CH632639A5 - Verfahren zum zuechten von basidiomyzeten. - Google Patents
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Description
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Züchten von Basidiomyzeten, die zum Genus Coriolus der Polyporaceae gehören, und insbesondere ein Züchtungsverfahren zur Verbesserung der Myzelausbeute der Basidiomyzeten durch Verwendung eines Glucose-Hefeextrakt-Mediums bestimmter Zusammensetzung.
Polysaccharide, die aus Basidiomyzeten erhältlich sind, welche zum Genus Coriolus der Polyporaceae gehören, haben in letzter Zeit wegen ihrer ausgezeichneten Antitumor-aktivität und anderen pharmakologischen Effekten grosse Beachtung gefunden, und es hat sich ein Bedarf für vorteilhafte technische Verfahren zur Herstellung solcher Stoffe entwickelt, insbesondere Verfahren zur Züchtung von Basidiomyzeten mit hoher Ausbeute.
Ziel der Erfindung ist daher ein Verfahren zur Züchtung der Basidiomyzeten vom Genus Coriolus der Polyporaceae, das die Myzelausbeute erheblich zu verbessern gestattet.
Die vorliegende Erfindung beruht auf Untersuchungen von Züchtungsmethoden, welche in der Lage sind, das Wachstum der Basidiomyzeten vom Genus Coriolus der Polyporaceae in hoher Ausbeute zu ermöglichen. Als Ergebnis wurde gefunden, dass die Myzelausbeute der Basidiomyzeten erheblich verbessert werden kann, wenn der Pilz unter Verwendung eines Glucose-Hefeextrakt-Mediums gezüchtet wird, das Glucose und Hefeextrakt in hohen Konzentrationen und in einem bestimmten Verhältnis enthält.
Bisher wurden für die Züchtung der Basidiomyzeten allgemein Medien verwendet, wie sie üblicherweise für die Züchtung von Mikroorganismen verwendet werden, und es wurden keinerlei Versuche gemacht, Glucose-Hefeextrakt-Medien bestimmter Zusammensetzung für die Züchtung der Basidiomyzeten zu verwenden.
Das Verfahren der Erfindung ist gekennzeichnet durch die Verwendung eines Glucose-Hefeextrakt-Mediums, das Glucose und Hefeextrakt in einem Verhältnis von 3:1 bis 15:1 enthält, wobei die Glucose im Medium 7,5 bis 15% ausArt macht, für die Züchtung von Basidiomyzeten, die zum Genus Coriolus der Polyporaceae gehören.
Durch das Verfahren der Erfindung lässt sich die Myzelausbeute bei der Züchtung von Basidiomyzeten, die zum Ge-5 nus Coriolus der Polyporaceae gehören, durch Verwendung des Glucose-Hefeextrakt-Mediums mit einem Verhältnis von Glucose zu Hefeextrakt von 3:1 bis 15:1 und einem Glucosegehalt im Bereich von 7,5 bis 15% erheblich verbessern. Es ist zu bemerken, dass bei einem Verhältnis von Glucose zu io Hefeextrakt in der Mediumzusammmensetzung im Bereich von 3:1 bis 15:1 keine erhebliche Erhöhung der Myzelausbeute zu erwarten ist, wenn der Glucosegehalt des Mediums niedriger als 7,5% liegt. Ferner wird die Ausbeute wenig verändert, wenn der Glucosegehalt über 15% liegt, und daher i5 ist die Verwendung von Glucose im Medium in Anteilen von über 15% wirtschaftlich nicht zweckmässig. Wenn Basidiomyzeten vom Genus Coriolus unter Verwendung eines Glucose-Hefeextrakt-Mediums bestimmter Zusammensetzung erfindungsgemäss entsprechend obigen Angaben gezüchtet 20 werden, lässt sich eine zwei- bis fünfmal höhere Ausbeute an Myzel erhalten, als wenn der Basidiomyzet unter Verwendung konventioneller Medien gezüchtet wird. Beispiele solcher konventioneller Medien sind natürliche Medien, wie Peptonmedien oder modifizierte Formen hiervon, Malzex-25 traktmedien, Kornextraktmedien, Maisquellwassermedien oder synthetische Medien, wie Pfeffer's Medium, Sabou-raud's Medium oder Meyer's Medium. Das erfindungsge-mässe Verfahren bietet auch zwei- bis viermal höhere Myzelausbeuten als bei Verwendung irgenwelcher Glucose-He-30 feextrakt-Medien mit Zusammensetzungen ausserhalb des erfindungsgemäss wesentlichen Bereichs. In bezug auf die Zusammensetzung des erfindungsgemäss verwendeten Glu-cose-Hefeextrakt-Mediums wird zum Erzielen der höchsten Ausbeuten die Verwendung von Medien bevorzugt, bei wel-35 chen der Glucosegehalt im Bereich von 10-15% und das Glucose-Hefeextrakt-Verhältnis im Bereich von 6:1 bis 10:1 liegt.
