CZ106794A3

CZ106794A3 - Peptides

Info

Publication number: CZ106794A3
Application number: CZ941067A
Authority: CZ
Inventors: Richard Dr Heng; Trevor Glyn Dr Payne; Laszlo Dr Revesz; Beat Dr Weidmann
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1991-11-04
Filing date: 1992-10-29
Publication date: 1994-12-15
Also published as: EP0611375A1; GB9123326D0; SK51194A3; ZA928511B; FI942061L; FI942061A0; FI942061A7; PT101027A; HU9401303D0; NO941629L; AU2885292A; JPH07500828A; NO941629D0; MX9206306A; CA2116653A1; HUT68200A; NZ244985A; IL103612A0; WO1993009135A1

Description

Oblast techniky

f—	—
“0	1-			O
r~'	> co	CV s		řo <	í o	n<
	Z	co	>		CXX 1
	o	O	σ	co	O
		στ
		ZZ.
!	-K	O			_____ —

Vynález se týká peptidů, které jsou farmaceuticky použitelné, způsobů jejich přípravy, farmaceutických prostředků, které tyto peptidy obsahují a použití těchto prostředků jako léčiv.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu jsou sloučeniny obecného vzorce I

R-/A₁-A₂/_n-A₃-A₄-X-A₅ (I) ve kterém

R znamená atom vodíku, skupinu chránící aminoskupinu nebo popřípadě v kruhu substituovanou benzyloxyskupinu,

A^ znamená Val, Leu, Ala, Ile nebo trimethylsilyl-Ala,

A₂ znamená Phe nebo Tyr, n znamená nulu nebo 1,

A} znamená přímou vazbu, Val, Leu, Ala, Ile, trimethylsilyl-Ala nebo dvojvazný zbytek obecného vzorce (a)

ve kterém je kruh A popřípadě substituován hydroxyskupinou nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, znamená přímou vazbu nebo dvojvazný zbytek obecného vzorce (b)

-N — CH — C0(b) ve kterém

Rj znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a

Y| znamená zbytek vázaný na alfa-uhlíkový atom alfaaminokyseliny, který je popřípadě chráněný, skupinu -CH₂-CH₂-N(C₁_₄alkyl)₂, imidazol-2-yl-methylovou skupinu, benzimidazol-2-yl-methylovou skupinu, 1H-1,2,4triazol-3-y1-methylovou skupinu, pyrazol-3-yl-methylovou skupinu, indazol-3-yl-methylovou skupinu nebo zbytek obecného vzorce (c) nebo (d) • h₂c^xX\n

(c)

(d) ve kterých každá že skupin F?₂ a R^ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, CFj nebo tritylová skupina, přičemž maximálně jedna ze skupin R₂ a R^ je atom vodíku, a každá ze skupin R^ a R^ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupina-,1 alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, CF^, fenylová skupina nebo atom halogenu, přičemž maximálně jedna ze skupin R^ a R^ je atom vodíku, nebo a spolu dohromady tvoří zbytek obecného vzorce (aa)

1)

NH - CH - CO - N - CH - CO

I

R.

(aa) ‘la ^R1 ^Y1 ve kterém má význam uvedený výše a

Rl a R^ spolu dohromady tvoří skupinu -(CH₉)_m, kde m znamená 2, 3, A nebo 5, a

X znamená dvojvazný zbytek obecného vzorce (ep

(β_χ) kde

Rz znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a znamená atom vodíku, CF^, zbytek -CH^-X^-Yj, kde X^ znamená 0 nebo S a Y^ znamená heteroarylovou sku pinu, zbytek ^nebo zbytky obecných vzorců (k) až (m)

- CH--X.-C0-Y. 2 1 4 (k)

(1) nebo

kde znamená tri(Cj_^alkyl)methylovou skupinu nebo zby-

kruh B je pyridyl, kruh C je fenyl nebo pyridyl, každý ze zbytků R? a Rg jsou nezávisle na sobě alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, CF^, atom halogenu, nitroskupina nebo kyanoskupina, a každý ze zbytků R_?j r _a r^ jsou nezávisle na sobě nitroskupina, kyanoskupina, CF^, karbamoylová skupina, 802^12’ ^-6H = CH-CN nebo -CH = CHC0₂Rj2» ^kcíe ^12 -Í^e lová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku, znamená také dvojvazný zbytek obecného vzorce (e^)

alkyl alkyl alkyl (e₂)

2) X když znamená atom vodíku, nebo znamená dvojvazný zbytek obecného vzorce (f)

a znamená skupinu -Z^-Z₂~Y2> ^de každé ze Z^ a Z₂ jsou nezávisle na sobě přímá vazba nebo zbytek alfa-aminokyseliny a Y₂ znamená NH₂, C^_^alkylaminoskupinu, di(C^_^alkyl)aminoskupinu nebo heterocyklický zbytek připojený atomem dusíku k Z₂, nebo zbytky obecných vzorců (k) až (o), jak jsou definovány výše, nebo OR^j, nebo ^^^4^15’ ^de R^ znamená alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinou OH nebo přerušenou kyslíkem a každé z R^ a ^15 ·ΐ^{5ου nez}ávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina s 5 až 7 atomy uhlíku nebo benzylová skupina, nebo

3) X znamená dvojvazný zbytek obecného vzorce (g)

(g) a A₅ znamená skupinu ^-Zi^_Z2^-Y2’ ^^{ak definována}výše, nebo

4) X znamená dvojvazný zbytek obecných vzorců (h) nebo (j)

a znamená zbytek obecných vzorců (k) až (o), -Ch^-Yj nebo -CH^-Xi-Yj, jak jsou definovány výše, s tou výhradou, že pouze jedna ze skupin A^ a A^ může znamenat přímou vazbu, když n je nula, a každá ze skupin A-j a A^ je jiná než přímá vazba, když n je 1, a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy, ve volné formě, ve formě soli nebo ve formě komplexů.

Příklady chránících skupin v substituentu R jsou například uvedeny v Protective Groups in Organic Synthesis, T. W. Greene, 3.Wiley and Sons NY (1901), 219 až 207 , a jsou to například acylová skupina, jako je acetylová skupina, methoxysukcinylová skupina, hydroxysukcinylová skupina nebo benzoylová skupina, popřípadě substituovaná na fenylovém kruhu například v para-poloze methoxykarbonylovou skupinou, methoxyskupinou nebo nitroskupinou, alkoxykarbonylová skupina, jako je terč. butyloxykarbony lová skupina, arylnethoxykarbonylová skupina, jako je 9-fluorenylmethoxykarbonylová skupina nebo benzyloxykarbonylová skupina, popřípadě substituovaná v para-poloze methoxyskupinou, nitroskupinou, chlorem nebo v meta-poloze fenylovou skupinou, arylmethylová skupina, jako je benzylová skupina, popřípadě v kruhu substituovaná v para-poloze methoxyskupinou, nitroskupinou nebo chlorem, nebo arylsulfonylová skupina, jako je fenylsulfonylová skupina, popřípadě substituovaná v kruhu v para-polcze methylovou skupinou nebo methoxyskupinou, nebo naftylsulfonylová skupina, popřípadě substituovaná v kruhu, například aminoskupinou nebo dialkylaminoskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku v každém z alkylů.

Jestliže R znamená v kruhu substituovanou benzyloxyskupinu, je to s výhodou benzyloxyskupina substituovaná hydroxyskupinou nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku. Výhodnou skupinou R je nesubstituovaná benzyloxyskupina.

