CZ20021409A3 - Způsob a zařízení k obohacování a stabilizaci konjugovaných estrogenů z moči klisen - Google Patents
Způsob a zařízení k obohacování a stabilizaci konjugovaných estrogenů z moči klisen Download PDFInfo
- Publication number
- CZ20021409A3 CZ20021409A3 CZ20021409A CZ20021409A CZ20021409A3 CZ 20021409 A3 CZ20021409 A3 CZ 20021409A3 CZ 20021409 A CZ20021409 A CZ 20021409A CZ 20021409 A CZ20021409 A CZ 20021409A CZ 20021409 A3 CZ20021409 A3 CZ 20021409A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cartridge
- urine
- filter
- adsorption
- pmu
- Prior art date
Links
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 title claims description 110
- 229940035811 conjugated estrogen Drugs 0.000 title claims description 90
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 63
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 20
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 title claims description 17
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 title claims description 17
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 96
- 238000003860 storage Methods 0.000 claims description 62
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims description 56
- QTTMOCOWZLSYSV-QWAPEVOJSA-M equilin sodium sulfate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4C3=CCC2=C1 QTTMOCOWZLSYSV-QWAPEVOJSA-M 0.000 claims description 55
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 48
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 47
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 47
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims description 36
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 33
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 26
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 22
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 20
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 20
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 claims description 20
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 19
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 19
- 238000011068 loading method Methods 0.000 claims description 15
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims description 13
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 6
- 239000004576 sand Substances 0.000 claims description 6
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 claims description 5
- 230000006698 induction Effects 0.000 claims description 4
- 230000000274 adsorptive effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000004744 fabric Substances 0.000 claims description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 claims description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 claims description 3
- 238000007667 floating Methods 0.000 claims description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000035939 shock Effects 0.000 claims 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 claims 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 abstract description 28
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- 206010046555 Urinary retention Diseases 0.000 abstract description 2
- DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N Estrone Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 34
- 229960003399 estrone Drugs 0.000 description 34
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 34
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 32
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 26
- WKRLQDKEXYKHJB-UHFFFAOYSA-N Equilin Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3=CCC2=C1 WKRLQDKEXYKHJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- 229920013685 Estron Polymers 0.000 description 24
- WKRLQDKEXYKHJB-HFTRVMKXSA-N equilin Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4C3=CCC2=C1 WKRLQDKEXYKHJB-HFTRVMKXSA-N 0.000 description 24
- HVDGDHBAMCBBLR-UHFFFAOYSA-N enterolactone Chemical compound OC1=CC=CC(CC2C(C(=O)OC2)CC=2C=C(O)C=CC=2)=C1 HVDGDHBAMCBBLR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 18
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 17
- 239000000463 material Substances 0.000 description 15
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 11
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 11
- DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N (+)-estrone Natural products OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 DNXHEGUUPJUMQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 2-methylphenol;3-methylphenol;4-methylphenol Chemical compound CC1=CC=C(O)C=C1.CC1=CC=CC(O)=C1.CC1=CC=CC=C1O QTWJRLJHJPIABL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930003836 cresol Natural products 0.000 description 10
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 10
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 9
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 9
- 238000013112 stability test Methods 0.000 description 9
- 150000001896 cresols Chemical class 0.000 description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 8
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 8
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 7
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 7
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 7
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 7
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- -1 germicides Substances 0.000 description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 6
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 5
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 5
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 5
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 5
- 238000011010 flushing procedure Methods 0.000 description 4
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 4
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000015728 Mucins Human genes 0.000 description 3
- 108010063954 Mucins Proteins 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 3
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 3
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 3
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 3
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 3
- MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 1,2-Divinylbenzene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1C=C MYRTYDVEIRVNKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000543381 Cliftonia monophylla Species 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 229920000715 Mucilage Polymers 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- 238000010936 aqueous wash Methods 0.000 description 2
- 239000003899 bactericide agent Substances 0.000 description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 2
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 2
- 239000002826 coolant Substances 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N estrone 3-sulfate Chemical compound OS(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-CBZIJGRNSA-N 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000002070 germicidal effect Effects 0.000 description 2
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N phenol group Chemical group C1(=CC=CC=C1)O ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 2
- 238000005057 refrigeration Methods 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M sodium bromide Chemical compound [Na+].[Br-] JHJLBTNAGRQEKS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000010902 straw Substances 0.000 description 2
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- JKKFKPJIXZFSSB-UHFFFAOYSA-N 1,3,5(10)-estratrien-17-one 3-sulfate Natural products OS(=O)(=O)OC1=CC=C2C3CCC(C)(C(CC4)=O)C4C3CCC2=C1 JKKFKPJIXZFSSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003439 Artificial menopause Diseases 0.000 description 1
- 101150064205 ESR1 gene Proteins 0.000 description 1
- HVDGDHBAMCBBLR-PBHICJAKSA-N Enterolactone Chemical compound OC1=CC=CC(C[C@H]2[C@@H](C(=O)OC2)CC=2C=C(O)C=CC=2)=C1 HVDGDHBAMCBBLR-PBHICJAKSA-N 0.000 description 1
- OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N Ethane Chemical compound CC OTMSDBZUPAUEDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N [6-(4-acetyloxy-5,9a-dimethyl-2,7-dioxo-4,5a,6,9-tetrahydro-3h-pyrano[3,4-b]oxepin-5-yl)-5-formyloxy-3-(furan-3-yl)-3a-methyl-7-methylidene-1a,2,3,4,5,6-hexahydroindeno[1,7a-b]oxiren-4-yl] 2-hydroxy-3-methylpentanoate Chemical compound CC12C(OC(=O)C(O)C(C)CC)C(OC=O)C(C3(C)C(CC(=O)OC4(C)COC(=O)CC43)OC(C)=O)C(=C)C32OC3CC1C=1C=COC=1 OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N acrylic acid group Chemical group C(C=C)(=O)O NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 description 1
- 229920003232 aliphatic polyester Polymers 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- SOIFLUNRINLCBN-UHFFFAOYSA-N ammonium thiocyanate Chemical compound [NH4+].[S-]C#N SOIFLUNRINLCBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000507 anthelmentic effect Effects 0.000 description 1
- 229940124339 anthelmintic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000921 anthelmintic agent Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 239000013068 control sample Substances 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- VUCAHVBMSFIGAI-ZFINNJDLSA-M estrone sodium sulfate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VUCAHVBMSFIGAI-ZFINNJDLSA-M 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000035784 germination Effects 0.000 description 1
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000012432 intermediate storage Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 238000007562 laser obscuration time method Methods 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 229940051875 mucins Drugs 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N octadecylsilane Chemical group CCCCCCCCCCCCCCCCCC[SiH3] YTJSFYQNRXLOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009304 pastoral farming Methods 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920005990 polystyrene resin Polymers 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 239000003507 refrigerant Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 238000004513 sizing Methods 0.000 description 1
- 230000035943 smell Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 238000007711 solidification Methods 0.000 description 1
- 230000008023 solidification Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000000638 solvent extraction Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000005496 tempering Methods 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N triammonium citrate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O YWYZEGXAUVWDED-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000003708 urethra Anatomy 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J1/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen, not substituted in position 17 beta by a carbon atom, e.g. estrane, androstane
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J75/00—Processes for the preparation of steroids in general
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Treatment Of Sludge (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Způsob a zařízení k obohacování a stabilizací konjugovaných estrogenů z moči klisen
Oblast techniky
Předložený vynález se týká způsobu a zařízení k obohacování a stabilizaci konjugovaných estrogenů z moči březích klisen na pevných nosičích, aby se získal vhodný výchozí materiál pro výrobu farmaceutik, která obsahují přirozenou směs těchto konjugovaných estrogenů jako účinnou složku.
Dosavadní stav techniky
Estrogeny jsou používány v lékařství k hormonální substituční terapii. Zejména jsou používány směsi estrogenů k léčbě a prevenci potíží vyskytujících se u žen v době přechodu po přirozené nebo umělé menopauze. Přitom se přirozené směsi konjugovaných estrogenů, jež existují v moči březích klisen, ukázaly jako obzvlášť účinné a dobře snášenlivé.
Obsah pevných látek rozpuštěný v moči březích klisen ( = pregnant mares' urine, v následujícím textu zkráceno jako „PMU“) může přirozeně kolísat v Širokých rozmezích a obecně leží v rozsahu 40 - 90 g sušiny na litr. Vedle močoviny a jiných běžných látek obsažených v moči jsou v obsahu pevných látek PMU obsaženy fenolické složky v množstvích 2-5 hmotn.%. %, vztaženo na sušinu. Mezi těmito fenolickými složkami se nacházejí krezoly a jako HPMF známý dihydro-3,4>bis[(3hydroxyfeny l)methyl]-2(3H)-furanon. Tyto látky se mohou nacházet ve volné n^bo konjugované formě. V PMU je obsažena přirozená směs estrogenů, jež existuje dalekosáhle “v k-onj ugované formě> např. jako sodná sůl poloesteru kyseliny sírové (dále zkraiCOVáno jako „sulfátová sůl“). Obsah konjugovaných estrogenů (= conjugated estrogen, dále zkracováno jak'J „CE“) může být vypočten jako sulfátová sůl e.strogenu a vytaženo na sušinu činí mezi 0,3 a 1 %hmotn.
K, přímému zpracovávání a získávání konjugovaných estrogenů obsažených v PMU jsou za dnešního stavu techniky popsány rů.zné způsoby postupů. Obvykle jsou extrakty obsahující konjugované estrogeny získávány z PMU extrakcí polárním, s vodou nemísitelným nebo jen málo mísitelným organickým rozpiouštědlem, jako např. ethylesterem octové kyseliny, n-butan olem nebo cyklohexanolem. Při takových kapalino-kapalinových extrakcích se však vyskytuje velmi mnoho problémů, jako silná tvorba pěny, tvorba sedimentů a emulzí a špatné dělení fází. K zamezení těchto nevýhod byla proto k současnému stavu techniky navržena řada způsobů extrakce pevných fází.
Pro úpravu malýcli množství močových a plazmových kapalin pro analytick/e určení estrogenů pomocí plynové chromatografie popisuji' Heikkinen et al. (Clin. Chem. 27/7, (1 98 1), 1 1 86- 1 1 89) a Sha.ckleton et al. (Clinica Chimica Acta 1 07( 1980) 23 1 -243) extrak;ci pevné fáze z estrogenů pomocí příslušné patrony či pouzdm náboje (kartuše) se silanizovaným křemičitým gelem obsahujíc ím oktadecylsilanové zbytky (SepPakR C18-cartridge, výrobcv Waters Ass. Inc. Milford, MA, USA). Přitom jsou z patro ny eluovány methanolem dané estrogeny.
• 0 0 0 ·· 0 0 0 0 ·· ··
0 0 0 · · · · * · ·
0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 ······ 0 0 0 0 0
0000 00 00 0W0 0· 0000
Η. L. Bradlow roku 1986 (viz Steroids 1 1( 1968), 265-272) navrhl, aby se k extrakci konjugovaných estrogenů z moči použil Amberlite XAD-2R, neutrální nepolární hydrofobní polystyrénová pryskyřice firmy Rohm a Haas. Uvedená adsorpční kapacita je malá. Podle Bradlowa se eventuálně zředěná moč vede nízkou průtokovou rychlostí sloupcem obsahujícím danou pryskyřici. Estrogeny jsou eluovány methanolem nebo ethanolem.
Novější patentové přihlášky popisují způsoby k získávání extraktu obsahujícího přirozené směsi konjugovaných estrogenů z moči klisen extrakcí pevné fáze směsi konjugovaných estrogenů z moči březích klisen např. RP-křemičitým gelem (WO 98/08525) nebo neiontových semipolárních polymerních adsorpčních pryskyřic (WO 98/08525).
Vedle výše popsané optimalizace přímé, úplné úpravy moči březích klisen (PMU) k získávání přirozených směsí konjugovaných estrogenů (CE) existují rovněž kroky předložené v dané úpravě, jako např. zaručení estrogen šetřícího skladování a manipulace s nashromážděnou močí na daném místě, jež mají zvláštní význam pro výtěžek a kvalitu surového materiálu obsahujícího estrogen a z toho se izolující přirozené směsi konjugovaných estrogenů. V této souvislosti je nutno usilovat též o optimalizaci přepravy nashromážděného, estrogeny obsahujícího surového materiálu z místa nashromáždění na místo vlastní úpravy a izolace konjugovaných estrogenů.
Úplná úprava PMU např. extrakcí pevné fáze vyžaduje chemicko-farmaceuticky kvalifikovaný odborný personál, aby • · ·« • · · • · ·· ·· • · · · • · > · ··· ι mohly být za dobře řiditelných podmínek dodrženy vysoké požadavky na čistotu a kvalitu látky nebo směsi látek používané jako farmaceutické účinné látky. Shromažďování či jímání moči (PMU) však probíhá obvykle v normálním životním prostředí březích klisen, tzn. v hřebčincích, selském okolním či životním prostředí a často rovněž na odlehlejších místech. Zpravidla zde jde jen o jednoduchou infrastrukturu a shromažďování moči (PMU) a manipulace s ní probíhá obvykle s j ednoduchým, zaškoleným personálem, na nějž v souvislosti s manipulací se shromážděnou močí nemohou být kladeny žádné příliš vysoké požadavky.
Konjugované estrogeny (CE), v daném složení vylučovány ve formě moči březích klisen, jsou ale komplexní směsí, jež obsahuje zejména estronsulfát sodný, equilinsulfát sodný, jakož i další CE. Pro izolaci CE je velmi důležité, aby PMU byl zpracován co možná nejrychleji v čerstvém stavu. Při delším uchovávání se začíná moč rychle rozkládat. Moč se zbarvuje do tmava, páchne po amoniaku a obsah CE velmi rychle klesá. Rychlost rozkladu závisí na skladovacích podmínkách a kritériích čistoty. Shromážděná moč (PMU), přičemž se jedná o velká množství kapaliny, musí být proto denně přepravována z místa jímání na centrální místo zpracovávání, aby byla zaručena co nejrychlejší úprava.
Existuje proto naléhavá potřeba vhodných postupů a zařízení k co možná nej šetrněj Šímu a jednoduše manipulovatelnému obohacování a stabilizaci konjugovaných estrogenů (CE), jež jsou obsaženy v moči březích klisen (CE), přímo na místě shromažďování moči (PMU), jakož i k co možná • · nejúčinnější přepravě zpracovávání a izolace. Podstata vynálezu z místa
0000 00 shromažďování
0000 00 *0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
0 0 0 0
000 00 0000 na místo
Úkolem tohoto vynálezu je tak, při zamezení výše popsaným nevýhodám, vyvinout technický způsob vhodný pro získávání přirozené směsi konj ugovaných estrogenů a vhodné zařízení pro obohacování a stabilizaci konjugovaných estrogenů (CE) ze shromážděné moči březích klisen (PMU). Zejména mají daný způsob a zařízení umožnit produkt šetřící, jednoduše manipulovatelné obohacování a stabilizaci konjugovaných estrogenů z PMU na místě jímání dané moči stejně jako co nejčinnější přepravu takto připraveného, estrogeny obsahujícího surového materiálu z místa shromažďování na místo vlastního zpracování a izolace přirozené směsi konjugovaných estrogenů.
Nyní bylo překvapivě zjištěno, že konjugované estrogeny (CE) jsou vázány velmi stabilně na pevných nosičích ( = adsorbentech, adsorpčních činidlech) a lze je delší dobu uchovávat bez nějakých známek rozkladu.
Tento vynález se proto týká způsobu praktického, decentralizovaného, tzn. zejména blízko místa ustájení a/nebo místa pastvišť, obohacování a stabilizace směsí konjugovaných estrogenů (CE) z moči březích klisen (PMU), jenž se vyznačuje tím, že v moči březích klisen (PMU) obsažená přirozená směs konjugovaných estrogenů (CE) na pevném nosiči je obohacována a stabilizována, když(přičemž)
- předem dané maximální celkové množství nashromážděné, event. předem sítované močové tekutiny se ze zásobní • · ·· • to nádoby kontinuálně nebo • to · to · · • · • · · · ··
množstvích čerpá předem danou rychlostí proudění pomocí svisle uspořádané kartuše (patrony) a odtékající močová kapalina se vyřazuje, přičemž
- kartuše (patrona) je plněna (stále) kapalinou obklopeným adsorbentem, vhodným k adsorpci předem definovaného množství směsi konjugovaných estrogenů (CE), a přičemž
- jako kontrola konečného bodu (titrační kontrola) pro nakládku adsorbentu je odsouhlaseno předem dané, maximální celkové množství kartuší čerpané močové kapaliny na maximální nakládací (plnicí) kapacitu daného adsorbentu pro konjugované estrogeny (CE) obsažené v močové kapalině.
Pojem „praktický“ přitom znamená, že daný způsob je přizpůsoben podmínkám jímací či shromažďo vací praxe „vor Ort“, tedy že je jednoduchý a bezpečně manipulovatelný zaškoleným personálem; tzn. není komplikovaný a je proveditelný a dalekosáhlým vyloučením možných chybných zásahů.
Pojem „decentralizovaný“ zde znamená, že daný postup může být prováděn na jakémkoliv místě zařízení či provozu ke shromažďování moči bez speciálních chemicko-farmaceutických zařízení, tzn. zejména v blízkosti ustájení a/nebo pastvin. Jako „kartuše“ se přitom zde rozumí jakýkoliv druh uzavřeného sloupce s uzavíratelným přítokem a odtokem, jakož i připojovacími prvky, např. rychlospojkami. Pojem „kartuše“ zahrnuje tak v rámci tohoto vynálezu také sloupce, které se používají obvykle v laboratoři, techniku (technické odborné • · 4 4 · 4 ·
• 4 • « • 4 44 škole), event. chemickém provozu, a jež j sou* výBave’ňy*,‘j ak Vyto výše popsáno, pro použití podle vynálezu.
