CH660026A5 - Polysaccharide mit antikarzinogener wirkung sowie, verfahren zu deren herstellung. - Google Patents

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CH660026A5
CH660026A5 CH1376/82A CH137682A CH660026A5 CH 660026 A5 CH660026 A5 CH 660026A5 CH 1376/82 A CH1376/82 A CH 1376/82A CH 137682 A CH137682 A CH 137682A CH 660026 A5 CH660026 A5 CH 660026A5
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glucans
glu
glucan
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broth
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CH1376/82A
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Kazuo Nakajima
Yoshiaki Hirata
Hiroyuki Uchida
Tomoko Shiomi
Tsutomu Taniguchi
Akira Obayashi
Osamu Tanabe
Takuma Sasaki
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Takara Shuzo Co
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Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf neue ß-l,3-Glucane, denen ausgezeichnete antikarzinogene Wir-
worin «Glu» den Glucopyranoserest darstellt, zusammen.
Die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane besitzen starke antikarzinogene Wirkungen nicht nur gegen allogene Tumore, sondern auch gegen syngene Tumore, wogegen die bisher bekannten ß-l,3-Glucane keine solche Eigenschaften aufweisen. Überdies besitzen die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane eine starke antikarzinogene Aktivität gegen allogene «Sarcoma-180»-Tumore in C3H/He-Mäusen, welche bekanntlich eine schwache Immunreaktion besitzen.
2. Ein ß-l,3-Glucan, welches aus der Gattung Auricularia der Klasse Basidiomycetes gewonnen wird (Japanisches Patent bzw. Patentanmeldung No. 63012/1979 der Fa.
3)ß-D-Glu(l
3)ß-D-Glu(l kungen zugeschrieben werden, sowie auf ein Verfahren zur 25 Herstellung dieser Verbindungen aus einem flüssigen Extrakt eines Mycéliums oder von Fruchtkörpern eines Stammes, welcher ein antikarzinogenes Polysaccharid zu erzeugen vermag und zur Gattung Pseudoplectania (Tribus Sarcomateae, Familie Sarcomataceae, Unterordnung Sarcoscyphineae, 3o Ordnung Pezizales), Klasse Discomycetes (Unterabteilung Ascomycotinia) gehört, oder aus einem Kulturmedium, in welchem dieser Stamm inkubiert worden war.
Die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane sind neue Polysaccharide mit hohem Molekulargewicht und setzen sich aus 35 wiederholten Glucopyranoseeinheiten der folgenden allgemeinen Formel:
3)ß-D-Glu(l I»
Bisher sind verschiedene Literaturstellen bekannt, worin so die chemische Struktur von antikarzinogenen ß-l,3-Glucanen zur Diskussion steht. Es handelt sich um folgende Stellen: 1. Schizophyllan:
Es handelt sich um ein ß-l,3-Glucan, welches aus Schizo-phyllum commune (Fries.) (Journal of the Agricultural Che-55 mical Society of Japan 44,337-342,1970; ibid 45, 162-168, 1971) erzeugt wird. Dessen chemische Struktur bezüglich der wiederkehrenden Einheiten soll die folgende sein:
(II)
Kokai). Dessen chemische Struktur bezüglich der wiederkehrenden Einheiten scheint folgendermassen auszusehen:
( ß-D-Glu1 -4-- 3)ß-D-Gli6(1-3)ß-D-Glu(1•
Herstellung eines hochmolekularen ederholten Glucopyranoseeinheiten, er folgenden Formel entspricht:
( ß-D-Glu1 -4-- 3)ß-D-Glu6(1-3)ß-D-Glu(1•
40
( ß-D-Glu1 4--3)ß-D-Glu6(1-3)ß-D-Glu(1
ß-D-Glu1
-3)ß-D-Glu6(1-3)ß-D-Glu(1-3)ß-D-Glu(1-
660 026
ß-D-Glu
ß-D-Glu
3)ß-D-Glu (1-3)ß-D-Glù6(1-3)ß-D-Glu(1-
(III)
3. Lentinan:
Dieses ß-l,3-Glucan wird aus Lentinus edodes (Berk.)
Singer erhalten [Nature 222,687-688,1969; Carbohydr. Research 47,99-104,1976; «Gan to Menekizokyo», herausgege- |0
ben durch Goro Chihara (publiziert durch Kodansha, Ttokyo, Japan) 1980]. Die chemische Struktur dieser Verbindung dürfte folgendermassen aussehen:
10
ß-D-Glu"1
ß-D-Glu1
■ 3 ) ß-D-Glu6 ( 1-3 ) ß-D-Glu( 1-3 ) ß-D-Glu6 ( 1-3 ) ß-D-Glu ( 1-3 ) ß-D-Glu ( 1-
(IV)
Diese bekannten ß-l,3-Glucane und die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane haben zwei Dinge gemeinsam, nämlich eine lineare Kette von durch ß-(l,3)-Bindungen verbundenen D-Glucopyranoseeinheiten und eine oder mehrere über ß-(l,6)-Bindungen gebundene D-Glucopyranose-Seitenketten. Wie aber aus einem Vergleich der Formel I mit den Formeln II, III und IV eindeutig hervorgeht, unterscheiden sich die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane von den bekannten ß-l,3-Glucanen im Verhältnis der Anzahl ß-l,3-Bindungen und der Anzal ß-l,6-Bindungen in der Seitenkette. Somit sind die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane bezüglich der chemischen Struktur neu, verglichen mit den bekannten ß-l,3-Glu-canen.
