CS259361B1 - Súprava ua stanovenie bielkovín detekčnou technikou striebrom - Google Patents
Súprava ua stanovenie bielkovín detekčnou technikou striebrom Download PDFInfo
- Publication number
- CS259361B1 CS259361B1 CS857391A CS739185A CS259361B1 CS 259361 B1 CS259361 B1 CS 259361B1 CS 857391 A CS857391 A CS 857391A CS 739185 A CS739185 A CS 739185A CS 259361 B1 CS259361 B1 CS 259361B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- solution
- volume
- protein determination
- water
- determination kit
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
259361 3
Vynález sa týká súpravy na sťavenie biel-kovín detekčnou technikou striebrom. Súprava na farbenie striebrom, ktorú vy-rába firma Bio-Rad (USA) pracuje na zá-klade metodiky, ktorú opísal Merril a spol.(Meril C. R., Goldman D., Sedman S. A. aEbert Μ. H.: Science 211, 1 437, 1931). Inúsúpravu pod obchodným názvom GELCODEvyrábajú dve firmy v USA s určitými obmě-nami, avšak u oboch je postup odvodený zmetodiky podl'a Sammonsa (Ochs D. C., Mc-Gonkey E. H. a Sammons D. W.: Electropho-resis 2, 304, 1981). Ani jedna z raenove.nýchsúprav nepoužívá strieborné ióny vo forměamoniakálneho komplexu.
Nevýhody doteraz vyrábaných súprav spo-čívajú hlavně v tom, že gél po spracovanímá poměrně intenzívně pozadie. Podlá fi-remných návodov pracovný postup trvá vel-mi dlho alebo na dosiahnutie optimálnehozafarbenia autor jednej metodiky (Meril C.R., Goldman D. a Van Keuren M. L.: Electro-phoresis 3, 17, 1982) doporučuje po prvomfarbení ešte dvakrát odfarbiť a farbenieznova zopakovat
Uvedené nevýhody odstraňuje súprava nastanovenie bielkovín detekčnou technikoustriebrom pódia vynálezu. Podstata vynále-zu spočívá v tom, že súprava obsahujeoddelene zložky vo formě roztokov pre pří-pravu pracovných roztokov. Obsahuje me-tanol, kyselinu octovú, glutaraldehyd a vo-du pre přípravu fixačno-vymývacieho rozto-ku, s výhodou v objemových pomeroch 50 :: 12 : 38 : 0,25. Pre přípravu amoniakálnehostrieborného komplexu ako farbiaceho roz-toku súprava obsahuje vodný roztok hydro-xidu sodného a hydroxidu draselného aleboich zmes a roztok dusičnanu strieborného.Pře přípravu vymývacieho roztoku obsahujeroztok hydroxidu sodného s výhodou o kon-centrácii 0,001 M před použitím. Pre přípra-vu vývojky súprava obsahuje roztok kyseli-ny citrónovej, vodný roztok formaldehydua vodu. Pre přípravu zastavovacieho kúpefasúprava obsahuje roztok metanolu a roztokkyseliny citrónovej. Výhody súpravy na stanovenie bielkovínpodl'a vynálezu spočívajú v tom, že apliko-váním jednotlivých roztokov připravenýchpodlá příkladu 1 a postupom podlá příkla-du 2 sa obdrží gél s bielkovinami zafarbe-nými striebrom so zanedbatelným pozadíma celý pracovný postup trvá 160 minút. Přikladl Z koncentrovaných roztokov súpravy nastanovenie bielkovín detekčnou technikoustriebrom sa pripravia pracovně roztoky, a) Fixačno-vymývací roztok sa připraví tak,že do 100 objemových dielov zmesi metanol,kyselina octová a voda v objemových po-meroch 50 : 12 : 38 sa přidá 1 objemový diel25 % vodného roztoku glutaraldehydu. b)Roztok amoniakálneho strieborného komple-xu sa připraví pomalým zmiešavaním 5 ob-jemových dielov roztoku zmesi 8,1 objemo-vých dielov 17,3 % hydroxidu amonného a 81,4 objemových dielov 0,14 M hydroxidusodného s 1 objemovým dielom 20 % roz-toku dusičnanu strieborného a zriedenímtejto zmesi 60,7 objemovými dielmi deioni-zovanej vody a nasledujúcim filtrováním, c)Vymývací roztok hydroxidu sodného sa při-praví 200-násobným zriedením roztoku 0,2M hydroxidu sodného, d) Vývojka sa připra-ví zmiešaním 0,1 objemového dielu 20 %roztoku kyseliny citrónovej, 400 objemovýchdielov vody a 0,4 objemových dielov 37 %vodného roztoku formaldehydu. e) Stop-kú-pel sa připravil zmiešaním 400 objemovýchdielov 20 %-ného metanolu s 1 objemovýmdielom 20 % roztoku kyseliny citrónovej.Příklad 2
Po skončení elektroforézy bielkovín vplatňovom polyakrylamidovom géle, pri po-užití roztokov uvedených v příklade 1 sagél vymývá 2 X 30 minút vo fixačno-vymý-vacom roztoku a preperie 3 krát 15 minútvodou. Na gél sa potom pósobí 15 minút roz-tokom amoniakálneho strieborného komple-xu. Gél sa ďalej vymývá vymývacím rozto-kom hydroxidu sodného 3 krát 10 minút asa vyvolává dovtedy, kým sa objavujú no-vé zóny bielkovín (cca 3 minúty). Vyvolá-váme sa zastaví 10 minútovým praním vstop-kúpeli a nakoniec sa gél preperie 1hodinu vodou. Takto připravený gél sa po-užije na vyhodnotenie.
Vynález má využitie pri stanovení bielko-vín v platňových polyakrylamidových gélochpřítomných vo vel'mi nízkej koncentrácii.Uplatní sa najma v biochemických labora-tóriách najróznejšej špecializácie, klinic-kých laboratóriách i v niektorých priemys-lových odvetviach napr. v pivovarníctve, far-maceutickom priemysle a pod.
Claims (6)
- 259361 I PREDMET1. Súprava na stanovenie bielkovín detekč-nou technikou striebrom obsahujúca odde-lene zložky vo formě roztokov pre přípra-vu pracovných roztokov, vyznačujúca satým, že obsahuje metanol, kyselinu octovú,glutaraldehyd a vodu pre přípravu fixačne-vymývacieho roztoku, vodný roztok hydro-xidu sodného a hydroxidu amónneho aleboich zmesi a roztok dusičnanu striebornéhopre přípravu amoniakálneho striebornéhokomplexu ako farbiaceho roztoku, roztokhydroxidu sodného pre přípravu vymývacie-ho roztoku, roztok kyseliny citrónovej, vod-ný roztok formaldehydu a vodu pre přípra-vu vývojky, roztok metanolu a roztok kyse-liny citrónovej pre přípravu zastavovaciehokúpeia.
- 2. Súprava na stanovenie bielkovín, pó-dia bodu 1, vyznačujúca sa tým, že fixačno-vymývací roztok obsahuje metanol, kyseli-nu octovú, vodu a glutaraldehyd v objemo-vých pomeroch 50 : 12 : 38 : 0,25.
- 3. Súprava na stanovenie bielkovín, po- VYNÁLEZU dl'a bodu 1, vyznačujúca sa tým, že farbiaciroztok před použitím obsahuje amoniakálnystrieborný komplex pripraviteiný zmiešaním0,1 M roztoku hydroxidu sodného, 26 % roz-toku hydroxidu amónneho, 20 % roztokudusičnanu strieborného a vody v objemo-vom pomere 10 : 0,42 : 1,65 : 88.
- 4. Súprava na stanovenie bielkovín, pó-dia bodu 1, vyznačujúca sa tým, že vymýva-cí roztok před použitím má koncentráciu0,001 M.
- 5. Súprava na stanovenie bielkovín, pó-dia bodu 1, vyznačujúca sa tým, že vývojkaobsahuje 0,1 objemového dielu 20 % rozto-ku kyseliny citrónovej, 0,4 objemových die-lov 37 % vodného roztoku formaldehydu a400 objemových dielov vody.
- 6. Súprava na stanovenie bielkovín, pó-dia bodu 1, vyznačujúca sa tým, že zastavo-vací kúpel' obsahuje 400 objemových dielov20 % metanolu a 1 objemový diel 20 % roz-toku kyseliny citrónovej.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS857391A CS259361B1 (sk) | 1985-10-17 | 1985-10-17 | Súprava ua stanovenie bielkovín detekčnou technikou striebrom |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS857391A CS259361B1 (sk) | 1985-10-17 | 1985-10-17 | Súprava ua stanovenie bielkovín detekčnou technikou striebrom |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS739185A1 CS739185A1 (en) | 1988-03-15 |
| CS259361B1 true CS259361B1 (sk) | 1988-10-14 |
Family
ID=5422962
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS857391A CS259361B1 (sk) | 1985-10-17 | 1985-10-17 | Súprava ua stanovenie bielkovín detekčnou technikou striebrom |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS259361B1 (cs) |
-
1985
- 1985-10-17 CS CS857391A patent/CS259361B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS739185A1 (en) | 1988-03-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Leggett et al. | General computer program for the computation of stability constants from absorbance data | |
| Isenberg et al. | The analysis of fluorescence decay by a method of moments | |
| DE3587633T2 (de) | Verfärbungsverfahren für Proteine und Nukleinsäuren. | |
| US4434234A (en) | Method and kit for silver staining substances supported in matrix | |
| US4416998A (en) | Silver stain procedure and kit for same | |
| DE2519478A1 (de) | Objekttraeger zum ermitteln des vorliegens eines bestandteiles der antigen-antikoerper-reaktion in der menschlichen koerperfluessigkeit | |
| GB1577376A (en) | Protein assay reagent and method | |
| JPS6418059A (en) | Analysis method and element for protein analysis | |
| US20010046709A1 (en) | Solution for fast visualization of protein | |
| US5064768A (en) | Silver staining technique and kit | |
| Brems et al. | Protection of amide protons in folding intermediates of ribonuclease A measured by pH pulse exchange curves | |
| Robinson et al. | Estimation of protamine and insulin in protamine zinc insulin | |
| CA2229446A1 (en) | Determination of aqueous fluid surfactant concentration | |
| Vari et al. | A simplified silver diammine method for the staining of nucleic acids in polyacrylamide gels | |
| Klein et al. | Application of Fe (II)-5-pyridyl benzodiazepin-2-ones to the determination of serum iron and iron-binding capacity | |
| DE69709485T2 (de) | Reagenszusammensetzung, Teststück und Testkit | |
| Borissova et al. | Titrimetric and spectrophotometric determination of chlorhexidine digluconate in tooth pastes | |
| CN101294913A (zh) | 一种用于分析dna的聚丙烯酰胺凝胶显带的快速方法 | |
| CS277303B6 (sk) | Spósob stanovenia bielkovín detekčnou technikou striebrom | |
| JPS58205855A (ja) | 蛋白質の分析方法および分析用キツト | |
| KATAOKA et al. | Catalymetric Analysis of Molybdenum (VI) by Means of an Iodide Ion-Selective Electrode | |
| EP0063005B1 (en) | Silver staining method and kit | |
| JP2001099826A5 (cs) | ||
| KR100915584B1 (ko) | 단백질 염색용 조성물 | |
| SU1264038A1 (ru) | Способ определени урана ( @ ) |