CZ166797A3 - Application of metal complexes as liver and gallbladder x-ray diagnostic agents - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se týká způsobu a použití kovových komplexů v jaterní a žlučníkové diagnostice pomocí rentgenového záření zejména v počítačové tomografii.

Dosavadní stav techniky

V současnosti je rozpoznání ohniskových onemocnění jater, zejména jaternich metastáz a jaternich tumorů jedním z nejdůležitějších diagnostických problémů v onkologiii. K dispozici jsou čtyři zobrazovací způsoby: scintigrafie, ul trasonografie, počítačová tomografie a magnet ickorezonanční tomografie. Každý ze způsobů má své specifické výhody a nevýhody, žádný není až dosud optimální a prakticky každý způsob se od jiného liší specifickým, přijatelným, intravenozně aplikovatelným kontrastním činidlem [Harned R.K. , Chezmar J.L., Nelson R.C. : Imagiňg of patients with potentially resectable hepativ neoplasms. 1JR 159, 1191-1194 (1922)].

•v

Scintigrafie poskytuje příliš malý prostorový záběr a její použití je omezeno nedostatečnou nebo příliš vysokou (jen pro málo tumorů použitelnou) specifitou radiofarmaka, takže v uvedeném článku není v přehledu uvedena. Sonografie nepatří v současnosti k dobrým technikám přo průkaz solidních ohniskových tumorů jater, protože tyto se často svými akustickými vlastnostmi odlišují od zdravé jaterní tkáně nedostatečně. Teprve operativně po uvolnění jater a při použití vysokofrekvenční ultrazvukové hlavy jsou menší léze prokazatelné v jaterní tkáni. Magnetickorezonanční tomografie (ME) je schopna dobře prostorově zobrazit celá játra s dobrým prostorovým zachycením a podle modu měření také s dobrým diferencováním tkáně. Pro ME jsou intravenózně aplikovatelná, dobřee snášitelná kontrastní činidla v klinických zkouškách, která by tento zobrazující způsob ještě mohla zlepšit. Nevýhodou jsou však pohybové artefakty které omezují několik minut trvající způsob stanovení a vysoké náklady na samotný přístroj.

Počítačová tomografie (CT) je vlastně ideální technika i^ro diagnostiku jater. S moderními přístroji je možno během Ai 30 sekund zobrazit celá játra při vynikajícím prostorovém zobrazení. Jednotíivá-jaterní vrstva vyžaduje asi 1 sekundu, takže pohyby dýchání a peristaltiky nehrají téměř žádnou roli. Náklady na CT jsou výrazně nižší než náklady na ME. Nevýhoda zobrazení malé tloušťky tkáně musí být především vyrovnána kontrastním činidlem. Dosud klinicky používaná kontrastní činidla poskytují následující možnosti:

1. Kontrastní činidlo se rychle a ve vysoké dávce (50 až 200 g) intravenózně injektuje nebo infunduje. Během několika minut může v jednotlivých případech nastat kontrastní rozdíl mezi lézemi a normální jaterní tkání, který je založen na rozdílech v perfuzi, relativních krevních objemech tkáně a extracelulárním prostoru. Tento časový prostor nestejného rozdělení kontrastního činidla je možno pro diagnostiku využít jen s uvedenými, velmi rychlými CT.

2. 4 až 6 hodin po podání alespoň 120 g dostupného urografického kontrastního činidla se u velmi malé části pacientů pozoruje zlepšený kontrast mezi kontrastní činidlo přijímajícím zdravým parenchymem a většinou nepřijímajícími ohniskovými lézemi. Tato technika označovaná jako pozdní skaň není však dostatečně spolehlivá a vypovídající, takže při rutinní práci se nepoužívá.

3. Při arteriální portografii se musí zavést katetr např. do A.mesenterica, pacient je pak sledován na CT-přístroji a skaň se provádí během infuze asi 150 ml kontrastního činidla. Tato technika je invazivní, časově náročná a drahá, ale v současné době poskytuje nejjistější informaci o přítomnosti a lokalizaci jaterních metastáz. Tato informace pro rozhodnutí o resektovatelnosti metastáz rozhodující význam. CT ‘s, arteriální portografii se pravidelně provádí předoperačňě p^es náklady na její provedení.

Výše uvedené problémy vznikají z toho, Že v současnosti dostupná rentgenová kontrastní činidla jsou urografické produkty, které se nekumulují v játrech. Aby bylo přesto dosaženo určitého kontrastu, játra se krátce zaplaví velmi vysokými množstvími kontrastního činidla krevním proudem (dynamický skaň) nebo se zkouší použít 1 až 2% kontrastní činidlo, které se u části pacientu nachází později v jaterním parenchymu (pozdní skaň).

Tak je zřejmé, že existuje potřeba zlepšené diagnostiky ohniskových jaterních lézí, protože uvedené způsoby jsou málo výkonné, příliš drahé nebo příliš zatěžují pacienta. V průběhu desetiletí bylo provedno mnoho pokusů o vývoj intravenózně aplikovatelného jaterně specifického rentgenového kontrastního činidla, 'Z velkého počtu zkoušených preparátů je uvedeno jen několik (viz tabulky 1-2): Thorotrast (koloidní suspenze oxidu thoria) vyvolává vynikající jaterní kontrast, není však dostatečně rozlišující. α-Zářič thoria se používá desetiletí po aplikaci jaterních tumorů. Schering uvedl na trh preparát •I

Tabulka 1: Emulze

Hepatoselectan, emulzi nejjemnějších kapiček tri jodovaného oleje. Pro akutní vedlejší účinky musel být stažen z trhu. Následující produkty jiných firem a výzkumných skupin (EOE-13, AG-60-90 atd) byly staženy již během klinických zkoušek pro stejné problémy.

Olejové emulze	i.v.
';Název	firma	hodnot i tel	stav
AG 60-90 EOE 13	Guerbet	Lamarque Vermess	100 pacientů, přerušeno několik set pacientů. přerušeno
EOE 14	Abbott	—	jen prekli- nicky
Perfluor- octylbromid	Boehringer Ingelheim	Bruneton	klinické zkoušky přerušeny
Intraiodol	—~	Lunderqui s t	klinické zkoušky přerušeny
Olejové emulze	i. a.
Lipiodol	—	mnoho uživatelů	bez.registrace

Tabulka 2: Liposomy

Název firma

Amidotrizoat ---hodnotitel

Rosenberg stav

Iopromid Schering Krause

TS

Iopamidol Bracco Musu

Ioxaglat

Guerbet Corot, velký poměr ved lejších účinků lidí, neregistr ováno pokusy na zvířa těch pokusy na zvířa těch pokusy na zvířa těch

Všechny částicové přípravky (suspenze, emulze, liposomy) mají navíc ke mnoha farmaceutickým problémům-tu nevýhodu, že při rentgenové diagnostice vyvolává vysoké dávkování (5 až 20 g) charakteristické vedlejší účinky, kterým se lze jen těžko vyhnout. V sedmdesátých a na počátku osmdesátých let byly proto vyvíjeny velké snahy o nalezení ve vodě rozpustných rentgenových kontrastních činidel, která se - dostatečně pro CT - akumulují v játrech. Takové substance obsahovaly až 6 atomů jodu na molekulu a ne jen proto byly při pokusech na zvířatech částečně velmi účinné a byly dobře snášeny. Nápadné byly velké rozdíly v účinnosti u jednotlivých zvířecích druhů. Až dosud však žádné ze zkoušených jod obsahujících ve vodě rozpustných kontrastních činidel nedosáhlo u lidí dostatečné

Ί koncentrace v játrech, která by poskytla při vyvíjení pro CT dostatečné rozlišení. Charakteristický příklad mnoha nezdařených pokusů je publikován v práci, jejímiž autory jsou

Mutzel W., Wegener O.H., Souchon R a Weinmann H.-J-, Water soluhle contrast agents for computed tomography of liver:

experimental studies in dog. V Amiel (edt.): Contrast media in radiologiy, Lyon 1981, Springer Verlag Berlin Heidelberg New

York 1982, str. 320-323, tab.l. Také v tomto případě nebyl u lidí na rozdíl od mnoha zvířecích druhů dosažen žádný vynikající jaterní kontrast.