Überdies zeigen die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane eine starke antikarzinogene Aktivität nicht nur gegen allogene Tumore, sondern auch syngene Tumore. Bisher sind aber noch keine ß-l,3-Glucane geoffenbart worden, welche eine starke antikarzinogene Aktivität gegenüber syngene Tumore aufweisen. Überdies besitzen die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane auch eine starke antikarzinogene Aktivität bezüglich «Sarcoma-180»-Tumore in C3H/He-Mäusen,
denen eine niedrige Immunreaktion zugesprochen wird.
Daher darf man annehmen, dass die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane als immunotherapeutische Arzneien bei der Krebsbehandlung wirksamer sind als die bekannten ß-l,3-Glucane.
Die chemische Struktur und die Eigenschaften der erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane sind die folgenden:
1. Chemische Struktur:
Die chemische Struktur der erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane bezüglich der wiederkehrenden Einheiten geht aus der obigen Formel I hervor, was auch durch die folgenden Experimente bestätigt wurde, nämlich:
A) die Behandlung dieses Polysaccharids mit exo- sen:
ß-l,3-Glucanase, das sich vom Mikroorganismus Basidiomy-
cetes QM 806 ableitet, liefert D-Glucose und Gentiobiose;
20 das Molverhältnis liegt bei 1:0,8 bei der Bestimmung mittels Bio-gel P-2 Gel-Permeationschromatographie.
B) Die Methylierungsbehandlung dieses Polysaccharids nach der Methode von Hakomori und die anschliessende Hydrolysierung liefert 2,3,4,6-Tetra-O-methyl-D-glucose,
25 2,4,6-Tri-O-methyl-D-glucose und 2,4-Di-O-methyl-D-glu-cose, was durch Papierchromatographie, Gaschromatographie und Massenspektrometrie identifiziert worden ist. Das Molverhältnis liegt bei 0,8:1:0,8.
C) die Periodatoxydation dieses Polysaccharids mittels
30 0,05 molarem Periodat verbraucht 0,667 Mol Periodat pro
Anhydroglycoseeinheit bei gleichzeitiger Infreiheitsetzung von 0,344 Mol Ameisensäure.
D) die Behandlung des nach den obigen Angaben oxydierten Produktes durch Abbau nach Smith liefert Glycerin
35 und Glucose in einem Molverhältnis von 1:2,1.
E) Die Behandlung des nach den obigen Angaben oxydierten und anschliessend reduzierten Produktes durch milde Hydrolysierung mittels 0,03-molarer Schwefelsäure führt zu Glycerin und einem in Wasser nichtlöslichen Material und
40 die Methylierung und anschliessende Hydrolysierung dieses in Wasser nicht löslichen Materials führt ausschliesslich zu 2,4,6-Tri-O-methyl-D-glucose.
F) die Behandlung dieses Polysaccharids durch milde Hydrolysierung mit Hilfe von 0,03-molarer Schwefelsäure
45 führt zur D-Glucose und zu einem in Wasser nichtlöslichen Material. Behandelt man das so erhaltene, in Wasser nichtlösliche Material mit der oben beschriebenen exo-ß-l,3-Gluc-anase, so wird ausschliesslich D-Glucose erzeugt.
Die obigen Resultate bescheinigen, dass die erfindungsge-
5o mässen Polysaccharide ß-l,3-Glucane sind, die wiederkehrende Glucopyranoseeinheiten der folgenden Formel aufwei-
ß-D-Glu 3)ß-D-Glu6(1-3)ß-D-Glu(1
(I)
■ 3)ß-D-Glu(1
worin eine lineare Kette von ß-(l,3)-gebundenen D-Glucopyranoseeinheiten mit ß-(l,6)-gebundenen und verzweigten D-GIucopyranoseeinheiten im Verhältnis von 9:4 vorliegt, wobei jede Verzweigung eine einzige D-Glucopyranoseein-heit darstellt.
2.Elementaranalyse :
C: 43,88% H: 6,18%
3. Molekulargewicht:
Mehr als 2,5 x 105 (Gelfiltrationsmethode)
4. Schmelzpunkt:
65 Diese Substanz besitzt keinen scharfen Schmelzpunkt und verkohlt nach starkem Erhitzen.
5. Spezifische Drehung:
[<xß>5 = +35° (0,5n-NaOH, C = 0,5%)
660 026
4
6. Grenz Viskosität:
[TI] = 20-25
Die Grenzviskosität wird durch die folgende Formel definiert:
[t|]= lim T|sp/c c-»-0
Tlsp = (Tlo) / T)o = T|/T|o — 1
t|: Viskosität der Lösung (0,1-molares NaCl 30 °C)
ti0: Viskosität des Lösungsmittels.
c: Wert in g in einer 100 ml Lösung.
7. Ultraviolettspektrum: Endabsorption.
8. Infrarotspektrum: diese Substanz zeigt eine Bande bei 890 cm-1, was die Anwesenheit einer ß-glucosidischen Bindung anzeigt.
9. Löslichkeit: Diese Substanz ist in Wasser, 0,5-normaler NaOH und Dimethylsulfoxyd lösich, jedoch in Petroläther, Äther, Aceton, Benzol, Äthanol und Methanol usw. unlöslich.
