CS230889B1 - Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy - Google Patents
Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy Download PDFInfo
- Publication number
- CS230889B1 CS230889B1 CS15083A CS15083A CS230889B1 CS 230889 B1 CS230889 B1 CS 230889B1 CS 15083 A CS15083 A CS 15083A CS 15083 A CS15083 A CS 15083A CS 230889 B1 CS230889 B1 CS 230889B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- alpha amylase
- amylase enzyme
- maltose
- alpha
- chemistry
- Prior art date
Links
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Spósob produkcie enzýmu alfa amylázy. Vynález sa týká oboru mikrobiológie, chemie a biochémie sacharidov, potravinárskej a farmaceutickej chémie. Očelom vynálezu je získanie nového enzýmu alfa amylázy schopnej hydrolyticky štěpit alfa-l,4-glukány škrobu na maltózové oligosacharidy s vysokým zastúpením maltózy i maltotriózy. Uvedeného účelu sa dosiahne pomocou mikroskopickej huby Blaštobotrys proliferans z rodu Blastobotrys Klopotek, četade Moniliaceae, rodu Moniiiales, triody Deuteromycates, kultivovanej na vhodných živných pódach. Enzým alfa amylázu možno získat o poměrně vysokej špecifickej aktivitě až 4,0 nkat/mg proteinu a vhodných vlastnostiach predovšetkým na vysoké zastúpenie maltózy a maltotrózy v škrobovom hydrolyzáte. Vynález má výužitie v mikrobiologii, biochemii a chemii sacharidov, potravinárskom a farmaceutickom priemysle.
Description
(54) Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy
Spósob produkcie enzýmu alfa amylázy.
Vynález sa týká oboru mikrobiológie, chemie a biochémie sacharidov, potravinárskej a farmaceutickej chémie.
Očelom vynálezu je získanie nového enzýmu alfa amylázy schopnej hydrolyticky štěpit alfa-l,4-glukány škrobu na maltózové oligosacharidy s vysokým zastúpením maltózy i maltotriózy.
Uvedeného účelu sa dosiahne pomocou mikroskopickej huby Blaštobotrys proliferans z rodu Blastobotrys Klopotek, četade Moniliaceae, rodu Moniiiales, triody Deuteromycates, kultivovanej na vhodných živných pódach.
Enzým alfa amylázu možno získat o poměrně vysokej špecifickej aktivitě až 4,0 nkat/mg proteinu a vhodných vlastnostiach predovšetkým na vysoké zastúpenie maltózy a maltotrózy v škrobovom hydrolyzáte.
Vynález má výužitie v mikrobiologii, biochemii a chemii sacharidov, potravinárskom a farmaceutickom priemysle.
Vynález sa týká spósobu produkcie enzýmu alfa amylázy (alfa-l,4-glukán glukánotíydroláza EC 3.2.1.1) pomocou mikroskopické] huby Blastobotrys proliferans kultiváciou na vhodných pódach.
Pre priemyselnú produkciu. alfa-amylázy sa používajú najčastejšie následovně mikroorganizmy: Bacillus subtilis, Bacillus amyloliqueficiens, Streptomyces aureofaciens, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae a pod.
Sú však aj iné mikroorganizmy, u ktorých doteraz neholá známá schopnost produkovat alfa amylázu. Pomocou gélovej metody (A. O. č. 18Θ059) testovania mlkroorganizmov na alfa amylolytickú aktivitu sme zistili výrazná produkciu alfa amylolytickej aktivity mikroskopickou hubou piastobotrys proliferans.
Blastobotrys proliferans je novopopísaný druh rodu Blastobotrys Klopotek čelade Moniliaceae rodu Moniliales, triedy Deuteromycetes [Marvanová L.: Two new Blastobotrys species. Transactions of the British Mycological Society 66, 217 (1976) ] izolovaný z para orechov (Bertholletia excelsa) z poškodeného jadra. O produkcii hydroláz polysacharidov uvedeným druhom Blastobotrys proliferans nie je zatial nič známe.