Intravenozní cholegrafika jako iotroxinat a ioglycamat se selektivně kumulují v játrech. Tento předchozí krok je velmi omezen kapacitou. Při koncentraci odpovídající 5 pg jodu/ml plasmy se ještě dosáhne 5-násobné koncentrace v játrech, při * koncentraci 50 pg jodu/ml se dosáhne jen 2-násobné koncentrace,, při 500 pg jodu/ml plasmy je koncentrace v játrech výrazně nižší než v plasmě a proto je dále diagnosticky bezcenná, protože diferenciace aktivně se obohacující tkáně a pouhé perfuze je nemožná. Počítačová tomografie však rozpoznává teprve koncentrace jodu od asi 1 mg/ml s dostačující jistotou (Speck U., Mutzel W.,

Herz-Hiibner U., Siefer H.M. Pharmakologie der Iotroxinsáure, eines neuen intravenosen Cholegraficums I. Pharmakokinetik und

Radiologie beim Tier. Drug. Res. 28, 2143-2149 (1978).

Nezbývá než konstatovat, Ze potřeba výhodně ve vodě j rozpustných a proto farmaceuticky dobře chrakterizovatelných, } i

stabilních, přijatelných, specifických a v ne příliš vysokých dávkách účinných rentgenových kontrastních činidel trvá a se j na trhu ani ve stadiu klinických zkoušek přes dlouholeté snahy nevyskytuje žádný takový produkt. Takové preparáty jsou díky nepředvídatelné závislosti na druhu pokud jde o jejich příjem, ' akumulaci a vylučování játry jen obtížně zjistitelné pomocí , pokusů ha zvířatech; také zjištění pomocí pokusů na zvířatech N l

i • ¹ i i

í i

i po mnoha jiných výsledcích na lidích není možno považovat dále jako indicii pro vhodnost něho nevhodost substance nebo třídy substancí.

Kovy obsahující kontrastní činidla pro magnetorezonanční tomografii, absorbují také rentgenové paprsky. Bylo proto v jednotlivých případech zkoušeno použít tyto substance pro počítačovou tomografii (Schild H.H. a spol.; Gadolinium DTPA (Magnevist^R) ais Kontrastmittel fur die arterielle DSA. Fortschr. Rontgenstr., 160. 218—221(1994); Quinn A.D. a spol.: Gd-DTPA: An alternativě contrast medium for CT. J.Comput. Assist Tomogr. 18, 634-636 (1994)). Pozoruhodné je, že až dosud používané kovové komplexy obsahují jen jeden kontrast poskytující kovový ion v každé molekule, zatímco jodované rentgenové kontrastní činidlo obsahuje 3 nebo 6 atomů jodu. Přes vysokou účinnost některých kovových iontů proti jodu (Zwicker C., Langer Μ., Langer E., Keske U. Comparision of iodinated and noniodinated contrast media in computed tomography. Invest Radiol. 26, 162-164 (1991) nejsou jodovaná kontrastní činidla až dosud v žádné relevantní indikaci používána jako kovové cheláty.

Podstatnou nevýhodou použití kovových chelátů jako rentgenového kontrastního činidla je podstatně nižší obsah prvku absorbujícího rentgenové záření v molekulách (jodované rentgenové kontrastní činidlo: 3 popř. 6 atomů jodu/raolekula; MR-kontrastní činidlo: 1 ion kovu/molekula). Tomu odpovídá poskytnutí slabého kontrastu, takže kovové komplexy se v současnosti používají jen pro exprimentální výzkum u rentgenu. V MR se dosahují kovové ionty tak nízkých koncentrací, protože jsou tyto rychle se vyměňující protony ovlivňovány vodou, zatímco u rentgenu musí být kov sám bezpečně zjistitelný.

Úloha předloženého vynálezu spočívá v tom, zvolit ze známých zobrazujících diagnostik vhodné farmaceutické substance na bázi kovových chelátu, která jsou vhodná pro výrobu kontrastních činidel pro rentgenovou diagnostiku, zejména pro počítačovou tomografii jaterních a žlučových cest.

Podstata vynálezu

Tato úloha se podle předloženého vynálezu řeší tak, jak je vyznačeno v patentových nárocích. Vynález tak spočívá v podstatě uvedené v patentových nárocích.

Bylo zjištěno, že- kovové komplexy, sestávající z kovu pořadového čísla 44-51 nebo 56-83 a látky, tvořící komplex, jsou vhodné pro výrobu kontrastních činidel pro použiti v kontrastně zesílené počítačové tomografii jater a žlučových cest.

Jedná se přitom o sloučeniny obecného vzorce I

N COOX

COOX

k.

(i).

kde

X nezávisle na sobě znamená atom vodíku nebo ekvivalent kovového iontu prvku s pořadovým číslem 44-51 nebo

56-83, jeden ze zbytků R¹ má vzorec -CH2-CsIÍ4-(O) _r-R², přičemž aromatický kruh může být substituován v poloze ortho-, meta- nebo para- a další zbytek R¹ znamená vodík,

R² znamená uhlovodíkový zbytek, sestávající z 1 až 6 atomů uhlíku a 0 až 2 atomů kyslíku, fenyl- nebo benzylzbytek nebo vodík a r znamená čísla nula nebo jedna, přičemž karboxylové skupiny mohou být přítomny také jako amidy, společně s k nábojovému vyrovnání popřípadě potřebnými fyziologicky přijatelnými kationty.

Jako zbytky R¹ obecného vzorce I mohou být použity benzylové zbytky jako například methoxybenzyl-, ethoxybenzylpropoxybenzyl-, butoxybenzyl-, pentoxybenzyl-, benzyloxybenzyl-, methylbenzyl-, ethylbenzyl-, propylbenzyl-, butylbenzyl-, pentylbenzyl a benzylbenzylzbytek. Výhodné zbytky R¹ jsou ethoxybenzyl a butylbenzylzbytek. Substituenty benzylzbytku mohou být v polohách 2-, 3- nebo 4, to znamená ortho-, meta- nebo parapoloze. Přitom jsou výhodné ortho a para-substituenty, zcela zvláště výhodné jsou zbytky v poloze para.

Zbytky R^l mohou být v poloze 4 nebo 5 3,6,9-triaza-3,6,9 tris(karboxymethyl)-undekandikarboxylové kyseliny, přičemž výhodná jé poloha 4. V každé jiné poloze R¹ vždy znamená atom vodíku.

Výhodné jsou takové zbytky, které obsahují kyslík (r = 1). Zcela zvláště výhodný je ethoxybenzylzbytek.