10. Farbreaktion: Diese Substanz zeigt eine positive Reaktion bezüglich Molish-Reagens und Anthron-Reagens, zeigt aber eine negative Reaktion gegen Jod-Stärke-Reagens, Bial-Reagens, Carbazol-H2SC>4-Reagens, Ninhydrin-Reagens und Elson-Morgan-Reagens.
11. pH-Wert der Lösung: neutral
12. Aussehen: weisses Pulver
13. Zuckerkomponente: Diese Substanz setzt sich lediglich aus D-Glucose zusammen, wie dies durch Papierchromatographie, Dünnschichtchromatographie, Gas-Flüssigchro-matographie und Glucoseoxydasemethode bestätigt wird.
Wie weiter oben erwähnt wurde, stellen die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane neue Verbindungen dar, denen die .Struktur der Formel I zugrunde liegt und welche die unter 2. bis 13. erwähnten physikochemischen Eigenschaften aufweisen.
Wie bereits erwähnt, besitzen die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane eine antikarzinogene Wirkung. Diese antikarzinogene Aktivität der neuen ß-l,3-Glucane (erhältlich nach den Angaben von Beispiel 3) wurde nach üblichen Methoden bestätigt und bestimmt. Sofern man Abweichungen vornahm, wurde dies in den experimentellen Angaben erwähnt.
Experiment 1
Die antikarzinogene Aktivität der erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane gegen Sarcoma-180 in ICR-Mäusen wurde bestimmt, wobei man zu den in der nachstehenden Tabelle 1 wiedergegebenen Resultaten gelangte.
Tabelle 1
Dosierung
Inhibitionsverhältnis
Vollständige Regression mg/kg/Tag
(%)
0,2
85,0
3/5
2,0
100,0
5/5
20,0
83,3
3/5 -
Tumorzellen: Sarcoma-180
Anzahl der transplantierten Zellen: 4x lOVMaus
Versuchstier: ICR 9
Behandlung: Nach Ablauf von einem Tage nach der erfolgten Transplantation erfolgte die intraperitoneale Verabreichung. Darauf erfolgte die Verabreichung 5mal nach Ablauf von jeweils einem Tag. (Blindversuch: Kochsalzlösung)
Bestimmung: Das Gewicht des Tumors vom festen Typ wurde vier Wochen nach der Transplantation gemessen. Inhibitionsverhältnis = [(C-T)/C] x 100
C: Durchschnittliches Gewicht der Tumore, welche aus der Blindversuchgruppe entfernt wurden.
T: Durchschnittliches Gewicht der Tumore, welche aus der mit ß-l,3-Glucan behandelten Gruppe entfernt wurden.
Experiment 2
Die antikarzinogene Wirkung der erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane gegen Sarcoma-180 in C3H/He-Mäusen, Ehr-lich-Carcinom in ICR-Mäusen und Meth-A-Fibrosarkom in BALB/c-Mäusen wurde bestimmt.
Die Resultate finden sich in den folgenden Tabelle 2,3 und 4.
Tabelle 2
Dosierung
Inhibitionsverhältnis
Vollständige Regression mg/kg/Tag
(%)
2,0
44,2
0/5
10,0
82,5
2/5
50,0
80,3
2/5
Tumorzellen: Sarcoma-180
Anzahl der transplantierten Zellen: 4 x lOVMaus
Versuchstiere: C3H/He 9
Behandlung: Nach Ablauf von einem Tage nach der Transplantation erfolgte die Verarbeitung auf intraperitoneale Weise, worauf zehnmal nach jeweils einem Tag eine weitere Verabreichung geschah. (Blindversuch: Kochsalzlösung)
Bestimmung: Das Gewicht des Tumors vom festen Typ wurde 5 Wochen nach erfolgter Transplantation gemessen. Inhibitionsverhältnis = [(C-T)/C] x 100
C: Durchschnittliches Gewicht der aus den Tieren des Blindversuchs entnommenen Tumore.
T: Durchschnittliches Gewicht der aus der mit ß-l,3-Glu-can behandelten Gruppe entfernten Tumore.
Tabelle 3
Dosierung
Inhibitionsverhältnis
Vollständige Regression mg/kg/Tag
(%)
0,06
80,3
1/5
0,60
100,0
5/5
6,00
92,4
4/5
Tumorzellen: Ehrlichkarzinom
Anzahl der transplantierten Zellen: 4 x lOVMaus
Versuchtiere: ICR 9
Behandlung: Nach einem Tag nach erfolgter Transplantation erfolgte die intraperitoneale Verabreichung, worauf man 8mal nach jeweils einem Tag eine weitere Verarbreichung vornahm. (Blindversuch: Kochsalzlösung)
Bestimmung: Das Gewicht des Tumors vom festen Typ wurde 5 Wochen nach erfolgter Transplantation gemessen. Inhibitionsverhältnis = [(C-T)/C] x 100
C: Durchschnittliches Gewicht der aus der Kontrollgruppe entfernten Tumore.
T : Durchschnittliches Gewicht der Tumore, die man aus der mit ß-l,3-Glucan behandelten Gruppe entnommen hatte.
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
5
660 026
Tabelle 4
Dosierung
Inhibitionsverhältnis
Vollständige Regression mg/kg/Tag
(%)
0,2
84,2
3/5
2,0
100,0
5/5
20,0
53,8
2/5
Tumorzellen: Meth-A-fibrosarcom
Anzahl der transplantierten Zellen: 1 x lOVMaus
Versuchstiere: BALB/c 9
Behandlung: Nach Ablauf von einem Tag nach erfolgter Transplantation erfolgte die erste intratumorale Verabreichung, worauf man lOmal nach jeweils einem Tage eine weitere Verabreichung durchführte. (Blindversuch: Kochsalzlösung)
Bestimmung: Das Gewicht des Tumors vom festen Typ wurde nach Ablauf von 5 Wochen nach erfolgter Transplantation gemessen. Inhibitionsverhältnis = [(C-T)/C]x 100
C durchschnittliches Gewicht der aus der Kontrollgruppe entfernten Tumore.