Podle způsobu podle tohoto vynálezu se přednostně připraví surový, event. výchozí materiál sloužící pro výrobu farmaceutik, která obsahují přirozenou směs konjugovaných estrogenů z PMU jako účinnou složku, a v němž může být prakticky úplně obsah přirozené směsi estrogenů (PMU) obohacován na adsorbentu (nosiči) a po delší dobu za normálních podmínek daného shro maž ď ovací ho místa stabilizován. Po úplném (maximálním) naložení či naplnění může být příslušná patrona nebo kartuše snadno nahrazena kartuší (patronou) bez adsorbentu. Kartuše s naloženým adsorbentem mohou být ještě dlouhou dobu uchovávány přímo na samotném místě při okolní teplotě nebo, je-li to žádoucí, také za chlazení až asi do 4 °C a za určitých předpokladů hluboce ochlazeny až do -20 °C, např. dokud existuje určitý počet nabitých (naložených) sloupců (kartuší) pro účelnou shromažďovací přepravu až k centrálnímu místu zpracování. Přeprava může probíhat za okolních teplot nebo, jak bylo již popsáno pro dané uchovávání (skladování), za chlazení, resp. hlubokého chlazení. Vlastní zpracování a izolace přirozené směsi konjugovaných estrogenů (CE)může pak probíhat v centrálním místě zpracování způsobem obvyklým pro aktuální adsorbens, např. promýváním a eluci CE z adsorbentu a další zpracování eluátu obvyklým způsobem. Např. eluát může být pro něho známým způsobem dále zúžen, aby byl získán dalekosáhle nebo úplně organického rozpouštědla zbavený koncentrát vhodný k dalšímu galenickému zpracování. V žádoucím případě může být jinými vhodnými sušicími postupy, jako např. sušením rozprašováním, sušením ve fluidní vrstvě, sušením vymrazováním (sublimací ze zmrazeného stavu) nebo vakuovým • Φ φφ φφ ΦΦΦΦ φφ φφ
ΦΦΦΦ φφφ ΦΦΦΦ .·ϊ :. : : ···.. : : ,· φφφ φφ φ φφφ sušením, také vyrobena směs pevných láteV z*Bavená*’élučnítíó*‘ činidla. Jak eluát obsahující směs estrogenů, tak z něho vyrobený koncentrát nebo rozprašováním vysušený pevný produkt mohou být pro ně známým způsobem zpracovány na pevné nebo kapalné galenické přípravky, jako např. tablety, dražé, tobolky nebo emulze.
Vedle daného způsobu podle vynálezu se týká rovněž (v tomto způsobu použitelného) zařízení, jež lze použít v tomto způsobu, které je přizpůsobeno jednoduchým podmínkám na místě použití účelným či vhodným způsobem a zaručuje bezpečné provádění daného způsobu šetřící produkt. Toto zařízení podle vynálezu se hodí k praktickému, decentralizovanému, tzn. zejména v blízkosti míst ustájení nebo pastvin, obohacování a stabilizaci. Dále budou obecně vysvětleny ještě některé další parametry důležité pro provedení daného způsobu. S ohledem na speciální konstrukční, event. přístrojové formy příslušných zařízení, jež se hodí k provádění způsobu podle vynálezu, se dále odkazuje na podrobný popis zařízení podle vynálezu, k němuž je třeba navíc přihlížet vedle následujícího obecného popisu provádění daného způsobu.
Pro tento způsob podle vynálezu může být použit nashromážděný PMU jako takový a denně nashromážděné množství PMU se přitom nejprve uchovává v zásobní nádrži.
V daném případě se doporučuje předchozí oddělení hrubých mechanických nečistot, jako slámy, sena apod., např. pomocí jednoduchého hrubozrnného síta při plnění zásobní nádrže čerstvě nashromážděným PMU. V žádoucím případě mohou být za účelem zmenšení počtu zárodků či klíčků a virů k moči ·· ·· ·· ···· ·· ·· • · · · · · · ♦ · · * ········ · · 9
999 99 9 999
9999 99 99 999 99 9999 nashromážděné v zásobní nádrži přidávány konzervační prostředky, germicidy, baktericidy a/nebo antelmintika.
Ze zásobní nádrže se PMU čerpá pravidelně v závislosti na shromážděném množství moči, např. jednou až dvakrát denně, pomocí příslušného čerpadla, např. pomocí hadicového čerpadla, ke kartuši - patroně - obsahující dané adsorpční činidlo. Tato kartuše vykazuje obvykle rozměry a hmotnosti, jež dovolují manuální práci(zacházení) normálními silnými osobami.
S ohledem na daný způsob se doporučuje vnitřní rozměry kartuše pro vzrůstající lože s adsorbentem dimenzovat tak, aby kartuše mohla zachytit asi 30 až 50 1 absorpčního činidla a PMU od vstupu až do výstupu musel urazit dráhu od 80 až do 120 cm, přednostně zpět. Podle vynálezu probíhá adsorpce konjugovaných estrogenů na adsorpční činidlo kontaktem PMU s adsorbentem, přičemž močová tekutina se zavede(uvede) do svisle uspořádané kartuše obsahující dané adsorpční činidlo, podle volby např. z horní nebo spodní strany, a v ní je během průtoku po dobu dostatečnou k adsorpci obsahu estrogenů udržována v kontaktu s daným adsorpčním činidlem, dokud zbylá moč konečně neopustí na opačné straně kartuše, PMU se přitom takto, např. z horní nebo spodní strany, zavádí do kartuše, aby se zaručilo, že adsorpční činidlo je stále obklopeno kapalinou, aby se pokud možno vyloučil nežádoucí chod nasucho kartuše.
Doba kontaktu, resp. rychlost proudění, je odsouhlasena či sladěna s aktuálním adsorpčním činidlem a měla by u adsorpčních činidel (= rychlosti nakládání či plnění) vhodných pro daný způsob ležet v rozsahu od 3 do 10 ložných objemů adsorbéru/h, přednostně 4 až 6 ložných objemů adsorbéru.
44 4« 4444 44 ··
4··· 4·· 4444
44444444 .4 4 4
444444 44444
4· *4 4 444
Příkladně vhodné nakládací (plnicí) rychlostí* j sou napr. 4,5 až 5,5 ložného objemu adsorbéru(adsorbentu)/h.
Speciální doby kontaktu a rychlosti proudění jsou pro zvlášť upřednostňovaná adsorpční činidla uvedena dále dole u popisu těchto adsorpčních činidel.
Maximální celkové množství močové kapaliny, jež může být vedeno přes kartuši, závisí na adsorpční kapacitě daného adsorpčního činidla a mělo by u adsorpčních činidel vhodných pro daný způsob ležet v rozsahu od 20 do 60 ložných objemů adsorbéru, raději od 30 do 40 ložných objemů adsorbéru. Obvykle by proto (s)mělo maximální celkové množství močové kapaliny, jež může být k nakládání (plnění) vedeno přes kartuši, ležet v rozsahu od 900 do 2.000 1. Aktuální konečná hodnota průtokového množství je obsluhujícímu personálu na shro maž ď ovacím místě pro aktuální typ kartu še pevně dána předem. K měření množství močové tekutiny čerpané přes kartuši může být proto použit jednoduchý průtokoměr, přednostně např. průtokový měřič. Po dosažení maximální nakládky (vsázky) se může eventuálně přepnout na paralelní druhý kartuši a adsorpční postup pokračuje přes tuto druhou kartuši.
Je-li pro danou kartuši dosaženo předem dané konečné hodnoty, pak se kartuše s adsorbovanými CE v žádoucím případě ještě promyje např. vodou a/nebo jiným vhodným vodným promývacím roztokem předtím, než se přeruší přívod kapaliny. Potom se odtok a přítok kapaliny uzavřou a pak se daná spojka, např. jednoduchá rychlo spoj ka, přívodu kapaliny uvolní až ke kartuši. Naplněná kartuše se může potom odejmout, uloží se na vhodném
4
4 4 4
4 ·
4 4
4* 44 • 4 4 4
4 4
místě až do přepravy k centrálnímu místu zpracování a čerstvá, nenaložená kartuši se připojí k přívodu kapaliny.
Kartuše se může po naložení (vsazení) (s) PMU, např. před výměnou kartuše plně naložené PMU nebo rovněž před dosažením celkové nakládací kapacity po(dle) libovolných jednotlivých dílčích nakládacích krocích, propláchnout v žádoucím případě ještě vodou a/nebo jiným vhodným vodným roztokem, např. zásaditým vodným roztokem, jako je zejména např. zředěný vodný sodný louh (např. vodný 0,5-2 N NaOH), aby se z kartuše odstranila zbylá močová kapalina. Množství promývacího roztoku není kriticky důležité a může být přednostně voleno tak, aby dostačovalo k vytěsnění zbytkové močoviny z kartuše, aniž by se přitom současně vymývala pozoruhodná množství konjugovaných estrogenů. Jako účelné se např. ukazuje použití 1-3, přednostně asi 2 ložné objemy promývací kapaliny na ložný objem adsorpčního činidla. Přitom se promývací voda nebo promývací roztok účelněji vede přes kartuši obsahující adsorbens průtokovou rychlostí od 3 do 10, raději 5 až 7 objemových dílů promývací vody na 1 objemový díl adsorpčního činidla/hodinu. Adsorpční činidlo naložené či naplněné v kartuši CE může sloužit jako surovina, resp. výchozí materiál, pro izolaci čistého CE pro výrobu léčiv či léčivých prostředků obsahujících přirozenou směs konjugovaných estrogenů.
V jedné variantě daného vynálezu může být kartuše po promytí vodou a/nebo promývacím roztokem k další stabilizaci adsorbovaného CE propláchnuta nakonec ještě konzervujícím roztokem, vodným roztokem s nastaveným pH a/nebo vodným roztokem soli předtím, než je kartuše uvolněna z daného zařízení a nahrazena čerstvou kartuši. K zabránění vzklíčení sloupců, • · * « · Μ 9 · * W » r · « · ··* 9 * « ««·«·· ··**· *** 9 9 9 9 9 9 9 9 9
9999 99 99 999 99 9999 zvláště při skladování nebo přepravě bez chlazení by mohly být použity běžné konzervační prostředky a např. také germicidy, baktericidy a/nebo antelmintika. Nastavení pH promývací vody se bude řídit podle aktuálně použitého adsorpčního činidla. Jako solné roztoky mohou být používány různě koncentrované vodné roztoky anorganických solí, jež jsou uvedeny pro příklady v tabulce III.1. Použití solných roztoků se doporučuje zvláště také tam, kdy mají být Kartuše naložené CE uchovávány v chlazeném stavu nebo zejména v hluboce chlazeném stavu. Upřednostněné solné roztoky jsou roztoky kuchyňské soli s koncentracemi solí zhruba od 10 do 35 % hmotn., přednostně od 25 do 33 % hmotn.
V upřednostněném ztělesněním daného způsobu podle vynálezu se shromážděná moč dříve, než se načerpá ze zásobní nádrže ke kartuši, zbaví zvláště slizových látek a jemnozrnných pevných látek. Je proto účelné, aby se močová tekutina ze zásobní nádrže před čerpáním močové kapaliny pomocí Kartuše vedla především nejprve přes jeden nebo více předběžných filtrů. Tak může být PMU veden příkladně přes alespoň jedno ze známých dělicích zařízení, např. filtračním zařízením majícím nejméně jeden hloubkový filtr nebo náplavový filtr. Jako dělicí zařízení může sloužit např. hloubkový filtr s psíkovým ložem nebo obchodně běžná filtrační Kartuše nebo mohou být použity obchodně běžný náplavový filtr či deskový filtr, svíčkový filtr, filtrační plachetka nebo rovněž filtrační trubky. Filtry mohou být nasazovány jednotlivě nebo ve větším počtu i v libovolné kombinaci mezi sebou navzájem, např. v sérii za sebou navzájem a/nebo paralelně zapojeny. V žádoucím případě mohou být před filtrací přidávány k močové kapalině (PMU) ještě filtrační pomocné prostředky. Vhodnými filtračními pomocnými ···· ·· ··
9 9 9 9 9 9 9 9 9
9 9 · 9 9 9 9 · 4 · prostředky jsou např. takové, jež váží uhličitan* váp*enaťy áYnebó* mucin a tím zlepšují filtraci moči. Eventuálně může být za filtrem zařazen ještě odlučovač částic, např. v případě pískového lože jako filtru dodatečně zařazený pískový odlučovač.
Odborníkovi jsou zásady či způsob provádění filtrace běžně známy. Se zřetelem k úkolu řešenému tímto vynálezem přicházejí proto v úvahu běžné zásady čiřící filtrace pro použití podle tohoto vynálezu. Čiřící filtrace je zaměřena na čištění kapalné fáze tak, aby čistota filtrátu byla podstatnou vyhodnocovací veličinou pro dosažení cílu daného způsobu. Dělicí způsob je realizován zásadně spolupůsobením mezi filtračním prostředkem a danou suspenzí. Toho je nutno dbát jak při výběru filtračního prostředku, modelování daného způsobu, tak při postupovětechnickém dimenzování filtračních aparátů. Ve většině případů ovlivňuje vyloučená pevná látka průběh způsobu rozhodujícím způsobem. Tak přebírá při dostatečném podílu pevné látky a při její schopnosti tvorby můstků (částice se vyztužují působením filtračního prostředku, aniž by se ucpávaly) vznikající a průběžně rostoucí filtrační koláč funkci filtračního prostředku. V tomto případě náplavové filtrace, filtrace koláče, určuje struktura filtračního koláče průběh příslušného postupu, zatímco vlastní filtrační prostředek po počáteční fázi má již jen podpůrnou funkci. Místo odlučování pevných látek je dalším podstatným znakem pro rozlišování filtračních postupů. U povrchové filtrace probíhá odlučování pevných látek na povrchu filtračního prostředku pomocí síta, tzn. na základě vztahů veličin mezi částicemi pevných látek a póry filtračního prostředku. Naproti tomu při hloubkové filtraci částice pevných látek vnikají do filtračního prostředku a usazují se v jeho vnitřku.
• · • · · · ♦ ti • · • · · · • ti titi • titi ti • ti ti • tititi titi · ti ··· • ti · • · titititi
Adsorpčními látkami použitelnými v kartuši mohou být všechny anorganické nebo organické adsorpční látky, jež vykazují dostatečnou adsorpční kapacitu pro přirozenou směs konjugováných estrogenů obsaženou v PMU. Jako adsorpční činidla pro daný způsob jsou proto vhodné polymerní adsorpční pryskyřice, křemičitý gel, RP-křemičitý gel nebo přednostně semipolární polymerní adsorpční pryskyřice pro použití v dané kartuši.
Hydrofobizovanými křemičitými gely použitelnými jako adsorpční činidlo jsou např. známé křemičité gely s vratnými fázemi (= s reverzními fázemi, zkráceno „RP-křemičité gely“), což jsou chemicky modifikované křemičité gely, jež nesou hydrofobní funkční skupiny, resp. ligandy. Tak se hodí např. silanizované RP-křemičité gely, jež obsahují jako hydrofobní funkční skupiny η-oktadecyldimethylsilyloxy-, n-oktyldimethylsilyloxy- nebo dimethylhydroxysilyloxyskupiny. Vhodné jsou např. silanizované křemičité gely se středními velikostmi zrn od 15 do 500 pm. Jako zvlášť účelný se ukázal křemičitý gel obsahující dimethylsilyloxyskupiny se střední velikostí zrn vrozsahu 0,05 až 0,3 mm, např. „Kieselgel 60/Dimethylsilanderivat“ firmy Merck. Ve vhodnějším případě může být močová tekutina vedena kartuši obsahující křemičitý gel takovou průtokovou rychlostí, aby doba kontaktu postačovala k adsorpci obsahu estrogenů. Vhodné jsou např. průtokové rychlosti, jež odpovídají průtoku 5 až 20 obj. dílů PMU na 1 obj. díl křemičitého gelu/hodinu. Adsorpce se provádí přednostně při teplotě místnosti. Průtoková rychlost močové kapaliny reaktorem může být účelně řízena pracemi při malém přetlaku (při regulaci výkonu čerpadla). Množství použitého ·· ·· ·· ··· · ·· ·· ···· · · · · * · · ♦* i ϊ · i ϊ *·*· · ί ϊ ·* hydrofobizovaného křemičitého gelu může Byf ’měneno*’*podre druhu použitého křemičitého gelu a množství obsahu pevných látek v nashromážděné močové kapalině. Při použití předfiltrovaného, tzn. slizu a pevných látek zbaveného PMU může být plněn jeden objemový díl hydrofobizovaného křemičitého gelu až s 80 objemovými díly předběžně upraveného PMU, aniž by byla dokazatelná viditelná množství estrogenů v odtékající močové tekutině.
Semipolárními polymerními adsorpčními pryskyřicemi používanými v kartuši jako adsorpční činidlo jsou přednostně porézní organické neiontové polymery, které na rozdíl od nepolárních hydrofobních polymerních adsorpčních pryskyřic mají střední polaritu (= např. s dipólmomentem aktivního povrchu pryskyřice v rozsahu 1,0 až 3,0, zejména 1,5 až 2,0 Debye) a trochu hydrofilněj ší strukturu, např. polyesterové pryskyřice karboxylových kyselin. Vhodně jsou nasazovány makroporézní semipolární pryskyřice s přednostně makroretikulární strukturou (s póry velkého průřezu) a s průměrnými průměry póry v rozsahu 50 až 150, přednostně 7 0 až 100, Angstrómů a specifickým povrchem v rozsahu 300 až 900, přednostně 400 až 500, m2/g. Jako zvlášť vhodné se ukazují makroporézní příčně zesíťované alifatické polyesterové pryskyřice karboxylových kyselin, zejména příčně zesíťované polyakrylesterové pryskyřice, jako např. Amberlite XAD-7R firmy Rohm und Haas. Ve vhodnějším případě může být močová kapalina vedena kartuši, obsahující adsorpční pryskyřici, takovou průtokovou rychlostí, že doba kontaktu postačuje k adsorpci daného obsahu estrogenů. Vhodné jsou např. průtokové rychlosti, které odpovídají průtoku 3 až 10, přednostně 5 až 7, obj. dílům PMU na 1 obj. díl adsorpční •· ·· ·· ··· *· ·· • · · · · · · · · · · ·· · · · ··· · · *1 · · · ·· · · · · ···· ·· ·· ··· ·· ···· pryskyřice/hodinu. Adsorpce se přednostně provádí při teplotě místnosti. Průtoková rychlost močové kapaliny reaktorem může být účelně řízena pracemi při malém přetlaku (regulovaným výkonem čerpadla). Množství použité semipolární adsorpční pryskyřice může být měněno podle druhu použité adsorpční pryskyřice a množství obsahu pevných látek v nashromážděné močové kapalině. Při použití PMU může být např. plněn jeden objemový díl adsorpční pryskyřice až s 80 objemovými díly předběžně upraveného PMU, aniž by byla dokazatelná viditelná množství estrogenů v odtékající močové tekutině.
Vedle přednostně uvedených adsorpčních činidel mohou být používány také jiné adsorpční pryskyřice nebo typy křemičitých gelů. Jako adsorpční pryskyřice se přitom hodí jak nepolární, semipolární, tak polární adsorpční pryskyřice. Množství moči, jež může být načerpáno přes adsorbér, je třeba přitom určit předem podle aktuální kapacity adsorbéru. Příklady použitelných adsorpčních pryskyřic jsou obchodně běžné typy jako polymerní amberlitové adsorbenty se základními styroldivinylbenzenovými kostrami (např. typy XAD-1180, XAD-2, XAD-4, XAD-16), s akrylesterovými základními osnovami (např. XAD-7) nebo takové typy, jež mají vysoce polární základní kostry obsahující dusík a kyslík (např. XAD-12). Jinými adsorpčními pryskyřicemi jsou dowexové pryskyřice (kopolymery styrenu a divinylbenzenu), jako např. Dowex 112, Dowex Optipore, Dowex Optipore V 493; Lewatite (zesíťované polystyreny), např. Lewatit OC 1064, Lewatit OC 1066 nebo Lewatit OC 1163, polyaminanexové pryskyřice, např. dowexové pryskyřice. Výhodnými adsorpčními pryskyřicemi jsou zejména XAD-7, XAD-16 (typ HP), XAD 118 a Dowex Optipore, v přednostním • · •to toto·· ·· ·· • · : · i ϊ .· ···· ·· ·· ··· ·· ··· případě jako Dowex Optipore V 493, stejně jako Lewatite OC 1064, OC 1066 a OC 1163.