Výhodným atomem halogenu je atom fluoru nebo atom chloru.

Jestliže A} je substituovaný zbytek obecného vzorce (a), pak je tento zbytek s výhodou substituován alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, s výhodou v para-poloze vůči skupině -C=0.

Alfa-aminokyselinou se rozumí v přírodě se vyskytující nebo komerčně dostupná nebo nepřírodní alfa-aminokyselina nebo její optický isomer. Nepřírodní alfa-aminokyselinou je alfa-aminokyselina, která není zabudována do proteinu codle mRNA pravidla, například beta-Nal, fluor-alfa-aminokyselina, . jako je fluoralanin, trimethylsilyl-Ala nebo alf a-ani nokyselina, jako je

COOH

NH

Wn.

Η_?Ν ch-cooh kde je celé číslo od 1 do 6 a n₂ je celé číslo od 1 do 12

Chránící skupiny, které mohou být přítomny v Yp jsou skupiny, které chrání 0, S nebo N funkční skupinu v postranním řetězci aminoskupin alfa-aminokyseliny. N-chránící skupiny jsou například skupiny uvedené výše pro R nebo alkylová skupina se 3 až 5 atomy uhlíku, jako je isopropylová skupina, formylová skupina, zbytek cukru, jako je 1-deoxy-fruktosyl nebo alfa-glukosyl(l-4)-deoxyfruktosyl, dihydroxyalkylová skupina se 3 až 6 atomy uhlíku, jako je dihydroxypropylová skupina, cykloalkylová skupina s 5 až 7 atomy uhlíku, jako je cyklohexylová skupina nebo tropinylová skupina. 0- a S-chránící skupiny pro hydroxylové a thiolové funkční skupiny jsou známé a mohou to být například methylová skupina, terč.butylová skupina nebo benzylová skupina.

Jestliže Y2 znamená heterocyklický zbytek, může to být na příklad pěti- nebo šestičlenný kruh, například piperidincskupina nebo pyrrolidinylová skupina.

Jako příklady pro heteroarylové skupiny pro substituent Υlze uvést například pěti-, šesti- nebo sedmičlenné nenasycené heterocyklické zbytky, které obsahují alespoň jeden atom dusíku a popřípadě další heteroatomy, jako je dusík, kyslík nebo síra. Výhodným Y-j je heteroary lová skupina obsahující od 1 do 4 atomů dusíku, například pyridylová skupina, triazolylová skupina, tetrazolylová skupina, triazindionylová skupina.

V kruhu B zbytku obecného vzorce (o) může být atom dusíku v poloze ortho, meta nebo para. Jestliže kruh C ve zbytku obecného vzorce (k) je pyridyl, pak to může být 3-, 4- nebo 5-pyridyl.

Zbytky obecných vzorců (e^), (62), (f), (g) a (j) jsou odvozeny od Asp a obsahují jeden asymetrický atom uhlíku a zbytek obecného vzorce (h) obsahuje dva asymetrické atomy uhlíku, takže se u nich vyskytuje isomerismus. Rozumí se samo sebou, že předložený vynález zahrnuje všechny jednotlivé iscmerní formy a diastereoisomery, jakož i jejich směsi, například racemáty, pokud není uvedeno jinak.

Zbytek obecného vzorce (ep připojený k substituentu A_$, který znamená atom vodíku, může existovat jak v cyklické formě tak v necyklické formě, jak je například znázorněno rovnicí:

Rozumí se samo sebou, že v případě výskytu tautomerních forem, předložený vynález zahrnuje jak formy laktolu tak formy oxo-karboxylové kyseliny, t.j. i když sloučeniny obecného vzorce I, kde X znamená zbytek obecného vzorce (e^), jsou výhodně označovány pouze jako forma oxo-karboxylové kyseliny, nelze chápat vynález pouze omezeně na zvláštní nomenklaturu nebo grafické znázornění použité pro tyto sloučeniny. Obdobné úvahy platí též pro výchozí sloučeniny vykazující laktol/oxo-karboxylová kyselina tautomerii, jak je popsáno výše.

Totéž platí také pro zbytek obecného vzorce (h), který může též existovat jak v lineární formě tak v cyklické formě, jak je znázorněno následující rovnicí:

h⁺/-h₂o js base/voda

a pro sloučeniny obecného vzorce I obsahující zbytek obecného vzorce (h) a pro odpovídající výchozí sloučeniny.

Výrazem fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy” se rozumí estery a amidy, které jsou hydrolysovatelné za fysiologických podmínek na alkoholy nebo aminy, které jsou samy o sobě fysiologicky přijatelné, t.j. které jsou neto xické při požadovaných dávkových hladinách.

Tyto estery nebo amidy lze připravit esterifikací nebo amidací sloučeniny obecného vzorce Γ, kde X znamená zbytek obsahující karboxyskupinu. Tyto estery zahrnují estery s alifatickým nebo alicyklickým alkoholem nebo polyolem obsahujícím 1 až 12 atomů uhlíku. Amidy zahrnují amidy s alifatickými aminy, například s alkylaminy s 1 až 4 atomy uhlíku, s alkoxyalkylaminy s 1 až 4 a torny uhlíku v alkoxyskupině a s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylové skupině, jako je beta-methoxyethylamin, nebo s anilinem .

Sloučeniny obecného vzorce I mohou existovat například ve volné formě, ve formě soli s kyselinou nebe ve formě komplexů. Soli s kyselinami se mohou tvořit například s organickými kyselinami, s polymerními kyselinami a s anorganickými kyselinami. Těmito solemi s kyselinami jsou například hydrochloridy a acetáty. Soli mohou být také tvořeny s karboxylovou skupinou přítomnou ve sloučeninách obecného vzorce I, například soli s alkalickými kovy, jako je sodík nebo draslík, nebo dále substituované nebo nesubstituované amoniové soli. Komplexy jsou například tvořeny ze sloučenin obecného vzorce I přidáním anorganické látky, například anorganických solí nebo hydroxidů, jak jsou Ca- a Zn-soli a/nebo přidáním palymerních organických látek.

Dále jsou uvedeny významy výhodných substituentů použitých bud'jednotlivě nebo v jakékoliv kombinaci nebo subkombinaci, které mohou být obsaženy ve sloučeninách obecného vzorce I:

1. R je skupina chránící aminoskupinu nebo benzyloxyskupina, s výhodou skupina chránící aminoskuoinu. R je s výhodou benzy loxyskupina, jestliže n je nula a j_e zbytek obecného vzorce (a).

2. Každá ze skupin A^ a je jiná než přímá vazba.

3. n je nula.

4. A} je zbytek obecného vzorce (a), kdy.ž n/je nula.

5. je přímá vazba, Val, Leu, Ala, Ile nebo trimethylsilyl-Ala.

6. R^ je atom vodíku nebo methylová skupina, výhodně atom vodíku.

7. Y₁ je zbytek připojený k alfa-atomu uhlíku alfa-aminokyseliny vybrané ze skupiny zahrnující Ala, Leu, His, Phe, Met, Trp, trimethylsilyl-Ala a popřípadě v postranním řetězci chráněnou Arg, Orn a Lys, nebo je zbytek obecného vzorce (c).

8. A^ a A^ mohou také spolu dohromady tvořit zbytek obecného vzorce (aa), když n je nula,

9. m je 2 nebo 3.

