CZ20031743A3 - Farmaceutický prostředek pro léčbu krvácení - Google Patents

Description

0 0 0

Farmaceutický prostředek pro léčbu krvácení

Oblast techniky

Závažná krvácení, indukovaná trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, včetně intrakraniálních, nitrolebních krvácení, se léčí podáváním účinného množství aktivovaného faktoru srážlivosti VII (Vila), nebo jeho funkčního derivátu.

Dosavadní stav techniky

Systém hemostáze, tedy systém zastavující krvácení, zahrnující krevní destičky, srážení krve a fibrinolýzu, hraje rozhodující roli v udržování krevního toku a v omezování ztrát krve během cévního poranění. Během cévního poranění se krevní destičky přichytávají, tj. adherují na cévní stěnu, hromadí se, tj. agregují a vytvářejí ucpávku, která je upevňována fibrinovou sítí, vytvářenou během aktivace srážení prostřednictvím aktivace faktoru VII, faktoru X a protrombinu. Po zastavení krevní ztráty je iniciováno hojení poranění, po němž následuje rpzpuštění krevní sraženiny fibrinolytickým systémem cestou vytváření plasminu, které je indukováno tkáňovým aktivátorem plasminogenu (t-PA, tissue plasminogen activator).

Během patologických, chorobných situací, jako v případě kardiovaskulárních onemocnění, může tento systém přeskočit normální fyziologickou regulaci a výsledkem je úplné uzavření, okluze krevní cévy, jak je pozorováno po protržení arteriosklerotického plátu. K léčbě takové trombotické obstrukce a k obnovení toku krve se široce používá trombolytická léčba (J. M. Stassen, A. Nystróm; A historical review on thrombosis and hemostasis, Ann. Plast. Surgery 39. 317-329, 1997).

·· ···« ♦ · • »

- 2 Trombolytická léčba zahrnuje kombinační léčbu činidlem působícím proti destičkám (antiplatelet agent), například kyselinou acetylsalicylovou, protisrážlivým činidlem, například heparinem a fibrinolytickým činidlem, například tkáňovým aktivátorem plasminogenu, streptokinázou, stafylokinázou, urokinázou, nebo jejich deriváty. Kombinace těchto činidel, jakkoliv je léčebně velmi účinná, rovněž zahrnuje významné riziko indukování krvácivých komplikací, zahrnujících i hemoragický záchvat, viz odkazy:

the GUSTO investigators; An International randomized trial comparing four thrombolytic strategies for acute myocardial infarction, New Engl. J. Med. 329(10), 673-682, 1993;

Assent-2, Single-bolus tenecteplase compared with front-loaded alteplase in acute myocardial infarction: the ASSENT-2 double blind randomised trial. Assessment of the Safety and Efficacy of a New Thrombolytic Investigators; Lancet 354(9180), 716-722, 1999.

Závažné krvácení nastává u významného množství pacientů, podrobených trombolytické léčbě. Podle posledního rozsáhlého klinického testu trombolytické léčby, tedy testu Assent-2, zahrnujícího 16 949 pacientů, četnost nitrolebního krvácení představuje 0,93 % pacientů u tenecteplázy (derivátu tkáňového aktivátoru plasminogenu, t-PA) a 0,94 % pacientů u alteplázy (rovněž t-PA derivátu), přičemž četnost komplikací, představovaných jiným než mozkovým krvácením, dosahuje 26,43 % pacientů u tenecteplázy a 28,95 % pacientů u alteplázy. Potřeba krevní transfuze zahrnula po použití těchto látek 4,25 %, respektive 5,49 % pacientů. Úmrtí nebo nikoli fatální záchvat postihly během 30 dnů 7,11 % pacientů v případě tenecteplázy a 7,04 % pacientů v případě alteplázy (viz výše uvedený odkaz Assent-2).

Existuje tedy potřeba léčiva, které lékaři poskytne protilátku ke zvrácení takových závažných krvácení, indukovaných trombolytickou léčbou, nezávisle na použitém trombolytickém činidle.

·· 0 00«

- 3 00

Podstata vynálezu

Předmětem předkládaného vynálezu je tedy poskytnutí prostředku pro léčbu a způsobu léčby závažných krvácení, indukovaných trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, u subjektu trpícího takovým krvácením, například u lidí či zvířat.

