séchage. On laisse le filtrat refroidir, des aiguilles apparaissant rapidement pour se regrouper sous la forme d'une rose. Après refroidissement à la température ordinaire, on laisse le solide au réfrigérateur à 4° C. Le lendemain, on filtre et on lave à l'eau puis on sèche à 4= C sous vide. Le produit sec pèse 26 g.

On concentre les liqueurs mères sous vide jusqu'à apparition de la cristallisation (environ la moitié du volume initial). On ajuste ensuite le pH à 9 avec de l'hydroxyde d'ammonium 2N et on laisse la yohimbine base cristalliser pendant une heure. Ensuite, on filtre et on lave à l'eau et finalement on sèche la yohimbine base obtenue. On extrait le filtrat avec la moitié de son volume de chlorure de méthylène à pH 1,5. On répète deux fois l'extraction en utilisant chaque fois un demi-volume de chlorure de méthylène. Finalement, on évapore le chlorure de méthylène pour obtenir 2,3 g d'acide D(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de +83".

On remet en suspension le premier solide insoluble dans un litre d'eau à 40-45° C, on ajuste le pH à 9 avec de l'hydroxyde d'ammonium 2N et on maintient le pH pendant une demi-heure. On refroidit à 4° C pendant une heure et on filtre. On extrait deux fois le filtrat avec du chlorure de méthylène à pH 1,5 en utilisant un demi-volume à chaque fois. Finalement, on chasse le chlorure de méthylène par évaporation pour obtenir 6 g d'acide L(—)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de —20°.

On remet en suspension les 26 g d'a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate de yohimbine dans un mélange de 1460 ml d'eau et 137 ml d'éthanol. On chauffe le mélange à ébullition pendant une heure puis on filtre à chaud. Le produit insoluble sec pèse 5 g. On laisse tout d'abord le filtrat cristalliser à la température ordinaire puis on le laisse au réfrigérateur pendant une nuit. Ensuite, on filtre et on lave à l'eau puis on sèche à 40° C sous vide. Le produit sec pèse 16 g. On concentre les liqueurs mères sous vide jusqu'au début de cristallisation et ajuste le pH à 9 avec de l'hydroxyde de sodium 2N. On laisse les liqueurs cristalliser à froid pendant une heure puis on filtre et on lave à l'eau. Qn extrait deux fois le filtrat avec du chlorure de méthylène à pH 1,5 en utilisant à chaque fois un demi-volume.

Enfin, on rassemble les phases organiques et on précipite l'acide D-

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(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique. Après séchage, il pèse 1,3 g et a un pouvoir de rotation de +49,6°. On traite comme indiqué ci-dessus le produit insoluble obtenu dans cette seconde recristallisation pour obtenir 1,6 g d'acide L-(—)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique ayant un pouvoir de rotation de —17°. 5

On recristallise selon la même technique que celle indiquée ci-dessus les 16 g d'a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate de yohimbine pour obtenir 3,2 g d'un sel insoluble qu'on transforme en acide L-(—)-a-(N-pyrroIyl)-phénylacétique pesant 1 g avec un pouvoir de rotation de—17,5". io

Le sel de yohimbine recristallisé pèse 9,3 g et, après conversion en acide, on obtient 3 g d'acide L-(—)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacéti-que ayant un pouvoir de rotation de —19,2°.