Jako zbytky R² mohou sloučeniny obsahovat Ci až Cs-alkylzbytky, například methyl-, ethyl,propyl-, butyl-, pentyl- nebo hexylzbytek. C3 až Cs-Alkylzbytky mohou být přitom přímé nebo rozvětvené, jako je například isopropyl-, isobutyl-, terc.butyl-, neopentyl- nebo isohexylzbytek. Alkylzbytky mohou ale také obsahovat až 2 atomy kyslíku (přičemžnepřicházejí v úvahu peroxosloučeniny), např. jako ethoxyethyl-, ((ethoxy-)ethoxy)ethyl)- nebo methoxypropylzbytky.

Z kovových iontů jsou výhodné lanthanidy. V měřeních za praktických podmínek (viz př. 8) se ukázaly jako vhodnější holmium, erbium a ytterbium než jako v MR obvyklé prvky gadolinium a'dysprosium.' Thulium se jeví vzhledem k vysoké ceně z hospodářského hlediska jako méně vhodné, v zásadě ale vhodné je. Dále jsou vhodné také prvky lutecium, praseodym, vizmut, olovo a hafnium. Mohou být použity i další prvky. Zejména chelátové sloučeniny lutecia, praseodymu, ceru, hafnia, olova a vizmutu vykazují zvláště výhodné vlastnost i.

Karboxylové skupiny mohou být přítomny také jako amidy, například jako alkyl- nebo dialkylamid, přičemž alkylskupiny vykazují 1 až 4 atomy uhlíku- nebo jako morfolidskupina. Amidové funkce nejsou narozdíl od karboxylových funkcí negativně nabity. Následkem toho se mění náboj komplexu změnou karboxylové funkce na amidovou funkci. Obvykle se přemění nejvýše tolik karboxylfunkci na.amidové funkce, že vznikne neutrální komplex.

Jako fyziologicky přijatelné kationty je možno uvést sodík*, vápník²*, hořčík²* a zinek²* jakož i organické kationty následujících bází: megluminu, glukosaminu, argininu, ornithinu, lysinu, 2-amino-l,3,4-butantriolu a ethanolaminu.

)

ΙΟ

Následující sloučeniny jsou zvláště vhodné pro použití podle předloženého vynálezu:

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzy1)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)~ undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandi karboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tri s(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-5-(4-[2-(2-ethoxyethoxy)-ethoxy]-benzy1}-undekandikarboxylovou,

3.6.9- tiiaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tri s(karboxymethyl)-4-(2-ethoxybenzy1)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tri s(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzy1)undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekarídikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4,8-bis-(4-buty1benzyl)-undekandikarboxy1ovou,

3,6,9-triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4,8-bis-(4-buty1benzyl)-undekandikarboxylovou,

-i;

' · · ·/G

3.6.9- tríaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4,8-bi s-(4-butylbenzy1)-undekandikarboxylovou,

3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylovou, a jejich soli a amidy.

Výroba sloučenin podle vynálezu je pro odborníka zřejmé. Některé takové substance a jejich výroba jsou mezi jiným popsány v EP 0405704 a US 4880008. Také v příkladech tohoto dokumentu se popisují možnosti výroby, které odborník v oboru může měnit na základě svých znalostí tak, aby získal požadované sloučeniny.

Uvedené kovové komplexy přicházejí v úvahu pro použití ve formě svých sterilních roztoků. Mohou mimo obvyklých komplexů kovů, absorbujících rentgenové záření obsahovat běžné farmaceutické pomocné látky jako jsou pufry, báze, kyseliny, stabilizátory, činidla napomáhající rozpouštění, substance pro úpravu osmolality a viskozity, farmaceuticky účinné přísady a přebytek vztaženo na diagnosticky účinný kovový komplex) volného komplexotvorného činidla nebo jeho solí/komplexů se slabě navázanými fyziologicky přijatelnými ionty jako je vápník ²⁺, hořčík²* a zinek²* pro zlepšení vyloučení iontů těžkých kovů. Vhodné substance a jejich koncentrační oblasti jsou odborníkovi známé nebo je možné je zjistit z literatury.

Kovové komplexy jsou výhodně v koncentraci od 0,1 mol do 1,0 mol vztaženo na kontrast poskytující kovový ion. Vyšší nebo nižší koncentrace jsou možné podle požadavků a rozpustnosti příslušných sloučenin. Dávkování činí pro posílení kontrastu v játrech asi 0,1 až 1,5 mmol/kg tělesné hmotnosti, výhodně činí tato oblast 0,2 až 0,6 mmol/kg.

Podání se muže provádět postupem obvyklým v medicíně. Výhodná je intravenózní infuze nebo injekce v časovém prostoru od asi 1 minuty do 30 minut,

Je překvapující, že těmito kovovými cheláty přes špatné předpovědi pokud jde o účinnost absorbce záření každé molekuly, se poprvé podařilo u lidí dosáhnout plně pro počítačovou tomografii uspokojivé absorbce rentgenového záření v játrech, aniž by bylo přitom nutno použít tak vysokého dávkování, jak je tomu v případě jodovaného rentgenového kontrastního činidla. Současně se ukázalo, že kumulace v játrech probíhá rychle a trvá dostatečně dlouho pro diagnostický způsob počítačovou tomografií. Podání je možno provést neinvazi vně ' (iiapř. ' intřavenozne) . Snášitelnost je v nezbytné dávkové oblasti (viz výše) velmi dobrá.

Souhrnně je možno konstatovat, že se poprvé podařilo zde popsanou třídou substancí, dosáhnout u lidí specifického kontrastního činidla, kumulujícího se v játrech, které vede u dnes používané techniky počítačové tomografie k potřebné diagnostické informaci. Tento nález je proto tak překvapující, že se již léta hledá preparát pro tento účel.

jodované rentgenové kontrastní činidlo přes výčet všech teoreticky potřebných vlastností molekuly a podstatně vyšší obsah kontrast poskytujícího prvku v molekule nevyhovuje požadavkům, použití substancí podle vynálezu vyžaduje lOkrát vyšší dávku než je tomu při magnetorezonanční tomografii aniž by to bylo na škodu fyziologické snášitelnosti,

I .-/)

-,. *; ι;ι*ν5,·¹ ϊ·· r ¹⁴ * ' »·;. ι-”^,τ koncentrace, které voličských játrech se dosahují při použití podle vynálezu '.byly :dOsaženy j iž velmi'· mnoha klasickými jodovanými rentgenovými kontrastními prostředky, aniž by tento .prostředek mohl? býtApoužiti'pro'počítačovou tomografii pro zlepšení diagnózy ohniskových* jaťerních změn,

A, -· i, x * - '·· že se zjištění z pokusů na zvířatech prokázala z hlediska vhodnosti kontrastnichíčinidehvpro-posί1ení kontrastu v počí tačové ,tomografi i -jater jakoN zc,el át nevhodná^' y í 1

Následující příklady slouží k objasnění vynálezu aniž by jeho podstatu' jakkoliv omezovaly: vyreJ· o-' p.'d'^f .ρ ' « -'*♦. ) ,

.....v^:'''hýf’’'íýy’ř3j.rť'i?í '“'ť, s'l '

Příklady proveden í⁴ vynál ezutíb»Aí.r . rný '. ne· D.PG-r pr i- -p « n . híidnc 11 1 .«βν*f··* „yj,^·! .ovt.

