CS164591A3 - Process for preparing beta-hydroxy-alpha aminoacids - Google Patents
Process for preparing beta-hydroxy-alpha aminoacids Download PDFInfo
- Publication number
- CS164591A3 CS164591A3 CS911645A CS164591A CS164591A3 CS 164591 A3 CS164591 A3 CS 164591A3 CS 911645 A CS911645 A CS 911645A CS 164591 A CS164591 A CS 164591A CS 164591 A3 CS164591 A3 CS 164591A3
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- aldehyde
- carbon atoms
- formula
- alkyl
- hydroxy
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- -1 succinic semialdehyde methyl ester Chemical class 0.000 claims abstract description 92
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 64
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims abstract description 49
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 41
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims abstract description 32
- 102000002667 Glycine hydroxymethyltransferase Human genes 0.000 claims abstract description 28
- 108010043428 Glycine hydroxymethyltransferase Proteins 0.000 claims abstract description 28
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 25
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 23
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 20
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 17
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 11
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 8
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 7
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 claims description 5
- 125000005982 diphenylmethyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])(*)C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 claims description 5
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000006503 p-nitrobenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1[N+]([O-])=O)C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 1-methylsulfonylpiperidin-4-one Chemical compound CS(=O)(=O)N1CCC(=O)CC1 RTBFRGCFXZNCOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004423 acyloxy group Chemical group 0.000 claims description 4
- JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N anhydrous glutaric acid Natural products OC(=O)CCCC(O)=O JFCQEDHGNNZCLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004217 4-methoxybenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1OC([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 125000000304 alkynyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000002102 aryl alkyloxo group Chemical group 0.000 claims description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 claims description 3
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 3
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 125000002349 hydroxyamino group Chemical group [H]ON([H])[*] 0.000 claims description 2
- 125000000051 benzyloxy group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])O* 0.000 claims 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 claims 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 claims 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 125000002485 formyl group Chemical group [H]C(*)=O 0.000 claims 1
- JNYXCAHRFRIDLS-UHFFFAOYSA-N 5-amino-4-hydroxy-6-methoxy-6-oxohexanoic acid Chemical compound COC(=O)C(N)C(O)CCC(O)=O JNYXCAHRFRIDLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 235000008206 alpha-amino acids Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000005494 condensation Effects 0.000 abstract 1
- 238000009833 condensation Methods 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 35
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 33
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 33
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 29
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 26
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 17
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 17
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 13
- NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N pyridoxal 5'-phosphate Chemical compound CC1=NC=C(COP(O)(O)=O)C(C=O)=C1O NGVDGCNFYWLIFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 235000007682 pyridoxal 5'-phosphate Nutrition 0.000 description 13
- 239000011589 pyridoxal 5'-phosphate Substances 0.000 description 12
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 11
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 11
- IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N Acetaldehyde Chemical compound CC=O IKHGUXGNUITLKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- AIJULSRZWUXGPQ-UHFFFAOYSA-N Methylglyoxal Chemical compound CC(=O)C=O AIJULSRZWUXGPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 8
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 8
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 6
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N Acrolein Chemical compound C=CC=O HGINCPLSRVDWNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N Butyraldehyde Chemical compound CCCC=O ZTQSAGDEMFDKMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical compound O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 4
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000007698 Alcohol dehydrogenase Human genes 0.000 description 3
- 108010021809 Alcohol dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 150000003934 aromatic aldehydes Chemical class 0.000 description 3
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 3
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000005949 ozonolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 3
- 229940120731 pyruvaldehyde Drugs 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002941 2-furyl group Chemical group O1C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- HSJKGGMUJITCBW-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybutanal Chemical compound CC(O)CC=O HSJKGGMUJITCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YGCZTXZTJXYWCO-UHFFFAOYSA-N 3-phenylpropanal Chemical compound O=CCCC1=CC=CC=C1 YGCZTXZTJXYWCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KEHNRUNQZGRQHU-UHFFFAOYSA-N 4-oxopentanal Chemical compound CC(=O)CCC=O KEHNRUNQZGRQHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N Ethylamine Chemical compound CCN QUSNBJAOOMFDIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-HRFVKAFMSA-N L-allothreonine Chemical compound C[C@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-HRFVKAFMSA-N 0.000 description 2
- VHVGNTVUSQUXPS-YUMQZZPRSA-N L-threo-3-phenylserine Chemical class [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])[C@@H](O)C1=CC=CC=C1 VHVGNTVUSQUXPS-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N Propionic aldehyde Chemical compound CCC=O NBBJYMSMWIIQGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 2
- 238000005882 aldol condensation reaction Methods 0.000 description 2
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 2
- HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N alpha-acetylene Natural products C#C HSFWRNGVRCDJHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- MNFORVFSTILPAW-UHFFFAOYSA-N azetidin-2-one Chemical class O=C1CCN1 MNFORVFSTILPAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JDRMYOQETPMYQX-UHFFFAOYSA-N butanedioic acid monomethyl ester Natural products COC(=O)CCC(O)=O JDRMYOQETPMYQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000001721 carbon Chemical group 0.000 description 2
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 2
- MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N crotonaldehyde Natural products CC=CC=O MLUCVPSAIODCQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N cyclohexylamine Chemical compound NC1CCCCC1 PAFZNILMFXTMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000002534 ethynyl group Chemical group [H]C#C* 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 125000001183 hydrocarbyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 2
- ALTWGIIQPLQAAM-UHFFFAOYSA-N metavanadate Chemical compound [O-][V](=O)=O ALTWGIIQPLQAAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000006178 methyl benzyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 description 2
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 2
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 2
- IJNJLGFTSIAHEA-UHFFFAOYSA-N prop-2-ynal Chemical compound O=CC#C IJNJLGFTSIAHEA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001327 pyridoxal phosphate Drugs 0.000 description 2
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N valeric aldehyde Natural products CCCCC=O HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 2
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 2
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 2
- IEAUKTACQUVNLS-HNQUOIGGSA-N (e)-3-thiophen-2-ylprop-2-enal Chemical compound O=C\C=C\C1=CC=CS1 IEAUKTACQUVNLS-HNQUOIGGSA-N 0.000 description 1
- GKIATJNLLNNGJV-UHFFFAOYSA-N 1-methoxycyclopentene Chemical compound COC1=CCCC1 GKIATJNLLNNGJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 2-Methylbenzenesulfonic acid Chemical compound CC1=CC=CC=C1S(O)(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMNCNUNUQBLASX-UHFFFAOYSA-N 2-aminoacetic acid;copper Chemical compound [Cu].NCC(O)=O RMNCNUNUQBLASX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RDFMDVXONNIGBC-UHFFFAOYSA-N 2-aminoheptanoic acid Chemical compound CCCCCC(N)C(O)=O RDFMDVXONNIGBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAARVZGODBESIF-UHFFFAOYSA-N 2-chloropropanal Chemical compound CC(Cl)C=O UAARVZGODBESIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001731 2-cyanoethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C([H])([H])C#N 0.000 description 1
- 125000004777 2-fluoroethyl group Chemical group [H]C([H])(F)C([H])([H])* 0.000 description 1
