CS272887B1 - Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272887B1 CS272887B1 CS152389A CS152389A CS272887B1 CS 272887 B1 CS272887 B1 CS 272887B1 CS 152389 A CS152389 A CS 152389A CS 152389 A CS152389 A CS 152389A CS 272887 B1 CS272887 B1 CS 272887B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- virus
- hybridome
- glycoprotein
- hybridoma
- monoclonal antibody
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 6
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 8
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 101710081103 Cuticular glutathione peroxidase Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 18
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 claims description 11
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 7
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 6
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims description 6
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 4
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 3
- 101000920732 Bovine leukemia virus Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 2
- 101500007118 Bovine leukemia virus Transmembrane protein Proteins 0.000 claims 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 claims 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 claims 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 claims 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 claims 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 6
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 3
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
(57) Riešenie sa týká myšieho lymfocytárneho hybridómu produkujúceho monoklonálnu protilátku proti obalovému glykoproteínu gp30 virusu bovinnej leukémie uloženého v zbierke hybridómov oddelenia molekulárnej virelógie Ústavu experimentálnej onkológie SAV pod značením UE0-94C11/2/E11. Samotná monoklonálna protilátka tohoto hybridómu je vhodná hlavně na 'použitie pre výrobu imunodiagnostických súprav na detekciu hovádzieho dobytka infikovaného vírusom bovinnej leukémie a na detekciu virusového antigénu. Je taktiež vhodná pre účely preparatívnej ako imunoafinitnej purifikácie virusového glykoproteínu a na přípravu antiidiotypovej protilátky pre vakcinačné účely.
272B87 Bl tn
CS 272887 Bl
Vynález sa týká nového myšieho lymfocytárneho hybridómu BLVgp30UE0-94Cll/2/Ell, t.j. hybridnej bunečnej linie, ktorá bola zostrojená fúziou buniek myšej myelómovej linie Sp2/0 a myších lymfoidných buniek, produkujúcích protilátky namierené proti obalovému glykoproteínu gp30 virusu bovinnej leukémie (BLV). Obalov.ý glykoproteín je důležitou súčastou virusu bovinnej leukémie, je spolu zodpovědný za infektivitu virusu. Nález anti-gp protilátok u zvierat má zásadný význam pre diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Ooteraz sa protilátky proti antigénom BLV vyrúbajú tak, že purifikovaný gp30 je opakované injikovaný produkčným zvieratám, najčastejšle králikom. Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po určitej době působenia antigénu, slúži ako zdroj protilátok. Tento postup má mnohé nevýhody, pre každé imunizáciu je nutné izolovaí znova glykoproteín gp30 z virusu, jeho purifikácia je drahá a časové náročná. Okrem toho v séru imunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom zvierati rožne a neopakovatelné. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky voči nečistotám antigénového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňoval vysycovaním. Z týchto dóvodov výrobné šarže sa značné odlíšujú a kvalita získaných polyklonálnych protilátok nie je štandartná.
Uvedené nedostatky hoře uvedeného postupu konvenčněj imunizácie odpadnú, keď máme k dispozícii hybridom, produkujúci mcnoklonálnu protilátku proti obalovému glykoproteínu BLV, ktorý je uložený v zbierke hybridómov oddelenia molekulárnej virológie, Ústavu experimentálnej onkológie SAV v Bratislavě, ul. Čsl. armády 21, pod označením UE0-94C11/E11.
Uvedený hybridom bol získaný v podstatě postupom známým v odbornej literatúre ako hybridómová technológia (Kohler, G., Milstein, C. iGoátinuous. - cultures of fused cells secreting antibody of pradefined specificity, Nátuře 256, 495, 1975 , R. H. Burdon, Ρ. H. VanKnippenberg: Laboratory techniques in biochemistry and moleoular biology, Vol. 13 Monoclonal Antibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1984). Postup, ktorým boli hybridómy připravené bol námi modifikovaný (0. Orlík, Č. Altaner: Modifications of hybridoma technology yield of monoclonal antibody producing cells, 3. Immunol. Methods, 115, 55-59, 1988).
Výhodou hybridómu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagujé s obalovým glykoproteínom BLV. Hybridom BLVgp30-94Cll/Ell, je možno kultivoval in vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky a súčasne je adaptovaný pre rast in vivo v peritoneálnej dutině myšieho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sú uchovávané v kvapalnom dusíku, je možno zahájil produkciu protilátky bez Salšieho antigénu. Protilátka produkovaná klónom BLV gp30-94Cll/2/Ell reaguje specificky s determinantou obalového glykoproteínu BLV.
