CZ20012765A3

CZ20012765A3 - Purinové inhibitory kinasy 2 a Ikappa - Aalfa dependentní na cyklinu

Info

Publication number: CZ20012765A3
Application number: CZ20012765A
Authority: CZ
Inventors: Robert T. Lum; Cheri Lynn Blum; Richard Mackman; Michael M. Wick; Steven R. Schow; Jeffrey A. Zablocki; Prabha Ibrahim
Original assignee: Cv Therapeutics, Inc.
Priority date: 1999-02-01
Filing date: 2000-01-20
Publication date: 2002-08-14
Also published as: NO20013751D0; WO2000044750A1; DK1150982T3; IL144675A; JP2002535405A; AU2969300A; AR029612A1; NZ513371A; JP3681984B2; HUP0200535A2; TR200102714T2; ES2246829T3; RU2001124352A; DE60023268D1; UA74142C2; TW538044B; EP1150982B1; NO20013751L; CA2361518A1; DE60023268T2

Description

Oblast techniky:

Tento vynález se týká 2,6,9-trisubstituovaných purinů, u nichž bylo zjištěno, že jsou selektivními inhibitory buněčného cyklu kinás a, jako takové, sloučeniny jsou inhibitory buněčné proliferace. 2,6,9trisubstituované puriny jsou vhodné například při léčení autoimunitních onemocnění, jako je revmatická artritida, lupenka, diabetes typu I, sklerosa multiplex atd, při léčení rakoviny, kardiovaskulárních onemocnění, jako je restenosa, onemocnění hostitel versus štěp, dna, polycystické ledvinové onemocnění a další proliferativní choroby, jejich patogenese zahrnuje abnormální buněčnou proliferaci.

Tento vynález se také týká 2,6,9-trisubstituovaných purinů, které byly objeveny jako potentní a specifické inhibitory ΙκΒ-α kinasy, která brání aktivaci NF-κΒ indukované signálem a syntéze xytokinů in vitro a in vivo. U těchto inhibitorů se předpokládá, že inhibují syntézu cytokinů a adhezi proteinů, jejichž syntéza je transkripčně regulovaná NF-κΒ. Prozánětlivé cytokiny jako je IL-1, IL-6, TNF a adhezní proteiny (jako je ICAM, VCAM a výběry) spadají do této třídy molekul a byly implikovány v patogenních a zánětlivých onemocněních. Proto je potentní inhibitor ΙκΒ-α kinasy vhodný pro klinické zvládání nemocí, kde je požadována NF-κΒ aktivace pro indukci nemoci.

Dosavadní stav techniky

V několika minulých letech přispěl k našemu pochopení mechanismu buněčné proliferace a specifických případů, které se vyskytují v průběhu progrese buněk při mitose, pokrok v molekulární a buněčné biologii. Příkladně „Progress in Cell Cycle Research“, Sv.l.

Ed. L. Meijer, S. Guidet a H.Y.L. Tung; Plenům Press, New York, 1995. Tyto studie prokázaly, že progrese během buněčného cykluje regulována rodinou kinás serinu/threoninu, zvaných cyklin dependentní kinasy. Tyto enzymy obsahují (a) katalytický protein zvaný cyklin dependentní kinasa (CDK), který používá ATP jako substrát, a (b) regulátorový protein zvaný cyklin. Různé kombinace cyklin-CDK regulují takové jevy, jako je růst, replikace DNA a buněčné dělení. Jedním klíčovým členem CDK rodiny enzymů je CDK2. Ukázalo se, že CDK2 aktivita je zásadní pro progresi savčího buněčného cyklu na rozmezí Gl/S. Mikroinjekce protilátek řízená proti CDK2 blokuje progresi lidských diploidních fibroblastů do S fáze buněčného cyklu. Exprese CDK2 dominantního negativního mutantu v lidských buňkách osteosarkomu má podobný účinek. Dohromady indikují tyto studie, že inhibice celulární CDK2 aktivity bude bránit progresi buněk přes mitotický cyklus a indukovat růst zadržení dříve než S fáze. V souladu s tímto názorem ukazují studie s olomoucinem (2-(hydroxyethylamino)6-benzylmino-9-methylpurin), že je specifickým inhibitorem CDK2 s IC50 přibližně 2,1 pg/ml (J. Veselý, a kol.; Eur. J. Biochem 224, 771786 (1994), L. Meijer „Chemical Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases“, str. 351-356 v „Progress in Cell Cycle Research, Sv.l, Eds. Meijer, S. Guidet a H.Y.L.Tung; Plenům Press, New York, 1995.) In vivo studie využívající v kultuře savčí buňky prokázaly, že olomoucin inhibuje buněčnou proliferaci při průměrné koncentraci 50 pg/ml.

V tomto vynálezu jsme vyvinuli řadu sloučenin, jejichž biologická aktivita je výrazně silnější než olomoucinu. In vivo studie používající savčí buňky indikují, že některé z popsaných sloučenin inhibují buněčnou proliferaci při koncentracích, které jsou výrazně nižší než olomoucin.

Nedávno byla popsána aktivita ΙκΒ-α kinasy v cytoplasmě stimulovaných lidských endotelových buněk pupečníkové žíly (Benett a kol (1996) J. Biol. Chem 271, 19680-19688). Některé ze sloučenin z tohoto vynálezu byly identifikovány jako potentní a specifické inhibitory ΙκΒ-α kinasy, které brání signálem indukované NF-kB aktivaci a syntéze cytokinů in vitro a in vivo. Aktivace heterodimerního transkripčního faktoru NF-κΒ je komplexním procesem.

V nestimulovaných buňkách je NF-κ (p50/p65) heterodimer umístěn v cytosolu, kde je komplexován se subjednotkou ΙκΒ-α inhibitoru, ΙκΒ-α, váže na NF-κΒ a takto maskuje jeho nukleární lokalizační signál a brání transíokaci na jádra. Během stimulace buněk různými signály (jako lipopolysacharid) ΙκΒ-α je urychleně fosforylován, jednoznačně určen a štěpen proteasomem. Degradace ΙκΒ-α umožňuje transíokaci NF-κΒ na jádro, kde aktivuje transkripci řady genů se zánětlivou odezvou.

Tato pozorování předpokládají, že ΙκΒ-α kinasa je atraktivním cílem pro identifikaci inhibitorů, který může být užitečný pro léčení zánětlivých onemocnění, kde je požadována aktivace NF-κΒ pro vyvolání choroby.

Podstata vynálezu:

Úkolem tohoto vynálezu je poskytnout 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny, které inhibují cyklin dependentní kinasu 2.

Dalším úkolem tohoto vynálezu je poskytnout 2,6,9trisubstituované purinové sloučeniny, které jsou vhodné pro inhibici buněčné proliferace.

Tento vynález také předkládá farmaceutické prostředky, které zahrnují 2,6,9- trisubstituovanou purinovou sloučeninu a farmaceuticky přijatelný nosič.

Tento vynález také zahrnuje metody inhibice buněčné proliferace, které zahrnují podávání tomu, kdo to potřebuje, účinného množství 2,6,9-trisubstituované purinové sloučeniny,

V jednom provedení je vynálezem A 2,6,9- trisubstituovaná purinová kompozice, se základem majícím následující vzorec:

kde R¹ je halogen nebo RT-X, kde X je NH, O, S, S(O2). V kompozici R'i je alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl jsou volitelně substituovány jedním až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, CF3, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, so2nr²⁰cor²¹, so2nr²⁰conr²⁰r²³, so2nr²⁰co2r²¹, nr²⁰r²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, OR²⁰, oconr²⁰r²³, oconr²⁰so2r²¹, oconr²⁰r²³, cn, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO2R²¹ a COR²⁰. V prostředku také R2 je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány jedním až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹,

so₂nr²⁰conr²⁰r²³, so2nr²⁰co2r²¹, nr²⁰r²³, nr²⁰cor²¹,

NR²⁰CO₂R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, OR²⁰, oconr²⁰r²³, oconr²⁰so2r²¹, oconr²⁰r²³, cn, co₂r²⁰,

CONR²⁰R²³, CONR²⁰SCX₂R²¹ a COR²⁰. Dále v těchto kompozicích R3 je halogen, thio, alkoxy, alkylthio, alkyl, -NR4R5 nebo složka mající vzorec

kde m=l-3, a=l-3, o=l,3, alkylthiol;

y=karbonyl, -NR4R5, hydroxyl, thioí· alkoxy,

R4 a R5 jsou každý nezávisle vodík, OR₂₀, NR20R23 nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány jedním až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO₂R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, SO₂NR²⁰CONR^2QR²³, SO2NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, OR²⁰, OCONR²⁰R²³, oconr²⁰so2r²¹, oconr²⁰r²³, CN, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO2R²¹ a COR²⁰;

R je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci_i₅alkylu, C₂i₅alkenylu, C₂-i5alkynylu, heterocyklylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci_₆alkylu, CF₃, arylu a heteroarylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Cj.isalkylu, C2isalkenylu, C2-i5alkynylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heterocyklyl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2, S(O)R²², SO2R²², SO2N(R²⁰)2, SO2NR²⁰COR²², SO2NR²⁰CON(R²⁰)2 , SO2NR²⁰CO2R²², N(R²⁰)2 , NR²⁰COR²², NR²⁰CO2R²² , NR²⁰CON(R²⁰)2, NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR²⁰ , CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, conr²⁰so2r²² , NR²⁰SO2R²² , SO2NR²⁰CO2R²², OR²⁰, OCONR²⁰SO2R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH2OC(O)R²⁰ a OCON(R²⁰)2, a každý volitelný heteroarylový, arylový a heterocyklylový substituent je volitelně substituován halogenem, alkylem, CF3, amino, mono- nebo di-alkylamino, alkylnebo aryl- nebo heteroarylamidem, NCOR²², NR²⁰SO2R²², COR²⁰, CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, NR²⁰CON(R²⁰)2, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰)2, SR²⁰, S(O)R²², SO2N(R²⁰)₂, CN nebo OR²⁰;

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci-isalkylu, C₂i₅alkenylu, C₂.i₅alkynylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány s 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci_6alkylu, CF₃, arylu, a heteroarylu; a

R²³ je R²¹ nebo H.

Existují některá omezení pro rozsah vynálezu týkající se prostředků. Pokud Y je karbonyl, pak Y a R₄' společně mohou být jediný atom kyslíku, R₄ a R5 společně mohou být jediný atom kyslíku, R₄' a R₅' mohou být společně jediný kyslíkový atom. Když R₃ je 2-hydroxyethylamino a R₂ je methyl, R/-X není amino, 3methyl-2-butenylamino, benzylamino nebo m-hydroxybenzylamino když R₃ není 2-hydroxyethylamino. Když R₂ je isopropyl, R/-X není benzylamino, m-hydroxybenzylamino nebo 3-methylbutylamino. Když

R₃ je 2-hydroxyethylamino a R₂ je 2-hydroxyethyl, R/-X není benzylamino a když R₃ je zvolen ze skupiny sestávající z 2-methyl~2hydroxypropylamino a 2-dimethylaminoethylamino, a když R₂ je methyl, potom R/-X není benzylamino.

V jiném provedení je tímto vynálezem způsob inhibice buněčné proliferace u savců, zahrnující podávání terapeuticky účinného množství prostředku podle nároku 1 savci. Metoda je vhodná pro léčení poruch buněčné proliferace jako je revmatická artritida, lupus, diabetes typu I, multiple sklerosis, rakovina, restenosa, onemocnění z hostitelského štěpu a dna.

V ještě dalším provedení je tímto vynálezem farmaceutický prostředek obsahující výše uvedenou kompozici ve směsi s jedním nebo více farmaceutickými excipienty.

V ještě dalším provedení je tímto vynálezem kompozice vhodná pro léčení fungálních infekcí (fungí) u lidí, živočichů a rostlin.

Popis obrázku

Obrázek 1 je graf střední plochy vnitřní vrstvy cévní stěny (neointima) karotické artérie krysy, zpracované se sloučeninou 3 připravenou podle příkladu 2, kde nešrafovaná část představuje neošetřenou sekci karotické artérie a šrafovaná část reprezentuje ošetřenou sekci karotické artérie.

Popis běžného provedení

Předložený vynález se týká 2,6,9-trisubstituované sloučeniny purinu mající následující vzorec:

(D kde

R¹ je halogen nebo R'i-X, kde X je NH, O, S, S(O₂)

R'i je alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, CF₃, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO₂R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, SO₂NR²⁰CONR²⁰R²³, SO2NR²⁰CO2R²¹, NR^2oR²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, or²⁰, oconr²⁰r²³, oconr²⁰so₂r²¹, oconr²⁰r²³, cn, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO2R²¹ a COR²⁰;

R₂ je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO₂R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, so₂nr²⁰conr²⁰r²³, so2nr²⁰co2r²¹, nr^2Or²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R^2o)C(NR^2O)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, OR²⁰, OCONR²⁰R²³, oconr²⁰so₂r²¹, oconr²⁰r²³, cn, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO2R²¹ a COR²⁰;

• »

R-3 je halogen, hydroxyl, thio, alkoxy, alkylthio, alkyl, -NR₄R₅nebo složka mající vzorec

kde m=l-3, 11=1-3, 0=1,3., y=karbonyl, -NR₄R₅, hydroxyl, thio( alkoxy, alkylthiol;

R₄ a R5 jsou každý nezávisle vodík, OR₂₀, NR₂oR₂3 nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO₂R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, SO₂NR²⁰CONR²⁰R²³, so2nr²⁰co2r²¹, nr²⁰r²³, nr²⁰cor²¹, nr²⁰co2r²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, or²⁰, oconr²⁰r²³, oconr²⁰so2r²¹, oconr²⁰r²³, cn, co2r²⁰, conr²⁰r²³, CONR²⁰SO₂R²¹ a COR²⁰; s tou podmínkou, že pokud Y je karbonyl, pak Y a R₄' společně mohou být jediný atom kyslíku, R₄ a R5 společně mohou být jediný atom kyslíku, R₄' a R5' mohou být společně jediný kyslíkový atom; a když R₃ je 2hydroxyethylamino a R₂ je methyl, R/-X není amino, 3-methyl-2butenylamino, benzylamino nebo m-hydroxybenzylamino když R₃ není

2-hydroxyethylamino; když R₂ je isopropyl, R/-X není benzylamino, m-hydroxybenzylamino nebo 3-methylbutylamino; když R3 je 210 • · hydroxyethylamino a R₂ je 2-hydroxyethyl, R/-X není benzylamino a když R₃ je zvolen ze skupiny sestávající z 2-methyl-2-hydroxypropylamino a 2-dimethylaminoethylamino, a když R₂ je methyl, potom R/-X není benzylamino.

V prostředcích R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci₁₅alkylu, C₂-i₅alkenylu, C₂.j5alkynylu, heterocyklylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-C].₆alkylu, CF₃, arylu a heteroarylu;

V prostředcích také R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.i₅alkylu, C₂.i₅alkenylu, C₂.i₅alkynylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heterocyklyl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, CF₃, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)₂, S(O)R²², SO2R²², SO2N(R²⁰)₂, SO₂NR²⁰COR²²,

SO₂NR²⁰CON(R²⁰)2 , SO2NR²⁰CO2R²², N(R²⁰)2 , NR²⁰COR²², NR²⁰CO2R²² , NR²⁰CON(R²⁰)2, NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, cor²⁰ ; CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, CONR²⁰SO2R²² , NR²⁰SO₂R²² , SO2NR²⁰CO2R²², OR²⁰, OCONR²⁰SO2R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH2OC(O)R²⁰ a OCON(R²⁰)₂, a každý volitelný heteroarylový, arylový a heterocyklylový substituent je volitelně substituován halogenem, alkylem, CF₃, amino, mono- nebo dialkylamino, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidem, NCOR²², NR²⁰SO2R²², COR²⁰, CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, NR²⁰CON(R²⁰)2, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰)2, SR²⁰, S(O)R²², SO2N(R²⁰)₂, CN nebo OR²⁰;

V prostředcích R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ciisalkylu, C₂.i₅alkenylu, C₂_i₅alkynylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány s 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl11

« » · · • · · ♦ · · * « · · «··· nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci.₆alkylu, CF₃, arylu, a heteroarylu; a

R²³ je R²¹ nebo H

R'i je přednostně aryl, substituovaný aryl, každý mající 6 uhlíkových atomů, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci s 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, arylu, R²², NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, OR²⁰, CN;

aralkyl, substituovaný aralkyl, každý mající 6-8 atomů uhlíku, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci s 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, arylu, R²², NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, OR²⁰, CN;

-CH2-fenylu, přičemž fenylový kruh je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, R₂₂, OR₂₀, CN; substituovaného pyridylalkylu; nesubstituovaného pyridylalkylu, pyridylu, substituovaného pyridylu, a benzylu substituovaného halogenem, alkoxyskupinou, fenylem, pyridylem nebo nitroskupinou.

V některých kompozicích R'i je přednostně CH₂-aryl nebo CH₂substituovaný aryl. Výhodněji R'i je vybrán z 3-methylthiofenylu, 4methylthiofenylu, 4-fenylbenzylu, 4-methoxybenzylu, 4-bifenylu, 3methoxybenzylu, 4-(2-thienyl)benzylu, 4-(4-methyl)fenylbenzylu, 4-(4trifluormethyl)fenylbenzylu, 4-(4-nitrilo)fenylbenzylu, 4-(2-pyridinyl)benzylu, piperonylu, 3-methoxbenzylu, 4-chlorbenzylu a 4-nitrobenzylu.

R₂ je přednostně vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny substituovaný nižší alkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, každý mající jeden až 6 atomů uhlíku, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², NR²⁰R²³, OR²⁰;

·« · · »

·· • · 4 • · substituovaný alkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, každý mající 1 až 6 uhlíkových atomů, kde substituce zahrnuje volitelně substituci 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², NR²⁰R²³ a OR²⁰. Výhodněji R₂ je isopropyl.

R₃ je přednostně -NR4R5 kde R4 a R5 jsou každý zvolen ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, heterocyklylu, acylu, arylu, heteroarylu, aralkylu, heteroaralkylu, alkylalkenylu, alkylalkynylu, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, a COR²⁰. V některých prostředcích R4 a R5 jsou přednostně každý H, -CH2CH₂OH, -CHR'CH₂OH nebo -CH₂CHR'OH, -CH₂CH₂NH₂, CHR'CH₂NH₂, -CH₂CHR'NH₂, kde R'je vodík nebo alkyl mající od 1 do 6 atomů uhlíku.

R²⁰ je přednostně člen vybraný ze skupiny sestávající z H, C, Ci_₈alkylu.

R²¹ je přednostně člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_ 3alkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2.

R²² je přednostně člen vybraný ze skupiny sestávající z C1.3 alkylu, arylu, heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, alkylu nebo arylu, CN, O-Ci-ealkylu, a CF₃.