Das erfindungsgemäss verwendete Medium kann mit mindestens einem mineralischen Material aus der Gruppe 40 der Phosphor, Mangan, Magnesium, Calcium, Eisen und dergleichen enthaltenden Salze sowie mit Nährstoffen, wie Vitaminen, versetzt werden.
Was die für das erfindungsgemässe Verfahren angewendeten Züchtungsbedingungen betrifft, wird die Züchtung all-45 gemein bei Temperaturen von 25 ± 3 °C durchgeführt, und zwar während einer Zeitspanne von 3-10 Tagen im Falle von Submerskultur unter Belüftung und Rühren bzw. während 20-30 Tagen im Falle von stationären Kulturen.
Die für das erfindungsgemässe Verfahren verwendeten so Basidiomyzeten vom Genus Coriolus der Polyporaceae sind bekannt. Ihre mykologischen Eigenschaften sind z.B. in den Veröffentlichungen «Colored Illustration of Fungi of Japan» von Rokuya Imazeki und Tsuguo Hongo, Bände I, 1975, und II, 1974, beschrieben. Von diesen Basidiomyzeten 55 sind die folgenden Arten beim Fermentation Research Institute, Agency of Industriai Science and Technology, Chiba-shi, Japan, der japanischen Regierung hinterlegt.
Hinterlegungs-Nr. Hinterlegungsdatum
25.12.1973 24.6.1971 6.9.1974 6.9.1974
Coriolus versicolor (Fr.)
Quél. CM-103 FERM-P No. 2414 Coriolus consors (Berk.)
Imaz. CM-166 FERM-P No. 988 Coriolus hirsutus (Fr.)
Quél. CM-151 FERM-P No. 2711 Coriolus pargamenus (Fr.)
Pat. CM-161 FERM-P No. 2712
3
632 639
Von diesen Basidiomyzeten wird die Verwendung von Coriolus versicolor (Fr.) Quél, besonders bevorzugt.
Das durch Züchtung eines der oben genannten Basidiomyzeten vom Genus Coriolus erhaltene Myzel wird meist mit einem wässrigen Lösungsmittel, wie Wasser oder verdünnter alkalischer Lösung, extrahiert und die erhaltene Extraktlösung zur Eliminierung von niedermolekularen Fraktionen raffiniert, worauf der Rückstand weiter getrocknet wird. Hierdurch erhält man eine Substanz mit Polysaccharidaufbau. Das so erhaltene Polysaccharid enthält Stickstoff in der Molekülstruktur und zeigt eine ausgezeichnete Antitumoraktivität. Beim Verabreichen dieser Substanz an Mäuse zeigt sie nicht nur bei intraperitonealer, sondern auch bei oraler Verabreichung eine ausgezeichnete Antitumoraktivität. Zahlreiche Berichte über die Antitumoraktivität dieser Substanz sind angekündigt. Die Verwendbarkeit dieser Substanz ist jedoch nicht auf die Antitumorbe-handlung beschränkt. Die Testergebnisse zeigen vielmehr eine ausgezeichnete Wirksamkeit dieser Substanz auf die Immunitätsregeneration des Patienten, die Unterbindung von Nebeneffekten der Chemotherapie und die Vermeidung einer Verschlechterung des physischen Zustandes des Patienten nach Operationen oder aus anderen Gründen. Bei den Untersuchungen wurde auch festgestellt, dass die orale Verabreichung dieser Substanz Wirkungen in bezug auf Appetitanregung, Behebung von Verdauungs- bzw. Darmstörungen und Förderung des Harnabganges hat.