Vedle výše popsaného způsobu podle vynálezu se týká vynález rovněž zařízení použitelného v tomto způsobu, jež je přizpůsobeno jednoduchým podmínkám na místě nasazení vhodným způsobem a zaručuje bezpečné, produkt šetřící provádění daného způsobu.
Zařízení podle vynálezu je charakterizováno svou způsobilostí k praktickému, decentralizovanému, tzn. k místu pastvišť a ustájení blízkému, obohacování a stabilizaci směsí konjugovaných estrogenů (CE) obsažených v moči březích klisen (PMU) na pevném nosiči (= adsorbens), přičemž toto zařízení zahrnuj e:
- svisle uspořádanou kartuši, obklopené (stále) příslušnou kapalinou, jež je naplněna adsorpčním činidlem vhodným k adsorpci předem definovaného množství směsi konjugovaných estrogenů (CE) obsažených v močové tekutině březích klisen, a přičemž daná Kartuše vykazuje buď a) na dolní straně umístěnou vpust (přívod) kapaliny a na horní straně umístěnou výpust (vývod) kapaliny nebo b) na horní straně umístěnou vpust (přívod) a na dolní straně umístěnou výpust (vývod) kapaliny, stejně jako před kartuší v uvedeném pořadí umístěné a hadicovými vedeními spolu navzájem spojené
- čerpadlo, reometr a průtokoměr.
Zařízení podle vynálezu je určeno k provádění výše popsaného způsobu k praktickému, decentralizovanému obohacování a ·< ·· ·♦ ·«♦» ·· 94 • 944 ··· 4 9 · · ···..: :
··· ·· · 4 4 9 stabilizaci konjugovaných estrogenů (CE) obsažených** ν’ϊ’Μϋ*
V žádoucím případě může dané zařízení obsahovat také dvě paralelně zapojené kartuše, jež mohou být provozovány za sebou nebo střídavě.
Kartuše použitá v zařízení podle vynálezu může být dimenzována v širokém rámci se zřetelem na výšku a průměr.
Aby manipulace v praxi nebyla ovšem zhoršena, měla by být kartuše podle velikosti a hmotnosti dimenzována tak, aby se s ní mohlo běžně silnou osobou, např. při výměně naplněných kartuší za čerstvě vyložené kartuše, ještě dobře manuálně manipulovat a nosit. Příkladně by měla být proto kartuše dimenzována zhruba tak, aby kartuše vykazovala vnitřní rozměry pro adsorpční lože, jež dovolují pojmout 30 až 50 1 adsorpčního činidla, přičemž zejména vnitřní výška leží v rozsahu 80 až 120 cm. Vnitřní průměr kartuše bude obecně činit 10 až 25 cm. Odborník je přitom v situaci, kdy musí provést přesné dimenzování kartuše, aby byly zaručeny optimální vztahy(poměry) proudění při provozu.
Dále existuje kartuše použitá v zařízení podle daného vynálezu účelněji z robustních, pevných a proti chemikáliím odolných materiálů, jaké jsou obvykle používány pro výrobu zařízení či přístrojů pro chemický průmysl, např. laboratorního skla odolného proti úderu, umělých hmot (plastů) a/nebo kovů, jako je např. ocelový plech.
V daném zařízení podle vynálezu mohou být používána libovolná, jednoduchá a robustně konstruovaná čerpadla, jako např. šroubová jednovřetenová čerpadla, hadicová čerpadla nebo ♦ · · · to· · · · « » ·· · · to· • to · · · · · · • · to to to 4 membránová čerpadla. Příkladně pro zařízení podle vynálezu se jako vhodné čerpadlo ukázalo hadicové čerpadlo.
V zařízení podle vynálezu mohou být používány libovolné, jednoduché a robustně konstruované průtokoměry, jako např. rotametry, hydraulické lopatkové excentrické průtokoměry nebo indukční průtokoměry. Např. jako průtokoměr pro zařízení podle vynálezu se ukázal účelným plovákový rotametr.
V daném zařízení podle vynálezu mohou být k měření množství močové kapaliny čerpané přes kartuši použity libovolné, jednoduché a robustně konstruované průtokoměry, jako např. vodoměry nebo induktivní průtokoměry. Jako účelný průtokoměr pro zařízení podle vynálezu se např. ukázal vodoměr (průtokový měřič).
Ve vhodné variantě zařízení podle vynálezu jsou mezi čerpadlem a průtokoměrem zařazeny navíc nejméně jeden nebo několik předběžných filtrů, např. hloubkový filtr nebo náplavový filtr. U těchto filtrů se může např. jednat o hloubkový filtr s pískovým ložem nebo obchodně běžnou filtrační kartuši, nebo obchodně běžné náplavové filtry nebo deskové filtry, svíčkové filtry, filtrační plachetky nebo rovněž filtrační trubky. Za předběžným filtrem může být eventuálně ještě zařazen odlučovač částic, např. v případě pískového lože jako předběžného filtru dále zařazený pískový odlučovač. Filtry mohou být nasazovány jednotlivě nebo ve větším počtu i v libovolné kombinaci mezi sebou navzájem, např. v sérii za sebou navzájem a/nebo paralelně zapojeny. Výhodné ztělesnění těchto variant se vyznačuje tím, že předběžným filtrem je modul ze dvou paralelně zapojených předběžných filtrů, které mohou být • · ·· • · · fl • · « •» 0 00 0 00 ► 00 0 0 » · · 0 · 0 0 střídavě provozovány jednotlivě a také při*’Kěz*ící m* p*řovozu zařízení mohou být vyměněny za čistý předčasný filtr. Další z výhodných ztělesnění těchto variant se vyznačuje tím, že filtrační zařízení se skládá předběžné filtrační jednotky z modulu do série zapojené z předfiltru (např. filtrační plachetky) a jednoho nebo dvou prohloubených filtrů a k nim paralelně připojených absolutních filtrů (např. membránových filtrů), přičemž absolutní filtry mohou být provozovány střídavě jednotlivě a také mohou být při běžícím provozu vyměněny za čistý filtr. Dále je v daném případě účelné, aby zařízení podle vynálezu mělo ke kontrole náležité funkce předfiltru vždy zapojen manometr mezi čerpadlem a předčišťovací m filtrem, jakož i jeden manometr v úseku za předfiltrem, umístěný přednostně až za průtokoměrem.
Přehled obrázků na výkresu
K dalšímu vysvětlení zařízení podle vynálezu v upřednostněném provedení slouží obr. 1, který ukazuje schématické zařízení ke stabilizaci a obohacování CE z PMU. Schématické zobrazení postupu varianty filtrace příslušnou trubicí je reprodukováno v obr. 2.
Způsob podle vynálezu a zařízení podle vynálezu ukazují řadu výhod, z nichž dále budou stručně uvedeny ty nejdůležitější.. Obohacování CE, tzn. plnění či nakládání adsorpčních sloupců může být prováděno přímo na místě shromažďování. Odpadá tím denní přeprava velkých množství močové kapaliny do centrálního místa zpracovávání. Plnění (navážení) může ale kontinuálně probíhat po delší dobu až několika týdnů, dokud není adsorpční sloupec nasycen; např. u adsorpční pryskyřice XAD-7 činí množství adsorbované moči •0 00 0 0 0000 00 00 •000 000 0000
2i 0* j i a ϊ ϊ ···. · : : 0·
000 00 0 000 přibližně 35 ložných objemů. Zbylá moč zbavená CE zůstává na místě, kde jsou pro likvidaci stejně přítomna vhodná zařízení. Přepravován je naplněný sloupec, tzn. jen 1/35 původní hmotnosti močové tekutiny. Přeprava může probíhat ve větších časových intervalech. Přeprava může vyžadovat rovněž delší dobu, např. až několik týdnů. Vzhledem k dobré stabilitě CE v adsorpčním sloupci nelze očekávat žádný rozklad. Odpadá manipulace velkých množství moči separačním a ultrafiltračním zařízením, jelikož oddělování slizových látek a sedimentů přítomných eventuálně ve výchozí moči probíhá robustními a obsluhu nevyžadujícími náplavovými nebo hloubkovými filtry (např. pískovými filtry, filtračními kartušemi, deskovými filtry, svíčkovými filtry, filtračními plachetkami nebo filtračními trubkami), které mohou být v případě potřeby snadno vyměněny.
Následující obrázky a příklady mají vysvětlit blíže daný vynález, aniž by však byl omezen jejich rozsah.
Obr. 1
Schématické výhodné zařízení ke stabilizaci a obohacování CE z PMU; prvky daného zařízení mají následující význam: 1_ = přívod močové kapaliny ze zásobní nádrže; 2 = čerpadlo, např. hadicové čerpadlo; 3_ = spojovací vedení; 4. = manometry; 5. = trojcestná dráha; 6. = rychlospojky; ]_ = uzavírací ventily; 8. = filtry; 9.= měřič proudění s plovoucím tělískem (rotametrem); 1 0 = průtokoměr, např. vodoměr; 11 = kartuše; sloupec; 12 = adsorpční lože (lože adsorbéru); 13 = odtok.
Obr. 2
Schématické znázornění postupu způsobu filtrace surové moče, kdy se filtrační zařízení skládá z modulu předběžné filtrační jednotky zapojené do série (např. filtračního pytlíku) a jednoho
Φ·
ΦΦ ·· • · φ φ φ φφφ φ φφ ΦΦ·· • φ • · · φ
ΦΦ φ · Φ φ Φ φ Φ φ Φ ΦΦΦΦ nebo dvou prohloubených filtrů a k nim nakon*eč* čivou ’par*a*leln*e zapojených absolutních filtrů (např. membránových filtrů).
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1:
Obecný pracovní předpis k obohacování a stabilizaci konjugovaných (vázaných) estrogenů (CE) obsažených v moči březích klisen (PMU) přímo na shromaždišti (místě shromažďování) PMU adsorpcí na adsorpční činidlo obsažené v kartuši.
Shromážděný PMU se vždy plní do zásobní nádrže přes nálevku osazenou příslušným sítem. Síto má velkou velikost ok a slouží pouze k oddělování mechanických nečistot, jako slámy, sena atd.
Daný způsob se vysvětlí dále např. použitím adsorpčního sloupce (jako kartuše) se semipolární adsorpční pryskyřicí. Jsou-li použity Kartuše s jinými adsorpčními činidly, řídí se v daném případě manipulace, avšak zejména zpracovávání (úprava) naplněné Kartuše podle druhu příslušného adsorpčního činidla. Postup plnění a závěrečné promývání kartuši na shromaždišti moči se zachovává v podstatě tak, jak bylo popsáno pod A) nebo B) nebo se případně jen nepatrně přizpůsobí eventuálním zvláštním poměrům daného místa (vor Ort) nebo aktuálnímu adsorpčnímu činidlu.
A) Adsorpce obsahu estrogenů v PMU na příslušné adsorpční činidlo
Adsorpce obsahu CE PMU se provádí v adsorpčním zařízení, jak je např. načrtnuto na obr. 1. Celé množství PMU předem dané kapacitou kartuše nebo adsorpčních ··· ·
4 * · · 4 • ·
4« • 4 sloupců se čerpá při okolní teplotě, připadne’ po předchozím sítování a filtraci, najednou nebo po částech, předem danou průtokovou rychlostí pomocí sloupce nebo Kartuše naplněného příslušným adsorpčním činidlem. Jako adsorpční činidlo může být použita např. ve vodě nabobtnalá semipolární polyakrylesterová adsorpční pryskyřice (= Amberlite XAD-7 firmy Rohm und Haas, velikosti ok síta 0,3 až 1,2 mm, dipólmomentu 1,8 Debye, průměrného průměru pórů 80 Angstrómů, specifického povrchu přibližně 450 m2/g sušiny) nebo jiné vhodné adsorbenty. Po dosažení předem daného maximálního plněného množství PMU se přívod PMU na daný sloupec nebo kartuši zastaví a v žádoucím případě se přečerpá z naplněného sloupce nebo Kartuše na paralelně zapojený volný sloupec nebo kartuši. Obsah estrogenů PMU je tak úplně adsorbován na takto naplněném adsorpčním sloupci.
•4 4444
B).Promývání naplněného adsorpčního sloupce
Naplněný adsorpční sloupec (sloupec s adsorpčním činidlem) nebo Kartuše se po skončení adsorpčního postupu fakultativně (nepovinně) promyje vodou nebo jiným vodným promývacím roztokem, např. bazickým promývacím roztokem, jako je zejména zředěný sodný louh (např. 0,5-2 A NaOH). Přitom se promývací voda nebo roztok čerpá daným sloupcem nebo kartuši při okolní teplotě předem danou průtokovou rychlostí např. 5,5 ložného objemu za hodinu. Odteklá promývací kapalina se vyřadí.
4
4
4
4 4 ·· 4444
4 · 4 4
4
4*4
C) Skladování a přeprava
K přepravě nebo k meziskladování naplněného sloupce s adsorbérem nebo kartuše se sloupec Či kartuše po ukončení adsorpčního postupu nebo po fakultativním promývání např. vodou (nebo jiným vodným, případně bazickým promývacím roztokem, jako je zejména zředěný roztok louhu sodného, např. 0,5-2 A NaOH) oboustranně uzavře, mechanicky odepne od plnicího zařízení a uloží na vhodném místě. Skladování (uložení) může probíhat při teplotě okolí, např. při 15 až 30 °C v normální skladovací hale nebo i v chladírně při teplotě snížené přibližně až na 4 °C. Je-li kapalina v adsorpčním sloupci chráněna proti zamrznutí, může být dokonce ochlazena i na nižší teploty, např. -20 °C. Naplněné sloupce nebo kartuše jsou v pravidelných intervalech od několika dní až do několika týdnů přepravovány z místa shromažďování nebo skladování na místo centrálního zpracovávání, kde jsou zaručeny chemická úprava a izolace konjugováných estrogenů odborným způsobem.
D)Desorpce konjugovaných estrogenů z adsorpčního sloupce nebo Kartuše
Zpracovávání naplněných sloupců nebo kartuši probíhá způsobem obvyklým pro aktuální adsorpční činidlo k oddělení doprovodných látek a izolaci CE. Při použití semipolární adsorpční pryskyřice typu Amberlitu, např. XAD 7, může probíhat dané zpracovávání jako v mezinárodní patentové přihlášce WO 98/08526. Přitom se např. eluční tekutina vede vhodnou plynulou rychlostí daným sloupcem nebo kartuši předehřátou na 45 °C.
Odteklý eluát se jímá v příslušných frakcích. První *ft ·· ftft ftftft· ftft ftft • · < 9 ftftft ftftft „ 9 9 9 9 9 999 99 »
OS ·«···· · · · ft · ftftft ftft · «ftft • ftftft ftft ftft 999 ftft ftftftft frakce (= přibližně 1 ložný objem), zbývající frakce činí vždy přibližně 0,75 ložného objemu. Jednotlivé frakce jsou analyzovány pomocí HPLC ohledně jejich obsahu estronsulfátové soli, kresolů a HPMF. První frakce se shromažďuje, dokud je eluát bezbarvý až slaběžlutě zbarvený. Tato frakce obsahuje pravidelně jen stopy estrogensulfátové soli.
Po odtoku prvního ložného objemu eluátu dochází ke změně barvy eluátu na intenzivní tmavohnědou barvu.
V následujících 2 až 4 frakcích je pak pravidelně obsaženo 80 až 98 % veškerého množství konjugovaných estrogenů adsorbovaných v daném sloupci. Zbývající frakce obsahují již jen malé množství estrogensulfátové soli. To je rovněž patrné na poklesu intenzity zbarvení. Eventuálně mohou být zbývající frakce rovněž ještě dále zpracovávány po oddestilování daného obsahu rozpouštědel a mohou být izolovány další CE.
Hlavní frakce obsahující konjugované estrogeny vykazují aktuálně vysoké obsahy sušiny (TS = sušina, určená HPLC) estronsulfátové soli a jsou zbaveny kresolů a HPMF tak dalece, že tyto frakce představují již vhodné extrakty pro další galenické zpracování.
E)Regenerace sloupců s adsorpční pryskyřicí
Regenerace naplněných sloupců nebo kartuši probíhá způsobem obvyklým pro příslušné adsorpční činidlo. Při použití semipolární adsorpční pryskyřice typu Amberlite, např. XAD 7, může regenerace probíhat jako v mezinárodní patentové přihlášce WO 98/08526. Při regeneraci se daný sloupec nebo kartuše nejprve promývá směsí ethanol/voda obsahující 50 %hmotn. ěthanolu a ·· ··»·* *« ·· • ·4· » · · ♦ « · ♦ _ . · · · » * ·♦· · ♦ * *····· 4 · · « ·
Λ*'-' ····· ···· ···· ·· ·· ··· ·· ···· nastavené na pH 12, pak 10 %hmotn. vodným roztokem citranu sodného a znovu směsí ethanol/voda a nakonec destilovanou vodou. Celá regenerace probíhá pro uvedenou adsorpční pryskyřici při teplotě 45 °C, přičemž rovněž zde mohou být regenerační a promývací roztoky vedeny ze spodní nebo horní strany přes daný sloupec nebo kartuší. Sloupce, resp. Kartuše mohou být vícekrát, např. až 40krát, naplněny a zase regenerovány.
Příklad 2:
Testy stability naplněných adsorpčních sloupců k určení desorbovatelného obsahu GE
K průzkumu stability sloupců, tzn. stability adsorbovaných CE (conjugated estrogens) byly provedeny zkoušky stability adsorpčních sloupců naplněných výchozí močí. Obvykle byly za tím účelem naplněny adsorpční sloupce, pak byla adsorpční pryskyřice ze sloupců odebrána a skladována při dvou teplotách po různou dobu. Po uplynutí skladovací doby byl daný adsorbát eluován a analyzován na svůj obsah CE a doprovodných látek. Získaný výsledek byl srovnáván s výsledkem eluce kontrolních vzorků, tzn. vzorků bez příslušné doby skladování.
A) Provádění zkoušek
Adsorpce byla prováděna nyní známým způsobem ve 3 1sloupcí se semipolární adsorpční pryskyřicí typu XAD 7 (semipolární polyakrylesterovou pryskyřicí, tzn. Amberlitem XAD-7 firmy Rohm und Haas, o velikosti ok 0,3 až 1,2 mm, dipólmomentu 1,8 Debye, průměrném průměru pórů 80 Angstrómů, specifickém povrchu 450 m2/g zasucha). Přitom na daný sloupec bylo dodáno množství 90 1 (= 30 ložných • · »······« • · · · · * objemů) předem ultrafiltrované kobylí m‘óVi “ (půvocfem z Polska) při teplotě místnosti průtokovou rychlostí 5 ložných objemů za hodinu. Obsah estrogenů PMU byl ve sloupci takto naplněném semipolární adsorpční pryskyřicí úplně adsorbován. Po skončeném naplnění sloupce močí klisen byl tento dodatečně promyt 3 1 vody a naplněná (vsazená) pryskyřice byla ze sloupce vyjmuta a rozdělena na 10 vzorků po 300 ml a tyto vzorky byly převedeny do menších sloupců. Příslušný vzorek byl vyřazen.