T: Durchschnittliches Gewicht der Tumore, die man aus der mit ß-l,3-Glucan behandelten Gruppe entnommen hatte.
Experiment 3
Die antikarzinogene Aktivität der erfindungsgemässen ß-l,3-Glucan gegen Ehrlich-Ascites-Tumor in ICR-Mäusen wurde bestimmt.
Die Resultate finden sich in der Tabelle 5.
Tabelle 5
Dosierung mg/kg/Tag
Überlebensdurchnittt (Tage)
Anzahl der
überlebenden Tiere pro Gruppe
Blindversuch
13,3
0/5
0,24
15,2
0/5
1,20
23,2
0/5
6,10
>31,4
3/5
Tumorzellen : Ehrlich-Ascites-Tumor
Anzahl der transplantierten Zellen: 5 x lOVMaus
Versuchstiere: ICR 9
Behandlung: nach Ablauf von einem Tag nach erfolgter Transplantation erfolgte die intraperitoneale Verabreichung, welche hierauf nach Ablauf von jeweils einem Tag lOmal wiederholt wurde. (Blindversuch: Kochsalzlösung)
Bestimmung: Die Anzal der überlebenden Mäuse und die Überlebenstage einer jeden Gruppe wurden nach Ablauf von 7 Wochen nach erfolgter Transplantation gemessen.
Wie sich aus den obigen Experimenten 1 bis 3 ergibt, zeigen die ß-l,3-Glucane dieser Erfindung eine starke antikarzinogene Aktivität nicht nur gegen allogene Tumore, wie Sar-com-180-Tumor in ICR-Mäusen, sondern auch gegen syngene Tumore, wie Meth-A-fibrosarcom-Tumor in BALB/c-Mäusen. Dabei ist hervorzuheben, dass es bisher nicht bekannt war, dass derartige ß-l,3-Glucane eine starke antikarzinogene Aktivität gegen syngene ß-l,3-Glucane, wie Meth-A-fibrosarcom-Tumor in BALB/c-Mausen, aufweisen. Die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane zeigen auch eine starke antikarzinogene Wirkung gegen allogene Tumore, wie Sarcom-180Tumor in C3H/He-Mäusen, bei denen man weiss, dass sie eine schwache Immunreaktion aufweisen.
Die erfindungsgemässen ß-l,3-Glucane besitzen weder eine direkte Cytotoxizität in vitro noch Nebenwirkungen, wie sie üblicherweise bei Anwendung üblicher Mittel, in Erscheinung treten, wie z.B. eine Abnahme der Leukozytenzahl, ein Auftreten der Leberanämie und eine Anämie anderer Organe, eine Milzatrophie, einen Körperverlust und eine Appetitlosigkeit. Die akute Toxizität (LDso) dieser ß-l,3-Glucane bei Mäusen liegt bei mehr als 1000 mg/kg bei intraperionealer Verabreichung.
Die erfindungsgemässen hochmolekularen ß-l,3-Glucane werden nach dem Verfahren gemäss Anspruch 2 hergestellt.
Gemäss vorliegender Erfindung kann man einen beliebigen Stamm der zur oben erwähnten Gattung gehörenden Art einsetzen, sofern er ein antikarzinogenes Polysaccharid zu erzeugen vermag.
Gemäss einer Ausführungsform der vorliegenden Erfindung verwendete man einen Stamm Pseudoplectania nigrella (Pers.) Fuckel K-1426, der durch Züchtung eines Fruchtkörpers (Gewebe) einer Pilzart erhalten worden ist, welche in einem Vorort von Sapporo in der Hokkaido-Präfektur, Japan, gesammelt worden war.
Die Identifizierung dieser Art erfolgte gemäss den Angaben in Handbuch «Transactions of the Mycological Society of Japan» 21,149-179, 1980.
Die Eigenschaften dieses Stammes sind die folgenden:
Dieser Organismus wurde im Moos von Nadelhölzern gesammelt, und sein Körper weist die typischen Eigenschaften der Gattung Pseudoplectania auf. Er ist daher schwarz gefärbt und seine Kappe besitzt einen Durchmesser von ungefähr 1 cm und besitzt keinen Stamm. Die Aussenseite dieses Fruchtkörpers ist mit samtähnlichen Haaren bedeckt, und sein äusseres Excipulum setzt sich aus t-angularis zusammen und hat eine Tiefe von 100 bis 200 |j.m. Das medulläre Gewebe setzt sich aus t-intricata zusammen und hat eine Tiefe von 250 bis 400 |im. An der Aussenfläche des Excipu-lums befinden sich dunkelbraune, lange, verzweigte Haare, die miteinander verflochten sind und eine Tiefe von 150 jj.m aufweisen. Der Ascus setzt sich aus Sklerenchym zusammen und hat eine zylindrische Form mit Ausmassen von 220 bis 300 x 12 bis 15 p.m. Das Mycélium ist fadenförmig bei einem Durchmesser von 2 bis 3 Jim. Die Aussenseite des Filamentes ist schwach expandiert.