- IQVAERDLDAZARL-UHFFFAOYSA-N 2-phenylpropanal Chemical compound O=CC(C)C1=CC=CC=C1 IQVAERDLDAZARL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAUAFFKABKNGKX-UHFFFAOYSA-N 3-(2-methylphenyl)prop-2-enal Chemical compound CC1=CC=CC=C1C=CC=O ZAUAFFKABKNGKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VQZRLBWPEHFGCD-UHFFFAOYSA-N 3-chloro-4-methylphenol Chemical group CC1=CC=C(O)C=C1Cl VQZRLBWPEHFGCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AQJFATAFTQCRGC-UHFFFAOYSA-N 3-chloro-4-methylphenol Chemical group CC1=CC=C(O)C(Cl)=C1 AQJFATAFTQCRGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DNEOPNXWMLCLNN-UHFFFAOYSA-N 3-fluoropentanal Chemical compound CCC(F)CC=O DNEOPNXWMLCLNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QOXOZONBQWIKDA-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxypropyl Chemical group [CH2]CCO QOXOZONBQWIKDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SXIFAEWFOJETOA-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-butyl Chemical group [CH2]CCCO SXIFAEWFOJETOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFZMJAMTNAAZQE-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxypentanal Chemical compound CC(O)CCC=O HFZMJAMTNAAZQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CGFGIKNLZTZJDE-UHFFFAOYSA-N 4-oxobutanenitrile Chemical compound O=CCCC#N CGFGIKNLZTZJDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSTNYGQPCMXVAQ-KIYNQFGBSA-N 5,6,7,8-tetrahydrofolic acid Chemical compound N1C=2C(=O)NC(N)=NC=2NCC1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 MSTNYGQPCMXVAQ-KIYNQFGBSA-N 0.000 description 1
- 102000003677 Aldehyde-Lyases Human genes 0.000 description 1
- 108090000072 Aldehyde-Lyases Proteins 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N Dibenzylamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCC1=CC=CC=C1 BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BUDQDWGNQVEFAC-UHFFFAOYSA-N Dihydropyran Chemical compound C1COC=CC1 BUDQDWGNQVEFAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUXOBHXGJLMRAB-UHFFFAOYSA-N Dimethyl succinate Chemical compound COC(=O)CCC(=O)OC MUXOBHXGJLMRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N Erythromycin Chemical group O([C@@H]1[C@@H](C)C(=O)O[C@@H]([C@@]([C@H](O)[C@@H](C)C(=O)[C@H](C)C[C@@](C)(O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@H](C[C@@H](C)O2)N(C)C)O)[C@H]1C)(C)O)CC)[C@H]1C[C@@](C)(OC)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ULGZDMOVFRHVEP-RWJQBGPGSA-N 0.000 description 1
- 102000001390 Fructose-Bisphosphate Aldolase Human genes 0.000 description 1
- 108010068561 Fructose-Bisphosphate Aldolase Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- QIKRJDSHBWCYHO-UHFFFAOYSA-N NC(C(C(=O)O)=O)(CC)O Chemical compound NC(C(C(=O)O)=O)(CC)O QIKRJDSHBWCYHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000046052 Phaseolus vulgaris Species 0.000 description 1
- 235000010627 Phaseolus vulgaris Nutrition 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJOQJPYNENPSSS-XQHKEYJVSA-N [(3r,4s,5r,6s)-4,5,6-triacetyloxyoxan-3-yl] acetate Chemical compound CC(=O)O[C@@H]1CO[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O MJOQJPYNENPSSS-XQHKEYJVSA-N 0.000 description 1
- IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N acetaldehyde Chemical compound [14CH]([14CH3])=O IKHGUXGNUITLKF-XPULMUKRSA-N 0.000 description 1
- 159000000021 acetate salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 238000005575 aldol reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001323 aldoses Chemical class 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000012431 aqueous reaction media Substances 0.000 description 1
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N benzaldehyde Chemical group O=[11CH]C1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N 0.000 description 1
- 125000001246 bromo group Chemical group Br* 0.000 description 1
- 230000005587 bubbling Effects 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- QDHFHIQKOVNCNC-UHFFFAOYSA-N butane-1-sulfonic acid Chemical compound CCCCS(O)(=O)=O QDHFHIQKOVNCNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004369 butenyl group Chemical group C(=CCC)* 0.000 description 1
- 125000004106 butoxy group Chemical group [*]OC([H])([H])C([H])([H])C(C([H])([H])[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000001589 carboacyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- VVYPIVJZLVJPGU-UHFFFAOYSA-L copper;2-aminoacetate Chemical compound [Cu+2].NCC([O-])=O.NCC([O-])=O VVYPIVJZLVJPGU-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N crotonaldehyde Chemical compound C\C=C\C=O MLUCVPSAIODCQM-NSCUHMNNSA-N 0.000 description 1
- 238000006392 deoxygenation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 1
- MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N dibenzyl ether Chemical compound C=1C=CC=CC=1COCC1=CC=CC=C1 MHDVGSVTJDSBDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 1
- ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N diethanolamine Chemical compound OCCNCCO ZBCBWPMODOFKDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- PMNYTGAGAKEGJE-UHFFFAOYSA-N ethane-1,2-diamine;sodium Chemical compound [Na].[Na].NCCN PMNYTGAGAKEGJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001301 ethoxy group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 238000001917 fluorescence detection Methods 0.000 description 1
- 125000004216 fluoromethyl group Chemical group [H]C([H])(F)* 0.000 description 1
- CNUDBTRUORMMPA-UHFFFAOYSA-N formylthiophene Chemical compound O=CC1=CC=CS1 CNUDBTRUORMMPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 125000006038 hexenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000005980 hexynyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 125000004029 hydroxymethyl group Chemical group [H]OC([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 125000000904 isoindolyl group Chemical class C=1(NC=C2C=CC=CC12)* 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N medroxyprogesterone acetate Chemical compound C([C@@]12C)CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@](OC(C)=O)(C(C)=O)CC[C@H]21 PSGAAPLEWMOORI-PEINSRQWSA-N 0.000 description 1
- 229940098779 methanesulfonic acid Drugs 0.000 description 1
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 1
- 125000004184 methoxymethyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC([H])([H])* 0.000 description 1
- OJURWUUOVGOHJZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-[2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]ethyl]amino]acetate Chemical compound C=1C=CC=C(OC(C)=O)C=1CN(CC(=O)OC)CCN(CC(=O)OC)CC1=CC=CC=C1OC(C)=O OJURWUUOVGOHJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N naphthalene-1-sulfonic acid Chemical compound C1=CC=C2C(S(=O)(=O)O)=CC=CC2=C1 PSZYNBSKGUBXEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940054441 o-phthalaldehyde Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 125000004043 oxo group Chemical group O=* 0.000 description 1
- 125000002255 pentenyl group Chemical group C(=CCCC)* 0.000 description 1
- 125000005981 pentynyl group Chemical group 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N phthalaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1C=O ZWLUXSQADUDCSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 125000004368 propenyl group Chemical group C(=CC)* 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000007363 ring formation reaction Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 150000003900 succinic acid esters Chemical class 0.000 description 1
- UIUJIQZEACWQSV-UHFFFAOYSA-N succinic semialdehyde Chemical compound OC(=O)CCC=O UIUJIQZEACWQSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003460 sulfonic acids Chemical class 0.000 description 1
- LCZVKKUAUWQDPX-UHFFFAOYSA-N tert-butyl 2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-[2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-[2-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-2-oxoethyl]amino]ethyl]amino]acetate Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1CN(CC(=O)OC(C)(C)C)CCN(CC(=O)OC(C)(C)C)CC1=CC=CC=C1OC(C)=O LCZVKKUAUWQDPX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003588 threonines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 1
- 229940005605 valeric acid Drugs 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1003—Transferases (2.) transferring one-carbon groups (2.1)
- C12N9/1014—Hydroxymethyl-, formyl-transferases (2.1.2)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
- C07C229/02—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton
- C07C229/04—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
- C07C229/24—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms of the same carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having more than one carboxyl group bound to the carbon skeleton, e.g. aspartic acid
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
- C12P13/08—Lysine; Diaminopimelic acid; Threonine; Valine
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Catalysts (AREA)
- Diaphragms For Electromechanical Transducers (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
Způsob přípravy ,6 -hydroxy- -aminokyselin^“*———. ,L.
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu přípravy β-hydroxy-«/.-aminoky-selin, Zvláště se týká enzymatického způsobu přípravy -hyd-roxy- -aminokyselin v podstatě v L-erytroformě.
Dosavadní stav techniky β-hydroxy- 4- -aminokyseliny mají četná použití včetněpoužití jakožto meziproduktů pro přípravuβ -laktamových an-tibiotik. Příkladně se uvádí Mattingly P.G., Miller M.J.z J.Org Chem. Soc. 1980, 46, str. 1557 a Miller M.J. a kol., J,Amen. Chem. SOc. 1980, 102, str. 7026. Jsou známy četné che-mické způsoby pro přípravu $ -hydroxy- oL -aminokyselin, a/v- šak většina těchto způsobů má četné nedostatky. Jsou nedos-tatečně obecné, řízení stereochemie je špatné, vyžadují chi-ráiní pomo,cné prostředky nebo vedou primárně k produkci threo/nebo syn/ isomerů.
Enzymatické způsoby mají některé výrazné přednosti před způsoby chemickými. Například se mohou provádět ve vodném pro-středí za mírných podmínek a často stereoselektivně. Enzym,používaný při způsobu podle vynálezu,je znám obecně jako aldo-lasa. Jednou takovou aldolasou je serinhydroxymethyltransfe-rasa /SHMT/, Schirch L. Adv. Snzymol. Relat. Areas Mol. Biol.1982, 53, str. 83 a Schirch L., Gross T.J. Biol. Chem. 1968,243, 5651. Přírodními biologickými úlohami aldolas je přenosjednouhlíkových jednotek na serin nebo ze šeřinu a retroaldo-lové štěpení -hydroxy-ζλ. -aminokyselin, jako threoninu aallo-threoninu za generace aldehydu a glycinu.
Aldolasy jsou všudypřítomné v rostlinách, bakteriích av živočiších, na,příklad v semenáčcích kukuřice, v semenáč-cích fazolí a v králičích játrech. Způsob podle vynálezu jezaložen na použití serinhydroxymethyltransferasy /SHMT/ pro přípravu za mírných podmínek - 2 - kyselinových prekursorů pro β -laktamová antibiotika. Při způsobu se v mnoha případech získá ^/^-hydroxyaminokyselina v L-erythro isomerní formě, která je žádoucí diestereomerní formou prekursorů ^-lektamových antibiotik.
