CZ20022675A3

CZ20022675A3 - Nový způsob kondenzace

Info

Publication number: CZ20022675A3
Application number: CZ20022675A
Authority: CZ
Inventors: Jörgen Alvhäll; Daniel Edvardsson; Panagiotis Ioannidis; Magnus SJÖGREN; Maria Szönyi
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 2000-02-07
Filing date: 2001-01-30
Publication date: 2002-11-13
Also published as: SE0000382D0; CN1227227C; NO20023714L; EP1257533A1; MXPA02007388A; ZA200205235B; AU769009B2; US6518434B2; NZ519946A; NO20023714D0; HUP0300381A3; CN1398255A; WO2001056986A1; SK11252002A3; PL358006A1; CA2396743A1; BR0108130A; AU3251601A; KR20020073202A; HUP0300381A2

Description

Nový způsob kondenzace

Oblast techniky

Vynález se týká nového způsobu výroby sloučenin obsahujících peptidické vazby.

Dosavadní stav techniky

Obecně je dobře známo, že peptidické vazby se typicky tvoří kondenzací aminu a karboxylové kyseliny.

Takové kondenzační reakce se často provádějí v přítomnosti tak zvaných „kondenzačních činidel jako oxalylchloridu, EDC (hydrochloridu 1-(3-dimethylaminopropyl)-3-ethylkarbodiimidu), DCC (dicyklohexylkarbodiimidu), isobutylchloroformiátu, HBTU ([Ν,Ν,Ν',N'-tetramethyl-O-(benztriazol-l-yl)uronium-hexafluorfosfátu]), HATU (0-(azabenztriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluroniumhexafluorfosfátu) nebo TBTU ([N,N,N',N'-tetramethyl-O(benzotriazol-l-yl)uroniumtetrabluoroborátu]) a vhodné báze.

Taková činidla, která se typicky používají pro zvýšení účinnosti kondenzační reakce a/nebo výtěžku „kondenzovaného produktu mají nevýhodu v tom, že jsou drahá. Mohou dále podporovat vedlejší reakce a/nebo tvorbu vedlejších produktů, což vede k tomu, že kondenzovaný produkt se musí před použitím čistit a/nebo se do životního prostředí vypouští nepřijatelné množství chemických odpadů.

Existuje tedy potřeba zlepšeného, nákladově' efektivního způsobu tvorby peptidické vazby. Takový způsob by s výhodou minimalizoval množství potřebných činidel a tedy množství vedlejších reakcí a vytvářených vedlejších produktů a nutnost jejich odstranění před dalším zpracováním kondenzovaného produktu.

Evropský patentový spis EP 168,769 a EP 336,368 a US patent 5,359,086 popisují kondenzace N-karboxyanhydridů (NCAs) s cyk·♦ • · · ·

• · • · ·· lickými aminokyselinami, jako prolinem a jeho estery. V těchto dokumentech není žádná zmínka o kondenzaci NCAs s amidy cyklických aminokyselin.

Bylo překvapivě zjištěno, že peptidické vazby se mohou tvořit efektivním jednostupňovým postupem, ve kterém se NCAs kondenzují přímo mezi jiným s amidy cyklických aminokyselin.

Podstata vynálezu

Podle prvního aspektu se předkládaný vynález týká způsobu výroby sloučeniny obecného vzorce I,

(l) kde R¹ je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná a/nebo ukončená jedním nebo více substituenty vybranými z atomu halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)2NH2, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR⁵, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)2R⁸r skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R² je alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, -A¹cykloalkylová skupina obsahující v cykloalkylové části 4 až 8 atomů uhlíku nebo -A¹-arylová skupina obsahující v arylové části 6 až 10 atomů uhlíku, všechny skupiny jsou popřípadě substituovány jedním nebo více substituenty vybranými z alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku (kterážto je popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy halogenu), methylendioxyskupiny, atomu halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)2NH2, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR⁵, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)₂R% skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R³ je skupina N(R¹²)R¹³ nebo skupina CH(R¹²)R¹³, ···· • ··

R¹³ je vždy skupina fenylová, skupina alkylfenylová obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku nebo skupina (CO)fenylová, všechny skupiny jsou popřípadě substituovány jedním nebo více substiutenty vybranými z kyanoskupiny, amidinoskupiny, hydroxyamidino skupiny, atomu halogenu, alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku (kterážto je popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy halogenu), skupiny SR⁶, skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R⁹ a R¹⁰ nezávisle jsou při každém výskytu atom vodíku, alkylová skupina .obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo skupina C(O)R¹⁴,

A¹ je vždy jednoduchá vazba nebo alkylenová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, n je 1,2 nebo 3,

R⁵ je vždy atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo skupina alkylfenylová obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku, kde poslední skupina je popřípadě substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými z alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku (kterážto je popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy halogenu), methylendioxyskupiny, atom halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)2NH2, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR^5a, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)2R⁸, skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R⁴, R^5a, R⁶, R¹¹, R¹² a R¹⁴ nezávisle jsou vždy atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a

R⁷ a R⁸ nezávisle jsou vždy alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, kde způsob zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce II, • · · · ····

kde R¹ a R² mají shora uvedený význam, se vzorce III, sloučeninou obecného tl)n

R“ (III) kde R³ a n jsou definovány výše, a tento způsob je níže nazýván jako „způsob podle vynálezu.