Výhodné kompozice 2,6,9-trisubstituovaného purinu podle tohoto vynálezu zahrnují • 9

4 ♦ • · • · ····

2- {(2-hydroxyethyl)[9-(methyIethyl)-6-({[4-(trifluormethyl)- feny l]methyl}amino)purin-2-yl] amino} ethan-l-ol;

{((2S)oxolan-2yl)methyl}(6-([(4-fluorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amin;

[((2R)oxolan-2-yl)methyl](6-{[(4-fluorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amin;

(2-aminoethyl)(6-{ [3,5-dichlorfenyl)methyl] amino }-9-(methylethyl )purin-2-yl)amin;

(2-aminoethyl)[6-({[4-chlor-3-(trifluormethyl)fenyl]methyl}amino)-9-(methylethyl)purin-2-yl]amin;

[-[(6-{ [(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]-

3- methylbutanamid;

(2-amino-2-methylpropyl)(6-{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyi)purin-2-yl)amin;

3-(2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]-6-{[4-chlorfenyl)methyl]amino}- purin-9-yl)butan-2-on;

2- [(6-{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]-

3- methylbutan-l-ol;

4- [({2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}amino)- methyl]benzensulfonamid;

2-[(2-hydroxyethyl)(6-([(4-methoxyfenyl)methyl]amino}-9-(methyl- ethyl)purin-2-yl)amino]ethan-l-ol;

2-((2-hydroxyethyl)(9-(methylethyl)-6-[(4-fenylfenyl)amino]purin-2- yl}amino)ethan-l-ol;

{2-[(2-amino-2-propyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4chlorfenyl)methyl]amin;

{2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4chlorfenyl)methyl]amin;

{2-[(2-aminopropyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4chlorfenyl)methyl]amin a

2-[(2-aminoethyl)(6-{ [(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)- purin-2-yl)amino]ethan-l-ol.

* ·

Jsou určitá omezení v rozsahu Ri, Ri', R₂ a R₃. Jak bylo zmíněno výše, když R₃ je 2-hydroxyethylamino a R₂ je methyl, R/-X nemůže být amino, 3-methyl-2-butenylamino, benzylamino nebo m-hydroxybenzylamino. Když R₃ je 2-hydroxyethylamíno a R₂ je isopropyl, R/-X nemůže být benzylamino, m-hydroxybenzylamino nebo 3-methylbutylamino. Když R₃ je 2-hydroxyethylamino a R₂ je 2-hydroxyethyl, Ri'-X nemůže být benzylamino. Když R₃ je 2-propanol.2-methylamino nebo 2-dimethylaminoethylamino a R₂ je methyl, R/-X nemůže být benzylamino.

Dále jsou uvedeny definice některých používaných termínů.

„Halo“ nebo „halogen“ - samotný nebo v kombinaci znamená všechny halogeny, tj. chlor (Cl), fluor (F), brom (Br), jod (I).

„Hydroxyl“ označuje skupinu -OH.

„Thiol“ nebo „merkapto“ označuje skupinu -SH.

„Alkyl“ - samotný nebo v kombinaci znamená od alkanu odvozený radikál obsahující od 1 do 20, přednostně 1 až 15, atomů uhlíku (pokud není specificky definováno). Je to přímý alkylový řetězec, větvený alkyl nebo cykloalkyl. Přednostně přímé nebo větvené alkylové skupiny obsahují od 1 do 15, výhodněji 1 až 8, ještě přesněji 1-6, ještě výhodněji 1-4 a nejvýhodněji přednostně 1-2 uhlíkové atomy, jako je methyl, ethyl, propyl, isopropyl, butyl, t-butyl a podobné. Termín „nižší alkyl“ jak se zde používá k popisu přímého řetězce alkylových skupin, bude popsán bezprostředně dále. Přednostně jsou cykloalkylové skupiny monocyklické, bicyklické nebo tricyklické kruhové systémy 38, výhodněji 3-6 členné v kruhu, jako je cyklopropyl, cyklopentyl, cyklohexyl, adamantyl a podobné. Alkyl také zahrnuje přímé řetězce nebo větvené alkylové skupiny, které obsahují nebojsou přerušeny cykloalkylovou částí. Alkylová skupiny s přímým nebo větveným řetězcem je napojena na jakékoliv dostupné místo pro vznik stabilní sloučeniny. Její příklady zahrnují, ale nejsou na ně omezeny, 4-(isopropyl)-*cyklohexylethyl nebo 2-methyl-cyklopropylpentyl.

Substituovaný alkyl je alkyl s přímým řetězcem, větvený alkyl nebo cykloalkyl definovaný výše, nezávisle substituovaný 1 až 3 skupinami nebo substituenty halogenem, hydroxy, alkoxy, alkylthio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, acyloxy, aryloxy, heteroaryloxy, amino volitelně mono nebo di-substituovaný alkylovou, arylovou nebo heteroarylovou skupinou, amidino, močovino, volitelně substituované alkylovými, arylovými, heteroarylovými nebo heterocyklylovými skupinami, aminosulfonyl volitelně N-mono nebo N,N-di-substituovaný alkylovými, arylovými nebo heteroarylovými skupinami, alkylsulfonyl amino, ary lsulfony lamino, heter o ary lsulfony lamino, alkylkarbonylamino, arylkarbonylamino, heteroarylkarbonylamino nebo podobné.

„Alkenyl“ - samotný nebo v kombinaci znamená přímý, větvený nebo cyklický uhlovodík obsahující 2-20, přednostně 2-17, výhodněji 210, ještě výhodněji 2-8, nejvýhodněji 2-4 uhlíkové atomy, alespoň jeden, přednostně 1-3, výhodněji 1-2, nejvýhodněji jeden uhlík nebo dvojnou vazbu uhlíků. V případě cykloalkylové skupiny není konjugace více než jednoho uhlíku na uhlíkovou dvojnou vazbu taková, aby se automaticky formovala do kruhu. Uhlík na dvojných uhlíkových vazbách může být buď obsažen v cykloalkylové části, s výjimkou cyklopropylu, nebo v přímém řetězci nebo větvené části. Příklady alkenylových částí zahrnují ethenyl, propenyl, isopropenyl, butenyl, cyklohexenyl, cyklohexenylalkyl a podobné. Substituovaný alkenyl je alkenyl s přímým řetězcem, větvený alkenyl nebo cykloalkenylová skupina definovaná výše, nezávisle substituovaná 1 až 3 skupinami nebo substituenty halogenem, hydroxy, alkoxy, alkylthio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, acyloxy, aryloxy, heteroaryloxy, amino volitelně mono* nebo di-substituovaná alkylovou, arylovou nebo heteroarylovou skupinou, amidino, močovino, volitelně substituované alkylovými, arylovými, heteroarylovými nebo heterocyklylovými skupinami, aminosulfonyl volitelně N-mono nebo N,N-di-substituovaný ·· alkylovými, arylovými nebo heteroarylovými skupinami, alkylsulfonylamino, arylsulfonylamino, heteroarylsulfonylamino, alkylkarbonylamino, arylkarbonylamino, heteroarylkarbonylamino, karboxy, alkoxykarbonyl, aryloxykarbonyl, heteroaryloxykarbonyl nebo podobné navázané na jakémkoliv dostupném místě pro vznik stabilní sloučeniny.

„Alkynyl“ - samotný nebo v kombinaci znamená přímý nebo větvený uhlovodík obsahující 2-20, přednostně 2-17, výhodněji 2-10, ještě výhodněji 2-8, nejvýhodněji 2-4 uhlíkové atomy obsahující alespoň jednu, přednostně jednu, trojnou vazbu uhlík- uhlík. Příklady alkynylových skupin zahrnují ethynyl, propynyl, butynyl a podobné. Substituovaný alkynyl se týká alkynylu s přímým řetězcem nebo větveného alkenylu definovaných výše, nezávisle substituovaný 1 až 3 skupinami nebo substituenty halogenem, hydroxy, alkoxy, alkylthio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, acyloxy, aryloxy, heteroaryloxy, amino volitelně mono- nebo di-substituovaná alkylovou, arylovou nebo heteroarylovou skupinou, amidino, močovino, volitelně substituované alkylovými, arylovými, heteroarylovými nebo heterocyklylovými skupinami, aminosulfonyl volitelně N-mono nebo N,N-di-substituovaný alkylovými, arylovými nebo heteroarylovými skupinami, alkylsulfonylamino, arylsulfonylamino, heteroarylsulfonylamino, alkylkarbonylamino, arylkarbonylamino, heteroarylkarbonylamino nebo podobné navázané na jakémkoliv dostupném místě pro vznik stabilní sloučeniny.

„Alkylalkenyl“ označuje skupinu -R-CR'=CR='R, kde R je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl, R', R', R může být nezávisle vodík, halogen, nižší alkyl, substituovaný nižší alkyl, acyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl, nebo substituovaná heteroaryl jak je definován výše.

„Alkylalkynyl“ označuje skupiny -RC^CR', kde R je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl, R'je vodík, nižší alkyl, aubatituovaný • « nižší alkyl, acyl, aryl, substiuovaný aryl, heteroaryl, nebo substituovaný heteroaryl, jak je definován výše.

„Alkoxy“ označuje skupinu -OR, kde R je nižší alkyl, substituovaný nižší alkyl, acyl, aryl, substituovaný aryl, aralkyl, substituovaný aralkyl, heteroalkyl, heteroarylalkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, cykloheteroalkyl nebo substituovaný cykloheteroalkyl, jak je definován.

„Alkylthio“ označuje skupinu -SR, -S(O)_n=i.₂-R, kde R je nižší alkyl, substituovaný nižší alkyl, aryl, substituovaný aryl, aralkyl nebo substituovaný aralkyl, jak je zde definován.

„Acyl“ označuje skupiny -C(O)R, kde R je vodík, nižší alkyl, substituovanáý nižší alkyl, aryl, substituovaný aryl a podobné, jak je definováno výše.

„Aryloxy“ označuje skupiny -Oar, kde Ar je aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaná heteroarylová skupina, jak je zde definováno.

„Amino“ označuje skupinu NRR', kde R a R' mohou být nezávisle vodík, nižší alkyl, substituovaný nižší alkyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl, nebo substituovaný heteroaryl, jak je zde definován, nebo acyl.

„Amido“ označuje skupinu -C(O)NRR', kde R a R'mohou bát nezávisle vodík, nižší alkyl, substituovaný nižší alkyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl, jak je zde definován.

„Karboxyl“ označuje skupinu -C(O)OR, kde R je vodík, nižší alkyl, substituovaný nižší alkyl, aryl, substituovaný aryl, heteroaryl, nebo substituovaný heteroaryl jak je zde definován.

„Aryl“ samotný nebo v kombinaci znamená fenyl nebo naftyl výhodně karbocyklický kondenzovaný s cykloalkylem přednostně s 5-7, výhodněji 5-6, členným kruhem, a/nebo popřípadě substituovaný s 1 až 3 skupinami nebo substituenty halogenem, hydroxy, alkoxy, alkylthio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, acyloxy, aryloxy, heteroaryloxy, amino volitelně mono- nebo di-substituovaný alkylovou, arylovou nebo heteroarylovou skupinou, amidino, močovino, volitelně substituované alkylovými, arylovými, heteroarylovými nebo heterocyklylovými skupinami, aminosulfonyl volitelně N-mono nebo N,N-di-substituovaný alkylovými, arylovými nebo heteroarylovými skupinami, alkylsulfonylamino, arylsulfonylamino, heteroarylsulfonylamino, alkylkarbonylamino, arylkarbonylamino, heteroarylkarbonylamino nebo podobné.

„Substituovaný aryl“ označuje aryl popřípadě substituovaný jednou nebo více funkčními skupinami, jako je halogen, nižší alkyl, nižší alkoxy, alkylthio, acetylen, amino, amido, karboxyl, hydroxyl, aryl, aryloxy, heterocykl, heteroaryl, substituovaný heteroaryl, nitro, kyano, thiol, sulfamido a podobné.

„Heterocyklus“ označuje nasycenou, nenasycenou nebo aromatickou karbocyklickou skupinu mající jediný kruh (jako je morfolin, pyridyl nebo furyl) nebo násobně kondenzované kruhy (jako je naftylpyridyl, chinoxalyl, chinolinyl, indolizinyl nebo benzo[b]thienyl) a mající v kruhu alespoň jeden heteroatom, jako je N, O nebo S, které mohou být nesubstituované nebo substituované např. halogenem, nižším alkylem, nižší alkoxyskupinou, alkylthio, acetylenem, amino, amido, karboxylem, hydroxylem, arylem, aryloxy, heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

„Heteroaryl“ samotný nebo v kombinaci označuje monocyklickou aromatickou kruhovou strukturu obsahující 5 až 6 atomů v kruhu, nebo bicyklickou aromatickou skupinu mající 8 až 10 atomů, obsahující jeden

•	1· •	* ♦	44 •	•	4 4	44 • 4	• 4 4 4
4	•	4 *	•	4	4 4	4 4	4
φ	«	··· 4	4 .	•	44 44	4 4 ·	4
•	• 44	4 • 4	4 44	•	• 4	4 4 44	• 4 44 4

nebo více, přednostně 1-4, výhodněji 1-3, ještě výhodněji 1-2, heteroatomy nezávisle vybrané ze skupiny O, S a N a popřípadě substituované s 1 až 3 skupinami nebo substituenty halogenem, hydroxy, alkoxy, alkylthio, alkylsulfinyl, alkylsulfonyl, acyloxy, aryloxy, heteroaryloxy, amino volitelně mono- nebo di-substituovaný alkylovou, arylovou nebo heteroarylovou skupinou, amidino, močovino, volitelně substituované alkylovými, arylovými, heteroarylovými nebo heterocyklylovými skupinami, aminosulfonyl volitelně N-mono nebo N,N-di-substituovaný alkylovými, arylovými nebo heteroarylovými skupinami, alkylsulfonylamino, arylsulfonylamino, heteroarylsulfonylamino, alkylkarbonylamino, arylkarbonylamino, heteroarylkarbonylamino nebo podobné. Heteroaryl je také uvažován, že zahrnuje oxidovaný S nebo N, jako je sulfinyl, sulfonyl a N-oxid terciárního dusíku v kruhu. Uhlíkový nebo dusíkový atom je místem připojení heteroarylové kruhové struktury tak, že je vytvořen stabilní aromatický kruh. Příklady heteroarylových skupin jsou pyridinyl, pyridazinyl, chinazolinyl, purinyl, indolyl, chinolinyl, pyrimidinyl, pyrrolyl, oxazolyl, thiazolyl, thienyl, isoxazolyl, oxathiadiazolyl, isothiazolyl, tetrazolyl, imidazolyl, triazinyl, furanyl, benzofuryl, indolyl a podobné. Substituovaný heteroaryl obsahuje substituent navázaný na dostupný uhlík nebo dusík pro vznik stabilní sloučeniny.

„Heterocyklyl“ samotný nebo v kombinaci znamená nearomatickou cykloalkylovou skupinu mající od 5 do 10 atomů, v níž 1 až 3 uhlíkové atomy v kruhu jsou nahrazeny heteroatomy O, S nebo N, a jsou popřípadě benzo- kondenzovaný nebo kondenzovaný heteroaryl 5-6 lčnného kruhu a/nebo jsou volitelně substituované jako v případě cykloalkylu, Heterocyklyl je také míněn, že zahrnuje oxidovaný S nebo N, jako je sulfinyl, sulfonyl a N.oxid terciárního dusíku v kruhu. Místo navázání je na uhlíkovém nebo dusíkovém atomu. Příklady heterocyklylových skupin jsou tetrahydrofuranyl, dihydropyridinyl, piperidinyl, pyrrolidinyl, piperazinyl, dihydrobenzofuryl, dihydroindolyl a podobné. Substituovaný heterpcyklyl obsahuje

• · *

9 9 ·

Φ ·9·· » · ·· ·· * Φ · substituent dusík navázaný na dostupný uhlík nebo dusík za vzniku stabilní sloučeniny.

„Substituovaný heteroaryl“ označuje heterocyklus volitelně mononebo di-substituovaný jednou nebio více funkčními skupinami, jako je halogen, nižší alkyl, nižší alkoxy, lkylthio, acetylen, amino, amido, karboxyl, hydroxyl, aryl, aryloxy, heterocykl, substituovaný heterocykl, heteroaryl, substituovaný heteroaryl, nitro, kyano, thiol, sulfamido a podobné.

„Aralkyl“ označuje skupinu -R-Ar, kde Ar je arylová skupina a R je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl. Arylové skupiny mohou být volitelně nesubstituované nebo substituované halogenem, nižším alkylem, alkoxy, alkylthio, acetylenem, amino, amido, karboxylem, hydroxylem, arylem, aryloxy, heterocyklem, substituovaným heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

„Heteroalkyl“ označuje skupinu -R-Het, kde Het je heterocyklická skupina a R je nižší alkyl. Heteroalkylové skupiny mohou být popřípadě nesubstituované nebo substituované např. halogenem, nižším alkylem, nižším alkoxy, alkylthio, acetylenem, amino, amido, karboxylem, arylem, aryloxy, heterocyklem, substituovaným heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

„Heteroarylalkyl“ označuje skupinu -R-HetAr, kde HetAr je heteroarylová skupina a R je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl. Heteroarylalkyové skupiny mohou být popřípadě nesubstituované riebo substituované např. halogenem, nižším alkylem, substituovaným nižším alkylem, alkoxy, alkylthio, acetylenem, arylem, aryloxy, heterocyklem, substituovaným heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

4··♦ • « ·· · ·· • · ·♦· · • ·· ···♦ •» · · •· * • ·· * • ·· *· ·»·· „Cykloalkyl“ označuje dvojvaznou cyklickou nebo polycyklickou alkylovou skupinu obsahující 3 až 15 uhlíkových atomů.

„Substituovaný cykloalkyl“ označuje cykloalkylovou skupinu obsahující jeden nebo více substituentů s, např. halogenem, nižším alkylem, substituovaným nižším alkylem, alkoxy, alkylthio, acetylenem, arylem, aryloxy, heterocyklem, substituovaným heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

„Cykloheteroalkyl“ označuje cykloalkylovou skupinu, kde jeden nebo více z uhlíkových atomů kruhu je nahrazen heteroatomem (jako je N,O,S nebo P).

„Substituovaný cykloheteroalkyl“ označuje cykloheteroalkylovou skupinu, jak je definována, která obsahuje jeden nebo více substituentů, jako je halogen, nižší alkyl, nižší alkoxy, alkylthio, acetylen, amino, amido, karboxyl, hydroxyl, aryl, aryloxy, heterocykl, substituovaný heterocykl, heteroaryl, substituovaný heteroaryl, nitro, kyano, thiol, sulfamido a podobně.