10. X je zbytek obecného vzorce (e^) a A^ je jiné než atom vodíku.

11. X je zbytek obecného vzorce (g).

12. X je zbytek obecného vzorce (h) nebo (j).

13. 8^ je atom vodíku nebo methylová skupina, s výhodou atom vodíku.

14. Z^ v je zbytek přírodní alfa-aminokyseliny, s výhodou aromaticko-heterocyklické alfa-aminokyseliny, zejména Pro.

15. Z£ v je zbytek přírodní alfa-aminokyseliny, s výhodou alifatické alfa-aminokyseliny, zejména alifatické alfaaminokyseliny neobsahující žádné další funkční skupiny, nejvýhodněji Val.

16. X je zbytek obecného vzorce (e^), popřípadě esterifikovaný nebo amidovaný a A^ je zbytek obecného vzorce (k), (1) nebo (o).

17. X je zbytek obecného vzorce (e^), (h) nebo (j), popřípadě esterifikovaný nebo amidovaný a A₅ je -C^-X-^-Y-j , s výhodou -CH^-S-Y-j nebo -CH^-Y^·

10. X je zbytek obecného vzorce (h) nebo (j), popřípadě esterifikovaný nebo amidovaný a je zbytek obecného vzorce (k).

19. X je zbytek obecného vzorce (j), popřípadě esteriflkávaný nebo amidovaný a A^ je zbytek obecného vzorce (m).

20. Zbytek obecného vzorce (m) je monosubstituovaný, s výhodou v poloze para, a ještě výhodněji to je 4-nitrofenyl.

21. Všechny přítomné zbytky alfa-aminokyselin kromě X mají L konfiguraci. X má D nebo L konfiguraci.

22. Asymetrický atom uhlíku ve zbytku obecného vzorce (h) nesoucím OH skupinu má S konfiguraci. Výhodně má asymetrický atom uhlíku ve zbytku obecného vzorce (j) nesoucím skupinu R konfiguraci.

Výhodnými jsou také sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých n je nula, A^ je přímá vazba, Val, Leu, Ala, Ile nebo trimethylsilyl-Ala, A^ má význam uvedený výše, nebo a A^ spolu dohromady tvoří zbytek obecného vzorce (aa), jak je definován výše, a

1) X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (e?), jak jsou definovány výše, a A^ je atom vodíku, nebo

2) X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (f) a je zbytek obecného vzorce (k), (1) nebo (m), kde X^ je 0,

3) X je zbytek obecného vzorce (g) a A^ je -Z^-₂ nebo

4) X je zbytek obecného vzorce (j) a je zbytek obecného vzorce (k), (1) nebo (m), kde X^ je 0.

Podstatou vynálezu je také způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I, který se vyznačuje tím, že se:

a) odstraní alespoň jedna chránící skupina ze sloučeniny obecného vzorce I v chráněná formě nebo se přidá chránící skupina R k N-koncové skupině sicučeniny ooecného vzorce I, nebo se

b) převede jedna sloučenina obecného vzorce I na jinou sloučeninu obecného vzorce I, nebo se

c) spojí spolu dohromady amidickou vazbou dva peptidové fragmenty, přičemž každý z nich obsahuje alespoň jednu aminokyselinu v chráněné nebo nechráněné formě a jeden peptidový fragment obsahující zbytek obecného vzorce (e^) až (j), jak jsou definovány výše, přičemž peptidové fragmenty jsou takové, že se získá chráněný nebo nechráněný peptid mající sekvenci podle obecného vzorce I, a popřípadě se odstraní chránící skupina nebo chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce I v chráněné formě, nebo se

d) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (h) a je zbytek obecného vzorce (k), (1) nebo (o) nebo nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III

		-A.-X'-CH_O-Z 4 2 a	(ΙΠ)
kde	R, až A^ a n mají	výše uvedený	význam, X” je zby-
tek	obecného vzorce (e^)	nebo (h) a Z a	je odštěpitelná

skupina, například atom halogenu, s odpovídajícím fenolem, thiofenolem nebo HX^-pyridinem nebo s kyselinou obecného vzorce HX^-CO-Y^ nebo s jejím funkčním derivátem nebo s HX^-Y^, nebo se

e) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I

H 0

(I) kde R, až A$ a n mají výše uvedený význam a R^ je alifatický nebo alicyklický zbytek obsahující 1 až 12 ato mů uhlíku, oxiduje sloučenina obecného vzorce V

H OH

kde R, A₁ až A₅, n a R^_ó mají výše uvedený význam, a isoluje se takto vzniklá sloučenina obecného vzorce I ve volné formě nebo ve formě soli nebo ve formě komplexu.

Postupy (a) až (e) se mohou provádět způsoby známými ze stavu techniky.

Odstranění chránící skupiny ve stupni (a) může taká zahrnovat odstranění R na N-koncové skupině sloučeniny obecného vzorce I. Například, jestliže R je benzylaxykarbonylová skupina, může se tato skupina odstranit hydrogenací v přítomnosti katalysátorů, například palladia.

V souhlasu s postupem podle stupně (b) se může například pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X obsahuje karboxyskupinu, hydrolysovat sloučenina obecného vzorce I, kde X obsahuje esterifikovanou nebo amidovanou karboxyskupinu.

Tato hydrolysa se může provádět příslušnou alkalickou nebo kyselou hydrolysou, například v přítomnosti trifluoroctové kyseliny.

Dále v souhlasu s postupem podle stupně (b) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X obsahuje esterifikovanou nebo amidovanou karboxyskupinu, se může (trans)esterifikovat nebo amidovat sloučenina obecného vzorce I, kde X obsahuje karboxyskupinu nebo esterifikovanou karboxyskupinu. Tato tvor16 ba esteru nebo amidace se může provádět použitím způsobů známých ze stavu techniky, například převedením karboxyskupiny na funkční reaktivní skupinu, například na odpovídající karbonylhalogenid nebo anhydrid, nebo použitím sloučeniny obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (h) ve formě laktonu, a reakcí takovéto skupiny s vybraným alkoholem nebo aminem.

Dále v souhlasu s postupem podle stupně (b) pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (g), se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (e^) a je atom vodíku, se sloučeninou obecného vzorce II

H₂N-NH-C0-A₅ (II) kde A^ má význam uvedený výše. Tento způsob se může provádět analogicky podle známých způsobů používaných pro přípravu semikarbazonů.

Sloučeninu obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (ep, lze také převést známými způsoby na sloučeninu obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (ep, a naopak.

Postup podle stupně (c) se může provádět způsoby známými z chemie peptidů. Peptidovým fragmentem obsahujícím zbytek obecného vzorce (ep až (j), se také rozumí zbytek obsahující chránící skupinu na části -NR^- a příslušně končící, například A^ nebo ύΗ^-Ζθ, na opačném konci.

Postup podle stupně (d) se může provádět za použití OessMartinova činidla, například v přítomnosti base nebo halogenem se srážící stříbrné soli, nebo oxidačním postupem podle Swerna.

Je-li to žádoucí při těchto reakcích lze použít pro funkční skupiny, které se nezúčastní reakce, chránící skupiny.

Mohou to být například skupiny chránící aminoskupinu, skupiny chránící karboxyskuoinu, acetalové skupiny atd. Po skončení požadované reakce se chránící skupiny mohou odstranit.

