CS272887B1 - Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272887B1 CS272887B1 CS152389A CS152389A CS272887B1 CS 272887 B1 CS272887 B1 CS 272887B1 CS 152389 A CS152389 A CS 152389A CS 152389 A CS152389 A CS 152389A CS 272887 B1 CS272887 B1 CS 272887B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- virus
- hybridome
- glycoprotein
- hybridoma
- monoclonal antibody
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 8
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101710081103 Cuticular glutathione peroxidase Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 18
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 claims description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 6
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims description 6
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 3
- 101000920732 Bovine leukemia virus Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 2
- 101500007118 Bovine leukemia virus Transmembrane protein Proteins 0.000 claims 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 claims 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 6
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
X CS 272887 B1
Vynález sa týká nového myšieho lymfocytárneho hybridomu BLVgp30UE0-?4Cll/2/Ell, t.j.hybridnej bunečnej linie, ktorá bola zostrojená fúziou buniek myšej myelómovej linieSp2/0 a myších lymfoidných buniek, produkujúcich protilátky namierené proti obalovémuglykoproteínu gp30 virusu bovinnej leukémie (BLV). Obalov.ý glykoproteín je dčležitou sú-častou virusu bovinnej leukémie, je spolu zodpovědný za infektivitu virusu. Nález anti-gpprotilátok u zvierat má zásadný význam pre diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Ooteraz sa protilátky proti antigénom BLV vyrábajú tak, že purifikovaný gp30 je opa-kované injikovaný produkčným zvieratám, najčastejšie králikom. Sérum takto imunizovanýchzvierat, odobrané po určitej době působenia antigénu, slúži ako zdroj protilátok. Tentopostup má mnohé nevýhody, pre každé imunizáciu je nutné izolovaí znova glykoproteín gp30z virusu, jeho purifikácia je drahá a časové náročná. Okrem toho v séru imunizovanýchzvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom zvieratirožne a neopakovatelné. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky voči nečistotám anti-génového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňovat vysycovaním. Z týchto dóvodov výrob-ně šarže sa značné odlišujú a kvalita získaných polyklonálnych protilátok nie je štandart-ná.
Uvedené nedostatky hoře uvedeného postupu konvenčněj imunizácie odpadnú, keď mámek dispozícii hybridom, produkujéci monoklonálnu protilátku proti obalovému glykoproteínuBLV, ktorý je uložený v zbierke hybridómov oddelenia molekulárněj virológie, Ústavu expe-rimentálnej onkológie SAV v Bratislavě, ul. Čsl. armády 21, pod označením UE0-74C11/E11.
Uvedený hybridom bol získaný v podstatě postupom známým v odbornej literatúre ako hy-bridómová technológia (Kohler, G., Milstein, C. :Goátinuous. - cultures of fused cells secret-ing antibody of prodefined specificity, Nátuře 256, 475, 1775 , R. H. Burdon, P. H. VanKnip-penberg: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology, Vol. 13 MonoclonalAntibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1784). Postup, ktorým boli hybridómy připravenébol námi modifikovaný (0. Orlík, Č. Altaner: Modifications of hybridoma technology yieldof monoclonal antibody producing cells, 0. Immunol. Methods, 115, 55-57, 1788). Výhodou hybridomu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagujés obalovým glykoproteínom BLV. Hybridom BLVgp30-?4Cll/Ell, je možno kultivovat in vitrov médlách vhodných pre živočišné buňky a súčasne je adaptovaný pre rast in vivo v perito-neálnej dutině myšieho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sé uchovávané v kvapalnom dusíku,je možno zahájit produkciu protilátky bez Salšieho antigénu. Protilátka produkovaná klónomBLV gp30-?4Cll/2/Ell reaguje specificky s determinantou obalového glykoproteínu BLV. Příklad
Za účelom pomnoženia hybridómových buniek in vivo bolo 2-10 x 10^ buniek injikovanédo peritoneálnej dutiny myší kemňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým injikovanédo peritoneálnej dutiny 0,5 ml Přistanu alebo inkompletného Freudova adjuvans za účelomvytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá rastu Injikovaných hybridómových buniek. Po14 dňoch rastu hybridómových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrtená a naprodu-kovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 ml ascitovej tekuti-ny, ktorá obsahovala 7 mg/ml imunoglobulínu. Monoklonálna protilátka reagovala Specific-ky s glykoproteínom gp30-BLV a s desintegrovaným vírusoum v rádioprecipitačnom teste a rá-dioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny bol imunoglobulín izolovaný pomocou chroma-tografie na kolóne Protein A-Sepharose alebo lnou vhodnou metodou. Takto purifikovaná mono-klonálna protilátka je vhodná pre poíahovanie polystyrénových materiálov (mikrotitračnédoštičky, polystyrénové tyčinky) za účelom přípravy diagnostických súprav na detekciu BLVinfikovaných zvierat.