Příklade 1,,;íí, ··, S»r * rol Ά» .y<1 ’ίϊΐ-t,· r-’- -«» y t yt t „r,A ί í dť ι>’κ <- *' >« ¹ ,

Komplex: lutecia- se'dvoj sodnou solí*kýšeliny 3)·6,9-triazá3,6,9-trisr (karboxyřnethyl) -5-(4-e'thůxybeňžýl) undekandikarboxylové ť r«,. · - - i · ' *

a) di-teřc ; Buty lest er.*,ky sel iny-3,6,9-tf;iaža~3·, 6,9-ťris- ****·.··* . (terc.butoxykarbonylniethyl)-5v(4-éthoxybenzyl)-^ř .* undekand i karboxy l-ovéth jh re” to·. Γ- ► ’*·» - ··*' ♦ • , . ; řt ,1bu Jj 1 ♦·-·!«?’ f h»dí:,’ « filtru·:. Plť? . p y ‘ _t. 16,7 _tg (21 ,'4tmmol)n di-terc.butyléstěrú kyseliny 3,6,9triaza-3,6,9-tr i (terč . bútoxykarbortýlměthyl) -5-,( 4-hydroxybenzyl)-undekandikarboxylové (DOS 3710730) se rozpustí v 50 ml bezvodého,N,N-dimethylformamidu a-při-0 °C'se smísí pod argonem s ^0,94 ,g (23(5 mmol) ^disperze* hydridu sodného (60% v minerálním oleji). Vsázka se nechá 15 minut míchat, potom.se přidá 3,.74; g 7(24,0'mmol)>,ěthy 1 jodidu/ reakční teplotě se** nechá silikagelu s hexanem/diethylethěrem/triethylaminem. Frakce, obsahující produkt se spojí a odpaří.

Výtěžek: 16,4 g (94,8 % teorie) bezbarvého oleje.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 63,92 % C, 9,11 % H, 5,20 % N, 21,78 % O nalezeno: 63,77 % C, 9,28 % H, 5,13 % N. .

b) Komplex lutecia se dvojsodnou solí kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tr i s-(karboxymethy1)-5-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové

16,1 g (20 mmol) sloučeniny vyrobené podle příkladu a) se rozpustí v 50 ml tetrahydrofuranu a smísí se 60 ml dvojnormálního hydroxidu sodného, míchá se dvě hodiny při 60 °C, pH se upraví na hodnotu 1 koncentrovanou kyselinou ch 1 o rov o dík o vou. ,__od. p. a ří _ s _e__ _siln_ě__na_r o_t_ač n. í__od.R.a rce_a_ z.by_t.e.k.....

se čistí iontovýměnnou chromatografií (katéx (H*-forma), eluens: vodný roztok amoniaku). Eluát se odpaří a silně vysuší ve vysokém vakuu. Získá se volné komplexotvorné činidlo.

Pentakyselina se vyjme do 250 ml vody a smísí se 3,98 g (10 mmol) luteciumoxidu. Suspenze se míchá při 100 °C 36 hodin a filtruje. Potom se pH upraví jednonormálním hydroxidem sodným na pH 7,3. Potom se roztok míchá při 80 ⁰C po přídavku í,6 g aktivního uhlí jednu hodinu a filtruje. Filtrát poskytne po sušení vymrážením bezbarvou pevnou látku.

Výtěžek: 14,1 g (96,8 % teorie) bezbarvého oleje.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 37,16 % C, 3,80 % H, 5,65 % N, 23,67 % O, 23,53 %

Lu, 6,18 % Na nalezeno: 37,03 % C, 3,94 % H, 5,51 % N

23,38 %

Lu, 5,90 % Na,

Přiklad 2

Komplex ytterbia se dvojsodnou solí 3,6,9-triaza-3,6,9-tris (karboxymethyl)-4-(2-ethoxybenzyl)-undekandikarboxylové

a) Methylester N-benzyloxykarbonyl-3-[2-hydroxyfenyl]alaninu

9,5 g (52,4 mmol) o-tyrosinu (2-hydroxyfenylalanin, Heraeus) se suspenduje ve 48 ml methanolu, ochladí v ledové lázni a po kapkách se smísí se 7,6 ml (105 mmol) thionylchloridu. Po jedné hodině se ohřeje na teplotu zpětného toku a míchá se tři hodiny. Pak se nechá míchat přes noc při teplotě místnosti. Odpaří se dosucha, zbytek se vyjme do methanolu, odpaří a postup se dvakrát opakuje. Vyjme se do 50 ml vody, pH se upraví na hodnotu 8,5 l.Smolárním roztokem hydroxidu sodného a pod kontrolou pH se přidá 22,1 ml (63 mmol) benzylesteru kyseliny chlormravenčí. Čtyři hodiny se míchá při teplotě místnosti, organická fáze se oddělí, promyje se vodou a suší nad síranem sodným. Po odpaření se zbytek chromatografuje na silikagelu (methylenchlorid/ethylacetát). Výtěžek: 13,5 g (78,2 % teorie) bezbarvého oleje, který pomalu krystaluje.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 65,64 % C, 5,82 % H, 4,25 % N, 24,29 % 0 nalezeno: 65.,57 % C, 5,68 % H,· 4,30 % N.

b) Methylester N-benzyloxykarbonyl-3-[2-ethoxyfenyl]-alaninu

10,2 g (31 mmol) ortho-fenolu.z příkladu a) se rozpustí při 40 ^eC v 6 ml Ν,Ν-dimethylformamidu, smísí s 9,2 g (66,5 v

mmol) uhličitanu draselného a 0,3 ml vody. Potom se po kapkách přidá 5,7 ml (43,4 mmol) diethylsulfátu a míchá se 3,5 hodiny. Přidá se 6,6 ml amoniaku a vsázka se nechá hodinu stát. Pak se smísí s malým množstvím vody a extrahuje se terč.butylmethyletherem. Organická fáze se oddělí, promyje se zředěnou kyselinou sírovou a vodou. Suší se nad síranem sodným, odpaří po filtraci a zbytek se chromatografuje na silikagelu.

Výtěžek: 8,2 g (74 % teorie) bezbarvého oleje.

Analýza (vztaženo ná substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 67,21 % C, 6,49 % H, 3,92 % N, 22,38 % 0 nalezeno: 67,09 % C, 6,53 % H, 3,77 % N.

c) N-Benzyloxykarbonyl-2~[2-ethoxybenzyl]-2-aminoethanol

7,9 g (22 mmol) methylesteru N-benzyloxykarbonyl-3-[2ethoxyfenyl]-alaninu (příklad b) se rozpustí v 63 ml terč.butylmethyletheru a smísí s 1,1 g (30,1 mmol) borohydridu sodného. Při 5 °C se přidá 15 ml methanolu a míchá se pět hodin při konstantní teplotě. Potom se přidá 1,5 ml kyseliny octové rozpuštěné v 5 ml tetrahydrofuranu, smísí se s 9 ml vody a deset minut se míchá při teplotě místnosti. Organická fáze se oddělí, promyje se vodou a suší se nad síranem sodným. Sušidlo se odsaje, filtrát se odpaří a zbytek se pro čištění chromatografuje na silikagelu.