Im folgenden werden Ausführungsformen der Erfindung anhand von Beispielen erläutert. Angaben in Prozent beziehen sich auf das Gewicht.
Beispiel
Jeweils 20 ml Medium der in Tabelle I angegebenen Zusammensetzung wurden in einen 100-ml-Erlenmeyerkolben gegeben. Jedes dieser Medien wurde mit einer Saatkultur von Coriolus versicolor (Fr.) Quél. CM-103 (FERM-P Nr. 2414) angeimpft und bei 25-28 °C während 28 Tagen als stationäre Kultur gezüchtet. Nach Beendigung der Züchtung wurde die in jedem Kolben erhaltene Myzelausbeute bestimmt. Die Ergebnisse sind in Tabelle I dargestellt, und zwar zusammen mit den Ergebnissen von Vergleichsversuchen, bei welchen die Züchtung unter gleichen Bedingungen mit der Abänderung durchgeführt wurde, dass das verwendete Glucose-Hefeextrakt-Medium eine Zusammensetzung • 5 ausserhalb des für das erfindungsgemässe Verfahren angegebenen Bereiches hatte.
Tabelle I
Glucose
Hefeextrakt
Glucose/
Myzelausbeute
(%)
(%)
Hefe-Extrakt
(g/Liter)
15
1,0
15
28,7
15
1,25
12
33,0
15
1,5
10
39,1
12,5
1,0
12,5
43,2
C/3
12,5
1,25
10
39,2
s
V
12,5
1,5
8,3
42,9
W)
CA
ÒO
10,0
0,75
13,3
30,7
G
D
10,0
1,0
10
35,4
T3 Ö
10,0
1,25
8,0
41,2
<D
10,0
1,5
6,7
40,6
7,5
0,5
15
27,6
7,5
0,75
10
33,7
7,5
1,0
7,5
32,2
7,5
1,25
6
30,3
2,5
0,25
10
11,0
4-
5,0
0,5
10
23,3
O
'S
7,5
0,25
30
18,8
"Hb u
10,0
0,5
20
23,1
>
12,5
0,5
25
15,9
15,0
0,75
20
22,8
2,5
1,25
2
5,8
Aus Tabelle I ist zu ersehen, dass die Myzelausbeute, die durch Züchten nach dem erfindungsgemässen Verfahren erhalten wurde, gegenüber den Vergleichsbeispielen erheblich 4o verbessert ist.
s
Claims (4)
1. Verfahren zum Züchten von Basidiomyzeten, die zum Genus Coriolus der Polyporaceae gehören, dadurch gekennzeichnet, dass die Basidiomyzeten in einem Glucose-Hefeex-trakt-Medium gezüchtet werden, das 7,5 bis 15 Gew.-% Glucose bei einem Verhältnis Glucose zu Hefeextrakt von 3:1 bis 15:1 enthält.
2. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass das Verhältnis von Glucose zu Hefeextrakt 6:1 bis 10:1 beträgt.
3. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass der Glucosegehalt des Mediums im Bereich von 10—15 Gew.-% liegt.
4. Verfahren nach Patentanspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass der Basidiomyzet Coriolus versicolor (Fr.) Quél. ist.
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
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| PL | Patent ceased | ||
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