Pak se postupovalo, jak je uvedeno dále:
1. Okamžitá eluce kontrolního vzorku, tzn. bez uchovávání (skladování).
2. Skladování aktuálních zbývajících vzorků při 4 °C nebo při 25 °C.
3. Eluce vzorků 1 (4 °C) a 2 (25 °C) po jednotýdenním uchovávání (skladování).
| 4. | Eluce vzorků skladování | 3 | (4 | °C) | a 4 | (25 | °C) | po | dvoutýdenní m |
| 5. | Eluce vzorků skladování | 5 | (4 | °C) | a 6 | (25 | °C) | po | pětitýdenní m |
| 6. | Eluce vzorků | 7 | (4 | °C) | a 8 | (25 | °C) | po | osmitýdenním |
skladování
Eluce proběhla známým způsobem, přičemž naložená adsorpční pryskyřice byla nejprve promyta vodným roztokem hydroxidu sodného. Po každém promývacím kroku byla daná promývací kapalina analyzována na obsah estronu (jako sulfátové soli), equilinu, kresolů a HPMF.
Jako eluční kapalina byla použita přídavkem hydroxidu sodného alkalicky nastavená směs voda/ethanol (30 ·· • · · · · · • · ·
hmotn.%), hodnota pH 12) a eluce pryskyřice Kýí a’’prováděna při eluční teplotě 45 °C. Eluát byl jímán do frakcí a jednotlivé frakce byly opět vyšetřovány pomocí HPLC na obsah estronu, kresolů a HPMF. První frakce byla jímána, dokud eluát vycházel bezbarvý až slab žlutě zbarvený. Tato frakce obsahuje jen stopy estronu (sulfátové soli estrogenů). Po odtečení prvního ložného objemu eluátu nastává změna barvy eluátu na intenzivní tmavohnědý barevný tón. V následujících 2 až 4 frakcích je pak obsaženo přibližně 80 až 98 % celkového množství konjugovaných estrogenů adsorbovaných na daném sloupci. Zbývající frakce pro regeneraci dané pryskyřice (vždy při 45 °C v uvedeném pořadí s 50 %hmotn. ethanolu při pH 12, 10 %hmotn. citranu amonného a vody) obsahují již jen malé množství sulfátové soli estrogenů. To je zřejmé rovněž na poklesu intenzity zbarvení.
B) Výsledky
Výsledky získané pro testy stability sloupců pro jednotlivé vzorky jsou uvedeny v tab. 1.0 až 1.9, resp. shrnuty v tab. 1.10 a budou následně ještě dále vysvětleny.
Naplnění sloupce nebo kartuše močí, viz tab. 1.0, stejně jako eluce kontrolního sloupce, tab. 1.1, ukázaly normální průběh adsorpce a desorpce. Byly sice zjištěny zvýšené hodnoty krezolů a HPMF v eluátu, což však mohlo ukazovat na neúplné laminární proudění v daném sloupci nebo na velmi vysoké hodnoty kresolů (téměř 1000 mg/1) ve výchozí moči.
Tabulky 1.2 až 1.9 uvádějí výsledky pro eluci po jedno-, dvou-, pěti- nebo osmitýdenním skladování. V zásadě lze zjistit, že adsorbované hormony (CE) jsou zpravidla ·· ·· ·· ···· . · · · · · · • · · · · ··· ······ · * · · · · · • · · · · kvantitativně desorbovány. Příležitostně, napr”’z’ej m éna jen po jednotýdenní skladovací době při 25 °C, se kvantitativní desorpce zjistí až při 50%-ní ethanolické regeneraci, přičemž se však zde jedná jen o desorpci zbývajících množství CE a největší část by mohla být izolována již předtím ve vlastní desorpci. Závislost desorpce na době skladování a teplotě se neprojevuje nebo je nanejvýš dána jen podmíněně, např. jestliže eventuálně neoptimální tokové poměry v malých sloupcích nemohou hrát žádnou větší roli. Eluát je ale ve všech případech dalekosáhle zbaven kresolů a HPMF. K docílení optimálních výsledků by se tak nezávisle na skladovací době mělo dbát (na) optimálního proudění sloupcem. Sloupce nebo kartuše by proto měly být neustále pod kapalinou, tzn. je nutno zamezit chodu nasucho.
Výsledky po pětitýdenním skladování, tabulky 1.6 až 1.7, ukazují pro teplotu 4 °C dobrý průběh eluce; při T = 25 °C se ovšem v regenerátu vyskytují ještě hormonální podíly. Obsahy HPMF a krezolů v eluátu jsou v obou případech velmi malé.
Překvapivěji rovněž po velmi dlouhém skladování jsou docilovány velmi dobré výsledky, jak je to vidět po osmitýdenním skladování z výtečných výsledků v tab. 1.8 až 1.9. Eluční vrcholy pro estron a equilin jsou velmi strmé nebo ostré, tzn. objem CE-eluátu je malý. Hodnoty kresolů a HPMF se pohybují kolem nuly.
Tab. I.10 reprodukuje všechny zkoušky či pokusy v přehledné souvislosti. Souhrn např. obsahu estronu v eluátu a regenerátu činí ve všech případech přibližně 1055 mg ± 4 % a odpovídá tím očekávanému bilancování.
Souhrnně lze proto zjistit, že jedno- až osmi týdenní skladování naplněné pryskyřice XAD-7 při teplotách 4 °C a • · · · · · ·· °C vykazuje sice rozdíly v elučním chováni, výšce a šířce hormonálních vrcholů, ne však v součtu celkově eluovaných hormonů, jež všechny s ohledem na obsah estronu leží v rozsahu 1055 ± 4 %. Z toho lze vyvodit, že pozorované kvalitativní rozdíly existují jen v nehomogenních tokových poměrech a při použití praxi odpovídajících dimenzovaných sloupcích nebo kartuších jim lze snadno zabránit.
Tabulka 1.0:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu Plnění sloupců přírodní ultrafiltrovanou močí z Polska Adsorpční činidlo XAD 7, objem = 3 1
Po dodání se na sloupec vynese pryskyřice a sloupec se promyje 3 1 vody. Pryskyřice se rozdělí na stejné díly po 300 ml a podrobí se zkoušce na stabilitu sloupce. Daný soubor pryskyřice se ihned eluuje, ostatní se uloží při teplotě místnosti a v chladničce.
| a) Vzorky | Objem 1 | Estron mg/1 | HPMF mg/1 | Krezol mg/1 | Equilin mg/1 |
| Výchozí roztok (= po ultrafiltraci) | |||||
| Kontrolníro ztok 1 | 30 | 85,4 | 67,2 | 908 | 50,1 |
| Kontrolní roztok 2 | 30 | 117,7 | 96,9 | 990,4 | 70 |
| Kontrolní roztok 3 | 30 | 137,6 | 105 | 997,5 | 80,2 |
| 90 | 113,567 | 89,7 | 965,3 | 66,8 | |
| =30 BV | = průměr |
| b) | Objem | Čas | Tok | Tok | Estron | Equilin | HPMF | HPMF | Krezol | Krezol |
| Vzorky | 1 | h | 1/h | BV/h | mg/1 | mg/1 | mg/1 | mg | mg/1 | mg |
| Průběh 1 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 142,6 | 1426 | 2,7 | 27 |
| Průběh 2 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 0 | 0 | 2,2 | 22 |
| Průběh 3 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0,8 | 8 |
| Průběh 4 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 148,5 | 1485 | 1,4 | 14 |
| Průběh 5 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 150,6 | 1506 | 5,2 | 52 |
| Průběh 6 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 153,7 | 1537 | 27,3 | 273 |
| Průběh 7 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 153,8 | 1538 | 81,9 | 819 |
| Průběh 8 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 155,7 | 1557 | 322,4 | 3224 |
| Průběh 9 | 10 | 0,7 | 15 | 5 | 0 | 0 | 154,2 | 1542 | 770,5 | 7705 |
Tabulka 1.1:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce bez skladování (uchovávání)
Adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrováná
| Equilin mg | V“ | <0 | CN | 0> | 10 | 0) | 0) | to— | to— | CO | |||||||||
| 514, | co | M7 | O) | CN | co V“ | 362, | 140, | 10 Μ- | co | ||||||||||
| z-\ | 00 | (O | co | m | 00 | o | CO | 00 | σ> | CN | OO | 00 | to— | 0 | |||||
| c S 5 σ ε LU | ) 300 ml | ‘99 | 53, | 48, | 30, | 05 | w | 56, | 1209, | 466, | 150, | 44 | co | 0 | |||||
| 00 | O) | o | o | O | o | o | CN | 10 | CN | ||||||||||
| Krezol mg | dílů pc | 7432, | 426, | 1500, | 1500, | O O CO | 307, | 169, | 118, | 36, | 10’ to— | co | |||||||
| Krezol mg/l | á na 10 | 965,3 | 1423,1 | 5000 | 5000 | 2000 | 1023,3 | 565,8 | 394,8 | 119,9 | 50,8 | 21,6 | CM t— | 5,9 | OO co’ | ||||
| c | Γ- | cn | 00 | CN | CN | 10 | 0 | CO | 0 | 0 | O | ||||||||
| HPMI mg | Φ ><1) T3 | 690, | tor“ | (0 | 33, | co’ | CO to— | 10’ 1^· | 0 | 0’ | 0 | 0 | 0 | ||||||
| 8 | CN | o | CO | r- | T | to— | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | ||||||
| ÍC £ w | ‘68 | 37, | 216, | 110, | 10 5J- | •M7 10 | 585, | 0 | to— | 0 | 0’ | 0 | 0’ | o | |||||
| Estron mg | £ o. | 874,7 | 30,8 | 8,9 | 3,8 | 2,9 | 2,5 | 32,8 | 629,8 | 244,7 | 80,6 | 26,2 | 23,5 | O | |||||
| Estron mg/l | pec 3 I (tab. | 113,6 | 102,6 | 29,5 i | 12,8 | 9,8 | co | 109,2 | 2099,2 | 815,6 | 268,8 | 87,2 | 39,1 | 10 to? | 2,9 | ||||
| TS % | CO | 3,6 | σ> V | 9‘0 | CM~ θ’ | 0,1 | O CC | ||||||||||||
| X Ω- | 3 O tn (0 c Φ | ZE Q. | 9,4 | T“ co’ T“ | co’ T“ | 13,2 | 13,2 | CM to— X Q. t | to“ co T“ | 13,0 | r- CN v | 12,5 | 12,3 | CN | 12,2 | 0 > | 11,7 | 11,3 | |
| Tok BV/h | cn | o m | o‘s | 5,0 | o‘s | 0‘S | 10’ | 5,0 | 5,0 | 0 10’ | 5,0 | X 0. | 5,0 | c Ό O | |||||
| ml/ min | »c Q. CO c | sNaOh | 25 | 25 | 25 | 25 | 25 | o 10 | 25 | 25 | 25 | 25 | 25 | o“ O | 25 | citran s | 25 | 25 | |
| Ě ω c | CM to— | CM to” | CN | CN | CN | CN | CN | CM v- | CM v— | CN | 10 to? | 24 | 24 | 24 | |||||
| zr o | o O) | 7700 | 3 O *0 O | 300 | 300 | 300 | 300 | 300 | o co o | 300 | 300 | 300 | 300 | 300 | 50 %, | 0 0 co | 10% | 0 0 co | 0 0 co |
| $ o s | Výchozí roztc | Výchozí obsah: | Promývání: v | Praní 1 | Praní 2 | Praní 3 | Praní 4 | Praní 5 | Eluce: ethan | Eluát 1 | Eluát 2 | Eluát 3 | Eluát 4 | Eluát 5 | Reqenerace: | Regenerát 1 | Regenerace: | Regenerát 2 | Regenerát 3 |
····
Tabulka 1.2:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce po 7 dnech skladování (uchovávání), 4 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrovaná
| Equilin mg | |
| Equilin mg/l | |
| Krezol mg | |
| Krezol mg/l | |
| HPMF mg | |
| HPMF mg/l | |
| Estron mg | |
| Estron mg/l | |
| TS % | |
| PH | |
| Tok BV/h | |
| Tok ml/min | |
| Čas min . | |
| Obj. | |
| Vzorky |
o o
co o
Q.
CO c
'CO c
><U
Ό
IM iC £
Q.
CO
E tu
Έ o
o o
cu
o.
O in co c
o
O) tu
a.
co o
£ 'Ň
O £
O o
o r-~ r~co ju o
'Ň
O
O £
| 12,7 | 17,5 | V“ | ||
| 42,2 I | 58,3 | 4,7 | 4,7 | co Μ- |
| ’Μ; co | 1619,1 | 402,9 | 183,4 | 55,2 |
| 2604,6 | 5396,9 | 1334,0 | 611,3 | 184,0 |
| 26,6 | 103,1 | 9,7 | 0,0 | CO T“ |
| 88,6 | 334,7 | 32,4 | 0,0 | 4,3 |
| 26,9 | 10,1 | 2,7 | 2,7 | 2,8 |
| 89,6 | 33,7 | 9,0 | 9,1 | CO σ> |
| 9,5 | V co T“ | co T | V co’ | V co |
| 5,0 | O to | CD to | 5,0 | o to |
| 25 i | 25 | 25 | 25 | 25 |
| CM | CM | CM v | CM T | CM |
| 300 í | 300 | 300 | 300 | 300 |
| Praní 1 | Praní 2 | Praní 3 | Praní 4 | Praní 5 |
CM
X
a.
O o
LO
CO l<
CM
CM
O) co σ>
CM co co cm tO cm
CO
CO tO
CM
CM
O
O
CO
CM
CO
CO cd co o
to
CM
CM o
o co
CM
9·* '<0 _d
LU co o
co cm o
tn to
CM
CM
O o
co co to o
to
CM
O) cm to
C3 o
o o
o co to co co ’Μ·
CM
O to to
CM
CM
O
O
CO 'CC _3
UJ co
CM
CM o
tJcm
CD to tO
CM
CM
O
O co to •w '03 in co v
r·» mcm o
in
CM v
X
Q.
d o
tO
É.