Podstata vynálezu spočívá v tom, že kultiváciqu kmeňa Blastobotrys proliferans CCMF-493, deponovaný ako CBS 522-75 v Holandsku a ATCC 34 216 v zbierke typových kultúr USA na živnej pode obsahujúcej 1->4)-α-D-glukán ako induktor enzýmu pri teplote 37 °C a hodnotě pH 4,8 po dobu 48 až 120 hodin produkuje enzým alfa amylázu, ktorý sa získá v surovom stave odpařením rastovej pódy připadne v zuštachtenom stave zrážanim síranom amonným, alebo organickými rozpúšťadlami, s výhodou etanolu a acetonu.
K ďalšej purifikácii nového enzýmu možno použiť například afinitnej metody.
Uvedený kmeň Blastobotrys proliferans představuje alternativně využitie v procesoch produkcie alfa amylázy, například sacharifikácie polysacharidov škrobu. Použitie takto získanej alfa amylázy, predovšetkým v čistom stave, je vhodné pri výrobě alternatívnych sladidiel, a to s ohtadom na vysoké zastúpenie maltózy a maltotriózy v enzymatickom hydrolyzáte (až 55 %). Táto skutočnosť zvýhodňuje využitie enzýmového produktu tam, kde vysoký obsah glukózy v hydrolyzáte nie je želaný (dietná strava pre fenylketonurikov, bombonársky sirup a pod.). Výhodné zloženie hydrolyzátu předurčuje enzymatická hydrolýzu pomocou alfa amylázy Blastobotrys proliferans k príprave vzácných oligosacharldov maltózového typu. Na druhej straně výhodou je skutočnosť, že nový preparát obsahuje aj alfa glukozidázu (alfa-glukozld glukohydroláza EC 3.2.1.20] a možno preto neprečistený enzým využiť k sacharifikácii (l->4)-«-D-glukánov škrobu až na glukózu.
Příklad 1
Blastobotrys proliferans CCMF-493 sa pomnoží na rastovej pode Obsahujúcej 2 g gélu připraveného sietovaním amylázy (A. O. čís. 186 059) ponořeného do polovice výšky do Yaest Nitrogen Base rastovej pode (Oxoid), pH 4,8, 0,6 g/100 ml a kultivuje sa povrchovo po dobu 48 hodin pri teplote 37 °C, kedy dochádza k stekuteniu gélu. Nahromaděná biomasa (0,07 g) sa použije k fermentácii na pode obsahujúcej 22 g kukuřičného výluhu a 2 g zemiakového škrobu a 0,5 g KH2PO4 na 1 liter vody (pH 4,8) po dobu 72 hodin. Po 72. hodinách sa biomasa Blastobotrys proliferans odfiltruje a surový enzým alfa amyláza sa získá odpařením fermentačnej pódy na vákuovej odparke (celková aktivita 1,8 nkat/1 1, specifická aktivita 2,6 nkat/1 mg proteinu).
Příklad 2
Postup podlá příkladu 1 s tým rozdielom, že ako fermentačná póda sa použijú gluténové vypalky (18 %), 3 g škrobu a 0,5 g KH2PO4 v 1 1 vody (pH 4,8), pričom fermentácia běží po dobu 120 hodin. Surový enzým alfa amyláza má celkovú aktivitu 2,2 ^kat/1 1 a Špecifickú aktivitu 3,5 nkat/1 mg proteinu.
Příklad 3
Postup podfa příkladu 1 s tým rozdielom, že získaná fermentačná póda sa spracováva srážaním etanolom v objemových pomeroch etanol ku fermentačnej póde 2 : 1. Získaný precipiitát po presušení sa spracováva afinitnou metodou (A. O. č. 157 955) a zušfachtená alfa amyláza má aktivitu 1,6 ,ukat a specifická aktivitu 4,0 nkat/mg, pričom neobsahuje viac ako 0,05 nkat a-glukozidázovej aktivity.
Příklad 4
Postup podfa příkladu 3 s tým rozdielom, že k zrážaniu enzýmu sa použije aceton. Získaná zušlachtená alfa amyláza má aktivitu tak, ako je uvedené v příklade 3.
P r í k 1 a d 5
Postup podfa příkladu 3 s tým rozdielom, že k zrážaniu sa rpoužije síran amonný o stupni saturácie 0,7. Získaná zušlachtená alfa amyláza má aktivitu a špecifickú aktivitu tak, ako je uvedené v příklade 3.