Příklad
Za účelom pomnoženia hybridómových buniek in vivo bolo 2-10 x 10^ buniek injikované do peritoneálnej dutiny myší kemňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým injikované do peritoneálnej dutiny 0,5 ml Přistanu alebo inkompletného Freudova adjuvans za účelom vytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá rastu injikovaných hybridómových buniek. Po 14 dňoch rastu hybridómových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrtená a naprodukovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 ml ascitovej tekutiny, ktorá obsahovala 9 mg/ml imunoglobulinu. Monoklonálna protilátka reagovala Specificky s glykoproteínom gp30-BLV a s desintegrovaným vírusoum v rádioprecipitačnom teste a rádioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny bol imunoglobulín izolovaný pomocou chromatografie na kelóne Protein A-Sepharose alebo lnou vhodnou metodou. Takto purifikovaná monoklonálna protilátka je vhodná pre poíahovanie polystyrénových materiálov (mikrotitračné doštičky, polystyrénové tyčinky) za účelom pripravy diagnostických súprav na detekciu BLV infikovaných zvierat.
Iri vitro rastů buňky hybridómu ako polosuspenzná kultúra. Základným kultivačným médiom je Oulbeccova modifíkácia Eaglova mínimálneho esencíálneho média doplněného 5 percentami koňského alebo iného séra vhodného pře tkáňové kultúry, Hybridom je kultivovaný pri
CS 272887 Bl
JL i
Claims (1)
- i37 °C v CO^ termostate, jeho štandardná generačná doba je přibližné 24 hodin. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulín podtriedy IgGl.Hybridóm BLVgp30UE0-94Cll/Ell móže byí priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky proti obalovému glykoproteínu gp30 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných metodách a iných aplikáciach.Konkrétné má využitie: při výrobě imunodiagnostických súprav na detekciu infekcie hovádzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, pri purifikácii virusového glykoproteínu imunoafinitnou chromatografiou, pri vyhodnocovaní antigénnej variability virusového glykoproteínu, pře přípravu antiidiotypovej protilátky pře vakcinačné účely, ako zdroj protilátky jedinej podtriedy pre přípravu sér, pre detekciu virusového antigénu v infikovaných zvieratách.PREDMET VYNÁLEZUMyší lymfocytárny hybridóm BLVgp3OUE0-94C11/2/E11 produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedy IgGl proti obalovému glykoproteínu gp30 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152389A CS272887B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152389A CS272887B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152389A1 CS152389A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272887B1 true CS272887B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349822
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152389A CS272887B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272887B1 (sk) |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152389A patent/CS272887B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152389A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI87734B (fi) | Immunologisk motverkan foer tumoerer och virus | |
| US6632431B2 (en) | Anti-idiotypic antibody against FimH adhesion of uropathogenic type I-fimbriated Escherichia coli, compositions containing same and method for using same | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| US4731237A (en) | Immune response to virus induced by anti-idiotype antibodies | |
| US4908203A (en) | Method for inducing HIV neutralizing antibodies using an internal image idiotope | |
| US4490358A (en) | Screening vaccines and immunization process | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| US11267872B2 (en) | Polyclonal antibodies produced using HIV-1 trimeric envelope glycoprotein subunits | |
| FI111518B (fi) | Menetelmä monoklonaalisten vasta-aineiden ja vasta-ainetta sisältävän farmaseuttisen koostumuksen valmistamiseksi | |
| CN115960220B (zh) | 特异性结合柯萨奇病毒a6的单克隆抗体及其用途 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| Opolski et al. | Polymorphic and autoreactive H-2-specific monoclonal antibody isolated after injections of syngeneic Sendai virus-coated lymphocytes | |
| KR880001757B1 (ko) | 알파 인터페론 정제에 효과가 있는 단일항체의 제조방법 | |
| Novak et al. | Preparation and characterization of hybridomas producing monoclonal antibodies against human alpha interferon | |
| CN115819568A (zh) | 一种肠道病毒a71单克隆抗体及应用 | |
| RU2257414C1 (ru) | Штамм гибридных клеток с3/s-3e5 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к коксиеллам бернета | |
| CN114805589A (zh) | 可同时识别牛、山羊、绵羊抗体的单克隆抗体 | |
| JPH0720884B2 (ja) | 抗イデイオタイプ抗体によって誘発される、腫瘍およびウイルスに対する免疫応答 | |
| JPS6263525A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| Zimmermann et al. | Leishmania major parasites share an epitope with the murine CD3‐T cell receptor complex | |
| JPS63253098A (ja) | ヒト抗体に対するモノクロ−ナル抗体、その製法及び用途 |