„Alkylcykloalkyl“ označuje skupinu -R-cykloalkyl, kde cykloalkylem je cykloalkylová skupina a R je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl. Cykloalkylové skupiny mohou být popřípadě nesubstituovány nebo substituovány s např. halogenem, nižším alkylem, nižším alkoxy, alkylthio, acetylenem, amino, amido, karboxylem, hydroxylem, arylem, aryloxy, heterocyklem, substituovaným heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

„Alkylcykloheteroalkyl“ označuje skupinu -R-cykloheteroalkyl, kde R je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl. Cykloheteroalkylové skupiny mohou být popřípadě nesubstituovány nebo substituovány s např. halogenem, nižším alkylem, nižší alkoxyskupinou, • 4 • * ·· • · ·· • ·44« • ··

44·· ·< ·

44 • · 4·

4·#··

44

44*

4 4 «444 alkylthio, amino, amido, karboxylem, acetylenem, hydroxylem, arylem, aryloxy, heterocyklem, substituovaným heterocyklem, heteroarylem, substituovaným heteroarylem, nitro, kyano, thiolem, sulfamido a podobně.

„Farmakologicky přijatelná sůl“ je sůl připravená běžnými postupy, které jsou odborníkovi ze stavu techniky velmi dobře známé. „Farmakologicky přijatelné soli“ zahrnují bázické soli anorganických a organických kyselin, zahrnující, ale neomezující se na ně, kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu bromovodíkovou, kyselinu sírovou, kyselinu fosforečnou, methansulfonovou kyselinu, ethansulfonovou kyselinu, kyselinu jablečnou, kyselinu octovou, kyselinu oxalovou, kyselinu vinnou, kyselinu citrónovou, kyselinu mléčnou, kyselinu fumarovou, kyselinu jantarovou, kyselinu maleinovou, kyselinu salicylovou, kyselinu benzoovou, kyselinu fenyloctovou, kyselinu mandlovou a podobné. Pokud sloučeniny vzorce I-III zahrnují kyselinovou funkci, jako je karboxylová skupina, jsou odborníkovi z oblasti techniky velmi dobře známé, a zahrnují kationty alkalických kovů, kovů alkalických zemí, amoniové, kvarterní amoniové kationty a podobně. Pro další příklady typů sloučenin, které jsou „farmakologicky přijatelnými solemi“, viz Berge a kol., J. Pharm. Sci. 66, 1 (1977).

Pokud finální 2,6,9-trisubstituovaná purinová sloučenina z tohoto vynálezu obsahuje zásaditou skupinu, potom může být připravena adiční sůl kyseliny kompozice. Adiční soli kyselin sloučenin podle tohoto vynálezu jsou připraveny standardním způsobem ve vhodném rozpouštědle z mateřské sloučeniny a přebytku kyseliny, jako je, ale bez omezení se na ně, kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová, forforečná, octová, maleinová, jantarová, citrónová nebo methansulfonová. Zejména vhodná je forma chlorovodíkové soli.

Jestliže finální 2,6,9-trisubstituovaná purinová sloučenina obsahuje kyselinovou skupinu, potom mohou být připraveny kationtové soli kompozic. Typicky je kyselinová mateřská sloučenina zpracována

* · • · · · to to* · v ·· · · oa · ··

Zj · ··· s přebytkem alkalického reakčního činidla, jako je, ale bez omezení se na ně, hydroxid, uhličitan nebo alkoxid, obsahující příslušný kation jako je, ale bez omezení se na ně, Na⁺, K⁺, Ca⁺² a NH₄ ⁺. Některé sloučeniny tvoří vnitřní soli nebo zwitteriony, které jsou rovněž přijatelné.

Sloučeniny z tohoto vynálezu jsou vhodné pro inhibici buněčné proliferace u savců, včetně lidí. 2,6,9-Trisubstituované puriny jsou vhodné například pro léčení autoimunních onemocnění, jako je revmatická artritida, lupus, diabetes typu I, multiple sklerosis, rakovina, kardiovaskulární onemocnění, jako je restenosa po balonové angioplastii a ateroktomii, restenosa po vaskulárních modifikujících chirurgických postupech, onemocnění štěp versus hostitel, dna, polycystická onemocnění ledvin a jiné proliferativní nemoci, jejichž patogenese zahrnuje abnormální buněčnou proliferaci. Konkrétně jsou prostředky podle tohoto vynálezu vhodné pro léčení rakoviny zahrnující rakoviny včetně lymfoidního neoplasmu, rakoviny tlustého střeva, rakoviny prsu, rakoviny vaječníků, rakoviny pankreatu, a rakovin souvisejících s endoterikálními buňkami.

Způsob léčení zahrnuje podávání účinného množství vybrané sloučeniny podle tohoto vynálezu parenterálně a orálně, přednostně dispergované ve farmaceutickém nosiči. Terapeuticky vhodná množství prostředku podle vynálezu obecně leží v rozmezí od asi 0,01 do asi 100 mg/kg, ale odborník znalý dané oblasti techniky to snadno stanoví na základě cesty podávání, věku a stavu pacienta. Terapeuticky vhodná množství prostředku podle tohoto vynálezu mohou být podávána jednou až desetkrát denně nebo více pro akutní nebo chronická onemocnění.

v

Žádné nepřijatelné toxikologické účinky nebyly pozorovány, když jsou sloučeniny podle vynálezu podávány v souladu s předloženým vynálezem.

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou také vhodné jako protizánětlivé a antifungální látky. Jako takové jsou prostředky podle

• · · ·· • · · ·· ······ · · • ·9 · • 99 9 99 9 tohoto vynálezu vhodné pro léčení protizánětlivých a fungálních infekcí u lidí, zvířat a houbových infekcí u rostlin.

Farmaceutické prostředky zahrnující sloučeniny podle tohoto vynálezu a/nebo jejich deriváty mohou být formulovány jako roztoky nebo lyofilizované prášky pro parenterální podávání. Prášky mohou být rozředěny přidáním vhodného ředidla nebo jiného farmaceuticky přijatelného nosiče před použitím. Pokud se používají v tekuté formě, jsou přednostně prostředky podle tohoto vynálezu začleněny do pufrovaných isotonických vodných roztoků. Příklady vhodných ředidel jsou normální isotonický fyziologický roztok, standardní 5% dextrosa ve vodě a pufrový roztok acetátu sodného nebo amonného. Tyto tekuté formulace jsou vhodné pro parenterální podávání, ale mohou být rovněž použity pro orální podávání.

Do farmaceutických prostředků obsahujících sloučeniny podle vynálezu může být vhodné přidat excipienty, jako je polyvinylpyrrolidinon, želatina, hydroxycelulosa, arabská guma, polyethylenglykol, mannitol, chlorid sodný, citrát sodný nebo jiné excipienty, známé odborníkovi ze stavu techniky. Alternativně mohou být farmaceutické sloučeniny zapouzdřeny, tabletovány nebo připraveny v emulsi nebo sirupu pro orální podávání. Farmaceuticky přijatelné pevné nebo kapalné nosiče mohou být přidány pro zvýšení nebo stabilizaci prostředku, nebo pro úspěšnou přípravu prostředku. Tekuté nosiče zahrnují, ale neomezují se na ně, sirup, arašídový olej, olivový olej, glycerin, fyziologický roztok, alkoholy a vodu. Pevné nosiče zahrnují, ale neomezují se na ně, škrob, laktosu, síran vápenatý, dihydrát, teffa alba, stearát hořečnatý nebo kyselinu stearovou, talek, pektin, arabskou gumu, agar nebo želatinu. Nosič také může zahrnovat materiál pro postupné uvolňování, jako jsou, ale bez omezení se na ně, glyceryl monostearát nebo glycerol distearát, samotné nebo s voskem. Množství pevného nosiče se mění, ale přednostně bude mezi 20 mg až asi 1 gramem na dávkovou jednotku.

Farmaceutické dávky jsou vyrobeny použitím běžných technik jako jsou, ale bez omezení se na ně, mletí, míšení, granulace a lisování, pokud je to nezbytné, pro tabletové formy. Pokud je použit kapalný nosič, přípravky budou ve formě sirupu, elixíru, emulse nebo vodné nebo nevodné suspenze. Taková kapalná formulace může být podávána přímo nebo plněna do měkkých želatinových kapslí.

Příklady, které následují, slouží pro ilustraci vynálezu. Předložené příklady ale v žádném případě neomezují rozsah tohoto vynálezu, ale jsou předloženy, aby ukázaly, jak připravit a použít sloučeniny podle vynálezu. V příkladech jsou všechny teploty ve stupních Celsia. RT označuje teplotu místnosti.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou připraveny běžnými metodami z organické chemie. Reakční postup znázorněný ve schématu syntézy dále je obecnou metodou vhodnou pro syntézu sloučenin podle vynálezu. 2,6-Dichlorpurin je rozpuštěn v butanolu a je přidán příslušný Ri amin. Po zahřívání po dobu několika hodin je reakční směs ochlazena a je získána sloučenina 1. Do sloučeniny 1 je přidán hydrid sodný, následovaný R₂ a izoluje se sloučenina 2. Do sloučeniny 2 se přidá R₃ v roztoku s N-methylpyrrolidinonem. Směs se zahřívá po vhodnou dobu, následuje purifikace vedoucí k požadované sloučenině.

R₃. Δ

N-methylpyrrolidinon butanol, Δ

Následující sloučenina byla připravena metodou popsanou výše.

Příprava 2-chlor-6-(4-methoxybenzylamino)purinu (1)

2,6-Dichlorpurin (4,06 g, 21,5 mmol) byl suspendován v nbutanolu (150 ml) a byl přidán 4-methoxybenzylamin (3,4 ml, 26 mmol). Roztok se vyčeřil a potom se o několik minut později zakalil. Roztok byl zahříván při 120 °C po 2 hodiny a potom byl ochlazen, nButanol byl odpařen, následovala suspense zbytku ve směsi vody a diethyletheru. Byl přidán roztok 2N NaOH (1,3 ml, 26 mmol) a roztok byl míchán po 10 minut před filtrací. Filtrovaná sraženina byla promyta vodou a malým množstvím etheru a potom byla sušena pod vakuem. Zbytková tekutina byla ponechána přes noc a další den bylo shromážděno více krystalů a promyto diethyletherem.

Příprava 2-chlor-6-(4-methoxybenzylamino)-9-isopropylpurinu (2)

2-Chlor-6-(4-methoxybenzylamino)purin byl suspendován v suchém DMF (5 ml) a zpracován s hydridem sodným, 60% disperse (82 mg, 2,06 mmol). Suspense byla míchána po 30 minut, po tuto dobu se z ní stal čirý žlutý/zelený roztok. Po dobu 5 minut byl přidáván 2-jodpropan (0,280 ml, l,7.ekv.) a získaný roztok byl míchán po 2 dny. Byla přidána voda a roztok a extrahován ethylacetátem. Organická vrstva byla odpařena za získání produktu isopropylpurinu.

Příprava 2-diethanoIamin-6-(4-methoxybenzylamino)-9-isopropylpurinu (3)

Purin (1,65 g, 4,98 mmol) byl rozpuštěn v DMSO (12 ml) a diethanolaminu (4 ml) a potom zahříván při 140 °C po 2-3 dny a potom při 160 °C po 1 den. Roztok byl ochlazen a byla přidán butanol nasycený vodou (100 ml). Potom byl roztok promyt vodou ( 3x 50 ml) a odpařen za získání hnědého oleje. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s ethylacetátem, následně 3% methanolem v ethylacetátu za získání produktu.

‘H-NMR (δ CDC13): 7,29 (br s 1H), 7,25 (d, 2H), 6,94 (br s, 1H), 6,83 (d, 2H), 5,43 (br s<2H), 4,63 (br s, 2H), 4,53 (m 1H), 3,86 (t, 4H), 3,76 (m, 7H), 1,47 (d, 6H).

Tabulka 1 identifikuje sloučeniny podle vynálezu, které byly připraveny postupem uvedeným v tomto příkladu.

·

TABULKA 1

Sloučeniny připravené metodou podle příkladu 1

RjX	R:	r₃
(4-methoxyphenyl)methylamino	3-cyanopropyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	3-chloropropyl	ci
(4-methoxyphenyl)methylamino	benzyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	(4-methylcarboxyphenyl)methyl	Cl
(4-meťhoxyphenyl)methylainino	2-(N-phtyhaloyl)ethyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	Ethanolamine
(4-methoxyphenyl)methylaniino	isopropyl	Diethanolamine
(4-methoxyphenyl)methylamino	3-methylbutyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	2-methylbutyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	cyclopentyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	(3-nitrophenyl)methyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	(4-nitrophenyl)methyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	ethyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	propyl	Cl
(4-rriethoxyphenyl)methylammo	(3-methylphenyljmethyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	(4-methylphenyl)methyl	Cl
heptyiamino	H	Cl
\| N-benzyl-N-hydroxylamino	H	Cl
propylamino	H	Cl
noradamantylamino	H	Cl
cyclobutylamino	H	Cl
3-methoxypropylamino	H	Cl
i 2-methoxyethylamino	H	Cl
cyclopentylamino	H	Cl
1 -hydroxy-2-methyl-2propylamino	H	Cl
(N-1 -benzylpiperidinyl)-4-amino	H	Cl
heptyiamino	Methyl	Cl

RjX	R₃	r₃
N-benzyl-N-hydroxylamino	Methyl	Cl
propylamino	Methyl	Cl
nora daman tylamino	Methyl	Cl
cyclobutylamino	Methyl	Cl .
3 -methoxypropy lamino	Methyl	Cl
2-methoxyethylamino	Methyl	Cl
cyclopentylamino	Methyl	Cl
1 -hydroxy-2-methyl-2propylamino	Methyl	Cl
(N-1 -benzylpiperidmyl)-4-amino	Methyl	Cl
(2,4- dimethoxyphenyl)methylamino	Methyl	Cl
(2-methoxyphenyl)methylamino	H	Cl
(2-pry idiny l)methylamino	H	Cl
(3,4-dimethoxyphenyl)ethylamino	H	Cl
(3-pyridmyl)methylamino	H	Cl
(4-pyridinyl)methylamino	H	Cl
6-hydroxy-1 -hexylamino	H	Cl
phenethylamino	H	Cl
(2-benzothiazolyl)amino	H	Cl
(2,4- dimethoxyphenyl)methya!mino	H	Cl
(2-methoxyphenyl)methylamino	Methyl	Cl
(2-pyridinyl)methylamino	Methyl	Cl
(3,4-dimethoxyphenyl)ethylamino	Methyl	Cl

• · • · ·

Rj-X (4-methoxyphenyl)methylamino	Rr	Ra
Methyl	Cl
(3-pyridinyl)methylamino	isopropyl	2-aminoethylamino
(4-pyndlnyí)K5thylaffiino	H	Cl
1 -hydroxy-6-hexy lamino	H	Cl
pheneťhylamino	H	Cl
(2-benzothiazolyl)amino	H	Cl
(4-methoxyphenyl)methylaminó	H	Cl
3 -pheny 1-1 -propylamino	isopropyl	3-hydroxypyrrolidino
(2-indanyl)amino	H	Cl
(4-methoxyphenyl)ethylamino	H	Cl
(4-nitrophenyl)methylamino	H	Cl
(2,6-difluorophenyl)methylamino	H	Cl
3-phenyl-1 -propylamino	H	Cl
(2-indanyl)amino	Methyl	Cl
(4-methoxyphenyl)ethylamino	Methyl	Cl
(4-nitrophenyl)methylamino	Methyl	Cl
(2,6-difluorophenyl)methylamino	Methyl	Cl
cyclopropylmethylamino	Methyl	Cl
4-( 1,2-methylenedioxyphenyl) methylamino	H	Cl
(4- aminosulfonylphenyl)methylamino	H	Cl
(cyclohcxanol)-1 -methylamino	H	Cl
(2-benzimidazoly)methylamino	H	Cl
cyclohexylmethylamino	H	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	H	Cl

• ·

Rj-X	R:	Ra
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	(2-hydroxy-l- hydroxymethyl)ethylamino
cyclopropylmethylamino	isopropyl	3-amino-2-hydroxypropylamino
4-(l,2-methylenedioxyphenyl)methylamino	Methyl	Cl
(4-aminosulfonylphenyl)methylamino	Methyl	Cl
(cyclohexanol)-1 -methylamino	Methyl	Cl
(2-benzimidazolyl)methylamino	Methyl	Cl
cyclohexyimethylamino	Methyl	Cl
(3-pyridinyl)methylamino	Methyl	Cl
(4-pyridinyl)methylamino	2-methylpropyl	Cl
6-hydroxyhexylamino	cyclopentyl	Cl
phenethylamino	propyl	Cl
(2-benzothiazolyl)amino	ethyl	Cl
3-phenyl-1-propylamino	isopropyl	Cl
(2-indanyl)amino	2-methylpropyl	Cl
2-(4-methoxyphenyl)ethylamino	cyclopentyl	Cl
(4-nitrophenyl)methylamino	propyl	Cl
(2,6-difluorophenyl)methylammo	ethyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	Cl
3-phenyl-1 -propylamino	isopropyl	4-hydroxypiperidino
(2-indanyl)amino	H	Cl
2-(4-methoxyphenyl)ethylamino	H	Cl
(4-nitrophenyl)methylamimo	H	Cl
(2,6-difluorophenyl)methylamino	H	Cl

»

R_rX	Ri	R_s
(4-methoxyphenyl)methylamino	H	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	N-(2-cyanoethyl)-N-benzylamino
3-phyenyl-1-propylamino	isopropyl	l-(R,S)-hydroxymethyl-3méthylbutylamino
(2-indanyl)amino	isopropyl	Cl
2-(4-Methoxyphenyl)ethyiamino	isopropyl	Cl
(4-nitrophenyl)methylamino	isopropyl	Cl
(2,6-difluorophenyl)methylamino	isopropyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylaniino	isopropyl	Cl
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	Piperidino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	3-hydroxypiperidino
3-phenyl-1 -propylamino	isopropyl	1 -(S)-hydroxymethyl-2-(4'imidazolyl)ethylamino
(2-indanyl)amino	isopropyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	isopropyl	2-(S)-hydroxymethylpyrrolidino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	benzyl	morpholino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	3-methylbutyl	diethanolamino
(4-meíhyoxyphenyl)methylamino	2-methylbutyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	cyclopentyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	(3-nitrophenyl)methylamino	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	(4-nitrophenyl)methylamino	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	ethyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	propyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	(3-methylphenyl)methylamino	diethanolamino
hepty lamino	(4-methylphenyl)methylamino	diethanolamino