o c
co
Φ
Φ o
tu c
ω σ
tu
QC m
CM
CM
O
O
CO tu c
tu ra tu o
o lO
M·
O
JO
O
CD σ
o >
0) o
tu c
ω a
«
| 0,0 | 0,0 |
| 0,0 | 0,0 |
| 0,0 | O o |
| O o | o o |
| 0,0 | 0,0 |
| 0,0 | o o |
| 11,3 | O o |
| 18,8 | 0,0 |
| cm V“ | 11,2 |
| 25 | 25 |
| 24 | 24 |
| 600 | o o co |
| Regenerát 2 | Regenerát 3 |
• ·
Tabulka 1.3:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce po 14 dnech skladování (uchovávání), 25 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrováná k iTuta---- -- r ml/pV/ TS EstronEstronHPMFHPMF Krezol Krezol Equili Equilin
O)
E x
σ>
E
O)
E
O)
E
O)
E
E
F o
| 514,4 | 19,8 | 14,5 | O CM | LO V | r- | 28,8 | 156,4 | 165,6 | 104,2 | 57,7 | ||
| co | O | co | O | co | 5“ | CO | T— | CO | ||||
| <0 | oo' | co | CO | lo’ | CO | CM | r- | CM | ||||
| CO | to | O) | CM | LO | o> | |||||||
| (O | LO | LO | CO | v- | ||||||||
| ¢0 | iq | CO | oo | CM. | σ> | σ> | O | co. | OO | |||
| cm’ co | lo | O | co | CO | ιθ | co | in | T— | xt | xt | ||
| T“ | CO | V | O | σ> | co | M· | CM | T” | ||||
| CM | xr | O) | LO | t— | ||||||||
| 1- | T“ | |||||||||||
| cq | 1- | v | CO | CO | O) | o | co | co | r- | o> | ||
| T- | CM | o | cm’ | co’ | co | co’ | CM | co’ | ||||
| in | lo | O | CM | LO | CM | co | co | Xt | ||||
| CO | o | r- | co | CO | CM | T“ | ||||||
| o> | ’Ί’ | CO | T“ | |||||||||
| (0 | LO | LO | CM. | !O | xt | o | o | C3 | o | |||
| o | cm | co’ | σ> | co | o' | o' | o | o | ||||
| σ> | LO | <0 | ▼“· | |||||||||
| to | ||||||||||||
| I— | co | O | co | t— | CM | O | o | o | o | |||
| h* | co | co | LO | o | LO | V- | o | o | o | o’ | ||
| σ> | co | o | LO | co | T— | |||||||
| 00 | CM | |||||||||||
| r- | to | CO | xt | LO | CO | cq | co_ | co | cq | |||
| σ> | r* | cm’ | cm' | cm' | xf | xt | co | co | ||||
| Γ- ΟΟ | CM | LO | r* CM | 28 | co T“ | o | ||||||
| to | r-_ | T~ | o | co | Γ- | co | co_ | o | 'T, | cq | ||
| co | co | co’ | oo' | co | oo' | cm | xt | oí | v | co | ||
| O) | CM | co | o | xt | xt | |||||||
| T“ | Oí | O) | co | co | ||||||||
| CO | r- | co | LO | xt | ||||||||
| T“ X Q | co | o | O | o | ||||||||
| o | ώ | τ— | t— | co | T- | o | co | ιθ | M· | |||
| o’ | co | co*- | co | co’ | CM | co’ | co | CM | CM | CM | ||
| /•“s | v | •v | T” | t— | T” | ▼— | T“ | V“ | ||||
| o | o | O | o | o | X | o | o | o | o | o | ||
| CM, | LO | Úl | LO | LO | lo | Q. d | lo | ιθ | lo | ιθ | ιθ | |
| X | LO | LO | LO | LO | LO | LO | LO | LO | LO | LO | ||
| o co | CM | CM | CM | CM | CM | CO | CM | CM | CM | CM | CM | |
| Cm | ÍM | cM | CM | CM | M· | CM | N | CM | CM | CM | ||
| t— | T— | V | V“ | ·» | T“ | v | V“ | |||||
| ω | ||||||||||||
| O | O | O | o | o | O | o | O | o | O | o | ||
| o | 3 | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o |
| r- | O | co | co | co | co | co | co | co | co | co | co | co |
| t— | o | o | ||||||||||
| > | c | |||||||||||
| CD | ||||||||||||
| c | .c | |||||||||||
| CU | ||||||||||||
| 'Ň | £ | v- | CM | co | xt | <o | i) | T- | CM | co | LO | |
| 2 -£Ť | e | v·* | ||||||||||
| c | c | c | c | c | c | u | 'Cd | *cd | 'Cd | 'Cd | 'Cd | |
| s | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | |
| ST-q o | o. | CL | CL | CL | CL | CL | UJ | LU | LU | LU | LU | LU |
| 61,6 | 6,0 | 0,0 | ||
| N- | O | o | ||
| CM | o | o | ||
| O | v | |||
| T— | ||||
| CM | o | |||
| O> | xt | o' | ||
| O | o> | o | ||
| cm | r-’ | o | ||
| CO | ||||
| o | o | o | ||
| o | o' | o | ||
| o | o | o | ||
| o | o | o | ||
| v- | xt | o | ||
| LO | o | o | ||
| T“ | ||||
| v- | 45° | |||
| CO_ | o_ | o | ||
| o> | o | |||
| o> | θ' | |||
| CM | T“ | |||
| T— | ||||
| X | Cd | |||
| Q | T3 | |||
| O | co | co | ||
| O | CM | > | cm’ | v- |
| T“· | ||||
| u, 45 | '5^ | |||
| 5,0 | C Ό O CO | |||
| o | LO | LO | LO | |
| c Cd r | CM | c Cd | CM | CM |
| Xt· | BB | Xj· | xt | |
| Φ | CM | 3 | CM | CM |
| O | O | O | ||
| o- | o | o | O | |
| 50 | co | o | co | co |
| φ | V | v | CM | co |
| 2 | 3 | 2 | '2 | '2 |
| Φ | cu | Φ | cu | cu |
| c | c | c | c | c |
| cu | cu | cu | Φ | cu |
| σ | σ | σ | a | O) |
| Φ | φ | ω | φ | cu |
| CL | a: | CL | a: | Od |
444· • · 4
4
4· · «
Tabulka 1.4:
Test sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce po 14 dnech skladování (uchovávání), 4 °C adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrovaná · ♦
--JčaTTok|Toki--- - r
Obj. smi ml/BV TS Estron Estron HPMF HPMF Krezol Krezol Equilin Equili
Vzorky ml |n· pi |H/h| pH % mg/l mg mg/l mg mg/l mg mg/l [nmg Výchozí roztok: 901 naplňte na saloupec 3 L (tabulka 1.1, pryskyřice rozdělena na 10 dílů po 300
N
O
| M· | 00 | co | 00 | CO | Xt | r-» | l·- | LO | 7“ | CO | χφ | O | |||||
| W | co | V“ | CM | 7— | T“ | co | o | t·' | 7— | o | |||||||
| V | V“ | v | co | o | CM | ||||||||||||
| io | xt | ||||||||||||||||
| oó | o | CO | Xt | co | co | oo | co | LO | co | 7— | CO | o | |||||
| <£> | lo | σ> | oí | un | xt | lo | lo | ΙΛ | V“ | co | cm | CM | o | ||||
| CD | lo | co | xt | CM | co | oo | CM | ||||||||||
| CO | CO | ||||||||||||||||
| * | |||||||||||||||||
| CO | co | o | co | co | xt | « | o | o | CO | CO | oo | Xt | ώ | ||||
| c\i | to | o | oo | co | Xt | o | o | r* | CO | cm” | LO | 7“ | o’ | ||||
| CO | Γ— | o | V | V“ | |||||||||||||
| xt | co | co | |||||||||||||||
| r- | |||||||||||||||||
| cO | O) | o | co | CO | LO | ÍM | o | 00 | o> | OO | co | xt | o | ||||
| in | LO | o | xt | M* | xt | Xt | o' | co | o | co’ | o> | cm' | o | ||||
| <0 | m | o | o> | xt | co | LO | CM | ||||||||||
| O) | CM | o | |||||||||||||||
| V” | co | ||||||||||||||||
| CO | xt | T- | o | o | LO | o | o | O | o | o | o_ | o | |||||
| o | OJ | co” | σΓ | o | o | V- | o | o | o' | o | o | o | ó | ||||
| a> | co | ||||||||||||||||
| (O | |||||||||||||||||
| Γ-; | CO | co | CM | <3 | o | o_ | o_ | o | O | o | o | o | o | ||||
| σ> | Osí | O | o | o’ | lo | o’ | o' | o' | o | o | o | o’ | |||||
| 00 | Xt | m | CO | ||||||||||||||
| 'M· | |||||||||||||||||
| r- | CM | co | LO | Xt | o> | co | CO | co | r- | xt | ώ | ||||||
| xt | co | co' | CM | CM | CM | co | co | co | σ> | T— | CM | cm | o’ | ||||
| r*. | ÍM | CM | lO | h- | co | V“ | V | O o | |||||||||
| 00 | h- | ||||||||||||||||
| CO | CO | o | CO | CM | O | OO | o | 00 | o | LO | c\l | lO | o | o | |||
| co’ | r*- | co | co' | oo | co | O) | co' | r- | V“ | oo | V“ | χφ | Xt | o | |||
| CM | r- | ÍM | co | co | CM | *— | |||||||||||
| LO | io | T— | o* | ||||||||||||||
| CM | CM | X5 | |||||||||||||||
| CO | LO | CO | xt | ||||||||||||||
| co | o | o | o | re | |||||||||||||
| I | I | σ | |||||||||||||||
| Q. | co | 5“ | T“ | T— | CM | Ί— | oo | co | co | co | Q. | CO | o | M- | |||
| o> | co | co | co’ | co | CM | co | cm' | CM | ÍM | cm' | 6 O | CM | CM | 7— | |||
| £ | v- | T“ | T— | T— | *“ | *>> | V“ | 7— | |||||||||
| 5,0 | 5,0 | (3 lo | <□ un | 5,0 | I Q. | 5,0 | 5,0 | (□ V) | 5,0 | 5,0 | 45 | o Lo | c 3 o | ||||
| -r | <0 | ||||||||||||||||
| uo | io | io | CO | in | υ | un | to | LO | iO | LO | O | LO | LO | LO | |||
| O re | CM | CM | CM | CM | CM | o LO Xt | CM | CM | CM | CM | CM | c re | CM | c 2 | CM | CM | |
| z | CM | N | CM | N | CM | CM | CM | CM | CM | CM | JZ | M- | •S | Xt | S | ||
| (Λ | 5“ | T“ | V“ | 1S | CM | CM | CM | ||||||||||
| o | 3 | O | O | o | o | o | o | o | o | o | o | o | O | o | |||
| o | O | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o· | o | O | o | ||
| 1· | 3 | co | co | co | co | co | co | co | co | co | co | co | o | co | o | CO | co |
| r- | o | LO | V | ||||||||||||||
| o | |||||||||||||||||
| SM· | c re | Φ o | T- | Φ o | CM | co | |||||||||||
| c 'B £ | V“ | CM | co | xt | lo | .c. φ | CM | co | xt | m | 2 φ c | ‘2 tu c | 2 OJ c | Š Φ c | Έ φ c | ||
| E | Xm | x_ | Xa> | Xm | X— | Φ | Φ | Φ | Φ | Φ | <D | ||||||
| TO w | c | c | c | c | c | o | 'TO | *re | *re | *re | *re | o | □) | o | O) | Q) | |
| 2 | re | 2 | 2 | 2 | 2 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | Φ | Φ | TO | Φ | Φ | |
| .Ω Ώ | 0. | 0. | 0. | 0. | CL | OL | LU | UJ | LU | LU | UJ | UJ | QC | Q£ | at | at |
00·· » · * • 0 0 0 0
0 · ·
0 ·
0 0 0 · ·
Tabulka 1.5 :
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce po 14 dnech skladování (uchovávání), 25 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml ·· » 0 · «
| CT <= £ a |
| c O) ct E LU |
| Krezol mg |
| Krezol mg/l |
| u. 2 o. E X |
| HPMF mg/l |
| Estron mg |
| Estron mg/l |
| TS % |
| X o. |
| Tok BV/h |
| Tok ml/ min |
| Čas min. |
| Obj. ml |
| £ o |
o o
co o
CL «□ '5 o
(0 c
co c
o ><D
SC £
CL
E
CO co o
ω
o.
O co c
ω <c
Q.
CO c
o σ»
Sč s
s 'Ň
O £
I
| 66,8 |
| 7432,8 |
| 965,3 |
| 690,7 |
| 89,7 |
| 874,7 |
| 113,6 |
| 7700 |
| Výchozí obsah: |
| I 16,8 I_ | 41,8 | CO cm | CO 5Γ | |
| I 130,0 I_ | 53,4 | 10,0 | 3,3 | 4,5 _I |
| 1800,0 | 656,6 | 212,2 | 22,8 | r-~ σ> |
| 6000,0 | 2188,5 | 707,3 | 76,1 | 32,2 _i |
| 150,8 | 39,0 | O cd* | co | 0,0 _I |
| 502,5 | 130,1 | 26,8 | 5,2 | 0,0 |
| CO | 19,7 | 2,6 | 2,2 | 2,3 |
| 25,9 | 65,5 | 8,6 | 7,2 | 7,6 I |
| 9,3 | 13,0 | 13,1 | T“ CO T— | co Ύ“ |
| O m | 5,0 | o‘s | 5,0 | O to |
| 25 | 25 | 25 | 25 | 25 I |
| N T— | CM V | CM T“ | CM | CM |
| 300 | 300 | 300 | 300 | 300 _I |
| Praní 1 | Praní 2 | Praní 3 | Praní 4 | I Praní 5 |
CM
O
O to χθ σ'
O
CO o
c co .£
Έ5
Φ o
LU
| h- | r- | ř*. | LO | T“ | co | o | |||
| co’ | h»’ | o’ | Tř | r- | N- | v— | o | ||
| T“ | co | o | CM | ||||||
| CO | o | co | O | co | r- | o | |||
| h- | O) | co | o> | M· | o | ||||
| σ> | CM | o> | T“ | o | O) | ||||
| 0» | ’Μ | CM | |||||||
| r- | O | o | to | 00 | CM | T“ | o | ||
| co | O | o | CM | co | lf) | M | o | ||
| V“ | |||||||||
| 00 | O | o | co | t· | ''t | Ο» | o | ||
| to’ | o | o | cm | to | co | o | |||
| to | CM | CM | |||||||
| v | o | ’Μ’ | CM | r- | o | o | |||
| o | O | o’ | o | O | o | ||||
| r*- | b- | o | CM | to | v- | o | o | ||
| co | co | o’ | o | v | o | o | |||
| cM | O) | V“ | co | co | CM | 1- | o | ||
| V | lO | CM | N- | CM | co | o | |||
| to | r* | σ> | to | O> | o o | v | |||
| M· | CM | ||||||||
| LO | CM | T- | “Μ- | σ> | CO | to | LO | o | |
| o | co’ | r-~ | to | to | co | o | |||
| b- | co | o | CM | r- | co | CM | |||
| v | ΙΛ | co | CO | v | v | θ' | |||
| CM | X) | ||||||||
| to | co | co | co | CM | |||||
| co | o | o | o | I | co Q | ||||
| t— | o | to | to | CL | s | Γ>» | o | ||
| co’ | «Γ | CM | CM | c\í | d | cm | T- | o | |
| ί— | |||||||||
| o | '>» | ||||||||
| o | o | O | O | o | to | O | c | ||
| to’ | to’ | to’ | to | to | M· | to | Ό O | ||
| co | |||||||||
| to | to | lO | to | to | o | to | to | to | |
| CM | CM | CM | CM | CM | c co JZ | CM | c 2 | CM | CM |
| CM | CM | CM | CM | CM | 'M- | •S | 'M- | ||
| V“ | TT“ | T“ | «♦-» ω | CM | CM | CM | |||
| O | o | ώ | o | o | xP | O | O | O | |
| O | o | o | o | o | θ'* | O | O | O | |
| co | co | CO | co | co | 50 | co | O | CO | co |
| fl) o | T— | fl) o | CM | co | |||||
| 2 | '2 | 2 | '2 | '2 | |||||
| co | iO | fl) | fl) | fl) | fl) | fl) | |||
| t— | CM | -M- | c | c | c | c | £ | ||
| ** | ·«-* | Φ | fl) | Φ | fl) | fl) | |||
| 'CO | 'CO | 'CO | 'CO | 'CO | a | O) | σ | O) | O) |
| 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | fl) | fl) | « | fl) | CD |
| LU | LU | LU | LU | LU | oc | OČ | Oč | Oč | Oč |
» · · * · ·
Tabulka 1.6:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce po 35 dnech skladování (uchovávání), 4 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrovaná ·· ···« > · · • ·
| Equilin mg |
| Equilin mg/l |
| Krezol mg |
| Krezol mg/l |
| HPMF mg |
| lU-I’ c_E |
| Estron mg |
| Estron mg/l |
| TS % |
| X o. |
| Tok BV/h |
| Tok ml/ min |
| ω c ro = >Q E |
| Obj. ml |
| £ o |
n o
y—
CO c
co c
Φ >φ
N >c £
&
CL
CO ££
XJ
CO
CO
O cu
CL .O co c
CD ε
Q.
CO c
o σ>
Ič o
'R o
c u
'>
>r θ' s
c5~ to co co cm co
Mř co m
co tji o
o>
co o>
co
M t·co co_ co
| CM | o> | T- | f“ | CO | r- | O | CO | O | ca | CM | ||||
| σ> | cm | 'M· | CM | V“ | co | T— | oo’ | ca | ||||||
| T* | to | v- | V | CO | co | |||||||||
| xt | ||||||||||||||
| o | CM | to | Ó) | co | OJ | co | 00 | co | oo | co | ||||
| xt | to | co | CO | xt | co | co | co | co | o> | u? | ||||
| <0 | co | oo | co | CM | CO | T— | ||||||||
| co | xť | T“ | ||||||||||||
| T“ | ||||||||||||||
| N | v | cn | O | co | (0 | v- | h- | co | CM | co | ||||
| to | l·*· | σΓ | σ> | CM | co | xf | o’ | to’ | CO | co | ||||
| o | ’Τ | co | CM | T“ | ’Μ’ | CM | T- | |||||||
| w | co | CM | ||||||||||||
| v- | ||||||||||||||
| cM | t— | r- | 00 | o | v- | o | co | CO | co | |||||
| r* | í< | σ> | co | CM | CM | O) | CM | o | M· | |||||
| 00 | to | σ> | O) | 'Μ’ | CO | co | to | CM | v- | |||||
| co | v— | co | ||||||||||||
| V | (O | |||||||||||||
| o> | T- | cM | O> | O | CO | O | o | xt | O | O | ||||
| cm | to | CM | o | o | T— | o | o | o | o | o | ||||
| CM | T— | |||||||||||||
| o> | to | O | o | XÍ- | o | o | co | o | o | |||||
| co | co | o | co | o | to | o | o | T- | o | o | ||||
| r- | V | ''t | ||||||||||||
| O) | H- | co | S· | co | o | cM | o | V“ | o | co | ||||
| to’ | -Μ7 | CM | CM | CM | CM | V- | o | r- | o | O) | ||||
| CM | ▼— | CM | CO | CO | co | CM | ||||||||
| r- | CM | |||||||||||||
| CO | O) | CM | O) | CO | CO | CM | to | to | l·- | to | ||||
| O) | co’ | σ> | CO | f'- | co | r-> | ca | co | CO | to | ||||
| oo | h- | CO | to | CM | CO | T“ | ||||||||
| Xf | CM | |||||||||||||
| co | CM | CM | ||||||||||||
| co | O | to | CO | T- | ||||||||||
| X | co’ | CM | o | o | o | X | ||||||||
| CM | o | V | T- | O | o | co | co | to | Q. | 1 | ||||
| σ> | co’ | co | co | co | CM | co | CM | CM | CM | cm | d o | cm | ||
| sč | T— | v | r— | V | T— | |||||||||
| cm | o | o | ů | o | o | X | o | o | o | o | o | to | o | |
| X | to | to | to | to | to | Q. | to | to | to | to | to | to | ||
| o | m | to | to | to | to | d | to | to | to | to | to | O, | to | |
| co | CM | CM | CM | CM | CM | o to | CM | CM | CM | CM | CM | c co | CM | |
| CM | tM | N | CM | CM | CM | N | N | CM | CM | JZ | ||||
| (Z) | V | t— | T- | O | CM | |||||||||
| o | 3 | o | O | Γ) | o | o | o | o | o | o | o | χΡ | o | |
| o | O | o | o | o | o | o | o | o | o | o | cF | o | ||
| r- | CO | co | co | co | co | co | co | co | co | co | co | O | co | |
| h- | 5 | to | ||||||||||||
| Έ | an | Φ O | V | |||||||||||
| 2 | CM | co | xt | LO | JZ ω | CM | co | xj· | to | 2 φ c | '2 ω c | |||
| E | L— | Φ | Φ | φ | ||||||||||
| cv £ o | o | c | c | c | c | c | O | 'CO | 'CO | 'co | 'CO | 'CO | π | |
| c Q. | Pra | Pra | Pra | Pra | Pra | 3 UJ | Elu | Elu | Elu | 3 UJ | 3 UJ | Φ Qí | φ Ct |
| 0,7 | 0,0 |
| - | 0,0 |
| tOh xř | to o |
| 7,5 | 0,8 |
| O o | O o” |
| 0,0 | o o |
| 0,8 | 0,0 |
| X. | 0,0 |
| o CM | 10,9 |
| 25 | 25 |
| 24 | 24 |
| 600 | 600 |
| Regenerát 2 | Regenerát 3 |
Tabulka 1.7:
Test sloupce ohledně stability sloupcového materiálu
Eluce po 35 dnech skladování (uchovávání), 25 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrovaná ·· ···* » · · • · ·♦· ·· ····
--—1771-----HPWh----Vzorky Obj. čas ml/ Tok TS Estron Estron F HPMF Krezol Krezol Equilin Equilin fc ra
E ra
E ra
E
I
o.
o o
co o
Q.
«3
T3
O
CO c
co c
tD ><U £
£
o.
co
X) co co o
o
α.
O co c
<D ε
Q.
CO c
o ra g 2 'R o £ u ·>
| 514,4 |
| 66,8 |
| 7432,8 |
| 965,3 |
| 690,7 |
| 89,7 |
| r-_ 7 Γ- ΟΟ |
| 113,6 |
| 7700 |
| Výchozí obsah: |
co
T“
X α
O
TJ
O >
c co £
ε
O
M· o’
LO
LO*
M· co
Μ’ co lo
Tř co <0 od r^· m
σ>
LO lo r-’
CM co
O) <07 o’
CM
CO co’ co
CM σΓ o
lo’
LO
CM
CM
O o
co
O
V“
LO
CM*
M·’
LO o’
LO
CO
LO o
co’
Mer co’
C5
LO’
LO
CM
CM
O o
co
CM
Έ
a.