Alkylové skupiny, které jsou reprezentované skupinami R¹, R², R⁴, R⁵, R^5a, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹² a R¹⁴ a kterými mohou být substituovány skupiny R², R⁵ a R¹³, mohou být lineární nebo, při dostatečném počtu (tj. tří) atomů uhlíku, rozvětvené a/nebo cyklické. Při dostatečném počtu (tj. čtyř) atomů uhlíku, mohou být dále takové alkylové skupiny z části cyklické/acyklické. Alkylové skupiny mohou být nasycené nebo při dostatečném počtu (tj. dvou) atomů uhlíku nenasycené a/nebo přerušené atomem kyslíku.

Pro vyloučení pochybností, místo připojení alkylfenylových skupin representovaných skupinami R⁵ a R¹³ je v alkylové části takových skupin. Alkylová část těchto skupin může být lineární nebo při dostatečném počtu (tj. tří) atomů uhlíku rozvětvená. Takové alkylové skupiny mohou být nasycené nebo při dostatečném počtu (tj. dvou) atomů uhlíku nenasycené a/nebo přerušené atomem kyslíku.

Alkylenové řetězce, které mohou reprezentovat skupinu A¹, mohou být lineární nebo při dostatečném počtu (tj. dvou) atomů uhlíku rozvětvené. Takové řetězce mohou být nasycené nebo při dostatečném počtu (tj. dvou) atomů uhlíku nenasycené a/nebo přerušené atomem kyslíku.

Jak je uvedeno dále, pojem „halogen značí atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

Výhodné významy skupin R¹ zahrnují alkylové skupiny obsahující 1 až 3 atomy uhlíku (např. ethylovou nebo obzvláště methylovou skupinu) substituované a/nebo ukončené substituentem C(O)OR⁵, a obzvláště je-li alkylová skupina alkylová skupina obsahující 2 až 3 atomy uhlíku taková, ve které případný substituent C(O)OR⁵není umístěn na atomu uhlíku, ke kterému je připojena skupina NH. Výhodný význam skupiny R⁵ zahrnuje atom vodíku, lineární nebo rozvětvenou alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku (např. isopropyl nebo ethyl) nebo alkylfenylovou skupinu obsahující v alkylové části 1 až 2 atomy uhlíku (např. benzyl).

Výhodné významy skupin R² zahrnují skupinu -A¹-cykloalkylovou obsahující v cykloalkylové části 5 až 7 atomů uhlíku nebo skupinu -A¹-fenylovou, ve kterých v obou případech je A¹ jednoduchá vazba nebo alkylenovou skupinu obsahující 1 až 2 atomy uhlíku. Zvláště výhodné skupiny R² zahrnují skupinu cyklohexylovou.

Výhodné významy skupin R³ zahrnují skupinu N(R¹²)R¹³, ve které R¹²je alkylová skupina obsahující 1 až 2 atomy uhlíku nebo obzvláště atom vodíku a R¹³ je alkylfenylová skupina obsahující v alkylové části 1 až 2 atomy uhlíku (např. benzylová skupina), kde posledně jmenovaná skupina je substituovaná amidinovou skupinou, hydroxyamidinovou skupinou nebo s výhodou kyanoskupinou, kde substituent je s výhodou v poloze 4 fenylové části této skupiny (vzhledem k alkylové části obsahující 1 až 2 atomy uhlíku). Jestliže skupina R¹³ je alkylfenylová skupina substituovaná ve fenylové části amidinoskupinou, hydroxyamidinoskupinou nebo kyanoskupinou, další skupiny, které se mohou dále zmínit, zahrnují takové, které jsou také popřípadě substituované ve fenylové části jedním nebo více atomy halogenu (např. fluoru).

-··. :··· • ···

·· ··..

Výhodné hodnoty n zahrnují 2 a obzvláště 1.

Postup podle vynálezu se s výhodou provádí v přítomnosti vhodné báze a vhodného rozpouštědlového systému, kde rozpouštědlový systém může obsahovat vodná a/nebo organická rozpouštědla. Báze a rozpouštědlový systém, který se používá, by neměl reagovat s reaktanty nebo již vytvořenými produkty nebo v nich způsobovat stereochemické změny nebo poskytovat jiné vedlejší reakce.

Vhodné báze zahrnují anorganické báze, jako hydroxidy, alkoxidy, hydrogenuhličitany nebo uhličitany alkalických kovů (jako sodíku nebo draslíku), nebo organické báze jako běžné terciární aminy (např. triethylamin, diisopropylethylamin a N-methylmorfolin). Zvláště výhodné báze zahrnují aminové báze.

Vhodná vodná rozpouštědla zahrnují vodu. Vhodná organická rozpouštědla zahrnují acetáty (např. ethylacetát, isopropylacetát, butylacetát), acetonitril, toluen, dichlormethan, tetrahydrofuran, dimethylformamid a směsi kterýchkoliv těchto rozpouštědel.