Φ • Φ ··· ·Φ

Φ Φ Φ · ♦ ♦·

ΦΦΦΦ Φ Φ· • Φ ΦΦ» Φ Φ · Φ··· ΦΦΦ Φ • 9 Φ ΦΦ «Φ ΦΦ • Φ ·* ·· ♦ ······

R_rX	R:	Ra
N-benzyl-N-hydroxyamino	Methyl	diethanolamino
propylamino	Methyl	diethanolamino
noradamantylamino	Methyl	diethanolamino
cyclobutylamino	Methyl	diethanolamino
3 -methoxypropy lamino	Methyl	diethanolamino
2-methoxyethylamino	Methyl	diethanolamino
cyciopentyiamino	Methyl	diethanolamino
1 -hydroxy-2-methyl-2propylamino	Methyl	diethanolamino
4-( I -benzylpiperidinyl)amino	Methyl	diethanolamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(2,4-dimethoxy-phenyl) methylamino	isopropyl	3-hydroxypyTTolidino
(2-methoxyphenyl)mcthylamino	Methyl	2-(3’indolyl)ethylamino
(2-pyridinyl)methylaminb	Methyl	diethanolamino
2-(3,4- dimethoxyphenyl)ethylamino	Methyl	diethanolamino
(3-pyridinyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
(4-pyridinyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
6-hydroxy-1 -hexy lamino	Methyl	diethanolamino
phenethylamino	Methyl	diethanolamino
(2-benzothiazolyl)amino	Methyl	diethanolamino
3-phenyl-l-propylamino	Methyl	diethanolamino
(2-indanyl)amino	Methyl	diethanolamino
2-(4-methoxyphenyl)ethylamino	Methyl	diethanolamino
(4-nitrophenyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
(2,6-difluoropheny l)methy lamino	Methyl	diethanolamino

λ

9

R_rX	R,	R_s
cyclopropylmethylamino	Methyl	diethanolamino
4-( 1,2-methylenedioxyphenyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
(4-aminosulfonylphenyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
(cyclohexanol)-1 -methylamino	Methyl	diethanolamino
(2-benzimidazolyl)methylamino	Methyl	diethanolamino
cyclohexylmethylamino	Methyl	diethanolamino
(3-pyridyl)methylammo	Methyl	diethanolamino
(4-pyridyl)methylamino	2-methylpropyl	diethanolamino
6-hydroxy-1 -hexylamino	cyclopentyl	diethanolamino
2-phenethy lamino	propyl	diethanolamino
(2-benzothiazolyl)amino	ethyl	diethanolamino
3-phenyl-1 -propylamino	isopropyl	diethanolamino
(2-indanyl)amino	2-methylpropyl	diethanolamino
2-(4-methoxyphenyl)ethylamino	cyclopentyl	diethanolamino
(4-nitrophenyl)methylamino	propyl	diethanolamino
(2,6-difluorophenyl)methylamino	ethyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyi)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-methyoxyphenyi)methylamino	isopropyl	1 -hydroxymethylcyclopenty lamino
(4-methyoxyphenyl)methylamino	isopropyl	2-(R,S)-hydroxymethylpiperidino
cyclopropylmethylamino	isopropyl	2,3-dihydroxy- 1-propylamino
4-( 1,2-methylenedioxyphenyl) methylamino	isopropyl	Cl
(4-aminosulfonylphenyl) methylamino	isopropyl	Cl
(cyclohexanol)-1 -methylamino	isopropyl	Cl

Rj-X		*3
(2-benzimidazolyl)amíno	isopropyl	Cl
cyclohexylmethylamino	isopropyl	Cl
3-pbenyl-l -propylamino	isopropyl	Cl
cyclopropylmethylamino	cyclopentyl	Cl
4-( 1,2-metbylenedioxyphenyl) methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	diisopropylamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	(trans-2-hydroxycyclohexyl)amino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	2(R)-( 1 -hydroxy-3phenyl)propylamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	5-(S)-(2,2-dimethyl-4(S)phenyldioxalanyl)amino
(4-méthoxyphenyl)methylamino	isopropyl	3-(N-l-imidazolyí)propylamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	4-hydroxyl-4-phenylpiperidino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	(2-benzylthio-l- hydroxymethyl)ethylamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	N-methyl-N-(2-hydroxy-2-(3,4dihydroxyphenyl)ethyl)amino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	diallylamino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	Piperazino
(4-methoxyphenyl)methylaniino	isopropyl	(+/-)N-methyl-N-(2-hydroxy-2phenylethyl)amino
(4-metboxypbenyl)methylamino	isopropyl	(SX+)-2- (anilinomethyl)pyrrolidino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	(+/-)N-(2-propenyl)-N-2-(4hydroxy-2-methylpentyl)amino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopiopyl	N-(2-hydroxyethyl)-N-(3hydroxypropyl)amino
(4-methoxyphenyl)methylanuno	isopropyl	Di-N-l-(2-hydroxy-2methylpentyl)amino
(4-methoxyphenyl)methylamino	isopropyl	Di-N-2-(3-hydroxybutyl)amino

«· ·· ♦ ·· ♦· ♦ <♦· »♦♦· * 9 · f · · · 9 99

9 999 9 * · 9999 9 9 ··

9 9 9 9 9 9 99

9 9 9 9 9 · 99999 9

Příklad 2

Tento příklad popisuje metodu přípravy sloučenin z tohoto vynálezu podle následného obecného schématu syntézy:

Příprava {2-chlorpurin-6-yl}[(4-chlorfenyl)m ethyl] aminu:

Do suspenze 15 g (0,0794 mol) 2,6-dichlorpurinu ve 250 ml absolutního ethanolu bylo přidáno 12,7 ml (0,0873 mol) triethylaminu a 10,62 ml (0,0873 mol) 4-chlorbenzylaminu. Směs byla refluxována při 80 °C po 16 hodin (byl pozorován vznik bílé krémové sraženiny). Reakční směs byla ochlazena a vysrážený produkt byl odstraněn filtrací. Sraženina byla promyta ethanolem (350 ml) a sušena za vysokého vakua po 24 hodiny. Produkt byl charakterizován 'H-NMR.

Příprava {2-chlor-9-(methylethyl)purin~6-yl} [4-chlorfenyl)methyl]aminu:

Do roztoku 6 g (0,020 mol) 2-chlor-6-(4-chlorfenyl)methylaminopurinu ve 41 ml bezvodého DMF bylo přidáno 5,64 g (0,041 mol) bezvodého uhličitanu draselného a 3,41 ml (0,035 mol 2-jodpropanu) a mícháno při teplotě místnosti po 16 hodin. Do směsi bylo přidáno 500 ml vody a mícháno po 1 hodinu. Sraženina byla filtrována, promyta vodou (350 ml) a sušena ve vakuové peci při 50 °C po 16 hodin.

• · ♦

Produkt byl získán jako téměř bílá pevná látka a charakterizován ’HNMR.

Příprava {2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4chlorfenyl)methyl] aminu:

Do roztoku 3,36 g (0,01 mol) (2-chlor-9-(methylethyl)purin-6yl}[(4-chlorfenyl)methyl]aminu v 13 ml bezv. l-methyl-2-pyrrolidinu bylo přidáno 4,68 ml (0,70 mol) 2-aminoethylaminu a směs byla zahřívána při 140 °C po 24 hodiny. Sloučenina byla podrobena chromatografii s proměnným gradientem na silikagelu směsí dichlormethan /methanol a byl získán l-methyl-2-pyrrolidinon. Směs byla rozpuštěna v dichlormethanu a extrahováno vodou (520 ml). Organická vrstva byla sušena nad bezvodým síranem sodným a odpařena na téměř bílou pevnou látku. Produkt byl charakterizován “H-NMR a čistota byla kontrolována RP-HPLC (YMC C-18 kolona; 50X4,4 mm; S5 120 A° 0,1% TFA-voda/0,1% TFA-acetonitril).

Tabulka 2 dále identifikuje sloučeniny podle tohoto vynálezu, které byly připraveny metodou podle obecné syntézy uvedené v tromto příkladu. V tabulce 2, MS= Hmotové spektrum a MH+ = hmota mateřského molekulárního iontu plus jeden vodíkový atom.

TABULKA 2

Sloučeniny připravené metodou podle příkladu 2

R,X	. Ri	R,
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	340
(2,4-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	439
(2,4-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	394
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	385
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	340
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-Dimethylamino)-N 1 benzylethylamino	458
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	394
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylpropylamino	437
(3,5-Bis- trifluoromethylphenyljmethylamino	Isopropyl	Diethanolamino	507
(3,5-Bis- 1 trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	462

• · · · • ··♦ · ·

R£	R,	Ri	MS(MH+)
(3,5-Bis- trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylpropylamino	505
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethylethylamino	375
(2-Trifluoromethyl-phenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethylethylamino	409
(4-Chloro-3 -trifluoromethy 1phenyljmethylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethylethylamino	443
(3-Chlorophenyl)methy lamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	361
(2-Trifluromethyl-phenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	395
(4-Chloro-3-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	429
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(lR,2S)-2-Hydroxy-lmethyl-2-phenylethylamino	451
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	450
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	407
(1 -Naphthyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	421
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	360
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	362
(1 -Naphthyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	376
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylethylamino	403
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethy 1-2methylethylamino	405
(1 -N aphthyl)me thylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylethylamino	419
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	354
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	374
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylanrino	374
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	376
(1 -Naphthyl)methy lamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	390
(2-Chloro-5trifluoromethylphenyl)methylammo	Isopropyl	Diethanolamino	473
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	l-Hydroxymethyl-2methylpropylamino	403
(2-Trifluoromethylphenyl)methylaniino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylpropylamino	437
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethvlammo	384
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	404
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	404
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	406
(1 -Naphthyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	420
(3,5-Bistrifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	506
(4-Isopropylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	412
(2-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	438
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	384

·· ·· ·· ♦ ·· ·· * · · · · · · · · · · • · · · ···· « · <

9 999 · 9 9 9999 *99 9

9 9 9 9, 9 9 9 9 ·· 9 9 99 9 ******

R,X		R,
(4-Chloro-3trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethy lamino	472
(2-Chloro-5- trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	472
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	438
(1 R)-(4-Methy lpheny 1) ethylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	398
(lR)-(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	434
(2,4-Dichloro-6methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	452
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	438
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	380
(2-Chlorophenyl)methy lamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	400
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pynolomethylamino	400
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	402
(1 -Naphthyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	416
(3,5-Bistrifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	502
(4-Isopropylphenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	408
(2-Trifluoromethylphenyl')methylamino	Isopropyl	(2S)-pvrrolomethylamino	434
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	380
(4-Chloro-3- trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	468
(2-Chloro-5- trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	468
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	434
(lR)-(4-Methylphenyl)ethylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	394
(lR)-(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	430
(2,4-Dichlorp-6methylphenyljmethylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	448
(4-Trifluoromethylphcnyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	434
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methyiethylamino	355
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	375
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	377
(l-Naphthyl)methy lamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	391
(3,5-Bistrifluoromethylphcnyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	477
(4-Isopropylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino.	383
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	355
(2-Chloro-5- trifluoromethylphenyl)methylaniino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	443
(5-Fluoro-2trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	427
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-l-(S)methylethylamino	409

··

R,X	Ri	R,	MS(MH+)
[R]-1 -(4-Methylphenyl)ethy lamino	Isopropyl	2-Hydroxy-1-(S)methylethylamino	369
[RJ-1 -(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-1-(S)methylethylamino	405
(2,4-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-1-(S)methylethylamino	409
(2,4-Dichloro-6methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-1-(S)methylethylamino	423
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-1-(S)methylethylamino	409
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	341
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	361
(2,5-Difluoropheny l)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	363
(1 -Naphthyl)méthylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	377
(3,5-Bistriíluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	463
(4-Isopropylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	369
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydřoxyethylamino	341
(2-Chloro-5trifluoromethylpheny Dmethylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	429
(5-Fluoro-2- trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	413
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	395
(lR)-(4-Methylphenyl)ethylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	355
(1 R)-(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	2-HydroxYethylamino	391
(2,4-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	395
(2,4-Dichloro-6methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	409
(4-Triíluoromethylphenyl)methylammo	Isopropyl	2-Hydroxyethylamino	395
(3-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	369
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	389
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	389
(2,5-Difluorophenyl)methylammo	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	391
(1 -Naphthyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	405
(3,5-Bistrifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	491
(4-Isopropylphenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	397
(2-Trifluoromethylphenyl)methylammo	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	423
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	369
(4-Chloro-3- trifluoromethylphenyl)methylarnino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	457
(2-Chloro-5- trifluoromethylphenyl)methylammo	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	457
(5-Fluoro-2- trifluoromethylphenyl)methylamino		1- Hydroxymethylpropylamino	441

• · ·

R,X	R,	R<	MS(MH+)
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	423
(lR)-(4-Methylphenyl)ethylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	383
(lR)-(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	419
(2,4-Dichlorophenyl)methylamino	. Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	423
(2,4-Dichloro-6methylphenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	437
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino	423
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(2-Hydroxyethylamino)ethylamino	438
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(2S)-pyrrolomethylamino	434
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminocyclohexylamino	414
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	3 - Aminocy clohexylamino	414
(3-Fluoro-6-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	457
(2-Chloro-5-trifluoromethylpehnyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	428
(3,5-Bis-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	476
(2-Trifluoromethyl-phenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	408
(4-methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	354
(4-Chloro-3-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	442
(2-Chloro-5-trifluoromethylphenyi)methylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	442
[R]. 1 -(4-methylphenyl)ethylamino	Isopropyl	2-aminoethylamino	354
fRl-1 -(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	390
(2-Chloro-5-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylpropylamino	471
(3-fluoro-6-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2methylpropylamino	455
[R]-1 -(4-methylphenyl)ethylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	368
IRI-1 -(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	404
(4-Trifluoromethyl-phenyl)methy lamino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	408
(3-Methyiphenyl)methylaniino	Isopropyl	2-Amino-2- . methylpropylamino	368
(2-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	388
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	388
(2,5-Difluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	390
(1 -Naphthyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	404
(3,5-Bis-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	490
(2-Trifluoromethyl-phenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	422
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	368

♦ 4

4·444

4 4 4 44 4

44 4 4444

4 »444444444

4 4 4 44

44 44·

R,X	Rj	R,	MS(MH+)
(4-Chloro-3-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	456
(2-Chloro-5-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Ammo-2methylpropylamino	456
(3-Fluoro-6-trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyi	2-Amino-2methylpropylamino	440
[R]-1 -(4-Methylphenyl)ethylamino	Isopropyl	2-Ammo-2methylpropylamino	382
[RJ-1 -(2-Naphthyl)ethylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino	418
(4-Trifluoromethyl-phenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methyipropylamino	422

Příklad 3

Tento příklad popisuje metodu přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu. Metoda syntézy popsaná v tomto příkladu je pouze mírně modifikovaná metoda popsaná v příkladu 1.

Ci

butanol, Δ

R3, Δ

N-methyipyrřůiidíriórk

Následující sloučenina byla připravena podle metody popsané výše.

Příprava 2,6-dichlor-9-isopropylpurinu (4)

Do roztoku 0,67 g 2,6-dichlorpurinu v 5 ml suchého DMF při teplotě místnosti byl přidáno 0,16 g (1,1 ekv.) 50% hydridu sodného / olejového prášku. Po ukončení vývinu vodíku byl přidán do aniontového roztoku velký přebytek (2 ml) isopropyljodidu. Tento reakční roztok • · • ·« • »» •·

• · « « ·· < »· · « φ ·· ·· byl míchán po tři dny při teplotě okolí. Reakce byla zchlazena 30 ml vody a extrahována ethylacetátem (350 ml). Organické extrakty byly spojeny a zadní část byla promyta 350 ml vody a následně 20 ml solanky. Roztok ethylacetátu byl sušen nad bezvodým síranem sodným a odpařen. Sloučenina byla podrobena mžikové chromatografii s různým gradientem na silikagelu směsí hexan/ethylacetát a byl získán N-9 produkt a N-7 isomer.

Příprava 2-chlor-6-anilino-9-isopropylpurinu (5):

2,6-Dichlor-í-isopropylpurin (0,019 g, 0,081 mmol) byl rozpuštěn v butanolu (0,5 ml) a byl přidán anilin (0,044 ml, 0,244 mmol). Reakční směs byla zahřívána na 120 °C po 10 hodin, bylaochlůazena, zředěna EtOAc a promyta 3 krát vodou. Směs byla sušena nad MgSO₄ a koncentrována na téměř bílou pevnou látku.

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-fenyIanilino)-9-isopropylpuriiiu (6):

Roztok 67 gramů 2,6-cichlor-N-9-isopropylpurinu a 100 mg 4fenylanilinu v 1 ml n-oktanolu byl zahříván na 80 °C po 24 hodiny, nOktanol byl odstraněn ve vakuu a potom byl nahrazen 1 ml 40% diethanolaminu v DMSO. Roztok byl zahříván při 130 °C po 48 hodin. Reakční směs byla ochlazena na teplotu okolí a potom zředěna 10 ml vody a následně extrahována ethylacetátem (3X30 ml). Organické extrakty byly spojeny a zadní část byla promyta 3X20 ml vody a následně 10 ml solanky. Ethylacetátový roztok byl sušen nad bezvodým síranem hořečnatým a filtrován a rozpouštědlo bylo odpařeno. 65 mg surového produktu krystalizovalo z THF-ether roztoku.

Tabulka 3 dále identifikuje sloučeniny podle tohoto vynálezu, které byly připraveny metodou podle obecné syntézy uvedené v tomto příkladu.