Aus diesen Eigenschaften und unter Zugrundelegung der Angaben im oben erwähnten Buch wurde dieser Stamm mit Pseudoplectania nigrella (Pres.) Fuckel identifiziert. Dieser Stamm wurde am 15. Dezember 1980 beim Fermentation Research Institute, Agency of Industriai Science and Technology, Ministry of International Trade and Industry, 1-3, Higashi 1-chôme, Yatabe-machi, Tsubuka-gun, Ibaraki-ken 305, Japan, unter der Nummer FERM-P 5803 und am 2. Februar 1981 bei der American Type Culture Collection, 12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland 20852 USA,
unter der Nummer ATCC 20609 hinterlegt.
Gemäss der vorliegenden Erfindung kann man einen beliebigen Stamm der Art verwenden, welche zur Gattung Pseudoplectania der Klasse Discomycetes gehört und ein antikarzinongenes Polysaccharid zu erzeugen vermag.
Es ist allerdings nicht leicht, solche Fruchtkörper in ausreichender Menge im natürlichen Boden zu sammeln. Daher ist es von Vorteil, ein gezüchtetes Mycélium zu verwenden. Das gemäss Erfindung zu verwendende Mycélium kann durch bekannte und übliche Züchtungsmethoden, z.B. mit Hilfe einer festen Kultur oder einer flüssigen Kultur, erhalten werden. Für die Züchtung in festen Kulturmedien kann man beispielsweise Agar, Gelatine, Stärke, Sägemehl, Malz, Reiskleie, Sojabohnenmehl und andere übliche feste Kulturmedien oder eine Kombination derselben anwenden. Für die Züchtung in Flüssigkultur kommen Kulturmedien in Frage, welche verschiedene, für die Züchtung von Mikroorganismen
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
55
60
65
660 026
6
bekannte Nährstoffe enthalten. So können die flüssigen Kulturmedien eine Kohlenstoffquelle, z.B. Glucose, Maltose, Lactose, Saccharose, Stärke, Öl, Molassen usw., eine stickstoffhaltige Quelle organischen oder anorganischen Ursprungs, wie z.B. Pepton, Hefeextrakte, Maisquellflüssigkeit, Ammoniumsalze, Harnstoff usw. und ein oder mehrere organische oder anorganische Salze, wie z.B. Phosphate, Magnesiumsalze usw., enthalten. Gewünschtenfalls können auch andere das Wachstum fördernde Materialien, wie z.B. Vitamine, mitverwendet werden.
Diese Materialien für feste und flüssige Medien sind für die Züchtung von Fungi bestens bekannt, so dass man auf weitere ausführliche Angaben verzichten kann.
Die Züchtung in Flüssigkultur kann in üblicher Weise durch statische Kultur, Schüttelkultur oder submerse Kulturen durchgeführt werden. Aus wirtschaftlichen Überlegungen und der Handlichkeit wegen werden flüssige Kulturmedien mittels Belüftung und Rühren den festen Kulturmedien im allgemeinen bevorzugt.
Verwendet man flüssige Kulturmedien, so gelten im allgemeinen die folgenden Bedingungen:
anfänglicher pH-Wert 2-9 Inkubationstemperatur 15-35 °C Inkubationsdauer 3-30 Tage
Im Falle einer submersen Züchtung wird das Medium einer Belüftung mit einer Geschwindigkeit von 0,1 bis 2,01/1/ min unter Rühren bei 30 bis 500 Umdrehungen pro Minute unterworfen.
Das im festen oder flüssigen Kulturmedium gewachsene Mycel wird in an sich bekannnter Weise gesammelt und als Ausgangsmaterial für diese Erfindung eingesetzt.
Im Falle einer flüssigen Kultur kann man das Mycel beispielsweise dadurch gewinnen bzw. sammeln, dass man das entstandene flüssige Kulturmedium bekannten Trennungsmethoden, wie z.B. Zentrifugieren, Filtrieren usw., unterwirft. Das auf diese Weise gewonnene Filtrat wird als Filterbrühe bezeichnet und kann ebenfalls als Ausgangsmaterial gemäss vorliegender Erfindung betrachtet und verwendet werden.
Die in der oben beschriebenen Weise gesammelten Fruchtkörper und/oder Mycelia werden im allgemeinen mit einem wässrigen Lösungsmittel extrahiert. Dabei kann man die Fruchtkörper und/oder Mycelia als solche direkt extrahieren. Gewünschtenfalls kann man aber vor der Durchführung einer solchen Extraktion die Fruchtkörper und/oder Mycelia beispielsweise durch Waschen mit Wasser, durch Lufttrocknung, durch Zerkleinern bzw. Pulverisieren oder durch Extraktion mit einem nicht polaren Lösungsmittel einer Vorbehandlung unterwerfen.
Das für die Extraktion im allgemeinen verwendete, wäss-rige Lösungsmittel besteht aus Wasser oder einer Mischung von Wasser und mindestens einem wasserlöslichen Material, z.B. einer Säure, Base oder einem Salz, oder mindestens einem organischen Lösungsmittel.