Podstata vynálezu
Podstatou přípravy aminokyselin obecného vzorce I + h3n
/1/
o-— kde znamená R alkenylovou skupinu ; s 2 až 6 atomy uhlíku, alkynylo-vou skupinu s 2 až 6 atomy uhlíku, alkylovou skupinus 1 až 6 atomy uhlíku substituovanou esterifikovou kar-boxyskupinou, alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, atomemfluoru, chloru nebo bromu, kyanoskupinau,hydroxyskupinou,alkanoyloxyskupinotx s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylovou sku-pinou, furylovou skupinou, nebo benzyloxyskupinu, feny-lovou skupinu nebo furylovou skupinu,
spočívá podle vynálezu v tom, že se mísí při teplotě přibliž-ně 30 °C až přibližně 55 °C ve vodném roztoku o hodnotě pHpřibližně 5,5 až přibližně 9 aldehyd obecného vzorce II RCHO /11/ kde R má shora uvedený význam a glycin se serinovou hydroxy-methyltransferasou v přítomnosti pyridoxal-5 -fosfátu. S výhodou se reakce provádí při teplotě 37 °C. °akožtoaldehydu obecného vzorce II se používá například alifatické-ho aldehydu jako acetaldehydu mebo butanalu nebo se použí-vá aromatického aldehydu jako 2-furfuralu. Způsobem podle - 3 - vynálezu se převádí ester jantarového semialdehydu na monoes- ter kyseliny β-hydroxy- -aminoadipové.
Poměrné množství glycinu a aldehydu obecného vzorce IIse může měnit, zdá se však, že se produkt získá ve vyšším vý-těžku, když se moužije ekvimolárního množství. Množství pou-žitého enzymu závisí na míře čistoty enzymu, jelikož jakéko-liv nečistoty účinnost enzymu ovlivňují.
Hodnota pH reakčního prostředí se pufruje na hodnotupH přibližně 5,5 až přibližně 9 v případě většiny substrátů,s výhodou na hodnotu 7,0 až přibližně 8,0. Fosfátové pufryjsou vhodné pro dosahování žádané hodnoty pH. 0©ko v případě jiných enzymatických reakcí kofaktory mo-hou ovlivňovat substrátovou specificitu enzymu a účinnost en-zymu při katalyzování reakce daného substrátu. Důležitýmfaktorem pro serinhydroxymethyltransferaau při způsobu pod-le vynálezu je pyridoxal-5*-fosfát♦ Jiné faktory vedle PLP,ktey se může přidat, mají příznivý vliv na výtěžek produk-tu získaného za použití některých substrátů. Například ky-selina tetrahydrofolová podporuje účinnost enzymu při konver-zi pyruvaldehydu jakožto substrátu. Také metavanadát působíjakožto kofaktor pro konverzi téhož aldehydu.
Ve shora uvedeném obecném vzorci I je /j-hydroxy-< -aminokyselina, připravovaná způsobem podle vynálezu, ve for-mě vnitřní soli. !^ato forma soli se očekává při hodnotě pHpři způsobu podle vynálezuzavšak za jiných podmínek může ky-selina být také v neiontové formě obecného vzorce
OH j H2N - CH - CH - Ri
. COOH kde R má shora uvedený význam.
Aldehyd obecného vzorce II, používaný při způsobu po-dle vynálezu, může mít přímý nebo rozvětvený alkylový řetě-zec, nebo to může být alkenylaldehyd nebo alkynylaldehyd nebo aromatický nebo heterocyklický aldehyd. Aldehyd může býtsubstituován skupinami, vybranými ze souboru zahrnujícího na-příklad alkoxyskupinu jako methoxyskupinu nebo ethoxyskupinu;esterifikovanou karboxyskupinu jako alkylestery s 1 až 4 ato-my uhlíku v alkylovém podílu karboxyskupiny; kyanoskupinu;hydroxyskupinu; acylovanou hydroxyskupinu, jako formyloxysku-pinu, acetoxyskupinu, propionoxyskupinu nebo butyloxyskupi-nu; atom halogenu jako fluoru nebo chloru; halojgenalkylo-vou skupinu jako trifluormethylovou nebo chlormethylovou sku-pinu; nebo alifatický aldehyd může obsahovat oxoskupiny,například aldehydem obecného vzorce II může být ketoaldehydnapříklad 4-oxopentanal nebo pyruvaldehyd. Aromatický alde-hyd nebo heterocyklický aldehyd může být podobně substituo-ván na aromatickém nebo heterocyklickény jádru nebo na ja-kémkoliv alkylovém nebo alkenylovém podílu. Jakožto příkladyalkylaldehydů, alkenylaldehydů a alkynylaldehydů obecnéhovzorce II, kterých se může při způsobu podle vynálezu pou-žít, se uvádějí acetaldehyd, propionaldehyd, butyraldehyd,valeraldehyd, methylester semialdehydu jantarového, jantaro-vý semialdehyd benzylester, 4-hydroxyvaleraldehyd, methyles-ter gLutarsemialdehydu, pyruvaldehyd, 0-formyl-4-hydroxyva-leraldehyd, 3-fluorvaleraldehyd, 5-chlorvaieraldehyd, 2-chlorpropionaldehyd, propargylaldehyd a alkenaldehydy o-becného vzorce 0 0 I* « RC - CH = CH - R*f H - C - CH2 - GHg - CH = CH - R* kde znamená R* atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4atomy uhlíku, jako je třeba akrolein, krotonaldehyd a 4-pen-tenal·. «Jakožto příklady aromatických a heterocyklických alde-hydů obecného vzorce II, použitelných při způsobu podle vy-nálezu se uvádějí benzaldehyd, tolualdehyd, 3-fenylpropion-aldehyd, 2-fenylpropionaldehyd, furfural, 2-/2-furyl/acetal-dehyd, 3-furylakroIein, 3-fenylekrolein, 2-thiofenaldehyd, 3-/2-thienyl/akrolein, 3-/methylfenyl/akrolein a podobnéaromatické aldehydy. - 5 - S výhodou se při způsobu podle vynálezu používá aldehyčUobecného vzorce II, kde znamená R alkenylovou skupinu s 2až 6 atomy unlíku, alkynylovou skupinu s 2 až 6 atomy uhlí-ku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku substituo-vanou esterifikovanou karboxyskupinou, alkanoxyloxyskupinkus 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 6 ato-my uhlíku substituovanou arylalkoxyskupinou.
Zde používaným výrazem alkenylovou skupina s 2 až 6 a-tomy uhlíku se; míní uhlovodíková skupina s přímým nebo s roz-větveným řetězcem, jako je například skupina ethenylová, pro-penylová, butenylová, pentenylová a hexenylová skupina; "al-kynylovou skupinou" se míní uhlovodíková skupina s přímý# ne-bo rozvětveným řetězcem, jako je skupina ethynylová, propymy-lová, butynylová, pentynylová a hexynylová.
Alkylovou skupinou s 1 až 6 atomy uhlíku substituovanouesterifikovanou karboxyskupinou se míní alkylová skupina spřímým nebo s rozvětveným řetězcem substituovaná esterifi-kovanou karboxyskupinou, přičemž esterovým podílem je skupinaalkylová s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylová, benzylová substitu-ovaná benzylová skupina, jako je skupina p-methoxybenzylo-vá., methylbenzylová, p-nitrobenzylová, difenylmethylová ne-bo- jakákoliv jiná běžná karboxyl: ' chránící skupina. Jakož- to příklady takových skupin se uvádějí skupina ethoxykarbonylmethylová, 2-/methoxykarbonyl/ethylová, 3-/terc.-butoxy-karbonyl/propylová, 3-/benzyloxykarbonyl/butylová, 5”/4—methoxybenzyloxykarbonyl/hexylová a podobné alkylové skupiny, sub-stituované esterifikovanými karboxyskupinami. Výrazem "alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, substi-tuovaná alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku" se vždy mínímethoxymethylová skupina, 2-ethoxyethylová skupina, 4-tere.-butoxypentylová skupina, 3-isopropoxypentylové skupina, 2-ethoxyhexylová skupina a podobné skupiny. Výrazem alkylováskupina s 1 až 6 atomy uhlíku substituované atomem fluorunebo chloru" se vždy míní skupiny jako 2-fluorethylová sku-pina, 4—chlorbutylová skupina, 5—chlorpentylová skupina, - 6 - skupina chlormethylová, fluormethylová, 3-chlor-4-methylfe-nylová a podobné skupiny; výrazem "alkylová skupina s 1 až 6atomy uhlíku,substituované kyanoskupinou" se zde vždy mínískupiny jako skupina kyanmethylová, 2-kyanethýlové, 4-kyan-butylovó, 3-kyanbutylová, 5-kyanhexylová a podobné skupi-ny» výrazem "alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku,sub-stituované hydroxyskupinou" se zde vždy míní skupiny jakoskupina hydroxymethylovó, 2-hydroxymethylová, 4-hydroxybuty-lová, 3-hydroxypropylová, 3-hydroxyhexylovó a podobné skupinyvýrazem čélkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, substituo-nanó alkanoyloxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku” se zde vždymíní skupina, jako je skupina 2-acetoxyethylová, 2-formyloxy-ethylovó, 3-acetoxypropylová, 4-propionoxybutylovó a podob-né skupiny; a výrazem "alkylová skupina s 1 až 6 atomy uhlíkusubstituovaná arylalkoxyskupinou" se zdá vždy míní benzyloxy-methylová , difenylmethoxymethylová, 4-benzyloxybutylová, 2-/4-methoxybenzyloxy/ethylová, 3-difenylmethoxypropylováskupina a podobné skupiny.