Každý z výše uvedených postupů lze provádět za použití výchozích látek ve formě jednoho nebo dalšího jednotlivého op17 tického isomeru nebo ve formě jejich směsi /podle asymetrických atomů uhlíku přítomných ve zbytcích obecného vzorce (e^) až (j ) ve významu X nebo v prekursoru těchto zbytků/. Obvykle se jako výchozí látky používají S- nebo R-enantiomery, přičemž se získají sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých asymetrický atom uhlíku ve zbytcích obecného vzorce (e^) až (j) má S nebo R konfiguraci.

Výchozí látky používané ve stupních (d) nebo (e) postupu podle vynálezu lze připravit analogicky s postupem podle stupně (c).

Pokud není příprava výchozích látek jmenovitě popsána, jsou tyto sloučeniny známé nebo je lze připravit analogicky podle známých postupů, které se v praxi používají.

Následující příklady slouží k bližšímu objasnění předloženého vynálezu. Všechny teploty jsou uvedeny ve °C.

V příkladech jsou používány následující zkratky:

THF	= tetrahydrofuran
TFA	= trifluoroctová kyselina
MeOH	= methanol
EtOAc	= ethylacetát
DCC	= dicyklohexylkarbodiimid
HOST	= hydroxybenzotriazol
Z	= benzyloxykarbony1
Fmoc	= 9-fluorenylmethoxykarbonyl
a	= amorfní

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Z-Val-Met-Asp(OH)-H

Beta-terč.butylester dimethylacetalu Z-Val-Met-aspartaldehydu (1,17 g) se dá do 150 ml), přidá se TFA (15 ml) a voda (1 ml) a reakční směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 2,5 hodiny. Rozpouštědlo se odpaří, přidá se dvakrát toluen a znovu se odpaří. Krystalický zbytek se rozpustí ve vodě (60 ml) za zahřátí, dekantuje se od nerozpuštěné látky a prekrystaluje se při teplotě 5 °C, přičemž se získá první podíl produktu., teploty tání 117 °C. Všechny matečné louhy se spojí a chromatografují se (Si0₂, aceton/hexan/EtOAc 60/40/0,5) a získá se druhý podíl produktu a prekrystaluje se po rozmělnění s vodou.

Příklad 2

Z-Val-Met-Asp(OH)-H semikarbazon

Sloučenina podle příkladu 1 (0,27 g, 0,55 mmol) v MeOH (2 ml) se smísí se semikarbazidem, HC1 (0,6 ml 1 molárního roztoku), načež se přidá 5 kapek pyridinu. Produkt vykrystaluje po 10 minutách při teplotě místnosti, má teplotu tání 253 až 235 °C.

Příklad 3

Z-Val-Met-Asp(OH)-H semikarbazonyl-Pro-Val-N(CH^)₂

Sloučenina podle příkladu 1 (0,48 g, 1 mmol) se rozpustí ve směsi MeOH (2 ml), vody (0,5 ml) a 3 kapek pyridinu. N-(hydrazinokarbonyl)-Pro-Val-N(CH^)₂ (0,3 g, 1 mmol) se rozpustí v MeOH (1 ml), vodě (2 ml) a 3 kapkách 2N HC1. Oba roztoky se smísí a zahřívají se 2 minuty na teplotu 40 až 50 °C. Produkt vykrystaluje za chlazení, má teplotu tání 118 až 120 °C

Opakováním postupu podle příkladu 1 se za použití odpovídajících výchozích sloučenin připraví následující sloučeniny:

Příklad 4

Z-Val-Phe-Asp(OH)-H

Příklad 5

Z-Val-His-Asp(OH)-H Opakováním postupu podle příkladu 2 nebo 3 se za použití odpovídajících výchozích sloučenin připraví následující sloučeniny obecného vzorce IA κι /NHA, z-a₃-a₄-n—⁵

CIA)

C0₂H kde A-j, A^ a A^ mají výše uvedený význam,

příklad č.	^A3		^A5	teplota tání °C
6	Val	Phe	H	a
7	Val	His	H	150
8	Val	Phe	Pro-Val-N(CH₃)₂	126 - 129
9	Val	His	Pro-Val-N(CH₃)₂
10	Ala-Tyr-Val	Phe	H	205
Příklad	11

(3S)-3-(Z-valyl-fenylalanyl)-amino-5-(2,6-dimethylbenzoyloxy)4-oxopentanová kyselina

Na terč.butylester (3S,4RS)-3-(Z-Val-His)amino-4-hydroxy

5-(2,6-dimethylbenzoyloxy)pentanové kyseliny (0,6 mmol) se působí Dess-Martinovým činidlem (0,77 mmol) v Ch^Cl? (4 ml) po dobu 45 minut a pak se směs přefiltruje. Přidá se aceton a 0,5 N NaOH a aceton se odpaří. Zbylá krystalická látka se promyje vodou, okyselí se 10 % kyselinou vinnou a extrahuje se EtOAc. Spojené EtOAc extrakty po odpaření poskytnou terc.butylester produktu ve formě žlutých krystalů. Ty se rozpustí v (4 ml), přidá se TFA (4 ml) a směs se míchá při teplotě místnosti po dobu 15 minut. Potom se směs odpaří k suchu a chromatografuje se (Si0_2> aceton/hexan/EtOAc 60/40/1), čímž se získá požadovaný produkt ve formě mírně zbarvených krystalů.

Příklad 12

Éthylester (Z-valyl-alanyl)-(3R,4S)-3-amino-4-hydroxy-5-(2,6dichlorbenzoyloxy)pentanové kyseliny

Ethylester (Z-valyl-alanyl)-(3R,4S)-3-amino-4,5-dihydroxypentanové kyseliny a 4-dimethylaminopyridin se rozpustí v pyridinu a po kapkách se přidá 2,6-dichlorbenzoylchlorid. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, potom se přidá led a voda a směs se extrahuje AcOEt. Organická vrstva se promyje vodou, potom roztokem NaCl, vysuší se Na2S0^, přefiltruje se, odpaří a surový produkt se chromatografuje. Získá se sloučenina uvedená v názvu.

(3R,4RS)-derivát sloučeniny uvedené v názvu se připraví následujícím způsobem:

Z-Val-Ala-0H (0,26 mmol), DCC (53 mg, 0,26 mmol) a HOBT.F^O (39 mg, 0,26 mmol) se rozpustí ve směsi THF/DMF (2 ml/2 ml) a míchá se po dobu 5 minut, načež se přidá terč.butylester (3S,4RS)-3-amino-4-hydroxy-5-(2,6-dimethylbenzoyloxy)pentanové kyseliny (07 mg, 0,26 mmol) v THF (2 ml). Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, potom se odpaří a chro21 matografuje se (SiC^» EtOAc/MeOH/NH95/5/0,5), čímž se získá (3R,4RS)-derivát sloučeniny uvedené v názvu.

Příklad 13

Ethylester (Z-valyl-alanyl)-(3R)-3-amino-4-oxo-5-(2,6-dichlorbenzoyloxy)pentanové kyseliny

K roztoku oxalylchloridu v se při teplotě -50 °C přidá po kapkách dimethylsulfoxid v Po 15 minutách se přidá po kapkách roztok sloučeniny podle příkladu 12 v Ch^Cl? a reakční směs se míchá při teplotě -40 °C po dobu 1 hodiny. Potom se přidá triethylamin a v míchání se pokračuje po dobu 3 hodin při teplotě místnosti. Pak se přidá voda a reakční směs se extrahuje CH₂C1₂. Organická vrstva se promyje roztokem NaHCO^ a roztokem NaCl, vysuší se Na^O^, přefiltruje se a odpaří. Zbytek se chromatografuje a získá se sloučenina uvedená v názvu.