Výtěžek: 7,25 g (100 % teorie) bezbarvého oleje.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 69,28 % C, 7,04 % H, 4,25 % N, .19,43 % O nalezeno: 69,32 % C, 7,00 % H, 4,18 % N.

d) Dihydrochlorid

N-benzyloxykarbonyl-2-[2-ethoxybenzyl]-1,4,7-triazaheptanu

7,2 g (22 mmol) alkoholu z příkladu c) se rozpustí v 18 ml tetrahydrofuranu a při teplotě místnosti se smísí se 4,9 ml (35 mmol) triethylaminu. Přidá se 2,54 ml (32,6 mmol) chloridu kyseliny methansulfonové ve 2 ml tetrahydrofuranu a míchá se při 20 °C šest hodin. Potom se přikape 22,2 ml (330 mmol) ethylendiaminu při teplotě mezi 30 °C a 45 °C. Zahřeje se na 50 °C a vsázka se míchá čtyři hodiny. Potom se reakční směs odpaří, zbytek se vyjme do ethylacetátu a promyje se vodou. Organická fáze se ochladí v ledové lázni a smísí s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Vzniklá sraženina se odsaje, promyje se Studeným isopropanolem a suší při 50 °C. Výtěžek: 7,5 g (76,7 % teorie) bezbarvé pevné látky.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 56,76 % C, 7,03 % H, 15,95 % Cl, 9,45 % N,

10,80 % O nalezeno: 56,62 % C, 7,11 % H, 15,80 % Cl, 9,36 % N.

e) Dihydrochlorid 2-[2-ethoxybenzyl]-1,4,7-triazaheptanu

7,2 g (16,2 mmol) Z-chráněného aminu z příkladu d) se suspenduje v 72 ml methanolu, smísí s 1,08 g palladia (10%) na aktivním uhlí a 0,5 ml vody a za normálního tlaku se hydrogenuje při teplotě místnosti. Po ukončení spotřeby vodíku se katalyzátor odfiltruje a filtrát se odpaří.

Výtěžek: 4,9 g (97,5 % teorie) bezbarvé pevné látky.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 50,33 % C, 8,12 % H, 22,85 % Cl, 13,54 % N,

5,16 % O nalezeno: 50,17 % C, 8,34 % H, 23,11 % Cl, 13,40 % N.

f) di-terc.Butylester kyseliny 3,6,9-triaza-3,6,9-tris(terč.butoxykarbonylmethyl)-4-(2-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové >1

11,2 g (81,5 mmol) uhličitanu draselného se rozpustí v 11 ml vody a smísí při 35 ’C se 4,8 g (15,5 mmol) triaminu (příklad e). Přidá se 12,5 ml (85,3 mmol) terč.butylesteru kyseliny bromoctové a vsázka se míchá sedm hodin při 65 °C. Po 18-hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakčni směs smísí s vodou a vytřepe se s ethylacetátem. Organická fáze se suší nad síranem sodným, odpaří a zbytek se chromatografuje na silikagelu (methylenchlorid/methanol). Po odpaření frakcí, obsahujících produkt se získá pentaester jako špinavě žlutý olej.

Výtěžek: 11,9 g (95 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 63,92 % C, 9,11 % H, 5,20 % N, 21,78 % O nalezeno: 64,05 % C, 9,23 % H, 5,07 % N.

g) Kyselina 3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4-(2ethoxybenzyl)-undekandikarboxylová

11,75 g (14,5 mmol) pentaesteru z příkladu f) se rozpustí v 86 ml methanolu a nechá se reagovat se 4,65 g (116,3 mmol) hydroxidu sodného v 7,1 ml vody. Čtyři hodiny se míchá při 65 °C, pak se methanol odpaří, přidá se voda a ještě jednou se odpaří. Vyjme se do vody a iontoměničem se pH nastaví na 1,8. Po odfiltrování iontoměniče se vodný roztok odpaří a pentakyselina se čisti preparativní HPLC (voda/methanol/pH 2,^l5) . Frakce, obsahující produkt se ,odpaří , vyjmou do vody a suší se vymraženim.

Výtěžek: 4,9 g (64 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 52,37 % C, 6,31 % H, 7,97 % N, 33,36 % 0 nalezeno: 52,19 % C, 6,46 % H, 7,88 ÍS N.

h) Komplex ytterbia se dvojsodnou solí kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-4-(2-etboxybenzyl)-undekandikarboxylové

3,72 g (7,05 mmol) pentakyseliny z příkladu g) se rozpustí při 60 °C v 19 ml vody a po částech se smísí s 1,85 g (3,53.mmol) uhl iči tanu-ytterbia. Po ukončené komplexaci se zfiltruje, pH se upraví na 7,0, míchá se při 100 ⁰C deset minut, znovu se filtruje a filtrát se lyofilizuje.

Výtěžek: 4,6 g (88 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 37,26 % C, 3,81 % H, 5,67 % N, 23,74 % O, 23,34 % Yb, 6,20 % Na nalezeno: 37,13 % C, 4,02 % H, 5,55 % N 23,18%

Yb, 5,87 % Na.

Příklad 3

Komplex ytterbia se dimegluminovou solí solí kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové

2,9 g (5,5 mmol)

3.6.9- triaza-3,6,9-tri s-(karboxymethy.l)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové (EP 0405.704, příklad 8b) se suspenduje ve ml vody a komplexuje s 1,45 g (2,75 mmol) uhličitanu ytterbia při 60 °C, Po ukončení reakce se vsázka neutralizuje methylglukaminem. Filtruje se a získá se kovový komplex vymrážením filtrátu.

Výtěžek: 5,7 g (95,3 % teorie) bezbarvého lyofilizátu.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):, vypočteno: 40,85 % C, 5,93 % H, 6,44 % N, 30,88 % O, 15,90 % Yb nalezeno: 40,67 % C, 6,08 % H, 6,17 % N, 14,62 %

Yb.

b) Komplex ytterbia s di-[2-amino-l,3,4-butantriolovou)-solí kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4~(4~ethoxybenzy1) undekandikarboxylové

Titulní sloučenina se získá analogicky příkladu a), jestliže se komplexová sul neutralizuje

2-amino-l,3,4-butantriolem.

c) Komplex ceru se dvojsoudnou solí kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4-(4-ethoxybenzyl) undekanové

Titulní sloučenina se získá analogicky příkladu a), . jestliže se ligandy (EP 0405704, příklad 8b) nechají reagovat s uhličitanem ceru a neutralizují se hydroxidem sodným.

d) Komplex ytterbia se dvojsodnou solí kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-t r i s-(karboxyme thyl )-4-.( 4-ěthoxybenzyl) undekandikarboxylové

2,1 g (4 mmol) kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové (EP 0405704, příklad 8b) se suspenduje v 15 ml vody a komplexuje s 1,05 g (2 mmol) uhličitanu ytterbia při 60 °C. Po ukončení komplexace se vsázka neutralizuje s IN hydroxidem sodným. Komplexační roztok se filtruje a získá se titulní sloučenina sušením vymražením filtrátu.

Výtěžek: 3,0 g (Í00 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 37,26 % C, 3,81 % H, 5,67 % N, 23,74 % 0, 23,34 % Yb, 6,20 % Na nalezeno: 37,14 % C, 4,11 % H, 5,50 % N, 23,22%

Yb, 5,94 % Na·. .............. -

e) Komplex lutecia se dvojsodnou solí kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxamethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)udekandikarboxy1ové

3.0 g (5,7 mmol)

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové (EP 0405704, příklad 8b) se suspenduje v 15 ml vody a komplexuje se s 1,07 g (2,7 mmol) oxidu lutecia při 95 °C. Po ukončené komplexaci se vsázka neutralizuje IN hydroxidem sodným. Roztok se filtruje a získá se titulní sloučenina vymražením filtrátu.

Výtěžek: 3,9 g (92 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 37,16 % C, 3,80 % H, 5,65 % N, 23,67 % 0, 23,53 % Lu, 6,18 % Na, nalezeno: 37,02 % C, 4,01 % H, 5,53. % N, 23,36 %

Lu, 5,87 % Na.

Analogickým způsobem se může získat odpovídající komplex vizmutu (z vizmutoxyuhličitanu), komplex hafnia (z hydroxidu hafnia), komplex olova (z uhličitanu olova), komplex lanthanu (z uhličitanu lanthanu), komplex dysprosia (z oxidu dysprosia), komplex erbia (z uhličitanu erbía), komplex terbia (z uhličitanu terbia), komplex holmia (z uhličitanu holmia) a komplexu praseodymu (z uhličitanu praseodymu).

Příklad 4

Komplex gadolinia dvojsodné soli kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tri s-(karboxymethyl)-4-(2-butoxybenzyl)undekandikarboxylové

a) Methylester N-benzyloxykarbony1-3-[2-butoxyfenyl]-alaninu

5,0 g (15,2 mmol) ortho-fenolu z příkladu 2a se rozpustí při 40 °C ve 4 ml Ν,Ν-dimethylformamidu , smísí se se 4,5 g (31,1 mmol) uhličitanu draselného a 0,2 ml vody. Potom se přidá 2,1 g (15,5 mmol) n-butylbromidu po kapkách a míchá se 5 hodin. Přidá se 3,2 ml amoniaku a nechá se vsázka jednu hodinu stát. Potom se smísí s malým množstvím vody a extrahuje se terč.butylmethyletherem. Organická fáze se oddělí, promyje. se zředěnou kyselinou sírovou a vodou. Suší se nad síranem sodným, po odfiltrování se odpaří a chromatografuje se zbytek na silikagelu.

Výtěžek: 4,7 g (80,2 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 68,55 % C, 7,06 % H, 3,63 % N, 20,75 % O nalezeno: 68,42 % C, 7,18 % H, 3,59 % N.

b) N-Benzyloxykarbonyl-2-[2-butoxybenzyl]-2-aminoethanol

3,9 g (11 mmol) methylesteru

N-benzyloxykarbonyl-3-[2-butoxyfenyl]~alaninu (příklad a) se rozpustí ve 30 ml terc.butylmethyletheru a smísí s.0,55 g (15 mmo) borohydridu sodného. Při 3 °C se přidá 8 ml methanolu a míchá se pět hodin při konstantní teplotě. Potom se přidá 0,8 ml kyseliny octové ve 3 ml tetrahydrofuranu, .

_Λ smísí se s 5 ml vody a míchá se deset minut při teplotě místnosti. Organická fáze se oddělí, promyje se vodou a suší nad síranem sodným. Sušidlo se odsaje, filtrát se odpaří i a zbytek se chromatografuje pro čištění na silikagelu.

Výtěžek: 3,4 g (86,5 % teorie) bezbarvého oleje.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 70,56 % C, 7,61 % H, 3,92 % N, 17,90 % O nalezeno: 70,43 % C, 7,60 % H, 4,07 % N.

c) Dihydrochlorid N-benzyloxykarbonyl-2-[2-butoxybenzyl], 1,4,7-triazaheptanu

3,1 g (8,8 mmol) alkoholu z příkladu b) se rozpustí v 8 > ml tetrahydrofuranu a při teplotě místnosti se smísí se 2,0 ml | (14 mmol) triethylaminu. Přidá se 1,02 ml (13 mmol) chloridu kyseliny methansulfonové rozpuštěného v 1 ml tetrahydrofuranu , .. a míchá se při 20 ^eC pět hodin. Potom se přikape 8,9 ml (132 mmol.) ethylendiaminu při teplotě mezi 35 °C a 45 °C. Nechá se ... ohřát na 50 °C a vsázka se tři hodiny míchá. Potom se reakční směs odpaří, zbytek se vyjme do ethylacetátu a promyje se vodou. Organická fáze se ochladí na ledové lázni a smísí s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou. Vzniklá sraženina se

I odsaje, promyje se studeným isopropanolem a suší při 50 ’C.

Výtěžek: 3,8 g (91,4 % teorie) nažloutlé pevné látky.

í

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla);

vypočteno; 58,47 % C, 7,47 % H, 15,01 % Cl, 8,89 % N,

10,06 % O nalezeno: 58,28 % C, 7,47 % H, 14,93 % Cl, 8,73 % N.

d) Dihydrochlorid 2-[2-butoxybenzyl]-1,4,7-triazaheptanu.

3,6 g (8,1 mmol) Z-chráněnéhó aminu z příkladu c) se suspenduje ve 35 ml methanolu, smísí s 0,4 g palladia (10%) na aktivním uhlí a 0,3 ml vody a hydrogenuje se za normálního tlaku při teplotě místnosti. Po ukončení spotřeby vodíku se katalyzátor odfiltruje a filtrát se odpaří.

Výtěžek: 2,4 g (87,6 % teorie) nažloutlé pevné látky.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 53,25 % C, 8,64 % H, 20,96 % Cl, 12,42 % N,

4,73 % 0 nalezeno: 53,08 % C, 8,72 % H, 21,23 % Cl, 12,29 % N.

e) di-terc.Butylester kyseliny 3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(terč. butoxykarbonylmethyl)-4-(2-butoxybenzyl)-undekandikarboxylové

5,3 g (38,8 mmol) uhličitanu draselného se rozpustí v 5 ml vody a při 35 °C se smísí se 2,3 g (7,4 mmol) dihydrochloridu triaminu (příklad d). Přidá se 5,9 ml (40,6 mmol) terc.butylesteru kyseliny bromoctové po kapkách a míchá se vsázka osm hodin při 60 °C. Po 15-hodinovém míchání při teplotě místnosti se reakční směs smísí s vodou a vytřepe se s ethylacetátem. Organická fáze se suší nad síranem sodným, odpaří a zbytek se chromatografuje na silikagelu (ethylacetát/aceton). Po odpaření frakcí, obsahujících produkt, se získá pentaester jako bezbarvý olej’.

Výtěžek: 5,3 g (85,7 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 64,64 % C, 9,28 % H, 5,03 % N, 21,05 % 0 nalezeno: 64,77 % C, 9,34 % H, 4,88 % N.

f) Kyselina 3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4-(2butoxybenzy1)-undekandikarboxylová

5,11 g (6,3 mmol) pentaesteru z příkladu e) se rozpustí ve 40 ml methanolu a nechá se reagovat se 2,02 g (50,6 mmol) hydroxidu sodného ve 3,1 ml vody. Míchá se tři hodiny při 55 °C, potom se methanol odpaří, přidá se voda a ještě jednou se odpaří. Vyjme se do vody a ionexem se pH upraví na 1,9. Po odfiltrování ionexu se vodný roztok odpaří a pentakyselina se čistí přes preparativní HPLC (voda/methanol/pH 2). Frakce, obsahující produkt se odpaří., ještě jednou se vyjmou do vody a suší se vymražením.

Výtěžek: 2,9 g (82,8 % teorie) bezbarvého lyofilizátu.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla):

vypočteno: 54,05 % C, 6,71 % H, 7,56 % N, 31,6 % 0 nalezeno: 53,91 % C, 6,76 % H, 7,39 % N.

g) Komplex gadolinia se dvojsodnou solí kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-4-(2-butoxybenzy1)undekandikarboxylové

2,4’8 g (4,7 mmol) pentakysel iny z příkladu f) se suspenduje při 85 °C ve 20 ml vody a po částech se smísí s 0,85 g (2,35 mmol) gadoliniumoxidu. Po ukončení komplexace se zfiltruje, pH se nastaví na 7,2, míchá se deset minut při 90 . °C s 0,2 g aktivního uhlí, znovu se filtruje a filtrát se lyofilizuje.

Výtěžek: 3,5 g (98,8 % teorie) bezbarvého lyofilizátu.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 39,84 % C, 4,28 % H, 5,58 % N, 23,35 % 0, 20,86 % Gd, 6,10 % Na nalezeno: 39,73 % C, 4,39 % H, 5,47 % N, 20,71 %

Gd, 5,94 X Na.

Příklad 5

Komplex ytterbia se dvojsodnou solí kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-5-{4-[2-(2-ethoxy]benzy1}-undekandikarboxy1ové

a) di-terc.Butylester kyseliny 3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(terc, butoxykarbonyImethy1)-5-(4-[2-(2-ethoxyethoxy)ethoxy]benzyl}-undekandikarboxylové

16,7 g (21,4 mmol) di-terc.buty1 esteru kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(terč.butoxykarbonyImethyl)-5-(4hydroxybenzyl)-undekandikarboxylové (DOS 3710730) se rozpustí v 50 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu a při 0 °C pod argonem se smísí s 0,94 g (23,5 mmol) disperze hydridu sodného (60% v minerálním oleji). Vsázka se nechá 15 minut míchat, potom se přidá 4,73 g (24,0 mmol) 2-(2-ethoxyethoxy)ethylbromidu, teplota reakční směssi se nechá stoupnout na teplotu místnosti a míchá se další čtyři hodiny. Pro zpracování se vsázka vyjme do toluenu a vícekrát se vytřepe proti vodnému roztoku hydrogenuhličitanu sodnéo. Organická fáze se oddělí, suší se nad síranem hořečnatým, filtruje a odpaří. Olejovitý zbytek se chromatografuje na silikagelu hexanem/diethyletherem/triethylaminem, frakce, obsahující produkt se spojí a odpaří.

Výtěžek: 17,7 g (92,4 % teorie) bezbarvého oleje.

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 62,99 % C, 9,11 % H, 4,69 X N, 23,21 % 0 nalezeno: 63,07 % C, 9,27 % H, 4,75 % N.

b) Komplex ytterbia se dvojsodnou solí kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-5-{4-[2-(2-ethoxyethoxy)-ethoxy]-benzyl}-undekandikarboxylové

13,4 g (15,0 mmol) sloučeniny vyrobené podle a) se rozpustí ve 35 ml tetrahydrofuranu a smísí se 45 ml dvoj normálního hydroxidu - sodného, míchá se dvě hodiny při 60 °C, pH se nastaví na 1 koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou, odpaří se silně na rotační odparce a zbytek se čistí iontovýměnnou chromatografií (katex (H⁺-forma), eluens: vodný roztok amoniaku). Eluát se odpaří a silně vysuší ve vysokém vakuu, čímž se získá volné komplexotvorné činidlo. Pentakyselina se vyjme do Í50 ml vody a smísí se 3,94 g (7,.5 mmol) uhličitanu ytterbia. Suspenze se 3 hodiny míchá při 60 ⁰C a zfiltruje. Potom se jednonormálním hydroxidem sodným pH nastaví na 7,3. Pak se roztok při 80 °C po přídavku 1,0 g aktivního uhlí míchá jednu hodinu a zfiltruje. Filtrát poskytne po sušení vymražením bezbarvou pevnou látku.

Výtěžek: 11,4 g (91,6 % teorie)

Analýza (vztaženo na substanci prostou rozpouštědla): vypočteno: 39,09 % C, 4,37 % H, 5,07 % N, 25,07 % O, 20,86 % Yb, 5,54 % Na nalezeno: 38,84 % C, 4,45 % H, 5,02 % N, 20,69 %

Yb, 5,30 % Na.

Příklad 6

Zvýšení hloubky zdravého jaterního parenchymu 10 a 60 minut po infuzi 0,25molárního roztoku gadolinium IlI-komplexu se dvojnou solí kyseliny

3,6,9-triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekankarboxylové (Gd-EOB-DTPA, popsán v příkladu 8c EP 0405704) u 5 pacientů s jaterními metasázami v dávce 0,35 mmol/kg v Houndsfieldových jednotkách (HU) . Tato dávka odpovídá asi 16 g komplexu na 70 kg pacienta.

Tabulka 3 min po inf HU min po inf. HU pacient 1 pacient 2 pacient 3 pacient 4 pacient 5 .32

1982, speciálně pro

SH L 433 (vzorec XI)

Pro srovnání zkoušel Mtitzel a spol., jaterní diagnostiku vyvinutý hexajodovaný

v dávce, odpovídající 360 mg jodu/kg (asi 25 g jodu na 70 kg pacienta) a dosáhl zvýšení jen <10 HU (opice, pes, myš:> 40 HU). Z asi 90 % u lidí biliárně vylučovaný Iotroxinat (hexajodovaný, 2 karboxylové skupiny) se kumuluje v játrech při maximální snášitelné dávce, odpovídající asi 7 g jodu/7'0 kg pacienta jen 15 HU (Hiibner K.H. : Computertomographische Densitometrie von Leber, Milz und Nieren bei intravenos verabreichten lebergángigen Kontrastmitteln in Bolusform. Fortschr. Růntgenstr. 129, 289-297 (1978)).

Pro srovnání se také s asi 3,5 g gadolinia ve formě komplexu, který obsahuje jen jeden ion gadolinia/molekulu, vícenásobně vyšší absorpce rentgenového záření v játrech lidí než se 25 g jodu z SH L 433 (vzorec XI) popř. 7 g jodu Iotroxinátu, ačkoliv se u obou rentgenových kontrastních činidel jedná o hexajodované sloučeniny.

Příklad 7

Byl vyroben následující roztok:

0,1 mol holmium(III)-komplexu dimeglumínové soli kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tri s-(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzy1)undekandikarboxylové,

0,005 mol kalcium(II)-komplexu trimegluminové soli kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylové v 1 litru 5% roztoku manitu, pH 7,0.

Roztok se 30 minut infunduje v dávce 0,3 mmol/kg tělesné hmotnosti. CT-skany se provedou na. začátku infuze, na konci infuze a 30 minut po skončení infuze obvyklým způsobem.

Příklad 8

Dvojsodná sůl kyseliny

3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylové se komplexuje s různými rentgenové paprsky absorbujícími ionty kovů a pak se při různé koncentraci měří hodnota hloubky vzorků ve vodném fantomu, protože při měření zhruba odpovídá abdoméně člověka. Pracuje se na obchodně dostupném počítačovém tomografu při provozním napětí 137 kV a 110 mA.

Hodnoty v Hounsfieldových jednotkách (HU+SD)

Tabulka 4

Prvek	koncentrace (mmo1/1)	HU	±SD
H20	-	14	23
Gd	50	218	23
	500	1680	33
Tb	50	228'	25
	500	1760	45
Dy	50	226	23
	500	1840	42
Ho	50	221	29
	500	1890	40
Er	50	254	24
	500	1955	57
Yb	50	252	18
	500	1980	42
J	50	110	25
	500	914	27

Dochází k překvapivě vysoké účinnosti vzácných zemin oproti jodu, která bezpochyby se odráží zpětně na speciální podmínky.měření při abdominálním CT. Z lanthanidu je erbiu, ytterbiu a holmiu dávána přednost před dosud nejzkoušenějšími prvky gadoliniem a dysprosiem.

Příklad 9

Provedení pokusu

Padesát pacientů se známými jaterními metastázami bylo zkoumáno v jaterním CT 10 min, 60 min a (N=5) 120 min po intravenózní infuzi 0,2, 0,35 popř. 0,5 mmol/kg Gd-EOB-DTPA (viz příklad 6).

Gd-EOB-DTPA (0,25 mmol/1) se podává intřavenozne kapací infuzi do cévy na ruce. Doba trvání infuze činí 20 in pro dávkování 0,2 a 0,35 mmol/kg a 30 min pro nejvyšší dávku 0,5 mmol/kg.

Pacienti měli histologicky prokázané primární tumory (N = 9 s kolorektálním karcinomem, N= 2 s intestinálním karcinoidem, N = 1 s karcinomem žaludku, N = 1 s leiomyosarkomem a N- 1 s ovariálním-cysradenokarcinomem) a metastázy (N<. 5) byly prokázány CT s konstrast posilujícím činidlem během jednoho měsíce před Gd-EOB-DTPA-studií. Vylučovací kriteria pro pacienty byla:

podání kontrastního činidla, parametry.

CT-pokusy byly provedeny před a 10 min, 60 min a (N=5)

120 min po intravenózní infuzi Gd-EOB-DTPA se zařízením Siemens-Spiral-CT. Celá játra byla měřena během 20 až 30 sekund v dýchacím klidu. Posun stolu Činil 8 mm/s, kollimace 8 mm.

Na bázi obrazu před a po kontrastu byl vyhodnocen počet a velikost metastáz dvěma nezávislými pozorovateli kvalitativně (vynikající, dobré, masivní, minimální, žádné zlepšeni) a kvantitativní (měření Hounsfieldových jednotek).

Snášitelnost Gd-EOB-DTPA byla stanovena stanovením celkových zjištění, záznamem vitálních parametrů a laboratorní analýzou parametrů sera a moče.

Výsledky

Po intravenozní infuzi Gd-EOB-DTPA byl zjištěn dávkově závislý příjem CT-hustoty zdravých jater. Obrázek 1 představuje časový průběh CT-hustoty (Hounsfieldovy jednotky, HU) v játrech pacientů s histologicky prokázanými primárními tumory po počátku infuze 0,2 (o)-, 0,35 (♦) popř. 0,5 mmol/kg Gd-EOB-DTPA (4). CT-hustota v jaterních metastázách je označena symbolem *.

CT-hustota metastáz byla nezměněna. Navíc se podařilo zobrazení žlučníku a žlučových cest.

Vizualizace metastáz byla po infuzi Gd-EOB-DTPA ve všech dávkových skupinách zlepšena. Vynikající byla u obou dávkových skupin. Po nejvyšší dávce byly v průměru zjištěny další dvě metastázy. Střední velikost nejmenších nalezených metastáz se zmenšila z 20,3 na 16,6 mm. U pacientů se známými metastázami v pravém jaterním laloku byla po podání Gd-EOB-DTPA v levém jaterním laloku objevena další léze 7 mm v průměru, která před tím nebyla nalezena.

Obecná snášitelnost Gd-EOB-DTPA byla dobrá. Byly pozorovány jen čtyři střední popř. masivní vedlejší účinky. Ve dvou případech pociťovali pacienti pálení na místě infuze nebo od něj, které trvalo jen několik sekund popř. minut. Další vedlejší účinky byly nevolnost a epigastrální tlak.

Vyhodnocení laboratorních parametru neposkytlo žádný významný trend. U třech pacientů byl nalezen mírný vzestup aspartat- a alaninaminotransferas, který ale byl podmíněn pravděpodobně jaterními metastázami.

Je možno učinit závěr, že Gd-EOB-DTPA je dobře snášitelné a účinné jaterní popř. žlučníkové kontrastní činidlo pro počítačovou tomografii.

*i atívotót

S$Q SU PRAHA 2, Ké&WS 0

PATENTOVÉ

1. Použití chelátových

sloučenin obecného

Ν' COOX

k.

'COOX

NÁROKY

Claims (11)

1. X nezávisle na sobě znamená atom vodíku nebo ekvivalent kovového iontu prvku s pořadovým číslem 44-51 nebo 56-83, jeden ze zbytků E¹ má vzorec -CH2^_C6H4-(O)r-E², přičemž aromatický kruh může být substituován v poloze ortho-, meta- nebo para- a další zbytek E¹ znamená vodík,

   E² znamená uhlovodíkový zbytek, sestávající z 1 až 6 atomů uhlíku a 0 až 2 atomu kyslíku, fenyl- nebo benzylzbytek nebo’ vodík, r znamená čísla nula nebo jedna, přičemž karboxylové skupiny mohou být přítomny také jako amidy, společně s k nábojovému vyrovnání popřípadě potřebnými fyziologicky přijatelnými kationty pro medicínskou diagnostiku, pro výrobu kontrastních prostředků pro počítačovou tomografii jater a žlučových cest.
2. 2. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že komplexovaným kovem je atom lanthanoidu.
3. 3. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že komplexovaným kovem je cer, praseodym, gadolinium, dysprosium, holmium, erbium, ytterbium nebo lutecium.
4. 4. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že komplexovaným kovem je hafnium, vizmut nebo olovo.
5. 5. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že alespoň jedním z fyziologicky přijatelných kationtů je Na⁺, Ca^⁺, Mg^⁺ nebo kation organických bázi megluminu, glukosaminu, argininu, ornithinu, lysinu, 2-amino-l,3,4-butantriolu nebo ethanolaminu.
6. 6. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že r znamená nulu.
7. 7. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že r znamená jedna.
8. 8. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že R představuje methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, terc.butyl, fenyl nebo benzyl.
9. 9. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se t í m, Že R¹ je v poloze ortho nebo para.
10. 10. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že chelátovou sloučeninou je komplex gadolinia(III) s kyselinou

    3,6,9-triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou, komplex ytterbia(in) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou, komplex praseodymu(III) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethy1)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou, komplex lutecia(III) s kyselinou

    3.6.9- tr iaza-3,6,9-tris (karboxymethyl )-4-( 4-ethoxybenzyl ),undekandikarboxylovou, komplex ceru(III) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethy1)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou, komplex hafnia(IV) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tri s(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou, komplex vizmutu(III) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekand ikarboxy1ovou, komplex ytterbia s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris-(karboxymethy1)-5-(4-[2-(2-ethoxy} ethoxy)-ethoxy]-benzyl}-undekandikarboxylovou, komplex olova(II) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tri s(karboxymethyl)-4-(4-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou nebo komplex ytterbia(III) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethy1)-4-(2-ethoxybenzyl)undekandikarboxylovou.
11. 11. Použití chelátových sloučenin podle nároku 1, vyznačující se tím, že chelátovou sloučeninou je komplex gadolinia(III) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylovou, komplex ytterbia(III) s kyselinou

    3,6,9-triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylovou, komplex praseodymu(III) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylovou, komplex lutecia(III) s kyselinou

    3/6,9-triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4-(4-butylbenzyl)undekandikarboxylovou, komplex hafnia (IV) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4,8-bi s-(4-buty1benzyl)-undekandikarboxylovou, komplex vizmutuíIII) s kyselinou

    3.6.9- triazá-3,6,9-tris(karboxymethyl)-4,8-bis-(4-butylbenzyl)-undekandikarboxylovou nebo komplex olova(II) s kyselinou

    3.6.9- triaza-3,6,9-tris(karboxymethy1)-4-(4-butylbenzyl) undekandikarboxylovou.