*4 * 9999 • · · 9 9 99 • 99« · 99 • · MM · · 99 • 99999 ·· 9 999999

TABULKA 3

Sloučeniny připravené metodou podle příkladů 3

R,X	R,	Ri
(8-quinolinyl)amino	Isopropyl	Cl
(6-quinoliny l)amino	Isopropyl	Cl
(3-quinolinyl)amino	Isopropyl	Cl
anilino	Isopropyl	Cl
3,5-dinitroanilino	Isopropyl	Cl
4-butylanilino	Isopropyl	Cl
(8-quinolinyl)amino	Isopropyl	Diethanolamino
(6-quinolinyl)ammo	Isopropyl	Diethanolamino
(3-quinolinyl)amino	Isopropyl	Diethanolamino
anilino	Isopropyl	Diethanolamino
3,5-dinitroanilino	Isopropyl	Diethanolamino
4-butylanilino	Isopropyl	Diethanolamino
(6-ethoxy-2-benzothiazolyl)amino	Isopropyl	Cl
4-morpholino-2-methylamino	Isopropyl	Cl
(4-aminosulfonyl-phenyl)methviamino	Isopropyl	Cl
4-bromoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3,4-dichloroanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-(2-( 1 -methyl)pyrrolidinýl)ethylamino	Isopropyl	diethanolamino
3-bromoanilino	Isopropyl	Cl
4-methoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
4-iodoanilino	Isopropyl	Cl
3-iodoanilino	Isopropyl	Cl
3-methoxyanilino	Isopropyl	Cl
2-( l-piperidinyl)ethy lamino	Isopropyl	diethanolamino
2-( 1 -pyirolidiny l)ethy lamino	Isopropyl	diethanolamino
(l-indanyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
2-(6-ethoxybenzothiazolyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
4-morpholino-2-methylamino	Isopropyl	diethanolamino
(4-aminosulfonyl-phenyl)methylamino	isopropyl	diethanolamino
4-bromoaniiino	Isopropyl	diethanolamino
3,4-dichloroanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-(2-( l-methyl)pyrrolidinyl)ethylamino	Isopropyl	diethanolamino
3-bromoanilino	Isopropyl	diethannlaminn
4-methyoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
4-iodoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3-iodoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3-methoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-( 1 -piperidiny l)ethy lamino	Isopropyl	diethanolamino
2-( 1 -pyrrolidinyl)ethylamino	Isopropyl	diethanolamino
(l-indanyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
3-iodonilino	Isopropyl	diethanolamino

··	··	·<*	•	*9	*·
•	•	e ·	•	9	•	9	9	• ·
•	•	• ♦	♦	•	9 9	9	9	•
•	•	♦ ·> ·	•	•	9999	• ·	9	*
•	•	•	•	•	•	•	9	•
··			«·	41	99		9999

R,X	r?	Ri
3-phenoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
4-iodoanilino	Isopropyl	diethanolamino
4-phenoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
3-phenoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-fluorenylamino	Isopropyl	diethanolamino
1-fluoreny lamino	Isopropyl	diethanolamino
2-anthracenylamino	Isopropyl	diethanolamino
l-anthracenylainino	Isopropyl	diethanolamino
2-( 6-ethoxybenzothiazolyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
(l-indanyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
2-(6-ethoxybenzothiazolyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
4-morpholino-2-methylamino	Isopropyl	diethanolamino
(4-aminosulfonyl-phenyl)methylamino	IsopTopyl	diethanolamino
4-bromoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3,4-dichloroanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-(2-( l-methyl)pynolidinyl)ethylamino	Isopropyl	diethanolamino
3-bromoanilmo	Isopropyl	diethanolamino
4-methoxyaniIino	Isopropyl	diethanolamino
4-iodoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3-iodoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3-methoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-( 1 -piperidinyl)ethylamino	Isopropyl	diethanolamino
2-( 1 -pyrrolidiny l)ethylamino	Isopropyl	diethanolamino
(l-indanyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
3-iodoanilino	Isopropyl	diethanolamino
3-pheoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
4-iodonilino	Isopropyl	diethanolamino
4-phenoxyanilino	Isopropyl	. diethanolamino
3-phenoxyanilino	Isopropyl	diethanolamino
2-fluorenylamino	Isopropyl	diethanolamino
1-fluorenvlamino	Isopropyl	diethanolamino
2-anthracenylamino	Isopropyl	diethanolamino
1 -anthraceny lamino	Isopropyl	diethanolamino
2-(6-ethoxybenzothiazolyl)amino	Isopropyl	diethanolamino
(2-biphenyl)methylamino	Isopropyl	diethanolamino
(4-biphenyl)methylamino	Isopropyl	diethanolamino
2-naphthylmethylamino	Isopropyl	diethanolamino
1-naphthylmethy lamino	Isopropyl	diethanolamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
; (4-Methoxyphenyl)methylamino	Isopropyl	5-Aminopentylamino
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isobutyl	Diethanolamino
(4-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(S)-2-Amino-3phenylpropylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(D)-1 -Hydroxymethyl-2methyl-propylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(L)-1 -Hydroxymethyl-2methyl-propylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(D)-1 -Hydroxymethyl-2methyl-propylamino

• · • ·

R,X	R.	R,
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(L)-1 -Hydroxymethyl-2methyl-propylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-2-phenylethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-Nl-(2hydroxyethyl)ethylamino
. (4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-N2-(2hydroxyethyl)ethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(S)-2-Phenyl-1 -carboxamidoethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-N2-(2hydroxycthyl)-Nl(hydroxyethyl)ethylamino
(4-Sulfonamidophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	2-Oxo-3-butyl	Ďiethanolamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	2-Oxo-3-butyl	2-Aminoethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	2-Oxo-3-butyl	Ďiethanolamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	2-Oxo-3-butyl	2-Aminoethylamino
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2-methy 1propylamino
(3-Methylphenyi)methylamino	Isopropyl	1 -Hydroxymethyl-2-methylpropylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-dimethylamino)-N 1benzyl-ethylamino
(4-ChIorophenyl)methylamino	Isopropyl	1 -Carboxamido-2-methylpropylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	3-Aminopropylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	5-Aminopentylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2-methylethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(SX+)-l- (Hydroxymethyl)propylamm o
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(R)-(-)-l- (Hydroxymethyl)propylamin 0
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(S)-(+)-l- (Hydroxymethyl)ethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(RX-)-l- (Hydroxymethyl)ethylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(8)-(+)-2Hydroxypropylamino
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	(RX-)-2Hydroxypropylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-propylamino
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	Ďiethanolamino
(3 -Chloropheny l)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(2-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	Ďiethanolamino
(2-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(4-Chloro-3-trifluoromethylphenyl) methylamino	Isopropyl	Ďiethanolamino
(4-Chloro-3-trifluoromethylphenyl)	Isopropyl	2-Aminoethylamino

R,X	R,	R,
methylamino
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-ethylamino
(2-Trifluoromethyl-phenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-dimethylamino)-N 1 benzyl-ethylamino
(3-Chlorophenyl)methy lamino	Isopropyl	Diethanolamino
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(2-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(2-Trifluoromethylphenyl)methylamino	. Isopropyl	2-Aminoethylamino
(4-Chloro-3trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(4-Chloro-3trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(3,5-Dichloropheny l)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino
(2-Trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-Dimethylamino)-N 1 benzylethylamino
(3-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-Dimethy lamino)-N 1 benzylethylamino
(3,5-Dichlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-Dimethylamino)-N 1benzylethylamino
(4-Chloro-3- trifluoromethylphenyl)methylamino	Isopropyl	2-(N2-Dimethylamino)-N l benzylethylamino
(4-ChIorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(S)-(2- Tetrahydrofuranyl)methylam ino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(R)-(2- Tetrahydrofuranyl)methylam ino
(4-Methylphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Hydroxy-lmethylethylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(S)-2-Hydroxy-2methylethylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	(R)-2-Hydroxy-2methylethylamino
(4-Fluorophenyl)methylamino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpropylamino
(4-Flurophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylpropylamino

• · • ·

Příklad 4

Tento příklad popisuje metodu přípravy sloučenin podle vynálezu.

Metoda syntézy popsaná v tomto příkladu je pouze mírně modifikovaným postupem popsaným v příkladu 1.

Cl

NaH *2

R^. Α» N-methylpyrrdícfirwa

Následující sloučenina byla připravena podle postupu popsaného výše.

Příprava 2,6-dichlor-9-isopropylpurinu (4):

2,6-dichlorpurin (5,00 g, 26,46 mmol) byl suspendován v 55 ml suchého DMF při teplotě místnosti a zpracován s hydridem sodným, 60% disperzí (1,27 g, 31,75 mmol) přidávanou po částech. Po míchání po 1 hodinu byl přidán 2-jodpropan (4,5 ml, 44,98 mmol) a reakční směs byla míchána po 2 dny. Směs byla nalita do ethyletheru a jednou promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a jednou s vodou. Směs byla sušena nad bezvodým síranem sodným a koncentrována ve vakuu. Koncentrát byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 10% acetonem v roztoku dichlormethanu za získání požadovaného N-9-alkylačního produktu jako bílé pevné látky.

• ·

Příprava 2-chlor-6-(4-methyImerkapto)anilino-9-isopropylpurinu (5A):

2,6-Dichlor-9-isopropylpurin (0,15 g, 0,649 mmol) byl rozpuštěn v n-butanolu (4 ml) a byl přidán 4-(methylmerkapto)anilin (0,089 ml, 0,714 mmol) a triethylamin (0,20 ml, 1,43 mmol). Reakční směs byla zahřívána při 80 °C přes noc. Ochlazená reakční směs byla zředěna ethylacetátem a promyta 1 x 1M HC1, 1 x nasyceným hydrogenuhličitanem sodným a 1 x solankou, před sušením s bezvodým síranem sodným a koncentrován ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu a promýván 2% methanolem v dichlormethanu za získání požadovaného produktu jako bílé látky.

Příprava 2-diethanolamin-6-(4-methylmerkapto)anilino-9-isopropylpurinu (6A):

Purin (0,18 g, 539 mmol) byl rozpuštěn v N-methylpyrrolidinonu (3 ml) a diethanolaminu (1 ml) a potom byl zahříván při 120 °C přes noc. Zchlazená reakční směs byla nalita na diethylether a promyta třikrát vodou před sušením nad bezvodým síranem sodným a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 5% methanolem v dichlormethanu za získání požadovaného produktu jako téměř bílé pevné látky. 'H-NMR (δ, CDCls): 8,08 (s, 1H), 7,58 (d, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,18 (d,.2H), 4,59 (br s, <2H), 4,52 (m, 1H), 3,94 (m, 4H), 3,83 (m, 4H), 2,43 (s, 3H), 1,47 (d, 6H).

Příprava 4-(2-thienyI)benzonitriIu

Některé R]'skupiny musí být nejprve syntetizovány před reakcí s

2,6-dichlor-9-isopropylpurinem. Tyto skupiny musí být syntetizovány pomocí různých kuplovacích metod a jiných syntetických postupů známých odborníku ze stavu techniky organických syntéz.

• · · · · · · ·· ··

ΓΛ ······· ·· ·· du ···· · ♦ · · ·· · • · ··· · · · ···· · · · · • · · · · · ·· ·· ·· ·· · ·· ····

Do tlakové zkumavky byl přidán 4-brombenzonitril (0,20 g, 1,10 mmol), tetrakis(trifenylfosfin)paladium (0) (0,127 g, 0,1 ekv.) a 2-thiofenboritá kyselina (0,211 g, 1,65 mmol). Reakční směs byla třikrát propláchnuta suchým dusíkem. Po propláchnutí byly do zkumavky přidány ethylenglykoldimethylether (5,5 ml) a vodný roztok uhličitanu sodného (2,53 ml, 1M). Potom byla zkumavka utěsněna a zahřívána při 80 °C přes noc. Ochlazená reakční směs potom byla zředěna diethyletherem a promyta dvakrát vodou před sušením nad síranem sodným a koncentrováním ve vakuu. Zbytek byl podroben chromatografii na silikagelu promýváním s 10% ethylacetátem v hexanu za získání požadovaného produktu jako téměř bílé pevné látky.

Příprava 4-(2-thienyl)benzylaminu

4-(2-thienyl)benzonitril (0,086 g, 0,464 mmol) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (1,6 ml) před přidáváním hydridu hlinitolithného (0,46 ml, 0,464 mmol, 1M v THF) po kapkách. Reakční směs byla ponechána míchat při teplotě místnosti přes noc. TLC (5% methanol v dichlormethanu) prokázal ještě zbývající výchozí materiál. Byl přidán ještě další 1 ekv. LAH. Po další hodině byla reakční směs zchlazena Fieserem a Fieserovou metodou použitím vsázky (17,46 μΐ), a postupně byly do reakční směsi přidávány vodný roztok hydroxidu sodného (17,46 μΐ, 15% roztok) a voda (52,37 μΐ). Reakční směs potom byla zředěna diethyletherem a vodou a extrahována dvakrát s diethyletherem před sušením nad síranem sodným a koncentrováním ve vakuu. Zbytek byl zpracován na surovinu bez jakékoliv další purifikace.

Tabulka 4 dále identifikuje sloučeniny podle tohoto vynálezu, které byly připraveny podle obecné metody syntéz uvedené v tomto příkladu.

• ·· • 44 •· · · •· • 4 • 4 · · 44 • · 4 4 4· ·····»· · * • · 4 ·· • 44····

TABULKA 4

Sloučeniny připravené metodou podle příkladu 4

R/-X	R2	R3
Cl	Me z	Cl
ethanolamino	Me	ethanolamino
cyclopropylmethylamino	isopropyl	Cl
cyclopropylmethylamino	isopropyl	diethanolamino
3,5-dinitroaniiino	isopropyl	Cl
3 -phenoxy anilino	isopropyl	Cl
4-iodoanilino	isopropyl	Cl
3-aminoqumolino	isopropyl	Cl
3,5-dinitroanilino	isopropyl	diethanolamino
Cl	epoxýmethyl	Cl
4-methoxybenzy lamino	2,3-dihydroxypropyl	diethanolamino
4-phenylanilino	isopropyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	isopropyl	Cl
2-naphthalenylmethylamino	isopropyl	Cl
1 -naphthalenylmethylamino	isopropyl	Cl
2-phenylbenzylamino	isopropyl	Cl
3-quinolinylamino	isopropyl	diethanolamino
5-quinolinylamino	isopropyl	diethanolamino
6-quinolinylamino	isopropyl	diethanolamino
8-quinolinylamino	isopropyl	diethanolamino
n-butylamino	isopropyl	Cl
4-(2-thiophenyl)benzylamino	isopropyl	deithanolamino
4-(2-thiophenyl)benzylamino	isopropyl	Cl
3-thiomethoxyanilino	isopropyl	Cl
4-thiomethoxyanilmo	isopropyl	Cl
3-thiomethorxyaniIino	isopropyl	diethanoamino
4-thiomethoxyanilino	isopropyl	diethanoamino
4-(2-pyridinyl) benzylamino	isopropyl	Cl
3-methoxybenzy lamino	isopropyl	Cl
3,4-dimethoxybenzy lamino	isopropyl	Cl
3,4,5-ttimethoxyenzylamino	isopropyl	Cl
3-methoxybenzylamino	isopropyl	diethanolamino
3,4-dimethoxybenzy lamino	Isopropyl	diethanolamino
3,4,5-trimethoxbenzylamino	Isopropyl	diethanolamino
i 4-(3-thiophenyl)benzylamino	Isopropyl	Cl
! 4-(4-methoxphenyl) benzylamino	Isopropyl	Cl
4-(4-bromophenyl) benzylamino	Isopropyl	diethanolamino
i 4-(3- methoxyphenyl) benzylamino	Isopropyl	diethanolamino
4-(4-methoxypheny) benzylamino	Isopropyl	diethanolamino
4-(3-ťhiophenyl) benzylamino	Isopropyl	diethanolamino
4-(3-methylpheny) benzylamino	Isopropyl	Cl
4-(4-methylphenyl) benzylamino	Isopropyl	Cl
4-(4-trifluoromethylphenyl) benzylamino	Isopropyl	Cl
ί 3-(4 nitrilophenyDanilino	Isopropyl	Cl
3-(4-nitrilophenyI)anilino	Isopropyl	diethanolamino
4-(2-pyridinyl)benzy lamino	Isopropyl	Cl
4-(2-pryidinyl)benzylamino	Isopropyl	diethanolamino

• · • · ··

Příklad 5

Tento příklad popisuje metodu přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu. Metoda syntézy popsaná v tomto příkladu je pouze mírně modifikovaným postupem, který je popsán v příkladu 1.

Následující sloučenina byla připravena podle metody popsané výše.

Příprava 2-amino-6-chlor-9-methylpurinu (7):

2-Amino-6-chlorpurin (1,08 g, 6,4 mmol) byl suspendován v suchém DMF (75 ml) a zpracován s hydridem sodným, 60% disperzí (0,28 g, 7 mmol). Suspenze byla míchána po 15 min předtím, než se přidá jodmethan (0,44 ml, 7,06 mmol) a získaný žlutý roztok byl míchán po 1 hodinu a 45 minut. Pevná látka byla zfiltrována a filtrát byl odpařen před přidáním vody po 10 minut. Získaná pevná látka byla filtrována a sušena přes noc za získání produktu jako směsi N-7 a N-9 alkylačních produktů. Výsledná tekutina byla ponechána přes noc a další den byly shromážděny další krystaly a sušeny.

Příprava 6-chIor-2-(2-methoxyacetylamino)-9-methylpuřinu (8):

Směs isomerů z výše uvedených byla rozpuštěna v dichlormethanu a pyridinu (2 ekv.) a následovalo zpracování s methoxyacetylchloridem (4 ekv.). Reakční směs byla odpařena a filtrována přes zátku ze silikagelu promýváním s 2% methanolem v dichlormethanu následovaný purifikací na chomatotronu použitím silikagelu a promýváním s 2% methanolem v dichlormethanu, aby se izoloval požadovaný produkt

Tabulka 5 identifikuje sloučeniny podle tohoto vynálezu, které byly připraveny podle metod syntézy uvedené v tomto příkladu.

TABULKA 5

Sloučeniny připravené metodou podle příkladu 5:

R1	R2	R3
Cl	Me	H
Cl	Me	2-methoxyacetylamino

Příklad 6

Tento příklad popisuje metodu přípravy sloučenin podle tohoto vynálezu. Metoda syntézy popsaná v tomto příkladu je pouze mírně

• ·

Následující sloučenina byla připravena podle metody popsané výše.

Příprava 2-chlor-6-(4-fenylbenzylamino)purinu (9):

2,6-Dichlorpurin (5,0 g, 26,45 mmol) byl suspendován v n-butanolu (50 ml) a byly přidány 4-fenylbenzylamin (6,61 g, 29,1 mmol) a triethylamin (4,1 ml, 29,1 mmol). Roztok byl zahříván na 120 °C přes noc a potom byl ochlazen. Produkt byl odfiltrován použitím přebytku nbutanolu a sraženina byla promyta 100 ml 1M HC1 a 200 ml vody. Pevná látka byla sušena ve vakuu přes noc při 70 °C za získání požadovaného produktu jako bledě žluté pevné látky.

Příprava 2-diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)purinu (10):

2-Chlor-6-(4-fenylbenzylamino)purin (2,0 g, 5,96 mmol) byl přidán společně s diethanolaminem (11,4 ml, 119,2 mmol) a N-methylpyrrolidinonem (10 ml) a zahříván při 120 °C přes noc. Ochlazená reakční směs byla nalita do dichlormethanu a promyta dvakrát vodou. Organická vrstva byla sušena s bezvodým síranem sodným a koncentrována ve vakuu za získání požadovaného produktu jako bledě zelené pevné látky, která byla dále sušena ve vakuové peci při 70 °C po 2 dny.

Příprava 2-d i ethan olamino-6-(4-fenylbenzylamino)-9-methylpu řinu (11):

2-Diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)purin (0,050 g, 0,124 mmol) byl rozpuštěn v suchém DMF a zpracován s hydridem sodným, 60% disperzí (5,5 mg, 0,136 mmol) po 1 hodinu, byl přidán jodmethan (0,009 ml, 0,148 mmol) a získaný roztok byl míchán při teplotě místnosti přes noc. Reakční směs byla nalita do ethyletheru a promyta dvakrát nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného před sušením nad bezvodým síranem sodným a koncentrováním ve vakuu. Zbytek byl ·· · podroben chromatografii nad silikagelem promýváním 5% methanolem v dichlormethanu za získání produktu jako bílé pevné látky.