Předkládaný vynález je založen na zjištění, že výše uvedeného předmětu je možné dosáhnout, pokud je k tomuto účelu použit aktivovaný faktor srážlivosti Vil (Vila).

Faktorem VII je na vitamínu K závislý glykoprotein, který je fyziologicky syntetizován jaterními buňkami a vylučován do krve v podobě jednořetězcové molekuly, sestávající ze 406 aminokyselinových zbytků. Aktivace faktoru VII na faktor Vila zahrnuje hydrolýzu jediné peptidové vazby mezi aminokyselinovými zbytky Arg-152 a lle-153, čímž vznikne molekula mající dva řetězce, sestávající z lehkého řetězce o 152 aminokyselinových zbytcích a těžkého řetězce, tvořeného 254 aminokyselinovými- zbytky, přičemž jsou oba řetězce spojeny jedinou disulfidovou vazbou. Ve své aktivované formě tento protein působí jako serinproteáza, která se je zúčastněna v zevní dráze či systému kaskády srážení krve.

Během vystavení tkáňového faktoru (TF) na poškozenou cévní stěnu se vytvoří komplex s faktorem VII, čímž vznikne aktivovaný faktor VII (faktor Vila), tento komplex TF a faktoru Vila aktivuje faktor X na faktor Xa a ten naopak přeměňuje prothrombin na thrombin. Trombin hraje zásadní roli ve srážení krve a hojení poranění. V počáteční fázi cévního poškození indukuje agregaci destiček a vytváření fibrinu, následovanou stimulací buněčného růstu k vystupňování opravy poškozené krevní cévy (práce J. M. Stassena a A. Nystróma, viz výše).

»· »»»· ·» • · φ • φ « φ φ * φ « φ Α •44 • · Φ β » · φ • Φ ΦΦ

Rekombinantní faktor VII (rFVII) se exprimuje v ledvinových buňkách mláďat křečků po buněčné transfekci lidskou DNA, kódující faktor VII a během čištění se přeměňuje na aktivovaný faktor Vila (rFVIIa), viz práce L. Thima a spoluautorů; Amino acid sequence and posttranslational modifications of human factor Vila from plasma and transfected baby hamster kidney celíš; Biochemistry 27, 7785-7793, 1988. Rekombinantní faktor Vila je ve své prodávané formě, jako NovoSeven® (Novo Nordisk, Bagsvaerd, Dánsko), rostoucí měrou používán k léčbě krvácivých příhod při široké škále krvávivých poruch, především u hemofiliků, majících inhibitory působící vůči faktoru VII nebo IX, u nichž byly jiné léčby neúčinné. Viz citace:

B. G. Macík se spoluautory; Use of recombinant activated factor VII for treatment of a retropharyngeal hemorrhage in a hepophilic patient with a high titer inhibitor; Am. J. Hematol. 32, 232-234, 1989;

G. Kenet se spoluautory; Treatment of traumatic bleeding with recombinant factor Vila; Lancet 354, 1879, 1999;

B. Whíte se spoluautory; Successful use of recombinant FVIIa (NovoSeven®) in the management of intactable post-surgical intra-abdominal haemorrhage; Br. J. Haematol. 107, 677-678, 1999;

M. Al Douri se spoluautory; Effect of the administration of recombinant activated factor VII (FVIIa, NovoSeven®) in the management of severe uncontrolled bleeding in patients undergoing heart valve replacement surgery; Blood Coagul. Fibrinolysis, Suppl.1, S121-127, 2000;

C. Negrier a A. Lienhart; Overall experience with NovoSeven®; Blood Coagul. Fibrinolysis, Suppl.1, S19-24, 2000;

W. Y. Wong se spoluautory; Clinical efficacy and recovery levels of recombinant FVIIa (NovoSeven®) in the treatment of intracranial haemorrhage in severe neonatal FVII deficiency; Haemophilia 6, 50-54, 2000.

Ovšem přes přibližně třináct let zkušeností s tímto lékem nebylo použití faktoru Vila ke zvrácení závažného krvácení, indukovaného

- 5 • · · · · · Σ · · *· ·** ·· ·· ·· ·· trombolytickou/fibrínolytickou léčbou, ještě nikdy ani navrženo, ani testováno.