Obzvláště výhodnými aldehydy obecného vzorce II pro způ-sob podle vynálezu jsou aldehydy obecného vzorce II, kde zna-mená R alkenaldehyd obecného vzorce 0 ti
HC - 0¾ - CH2 - CH = CH - R jak shora definováno, nebo R znamená alkylovou skupinu s 1až 4 atomy uhlíku, substituovanou esterifikovanou karboxy-skupinou nebo alkenoyloxyskupinu. Jakožto příklady takovýchskupin se uvádí skupina 2-/methoxykarbonyl/ethylové, 2-/ben-zyloxykarbonyl/ethylová, 3-/e:thoxykarbonyl/propylová, 2-formyloxyethylová a 2-acetoxyethylová skupina.
Aldehydy obecného vzorce IIRCHO kde R má shora uvedený význam, jsou všechny o sobě známýmisloučeninami obchodně dostupnými nebo přepravitelnými o so-be známými způsoby. - 7 - Výhodný způsob přípravy podle vynálezu zahrnuje použitíaldehydu obecného vzorce II, kde znamená R 2-/esteri£ikova-ný karboxy/ethylovou skupinu, 2-kyanethylovou skupinu, 2-esterifikovany< karboxy/ethynylovou skupinu, 2-/esterifiko-vený karboxy/vinylovou skupinu, 3-/esterifikovaný karboxy/-propylovou skupinu, 2-formyloxyethylovou skupinu, 2-acet-oxymethylovou skupinu, 3-formyloxypropylovou skupinu nebo 3-acatoxypropylovou skupinu, přičemž esterovým podílem es-terifikované karboxyskupiny je alkylový podíl s 1 až 4 ato-my uhlíku, například skupina methylbvá, ethylová nebo terč.-butylová; podíl fenylový, benzylový, difenylmethylový, tri-tylový, nebo substituovaný benzylový, například skupina 4-methoxybenzylová nebo 4-nltrobenzylová. Jakožtó obzvláštěvýhodný aldehyd pro způsob podle vynálezu se uvádí sernial-dehydester kyselina jantarové. Jiným obzvláště výhodným al-dehydem je semialdehydester kyseliny glutarové.
Reakce probíhá podle následujícího schéma: RCČjH, + N^Cř^COOH R - CH/OH/ - GH /nHj/COO” kde R má shora uvedený význam.
Jak shora uvedeno, serinfeydroxymethyltransferasa jezískatelná z četných zdrojů. Třemi takovými zdroji jsou krá-ličí játra /LaVerne Schirch a Merle Mason, J. Biol. Chem. sv.237, číslo 8, srpen, 1962/, semenáčky kukuřice /Mssuda T.,a kol., Agric. Biol.· Chem. 1986, 50, 2763/ & semenáčky faso-lí /Rao, D.N. a Rao N.A., Plant Physiol., 1982, 69, 11/. V následující tabulce I jsou uvedeny representativní al-dehydové substráty, které se převádějí způsobem podle vyná-lezu na ^-hydroxy-ýC -aminokyseliny za použití SHMT fcedvou zdrojů. Konverse substrátu podle tabulky I se provádíinkubováním substrátu a glycinu s SHMT za podmínek způsobupřípravy. Četné používané pracovní podmínky jsou společnévšem substrátům a jsou dále podrobně popsány. Jsou všakmožné také výjimky, na které bude upozorněno v každém pří-padě.
Inkubováni se provádí v 10 mM fosfátovém pufru, při - 8 - hodnotě ρϋ 7,3, přičemý pufr obsahuje pyridoxal-5'-fosfátv koncentraci přibližně 80 /UM. Pro nejlepší výsledky se ·všchny roztoky připravují z destilované a deionizované vody.Konverze se provádí při teplotě přibližně 37 °C v zatavenémikroodstředivkové fiole o obsahu 500 ^ul z polypropylenupři konstantní teplotě vodné lázně. Eiola se chrání přěd ~světlenu s výjimkou, kdy se vyjímá z vodní lázně pro vyjmutíalikvotu pro analýzu. V případě všech konverzí se provádíslepá enzymová inkubace paralelně s SEEMT inkubací. Celkovýobjem inkubační směsi je zpravidla přibližně 200 /ul. In-kubace v případě slepém zkoušky se provádí stejně jako inku-bace směsi s tou jedinou výjimkou, že enzym není obsažen.
ND
Tabulka I
Aldehydové /RCHO/ substráty pro SHM.T
Aldehyd /RCHO/ Enzym1 R = králičí játra -cr3 + -C^CÍ^CH-j + -C^CÍ^CC^CILj . -CBgCE^COg/Cí^/2 -co2r -Cí^CH^CHgCOgC^ -C/O/CH32
-CHgCHgCí^OCHO -CH^OCÍ^C^ 2-furyl 2-/2_furyl/ethyl
Kukuřičné demenáčky +
KB + +
KB + +
NB
ND + = konverze,
znamená nezjistitelnou konverzi, NB znamená nestanoveno 2/ v případě králičích jater je obsažen SHMT VO^" a v pří-padě kukuřice SHMT je přítomen tetrahydrodolát
Způsob se může monitorovat pro výrobu (b -hy&rtyxy- d. -amonkyseliny odstraněním aliquotů z inkubační směsi, občas azkoušením vzorků HPLC chromátogrsdickým děleníma fluores-cenční detekcí o-ftalaldehydu odvozených isoindolů všech pri-márních sloučenin obsažených ve směsi. Zkušební postup po-psal Jones B-N.., Gilligan J.P., J. C^rom. 1983, 266, 471;
Hones B.N.., a .kol., J. L|q. Chrom. 1981, &, 565 a Simins Jr., S.S. a kol., J. Am. Cuem. SJc. 1976, 98, 7098. Analýza HPLCjak inkubační směsi tak slepé zkoušky umožňuje stanovit kte-ří pík nebo které píky chromatogramů se mohou přičítat en-zymovým produktům.
Způsob podle vynálezu se provádí přidáním aldehydu k puf-rovanému roztoku glycinu obsahujícího PLP a jiný kodaktor apak smíšením roztoku s pudrovaným roztokem enzymu. Nebo pud-rovaný roztok, obsahující P&P^ glycinu a roztok enzymu sesmísí a pak se přidá aldehyd. Je rovněž možné přidávat enzy-mový roztok do roztoku aldehydu a glycinu v přítomnosti PLPobsahujícího pudru.
Není řfcutné, aby aldehyd, obecného vzorce RCHO byl dokona-le roupuštěn v roztoku, k tomu, aby probíhal konversní proces.Aldehydy, které jsou toliko částečně rozpustné ve vodném re-akcním prostředí, mohou také sloužit jako enzymový substrát.
Způsob podle vynálezu, kdy aldehyd obecného vzorce RCHOje alifatickým aldehydem /například atom uhlíku vázaný nakarbonylovou skupinu aldehydové dunkce je nasycen, CH^/poskytuje přednostně L-erythro diastereomer tf\-hydroxy- Qy -aminokysliny nebo esteru,Jestliže je však aldehydový sub-strát aromatický /mapříklad atom uhlíku , vázaný na karbo-ny 1 aldehydové funkce je částí aromatického systému/, získáse produktjjak v threo tak v erythro formě vždy ve stejnémmnožství. Například benzaldehydová formfc. jak threo tak eryt.-hro isomerů β -fenylserinu.
Jakožto příklady/¾-hydroxy-^-aminokyselin, získaných 10 způsobem podle vynálezu, se uvádějí /3-fenylserin, β -/2-furyl/serin, fy-hydroxy- -eminoadipová kyselina, -hyd-roxy- -aminohexanoová kyselina, 0-hydroxy- ^-amino-ip -formyloxyhexanoová kyselina, (J-hydroxy- <?L -amino- -oxo-valerová kyselina, β -hydroxy- flU-amino- -fenylmáselná ky-selina, -hydroxy- qú.-aminoheptanoová kyselina, β-hydroxy-^-amino- uj -/2_furyl/pentanoová kyselina a podobné amino-kyseliny. Při výhodném provádění způsobu podle vynálezu se inkubu-je^ester semialdehydu jantarové kyseliny, například alkyl-ester s 1 až 4 atomy uhlíku, jako methylester nebo isopro-pylester s glycinem a s SHMT ve fosfátovém pufru v přítom-nosti PLP, čímž se získá poloester β -hydroxy- -aminoadi-pové kyseliny ve formě L-erythroisomeru. Při jiném výhodnémprovedení způsobu podle vynálezu se inkubuje ester semial-dehydu kyseliny glutarové, například methylester, se SHMTza vzniku poloesteru /S-hydroxy- & -aminopimelová kyseliny. λ v
Shora uvedená provedení vynálezu objasňuje, následujícíschéma: 0
SHMT R1 OO/CH^CHO + ^NCi^COOH :> O OH NIL· .. i i
R10C-/CH2/n-CH-CH-C00H kde zanmená R^ skupinu alkylovou s 1 až 4 atomy uhlíku, fe-nylovou, benzylovou, difenylmethylovou, 4-methoxybenzylovounebo 4-nitrobenzylovou a n číslo 2 nebo 3.