’Η-NMR (δ, CDC1₃): 7,55 (m, 4H), 7,41 (m, 4H), 7,35 (m, 4H), 6,41 (br s, < 1H), 5,10 (br s, <2H), 4,72 (br s, 2H), 3,86 (m, 4H), 3,74 (m, 4H), 3,59 (s, 3H).

Tabulka 6 identifikuje sloučeniny podle tohoto vynálezu, které byly připraveny podle metody syntézy uvedené v tomto příkladě.

TABULKA 6

Sloučeniny připravené metodou podle příkladu 6

R,’-X	R2	R3
4-phenylbenzylamino	Methyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	Cyclopentyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	AUyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	Benžyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	3-methylbutyl	diethannlaminn
4-phenylbenzylamino	Isobutyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	t-butylacetate	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	Methylacetate	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	Cyclobutyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	Ethyl	diethanolamino
4-phenylbenzylamino	Propyl	diethanolamino

·· ·« ♦ ·· ΦΦ • ΦΦΦ 9·· · · ··

ΦΦΦΦ ΦΦΦΦ Φ ΦΦ • · ·♦· · · Φ ···· · · ΦΦ

Φ Φ · ΦΦΦ · ♦Φ

Φ· Φ· Φ· Φ »*·»»·

Příklad 7

Látky podle tohoto vynálezu byly hodnoceny dále uvedenými zkouškami.

CDK2 testy:

Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly testovány na stanovení jejich CDK2 inhibiční aktivity. Testovaný systém (celkový objem 50 gl) obsahoval 50 mM Tris-Cl, pH 7,4, 10 mM MgCl₂, 5 mM DTT, 1 gg histonu Hl, 30 μΜ ATP (1 gCi gamma ³²P značeného ATP), 10 gg BSA a 1 ng purifikované CDK2. Po inkubaci při 30 °C po 30 minut byla reakce ukončena přidáním 10 gl 10% TCA a vzorky byly přeneseny na nitrocelulosové filtry. Tyto filtry byly značně promyty v 10% TCA a testovány na radioaktivitu. Slepé pokusy neobsahovaly žádný enzym. Ke stanovní potence různých sloučenin podle tohoto vynálezu byly sloučeniny vkládány do výše uvedeného testu při koncentracích ležících v rozmezí od 100 do 0,02 gg/ml. Po inkubaci po 30 minut byly testované zkumavky zpracovány jako výše. Ve všech testech byly přidávány různé koncentrace olomoucinu a byly použity jako standardní pozitivní kontrolní vzorek. Hodnota IC50 (enzym) uvedená v tabulce 7 je definována jako koncentrace vyžadovaná pro inhibici CDK2 aktivity z 50 %.

Příklad 8

Test buněčné proliferace

Prvotní pasáže buněk hladkého aortického svalu krysy (CV Therapeutics Cell repository) byly naočkovány do 48 miskových ploten (Falcon, ml/misku) na hustotu 20 000 buněk /ml DME obsahujícího 5% tepelně inaktivované bovinní sérum. Buňky byly inkubovány ve standardním inkubátoru pro kultivaci tkáně po 48 hodin. Medium bylo • 4 <4 · · * 4’9 • 4 « 4 4 44 ·4 · 4444 > 444 4 « 44449

4 4 4 44

44 444 odsáto a misky byly doplněny 0,2 ml čerstvého média. Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly přidány v koncentracích ležících od 100 do 0,37 pg/ml. Po 48 hodinách inkubace bylo medium odsáto a kultury byly zpracovány s 0,2 ml roztoku 0,25 μΐ fenozinmethosulfátového roztoku obsahujícího MTS (Buněčný titr 96® vodný testovací kit neradioaktivní buněčné proliferace, Katalog č. G 5430, promega, 2800 Woods Hollow Road, Madison, WI 53711-5399). Hodnota IC₅₀ uvedená v tabulce 6 je definovaná jako koncentrace vyžadovaná pro inhibici buněčné proliferace z 50 %. Olomoucin byl přidáván při různých koncentracích a byl použit jako standardní pozitivní kontrolní vzorek.

Tabulka 7

Bioaktivita vybraných vzorků podle tohoto vynálezu

R,’-X	R2	R3	IC„ (pg/mL) enzym'	IC„ (pg/mL)
behzylammo	Me	Ethanolamino	7	70
4-methoxybenzylamino	H	Cl	60	NA
4-methoxybenzylamino	Me	Cl	6	>70
4-methoxybenzylamino	Me	Ethanolamino	4	48
4-chlorobenzyloxy	H	Cl	60	NA
4-chiorobenzyloxy	Me	Cl	60	NA
4-chlorobenzyloxy	trifluoromethyl	Cl	>60	NA
4-methoxybenzylamino	isopropyl	Cl	4	77

• · · · · · · • · ♦ · · é · • · · · · · · ·· ······· 9 9 ·1?Ή. ... · 999 9

R,’-X	R2	R3	IC„ (gg/mL) enzyme	IC„ (gg/tnL) cells
4-methoxybenzylamino	isopropyl	Ethanolamino	4	43
4-methoxybenzylamino	Me	Diethanolamino	4	48
4-methoxybenzylamino	2-methylpropyl	Cl	60	>70
ethanolamino	Me	Ethanolamino	>60	>70
4-methoxybenzylamino	trifluoromethyl	Cl	>60	>70
4-methoxybenzylamino	benzyl	Cl	>60	>70
ethanolamino	H	Benzylamino	>60	NA
4-methoxybenzylamino ·	isopropyl	Diethanolamino	0.2	2.1
4-methoxybenzylamino	perfíuoroisopropyl	Cl	>45	NA
4-methoxybenzylamino	perfluoroisopropyl	Diethanolamino	40	NA
4-methoxybenzylamino	ispropyl	3-pyrroline	l	12.5
4-methoxybenzylamino	hydroxyethyl	Diethanolamino	0.5	62
4-methoxybenzylamino	isopropyl	Serinol	0.4	15
4-methoxybenzylamino	isopropyl	1,3-diamino-2hydroxypropane	0.6	25
4-methoxybenzylamino	3-cyanopropyl	Cl	>60	NA
4-methoxybenzylamino	3-chloropropyl	Cl	>60	NA
4-methoxybenzylamino	benzyl	Cl	>60	NA
4-methoxybenzylamino	Methyl 4carboxybenzyl	Cl	>60	NA
4-methoxybenzylamino	Naphthaloylethyl	Cl	>60	NA
4-chlorobenzylamino	Trifluoromethyl	Cl	1	NA
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-(2-cyanopropyI)N-(3pyridylmethyl)amino	1	NA
4-methoxybenzylamino	isopropyl	2-(hydroxymethyi)3-methylbutan-2amino	1	NA
4-methoxybenzylamino	isopropyl	3- hydroxypiperidino	1	NA
cyclohexylmethylamino	isopropyl	Cl	1	NA
piperonylamino	isopropyl	Diethanolamino	0.8	NA
4-methox ybenzy lamino	isopropyl	Diisopropanolamin 0	0.8	NA

• · • · · · · · ♦ · · · · • · · · · ·. ·. .· . · · · . · ··· · 6®.íwu*®i* · ; , •I · · ·· · .·····

R,’-X	R2	R3	IC„ (pg/mL) enzyme	IC„ (pg/mL) cells
anilino	isopropyl	Cl	1	NA
4-methoxybenzylamino	isopropyl	N-benzyl-N-2hydroxyethylamino	1	NA
4-phenylanilino	isopropyl	Diethanolamino	0.6	NA
4-phenylbenzyiamino	isopropyl	Diethanolamino	0.6	NA
4-phenyibenzylamino	isopropyl	3-amino-l,2propanediol	0.6	NA
4-(2- thiophenyl)benzylamino	isopropyl	Diethannolamino	0.5	NA
4-(4-methylphenyl) benzylamino	isopropyl	Diethanolamino	0.6	NA
4-(4- trifluoromethylphenyl) benzyalmino	isopropyl	Diethanolamino	0.6	NA
4-thiomethoxyani iino	isopropyl	Cl	0.6	NA
3-(4-nitrilophenyl) anilino	isopropyl	Diethanolamino	0.5	NA
3-thiomethoxyanilino	isopropyl	Diethanolamino	0.1	NA
4-thiomethoxyanilino	isopropyl	Diethanolamino	0.07	NA
3 -methoxy benzylamino	isopropyl	Cl	0.9	NA
4-(2-pyridinyl) benzylamino	isopropyl	Diethanolamino	0.16	NA
3-methoxybenzylamino	isopropyl	Diethanolamino	0.5	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	Diethannlaminn	0.12	0.3
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	Diethanolamino	0.15	2.2
(4- Trifluoromethylphenyl) methvlamino	Isobutyl	Diethanolamino	59	NA
(4- Trifluoromethylphenyl) methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	0.56	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-2-Amino-3phenylpropylamino	1.07	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2Aminoethylamino	0.17	1.4
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(D)-lHydroxymethyl-2methylpropylamino	0.06	2.7
(4-Fluorophenyl) methylamino	Isopropyl	(L)-l- Hydroxymethyl-2-	0.19	NA

« «

·· · ·· . ·· • 9 · · · · J • · · ·· · · · ·

R,’-X	R2	R3	IC_S4 (pg/mL) enzyme	IC„ (pg/mL) cells
		methylpropyiamino
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(D)-lHydroxymethyl-2methylpropylamino	0.19	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(L)-l- Hydroxymethyl-2methylpropylamino	0.05	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Hydroxy-2phenyl-ethylamino	0.08	>5
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Amino-Nl-(2hydroxyethyl)ethyl amino	0.07	0.2
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Amino-N2-(2hydroxyethyl)ethyl amino	2.02	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-2-Phenyl-lcarboxamidoethylamino	1.07	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Amino-N2-(2hydroxyethyl)-N 1 (hydroxyethyl)ethy lamino	0.43	NA
(4- Sulfonamidophenyl)me thylamino	Isopropyl	2Aminoethylamino	9	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	2-Oxo-3-butyl	Diethanolamino	11	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	2-Oxo-3-butyl	Diethanolamino	37	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2Aminoethylamino	0.35	0.1
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	3- Aminopropylamino	1.0	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	5- Aminopentylamino	31	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Amino-2-methylethylamino	0.05	0.1
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-(+)-l(Hydroxymethyl)pr opylamino	0.17	NA
(4- Chlorophenyl)methyla	Isopropyl	(R)-(-)-l(Hydroxymethyljpr	0.18	NA

R/-X	R2	R3	IC₅₀ (Mg/mL) enzym	IC„ (pg/mL)
mino		opylamino
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-(+)-l(Hydroxymethyl)et hylamino	0.26	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(R)-(-)-l(Hydroxymethyl)et hylamino	0.35	NA
(4- Chlorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-(+)-2Hydroxypropylami no	0.38	NA
(4- Chlorophenyl)methyia mino	Isopropyl	(R)-(-)-2Hydroxypropylami no	0.43	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Aminopropylamino	0.48	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-(2Tetrahydroíuranyl) methylamino	0.63	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(R>(2Tetrahydroíuranyl) methylamino	0.58	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	2-Hydroxy-lmethylethylamino	0.18	NA
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(S)-2-Hydroxy-2methylethylamino	0.22	NA
(4* Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	(R)-2-Hydroxy-2methylethylamino	0.23	>5
(4- Fluorophenyl)methyla mino	Isopropyl	1- Hydroxymethylpro pylamino	0.11	2.4

Vlastnost inhibice buněčné proliferace sloučenin podle tohoto vynálezu je demonstrována jejich schopností inhibovat buněčnou proliferaci v rozmezí od asi 0,05 gg/ml do 100 gg/ml, přednostně méně než 0,5 gg/ml.

Obdobné testy byly prováděny použitím následujících buněčných linií; P388 - myší lymfoidní neoplasmus; L1210 - myší lymfotická leukémie.; Caco2 adenokarcinom lidského střeva; MCF7- adenokarcinom lidského prsu; PupVSMC buňky aortického hladké svalstva neonatální krysy; Ovcar-lidský ovariální karcinom; Panel - lidský pankreatický • * « · adenokarcinom; a HUVEC- endotelové buňky lidské pupečníkové šňůry. Inhibiční aktivita mnoha sloučenin podle tohoto vynálezu proti jedné nebo více z buněčných linií je uvedena v tabulce 8 a 9.

Tabulka 8

IC50 (pg/ml) pro inhibici buněčné proliferace

R,X	^R2	•R,	P 388	L . 120	Caco 2	MCF 7	Panel	OvC ar	Pup VS MC	HU VE C
(4methoxyphenyl )-methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	1.5	2.5	4.5	8.0	10.0	11.0	0.5	3.0
(4phenylphenyl)a mino	Isopropyl	Diethanolamino	1.0	4.0	0.5	4.0	4.0	7.0	1.0
(4phenylphenyi)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	<1.0	1.0	3.5	1.0	1.3	2.0
(4methoxyphenyl )-methylamino	Isopropyl	Morpholino	>5				5.5	4.0
3phenoxyphenyl ,3benzyloxyphen z!	isopropyl	Diethanolamino	1.5			2.0	2.5	2.0

Tabulka 9

R,X	Ri	R,	MRC-5	PupVSMC
(4-methoxyphenyl)methylamino	Isopropyl	Diethanolamino	5	0.4
(4-Chlorophenyl)methylamino	Isopropyl	2-Aminoethylamino	1	0.1
(4-Chlorophenyl)-methylamino	Isopropyl	2-Amino-2methylethylamino	1	0.1
(4-Chlorophenyl)-methylamino	Isopropyl	2-Amino-Nl-(2hydroxyeťhyl)ethylamin 0	1	0.3
(4-Chlorophenyl)-methy lamino	Isopropyl	Diethanolamino	3	0.3

MRC-5 = Lidský fibroblast

PupVSMC = buňky aortického hladkého svalstva neonatální krysy

Příklad 8

Sloučeniny podle tohoto vynálezu byly hodnoceny z hlediska jejich účinnosti použitím myšího modelu leukémie. Myší model leukémie je standardní model použitý pro hodnocení protinádorových látek. Myšim CDF1 byly injekčně vstříknuty L1210 buňky (1x10 3 buněk/myš). O dvacet čtyři hodiny později byly tyto myši ošetřeny různými dávkami (ip) sloučeniny 3 z příkladu 1 ve fyziologickém roztoku. Použitý dávkový režim v této studii je znázorněn v tabulce 10 dále. Myším byla dávkována sloučenina 3 denně nebo obden. Kontrolnímu vzorku myší byl podáván fyziologický roztok. Po 7 dnech bylo dávkování pozastaveno s živé myši byly monitorovány.

Tabulka 10

Ošetření		N	Střední Doba Přežití Dny	T/Cxl00
Fyziol.roztok		7	10 (9-13)	100

Sloučenina 3	0,5mg/kg	7	11 (10-15)	110
	1,0 mg/kg	7	13 (11-13)	130
	2 mg/kg	7	12 (10-14)	120
	4 mg/kg-dny 1,3,5,7	7	13 (10-15)	130
	8 mg/kg-dny 1,3,5,7	7	13 (12-16)	130

Výsledky indikují, že krysy, kterým byla podávána sloučenina 3, přežily déle než kontrolní krysy.

• · ·

Příklad 9

V tomto příkladu byl měřen účinek akutního lokálního podávání sloučeniny 3 z příkladu 1 na redukování neointimy, následující po balonové angioplastii v krysím modelu karotické artérie. V tomto příkladu byly levé karotické artérie běžných dospělých krysích samců (n=10 na experimentální skupinu) chirurgicky poraněny použitím Fogarty katétru pro arteriální embolektomii. Bezprostředně po poškození byla karotická artérie rozpůlena vaskulární svorkou a tím se rozdělila na neošetřený a ošetřený segment. Katétr pro podávání léčiva byl potom vložen do distální poloviny karotidy. Po podání léčiva byl katétr odstraněn a přebytek léčiva byl vymyt odstraněním vaskulární svorky a obnovením krevního toku jako před uzavřením artérie. Zvířata byla ponechána k ozdravění po 14 dní před odběrem karotické artérie. Odebraná tkáň byla rozdělena a neointimální plocha byla digitalizována a měřena pomocí počítače planimetrickým systémem. Pro každé zvíře bylo zprůměrováno 15 měření pro neošetřený vzorek a 15 pro ošetřený vzorek. {2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4-chlorfenyl)methyl]amin byl podáván v dávce 5 mg/ml redukující neointimální plochu asi 90% v porovnání se 6% snížením při podávání fyziologického roztoku samotného.

Výsledky z tohoto příkladu jsou uvedeny na obr. 1. Podle obr.l podávání sloučeniny 3 z příkladu 1 na poškozenou karotickou artérií obnovilo neointimální plochu asi v 88 % v porovnání se 6% redukcí poskytovanou samotným fyziologickým nosičem.

Příklad 10

Prostředky podle tohoto vynálezu byly testovány ke stanovení jejich inhibiční aktivity ΙκΒ-α kinasy. Lidská endotelová buněčná linie pupečníkové vény (HUVEC) použitá v těchto studiích byla získána od Clonetics (San Diego, CA) a byla uchovávána v endotelovém buněčném ·· růstovém médiu doplněném 2% fetálním bovinním sérem, 10 ng/ml lidského rekombinantního epidermálního růstového faktoru, 1 pg/ml hydrokortizonu, 50 pg/ml gentamicinu, 50 ng/ml amfotericinu B a 12 pg/ml bovinního mozkového extraktu při 37 °C v inkubátoru pro tkáňovou kulturu. Všechna růstová media s doplňky byly získány od Clonetics (San Diego, CA). E. coli lipopolysacharid (LSP) serotyp 0111:B4 byl získán od Sigma (Saint Louis, MI). Všechny další chemikálie byly reakčního stupně.

Příprava buněčného lyzátu:

Monovrstvy (75 cm²) HUVEC buněk byly ošetřeny LPS (100 ng/ml) po 5 minut, potom bylo buněčné medium urychleně odstraněno a monovrstva byla promyta třikrát s ledově studenou PBS. Buněčná vrstva byla naškrábána do 10 ml PBS a buňky byly peletovány odstředěním (3000 otáček za minutu, 5 min, 4 °C). Buněčný lyzát byl připraven inkubováním buněčných pelet ve 0,2 ml lýzového pufru (20 mM HEPES, pH 7,3, 50 mM NaCl, lOmM MgCl₂, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1 mM ortovanadičnanu sodného, 10 mM β-glycerofosfátu, 1 mM fenylmethylsulfonylfluoridu, lmM dithiothreitolu, 0,5% Nonidet P-40 po 15 minut při 37 °C za opakovaného víření. Buněčná poškozená tkáň byla odstraněna ze vzorku mikro-odstřeďováním (10 OOOxg, 15 minut, 4 °C) a supernatant byl přečištěn přidáním 100 ml suspenze sefarózy 4B v lýzovém pufru a jemným mícháním po 1 hodinu při 4 °C. Korálky ze safarózy 4B byly odstraněny mikro-odstředěním a supernatant rozdělen a uložen při 80 °C.