Iri vitro rastů buňky hybridomu ako polosuspenzná kultúra. Základným kultivačným mé- diom je Dulbeccova modifikácia Eaglova mínimálneho esencíálneho média doplněného 5 percen- tami koňského alebo iného séra vhodného pře tkáňové kultúry, Hybridom je kultivovaný pri
Claims (1)
- CS 272887 B1 37 °C v CO^ termostate, jeho štandardná generačná doba je přibližné 24 hodin. Produkovanáprotilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgGl. Hybridóm BLVgp30UE0-94Cll/Ell móže byí priemyslovo využívaný ako zdroj protilátkyproti obalovému glykoproteínu gp30 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných metodácha iných aplikáciach. Konkrétné má využitie: při výrobě imunodiagnostických súprav na detekciu infekciehovádzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, pri purifikácii virusového glykoproteínuimunoafinitnou chromatografiou, pri vyhodnocovaní antigénnej variability virusového glyko-proteínu, pře přípravu antiidiotypovej protilátky pře vakcinačné účely, ako zdroj proti-látky jedinej podtriedy pre přípravu sér, pre detekciu virusového antigénu v infikovanýchzvieratách. PREOMET VYNÁLEZU Myší lymfocytárny hybridóm BLVgp3OUE0-94C11/2/E11 produkujúci monoklonálnu protilát- ku podtriedy IgGl proti obalovému glykoproteínu gp30 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152389A CS272887B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152389A CS272887B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152389A1 CS152389A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272887B1 true CS272887B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349822
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152389A CS272887B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272887B1 (cs) |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152389A patent/CS272887B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152389A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI87734B (fi) | Immunologisk motverkan foer tumoerer och virus | |
| US6632431B2 (en) | Anti-idiotypic antibody against FimH adhesion of uropathogenic type I-fimbriated Escherichia coli, compositions containing same and method for using same | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| US4731237A (en) | Immune response to virus induced by anti-idiotype antibodies | |
| US4908203A (en) | Method for inducing HIV neutralizing antibodies using an internal image idiotope | |
| US4490358A (en) | Screening vaccines and immunization process | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| US11267872B2 (en) | Polyclonal antibodies produced using HIV-1 trimeric envelope glycoprotein subunits | |
| FI111518B (fi) | Menetelmä monoklonaalisten vasta-aineiden ja vasta-ainetta sisältävän farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi | |
| CN115960220B (zh) | 特异性结合柯萨奇病毒a6的单克隆抗体及其用途 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| Opolski et al. | Polymorphic and autoreactive H-2-specific monoclonal antibody isolated after injections of syngeneic Sendai virus-coated lymphocytes | |
| KR880001757B1 (ko) | 알파 인터페론 정제에 효과가 있는 단일항체의 제조방법 | |
| Novak et al. | Preparation and characterization of hybridomas producing monoclonal antibodies against human alpha interferon | |
| CN115819568A (zh) | 一种肠道病毒a71单克隆抗体及应用 | |
| RU2257414C1 (ru) | Штамм гибридных клеток с3/s-3e5 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к коксиеллам бернета | |
| CN114805589A (zh) | 可同时识别牛、山羊、绵羊抗体的单克隆抗体 | |
| JPH0720884B2 (ja) | 抗イデイオタイプ抗体によって誘発される、腫瘍およびウイルスに対する免疫応答 | |
| JPS6263525A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| Zimmermann et al. | Leishmania major parasites share an epitope with the murine CD3‐T cell receptor complex | |
| JPS63253098A (ja) | ヒト抗体に対するモノクロ−ナル抗体、その製法及び用途 |