Vynález se dálé týká aminokyseliny, Ú-hydroxy-©U -ami-noadipové kyseliny, jejích mono a di R^ esterů a solí obec-ného vzorce r ooc-ch2-ch2-ch/oh/ch/nh2/coor1 ' kde R.| má shora uvedený význam a R^ znamená atom vodíku ne-bo má stejný význam jako R. ,J-'ato aminokyselina se způsobempodle vynálezu získá v L-erythroformě. Soli dikyseliny nebo - 0 - její monoester se mohou připr&vit o sobě známým způsobem.J-akové soli zahrnují soli s alkalickým kovem, jako jsousoli sodné a draselné, soli s kovem alkalické zeminy, jakojsou soli vápenatá a amoniové soli a aminové soli, jako jsousoli získané s benzylaminem, dibenzylaminem, cyklohexylami-nem, dicyklohexylaminem a alkylprimárními a sekundárními a-miny, přičemž alkylový podíl obsahuje 1 až 4 atomy uhlíku,například s methylaminem, ethylaminem, diethylaminem, di-/n-butyl/aminem, ethanolaminem, diethanolaminem, dipropanol-amihem. a podobné soli. Takové soli jsou užitečné pro izola-ci a čištění dikyseliny nebo jejího monoesteru a vytvářejístálé formy pro skladování aminokyselin. Připravují se takékyselé adiční soli s aminokyselinou a s jejím esterem. Tako-vé soli se vytvářejí s kyselinami, které jsou silnější nežkyselé skupiny karboxylové kyseliny aminokyseliny. Jakožtopříklady takových kyselin se uvádějí kyselina chlorovodíko-vá, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina fosfo-rečná a kyseliny sulfonové, jako je kyselina toluensulfono-vá, naftalensulfonová, methansulfonová a n-butansulfonovákyselina. jejich esterů se vztahuje na monoestery a diestery,kde R^ má stejný význam, jako shora uvedeno v reakčním schéma.Jakožto příklady takových esterů se uvádějí monomethylester,monoethylester, dimethylester, diethylester, terč.-butyl-ester a di-terc.-butylester, benzylester, 4-methoxybenzyl-ester a dibenzylester.
Způsob/podle /vynálezu připravené -hydroxy- o( - /ami-nokyseliny jsou užitečnými meziprodukty pro důležité ^-lak-tamové sloučeniny. Produkty se převádějí o sobě známými způ-soby na fa -laktamové sloučeniny, které jsou užitečné propřípravu o sobě známých antibiotikových sloučenin. Napřík-lad /J-hydroxy- dC-aminokyseliny se převádějí na hydroxya-mátové deriváty a pak se cyklizují na 3-amino-4-substituova-H-é. -laktamové sloučeniny podle následujícího reakčníhoschéma: - 12 -
OH t H7N - CH - CH -Ro□ I c. c - o"
II o R1 ONH2 ->
OH »
HglL - CH - CH - RÓ - NH - OR,
It '
O
A
A
kde R má shora uvedený význam u obecného vzorce I a R^ zna-mená alkylovou skupinu, alkanoylovou skupinu nebo aralkylo-vou skupinu. Vytvoření hydroxyamátu a cyklizace hydroxyamátuna /3-laktam se provádí způsobem, který popsal Miller M. J.,Tetrahedron Lett., 1987, 28, 6257 a Kolasa T. a Miller M.J.,Tetrahedron Lett., 1987, 28, 1861·.
Nebo se fa -hydroxy- -aminokyseliny mohou převádět naN-/substituované methyl/azetidinony, jako popsal Miller M.3.,americký patentový spis číslo 4 595532. Dále se aminokyseli-nové produkty mohou převádět na N-/fosfonomethyl/azetidinonyzpůsobem, který popsal Miller M.J., americký patentový spisčíslo 4 820815. Následující způsoby přípravy a příklady praktického pro-vedení vynález objasňují, nijak jej však neomezují. Příklady provedení vynálezu Příprava serinhydroxymethyltransferasy z kukuřičných semenáč-ků Všechny následující operace se provádějí při teplotě 4°C.. Promyté 5 až 7 dní staré kukuřičné semenáčky se homo-genizují v Waringově mísiči ve 100 mM roztoku monohydrogen-fosfátu draselného obsahujícího 1 mM disodiumethylendiamin- 13 tetraacetát /EDTA/, 1 mM dithiothreitol a 1 25 ^uM pyridoxal-5 -fosfát. Směs obsahuje přibližně 960 g semenáčků na litrsměsi. Homogenát se zfiltruje plátnem na sýr a filtrát se vy-srání síranem amonným. Bílkovina se vysráží 35 až 50% amo-niumsulfátem po odstředění při 13800 x g po 40 minut, roz-pustí se v 10 mM fosfátovém pufru při hodnotě 7,8 obsahují-cím 125 /UM pyridoxal-5'-fosfáty v 1mM EDTA. Roztok se dia-lyzuje a zkoncentruje na 5 až 15 mg bílkoviny/ml v témžepufru v nepřítomnosti EDTA. Zkouška na aldosuvou aktivitubílkoviny sestává z kopulovaného systému mezi aldosou kataly-zovaného retroaldol L-allothreoninu s NADH /redukovaná formanikotinamidadenindinekleotidu/a redukcí vzniklého acetaldehy-du; kvasinkovou alkoholdehydrogenasou /ADH/. Specifická aktivi-ta je; 78 milijednotek/mg bílkovin. Jedna jednotka enzymové ak-tivity je definována jakožto množství enzymu potřebné způso-bit změnu optické jednotky hustoy /při 340 nm/ za minuty přiteplotě místnosti v přítomnosti ADH, 120 mM L-allothreoninu, 1 25 /UM PLP a 120 ^uM NADH ve 100 mM fosfátového pufru připH 7,5.
Nepoužitá SHMT se skladuje bučí v lyofilizované formě ne-bo ve zmrazené formě s 10 % glycerolu. V následujících příkladech praktického provedení, pokudnení jinak uvedeno, je pufrovým systémem 10 mM fosforečnandraselný, při hodnotě pH 7,3 a obsahuje pyridoxal-5'-fosfát/PLP/ v koncentraci přibližně 80 ^uM. Všechny roztoky se při-pravují v destilované deionizované vodě.
Inkubování enzymem se provádí při teplotě 37 v zata-vené fiole mikroodstředivky o obsahu 500 ^ul z polypropylenuve vodní lázni o konstantní teplotě.
Retenční doba, uváděná v příkladech se mění občas přiHPLC analýze v důsledku malých obměn takových faktorů, jako jesloupec, rovnováha, pufr a podobně. V následujících příkladech používaná SHMT je získána z krá-ličích jater /L. Schirch- supra/. 14 Příklad 1 Příprava threoninu Připraví se roztok glycinu /34 mM/ v PLP obsahujícím fos fátovém pufru a přidá se dostatečné množství čerstvě desti- lovaného acetaldehydu, aby byla koncentrace rovněž 34 mM. Při přidání do enzymového roztoku je koncentrace každého substrá- tu 17 mM.
Poztok SHMT /0,1 mg/ ve 200 yUl standardního fosfátové-ho pufru se vnese do 2 ml skleněné fioly. Přidá se stejný ob-jem substrátového roztoku a fiola se utěsní kaučukovou zátkoua měděným drátem ke snížení ztrát acetaldehydu na minimum.Tato fiola a enzymový slepý roztok se inkubují při teplotě37 °C.
Odeberou se slikvoty /10 ^ul/ 50 yul mikrolitrovcu stří-kačmcu při době inkubace 1,0; 2,$; 3,0; 4,0 a 20,5 hodin aanalyzují se HPLC.
Chromatogram ukazuje hlavní pík pro 1-erythrc isomerpři 21,9 minutách retenční doby a malý pík pro threoisomer;Identita aminokyselin produkovaných se potrvzuje současnýmvstřiknutím autentického obchodně dostupného threoninovéhoisomeru. Příklad 2 pC-Amino- -hydroxykaproová kyselina
Substrátový roztok se připraví rozpuštěním glycinu/25,5 mg, 0,340 mmol/ a n-butenalu /25,3 mg, 0,351 mmol/v 10 ml standardního fosfátového pufru, čímž se získá 34mM a 35 mM koncentrace obou jednotlivých substrátů.
Roztok SHMT /0,1 mg/ ve 100 /Ul pufru se vnese do 0,5ml polypropylenové fioly. Jiných 100 yul pufru bez enzymuse vnese do jiné fioly a do každé fioly se vnese 100 /Ulsubstrátového roztoku.
Odeberou se alikvotní roztoky z enzymového a ze slepé- ho roztoku po inkubaci 1,0; 3,0; 7,25; a 21 hodin a analy- «WSSKBcmStSKÍE? ' - 15 - lyžují se HPLC.
