CS272890B1 - Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 - Google Patents
Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 Download PDFInfo
- Publication number
- CS272890B1 CS272890B1 CS152689A CS152689A CS272890B1 CS 272890 B1 CS272890 B1 CS 272890B1 CS 152689 A CS152689 A CS 152689A CS 152689 A CS152689 A CS 152689A CS 272890 B1 CS272890 B1 CS 272890B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridome
- virus
- ueo
- monoclonal antibody
- glycoprotein
- Prior art date
Links
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 5
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 claims description 13
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 claims description 4
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 claims description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 claims description 3
- 101500007117 Bovine leukemia virus Surface protein Proteins 0.000 claims 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 7
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 abstract description 5
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 abstract description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 abstract description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 abstract description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 abstract description 5
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 abstract description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 abstract description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 4
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 abstract description 3
- 238000001261 affinity purification Methods 0.000 abstract 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 abstract 1
- 108010011013 glycoprotein GP51 Proteins 0.000 abstract 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 abstract 1
- 241000714266 Bovine leukemia virus Species 0.000 description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 210000003200 peritoneal cavity Anatomy 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 3
- 101000920732 Bovine leukemia virus Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 3
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 2
- 101800001271 Surface protein Proteins 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 2
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 239000008241 heterogeneous mixture Substances 0.000 description 1
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 1
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
Vynález sa týká nového mySieho lymfocytárneho hybridómu, BIiVgp51 UEO-4E9/32E5 t.j. hybridnej bunečnej linie, ktorá bola zostroj'ená fáziou buniek mySej myelómovej linie Sp2/0 a myších lymfoidných buniek, produkujácich protilátky namierené proti obalovému glykoproteinu agp 51 virusu bovinnej leukémie (BLV). Obalový glykoproteín je důležitou súčastfou virusu bovinnej leukémie, je zodpovědný za infektivitu virusu. Nález anti gp-protilátok u zvierat má zásadný význam-pre diagnostiku leukémie hovadzieho dobytka.
Doteraz sa protilátky proti antigénom ELV vyrábajá tak, že purifikovaný gp51 je opakované injikovaný produkčným zvieraťám, najčastéjšie. králikom. Sérum takto imunizovaných zvierat, odobrané po určitéj době posobenia antigénu, sláži ako zdroj protilátok. Tento postup má mnohé nevýhody, pre každá imunizáciu je nutné izolovat znova glykoproteín gp51 z virusu, jeho purifíkácia je drahá a časové náročná. Okrem toho v sére imunizovaných zvierat sa nachádza heterogénna zmes protilátok, ktorých spektrum je v každom zvierati řízne a neopakovateíhé. Sérum takto získané obsahuje tiež protilátky voči ne- čistotám antigénového preparátu, ktoré je potom nutné odstraňoval vysycovaním. Z týchto dovodov výrobně Šarže sa značné odlišujú a kvalita získaných polyklonálnych protilátok nie je štandardná.
Uvedené nedostatky výše uvedeného postupu konvečnej imunizácie odpadná, keň máme k dispozici! hybridóm, produkujáci monoklonálnu protilátku proti obalovému glykoproteínu BEiV, ktorý je uložený v zbierke hýbridómov oddelenia molekulárnej virologie, lístavu experimentélnej onkológie SAVv Bratislavě, ul. čsl. armády 21, pod označením UEO-4E9/32E5.
Uvedený hybridóm bol získaný v podstatě postupom známým v odbornej literatáre ako hybridómová technológía (Kohler, G., Milsteíň, C.: Continuous cultures of fused cells secreting antibody of prodefined specificity,. Nátuře 25 ň', 495, 1975), H.H. Burdon, P.H. VanKhippenberg: Laboratory techniques in biochemistry and molecular biology, Vol. 13, Monoclonal Antibody Technology, Elsevier, Amsterdam 1984). Postup, ktorým boli hybridómy připravené bol námi modifikovaný CO. Orlík, 5. Altaner: Modifications of hybridoma technology yield of monoclonal antibody-producing cells, J. Immunol. Methods, 115,
55-59, 1988).
Výhodou hýbridómu je, že produkuje homogénne monoklonálne protilátky, ktoré reagujú s obalovým glykoproteínom BLV. Hybridóm BLVgp51UEO-4E9/32E5, je možno kultivovat in vitro v médiách vhodných pre živočišné buňky a sáčasne je adaptovaný pre rast in vivo v peritoneálnej dutině myšieho kmeňa BALB/c. Z konzerv, ktoré sú uchovávané v kvapalnom dusíku, je možno zahájit produkciu protilátky bez dalšieho antigénu. Protilátka produkovaná klónom BLV gp51-4E9/32E5 reaguje Specificky s'determinantou obalového glykoproteínu BLV.