Opakováním postupu podle příkladů 1 až 3 a 11 až 13 se za použití odpovídajících výchozích sloučenin připraví následující sloučeniny obecného vzorce 18

(IB)

kde A-j, A^, R* a R^ mají významy uvedené níže.

	CM
	O O
X
o	N4
(U	c
X	XD
M-z	4-»
o	CO
o	4-» O r—< D.
CM O	ω
	4->
CD
«*4	o
r4	X)
CD	ω
	c

Γ-Λ

Ό

CD

S-i

Xu

Cl

	í—(	r-4	1“4	r-4
<—1	Γ—f		r-4		X	>,	>.	i-4
>>	X		X	o	o	O	o	X
o	O		O	N	N	IM	N	O
IM	N		N	C	C	c	C	N
c	c		C	ω	ω	ω	ω	c
ω	ω	i—t	cu	XI	XD	XI	X	ω
n	XD		xd	1	1	1	1	XD
1	1	c	1		CM		r-\	1
ω	ω	ω x	r-4	u.	O	Li_	U-	»-4
X		«Μ	O	C_5	2:	LJ	O	O
-w	•r4	I	•r4	·»—t	•*4	•«4	•c4	•r4
Ό	TZJ	CM	XD	Π	XD	XD	xd	XD
1	1	O	I	1	1	1	1	1
M3	NO	X	NO	M3	NO	NO	NO	NO
*	·»	1			*·.		«*
CM	CM	CL	CM	CM	CM	CM	CM	CM

, 6-diCl-benzoyl

CM příklad R_x /alfa/g c (MeOII) nebo teplota tání

CM o

CM

C\

CM o

o

I—

VO

CM

I

r—1	^-4	l—i
	>>	>>
o	a	o
N	N	N
c	c	C
tu	tu	ω
-Ω	10 \|	JO
1 r-H	1 r-4	i—i
o	co	C_3
•fH	•«-4	•r-4
Ό	-a t	O
vo	1 VO	vC
	*»	F.
CM	CM	CM

CM

O ω in o

JZ -rH tu

CL. X <

ra >

i u

>>

FI ra ra >

m vo r** cm cm CM tn ra >

o

CM ro o

o o

i—4

I

ra >

σ\

CM vo

C\ o

o

Cv

ra >

o r*\

-diCl-bcnzoy1

VO

CM

CM o

o příklad Λ-j Λ₄ R_y R_x /alfa/_Q c (MeOH) nebo teplota ,tání

XXX

Nilo σ\ o <r <r ir\

I CM m lt\

F**\

LT\

CN

C_3 □

příklad Λ-, Λ₄ R_y R_x /alfa/^^u c (MeOH) nebo teplota tání

sloučeniny mají R,S konfiguraci v aspartylové části

Příklad 50

/alfa/*⁰ = -20,3 ⁰ c = 1 v MeOH

Příklad 59

Příklad 60

O-CO /alfa/*⁰ = -21,5 ⁰ c = 1,07 MeOH

Příklad 61

Příklad 62

Opakováním postupu podle příkladů 1 až 3 a 12 až 13 a za použití odpovídajících výchozích sloučenin se připraví následující sloučeniny obecného vzorce IC

(IC) kde A., R a R mají význam uvedený níže:

X y

příklad	^Λ4	R y	R X	X
63	Ala	H	2,6-diCl-benzoyl Cl \_	R,S
64	Ala	C₂ ^H5	-^C°-/Oy Cl	R
65	Ala	t-C₄ ^H9	2,6-diCl-benzoyl	R,S
66	Ala	-C_oH_a-0CH, 2 4 3	2,6-diCl-benzoyl	R,S

Příklad 67

Terc.butylester (3RS)-3-(Z-valyl-fenylalanyl)amino-4-oxo-6(p-nitrofenyl)-trans-5-hexenové kyseliny

5-diethylfosfonát terč.butylesteru (3RS)-3-(Z-valyl-fenylalanyl)amino-4-oxo-pentanové kyseliny (0,2 g, 0,29 mM) se rozpustí v THF (15 ml) při teplotě 5 °C. Přidá se NaH (25 mg, 0,59 mM) a směs se míchá po dobu 10 minut. Při teplotě 0 °C se přidá p-nitrobenzaldehyd (0,18 g, 1,1 mM) v THF (2 ml) a reakční směs se při této teplotě míchá po dobu 45 minut. Reakční směs se potom naleje do 5 % kyseliny vinné a extrahuje se ethylacetátem, organická fáze se vysuší Na₂S0^, odpaří se a produkt se čistí chromatograficky. Získá se sloučenina uvedená v názvu.

Příklad 68

Beta-methylester dimethylacetalu Z-Val-Phe-aspartaldehydu

Z-Val-Phe-Asp(OH)-H (0,8 g) se rozpustí v MeOH (25 ml) obsahujícím 8 % HC1, nechá se při teplotě místnosti přes noc, potom se odpaří k suchu a zbylé krystaly se promyjí etherem, přičemž se získá sloučenina uvedená v názvu ve formě bílých krystalů, teploty tání 168 až 171 °C.

Výchozí sloučeniny se připraví následujícími způsoby:

Příklad 69

Terč.butylester (3S)-3-(fluorenylmethoxykarbonyl)amino-5-jod4-oxo-butanové kyseliny

K terč.butylesteru (3S)-3—(fluorenylmethoxykarbonyl)amino-3-karboxybutanové kyseliny (3,5 g, 0,5 mmol) v THF (60 ml) se při teplotě -10 °C přidá triethylamin (1,3 ml, 9,6 mmol) a potom ethylchlorformiát (0,92 ml, 9,6 mmol). Po 10 minutách se pomalu přidá roztok diazomethanu v etheru a reakční směs se míchá při teplotě 0 až 5 °C po dobu 45 minut. Při teplotě 5 až 10 °C se přidává HC1 (2 N) v etheru, až ustane vývin plynu. Reakční směs se odpaří k suchu, vyjme se do acetonu (50 ml), přidá se Nal (4 g) a míchá se při teplotě místnosti po dobu 1 hodiny. Potom se přidá ether (150 ml) a reakční směs se přefiltruje a odpaří. Zbytek se chromatografuje (SiO?, EtOAc/hexan), přičemž se získá sloučenina uvedená v názvu ve formě světle žlutých krystalů.

Příklad 70

Terc.butyletser (3S)-3-(fluorenylmethoxykarbonyl)amino-5-(2,6dimethylbenzoyloxy)-4-oxo-pentanové kyseliny

Terč.butylester (3S)-3-(fluorenylmethoxykarbonyl)amino31

5-jod-4-oxo-butanové kyseliny (1 g, 1,0 mmol), 2,6-dimethylbenzoová kyselina (0,5 g, 3,3 mmol) a AgOAc (0,6 g, 3,6 mmol) se rozpustí v acetonu (25 ml) a zahřívá se k varu po dobu 1 hodiny. Po filtraci a odpaření se surový produkt chromatografuje (SÍO2, ether/hexan 3/7) a získá se sloučenina uvedená v názvu.