Ne chrcmětogramu se pozorují dva píky produktu, velkýpři 25,7 min a malý při 24,3 min. Píky odpovídají pikům au-tentického, racemického produktu. Autentický produkt se při-praví racemicky prováděnou aldolovou reakcí na měděném kom-plexu glycinu, S. Akebari a kol., Archives of Biochemistry andDiophysics 1959, 83, 1 a J.P. Greenstein a M.Winitz, “Che-mistry of Amino Acids" /Chemie aminokyselin/, John Wiley andSons, New York, 1961, sv. 3, str. 2249 až 2250. Příklad 3
Monomethylester kyseliny z^-amino- 3-hydroxyadipové
Glycin /13,3 mg, 0,177 mmol/ a methylester semieldehy-du kyseliny jantarové /20 mg, 0,172 mmol/ se rozpustí v 5,0ml pufru, čímž se získá 35 mM a 34 mM koncentrace příslušnýchlátek. Používaný aldehyd při této zkoušce je prost dimethyl-sulfoxidu, jakkoliv předšlé inkubace s tímto aldehydem vždyzahrnovaly nečistoty /zbylé po syntéze ozonolyzou sloučeninyvzorce CB2=CH-CH2CH2-COO-CH3 následovanou zpracováním dimethylsulfoxidem/.
Do roztoku*SHMT /0,1 mg/ ve 100 ^ul pufru se přidá 100yUl substrátové směsi. Alikvoty se odeberou po době inkuba-ce 0,5; 1,0; 2,0; 3,0; a 24 hodin. Pík produktu /L-erythro/ se pczoruje při t^ 22,5 minuta dosahuje svého maxima při dvou hodinách. V průběhu počátečních dvou hodin se objevuje malý novýpík při HPLC analýze s retenční dobou přibližně 8 minut. V průběhu 24 hodinové periody tento pík roste v intenzitězatímco píky odpovídající výchozímu glycinu a methylesterukyseliny cL-amino- β-hydroxyadipové ubývají. Po 24 hodi-nách je poměr nového píku k píku glycinu a esteru 38 : 47 * 15. Struktura sloučeniny, odpovídající novému píku, stano-vena jako L-erythro- 0Ú amino- yj-hydroxyadipové kyselina 16 - /R= C^-CÍ^-CC^H/ nezávislou syntézou a současným vstřiknutím autentického pro-duktu s produktem připraveným enzymaticky. Cftemická syntézaautentického produktu se provádí aldolovou kondenzací methyl-esteru semieldehydu jantarové kyseliny s enolátem boru chi-rálního oxazinu /Reno, D.S., Loth B.T., Miller M.J. Tetra-hedron Lett. 1990, 31, 827/ následovanou odstraněním chrání-cích skupin a hydrolyzou na žádanou sloučeninu.
Vytvářením této matečné aminokyseliny v průběhu enzy-matické syntézy probíhá hydrolyzou počátečně produkovanéhomethylesteru aminokyseliny. Jelikož má produkt přídavně ioni-zovanou skupinu karboxylové kyseliny, není substrátem proenzymatickou reversní aldolovou kondenzaci; proto se nový a-minokyselinový produkt /L-erythro- οζ -amino- $ -hydroxyadi-pová kyselina/ akumuluje. Jakožto dikarboxylová kyselina ami-nokyselinový produkt se může vyčistit z reakčni směsi ione-xovou chromatografií /Greenstein J.P., Wimitz M., "Chemis-try of the Amino Acids” /Chemie aminokyselin/, svazek 2,str.. 1452 až 1460, Wiley, New York, N.Y, 1961/ Přiklad 4 řdonoisopropylester kyseliny j^-amino- y2>-hydroxyedipové
Glycin /26,2 mg, 0,348 mmol/ se rozpustí v 10,0 mlpufru a is.oprópylesteri semialdehydu kyseliny jantarové/34 mg/ /obsahující dimethylsulfoxid jakožto nečistotu za-vlečenou z jeho přípravy/ se přidá. Přítomnost dimethyl-sulfoxidu při inkubaci nemá nepříznivého vlivu na enzymnebo na průběh reakce. Koncentrace aldehydu v pufru popřihlédnutí k přítomnému dimethylsulfoxidu je 18 mmolární.Plčáteční koncentrace glycinu a aldehydu v inkubační smě-si je 17,4 mM a 9 mM.
Substrátová směs /100 yul/ se vnese do roztoku SHMT/0,1 mg/ v 100 /Ul pufru a do slepé zkoušky.
Alikvoty se odeberou po době inkubace 0,5; 1,0; 2,0; 17 - 4,0; 6,0; 17,25; 25 a 52 hodin a zkouší se HPLC. Hlavní píkproduktu /L-erythro/ se objeví při T^25 minut v průběhu0,5 hodin a roste k maximu za 2 až 4 hodiny. Příklad 5
Monomethylester kyseliny ^C-amino- β -hydroxypimelové
Methylester semialdehydu kyseliny glutarové, použitý při té-to inkubaci, obsahuje dimethylsulfoxid v množství, vyjádřenémpoměrem 1 : 1. Dimethylsulfoxid je vedlejším produktem z pří-pravy aldehydu ozonolyzou 1-methoxycyklopentenu, kt§rá zahr-nuje při zpracování dimethylsulfoxid /Oline D.L.J., Russel,C.G., Tetrahedron 1980, 36, 1399/. Substrátový roztok se při-praví rozpuštěním glycinu /25,6 mg, 0,341 mmol/ a směsi al-dehydu/dimethylsulfoxidu /66,7 mg/ v 10,0 ml pufru k dosa-žení koncentrace glycinu a aldehydu 34,1 a přibližně 25 mM.
Enzymový roztok sestává z 0,1 mg SHMT rozpuštěného ve40 /ul pufru raději než 100 /ul. Přidá se substrátový roz-tok/40 yul/ do enzymu a zároveň slepý roztok se inkubujíjako obvykle. Odebírají se alikvoty /10 /ul/ po 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 3,©; 4,0 a 17,0 hodinách. Po 0,5 hodinách se ob-jeví enzymem produkovaný pík v HPLC při 23,7 min odpovída-jící žádanému produktu a příslušející přibližně 20% výtěž-ku. Druhý, malý enzymem navozený pík se objeví při retenčnídobě 22,3 minut, což může odpovídat menšímu množství threoisomeru. Příklad 6 .ρ^,-Amino— $ -hydroxy- J^-oxovalerová kyselina
Glycin /25,5 mg, 0,340 mmol/ a aldehyd pyrohroznový/61,1 mg 49% /hmotnostně/ roztoku, 0,327 mmol aldehydupyrohroznového/ se rozpustí v 1 ml pufru při hodnotě pH 7,2 na koncentraci. 34 mM /glycin/ a 32,7 mM /aldehyd py-rohroznový/ v zásobním roztoku. Přidá se metavanadátosdný /1,5 mg 90% čisté sloučeniny, Aldrich/. Po přibližně 18 - min 30v'dojde k rozpuštění, čímž se získá koncentrace 1,11 mM.
Do enzymového roztoku /0,1 mg SHMT v 80 ^ul/ se přidá80 /UL substrátového roztoku. Odejmou se alikvoty /10 yul/po inkubační době 0,5} 1,0; 2,0; 3,0; 5,0; 29 a 53 hodin.
Aminokyselinová analýza HPLC indikuje novou aminokyse-linu s Retenční dobou 8,5 minut. K potvrzení, že jde o žáda-nou aminokyselinu se připraví autentický racemický materiálpostupem s glycinátem mědi. £ak se rozpustí 4,23 g glyciná-tu měSnatého /20 mmol/ v '10 ml 9M vodného roztoku hydroxidudraselného. Přidá se aldehyd pyrohroznový /16,2 ml hmotnost-ně %0% roztoku ve vodě, což odpovídá 7,0 g, 9,71 mmol alde-hydu/. Po 5,25 hodinách se přidá 3M hydroxid amonný /40 ml/do vzniklého hnědého roztoku a rozpouštědla se odpaří, čímžse získá hnědý olej. O-,ej se vede sloupcem Dowex-50 /+NH^forma/, eluuje se vodou, čímž se získá polovyčištěná amino-kyselina. Příklad 7 g(.-Amino- fy -hydroxy-6-formyloxyhexanoová kyselina
Aldehyd při této inkubaci opět obsahuje značné množstvídimethylsulfoxidu ze své přípravy ozonolyzou dihydropyranunásledovanou zpracováním dimethylsulfoxidem. Do 10,0 mlpufru se přidá 0-formyl-4-hydroxybutanal /39,5 mg, přib-ližně 0,20 mmol, připouštějící dimethylsulfoxid/ a glycin/25,5 mg, 0,340 mol/. Přidá se substrátový roztok /40 ^ul/ do enzymového roz-toku /0,1 mg SHMT v 40 /Ul/ a do slepého roztoku. Koncen-trace obou substrátů v inkubační směsi je 17 mM /glycinu/ a10 mM /aldehydu/. Alikvoty /10 /Ul/ se pak odebírají poinkubační době 0,5; 1,0; 2,0; 3,® 7,0; a 24 hodin. Z prvního alikvotu, odebraného po 0,5 hodin, se po-tvrzují dvě nové aminokyseliny. Malý pík se objevuje po15,6, minutách právě po glycinovém píku. Glycinu patří vel-ký, ostrý pík při 22,5 minutách. %l3 hodiny, 22,5 minutovýpík, odpovídající očekávané aminokyselině, dosahuje maxima - 19 - při přibližně 10 % glycinového píku a pak pomalu klesá, za-tímco pík při 15,6 min pomalu zvyšuje intenzitu. Aminokyse-lina, etluovaná při 15,6 min je produktem pomalé hydrolyzyformátového esteru v reakčním prostředí. Struktura odpoví-dá £ -amino-hydroxy-6-hydroxyhexanoové kyselině. Příklad 8 -Penylserin
Používaný pufrový roztok obsahuje PLP v 160 ^uM koncen-traci místo 80 /UM. Benzaldehyd se destiluje bezprostředněpřed použitím. Pufrový roztok se deoxygenuje probublávánimdusíku^ před přidáním substrátu. Tato deoxygenace se provádíproto, aby se snížilo nebezpečí oxdidace benzaldehydu v roz-toku. V. 10,0 ml pufru se rozpustí glycin /25,4 mg, 0,338 mmol/a benzaldehyd /35 /ul, 0,3^4 mmol/. Tento roztok /100 /ul/se přidá do 100 yul SHMT roztoku /0,1 mg enzymu/. Alikvotyse odebírají po inkubaci 1,0; 5,25 a 7,0 hodin.