Test ΙκΒ-α kinasy v pevné fází pg GST- ΙκΒ-α, odpovídající plné délce ΙκΒ-α lidského původu, (Santa Cruz Biotechnology) byl inkubován s 20 μΐ 50% suspenze glutathion S sefarózy 4B (Pharmacia) v reakčním pufru (20 mM HEPES, pH 7,3, 10 mM MgCl₂, 15 mM β-glycerofosfátu, 0,5 mM ortovanadičnanu sodného, 0,5 mM EGTA) po 30 minut při teplotě místnosti. Komplex GST- ΙκΒ-perliček byl promyt třikrát s 0,5 ml reakčního pufru

Φ· *· ·♦ · 99 ·· • « · · · φ · φ · φ♦ • ••9 φ Φ Φ φ φ φ· « · ··· « « Φ ···· · · Φ♦

ΦΦ · φ Φ Φ φ Φφ

ΦΦ ΦΦ ΦΦ Φ «* 9999 resuspendací a mikroodstředěním. 10 pg HUVEC buněk lyzátového proteinu ve 100 μΐ reakčního pufru potom bylo přidáno do GST- IkBperličkového komplexu a směs byla inkubována za mírného míchání po 1 hodinu při 4 °C. Perličkový komplex potom byl třikrát promyt s reakčním pufrem obsahujícím 0,2 M NaCl a jedenkrát se samotným reakčním pufrem. Nakonec byl perličkový komplex resuspendován ve 20 μΐ reakčního pufru obsahujícího 5pCi[y-³²P]ATP (>5000ci/mmol, New England Nuclear Corp.Boston, MA) a inkubován při teplotě místnosti po 15 minut. Reakce byla ukončena přidáním 10 μΐ SDS-PAGE vzorku pufru a vařena po 3 minuty před separací pomocí SDS-PAGE (10-20% gradient Readygel, BioRad). Po elektroforéze byl gel fixován (50% methanol 10% kyselina octová) po 15 minut, promyt třikrát po 5 minut pokaždé destilovanou vodou a zpracován s 5% glycerolem po 15 minut před vysušením a exponováním na filmu pro autoradiografii (X-OMAT XAR-5 Kodak).

Test kínasy v gelu:

ΙκΒ-α isozymy byly testovány na aktivitu použitím modifikace dříve publikovaných metod (11, 19, 20). Stručně, dvojité vzorky perličkového komlexu ΙκΒ-glutathion sefarózy 4B byly připraveny jak bylo popsáno výše a byly separovány elektroforézou pomocí 12% SDSPAGE gelu, který byl polymerizován za přítomnosti 15μg/ml GST- IkBa. Po elektroforéze byl gel mírně promyt dvakrát po 30 minut pokaždé s 50 mM Tris-HCl pH 8,0, 5 mM β-merkaptoethanolu; 20% isopropanolu pro odstranění SDS. Potom byly proteiny denaturovány v gelu inkubací po 45 minut ve 100 ml 50mM Tris-HCl pH 8,0; 5 mM β-merkaptoethanolu; 0,04% Tween 40. Potom byl gel rozříznut na polovinu, aby se oddělily duplicitní vzorky, jedna polovina byla inkubována v 10 ml samotného reakčního pufru a druhá v 10 ml reakčního pufru obsahujícího 10 pg/ml 2-diethanolamino-6(4-fenyl-anilino)-9-isopropylpurinu (sloučenina 6 z příkladu 2) po 1 hodinu při teplotě místnosti, přičemž bylo přidáno 10pCi[y-³²P]ATP a inkubace pokračovala po další hodinu při teplotě místnosti. Potom byly gely ·· ·· · ·· • · · · · · · · ···♦«···· o/ · · ··· · · · ··♦· · · • · · · · · · ♦ «· «· ·« * ·* ···<

podrobeny násobnému promývání 15 minut, každé 100 ml 5% trichloroctové kyseliny obsahující 1% pyrofosfát sodný až do doby, kdy 1 ml promývácího roztoku poskytl blízko k pozadí radioaktivity. Potom byly gely usušeny a postoupeny do souboru pro autoradiografii.

Příprava afinitní matrice 2-diethanolamino-6-(4-fenylbenzylamino)-9isopropylpurinu epoxy-aktivované sefarózy 6B

Mrazem vysušená epoxy-aktivovaná Sefaróza 6B (Pharmacia LKB, Piscataway, NJ) byla zvolena pro kuplovací reakci vzhledem ke své schopnosti tvořit etherovou vazbu mezi ligandem obsahujícím hydroxyl a epoxidovou skupinou na sefaróze. Gel byl nabotnán podle výrobních pokynů, (100 mg) sloučeniny 6 z příkladu 2 bylo rozpuštěno v 1 ml kuplovacího roztoku (1,2:1 obj/obj dimethylformamidu : O,1N NaOH) a míšeno s 0,5 ml nabotnaného gelu při pH 10-11 po 72 hodiny při teplotě místnosti za mírného míchání. Přebytečné reakční skupiny byly blokovány s 1M ethanolaminem po 4 hodiny při 50 °C a gelová suspenze byla nalita do 1 ml kolony stříkačnou. Pryskyřice byla aktivována třemi střídajícími se cykly dvaceti objemů kolony pufry, každý s pH 4,0 (0,lM acetát, 0,5M NaCl) a pH 8.0 (0,lM Tris-HCl, 0,5M NaCl), následně dvaceti objemy kolony reakčního pufru (20mM HEPES, pH 7,3, lOmM MgCl₂, 15 mM β-glycerofosfátu, 0,5mM ortovanadičnanu sodného, 0,5 mM EGTA). Kolona byla uložena při 4 °C v reakčním pufru obsahujícím 0,5% azid sodný a regenerovala před každým použitím střídajícími se cykly s nízkým a vysokým pH, jak bylo popsáno výše.

Aktivovaný buněčný lyzát HUVEC (500 gg proteinu v 1 ml reakčního pufru) byl převeden přes CTV-1545 matrici sefarózy postupně pětkrát a proplach byl uložen (nevázaný materiál). Potom byla matrice promyta třikrát s 1 ml reakčního pufru (proplach 1-3), potom třikrát s reakčním pufrem obsahujícím 0,5M NaCl (eluát 1-3). Alikvotní podíly (20μ1 z 1 ml) každého vzorku byly testovány na svou schopnost ·

9 · « · · ♦ φ «Φ·

ZQ ··«« ··*· ··*

9 9 9 9 9··* «· ·· ·· · <·9999 fošforylovat na perličkovém komplexu GST-ΙκΒ a byly analyzovány SDS-PAGE, jak bylo popsáno výše.

Test afinity obohacené ΙκΒ-α kinasy

Objemné 0,5 M NaCl eluáty z afinitní matrice byly použity jako zdroj enzymů pro výzkum filtračního testu ΙκΒ-α kinasy. Každá reakční směs obsahovala afinitou obohacenou ΙκΒ-α kinasu (lpg proteinu), 10 ng GST ΙκΒ-α kinasy a 0,5pCi[y-³²P]ATP (>5000 Ci/mmol, New England Nuclear Corp., Boston, MA) ve 20 μΐ reakčního pufru. Reakční směs byla inkubována po 15 minut při teplotě místnosti a reakce byla ukončena přidáním 2 μΐ 0,5M EDTA. Reakční směsi byly naneseny na disky z fosfocelulózy (Bibco BRL Life Technologies, Gaithersburg, MD) a filtry byly promyty třikrát s 0,15M fosforečnou kyselinou za mírného třepání po 15 minut (až 10 filtrů bylo promyto s 300 ml 0,15M kyseliny fosforečné). Po třetím promytí byly filtry sušeny na vzduchu, vloženy do scintilační kapaliny a testovány kapalinovou scintilační spektrometrií.

Test posunu elektroforetické mobility :

Nukleární extrakty byly připraveny použitím extrakčního postupu s pufrem s vysokým obsahem soli. 10 pmol dvojitého řetězce NF-kB konvenčního oligonukleotidu (5 '-AGTTGAGGGGACTTTCCCAGGC3'))Promega) bylo na 5'konci označeno 5pCí[y-³²P]ÁTP (>5000 Ci/mmol, New England Nuclear Corp., Boston, MA) inkubací s T4 polynukleotidovou kinasou po 1 hodinu při 37 °C. Nezabudované nukleotidy byly odstraněny průchodem reakční směsi přes kolonu 1 ml Sephadex G-5-spin. Testy vazebnosti probíhaly při teplotě místnosti po 1 hodinu a sestávaly z 10 pg nukleárního extraktu proteinu, lpg DNA ze sperma lososa a 5xl0⁴ cpm ³²P značeného konvenčního oligonukleotidu za přítomnosti a absenci padesáti násobného neznačeného oligonukleotidu. Komlexy DNA-proteinu byly rozpuštěny elektroforézou 8% nedenaturovaným polyakrylamidovým gelem, gely byly sušeny na filtračním papíru a vizualizovány autoradiografií.

Tabulka 11

Enzymová aktivita vybraných vzorků podle vynálezu

R/-X	R2	R3	IC50(pM) enzym
4-phenylbenzylamino	Isopropyl	Diethanolamino	1.1
4-phenylbenzylamino	Isopropyl	Diethylamino	>2.4
4-phenylbenzylamino	Isopropyl	Ethanolamino	2.5
4-bromoanilino	Isopropyl	Diethanolamino	14
4-(3 -methoxpheny 1) benzylamino	Isopropyl	Diethanolamino	>10
4-(4-methoxphenyl) benzylamino	Isopropyl	Diethanolamino	11
3-(4-nitrilophenyl) anilino	Isopropyl	Diethanolamino	2.2
4-thiomethoxyanilino	Isopropyl	Diethanolamino	12.4
4-(2-pyridinyl) benzylamino	Isopropyl	Diethanolamino	4.5

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina se základem majícím následující vzorec (D kde

R¹ je halogen nebo R'i-X, kde X je NH, O, S, S(O₂)

R'i je alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl, a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, CF₃, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, SO2NR²⁰CONR²⁰R²³, SO2NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, or²⁰, oconr²⁰r²³, oconr²⁰so2r²¹, oconr²⁰r²³, cn, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO₂R²¹ a COR²⁰;

R₂ je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a ·· ·· 99 · ··

4«·· · · · ·

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 ·

9 9 999 9 9 9 9999 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

99 99 99 9 99 9999 alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, SO2NR²⁰CONR²⁰R²³, SO2NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, OCONR²⁰R²³, OCONR²⁰SO2R²¹, OCONR²⁰R²³, CN, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO₂R²¹ a COR²⁰;

R₃ je halogen, hydroxyl, thio, alkoxy, alkylthio, alkyl, -NR₄R₅nebo složka mající vzorec kde m=l-3, n=l-3, o=l,3, y=karbonyl, -NR₄R₅, hydroxyl, thiol, alkoxy, alkylthiol;

R₄ a R₅ jsou každý nezávisle vodík, OR₂₀, NR₂₀R₂₃ nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, SO2NR²⁰COR²¹, SO2NR²⁰CONR²⁰R²³, SO2NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰C02R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, N(R²⁰)C(NR²⁰)NHR²³, nr²⁰so2r²¹, • ♦ • φ 9 φ · · ♦ · φ ·φ • φ « φ · φ · φ «φφ • · ··· φ · φ φφφφ · φ φφ φφ φφφφ φ φφ

Φ· ·· · «φ ♦···

OR²⁰, OCONR²⁰R²³, OCONR²⁰SO2R²¹, OCONR²⁰R²³, CN, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³, CONR²⁰SO₂R²¹ a COR²⁰; s tou podmínkou, že pokud Y je karbonyl, pak Y a R₄' společně mohou být jediný atom kyslíku, R₄ a R5 společně mohou být jediný atom kyslíku, R₄ ' a R5' mohou být společně jediný kyslíkový atom; a když R₃ je 2-hydroxyethylamino a R₂ je methyl, R/-X není amino, 3-methyl-2-butenylamino, benzylamino nebo m-hydroxybenzylamino, když R₃ není 2-hydroxyethylamino; když R₂ je isopropyl, Rť-X není benzylamino, m-hydroxybenzylamino nebo 3-methylbutylamino; když R₃ je 2-hydroxyethylamino a R₂ je 2-hydroxyethyl, Ri'-X není benzylamino a když R₃ je zvolen ze skupiny sestávající z 2-methyl-2-hydroxypropylamino a 2-dimethylaminoethylamino, a když R₂ je methyl, potom R/-X není benzylamino;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci.]₅alkylu, C₂. i₅alkenylu, C₂-i5alkynylu, heterocyklylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-C].6alkylu, CF₃, arylu a heteroarylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci-isalkylu, C2-15alkenylu, C2-i5alkynylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heterocyklyl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2, S(O)R²², SO2R²², SO2N(R²⁰)2, SO2NR²⁰COR²², SO2NR²⁰CON(R²⁰)2 , SO2NR²⁰CO2R²², N(R²⁰)2 , NR²⁰COR²², NR²⁰CO2R²² , NR²⁰CON(R²⁰)2, NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR²⁰ , CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, CONR²⁰SO2R²² , NR²⁰SO2R²² , SO2NR²⁰CO2R²², OR²⁰, OCONR²⁰SO2R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH2OC(O)R²⁰ a OCON(R²⁰)2> a každý volitelný heteroarylový, arylový a heterocyklylový substituent je volitelně substituován halogenem, alkylem, CF₃, amino, mono- nebo di-alkylamino, alkylnebo aryl- nebo heteroarylamidem, NCOR²², NR²⁰SO₂R²², COR²⁰,

Ί3 ·· ·9 · 99 • 9 9 · · · ·9999

9 9 9 9 9999 99* • 9 ··· · · · ···· · 9 99

99 9 999 9 99 «· ·· 99 9 · ···· 9

CO₂R²⁰, CON(R²⁰)2, NR²⁰CON(R²⁰)2, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰)2, SR²⁰, S(O)R²², SO2N(R²⁰)₂, CN nebo OR²⁰;

R je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_i₅alkylu, C2-15alkenylu, C₂_i5alkynylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, alkynyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány s 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci.galkylu, CF₃, arylu, a heteroarylu; a

R²³ je R²¹ nebo H.
2. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1, kde

R'i je alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl, a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, CF₃, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³ a COR²⁰;

R₂ je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny substituovaný alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³, a COR²⁰;

« · *· ·· • 9 99

9 9 9* » » ···9

R₄ a Rs jsou každý nezávisle vodík, OR₂o, NR₂oR₂₃ nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰CONR²⁰R²³, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³, a COR²⁰;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci-galkylu, C₂. ₈alkenylu, heterocyklylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo aryl- nebo hetero-arylamidu, CN, O-Ci. éalkylu, CF3, arylu a heteroarylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Cj.galkylu, C2-salkenylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, aryl, heterocyklyl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2, S(O)R²², SO2R²², SO2N(R²⁰)2, SO2NR²⁰COR²², SO2NR²⁰CON(R²⁰)2 , SO2NR²⁰CO2R²², N(R²⁰)2 , NR²⁰COR²², NR²⁰CO2R²² , NR²⁰CON(R²⁰)2, NR²⁰C(NR²⁰)NHR²³, COR²⁰ , CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, conr²⁰so₂r²² , NR²⁰SO2R²² , SO2NR²⁰CO2R²², OR²⁰, OCONR²⁰SO2R²², OC(O)R²⁰, C(O)OCH₂OC(O)R²⁰ a OCON(R²⁰)2. a každý volitelný heteroarylový, arylový a heterocyklylový substituent je volitelně substituován halogenem, alkylem, CF3, amino, mono- nebo di-alkylamino, alkylnebo aryl- nebo heteroarylamidem, NCOR²², NR²⁰SO2R²², COR²⁰, CO₂R²⁰, CON(R²⁰)2, NR²⁰CON(R²⁰)2, OC(O)R²⁰, OC(O)N(R²⁰)2, SR²⁰, S(O)R²², SO2N(R²⁰)₂, CN nebo OR²⁰; a ·· »· 9« 9 ·9 ·♦ • 999 999999«

75 ·····«···♦♦ • ···«*· ·♦····· 9· • · · · · * ··· ·· ·· ·· 9 ······

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z C^₈alkylu, C₂-salkenylu, heterocyklylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, alkenyl, heterocyklyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány s 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci-salkylu, CF₃, arylu, a heteroarylu.
3. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1, kde

R'i je alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroaralkyl, alkenyl, a alkynyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl, a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, CF₃, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰ ,CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³, a COR²⁰;

R₂ je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, heterocyklyl a aryl, každý mající jeden až 10 uhlíkových atomů, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl jsou volitelně substituovány 1 až třemi substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, , R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³, a COR²⁰;

R₄ a Rs jsou každý nezávisle vodík, OR₂₀, NR₂₀R₂3 nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO₂R²¹, ·· φ-Φ ··· ·· „_r Φ Φ Φ · Φ · Φ···· /0 ········ φ ·♦ • * ··< · · · ··*· « φ φ♦ • · φ * φ φ φ ·φ «· φφ >· φ «φ ···· so₂nr²⁰r²³, nr²⁰r²³, nr²⁰cor²¹, nr²⁰co2r²¹, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰,

CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³, a COR²⁰;

2 O

R je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci_₈alkylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci.&alkylu, CF₃;

R²¹ je člen vybraný zé skupiny sestávající z Ci_8alkylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2, S(O)R²², SO2R²², SO2N(R²⁰)2, NR²⁰CO2R²² , NR²⁰CON(R²⁰)2, COR²⁰ , CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, NR²⁰SO2R²², OR²⁰ a

9 9

R je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.₈alkylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány s 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci-6alkylu, CF₃, arylu, a heteroarylu.
4. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1, kde

R'i je alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteróaralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, arylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³;

R₂ je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny alkyl, heterocyklyl a aryl, každý mající jeden až 10 uhlíkových atomů, φφ ·· φφ * ·· ·· • · φ « φ · ····· • · · · φ φ φ φ · ·· • ♦ ··♦ φ φ φ ···· · · φ· • · · φ φ φ φ ·· • Φ φφ >· · φφ ···· přičemž alkyl, heterocyklyl, aryl, jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²’, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰, CONR²⁰R²³ a COR²⁰;

R4 a R5 jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, nr²⁰r²³, nr²⁰cor²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Cj.«alkylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Ci-6alkylu, CF₃;

R^Z1 je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci-«alkylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2, S(O)R²², SO2R²², SO2N(R²⁰)₂,

NR²⁰CO₂R²² , NR²⁰CON(R²⁰)2, COR²⁰ , CO2R²⁰, CON(R²⁰)2, NR²⁰SO2R²², OR²⁰; a

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_«alkylu, arylu, a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány s 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl- nebo aryl- nebo heteroarylamidu, CN, O-Cj.galkylu, CF₃, arylu, a heteroarylu.