Příklad 71

Terč.butylester (3S)-3-(fluorenylmethoxykarbonyl)amino-5-(4nitrofenoxy)-4-oxo-pentanové kyseliny

Terč.butylester (3S)-3-(fluorenylmethoxykarbonyl)amino5-jod-4-oxo-butanové kyseliny (1 g, 1,8 mmol), p-nitrofenol (0,5 g, 3,7 mmol) a (0,38 g, 2,8 mmol) se zahřívají k va ru v acetonu (6 ml) po dobu 30 minut, načež se přidá CI^C^ a organická fáze se promyje 2 N NaHCO^. Spojené organické fáze se vysuší, odpaří a chromatografují (S1O2, EtOAc/hexan 2/8), přičemž se získá sloučenina uvedená v názvu ve formě žlutého oleje.

Příklad 72

Ethylester (Z-valyl-alanyl)-(3R,4S)-3-amino-4,5-dihydroxypentanové kyseliny

a) Ethyl-(3R,4S)-3-benzylamino-4,5-(isopropylidendioxy)pentanoát (Y. Yamada, Tetrahedron Letters 1983, 24, 3009) a 10 % Pd/C v ethanolu se třepou při teplotě místnosti v atmosféře vodíku po dobu 30 minut. Filtrací a odpařením reakční směsi se získá ethy1-(3R,4S)-3-amino-4,5-(isopropy1idenoxy)pentanoát, který se použije dále bez dalšího čištění.

b) Z-Val-Ala-0H se rozpustí v THF, přidá se HOBT.h^O a DCJ při teplotě 5 °C. Reakční směs se míchá po dobu 20 minut při teplotě 5 °C, načež se přidá diisopropylethylamin a ethyl(3R,4S)-3-amino-4,5-(isopropylidendioxy)pentanoát v THF. Reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti, přefiltruje se, odpaří a chromatografuje se. Získá se ethylester (Z-valyl-alanyl)-(3R,4S)-3-amino-4,5-(isopropylidendioxy)pentanové kyseliny.

c) Sloučenina podle příkladu 74 b) se rozpustí v AcOH/I^O (75/25) a míchá se při teplotě 40 °C po dobu 4 hodin. Po odpaření se přidá voda a směs se extrahuje AcOEt. Spojené extrakty se promyjí vodou, roztokem NaHCO^, vysuší Na₂S0₄, přefiltruje se a odpaří. Získá se sloučenina uvedená v názvu.

Sloučeniny obecného vzorce I a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery a amidy a jejich farmaceuticky přijatelné soli (zde označované jako sloučeniny podle vynálezu) vykazují farmaceutickou účinnost a jsou proto použitelné jako léčiva.

Sloučeniny podle vynálezu zejména inhibují IL-lbeta sekreci, jak je patrné z následujících provedení in vitro testu za použití THP-1 buněk a in vivo testu:

a) 900 yul THP-1 buněk (0,5 x 10^ buněk) spolu s 100 U gama-interferonu/0,9 ml RPMI 1640 media (obsahujícího 2 mM L-glutaminu a 5 % teplem inaktivovaného sera z plodu telete) se pipetuje do 24 kalíšků kultivačních misek. Potom se přidá 100 /Ul testované sloučeniny. Po 3 hodinách se při teplotě 37 °C v atmosféře 5 % CO₂/95 % vzduchu přidá 10 ^ul lipopolysacharidu (500 /ug/ml) a inkubace pokračuje dalších 40 hodin. Do pokusu se zahrnou příslušné kontroly (s a bez stimulu, rozpouštědla). Media se pak vyjmou a vyčeří se centrifugací při 1000 g po dobu 10 minut, načež se do kalíšků přidá 1,0 ml 0,01 % digitoninu, aby došlo k lysi buněk , které se zkypří a seškrábnou gumovou stěrkou a ponechají se při teplotě 4°C po dobu 10 minut. Ihned po tom se provede měření laktát dehydrogenasy a vzorky se skladují při teplotě -20 °C až do dalších stanovení.

Těmito testy jsou: IL-lbeta (medium a lysát), IL-6 (medium), TNF-alfa (medium), PGE2 (medium a lysát), laktát dehydrogenasa (LDH) a DNA (lysáty). Testy IL-lbeta, IL-6 a TNF-alfa se stanoví použitím obchodně dostupných ELISA souprav (Cistron), PGE2 se měří použitím standardního RIA a DNA se měří fluorometricky použitím DAPI.

V tomto testu sloučeniny podle vynálezu selektivně inhibují uvolňování IL-lbeta v koncentracích od asi 0,01 do 100 /UM. Na rozdíl od toho hladiny IL-6, TNF-alfa, PGE2 a DNA zůstávají v podstatě neovlivněny a sloučeniny jsou netoxické, protože uvolňování LDH je nezměněno. Například bylo stanoveno, že sloučeniny podle příkladů 40 a 50 mají hodnotu IC^g (koncentrace sloučeniny, která inhibuje 50 % uvolňování IL-lbeta) nebo 0,1 /UM.

b) LPS-horečka

Samcům Tuttlingen SD krys (150 až 160 g) se injikuje suspense LPS (Sigma, č. L—5886, 100 yug/5 ml glukosový roztok podkožně). Za 2 hodiny se měří tělesná teplota pomocí termistorového rektálního čidla připojeného na ELLAB teploměr. Po 4 hodinách se aplikuje testovaná sloučenin per os a po dalších hodinách (6 hodin po aplikaci LPS) se znovu změří teplota. Přírůstek teploty naměřený u neošetrené kontroly se počítá jako 100 % a u ošetřené skupiny se tento vyjadřuje jako procenta této hodnoty. ED^g je dávka způsobující 50 % inhibici přírůstku teploty stanovené u kontrolních krys. Při tomto testu sloučeniny podle vynálezu inhibují přírůstek teploty indukovaný LPS při aplikaci dávky v rozmezí od 0,001 do 0,1 mg/kg per os. Například bylo stanoveno, že sloučeniny podle příkladů a 50 mají každá hodnotu ED^g 0,01 mg/kg per os a sloučenina podle příkladu 51 má hodnotu ED^g 0,05 mg/kg per os.

c) Otoky tlapek u krys vyvolané carrageenanem

Pro každou skupinu se peužijí 50FA samci krys o tělesné hmotnosti 150 až 170 g. Testovaná sloučenina se aplikuje orálně jako suspense ve fysiologickém solném roztoku a 0,5 % tragacanthu, a to 1 hodinu před injekcí carrageenanu. Carrageenan (0,1 ml 1 % suspense ve fysiologickém solném roztoku) se aplikuje subplantární injekcí do jedné zadní tlapky. Otok tlapky se měří antiflogometrem podle Kempera a Amelma. Kontrolní odečet se provede ihned po injekci a otok se měří po 3 a 5 hodinách. Průměrná hodnota z odečtů po 3 a 5 hodinách se odečte po odečtu kontrolního měření a získané hodnoty u ošetřených zvířat se vyjádří jako procenta hodnoty získané z neošetřených kontrol. Hodnota je dávka způsobující 50 ¾ inhibici carra geenanem indukovaného otoku po 3 hodinách. V tomto testu sloučeniny podle vynálezu signifikantně inhibují carrageenanem indukované otoky při aplikaci per os v dávce v rozmezí od 0,02 do 5 mg/kg. Například bylo stanoveno, že sloučeniny podle příkladů 40 a 50 mají hodnoty ΕΟ^θ 0,2..3 1 mg/kg per os.