Dva píky produktu se jeví na chromatogramu, větší při24,8 min a menší při 23,7 min. Směs; produktu při tétozkoušce se porovnává s autentickým racemickým, obchodně do-stupným p-fenylserinem. Píky z obou směsí přesně souhlasí.Také při sro vnávání souhlasu s autentickým threo-/5 -fenyl-serinum je menší pík podporován se zřetelem na pozdější pík.Tyto výsledky indikují, že enzym vytváří dvojice enantiome-rů aromatických aminokyselin avšak podporuje vytvořeníerythroisomerů.
Příklad S ť^-Amino-^ hydroxy- ..^-/2-furyl/propionová kyselina Při tomto příkladu používaný 2-furfural se připravujedvěma destilacemi na uhličitanu sodném se druhou destilaciv prostředí dusíku. Destilovaný aldehyd se skladuje předpoužitím, vysuší se v prostředí dusíku a chrání se před 20 světlem.
Substrátový roztok se připraví rozpuštěním glycinu /14,0mg, 0,186 mmol/ a formaldéhydu /15,5 /Ul, 0,187 mmol/ v puf-ru. /10,0 ml/. Jestliže se 360 yul tohoto roztoku přidá doroztoku enzymu /0,2 mg SHMT ve 40 /Ul/, je koncentrace kaž-dého substrátu 17 mM.
Odeberou se alikvoty /10 /Ul/ za 1,0; 2,0; 49; 5,0; 18, 24, 72 a 114 hodin» V průběhu jedné hodiny se produku-jí dvě nové aminokyseliny, jak se zjistí HPLC analýzou. Většípík odpovídá jednomu isomeru a má retenční dobu 21 až 22 mi-nut, zatímco menší pík /více než 50 % většího píku/ odpoví-dá jinému /threo/ isomeru a má retenční dobu 19 až 20 min. Příklad 10 ^-Amino- /$ -hydroxy- -/2-furyl/valerová kyselina
Substrátový roztok se připraví rozpuštěním glycinu /25,5mg, 0,340 mmol·/ a aldehydu /46,3 mg, 0,373 mmol/ v 10,0 mlpufru.' Aldehyd /kapalina/ se rozpustí v průběhu přibližně 15minut. Přidá se substrátový roztok /100 /Ul/ do roztoku enzy-mu /0,1 mg SHMT ve 100 yUl pufru/ a inkubuje se při teplotě37 °C. Odeberou se alikvotní podíly po 0,55; 1, 2, 4,25; 8a 21 hodinách. Za půl hodiny se vytvoří pík s retenční dobou 21,3 min podle HPLC analyzy, indikující přibližně 3% konver-zi- glycinu na aldolový produkt. Příklad 11 Získá se ^C-amino--hydroxyhex-5-ynoové kyselinashora popsanými inkubečními způsoby za použití propargyl-aldehydu. Příklad 12 Získá se 5^-amino- b -hydroxyhex-5-enoová kyselina - 21 shora popsanými inkubačními způsoby za použití allylaldehy- du. Příklad 13 Získá se íC-amino-y^ -hydroxypent-4-enoová kyselinashors popsanými inkubačními způsoby za použití akroleinu. Příklad 14 Získá se OÍ-amino- β -hydroxy-^/"-kyanovalerová kyse-lina za použití shora popsaných inkubačních způsobů a fl? -kyanopropionaldehydu.
Průmyslová využitelnost Výhodný enzymatický způsob přípravy ^-hydroxy- -a-minokyselin, který je možno provádět ve vodném prostředí zamírných podmínek a stereoselektivně. JUDr. Otakar ŠVORČÍKadvskáí
Claims (9)
- - 22 PATENTOVÉ NÁROKY1 . Způsob přípravy -hydroxy- -aminokyseliny,něho vzorce I ~i!vď] Hýf OH I -jH. k /1/ ΛΛ3Γ0Ο V,AZ3TyMÁA OHdavyn t 6 (A ,'S 0 aiS5fl O kde znamená Rskupinu alkenylovou s 2 až 6 atomy uhlíku, alk nylovous 2 až 6 atomy uhlíku, alkylovou s 1 až 6 atomy uhlíkusubstituovanou esterifikovanou karboxyskupinou, alkoxy-skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, atomem fluoru, chlorunebo bromu, kyanoskupinou, hydroxyskupinou, alkanoyl-oxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, fenylovou skupinou,furylovou skupinou nebo benzyloxyskupinou, nebo zna-mená fenylovou nebo furylovou skupinu, vyznačený tím, že se mísí při teplotě přibližně 30 ež přib-ližně 55 °G ve vodném roztoku při hodnotě pH přibližně 5,5až přibližně 9 aldehyd obecného vzorce II RCHO //// kde R má shora uvedený význam a glycin se serinhydroxy-methyltransferasou v přítomnosti pyridoxa^-5 * -fosfátu.
- 2. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím , že se používá aldehydu obecného vzorce II, kde znamená R alkenylovou sku-pinu s 2 až 6 atomy uhlíku, alkynylovou skupinu s 2 až 6atomy uhlíku nebo alkylovou skupinu s 1 aŽ 6 atomy uhlíkusubstituovanou esterifikovou karboxyskupinou, alkanoyloxy-skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku nebo alkylovou skupinou sub-stituovanou arylalkoxyskupinou. - 23 -
- 3. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se používáaldehydu obecného vzorce II, kde znamená R alkylovou skupi- * , nu s 1 až 4 atomy uhlíku, substituovanou esterifikovanou * karboxyskupinou nebo alkenoyloxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlí- ,
- 4. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se používáaldehydu obecného vzorce II, kterým je o w R3 00-/01^/ CHO kde znamená R^ alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, sku-pinu benzylovou, difenylmethylovou, 4-methoxybenzylovou nebo 4-nitrobenzylovou a n 2 nebo|3. 5«. Způsob podle bodu 4, vyznačený tím, že aldehydem obec-ného vzorce II je methylester semialdehydu kyseliny jantarové.
- 6. Způsob podle bodu 4, vyznačený tím, že aldehydem obec-ného vzorce II je^methylester semialdehydu kyseliny glutarové.
- 7. Způsob podle bodu 1, vyznačený tím, že se používá al-dehydu obecného vzorce II, kde znamená R alkylovou skupinu a 1 až 6 atomy uhlíku, substituovanou esterifikovanou kar-boxy skupinou, alkanoyloxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku,fenylovou skupinou, furylovou skupinou nebo benzyloxysku-pinou.
- 8. Způsob podle bodu 7, vyznačený tím, že připravovaná * i^-amino- /3 -hydroxykyselina je L-erythrodiastereomer.
- 9. Sloučenina v L-erythrodiastereomerní formě obecnéhovzorce OH KHq i i R 0C/0/-CH2_CH2-CH-CH-C/0/0R1 .kde znamená r a Rsj ' na sobě nezávisle atom vodíku nebo skupinu alky-lovou s 1 až 4 atomy uhlíku, benzylovou, 4-methyl- - 24 - benzylovou, 4-nitrobenzylovou a difenylmethylovou a její soli s alkalickým kovem, s kovám alkalické zeminy,amoniové a aminové a v případě, kdy R^ a R^ znamenají vždyatom vodíku také její adiční soli s kyyelinami.