Bei der Durchführung der Extraktion werden die vorbehandelten oder nicht vorbehandelten Fruchtkörper oder Mycelia zweckmässig mit dem wässrigen Lösungsmittel vermischt. Die Temperatur des Lösungsmittels ist nicht von Bedeutung, sofern sie 120 °C nicht übersteigt. Bevorzugte Temperaturen ergeben sich aus wirtschaftlichen Erwägungen. Die Extraktion wird während einer ausreichenden Zeitdauer durchgeführt, um die gewünschte Extraktion zu bewirken. Im allgemeinen verläuft die Extraktion bei höherer Temperatur schneller. Innerhalb des obenerwähnten bevorzugten Temperaturbereiches erfolgt die Extraktion vorzugsweise innerhalb eines Zeitraumes von 30 Minuten bis 10 Stunden. Die Extraktion erfolgt vorzugsweise unter Schütteln in einem Behälter aus Glas, aus mit Glas ausgefüttertem Stahl, aus emailliertem Stahl oder rostfreiem Stahl. Die anzuwendende Lösungsmittelmenge kann ebenfalls in grossem Massstabe schwanken, liegt aber im allgemeinen bei der 10- bis lOOfachen Gewichtsmenge (bezogen auf Trockenbasis) der Fruchtkörper und/ oder Mycelia. Für die Extraktion verwendet man vorteilhaf-5 terweise pulvrige Fruchtkörper oder Mycelia. Nach der Extraktion werden das Mycélium oder die Fruchtkörper und die anderen festen Bestandteile in an sich üblicher Weise, beispielsweise durch Filtrieren oder Zentrifugieren, aus dem flüssigen Extrakt entfernt. Der flüssige Extrakt wird dann bei-io spielsweise durch Vakuumverdampfung oder dergleichen eingeengt, um anschliessend weiter behandelt zu werden. Im allgemeinen wird der wässrige Extrakt auf ungefähr ein Drittel bis ein Zehntel des ursprünglichen Volumens eingeengt.
Der nach den obigen Angaben erhaltene Extrakt wird 15 hierauf beispielsweise in der nachstehenden beschriebenen Weise gereinigt, wodurch das beabsichtigte Polysaccharid ausgefällt und gewonnen wird. Die Bezeichnung «flüssiger Extrakt» bedeutet im vorliegenden Falle ein Filtrat oder ein Zentrifugat, das man durch Entfernung des Mycéliums und/ 20 oder Fruchtkörper und anderer fester Bestandteile aus dem Extrakt gewonnen hat.
Die filtrierte Brühe kann auch und zwar mit Vorteil für die Reinigung nach den nachstehenden erwähnten Angaben verwendet werden, um das beabsichtigte Polysaccharid aus-25 Zufällen und zu gewinnen. Die Bezeichnung «filtrierte Brühe», wie sie hier verwendet wird, bedeutet ein Filtrat, welches die Wirksubstanz, d.h. das Polysaccharid, enthält und erhalten wurde durch Entfernung des Mycéliums und anderer fester Bestandteile aus der Kulturbrühe, d.h. dem Kulturme-30 dium, in welchem der Stamm durch Flüssigkultur in der weiter oben beschriebenen Weise inkubiert worden ist. Die Filterbrühe wird beispielsweise durch Vakuumverdampfung oder dergleichen eingeengt, um dann weiterbehandelt zu werden. Im allgemeinen wird die Filtrierbrühe auf ein Drittel bis 35 ein Zehntel des ursprünglichen Volumens eingeeingt. Die eingeengte Filtrierbrühe wird hierauf gereinigt.
Der flüssige Extrakt und die Filterbrühe können getrennt einem Reinigungsprozess unterworfen werden. Man kann aber auch den flüssigen Extrakt und die Filtrierbrühe mitein-4o ander vereinigen, um dieses Gemisch zu reinigen.
Die Reinigung kann nach einer der beliebigen nachfolgenden Methoden geschehen.
A) Durch Ausfällung der gewünschten Substanz durch Zugabe eines hochpolaren, organischen Lösungsmittels, wie 45 z.B. eines niederen Alkohols und Ketons, wie z.B. Methanol, Äthanol, Propanol, Butanol, Aceton usw., oder durch Aussalzen durch Zugabe von wasserlöslichen, anorganischen Salzen, wie z.B. Ammoniumsulfat, Natriumchlorid, Kaliumchlorid usw.
so B) Durch Beseitigung von Säuren, Ionen und niedermolekularen Substanzen durch Dialyse, umgekehrte Osmose, Gel-filtrierung mittels Dextran- oder Polyacrylamid-Gel, wie z.B. Sephadex, Bio-Gel usw., Ionenaustausch-Harzbehandlung mittels Verwendung von beispielsweise verschiedener han-55 delsüblicher Anionen- und Kationenaustauschharzen, wie z.B. Amberlite, Dowex, Duolite usw., Ultrafiltrierung oder einer Kombination dieser Methoden, wobei man eine im wesentlichen reine Lösung erhält, aus welcher die gewünschte Wirksubstanz gewonnen wird.
6o C) Durch Behandeln beispielsweise nach der
Sevag-methode, Trifluortrichlormethanmethode, durch Pro-teasebehandlung usw. zwecks Entfernung freier Proteine.
Diese Arbeitsweisen sind alle dem Fachmann durchwegs bekannt. Gewünschtenfalls kann man zwei oder mehrere die-65 ser Methoden kombinieren. Im allgemeinen wird der flüssige Extrakt oder die Filterbrühe nach dem Einengen durch eine Ionenaustausch-Harzbehandlung, Dialyse, umgekehrte Osmose, Gelfiltrierung, Ultrafiltrierung oder einer Kombina
7
660 026
tion davon behandelt, um eine Entfärbung, eine Entsäuerung und Entfernung der niedrigmolekularen Substanzen zu bewirken. Aus einer derart gereinigten Lösung kann man die gewünschte Wirksubstanz unter Zuhilfenahme eines geeigneten Verfahrens, z.B. durch Gefriertrocknung, isolieren. Gewünschtenfalls lassen sich die oben erwähnte Methode oder die oben erwähnten Methoden wiederholen, um das gewünschte Ausmass an Reinigung zu erhalten.
