CS251533B1 - Kmen mikroorganizmu Aspergillus tamarii CCM F-780 - Google Patents

Description

Vynález sa týká nového kmeňa Aspergillus tamarii mutant III, ktorý produkuje kyselinu kójovú vo zivýšeňom výtažku,

Kmeň Aspergillus tamarii sa popisuje alko producent kyseliny kójovej už dávnejšie, avšak bez udania množstva produkoivamej kyseliny [Korzyhski, T., Kotwszyk — Gindifer, Z. Kurylojwicz, W.: Antibiotics, PWN — — Polish Scientific Pulblishers, Warszawa, (1967)].

Podfa literárnej rešerše kmeň Aspergillus tamarii sa na priemyslovú výrobu kyseliny kójovej nepoužívá. Katalogy kultur húh (Cataloque of Cultures, Univerzita Karlova, Praha 1976, č. 664 Aspergillus tamarii Kita; ATCC Cataloque of Fungi) Yeasts, 16-th edition, 1984 čísla 1 005, 10 836, 12 699, 16 865, 20 054, 26 950, 26 951 Aspergillus 'tamarii Kita) uvádzajú druh Aspergillus tamarii bez vlastnosti produkovat kyselinu kójovú. U nás nie sú k dispozícii vysokoiprodukčné kmene húb, ktoré sú schopné vybvárať kyselinu kójovú.

Uvedené nedostatky doteraz známých kmeňov odstraňuje vynález, ktorý je nový kmeň mikroorganizmu Aspergillus tamarii mutant III uložený v Československej zbierke mikroorganizmov Univerzity J. E. Purkyně v Brňe, Třída Obránců míru 10, pod označením CCM F-780. Nový kmeň sa získal tak, že na suspenziu spor Aspergillus tamarii o koncentrácii 10⁶/ml v 10 %-nom dimetylsulf oxide sa .působilo χ-lúčmi po dobu 25 až 35 minut, suspeinzia spor sa rozliala na sladinkový agar a nechala vysporulovat pri teplote 25 až 30 °C, z vysporulovanej ikultúry sa připravila suspenzia spór, ktorá sa rledila 1:1 000, rozliala na sladinkový agar, 'kde vyrástli kolonie kultury mikroorganizmu, ktoré sa hodnotili fermentačnými skúškami z hladislka produkcie kyseliny kójovej a z nich bol vybraný kmeň Aspergillus tamarii mutant III.

Hlavnou výhodou nového kmeňa je zvýšená produktivita, ktorá dosahuje hodnoty 33 kg kyseliny kójovej na 100 'kg cukru. Póvodný kmeň Aspergillus tamarii mal maximálnu produkeiu kyseliny kójovej 15 až 18 Ikg na 100 kg cukru. Tento kmeň na Sabouraudovej pode za 3 dni vytvára kolonie o priemere 2,6 cm, vrchná strana je biela so silnou sporuláclou v střede kolonie. Spodná strana je slabo oranžová. Slpóry sú tmavohnedej farby 7 až 8 μιη v priemere, vezikulum výrazné gulaté v priemere 44 až 48 ,um.

Nový kmeň Aspergillus tamarii mhtant III dohře rastie na Sabouraudovej agarovej pode. Za 3 dinl vytvára kolonie o priemere 3 cm, 'vrchná strana je biela v střede slabo aporuluje. Spodná strana je oranžovohnedá a hladká. Na sladinkovom agare vytvára za 3 dni kolonie o priemere 4 cm bez sporulácie, vrchná strana je biela, spodná strana je radiálně zvrásnená a oranžověj farby. Sporúlácia na sladikovom agare sa objavuje po 5 dňoch kultivácie. Spory sú tmavohnedej farby, 7 až 8 μΐη v priemere, vezikulum výrazné gulaté p priemere 46 až 50 /xm. Životnost spór je díhodobá pri skladovaní v suspenzli s aktívnym uhlím, v parafínovém oleji, alebo v lyofilizovanom stave aj nie kolik o rokov.

Příklad 1'

Na susipenziu spór Aspergillus tamarii o koncentrácii 10⁶/ml v 10 %-nom dimetylsulfoxide sa působí χ-lúčmi zo zdroja ⁶⁰CO po dobu 25 až 35 minut. Suspenzia spór sa potom rozleje na sladinkový agar a nechá vysporulovaf v termostate pri teplote 25 až 30 °C. Z vysporulovanej kultury sa připraví suspenzia spór v 0,9 %-nom chloride sodnom, ktorá sa riedi 1 : 1 000 a rozleje na sladinkový agar, kde za 3 až 4 dní vyrastú kolonie kultury mikroorganizmu, ktoré sa hodinotia fermentačnými skúškami na produkeiu kyseliny kójovej a z nich sa vybral kmeň AspergilHus tamarii mutant III.

Příklad 2

Připraví sa kultivačně médium, na 1 liter sa použije 100 g glukózy, 0,16 g dihydrofosforečnann draselného, 0,07 g chloridu sodného, 0,02 g tetrahydrátu síranu manganatého, 1 g močoviny, 1 g chloridu amonného, 0,01 g heptahydrátu síranu zinočnatého a 0,01 g heptahyídrátu síranu železnatého. Sterilné kultivačně médium o pH 5,0 až 6,5 v 5 1 fermentačnom tanku sa zaočkuje s 10 % obj. 48 hodinového vegetatívneho inOkula Aspergillus tamarii mutant III a kultivuje pri teplote 30 °C, pri obvodové,j rýchlosti 3,1 ms^_1 a vzdušnění 3 VVM po dobu 7 až 8 dní. V priebehu fermentácie sa vytvára v médiu 33 g/1 kyseliny kójovej.

P r í k 1 a d 3

Izolovaný kmeň má tú vlastnost, že jeho mycélium po oddělení od fermentačnej tekutiny je možné použít niekorkokrát za sebou na fermeotačnú přípravu kyseliny kójovej. Připraví sa roztok 130 g glukózy v 1 1 0,1 M fosfátového tlmivého roztoku o pH 6,0. Sterilný roztok v 5 1 fermentačnom tanku sa zmiešal s mycéliom, ktoré sa získalo separováním od fermentačného média po skončené) fermentácii popísanej v příklade 2. Podmienky fermentácie sú také isté ako v příklade 2. Po 5 až 6’ dňoch kultivácie sa v médiu vytvára 19 až 21 g/1 kyseliny kójovej.

Kmeň Aspergillus tamarii mutant III může sa využit pri fermentačnej výrobě kyseliny kójovej, ktorá slúži ako surovina pre chemický, potravinářsky a farmaceutický priemysel.

Claims (1)

1. ; R Ε D Μ Ε Τ VYNALEZU

   Kmeň mikroorganizmu Aspergillus tamarii CCM F-780 iprodukujúci kyselinu ikójovú