- 10. Sloučenina podle bodu 9, kde znamená R^ alkylovouskupinu s 1 až 4 atomy uhlíku.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US53284590A | 1990-06-04 | 1990-06-04 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS164591A3 true CS164591A3 (en) | 1992-01-15 |
Family
ID=24123416
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS911645A CS164591A3 (en) | 1990-06-04 | 1991-05-31 | Process for preparing beta-hydroxy-alpha aminoacids |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0460883B1 (cs) |
| JP (1) | JPH0787989A (cs) |
| KR (1) | KR920000701A (cs) |
| CN (1) | CN1058046A (cs) |
| AT (1) | ATE147785T1 (cs) |
| AU (1) | AU637705B2 (cs) |
| CA (1) | CA2043761A1 (cs) |
| CS (1) | CS164591A3 (cs) |
| DE (1) | DE69124143T2 (cs) |
| DK (1) | DK0460883T3 (cs) |
| ES (1) | ES2099135T3 (cs) |
| FI (1) | FI912626A7 (cs) |
| GR (1) | GR3022558T3 (cs) |
| HU (1) | HU212925B (cs) |
| IE (1) | IE911879A1 (cs) |
| IL (1) | IL98312A0 (cs) |
| NO (1) | NO912120L (cs) |
| NZ (1) | NZ238342A (cs) |
| YU (1) | YU97891A (cs) |
| ZA (1) | ZA914201B (cs) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0628638A3 (en) * | 1993-05-25 | 1995-09-06 | Lilly Co Eli | Process for the preparation of 2-amino-3-hydroxy-carboxylic acids. |
| JP4032441B2 (ja) * | 1995-08-30 | 2008-01-16 | 味の素株式会社 | Ｌ−アミノ酸の製造方法 |
| CN1062603C (zh) * | 1996-01-31 | 2001-02-28 | 中国科学院大连化学物理研究所 | 酶法生产d－对羟基苯甘氨酸的膜反应方法 |
| CA2234412C (en) * | 1997-06-09 | 2008-09-02 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Method for producing optically active compound |
| WO2003090918A1 (en) | 2002-04-26 | 2003-11-06 | China Petroleum & Chemical Corporation | Downflow catalytic cracking reactor and use thereof |
| DE102007020246B4 (de) | 2007-04-24 | 2012-12-27 | Schott Ag | Metallkolloidgefärbte oder farblose Glaskeramik und in eine metallkolloidgefärbte oder farblose Glaskeramik umwandelbares farbloses Glas |
| US20160326157A1 (en) * | 2014-01-06 | 2016-11-10 | President And Fellows Of Harvard College | Monobactams and methods of their synthesis and use |
| EP3630798B1 (en) * | 2017-05-27 | 2022-11-23 | Enzymaster (Ningbo) Bio-Engineering Co., Ltd. | Engineered aldolase polypeptides and their applications in synthesis of beta-hydroxy-alpha-amino acids |
| CN114657221A (zh) * | 2020-12-22 | 2022-06-24 | 安徽华恒生物科技股份有限公司 | 一种d-泛酸的制备方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3871958A (en) * | 1972-03-04 | 1975-03-18 | Ajinomoto Kk | Biological method of producing serine and serinol derivatives |
| JPS59109187A (ja) * | 1982-11-19 | 1984-06-23 | ジェネックス・コーポレイション | Ｌ−セリンの酵素的合成方法 |
-
1991
- 1991-05-30 NZ NZ238342A patent/NZ238342A/en unknown
- 1991-05-30 IL IL98312A patent/IL98312A0/xx unknown
- 1991-05-31 IE IE187991A patent/IE911879A1/en unknown
- 1991-05-31 KR KR1019910008978A patent/KR920000701A/ko not_active Ceased
- 1991-05-31 FI FI912626A patent/FI912626A7/fi not_active Application Discontinuation
- 1991-05-31 CS CS911645A patent/CS164591A3/cs unknown
- 1991-06-03 JP JP3131068A patent/JPH0787989A/ja active Pending
- 1991-06-03 YU YU97891A patent/YU97891A/sh unknown
- 1991-06-03 CA CA002043761A patent/CA2043761A1/en not_active Abandoned
- 1991-06-03 EP EP91304977A patent/EP0460883B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-03 ES ES91304977T patent/ES2099135T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-06-03 DE DE69124143T patent/DE69124143T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-06-03 CN CN91104369A patent/CN1058046A/zh active Pending
- 1991-06-03 AU AU78146/91A patent/AU637705B2/en not_active Ceased
- 1991-06-03 AT AT91304977T patent/ATE147785T1/de active
- 1991-06-03 ZA ZA914201A patent/ZA914201B/xx unknown
- 1991-06-03 HU HU911854A patent/HU212925B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-06-03 DK DK91304977.1T patent/DK0460883T3/da active
- 1991-06-03 NO NO91912120A patent/NO912120L/no unknown
-
1997
- 1997-02-12 GR GR970400248T patent/GR3022558T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK0460883T3 (da) | 1997-07-14 |
| CA2043761A1 (en) | 1991-12-05 |
| EP0460883A2 (en) | 1991-12-11 |
| ES2099135T3 (es) | 1997-05-16 |
| KR920000701A (ko) | 1992-01-29 |
| GR3022558T3 (en) | 1997-05-31 |
| ZA914201B (en) | 1993-02-24 |
| FI912626L (fi) | 1991-12-05 |
| IL98312A0 (en) | 1992-06-21 |
| FI912626A7 (fi) | 1991-12-05 |
| AU7814691A (en) | 1991-12-05 |
| FI912626A0 (fi) | 1991-05-31 |
| ATE147785T1 (de) | 1997-02-15 |
| DE69124143T2 (de) | 1997-05-22 |
| EP0460883A3 (en) | 1992-11-19 |
| NO912120D0 (no) | 1991-06-03 |
| IE911879A1 (en) | 1991-12-04 |
| DE69124143D1 (de) | 1997-02-27 |
| EP0460883B1 (en) | 1997-01-15 |
| CN1058046A (zh) | 1992-01-22 |
| YU97891A (sh) | 1994-01-20 |
| HU212925B (en) | 1996-12-30 |
| HUT61597A (en) | 1993-01-28 |
| HU911854D0 (en) | 1991-12-30 |
| NZ238342A (en) | 1993-10-26 |
| JPH0787989A (ja) | 1995-04-04 |
| AU637705B2 (en) | 1993-06-03 |
| NO912120L (no) | 1991-12-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA2637821A1 (en) | Process for the preparation of optically active chiral amines | |
| Rando | Mechanism of the irreversible inhibition of γ-aminobutyric acid-α-ketoglutaric acid transaminase by the neurotoxin gabaculine | |
| OZAKI et al. | Regulation of the TCA and glyoxylate cycles in Brevibacterium flavum: II. Regulation of phosphoenolpyruvate carboxylase and pyruvate kinase | |
| Soda et al. | L-lysine-. alpha.-ketoglutarate aminotransferase. I. Identification of a product,. DELTA. 1-piperideine-6-carboxylic acid | |
| Silverman et al. | Mechanism of inactivation of. gamma.-aminobutyric acid-. alpha.-ketoglutaric acid aminotransferase by 4-amino-5-halopentanoic acids | |
| CS164591A3 (en) | Process for preparing beta-hydroxy-alpha aminoacids | |
| Laber et al. | Mechanisms of interaction of Escherichia coli threonine synthase with substrates and inhibitors | |
| US3871958A (en) | Biological method of producing serine and serinol derivatives | |
| KR100810169B1 (ko) | 아스파르테이트를 사용하여 효소적 아미노기 전달반응에의해 엘-포스피노트리신을 제조하는 방법 | |
| Bearne et al. | Glutamate. gamma.-semialdehyde as a natural transition state analog inhibitor of Escherichia coli glucosamine-6-phosphate synthase | |
| Chase et al. | A coenzyme A analogue, desulpho-coA; preparation and effects on various enzymes | |
| NO166083B (no) | Analogifremgangsmaate ved fremstilling av terapeutisk aktive pyridazodiazepinderivater. | |
| EP1897956A1 (en) | Process for preparation of optically active amines by optical resolution of racemic amines employing a bacterial omega-transaminase | |
| EP0175312B1 (en) | Process for preparing optically active hydantoins | |
| CS224638B2 (en) | Method of enzymetic cleavage d,l-2-amino-4-methylphosphinebutyric acid | |
| US5266468A (en) | Process for preparing β-hydroxy-α amino acids | |
| CZ20003223A3 (cs) | Způsob enzymatického dělení enantiomerů 3(R)- a 3(S)-hydroxy-1-methyl-4(2,4,6-trimethoxyfenyl)-1,2,3,6-tetrahydropyridinu, popřípadě esterů karboxylových kyselin | |
| Bailey et al. | Synthesis of 4a-hydroxytetrahydropterins and the mechanism of their nonenzymic dehydration to quinoid dihydropterins | |
| Gamini Kannangara et al. | Biosynthesis of Δ-aminolevulinate in greening barley leaves: Glutamate 1-semialdehyde aminotransferase | |
| Guibé-Jampel et al. | Enantioselective hydrolysis of racemic diesters by porcine pancreatic lipase | |
| TRINCHANT et al. | Lactate dehydrogenase from Rhizobium. Purification and role in indole metabolism | |
| Westerik et al. | Aspartic-β-Semialdehyde: A Potent Inhibitor of Escherichia coli l-Asparaginase | |
| Fulston et al. | Clavulanic acid biosynthesis; the final steps | |
| NAM et al. | Enzymatic synthesis of phenoxymethylpenicillin using Erwinia aroideae enzyme | |
| NZ225806A (en) | Process for the resolution of dialkylphosphinoyl hydroxy acetic acid esters, the acid so obtained, and plant growth control compositions containing it |