Die so erhaltene Substanz besitzt die weiter oben erwähnten Eigenschaften.
Die Erfindung sei durch die folgenden Beispiele teilweise mit Hilfe der Figur 1, welche ein Infrarotspektrum des erfindungsgemässen Polysaccharids wiedergibt, erläutert.
Beispiel 1
Ein Stamm (FERM-P 5803, ATCC 20609) von Pseudo-
plectania nigrella (Pers.) Fuckel K-1426 wurde im folgenden
Kulturmedium inkubiert.
Glucose
20 g
Maisquellflüssigkeit
5g
Sojabohnenmehl lg
Hefeextrakt
1 g primäres Kaliumphosphat
1 g
Magnesiumsulfat (7H2O)
0,5 g
Wasser
1 Liter anfänglicher pH-Wert
5,6
Die Inkubation erfolgte dadurch, dass man 100 ml des obigen Kulturmediums jeweils in 500 ml Erlenmeyerkolben einführte. Die Kolben wurden mit Baumwolle verstopft und während 20 Minuten bei 120 °C sterilisiert. Nach dem Kühlen wurde das Material in üblicher Weise mit dem Stamm, welcher getrennt in einem Schrägkulturmedium, enthaltend 2% Glucose, 0,5% Ebios und 1,5% Agar, gezüchtet worden war, inokuliert. Nach lOtägiger Inkubationsdauer bei 27 °C wurden die Kolbeninhalte für die weitere Inkubation verwendet. 20 Liter des oben beschriebenen flüssigen Kulturmediums wurden in einen 30-Liter-Fermentierbehälter aus rostfreiem Stahl während 20 Minuten bei 120 ° C sterilisiert und anschliessend gekühlt. Hierauf wurde der so behandelte Inhalt der Kolben im Kulturmedium in besagtem Fermentierbehälter inokuliert. Das Medium wurde unter Rühren bei 200 Umdrehungen pro Minute während 12 Tagen bei 27 °C aerob inkubiert, wobei die Belüftung mit einer Geschwindigkeit von 0,5 Liter/Liter/Minute geschah. Die so erhaltene Kulturbrühe wurde filtriert, wobei man 130 g trockenes Mycel und 70 Liter Filtrierbrühe erhielt. Die Bezeichnung «Filtrierbrühe», wie sie hier verwendet wird, bedeutet ein Filtrat, welches die Wirksubstanz, d.h. Das Polysaccharid, enthält und erhalten wurde dur Entfernung des Mycels und anderer fester Bestandteile aus der Kulturbrühe, enthielt, d.h. dem Kultur-5 medium, in welchem der Stamm durch Flüssigkultur in der oben beschriebenen Weise inkubiert worden war.
Beispiel 2
130 g des nach Beispiel 1 erhaltenen Mycels wurden mit 1 io Liter Wasser gewaschen und die Waschflüssigkeit mit der Filtrierbrühe vereinigt. Das gewaschene Mycel wurde mit 15 Liter Wasser gemischt und das Gemisch während 30 Minuten in einem verschlossenen Behälter auf 120°C erhitzt. Hierauf wurde das Gemisch auf Zimmertemperatur abkühlen gelas-15 sen und anschliessend filtriert. Diese Arbeitsweise wurde zweimal wiederholt, wobei man 43 Liter eines Extraktes erhielt. Der so erhaltene Extrakt wurde auf ein Zehntel seines ursprünglichen Volumens eingeengt. Der eingeengte Extrakt wurde mit dem gleichen Volumen Äthanol versetzt, um das 20 Polysaccharid auszufällen, das auf diese Weise ausgeschieden wurde. Dieser Niederschlag wurde in Wasser gelöst und dia-lysiert. Das Dialysat wurde durch DEAE-Sephadex-Tonen-austauschchromatographie behandelt und die nichtadsorbie-rende Fraktion aus der DEAE-Sephadex-Ionenaustauch 25 Chromatographie ebenfalls durch SP-Sephadex-Ionenaus-tauschchromatographie behandelt. Die nicht adsorbierende Fraktion der SP-Sephadex-Ionenaustauschchromatographie, wie sie nach den obigen Angaben erhalten wurde, wurde erneut dialysiert und dann gefriergetrocknet, wobei man 8.6 g 3o einer weissen, pulvrigen Substanz erhielt. Diese Substanz wurde mit den oben erwähnten Experimenten A) bis E) als ß-l,3-Glucan mit wiederholten Einheiten der Formel I identifiziert. Das durchschnittliche Molekulargewicht dieses ß-l,3-Glucans betrug ungefähr 1 x 106 (Gel-Filtrierungsme-35 thode).
Beispiel 3
Die 17 Liter des gemäss Beispiel 1 erhaltenen Filtrierbrühe wurden in der gleichen Weise wie in Beispiel 2 behan-40 delt, wobei man 13,2 g einer weissen, pulvrigen Substanz erhielt. Diese Substanz wurde mit Hilfe der oben erwähnten Experimente A) bis E) als ß-l,3-Glucan mit wiederholten Einheiten der Formel I identifiziert. Das durchschnittliche Molekulargewicht dieses ß-l,3-Glucans betrug ungefähr 1 x 106 45 (Gel-Filtrierungsmethode).
Das Infrarotspektrum dieser Substanz findet sich in
Fig. 1.
o
1 Blatt Zeichnung

Claims (3)

  1. 660 026
  2. 2. Verfahren zur ] ß-l,3-Glucans mit wl wobei jede Einheit di dadurch gekennzeichnet, dass man aus einem Kulturmedium eines Stammes, welcher ein ß-l,3-Glucan zu erzeugen vermag und zur Gattung Pseudoplectania aus der Klasse Discomyce-tes gehört, eine Filterbrühe bildet und aus dieser Filterbrühe oder einem flüssigen Extrakt von Fruchtkörpern oder von einem Mycélium eines genannten Stammes ein ß-l,3-Glucan in gereinigter Form gewinnt.
    2
    PATENTANSPRÜCHE 1. Hochmolekulare ß-l,3-Glucane mit wiederholten Glu-copyranoseeinheiten, wobei jede dieser Einheiten der folgenden Formel entspricht:
  3. 3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass man als Stamm Pseudoplectania nigrella (Pers.) Fuk-kel K-1426 FERM-P 5803 bzw. ATCC 20609 verwendet.
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Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6023401A (ja) * 1983-03-09 1985-02-06 Toyo Soda Mfg Co Ltd 多糖類およびその製造法
JPH0692441B2 (ja) * 1986-03-03 1994-11-16 株式会社林原生物化学研究所 β−Ｄ−グルカンとその製造方法及び用途
FI885955A7 (fi) * 1987-12-23 1989-06-24 Weston George Ltd Ny b-1,3-glukanexopolysackarid och foerfarande foer framstaellning av densamma.
JP2681653B2 (ja) * 1988-05-13 1997-11-26 台糖株式会社 抗エイズウィルス剤
US5189028A (en) * 1989-02-20 1993-02-23 Taito Co., Ltd. Composition and method to enhance the efficacy of a fish vaccine and to stimulate the immune system of fish
GB9007730D0 (en) * 1990-04-05 1990-06-06 Cerestar Holding Bv Therapeutic compound and composition
JPH0784481B2 (ja) * 1991-02-21 1995-09-13 株式会社デイ・デイ・エス研究所 カルボキシメチルマンノグルカン及びその誘導体
JP3167649B2 (ja) * 1997-07-25 2001-05-21 株式会社資生堂 タンパク質を除去したβ−１，３グルカン及びこれを主成分とするゲルからなる超音波診断装置のプローブ用接触媒体
US6251877B1 (en) * 1998-03-24 2001-06-26 Pacific Corporation Composition for external application containing a β-1,6-branched-β-1,3-glucan
EP1357919B1 (de) * 2001-01-16 2017-04-05 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Glucan zur verbesserung der therapie
US7906492B2 (en) * 2001-01-16 2011-03-15 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
US7507724B2 (en) * 2001-01-16 2009-03-24 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
NO20014256D0 (no) * 2001-09-03 2001-09-03 Bjoern Kristiansen Fremstilling av immunstimulerende forbindelse
US7514085B2 (en) * 2004-07-16 2009-04-07 Medimush A/S Immune modulating compounds from fungi
WO2006119774A1 (en) * 2005-05-13 2006-11-16 Medimush As Feed or food products comprising fungal material
WO2006133707A2 (en) * 2005-06-15 2006-12-21 Medimush A/S Anti-cancer combination treatment and kit-of-part
WO2006133708A1 (en) * 2005-06-15 2006-12-21 Medimush A/S Bioactive agents produced by submerged cultivation of a basidiomycete cell
US20090053221A1 (en) * 2006-01-17 2009-02-26 Cheung Nai-Kong V Immune response enhancing glucan
US8323644B2 (en) * 2006-01-17 2012-12-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Therapy-enhancing glucan
US8075839B2 (en) 2006-09-15 2011-12-13 Haynes International, Inc. Cobalt-chromium-iron-nickel alloys amenable to nitride strengthening
DE102015224162B4 (de) * 2015-12-03 2017-11-30 Siemens Healthcare Gmbh Verfahren zur Ermittlung einer eine Bewegung in einem zumindest teilweise bewegten Untersuchungsbereich beschreibenden Bewegungsinformation und Magnetresonanzeinrichtung
CN112076209A (zh) * 2019-06-14 2020-12-15 青岛海洋生物医药研究院股份有限公司 一种β-葡聚糖组合物及其用途
CN111593034B (zh) * 2020-06-24 2022-07-05 江南大学 利用β-1,6-葡聚糖酶制备低聚龙胆糖的方法及其应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3301848A (en) * 1962-10-30 1967-01-31 Pillsbury Co Polysaccharides and methods for production thereof
JPS5339519B1 (de) * 1970-07-31 1978-10-21
JPS5461112A (en) * 1977-10-24 1979-05-17 Ono Pharmaceut Co Ltd Oncostatic polysaccharide* its preparation* and oncostatic drugs containing it as an effective component

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Publication number Publication date
IT1150622B (it) 1986-12-17
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AU549553B2 (en) 1986-01-30
US4454289A (en) 1984-06-12
IT8219987A0 (it) 1982-03-05
ES8302776A1 (es) 1983-01-16
DE3208057C2 (de) 1987-02-19
GB2094324B (en) 1984-09-19

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