Sloučeniny podle vynálezu jsou proto použitelné pro léčení poruch, jejichž příčinou je nadbytečné uvolňování IL-lbeta, například u rozmanitých zánětlivých stavů a nemocí, jako jsou například vyčerpání vápníku u tkání, degenerativní procesy v kostech a chrupavkách, například revmatická arthritida a osteo arthritida, zánětlivá onemocnění střev, dráždivá onemocnění střev, septický šok, psoriasa, astma, syndrom respirační úzkosti u dospělých, diabetes typu I, osteoporosa různého původu včetně například klimakterická nebo pomenopausální osteoporosy, jakož i osteoporosa následkem stáří, znehybnění nebo traumatu, arteriosklerosa a Alzheimerova nemoc.

Pro výše uvedená použití požadovaná dávka samozřejmě závisí na způsobu aplikace, příslušném stavu, který má být léčen, a na požadovaném účinku. Avšak obecně se dostatečných výsledků dosáhne při použití denních dávek v rozmezí od asi 0,001 do asi 100 mg/kg, s výhodou od 0,001 do asi 10 mg/kg tělesné hmotnosti. Vhodné denní dávky pro větší savce, například pro lidi, jsou v řádu od asi 0,1 mg do asi 1 g/den, přičemž lze vhodně použít dávku najednou, v rozdělených dávkách dvakrát až čtyřikrát za den' nebo ve formě pomalého uvolňování.

Výhodné jsou sloučeniny podle příkladů 50 a 51.

V souhlasu s předcházejícím textem se předložený vynález také týká:

a) Způsobu léčení stavů, jejichž příčina je spojena s nadbytečným uvolňováním IL-lbeta nebo které jsou způsobeny nadbytečným uvolňováním IL-lbeta, například jak je uvedeno výše u subjektu, který toto léčení vyžaduje, přičemž tento způsob léčení se vyznačuje tím, že se subjektu, který má být léčen, aplikuje účinné množství sloučeniny obecného vzorce I, jejího fysiologicky hydrolysovatelného a přijatelného esteru nebo ami du nebo její farmaceuticky přijatelné soli.

b) Sloučeniny obecného vzorce I, jejího fysiologicky hydrolysovatelného a přijatelného esteru nebo amidu nebo její farmaceuticky přijatelné soli pro použití jako léčiva, například pro použití jako činidla pro ošetření stavů, jak jsou uvedeny výše.

Sloučeniny podle vynálezu se mohou aplikovat jakoukoliv běžnou metodou, zejména nasálně, enterálně, s výhodou orálně, například ve formě tablet nebo kapslí, nebo parenterálně, například ve formě injikovatelných roztoků nebo suspensí nebo ve formě čípků, jednotkové dávkové formy obsahují například od asi 25 /ug do 500 mg sloučeniny podle vynálezu.

Sloučeniny podle vynálezu mohou být podávány ve volné for mě nebo ve formě farmaceuticky přijatelné soli. Tyto soli lze připravit běžnými způsoby a vykazují stejnou účinnost jako vol né sloučeniny.

Dále se předložený vynález týká také:

c) Farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeninu obecného vzorce I, její fysiologicky hydrolysovatelný a přijatelný ester nebo amid nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, jak jsou definovány výše, spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem. Tyto prostředky lze připravovat běžnými způsoby. Prostředky mohou obsahovat až do 99,9 % hmotnostních účinné látky.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Sloučeniny obecného vzorce I

R /^A1-A₂/_n A₃-A₄-X-A₅ (I) ve kterém

R znamená atom vodíku, skupinu chránící aminoskupinu nebo popřípadě v kruhu substituovanou benzyloxyskupinu, n znamená nulu nebo 1,

A^ znamená Val, Leu, Ala, Ile nebo trimethylsilyl-Ala,

A

2 znamená Phe nebo Tyr,

A} znamená přímou vazbu, Val, Leu, Ala, Ile, trimethylsilyl-Ala nebo dvojvazný zbytek obecného vzorce (a)

C0(a) ve kterém je kruh A popřípadě substituován hydroxyskupinou nebo alkoxyskupinou s 1 až 4 atomy uhlíku,

A₄ znamená přímou vazbu nebo dvojvazný zbytek obecného vzorce (b)

-N - CH - C0- (b) ve kterém

R^ znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, a

Y| znamená zbytek vázaný na alfa-uhlíkový atom alfaaminokyseliny, který je popřípadě chráněný, skupinu -CH2-CH2~N(C^_₄alkyl)2, imidazol-2-yl-methylovou skupinu, benzimidazol-2-y1-methylovou skupinu, 1H1,2,4-triazol-3-y1-methylovou skupinu, pyrazol-3-y1methylovou skupinu, indazol-3-yl-methylovou skupinu nebo zbytek obecného vzorce (c) nebo (d) (c) ve kterých každá ze skupin R₂ a R-j jsou nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, CF^ nebo tritylová skupina, přičemž maximálně jedna ze skupin R₂ a R-j je atom vodíku, a každá ze skupin R^ a R^ jsou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxyskupina, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, CF^, fenylová skupina nebo atom halogenu, přičemž maximál ně jedna ze skupin a R^ je atom vodíku, nebo

Aj a A^ spolu dohromady tvoří zbytek obecného vzorce (aa)

-NH-CH - CO-N - CH-COI ^Rla ^R1 ^Y1 (33) ve kterém

Υ^ má význam uvedený výše a ^Rl ^{a R}ia ^SP^O1^U dohromady tvoří skupinu -(CH„) . kde m X x a zm’ znamená 2, 3, 4 nebo 5, a

1) X znamená dvojvazný zbytek obecného vzorce (e^) kde

Rg znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, a

A₅ znamená atom vodíku, CF^, zbytek -CF^-X^-Y-j, kde

Xj znamená 0 nebo S a Y^ znamená heteroarylovou sku. pinu, zbytek —Cl·^—Y^ nebo zbytky obecných vzorců (k) až (m) nebo (m) ‘11 (o) kde

Y₄ znamená triCC^alkyDmethylovou skupinu nebo zbytek obecného vzorce \⁷ kruh B je pyridyl, kruh C je fenyl nebo pyridyl, každý ze zbytků a Rg jsou nezávisle na sobě alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupina s 1 až 4 atomy uhlíku, CF^, atom halogenu, nitroskupina nebo kyanoskupina, a každý ze zbytků R^, R^g a R^ jsou nezávisle na sobě nitroskupina, kyanoskupina, CF^, karbamoylová skupina, ^C02^R12’ -^ch=ch_cn nebo -CH=CHC0₂R₁₂, kde R₁₂ je alky lová skupina s 1 až 6 atomy uhlíku,

X znamená také dvojvazný zbytek obecného vzorce (e₂) alkyl alkyl alkyl ( e₂)
2) X když znamená atom vodíku, nebo znamená dvojvazný zbytek obecného vzorce (f) a A₅ znamená skupinu “^Z1“^Z2^Y2’ ^{kde každé} ze ^zi ^{a z}2 i^sounezávisle na sobě přímá vazba nebo zbytek alfa-aminokyseliny a znamená Nl·^, C^_^alkylaminoskupinu, di-(C^_^alkyl)aminoskupinu nebo heterocyklický zbytek připojený atomem dusíku k Z2, nebo zbytky obecných vzorců (k) až (o), jak jsou definovány výše, nebo nebo NR^R^, kde R^ znamená alkylovou skupinu s 1 až 12 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinou OH nebo přerušenou kyslíkem a každé z ^14 ³ ^15 i^sou nezávisle na sobě atom vodíku, alkylová skupina s 1 až 12 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina s 5 až 7 atomy uhlíku nebo benzylová skupina, nebo
3) X znamená dvojvazný zbytek obecného vzorce (g) a A^ znamená skupinu -Z^-Z2~Y2» jek je definována výše, nebo
4) X znamená dvojvazný zbytek obecných vzorců (h) nebo (j) (h) (j) a znamená zbytek obecných vzorců (k) až (o), -CH₂-Y-j nebo -CH₂-X₁~Y₅, jak jsou definovány výše, s tou výhradou, že pouze jedna ze skupin A^ a A^ může znamenat přímou vazbu, když n je nula, a každá ze skupin A^ a A^ je jiná než přímá vazba, když n je 1, a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy, ve volné formě, ve formě soli nebo ve formě komplexů.

2. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterých n je nula, A^ je přímá vazba, Val, Leu, Ala, Ile nebo trimethyl silyl-Ala, A^ má význam uvedený v nároku 1 nebo A^ a A^ spolu dohromady tvoří zbytek obecného vzorce (aa), jak je definován v nároku 1, a

1) X je zbytek obecného vzorce (e.) nebo (θ?)» ď^e definován v nároku 1 a A_$ j_{S a}t_on, vodíku, nedo

2) X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (f) a A_$ je zbytek obecného vzorce (k), (1) nebo (m), jak jsou definovány v nároku 1, kde je 0,

3) X je zbytek obecného vzorce (g) a A,, je skupina

-Z^-Z₂-Y₂, jak jsou definovány v nároku 1, nebo

4) X je zbytek obecného vzorce (j) a A^ je zbytek obecného vzorce (k), (1) nebo (m), jak jsou definovány v nároku 1, kde X^ je 0, a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy, ve volné formě, ve formě soli nebo ve formě komplexů.

3. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, ve kterých n je nula a každá ze skupin A^ a A^ je jiná než přímá vazba, a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy, ve volné formě, ve formě soli nebo ve formě komplexů.

4. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároků 1 nebo 3, ve kterých je zbytek připojený k alfa-uhlíkovému atomu alfa-aminokyseliny vybrané ze skupiny zahrnující Ala, Leu, His, Phe,

Met, Trp, trimethylsilyl-Ala a popřípadě v postranním řetězci chráněnou Arg, Orn a Lys, nebo zbytek obecného vzorce (c), a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy, ve volné formě, ve formě soli nebo ve formě komplexů,

5. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároků 1, 3 nebo 4, ve kterých X je zbytek obecného vzorce (e^), (h) nebo (j),

A5 je jiné než atom vodíku, jestliže X je zbytek obecného vzorce (ep, a jejich fysiologicky hydrolysovatelné a přijatelné estery nebo amidy, ve volné formě, ve formě solí nebo ve formě komplexů.

6. Ethylester (benzyloxykarbonyl-valyl-alanyl)-3R-3-amino4-oxo-5-(2,6-dichlorbenzoyloxy)pentanové kyseliny, ethylester (benzyloxykarbonyl-valyl-alanyl)-3R,S-3-amino4-oxo-5-(2,6-dichlorbenzoyloxy)pentanové kyseliny, ethyl-ester (benzyloxykarbonyl-valyl-alanyl)-3R-3-amino4-oxo-5-(2,6-dichlorpyridyl-4-karbonyloxy)pentanové kyseliny, (benzyloxykarbonyl-valyl-alalnyl)-3R,S-3-amino-4-oxo-5(2,6-dichlorbenzoyloxy)pentanová kyselina, isopropylester (benzyloxykarbonyl-valyl-alanyl)-3R,S-3amino-4-oxo-5-(2,6-dichlorbenzoyloxy)pentanové kyseliny, terč.butylester (benzyloxykarbonyl-valyl-alanyl)-3R,S3-amino-4-oxo-5-(2,6-dichlorbenzoyloxy)pentanové kyseliny a (benzyloxykarbonyl-valyl-alanyl)-3S-3-amino-4-oxo-5-(2,6dichlorbenzoyloxy)pentanová kyselina ve volné formě, ve formě soli nebo ve formě komplexů.

7. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I a jejich fysiologicky hydrolysovatelných a přijatelných esterů a amidů, jak jsou definovány v nároku 1, vyznačující se tím, že se

a) odstraní alespoň jedna chránící skupina ze sloučeniny obecného vzorce I v chráněné formě nebo se přidá chránící skupina R, jak je definována v nároku 1, k N-koncové skupině sloučeniny obecného vzorce I, nebo se

b) převede jedna sloučenina obecného vzorce I na jinou sloučeninu obecného vzorce I, nebo se

c) spojí spolu dohromady amidickou vazbou dva peptidové fragmenty, přičemž každý z nich obsahuje alespoň jednu aminokyselinu v chráněné nebo nechráněné formě a jeden peptidový fragment obsahující zbytek obecného vzorce (e^) až (j), jak jsou definovány v nároku 1, přičemž peptidové fragmenty jsou takové, že se získá chráněný nebo nechráněný peptid mající sekvenci podle obecného vzorce I a popřípadě se očsxrs-^z chránící skupina n?oo chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce I v cnráněné formě, nebo se

d) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I, kde X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (h) a je zbytek obecného vzorce (k), (Ϊ) nebo (o) nebo -CHj-X^-Y^, jak jsou definovány v nároku 1, nechá reagovat sloučenina obecného vzorce III

R-/A₁-A₂/_n-A₃-A₄-X'-CH₂-Z_a (III) kde R, A^ až A^ a n mají význam uvedený v nároku 1, X je zbytek obecného vzorce (e^) nebo (h), jak jsou definovány v nároku 1, a Z je odštěpitelná skupina, s odpovídajícím fenolem, thiofenolem nebo HX^-pyridinem nebo s kyselinou obecného vzorce HX^-CO-Y^ nebo s jejím funkčním derivátem nebo s HX^-Y^, kde X^, Y^ a Y^ mají význam uvedený v nároku 1, nebo se

e) pro přípravu sloučenin obecného vzorce I kde R, A^ až A^ a n mají význam uvedený v nároku 1, a

R je alifatický nebo alicyklický zbytek obsahující 1 až X o

12 atomů uhlíku, oxiduje sloučenina obecného vzorce V (V) kde R, až A^, mají výše uvedený význam, a isoluje se takto vzniklá sloučenina obecného vzorce I nebo její fysiologicky hydrolysovatelný a přijatelný ester nebo amid ve volné formě nebo ve formě soli nebo ve formě komplexu.

0. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6 pro použití jako léčiva. '

9. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I, jak je definována v nároku 1, nebo její fysiologicky hydrolysovatelný a přijatelný ester nebo amid ve volné formě nebo ve formě fysiologicky přijatelné soli, spolu s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičem.

10. Sloučenina vzorce I, tak jak je definována v nároku 1, její fyziologicky hydrolyzovatelný a fyziologicky přijatelný ester nebo amid nebo její farmaceuticky přijatelná sůl k použití pro léčení stavů, které jsou způsobeny nadbytečným uvolňováním IL-1beta.