44 »· «4 4 44 44 • 4 1 · 4 ♦ 4 4 4 4 4

4 · 4 4 «444 4 44

4 4 444 4 4 4 «·44 4 4 44

4 « 4 4 44444

44 «4 44 4 ν· ····
5. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1, kde

X=NH.
6. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1, kde R₃ je složka mající vzorec: kde m=l-3, n=l-3, o=l,3, y=karbonyl, -NR₄R₅, hydroxyl, thiol, alkoxy, alkylthiol s podmínkou, že když Y je karbonyl, Y a R₄ společně mohou být jediný kyslíkový atom, R₄ a Rs mohou být společně jediný kyslíkový atom, R₄' a R₅' mohou být společně jediný kyslíkový atom; a

R₄ a Rs jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³ .
7. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 3, kde Ri'je zvolen ze skupiny sestávající z aralkylu a heteroarylalkylu.

• · ·· ·· · ·· ····
8. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 7, kde Ri'je zvolen ze skupiny sestávající z aralkylu, nesubstituovaného pyridylalkylu a substituovaného pyridylalkylu, a kde R₂ je zvolen ze skupiny sestávající z nižšího alkylu, substituovaného nižšího alkylu a alkylcykloalkylu.
9. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 5, kde

R'i je aryl, heteroaryl, heterocyklyl, aralkyl, heteroaralkyl, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, arylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³;

R₂ je vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny substituovaný nižší alkyl, substituovaný alkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, každý mající jeden až 10 uhlíkových atomů, přičemž substituce zahrnuje volitelně substituci 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO₂R²¹, NR^2OR²³, OR²⁰ a CN;

R₄ a R5 jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík vybraný ze skupiny zahrnující alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl, každý mající jeden až dvacet uhlíkových atomů, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, alkenyl a alkynyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, R , SR , NR R , NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci.galkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle • · ·· ·· · ·· ·· • · · · · · · · · ♦ · ···· · · · · ·· · zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino-, alkyl- nebo CN, O-Ci-6alkylu, CF₃;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.galkylu, přičemž alkyl je volitelně substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2 ; a

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_₃alkylu, arylu a heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylaminoskupiny, alkyl- nebo aryl- CN, O-Cj. ₆alkylu, CF₃.
10. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 3, kde R/ je zvolen ze skupiny sestávající z arylu, heterocyklylu, heteroarylu, substituovaného heteroarylu a substituovaného arylu.
11. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 3, kde R/ je zvolen ze skupiny sestávající z arylu, nesubstituovaného pyridylu, substituovaného pyridylu a substituovaného arylu, a R₂ je zvolen ze skupiny sestávající z alkylu, substituovaného alkylu.
12. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 2, kde R₃je -NR4R5 , kde R₄ a R₅ jsou každý zvolen ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, heterocyklylu, acylu, arylu, heteroarylu, aralkylu, heteroaralkylu, alkylalkenylu, alkylalkynylu, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl, heteroarylalkyl jsou volitelně substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, heteroarylu, heterocyklylu, R²², SR²⁰, S(O)R²¹, SO2R²¹, SO2NR²⁰R²³, NR²⁰R²³, nr²⁰cor²¹, NR²⁰CO2R²¹ , NR²⁰CONR²⁰R²³, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO2R²⁰, CONR²⁰R²³ a COR20.

•· ·· · ·· ·· • · · ♦ · · · « ···· · · · · · · · • · ··· · · · ···· · · · · ·· · · · · ··· • · · · ·· · ·«····
13. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

R'i je aryl, substituovaný aryl, každý mající 6 uhlíkových atomů, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci s 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, arylu, R²², NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, OR²⁰, CN;

R₂ je vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny substituovaný nižší alkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, každý mající jeden až 6 atomů uhlíku, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², NR²⁰R²³, OR²⁰;

R₄ a R5 jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny zahrnující alkyl a heterocyklyl, kde každý uhlovodík má jeden až 12 atomů uhlíku, přičemž alkyl a heterocyklyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², SR²⁰, OR²⁰, NR²⁰R²³, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci.₈ alkylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.3alkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2; a

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Cj.₃ alkylu, arylu, heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, alkylu nebo arylu, CN, O-Ci_6alkylu, a CF₃.
14. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

R'i je aryl, substituovaný aryl, každý mající 6 uhlíkových atomů, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci s 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CIG, R²², OR²⁰, CN;

R₂ je isopropyl;

R4 a R5 jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny zahrnující alkyl a heterocyklyl, kde každý uhlovodík má jeden až 12 atomů uhlíku, přičemž alkyl a heterocyklyl jsou volitelně substituovány 1 substituentem nezávisle zvoleným ze skupiny sestávající z R²², OR²⁰, NR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, C1-2 alkylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci-3alkylu;

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z C1.3 alkylu, arylu, přičemž alkyl, aryl jsou popřípadě substituovány 1 substituentem nezávisle zvoleným z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, CN, CF₃; a

R²³ je R²¹ nebo H.
15. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

R'i je aralkyl, substituovaný aralkyl, každý mající 6-8 uhlíkových atomů, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci s 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, arylu, R²², NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, OR²⁰, CN;

R₂ je vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny substituovaný alkyl, cykloalkyl, substituovaný cykloalkyl, každý mající jeden až 6 atomů uhlíku, přičemž substituce zahrnuje volitelnou substituci 1 • · • · substituentem nezávisle zvoleným ze skupiny sestávající z halogenu, R²², NR²⁰R²³, OR²⁰;

R< a R5 jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny zahrnující alkyl a heterocyklyl, kde každý uhlovodík má jeden až 12 atomů uhlíku, přičemž alkyl a heterocyklyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², SR²⁰, OR²⁰, NR²⁰R²³, CN, CO₂R²⁰ a CONR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci.g alkylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.3alkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny halogen, CF3, CN, OR²⁰, SR²⁰, N(R²⁰)2; a

Λ Λ

R je člen vybraný ze skupiny sestávající z C1-3 alkylu, arylu, heteroarylu, přičemž alkyl, aryl a heteroaryl jsou popřípadě substituovány 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, alkylu nebo arylu, CN, Ο-Ci.ealkylu, a CF₃.
16. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

R'i je - CH₂-fenyl, kde fenylový kruh je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, CF₃, R²², OR²⁰, CN;

R₂ je isopropyl;

R4 a R5 jsou každý nezávisle vodík nebo uhlovodík zvolený ze skupiny zahrnující alkyl a heterocyklyl, kde každý uhlovodík má jeden až 12 atomů uhlíku, přičemž alkyl a heterocyklyl jsou volitelně •· ·· · ··«· • · · · ··· · « · · • · · · · · · · ·· · • · ··· · · · ···· · · · · ·· ·· ·· · ·· ···· substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z R²², OR²⁰, NR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci.₂alkylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.₃alkylu; a

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_₃ alkylu, arylu, přičemž alkyl, aryl jsou popřípadě substituovány 1 substituentem nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, CN,

CF₃; a

R²³ je R²¹ nebo H.
17. 2,6,9-trisubtituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

Ri' je zvolen ze skupiny sestávající z aralkylu, substituovaného pyridylalkylu a nesubstituovaného pyridylalkylu;

R₂ je zvolen ze skupiny sestávající z alkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², NR²⁰R²³, OR²⁰;

R₄ je substituovaný alkyl mající od 2 do 6 atomů uhlíku popřípadě substituovaných 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z R²², OR²⁰, NR²⁰R²³;

Rs je zvolen ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, acylu, heterocyklylu, arylu, heteroarylu, aralkylu, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle

90 O A O A O 9 ” zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, R , SR , NR R , NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a

CONR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci-₂ alkylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_₃alkylu;

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z C1.3 alkylu, arylu, přičemž alkyl, aryl jsou popřípadě substituovány 1 substituentem nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, CN, CF₃; a

R²³ je R²¹ nebo H.
18. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

Ri' je zvolen ze skupiny sestávající z arylu, substituovaného arylu, pyridylu, a substituovaného pyridylu;

R₂ je zvolen ze skupiny sestávající z alkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, R²², NR²⁰R²³, OR²⁰;

R₄ je substituovaný alkyl mající od 2 do 6 atomů uhlíku popřípadě substituovaných 1 až 3 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z R²², OR²⁰, NR²⁰R²³;

R5 je zvolen ze skupiny sestávající z vodíku, alkylu, acylu, heterocyklylu, arylu, heteroarylu, aralkylu, každý mající jeden až 20 atomů uhlíku, přičemž alkyl, acyl, heterocyklyl, aryl, heteroaryl, aralkyl jsou volitelně substituovány 1 až 2 substituenty nezávisle zvolenými ze skupiny sestávající z halogenu, arylu, R²², SR²⁰, NR²⁰R²³, NR²⁰COR²¹, NR²⁰CO2R²¹, NR²⁰SO2R²¹, OR²⁰, CN, CO₂R²⁰ a

CONR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci_₂ alkylu;

R²¹ je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci.₃alkylu;

• · • · · ·· ·· • · ♦ · • · · • · · • · · • · · · · ·

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z C].₃ alkylu, arylu, přičemž alkyl, aryl jsou popřípadě substituovány 1 substituentem nezávisle zvolenými z halogenu, alkylu, mono- nebo dialkylamino, CN,

CF₃; a

R²³ je R²¹ nebo H.
19. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

Ři' je zvolen ze skupiny sestávající z aralkylu, pyridylalkylu a substituovaného pyridylalkylu;

R₂ je zvolen ze skupiny sestávající z alkylu, přičemž alkyl je popřípadě substituován 1 až 2 substituenty nezávisle zvoleným ze

00 20 skupiny sestávající z halogenu, R a OR ;

R₄ a R5 jsou každý substituovaný alkyl mající od 2 do 6 atomů uhlíku popřípadě substituovaných 1 substituentem nezávisle zvoleným ze skupiny sestávající z R²², OR²⁰ a NR²⁰R²³;

R²⁰ je člen vybraný ze skupiny sestávající z H, Ci-₂ alkylu;

R^Z1 je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci-₃aíkylu;

R²² je člen vybraný ze skupiny sestávající z Ci_₃ alkylu; a

R²³ je R²¹ nebo H.
20. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je CH₂-aryl nebo CH₂-substituovaný aryl, R₂ je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl, R₄ a R5 jsou každý -CH₂CH₂OH, -CHR'CH₂OH nebo -CH₂CHR'OH, kde R' je vodík nebo alkyl mající od 1 do 6 atomů uhlíku.
21. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde • φ φ φ · φ · φφ φ«

27 φφφφφφφ · φ * · ο / ΦΦΦΦΦΦΦΦ φφ Φ φ φ φφφ ♦ · φ φφφ« φ · φ φ φφ φφφφ φφφ φφ φφ φ· · *·····

Ri' je CH₂-aryl nebo CH₂-substituovaný aryl, R₂ je nižší alkyl, a R₄ =

H, a R₅ je -CH₂CH₂NH₂ , -CHR'CH₂NH₂ , -CH₂CHR'NH₂ , kde R' je vodík nebo alkyl mající od 1 do 6 atomů uhlíku.
22.2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 21, kde R₂ je isopropyl.
23. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je CH₂-aryl nebo CH₂-substituovaný aryl, R₂ je nižší alkyl, R₄ je CH₂CH₂OH, R₅ je -CH₂CH₂NH₂, nebo -CHR'CH₂NH₂ nebo -CH₂CHR'NH₂ , kde R' je vodík nebo alkyl mající od 1 do 6 atomů uhlíku.
24. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 23, kde R₂je isopropyl.
25. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 20, kde R₂je isopropyl.
26. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je zvolen ze skupiny sestávající z arylu, substituovaného arylu, pyridylu, a substituovaného pyridylu, R₂ je zvolen ze skupiny sestávající z nižšího alkylu, substituovaného nižšího alkylu a alkylcykloalkylu, a R₄ a R₅ jsou každý substituovaný nižší alkyl mající od 2 do 6 uhlíkových atomů.
27. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je aryl nebo substituovaný aryl, R₂ je nižší alkyl nebo substituovaný nižší alkyl, R₄ a R5 jsou každý -CH₂CH₂OH, -CHR'CH₂OH nebo -CH₂CHR'OH, kde R' je vodík nebo alkyl mající od 1 do 6 atomů uhlíku.

• ·· · • ·· • ·· • ··· *· ····
28. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 27, kde R₂je isopropyl.
29. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je benzyl substituovaný halogenem, alkoxy, fenylem, pyridylem nebo nitroskupinou, R₂ je isopropyl, R₄ a R₃ jsou každý -CH₂CH₂OH.
30. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri'je benzyl substituovaný halogenem, alkoxy, fenylem, pyridylem nebo nitroskupinou, R₂ je isopropyl, R₄ = H, a R5 je CH₂CH₂NH₂.
31. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je benzyl substituovaný halogenem, alkoxy, Ci_₃alkylem, CF₃, fenylem, pyridylem nebo nitroskupinou, R₂ je isopropyl, R₄ = H a R₅ = CH₂CHR^řNH₂, kde R'je vodík nebo alkyl mající 1-6 uhlíkových atomů.
32. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri' je benzyl substituovaný halogenem, alkoxy, Ci-₃alkylem, CF₃, fenylem, pyridylem nebo nitroskupinou, R₂ je isopropyl, R₄ = H a R5 = CH₂CR'R'NH₂, kde R'je vodík nebo alkyl mající 1-6 uhlíkových atomů.
33. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 1 zvolená ze skupiny sestávající z

2-{(2-hydroxyethyl)[9-(methylethyl)-6-({[4-(trifluormethyl)fenyl]methyl}amino)purin-2-yl] amino} ethan-1-olu;

{((2S)oxolan-2yl)methyl}(6-{ [(4-fluorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)aminu;

[((2R)oxolan-2-yl)methyl](6-{[(4-fluorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)aminu;

(2-aminoethyl)(6-{[3,5-dichlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)aminu;

·· ·· ·♦ · ·♦ ··

QO ·♦·······»· <->7 · · · · · · · « ··· • · ··· · · · ·>··· · · ·9

9 9 9 9 9 9 9 99

99 99 99 9 99 9999 (2-aminoethyl)[6-({[4-chlor-3-(trifluormethyl)fenyl]methyl}amino)-9-(methylethyl)purin-2-yl] aminu;

[-[(6-{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]-

3-methylbutanamidu;

(2-amino-2-methylpropyl)(6-{[(4-chlorfenyl)methyl] amino }-9-(methylethyl )purin-2-yl) aminu;

3-(2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]-6-{[4-chlorfenyl)methyl]amino}- purin-9-yl)butan-2-onu;

2- [(6-{ [(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)aminoJ-

3- methylbutan-l-olu;

4- [({2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}amino)- methyl]benzensulfonamidu;

2-[(2-hydroxyethyl)(6-{[(4-methoxyfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]ethan-l-olu;

2-((2-hydroxyethyl){9-(methylethyl)-6-[(4-fenylfenyl)amino]purin-2yl}amino)ethan-l-olu;

{2-[(2-amino-2-propyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}[(4chlorfenyl)methyl] aminu;

{2-[(2-aminoethyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl}[(4chlorfenyl)methyl] aminu;

{2-[(2-aminopropyl)amino]-9-(methylethyl)purin-6-yl} [(4chlorfenyl)methyl]aminu a

2-[(2-aminoethyl)(6-{[(4-chlorfenyl)methyl]amino}-9-(methylethyl)purin-2-yl)amino]ethan-l-olu.
34. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

Ri' je fenyl substituovaný halogenem, alkoxy, fenylem, pyridylem nebo nitroskupinou, R₂ je isopropyl, R₄ a R₅ jsou každý -CH₂CH₂OH.
35. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde

Ri'je bifenylmethyl, R₂ je isopropyl a R₄ a R₅ jsou každý -CH₂CH₂OH.

• ·
36. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 12, kde Ri'je zvolen ze skupiny sestávající z 3-methylthiofenylu, 4-methyl thiofenylu, 4-fenylbenzylu, 4-methoxybenzylu, 4-bifenylu, 3-methoxy benzylu, 4-(2-thienyl)benzylu, 4-(4-methyl)fenylbenzylu, 4-(4-trifluor methyl)fenylbenzylu, 4-(4-nitrilo)fenylbenzylu, 4-(2-pyridinyl)benzylu, piperonylu, 3-methoxybenzylu, 4-chlorbenzylu a 4-nitrobenzylu, R₂ je isopropyl a R4 a R5 jsou oba CH₂CH₂OH.
37. 2,6,9-Trisubstituovaná purinová sloučenina podle nároku 36, kde Ri'je zvolen ze skupiny sloučenin sestávající z 4-methoxybenzylu,

4-fenylbenzylu, 4-bifenylu, 3-methoxybenzylu, 4-(2-thienyl)benzylu,

4-(4-methyl)fenylbenzylu, 4-(4-trifluormethyl)fenylbenzylu,

4-(4-nitrilo)fenylbenzylu, 4-(2-pyridinyl)benzylu, piperonylu, 3-thiomethoxyfenylu, 4-thiomethoxyfenylu a 4-bromfeňylu.
38. Kationová sůl sloučeniny podle nároku 1.
39. Adiční sůl sloučeniny podle nároku 1 s kyselinou.
40. Způsob inhibice buněčné proliferace u savců zahrnující podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny podle nároku 1 savci.
41. Způsob podle nároku 40, kde terapeuticky účinné množství je v rozmezí od asi 0,001 do asi 100 mg/kg hmotnosti savce.
42. Způsob podle nároku 40, kde sloučenina je podávána savci trpícímu poruchou buněčné proliferace zvolenou ze skupiny sestávající z revmatoidní artritidy, lupenky, diabetes typu I, sklerosy multiplex, rakoviny, restenosy následující po balonové angioplastii nebo aterektomii, restenose následující po chirurgických zákrocích týkajících se vaskulárních modifikací, onemocnění hostitel versus štěp a dny.
43. Způsob podle nároku 42, kde chorobou buněčné proliferace je restenosa.
44. Způsob podle nároku 42, kde chorobou buněčné proliferace je rakovina.
45. Způsob podle nároku 42, kde chorobou buněčné proliferace je polycystické ledvinové onemocnění.
46. Způsob podle nároku 42, kde savcem je člověk.
47. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1 a jeden nebo více farmaceutických excipientů.
48. Antifungální činidlo vhodné pro léčení fungálních infekcí u lidí a zvířat vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 1.
49. Způsob podle nároku 42, kde choroba buněčné proliferace je zvolena ze skupiny sestávající z lymfoidního neoplasmu, rakoviny tračníku, rakoviny prsu, rakoviny vaječníků, rakoviny pankreatu a rakovin spojených s endotelovými buňkami.