S výhodou je v používaném rozpouštědlovém systému přítomna voda. Nalezli jsme s výhodou, že při použití vody jako rozpouštědla, není efektivita postupu citlivá na vlastnostech tuhé fáze použitého aminu obecného vzorce III.

NCA sloučeniny obecného vzorce II jsou běžně známé nebo se mohou připravit pomocí běžných technik (viz, například, analogické postupy popsané v německém patentovém spisu DE 4011171 a mezinárodním patentovém spisu WO 96/12729).

Například, sloučenina obecného vzorce II se může reakcí aminokyseliny obecného vzorce IV, připravovat :··· • ·· ····

OH (IV)

R¹\ kde R¹ a R² jsou definovány shora, s fosgenem. Tato reakce se může, například, provádět za zvýšené teploty (např. mezi 30 °C a teplotou varu) v přítomnosti vhodného rozpouštědla, jako tetrahydrofuranu.

Sloučenina obecného vzorce IV, ve které R¹ je popřípadě substituovaná/zakončující alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a která je popřípadě ve formě kyselé adiční soli (např. halogenovodíkové kyseliny) , se může připravovat reakcí příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, nebo jejich kyselé adiční soli (např. halogenovodíkové nebo alkylsulfonové kyseliny) se sloučeninou obecného vzorce V,

R^la-I? (V) kde L¹ je vhodná odstupující skupina (jako atom halogenu (např. Cl, Br nebo I), triflát, tosylát, mesylát, atd.) a R^la je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná a/nebo ukončená jedním nebo více substituenty vybranými z atomu halogenu, kaynoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)₂NH₂, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR⁵, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)2R% skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹ a skupiny R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰ a R¹¹ mají shora uvedený význam. Tato reakce se může, například, provádět mezi teplotou místnosti a teplotou refluxu ve vhodném rozpouštědlovém systému (např. vodná a/nebo organická rozpouštědla (jako tetrahydrofuran, ethylacetát, toluen, acetonitril, atd.), zahrnujícím směsi voda/ tetrahydrofuran a směsi voda/ethylacetát, popřípadě v přítomnosti báze (např. anorganické báze, jako hydrogenuhličitanu draselného) . Odborník si je vědom, že může být žádoucí před provedením této reakce chránit karboxylovou skupinu příslušné slou. :··· ϊ ··· • · ···· ceniny obecného vzorce IV vhodnou chránící skupinou (např. benzylovou skupinou).

Sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku a které jsou popřípadě ve formě kyselých adičních solí (např. kyseliny halogenovodíkové) se mohou připravovat hydrolýzou příslušné sloučeniny obecného vzorce II, ve kterém R¹ je atom vodíku, za vhodných reakčních podmínek. Odborník si je vědom, že je možno a/nebo žádoucí chránit karboxylovou skupinu výsledné sloučeniny obecného vzorce IV vhodnou chránící skupinou (např. benzylovou skupinou) provedením této hydrolýzy v přítomnosti vhodného chránícího činidla (např. benzylalkoholu).

Jinak se mohou sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterých R¹ je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituované nebo ukončené skupinou C(O)OR⁵ za předpokladu, že v případě alkylové skupiny obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupina C(O)OR⁵není připojena na atom uhlíku, ke kterému je připojena také skupina NH, připravovat hydrogenací příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, buď v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce VI

OHC-R^lb (VI), nebo sloučeniny obecného vzorce VII,

R^aQ

(VII)

R^aO ve kterých v obou případech R^lb je skupina C(O)OR⁵ nebo alkylová skupina obsahující 1 až 2 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ a skupina R5 je definována shora, a v případě sloučeniny obecného vzorce VII skupiny R^a jsou buď samostatně alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo jsou spojeny dohromady za vzniku alkylenového řetězce obsahu.’·.···· : :···. : * · í »♦ ·· ··· jícího 2 až 4 atomy uhlíku, za vhodných reakčních podmínek. Reakce sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, se sloučeninou obecného vzorce VI, nebo sloučeninou obecného vzorce VII, se může, například, provádět v přítomnosti vhodného rozpouštědlového systému (např. alifatického alkoholu (jako methanolu, ethanolu, isopropylalkoholu nebo n-propanolu), kde alkohol by se měl vybrat tak, abychom se vyhnuli transesterifikačním reakcím v reaktantech a produktech příslušné reakce), a popřípadě vhodné kyseliny, jako anorganické kyseliny (např. HCI) nebo organické kyseliny (např. methansulfonové kyseliny, toluensulfonové kyseliny, atd.). Odborník si je vědom, že tyto reakce se mohou provádět při teplotách kolem teploty místnosti nebo vyšších (např. až do teploty refluxu použitého rozpouštědla (např. 40 až 60 °C, jako asi 50 °C) ) v atmosféře vodíku, například za přetlaku vodíku (např. 300 až 800 kPa (3 až 8 barů) (např. 400 až 600 kPa (4 až 6 barů), jako 500 kPa (5 barů)) a v přítomnosti vhodného hydrogenačního katalytického systému (např. Pd/C, Pt/C). Odborník si je vědom, že změna tlaku vodíku během příslušné reakce budě měnit teplotu refluxu rozpouštědla.

Podle dalších dvou aspektů se předkládaný vynález týká způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ za předpokladu, že v případě alkylové skupiny obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupina C(O)OR⁵ není připojena na atom uhlíku, ke kterému je připojena také skupina NH, kde způsob zahrnuje hydrogenaci příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce VI definovaného shora, nebo sloučeniny obecného vzorce VII definované shora.

Tyto způsoby přípravy sloučenin obecného vzorce IV, ve kterých R¹ je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵, mají tu výhodu, že takové sloučeniny se připravují v méně krocích než jinými postupy přípravy ekvivalentních sloučenin obecného vzorce IV, kde jiné postupy ·· ·» • · ···, • Φ jsou popsány zde nebo dříve někde jinde. Obzvláště se tento způsob vyhýbá nutnosti používat chránění příslušné karboxylové skupiny ve sloučenině obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, před kondenzací s např. sloučeninou obecného vzorce V, např. popsaném zde.

;··· ···

Sloučeniny obecného vzorce III, V, VI a VII jsou buď komerčně dostupné, jsou známé v literatuře, nebo se mohou získat buď podle analogie s postupy zde popsanými nebo běžnými syntetickými postupy podle standardních technik ze snadno dostupných výchozích materiálů za použití vhodných činidle a reakčních podmínek.

Substituenty na arylové/arylových (např. fenylové) a (je-li vhodné) heterocyklické/heterocyklických skupině/skupinách ve zde definovaných sloučeninách se mohou transformovat na jiné substituenty pomocí běžně známých technik. Například, aminoskupina se může převést na amidoskupinu, amidoskupina se může hydrolyzovat na aminoskupinu, hydroxyskupina se může transformovat na alkoxyskupinu, alkoxyskupina se může hydrolyzovat na hydroxyskupinu, a kde je to vhodné, kyanoskupina se může transformovat na amidinoskupinu nebo hydroxyamidinoskupinu.

Odborník si je vědom, že ve výše uvedených postupech se funkční skupiny intermediárních sloučenin mohou, nebo je potřeba je, chránit chránícími skupinami. Obzvláště je vhodné chránit karboxylovou funkční skupinu sloučeniny obecného vzorce IV (a její kyselé adiční soli) vhodnou chránící skupinou (např. benzylovou skupinou), která by se měla odstranit před reakcí s fosgenem.

Funkční skupiny, které je vhodné chránit tak zahrnují hydroxyskupinu, aminoskupinu a karboxylovou kyselinu. Vhodné chránící skupiny pro hydroxylovou skupinu zahrnují skupiny trialkylsilylové a diarylalkylsilylové (např. terc-butyldimethylsilyl, terc-butyldifenylsilyl nebo trimethylsilyl), tetrahydropyranyl, benzylové a alkylkarbonylová skupiny (např. methylové a ethylkarbonylové skupiny). Vhodné chránící skupiny pro aminoskupinu zahrnují benzylovou, terc-butoxykarbonylovou, 9-fluorenylmetho• to *

• · • to • to • ··· • to·· xykarbonylovou nebo benzyloxykarbonylovou skupinu. Vhodné chránící skupiny pro karboxylovou kyselinu zahrnují alkylové estery obsahující v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku, allyl- nebo benzylestery.

Chránění a deprotekce funkčních skupin může probíhat před nebo po každém zde popsaném reakčním kroku.

Chránící skupiny se mohou odstraňovat běžně známými a níže popsanými technikami.

Používání chránících skupin je plně popsáno v „Protective Groups in Organic Chemistry, J.W.F. McOmie (Editor), Plenům Press 1973, a v „Protective Groups in Organic Synthesis, 3^rd Edition, T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1999).

Sloučeniny obecného vzorce I připravené způsobem podle předkládaného vynálezu se mohou využít v následné peptidové kondenzační reakci a/nebo se mohou transformovat na jiné sloučeniny obecného vzorce I. Například, sloučeniny obecného vzorce I, kde R³ je skupina N(R¹²)R¹³, ve které R¹³ je skupina fenylová, skupina (CO)fenylová, nebo s výhodou skupina alkylfenylová obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku (např. benzylová skupina) substituovaná (v příslušné fenylové části) kyanoskupinou (např. v případě skupiny alkylfenylové obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku v poloze 4 vzhledem k alkylové části) se může transformovat na ekvivalentní sloučeninu obecného vzorce I, ve kterém je fenylová skupina substituovaná amidinoskupinou, nebo s výhodou hydroxyamidinou skupinou, skupinou získanou běžně známými technikami (např. použitím hydroxylaminu).

Způsob podle vynálezu je tedy vhodný pro výrobu chemických sloučenin obsahujících peptidickou vazbu a obzvláště peptidických sloučenin obsahujících skupiny cyklických aminokyselin.

Způsob podle vynálezu má tu překvapivou výhodu, že peptidické sloučeniny obecného vzorce I se mohou efektivně získávat ze ·· • · ’ • · ··»· nutnosti používat \ :·*· • *·· snadno dostupných výchozích materiálů bez kondenzační činidla.

Způsob podle vynálezu má dále tu výhodu, že sloučeniny obecného vzorce I se připravují ve vyšších výtěžcích, za kratší dobu, vhodněji a s nižšímu náklady, než když byly připravovány dřívějšími známými postupy.

Vynález je ilustrován následujícími, nijak neomezujícími, příklady.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Ethyl-2-[((IR)-2-{(2S)-2-[({4-kyanobenzyl}amino)karbonyl]azetidinyl}-l-cyklohexyl-2-oxoethyl)amino]acetát (a) Methansulfonát benzyl-(2R)-2-amino-2-cyklohexylethanoátu

K suspenzi 200 g (1,27 mol) (2R)-2-amino-2-cyklohexylethanové kyseliny a 276 g (2,54 mol) benzylalkoholu v 1600 ml toluenu se přidává methansulfonová kyselina takovou rychlostí, aby teplota nedosáhla 100 °C. Reakce se míchá dalších 6 hodin při teplotě 110 až 115 °C. Voda, která se vytvoří, se oddestilovává azeotropicky. Přidá se další podíl 276 g (2,54 mol) benzylalkoholu a směs se refluxuje dalších 12 h za oddestilovávání vody. Reakční směs se pak ochladí a přidá se terc-butyl(methyl)ether pro iniciaci krystalizace. Produkt se odfiltruje a vysuší, získá se 404 g (92 %) sloučeniny uvedené v názvu.

(b) Hydrochlorid benzyl-(2R)-2-cyklohexyl-2-[(2-ethoxy-2-oxoethyl)amino]ethanoátu

K suspenzi 222 g (2,22 mol) hydrogenuhličitanu draselného ve vodě se přidá po částech 200 g (0,58 mol) methansulfonátu benzyl-(2R)-2-amino-2-cyklohexylethanoátu z kroku (a) výše. Po ukončení přidávání se směs míchá 15 minut při 20 až 25 °C. Směs se pak zředí 150 ml tetrahydrofuranu za stálého míchání po 30 ·« »·.

·<* *· minut. Během jedné hodiny se přidá ethyl-bromacetát, načež se směs míchá osm hodin při 35 °C. Teplota se pak zvýší na 50 °C a reaguje se další čtyři hodiny. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a pak se zředí 450 ml toluenu. Dvě fáze se oddělí a organická fáze se dvakrát promyje vodou, zahustí, filtruje a produkt se isoluje jako hydrochlorid použitím chlorovodíkové kyseliny v heptanu. Po vysušení se získá 199 g (93 %) sloučeniny uvedené v názvu.

(c) (2R)-2-Cyklohexyl-2-[(2-ethoxy-2-oxoethyl)amino]ethanová kyselina

Alternativa A g (0,1 mol) hydrochloridu benzyl-(2R)-2-cyklohexyl-2-[(2ethoxy-2-oxoethyl)amino]ethanoátu z kroku (b) výše rozpuštěný v 320 ml isopropylalkoholu se hydrogenuje v přítomnosti 2 g (50% vodného) 5% Pd/C po dobu 3 hodiny při 30 °C. Po odstranění katalyzátoru filtrací se filtrát neutralizuje tetrabutylamoniumhydroxidem a pH se adjustuje na pH 5,2. Pro odstranění vzniklé vody se suspenze odpaří a opakovaně promyje isopropylalkoholem a vysuší a poskytne 49 g (94 %) sloučeniny uvedené v názvu.

Alternativa B

71,5 g (50% v toluenu) ethyl-glyoxalátu se přidá ke směsi 10 g (64 mmol) (2R)-2-amino-2-cyklohexylethanové kyseliny a 4,9 g (51 mol) ve 100 ml ethanolu. Směs se hydrogenuje v přítomnosti 0,5 g

5% Pd/C při tlaku 5 bar po dobu 6 hodin při 22 °C. Směs se pak zahřeje na 50 °C a hydrogenace se postupuje dalších 14 hodin.

Katalyzátor se odstraní filtrací a pH se adjustuje na hodnotu 4 až 5. K výsledné želatinové suspenzi se přidá 200 ml vody, tuhá fáze se filtruje, promyje, vysuší a poskytne 9,4 g (50 %) sloučeniny uvedené v názvu jako bílého prášku.

²H NMR (D₂O) δ	l,29t), cca 1,1-1,4	(m), cca	1,6-1,9	(m) ,	cca 2,0-
2,2 (m), 4,04	(d), 4,08 (q), 4,31	(q) ·
¹³C NMR(D₂O) δ	13, 9, 25,9, 26,1,	26,3, 28,	5, 29,0,	39,	4, 47,6,

64,4, 66,1, 167,7, 170,9.

• · ··

·· »

• · (d) Ethyl-2-[(4R)-4-cyklohexyl-2,5-dioxo-l,3-oxazolidin-3-yl]acetát

28.9 kg (291,9 mol) fosgenu se přidá během jedné hodiny k 44,2 kg (182 mol) (2R)-2-cyklohexyl-2-[(2-ethoxy-2-oxoethyl)amino]ethanové kyseliny získané analogicky jako v metodě popsané v kroku (c) (alternativa A) výše v 340 kg tetrahydrofuranu při 40 °C. Reakce se po další hodině považuje za ukončenou. Směs se zahustí při sníženém tlaku. Zbytek se zředí 272,6 kg tetrahydrofuranu a pH se adjustuje 15,3 kg N-methylmorfolinu na

6,5 při 0 °C. Reakce pokračuje dalších 45 minut. Pak se přidá 0,34 kg HCl/dioxan a zbytek se filtruje Celitem® (křemelinou). Filtrační koláč se promyje dvakrát tetrahydrofuranem. Kombinované filtráty se zahustí za sníženého tlaku při 20 °C. Ke zbytku se přidá 250 kg heptanu a směs se znovu zahustí. K výslednému zbytku se přidá dalších 81 kg heptanu. Teplota se adjustuje na 0 °C a směs se nechá 5 hodin krystalovat. Krystaly se filtrují, promyjí 3x30 kg heptanu a suší (nízký tlak, 20 °C) a získá se 46 kg (95 %) sloučeniny uvedené v názvu.

¹³C NMR: δ 168,2, 167, 9, 152,3, 65,3, 61,2, 43, 8, 37,5, 27,3,

26, 0, 25,6, 25,2, 13, 9.

(e) Ethyl-2-[((IR)-2-{(2S)-2-[({4-kyanobenzyl}amino)karbonyl]azetidinyl}-l-cyklohexyl-2-oxoethyl)amino]acetát

4.9 g (48,6 mmol) 4-methylmorfolinu se při 30 °C přidá ke směsi

10,8 g (43,9 mmol) (2S)-N-(4-kyanobenzyl)-2-azetidinkarboxamidu (připraveného podobně jako je popsáno obecně ve způsobech v mezinárodní patentové přihlášce WO 94/29336, WO 99/64391 a WO 00/12473) a 11,6 g (42,2 mmol) ethyl-2-[(4R)-4-cyklohexyl-2,5dioxo-1,3-oxazolidin-3-yl]acetátu (viz krok (d) výše) v 28 ml ethylacetátu. Po pěti minutách míchání se přidá 9,3 ml vodného chloridu sodného (10 % hmotn. a 0,066 % hmotn. EDTA). po dalších třech hodinách míchání se organická vrstva obsahující titulní sloučeninu oddělí a poskytuje 99 % žádané sloučeniny.

¹³C NMR (CDC1₃) : δ 14,3, 19,2, 26, 1, 26,2, 26, 4, 29,2, 30, 0, 41, 1,

42,9, 48,6, 49,5, 61,0, 62,0, 62,8, 111,1, 118,9, 128,1x2, 132,

5x2, 144,1, 171,1, 172,4, 175,7.

Příklad 2

Ethyl-2-({(IR)-l-cyklohexyl-2-oxo-2-[(2S)-2-(2-fenylacetyl)azetidinyl]ethyl}amino)acetát

K roztoku 9 g (20 mmol) hydrochloridu 1-[(S)-azetidinyl]-2fenyl-l-ethanonu a 6,7 g (25 mmol) ethyl-2-[(4R)-4-cyklohexyl2,5-dioxo-l,3-oxazolidin-3-yl]acetátu (viz příklad l(d) výše) v 50 ml ethylacetátu se přidají 4 ml (40 mmol) N-methylmorf olinu.. Když je reakce podle HPLC ukončena, reakce se zpracuje extrakcemi. Po zahuštění se získá 7 g (84 %) sloučeniny uvedené v názvu v podobě oleje.

LC-MS: (M+l) = 417 (m/z).

Příklad 3

Ethyl-2-[(((IS)-2-{(2R0-2-[({4-[{[(benzyloxy)karbonyl]amino}(hydroxy imino) methyl ]benzyl}amino)karbonyl]azetidinyl}-1-cyklohexyl-2-oxoethyl)acetát

K roztoku 11,7 g (25 mmol) hydrochloridu benzyl-[4-({[(2S)azetidiny1karbonyl]aminoJmethyl)fenyl](hydroxyimino)methylkarbam átu a 6,7 g (25 mmol) ethyl-2-[(4R)-4-cyklohexyl-2,5-dioxo-l,3oxazolidin-3-yl]acetátu (viz příklad 1 (d) výše) v 55 ml tetrahydrofuranu se přidá 5 ml (50 mmol) N-methylmorfolinu. Když se reakce podle HPLC ukončena, reakce se zfiltruje a zpracuje extrakcemi. Sušením a zahuštěním se získá žádaná sloučenina jako olej (77 %) .

LC-MS: (M+l) = 608 (m/z).

• 0

Přiklad 4

Následující sloučenina se připraví analogicky výše popsaným technikám:

Di(trifluormethansulfonát) ethyl-2-[((IR)-2-{(2S)-2-[{{4—[amino(hydroxyimino)methyl]benzyl}amino)karbonyl]azetidinyl}-1-cyklohexyl-2-oxoethyl]amino)acetátu

Claims

2. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I,

R\

O) kde R¹ je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná a/nebo ukončená jedním nebo více substituenty vybranými z atomu halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)₂NH₂, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR⁵, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)₂R⁸, skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R² je alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, -A¹cykloalkylová skupina obsahující v cykloalkylové části 4 až 8 atomů uhlíku nebo -A^x-arylová skupina obsahující v arylové části 6 až 10 atomů uhlíku, všechny skupiny jsou popřípadě substituovány jedním nebo více substituenty vybranými z alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy halogenu, methylendioxyskupiny, atomu halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)2NH2, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR⁵, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)2R⁸, skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R³ je skupina N(R¹²)R¹³ nebo skupina CH(R¹²)R¹³,

R¹³ je při každém výskytu skupina fenylová, skupina alkylfenylová obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku nebo skupina (CO)fenylová, všechny skupiny jsou popřípadě substituovány jedním nebo více substiutenty vybranými z kyanoskupiny, amidinoskupiny, hydroxyamidinoskupiny, atomu halogenu, alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná • 9 • · ·· • ·« • ♦ ί • 99 jedním nebo více atomy halogenu, skupiny SR⁶, skupiny N(R⁹)R¹⁰nebo skupiny OR¹¹,

R⁹ a R¹⁰ nezávisle jsou při každém výskytu atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo skupina C(O)R¹⁴,

A¹ je při každém výskytu jednoduchá vazba nebo alkylenová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, n je 1,2 nebo 3,

R⁵ je při každém výskytu atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo skupina alkylfenylová obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku, kde poslední skupina je popřípadě substituovaná jedním nebo více substituenty vybranými z alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, která je popřípadě substituovaná jedním nebo více atomy halogenu, methylendioxyskupiny, atom halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)2NH2, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR^5a, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)2R⁸, skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹,

R⁴, R^5a, R⁶, R¹¹, R¹² a R¹⁴ nezávisle jsou při každém výskytu atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a

R⁷ a R⁸ nezávisle jsou při každém výskytu alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, vyznačující se tím, že se reaguje sloučenina obecného vzorce II, (II) ·· ·♦ • · • ·· • · kde R¹ a R² mají shora uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce III, tl), n

(lil) kde R³ a n jsou definovány výše.

2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že R¹ značí alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovanou nebo ukončenou substituentem C(O)OR⁵.
3. Způsob podle nároku 2, vyznačující se tím, že alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku je methylová skupina nebo ethylová skupina.
4. Způsob podle kteréhokoliv nároku 1 až 3, vyznačující se tím, že skupina R⁵ je atom vodíku, lineární nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkylfenylová skupina obsahující v alkylové části 1 až 2 atomy vodíku.
5. Způsob podle nároku 4, vyznačující se tím, že skupina R⁵ je isopropylová skupina, ethylová skupina nebo benzylová skupina.
6. Způsob podle kteréhokoliv předchozího nároku, vyznačující se tím, že skupina R^{7 2} je -A¹-cykloalkylová skupina obsahující v cykloalkylové části 5 až 7 atomů uhlíku nebo -A¹fenylová skupina, ve kterých v obou případech A¹ je jednoduchá vazba nebo alkylenová skupina obsahující 1 až 2 atomy uhlíku.
7. Způsob podle kteréhokoliv předchozího nároku, vyznačující se tím, že skupina R³ je skupina N(R¹²)R¹³, ve které .··. :··· • · ·

R¹² je atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 2 atomy uhlíku a R¹³ je alkylfenylová skupina obsahující v alkylové části 1 až 2 atomy uhlíku, kde poslední skupina je substituovaná amidinoskupinou, hydroxyamidinovou skupinou nebo kyanoskupinou.
8. Způsob podlé nároku 7, vyznačující se tím, že substituent je umístěný v poloze 4 fenylové části alkylfenylové skupiny obsahující v alkylové části 1 až 2 atomy uhlíku, vzhledem k alkylové části.
9. Způsob podle kteréhokoliv předchozího nároku, vyznačující se tím, že způsob se provádí v přítomnosti báze.
10. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že báze je terciární aminová báze.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že bází je triethylamin, diisopropylethylamin nebo N-methylmorfolin.
12. Způsob podle kteréhokoliv předchozího nároku, vyznačující se tím, že se reakce provádí v přítomnosti rozpouštědlového systému obsahujícího vodu.
13. Způsob podle kteréhokoliv předchozího nároku, vyznačující se tím, že se reakce provádí v přítomnosti organického rozpouštědla vybraného ze skupiny, kterou tvoří acetát, acetonitril, toluen, dichlormethan, tetrahydrofuran, dimethylformamid nebo směs kteréhokoliv z těchto rozpouštědel.
14. Způsob podle kteréhokoliv předchozího nároku, vyznačující se tím, že sloučenina obecného vzorce II se připraví reakcí sloučeniny obecného vzorce IV, kde R¹ a R² jsou definovány v nároku 1, s fosgenem.
15. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že skupina R¹ ve sloučenině obecného vzorce IV je popřípadě substituovaná/ukončená alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, sloučenina je popřípadě ve formě kyselé adiční soli, a sloučenina obecného vzorce IV se připraví reakcí příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, kde R¹ je atom vodíku, nebo její kyselé adiční soli, se sloučeninou obecného vzorce V,

R^la-L^x (V) kde L¹ je odstupující skupina a R^la je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovaná a/nebo ukončená jedním nebo více substituenty vybranými z atomu halogenu, kyanoskupiny, nitroskupiny, skupiny S(O)2NH2, skupiny C(O)R⁴, skupiny C(O)OR⁵, skupiny SR⁶, skupiny S(O)R⁷, skupiny S(O)2R⁸, skupiny N(R⁹)R¹⁰ nebo skupiny OR¹¹ a skupiny R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰ a R¹¹ jsou definovány v nároku 1.
16. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že skupina R¹ ve sloučenině obecného vzorce IV je atom vodíku, sloučenina je popřípadě ve formě kyselé adiční soli a sloučenina obecného vzorce IV se připraví hydrolýzou příslušné sloučeniny obecného vzorce II, jak je definováno v nároku 1, kde R¹ je atom vodíku.
17. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že skupina R¹ ve sloučenině obecného vzorce IV je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ za předpokladu, že v případě alkylové sku·· •0

0 0 • 00 • · 0 ·· 0 ·· 00 .··. :··· : ;··· ; • ϊ : · · ·· ··· : .·

0 0 •000 piny obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupina C(O)OR⁵ není připojena na atom uhlíku, ke kterému je připojena také skupina NH, a sloučenina obecného vzorce IV se připraví hydrogenací příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce VI

OHC-R^lb (VI), kde skupina R^lb je skupina C(O)OR⁵ nebo alkylová skupina obsahující 1 až 2 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ a skupina R⁵ je definována v nároku 1.
18. Způsob podle nároku 14, vyznačující se tím, že skupina R¹ ve sloučenině obecného vzorce IV je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ za předpokladu, že v případě alkylové skupiny obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupina C(O)OR⁵ není připojena na atom uhlíku, ke kterému je připojena také skupina NH, a sloučenina obecného vzorce IV se připraví hydrogenací příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce VII,

R^aQ (VII)

R^aO kde R^lb je definována v nároku 17 a skupiny R^a jsou buď samostatně alkylové skupiny obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, nebo jsou spojeny dohromady za vzniku alkylenového řetězce obsahujícího 2 až 4 atomy uhlíku.
19. Způsob přípravy sloučeniny vzorce IV podle nároku 14, vyznačující se tím, že skupina R¹ je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ za předpokladu, že v případě alkylové skupiny obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupina C(O)OR⁵ není ···· • ·· • · ·· ··· • · »· ·* ·· • « .

* « · ·· ···♦ připojena na atom uhlíku, ke kterému je připojena také skupina NH, kde postup zahrnuje hydrogenací příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce VI definované v nároku 17.
20. Způsob přípravy sloučeniny vzorce IV podle nároku 14, vyznačující se tím, že skupina R¹ je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku substituovaná nebo ukončená skupinou C(O)OR⁵ za předpokladu, že v případě alkylové skupiny obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupina C(O)OR⁵ není připojena na atom uhlíku, ke kterému je připojena také skupina NH, kde postup zahrnuje hydrogenací příslušné sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterém R¹ je atom vodíku, v přítomnosti sloučeniny obecného vzorce VII definované v nároku 18.
21. Způsob podle kteréhokoliv nároku 17 až 20, vyznačující se tím, že v kroku přípravy sloučeniny obecného vzorce IV se reakce provádí v přítomnosti ethanolu jako rozpouštědla .
22. Způsob podle kteréhokoliv nároku 17 až 21, vyznačující se tím, že v kroku přípravy sloučeniny obecného vzorce IV se reakce provádí v přítomnosti kyseliny.
23. Způsob podle 22, vyznačující se tím, že kyselinou je methansulfonová kyselina.
24. Způsob podle kteréhokoliv nároku 17 až 23, vyznačující se tím, že v kroku přípravy sloučeniny obecného vzorce IV se reakce provádí v přítomnosti katalyzátoru Pd/C nebo Pt/C.
25. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce I, kde R³ je skupina N(R¹²)R¹³, kde R¹² je definována v nároku 1 a R¹³ je fenylová skupina, (CO)fenylová skupina nebo alkylfenylová skupina obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku, každá z nich je substituovaná hydroxyamidinovou skupinou, vyzná.··.:··· : :···.

- ·*

2 · * čující se tím, že zahrnuje způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 18, nebo kteréhokoliv z nároků 21 až 24 závislého na kterémkoliv z nároků 1 až 18 -, ve kterém ve sloučenině obecného vzorce III skupina R³ je skupina N(R¹²)R¹³, kde R¹² je definována v nároku 1 a R¹³ je skupina fenylová, (CO)fenylová nebo alkylfenylová skupina obsahující v alkylové části 1 až 3 atomy uhlíku, každá z nich je substituovaná kyanoskupinou, kdy po tomto způsobu následuje reakce výsledné sloučeniny obecného vzorce I s hydroxylaminem.
26. Sloučenina obecného vzorce II definovaná podle kteréhokoliv z nároků 2 až 6.