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Exemple 8

Acide a-(N-pyrrolyl)-p-chlorophénylpropionique

On dissout 48 g d'acétate de sodium dans 480 ml d'acide acétique. On chauffe la solution à ébullition puis on ajoute 24 g (0,091 20 mole) de chlorhydrate de p-chlorophénylanilinate d'éthyle puis 13,5 g (0,097 mole) de 2,5-diméthoxytétrahydrofuranne. Après avoir laissé réagir à la température ordinaire pendant une minute, on verse le mélange réactionnel sur 950 g d'eau glacée. On extrait le mélange avec 900 ml d'acétate d'éthyle. On obtient l'a-(N-pyrrolyl)-ester par 25 évaporation de l'acétate d'éthyle. On hydrolyse ensuite le produit avec un alcali dans un mélange de dioxanne et d'eau comme décrit dans les exemples précédents. Après élimination du dioxanne, on extrait le mélange à pH 1,5-2 avec du chloroforme puis on cristallise le produit avec de l'éther de pétrole. Après séchage, l'acide a-(N- 30 pyrrolyl)-p-chlorophénylpropionique obtenu pèse 15,2 g et a un point de fusion de 124-126° C. Le spectre infrarouge à 0,5% dans le bromure de potassium est illustré par la figure 3.

Activité analgésique périphérique - contractions provoquées par l'acide acétique 60

Les médicaments qui ont de façon prédominante un effet de suppression de la douleur sont appelés analgésiques et sont généralement divisés en narcotiques et non-narcotiques.

Les non-narcotiques ne provoquent pas de sommeil ni d'accoutumance et sont inefficaces contre certaines formes de douleur. Les « plus caractéristiques de ce groupe sont les saiicylates.

La méthode expérimentale consiste à injecter un irritant tel que l'acide acétique dans le péritoine du rat pour provoquer des contorLes résultats d'essais des propriétés thérapeutiques des composés selon l'invention figurent ci-après.

Activité d'anti-agrégation plaquettaire

On sait depuis de nombreuses années que l'agrégation des plaquettes joue un rôle fondamental dans l'hémostase et la pathogenèse des thromboses, en particulier des thromboses artérielles.

L'agrégation plaquettaire est généralement étudiée in vitro selon une technique photométrique (agrégomètre) décrite par G.V.R.

Born, Nature, 194, 927 (1962).

On emploie pour étudier l'agrégation plaquettaire provoquée «ex vivo» chez le rat par l'ADP des rats Wistar ITA 177, exempts d'organismes pathogènes spécifiques, pesant 100-250 g.

On emploie comme standard l'acide acétylsalicylique à une dose de 100 mg/kg per os.

On administre les produits à étudier à la dose maximale de 200 mg/kg per os.

On administre le standard et les produits en solution ou en suspension dans une solution à 10 ml/kg de Tween.

On fait jeûner les animaux pendant l'essai et les 17 heures précédentes, mais on leur fournit de l'eau à volonté.

Cinq heures après l'administration des produits, on anesthésie les animaux (5 par groupe) et on prélève le sang à la veine jugulaire avec une seringue contenant du citrate de sodium à 3,8%.

On calcule le pourcentage d'agrégation par mesure de la différence en mm de l'enregistrement entre le stade initial de l'agrégation et la hauteur de la courbe de l'échantillon 6 minutes après le début de l'agrégation.

On exprime ensuite cette valeur en pourcentage en prenant pour 100% la valeur en mm de la différence entre le plasma riche en plaquette et le plasma pauvre en plaquettes obtenue lors de l'équilibrage de l'appareil pour l'échantillon examiné.

Les résultats obtenus figurent dans le tableau I ci-dessous.

sions douloureuses évidentes telles qu'un étirement des pattes arrière et une torsion des muscles dorso-abdominaux.

Le mécanisme d'action de l'acide acétylsalicylique en tant qu'analgésique semble se situer à deux niveaux, l'un central et l'autre périphérique avec antagonisme de l'action périphérique de la bradyki-nine, soit à l'endroit où le stimulus nociceptif se produit, soit par inhibition du passage de la bradykinine à travers la barrière hématoencéphalique.

On utilise deux lots de souris NMRI élevées dans notre centre d'élevage d'animaux exempts d'organismes pathogènes spécifiques dans des conditions de température et d'humidité constantes de 23 ± 0,5'J C et 70 ± 5%.

Tableau I

Activité d'anti-agrégation plaquettaire, «ex vivo» chez les rats

Traitement

Dose mg/kgp.o.