Příklad: Za áčelom pomnoženia hýbridómových buniek in vivo bolo 2-10x10^ buniek injikovaná do peritoneálnej dutiny myší kmeňa BALB/c. Týmto myšiam bolo 14 dní predtým injikované do peritoneálnej dutiny 0.5 ml Přistanu alebo inkompletného Preudova adjuvans za áčelom vytvorenia sterilného ascitu, ktorý napomáhá rastu injikovanýeh hýbridómových buniek. Po 14 dňoch rastu hýbridómových buniek v peritoneálnej dutině, myš bola usmrtená a neprodukovaná ascitická tekutina bola sterilně odobraná. Celkom sa získalo 8 ml ascitovej tekutiny, ktorá obsahovala 9mg/ml imunoglobulinu. Monoklonálna protilátka reagovala Specificky s glykoproteínom gp51-ELV a s desintegrovaným vírusom a rádioprecipitačnom teste a rádioimunologickom teste. Z ascitickej tekutiny byl imunoglobulín izolovaný pomocou chromatografie na koloně Protein A-Sepharose alebo inou vhodnou metódou.Takto purifikovaná monoklonálna protilátka je vhodná pře poťahovanie polystyrénových materiálov (mikrotitračné doštičky, polystyrénové tyčinky) za áčelom přípravy diagnostických sáprav na detekeiu ELV infikovaných zvierat.
CS 272890 EL
In vitro rastů buňky hybridómu ako polosuspenznó kultúra. Základným kultivačným médiom je Dulbeccova modifikácia Eaglova minimálneho esenoiálneho média doplněného 5 percentami koňského alebo iného séra vhodného pre tkáňové kultúry. Hybridám je kultivovaný pri 37 °C v C02 termostate, jeho štandartná generačná doba je přibližné 24 hodin. Produkovaná protilátka je monoklonálny imunoglobulin podtriedy IgG2b.
Hybridem BLVgp51UEO-4E9/32E5 može byt priemyslovo využívaný ako zdroj protilátky proti obalovému glykoproteínu gp51 BLV v diagnostických metodách, v purifikačných metodách a iných aplikáciach.
Konkrétné má využitie: pri výrobě imunodiagnostických súprav na detekcii infekcie hovadzieho dobytka vírusom bovinnej leukémie, pri purifikácii virusového glykoproteínu imunoafinitnou chromatografiou, pri vyhodnocovaní antigénnej variability virusového glykoproteínu, ako zdroj protilátky jedinej podtriedy pre přípravu sér, pre detekciu virusového antigénu v infikovaných zvieratách.
Claims (2)
- Myší lymfocytárny hybridóm BLVgp51UEO-4E9/32E5 produkujúci monoklonálnu protilátku podtriedy IgG2b proti obalovému glykoproteínu gp51 virusu bovinnej leukémie.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152689A CS272890B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS152689A CS272890B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS152689A1 CS152689A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272890B1 true CS272890B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5349857
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS152689A CS272890B1 (en) | 1989-03-11 | 1989-03-11 | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272890B1 (sk) |
-
1989
- 1989-03-11 CS CS152689A patent/CS272890B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS152689A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2648419B2 (ja) | モノクローナル抗体混合物 | |
| FI83538C (fi) | Foerfarande foer produktion av en hybridomcellinje. | |
| EP0038642B1 (en) | A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample | |
| JPS592276B2 (ja) | ウイルス抗体の製造方法 | |
| US4731237A (en) | Immune response to virus induced by anti-idiotype antibodies | |
| US7871621B2 (en) | Anti-HBs monoclonal antibody | |
| CS272890B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-4e9/32e5 | |
| CS272889B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blv p 24 ueo-25 e 11/8 | |
| CS272886B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-6a12/a7 | |
| CS272888B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 51 ueo-25 e11/2 | |
| CS272887B1 (en) | Mouse lymphocyte hybridome blvgp 30 ueo-94 c 11/2/e11 | |
| WO1990001066A1 (en) | Porcine polyclonal and monoclonal antibodies | |
| Novak et al. | Preparation and characterization of hybridomas producing monoclonal antibodies against human alpha interferon | |
| KR880001757B1 (ko) | 알파 인터페론 정제에 효과가 있는 단일항체의 제조방법 | |
| RU2257414C1 (ru) | Штамм гибридных клеток с3/s-3e5 животных mus musculus l., продуцирующих моноклональные антитела к коксиеллам бернета | |
| SU1631072A1 (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животных MUS мUSсULUS L., используемый дл получени моноклональных антител к гликопротеидному структурному белку вируса бешенства | |
| RU1801117C (ru) | Способ получения монокло- нального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jthfs-про- дуцентмоноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита чело- века, культивируемая клетка гибридомы jti-if3-f5 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека, культивируемая клетка гибридомы jti-id7 - про- дуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцита человека, культивируемая клетка гибридомы jt2-n15 - продуцент моноклонального антитела к моноклональному антителу к белку т4 лимфоцитачеловека | |
| RU93019968A (ru) | Штамм гибридных культивируемых клеток животного mus musculus - продуцент моноклональных антител к с-концевой части белка р24 вируса иммунодефицита человека i типа | |
| CS239800B1 (cs) | Myší lymfocytární hybridom IMG CZAS TU-04 | |
| CS253337B1 (cs) | Myši lymfocytárnf hybridem IMG CZAS RT-14 | |
| CA2039168A1 (en) | Neutralizing monoclonal antibody to infectious pancreatic necrosis virus | |
| SCIENCIE | v. UMAPATHI, Bv se | |
| CN109627333A (zh) | 新疆伊犁株马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体制备方法 | |
| CS270543B1 (cs) | Myši lymfocytáeny hybridóm VU 2-L/5 | |
| JPS6272700A (ja) | ホルモン又は酵素のモノクロナ−ル抗体及びその製造方法とこれを用いた精製方法 |