CS248086B1 - Sposob apyrogénnej úpravy zvieracieho albuminu pre veterinárně intravenózne použitie - Google Patents

Description

248086

Vynález sa týká spósobu přípravy apyro-genného albuminu pre veterinárně intrave-nózne použitie. V súčasnom období u nás zvierací albu-min připravovaný v priemyselnom měřítkuspravidla obsahuje pyrogenné látky, častohraničiace s toxicitou. To sú zrejme důvody,že použitie takéhoto přípravku k intrave-nóznej aplikácii je vylúčené. Príkladom jeaj Biovetou n. p. — Nitra připravovaný 5 %zvierací albumin pod fy označením „PLAZ-BION — B“, ktorý sa doporučuje aplikovaťiba podkožně, vnútrosvalovo alebo intra-peritoneálne. Příčinou tohto stavu je kontaminovanievýchodzieho materiálu a následné pomno-ženie mikroflóry v priebehu používanýchtechnologických postupov (odběr krve,transport, uskladnenie a technologické spra-covanie j.

Medzi doteraz najznámejšie depyrogeni-začné postupy plazmatických bielkovín mož-no zaradiť adsorbciu na aktivně uhlie (Ho-ward F., Spooner E. C. R,: Chemistry andIndustry 19671946]; AI2O3 (Szeghi G., Torna E., Stanica E., Stoian C., Gartner M. Arch.Roum. de Pathol. Exper. 21/163/1962]; Budi-lina J. A., Filimonova A. A., Ciumanov: ŽMEI30, 89/1959), azbestové filtre (Co Tui F. W.,Wright A. M.: Ann. Surgey 116, 412/1942,Zittle C. A., Devlin Η. B., Rodney G., Wel-che M.: J. Lab. Clin. Med. 40, 75/1945), po-případě zohrievanie pri teplote 37 °C (Sgou-ris J. T., Storey R. W., Mc Call K. B., Ander-son H. D.: Vox Sang. 7, 739/1962).

Nevýhoda citovaných depyrogenizačnýchspósobov je nedokonalý depyrogenizačný e-fekt, nereprodukovatefnosť a v niektorýchprípadoch dlhý technologický postup.

Vyššie uvedené nevýhody odstraňuje rie-šenie, ktorého podstata spočívá v tom, žekomerčně připravený zvierací albumin sarozpustí v apyrogennej vodě na 2 až 2,5hmotnostných % bielkovín a za stálého mie-šania sa upraví jeho pH 1 M kys. octovouna hodnotu 5,6 až 5,9 a za stálého miešaniasa přidává chloroform v pomere 5 až 35mililtrov na 100 ml roztoku. Vzniklá zraze-nina predstavujúca balastné bielkovinyhlavně lipoidného charakteru, představujeodpad, ktorý sa centrifugáciu odstrání v po-době sedimentu. Získaný supernatant je roz-tok albuminu, ktorý sa filtruje cez azbesto-celulózové filtre a zohrieva pri teplote 60 °Cpo dobu 10 až 48 hodin. Keďže ide o urči-tý purifikačný postup strata na albumineTabulka 1 Výrobok Vzestup teplot na

troch králikoch °C je minimálna, nakolko pokles % bielkovínpredstavujú balastné bielkoviny. Výhoda navrhovaného postupu je techno-logická nenáročnost, dostupnost použitýchsurovin a materiálov a najmá vysoký jedno-značný depyrogenizačný efekt (viď tabulkač. 1).

Doterajšia aplikácia pyrogenného zviera-cieho albuminu je málo účinná, lebo sa ten-to může podávat zvieratám iba intramusku-lárne. Přitom chorobné stavy zvierat najmámláďat pri metabolických poruchách zapří-činěných výživou ako aj patogenným agnenssi vyžadujú doplnenie, resp. stabilizáciu ko-loidno-osmotického tlaku krvného riečišťa. Příklad 1 100 g lyofilizovaného albuminu sa rozpus-tí v 3 500 ml apyrogennej vodě, hodnota pHroztoku sa upraví na 5,6 přidáním 1 M kys.octovej a za stálého miešania k roztoku al-buminu po kvapkách sa přidává 575 mlchloroformu. Po dvojhodinovom miešení a12 hodinovej precipitácii pri teplote + 10 °Cvzniklý precipitát sa oddělí centrifugáciou.Supernatant sa filtruje cez čeriace a násled-né sterilizačné azbestocelulózové vložky.Filtrát sa namrazuje, lyofilizuje, potom roz-pusta v roztoku stabilizátorov, sterilně fil-truje a zohrieva pri 60 °C po dobu 10 hodin. Příklad 2 100 g lyofilizovaného albuminu sa rozpus-tí v 3 500 ml apyrogennej vodě, hodnota pHroztoku sa upraví na 5,9 přidáním 1 M kys.octovej a za stálého miešania k roztoku al-buminu po kvapkách sa přidává 450 mlchloroformu. Po dvojhodinovom miešení a12 hodinovej precipitácii pri teplote + 10 °Cvzniklý precipitát sa oddělí centrifugáciouSupernatant sa filtruje cez čeriace a násled-né sterilizačné azbestocelulózové vložky.Filtrát sa namrazuje, lyofilizuje, potom roz-pusta v roztoku stabilizátorov, sterilně fil-truje a zahrieva pri 60 °C po dobu 48 hodin.Hodnotenie stupňa depyrogenizácie: V tabulke č. 1 sú uvedené hodnoty vzo-stupu teplot na troch králikoch a priemertýchto hodnot v °C u východzieho hovádzie-ho albuminu a hovádzieho albuminu po de-pyrogenizácii. 0 hotnůt 0 hodnota

v °C poklesu v °C

Komerčně připravený albumin 1,2; 2,1; 1,4 1,56 Depyrogenizovanýhovadzí albuminupravený podlá 0,3; 0,4; 0,0 0,23 příkladu 2

Claims (2)

1. 248036 PREDMEI
2. 1. Spósob apyrogennej úpravy zvieracie-ho albuminu pře veterinárně íntravenóznepoužitie, vyznačený tým, že sa komerčněpřipravený pyrogenný zvierací albumin roz-pustí v apyrogennej vodě na roztok obsa-hujúci 2 až 2,5 hmotnostných % bielkovín,upraví sa jeho pH na hodnotu 5,6 až 5,9 a VYNALEZU za stálého miešania sa přidává chloroformv pomere 5 až 35 ml na 100 ml roztoku al-buminu, vzniklá zrazenina sa odstředí a su-pernatant, predstavujúci roztok albuminu,sa filtruje azbestocelulózovým filtrom a zo-hrieva pri teplote 60 °C po dobu 10 až 48hodin.