Vynález má využitie jednak pri príprave alfa amylázy osobitných vlastností pre základný výskům, príprave vzácných cukrov, resp. príprave zmesných cukrov pre potravinářské a farmaceutické účely.
Claims (1)
- PREDMETSposob produkcie enzýmu alfa amylázy pomocou mikroskopické] huby Blastobotrys proliferans, vyznačený tým, že sa kultivuje kmeň Blastobotrys proliferans CCMF-493 na živnej pode obsahujúcej (l-*4 j-a-D-glukán ako induktor enzýmu pri teplote 37 °C a hodnotě pH 4,8 po dobu 48 až 120 hodin a envynAlezu zým alfa amylázá sa získává v surovom stave odpařením rastovej pddy, připadne v prečistenom stave zrážaním síranom amonným, alebo organickými rozpúšťadlami, s výhodou etanolom alebo acetónom a v čistom stave použitím afinitnej metody.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS15083A CS230889B1 (sk) | 1983-01-10 | 1983-01-10 | Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS15083A CS230889B1 (sk) | 1983-01-10 | 1983-01-10 | Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS230889B1 true CS230889B1 (sk) | 1984-08-13 |
Family
ID=5333156
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS15083A CS230889B1 (sk) | 1983-01-10 | 1983-01-10 | Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS230889B1 (sk) |
-
1983
- 1983-01-10 CS CS15083A patent/CS230889B1/sk unknown
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0171218B1 (en) | Enzymatic hydrolysis of granular starch directly to glucose | |
| USRE32153E (en) | Highly thermostable glucoamylaseand process for its production | |
| El-Ghonemy | Optimization of extracellular ethanol-tolerant β-glucosidase production from a newly isolated Aspergillus sp. DHE7 via solid state fermentation using jojoba meal as substrate: purification and biochemical characterization for biofuel preparation | |
| Ueda et al. | Production of isoamylase by Escherichia intermedia | |
| McCleary et al. | Hydrolysis of α-D-glucans and α-D-gluco-oligosaccharides by Cladosporium resinae glucoamylases | |
| Michelena et al. | Production of amylase by Aspergillus foetidus on rice flour medium and characterization of the enzyme | |
| EP0405283A2 (en) | Novel thermoduric and aciduric pullulanase enzyme and method for its production | |
| US4318927A (en) | Method of producing low calorie alcoholic beverage with starch-degrading enzymes derived from Cladosporium resinae | |
| US4318989A (en) | Starch-degrading enzymes from Cladosporium resinae | |
| Pleszczyńska et al. | Hydrolysis of dextran by Penicillium notatum dextranase and identification of final digestion products | |
| Aisien et al. | Production, purification, and characterization of α-amylase from Aspergillus niger, Aspergillus flavus and Penicillium expansum using cassava peels as substrate | |
| JPS61162183A (ja) | プルラナ−ゼ様酵素の製造法 | |
| US4689296A (en) | Method of preparing novel thermostable transglucosidase | |
| US4855232A (en) | Method for production of glucose by use of transglucosidase | |
| JP3490481B2 (ja) | オリゴ糖の製造方法 | |
| US4234686A (en) | Starch-degrading enzymes derived from cladosporium resinae | |
| US3806421A (en) | Amylase inhibitor and method of producing the same | |
| CA1081633A (en) | Heat and acid-stable alpha-amylase enzymes and processes for producing the same | |
| JP3761236B2 (ja) | 新規なβ−グルコシダーゼ、その製造法および用途 | |
| CS230889B1 (sk) | Sposob produkcie enzýmu alfa amylázy | |
| Attyia et al. | Biodegradation of agro-industrial orange waste under solid state fermentation and natural environmental conditions | |
| Krzechowska et al. | Isolation and some properties of glucoamylase from Cephalosporium charticola Lindau | |
| JPH10271992A (ja) | 真菌類から得られる、精製された、酸に安定なα− アミラーゼ | |
| Ogundero et al. | The purification and activities of an alkaline protease of Aspergillus clavatus from Nigerian poultry feeds | |
| Kelleher et al. | Cellobiose-quinone oxidoreductase—application in monitoring cellobiohydrolase purification |