N° animaux

Poids moyen eng

Plaquettes %

Inhibition de l'agrégation

%

Contrôle

—

5

160,0 ±4,47

86,4 ±2,15

—

Acide acétylsalicylique

100

5

160,0 ±3,16

20,1 ±1,49

76,7

Phénylbutazone

100

5

160,0 ±5,48

58,2 ± 7,35

32,6

Acide DL (+) -a-(n-pyrrolyl)-phénylacêtique

100

5

158,0 + 3,74

25,3 + 9,28

70,7

Acide a-(N-pyrrolyl)-acêtique

100

5

158,0 ±3,74

63,1 ±3,32

27,0

DL (±)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle

100

5

162,0 + 3,74

42,0 ±2,58

51,4

Test de Duncan Kramer, P < 0,05

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6

Standard: acide acétylsalicylique

Véhicule: propylèneglycol/eau: 40/60 v

Cages en plastique transparent

On répartit les souris en groupes de 10 animaux. On fixe au hasard l'ordre des essais et le traitement de chaque groupe.

On fait jeûner les souris pendant 15-18 heures en leur fournissant de l'eau à volonté et on leur administre les traitements prévus per os (10 mg/kg) en solution ou en suspension dans le véhicule.

Le lot témoin reçoit le véhicule. Comme standard, on emploie l'acide acétylsalicylique à une dose de 100 mg/kg en suspension dans le même véhicule et on l'administre per os.

Après 30 minutes, on administre par voie intrapéritonéale 0,25 ml de solution d'acide acétique à 0,5% pour 20 g de poids corporel.

On laisse s'écouler 15 minutes, puis on observe les souris pendant une demi-heure en les plaçant chacune dans une cage en plastique transparent retournée.

On compte le nombre des contorsions douloureuses et, pour évaluer le résultat, on calcule la moyenne du nombre des étirements 5 de chaque lot et on l'exprime par le pourcentage d'inhibition relativement aux témoins, selon l'équation suivante:

c lu

% de protection = x 100

c

10

où c est la moyenne du nombre des étirements du groupe témoin et b la moyenne du nombre des étirements du groupe traité.

On peut évaluer la signification statistique entre les lots selon le test de Duncan-Kramer avec p < 0,05.

15 Les résultats obtenus figurent dans le tableau II ci-dessous.

Tableau II Activité analgésique

Contorsions induites par 0,05 % d'acide acétique d'une des souris mâles NMRI (n=10)

Traitement

Dose mg/kg

N° contorsions X + s.e.

% inhibition par rapport au contrôle

N° souris avec des contorsions

Contrôle

100

27,1+4,3

—

10/10

Acide acétylsalicylique

100

17±3,5

37,27

10/10

Acide DL (±)-cc-(N-pyrrolyl)-phényl-accétique

100

5,5+1,8

79,7

7/10

Acide D (+)-a-(N-pyrrolyl)-phényl-acétique

100

7,9+2,6

70,9

8/10

Acide L-(—)-a-(N-pyrrolyl)-phényl-acétique

100

6,4+1,9

76,2

8/10

DL (±)-a-(N-pyrrolyl)-p-hydroxy-phénylacétate de dibenzylamine

100

7,5+2,2

72,3

9/10

Test de Duncan Kramer, p < 0,05

R

3 feuilles dessins

Claims

658786

1. Médicaments présentant en particulier une activité analgésique et d'anti-agrégation plaquettaire, caractérisés en ce qu'ils contiennent comme substance active une quantité thèrapeutiquement efficace d'un ou plusieurs composés de formule générale I

Ri

R.

R3

N-CH-COOR'

I

R

(I)

R4

2. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance active est le DL(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétate d'éthyle.

2

REVENDICATIONS

H,N-CH-COOR'

3. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance active est le DL(±)-a-(N-pyrrolyl)-p-hydroxyphényl-acétate de dibenzylamine.

4. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance active est l'acide DL(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique.

5. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance active est l'acide D(+)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique.

6. Médicaments selon la revendication 1, caractérisés en ce que la substance active est l'acide L(—)-a-(N-pyrrolyl)-phénylacétique.