·> ··

Podrobný popis vynálezu

V prvním aspektu se předkládaný vynález týká použití aktivovaného faktoru srážlivosti VII (Vila) nebo jeho funkčního drívátu pro výrobu léčiva k léčbě závažných krvácení, indukovaných trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, včetně intrakraniálních, tedy nitrolebních krvácení.

Ve druhém aspektu se předkládaný vynález týká způsobu léčby závažných krvácení, indukovaných trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, včetně nitrolebních krvácení, přičemž tento způsob zahrnuje podávání účinného množství aktivovaného faktoru srážlivosti VII (Vila) nebo jeho funkčního drívátu subjektu, trpícímu takovým krvácením. Tento způsob je zvláště vhodný k léčbě savců, včetně člověka.

Lidský vyčištěný faktor Vila, vhodný pro použití v předkládaném vynálezu, může být isolován z přírodních zdrojů, nebo, výhodněji, může být vyroben technikami přípravy rekombinantní DNA, jak je například popsáno v práci Hagena a spoluautorů; Proč. Nati. Acad. Sci. USA 83, 2412-2416, 1986, která je zde uvedena jako odkaz. Faktor Vila, vyrobený rekombinantními technikami, může být v podstatě identický jako přírodní faktor Vila, jakým je produkt NovoSeven® od firmy Novo Nordisk.

Výraz funkční derivát se týká modifikovaného derivátu faktoru Vila, majícího v podstatě stejnou příslušnou biologickou aktivitu. Takové funkční deriváty faktoru Vila mohou být vyráběny například místně specifickou mutagenezí sekvence nukleové kyseliny, kódující faktor VII, • 4 • · · ·« což poskytne modifikované rekombinantní proteiny, mající aminokyselinovou sekvenci, lišící se od přírodně se vyskytující aminokyselinové sekvence v místě jednoho nebo více aminokyselinových zbytků. Takové modifikace mohou například zahrnovat delece (vypuštění), inserce (vložení), přidání, substituce, náhrady a obrácení aminokyseliny. Uskutečněny mohou být také posttranslační modifikace, například eliminace nebo změny v charakteru glykosylace.

Trombolytické/fibrinolytické léčivo, používané v trombolytické/ fibrinolytické léčbě, může zahrnovat jakoukoliv formu přírodního nebo rekombinantního tkáňového aktivátoru plasminogenu, jako jsou altepláza nebo retepláza, dutepláza, sarupláza, rekombinantní DSPA alfa 1 (BAT PA), streptokináza, antistrepláza, stafylokináza, včetně stafylokinázy s navázaným polyethylenglykolem a mutantů stafylokinázy o nulové nebo snížené imunogenitě, urokináza, jednořetězcová urokináza, kterékoliv z trombolytických činidel třetí generace, známých v oboru, například amedipláza, tenectepláza, montepláza, lanotepláza, pamitepláza, nebo léčebně přijatelné deriváty takových látek. Viz; výše odkazy;

GUSTO investigators; Assent-2; a odkazy

Gissi International Study Group; ln-hospital mortality and clinical course of 20 891 patients with suspected acute myocardial infarction randomised between alteplase and streotokinase with or without heparin; The Lancet 336, 71-75, 1990;

The Global Use of Strategies to Open Occluded Coronary Arteries (GUSTO III) Investigators; A comparison of reteplase with alteplase for acute myocardial infarction; New Engl. J. Med. 337,1118-1122, 1997;

F. Van de Werf se spoluautory; Safety assessment of single-bolus administration of TNK tissue-plasminogen activator in acute myocardial infarction; the ASSENT-1 trial. The ASSENT-1 Investigators; Am. Heart J. 137, 786-791, 1999;

D. Collen se spoluautory; Polyethylene glycol-derivatized cystein-substitution variants of recombinant staphylokinase for single-bolus treatment of acute myocardial infarction; Circulation 102, 1766-1772, 2000;

Y. Laroche se spoluautory; Recombinant staphylokinase variants with reduced antigenicity due to elimination of B-lymphocyte epitopes; Blood 96, 1425-1432, 2000 a

M. Verstraete; Third-generation thrombolytic drugs; Am. J. Med. 109, 52-58, 2000).

Léčivo nebo farmaceutický prostředek, obsahující faktor Vila, budou s výhodou podávány prostřednictvím intravenózní injikace bolusu (velké dávky), nebo prostřednictvím nespojité či spojité intravenózní infuze. Použít je možné rovněž kombinaci jedné intravenózní injikace bolusu a následné intravenózní infuze faktoru Vila.

