CS270819B1 - Method of net-like acidic polysaccharides preparation - Google Patents

Method of net-like acidic polysaccharides preparation Download PDF

Info

Publication number
CS270819B1
CS270819B1 CS881656A CS165688A CS270819B1 CS 270819 B1 CS270819 B1 CS 270819B1 CS 881656 A CS881656 A CS 881656A CS 165688 A CS165688 A CS 165688A CS 270819 B1 CS270819 B1 CS 270819B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
acid
mol
bis
ether
moles
Prior art date
Application number
CS881656A
Other languages
English (en)
Slovak (sk)
Other versions
CS165688A1 (en
Inventor
Jiri Ing Csc Zemek
Eva Ing Zelenayova
Original Assignee
Zemek Jiri
Zelenayova Eva
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zemek Jiri, Zelenayova Eva filed Critical Zemek Jiri
Priority to CS881656A priority Critical patent/CS270819B1/cs
Publication of CS165688A1 publication Critical patent/CS165688A1/cs
Publication of CS270819B1 publication Critical patent/CS270819B1/cs

Links

Landscapes

  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)

Description

CS 270 819 B1 1
Vynález sa týká sposobu přípravy sletovaných kyslých polysacharidov pre využitie vanalytickej biochémii, dioorganickej syntéze a enzýmovom inžinierstve.
Aj ke3 v dosledku rozvoja biotechnologii dochádza k dynamickému rozvojů nových ana-lytických a preparativnych metod, založených na použiti ionexov anorganického a orga-nického syntetického povodu, biopolyméry, predovšetkým však polysacharidy kyslého abazického povodu si ponechávajú svoj význam a to predovšetkým s ohl'adom na vysokú čis-totu východiskových surovin - izolovaných přečištěných biopolymérov, ich pravidelnéštruktúru a vysoké zastúpenie funkčných skupin, karboxylových (pektín, kyselina pekto-vá, kyselina alginová, kyselina hyaluronová, chondroitín, heparin a proteiny kysléhotypu), sulfónových (chondroitin 6-sulfát, keratan sulfát, dermatan sulfát, heparin) aprimárných aminoskupín (chitozan, bazické proteiny). Ionexy připravené z prirodných po-lymérov sa nevyznačujú vysokými nespecifickými sorpciami a vzhladom k vysokej čistotěpoužitých surovin nedochádza k negativnému ovplyvneniu vlastností stanovovaných aleboizolovaných biologicky aktivnych látok.
Pripravou pektinového katexu sa zaoberá čsl. patent 140 713, kde východiskovou su-rovinou pre reakciu sieťovania je kyselina pektová (deesterifikovaný pektin). Přibliž-né ekvimolárne zastiípenie jednotlivých zložiek v reakčnej zmesi (pektin, hydroxid sod-ný a 2-chlórometyloxiran) neumožňuje pripravu sletovaného gélu o vhodných hydrodyna-mických vlasnostiach. Pri priprave sletovaného gélu kyseliny pektovej podl'a A.O. 218 702sa sice vychádza priamo z citrusového pektinu a deesterifikačná reakcia spolu s reak-ciou sietovania prebiehajú v jednom reakčnom stupni, připravený gél, vhodný po 3alšejaktivácii i imobilizácii enzýmov, nevyhovuje však k použitiu ako katex a to pre nizkystupeň sietovania a vysoký napučaci objem. Oe potřebné však súčasne zdůraznit, že pod-mienky sieťovania 2-chloromethyloxiránom vyhovujú len pre alkalistabilnejšle biopoly-méry, zatial čo alkalilabilné sa v přítomnosti vysokej koncentrácie hydroxidov rozklá-dají.
Uvedené nedostatky odstraňuje postup podlá vynálezu, podstata ktorého spočívá vtom, že kyslý polysachrid sa sletuje homo- alebo heterobifukčným činidlom, s výhodou2,2 -bis(oxiranylmetyl)éterom alebo 2-chlórometyloxiránom v pomere na 1 mol substituo-vanej anhydroglykozylovej jednotky kyslého polysacharidu 0,1 až 1,5 molu 2,2 '-bisCoxi-ranylmetyl) éteru alebo 2-chlórometyloxiránu pri pH nad 11,2 pre sietovanie 2,2'-bis(oxiranylmetyl)éterom alebo v přítomnosti 0,4 až 1,2 molu hydroxidu sodného alebo dra-selného na 1 mól substituovanéj anhydroglykozylovej jednotky polysacharidu, pri sle-tovaní 2-chlórmetyloxiránom a 5 až 20 mólov destilovanej vody, pri teplote 40 až 80 °Cpo dobu 1 až 3 hodin.