CO cm’
CO co’ <0 o
LO’
CM co
M
LO’
CO
LO’ o
Tt
M*’
CO
LO co o
o’ cm’ o>
N-’ co
LO
CM
CM o
o co cm’ co
LO
CM
CM
CM
X α
d o
LO
M·
LO
O <0
O c
Φ
-C a>
φ o
| 19,4 | 243,4 | 153,7 | 75,5 | 37,7 |
| 64,8 | 811,4 | 512,4 | 251,5 | 125,7 |
| 30,4 | 59,8 | 41,7 | 21,3 | 00 co' |
| 101,2 | 199,2 | 139,1 | V“ r- | 22,5 |
| CO cm’ | 0,0 | o o | 0,7 | o o |
| 7,5 | o o | 0,0 | CN CN | 0‘0 |
| 35,5 | 457,8 | 296,3 | 143,8 | 72,3 |
| 118,4 | 1525,9 | 987,7 | 479,4 | 241,0 |
| 3,5 | CO v | 0.7 | co o’ | CO o |
| 13,0 | 12,9 | 12,6 | N- CN V“ | 12,3 |
| O LO | 5,0 | O 10 | O id | O LO |
| 25 | 25 | LO CM | LO CM | 25 |
| CN | CM | CN t— | CN | CN |
| 300 | 300 | 300 | O o CO | 300 |
| Eluát 1 | Eluát 2 | Eluát 3 | <3 3 UJ | Eluát 5 |
CM
X
Q.
d o
LO
O
LO
Φ
O
Φ c
Φ σ
φ
Qí
| 35,0 |
| 58,3 |
| 9,5 |
| 15,9 |
| 0,9 |
| αχ V |
| 66,5 |
| 6‘0lT |
| 12,3 |
| o id |
| 25 |
| 24 |
| 600 |
| Regenerát 1 |
O o
LO
O
-Q
O
CO
T3 c
TJ
O
V) c
•g
-e oo
Φ υ
φ c
Φ σ
φ
OÉ
| 3,4 | 0,0 |
| CO LO’ | 0,0 |
| 4,0 | 0,0 |
| 6,7 | 0,0 |
| 0,0 | 0,0 |
| o o | 0,0 |
| 5,8 | 0,0 |
| 9,6 | 0,0 |
| 11,9 | o o |
| 25 | 25 |
| 24 L . | 24 |
| O O CO | 009 |
| Regenerát 2 | Regenerát 3 |
·*·· ♦ · toto ι · · *
T abulka 1.8:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu, eluce po 56 dnech skladování (uchovávání) 4 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrovaná ···· ·· ·· • ♦ · • · ···
| Equilin mg |
| Equilin mg/l |
| Krezol mg |
| Krezol mg/l |
| Li. 5 σ) CL E I |
| u__ Š:E |
| 2 ra 65 2 UJ |
| Estron mg/l |
| TS % |
| X o. |
| Tok BVH EÁl |
| c |
| £ = LOe |
| Obj. ml |
| Vzorky |
CO o
Ό
O
T“
CO c
co c
Φ >Φ n
ÍC £
£
CL s
co
CO o
Φ
Q.
O
TO
C
TO »1
Q.
TO
C
O o>
jč o
o
| M· | V | CO | CN | v- | ||
| 514, | co’ T“ | 3 | CN | T— | ||
| CO | co | co | co | o | r- | |
| ‘99 | 44, | 113, | r- | M· | co’ | |
| co | M· | o | h- | V | CN | |
| 7432, | cn co | 1500, | 210, | σ> | r- | |
| CO | co | O | CN | co | o> | |
| 965, | 1171, | 5000, | 702, | co’ co | 23, | |
| CN | CN | co | o | |||
| 690, | co | r* co | O | t— | o’ | |
| h- | io | N | co | o | ||
| ‘68 | 44, | 457, | 34, | M7 | o | |
| l·- | r» | oj | h- | |||
| r* co | m CN | CN CN | CN | CN | CN | |
| «0 | co | CO | CO | σ> | O) | |
| co” | co co | r*- | o> | co | co” | |
| CO Τ’ | ||||||
| X CL | 9,2 | 13,0 | 13,1 | 13,2 | V co” | |
| o | O | O | O | o | ||
| CN | m | un | in | in | to” | |
| X o | 25 | 25 | 25 | 25 | 25 | |
| TO Z | N V“ | CM T~ | CM T“ | CM | CM *r“ | |
| 7700 | (Λ <0 Ό P | 300 | 300 | 300 | 300 | 300 |
| > | ||||||
| '2 | ||||||
| “Ň | £ | ·>- | CN | CO | M* | |
| C | ε 2 | ani | •ani | •ani | •ani | raní |
| > -O Q | o. | CL | CL | 0. | 0. | CL |
CN
O
CO
O c
TO x:
LU ií
U
Lil
| CO | IO | co | CO | co | σ> | Μ- | |||
| co | co | CN | co | co | co | o | o | ||
| co | M* | co | V“ | ||||||
| co | |||||||||
| co | CN | o> | ώ | CN | σ> | uo | r- | ||
| r-’ | co | lO | CN | IO | CN | v | o | ||
| CN | CO | r·'- | CN | Xt | CN | ||||
| CN | |||||||||
| CO | o | o | o | o | O | co | T— | ||
| CN | o | o | o | o” | o’ | T“ | o” | ||
| r- | o | o | o | o | o | CN | CN | ||
| y— | o | o | o | o | o | CN | o | ||
| Μ- | |||||||||
| O | r- | o | h- | o | 00 | O | uo | ||
| ▼— | o’ | o | o” | o | o | ||||
| CO | co | o | o | o | o | σ> | |||
| co” | uo | o | CN | o | co’ | o” | o | ||
| o> | co | CO | o | Νφ | oj | h- | |||
| »θ” | CO | o | co | co | co | V- | o | ||
| v | CO | co | CO | CN | CN | ||||
| CO | CN | o | |||||||
| T- | T— | M· | CN | o | T— | T“ | |||
| CO | σ>’ | O) | co | co | CN | CO | co” | ||
| co | co | co | CN | 00 | |||||
| CN CN | co | CN | CN | θ' | |||||
| co | O | co | CN | V“ | O | ||||
| co” | CN | o | o’ | o | X | ||||
| Q. | co | ||||||||
| CO | Tř | co | co | CM | T3 | 00 | CO | ||
| co | CN | CN | CN | CN | d | cm | O > | v | o“ |
| V“ | V“ | ▼ | uo | T | T“ | v* | |||
| o | O | o | o | o | O | c | |||
| in | co | co | 10 | cn | 3 | to | TJ o | ||
| CO | IO | IO | m | m | O | m | (0 | m | lO |
| CN | CN | CN | CN | CN | CO | CN | c 2 | CN | CN |
| N | CN | CN | CN | CN | C | Μ- | M | ||
| ▼“ | T- | TO | CN | Ό | CN | CN | |||
| o | O | o | o | o | sS | O | O | O | |
| o | O | o | o | o | O | O | O | ||
| co | CO | co | co | co | O co | co | O | co | co |
| φ o | V“ | Φ o | CN | co | |||||
| 2 | rát | 2 | Š | '2 | |||||
| CN | co | uo | Φ | Φ | Φ | Φ | Φ | ||
| T“ | c | c | c | c | c | ||||
| H—’ | Φ | Φ | Φ | Φ | Φ | ||||
| 'CO | OJ | 'CO | 'CO | 'C0 | σ | S) | σ | O) | O) |
| 3 Lil | 3 LU | 3 LU | 3 LU | 3 LU | Re | Φ a: | » 0£ | Φ a: | Φ ct |
4444
Tabulka 1.9:
Zkouška sloupce ohledně stability sloupcového materiálu, eluce po 56 dnech skladování (uchovávání), 4 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 300 ml
Výchozí roztok: přírodní moč z Polska, ultrafiltrovaná ♦ 4 4 4 44 ·4 » 4 4 1
4 ·· > 4 4 1 • · <
• · 1
4 <
I 44 4 44
444 •4 4444
| •E oj | co | CO cm | N | V“ V | o co | 6,5 | 2,8 | 6,6 | co co | ÍA co | 0,9 | o | |||||||
| o | co | CO | CO | V“ | |||||||||||||||
| 5- c LU | E | to | co | ||||||||||||||||
| c | 300 | 66,8 | 44,6 | 13,5 | to Γ» | 4,0 | r- co | 27,6 | 88,2 | 75,9 | 22,0 | 45,2 | 22,9 | ΙΩ | F- o | ||||
| ctE UJ | po | T” | CM | •V | v- | ||||||||||||||
| rezol mg | OJ *C | co CM | v | 0,0 | 0,7 | V“ σ> | 7,2 | 2,5 | 0‘0 | 0,0 | 0,0 | o o | 0,0 | ω | V o | ||||
| o | CO | 35 | 50 | CM | T” | V | |||||||||||||
| á na 1 | Γ— | ||||||||||||||||||
| N s ε | o to | co | o o | cM cm | m co | O> CO | r- V” | 0‘0 | 0,0 | 0,0 | 0‘0 | O o | 2,2 | 0,2 | |||||
| c Φ | s | F- | o o | O b- | co | CM | ’Μ' | ||||||||||||
| >Φ | 5” | to | |||||||||||||||||
| LL 5 cn | tí o | - o | co | N r·* | 0,2 | CO v | 0,0 | O T“ | F- | o,o | 0,7 | 0,0 | co | 0,0 | 0,5 | ||||
| cl E I | c. 8 JC, | O) co | co T“ | ||||||||||||||||
| u__ | - | to | ťM | co | o | CO~ | eo | o | ’Μ | o | o_ | o | 92. | ||||||
| 5¾ O. E I | (Z) 2* | 68 | $ | 457 | 34 | o | CO | to | o | CM | o | co | o’ | o | |||||
| c | o. | — | T^- | σ> | F- | Γ** | cn | s | CO | to | o | O | F~ | ||||||
| 2 en | *. | to’ | cm | cm | cm | cm | m | co | o | co | w | to | o’ | ||||||
| K E | f- 00 | CM | CM | 89 | co CM | co | CM | CM | o O LO | ||||||||||
| UJ | xi TO | ||||||||||||||||||
| c o | CO co | 00 to | co | co O> | 8,9 | O) 00 | co | 9,1 | 9,4 | 8,2 | co | 'M' cm | 3,1 | v | |||||
| co | F- | to | co | co | CM | co | |||||||||||||
| E LU c | •JI | T“ | CM | co | CM | ||||||||||||||
| CO | CM | 'θ' | |||||||||||||||||
| TS % | u Φ Q. | co | 3,8 | 2,0 | 0,5 | CM o | o | CM | £2 o co Ό O | ||||||||||
| X | O CZ) | X Q. | 9,2 | 3,0 | ▼— co | 3,2 | co | co | 2,8 | cm | 2,3 | co cm | Q. | CM cm | °θ | CO o | |||
| Q. | CO | vP | *“ | T“ | V“ | t— | *“ | d | * | > | |||||||||
| 2.1 | Φ | ď* aJ | 5,0 | C5 tO | O to | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | 5,0 | to ’Μ | o to | c | ||||
| H co | >e | ϋ O | Ό | ||||||||||||||||
| X | to | to | to | to | to | to | to | to | to | ií) | — | lO | o | to | to | ||||
| °e'é | co | o co | CM | CM | CM | CM | CM | to | CM | CM | CM | CM | CM | c | CM | (Z) c | CM | CM | |
| —h >O E | c | CM | CM | CM | CM | cM | CM | CM | CM | CM | CM | co | ’Μ’ | co | |||||
| Z (Z) | v· | T“ | V“ | T“ | T | T- | V“ | Φ | CM | uí | CM | CM | |||||||
| σ> | o | o | O | o | o | O | O | o | o | ώ | O | O | O | O | o | ||||
| o | co | o | O | o | o | O | O | o | o | o | o | O | o | xP | o | o | |||
| £i C O b | r» | Ό O > | co | CO | co | co | co | co o | co | co | co | CO | CO | o m | co | o | co | co | |
| 13 | C | ||||||||||||||||||
| CO | TO | CM | <o | ||||||||||||||||
| & | 2 | c >w | LU | O 2 | '2 | Φ o (0 | £ | '2 | |||||||||||
| L. o | N o | N | s | CM | co | to | luče: | v | CM | co | Μ | to | Φ c | Φ c | Φ | Φ c | Φ c | ||
| s | jc o s> | TO | E 2 | raní | raní | raní | raní | raní | luát | luát | luát | *co =J | 53 3 | TO σ TO | Φ O) Φ | c v σ | Φ O) Φ | Φ O) Φ | |
| >1 | o | o. | CL | 0. | CL | CL | CL | LUI | LU | UJ | LU | UJ | LU | QC | cl | DC | Qí | CL |
·· • · »··· • · • *
Φ Φ ·* «φφφ • f • 494
Φ •
Φ Φ ·
Φ Φ
4»
9
494
Φ
Φ Φ « Φ φ φ •
φ φ
4 94
Τ abulka 1.10:
Souhrn výsledků zkoušek sloupcové stability
| Vzorek 8 | 874,7 | 514,4 | Φ | 56 | 56,4 | T™ CN IO | 1056,9 | 587,8 | 28,0 | 15,0 | 1084,9 | 602,8 | |||||||
| σ> | to | o | oo | CN | o | CN | oo | ||||||||||||
| £ | h·^ | Φ | co | σ> | φ | r- | co | o | co“ | r~ | CN | ||||||||
| φ | φ | IO | Φ | Φ | oo | co | y— | σ> | Φ | ||||||||||
| τ— | CN | IO | O | to | o | to | |||||||||||||
| £ | oo | tn | T“ | ||||||||||||||||
| Φ | co | CN | CN | V“ | O) | co | T“ | ||||||||||||
| £ | r-_ | Φ__ | o> | o> | σ> | o | σ> | V“ | σ> | ||||||||||
| O-ÍO | φ | Φ | φ | to | Γ*· | r- | o | Ύ“ | 00 | T | |||||||||
| N- | T | co | O | co | o | co | |||||||||||||
| OO | to | T“ | |||||||||||||||||
| CN | CN | t- | c- | CO | φ | o | |||||||||||||
| £ | t'-- | Φ_ | Φ | co | to’ | σ> | CN | oo | oo | 00 | |||||||||
| φ | φ | IO | IO | CO | o | CN | h* | CO | h- | co | |||||||||
| 1*» | T“ | CN | co | o | IO | O | IO | ||||||||||||
| £ | oo | m | T* | ||||||||||||||||
| T“ | Φ | to | r- | V | r-> | co | Φ | ||||||||||||
| £ | r-_ | Φ | os | φ | co | co | IO | oo | ^J· | CN | |||||||||
| φ | φ | φ | Φ | co | co | o | co | γ— | CN | Φ | |||||||||
| r>- | ▼— | o | co | O | co | ||||||||||||||
| £ | 00 | m | V“ | V | |||||||||||||||
| co | Φ | co | co | σ> | co | IO | co | ||||||||||||
| £ | r- | φ_ | φ’ | o | σ> | co | CN | co | CN | y_ | |||||||||
| N·' | φ | IO | Φ | co | co | T | in | (0 | CO | o | |||||||||
| r* | T” | CM | O) | to | o | co | |||||||||||||
| 00 | IO | v- | to | ||||||||||||||||
| N | 'φ | 00 | co | r~ | y— | Φ | |||||||||||||
| £ | r-_ | Φ | to | Φ | co | co’ | φ | h- | τ-? | φ | |||||||||
| O CN | Φ | φ | φ | r- | Φ | co | CN | CO | to | Φ | σ> | ||||||||
| h*· | v | O) | to | V | O | to | |||||||||||||
| £ | oo | IO | τ— | ||||||||||||||||
| o> | m | h- | o | co | co | co | |||||||||||||
| £ | r~._ | xř | φ | σ> | h- | CN | co | l·- | co | o | |||||||||
| φ | φ | IO | b* | Φ | co | CD | CN | co | CN | oo | |||||||||
| I- | CM | OO | O | γ— | O | to | |||||||||||||
| £ | oo | IO | T— | ||||||||||||||||
| <D | o | co | T— | Φ | O | 00 | CN | ||||||||||||
| >CZ) | r-_ | φ_ | oo | φ | Φ | oo | co | co | o | CN | |||||||||
| φ | φ | I | Φ | Φ | V | r- | CN | γ— | Φ | σ> | |||||||||
| r- | V | 0. | 1 | o | m | o | m | ||||||||||||
| <5 | 00 | «Ο | T— | ||||||||||||||||
| £ | |||||||||||||||||||
| c | o | ||||||||||||||||||
| ><d c | £1 | O) O | 'tu | ! | t | Pryskyřice nanesena, rozdělena na | |||||||||||||
| Q. cu | o | o co | £> | I | i | 1 | 10 částí | ||||||||||||
| Z | > | ||||||||||||||||||
| <D | |||||||||||||||||||
| > | I | ||||||||||||||||||
| >» | c | _ | 0) | OJ | φ | ||||||||||||||
| c | 'CD | σ | σ | σ | 3 | o | σ | CT | τ | o | |||||||||
| c | ‘to | s | E | £ | E | 2 | E | _b | <D | 2 | |||||||||
| CD | ca | •ě | E | c | c | 8 | c | c | c | c | c | Φ | c | c | c | ||||
| N Sl | o a | se o φ | 2 | 2 tó | ‘5 σ | 3 | 2 1λ | □ σ | Φ 8 | 2 s> | ‘5 CT | >O 3 O | eqe | stro | quili | ||||
| □. | č | IXS | CL | UJ | UJ | UJ | UJ | UJ | o: | UJ | UJ | ω | ± | UJ | UJ |
< · 00 • 0 0 0
0 ·
0» • 0 · »··· 00 •
• 0 «
Příklad 3 ··'«» • ·
00* *
» « ·*·
0» *» • 00J
0· · 0 0 0 0 0 0 • e »000
Zkoušky stability s naplněnými adsorpčními sloupci k určení počtu zárodků
Mikrobiologická kvalita a nezávadnost přírodních výchozích materiálů k výrobě farmaceutických přípravků získává v novější době rostoucí měrou na významu. Proto byly prováděny analýzy za účelem určení počtu zárodků ve vzorcích po pěti-, resp. osmitýdenním skladování či uchovávání sloupců podle obvyklé metodiky (pharmacoepia ...).
Výsledky stanovování počtu zárodků jsou reprodukovány v tab. II. Celkové počty zárodků pro skladovací teplotu 4 °C lze označit za malé. Pro skladovací teplotu 25 °C vykazuje voda k promývání sloupců 1,2 až 4,6 . 106 zárodků, v eluátu bylo nalezeno 80 až 170 zárodků. Je třeba ovšem poukázat na to, že skladovaná sloupcová adsorpční činidla nebyla předem ani promývána ani konzervována, byla zde tedy od začátku vystavena zvýšenému nebezpečí tvorby zárodků. Při skladování bez chlazení se proto doporučuje důkladné promývání naplněných sloupců přinejmenším vodou, vhodněji ale navíc s dodatečně stabilizovanými nebo konzervovanými promývacími roztoky, např. roztoky kuchyňské soli.