Vhodné farmaceutické prostředky pro injikaci nebo pro účely infuze zahrnují sterilní vodné roztoky a sterilní prášky pro improvizovanou přípravu sterilních injikovatelných roztoků či roztoků pro infuze. Obecně budou konečné roztoky rovněž obsahovat vhodné sole a jiná pomocná činidla, jak je v oboru obvyklé. Například rekonstituovaný vodný roztok léčiva NovoSeven®, vyráběného a prodávaného firmou Novo Nordisk, obsahuje chlorid sodný v koncentraci 3 mg/ml, dihydrát chloridu vápenatého v koncentraci 1,5 mg/ml, N-glycylglycin v koncentraci 1,3 mg/ml, polysorbát 80 (monooleát polyoxyethylen-80-sorbitanu) v koncentraci 0,1 mg/ml a mannitol v koncentraci 30 mg/ml.

Dávkování faktoru Vila, jenž má být podáván, se bude lišit v závislosti například na věku a fyzické kondici konkrétního subjektu, závažnosti krvácivých komplikací, které mají být léčeny a na zvoleném

- 8 způsobu podávání. Vhodné dávkování může být snadno stanoveno osobou se znalostmi oboru.

Vhodné dávkovači rozmezí bude pro faktor Vila, podávaný intravenózní injikací bolusu, typicky přibližně od 3 000 do 6 000 IU (mezinárodních jednotek, podle prvního mezinárodního standardu, týkajícího se faktoru Vila 89/688), což odpovídá přibližně 60 až 120 mikrogramům rekombinantního faktoru Vila a kilogram tělesné hmotnosti. S výhodou se bude dávkování pro intravenózní injikací bolusu pohybovat v rozmezí přibližně od 4 500 do 6 000 IU na kilogram tělesné hmotnosti. Vzhledem k tomu, že systémový poločas rekombinantního faktoru Vila je obvykle pouze 2 až 3 hodiny, mohou být nezbytné opakované intravenózní injikace bolusu v poměrně krátkých časových intervalech, s výhodou pak v intervalech 2 až 3 hodin a ještě lépe v intervalu 2 hodin. Pokud je to žádoucí, počáteční časové intervaly mohou být v průběhu léčby rozšířeny například až na 4 hodiny či 6, 8 či 12 hodin.

Pokud je to. léčebně žádoucí, intravenózní injikace bolusu by měla být podávána během přibližně 2 až 5 minut.

Vhodný dávkovači režim pro nespojitou infuzi faktoru Vila může představovat podávání přibližně 4 500 až 6 000 IU na kilogram tělesné hmotnosti, a to po 2 až 6 hodinách.

Vhodným dávkováním faktoru Vila pro spojitou infuzi může být podávání přibližně 500 až 1500 lU/kg/h, což odpovídá přibližně 10 až 30 pg rFVIIa/kg/h. Pokud je to žádoucí, může spojité infuzi faktoru Vila předcházet jedna injikace bolusu v dávce přibližně 4 500 až 6 000 lU/kg tělesné hmotnosti. Výsledky dřívějších studií, prováděných za použití spojité infuze rekombinantního faktoru Vila (ad práce S. Schulmana a

spoluautorů; Feasibility of using recombinant factor Vila in continuous infusion; Thromb. Haemost. 75(3), 432-436, 1996; a F. Bauda se spoluautory; The continuous infusion of recombinant activated factor Vila (rFVIIa) in patients with factor Vlil inhibitors activates the coagulation and fybrinolytic systems without clinical complications, Thromb. Res. 99, 21-24, 2000) ukazují, že léčba spojitou infuzí faktoru Vila bude ve srovnání s injikací bolusu účinná při nižších celkových dávkách léčiva.

Vzhledem k tomu, že až do dneška je četnost vedlejších účinků u známých aplikací faktoru Vila nízká a nejsou přítomné biochemické příznaky, ukazující na trombogenicitu nebo vysilující koagulopathii, předpokládá se, že závažná krvácení, související s trombolytickou léčbou, jsou účinně zvrácena aktivovaným faktorem Vila bez zjevného poškození příjemce.