Po zosieteni sa reakčná zmes zaleje nadbytkom destilovanej vody, rozvolni, neutra-lizuje pomocou kyseliny octovej alebo chlorovodíkovéj, připadne vybieli účinkom zrie-deného chlornanu sodného, odvodní postupným účinkom nadbytku 50% a potom 95 - 100% eta-nolu alebo acetonu a vysuši vo vákuovej sušiarni. Vysušený gél sa vytriedi na sitáchna frakcie o potrebnom zrnění a upraví na vhodnú hodnotu pH pre 3alšie použitie. Výhodou uvedeného postupu je skutočnost, že základný materiál, kyslý polysacharidje povačšine lahko dostupný a lačný, stupeň substitúcie DS kyslými fukčnými skupinamiv pripade kyseliny pektovej, alginovej, chondritin 6-sulfátu a dermetan sulfátu je oko-lo 1, v pripade keratan sulfátu a hyaluronovej kyseliny je okolo 0,5 a u heparinu jeokolo 2. Pri sielovani esterifikovaných kyslých polysacharidov predovšetkým pomocou2-chlorometyloxiránu dochádza aj k súčasnej deesterifikácii. V pripade sietovania po-mocou 2,2 -bis.(oxiranylmetyl)éteru možno reakciu sietovania zabezpečit aj bez deeste-rif ikácie. Zostavou reakčnej zmesi možno regulovat stupeň sietovania gélu a jeho napu-čaci objem v rozsahu od 3,8 až po 25 ml.g”*. CS 270 819 81 Přiklad 1
Ku kyselině pektovej (176 g; 1 mol anhydrogalakturónovej kyseliny) sa přidala zamiešania 40 ml destilovanej vody a potom postupné v priebehu áalšich 30 minut za stálé-ho miešania 1 mól NaOH, rozpuštěný v 50 ml destilovanej vody. Po dokonalom zvlhčeni azhomogenizovani reakčnej zmesi za stálého miešania a chladenia sa přidávalo postupné0,5 molu 2-chlórometyloxiránu a po dokladnou) preroiešaní sa zvýšila teplota reakčnej zmesi na 40 °C. Po 3 hodinách priebehu sa vybielil účinkom 200 ml 0,5% chlornanu sodného,znovu vymyl v destilovanej vodě a adjustoval do H+ cyklu účinkom 400 ml 2% kyseliny fosforečnej. Nadbytok volnej kyseliny fosforečnej sa vymyl opakované 500 ml destilovanejvody a vysušil postupným odvodněním pomocou 50% etanolu alebo acetonu (1000 ml) a 96 až100% etanolu alebo acetonu a dosušil vo vakuovej sušiarni. Získaný sietovaný gél kyse-liny pektovej (204 g) mal výmennú kapacitu 5,2 mól.g”! a napučaoi objem 12,5 ml.g”!. Příklad 2
Postupuje sa tak, ako je uvedené v přiklade 1 s tým rozdielom, že namiesto kyseli-ny pektovej sa použije 187 g jablčného pektinu o stupni esterifikácie 62%. Reakčným produktom bolo 205 g gélu sietovanej kyseliny pektovej o výmennej kapacitě 5,2 mól.g”! anapuěacom objeme 12 ml.g”!. Přiklad 3
Postupuje sa tak, ako je uvedené v přiklade 1 s tým rozdielom, že namiesto 40 mldestilovanej vody sa ku zvlhčeniu kyseliny pektovej použije 100 ml a 1,2 molz NaOH sarozpust! v Salšich 100 ml destilovanej vody. K sietovaniu sa použilo 1,5 molu 2-chló-rometyloxiránu. Reakcia sietovania prebiehala pri 80 °C po dobu 1 hodiny. Získaný gélkyseliny pektovej (211 g) mal výmennú kapacitu 4,6 mól.g”! a napučaci objem 6,0 ml.g”!. Přiklad 4
Postupuje sa tak, ako v přiklade 1 s tým rozdielom, že sa k sietovaniu použije0,1 mól 2-chlórometyloxiránu a 0,4 molu KOH. Získaný gél sietovanej kyseliny pektovej(145 g) mal výmennú kapacitu 5,4 mol.g a napučaci objem 25 ml.g !. Přiklad 5
Postupuje sa tak, ako je uvedené v příklade 1, s tým rozdielom, že namiesto kyse-liny pektovej sa použije kyselina alginová. Získaný gél sietovanej kyseliny alginovej(145 g) mal výmennú kapacitu 4,8 mól.g a napučaci objem 23 ml.g !. Příklad 6
Postupuje sa tak, ako v přiklade 1 s tým rozdielom, že kyselina pektová sa rozpustív 150 ml borátového pufru (pH 11,2; 0,05 mol) a k sietovaniu sa použije 1 mól 2,2'-bis(oxiranylmetyl)éteru. Získaný gél sietovanej kyseliny pektovej (218 g) mal výmennú kapa , _i _ | citu 5,1 mol.g a napučaci objem 15,6 ml.g Přiklad 7
Postupuje sa tak ako v přiklade 6, s tým rozdielom, že namiesto kyseliny pektovejsa použije 0,01 mólu substituovaných anhydroglykozylových skupin heparinu. Získaný gélSletovaného heparinu (210 g) mal výmennú kapacitu 7,1 mol.g”! (SOg) a 2,1 mol.g kar-boxylových skupin. Napučaci objem získaného gélu bol 18,5 ml.g !. Přiklad 8
Postupuje sa tak, ako je uvedené v přiklade 6, s tým rozdielom, že namiesto kyseli-

Claims (1)

  1. CS 270 819 81 3 ny pektovej sa použije kyselina hyaluronová (2 g; tj. cca 0,01 mol). Při zachovarri ",ostatných molárnych proporci! tak, ako je uvedené v přiklade 6 sa získal gél sietova-nej kyseliny hyalurónovej v množstve 2,1 g o výmennej kapacitě 2,8 mol.g 1 (karboxy-lová skupina) a napučacom objeme 17,7 ml.g . Přiklad 9 Postupuje sa tak, ako je uvedené v přiklade 8, s tým rozdielom, že sa namiesto ky-seliny hyalurónovej použije chondroitin 6-sulfát. Získaný gél 2,4 g sieťovaného chon-droitin 6-sulfátu mal výmennú kapacitu 2,4 mol.g-^ (karboxylová skupina) a 2,1 mol.g(-S0-). Přiklad 10 Postupuje sa tak, ako je uvedené v přiklade 8, s tým rozdielom, že namiesto kyseli-ny hyalurónovej sa použije keratan sulfát. Získaný gél, 1,6 g sieťovaného keratan sul-fátu mal výmennú kapacitu 1,6 mol.g-^ (-30g) a napučaci objem 14,1 ml.g-^. Přiklad 11 Postupuje sa tak, ako je uvedené v přiklade 8, s tým rozdielom, že sa namiesto ky-seliny hyalurónovej použije dermatan sulfát. Získaný gél, 1,8 g sieťovaného dermatanu mal výmennú kapacitu 2,4 mol.g-^ (karboxylová skupina) a 2,2 mol.g-^ (-30ζ) a napučaci-1 J objem 19,2 ml.g Vynález má široké uplatneníe predovšetkým v onalytickej biochémii, v bioorganickejchémii, v enzýmovom inžinierstve a v, technológiach využivajúcich rekombinantnú dezoxy-ribonukleovú kyselinu. \ PREDMET VYNÁLEZU Sposob přípravy sletovaných kyslých polysacharidov vyznačený tim, že kyslý polysa-charid sa sietuje homo- alebo heterobifunkčným činidlom, s výhodou 2,2'-bis(oxiranyl-metyl)éterom alebo 2-chlórometyloxiránom v pomere na 1 mól substituovanej anhydroglyko-zylovej jednotky kyslého polysacharidu 0,1 až 1,5 molu homo- alebo heterobifunkčnéhočinidla pri pH nad 11,2 pre sietovanie 2,2z-bis(oxiranylmetyl)éterom alebo v pritomnos- * ti 0,4 až 1,2 molu hydroxidu sodného alebo draselného na 1 mól substituovanej anhydro-glykozylovej jednotky polysacharidu, pri sieťovani 2-chlórometyloxíránom a 5 až 20 mó-lov destilovanej vody při teplote 40 až 80 °C po dobu 1 až 3 hodin.
CS881656A 1988-03-14 1988-03-14 Method of net-like acidic polysaccharides preparation CS270819B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS881656A CS270819B1 (en) 1988-03-14 1988-03-14 Method of net-like acidic polysaccharides preparation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS881656A CS270819B1 (en) 1988-03-14 1988-03-14 Method of net-like acidic polysaccharides preparation

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS165688A1 CS165688A1 (en) 1989-12-13
CS270819B1 true CS270819B1 (en) 1990-08-14

Family

ID=5351475

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS881656A CS270819B1 (en) 1988-03-14 1988-03-14 Method of net-like acidic polysaccharides preparation

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS270819B1 (cs)

Also Published As

Publication number Publication date
CS165688A1 (en) 1989-12-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100375299B1 (ko) 히알루론산의 가교결합형 아마이드 유도체와 이의 제조방법
Helting et al. Occurrence and biosynthesis of β-glucuronidic linkages in heparin
DK164068B (da) Geldannende blanding af polysaccharid og gelatine, vandigt geldannende praeparat og gel fremstillet deraf
Chemin et al. Well-defined oligosaccharides by mild acidic hydrolysis of hemicelluloses
CA2401704A1 (en) Salmon-origin chondroitin sulfate
AU656953B2 (en) Oligosaccharide having affinity for fibroblast growth factor and process for producing same
Crescenzi et al. New cross‐linked and sulfated derivatives of partially deacetylated hyaluronan: Synthesis and preliminary characterization
Zhang et al. Improved method for synthesis of cysteine modified hyaluronic acid for in situ hydrogel formation
Gomez et al. Synthesis and characterization of a β-CD-alginate conjugate
CN1100794C (zh) 可生物降解的热塑性多糖类衍生物及其制备方法和应用
US3639389A (en) Low d.e. starch hydrolysate derivatives
US6388060B1 (en) Process for the sulfation of uronic acid-containing polysaccharides
EP3279220A1 (en) Method for sulfating glycosaminoglycan
Kozlowski et al. Hydrolytic degradation of heparin in acidic environments: nuclear magnetic resonance reveals details of selective desulfation
TOMODA et al. Plant mucilages. XL. A representative mucilage,“Hibiscus-mucilage SF,” from the flower buds of Hibiscus syriacus
Spasojevic et al. Peroxidase-sensitive tyramine carboxymethyl xylan hydrogels for enzyme encapsulation
Maccari et al. Glycosaminoglycan blotting on nitrocellulose membranes treated with cetylpyridinium chloride after agarose‐gel electrophoretic separation
Egusa et al. Surface modification of a solid-state cellulose matrix with lactose by a surfactant-enveloped enzyme in a nonaqueous medium
CS270819B1 (en) Method of net-like acidic polysaccharides preparation
US6800754B1 (en) Method for producing cellulose sulfoacetate derivatives and products and mixtures thereof
Endo et al. Synthesis of neoproteoglycans using the transglycosylation reaction as a reverse reaction of endo-glycosidases
Takano Desulfation of sulfated carbohydrates
US6342367B1 (en) Method for the preparation of chondroitin sulfate compounds
JP2008519595A (ja) 変性アルギネートおよびその製造方法および用途
Schiller et al. Synthesis and characterization of chemically modified hyaluronan and chondroitin sulfate