Tab. II:
Zkoušky stability k určení počtu zárodků
| Skladovací doba 5 týdnů | Skladovací doba 8 týdnů | |||
| Doba skladování při °c | 4°C | 25 °C | 4°C | 25 °C |
| Voda k promývání sloupců | 200 | 4,6* 106 | 150 | 4,6* 106 |
| Bazická prací voda | < 1 | 18 | 3 | 14 |
| Ethanolický eluát | 20 | 80 | 3,5 | 170 |
• ti · · .· :
• r ti ti ti ti ti'
Údaje v KBE/tnl (kolonie tvořící jednotky) Příklad 4:
Zkoušky stability s hluboce chlazenými naplněnými adsorpčním činidlem • ti • ti · • titi sloupci • ti ti · ti ti
V závislosti na ročním období a/nebo regionálně í
podmíněně se mohou při skladování nebo při přepravě naložených či naplněných sloupců nebo kartuší vyskytovat teploty pod bodem mrazu s nežádoucím důsledkem, že vodný obsah sloupců nebo kartuší ztuhne. Z odpovídajících zkoušek se dá potom vydedukovat, že se ukazuje, že mrznoucí proces působí negativně na eluci znovurozmrazeného sloupce nebo Kartuše. Pokud temperování sloupce nemůže být provedeno, nebo pokud skladování probíhá při hlubokých teplotách, doporučuje se k zabránění mrznutí, aby se poslední promývání provedlo místo s vodou vhodnými chladicími směsmi.
A) Provádění pokusů (zkoušek)
Z velkého počtu možných chladicích směsí, z nichž je pro vysvětlení několik takových směsí např. uvedeno v tab. III.1, byl pro další pokusy vybrán jako příklad jeden roztok kuchyňské soli. Při přidání 23 g NaCl na 100 g vody leží bod mrazu při teplotě -21 °C.
Plnění či nakládání sloupce proběhlo obvyklým způsobem. Po ukončení plnění močí bylo provedeno příslušné proplachování 3 ložnými objemy vody a potom s 2 ložnými objemy 33 %hmotn. roztokem NaCl. Nakonec byl daný sloupec skladován při teplotě -19 °C v hluboko mrazicím pultu.
4 ·· ·· · · · · 4 · ♦ · · * 4 4 4 « « 4 « • · · 4 4··· · · ·
4444 ·· «4 444 44 4444
Tab. III.1:
| Dosažitelná teplota ve °C | Látka A | [g A/100 g chladivá] | Látka B |
| -3,4 | NH4CI | 23 | Voda |
| -5,3 | NaNO3 | 43 | Voda |
| -7,8 | BaCl2 | 22 | Led |
| -10 | NaCI | 26 | Voda |
| -12 | CaCl2 · 6H2O | 71 | Voda |
| -16 | NH4SCN | 57 | Voda |
| -19 | (NH4)2SO4 | 38 | Led |
| -21 | NaCI | 23 | Led |
| -22 | CaCl2 · 6H2O | 45 | Led |
| -28 | NaBr | 39 | Led |
| -33 | MgCl2 | 22 | Led |
| -37 | 66,1% H2SO4 | 48 | Sníh |
| -40 | CaCl2 · 6H2O | 55 | Led |
| -55 | CaCl2 · 6H2O | 59 | Led |
B) Výsledky
I po 9 dnech skladování při -19 °C zůstal obsah sloupce kapalný, a sice bez příznaků eventuálního částečného ztuhnutí. Zpracování, resp. úprava sloupce, tzn. bazické promývání, eluce a regenerace proběhly normálně. Celkový obsah hormonů na TS činil přibližně 22 % hmotn. Výsledky jsou zobrazeny v tab. III.2.
Negativní účinky vysokého obsahu NaCI na obsah CE a oddělování krezolů a HPMF nebyly identifikovány.
• · ·· ·· ···· • titi ti ti titi ·* Ϊ í . ί Σ ***· ·
Souhrnně lze proto konstatovat, že stabilizace” mbčí naplněných sloupců nebo kartuši se projevuje výhodně účinkem chladicí směsi, např. vodným roztokem kuchyňské soli, a skladování či uchovávání za chlazení, např. až do -20 °C, po časová období 1,5 až 2 týdnů. Obsah sloupců nebo kartuši zůstane kapalný, zpracování sloupců či kartuši za účelem izolace CE promýváním, eluci a regenerací probíhá normálně. Negativní nálezy nebyly zjištěny ani při vysokých obsazích NaCl.
• · · · ·· · · · · * · · · · · · ·· · · ·«··
Tab. III.2:
Zkouška sloupců ohledně stability sloupcového materiálu Eluce po 9 dnech skladování, -19,1 °C, adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 200 ml ·· ·· • · · « • · · ^bl-lčasl Tok ITokl TS «rezol Krezol EquilinEquili Estron Estr hig/m HPMF Estron
Vzorky_ I |min, ml/min|BV/h| pH % mg/l mg mg/l |n mg mg/ml mg I mg TS%
Výchozí roztok: 7 I naplňte na sloupec 3 L = 35 ložných objemů
| CM | M· | 00 | o | o | |||||||||||||||||
| O | o | LO | |||||||||||||||||||
| o | CO | h* | 00 | Y~ | |||||||||||||||||
| Y- | |||||||||||||||||||||
| O | c0 | N | LÓ | o | o | CM | O | ||||||||||||||
| O) | CM | CM | CM | Y“ | |||||||||||||||||
| co | CO | ||||||||||||||||||||
| Y“ | |||||||||||||||||||||
| o | o | o | co | co | h- | N | oů | m | o | co | ''t | Y“ | y— | w | o | o | Μ- | CM | |||
| CM | CM | CO | co | y— | CO | Y” | |||||||||||||||
| <O | |||||||||||||||||||||
| M- | CO | o | o | CM | r- | h- | CO | ||||||||||||||
| o | Y- | ||||||||||||||||||||
| M· | Y— | ||||||||||||||||||||
| o | O | O | CĎ | O | O | o | O | o | o | o | LO | o | o | «0 | co | Υφ | LO | 1- | |||
| h* | Y* | co | LO | CO | Y“ | ||||||||||||||||
| O o | o | CO | |||||||||||||||||||
| CM | |||||||||||||||||||||
| CM | CM | co | r- | O> | co | CM | |||||||||||||||
| CM | σ> | ||||||||||||||||||||
| (JI | CM | ||||||||||||||||||||
| Y- | |||||||||||||||||||||
| o | o | o | o | ώ | O | o | 1 | O | o | o | O | CM | O | (JI | co | LO | co | CM | CO | ||
| ÍC Q <**> | CO | Y— | CO Y“ | Gi | CO | ||||||||||||||||
| co | y— | m | h- | N | c | co | <o | 00 | CM | r*. | CO | co | CO | co | CM | LO | |||||
| co | σ> | Y— | r- | co | σ> | >Q) | co | CO | Y” | o | O | LO | Y— | Y | LO | CM | |||||
| Y— | CM | CM | co | C | co | Y- | o | co | |||||||||||||
| Ό w | M· | ||||||||||||||||||||
| co | LO | l·- | N | co | ΙΟ | o | co | (JI | h- | o> | Y— | co | CM | Yt | |||||||
| co | o> | Y— | h- | CO | 0) | co | r- | co | o | co | co | 00 | co | CO | CM | ||||||
| Y“ | CM | CM | co | CZ) | (0 | ’Μ· | o | o | CM | CM | Y“· | ||||||||||
| 3, | o CM | Xt | |||||||||||||||||||
| i·· <D | y— | LO | LO | Y“ | γ- | ||||||||||||||||
| >N | CM | o | o | o | |||||||||||||||||
| O | |||||||||||||||||||||
| 3 | y— | CO | <0 | Tt | |||||||||||||||||
| CM | co’ | CM | CM | CM | |||||||||||||||||
| co | Y— | Y | Y | ||||||||||||||||||
| co | O) | 00 | O> | O> | o> | σι | o | o | 00 | o | m | LO | LO | LO | o | O | LO | LO | o | ||
| ^7 | M7 | xf | M7 | Na | ui | Y“· I | ui | ui | ui | ui | ui | lO | Iii | m | in | iri | |||||
| CD | M· <D | co' | 6,4 | 6,4 | 6,4 | 6,4 | jztok | h* <O | co Y— | Q. | 6,7 | 8,2 | CM co | 8,2 | 8,2 | CM | r* cd | CD* | CM oo | CM co | r- co |
| v | Y“ | Y“ | Y“ | s? | Y“ | Y— | Y— | T | Y— | Y*” | |||||||||||
| CM | N | V- | Y“ | V— | L_ | co | LÓ | O- | CM | Y“ | Y” | Y— | Y~ | Q. | CM | CM | Y— | CM | |||
| co | CO | co | co | CO | co | co | xP | co | CM | Y- | Y- | o o | *” | y— | |||||||
| Y | V- | T— | Y— | T“ | Y— | Y— | CO | co | X | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | ||
| co | o | o | o | O | O | O | O | O | LO | o | O | O | O | O | |||||||
| co | co | ||||||||||||||||||||
| co *O | Z ω | ||||||||||||||||||||
| Vo | no | O co | |||||||||||||||||||
| E | Ό | ||||||||||||||||||||
| <D | o | o | |||||||||||||||||||
| c | Jkí | > | c | ||||||||||||||||||
| '<0 | O | CO | |||||||||||||||||||
| > | rozt | x: | |||||||||||||||||||
| Y— | CM | CO | Μ- | LO | co | ho | án | UJ | |||||||||||||
| x: | £ | XZ | XZ | xz | x; | xz | υ | c | Y“ | CM | CO | M· | u> | Φ | y— | CM | CO | LO | |||
| >CI> | >(1) | >φ | >Q) | ><D | >φ | >φ | jo | 3 | C· | '> | |||||||||||
| X3 | xa | -Q | xa | xa | xa | xa | Q | O | Γ | E | C | c | C | c | c | o | 'CO | 'CO | 'CO | 'C0 | 'CO |
| ’2 | °2 | °5 | ’5 | ’? | ·? | °2 | O | Ό Ql | p | 2 | 2 | 2 | 2 | 2 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | 3 | |
| 0. | 0. | CL | 0. | CL | CL | CL | CL | > | ω | OL | CL | CL | CL | CL | CL | UJ | UJ | UJ | UJ | UJ | LU |
CM
V
X
Q.
O o
m ίο c
CO ω
| n.b. |
| n.b. |
| n.b. |
| 14,0 |
| 5,0 |
| 16,7 |
| 24 |
| 'M; o |
o lO
Φ o
Φ c
Φ o
Φ '2 <u c
φ o
tu
Qí
0) o
φ c
Φ □
£
| n.b. | n.b. |
| n.b. | n.b. |
| xá c | n.b. |
| 13,0 | |
| 5,0 | 5,0 |
| 16,7 | 16,7 |
| 24 | 24 |
| 0,4 | 0,4 |
| Regenerát 2 | Regenerát 3 |
• · · · • ·
Příklad 5:
I··· ·· ·· 9 99
Obohacování a stabilizace moči v praktické zkoušce
A) Obecná část
V praktické zkoušce (testu z praxe) by se mělo ukázat, že při dostatečném obsahu hormonů v moči lze dosáhnout dobré výsledky nejen v laboratoři, nýbrž také za výrobních podmínek. Byl proveden pokus, jak může tato zkouška probíhat ve shromažď ovacích kampaních (jímáních) na libovolných místech.
B) Provedení zkoušky (pokusu)
Čerstvá moč dostatečné kvality byla shromažďována (jímána) v příslušném hřebčinci. Při počtu tří koní a 15 až 20 1 moči/den se po 10 dnech shromáždilo zhruba 150 až 200 1 moči. K adsorpci byl proto zvolen adsorpční sloupec o velikosti (kapacitě,objemu) 5 1. Denní plnění močí bylo kromě víkendu prováděno při příslušné zkoušce(pokusu,testu) podle následujícího plánu:
Počátek jímání moči při víkendu
| Pondělí | : podávání moči ze neděle a pondělí | soboty, |
| Úterý až pátek | podávání moči z daného dne | vždy |
| Pondělí | podávání moči ze | soboty, |
Úterý neděle a pondělí eluce • · • · · · · · ·· • # · · · · · « • · · · · · ·· ·
Podávání či plnění moči při rychlosti plnění cca 4,5 ložných objemů/h proběhlo přímo na daný sloupec, pouze bavlněná svíčka s dělicí hranicí 20 pm sloužila jako předběžný filtr. Mezi jednotlivými podáními či plněními nebylo ke ztížení daných podmínek provedeno žádné proplachování vodou. V předběžných zkouškách či pokusech mohlo být přes bavlněnou svíčku dáno až 450 1 moči bez ztráty tlaku. V tomto praktickém testu se ovšem filtrace ukázala na základě nečekaně vysokého obsahu sedimentu uhličitanu vápenatého a/nebo mucinů jako obtížná.
Vždy po 40 až 50 1 došlo k zablokování s příslušným vzrůstem tlaku až na 4 bary, které učinily nutnou příslušnou výměnu filtru. Podle obsahu uhličitanu vápenatého a/nebo mucinů se proto eventuálně doporučuje přídavek filtračních pomocných prostředků.
Ačkoliv svíčka nechala projít podíly sedimentů > 20 pm, nedošlo k přidání do adsorpčního sloupce.
C) Výsledky
Obsahy hormonů
Výsledky těchto praktických zkoušek jsou uvedeny (reprodukovány) v tab. IV.
Obsahy estronu a equilinu v surové moči byly se 123 mg/l nebo 74 mg/l potěšitelně vysoké a odpovídají »· · · 4 4 4 4 · · · · · ♦ · · · · · • 4 4 4 4 4 · · · *444 44 «4 4·4 4* 4444 moči střední až dobré kvality. Nečekaně velké však byly hodnoty krezolů s 531 mg/1 v čerstvé moči, jež dosud nebyly pozorovány. Zde hraje roli otázka daného krmivá a je třeba k tomu přihlédnout. Ačkoliv se v zásadě zvládnou např. vyšší obsahy krezolů, mohou tyto obsahy přece jen v jednotlivém případě způsobit potíže. Může být proto nutné při zpracování prodloužit alkalický promývací postup, aby se krezolové hodnoty v ethanolickém eluátu minimalizovaly. Jinak adsorpce a desorpce proběhly jako obvykle. V eluátu docházelo k dobře vyjádřenému průběhu pro estron a equilin. V eluátech 2 a 3 se opět nacházelo více než 95 % estronu/equilinu. Vztaženo na obsah TS činí celkový obsah hormonů cca 30 %hmotn. Tím bylo očekávání vložené do daného pokusu(zkoušky) splněno a za obtížných zkušebních podmínek bylo dosaženo vynikajícího obohacení na obsah hormonů/TS > %hmotn.
• 9
9 99 9 · ·· · · • ♦ · · 9 9 ·
9 9 9 9 · 9 ·
VWVW V www
Tab. IV.1:
Praktická zkouška (Zkušební test) ke stabilizaci a obohacení CE
Dny zkoušek (Trvání zkoušek): 1-10 dní, plnění sloupců (7 pracovních dní) adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 5 1
Sloupec se vyjíždí zezdola nahoru.
| Estron/TS % |
| HPMF mg/1 |
| Equilin mg |
| Equilin mg/1 |
| Krezol mg |
| Krezol mg/1 |
| Estron mg |
| Estron mg/1 |
| TS % |
| X Q. |
| Tok BV/h |
| Tok ml/min. |
| (Λ c CO ·= >O E |
| Obj. 1 |
| £ o 2 |
O) x:
O) x:
O)
| 42,5 |
| 37,4 |
| 531,1 |
| 112,5 |
| co |
| 9,0 |
| 140 |
ω £
o 'Ň
O o
£
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o |
| o | o | o | o | O | o | o | o | o | O | o | o | o | o |
| O | 2490 | 2450 | 4080 | 3580 | 5370 | o o O) | 8360 | 5810 | 6050 | 6210 | 5090 | 6680 | 6550 |
| 0‘0 | 249 | 245 | 408 _ | 358 | 537 | 901 | 836 | V CO m | 605 | 621 | 509 | 668 | 655 |
| o | O | O | o- | O | O | O | O | o | O | O | O | O | O |
| 8,7 | |||||||||||||
| <0 | ’Μ· | co | xt | CM in | xt | X” Tř | <□ un | <X5 | xt | xfr | o‘s | ||
| 384,6 | 370,4 | 370,4 | 357,1 | 370,4 | 434,8 | 344,8 | 344,8 | 344,8 | 416,7 | 400,0 | 370,4 | 370,4 | 416,7 |
| 26 | 27 | 27 | 28 | 27 | 23 | 29 | 29 | 29 | 24 | 25 | 27 | 27 | 24 |
| O V | o | o | O T~ | o | o | O x— | o | o | O T— | O T“ | o | o | O x— |
| Průběh 1 | Průběh 2 | Průběh 3 | Průběh 4 | Průběh 5 | Průběh 6 | Průběh 7 | Průběh 8 | Průběh 9 | l Průběh 10 | Průběh 11 | Průběh 12 | Průběh 13 | Průběh 14 |
ti ti • ti • · · ···· titi • ti ti ti · · ti · • tititititi titi ·
Tab. IV.1:
Praktická zkouška (Zkušební test) ke stabilizaci a obohacení CE
Dny zkoušek (Trvání zkoušek): 1-10 dní, plnění sloupců (7 pracovních dní) adsorpční činidlo: XAD 7, objem = 5 1
Sloupec se vyjíždí zezdola nahoru.
| Estron/TS % |
| HPMF mg/l |
| Equilin mg |
| Equilin mg/l |
| Krezol mg |
| Krezol mg/l |
| Estron mg |
| Estron mg/l |
| TS % |
| X o. |
| Tok BV/h |
| Tok ml/min. |
| CZ» c co .5 >O E |
| Obj. I |
| Ě o s |
| 42,5 |
| 37,4 |
| 531,1 |
| 112,5 |
| co |
| 9,0 |
| 140 |
| Výchozí obsah |
| O | O | O | O | O | O | O | O | O | O | σ | O | O | O |
| o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o | o |
| o | o | O | o | o | o | o | ώ | o | o | o | o | o | o |
| O) | m | eo | 00 | h* | v- | CO | to | σ> | co | to | |||
| o | in | CO | o | co | co | o | CM | o | co | IO | |||
| CM | CM | xj· | CO | to | σ» | co | to | CO | CO | to | co | co | |
| ώ | 0» | to | eo | to | r- | y— ‘ | (0 | T“ | to | v· | 0» | co | to |
| ’Μ’ | o | to | co | O | co | co | o | CM | o | co | to | ||
| CM | CM | Xt | co | to | o> | co | to | co | CO | lO | co | co | |
| o | O | O | o | o | o | o | o | o | o | o | O | o | o |
| h- | |||||||||||||
| CO | |||||||||||||
| to | Xf | xt | co | (M | r- | T— | v | o | co | xf | xt | o | |
| xf- | Xfr | to | xf | xfr | to | xf | xf | xj- | in | ||||
| to | ’Μ- | xt | V“ | Xf | co | co | co | co | o | Xt | xt | b- | |
| o | o | f- | o | xf | xf | co | o’ | o | o | co | |||
| co | r- | r-~ | to | r- | co | xt | T” | o | b- | b~ | •r— | ||
| co | CO | CO | co | CO | co | co | co | Xť | CO | CO | Xj* | ||
| <0 | s | s. | co | r- | co | σ» | O) | ó> | xr | to | b- | s | Xt |
| CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM | CM |
| O | O | O | O | O | O | O | O | ώ | O | O | O | O | O |
| V“ | τ— | V | T | T— | V“ | ||||||||
| O | CM | CO | |||||||||||
| t— | CM | <0 | xfr | m | CO | l~ | co | o> | V | T- | T— | v- | τ— |
| £ | E | x: | x: | e | £ | JZ | x: | .c | E | x: | x: | JZ | x= |
| ><D | ><D | ><D | >tl) | »<D | ><D | ><D | ><D | >Q) | >0 | >φ | >o | ><u | >Q) |
| n | jo | jo | JO | JO | JO | jo | JO | JO | JO | JO | JO | JO | |
| •2 | rů | •2 | °2 | ’2 | ru o | °2 | o ru | '2 | o k. | o=3 k. | •2 | o | °2 |
| CL | CL | CL | CL | CL | CL | CL | 0. | CL | CL | CL | CL | CL | CL |
• ·
Počty zárodků
Kromě adsorpce moče byl bakteriální vzrůst zárodků existujících podmínkách:
• · «·»· «« «« ««· «· ·««« vyšetřován eventuální daného sloupce. Při
1. podávání (plnění) kontaminované surové moče (filtrací pomocí bavlněných svíček nejsou odděleny žádné zárodky)
2. žádného proplachování po denním podávání (plnění)
3. provádění pokusu či zkoušky při teplotě místnosti
4. době trvání pokusu (zkoušky) 10 dní nebylo možno osídlení sloupce zárodky a k tomu připojený vzrůst zárodků vyloučit. Určení celkového počtu zárodků při různých adsorpčních krocích dalo následující výsledek:
| Vzorek | Celkový počet zárodků / ml |
| Surová moč | 1,1 x 10 8 |
| Prací voda sloupců po 10 dnech | 1,1 x 108 |
| Zásaditá prací voda | < 1 |
| Hlavní eluát | 1,5 |
D) Souhrn výsledků
Po dobu zkoušky 10 dní byla čerstvá moč dávána denně na sloupec adsorpčního činidla (adsorpční sloupec) o objemu 5 1. Celkový objem moči činil 140 1 s průměrným obsahem estronu nebo equilinu 123 mg/1 nebo 74 mg/1.
·· ·· ·· ··»· ·· · · to * to to · ♦ to ««to·
Proplachování sloupce vodou po denní adsořpcf moci Vylo vědomě opomíjeno. V obou velmi výrazně se vyskytujících hlavních eluátech se nacházelo cca 93 % estronu nebo equilinu.
Celkový obsah hormonů daného eluátu vztažený na TS činil přibližně 30 % hmotn. Další překvapující výsledek se vztahuje k eventuálnímu (představitelnému) zaklíčkování nebo početí zárodků ve sloupcích. Zde nebyl přes podávání vysoce zaklíčkované (zazárodkováné) surové moče zaznamenán ani po 10 dnech nárůst daného sloupce. Příslušný eluát byl při 1,5 zárodcích/ml prakticky bez zárodků. Za obtížných podmínek se tím ve větším měřítku prokázalo, že při dostatečném obsahu hormonů v surové moči mohou být stabilizace a obohacení splněny na obsah hormonů/TS o více než 15 % s adsorpčním sloupcem v dobré kvalitě.
Příklad 6:
Filtrační zkoušky s filtračními svíčkami
V dalším praktickém testu byly provedeny filtrační zkoušky s filtračními svíčkami, jejichž výsledky mohou být shrnuty následovně:
Použitý materiál: čerstvá moč (původ z německého hřebčince)
Zčásti namíchaná, v sudech shromážděná či do sudů jímaná moč březích klisen byla ze sudů přečerpávána pomocí hadicového čerpadla přes předfiltr (váček či pytlík 5μ) do příslušné nádrže či kontejneru. V kontejneru zůstal sediment o 0,5 %hmotn.
9 9 * 9 9 9
9 9
9 ·
Schématické znázornění daného postupu filtr’ácě* reprodukováno (uvedeno) na obr. 2.
♦ 4 9999 99 44 ♦ 4 9 4 4 4 · 4 4 4 4 4 · 4 4 • · 4 * 4 4 surové moci je
1. zkouška:
Pytlík (sáček) Filtrační svíčky Absolutní svíčky Naplnění sloupců Sediment ve filtrátu
2. zkouška:
Pytlík (sáček) Filtrační svíčky Absolutní svíčky Naplnění sloupců Sediment ve filtrátu
3. zkouška:
Pytlík (sáček) Filtrační svíčky Absolutní svíčky Naplnění sloupců Sediment ve filtrátu μ
μ, 3 μ, 1 μ zapojeny do série (řady) 2 x 1, 2 μ paralelně zapojeny 95 1 filtrátu
0,000 % μ
μ, 3 μ, 1 μ zapojeny do série (řady) 2 x 3 μ paralelně zapojeny 142 1 filtrátu
0,001 % μ, 1 μ zapojeny do série (řady) x 1 μ paralelně pojeny 160 1 filtrátu
0,000 %
Na příslušný pokus či zkoušku byl odebírán příslušný vzorek za absolutní svíčkou (membránovým filtrem). Každých 100 1 byl odebírán příslušný vzorek z odtoku za daným sloupcem.
Celkové (na)plnění sloupce: 397 1 filtrátu
Obsah sušiny po zpracování (TS) činil 5,9 % hmotn.
řooz-^ov
Claims (4)
1. Způsob praktického, decentralizovaného obohacování a stabilizace směsí konjugovaných estrogenů (CE) z moči březích klisen (PMU), vyznačující se tím, že
- přirozená směs konjugovaných estrogenů (CE) obsažená v moči březích klisen (PMU) se obohacuje a stabilizuje na pevném nosiči (= adsorpčním činidle), přičemž
- předem dané celkové množství předem hrubě mechanicky předčištěné močové kapaliny je čerpáno kontinuálně ze zásobní nádoby nebo v přetržitých dílčích množstvích předem danou ry chl ostí toku vzpřímeně uspořádanou kartuši a odtékající močová kapalina je vyřazována, přičemž
- daná kartuše je plněna příslušnou kapalinou obklopeným adsorpčním činidlem vhodným k adsorpci předem definovaného množství směsi konjugovaných estrogenů (CE) obsažené v močové kapalině, a přičemž
- jako kontrola konečného bodu pro naplnění adsorpčního činidla je za předem dané, maximální celkové množství kartuši čerpané močové kapaliny odsouhlasena maximální plnicí kapacita adsorpčního činidla pro konjugované estrogeny (CE) obsažené v močové kapalině.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačujícího se tím, že vnitřní rozměry kartuše pro adsorpční lože jsou dimenzovány tak, že daná kartuše může zaujímat 30 až 50 1 adsorpčního činidla a že PMU či moč březích • 4 4444
4 4 4 4·· klisen od vstupu do výstupu musí urazit cestu 120 cm.
od 80 do
44 4 4
4 4 4 4
4 4 ·
4 4 4 • 4 ·
44 4444
3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že ve způsobu použitá kartuše je složena z proti úderu odolného laboratorního skla, umělých hmot a/nebo kovu.
4. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako čerpadlo se použije šroubové jednovřetenové čerpadlo, hadicové čerpadlo nebo membránové čerpadlo.
5. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako měřič toku nebo proudění se použije rotametr s plovoucím tělískem, měřič proudění s nastavovacími křídly nebo indukční měřič proudění.
6. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že k měření množství močové kapaliny čerpané kartuší se použije průtokoměr, přednostně vodoměr nebo indukční průtokoměr.
7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že rychlost proudění, což znamená rychlost plnění, leží v rozsahu 3 až 10 adsorpčních ložných objemů/h, přednostně 4 až 6 adsorpčních ložných objemů.
8. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že jako adsorpční činidlo jsou použity polymerní adsorpční pryskyřice, křemičitý gel nebo RP-křemičitý gel,
4444 ··
44 444· • 4 ♦ 4 4 4
44 4 44 zejména polymerní adsorpční činidla, přednostně semipolární polymerní adsorpční činidla.
44 44 ’ 4 4 I
4 4 4
44 4444
9. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že maximální celkové množství močové kapaliny činí 20 až 60 adsorpčních ložných objemů, přednostně 30 až 40 adsorpčních ložných objemů.
10. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kartuše po naplnění adsorbentu je proplachována množstvím PMU odpovídajícím celkovou kapacitou zhruba kapacitě adsorbentu PMU nebo také již před dosažením celkové plnicí kapacity po libovolných jednotlivých dílčích plnicích krocích vodou a/nebo jiným vhodným vodným promývacím roztokem.
11. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že kartuše ti po naplnění adsorbéru v žádoucím případě je nejprve propláchnuta vodou a/nebo jiným vhodným vodným promývacím roztokem a nakonec za účelem další stabilizace konzervujícím roztokem, např. roztokem obsahujícím konzervační prostředek, vodným roztokem k nastavování pH a/nebo vodným solným roztokem.
12. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že močová tekutina ze zásobní nádrže je čerpána nejprve přes jeden nebo několik předběžných filtrů, výhodně nejméně přes jeden hloubkový filtr nebo jeden náplavový filtr předtím, než se močová kapalina čerpá přes kartuši.
•0 0000 00 00 ♦ 0 · 0*00
0 0 000 0 0 0
4 44 vyznačující se tím, že daným měření sloužícímu k průtoku přes kartuší je vodoměr nebo
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10037389A DE10037389A1 (de) | 2000-08-01 | 2000-08-01 | Verfahren und Vorrichtung zur Anreicherung und Stabilisierung von konjugierten Oestrogenen aus Stutenharn |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ20021409A3 true CZ20021409A3 (cs) | 2002-08-14 |
| CZ303159B6 CZ303159B6 (cs) | 2012-05-09 |
Family
ID=7650908
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20021409A CZ303159B6 (cs) | 2000-08-01 | 2001-07-26 | Zpusob a zarízení k obohacování a stabilizaci smesi konjugovaných estrogenu z moci brezích klisen |
Country Status (25)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US7081451B2 (cs) |
| EP (1) | EP1307210B1 (cs) |
| CN (1) | CN100482239C (cs) |
| AT (1) | ATE328600T1 (cs) |
| AU (1) | AU785438B2 (cs) |
| BG (1) | BG65554B1 (cs) |
| BR (1) | BR0107062B1 (cs) |
| CA (1) | CA2410654C (cs) |
| CZ (1) | CZ303159B6 (cs) |
| DE (2) | DE10037389A1 (cs) |
| EE (1) | EE04541B1 (cs) |
| ES (1) | ES2266221T3 (cs) |
| HR (1) | HRP20020248B1 (cs) |
| HU (1) | HU228396B1 (cs) |
| IL (1) | IL148878A0 (cs) |
| MX (1) | MXPA02002835A (cs) |
| NZ (1) | NZ518645A (cs) |
| PL (1) | PL202238B1 (cs) |
| PT (1) | PT1307210E (cs) |
| RS (1) | RS50238B (cs) |
| RU (1) | RU2277241C2 (cs) |
| SI (1) | SI1307210T1 (cs) |
| SK (1) | SK287663B6 (cs) |
| UA (1) | UA79067C2 (cs) |
| WO (1) | WO2002009732A2 (cs) |
Families Citing this family (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10159161A1 (de) * | 2001-12-01 | 2003-06-18 | Solvay Pharm Gmbh | Verfahren zur Gewinnung von Oestrogenen aus Stutenharn |
| US8349819B2 (en) * | 2002-10-09 | 2013-01-08 | Dr. Reddy's Laboratories New York, Inc. | Steroid extraction process from urine sources |
| ATE410435T1 (de) * | 2003-07-17 | 2008-10-15 | Solvay Pharm Gmbh | Verfahren zur gewinnung eines natürlichen gemisches konjugierter equin esrtrogene |
| US20070161779A1 (en) * | 2003-10-24 | 2007-07-12 | Thorgard Pharmaceuticals (Aust) Pty Ltd | Estrogen Extraction From Pregnant Animal Urine |
| ITMI20052516A1 (it) | 2005-12-29 | 2007-06-30 | Evultis Sa | PROCESSO PER L'ISOLAMENTO DI PèRINCIPI FARMACOLOGICAMENTE ATTIVI DI ORIGINE VEGETALE ED ANIMALE |
| US20070212751A1 (en) * | 2006-01-18 | 2007-09-13 | Solvay Pharmaceuticals Gmbh | Microbial method for the 11beta hydroxylation of 9beta, 10alpha-steriods |
| CA2761844C (en) | 2009-05-14 | 2017-11-28 | University Health Network | Quantitative endoscopy |
| US10391419B1 (en) | 2015-02-12 | 2019-08-27 | Nostrum Pharmaceuticals. Llc. | Isolation and purification of conjugated estrogens |
| AU2017260320B2 (en) * | 2016-05-05 | 2021-11-11 | Indiana University Research & Technology Corporation | Quantitative profiling of progesterone metabolites for the prediction of spontaneous preterm delivery |
| RU180071U1 (ru) * | 2016-05-23 | 2018-05-31 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Федеральный исследовательский центр "Казанский научный центр Российской академии наук" | Линия получения лекарственного средства Na-, Fe-, Ca-полигалактуронат |
| US11014025B1 (en) * | 2020-03-06 | 2021-05-25 | Kevin-Steven Creagh Buford | Pressurized filtration system and device for rapid extraction and recycling of medication from body fluid |
| CN116920459B (zh) * | 2023-09-15 | 2023-11-24 | 东营平明医药科技有限公司 | 一种2-巯基苯并噻唑粗品的提纯装置 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2519743A (en) * | 1947-12-29 | 1950-08-22 | Ivy H Dameron | Adjustable protector cap |
| US2578729A (en) * | 1948-09-21 | 1951-12-18 | Upjohn Co | Extraction of hydrolyzed estrogens from urine |
| US2565115A (en) * | 1948-10-28 | 1951-08-21 | Squibb & Sons Inc | Method of obtaining a conjugated estrogen preparation |
| US2834712A (en) * | 1953-05-27 | 1958-05-13 | American Home Prod | Urinary estrogen compositions and methods for preparing them |
| GB821989A (en) | 1957-11-06 | 1959-10-14 | Ayerst Mckenna & Harrison | Urinary estrogen compositions and methods for preparing them |
| DE1245373B (de) * | 1964-02-06 | 1967-07-27 | Vni Chimiko Pharmazewtitschesk | Verfahren zur Isolierung von Steroiden aus Kulturfluessigkeiten |
| NL7111863A (cs) | 1970-10-13 | 1972-04-17 | ||
| US3769401A (en) * | 1970-11-19 | 1973-10-30 | Frosst & Co | Chemical process |
| US4379845A (en) * | 1981-07-23 | 1983-04-12 | Nabisco Brands, Inc. | Yeast process and product |
| GB2230856A (en) * | 1989-04-13 | 1990-10-31 | St Thomas Hosp Med School | Storing urine samples |
| HU9500322D0 (en) * | 1994-02-08 | 1995-03-28 | Solvay Deutschland | Process for separating estrogenes from the urine of mares with foal |
| HU9500323D0 (en) * | 1994-02-08 | 1995-03-28 | Solvay Deutschland | Process for separating estrogenes from urine of mares with foal |
| PL185920B1 (pl) * | 1996-08-30 | 2003-08-29 | Solvay Pharm Gmbh | Sposób otrzymywania estrogenów z moczu klaczySposób otrzymywania estrogenów z moczu klaczy |
| DE59610985D1 (de) | 1996-08-30 | 2004-05-19 | Solvay Pharm Gmbh | Verfahren zur gewinnung von oestrogenen aus stutenharn |
| CN1278432A (zh) * | 1999-06-22 | 2001-01-03 | 中国科学院新疆化学研究所 | 从孕尿液中提取雌性激素的新方法 |
| DE10048524A1 (de) * | 2000-09-29 | 2002-06-06 | Solvay Pharm Gmbh | Kresolabtrennung aus Stutenharn |
| US6855704B2 (en) * | 2002-10-09 | 2005-02-15 | Apr Llc | Process for isolating conjugated estrogens |
-
2000
- 2000-08-01 DE DE10037389A patent/DE10037389A1/de not_active Withdrawn
-
2001
- 2001-07-26 IL IL14887801A patent/IL148878A0/xx unknown
- 2001-07-26 HU HU0301283A patent/HU228396B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 MX MXPA02002835A patent/MXPA02002835A/es active IP Right Grant
- 2001-07-26 AT AT01955372T patent/ATE328600T1/de active
- 2001-07-26 RS YU24102A patent/RS50238B/sr unknown
- 2001-07-26 CA CA2410654A patent/CA2410654C/en not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-26 AU AU77553/01A patent/AU785438B2/en not_active Ceased
- 2001-07-26 RU RU2002110100/15A patent/RU2277241C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 BR BRPI0107062-2A patent/BR0107062B1/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 SI SI200130560T patent/SI1307210T1/sl unknown
- 2001-07-26 SK SK442-2002A patent/SK287663B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 WO PCT/EP2001/008657 patent/WO2002009732A2/de not_active Ceased
- 2001-07-26 EE EEP200200170A patent/EE04541B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 PT PT01955372T patent/PT1307210E/pt unknown
- 2001-07-26 HR HR20020248A patent/HRP20020248B1/xx not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 CN CNB018022588A patent/CN100482239C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2001-07-26 NZ NZ518645A patent/NZ518645A/en not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 ES ES01955372T patent/ES2266221T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-26 EP EP01955372A patent/EP1307210B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-26 DE DE50110057T patent/DE50110057D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-07-26 PL PL354451A patent/PL202238B1/pl unknown
- 2001-07-26 CZ CZ20021409A patent/CZ303159B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-07-26 UA UA2002043558A patent/UA79067C2/uk unknown
-
2002
- 2002-04-01 US US10/112,040 patent/US7081451B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-04-25 BG BG106649A patent/BG65554B1/bg unknown
-
2005
- 2005-06-01 US US11/141,390 patent/US7074325B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2006
- 2006-06-13 US US11/451,472 patent/US7524833B2/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SK4422002A3 (en) | Method and device for concentrating and stabilising conjugated oestrogens from the urine of mares | |
| IL273490B1 (en) | Method and system for treating and/or purifying water | |
| CA2263757C (en) | Method to obtain oestrogens from mare's urine | |
| Imbrogno et al. | Estradiol uptake in a combined magnetic ion exchange-ultrafiltration (MIEX-UF) process during water treatment | |
| CA2468933C (en) | Method for obtaining oestrogen from mare's urine | |
| CZ59999A3 (cs) | Způsob k získání estrogenů z moči klisen | |
| Kraicer et al. | Adenohypophysial DNA and RNA after adrenalectomy, castration, and PTU | |
| US7964586B2 (en) | Method for obtaining a natural mixture of conjugated equine estrogens | |
| ZA200502494B (en) | Method for extracting a natural mixture of conjugated equine estrogens that is deplated of non-conjugated lipopilic compounds | |
| DE3629985A1 (de) | Verfahren zur trennung von corrinoiden |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20150726 |