Zastupuje:

Claims (10)

1. - 10 PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Použití aktivovaného faktoru srážlivosti VII, tedy Vila, nebo jeho funkčního derivátu, pro výrobu léčiva k léčbě závažných krvácení, indukovaných trombolytickou/fibrinolytickou léčbou.
2. 2. Použití podle nároku 1, přičemž krvácení je indukováno trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, využívající jakoukoliv formu přírodního nebo rekombinantního tkáňového aktivátoru plasminogenu, jako jsou altepláza nebo retepláza, dutepláza, sarupláza, rekombinantní DSPA alfa 1, tedy BAT PA, streptokináza, antistrepláza, stafylokináza, včetně stafylokinázy s navázaným polyethylenglykolem a mutantů stafylokinázy o nulové nebo snížené imunogenitě, urokináza, jednořetězcová urokináza, či kterékoliv z trombolytických činidel třetí generace, nebo léčebně přijatelný derivát takových látek.
3. 3. Použití podle nároku 1, přičemž krváceními jsou nitrolební krvácení.
4. 4. Použití podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, přičemž léčivo je vhodné pro podávání účinného množství faktoru Vila nebo jeho funkčního derivátu, prostřednictvím intravenózní injikace bolusu nebo intravenózní infuze.
5. 5. Použití podle nároku 4, přičemž účinné množství faktoru Víla nebo jeho funkčního derivátu představuje jednu nebo více jednotlivých intravenózních injikací bolusu v dávkách přibližně od 3 000 do
6. 6 000 IU, což odpovídá přibližně 60 až 120 mikrogramům rekombinantního faktoru Vila na kilogram tělesné hmotnosti a/nebo intravenózní infuzi v dávce přibližně 500 až 1500 IU, což odpovídá přibližně 10 až 30 pg rekombinantního faktoru Vila, na kg tělesné hmotnosti za hodinu.

   • · · ·

   - 11 6. Použití podle nároku 4 nebo 5, přičemž účinné množství faktoru Vila nebo jeho funkčního derivátu se podává ve formě opakovaných intravenózních injikací bolusu v časových intervalech přibližně 2 hodin.
7. 7. Způsob léčby závažných krvácení, indukovaných trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, včetně nitrolebních krvácení, v y značující se tím, že se subjektu, trpícímu takovým krvácením, podává účinné množství aktivovaného faktoru srážlivosti VII (Vila) nebo jeho funkčního drivátu.
8. 8. Způsob podl nároku 7, v y z n a č u j í c í se t í m , že krvácení je indukováno trombolytickou/fibrinolytickou léčbou, využívající jakoukoliv formu přírodního nebo rekombinantního tkáňového aktivátoru plasminogenu, jako jsou altepláza nebo retepláza, dutepláza, sarupláza, rekombinantní DSPA alfa 1, tedy BAT PA, streptokináza, antistrepláza, stafylokináza, včetně stafylokinázy s navázaným polyethylenglykolem a mutantů stafylokinázy o nulové nebo snížené imunogenitě, urokináza, jednořetězcová urokináza, či kterékoliv z trombolytických činidel třetí generace, nebo léčebně přijatelný derivát takových látek.
9. 9. Způsob podle nároku 7 nebo 8, vyznačující se tím, že účinné množství faktoru Vila nebo jeho funkčního derivátu se podává prostřednictvím intravenózní injikace bolusu nebo intravenózní infuze, s výhodou pak prostřednictvím opakovaných intravenózních injikací bolusu v intervalech přibližně 2 hodin.
10. 10. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že účinné množství faktoru Vila nebo jeho funkčního derivátu se skládá z jedné nebo více z jednotlivých intravenózních injikací bolusu v dávkách přibližně od 3 000 do 6 000 IU, což odpovídá přibližně 60 až 120 mikrogramům rekombinantního faktoru Vila na kilogram tělesné hmotnosti a/nebo z intravenózní infuze v dávce přibližně 500 až 1500

    - 12 IU, což odpovídá přibližně 10 až 30 gg rekombinantního faktoru Vila, na kg tělesné hmotnosti za hodinu.

    žrnrtr.rprwjtf,: