CZ2004359A3

CZ2004359A3 - Aminoindazolové deriváty aktivní jako inhibitory kinázy, způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky obsahující tyto deriváty

Info

Publication number: CZ2004359A3
Application number: CZ2004359A
Authority: CZ
Inventors: Raffaella Amici; Matteo D¨Anello; Katia Martina; Barbara Salom; Anna Vulpetti
Original assignee: Pharmacia Italia S.P.A.
Priority date: 2001-09-26
Filing date: 2002-09-19
Publication date: 2004-09-15
Also published as: ES2380054T3; JP4542338B2; EA007430B1; JP2005512967A; BR0212841A; CA2460145A1; KR20040047869A; DE60238999D1; EP1820503A3; CA2460145C; EP1820503B1; MXPA04001114A; CN1556702A; EP1432416B1; NZ531765A; IL160744A0; EA200400476A1; ATE495741T1; EP1432416A1; US20040254177A1

Description

Aminoindazolové deriváty aktivní jako inhibitory kinázy, způsob jejich přípravy a farmaceutické prostředky obsahující tyto deriváty

Oblast techniky

Předkládaný vynález se týká aminoindazolových derivátů aktivních jako inhibitory kinázy, zejména se týká 3-aminoindazolových derivátů, způsobu jejich přípravy, farmaceutických prostředků obsahujících tyto deriváty a jejich použití jako terapeutická činidla, zejména při léčbě chorob spojených s neregulovanými proteinkinázami.

Špatná funkce protein-kináz (PKs) je charakteristickým znakem mnoha chorob. Značná část onkogenů a proto-onkogenů zapojených do rakovin u lidí kóduje PKs. Zvýšené aktivity PKs se také vyskytují u mnoha nemaligních chorob, jako je benigní zbytnění prostaty, familiální adenomatóza, polypóza, neurofibromatóza, psoriáza, proliferace buněk hladkého svalstva spojená s atherosklerózou, plicní fibróza, artritická glomerulonefritida a pooperační stenóza a restenóza.

PKs se dále účastní zánětlivých stavů a množení virů a parazitů. PKs mohou dále hrát důležitou roli při pathogenezi a vzniku neurodegenerativních poruch.

Obecné odkazy na neregulované nebo špatně nefungující PKs jsou uvedeny např. v Current Opinion in Chemical Biology 1999, 3, 459 - 465.

Předmětem vynálezu je poskytnout sloučeniny, které jsou užitečnými činidly při léčbě velkého množství chorob způsobených a/nebo spojených s neregulovanou aktivitou protein-kináz.

Dalším předmětem vynálezu je poskytnout sloučeniny, které jsou vybavené inhibiční aktivitou vůči mnoha protein-kinázám.

V předkládaném vynálezu se učinil objev, že některé 3-aminoindazolové deriváty, zde nadále zkráceně nazývané indazolové deriváty nebo indazoly, jsou vybavené inhibiční aktivitou vůči mnoha protein-kinázám, a jsou tak užitečné při léčbě chorob spojených s neregulovanými protein-kinázami.

Indazoly podle předkládaného vynálezu jsou zejména užitečné při léčbě různých typů rakovin včetně ale bez omezení na karcinom měchýře, prsu, tlustého střeva, ledviny, jater, plic včetně rakoviny malých plicních buněk, jícnu, žlučníku, vaječníků, pankreatu, žaludku, děložního čípku, štítné žlázy, prostaty a kůže včetně karcinomu plochých buněk; hematopoézové nádory lymfoidní skupiny včetně • · · · · · • · · · · • · · · · · · ····· · · ···· leukémie, akutní lymfocytové leukémie, akutní lymfoblastové leukémie, lymfomu Bbuněk, lymfomu T-buněk, Hodgkinova lymfomu, non-Hodgkinova lymfomu, lymfomu vlasových buněk a Burkettova lymfomu; hematopoézové nádory myeloidní skupiny včetně akutní a chronické myeloidní leukémie, myelodysplastového syndromu a promyelocytové leukémie; nádory mezenchymálního původu včetně fíbrosarkomu a rhabdomyosarkomu; nádory cetrální a periferní nervové soustavy včetně astrocytomu, neuroblastomu, gliomu a schwannomu; další nádory včetně melanomu, seminomu, teratokarcinomu, osteosarkomu, xenoderomu pigmentosum, keratoxanthomu, thyroidní folikulární rakoviny a Kaposiho sarkomu.

Kvůli klíčové roli PKs při regulaci buněčné proliferace jsou tyto indazoly dále užitečné při léčení různých buněčných proliferačních poruch, jako je např. benigní zbytnění prostaty, familiální adenomatóza, polypóza, neurofibromatóza, psoriáza, proliferace buněk hladkého svalstva spojená s atherosklerózou, plicní fíbróza, arthritida glomerulonefritida a pooperační stenóza a restenóza.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné při léčbě Alzheimerovy choroby, o čemž svědčí fakt, že cdk5 je zapojen do fosforylace proteinu tau (J. Biochem. 117, 741-749, 1995).

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu, jako modulátory apoptózy, jsou dále užitečné při léčbě rakoviny, virových infekcí, prevenci vývoje AIDS u jedinců infikovaných virem HIV, autoimunitních chorob a neurodegenerativních poruch.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou užitečné při inhibici angiogeneze tumorů a metastází.

Sloučeniny podle vynálezu jsou užitečné jako inhibitory cyklin-dependentní kinázy (cdk) a dále jako inhibitory dalších protein-kináz, jako jsou například proteinkinázy C v různých isoformách, Met, PAK-4, PAK-5, ZC-1, STLK-2, DDR-2, Aurora 1, Aurora 2, Bub-1, PLK, Chkl, Chk2, HER2, rafl, MEK1, MAPK, EGF-R, PDGFR, FGF-R, IGF-R, VEGF-R, PI3K, WEEL kináza, Src, Abl, Akt, ILK, MK-2, IKK-2, Cdc7, Nek, a tak jsou účinné při léčbě chorob spojených s dalšími protein-kinázami.

Dosavadní stav techniky

V oboru jsou známé některé indazoly a aminoindazoly jako syntetické nebo chemické intermediáty, jako stabilizátory polymerů, jako terapeutická činidla a dokonce jako inhibitory protein-kinázy.

······ ··· ·· · • · φ φφφ φφφ φ φ · φφφφ φφφφ φ φ φ φφ φφφφφφφ φφφφ

V US 28 939 (nové vydání US 3 133 081) od Smithkline Co. jsou zveřejněné některé alkylaminoindazoly, které vykazují aktivitu jako svalový relaxant a analgetikum; mezi nimi 3-methylamino-5-trifluormethylindazol a 3-diethylamino-5-trifluormethylindazol. V Bioorg. Med. Chem. Lett. (1998); 8(7), 715-720, jsou jako inhibitory HlV-proteázy zveřejněné cyklické deriváty /V,/V-močoviny nesoucí 3-aminoindazolové skupiny.

Ve WO 99/32111 od Bayer Co. jsou jako inhibitory p38-kinázy, užitečné při léčbě chorob jiných než rakovina, zveřejněné deriváty diaryl-močoviny; mezi specifickými exemplárními sloučeninami je uvedena V-{4-[(pyridyl-4-yl)oxy]fenyl}-yV-[6-chlor-(indazol-3-yl)]močovina. Ve WO 91/17162 od Pfizer Ltd. jsou jako antagonisté aktivačního faktoru krevních destiček (PAF) zveřejněné imidazopyridinové deriváty dále substituované arylovými skupinami, např. indazolylaminokarbonylfenyl.

Ve WO 01/02369 od Agouron Pharmaceuticals lne. jsou zveřejněné indazolové sloučeniny dále substituované v poloze 3 jinými substituenty než aminoskupinami nebo jejich deriváty, které vykazuji aktivitu inhibitoru proteinkinázy.

V US 5 714 514 od Hoechst jsou zveřejněné merkaptokyanoylamino- nebo alkylthiokyanakryloylaminoheterocykly, které jsou užitečné při léčbě poruch spojených se zvýšeným růstem buněk.

Ve WO 99/65870 od Vertex Pharmaceuticals lne jsou jako inhibitory HIV aspartyl-proteázy zveřejněné deriváty l-acylamino-3-(/V-arylsulfonyl-/V-alkoxyamino)-2-hydroxypropanu, kde arylová část také obsahuje indazolové skupiny.

Jako terapeutická činidla jsou známé některé další specifické indazolové deriváty; je zveřejněno, že 3-[3-(morfolin-4-yl)propionylamino]indazol, 3-(/V,A,-diethylamino)propylamino-5-methoxyindazol, 3-[(3-methyl)morfolin-4-yl]propylamino-5-methoxyindazol, 3-(/\/yV,-diethylamino)propylamino-5-methylindazol a 3-[(3-methyl)morfolin-4-yl]-propylamino-5-methylindazol vykazují analgetickou a protizánětovou aktivitu [viz US 4 751 302 a JP-A-60061569 od Asahi Chemical Industry]; 3-[(2-hydroxyfenyl)karbonylamino]indazol je zveřejněný jako antimikrobiální činidlo [viz Pharmazie (1990), 45(6), 441-2].

V oboru jsou známé další indazoly, zveřejněné hlavně jako chemické intermediáty nebo pro jiné než terapeutické účely, např. polymerní stabilizátory, bělící činidla, barviva a tak podobně.

• · · ·

Patří k nim: 3-(ethoxykarbonylamino)indazol (viz Chemical Abstracts 92(1980), 215 400]; 3-acetylaminoindazol a 3-benzoylaminoindazol [viz J. Org. Chem.(1996), 61(24), 8397-8401]; 3-butyrylaminoindazol, 3-[(4-chlorfenyl)karbonylamino]indazol, 3-[(4-methylfenyl)karbonylamino]indazol a 3-[(3,3-difenyl)propionylamino]indazol [viz Acta Chim. Hung. (1990), 127 (6), 795-802]; 3-[(3,5-dimethylisoxazol-4-yl)karbonylamino]indazol (viz J. Heterocyl. Chem. (1974), 11 (4), 623-6]; 3-[(4-nitrofenyl)karbonylamino]indazol a 3-(fenylacetylamino)indazol [viz J. Chem. Soc., Perkin Trans. 1 (1982), (3), 759-66]; 3-[(2-aminofenyl)karbony lamino] indazol a 3-[(2-nitrofenyl)karbonylamino]indazol [Heterocyles (1996), 43(11), 2385-2396]; 3-[(4-chlor-2-nitrofenyl)karbonylamino]indazol, 3-[(2-amino-4-chlorfenyl)karbonylamino] indazol, 3-[(2-amino-5-chlorfenyl)karbonylamino] indazol a 3-[(3-chlor-6-nitrofenyl)karbonylamino]indazol [viz Arch. Pharm. (1999), 332 (9), 317-320]; 3-(acetylamino)-5-aminoindazol [viz US 3 316 207 od Farbwerke Hoechst A.G.]; 3-dimethylamino-5-trifluormethylindazol (viz DE-A-2 458 965 od Bayer A.G.]; 3-fenylamino-6-methylindazol, 3-fenylamino-, 3-(4-chlor)fenylamino-, 3-(4-methyl)fenylamino-, 3-(3-methyl)fenylamino- a 3-(4-aminosulfonyl)fenylamino-5-methylindazol (viz Chemical Abstracts 78(1973): 136158]; 3-[(l-hydroxy-2-methyl)-2-propyl]amino-6,7-dimethoxyindazol [viz US 4 864 032 od Ortho Pharmaceutical Co.].

V US 4 751 302 od Asahi Chemical Industry Co jsou jako syntetické intermediáty při přípravě léků s analgetickou a protizánětovou aktivitou dále zveřejněné 3-ftalimidoindazol a 4-chlor-3-ftalimidoindazol.

V JP-A-08022109 od Heisei jsou jako sloučeniny tvořící kyanové barvivo zveřejněné sulfonylaminoindazoly, a to zejména alkyloxyfenylsulfonylaminoindazoly s dlouhým řetězcem.

Velká skupina pyrazolových sloučenin užitečných jako inhibitory proteinkinázy je dále zveřejněná v množství patentových přihlášek od Vertex Pharmaceuticals lne., např. WO 02/62789, WO 02/59112, WO 02/59111, WO 02/57259, WO 02/50066, WO 02/50065, WO 02/22608, WO 02/22607, WO 02/22606, WO 02/22605, WO 02/22604, WO 02/22603 a WO 02/22601.

• · · ·

Podstata vynálezu

Předkládaný vynález poskytuje způsob léčení chorob způsobených a/nebo spojených se změněnou aktivitou protein-kinázy, kdy se savci potřebujícímu toto léčení podává účinné množství aminoindazolu obecného vzorce I

kde R je vybírané ze skupiny skládající se z -NHR', -NR'R, -NHCOR', -NHCONHR', -NHCONRR, -NHSO₂R' nebo -NHCOOR', kde R' a R je nezávisle skupina výhodně dále substituovaná vybíraná z přímého nebo rozvětveného C]-Cé alkylu, C₂-C6 alkenylu nebo alkynylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-Cé alkylu, arylu, aryl Cj-Có alkylu, 5- nebo 6-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry; nebo R je ftalimidoskupina obecného vzorce II

(II) všechna R,, pokud jsou přítomná, jsou v poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu a znamenají skupinu, výhodně dále substituovanou, jak je uvedeno výše pro R' nebo R;

m je 0 nebo 1;

nebo jeho farmaceuticky přijatelné sole.

Ve výhodném provedení výše popsaného způsobu je choroba způsobená a/nebo spojená se změněnou aktivitou protein-kinázy vybíraná ze skupiny skládající se z rakoviny, poruch buněčné proliferace, Alzheimerovy choroby, virových infekcí, autoimunitních chorob a neurodegenerativních poruch.

• · φ · · · • φ · φ φ φ φφ φ φφφ φφφ • Φ φ φφφφ φφφφ • φ φ φφφ φφφφ φ φ φ φφφ • ΦΦ ··· ··· •ΦΦ ·· φ φφ φ

Specifické typy rakoviny, kterou lze léčit způsobem podle předkládaného vynálezu, zahrnují karcinom, karcinomu plochých buněk; hematopoézové nádory myeloidní nebo lymfoidní skupiny, nádory mezenchymálního původu, nádory cetrální a periferní nervové soustavy, melanom, seminom, teratokarcinom, osteosarkom, xenoderom pigmentosum, keratoxanthom, thyroidní folikulární rakovinu a Kaposiho sarkomu.

V dalším výhodném provedení výše popsaného způsobu je porucha buněčné proliferace vybíraná ze skupiny skládající se z benigního zbytnění prostaty, familiální adenomatózy, polypózy, neurofibromatózy, psoriázy, proliferace buněk hladkého svalstva spojené s atherosklerózou, plicní fibrózy, artritické glomerulonefritidy a pooperační stenózy a restenózy.

Způsob podle předkládaného vynálezu dále poskytuje inhibici angiogeneze tumorů a metastází.

Předkládaný vynález dále poskytuje aminoindazolový derivát obecného vzorce I

kde R je vybírané ze skupiny skládající se z -NHR', -NR'R, -NHCOR', -NHCONHR', -NHCONRR, -NHSO₂R' nebo -NHCOOR', kde R' a R je nezávisle skupina výhodně dále substituovaná vybíraná z přímého nebo rozvětveného Cj-Có alkylu, C₂-Có alkenylu nebo alkynylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Cj-Cř alkylu, arylu, aryl C1-C6 alkylu, 5- nebo 6-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry; nebo R je ftalimidoskupina obecného vzorce II

o (II) ······ »· · ··· • · · ··· ··· • · · · · · · · · · · • · · · · · ···· · · · ··· • · · ··· · · · • · · · · · · · · všechna Ri, pokud jsou přítomná, jsou v poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu a znamenají skupinu, výhodně dále substituovanou, jak je uvedeno výše pro R' nebo R;

mje 0 nebo 1;

nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl, s výhradou že :

a) pokud R je -NHCOR' a m je 0, pak R' je substituent jiný než methyl, tt-propyl, benzyl, 2,2-difenylethyl, 3,5-dimethylisoxazol-4-yl, 2-(morfolin-4-yl)ethyl, nebo fenyl výhodně substituovaný chlorem, hydroxyskupinou, methylem, nitroskupinou nebo aminoskupinou;

b) pokud indazol je substituovaný v poloze 5 nebo 6 methoxyskupinou, pak R je substituent jiný než 3-(#,V-diethylarnino)propylamino-, 3-[(3-methyl)morfolin-4-yljpropylamino- nebo l-hydroxy-2-methyl-2-propylaminoskupina;

c) vyloučená je sloučenina 3-ftalimidoindazol.

Sloučeniny obecného vzorce I, které jsou předmětem předkládaného vynálezu, mohou nést asymetrické atomy uhlíku a mohou tudíž existovat buď jako racemické směsy, nebo jako jednotlivé optické isomery.

Do rozsahu předkládaného vynálezu tudíž spadají též všechny možné isomery a jejich směsi, metabolity i farmaceuticky přijatelné bioprekursory (jinak označované jako proléčiva) sloučenin obecného vzorce I, a stejně tak všechny terapeutické způsoby léčby je zahrnující.

Pokud není uvedeno jinak, pak v popisu předkládaného vynálezu výraz přímý nebo rozvětvený C,-C₆ alkyl znamená skupinu jako je například methylová, ethylová, «-propylová, isopropylová, zz-butylová, isobutylová, se/r-butylová, Zerc-butylová, rc-pentylová, λζ-hexylová, a tak podobně.

Výraz přímý nebo rozvětvený C₂-C6 alkenyl nebo alkynyl znamená nenasycený uhlovodíkový řetězec obsahující dvojnou nebo trojnou vazbu, jako je například vinyl, ethynyl, 1-propenyl, allyl, 1- nebo 2-propynyl, 1-, 2- nebo 3-butenyl,

1-, 2- nebo 3-butynyl, pentenyl, pentynyl, hexenyl, hexynyl, a tak podobně.

Výraz C3-C6 cykloalkyl znamená skupinu jako je například cyklopropylová, cyklobutylová, cyklopentylová nebo cyklohexylová skupina.

Výraz aryl znamená mono-, bi- nebo póly-, buď karbocyklický, nebo heterocyklický uhlovodík s 1 až 4 kruhy, buď fúzovanými, nebo spojenými navzájem jednou vazbou, kde alespoň jeden z karbocyklických nebo heterocyklických kruhů je aromatický.

·♦·

• · • · 9 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9 · 9 9 9 9 • 9 9 9 9

9 9 9 9

Nelimitující příklady arylových skupin jsou například fenyl, indanyl, bifenyl, a- nebo β-naftyl, fluorenyl, 9,10-dihydroanthracenyI, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, indolyl, imidazolyl, imidazopyridyl, 1,2-methylendioxyfenyl, thiazolyl, isothiazolyl, pyrrolyl, pyrrolyl-fenyl, furyl, fenyl-furyl, benzotetrahydrofuranyl, oxazolyl, isoxazolyl, pyrazolyl, chromenyl, thienyl, benzothienyl, isoindolinyl, benzoimidazolyl, tetrazolyl, tetrazolylfenyl, pyrrolidinyl-tetrazolyl, isoindolinyl-fenyl, chinolinyl, isochinolinyl, 2,6-difenyl-pyridyl, chinoxalinyl, pyrazinyl, fenylchinolinyl, benzofurazanyl, 1,2,3-triazolyl, 1-fenyl-1,2,3-triazolyl, a tak podobně.

Výraz 5- nebo 6-členný heterocyklyl, zde zahrnující aromatické heterocyklické skupiny také označované jako arylové skupiny, dále znamená nasycený nebo částečně nenasycený 5- nebo 6-členný karbocyklus, kde jeden nebo více atomů uhlíku je nahrazeno 1 až 3 heteroatomy jako je dusík, kyslík a síra.

Příklady 5- nebo 6-členné heterocyklylové skupiny, výhodně benzokondenzované nebo dále substituované, zahrnují 1,3-dioxolan, pyran, pyrrolidin, pyrrolin, imidazolidin, pyrazolidin, pyrazolin, piperidin, piperazin, morfolin, tetrahydrofuran, a tak podobně.

Podle výše uvedených významů pro R,, R' a R, libovolná z výše uvedených skupin může být dále výhodně substituovaná v libovolné volné poloze jednou nebo více skupinami, například 1 až 6 skupinami vybíranými z halogenu, nitroskupiny, oxoskupiny (=0), karboxyskupiny, kyanoskupiny, alkylu, perfluorovaného alkylu, alkenylu, alkynylu, cykloalkylu, arylu, heterocyklylu, aminoskupiny a jejích derivátů jako je například alkylamino-, dialkylamino-, arylamino-, diarylamino-, ureido-, alkylureido- nebo arylureidoskupina; karbonylaminoskupin a jejich derivátů jako je například formylamino-, alkylkarbonylamino-, alkenylkarbonylamino-, arylkarbonylamino-, alkoxykarbonylaminoskupina; hydroxyskupiny a jejích derivátů jako je například alkoxy-, aryloxy-, alkylkarbonyloxy-, arylkarbonyloxy-, cykloalkenyloxynebo alkylidenaminooxyskupina; karbonylové skupiny a jejích derivátů jako je například alkylkarbonylová, arylkarbonylová, alkoxykarbonylová, aryloxykarbonylová, cykloalkyloxykarbonylová, aminokarbonylová, alkylaminokarbonylová, dialkylaminokarbonylová; sirných derivátů jako je například alkylthio-, arylthio-, alkylsulfonylová, arylsulfonylová, alkylsulfinylová, arylsulfinylová, arylsulfonyloxy-, aminosulfonylová, alkylaminosulfonylová nebo dialkylaminosulfonylová skupina.

····

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 999 9999 9 9 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 9 99 9

Kde to je vhodné, může být libovolná z výše uvedených skupin dále substituovaná jednou nebo více uvedenými skupinami.

Pokud není v popise uvedeno jinak, výraz atom halogenu v uvedených skupinách znamená atom fluoru, chloru, bromu nebo jodu.

Výraz perfluorovaný alkyl znamená přímou nebo rozvětvenou Cj-Cf, alkylovou skupinu jak je definovaná výše, kde více než jeden atom vodíku je nahrazen atomy fluoru. Příkladem perfluorováných alkylových skupin je skupina trifluormethylová, 2,2,2-trifluorethylová, 1,2-difluorethylová, 1,1,1,3,3,3-hexafluorpropyl-2-ylová, a tak podobně.

Z výše uvedeného je odborníkovi jasné, že libovolná skupina, jejíž název je název složený, jako je například cykloalkylalkyl, arylalkyl, heterocyklylalkyl, alkoxy, alkylthio-, aryloxy-, arylalkoxy-, heterocyklyloxy-, heterocyklylalkoxy-, alkylkarbonyloxy-, a tak podobně, je brána za obecně vytvořenou z částí, ze kterých je odvozená.

Výraz heterocyklylalkyl například znamená alkylovou skupinu, která je dále substituovaná heterocyklylovou skupinou, jak je definováno výše.

Farmaceuticky přijatelné sole sloučenin obecného vzorce I jsou kyselé adiční sole s anorganickou nebo organickou kyselinou, např. kyselinou dusičnou, chlorovodíkovou, bromovodíkovou, sírovou, chloristou, fosforečnou, octovou, trifluoroctovou, propionovou, glykolovou, mléčnou, oxalovou, malonovou, jablečnou, maleinovou, vinnou, citrónovou, benzoovou, skořicovou, mandlovou, methansulfonovou, 2-hydroxyethansulfonovou a salicylovou, a stejně tak sole s anorganickými nebo organickými bázemi, např. alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, zejména s hydroxidem sodným, draselným, vápenatým nebo hořečnatým, uhličitany nebo hydrogenuhličitany, acyklickými nebo cyklickými aminy, výhodně methylaminem, ethylaminem, diethylaminem, triethylaminem nebo pyridinem.

Ze všeho výše uvedeného je odborníkovi jasné, že pokud ve sloučeninách obecného vzorce I m je 0, pak nejsou žádné -OR] skupiny, tedy žádné skupiny Ri připojené na indazolový skelet prostřednictvím atomu kyslíku. V takovém případě jsou tedy polohy 5 nebo 6 podle číslování uvedeného níže nesubstituované (nebo substituované vodíkem).

O) ······ ··· ··· • · · · · · ·«· ·· · · · · · * · · · • · · · · · ···· · · · ··· ··· · · · « · · ··· ·· · ·· ·

Pokud m je 1, pak je v libovolné poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu přítomna jedna skupina -ORi (tedy Ri).

Do první skupiny výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu patří sloučeniny obecného vzorce I, kde R je skupina -NHR' nebo -NRR a R', R, Ri a m jsou definované výše.

Výhodnější z této skupiny jsou sloučeniny, kde m je 1 a R_t je v libovolné poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu.

Ještě výhodnější jsou sloučeniny, kde Ri, R' a R jsou vybírané, každé nezávisle, z C₂-C6 alkenylu, C3-C6 alkynylu, arylu, aryl Ci-Cg alkylu, 5- nebo 7členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Cé alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

Do další skupiny výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu patří sloučeniny obecného vzorce I, kde R je skupina -NHCOR' a R', Ri a m jsou definované výše.

Výhodnější z této skupiny jsou sloučeniny, kde m je 1 a Ri je v libovolné poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu.

Ještě výhodnější jsou sloučeniny, kde R, a R'jsou vybírané, každé nezávisle, z Ci-Có alkylu, C₃-C₆ cykloalkylu nebo cykloalkyl C|-C₆ alkylu, arylu, aryl Ci-C₆alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-C₆ alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku a síry.

Do další skupiny výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu patří sloučeniny obecného vzorce I, kde R je skupina -NHCONHR' nebo -NHCONRR, a R', R, Ri a m jsou definované výše.

Výhodnější z této skupiny jsou sloučeniny, kde m je 1 a R) je v libovolné poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu.

Ještě výhodnější jsou sloučeniny, kde Rj, R' a R jsou vybírané, každé nezávisle, z C)-C₆ alkylu, C₃-C₆ cykloalkylu nebo cykloalkyl C|-C₆ alkylu, arylu, aryl ·· · • · » ♦ · ···· • ·

• · * « • · ·

• · · · • · · · · • « · ·· ·

Ci-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl C|-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku a síry.

Do další skupiny výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu patří sloučeniny obecného vzorce I, kde R je skupina -NHSO2R', a R', R| a m jsou definované výše.

Ještě výhodnější jsou sloučeniny, kde Ri a R'jsou vybírané, každé nezávisle, z C|-Cé alkylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-Có alkylu, arylu, aryl Cj-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Cj-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku a síry.

Do další skupiny výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu patří sloučeniny obecného vzorce I, kde R je skupina -NHCOOR' a R', Ri a m jsou definované výše.

Ještě výhodnější jsou sloučeniny, kde Ri a R'jsou vybírané, každé nezávisle, z C|-Cg alkylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl C|-Cé alkylu, arylu, aryl Ci-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Cj-Cé alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku a síry.

Do další skupiny výhodných sloučenin podle předkládaného vynálezu patří sloučeniny obecného vzorce I, kde R je ftalimidoskupina obecného vzorce II a Ri a m jsou definované výše.

Výhodnější z této skupiny jsou sloučeniny, kde m je 1 a R| je v libovolné poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu.

Ještě výhodnější jsou sloučeniny, kde Ri je vybírané z C₂-C6 alkenylu, C3-C6 alkynylu, arylu, aryl C]-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl C|-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku a síry.

Specifické příklady sloučenin obecného vzorce I, výhodně ve formě farmaceuticky přijatelných solí, jsou uvedeny v experimentální části v příkladech provedení vynálezu.

·· ···» • · · ·« · • * ♦ ··· ··· ··· · *· · ···· · · · · · · ···· · · · ·«· ¹ ··· · · · · 4 Q ·· · ·» · ·· ·

Jak je uvedeno výše, dalším předmětem předkládaného vynálezu je způsob přípravy aminoindazolových derivátů obecného vzorce I.

Sloučeniny obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné sole, kde R je definované výše, ale není to ftalimidoskupina obecného vzorce II, lze připravit způsobem, kdy:

a) 2-aminobenzonitrilový derivát obecného vzorce III

CN (lil) nh₂ kde m je definované výše a R', pokud je přítomno, je methylová nebo benzylová skupina, reaguje za kyselých podmínek s nitritem sodným v přítomnosti chloridu cínatého, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV

b) sloučenina obecného vzorce IV reaguje s ftalanhydridem za vzniku sloučeniny obecného vzorce V

c) sloučenina obecného vzorce V reaguje s vhodným činidlem štěpícím ether za vzniku odpovídajícího hydroxyderivátu obecného vzorce VI ·· ···· ·» · «· ·· ·»·· ·«· ·· · ···· ···· • · · · · · ···· · · · ···« ··· ··· ···

d) sloučenina obecného vzorce VI reaguje s vhodným sililačním činidlem (R^lv)3SiZ, kde každé R'^v je shodné nebo rozdílné a je to přímá nebo rozvětvená C1-C4 alkylová skupina, a Z je atom halogenu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VII

e) sloučenina obecného vzorce VII reaguje s vhodným činidlem chránícím indazolový dusík, nebo se indazolový dusík ochrání ukotvením na vhodnou polymerní pryskyřici, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VIII

Q kde Q je výše uvedená chránící skupina nebo představuje nosnou pryskyřici;

9

f) sloučenina obecného vzorce VIII reaguje s hydrazin-monohydrátem za vzniku sloučeniny obecného vzorce IX

Q a sloučenina obecného vzorce IX reaguje v libovolném z následujících kroků g.l) nebo g.2);

g.l) s vhodným činidlem obecného vzorce R'-Z (X), R'-COZ (XI), R'-NCO (XII), R'-SO₂Z (XIII) nebo obecného vzorce ROCOZ (XIV), kde R' je definované výše a Z znamená atom halogenu nebo vhodnou odstupující skupinu, za vzniku odpovídající sloučeniny obecného vzorce XV

Q kde R je skupina -NHR', -NHCOR', -NHCONHR', -NHSO₂R' nebo -NHCOOR¹ a, pokud je to žádoucí, sloučeniny, kde R je skupina -NHR' nebo -NHCONHR', reagují se sloučeninou obecného vzorce RZ (XVI), kde R a Z jsou definované výše, za vzniku sloučenin obecného vzorce XV, kde R je skupina -NR'R nebo -NHCONRR;

g.2) se sloučeninou obecného vzorce R'RNH (XVII), kde R' a R jsou definované výše, v přítomnosti 4-nitrofenyl-chloroformiatu, za vzniku odpovídající sloučeniny obecného vzorce XV, kde R je skupina -NHCONRR;

h) libovolná z výše uvedených sloučenin obecného vzorce XV reaguje s tetrabutylamonium-fluoridem za vzniku sloučeniny obecného vzorce XVIII

Q

i) sloučenina obecného vzorce XVIII reaguje s derivátem obecného vzorce RiZ (XIX), kde R| je definované výše a Z je atom halogenu, vhodná odstupující skupina nebo hydroxyskupina, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XX

Q

j) odstraní se chránící skupina ze sloučeniny obecného vzorce XX nebo se odštěpí polymerní pryskyřice za vzniku požadované sloučeniny obecného vzorce I, a pokud je to žádoucí, převede se na jinou sloučeninu obecného vzorce I a/nebo na její farmaceuticky přijatelnou sůl.

Ze všeho výše uvedeného je odborníkovi v oboru jasné, že pokud sloučenina obecného vzorce I, připravená výše uvedeným způsobem, je získaná jako směs isomerů, jejich dělení na jednotlivé isomery obecného vzorce I, prováděné běžnými technikami, spadá stále do rámce předkládaného vynálezu.

Stejně tak do rámce předkládaného vynálezu spadá převádění odpovídajících solí na volnou sloučeninu obecného vzorce I s použitím postupů dobře známých v oboru.

V kroku a) předkládaného způsobu reaguje sloučenina obecného vzorce III, výhodně 2-amino-4-methoxybenzonitril nebo 2-amino-5-benzyloxybenzonitril, s dusitanem sodným. Diazoniová sůl se redukuje v přítomnosti chloridu cínatého v kyselém prostředí, např. s použitím kyseliny chlorovodíkové nebo kyseliny sírové.

Reakce se provádí ve směsi vody a vhodného rozpouštědla jako je například methanol, ethanol, a tak podobně, v teplotním rozsahu od 0 do 10 °C.

• · • · · ·

Reakce se provádí přídavkem dusitanu sodného do míchaného roztoku sloučeniny obecného vzorce III v koncentrované chlorovodíkové kyselině, směs se dále míchá po dobu 1 až 3 hodin.

Poté se suspenze překape do míchaného roztoku chloridu cínatého v koncentrované chlorovodíkové kyselině a ochladí se na 0 °C, směs se dále míchá po odpovídající dobu, například 4 až 6 hodin.

V kroku b) předkládaného způsobu sloučenina obecného vzorce IV reaguje s ftalanhydridem způsobem obvyklým pro přípravu ftalimidoderivátů. Reakce se provádí v různých rozpouštědlech včetně chloroformu, acetonitrilu, dioxanu, tetrahydrofuranu, dimethylformamidu, dimethylacetamidu, a tak podobně; výhodně v acetonitrilu. Při tomto provedení se ftalanhydrid přidává do roztoku sloučeniny obecného vzorce V. Teplota se poté zvýší na odpovídající hodnotu, například 70 až 100 °C; výhodně na 80 °C. Směs se míchá po odpovídající dobu v rozmezí 1 až 4 hodiny.

V kroku c) předkládaného způsobu se sloučenina obecného vzorce V převede na odpovídající hydroxyderivát reakcí s vhodným činidlem štěpícím ether jako je například sůl pyridinium-hydrochlorid, jodtrimethylsilan nebo bromid boritý. Reakce se provádí v samotném pyridinium-chloridu, nebo s jinými činidly v dichlormethanu nebo chloroformu. Výhodně se používá čistý pyridinium-chlorid.

V tomto provedení se směs pyridinium-chloridu a sloučeniny obecného vzorce V zahřeje na odpovídající teplotu v rozmezí 80 až 200 °C, přičemž se míchá po dobu v rozmezí 1 až 3 hodiny.

V kroku d) předkládaného způsobu reaguje sloučenina obecného vzorce VI se silylderivátém, výhodně /erc-butyl(dimethyl)silylchloridem (TBDMSC1), za vzniku odpovídajícího silyletherderivátu. Reakce se provádí v přítomnosti vhodné báze jako je například l,5-diazabicyklo[4.3.0]non-5-en (DBN), nebo výhodněji 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU).

V tomto provedení se férc-butyl(dimethyl)silylchlorid (TBDMSC1) přidává do roztoku sloučeniny obecného vzorce Ví. Reakce se provádí v různých rozpouštědlech jako je dichlormethan, acetonitril, dimethylformamid, a tak podobně; výhodný je dichlormethan. Teplota se pohybuje v rozmezí 20 až 40 °C, přičemž se směs míchá po dobu v rozmezí 1 až 4 hodiny.

• · · · • · ·

• · • · · • · · ·

V kroku e) předkládaného způsobu se takto získaný indazolový derivát obecného vzorce VII chrání bud’ na indazolovém atomu dusíku, nebo se ukotví na vhodnou polymerní pryskyřici.

Chránění se provádí obvyklými způsoby dobře v oboru známými, například s použitím vhodné chránící skupiny pro dusík, jako je například skupina íerc-butoxykarbonylová (BOC).

Indazol obecného vzorce VII lze ve stejné poloze dále výhodně ukotvit na inertní polymerní nosič, jako je například 2-chlortritylchloridová pryskyřice, tritylchloridová pryskyřice, Wangova p-nitrofenyl-karbonátová pryskyřice nebo brom-4-methoxyfenylmethyl-polystyren, které jsou všechny v této oblasti techniky běžně známé.

Stejné provedení je zejména výhodné pro přípravu sloučenin obecného vzorce I za podmínek syntézy na pevné fázi (SPS), které se typicky používají při přípravě knihoven sloučenin metodami kombinatorické chemie, například metodami uváděnými dále.

Reakce s pryskyřicí se provádí v přítomnosti malého nadbytku vhodné báze, například aminu, např. diisopropyl(ethyl)aminu (DIPEA), triethylaminu (TEA), l,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-enu (DBU) nebo 2-/erc-butylimino-2-diethylamino-l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu, ve vhodném rozpouštědle, například v dichlormethanu, chloroformu, tetrahydrofuranu, dimethylformamidu, dimethylacetamidu, a tak podobně. Výhodně se reakce provádí v dichlormethanu při teplotě 20 °C.

Reakce se provádí přídavkem báze a sloučeniny obecného vzorce VII k suspenzi pryskyřice, směs se míchá při teplotě 20 °C po stanovenou dobu, například až 24 hodin.

V kroku f) předkládaného způsobu reaguje derivát obecného vzorce VIII s hydrazin-monohydrátem za štěpení ftalimidoskupiny.

Reakce se výhodně provádí s použitím velkého nadbytku, například až 10 ekvivalentů, hydrazin-hydrátu nebo monohydrátu, v přítomnosti vhodných rozpouštědel, jako jsou například halogenované uhlovodíky, nižší alkoholy a jejich směsi.

Výhodná rozpouštědla jsou dichlormethan, ethanol a jejich směsi.

······ ··· ·· · ·· » · · · · · · • · » ···· ···

ΙΟ ··· ···········

Ιο · · · ····· • · · · · · · ·

Reakce se provádí přídavkem hydrazinu do roztoku sloučeniny obecného vzorce VIII, směs se míchá po stanovenou dobu při teplotě v rozmezí 20 až 45 °C. Výhodně se reakční směs míchá při 40 °C po dobu 16 hodin.

V kroku g.l) nebo g.2) předkládaného způsobu reaguje aminoderivát obecného vzorce IX s vhodným činidlem obecného vzorce X až XIV nebo se sloučeninou obecného vzorce XVII dobře známými postupy.

Typicky sloučenina obecného vzorce IX reaguje se sloučeninou obecného vzorce X za vzniku odpovídajícího -NHR'-derivátu, kde R' je definované výše; se sloučeninou obecného vzorce XI za vzniku odpovídajícího -NHCOR' acylderivátu; se sloučeninou obecného vzorce XII za vzniku odpovídajícího -NHCONHR' ureidoderivátu; se sloučeninou obecného vzorce XIII za vzniku odpovídajícího -NHSO₂R' derivátu; se sloučeninou obecného vzorce XIV za vzniku odpovídajícího -NHCOOR' derivátu. Nebo sloučenina obecného vzorce IX reaguje se sloučeninou obecného vzorce R'RNH (XVII), v přítomnosti 4-nitrofenyl-chloroformiatu, za vzniku odpovídajícího ureido -NHCONR'R derivátu.

Všechny výše uvedené reakce se provádějí obvyklými způsoby běžně používanými při přípravě funkčních derivátů aminoderivátů, kdy se vychází z odpovídajícího aminu.

Skupina Z u sloučenin obecného vzorce X výhodně znamená vhodnou odstupující skupinu, například jod, brom nebo zbytek kyseliny borité; skupina Z u sloučenin obecného vzorce XI, XIII nebo XIV znamená atom halogenu a ještě výhodněji atom chloru.

Kromě výše uvedeného je odborníkovi v oboru jasné, že kdykoliv je to žádoucí, libovolnou z výše uvedených takto připravených sloučenin obecného vzorce XV, kde R znamená skupinu -NHR' nebo -NHCONHR', lze dále převést na odpovídající derivát, kde R bude skupina -NR'R, respektive -NHCONR'R.

Všechny tyto reakce se provádějí obvyklými způsoby, reakcí příslušné intermediátové sloučeniny obecného vzorce XV s vhodným derivátem obecného vzorce XVI.

V tomto provedení se sloučenina obecného vzorce IX rozpustí ve vhodném rozpouštědle jako je dichlormethan, dimethylformamid, tetrahydrofuran, dioxan nebo podobně, a přidá se vhodná báze jako je triethylamin, diisopropyl(ethyl)amin, uhličitan sodný nebo podobně. Poté se přidá sloučenina obecného vzorce XI, XIII nebo XIV a směs se míchá po dobu 2 až 15 hodin, při teplotě v rozmezí 20 až 80 °C.

• · · ·· ···· • 9 · 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 (Λ ······ ···· · · · ···

IV · · · 9 9 9 9 9 9

999 99 9 99 ·

V případě použití isokyanátu obecného vzorce XII, jsou reakční podmínky stejné, s výhradou, že není nutná báze. Ve všech těchto reakcích se výhodně používá vhodný kazalyzátor, například dimethylaminopyridin.

Vpodstatě analogické postupy se používají při reakci sloučeniny obecného vzorce XII se sloučeninou obecného vzorce X, za vzniku odpovídajícího funkčního derivátu aminoderivátu obecného vzorce XIV, podle dobře známých postupů.

Obvyklým postupem lze například provést reakci sloučeniny obecného vzorce IX s derivátem obecného vzorce X, kde Z je halogen, například jod nebo brom, a R' je arylalkylová skupina, například benzylová skupina.

Nebo sloučenina obecného vzorce IX reaguje s derivátem obecného vzorce X, kde Z atom bromu a R'je arylová skupina, v přítomnosti katalyzátoru na bázi palladia, jako je například tris(dibenzylidenaceton)dipalladium, palladium-acetát nebo l,l'-bis(difenylfosfino)ferrocen-dichlorpalladium, s přídavkem vhodné báze, například Zerc-butoxidu draselného, uhličitanu česného nebo podobně, a ligandu palladia jako je 2,2'-bis(difenylfosfmo)-l,r-binaftyl, tri-o-tolylfosfin, tri-u-butylfosfin, tri-Zerc-butylfosfín, a tak podobně, za vzniku odpovídajícího derivátu obecného vzorce XV.

V tomto provedení se sloučenina obecného vzorce IX suspenduje ve vhodném bezvodém rozpouštědle jako je toluen, V-methyl-2-pyrrolidon, dimethoxyethan, dioxan, a tak podobně, a přidá se sloučenina obecného vzorce X, katalyzátor, báze a ligand. Suspenze se poté zahřeje na vhodnou teplotu v rozmezí 50 až 100 °C, přitom se směs dále míchá po dobu 8 až 5 hodin. Reakce se provádí v inertní atmosféře.

V kroku h) předkládaného způsobu sloučenina obecného vzorce XV poté reaguje s tetrabutylamonium-fluoridem za vzniku odpovídajícího hydroxyderivátu obecného vzorce XVIII. Sloučenina obecného vzorce XV se suspenduje v bezvodém rozpouštědle jako je dioxan, tetrahydrofuran nebo podobně, a přidá se roztok tetrabutylamonium-fluoridu ve vhodném rozpouštědle. Roztok se míchá po dobu 2 až 16 hodin, v teplotním rozsahu 20 až 50 °C.

Takto získaný produkt obecného vzorce XVIII může dále reagovat s vhodným derivátem obecného vzorce XIX v kroku i) předkládaného způsobu.

Reakce se sloučeninou obecného vzorce XIX, kde Z je atom halogenu jako je brom nebo chlor nebo vhodná odstupující skupina, se provádí v přítomnosti báze jako je například hydroxid sodný, hydrid sodný, 2-ferc-butylimino-2-diethylamino-l,39 9 ··« · • · · · · · • · · · · · 9 9 9

9 · · · · · · · · · · · · · 9 9 9999 9 9 9 9999 ···· : ·..· : ·.·* :

-dimethylperhydro-l,3,2-diaza-fosforin nebo výhodněji uhličitan česný, za vzniku odpovídajícího etherderivátu obecného vzorce XX.

V tomto provedení se sloučenina obecného vzorce XVIII suspenduje ve vhodném rozpouštědle jako je dimethylacetamid, tetrahydrofuran, dioxan nebo výhodněji dimethylformamid, a přidá se báze.

Směs se míchá 5 až 36 hodin v teplotním rozsahu 20 až 80 °C. Nebo lze tyto sloučeniny obecného vzorce XX připravit reakcí derivátu obecného vzorce XVIII se sloučeninou obecného vzorce XIX, kde Z je hydroxyskupina, za podmínek Mitsunobuovy reakce, např. v přítomnosti trifenylfosfinu a diisopropylazo-dikarboxylátu.

V tomto provedení se trifenylfosfin, diisopropylazo-dikarboxylát a sloučenina obecného vzorce XIX rozpustí ve vhodném rozpouštědle jako je tetrahydrofuran, dioxan nebo podobně, a roztok se převede do roztoku sloučeniny obecného vzorce XVIII ve vhodném rozpouštědle jako je tetrahydrofuran, dioxan nebo podobně, v přítomnosti vhodné báze jako je triethylamin nebo diisopropyl(ethyl)amin. Směs se míchá po dobu v rozmezí 2 až 15 hodin, při teplotě v rozsahu 0 až 20 °C.

V kroku j) předkládaného způsobu se u sloučeniny obecného vzorce XX obvyklým způsobem za kyselých podmínek odstraní chránící skupina z indazolového atomu dusíku. Sloučenina obecného vzorce XX se suspenduje ve vhodném rozpouštědle jako je methylalkohol, ethylalkohol nebo podobně, a přidá se koncentrovaný roztok chlorovodíkové kyseliny. Směs se míchá po stanovenou dobu 5 až 15 hodin v teplotním rozsahu 20 až 40 °C; výhodně při 20 °C. Nebo se intermediátová sloučenina obecného vzorce XX odštěpí z pryskyřice, ke které je ukotvena.

Odštěpení z pryskyřice se provádí například v přítomnosti trifluoroctové kyseliny za vzniku požadované sloučeniny obecného vzorce I. Pryskyřice se suspenduje v roztoku 5 až 95% trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu a směs se míchá při 20 °C po dobu v rozmezí 5 minut až 3 hodin.

Z výše uvedeného je odborníkovi v oboru jasné, že sloučeniny obecného vzorce I, kde R| a m jsou definované výše a R je ftalimidoskupina obecného vzorce II, a jejich farmaceuticky přijatelné sole, lze připravit reakcí sloučeniny obecného vzorce VIII analogickým způsobem jako v krocích h), i) a j) předkládaného způsobu, za vzniku požadovaného derivátu obecného vzorce I, kde namísto skupiny R je ftalimidoskupina obecného vzorce II.

•··· · ·

Při přípravě sloučenin obecného vzorce I, kde R je sulfonamido (-NHSO₂R') skupina, lze výše uvedené syntetické schéma výhodně modifikovat změnou pořadí kroků při odstraňování chránících skupin.

Sloučeniny obecného vzorce I, kde R je -NHSO₂R' skupina, lze výhodně připravit reakcí intermediátových derivátů obecného vzorce VIII, připravených v kroku e) předkládaného způsobu, s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XVIII, kde R je ftalimidoskupina.

Takto získané sloučeniny obecného vzorce XVIII poté reagují s derivátem obecného vzorce XIX v kroku i) předkládaného způsobu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XX, kde Rje ftalimidoskupina.

Výše uvedené sloučeniny obecného vzorce XX poté reagují v kroku f) předkládaného způsobu s hydrazin-monohydrátem, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XX, kde Rje -NH₂.

Výše uvedené sloučeniny obecného vzorce XX poté reagují s vhodným derivátem obecného vzorce XIII jako v kroku g.l) předkládaného způsobu, za vzniku odpovídajících sulfonamidoderivátů obecného vzorce XX, kde R znamená -NHSO₂R' skupinu, které jsou dále v krokuj) předkládaného způsobu zbaveny chránící skupiny nebo odštěpeny z pryskyřice.

Při přípravě sloučenin obecného vzorce I podle kteréhokoliv z provedení předkládaného způsobu, která všechna spadají do rozsahu předkládaného vynálezu, musí být výhodné funkční skupiny jak u výchozích látek, tak činidel nebo jejich intermediátů, které by mohly vést k nežádoucím vedlejším reakcím, příslušně chráněné podle obvyklých způsobů.

Konverze na volné nechráněné sloučeniny se provádí taktéž známými postupy.

Farmaceuticky přijatelné sole sloučenin obecného vzorce I, nebo naopak volné sloučeniny z těchto solí, se připravují obvyklými metodami.

Sloučeniny obecného vzorce III jsou známé nebo se snadno připraví známými postupy. Například 2-amino-4-methoxybenzonitril lze připravit postupem popsaným v EP-A-257583, Shionogi & Co; 2-amino-5-benzyloxybenzonitril lze připravit postupem popsaným v J. Heterocykl. Chem. (1972), 9(4), 759-73.

Všechny sloučeniny obecných vzorců X, XI, XII, XIII, XIV, XVI, XVII a XIX jsou známé, komerčně dostupné, nebo snadno připravitelné dobře známými způsoby.

«9 9999

9 999 999

9 9999 9999 __ 9 9 9 9 9 9 9999 9 9 9 999

2? 999999999

999 99 9 99 9

Taktéž libovolné činidlo v předkládaném způsobu, které obsahuje silylový derivát (R'^v)₃SiZ, nebo polymerní pryskyřice jsou komerčně dostupné nebo rychle připravitelné z komerčně dostupných zdrojů.

Jak bylo uvedeno dříve, sloučeniny obecného vzorce I podle předkládaného vynálezu byly výhodně připraveny technikami kombinatorické chemie v oboru dobře známými, provedením výše uvedených reakcí sériovým způsobem s několika intermediáty za podmínek syntézy na pevné fázi SPS.

Všechny výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu, případně ve formě farmaceuticky přijatelných solí, jsou zde výhodně indikovány a definovány jako produkty podle způsobu, tedy jako produkty obecného vzorce I, které jsou připravitelné daným způsobem.

V předkládaném vynálezu se poskytují nové sloučeniny a jejich farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie, například výše uvedeným způsobem, kdy nejprve reaguje sloučenina obecného vzorce IXa

s každou ze sloučenin obecného vzorce X, uvedených v tabulce I, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVa (tBu)(Me)₂Si

Q poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVa s tetrabutylamonium- fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

··»··· ·· · ·« · ·· · · · · · · · • · * · · · · ···· • · · 9 9 9 9999 9 9 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 9 ·· ·

V předkládaném vynálezu se dále poskytují nové sloučeniny a jejich farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie, například výše uvedeným způsobem, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXb

\

Q s každou ze sloučenin obecného vzorce X, uvedených v tabulce I, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVb (tBu)(Me)₂Si

poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVb s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX, uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

V předkládaném vynálezu se dále poskytují nové sloučeniny a jejich farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie, například výše uvedeným způsobem, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXa (tBu)(Me)₂Si

Q φφ φφφφ

ΦΦ Φ φφ φ φφ φφφφ φφφ φφ φ φφφφ φφφφ • φ φ φφφ φφφφ φ φ φ φφφφ φφφ φφφ φφφ φφ φ φφ φ φφ φ s každou ze sloučenin obecného vzorce XI, uvedených v tabulce IV, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVc (tBu)(Me)₂Si

Q poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVc s tetrabutylamonium-íluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX, uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

\

Q s každou ze sloučenin obecného vzorce XI, uvedených v tabulce IV, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVd

poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVd s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů

9999 •99 99 9

9 999 999

9 9999 9999

999 999 9999 99 9 9999

999 999 999

999 99 9 99 · obecného vzorce XIX, uvedených v tabulce II a III, a následně postupem podle kroku j) předkládaného způsobu.

V předkládaném vynálezu se dále poskytují nové sloučeniny a jejich farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie, například výše uvedeným způsobem, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXa

Q s každou ze sloučenin obecného vzorce XII, uvedených v tabulce V, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVe (tBu)(Me)₂Si

Q poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVe s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX, uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

V předkládaném vynálezu se dále poskytují nové sloučeniny a jejich farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie, například výše uvedeným způsobem, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXb (tBu)(Me)₂Si

O

Q ·<► ···· ·· · ·* · • · · · · * · · ·

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 999 9999 99 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9 99 9 s každou ze sloučenin obecného vzorce XII, množství sloučenin obecného vzorce XVf uvedených v tabulce

V, za vzniku

poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVf s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX, uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

Q s každou ze sloučenin obecného vzorce XIII, uvedených v tabulce VI, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVg (tBu)(Me)₂Si

NHSO₂R'

N (XVg) poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVg s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů ·· ·*·· ·· 9 99 9

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 r>.~ 9 9 9 9 9 9 9999 9 9 9 999 £ 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9 99 9 obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

s každou ze sloučenin obecného vzorce XIII, uvedených v tabulce VI, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVh

poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVh s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX, uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

·· ···· ·· · • 9 · • · · · · · · · · • · · · · · · ♦ · · · • » · · · * ···· · · · ··· t · · · · · ···

Tabulka I

Sloučeniny obecného vzorce R'-Z (X)

1.	1 -bromethylbenzen
2.	a-brom-m-xylen
3.	3-fenyl-2-propen-l -ylbromid
4.	3,4-(ethylendioxy)fenacylbromid
5.	2-brom-l-(4-chlorfenyl)-2-fenylethan-l-on
6.	2-benzoyl-2-bromacetanilid
7.	a-brom-4-( 1 -pyrrolidino)acetofenon
8.	ethyl -2- brombutyrát

Tabulka II

Sloučeniny obecného vzorce R)-Z (XIX), kde Z je brom

1.	2-brom-2-fenylacetofenon
2.	benzylbromid
3.	2-methylbenzylbromid
4.	α-brom-w-xylen
5.	2 -brom -25¹ -dimethoxy acetofenon
6.	4-methoxyfenacylbromid
7.	2-brom-4'-fenylacetofenon
8.	1 -brompinakolon
9.	propargylbromid
10.	1 -brom-3-methyl-2-buten
11.	allylbromid
12.	3 -fenyl-2-propen-1 -ylbromid
13.	2-fluorbenzylbromid
14.	2-fluorbenzylbromid
15.	2,6-difluorbenzylbromid
16.	2-chlorbenzylbromid
17.	4-chlorfenacylbromid

·· ···· ·· ·

9 9

9999 9 9 «

Φ· · • · · · • 9 9999

9 9

9

18.	2-kyanbenzylbromid
19.	4-nitrobenzylbromid
20.	methyl-2-brombutyrát
21.	3,5-difluorbenzylbromid
22.	2,4-bis(trifluormethyl)benzylbromid
23.	2-brom-n-fenyIpropionamid
24.	methyl-a-bromfenylacetát
25.	2-(trifluormethyl)benzylbromid
26.	3 -bromcyklohexen
27.	1 -brom-2-fluorethan
28.	l-brom-3-fluorpropan
29.	3,4-dichlorbenzylbromid
30.	3,4-dichlorbenzylbromid
31.	2-(brommethyl)anthrachinon
32.	4-brom-2-fluorbenzylbromid
33.	4-fluor-2-(trifluormethyl)benzylbromid
34.	2,3,6-trifluorbenzylbromid
35.	2,4,5-trifluorbenzylbromid
36.	3-(trifluormethoxy)benzylbromid
37.	4-(trifluormethyl)fenacylbromid
38.	3 -(brommethyl)-5 -chlorbenzo [bjthiofen
39.	2-(difluormethoxy)benzylbromid
40.	1 -brom-2-butyn
41.	1 -brom-2-pentyn
42.	(+/-)-3 -brom-1 -fenyl -2-pyrrolidinon
43.	a-brom-4-( 1 -pyrrolidino)acetofenon
44.	benzy 1 -2 -bromethylether
45.	3,5 -dimethoxy benzylbromid
46.	4-(brommethyl)-3,5-dimethylisoxazol

•v ··«· ·· · • · · • · · * • · · ···· · 9 · · ·» · ·· ·

9 9

9 9 9

9 999

9 9

9

Tabulka III

Sloučeniny obecného vzorce Ri-Z (XIX), kde Z je hydroxyskupina

1.	3 -methylbenzylalkohol
2.	cyklopentanol
3.	3 -methoxybenzylalkohol
4.	methanol
5.	4-fluor-l-butanol
6.	4-fenyl-2-butanol
7.	3-dimethy lamino-1 -propanol
8.	(2-hydroxyethyl)cyklopropan
9.	Cyklopentanmethanol
10.	1,2,3,6-tetrahydrobenzylalkohol
11.	2-(3 -thienyl)ethanol
12.	6-methyl-2-heptanol
13.	1 -methyl-2-pyrrolidin-ethanol
14.	2-methyl-1 -propanol
15.	1 -(2-hydroxyethyl)pyrrolidin
16.	5 -benzyloxy-1 -pentanol
17.	1 -hexanol
18.	4-methyl-5-thiazol-ethanol
19.	3-butyn-l-ol
20.	/7-(2-hydroxyethyl)piperidin
21.	tetrahydrofurfurylalkohol
22.	4'-(2-hydroxyethoxy)acetanilid

• · · · · · ·· · • ·

Tabulka IV

Sloučeniny obecného vzorce R/COZ (XI)

1.	benzoylchlorid
2.	l,3-benzodioxol-5-karbonylchlorid
3.	1 -naftoylchlorid
4.	2-furoylchlorid
5.	4-dimethylaminobenzoylchlorid
6.	4-(trifluormethyl)benzoylchlorid
7.	3,5 -dichlorbenzoylchlorid
8.	benzyloxyacetylchlorid
9.	4-íerc-butylbenzoylchlorid
10.	3,4-dimethoxybenzoylchlorid
11.	2-íluorbenzoylchlorid
12.	4-(trifluormethoxy)benzoylchlorid
13.	1 -acetylisonipekotoylchlorid
14.	2-fenoxypropionylchlorid
15.	4-Zerc-butylfenoxyacetylchlorid
16.	methoxyacetylchlorid
17.	chlorid hippurové kyseliny
18.	4-brombenzoylchlorid
19.	4-fluorbenzoylchlorid
20.	4-rz-butoxybenzoylchlorid
21.	3-chlor-4-fluorbenzoyl chlorid
22.	2-ethoxy-1 -naftoylchlorid
23.	3-chlorthiofen-2-karbonylchlorid
24.	3,5-dimethylisoxazol-4-karbonylchlorid
25.	4-ethylbenzoylchlorid
26.	2-n-propyl-n-valeroylchlorid
27.	3,5-dimethoxybenzoy lchlorid
28.	(s)-V-tosyl-fenylalanylchlorid
29.	w-anisoylchlorid

30.	benzoylchlorid
31.	cyklopropankarbonylchlorid
32.	fenylacetylchlorid
33.	3 -chlorbenzoy lchlorid
34.	4-methoxyfenylacetylchlorid
35.	3-fenyl propan-1 -y lchlorid
36.	4-Zerc-butylfenoxyacetylchlorid
37.	4-/erc-butylfenoxyacetylchlorid
38.	4-methoxyfenylacetylchlorid

Tabulka V

Sloučeniny obecného vzorce R’-NCO (XII)

1.	3 -methoxy feny 1 -i sokyanat
2.	μ-tolyl-isokyanat
3.	3-chlorfenyl-isokyanat
4.	4-bi fenylyl -i sokyanat
5.	4-acetylfenyl-isokyanat
6.	benzoyl-isokyanat
7.	isopropyl-isokyanat
8.	2,4-dimethylfenyl-isokyanat
9.	2-(difluormethoxy)fenyl-isokyanat
10.	4-fluorbenzyl-isokyanat
11.	w-butyl-isokyanat
12.	2,3,4-trifluorfenyl-isokyanat.
13.	3,5-dimethoxyfenyl-isokyanat
14.	2-(methylthio)fenyl-isokyanat
15.	3-(triíluormethyl)fenyl-isokyanat
16.	2-fluorfenyl-isokyanat
17.	2-fenylethyl-isokyanat
18.	4-methoxyfenyl-isokyanat

• · · · · ·

19.	3,4-(methylendioxy)fenyl-isokyanat
20.	3-karbomethoxyfenyl-isokyanat
21.	fenyl-isokyanat
22.	benzyl-isokyanat
23.	isopropyl-isokyanat

Tabulka VI

Sloučeniny obecného vzorce R'-SO₂Z (XIII)

1.	4-isopropylbenzensulfonylchlorid
2.	2-thiofensulfonylchlorid
3.	3-(trifluormethyl)benzensulfonylchlorid
4.	4-n-propylbenzensulfonylchlorid
5.	4-(trifluormethoxy)benzensulfonylchlorid
6.	2,4-difluorbenzensulfonylchlorid
7.	1 -butansulfonylchlorid
8.	3-chlor-2-methylbenzensulfonylchlorid
9.	3 -methoxybenzensulfonylchlorid
10.	3,4-dichlorbenzensulfonylchlorid
11.	3 -methylbenzensulfonyl chlorid
12.	3,5-dimethylisoxazol-4-sulfonylchlorid
13.	4-chlor-2,5-dimethylbenzensulfonylchlorid
14.	5-(Zerc-butyl)-2-methylfuran-3-karbonylchlorid
15.	3,4-dimethoxybenzensulfonylchlorid
16.	2-naftaIensulfonylchlorid
17.	8-chinolinsulfonylchlorid
18.	3,4-difluorbenzensulfonylchlorid
19.	4-/erc-butylbenzensulfonylchlorid
20.	4-chlorbenzensulfonylchlorid
21.	3-methylbenzensulfonylchlorid
22.	V-acetylsulfanilylchlorid

*· ···» • « · 9 · · · · · · · • · · · · · ···· · · · ··· ··· · · · ··· • · « ·· 9 · · ·

Dalším předmětem předkládaného vynálezu je knihovna obsahující dva nebo více aminoindazolových derivátů obecného vzorce I

kde R je vybírané ze skupiny skládající se z -NHR', -NR'R, -NHCOR', -NHCONHR', -NHCONRR, -NHSO2R nebo -NHCOOR', kde R' a R je nezávisle na sobě skupina výhodně dále substituovaná vybíraná z přímého nebo rozvětveného C|-Cé alkylu, C₂-C₆ alkenylu nebo alkynylu, C₃-C₆ cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-C₆alkylu, arylu, aryl Cj-Có alkylu, 5- nebo 6-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Cj-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry; nebo R je ftalimidoskupina obecného vzorce II

(II) všechna Ri, pokud jsou přítomná, jsou v poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu a znamenají skupinu výhodně dále substituovanou, jak je uvedeno výše pro R¹ nebo R;

m je 0 nebo 1;

nebo jejich farmaceuticky přijatelnou sůl,

Z výše uvedeného je odborníkovi v oboru jasné, že když se takto připraví knihovna indazolových derivátů, skládající se například z několika tisíc sloučenin obecného vzorce I, lze tuto knihovnu velmi výhodně použít pro skríning uvedených kináz, jak bylo popsáno dříve.

Obecné odkazy na knihovny sloučenin a jejich použití jako nástrojů pro skríning biologických aktivit, viz J. Med. Chem. 1999, 42, 2373-2382 a Bioorg. Med. Chem. Lett. 10 (2000), 223-226.

•♦ 99 9 9

Farmakologie

Sloučeniny obecného vzorce I jsou aktivní jako inhibitory protein-kinázy a jsou proto užitečné například pro restrikci neregulované proliferace nádorových buněk.

Při terapii je lze použít pro léčbu různých nádorů jako jsou například karcinomy, např. karcinom prsu, karcinom plic, karcinom měchýře, karcinom tlustého střeva, nádory vaječníků a dělohy, sarkomy, např. sarkomy měkkých tkání a kostí, a hematologické malignancie, např. leukemie.

Sloučeniny obecného vzorce I jsou dále užitečné při léčbě dalších poruch buněčné proliferace jako je psoriáza, proliferace buněk hladkého svalstva spojená s atherosklerózou a pooperační stenóza a restenóza, a při léčbě Alzheimerovy choroby.

Inhibiční aktivita předpokládaných cdk/cyklinových inhibitorů a účinek vybraných sloučenin byl stanoven testem založeným na použití technologie SPA (Amersham Pharmacia Biotech).

Test se skládá z přenosu radioaktivně značené fosfátové skupiny kinázou na biotinylovaný substrát. Výsledný 33P-značený biotinylovaný produkt se naváže na streptavidinem-obalené SPA kuličky (biotinová kapacita 130 pmol/mg), a emitované světlo se měří na scintilačním čítači.

Test inhibice aktivity cdk2/Cyklin A

Kinázová reakce:

Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidaly 4 μΜ substrátu na místě biotinylovaného substrátu histon H1 (Sigma # H-5505), 10 μΜ ATP (0,1 mikroCi Ρ³³γ-ΑΤΡ), 4,2 ng komplexu Cyklin A/CDK2, inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/ml BSA). Po 30-minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl do Optiplate.

Po 20-minutové inkubaci pro zachycení substrátu se přidalo 100 μΐ 5M CsCl pro umožnění statifikace kuliček na vrchu desky a po 4-hodinovém stání se na přístroji Top-Count počítala radioaktivita.

Stanovení IC50

Inhibitory se testovaly při různých koncentracích v rozmezí 0,0015 až 10 μΜ. Experimentální údaje se analyzovaly počítačovým programem GraphPad Prizm s použitím 4-parametrové logaritmické rovnice:

• · · · · ·

9» · y = minimum + (maximum - minimum) / (1 + 10^A((logIC50 - x) *směrnice)), kde x je logaritmus koncentrace inhibitoru, y je odezva; y začíná u minima a stoupá po sigmoidní křivce.

Výpočet Ki

Experimentální metoda: Reakce se prováděla v pufru (10 mM Tris, pH 7,5, 10 mM MgCl₂, 0,2 mg/ml BSA, 7,5 mM DTT) obsahujícím 3,7 nM enzymu, histonu a ATP (konstantní poměr neaktivního/značeného ATP 1/3000). Reakce se ukončila EDTA a substrát se uchytil na fosfomembránu (Multiscreen 96-jamkové destičky od Millipore). Po důkladném promytí se Multiscreen destičky detekovaly na Toppočítadle. Pro každou koncentraci ATP a histonu se provedlo kontrolní měření (čas nula).

Provedení experimentu: Reakční rychlosti se měří při 4 rozdílných koncentracích ATP, substrátu (histon) a inhibitoru. V okolí Km hodnot ATP a substrátu a IC50 hodnot inhibitoru (0,3, 1, 3, 9 násobek Km nebo IC50 hodnot) se vytvořila 80-bodová koncentrační matice. Předběžný experiment zaměřený na časový průběh v nepřítomnosti inhibitoru a při různých koncentracích ATP a substrátu umožnil vybrat jedinou hodnotu konečného času (10 min) v lineárním průběhu reakce pro experimentální stanovení Ki.

Předběžná stanovení kinetických parametrů: Kinetické parametry byly předběžně stanoveny pomocí simultánní nelineární regrese nej menších čtverců s použitím [Eq.l] (kompetitivní inhibitor ku ATP, randomní mechanismus) s použitím úplné sady údajů (80 bodů):

Vm-A-B v = —.............-.............-......—...................................

a · Ka · Kb + a -Ka · Β + a · Kb · A + A · Β + a · Ka · I · (Kb+B) [Eq.l]

Ki β kde A=[ATP], B=[Substrát], 1=[inhibitor], Vm = maximální rychlost, Ka, Kb, Ki disociační konstanty ATP, substrátu, respektive inhibitoru, a a β jsou kooperativní faktory mezi substrátem a navázáním ATP, respektive substrátem a navázáním inhibitoru.

Kromě toho byly vybrané sloučeniny charakterizovány na skupině ser/threo kináz striktně spojených s buněčným cyklem (cdk2/cyklin E, cdkl/cyklin Bl, cdk5/p25, cdk4/cyklin Dl), a dále na specificitu na MAPK, PKA, EGFR, IGF1-R a

Aurora-2.

• · · · · · ·· * ·« · * · · · · · · · · • a · ···· · · · · « · · · · · ···· · · · ··· Qn ··· ♦·····

J/ ·*· ·· · ···

Test inhibice aktivity cdk2/Cyklin E

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 10 μΜ v na místě biotinylovaného substrátu histon H1 (Sigma # H-5505), 30 μΜ ATP (0,3 mikroCi Ρ³³γ-ΑΤΡ), 4 ng komplexu GST-Cyklin E/CDK2, inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/ml BSA). Po 60-minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl na Optiplate.

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity cdkl/Cyklin B1

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidaly 4 μΜ v na místě biotinylovaného substrátu histon H1 (Sigma # H-5505), 20 μΜ ATP (0,2 mikroCi Ρ³³γ-ΑΤΡ), 3 ng komplexu Cyklin B/CDK1, inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/ml BSA). Po 20-minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl na Optiplate.

Po 20-minutové inkubaci pro zachycení substrátu se přidalo 100 μΐ 5M CsCl pro umožnění statifikace kuliček na vrchu Optiplate a po 4-hodinovém stání se na přístroji Top-Count počítala radioaktivita.

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity cdk5/p25

Test inhibice aktivity cdk5/p25 se prováděl podle následujícího protokolu.

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 10 μΜ biotinylovaného substrátu histon H1 (Sigma # H-5505), 30 μΜ ATP (0,3 mikroCi P γ-ΑΤΡ), 15 ng komplexu CDK5/p25, inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/ml BSA). Po 30minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl na Optiplate.

• · ···· • · ·

QO · · · · · · ·

J& «· · ·· ·

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity cdk4/Cyklin Dl

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 0,4 uM μΜ myšího GST-Rb (769-921) (# sc-4112 od Santa Cruz) substrátu, 10 μΜ ATP (0,5 μ(3ί Ρ³³γ-ΑΤΡ), 100 ng baculovirus exprimujícího GST-cdk4/GST-Cyklin Dl, vhodné koncentrace inhibitoru v konečném objemu 50 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, 7,5 mM DTT + 0,2 mg/ml BSA). Po 40-minutové inkubaci při 37 °C se reakce ukončila přídavkem 20 μΐ EDTA 120 mM.

Zachycení: Z každé jamky se převedlo 60 μΐ na desku MultiScreen, aby se substrát mohl navázat na fosfocelulózový filtr. Destičky se poté promyly 3-krát 150 μΐ/jamku PBS zbaveného Ca⁺⁺/Mg⁺⁺ a filtrovaly se filtračním systémem MultiScreen.

Detekce: filtry se vysušily při 37 °C, poté se přidalo 100 μΐ/jamku scintilantu a 33

P značený Rb fragment se detekoval počítáním radioaktivity na přístroji Top-Count.

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity MAPK

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 10 μΜ v na místě biotinylovaného substrátu MBP (Sigma # M-1891), 15 μΜ ATP (0,15 mikroCi Ρ³³γ-ΑΤΡ), 3 ng GST-MAPK (Upstate Biotechnology # 14-173), inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 mg/ml BSA). Po 30-minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl na Optiplate.

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity PKA

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 10 μΜ v na místě biotinylovaného substrátu histon H1 (Sigma # H-5505), 10 μΜ ATP (0,2 mikroCi Ρ³³γ-ΑΤΡ), 0,4 U PKA (Sigma # 2645), inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (TRIS HC1 10 mM pH 7,5, MgCl₂ 10 mM, DTT 7,5 mM + 0,2 • · » «

• · ···· mg/ml BSA). Po 90-minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl na Optiplate.

Po 20-minulové inkubaci pro zachycení substrátu se přidalo 100 μΐ 5M CsCl pro umožnění statifíkace kuliček na vrchu Optiplate a po 4-hodinovém stání se na přístroji Top-Count počítala radioaktivita.

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity EGFR

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 10 μΜ v na místě biotinylovaného substrátu MBP (Sigma # M-1891), 20 μΜ ATP (0,04 mikroCi Ρ³³γ-ΑΤΡ), 36 ng hmyzí buňky exprimující GST-EGFR, inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (Hepes 50 mM pH 7,5, MgCl₂ 3 mM, MnCl₂ 3 mM, DTT 1 mM, NaVO₃ 3μΜ + 0,2 mg/ml BSA). Po 20-minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila 100 μΐ PBS + 32 mM EDTA + 0,1% Triton X-100 + 500 μΜ ATP, s obsahem 1 mg SPA kuliček. Poté se objem 110 μΐ převedl na Optiplate.

Po 20-minutové inkubaci pro zachycení substrátu se přidalo 100 μΐ 5M CsCl pro umožnění statifíkace kuliček na vrchu Optiplate a po 4-hodinovém stání se na přístroji Top-Count počítala radioaktivita.

Stanovení IC50 - viz výše

Test inhibice aktivity IGF1-R

Test inhibice aktivity IGF1-R se prováděl podle následujícího protokolu.

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 10 μΜ na místě biotinylovaného substrátu MBP (Sigma # M-1891), 0-20 μΜ inhibitor, 6 μΜ ATP, 1 mikroCi P³³-ATP a 22,5 ng GST-IGF1-R (preinkubovaného 30 minut při pokojové teplotě 60 μΜ neaktivního ATP) v konečném objemu 30 μΐ pufru (HEPES 50 mM pH 7,9, MnCl₂ 3 mM, DTT 1 mM, NaVO₃ 3μΜ). Po 35minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila přídavkem 100 μΐ PBS obsahujícího 32 mM EDTA, 500 μΜ neaktivního ATP, 0,1% Triton X-100, a 10 mg/ml streptavidinem obalených SPA kuliček. Po 20-minutové inkubaci se 110 μΐ převedlo do 96-jamkových destiček Optiplate obsahujících 100 μΐ 5M CsCl. Po 4 hodinách se destičky 2 minuty načítaly na čtečce radioaktivity Packard TOP-Count.

• · φ · · φ • Φ φ φ φ φ • φ · φφ φ·

Test inhibice aktivity Aurora-2

Kinázová reakce: Do každé jamky 96 jamkové destičky s U-dnem se přidalo 8 μΜ biotinylovaného peptidu (4 opakování LRRWSLG), 10 μΜ ATP (0,5 gCi P³³gATP), 15 ng Aurora-2, inhibitor v konečném objemu 30 μΐ pufru (Hepes 50 mM pH 7,0, MgCl₂ 10 mM, DTT 1 mM, 0,2 mg/ml BSA, 3 μΜ orthovanadátu). Po 30minutové inkubaci při pokojové teplotě se reakce ukončila a biotinylovaný peptid se zachytil přídavkem 100 μΐ suspenze s kuličkami.

Statifikace. Do každé jamky se přidalo 100 μΐ 5M CsCl a po 4-hodinovém stání se na přístroji Top-Count počítala radioaktivita.

Stanovení IC50 - viz výše.

Test inhibice aktivity Cdc7/Dbf4

Test inhibice aktivity Cdc7/Dbf4 se prováděl podle následujícího protokolu.

Substrát biotin-MCM2 se trans-fosforyloval komplexem Cdc7/Dbf4 v přítomnosti ATP značeného γ -ATP. Fosforylovaný substrát biotin-MCM2 se poté zachytil na streptavidinem obalených SPA kuličkách a počítáním β se stanovil stupeň fosforylace.

Test inhibice aktivity Cdc7/Dbf4 se prováděl na 96-jamkové destičce podle následujícího protokolu.

Do každé jamky na destičce se přidalo:

-10 μΐ substrátu (biotinylovaný MCM2, výsledná koncentrace 6 μΜ)

-10 μΐ enzymu (Cdc7/Dbf4, výsledná koncentrace 12,5 nM)

-10 μΐ testované sloučeniny (12 zvyšujících se koncentrací v rozsahu nM až μΜ pro získání křivky závislosti na dávce)

-10 μΐ směsi neaktivního ATP (výsledná koncentrace 10 μΜ) a radioaktivního ATP (molární poměr k neaktivnímu ATP 1/2 500) se použilo k nastartování reakce, která probíhala při teplotě 37 °C.

Substrát, enzym a ATP se naředily v 50 mM HEPES pH 7,9, obsahujícím 15 mM MgCl₂, 2 mM DTT, 3 μΜ NaVCh, 2 mM glycerofosfát a 0,2 mg/ml BSA. Rozpouštědlo pro testované sloučeniny dále obsahovalo 10% DMSO.

Po 20-minutivé inkubaci se reakce ukončila přídavkem 100 μΐ PBS pH 7,4 obsahujícího 50 mM EDTA, 1 mM neaktivní ATP, 0,1% Triton X100 a 10 mg/ml streptavidinem obalených SPA kuliček do každé jamky.

Po 15-minutové inkubaci při pokojové teplotě, kdy docházelo k interakci biotinylovaného MCM2 s SPA kuličkami obalenými streptavidinem, se kuličky ·· 99 9· • 9 ·

9

9 · 9 9 9 9 ·9

9 · 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 999 9999 · · 9 9999 *+1 99 9 9· · 99 9 zachytily na 96-jamkové filtrační destičce (Unifilter^R GF/B™) s použitím Packard Cell Harvester (Filtermate), promyly se destilovanou vodou a poté se počítaly s použitím Top Count (Packard).

Od nalezených hodnot se odečetly slepé pokusy a analýzou experimentálních údajů (každý bod trojnásobně) s použitím nelineární regrese (Sigma Plot) se stanovila

IC50.

Sloučeniny obecného vzorce I podle předkládaného vynálezu, vhodné pro podávání savcům, např. lidem, se podávají obvyklým způsobem a v obvyklých dávkách, které závisí na věku, hmotnosti, stavu pacienta a způsobu podávání.

Vhodná dávka pro orální podávání sloučeniny obecného vzorce I je například v rozmezí od 10 do 500 mg na dávku, 1 až 5 krát denně. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se podávají v různých dávkovačích formách, např. orálně, v tabletách, kapslích, cukrem nebo filmem potahovaných tabletách, tekutých roztocích nebo suspenzích; rektálně ve formě čípků; parenterálně, např. intramuskulárně, nebo intravenózně a/nebo intratekálně a/nebo intraspinálně injekcí nebo infuzí.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se podávají buď samostatně, nebo alternativně v kombinaci se známou protirakovinovou léčbou jako je radiační terapie nebo chemoterapie v kombinaci s cytostatiky nebo cytotoxickými činidly, antibiotiky, alkylačními činidly, antimetabolitickými činidly, hormonálními činidly, imunologickými činidly, činidly interferonového typu, inhibitory cyklooxygenázy (např. COX-2 inhibitory), inhibitory metalomatrixproteázy, inhibitory telomerázy, inhibitory tyrosin-kinázy, činidly proti receptoru růstového faktoru, anti-HER činidly, anti-EGFR činidly, anti-angiogenními činidly, inhibitory farnesyl-transferázy, inhibitory ras-raf signální transdukce, inhibitory buněčného cyklu, dalšími cdks inhibitory, tubulin-vážícími činidly, inhibitory topoisomerázy I, inhibitory topoisomerázy II, a tak podobně.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se podávají například v kombinaci s jedním nebo více chemoterapeutickými činidly jako je například exemestan, formestan, anastrozol, letrozol, fadrozol, taxan, taxanové deriváty, opouzdřené taxany,

CPT-11, camptothecinové deriváty, anthracyklinové glykosidy, např. doxorubicin, idarubicin, epirubicin, etoposid, navelbin, vinblastin, karboplatina, cisplatina, estramustin, celecoxib, tamoxifen, raloxifen, Sugen SU-5416, Sugen SU-6668, Herceptin, a tak podobně, výhodně v jejich liposomálních formulacích.

• · · · · *

9 99 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9

9 9999999 9 999

Η-Z · * · · · 9 9 9 9

Ve fixní dávkové formulaci obsahují takové kombinované produkty sloučeniny podle předkládaného vynálezu ve výše popsaném dávkovém rozmezí a další farmaceuticky aktivní činidlo v příslušném dávkovém rozmezí.

Pokud není vhodná kombinovaná formulace, sloučeniny obecného vzorce I se používají při postupné léčbě se známými protirakovinovými činidly.

Předkládaný vynález dále zahrnuje farmaceutické prostředky obsahující sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl ve spojení s farmaceuticky přijatelným excipientem, což je nosič nebo ředidlo.

Farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny podle předkládaného vynálezu se obvykle připravují následujícími obvyklými metodami a podávají se ve farmaceuticky vhodné formě.

Pevné orální formy společně s aktivní sloučeninou obsahují například ředidla, např. laktózu, dextrózu, sacharózu, celulózu, kukuřičný nebo bramborový škrob; lubrikanty, např. oxid křemičitý, talek, stearovou kyselinu, stearát hořečnatý nebo vápenatý a/nebo polyethylenglykoly; pojivá, např. škroby, arabskou gumu, želatinu, methylcelulózu, karboxymethylcelulózu nebo polyvinylpyrrolidon; rozmělňovací činidla, např. škrob, alginovou kyselinu, algináty nebo škrobový glykolát sodný; šumivé směsi; barviva; sladidla; smáčedla jako je lecithin, polysorbáty, laurylsulfáty; a obecně netoxické a farmakologicky inaktivní látky používané ve farmaceutických formulacích. Tyto farmaceutické prostředky se vyrábějí známým způsobem, například mícháním, granulací, tabletováním, potahováním cukrem, nebo potahováním filmem.

Tekuté disperze pro orální podávání jsou například sirupy, emulze a suspenze.

Sirupy obsahují jako nosič například sacharózu nebo sacharózu s glycerinem a/nebo mannitolem a sorbitolem.

Suspenze a emulze obsahují jako nosič například přírodní gumu, agar, alginát sodný, pektin, methylcelulózu, karboxymethylcelulózu nebo polyvinylalkohol.

Suspenze nebo roztoky pro intramuskulámí injekce obsahují, společně s aktivní sloučeninou, farmaceuticky přijatelný nosič, např. sterilní vodu, olivový olej, ethyl-oleát, glykoly, např. propylenglykol, a pokud je žádoucí, vhodné množství lidokain-hydrochloridu. Roztoky pro intravenózní injekce nebo infuze jako nosič obsahují například sterilní vodu nebo výhodně jsou ve formě sterilních, vodných isotonických fyziologických roztoků nebo jako nosič obsahují propylenglykol.

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

99 99 99999

9 9 9 9 9

9 99 9 »

9 9 9 9

999 9 9

Čípky obsahují společně s aktivní sloučeninou farmaceuticky přijatelný nosič, např. kakaové máslo, polyethylenglykol, surfaktant s polyoxyethylensorbitan-esterem mastné kyseliny nebo lecithin.

Následují příklady, které předkládaný vynález lépe ilustrují, ale nijak tento vynález nelimitují.

Příklady provedení vynálezu

Obecné metody

Flash chromatografie se prováděla na silikagelu (Merck kvalita 9395, 60A). Retenční časy u vysokotlaké kapalné chromatografie (HPLC, hodnoty r.t.) se stanovily následujícími způsoby:

Způsob 1:

Přístrojové vybavení: HPLC systém Waters 2790 vybavený detektorem 996 Waters PDA a Mikromass mod. ZQ jednoduchý kvadrupólový hmotový spektrometr vybavený elektrosprejem (ESI).

Podmínky chromatografie: kolona RP18 Waters X Terra (4,6 x 50 mm, 3,5 pm); mobilní fáze A 5mM pufr octan amonný (pH 5,5 s poměrem kyselina octová/acetonitril 95:5), mobilní fáze B HzO/acetonitril (5:95). Gradient od 10 do 90 % B během 8 minut, 2 minuty udržovat 90 % B. UV detekce při 220 nm a 254 nm. Rychlost průtoku 1 ml/min. Objem nástřiku 10 μΐ. Plné skenování, základní hmotový rozsah 100 až 800 hmotových jednotek. Napětí na kapiláře 2,5 kV; teplota zdroje 120 °C; napětí na vstupním kuželu 10 V. Retenční časy (HPLC r.t.) jsou uváděny v minutách při 220 nm nebo při 254 nm. Hmotnost je uváděna jako poměr m/z.

Způsob 2:

Přístrojové vybavení: Waters 2790 Alliance s autosamplerem a termostatem; UV detektor s duální vlnovou délkou 2487 Satin Interface; Divert valve LabPro, Hmotový spektrometr Waters ZQ jednoduchý kvadrupólový přístroj s ionizací elektrosprejem ESI; Antek chemoluminiscenční dusíkový detektor (CLND) 8060.

Podmínky chromatografie: kolona Zorbax SB C8 (4,6 x 50 mm; 5 pm); mobilní fáze A 0,01% kyselina mravenčí v acetonitrilu, mobilní fáze B 0,01% kyselina mravenčí v methanolu. Gradient od 0 do 95 % B během 10 minut, 2 minuty udržovat 95 % B. UV detekce při 220 nm. Rychlost průtoku 1 ml/min. Objem • · · * · · • · · · · · · • · · · · · · ·« ····♦·· ♦·

Λ Λ 9 9 9 9 9 · 9 9

Η Η '· < 9 9 9 9 9 nástřiku 10 μΐ. Plné skenování, základní hmotový rozsah 120 až 1 000 hmotových jednotek. Napětí na kapiláře 2,8 kV; teplota zdroje 115 °C; napětí na vstupním kuželu 32 V.

Retenční časy (HPLC r.t.) jsou uváděny v minutách při 220 nm nebo při 254 nm. Hmotnost je uváděna jako poměr m/z.

Způsob 3:

Přístrojové vybavení: HP1100 HPLC binární pumpa; autosampler Gilson 215,

UV detektor HP1100 s jednou vlnovou délkou, Sedex 75c ELS detektor (Sedere, France); hmotový spektrometr PE/Sciex API-2000.

Podmínky chromatografie: kolony YMC ODS-AQ 4,6 x 50 mm, 5 pm S5; HPLC mobilní fáze A 0,5% kyselina mravenčí ve vodě (HPLC kvalita), mobilní fáze B 0,5% kyselina mravenčí v acetonitrilu (HPLC kvalita). HPLC gradient uváděný v tabulce se prováděl 5μ1 nástřiky pro každý vzorek. UV detekce při 220 nm.

LC/MS/UV/ELS Gradient
Čas (min)	Průtok (ml/min)	%A	%B
0,00	2,0	98	2
2,58	2,0	2	98
3,08	2,0	2	98
3,13	2,0	0	100
3,28	2,0	0	100
3,33	2,0	98	2
4,00	2,0	98	2

Použil se Turbo IonSpray zdroj o napětí kapiláry iontového spreje 5kV a teplotě 475 °C, napětí vstupní trysky (kónusu) 10V a napětí kruhové elektrody 250 V. Pozitivně nabité ionty se skenovaly v Q1 od 160 do 800 hmotových jednotek.

Pokud bylo nezbytné, sloučeniny se čistily preparativní HPLC na koloně Waters Symmetry Cl8 (19 x 50 mm, 5 μιη) s použitím Waters preparativní HPLC 600 vybavené PDA detektorem 996 Waters a Micromass mod. ZMD Z-spray, hmotový detektor s 1 kvadrupolem, ionizace elektrosprejem, pozitivní mod. Mobilní fáze A voda/0,01% TFA, mobilní fáze B acetonitril. Gradient od 10 do 90 % B během 8 min, 2 min udržovat 90 % B. Rychlost průtoku 20 ml/min.

9

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9

99 99 99999

9 9 9 9 9

9 99 9

9999

9 9 9 9

9999

1H-NMR spektrometrie se prováděla na Mercury VX 400 s pracovní frekvencí 400,45 MHz vybaveném 5 mm sondou s dvojitou rezonancí [1H (15N-31P) ID PFG

Varian].

Jak bylo uvedeno výše, technikou kombinatorické chemie bylo paralelně syntetizováno množství sloučenin obecného vzorce I podle předkládaného vynálezu.

V tomto provedení byly připravené sloučeniny výhodně a jednoznačně identifikovány, viz systém kódů v tabulkách IX až XVI, společně s HPLC retenčním časem (způsoby 1 až 3) a hmotností.

Každý kód, který identifikuje jednu specifickou sloučeninu obecného vzorce I, se skládá ze tří jednotek A-M-B.

A znamená libovolný substituent Ri- [viz obecný vzorec I] a je připojen ke zbytku indazolové skupiny prostřednictvím atomu kyslíku za vzniku indazolových derivátů substituovaných v poloze 5 (A-Ml-B) nebo v poloze 6 (A-M2-B); všechny radikály A (substituenty) jsou uvedeny v následující tabulce VII.

Společně s -NH-skupinou v poloze 3 indazolové skupiny, ke které je připojena, B-NH- znamená skupinu R obecného vzorce I; všechny radikály B (substituenty) jsou uvedeny v následující tabulce VIII.

M znamená centrální jádro dvoj vazné 3-aminoindazolové skupiny s -Oskupinou v poloze 5 nebo 6 a je substituované skupinami a B.

M je buď Ml, nebo M2, viz vzorce níže, které identifikují sloučeninu susbtituovanou skupinami A-O- v poloze 5 (Ml) nebo v poloze 6 (M2).

Každá ze skupin A nebo B v tabulkách VII a VIII byla identifikovaná odpovídajícím chemickým vzorcem s určením bodu připojení ke zbytku molekuly M.

Například sloučenina A21-M1-B10 z tabulky XI (viz příklad 11, vstup 429) znamená indazol Ml substituovaný v poloze 5 (prostřednictvím atomu kyslíku)

9 ·

9 9

9 9 »· ··*· • · • · · • ····

9

9 9

9 9 9

9 9999

9 9 9

99 9 skupinou A21 a v poloze 3 (prostřednictvím -NH-skupiny) skupinou BIO; podobně, sloučenina A10-M2-B70 z tabulky XII (viz příklad 12, vstup 281) znamená indazol M2 substituovaný v poloze 6 (prostřednictvím atomu kyslíku) skupinou A10 a v poloze 3 (prostřednictvím -NH-skupiny) skupinou B70

A21-M1-B10

F

A10-M2-B70

9

9 9

9 9 9

9 9999

9 9

9 ··*♦ *

* ·« · · ·

9 9 9

9 9999

9 9

9

Tabulka VII - Skupiny A

Fragment	' Kód'	\|Fragment	Kód	Fragment I Kód
M-H	A00	0 o	A13	^O)	A27
	A01		A14		A29
T)	A02	ϋ TV	A15		A30
a	A03	x	A16	..X	A31
vo	A04		A17	o	A32
αχ	A05	cb	A18		A33
	A06		A20	•Vo	A35
	A07	—	A21	Ό	A36
νχρ-	A08	.M F—I—F	A22	•^D	A37
o /	A09	uó	A23		A38
ax	A10	νφ	A24	Vo i	A39
M /o y	Ml	&r t	<\25	O, i	MO
Ώ>α	M2	>	\26

·« 9

9 9

9 9 9

9 9999

9 9

9

9999 9 •· 9 99 9 » 9 9

°/o	A41		A53		A64
O	A43	Λ-Q	A54		A65
	A44	I	A55	^Z^^sz/X<^/ZS'M	A66
	A45		A56	N=^/	A67
	A46		A57		A68
	A47	Xj	A58	^0	A69
	A4S		A59	O—'	A70
+2?	A50		A60	ro,.	A71
XT	A51		A61
	A52		A62

9

9 9

9 • 9 999 9

9

999

Tabulka VIII - Skupiny B

Fragment	Kód	Fragment	Kód	Fragment	Kód
	B01	Via	B12	M	B23
Ax>	B02	Aq	B13	A	B24
o,	B03	Λχ)	B14		B25
	B04		B15	íx	B26
Αοφ	B05		B16	Aq-.	B27
X	B06	Y^J'O	B17	χν	B28
	B07	A.	B18	XjA	B29
χ-χ)	B08	Αχ	B19	X o	B31
Vy	B09		B20	XO	B32
	B10		B21	χΛ	B33
v	B11	ΛΡ	B22	^;°ox	B35

•· 9 99 9 • 9 · • · · • · » ·· · ·· · • · · • 9 9 · • · * ···· • · · ·· · ·· 9

9 9

9 · · • · · ···<

9 9 ·

	Β36		Β50	Υ ΥΖΥ	Β63
		Ύ	Β51	Υ/^ΝγΖΚ/^σ Υ ν	Β64
Μ^./°	Β40	γ	Β52	γχι	Β65
“Μ	Β41	•Ά	Β53	ΎΌφ	Β66
ΎΡ	Β42	Μ^/°	Β54	Υ)	Β67
	Β43	νΟΟ ^ΜΥ	Β55	ΑΑ	Β68
°Yjl ν	Β44	QO o=s=o i	Β56	νά.	Β69
Ά.	Β45	XL,< // Μ Ο	Β57	Υ	Β70
Ο	Β46	//-Μ 0	Β58	Α^χ	Β71
«ν.// Α	Β47		Β59		Β72
ο ΥΥ	Β48	Τ<ν /Λμ ο	Β61		Β73
	Β49	ΥΥΓ	Β62	γςγ χ-°	Β74

*· ' ·· · * · · · · · · · · ·· · ···· · · · · « · · · · * ··** · · · ···· « · · · · ♦ · · · «· · ·· · ·· ·

vó	B75	TYQ	Β78		Β81
τχΛ'	B76	VXV	Β79	ΥΌ	Β82
νύ	B77	ΥΌΟ	880	^ΧΌ	Β83

Příklad 1

6-methoxy-l/T-indazol-3-amin

K ledem chlazené suspenzi 66,35 g (0,448 mol) 2-amino-4-methoxybenzonitrilu v 530 ml koncentrované HC1 se přikapal roztok 37,07 g (0,537 mol) dusitanu sodného v 55 ml vody. Po 1,5 hodině se vychlazená suspenze při 5 °C přikapala do předem připraveného roztoku 679,25 g (3,58 mol) chloridu cínatého v 530 ml koncentrované chlorovodíkové kyselině (HC1). Po 3 hodinách se chladná suspenze zfiltrovala a vlhká pevná látka 30 min reagovala s 1,7 1 vroucí vody. Horký zakalený roztok se vyčeřil po filtraci na látkovém filtru. Krystalizační louhy se ochladily v ledové lázni a přikapalo se k nim 0,8 1 17% NaOH. Pevná látka se zfiltrovala a vysušila ve vakuu při 50 °C: získalo se 67,2 g produktu ve formě světle hnědé pevné látky. Výtěžek = 91,9 %.

Teplota tání = 195 až 197 °C, rozklad; HPLC r.t. = 1,9; [M+H]⁺ = 164

Η’ΝΜΚ (DMSO-dó), přiřazené signály (ppm): 3,74 (s, 3H), 5,17 (široký s, 2H), 6,5 (dd, 1H), 6,6 (d, 1H), 7,5 (d, 2H), 11,07 (s, 1H).

Příklad 2

2-[(6-methoxy)-l/7-indazol-3-yl]-l//-isoindol-l,3(277)-dion

V 0,4 1 acetonitrilu se 2,5 hodiny refluxovalo 20 g (0,122 mol) 6-methoxy-1/7-indazol-3-aminu, 20 g (0,135 mol) ftalanhydridu a 140 mg (1,22 mmol) 4-dimethyl99 9999 ···*·* aminopyridinu. Směs se ochladila na 5 °C a zfiltrovala za vzniku prvního podílu produktu (24,2 g). Matečné roztoky se zahustily ve vakuu a přidalo se k nim 70 ml fórc-butyl(methyl)etheru (MTBE): po filtraci se získal druhý podíl produktu (5,8 g). Celkem se získalo 30,0 g produktu ve formě žluté pevné látky. Výtěžek = 83,6 %.

Teplota tání = 193 až 195 °C; HPLC r.t. = 4,7; [M+H]⁺ = 294; [2M+H]⁺ = 587; [3M+ Hf = 880

1-í'NMR (DMSO-d₆), přiřazené signály (ppm): 3,84 (s, 3H), 6,78 (dd, 1H), 6,96 (d, 1H), 7,55 (dd, 1H), 7,91-8,1 (m, 4H), 13,14 (s, 1H).

Příklad 3

2-[(6-hydroxy)-1 Z/-indazol-3-yl]-l /7-isoindol-1,3(2//)-dion

Směs 24,2 g (82,5 mmol) 2-[(6-methoxy)-l//-indazol-3-yl]-l//-isoindol-l,3(2//)-dionu a 73,4 g (0,635 mol) pyridin-hydrochloridu se 4 hodiny zahřívala na 200 °C. Výsledný hnědý roztok se ochladil na 140 °C a pomalu se nalil do dobře míchané směsi 250 ml 0,2N HC1 a 350 ml ethyl-acetátu. Oddělila se organická vrstva a do vodné vrstvy se přidalo 45 g NaCl a směs se dvakrát extrahovala do 350 ml ethyl-acetátu. Organické extrakty se sušily nad síranem sodným a zahustily ve vakuu na malý objem. Sraženina se zfiltrovala a sušila: získalo se 15,89 g produktu ve formě žluté pevné látky. Výtěžek = 68,9 %.

Teplota tání 265 až 270 °C, rozklad; HPLC r.t. 3,7; [M+H]⁺ = 280; [2M+H]⁺ = 559; [3M+Hf = 838

H^MR (DMSO-dů), přiřazené signály (ppm): 6,65 (dd, 1H), 6,8 (s, 1H), 7,44 (d, 1H), 7,97 (m, 4H), 9,73 (široký s, 1H) 12,86 (s, 1H).

Příklad 4

2-(6- { ffórc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} -1 H-indazol-3-yl)-1 H-isoindol-1,3-(2H)-dion

K suspenzi 15,03 g (53,82 mmol) 2-[(6-hydroxy)-lH-indazol-3-yl]-l/7-isoindol-l,3(2H)-dionu v 150 ml dichlormethanu se přidal roztok 20,19 g (0,134 mol) TBDMS-chloridu v 75 ml dichlormethanu. K výsledné směsi se při pokojové teplotě přikapalo 12,06 ml (80,73 mmol) l,8-diazabicyk!o[5,4,0]undec-7-enu (DBU) ·· ···* za vzniku čirého roztoku. Po 3 hodinách se reakční směs nalila do 250 ml 0,5N HC1. Vodná vrstva se oddělila a extrahovala do 120 ml dichlormethanu. Organické extrakty se sušily nad síranem sodným a rozpouštědlo se odpařilo ve vakuu. Vlhký surový produkt se míchal při 50 °C v 50 ml ethyl-acetátu. Poté se polovina rozpouštědla odpařila ve vakuu a ke směsi se přikapalo 100 ml cyklohexanu. Produkt se isoloval odsátím ve formě světle žluté pevné látky (15,04 g). Výtěžek = 71,0 %.

Teplota tání 207-209 °C; HPLC r.t. 7,6; [M+H]⁺ = 394; [2M+H]⁺ = 787

H^MR (DMSO-de), přiřazené signály (ppm): 0,21 (s, 6H), 0,98 (s, 9H), 6,71 (dd, 1H), 6,91 (d, 1H), 7,54 (d, 1H), 7, 93 (m, 2H), 8,1 (m, 2H).

Příklad 5

5-benzyloxy-l/7-indazol-3-amin

K ledem chlazené suspenzi 63,27 g (0,282 mol) 2-amino-5-(benzyloxy)benzonitrilu v 500 ml koncentrované chlorovodíkové kyseliny se přikapal roztok 23,32 g (0,338 mol) dusitanu sodného v 75 ml vody. Po 2 hodinách se vychlazená suspenze při 2 °C přikapala do předem připraveného roztoku 509,25 g (2,26 mol) chloridu cínatého v 380 ml koncentrované HC1. Po 3 hodinách se chladná suspenze zfiltrovala a vlhká pevná látka reagovala 30 minut s 1,8 1 vroucí vody a 300 ml ethanolu 95°. Horký zakalený roztok se vyčeřil po filtraci na látkovém filtru. Krystalizační roztoky se zahustily kvůli odstranění ethanolu a při 4 °C se přikapalo 0,35 1 35% NaOH. Pevná látka se zfiltrovala a vysušila ve vakuu při 50 °C: získalo se 73,82 g produktu ve formě světle hnědé pevné látky.

Teplota tání 193 až 195 °C; HPLC r.t. 4,7; [M]⁺ = 240; [2M+H]⁺ = 479

H*NMR (DMSO-dé), přiřazené signály (ppm): 5,03 (s, 2H), 5,16 (široký s, 1H), 6,96 (d, 1H), 7,13 (d, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,27-7,49 (m, 5H).

Příklad 6

2-[5-(benzyloxy)-l/f-indazol-3-yl]-l//-isoindol-2,3(2//)-dion

73,82 g 5-benzyloxy-l/7-indazol-3-aminu se míchalo ve 3 1 acetonitrilu. Tekutina se dekantovala a zbytek se míchal se směsí 0,5 1 methanolu a 0,5 1 ethyl······ ·· · ·· · • · · · · * ··· • · · ···· · · · · _ „ ······ ·«·· · · · ··· ····«···» ' ··· ·· 9 ···

-acetátu. Zbývající pevná látka se zfiltrovala (11,05 g solí cínu) a filtrát se odpařil dosucha ve vakuu. Zbytek se rozpustil ve zbylé kapalině a rozpouštědlo se odpařilo ve vakuu na konečný objem 1 1. K tomuto roztoku se přidalo 45,97 g (0,31 mol) ftalanhydridu a 345 mg (2,82 mmol) 4-dimethylamino-pyridinu. Směs se refluxovala 2 hodiny a poté se zahustila ve vakuu za vzniku prvního podílu produktu (70,11 g).

Matečné roztoky se zahustily dosucha a zbytek reagoval s 30 ml ethyl-acetátu a 100 ml Zí?rc-butyl(methyl)etheru (MTBE); po filtraci se získal druhý podíl produktu (9,75 g). Celkem se získalo 79,86 g produktu ve formě žluté pevné látky. Výtěžek = 76,6 % na dva kroky.

Teplota tání = 190 až 192 °C; HPLC r.t. = 6,5 min.; [M+H]⁺ = 370 [2M+H)⁺ =

739

1-í'NMR (DMSO-dó), přiřazené signály (ppm): 5 (s, 2H), 7,14 (d, 1H), 7,37,47 (m, 5H), 7,52 (d, 2H), 8 (m, 4H), 13,27 (s, 1H).

Příklad 7

2-(5-hydroxy-17/-indazol-3-yl)-1 /7-isoindol-1,3 (2//)-dion

Směs 46,14 g (0,125 mol) 2-[5-(benzyloxy)-l/7-indazol-3-yl]-l/7-isoindol-l,3(2//)-dionu a 143,35 g (1,24 mol) pyridin-hydrochloridu se 1,5 hodiny zahřívala na 180 °C. Výsledný hnědý roztok ochladil na 120 °C a pomalu se nalil do dobře míchané směsi 800 ml 0,5N HC1. Sraženina se zfiltrovala a sušila: získalo se 32,26 g produktu ve formě žluté pevné látky. Výtěžek = 92,4 %.

Teplota tání >270°C; HPLC r.t. - 3,2; [M+H]⁺ = 280; [2M+Hf = 559

H^MR (DMSO-dó), přiřazené signály (ppm): 6,8 (s, 1H), 6,98 (d, 1H), 7,42 (d, 1H), 8 (m, 4H), 9,2 (s, 1H) 13,12 (s, 1H).

Příklad 8

2-(5- {[tórc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} -1 //-indazol-3 -yl)isoindol-1,3 -dion

K suspenzi 32,26 g (0,115 mol) 2-(5-hydroxy-l//-indazol-3-yl)-l//-isoindol-l,3(2//)-dionu v 320 ml dichlormethanu se přidal roztok 43,54 g (0,288 mol) TBDMS-chloridu ve 150 ml dichlormethanu. K výsledné směsi se při pokojové

• · · · · · • · · · · · • · · · · · · · • · ······· · ··· • · · 9 9 9

9 9 9 9 teplotě přikapalo 35,5 ml (0,23 mol) l,8-diazabicyklo[5,4,0]undec-7-enu (DBU) za vzniku čirého roztoku. Po 3 hodinách se reakční směs nalila do 300 ml O,1N roztoku chlorovodíkové kyseliny. Vodná vrstva se oddělila a extrahovala do 200 ml dichlormethanu. Organické extrakty se sušily nad síranem sodným a rozpouštědlo se odpařilo ve vakuu. Surový produkt se čistil flash chromatografii na silikagelu elucí směsí dichlormethan-cyklohexan-ethyl-acetát (4:4:2). Získalo se 36,03 g produktu ve formě bílé pevné látky. Výtěžek = 79,2 %.

Teplota tání = 225 až 228 °C; HPLC r.t. = 8,3; [M+H]⁺ = 394; [2M+Hj⁺ = 787 H^MR (DMSO-dé), přiřazené signály (ppm): 0,15 (s, 6H), 0,93 (s, 9H), 6,98 (dd, 1H), 7,07 (s, 1H), 7,49 (d, 1H), 7,96 (m, 4H), 13,25 (s, 1H).

Příklad 9 yV-(6-hydroxy-l/7-indazol-3-yl)benzamid

500 mg trítyl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g,

0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-lH-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-rcrc-butylimino-2-diethylamino-2,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu (1,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

Identita pryskyřice a výtěžek substitučního kroku se ověřily štěpením substituovaného produktu.

mg pryskyřice se suspendovalo v 1 ml dichlormethanu a přidalo se 150 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získalo se 13,8 mg titulní sloučeniny.

Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,64; [M+H]⁺ - 394

Pryskyřice získaná v prvním kroku (500 mg, 0,425 mmol) se suspendovala v 5 ml směsi dichlormethanu a methanolu 1:1a přidalo se 500 μΐ hydrazin-monohydrátu.

Suspenze se zahřála na 45 °C. Zahřívání a míchání pokračovalo přes noc a poté se směs ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem a opět methanolem, poté se sušila ve vakuu.

·· · ··· ···

Identita pryskyřice se ověřila štěpením. Reakce se prováděla postupem popsaným výše.

Štěpený produkt: 6- {[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-1 H-indazol-3-amin;

HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,99; [M+H]⁺ = 264; [MH]’ = 262

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 2,5 ml dichlormethanu; přidal se V,7V'-diisopropyl(ethyl)amin (131 μΐ, 10 ekv.) a benzoylchlorid (30 μΐ, 3ekv.). Míchání při pokojové teplotě pokračovalo 20 hodin, pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem, a poté se sušila ve vakuu.

Identita pryskyřice se ověřila štěpením substituovaného produktu. Reakce se prováděla způsobem popsaným výše.

Štěpený produkt: N-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)benzamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,47; [M+H]⁺ = 368; [M-H]' = 366

Pryskyřice získaná v předchozím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

100 mg pryskyřice se suspendovalo v 3 ml dichlormethanu a přidalo se 450 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získala se titulní sloučenina.

jV-(6-hydroxy-l//-indazol-3-yl)benzamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,5;

[M+Hf = 253,99; [M-H]’ = 252

Postupem podobným Příkladu 9 se na pryskyřici ukotvily 2(6-{[/erc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} -1 H-indazol-3-yl)- l/f-isoindol-1,3(2//)-dion a 2-(5-( [terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion a poté se popsaným syntetickým schématem syntetizovaly následující produkty.

7V-(5-hydroxyindazol-3-yl)benzamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,08; [M+H]⁺ =

253,99

2-(4-/erobutylfenoxy)-JV-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)acetamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,38; [M+H]⁺ = 340,2

2V-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)-2-(4-methoxyfenyl)acetamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,35; [M+H]⁺ = 298,1 • » 9 · · · · ···» • · · 9* ······· · · · ·

V-(6-hydroxy-2//-indazol-3-yl)-3-fenylpropanamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,94; [M+I~I]⁺ = 282,1

V-(6-hydroxy-2//-indazol-3-yl)cyklopropankarboxamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 2,36; [M+H]⁺ = 218,1

Stejným postupem (příklad 9) se paralelně syntetizovalo 7 produktů; jejich kódy (viz výše) jsou uvedené v tabulce IX společně s odpovídajícími HPLC retenčními časy a experimentálně nalezenými [M+H]⁺.

Tabulka IX

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t. (min)	[M+H]⁺
1	A00-M1-B36	1	3,68	282,1
2	A00-M1-B31	1	2	218,1
3	A00-M1-B33	1	4,05	288
4	A00-M2-B68	1	3,08	235,1
5	A00-M2-B15	1	5,52	340,2
6	A00-M2-B35	1	3,62	298,1
7	A00-M2-B33	1	4,38	288

Příklad 10

V-butyl-W-(6-hydroxy-l//-indazol-3-yl)močovina

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(6-[[/crc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-terc-butylimino-2-diethylamino-l ,3-dimethylperhydro-l ,3,2-diazafosforinu (1,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

9 9 9 9 9 99 9 · 9 9

9 9 *·· 9 · Λ

9 9 9 · · 9 9 9 · 9

999 999 9999 99 9 999 <Q 999 999999

JO 9 9« 999 999

Identita pryskyřice a výtěžek substitučního kroku se ověřily štěpením substituovaného produktu:

Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,64; [M+H]⁺ = 394

Suspenze se zahřála na 45 °C. Zahřívání a míchání pokračovalo přes noc a poté se směs ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem a opět methanolem.

Štěpený produkt: 6-{ [fórc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} - l/Z-indazol-3-amin;

HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,99; [M+H]⁺ = 264; [M-H]' = 262

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 2 ml dimethylformamidu; přidal se V-butyl-isokyanat (28 μΐ, 5 ekv.).

Suspenze se zahřála na 50 °C. Míchání a zahřívání pokračovalo 60 hodin, poté se suspenze ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem, poté se sušila ve vakuu.

100 mg pryskyřice se poté suspendovalo v 3 ml dichlormethanu a přidalo se 450 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získala se titulní sloučenina.

l-butyl-3-(6-hydroxy-l/ř-indazol-3-yl)močovina; HPLC (Způsob 1) r.t. =

3,87; [M+H]⁺ = 249; [M-H]’ = 247

Postupem podobným Příkladu 10 se na pryskyřici ukotvily 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-17/-índazol-3-yl)-1 //-isoindol-1,3(2//)-dion a 2-(5- {[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion a poté se popsaným syntetickým schématem syntetizovaly následující produkty.

l-butyl-3-(5-hydroxy-l//-indazol-3-yl)močovina; HPLC (Způsob 1) r.t. =

3,65; [M+H]⁺ - 249; [M-H]' = 247 jV-benzyl-A'-(5-hydroxy-2/^:/-indazol-3-yl)močovina; HPLC (Způsob 1) r.t. =

4; [M+H]⁺= 283,1 φ Φ Φ φ Φ Φ φφφ ·· · « φ φ φφφ φ φ φ φφ φ φφφφ φφφφ φ φ φ φφ φφφφφφφ φφφφφ

V-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)-V-isopropylmočovina; HPLC (Způsob 1) r.t. = 2,92; [Μ+Η]⁺ = 235,1 jV-(6-hydroxy-27/-indazol-3-yl)-V-fenylmočovina; HPLC (Způsob 1) r.t. = 4,4; [M+H]⁺ = 269,1

Stejným postupem (příklad 10) se paralelně syntetizovalo 13 produktů, jejich kódy (viz výše) jsou uvedené v tabulce X společně s odpovídajícími HPLC retenčními časy a experimentálně nalezenými (M+H)⁺.

Tabulka X

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t. (min)	[M+H]⁺
1	A00-M1-B68	3	1,39	235,1
2	A00-M1-B63	3	1,89	283,1
3	A00-M1-B78	3	1,85	297,1
4	A00-M1-B79	3	1,71	299,1
5	A00-M1-B62	3	1,77	299,1
6	A00-M1-B64	3	2,01	303,1
7	A00-M1-B66	3	1,65	311,1
8	A00-M1-B17	3	1,33	311,1
9	Α00-Μ 1-B74	3	1,83	329,1
10	A00-M1-B76	3	2,12	337,1
11	A00-M1-B65	3	2,27	345,1
12	A00-M2-B83	1	4,15	283,1
13	A00-M1-B82	1	4,15	269,1

Příklad 11

V-(6-Benzyloxy-l//-indazol-3-yl)benzamid

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(6-{[fórc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-terc• · » ··· ··· • · · · · · · · · · · • · · » · ······· · · · · ·

-butylimino-2-diethylamino-1,3-dimethylperhydro-1,3,2-diazafosforinu (1,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

mg pryskyřice se suspendovalo v 1 ml dichlormethanu a přidalo se 150 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získalo se 13,8 mg titulní sloučeniny. Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,64; [M+H]⁺ = 394.

Pryskyřice získaná v prvním kroku (500 mg, 0,425 mmol) se suspendovala v 5 ml směsi dichlormethanu a methanolu 1:1a přidalo se 500 μΐ hydrazin-monohydrátu. Suspenze se zahřála na 45 °C. Zahřívání a míchání pokračovalo přes noc a poté se směs ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem a opět methanolem a poté se sušila ve vakuu.

6-{[7erc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-177-indazol-3-amin; HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,99; [M+H]⁺ = 264; [M-H]’ = 262

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 2,5 ml dichlormethanu; přidal se V,V'-diisopropyl(ethyl)amin (131 μΐ, 10 ekv.) a benzoylchlorid (30 μΐ , 3ekv.). Míchání při pokojové teplotě pokračovalo 20 hodin, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem a poté se sušila ve vakuu.

V-(6-{[tórc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l/7-indazol-3-yl)benzamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,47; (M+H]⁺ = 368; [M-H]’ - 366

Pryskyřice získaná v třetím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc a poté se * ·

pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

TV-(6-hydroxy-l//-indazol-3-yl)benzamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,5; [M+H]⁺ = 253,99; [M-H]' = 252

Pryskyřice získaná ve čtvrtém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml 1-methyl-2-pyrrolidinonu, poté se přidalo 43 μΐ 2-fórc-butylimino-2-diethylamino-l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu (1,5 ekv.) a 57 μΐ benzylbromidu (6 ekv.). Suspenze se míchala 16 hodin. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

100 mg suché pryskyřice se suspendovalo v 3 ml dichlormethanu a přidalo se 450 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 3 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získala se požadovaná titulní sloučenina.

/V-(6-Benzyloxy-l//-indazol-3-yl)benzamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 6,17; [M+H]⁺ - 344

Postupem podobným Příkladu 11 se na pryskyřici ukotvily 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l/7-indazol-3-yl)-lH-isoindol-l,3(2//)-dion a 2-(5-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion a poté se popsaným syntetickým schématem syntetizovaly následující produkty.

Y-(5-Benzyloxy-l//-indazol-3-yl)benzamid; HPLC r.t. = 6,05; [M+H]⁺ = 344;

Methyl-2-( {3 -[(3-fenylpropanoyl)aminoj -1 #-indazol-5-yl} oxy)butanoát;

HPLC (Způsob 2) r.t. - 8,2; [M+H]⁺ = 382,1;

N- {5 - [(1 -fenyl-2-oxopyrrolidin-3 -yl)oxy] -17/-indazol-3-yl} cyklopropankarboxamid; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,19; [M+H]⁺ = 377,2;

Methyl-2-( {3 -[(cyklopropylkarbonyl)amino]-177-indazol-5-yl} oxy)butanoát; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,05; [M+H]⁺ = 318,1

Methyl-2- [(3 - {[(4-methoxyfenyl)acetyl] amino} -1 //-indazol-5 -yl)oxy] butanoát; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,78; [M+H]⁺ = 398,2;

?/-{6-[(2-methylbenzyl)oxy]-l//-indazol-3-yl}cyklopropankarboxamid;

HPLC (Způsob 2) r.t. = 8,3 8; [M+H]⁺ = 322,1;

«· · · · ·

9 · · · · 9 9 9

9 · 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9999 9 9 9 99

*.·*· ... ··

A- {6-[( 1 - fenyl-2-oxopyrrolidin-3-yl)oxy]-1 A-indazol-3 -yl} cyklopropankarboxamid; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,41; [M+Hf = 377,2;.

Methyl-2-( {3 -[(cyklopropylkarbonyl)amino] -1 A-indazol-6-yl} oxy)butanoát;

HPLC (Způsob 1) r.t. =4,31; [M+H]⁺ = 318,1;

Methyl-2-( {3 -[(3 -chlorbenzoyl)amino] -1A-indazol-6-yl} oxy)butanoát;

HPLC (Způsob 1) r.t. = 6,02; [M+H]⁺ = 388,1

Stejným postupem (příklad 11) se paralelně syntetizovalo 806 produktů; jejich kódy (viz výše) jsou uvedené v tabulce XI společně s odpovídajícími HPLC způsoby a retenčními časy a experimentálně nalezenými [M+H]⁺.

Tabulka XI

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+Hf	Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+Hf
1	A29-M1-B36	2	8,18	441,2	404	A02-M1-B10	3	2,06	404,2
2	A31-M1-B36	2	8,02	350,2	405	A03-M1-B10	3	2,37	472,1
3	A35-M1-B36	2	8,18	429,2	406	A03-M2-B10	3	2,48	472,1
4	A40-M1-B36	2	8,91	469,2	407	A04-M1-B10	3	2,07	422,1
5	A38-M1-B31	2	8,27	322,1	408	A04-M2-B10	->	2,2	422,1
6	A03-M1-B31	2	8,91	376,1	409	A05-M1-B10	3	2,3	500,1
7	A31-M1-B31	2	6,95	286,1	410	A05-M2-B10	3	2,41	500,1
8	A35-M1-B31	2	7,08	365,2	411	A06-M1-B10	3	1,85	354,1
9	A29-M1-B15	2	9,28	499,2	412	A07-M1-B10	3	2,17	440,1
10	A31-M1-B15	2 -	9,11	408,2	413	A07-M2-B10	3	2,28	440,1
11	A35-M1-B15	2	9,3	487,2	414	A08-M1-B10	3	2,3	488,1
12	A32-M1-B15	2	9,39	440,2	415	A08-M2-B10	3	2,41	488,1
13	A38-M1-B35	2	8,73	402,2	416	A09-M1-B10	3	2,14	464,2

9 9 · 9 «··

9 «999 9999

9 9 99 9999999 99999

14	A29-M1-B3Í	5 2	7,87	457,2	417	A10-M1-BK	) 3	2,24	458,1
15	A31-M1-B3Í	ϊ 2	7,61	366,2	418	A10-M2-BK	) 3	2,27	458,1
16	A35-M1-B3Í	2	7,82	445,2	419	A11-M1-BK	) 3	2,2	470,1
17	A39-M1-B3f	2	8,09	446,2	420	A11-M2-BK	) 3	2,27	470,1
18	A40-M1-B3£	2	8,67	485,2	421	A12-M1-B1C	3	2,05	380,2
19	A29-M1-B32	2	8,37	447,1	422	A12-M2-B1C	3	2,09	380,2
20	A38-M2-B36	2	9,16	386,2	423	A14-M1-B1C	3	2,07	366,1
21	A45-M2-B36	2	9,27	476,2	424	A15-M1-B1C	3	2,33	449,1
22	A03-M2-B36	2	9,59	440,1	425	A16-M1-B1C	3	2,19	429,1
23	A29-M2-B36	2	8,35	441,2	426	A18-M2-B10	3	2,4	440,1
24	A31-M2-B36	2	8,45	350,2	427	A18-M1-B10	3	2,3	440,1
25	A44-M2-B36	2	8,72	434,1	428	A20-M1-B10	3	2,5	472,1
26	A46-M2-B36	2	8,61	460,2	429	A21-M1-B10	3	1,85	360,1
27	A35-M2-B36	2	8,26	429,2	430	A22-M1-B10	3	2,74	540,1
28	A32-M2-B36	2	8,3	382,2	431	A23-M1-B10	3	2,47	438,1
29	A41-M2-B36	2	8,98	476,2	432	A24-M1-B10	3	2,35	458,1
30	A39-M2-B36	2	8,52	430,2	433	A25-M1-B10	3	2,55	490,1
31	A40-M2-B36	2	9,05	469,2	434	A26-M1-B10	3	2,01	374,1
32	A45-M2-B31	2	8,65	412,2	435	A27-M2-B10	3	2,41	448,2
33	A03-M2-B31	2	9,01	376,1	436	A02-M1-B11	3	2,25	362,1
34	A31-M2-B31	2	7,5	286,1	437	A02-M2-B11	3	2,3	362,1
35	A44-M2-B31	2	7,87	370,1	438	A03-M1-B11	3	2,55	430,0
36	A46-M2-B31	2	7,77	396,1	439	A03-M2-B11	3	2,59	430,0
37	A35-M2-B31	2	7,27	365,2	440	A04-M1-B11	3	2,25	380,1
38	A41-M2-B31	2	8,26	412,2	441	A04-M2-B11	3	2,31	380,1
39	A39-M2-B31	2	7,64	366,1	442	A05-M1-B11	3	2,47	458,0
40	A40-M2-B31	2	8,34	405,2	443	A05-M2-B11	3	2,52	458,0
41	A29-M2-B15	2	9,39	499,2	444	A06-M1-B11	3	2,03	312,1
42	A31-M2-B15	2	8,99	408,2	445	A07-M2-B11	3	2,39	398,1
43	A35-M2-B15	2	9,35	487,2	446	A08-M1-B11	3	2,53	446,1
44	A32-M2-B15	2	9,42	440,2	447	A08-M2-B11	3	2,52	446,1
45	A29-M2-B35	2	8,01	457,2	448	A10-M1-B11	3	2,41	416,1
46	A31-M2-B35	2	8,03	366,2	449	A10-M2-B11	3	2,39	416,1
47	A44-M2-B35	2	8,41	450,1	450	A11-M2-B11	3	2,38	428,1
48	A35-M2-B35	2	7,95	445,2	451	A12-M2-B11	3	2,21	338,1
49	A32-M2-B35	1	5,21	398,2	452	A13-M2-B11	3	2,54	492,1
50	A41-M2-B35	2	8,7	492,2	453	A14-M1-B11	3	2,17	324,1
51	A38-M2-B33	2	9,32	392,1	454	A15-M1-B11	3	2,43	407,1
52	A03-M2-B33	2	9,75	446,0	455	A16-M1-B11	3	2,29	387,1
53	A29-M2-B33	2	8,56	447,1	456	A17-M1-B11	3	2,07	381,1
54	A44-M2-B33	2	8,9	440,0	457	A18-M2-B11	3	2,51	398,1
55	A46-M2-B33	2	8,81	466,1	458	A18-M1-B11	3	2,41	398,1
56	A35-M2-B33	2	8,46	435,1	459	Ά20-Μ1-Β11	3	2,61	430,1
57	A41-M2-B33	2	9,14	482,1	460	A21-M1-B11	3	1,94	318,1
58	A39-M2-B33	2	8,74	436,1	461	A22-M1-B11	3	2,85	498,1
59	A40-M2-B33	2	9,22	475,1	462	A23-M1-B11	3	2,57	396,1
60	A30-M1-B29	1	6,39	388,2	463	^24-M1-B11	3	2,46	416,1
61	A31-M1-B29	1	4,72	352,2	464	^25-M1-B11	3	2,67	448,1
62	A29-M1-B29	1	5,33	443,2	465	^26-M1-B11	3	2,13	332,1
63	A03-M1-B29	1	7,09	442,1	466	\27-M2-B11	3	2,51	406,1
64	^37-1^11-829	2	7,81	400,2	467	\01-M1-B12	3	2,11	376,1

9 9 99 • * 9

9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 999 9999 99 9 9999

999 9 9 9 9 9 9

65	A30-M2-B2Í	1	6,56	388,2	468	A02-M1-B11	2 3	2,45	428,1
66	A31-M2-B2£	2	8,33	352,2	469	A02-M2-B1I	2 3	2,54	428,1
67	A29-M2-B29	1	5,5	443,2	470	A03-M1-B11	2 3	2,69	496,0
68	A03-M2-B2E	1	7,22	442,1	471	A03-M2-B1Í	3	2,73	496,0
69	A41-M2-B01	1	6,56	448,2	472	A04-M1-B1z	2 3	2,42	446,1
70	A32-M2-B32	1	5,34	368,2	473	AO5-M1-B12	3	2,63	524,0
71	A47-M2-B32	2	8,63	454,1	474	A05-M2-B1S	3	2,69	524,0
72	A48-M2-B32	1	7,31	448,1	475	Α06-Μ1-Β1Σ	3	2,25	378,1
73	A43-M2-B32	1	5,33	366,2	476	A07-M1-B12	3	2,49	464,1
74	A33-M1-B32	1	5,32	416,2	477	A07-M2-B12	3	2,55	464,1
75	A35-M1-B32	1	5,33	415,2	478	AO8-M1-B12	3	2,6	512,1
76	A31-M1-B01	1	4,7	322,1	479	A09-M1-B12	3	2,54	488,1
77	A36-M1-B01	2	7,45	334,1	480	A09-M2-B12	3	2,56	488,1
78	A29-M1-B01	1	5,29	413,2	481	A10-M1-B12	3	2,64	482,1
79	A01-M1-B01	3	1,81	292,1	482	A10-M2-B12	3	2,63	482,1
80	A01-M2-B01	3	1,95	292,1	483	A11-M1-B12	3	2,57	494,1
81	A03-M1-B01	3	2,47	412,1	484	A11-M2-B12	3	2,6	494,1
82	A03-M2-B01	3	2,55	412,1	485	A12-M1-B12	3	2,49	404,1
83	A04-M1-B01	3	2,15	362,1	486	A13-M1-B12	3	2,75	558,1
84	A04-M2-B01	3	2,27	362,1	487	A14-M1-B12	3	2,47	390,1
85	A05-M1-B01	3	2,39	440,0	488	A15-M1-B12	3	2,67	473,1
86	A05-M2-B01	3	2,47	440,0	489	A16-M1-B12	3	2,57	453,1
87	A06-M1-B01	3	1,93	294,1	490	A17-M1-B12	3	2,39	447,1
88	A07-M1-B01	3	2,24	380,1	491	Α18-Μ2-ΒΪ2	3	2,77	464,1
89	A07-M2-B01	3	2,35	380,1	492	A18-M1-B12	3	2,67	464,1
90	A08-M1-B01	3	2,39	428,1	493	A20-M1-B12	3	2,85	496,1
91	A09-M1-B01	3	2,29	404,2	494	A21-M1-B12	3	2,31	384,1
92	A09-M2-B01	3	2,25	404,2	495	A22-M1-B12	3	3,05	564,1
93	A10-M1-B01	3	2,31	398,1	496	A23-M1-B12	3	2,83	462,1
94	A10-M2-B01	3	2,36	398,1	497	A24-M1-B12	3	2,71	482,1
95	A11-M1-B01	3	2,26	410,1	498	A25-M1-B12	3	2,89	514,1
96	A11-M2-B01	3	2,31	410,1	499	A26-M1-B12	3	2,43	398,1
97	A12-M1-B01	3	2,12	320,1	500	A27-M2-B12	3	2,77	472,1
98	A13-M2-B01	3	2,5	474,1	501	A01-M1-B13	3	1,39	341,2
99	A13-M1-B01	3	2,53	474,1	502	A02-M1-B13	3	1,7	393,2
100	A14-M1-B01	3	2,13	306,1	503	A03-M1-B13	3	2	461,1
101	A15-M1-B01	3	2,39	389,1	504	A12-M1-B13	3	1,67	369,2
102	A16-M1-B01	3	2,26	369,1	505	A13-M1-B13	3	2,08	523,2
103	A17-M1-B01	3	2,04	363,1	506	A14-M1-B13	3	V	355,2
104	A18-M2-B01	3	2,45	380,1	507	A18-M2-B13	3	2,07	429,2
105	A18-M1-B01	3	2,37	380,1	508	A20-M1-B13	3	2,29	461,2
106	A20-M1-B01	3	2,58	412,1	509	A22-M1-B13	3	2,5	529,2
107	A21-M1-B01	3	1,9	300,1	510	A27-M2-B13	3	2,06	437,2
108	A22-M1-B01	3	2,81	480,Ϊ	511	A01-M1-B14	3	1,95	336,1
109	*\23-M1-B01	3	2,53	378,1	512	M1-M2-B14	3	2,04	336,1
110	<\24-M1-B01	3	2,42	398,1	513	V32-M1-B14	3	2,27	388,2
111	«Κ25-Μ1-Β01	3	2,63	430,1	514	M3-M1-B14	3	2,57	456,1
112	<\26-M1-B01	3	2,07	314,1	515	V)3-M2-B14	3	2,61	456,1
113	°v27-M2-B01	3	2,47	388,2	516	<\04-M1-B14	3	2,28	406,1.
114	<\01-M1-B02	3	1,82	336,1	517	<\04-M2-B14	3	2,38	406,1
115	\01-M2-B02	3	1,97	336,1	518	\05-M1-B14	3	2,51	484,1

• · · * · · · φ · • · · · · · • · · * · · · » · « ♦ · » ···· • · · · · · • · · · · ·

116	A02-M1-B0Í	’ 3	2,14	388,1	519	Α05-Μ2-Β1*	1 3	2,57 I 484,1
117	A02-M2-B0Í	3	2,26	388,1	520	Α06-Μ1-ΒΡ	I 3	2,07	338,1
118	Α03-Μ1-Β0Σ	3	2,44	456,0	521	A07-M1-BU	3	2,43	424,1
119	A04-M1-B02	3	2,14	406,1	522	A07-M2-BU	3	2,45	424,1
120	A04-M2-B02	3	2,27	406,1	523	A08-M1-BU	3	2,49	472,1
121	A05-M1-B02	3	2,36	484,0	524	A08-M2-BU	3	2,55	472,1
122	A05-M2-B02	3	2,46	484,0	525	Α09-Μ1-Β14	3	2,41	448,2
123	A06-M1-B02	3	1,92	338,1	526	Α09-Μ2-Β14	3	2,41	448,2
124	A07-M1-B02	3	2,29	424,1	527	Α10-Μ1-Β14	3	2,51	442,1
125	A07-M2-B02	3	2,35	424,1	528	Α10-Μ2-Β14	3	2,51	442,1
126	A08-M1-B02	3	2,35	472,1	529	Α11-Μ1-Β14	3	2,46	454,2
127	A08-M2-B02	3	2,46	472,1	530	Α11-Μ2-Β14	3	2,47	454,2
128	A09-M1-B02	3	X	448,1	531	Α12-Μ2-Β14	3	2,35	364,2
129	A09-M2-B02	3	2,25	448,1	532	Α13-Μ1-Β14	3	2,64	518,2
130	A10-M1-B02	3	2,3	442,1	533	Α14-Μ1-Β14	3	2,27	350,1
131	A11-M1-B02	3	2,25	454,1	534	Α15-Μ1-Β14	3	2,51	433,1
132	A11-M2-B02	3	2,3	454,1	535	Α16-Μ1-Β14	3	2,39	413,2
133	A12-M1-B02	3	2,1	364,1	536	Α17-Μ1-Β14	3	2,19	407,2
134	A13-M2-B02	3	2,48	518,1	537	Α18-Μ2-Β14	3	2,59	424,1
135	A13-M1-B02	3	2,49	518,1	538	Α18-Μ1-Β14	3	2,5	424,1
136	A14-M1-B02	3	2,11	350,1	539	Α20-Μ1-Β14	3	2,7	456,1
137	A15-M1-B02	3	2,39	433,1	540	Α21-Μ1-Β14	3	2,09	344,1
138	A16-M1-B02	3	2,26	413,1	541	Α22-Μ1-Β14	3	2,93	524,1
139	A17-M1-B02	3	2,06	407,1	542	Α23-Μ1-Β14	3	2,66	422,1
140	A18-M2-B02	3	2,47	424,1	543	Α24-Μ1-Β14	3	2,54	442,1
141	A18-M1-B02	3	2,37	424,1	544	Α25-Μ1-Β14	3	2,75	474,1
142	A20-M1-B02	3	2,56	456,1	545	Α26-Μ1-Β14	3	2,24	358,1
143	A21-M1-B02	3	1,93	344,1	546	Α27-Μ2-Β14	3	2,57	432,2
144	A22-M1-B02	3	2,79	524,1	547	Α01-Μ1-Β15	3	2,32	378,2
145	A23-M1-B02	3	2,53	422,1	548	Α01-Μ2-Β15	3	2,43	378,2
146	A24-M1-B02	3	2,41	442,1	549	Α02-Μ1-Β15	3	2,61	430,2
147	A25-M1-B02	3	2,61	474,1	550	Α02-Μ2-Β15	3	2,65	430,2
148	A26-M1-B02	3	2,1	358,1	551	Α03-Μ1-Β15	3	2,85	498,1
149	A27-M2-B02	3	2,48	432,1	552	Α04-Μ1-Β15	3	2,61	448,2
150	A01-M1-B03	3	2,01	342,1	553	Α04-Μ2-Β15	3	2,65	448,2
151	A01-M2-B03	3	2,13	342,1	554	Α05-Μ1-Β15	3	2,79	526,1
152	A02-M1-B03	3	2,32	394,1	555	Α05-Μ2-Β15	3	2,84	526,1
153	A02-M2-B03	3	2,42	394,1	556	Α06-Μ1-Β15	3	2,45	380,2
154	A03-M1-B03	3	2,61	462,1	557	Α07-Μ1-Β15	3	2,67	466,2
155	A04-M1-B03	3	2,32	412,1	558	Α08-Μ1-Β15	3	2,76	514,2
156	A04-M2-B03	3	2,43	412,1	559	Α08-Μ2-Β15	3	2,81	514,2
157	A05-M1-B03	3	2,54	490,0	560	Α09-Μ1-Β15	3	2,73	490,2
158	A06-M1-B03	3	2,13	344,1	561	Α09-Μ2-Β15	3	2,72	490,2
159	A06-M2-B03	3	2,24	344,1	562	Α10-Μ1-Β15	3	2,81	484,2
160	A07-M1-B03	3	2,4	430,1	563	Α11-Μ1-Β15	3	2,75	496,2
161	A07-M2-B03	3	2,5	430,1	564	Μ1-Μ2-Β15	3	2,75	496,2
162	A08-M1-B03	3	2,52	478,1	565	Μ2-Μ1-Β15	3	2,67	406/2
163	A08-M2-B03	3	2,61	478,1	566	Μ2-Μ2-Β15	3	2,67	406,2.
164	A09-M1-B03	3	2,36	454,2	567	Μ3-Μ2-Β15	3	2,92	560,2
165	A09-M2-B03	3	2,41	454,2	568	Α13-Μ1-Β15	3	2,93	560,2
166	A10-M1-B03	3	2,46	448,1 I	569	<k20-M1-B15	3	3,05	498,2

• * · • « · • · · · • · · · · * • · · ·· 9 • · · · · · • · • t · * ♦ · ·*♦ 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 *9

999 999 9999 99 9 999

9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9 99 9

167	A11-M1-B03	3	2,4	460,1	I 570	A02-M1-B1G	3	2,1	312,1
168	A11-M2-803	3	2,46	460,1	571	A05-M1-B1G	3	2,37	408,0
169	A12-M1-B03	3	2,29	370,1	572	A06-M1-B1É	3	1,74	262,1
170	A12-M2-B03	3	2,37	370,1	573	A08-M1-B1G	3	2,41	396,1
171	A14-M1-B03	3	2,34	356,1	574	A11-M1-B16	3	2,21	378,1
172	A15-M1-B03	3	2,57	439,1	575	A14-M1-B16	3	1,72	274,1
173	A16-M1-B03	3	2,46	419,1	576	A15-M1-B16	3	2,11	357,1
174	A17-M1-B03	3	2,26	413,2 )	577	A16-M1-B16	3	1,95	337,1
175	A18-M2-B03	3	2,65	430,1	578	A17-M1-B16	3	1,67	331,1
176	A18-M1-B03	3	2,55	430,1	579	A18-M1-B16	3	2,06	348,1
177	A20-M1-B03	3	2,75	462,1	580	A04-M1-B16	3	2,11	330,1
178	A21-M1-B03	3	2,17	350,1	581	A20-M1-B16	3	2,3	380,1
179	A22-M1-B03	3	2,97	530,1	582	A21-M1-B16	3	1,47	268,1
180	A23-M1-B03	3	2,71	428,1	583	A22-M1-B16	3	2,58	448,1
181	A24-M1-B03	3	2,59	448,1	584	A23-M1-B16	3	2,22	346,1
182	A25-M1-B03	3	2,8	480,1	585	A24-M1-B16	3	2,11	366,1
183	A26-M1-B03	3	2,29	364,1	586	A25-M1-B16	3	2,37	398,1
184	A27-M2-B03	3	2,66	438,2	587	A26-M1-B16	3	1,71	282,1
185	A01-M1-B04	3	1,62	282,1	588	A15-M1-B17	3	2,23	446,1
186	A01-M2-B04	3	1,76	282,1	589	A16-M1-B17	3	2,09	426,1
187	A02-M1-B04	3	1,99	334,1	590	A17-M1-B17	3	1,86	420,2
188	A02-M2-B04	3	2,11	334,1	591	A18-M1-B17	3	2,17	437,1
189	A03-M1-B04	3	2,32	402,0	592	A20-M1-B17	3	2,39	469,1
190	A03-M2-B04	3	2,41	402,0	593	A21-M1-B17	3	1,73	357,1
191	A04-M1-B04	3	2,01	352,1	594	A22-M1-B17	3	2,63	537,1
192	A04-M2-B04	3	2,13	352,1	595	A23-M1-B17	3	2,33	435,1
193	A05-M1-B04	3	2,24	430,0	596	A24-M1-B17	3	2,24	455,1
194	A05-M2-B04	3	2,34	430,0	597	A25-M1-B17	3	2,43	487,1
195	A06-M1-B04	3	1,75	284,1	598	A26-M1-B17	3	1,88	371,1
196	A06-M2-B04	3	1,89	284,1	599	A02-M1-B18	3	2,62	422,0
197	A07-M1-B04	3	2,1	370,1	600	A05-M1-B18	3	2,87	517,9
198	A07-M2-B04	3	2,21	370,1	601	A06-M1-B18	3	2,39	372,0
199	A08-M1-B04	3	2,25	418,1	602	A08-M1-B18	3	2,86	506,0
200	A08-M2-B04	3	2,35	418,1.	603	A10-M1-B18	3	2,72	476,0
201	A09-M1-B04	3	2,08	394,1	604	A11-M1-B18	3	2,65	488,0
202	A09-M2-B04	3	2,1	394,1	605	A12-M1-B18	3	2,51	398,0
203	A10-M1-B04	3	2,19	388,1	606	A14-M1-B18	3	2,37	384,0
204	A11-M1-B04	3	2,14	400,1	607	A15-M1-B18	3	2,61	467,0
205	A11-M2-B04	3	2,17	400,1	608	A16-M1-B18	3	2,49	447,0
206	A12-M1-B04	3	1,98	310,1	609	A17-M1-B18	. 3	2,29	441,0
207	A13-M2-B04	3	2,35	464,1	610	A18-M1-B18	3	2,61	458,0
208	A13-M1-B04	3	2,39	464,1	611	A04-M1-B18	3	2,63	440,0
209	A14-M1-B04	3	1,94	296,1	612	Ά20-Μ1-Β18	3	2,79	490,0
210	A15-M1-B04	3	2,25	379,1	613	\21-M1-B18	3	2,18	378,0
211	A16-M1-B04	3	2,11	359,1	614	Ά22-Μ1-Β18	3	3,01	558,0
212	A17-M1-B04	3	1,87	353,1	615	\23-M1-B18	3	2,77	456,0
213	A18-M2-B04	3	2,31	370,1	616	<\24-Μ1-Β18	3	2,63	476,0
214	A18-M1-B04	3	2,22	370,1	617	^25-M1-B18	3	2,83	508,0
215	A20-M1-B04	3	2,43	402,1	618	A26-M1-B18	3	2,34	392,0
216	A21-M1-B04	3	1,69	290,1	619	\02-M1-B19	3	2,45	362,1
217	A22-M1-B04)	3	2,69	470,1 I	620	°Ό5-Μ1-Β19	3	2,7	458,0

• · · · · · · · · · · · · 9999 9 ® 9 »999

9*9 9 9 9 99® ··· 9» 9 «9 9

218	A23-M1-B04	3	2,39	368,1	621	A06-M1-B1É	3	2,2	312,1
219	A24-M1-B04	3	2,27	388,1	622	A08-M1-B1E	3	2,7	446,1
220	A25-M1-B04	3	2,49	420,1	623	A10-M1-B1£	3	2,56	416,1
221	A26-M1-B04	3	1,9	304,1	624	A11-M1-B1S	3	²,5	428,1
222	A27-M2-B04	3	2,31	378,1	625	A12-M1-B19	3	2,33	338,1
223	A01-M1-B05	3	1,84	335,1	626	A14-M1-B19	3	2,17	324,1
224	A01-M2-B05	3	2,01	335,1	627	A15-M1-B19	3	2,45	407,1
225	A02-M1-B05	3	2,2	387,2	628	A16-M1-B19	3	2,31	387,1
226	A02-M2-B05	3	2,32	387,2	629	A17-M1-B19	3	2,1	381,1
227	A03-M1-B05	3	2,51	455,1	630	A18-M1-B19	3	2,43	398,1
228	A04-M1-B05	3	2,2	405,2	631	A04-M1-B19	3	2,46	380,1
229	A04-M2-B05	3	2,33	405,2	632	A20-M1-B19	3	2,62	430,1
230	A05-M1-B05	3	2,43	483,1	633	A21-M1-B19	3	1,98	318,1
231	A05-M2-B05	3	2,53	483,1	634	A22-M1-B19	3	2,85	498,1
232	A06-M1-B05	3	1,97	337,2	635	A23-M1-B19	3	2,58	396,1
233	A06-M2-B05	3	2,12	337,2	636	A24-M1-B19	3	2,47	416,1
234	A07-M1-B05	3	2,29	423,2	637	A25-M1-B19	3	2,68	448,1
235	A07-M2-B05	3	2,4	423,2	638	A26-M1-B19	3	2,15	332,1
236	A08-M1-B05	3	2,43	471,2	639	A02-M1-B20	3	2,82	416,2
237	A08-M2-B05	3	2,53	471,2	640	A05-M1-B20	3	3,06	512,1
238	A09-M1-B05	3	2,26	447,2	641	A06-M1-B20	3	2,65	366,2
239	A09-M2-B05	3	2,3	447,2	642	A08-M1-B20	3	3,03	500,2
240	A10-M2-B05	3	2,4	441,1	643	A10-M1-B20	3	2,91	470,2
241	A11-M1-B05	3	2,31	453,2	644	A11-M1-B20	3	2,84	482,2
242	A11-M2-B05	3	2,36	453,2	645	A12-M1-B20	3	2,73	392,2
243	A12-M1-B05	3	2,18	363,2	646	A14-M1-B20	3	2,59	378,2
244	A13-M2-B05	3	2,54	517,2	647	A15-M1-B20	3	2,79	461,2
245	A13-M1-B05	3	2,57	517,2	648	A16-M1-B20	3	2,69	441,2
246	A14-M1-B05	3	2,19	349,2	649	A17-M1-B20	3	2,53	435,2
247	A15-M1-B05	3	2,46	432,2	650	A18-M1-B20	3	2,8	452,2
248	A16-M1-B05	3	2,32	412,2	651	A04-M1-B20	3	2,83	434,2
249	A17-M1-B05	3	2,11	406,2	652	A20-M1-B20	3	2,98	484,2
250	A18-M2-B05	3	2,53	423,2	653	A21-M1-B20	3	2,44	372,2
251	A21-M1-B05	3	1,98	343,1	654	A22-M1-B20	3	3,18	552,2
252	A26-M1-B05	3	2,15	357,2	655	A23-M1-B20	3	2,96	450,2
253	A27-M2-B05	3	2,53	431,2	656	A24-M1-B20	3	2,83	470,2
254	A01-M1-B06	3	2,07	360,1	657	A25-M1-B20	3	3,02	502,2
255	A01-M2-B06	3	2,22	360,1	658	A26-M1-B20	3	2,57	386,2
256	A02-M1-B06	3	2,44	412,1	659	A02-M1-B21	3	2,64	396,1
257	A02-M2-B06	3	2,48	412,1	660	A05-M1-B21	. 3	2,89	492,0
258	A03-M1-B06	3	2,65	480,0	661	A06-M1-B21	3	2,41	346,1
259	A03-M2-B06	3	2,75	480,0	662	A08-M1-B21	3	2,87	480,1
260	A04-M1-B06	3	2,39	430,1	663	A10-M1-B21	3	2,74	450,1
261	A04-M2-B06	3	2,49	430,1	664	A11-M1-B21	3	2,67	462,1
262	A05-M1-B06	3	2,59	508,0	665	A12-M1-B21	3	2,56	372,1
263	A05-M2-B06	3	2,66	508,0	666	A14-M1-B21	3	2,39	358,1
264	A06-M1-B06	3	2,21	362,1	667	A15-M1-B21	3	2,62	441,1
265	A06-M2-B06	3	2,32	362,1	668	A16-M1-B21	3	2,5	421,1·
266	A07-M1-B06	3	2,51	448,1	669	A17-M1-B21	3	2,31	415,1
267	A07-M2-B06	3	2,56	448,1	670	A18-M1-B21	3	2,62	432,1
268	A08-M1-B06	3	2,57	496,ΐ	671	A04-M1-B21	3	2,65	414,1

9

9 9

9 9'9

9 9999

9 9

9 *· ♦ ···

• 9 ·

• · ♦

9 9 • 9 9 9

9 9

99 • * ····

269	A08-M2-B06	3	2,66	496,1	672	A20-M1-B21	3	2,81	464,1
270	A09-M1-B06	3	2,42	472,1	673	A21-M1-B21	3	2,21	352,1
271	A09-M2-B06	3	2,48	472,1	674	A22-M1-B21	3	3,02	532,1
272	A10-M1-B06	3	2,51	466,1	675	A23-M1-B21	3	2,79	430,0
273	A10-M2-B06	3	2,6	466,1	676	A24-M1-B21	3	2,65	450,1
274	A11-M1-B06	3	2,45	478,1	677	A25-M1-B21	3	2,84	482,1
275	A12-M1-B06	3	2,36	388,1	678	A26-M1-B21	3	2,36	366,1
276	A12-M2-B06	3	2,42	388,1	679	A02-M1-B22	3	2,63	438,2
277	A13-M2-B06	3	2,71	542,1	680	A05-M1-B22	3	2,87	534,1
278	A14-M1-B06	3	2,43	374,1	681	A06-M1-B22	3	2,42	388,2
279	A16-M1-B06	3	2,52	437,1	682	A08-M1-B22	3	2,86	522,2
280	A17-M1-B06	3	2,36	431,1	683	A10-M1-B22	3	2,73	492,1
281	A18-M2-B06	3	2,74	448,1	684	A11-M1-B22	3	2,67	504,2
282	A18-M1-B06	3	2,64	448,1	685	A12-M1-B22	3	2,53	414,2
283	A20-M1-B06	3	2,81	480,1	686	A14-M1-B22	3	2,4	400/2
284	A21-M1-B06	3	2,27	368,1	687	A15-M1-B22	3	2,62	483,2
285	A22-M1-B06	3	3,02	548,1	688	A16-M1-B22	3	2,51	463,2
286	A23-M1-B06	3	2,79	446,1	689	A17-M1-B22	3	2,32	457,2
287	A24-M1-B06	3	2,67	466,1	690	A18-M1-B22	3	2,6	474,2
288	A25-M1-B06	3	2,85	498,1	691	A04-M1-B22	3	2,64	456,2
289	A26-M1-B06	3	2,39	382,1	692	A20-M1-B22	3	2,8	506,2
290	A27-M2-B06	3	2,74	456,1	693	A21-M1-B22	3	2,23	394,1
291	A01-M1-B07	3	2,21	360,0	694	A22-M1-B22	3	3,02	574,1
292	A01-M2-B07	3	2,37	360,0	695	A23-M1-B22	3	2,77	472,1
293	A02-M1-B07	3	2,55	412,1	696	A24-M1-B22	3	2,63	492,1
294	A02-M2-B07	3	2,66	412,1	697	A25-M1-B22	3	2,84	524,2
295	A03-M1-B07	3	2,83	480,0	698	A26-M1-B22	3	2,36	408,2
296	A04-M1-B07	3	2,55	430,0	699	A02-M1-B23	3	2,55	384,0
297	A04-M2-B07	3	2,65	430,0	700	A06-M1-B23	3	2,3	334,0
298	A05-M1-B07	3	2,77	508,0	701	A08-M1-B23	3	2,81	468,0
299	A06-M1-B07	3	2,37	362,0	702	A10-M1-B23	3	2,66	438,0
300	A06-M2-B07	3	2,49	362,0	703	A11-M1-B23	3	2,59	450,0
301	A07-M1-B07	3	2,61	448,0	704	A12-M1-B23	3	2,43	360,0
302	A07-M2-B07	3	2,73	448,0	705	A14-M1-B23	3	2,27	346,0
303	A08-M1-B07	3	2,73	496,0	706	A15-M1-B23	3	2,55	429,0
304	A08-M2-B07	3	2,81	496,0	707	A16-M1-B23	3	2,4	409,0
305	A09-M1-B07	3	2,67	472,1	708	A17-M1-B23	3	2,19	403,1
306	A09-M2-B07	3	2,65	472,1	709	A18-M1-B23	3	2,53	420,0
307	A10-M1-B07	3	2,65	466,0	710	A04-M1-B23	3	2,57	402,0
308	A11-M1-B07	3	2,58	478,0	711	A20-M1-B23	- 3	2,73	452,0
309	A11-M2-B07	3	2,68	478,0	712	A21-M1-B23	3	2,07	..340,0.
310	A12-M1-B07	3	2,51	388,1	713	A22-M1-B23	3	2,96	520,0
311	A13-M2-B07	3	2,88	542,1	714	A23-M1-B23	3	22L.	418,0
312	A14-M1-B07	3	2,57	374,0	715	A24-M1-B23	3	2,57	438,0
313	A15-M1-B07	3	2,78	457,0	716	A25-M1-B23	3	2ZZ..	470,0
314	A16-M1-B07	3	2,67	437,0	717	A26-M1-B23	3	2,25	354,0
315	A17-M1-B07	3	2,49	431,1	718	A02-M1-B24	3	2,27	363,1
316	A18-M2-B07	3	2,91	448,0	719	A05-M1-B24	3	2,54	459,0*
317	A18-M1-B07	3	2,8	448,0	720	A06-M1-B24	3	1,99	313,1
318	A20-M1-B07	3	2,98	480,0	721	A08-M1-B24	3	2,55	447,1
319	A21-M1-B07	3	2,39	368,0	722	A10-M1-B24	3	2,39	417^

• · • · • · • · ·· · • · · • · · · • ·····♦ • · « • » · • · · · • · ···· • · · ·· 9

320	Α22-Μ1-Β0}	3	3,19	548,0	723	Α11-Μ1-Β2/	1 3	2,34	429,1
321	Α23-Μ1-Β07	3	2,97	446,0	724	Α12-Μ1-Β2^Ζ	3	2,14	339,1
322	Α24-Μ1-Β07	3	2,83	466,0	725	Α14-Μ1-Β2^Ζ	3	1,98	325,1
323	Α25-Μ1-Β07	3	3,03	498,0	726	Α15-Μ1-Β24	3	2,27	408,1
324	Α26-Μ1-Β07	3	2,55	382,0	727	Α16-Μ1-Β24	3	2,13	388,1
325	Α27-Μ2-Β07	3	2,91	456,1	728	Α17-Μ1-Β24	3	1,89	382,1
326	Α01-Μ1-Β08	3	1,93	336,1	729	Α18-Μ1-Β24	3	2,25	399,1
327	Α01-Μ2-Β08	3	2,06	336,1	730	Α04-Μ1-Β24	3	2,29	381,1
328	Α02-Μ1-Β08	3	2,26	388,2	731	Α20-Μ1-Β24	3	2,46	431,1
329	Α03-Μ1-Β08	3	2,55	456,1	732	Α21-Μ1-Β24	3	1,74	319,1
330	Α04-Μ1-Β08	3	2,26	406,1	733	Α22-Μ1-Β24	3	2,71	499,1
331	Α05-Μ1-Β08	3	2,49	484,1	734	Α23-Μ1-Β24	3	2,41	397,1
332	Α05-Μ2-Β08	3	2,55	484,1	735	Α24-Μ1-Β24	3	2,29	417,1
333	Α06-Μ1-Β08	3	2,05	338,1	736	Α25-Μ1-Β24	3	2,51	449,1
334	Α06-Μ2-Β08	3	2,16	338,1	737	Α26-Μ1-Β24	3	1,95	333,1
335	Α07-Μ1-Β08	3	2,35	424,1	738	Α02-Μ1-Β25	3	2,63	372,2
336	Α07-Μ2-Β08	3	2,43	424,1	739	Α05-Μ1-Β25	3	2,89	468,1
337	Α08-Μ1-Β08	3	2,48	472,1	740	Α06-Μ1-Β25	3	2,41	322,1
338	Α08-Μ2-Β08	3	2,55	472,1	741	Α08-Μ1-Β25	3	2,87	456,1
339	Α09-Μ1-Β08	3	2,31	448,2	742	Α10-Μ1-Β25	3	2,73	426,1
340	Α09-Μ2-Β08	3	2,34	448,2	743	Α11-Μ1-Β25	3	2,66	438,2
341	Α10-Μ1-Β08	3	2,41	442,1	744	Α14-Μ1-Β25	3	2,38	334,1
342	Α10-Μ2-Β08	3	2,44	442,1	745	Α15-Μ1-Β25	3	2,62	417,1
343	Α11-Μ1-Β08	3	2,36	454,2	746	Α16-Μ1-Β25	3	2,5	397,2
344	Α11-Μ2-Β08	3	2,4	454,2	747	Α17-Μ1-Β25	3	2,31	391,2
345	Α12-Μ1-Β08	3	2,24	364,2	748	Α18-Μ1-Β25	3	2,61	408,1
346	Α12-Μ2-Β08	3	2,27	364,2	749	Α04-Μ1-Β25	3	2,65	390,2
347	Α13-Μ1-Β08	3	2,63	518,2	750	Α20-Μ1-Β25	3	2,8	440,2
348	Α14-Μ1-Β08	3	2,27	350,1	751	Α21-Μ1-Β25	3	2,21	328,1
349	Α15-Μ1-Β08	3	2,51	433,1	752	Α22-Μ1-Β25	3	3,02	508,1
350	Α16-Μ1-Β08	3	2,39	413,2	753	Α23-Μ1-Β25	3	2,77	406,1
351	Α17-Μ1-ΒΟ8	3	2,19	407,2	754	Α24-Μ1-Β25	3	2,65	426,1
352	Α18-Μ2-Β08	3	2,57	424,1	755	Α25-Μ1-Β25	3	2,83	458,1
353	Α18-Μ1-Β08	3	2,49	424,1	756	Α26-Μ1-Β25	3	2,35	342,2
354	Α20-Μ1-Β08	3	2,69	456,1	757	Α14-Μ1-Β26	3	3,49	328,2
355	Α21-Μ1-Β08	3	2,09	344,1	758	Α15-Μ1-Β26	3	3,53	411,2
356	Α22-Μ1-Β08	3	2,92	524,1	759	Α16-Μ1-Β26	3	3,49	391,2
357	Α23-Μ1-Β08	3	2,65	422,1	760	Α17-Μ1-Β26	3	3,39	385,2
358	Α24-Μ1-Β08	3	2,53	442,1	761	Α20-Μ1-Β26	3	3,77	434,2
359	Α25-Μ1-Β08	3	2,73	474,1	762	Α21-Μ1-Β26	. 3	3,31	322,2
360	Α26-Μ1-Β08	3	2,23	358,1	763	Α23-Μ1-Β26	3	3,8	400,2
361	Α27-Μ2-Β08	3	2,58	432,2	764	Α24-ΜΤΒ26	3	3,61	420,2
362	Α01-Μ1-Β09	3	2,23	348,2	765	425-Μ1-Β26	3	3,79	452,2
363	Α01-Μ2-Β09	3	2,37	348,2	766	426-Μ1-Β26	3	3,45	336,2
364	Α02-Μ1-Β09	3	2,55	400,2	767	402-Μ1-Β27	3	2,5	404,2
365	Α02-Μ2-Β09	3	2,63	400,2	768	405-Μ1-Β27	3	2,75	500,1
366	Α03-Μ1-Β09	3	2,82	468,1	769	<\06-Μ1-Β27	3	2,27	354,1
367	Α03-Μ2-Β09	3	2,89	468,1	770	<\08-Μ1-Β27	3	2,74	488,1-
368	Α04-Μ1-Β09	3	2,55	418,2	771	Μ0-Μ1-Β27	3	2,61	458,1
369	Α04-Μ2-Β09	3	2,63	418,2	772	Μ1-Μ1-Β27	3	2,54	470,1
370	Α05-Μ1-Β09	3	2,75	•496,1	773	Μ2-Μ1-Β27	3	2,38	380,2

9

9 99 9 9 9

9 9999

9 9 9

99 9 ·· ··♦· • · • · • · • · ·

• ♦ ·

9 · • ♦ ♦ t • · · • 99 • · ···*

371	A05-M2-B09	3	2,81	496,1	774	A14-M1-B27	3	2,25	366,1
372	A06-M1-B09	3	2,38	350,2	775	A15-M1-B27	3	2,49	449,1
373	A06-M2-B09	3	2,48	350,2	776	A16-M1-B27	3	2,37	429,1
374	A07-M1-B09	3	2,61	436,2	777	A17-M1-B27	3	2,17	423,2
375	A07-M2-B09	3	2,7	436,2	778	A18-M1-B27	3	2,47	440,1
376	A08-M1-B09	3	2,72	484,2	779	A04-M1-B27	3	2,51	422,1
377	A08-M2-B09	3	2,79	484,2	780	A20-M1-B27	3	2,66	472,1
378	A09-M1-B09	3	2,57	460,2	781	A21-M1-B27	3	2,06	360,1
379	A09-M2-B09	3	2,63	460,2	782	A22-M1-B27	3	2,89	540,1
380	A10-M1-B09	3	2,66	454,2	783	A23-M1-B27	3	2,63	438,1
381	A10-M2-B09	3	2,71	454,2	784	A24-M1-B27	3	2,51	458,1
382	A11-M1-B09	3	2,59	466,2	785	A25-M1-B27	3	2,7	490,4
383	A11-M2-B09	3		466,2	786	A26-M1-B27	3	2,22	374,4
384	A12-M1-B09	3	2,51	376,2	787	A02-M1-B28	3	2,65	541,2
385	A12-M2-B09	3	2,57	376,2	788	A05-M1-B28	3	2,86	637,1
386	A13-M2-B09	3	2,85	530,2	789	A06-M1-B28	3	2,47	491,2
387	A13-M1-B09	3	2,89	530,2	790	A08-M1-B28	3	2,85	625,2
388	A14-M1-B09	3	2,6	362,2	791	A10-M1-B28	3	2,73	595,2
389	A15-M1-B09	3		445,2	792	A11-M1-B28	3	2,68	607,2
390	A16-M1-B09	3	2,69	425,2	793	A12-M1-B28	3	2,56	517,2
391	A17-M1-B09	3	2,53	419,2	794	A14-M1-B28	3	2,44	503,2
392	A18-M2-B09	3	2,9	436,2	795	A15-M1-B28	3	2,63	586,2
393	A18-M1-B09	3	2,81	436,2	796	A16-M1-B28	3	2,54	566,2
394	A20-M1-B09	3	2,99	468,2	797	A17-M1-B28	3	2,37	560,2
395	A21-M1-B09	3	2,44	356,2	798	A18-M1-B28	3	2,63	577,2
396	A22-M1-B09	3	3,19	536,2	799	A04-M1-B28	3	2,65	559,2
397	A23-M1-B09	3	2,97	434,2	800	A20-M1-B28	3	2,79	609,2
398	A24-M1-B09	3	2,83	454,2	801	A21-M1-B28	3	2,31	497,2
399	A25-M1-B09	3	3,03	486,2	802	A22-M1-B28	3	3	677,2
400	A26-M1-B09	3	2,59	370,2	803	A23-M1-B28	3	2,76	575,1
401	A27-M2-B09	3	2,9	444,2	804	A24-M1-B28	3	2,65	595,2
402	A01-M1-B10	3	1,73	352,1	805	A25-M1-B28	3	2,83	627,2
403	A01-M2-B10	3	1,88	352,1	806	A26-M1-B28	3	2,42 I	511,6

9 9

9 ♦ ♦ · • · · • · · · • · · · ·

99 99 9 9 9 • · · • · φ • · · ·

Příklad 12

3-(6-Benzyloxy-1 //-indazol~3-yl)-3-butylrnočovina

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-lA-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-/ere-butylimino-2-diethylamino-l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu (1,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

mg pryskyřice se suspendovalo v 1 ml dichlormethanu a přidalo se 150 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získalo se 13,8 mg titulní sloučeniny. Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. - 7,64; [M+H]⁺ = 394

Pryskyřice získaná v prvním kroku (300 mg, 0,25 mmol) se suspendovala v 5 ml směsi dichlormethanu a methanolu 1:1a přidalo se 400 μΐ hydrazin-monohydrátu. Suspenze se zahřála na 45 °C. Zahřívání a míchání pokračovalo přes noc, poté se směs ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem a opět methanolem, poté se sušila ve vakuu.

Štěpená sloučenina: 6- {[fórc-butyl(dimethyl)silyl] oxy} -1 A-indazol-3 -amin; HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,99; [M+H]⁺ = 264; [M-H]' - 262

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 2 ml dimethylformamidu; přidal se A-butyl-isokyanat (28 μΐ; 5 ekv.). Suspenze se zahřála na 50 °C. Míchání a zahřívání pokračovalo 60 hodin, poté se suspenze ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem, poté se sušila ve vakuu.

9 9

9

9999

9 9

9 e · • · · • ··· ·

• « · 9 999

9 9

9

Pryskyřice získaná v třetím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

Štěpená sloučenina: l-butyl-3-(6-hydroxy-l//-indazol-3-yl)močovina; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,87; [M+H]⁺ = 249; [M-H]’ = 247

Pryskyřice získaná ve čtvrtém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml 1 -methyl-2-pyrrolidinonu, poté se přidalo 43 μΐ 2-/erobutylimino-2-diethylamino-l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu (1,5 ekv.) a 57 μΐ benzylbromidu (6 ekv.). Suspenze se míchala 16 hodin. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

100 mg suché pryskyřice se suspendovalo v 3 ml dichlormethanu a přidalo se 450 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 3 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily; získala se titulní sloučenina.

l-(6-Benzyloxy-l//-indazol-3-yl)-3-butylmočovina; HPLC (Způsob 3) r.t. = 2,3; [M+H]⁺ = 339,3

Postupem podobným Příkladu 12 se na pryskyřici ukotvily 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} -177-indazol-3-yl)-1 //-isoindol-1,3(2//)-dion a 2-(5-{[íerc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion a poté se popsaným syntetickým schématem syntetizovaly následující produkty.

1- (5-Benzyloxy-l//-indazol-3-yl)-3-butylmočovina; HPLC (Způsob 3) r.t. = 2,25; [M+H]⁺ = 339,3;

Methyl-2-( {3 - [(anilinokarbonyl)aminoj -1 //-indazol-5-yl} oxy)butanoát;

HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,88; [M+H]⁺ = 369,1;

Methyl-2-[(3- {[(benzylamino)karbonyl]amino}- l//-indazol-5-yl)oxy]butanoát; HPLC (Způsob 2) r.t. = 8,19; [M+H]⁺ = 383,2;

/V-isopropyl-V- {5-[( 1 -fenyl-2-oxopyrroIidin-3-yl)oxy]-1 //-indazol-3-yl} močovina; HPLC (Způsob 2) r.t. - 7,84; [M+H]⁺ = 394,2;

2- [(3-{[(Isopropylamino)karbonyl]amino}-l//-indazol-5-yl)oxy]-JV-fenylpropanamid; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,76; [M+H]⁺ = 382,2;

φφ φφφφ φ φ φ φ φ φ φ φ φ φ • · φφφ φφφφφ φ φφ φ φ φ φ φ φφφ φ φφφφ φφφ φφ φ

Methyl-2-[(3-{[(isopropylamino)karbonyl]amino}-l//-indazol-5-yl)oxyjbutanoát; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,65; [M+H]⁺ = 335,2;

A-isopropyl-A'-{6-[(l-fenyl-2-oxopyrrolidin-3-yl)oxy]-l//-indazol-3-yl}močovina; HPLC (Způsob 2) r.t. = 7,89; [M+H]⁺ = 394,2

Stejným postupem (příklad 12) se paralelně syntetizovalo 506 produktů; jejich kódy (viz výše) jsou uvedené v tabulce XII společně s odpovídajícími HPLC retenčními časy a experimentálně nalezenými [M+H]⁺.

Tabulka XII

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+H]⁺	Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+H]⁺
1	A38-M1-B82	2	9,11	373,2	254	A14-M1-B69	3	2,52	349,2
2	A29-M1-B82	2	8,3	428,2	255	A15-M1-B69	3	2,74	432,2
3	A35-M1-B82	2	8,18	416,2	256	A16-M1-B69	3	2,64	412,2
4	A38-M1-B83	2	9,09	387,2	257	A17-M1-B69	3	2,46	406,2
5	A29-M1-B83	2	8,3	442,2	258	A18-M2-B69	3	2,77	423,2
6	A35-M1-B83	2	8,26	430,2	259	A18-M1-B69	3	2,75	423,2
7	A39-M1-B83	2	8,47	431,2	260	A20-M1-B69	3	2,93	455,2
8	A40-M1-B83	2	9,05	470,2	261	A21-M1-B69	3	2,37	343,1
9	A38-M1-B68	2	8,75	339,2	262	A22-M1-B69	3	3,13	523,1
10	A03-M1-B68	2	9,32	393,1	263	A23-M1-B69	3	2,91	421,1
11	A40-M1-B68	2	8,74	422,2	264	A24-M1-B69	3	2,79	441,1
12	A35-M2-B82	2	8,31	416,2	265	A25-M1-B69	3	2,97	473,2
13	A32-M2-B82	1	6,01	369,1	266	A26-M1-B69	3	2,51	357,2
14	A39-M2-B82	2	8,54	417,1	267	A27-M2-B69	3	2,77	431;2
15	A40-M2-B82	2	9,09	456,2	268	A01-M1-B70	3	2,2	373,1
16	A38-M2-B83	2	9,15	387,2	269	A01-M2-B70	3	2,22	373,1
17	A45-M2-B83	2	9,31	477,2	270	A02-M1-B70	3	2,44	425,1
18	A03-M2-B83	2	9,61	441,1	271	A03-M1-B70	3	2,7	493,1
19	A29-M2-B83	2	8,35	442,2	272	A04-M1-B70	3	2,45	443,9
20	A31-M2-B83	2	8,64	351,2	273	A05-M1-870	3	2,63	521

····

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 99 9 99 · • · ·· ·· φ· * 999 9

21	Α44-Μ2-Β8Ξ	2	8,77	435,1	274	A05-M2-B7C	) 3	2,61	521
22	A46-M2-B83	2	8,69	461,2	275	A06-M1-B7C	3	2,27	375,1
23	A35-M2-B83	2	8,33	430,2	276	A06-M2-B7C	3	2,33	375,1
24	A32-M2-B83	1	5/	383,2	277	A07-M2-B7C	3	2,55	461,1
25	A41-M2-B83	2	9,02	477,2	278	A08-M1-B7C	3	2,61	509,1
26	A39-M2-B83	2	8,57	431,2	279	A09-M2-B7C	3	2,48	485,2
27	A40-M2-B83	2	9,12	470,2	280	A10-M1-B7C	3	2,57	479,1
28	A38-M2-B68	2	8,82	339,2	281	A10-M2-B70	3	2,56	479,1
29	A03-M2-B68	2	9,35	393,1	282	A11-M1-B70	3	2,51	491,1
30	A31-M2-B68	2	8,12	303,2	283	A11-M2-B70	3	2,52	491,1
31	A44-M2-B68	2	8,37	387,1	284	A12-M1-B70	3	2,41	401,1
32	A46-M2-B68	2	8,28	413,2	285	A12-M2-B70	3	2,43	401,1
33	A35-M2-B68	2	7,86	382,2	286	A13-M1-B70	3	2,76	555,1
34	A32-M2-B68	1	4,88	335,2	287	A14-M1-B70	3	2,5	387,1
35	A41-M2-B68	2	8,68	429,2	288	A18-M2-B70	3	2,71	461,1
36	A39-M2-B68	2	8,15	383,2	289	A01-M1-B71	3	1,96	339,1
37	A30-M1-B82	1	7,23	373,2	290	A02-M1-B71	3	2,27	391,1
38	A29-M1-B82	1	5,39	337,2	291	A02-M2-B71	3	2,33	391,1
39	A03-M1-B82	1	7,84	427,1	292	A03-M1-B71	3	2,55	459,1
40	A30-M2-B82	1	7,19	373,2	293	A03-M2-B71	3	2,58	459,1
41	A31-M2-B82	2	8,58	337,2	294	A04-M1-B71	3	2,28	409,1
42	A29-M2-B82	2	8,32	428,2	295	A04-M2-B71	3	2,34	409,1
43	A03-M2-B82	2	9,58	427,1	296	A05-M1-B71	3	2,49	487,1
44	A01-M1-B62	3	1,99	337,1	297	A05-M2-B71	3	2,52	487,1
45	A02-M1-B62	3	2,31	389,2	298	A06-M1-B71	3	2,09	341,1
46	A03-M1-B62	3	2,64	457,1	299	A08-M2-B71	3	2,52	475,1
47	A03-M2-B62	3	2,64	457,1	300	A09-M1-B71	3	2,31	451,2
48	A04-M1-B62	3	2,32	407,1	301	A10-M1-B71	3	2,42	445,1
49	A05-M1-B62	3	2,57	485,1	302	A11-M1-B71	3	2,36	457,1
50	A05-M2-B62	3	2,58	485,1	303	A11-M2-B71	3	2,37	457,1
51	A06-M1-B62	3	2,12	339,1	304	A12-M1-B71	3	2,24	367,1
52	A06-M2-B62	3	2,2	339,1	305	A12-M2-B71	3	2,25	367,1
53	A07-M1-B62	3	2,44	425,1	306	A13-M2-B71	3	2,54	521,2
54	A07-M2-B62	3	2,46	425,1	307	A14-M1-B71	3	2,29	353,1
55	A08-M1-B62	3	2,62	473,1	308	A15-M1-B71	3	2,51	436,1
56	A08-M2-B62	3	2,57	473,1	309	A16-M1-B71	3	2,41	416,1
57	A09-M1-B62	3	2,35	449,2	310	M7-M1-B71	3	2,21	410,2
58	A09-M2-B62	3	2,38	449,2	311	418-M2-B71	3	2,53	427,1
59	A10-M1-B62	3	2,15	443,1	312	M8-M1-B71	3	2,49	427,1
60	A11-M1-B62	3	2,4	455,1	313	A20-M1-B71	.3	2,69	459,1
61	A11-M2-B62	3	2,43	455,1	314	A21-M1-B71	3	2,13	347,1
62	A12-M1-B62	3	2,28	365,2	315	<\22-M1-B71	3	2,91	527,1
63	A13-M2-B62	3	2,61	519,2	316	λ23-Μ1-Β71	3	2,65	425,1
64	A14-M1-B62	3	2,33	351,1	317	A24-M1-B71	3	2,54	445,1
65	A14-M2-B62	3	2,41	351,1	318	λ25-Μ1-Β71	3	2,72	477,1
66	A15-M1-B62	3	2,55	434,1	319	λ26-Μ1-Β71	3	2,26	361,1
67	A16-M1-B62	3	2,45	414,1	320	\27-M2-B71	3	2,54	435,2
68	A17-M1-B62	3	2,24	408,2	321	\01-M1-B72	3	1,88	287,1-
69	A18-M2-B62	3	2,62	425,1	322	*\03-Μ1-Β72	3	2,55	407,1
70	A18-M1-B62	3	2,53	425,1	323	\04-M1-B72	3	2,26	357,2
71	A20-M1-B62.	3	2,75	457,1	324	\04-M2-B72	3	2,31	357,2

·· ·<·«· ·· *

A21-M1-B62

A22-M1-B62

A23-M1-B62

A24-M1-B62

A25-M1-B62

A26-M1-B62

A01-M1-B63

A02-M1-B63

A03-M1-B63

A03-M2-B63

A04-M1-B63

A04-M2-B63

A05-M1-B63

A06-M1-B63

A07-M2-B63

A08-M1-B63

A08-M2-B63

A09-M1-B63

A10-M1-B63

A11-M1-B63

A12-M1-B63

A13-M2-B63

A14-M1-B63

A15-M1-B63

A16-M1-B63

A17-M1-B63

A18-M2-B63

A18-M1-B63

100

A20-M1-B63

101

A21-M1-B63

102

A22-M1-B63

103

A23-M1-B63

104

A24-M1-B63

105

A25-M1-863

106

A26-M1-B63

107

A01-M1-B64

108

A02-M1-B64

109

A04-M1-B64

110

A05-M1-B64

111

A06-M1-B64

112

A07-M1-B64

113

A08-M1-B64

114

A08-M2-B64

115

A09-M1-B64

116

A09-M2-B64

117

A10-M1-B64

118

A11-M1-B64

119

A11-M2-B64

120

A12-M1-B64

121

A13-M2-B64

122

A14-M1-B64

2,15 345,1 [ I 325 A05-M1-B72

2,48

435,1

2,96

AL

2,58

2,78

2,31

2/9

2,47

2,75

2,72

2/2

2,44

2,68

2,23

2,49

2,67

2/4

2,56

2/9

2,37

2,69

2/1

2,65

2,53

2,35

2,67

2,64

2,83

2/6

3,05

2,81

2,67

2,87

Al

2,17

2,49

2,72

2,31

2,56

2,67

2/1

2,56

2,62

2,55

2,59

2,46

2,78

2,51

525,1

326

A05-M2-B72

2,53

435,1

423,1 327

443,1 ) I 328

475.1 329

359,1

330

321.1 331

373,2 I 332

441,1

333

441,1 | | 334

391,1

335

391,1 | l 336

469,1

337

323,1 | | 338

409,1 | | 339

457,1 | | 340

457,1 341

433,2

342

427,1 I | 343

439,2

344

349,2 | I 345

503,2 | | 346

335,1 | [ 347

418,1

398,2

348

349

392,2 I l 350

409,1 | | 351

409,1 352

441,1 | I 353

329,1 354

509,1 I | 355

407,1 | I 356

427,1 | | 357

459,1 I I 358

343,1 359

341,1 360

393,1 | | 361

411,1

489

362

363

343,1 I | 364

429,1

365

477,1 l | 366

477,1 l 367

453,1 I | 368

453,1 [ I 369

447,1 | I 370

459,1 | | 371

459,1 I | 372

369,1

373

523,1 | 374

355,1

A06-M1-B72

A07-M1-B72

A08-M2-B72

A09-M1-B72

A10-M1-B72

A11-M1-B72

A11-M2-B72

A12-M1-B72

A12-M2-B72

A13-M1-B72

A14-M1-B72

A15-M1-B72

A16-M1-B72

A17-M1-B72

A18-M2-B72

A18-M1-B72

A20-M1-B72

A21-M1-B72

A22-M1-B72

A23-M1-B72

A24-M1-B72

A25-M1-B72

A26-M1-B72

A01-M1-B73

A02-M1-B73

A06-M1-B73

A07-M1-B73

A07-M2-B73

A08-M2-B73

A10-M1-B73

A11-M1-B73

A11-M2-B73

A12-M1-B73

A12-M2-B73

A13-M2-B73

A14-M1-B73

A18-M2-B73

A27-M2-B73

A01-M1-B74

A01-M2-B74

A02-M1-B74

A02-M2-B74

A03-M1-B74

A04-M1-B74

A04-M2-B74

A05-M1-B74

A05-M2-B74

A06-M1-B74

375 A06-M2-B74

2,03

2,33

2,5

2,27

2,39

2,34

A¹⁹

2,21

2,62

2,21

2,47

2,35

2,13

2,49

2,45

2,66

2,03

2,9

2,61

2,5

2,7

2,17

2,19

2,51

2,33

2,6

2,57

2,7

2,63

2,57

2,58

2,47

2,49

2,77

2,55

2,77

2,78

2,08

2,11

2,39

2,41

2,67

2,4

2,41

2,59

2,6

2,21

2,23

289,2

375,2

423,2

399,2

393,1

405,2

315,2

469,2

301,2

384,2

364,2

358,2

375,2

407,2

295,1

475,1

373,1

393,1

425,2

309,2

361,1

413,1

363,1

449,1

497,1

467,1

479,1

389,1

543,1

375,1

449,1

457,1

367,1

419,2

487,1

437,2

515/

515,1

369,1

369,1 • · · • ···· • · • « ♦ · 9

9999 • 9 ··«»

• · ·· • · · • · · • · · · • · · • ·· • · • · • · · • ·· • 9 ···« • · '· • ····

123	A15-M1-B6^Z	3	2,72	438,1	376	A07-M1-BA	1 3	2,49	455,1
124	A16-M1-B64	3	2,63	418,1	377	A07-M2-B7'	1 3	1,18	455,1
125	A17-M1-B6/	3	2,43	412,1	378	A08-M1-B7'	1 3	2,58	503,1
126	A18-M2-B64	3	2,77	429,1	379	Α08-Μ2-Β7-!	1 3	2,6	503,1
127	A18-M1-B64	3	2,72	429,1	380	Α09-Μ1-Β7/	3	2,37	479,2
128	A20-M1-B64	3	2,91	461,1	381	Α09-Μ2-Β7/	3	2,4	479,2
129	A21-M1-B64	3	2,36	349,1	382	Α11-Μ1-Β7^	3	2,41	485,2
130	A22-M1-B64	3	3,12	529,1	383	Α11-Μ2-Β74	3	2,44	485,2
131	A23-M1-B64	3	2,89	427,1	384	Α12-Μ1-Β74	3	2,29	395,2
132	A24-M1-B64	3	2,75	447,1	385	Α12-Μ2-Β74	3	2,33	395,2
133	A25-M1-B64	3	2,95	479,1	386	Α13-Μ2-Β74	3	2,62	549,2
134	A26-M1-B64	3	2,5	363,1	387	Α13-Μ1-Β74	3	2,69	549,2
135	A01-M1-B65	3	2,35	383,1	388	Α14-Μ1-Β74	3	2,35	381,1
136	A02-M1-B65	3	2,64	435,2	389	Α14-Μ2-Β74	3	2,43	381,1
137	A04-M1-B65	3	2,63	453,2	390	Α15-Μ1-Β74	3	2,58	464,1
138	A05-M1-B65	3	2,83	531,1	391	Α16-Μ1-Β74	3	2,47	444,2
139	A06-M1-B65	3	2,47	385,2	392	Α17-Μ1-Β74	3	2,28	438,2
140	A07-M2-B65	3	2,68	471,2	393	Α18-Μ2-Β74	3	2,61	455,1
141	A08-M1-B65	3	2,79	519,2	394	Α18-Μ1-Β74	3	2,56	455,1
142	A09-M1-B65	3	2,65	495,2	395	Α21-Μ1-Β74	3	2,2	375,1
143	A09-M2-B65	3	2,67	495,2	396	Α22-Μ1-Β74	3	2,97	555,1
144	A10-M1-B65	3	2,75	489,1	397	Α23-Μ1-Β74	3	2,73	453,1
145	A11-M1-B65	3	2,67	501,2	398	Α24-Μ1-Β74	3	2,6	473,1
146	A11-M2-B65	3	2,7	501,2	399	Α25-Μ1-Β74	3	2,8	505,1
147	A12-M1-B65	3	2,6	411,2	400	Α26-Μ1-Β74	3	2,33	389,2
148	A14-M1-B65	3	2,71	397,2	401	Α02-Μ1-Β75	3	2,69	405,1
149	A16-M1-B65	3	2,8	460,2	402	Α05-Μ1-Β75	3	2,93	501
150	A17-M1-B65	3	2,64	454,2	403	Α06-Μ1-Β75	3	2,48	355,1
151	A18-M1-B65	3	2,89	471,2	404	A084VI1-B75	3	2,93	489,1
152	A2O-M1-B65	3	3,07	503,2	405	Α10-Μ1-Β75	3	2,79	459,1
153	A21-M1-B65	3	2,57	391,1	406	Α11-Μ1-Β75	3	2,74	471,1
154	A22-M1-B65	3	3,25	571,1	407	Α12-Μ1-Β75	3	2,58	381,1
155	A23-M1-B65	3	3,05	469,1	408	Α14-Μ1-Β75	3	2,44	367,1
156	A24-M1-B65	3	2,93	489,1	409	Α15-Μ1-Β75	3	2,66	450,1
157	A25-M1-B65	3	3,1	521,2	410	416-Μ1-Β75	3	2,57	430,1
158	A26-M1-B65	3	2,69	405,2	411	Α17-Μ1-Β75	3	2,38	424,1
159	A01-M1-B66	3	1,89	349,1	412	418-Μ1-Β75	3	2,65	441,1
160	A04-M1-B66	3	2,22	419,1	413	*\04-M1-B75	3	2,7	423,1
161	A06-M1-B66	3	2,02	351,1	414	ÍK20-M1-B75	3	2,87	473,1
162	A06-M2-B66	3	2,06	351,1	415	<\21-Μ1-Β75	.3	2,31	361,1
163	A08-M2-B66	3	2,45	485,1	416	\22-M1-B75	3	3,08	541,1
164	A09-M1-B66	3	2,24	461,2	417	<\23-Μ1-Β75	3	2,83	439,1
165	A09-M2-B66	3	2,82	461,2	418	Α24-Μ1-Β75	3	2,71	459,1
166	A11-M1-B66	3	2,31	467,1	419	\25-M1-B75	3	2,9	491,1
167	A11-M2-B66	3	2,34	467,1	420	\26-M1-B75	3	2,43	375,1
168	A12-M1-B66	3	2,16	377,2	421	Μ4-Μ1-Β76	3	2,58	389,1
169	A12-M2-B66	3	2,21	377,2	422	Μ5-Μ1-Β76	3	2,77	472,1
170	A14-M1-B66	3	2,22	363,1	423	Μ6-Μ1-Β76	3	2,69	452,1·
171	A15-M1-B66	3	2,46	446,1	424	Μ7-Μ1-Β76	3	2,51	446,1
172	A16-M1-B66	3	2,35	426,1	425 ?	Μ8-Μ1-Β76	3	2,77	463,1
173	A17-M1-B66	3	2,13	420,2	426 /	\20-M1-B76	3	2,96	495,1

174	A18-M2-B6C	3	2,51	437,1	427	A21-M1-B7(	3 3	2,45	383,1
175	A18-M1-B6É	3	2,44	437,1	428	A22-M1-B7Í	3 3	3,15	563,1
176	A20-M1-B66	3	2,65	469,1	429	A23-M1-B7Í	3 3	2,93	461,1
177	A21-M1-B66	3	2,06	357,1	430	A24-M1-B7f	5 3	2,8	481,1
178	A22-M1-B66	3	2,87	537,1	431	A25-M1-B7Ě	3	2,99	513,1
179	A24-M1-B66	3	2,49	455,1	432	A26-M1-B76	3	2,57	397,1
180	A25-M1-B66	3	2,69	487,1	433	A06-M1-B77	3	2,47	327,1
181	A26-M1-B66	3	2,19	371,1	434	A08-M1-B77	3	2,89	461,1
182	A27-M2-B66	3	2,51	445,2	435	A11-M1-B77	3	2,69	443,1
183	A01-M1-B67	3	1,91	335,1	436	A12-M1-B77	3	2,54	353,1
184	A01-M2-B67	3	2,01	335,1	437	A14-M1-B77	3	2,4	339,1
185	A02-M1-B67	3	2,26	387,1	438	A16-M1-B77	3	2,53	402,1
186	A02-M2-B67	3	2,35	387,1	439	A17-M1-B77	3	2,34	396,1
187	A03-M1-B67	3	2,56	455,1	440	A18-M1-B77	3	2,62	413,1
188	A03-M2-B67	3	2,59	455,1	441	A04-M1-B77	3	2,67	395,1
189	A04-M1-867	3	2,27	405,1	442	A20-M1-B77	3	2,83	445,1
190	A04-M2-B67	3	2,36	405,1	443	A22-M1-B77	3	3,05	513,1
191	A05-M1-B67	3	2,48	483	444	A23-M1-B77	3	2,79	411,1
192	A06-M1-B67	3	2,05	337,1	445	A24-M1-B77	3	2,66	431,1
193	A06-M2-B67	3	2,16	337,1	446	A25-M1-B77	3	2,86	463,1
194	A08-M2-B67	3	2,55	471,1	447	A26-M1-B77	3	2,39	347,1
195	A09-M1-B67	3	2,3	447,2	448	A02-M1-B78	3	2,55	387,2
196	A09-M2-B67	3	2,34	447,2	449	A05-M1-B78	3	2,79	483,1
197	A10-M1-B67	3	2,4	441,1	450	A06-M1-B78	3	2,35	337,2
198	A11-M1-B67	3	2,35	453,1	451	A08-M1-B78	3	2,79	471,2
199	A11-M2-B67	3	2,4	453,1	452	A10-M1-B78	3	2,67	441,1
200	A12-M1-B67	3	2,21	363,1	453	A11-M1-B78	3	2,63	453,2
201	A12-M2-B67	3	2,27	363,1	454	A12-M1-B78	3	2,45	363,2
202	A13-M2-B67	3	2,59	517,1	455	A14-M1-B78	3	2,33	349,2
203	A14-M1-B67	3	2,27	349,1	456	A16-M1-B78	3	2,45	412,2
204	A15-M1-B67	3	2,51	432,1	457	A17-M1-B78	3	2,27	406,2
205	A16-M1-B67	3	2,38	412,1	458	A18-M1-B78	3	2,53	423,2
206	A17-M1-B67	3	2,18	406,1	459	A04-M1-B78	3	2,57	405,2
207	A18-M2-B67	3	2,54	423,1	460	A20-M1-B78	3	2,73	455,2
208	A18-M1-B67	3	2,49	423,1	461	A21-M1-B78	3	2,2	343,1
209	A20-M1-B67	3	2,7	455,1	462	Ů22-M1-B78	3	2,95	523,1
210	A21-M1-B67	3	2,07	343,1	463	Ů23-M1-B78	3	2,69	421,1
211	A22-M1-B67	3	2,93	523,1	464	Ů24-M1-B78	3	2,57	441,1
212	A23-M1-B67	3	2,66	421,1	465	A25-M1-B78	3	2,77	473,2
213	A24-M1-B67	3	2,53	441,1	466	A26-M1-B78	.3	2,32	357,2
214	A25-M1-B67	3	2,74	473,1	467	^5-M1-B79	3	2,76	485,1
215	A26-M1-B67	3	2,22	357,1	468	<\06-M1-B79	3	2,28	339,1
216	A27-M2-B67	3	2,54	431,2	469	\08-M1-B79	3	2,76	473,1
217	A01-M1-B68	3	1,79	273,1	470	M2-M1-B79	3	2,4	365,2
218	A02-M1-B68	3	2,1	325,2	471	M4-M1-B79	3	2,27	351,1
219	A03-M1-B68	3	2,48	393,1	472	M7-M1-B79	3	2,2	408,2
220	A04-M1-B68	3	2,11	343,1	473	\04-M1-B79	3	2,53	407,1
221	A04-M2-B68	3	2,15	343,1	474	\20-M1-B79	3	2,69	457,1.
222	A05-M1-B68	3	2,⁴	421,1	475	\22-M1-B79	3	2,91	525,1
223	A06-M1-B68	3	1,87	275,1	476 ?	\23-M1-B79	3	2,65	423, t
224	A11-M1-B68	3	2,22	391,2	477 i	\24-M1-B79	3	2,53	443,1

• · · · β · · • · «· · * · ·

225	A13-M1-B68	3	2,51	455,2	478	A25-M1-B7S	3	2,73	475,1
226	A14-M1-B68	3	2,04	287,1	479	A26-M1-B7E	3	2,24	359,1
227	A15-M1-B68	3	2,35	370,1	480	AO5-M1-B8C	3	2,75	499
228	A16-M1-B68	3	2,2	350,2	481	A06-M1-B8C	3	2,29	353,1
229	A17-M1-B68	3	1,97	344,2	482	A08-M1-B80	3	2,75	487,1
230	A18-M2-B68	3	2,35	361,1	483	A11-M1-B80	3	2,57	469,1
231	A18-M1-B68	3	2,31	361,1	484	A14-M1-B80	3	227	365,1
232	A20-M1-B68	3	2,53	393,1	485	A17-M1-B80	3	2,2	422,1.
233	A21-M1-B68	3	1,83	281,1	486	A04-M1-B80	3	2,52	421,1
234	A22-M1-B68	3	2,78	461,1	487	A20-M1-B80	3	2,69	471,1
235	A23-M1-B68	3	2,48	359,1	488	A22-M1-B80	3	2,91	539,1
236	A24-M1-B68	3	2,37	379,1	489	A23-M1-B80	3	2,65	437,1
237	A26-M1-B68	3	1,99	295,1	490	A24-M1-B80	3	2,53	457,1
238	A01-M1-B69	3	2,24	335,1	491	A25-M1-B80	3	2,73	489,1
239	A01-M2-B69	3	2,26	335,1	492	A26-M1-B80	3	2,25	373,1
240	A02-M1-B69	3	2,52	387,2	493	A02-M1-B81	3	2,59	417,1
241	A03-M1-B69	3	2,81	455,1	494	A05-M1-B81	3	2,83	513
242	A04-M1-B69	3	2,52	405,2	495	A06-M1-B81	3	2,39	367,1
243	A05-M1-B69	3	2,73	483,1	496	A08-M1-B81	3	2,83	501,1
244	A05-M2-B69	3	2,15	483,1	497	A11-M1-B81	3	2,64	483,1
245	A06-M1-B69	3	2,33	337,2	498	A12-M1-B81	3	2,47	393,1
246	A06-M2-B69	3	2,38	337,2	499	A14-M1-B81	3	2,33	379,1
247	A08-M2-B69	3	2Z1	471,2	500	A04-M1-B81	3	2,61	435,1
248	A09-M1-B69	3	2,53	447,2	501	A20-M1-B81	3	2,77	485,1
249	A09-M2-B69	3	2,54	447,2	502	Λ22-Μ1-Β81	3	2,99	553,1
250	A11-M1-B69	3	2,58	453,2	503	A23-M1-B81	3	2,73	451,1
251	A12-M1-B69	3	2,47	363,2	504	A24-M1-B81	3	2,6	471,1
252	A12-M2-B69	3	2,48	363,2	505	A25-M1-B81	3	2,8	503,1
253	A13-M2-B69	3	2J6	517,2	506	A26-M1-B81	3	2,33	387,1

Příklad 13

-Methyl-A- {5 - [(3 -methylbenzyl)oxy] -1 A-indazol-3 -yl} benzensulfonamid

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(5-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-lA-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-řerc-butylimino-2-diethylamino-l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu (3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla ······ ··· ··· • · · · · · · · · • · · * · · · ···· • · · ·· ······· ···· __ ··· · · · ··· ·· ♦ ·· · ·· · dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná v prvním kroku (500 mg, 0,42 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 630 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

2-(6-hydroxy-17/-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,9;

[M+H]⁺ = 280

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 3 ml 1-methyl-2-pyrrolidinonu, poté se přidalo 43 μΐ 2-terc-butylimino-2-diethylamino-l,3-dimethylperhydro-l,3,2-diazafosforinu (1,5 ekv.) a 65 μΐ 3-methylbenzylbromidu (6 ekv.). Suspenze se míchala 16 hodin. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethan, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

Pryskyřice získaná v třetím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 5 ml směsi dichlormethanu a methanolu 1:1a přidalo se 100 μΐ hydrazin-monohydrátu.

Pryskyřice získaná ve čtvrtém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 2,5 ml dichlormethanu a přidalo se 90 mg «i-toluensulfonylchloridu (6 ekv.), 200 μΐ 2V,V'-diisopropyl(ethyl)aminu (15 ekv.) a katalytické množství 4-dimethylaminopyridinu. Suspenze se míchala přes noc. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsf • · • · · · ·· · • · » ·

methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem. Poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná v pátém kroku se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

-methyl-?/- {5 - [(3 -methylbenzyl)oxy] -1 //-indazol-3-yl} benzensulfonamid;

HPLC (Způsob 2) r.t. = 8,79; [M+H]⁺ = 408,1

Analogickým postupem (viz příklad 13) se připravily následující sloučeniny uvedené v tabulce XIII.

• · · ·♦ φ

Tabulka XIII

Vstuf	Sloučenina	HPLC způsob	r.t. (min,	[M+H]+	Vstůj	Sloučenina	HPLC způsob	r.t. (min	[M+H]+
1	A30-M2-B5E	1	4,29	427,1	167	A21-M1-B4E	3	1,97	315,1
2	A30-M2-B61	2	8,2	450,1	168	A22-M1-B4Ě	3	2,83	495,1
3	A30-M2-B58	1	4,58	449,2	169	A23-M1-B4€	3	2,57	393,1
4	A30-M2-B57	1	4,19	429,1	170	A24-M1-B46	3	2,45	413,1
5	A31-M2-B61	2	7,32	414,1	171	A25-M1-B46	3	2,65	445,1
6	A31-M2-B58	1	4,21	413,2	172	A26-M1-B46	3	2,13	329,1
7	A30-M1-B59	1	4,2	427,1	173	A27-M2-B46	3	2,44	403,2
8	A30-M1-B61	2	7,86	450,1	174	A01-M1-B47	3	2,11	375,0
9	A30-M1-B58	1	4,51	449,2	175	A02-M2-B47	3	2,47	427,1
10	A30-M1-B57	1	4,16	429,1	176	A09-M1-B47	3	2,43	487,1
11	A01-M1-B40	3	2,14	369,1	177	A09-M2-B47	3	2/16	487,1
12	A02-M1-B40	3	2,48	421,1	178	A10-M1-B47	3	2,53	481,0
13	A03-M1-B40	3	2,73	489,1	179	A11-M1-B47	3	2,47	493,1
14	A04-M1-B40	3	2,42	439,1	180	A11-M2-B47	3	2,51	493,1
15	A05-M1-B40	3	2,62	517,0	181	A12-M1-B47	3	2,38	403,1
16	A06-M1-B40	3	2,27	371,1	182	A13-M1-B47	3	2,73	557,1
17	A07-M1-B40	3		457,1	183	A14-M1-B47	3	2,44	389,1
18	A08-M1-B40	3	2,61	505,1	184	A15-M1-B47	3	2,64	472,1
19	A09-M1-B40	3	2,54	481,2	185	A16-M1-B47	3	2,53	452,1
20	A09-M2-B40	3	2,53	481,2	186	A17-M1-B47	3	2,35	446,1
21	A10-M1-B40	3	2,63	475,1	187	A18-M2-B47	3	2,71	463,1
22	A10-M2-B40	3	2,61	475,1	188	A18-M1-B47	3	2,63	463,1
23	A11-M1-B40	3	2,58	487,1	189	A20-M1-B47	3	2,82	495,1
24	A11-M2-B40	3	2.57	487,1	190	A21-M1-B47	3	2,27	383,1
25	A12-M1-B40	3	2,5	397,1	191	A23-M1-B47	3	2,79	461,0
26	A13-M1-B40	3	2,75	551,2	192	A24-M1-B47	3	2,67	481,0
27	A01-M1-B41	3	1,88	333,0	193	A25-M1-B47	3	2,88	513,1
28	A02-M1-B41	3	2,13	385,1	194	A26-M1-B47	3	2,4	397,1
29	A04-M1-B41	3	2,14	403,0	195	A02-M2-B48	3	2,29	409,1
30	A05-M1-B41	3	2,43	481,0	196	A05-M1-B48	3	2,46	505,0
31	A06-M1-B41	3	2	335,0	197	A05-M2-B48	3	2,48	505,0
32	A07-M1-B41	3	2,23	421,0	198	A06-M1-B48	3	2	359,1
33	A08-M1-B41	3	2,35	469,0	199	A08-M1-B48	3	2,48	493,1
34	A09-M1-B41	3	2,29	445,1	200	A10-M1-B48	3	2,34	463,1
35	A10-M1-B41	3	2,37	439,0	201	A11-M1-B48	3	2,3	475,1
36	A10-M2-B41	3	2,35	439,0	202	A11-M2-B48	3	2,33	475,1
37	A11-M1-B41	3	2,33	451,0	203	A12-M1-B48	3	2,18	385,1
38	A12-M2-B41	3	2,18	361,1	204	M3-M2-B48	3	2,51	539,1
39	A14-M1-B41	3	2,13	347,0	205	M3-M1-B48	3	2,55	539,1
40	A15-M1-B41	3	2,37	430,0	206	M4-M1-B48	3	2,21	371,1
41	A16-M1-B41	3	2,25	410,1	207	M5-M1-B48	3	2,45	454,1
42	A17-M1-B41	3	2,03	404,1	208	M6-M1-B48	3	2,32	434,1
43	A18-M1-B41	3	2,35	421,0	209	M7-M1-B48	3	2J2	428,1
44	A21-M1-B41	3	1,91	341,0	210	M8-M2-B48	3	2,5	445,1
45	Ά23-Μ1-Β41	3	2£L.	419,0	211 y	M8-M1-B48	3	2,41	445,1
46	Ά24-Μ1-Β41	3	2,39	439,0	212	A21-M1-B48	3	2,01	365,1
47	A25-M1-B41	3	2,59	471,0	213	\22-M1-B48	3	2,83	545,1

• · · · · ·

48	A26-M1-B41	3	2,07	355,0	214	A23-M1-B4Í	3	2,57	443,1
49	A01-M1-B42	3	2,15	395,1	215	A24-M1-B4Í	3	2,46	463,1
50	A02-M1-B42	3	2,36	447,1	216	A25-M1-B4Í	3	2,67	495,1
51	A03-M1-B42	3	2,69	515,0	217	A26-M1-B46	3	2,17	379,1
52	A04-M1-B42	3	2,35	465,1	218	A27-M2-B48	3	2,47	453,1
53	A05-M1-B42	3	2,55	543,0	219	A09-M1-B49	3	2,58	507,0
54	A06-M1-B42	3	2,19	397,1	220	A02-M1-B50	3	2,5	393,1
55	A07-M1-B42	3	2,49	483,1	221	A05-M1-B50	3	2,73	489,0
56	A08-M1-B42	3	2,6	531,1	222	A06-M1-B50	3	2,27	343,1
57	A09-M1-B42	3	2,49	507,1	223	A08-M1-B50	3	2,74	477,1
58	A10-M1-B42	3	2,57	501,1	224	A10-M1-B50	3	2,6	447,1
59	A11-M1-B42	3	2,51	513,1	225	A11-M1-B50	3	2,55	459,1
60	A11-M2-B42	3	2,51	513,1	226	A12-M1-B50	3	2,4	369,1
61	A12-M1-B42	3	2,43	423,1	227	A14-M1-B50	3	2,25	355,1
62	A12-M2-B42	3	2,41	423,1	228	A15-M1-B50	3	2,5	438,1
63	A01-M1-B43	3	2,16	369,1	229	A16-M1-B50	3	2,38	418,1
64	A02-M1-B43	3	2,45	421,1	230	A18-M1-B50	3	2,47	429,1
65	A03-M1-B43	3	2,75	489,1	231	A04-M1-B50	3	2,49	411,1
66	A04-M1-B43	3	2,44	439,1	232	A20-M1-B50	3	2,67	461,1
67	A05-M1-B43	3	2,68	517,0	233	A21-M1-B50	3	2,11	349,1
68	A06-M1-B43	3	2,34	371,1	234	A22-M1-B50	3	2,88	529,1
69	A07-M1-B43	3	2,51	457,1	235	A23-M1-B50	3	2,62	427,1
70	A08-M1-B43	3	2,62	505,1	236	A24-M1-B50	3	2,51	447,1
71	A09-M1-B43	3	2,56	481,2	237	A25-M1-B50	3	2,71	479,1
72	A09-M2-B43	3	2,55	481,2	238	A26-M1-B50	3	2,21	363,1
73	A10-M1-B43	3	2,64	475,1	239	A02-M1-B51	3	2,42	398,1
74	A10-M2-B43	3	2,63	475,1	240	A05-M1-S51	3	2,67	494,0
75	A11-M1-B43	3	2,59	487,1	241	A06-M1-B51	3	2,18	348,1
76	A11-M2-B43	3	2,58	487,1	242	A08-M1-B51	3	2,68	482,1
77	A14-M1-B43	3	2,51	383,1	243	A10-M1-B51	3	2,53	452,1
78	A15-M1-B43	3	2,7	466,1	244	A11-M1-B51	3	2,49	464,1
79	A16-M1-B43	3	2,59	446,1	245	A12-M1-B51	3	2,32	374,1
80	A17-M1-B43	3	2,42	440,2	246	A14-M1-B51	3	2,17	360,1
81	A18-M2-B43	3	2,76	457,1	247	A15-M1-B51	3	2,42	443,1
82	A18-M1-B43	3	2,68	457,1	248	A16-M1-B51	3	2,3	423,1
83	A20-M1-B43	3	2,87	489,1	249	A17-M1-B51	3	2,11	417,1
84	A21-M1-B43	3	2,35	377,1	250	A18-M1-B51	3	2,4	434,1
85	A23-M1-B43	3	2,83	455,1	251	A04-M1-B51	3	2,43	416,1
86	A24-M1-B43	3	2,72	475,1	252	A20-M1-B51	3	2,6	466,1
87	A25-M1-B43	3	2,9	507,1	253	A21-M1-B51	-3	2,01	354,1
88	A26-M1-B43	3	2,47	391,1	254	Ř22-M1-B51	3	2,82	534,1
89	A27-M2-B43	3	2,73	465,2	255	Ů23-M1-B51	3	2,55	432,1
90	A01-M1-B44	3	2,19	411,1	256	<\24-M1-B51	3	2,43	452,1
91	A03-M1-B44	3	2,65	531,0	257	^25-M1-B51	3	2,64	484,1
92	A04-M1-B44	3	2,39	481,1	258	λ26-Μ1-Β51	3	2,13	368,1
93	Ř05-M1-B44	3	2,57	559,0	259	\02-M1-B52	3	2,77	441,1
94	Ř06-M1-B44	3	2,24	413,1	260	<\05-M1-B52	3	3,01	537,0
95	W-M1-B44	3	2,52	499,1	261	\06-M1-B52	3	2,59	391,1 ·
96	<\09-M1-B44	3	2,53	523,1	262	\08-M1-B52	3	2,99	525,1
97	M0-M1-B44	3	2,57	517,1	263	M0-M1-B52	3	2,86	495,1 .
98	M1-M1-B44	3	2,55 \| 529,1	264	M1-M1-B52	3	2,79	507,1

• ♦ · · · · • · • * • · »

99	A11-M2-B44	3	2,53	529,1	265	Α12-Μ1-Β52	3	2,69	417,1
100	A12-M1-B44	3	2,47	439,1	266	Α14-Μ1-Β52	3	2,56	403,1
101	A12-M2-B44	3	2,45	439,1	267	Α16-Μ1-Β52	3	2,65	466,1
102	A14-M1-B44	3	2,47	425,1	268	Α17-Μ1-Β52	3	2,47	460,1
103	A15-M1-B44	3	2,65	508,1	269	Α04-Μ1-Β52	3	2,77	459,1
104	A16-M1-B44	3	2,55	488,1	270	Α20-Μ1-Β52	3	2,93	509,1
105	A17-M1-B44	3	2,39	482,1	271	Α21-Μ1-Β52	3	2,4	397,1
106	A18-M2-B44	3	2,71	499,1	272	Α22-Μ1-Β52	3	3,13	577,1
107	A18-M1-B44	3	2,63	499,1	273	Α23-Μ1-Β52	3	2,89	475,1
108	A20-M1-B44	3	2,81	531,1	274	Α24-Μ1-Β52	3	2,77	495,1
109	A21-M1-B44	3	2,31	419,1	275	Α25-Μ1-Β52	3	2,97	527,1
110	A23-M1-B44	3	2,78	497,0	276	Α26-Μ1-Β52	3	2,52	411,1
111	A24-M1-B44	3	2,67	517,1	277	Α02-Μ1-Β53	3	2,9	403,2
112	A25-M1-B44	3	2,85	549,1	278	Α05-Μ1-Β53	3	3,15	499,1
113	A26-M1-B44	3	2,43	433,4	279	Α06-Μ1-Β53	3	2,69	353,2
114	A27-M2-B44	3	2,69	507,1	280	Α08-Μ1-Β53	3	3,11	487,2
115	A02-M1-B45	3	2,3	415,1	281	Α10-Μ1-Β53	3	2,99	457,2
116	A03-M1-B45	3	2,59	483,0	282	Α11-Μ1-Β53	3	2,93	469,2
117	A05-M1-B45	3	2,49	511,0	283	Α12-Μ1-Β53	3	2,81	379,2
118	A06-M1-B45	3	2,04	365,1	284	Α14-Μ1-Β53	3	2,66	365,2
119	A07-M1-B45	3	2,37	451,1	285	Α16-Μ1-Β53	3	2,75	428,2
120	A09-M1-B45	3	2,37	475,1	286	Α17-Μ1-Β53	3	2,58	422,2
121	A10-M1-B45	3	2,45	469,1	287	Α18-Μ1-Β53	3	2,87	439,2
122	A10-M2-B45	3	2,43	469,1	288	Α04-Μ1-Β53	3	2,91	421,2
123	A11-M1-B45	3	2,4	481,1	289	Α20-Μ1-Β53	3	3,07	Γ471,2
124	A11-M2-B45	3	2,39	481,1	290	Α21-Μ1-Β53	3	2,49	359,2
125	A12-M2-B45	3	2,28	391,1	291	Α22-Μ1-Β53	3	3,27	539,2
126	A13-M2-B45	3	2,56	545,1	292	Α23-Μ1-Β53	3	3,05	437,2
127	A13-M1-B45	3	2,57	545,1	293	Α24-Μ1-Β53	3	2,9	457,2
128	A14-M1-B45	3	2,25	377,1	294	Α25-Μ1-Β53	3	3,09	489,2
129	A15-M1-B45	3	2,47	460,1	295	Α26-Μ1-Β53	3	2,62	373,2
130	A16-M1-B45	3	2,35	440,1	296	Α02-Μ1-Β54	3	2,33	439,1
131	A17-M1-B45	3	2,15	434,1	297	Α06-Μ1-Β54	3	2,09	389,1
132	A18-M2-B45	3	2,52	451,1	298	Α08-Μ1-Β54	3	2,61	523,1
133	A18-M1-B45	3	2,45	451,1	299	Α10-Μ1-Β54	3	2,45	493,1
134	A20-M1-B45	3	2,64	483,1	300	Α11-Μ1-Β54	3	2,41	505,1
135	A21-M1-B45	3	2,05	371,1	301	Α12-Μ1-Β54	3	2,24	415,1
136	A23-M1-B45	3	2,6	449,0	302	Α14-Μ1-Β54	3	2,09	401,1
137	A24-M1-B45	3	2,49	469,1	303	Α17-Μ1-Β54	3	2,05	458,1
138	A25-M1-B45	3	2,68	501,1	304	Α18-Μ1-Β54	.3	2,32	475,1
139	A26-M1-B45	3	2,21	385,1	305	Α04-Μ1-Β54	3	2,33	457,1
140	A27-M2-B45	3	2,49	459,1	306	Α20-Μ1-Β54	3	2,51	507,1
141	A01-M1-B46	3	1,87	307,1	307	Α22-Μ1-Β54	3	2,74	575,1
142	A02-M1-B46	3	2,25	359,1	308	Α23-Μ1-Β54	3	2,45	473,1
143	A02-M2-B46	3	2,26	359,1	309	Α24-Μ1-Β54	3	2,36	493,1
144	A03-M1-B46	3	2,49	427,1	310	Α25-Μ1-Β54	3	2,56	525,1
145	A03-M2-B46	3	2,52	427,1	311	Α26-Μ1-Β54	3	2,04	409,1
146	A04-M1-B46	3	2,2	377,1	312	Α02-Μ1-Β55	3	2,59	429,1
147	A05-M1-B46	3	2,41	455,0	313	Α06-Μ1-Β55	3	2,39	379,1
148	A05-M2-B46	3	2,46	455,0	314	Α08-Μ1-Β55	3	2,83	513,1
149	A06-M1-B46	3	1,99	309,1	315	Α10-Μ1-Β55	3	2,69	483,1 ~

«····· ··· ··· • · · · · · · « « • · · ♦ · · · ···· • · · · · · ···· * · · ··· • · · «·· · · » • · » «· · «· c.

150	A07-M14346	3	2,28	395,1	316	A11-M1-B55	3	2,64	495,1
151	A08-M1-B46	3	2,41	443,1	317	A12-M1-B55	3	2,51	405,1
152	A08-M2-B46	3	2,46	443,1	318	A14-M1-B55	3	2,39	391,1
153	A09-M1-B46	3	2,25	419,2	319	A04-M1-B55	3	2,59	447,1
154	A09-M2-B46	3	2,26	419,2	320	A20-M1-B55	3	2,75	497,1
155	A10-M1-B46	3	2,34	413,1	321	A21-M1-B55	3	2,23	385,1
156	A11-M1-B46	3	2,3	425,1	322	A22-M1-B55	3	2,96	565,1
157	A11-M2-B46	3	2,32	425,1	323	A23-M1-B55	3	2,71	463,1
158	A12-M1-B46	3	2,17	335,1	324	A24-M1-B55	3	2,6	483,1
159	A13-M2-B46	3	2,49	489,1	325	A25-M1-B55	3	2,79	515,1
160	A13-M1-B46	3	2,55	489,1	326	A26-M1-B55	3	2,35	399,1
161	A14-M1-B46	3	2,17	321,1	327	A20-M1-B56	3	2,61	498,1
162	A15-M1-B46	3	2,42	404,1	328	A23-M1-B56	3	2,57	464,1
163	A16-M1-B46	3	2,3	384,1	329	A24-M1-B56	3	2,46	484,1
164	A17-M1-B46	3	2,09	378,1	330	A25-M1-B56	3	2,66	516,1
165	A18-M2-B46	3	2,47	395,1	331	A26-M1-B56	3	2,15	400,1
166	A18-M1-B46	3	2,4	395,1

Příklad 14

4-Isopropyl-.V-{6-[(3-methylbenzyl)oxy]-l//-indazol-3-yl}benzensulfonamid

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(6-{[fórc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-/erc-butylimino-2-diethylamino-1,3 -dimethylperhydro-1,3,2-diazafosforinu (1,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

mg pryskyřice se suspendovalo v 1 ml dichlormethanu a přidalo se 150 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získalo se 13,8 mg titulní sloučeniny. Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,64; (M+H]⁺ = 394 φ » · • · ·

Pryskyřice získaná v prvním kroku (500 mg, 0,42 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 630 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem a poté se sušila ve vakuu.

2-[6-hydroxy-17/-indazol-3-yl]-isoindol-l,3-dion; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,9; [M+H]⁺ = 280

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 1,5 ml bezvodého tetrahydrofuranu. V baňce s kulatým dnem se ve 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu rozpustilo 209 mg trifenylfosfinu (0,8 mmol, 10 ekv.), poté se při 0 °C pomalu přidalo 157 μΐ diisopropylazo-dikarboxylátu (0,8 mmol, 10 ekv.) a 145 μΐ 3-methylbenzylalkoholu (1,2 mmol, 15 ekv.). Roztok se třepal 2 hodiny, poté se převedl do suspenze pryskyřice.

Suspenze se míchala přes noc a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem. Tento postup se dvakrát opakoval.

Pryskyřice získaná v třetím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 5 ml směsi dichlormethanu a methanolu 1:1a přidalo se 100 μΐ hydrazin-monohydrátu. Suspenze se zahřála na 45 °C. Zahřívání a míchání pokračovalo přes noc a poté se směs ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem a opět methanolem, poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná ve čtvrtém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 2,5 ml dichlormethanu a přidalo se 111 mg 4-fórc-butylbenzensulfonylchloridu (6 ekv.), 200 μΐ (V,(V-diisopropyl(ethyl)aminu (15 ekv.) a katalytické množství 4-dimethylaminopyridinu. Suspenze se míchala přes noc. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem. Poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná v pátém kroku se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc, poté se pryskyřice • · · · · · «· · zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

4-isopropy 1-/V- {6- [(3 -methylbenzyl)oxy] -1 //-indazol-3-yl} benzensulfonamid; HPLC (Způsob 3) r.t. = 2,69; [M+H]⁺ = 436,2

Analogickým postupem (viz příklad 14) se připravily následující sloučeniny uvedené v tabulce XIV.

Tabulka XIV

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+H]⁺	Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+Hf
1	A50-M2-B41	3	2,45	364,1	43	A56-M2-B46	3	2,5	338,1
2	A51-M1-B41	3	2,36	416,1	44	A57-M2-B46	3	2,69	352,2
3	A52-M1-B41	3	1,84	310	45	A58-M2-B46	3	2,71	364,2
4	A53-M1-B41	3	2,19	370,1	46	A59-M2-B46	3	2,48	380,1
5	A57-M2-B41	3	2,65	378,1	47	A60-M2-B46	O	2,97	382,2
6	A60-M2-B41	3	2,93	408,1	48	A61-M2-B46	3	1,36	381,2
7	A50-M2-B43	3	2,82	400,2	49	A62-M2-B46	3	2,51	326,1
8	A50-M1-B43	3	2,76	400,2	50	A30-M1-B47	o	2,64	442,1
9	A51-M1-B43	3	2,69	452,2	51	A30-M2-B47	3	2,67	442,1
10	A52-M1-B43	3	2,32	346,1	52	A50-M1-B47	3	2,71	406,1
11	A53-M1-B43	3	2,55	406,2	53	A50-M2-B47	3	2,76	406,1
12	A55-M2-B43	3	1,69	417,2	54	A51-M1-B47	3	2,64	458,1
13	A56-M2-B43	3	2,83	400,2	55	A52-M1-B47	3	2,25	352
14	A57-M2-B43	3	3	414,2	56	A53-M1-B47	3	2,49	412,1
15	A58-M2-B43	3	3,01	426,2	57	A55-M2-B47	3	1,63	423,1
16	A59-M2-B43	3	2,77	442,1	58	A56-M2-B47	3	2,77	406,1
17	A60-M2-B43	3	2,95	444,2	59	A57-M2-B47	o	2,94	420,1
18	A61-M2-B43	3	1,71	443,2	60	A58-M2-B47	3	2,95	432,1
19	A50-M1-B44	3	2,71	442,1	61	A59-M2-B47	3	2,72	448
20	A50-M2-B44	3	2,76	442,1	62	A60-M2-B47	3	3,ig	450,2

« · « ·

21	A51-M1-B44	3	2,65	494,1	63	A61-M2-B47	3	1,65	449,1
22	A52-M1-B44	3	2,29	388,1	64	A62-M2-B47	3	2,77	394,1
23	A53-M1-B44	3	2,51	448,1	65	A50-M2-B48	3	2,53	388,1
24	A55-M2-B44	3	1,67	459,1	66	A51-M1-B48	3	2,43	440,1
25	A56-M2-B44	3	2,76	442,1	67	A52-M1-B48	3	1,96	334,1
26	A59-M2-B44	3	2,73	484,1	68	A53-M1-B48	3	2,27	394,1
27	A60-M2-B44	3	3,17	486,2	69	A55-M2-B48	3	1,41	405,2
28	A50-M2-B45	3	2,55	394,1	70	A56-M2-B48	3	2,54	388,1
29	A51-M1-B45	3	2,45	446,1	71	A60-M2-B48	3	2,99	432,2
30	A52-M1-B45	3	2	340	72	A51-M1-B50	3	2,49	424,1
31	A53-M1-B45	3	2,31	400,1	73	A53-M1-B50	3	2,31	378,1
32	A55-M2-B45	3	1,42	411,1	74	A51-M1-B51	3	2,41	429,1
33	A56-M2-B45	3	2,56	394,1	75	A52-M1-B51	3	1,97	323,1
34	A59-M2-B45	3	2,53	436,1	76	A53-M1-B51	3	2,23	383,1
35	A60-M2-B45	3	3	438,2	77	A52-M1-B52	3	2,4	366,1
36	A62-M2-B45	3	2,57	382,1	78	A53-M1-B52	3	2,61	426,1
37	A50-M1-B46	3	2,44	338,1	79	A51-M1-B53	3	2,87	434,2
38	A50-M2-B46	3	2,49	338,1	80	A52-M1-B53	o	2,48	328,2
39	A51-M1-B46	3	2,41	390,1	81	A53-M1-B53	3	2,71	388,2
40	A52-M1-B46	3	1,9	284,1	82	A53-M1-B54	3	2,15	424,1
41	A53-M1-B46	3	2,25	344,1	83	A53-M1-B55	3	2,43	414,1
42	A55-M2-B46	3	1,33	355,2

Příklad 15

3-Fenyl-A-[5-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)-l//-indazol-3-yl]propanamid

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(6-{[tercbutyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 pl 2-/erc-butylimino-2-diethylamino-l ,3-dimethylperhydro-l ,3,2-diazafbsforinu (2,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla • · • · ·»»·

9 9

9 9 9

·· ·

9 9

9 9 9

9999 • 9 dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

mg pryskyřice se suspendovalo v 1 ml dichlormethanu a přidalo se 150 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získalo se 13,8 mg titulní sloučeniny. Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,64; [M+H]⁺ = 394

Pryskyřice získaná v prvním kroku (500 mg, 0,425 mmol) se suspendovala v 5 ml směsi dichlormethanu a methanolu 1:1a přidalo se 500 μΐ hydrazin-monohydrátu. Suspenze se zahřála na 45 °C. Zahřívání a míchání pokračovalo přes noc a poté se směs ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla směsí methanolu a vody 1:1, methanolem, dimethylformamidem a opět methanolem, poté se sušila ve vakuu.

6-{[/erc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-177-indazol-3-amin; HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,99; [M+H]⁺ = 264; [M-H]' = 262

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 2,5 ml dichlormethanu; přidal se V,7V-diisopropyl(ethyl)amin (131 μΐ, 10 ekv.) a 3-fenylpropanoylchlorid (35 μΐ, 0,24 mmol, 3 ekv.). Míchání při pokojové teplotě pokračovalo 20 hodin, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem a poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná v třetím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylamonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc, poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem a poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná ve čtvrtém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 1 ml bezvodého tetrahydrofuranu. V baňce s kulatým dnem se ve 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu rozpustilo 209 mg trifenylfosfmu (0,8mmol, 10 ekv.), poté se při 0 °C pomalu přidalo 157 μΐ diisopropylazo-dikarboxylátu (0,8 mmol, 10 ekv.) a 147 μΐ • · · * l-(2-hydroxyethyl)pyrrolidinu (1,2 mmol, 15 ekv.). Roztok se třepal 2 hodiny, poté se převedl do suspenze pryskyřice.

3-fenyl-V-[5-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)-17/-indazol-3-yl]propanamid; HPLC (Způsob 1) r.t. = 2,99; [M+H]⁺ = 379,2

Postupem podobným příkladu 15 se na pryskyřici ukotvily 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} -17/-indazol-3-yl)-1 //-isoindol-1,3(277)-dion a 2-(5-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion, poté se popsaným syntetickým schématem syntetizovaly následující produkty:

2-(4-tcrc-butylfenoxy)-V-[5-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)-17/-indazol-3-yl]acetamid; HPLC (Způsob 2) r.t. = 6,65; [M+H]⁺ = 437,2

2-(4-methoxyfenyl)-V-[5-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)-17/-indazol-3-yl]acetamid; HPLC (Způsob 2) r.t. = 4,56; [M+H]⁺ = 395,2

Stejným postupem jako v příkladu 15 se paralelně syntetizovalo 195 produktů uvedených v tabulce XV.

• · * > · · • 9 9 99 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 • · * 9 9 9 9 9 9 9 9

999 999 9999 99 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

Tabulka XV

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+H]⁺	Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+H]⁺
1	A65-M1-B36	2	9,55	458,2	99	A57-M2-B08	3	2,8	380,2
2	A52-M1-B36	1	4,52	296,1	100	A59-M2-B08	3	2,62	408,1
3	A65-M1-B31	2	8,97	394,2	101	A60-M2-B08	3	3,1	410,2
4	A64-M1-B31	1	1,6	315,2	102	A61-M2-B08	3	1,57	409,2
5	A66-M9-B31	1	6,06	302,2	103	A50-M2-B09	3	2,96	378,2
6	A67-M1-B31	1	3,86	343,1	104	A51-M1-B09	3	2,81	430,2
7	A68-M1-B31	2	6,63	270,1	105	A52-M1-B09	3	2,43	324,2
8	A69-M1-B31	1	1,9	329,2	106	A53-M1-B09	o	2,66	384,2
9	A65-M1-B15	2	10,3	516,3	107	A55-M2-B09	3	1,83	395,2
10	A66-M1-B15	2	10,4	424,3	108	A59-M2-B09	3	2,95	420,2
11	A67-M1-B15	1	6,27	465,2	109	A60-M2-B09	3	3,4	422,3
12	A68-M1-B15	2	9,15	392,2	110	A61-M2-B09	3	1,87	421,3
13	A70-M1-B15	2	9,21	424,2	11	A50-M2-B10	3	2,41	382,2
14	A71-M1-B15	2	8,95	517,2	112	A51-M1-B10	3	2,31	434,2
15	A65-M1-B35	2	9,32	474,2	113	A52-M1-B10	3	1,81	328,1
16	A67-M2-B15	2	9,65	465,2	114	A53-M1-B1O	3	2,13	388,2
17	A68-M2-B15	2	9,27	392,2	115	A55-M2-B10	3	1,37	399,2
18	A52-M2-B35	2	7,17	312,1	116	A56-M2-B10	3	2,45	382,2
19	A50-M2-B01	3	2,51	322,1	117	A59-M2-B10	o	2,45	424,1
20	A50-M1-B01	3	2,44	322,1	118	A60-M2-B10	3	2,95	426,2
21	A51-M1-B01	3	2,38	374,1	119	A61-M2-B10	3	1,43	425,2
22	A52-M1-B01	3	1,85	268,1	120	A50-M2-B11	3	2,54	340,1
23	A53-M1-B01	3	2,19	328,1	121	A51-M1-B11	3	2,41	392,1

·· ·*«·

• · • · · • ···· • « • · · • · · · · • *

24	A55-M2-B01	3	1,38	339,2	122	A52-M1-B11	3	1,9	286,1
25	A56-M2-B01	3	2,51	322,1	123	A53-M1-B11	3	2,23	346,1
26	A57-M2-B01	3	2,7	336,2	124	A55-M2-B11	3	1,39	357,2
27	A60-M2-B01	3	3,02	366,2	125	A56-M2-B11	3	2,56	340,1
28	A61-M2-B01	3	1,44	365,2	126	A57-M2-B11	3	2,76	354,2
29	A50-M2-B02	3	2,51	366,1	127	A59-M2-B11	3	2,56	382,1
30	A50-M1-B02	3	2,44	366,1	128	A60-M2-B11	3	3,07	384,2
31	A51-M1-B02	3	2,38	418,1	129	A61-M2-B11	3	1,46	383,2
32	A52-M1-B02	3	1,88	312,1	130	A50-M2-B12	3	2,81	406,1
33	A53-M1-B02	3	2,21	372,1	131	A51-M1-B12	3	2,68	458,1
34	A55-M2-B02	3	1,41	383,2	132	A52-M1-B12	3	2,28	352,1
35	A56-M2-B02	3	2,51	366,1	133	A53-M1-B12	3	2,53	412,1
36	A57-M2-B02	3	2,7	380,2	134	A55-M2-B12	3	1,73	423,2
37	A59-M2-B02	3	2,51	408,1	135	A56-M2-B12	3	2,83	406,1
38	A60-M2-B02	3	3,01	410,2	136	A57-M2-B12	3	3	420,1
39	A61-M2-B02	3	1,46	409,2	137	A58-M2-B12	3	3,01	432,1
40	A62-M2-B02	3	2,51	354,1	138	A59-M2-B12	3	^81	448,1
41	A50-M2-B03	3	2,71	372,2	139	A60-M2-B12	3	3,27	450,2
42	A50-M1-B03	3	2,65	372,2	140	A61-M2-B12	3	1,77	449,2
43	A51-M1-B03	3	2,56	424,2	141	A50-M2-B13	3	2,05	371,2
44	A52-M1-B03	3	2,13	318,1	142	A55-M2-B13	3	1,09	388,2
45	A53-M1-B03	3	2,39	378,2	143	A56-M2-B13	3	2,09	371,2
46	A55-M2-B03	3	1,58	389,2	144	A59-M2-B13	3	2,1	413,2
47	A57-M2-B03	3	2,89	386,2	145	A50-M2-B14	3	2,63	366,2
48	A58-M2-B03	3	2,89	398,2	146	A51-M1-B14	3	2,51	418,2
49	A61-M2-B03	3	1,63	415,2	147	A52-M1-B14	3	2,04	312,1
50	A50-M2-B04	3	2,33	312,1	148	A53-M1-B14	3	2,37	372,2
51	A51-M1-B04	3	2,23	364,1	149	A55-M2-B14	3	1,51	383,2
52	A52-M1-B04	3	1,62	258,1	150	A56-M2-B14	3	2,63	366,2
53	A53-M1-B04	3	2,03	318,1	151	A57-M2-B14	3	2,81	380,2
54	A55-M2-B04	3	1,21	329,2	152	A59-M2-B14	3	2,6	408,1
55	A56-M2-B04	3	2,33	312,1	153	A60-M2-B14	3	3,08	410,2
56	A57-M2-B04	3	2,53	326,1	154	A62-M2-B14	3	2,65	354,2
57	A59-M2-B04	3	2,35	354,1	155	A51-M1-B16	3	2,07	342,1
58	A60-M2-B04	3	2,87	356,2	156	A52-M1-B16	3	1,38	236,1
59	A61-M2-B04	3	V⁷	355,2	157	A53-M1-B16	3	1,82	296,1
60	A62-M2-B04	3	2,33	300,1	158	A51-M1-B17	3	2,18	431,2
61	A50-M2-B05	3	2,57	365,2	159	A52-M1-B17	3	1,65	325,1
62	A51-M1-B05	3	2,43	417,2	160	A53-M1-B17	3	2,05	385,2
63	A52-M1-B05	3	1,92	311,1	161	A51-M1-B18	- 3	2,6	452,1
64	A53-M1-B05	3	2,26	371,2	162	A52-M1-B18	3	2,15	346
65	A55-M2-B05	3	1,46	382,2	163	A53-M1-B18	3	2,43	406
66	A56-M2-B05	3	2,57	365,2	164	A51-M1-B19	3	2,42	392,1
67	A57-M2-B05	3	2,76	379,2	165	A52-M1-B19	3	1,92	286,1
68	A59-M2-B05	3	2,57	407,1	166	A53-M1-B19	3	2,25	346,1
69	A60-M2-B05	3	3,08	409,3	167	\51-M1-B20	3	2,81	446,2
70	A61-M2-B05	3	1,51	408,2	168	A52-M1-B20	3	2,43	340,2
71	A50-M1-B06	3	2,75	390,1	169	\δ3-Μ1-Β20	3	2,65	400,2
72	A50-M2-B06	3	2,78	390,1	170	451-M1-B21	3	2,63	426,1
73	A51-M1-B06	3	2,64	442,1	171	V52-M1-B21	3	2,18	320,1
74	A52-M1-B06	3	2,24	336,1	172	<\53-M1-B21	3	2,45	380,1

• ·

9

9 9

9

9 9

9 9 • · ····

9

9 • · • 999

75	A53-M1-B06	3	2,48	396,1	173	A51-M1-B22	3	2,61	468,2
76	A55-M2-B06	3	1,69	407,2	174	A52-M1-B22	3	2,2	362,1
77	A56-M2-B06	3	2,81	390,1	175	A53-M1-B22	3	2,45	422,2
78	A57-M2-B06	3	2,97	404,2	176	A51-M1-B23	3	2,53	414,1
79	A58-M2-B06	3	2,97	416,2	177	A52-M1-B23	3	2,03	308
80	A59-M2-B06	3	2,78	432,1	178	A53-M1-B23	3	2,35	368,1
81	A61-M2-B06	3	1,73	433,2	179	A51-M1-B24	3	2,25	393,1
82	A50-M2-B07	3	2,98	390,1	180	A52-M1-B24	3	1,67	287,1
83	A51-M1-B07	3	2,8	442,1	181	A53-M1-B24	3	2,05	347,1
84	A52-M1-B07	3	2,39	336	182	A51-M1-B25	3	2,61	402,2
85	A53-M1-B07	3	2,63	396,1	183	A52-M1-B25	3	2,17	296,1
86	A55-M2-B07	3	1,77	407,1	184	A53-M1-B25	3	2,44	356,2
87	A56-M2-B07	3	2,99	390,1	185	A51-M1-B26	3	3,62	396,2
88	A57-M2-B07	3	3,17	404,1	186	A52-M1-B26	3	3,43	290,2
89	A59-M2-B07	3	2,95	432	187	A53-M1-B26	3	3,51	350,2
90	A60-M2-B07	3	3,45	434,1	188	A57-M2-B26	3	2,98	358,2
91	A61-M2-B07	3	1,81	433,1	189	A60-M2-B26	3	3,25	388,3
92	A30-M1-B08	3	2,53	402,2	190	A51-M1-B27	3	2,49	434,2
93	A50-M2-B08	3	2£	366,2	191	A52-M1-B27	3	2,03	328,1
94	A51-M1-B08	3	2,5	418,2	192	A53-M1-B27	3	2,32	388,2
95	A52-M1-B08	3	2,04	312,1	193	A51-M1-B28	3	2,63	571,2
96	A53-M1-B08	3	2,33	372,2	194	A52-M1-B28	3	2,28	465,2
97	A55-M2-B08	3	1,52	383,2	195	A53-M1-B28	3	2,49	525,2
98	A56-M2-B08	3	2,61	366,2

Příklad 16

V-(5-{[5-(benzyloxy)pentyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)-V'- isopropylmočovina

500 mg trityl-pryskyřice (Novabiochem, deklarovaná substituce 1,27 mmol/g, 0,64 mmol) se suspendovalo v dichlormethanu a přidalo se 374 mg 2-(5-{[fórcbutyl(dimethyl)silyl]oxy}-ltf-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dionu (0,9 mmol) a 367 μΐ 2-tórc-butylimino-2-diethylamino-l ,3-dimethylperhydro-l ,3,2-diazafosforinu (1,3 mmol). Suspenze se míchala 16 hodin a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a opět dichlormethanem. Pryskyřice se poté sušila ve vakuu.

·· ···· • · · · • · · · • · · * 9

9 9 9 9 9

999 99 9 • · • · · • ···· ·

9

9 9 » 9 9 9

9 9999

9 9 mg pryskyřice se suspendovalo v 1 ml dichlormethanu a přidalo se 150 μΐ trifluoroctové kyseliny. Po 2 hodinách se pryskyřice vypustila a promyla dvakrát 1 ml dichlormethanu; spojené roztoky se sušily a získalo se 13,8 mg titulní sloučeniny. Vypočtená substituce 0,85 mmol/g; HPLC (Způsob 1) r.t. = 7,64; [M+H]⁺ = 394

6-{[z<?rč'-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-lA-indazol-3-amin; HPLC (Způsob 1) r.t. = 5,99; [M+H]⁺ = 264; [M-H]' = 262

Vzorek pryskyřice získané v druhém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendoval v 2 ml dimethylformamidu a přidal se isopropyl-isokyanat (39 μΐ, 0,4 mmol, 5 ekv.). Suspenze se zahřála na 50 °C. Míchání a zahřívání pokračovalo 60 hodin, poté se suspenze ochladila na pokojovou teplotu. Pryskyřice se zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem, poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná v třetím kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 3 ml bezvodého tetrahydrofuranu a přidalo se 120 μΐ 1M roztoku tetrabutylammonium-fluoridu v tetrahydrofuranu (1,5 ekv.). Suspenze se míchala přes noc a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem a poté se sušila ve vakuu.

Pryskyřice získaná ve čtvrtém kroku (100 mg, 0,08 mmol) se suspendovala v 1 ml bezvodého tetrahydrofuranu. V baňce s kulatým dnem se v 2 ml bezvodého tetrahydrofuranu rozpustilo 209 mg trifenylfosfinu (0,8mmol, 10 ekv.), poté se při 0 °C pomalu přidalo 157 μΐ diisopropylazo-dikarboxylátu (0,8 mmol, 10 ekv.) a 230 μΐ 5-benzyloxy-l-pentanolu (1,2 mmol, 15 ekv.). Roztok se třepal 2 hodiny, poté se převedl do suspenze pryskyřice.

·· • · · · · · · · · • · 9 ··«· ····

9 9 9 9 9 9999 9 9 · ···· ········»

AT 99 9 99 9 99 9

Suspenze se míchala přes noc a poté se pryskyřice zfiltrovala a promyla dichlormethanem, methanolem, dimethylformamidem, methanolem a dichlormethanem.

Tento postup se dvakrát opakoval.

N-(5 - {[5 -(benzyloxy)pentyl] oxy} -1 //-indazol-3 -yl)-V'-isopropylmočo vina HPLC (Způsob 1) r.t. = 6,75; [M+H]⁺ - 411,2

Postupem podobným příkladu 16 se na pryskyřici ukotvily 2-(6-{[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy} -1 //-indazol-3-yl)-1//-isoindol-1,3 (2//)-dion a 2-(5- {[terc-butyl(dimethyl)silyl]oxy}-l//-indazol-3-yl)isoindol-l,3-dion, poté se popsaným syntetickým schématem syntetizovaly následující produkty.

7V-[5-(but-3-ynyloxy)-l//-indazol-3-yl]-V'-isopropylmočovina; HPLC (Způsob 1) r.t. = 4,77; [M+H]⁺ - 287,1 (V-benzyl-V'-[5-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)-l//-indazol-3-yl]močovina; HPLC (Způsob 1) r.t. = 3,28; [M+H]⁺ = 380, 2

V-isopropyl-V'- {5 - [2-(4-methyl-1,3 -thiazol-5 -yl)ethoxy] -1 //-indazol-3 -yl} močovina; HPLC (Způsob 2) r.t. = 8,02; [M+H]⁺ = 360,1

Stejným postupem jako v příkladu 16 se paralelně syntetizovalo 95 produktů uvedených v tabulce XVI.

Tabulka XVI

Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+Hf	Vstup	Sloučenina	HPLC způsob	r.t (min)	[M+Hf
1	A65-M1-B83	1	7,3	459,2	49	59-M2-B70	3	2,75	445,1
2	A66-M1-B83	1	7,41	367,2	50	A60-M2-B70	3	3,2	447,2
3	A67-M1-B83	2	8,53	408,1	51	A62-M2-B70	3	2,77	391,2
4	A64-M1-B68	1	2,42	332,2	52	A50-M2-B71	3	2,57	369,2
5	A66-M1-B68	1	6,78	319,2	53	A51-M1-B71	3	2,5	421,2
6	A68-M1-B68	1	4,77	287,1	54	A52-M1-B71	3	2,08	315,1
7	A50-M2-B62	3	2,67	367,2	55	A53-M1-B71	3	2,36~	375,2

·· ····

9 ·· · • 9 9 9 9 9 9 9 9 • · · 9 9 9 9 9 9 9 9

999 999 9999 99 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9 99 9

8	A50-M1-B62	3	2,61	367,2	56	A54-M2-B71	3	2,59	433,2
9	A51-M1-B62	3	2,55	419,2	57	A55-M2-B71	3	1,94	386,2
10	A52-M1-B62	3	2,11	313,1	58	A57-M2-B71	3	2,75	383,2
11	A53-M1-B62	3	2,4	373,2	59	A60-M2-B71	3	3,0	413,2
12	A54-M2-B62	3	2,62	431,2	60	A61-M2-B71	3	1,54	412,2
13	A50-M1-B63	3	2,72	351,2	61	A62-M2-B71	3	2,63	357,2
14	A50-M2-B63	3	2,72	351,2	62	A50-M2-B72	3	2,51	317,2
15	A51-M1-B63	3	2,64	403,2	63	A51-M1-B72	3	2,4	369,2
16	A52-M1-B63	3	2,22	297,1	64	A52-M1-B72	3	1,9	263,1
17	A53-M1-B63	3	2,5	357,2	65	A53-M1-B72	3	2,2	323,2
18	A51-M1-B64	3	2,73	423,1	66	A54-M2-B72	3	2,59	381,2
19	A52-M1-B64	3	2,34	317,1	67	A55-M2-B72	3	1,83	334,2
20	A53-M1-B64	3	2,59	377,1	68	A57-M2-B72	3	2,7	331,2
21	A50-M2-B65	3	3,05	413,2	69	A60-M2-B72	3	3,0	361,3
22	A51-M1-B65	3	2,9	465,2	70	A61-M2-B72	3	1,4	360,51
23	A52-M1-B65	3	2,57	359,1	71	A50-M2-B73	3	2,8	391,1
24	A53-M1-B65	3	2,78	419,2	72	A54-M2-B73	3	2,7	455,2
25	A62-M2-B65	3	3,05	401,2	73	A50-M2-B74	3	2,67	397,2
26	A50-M2-B66	3	2,54	379,2	74	A50-M1-B74	3	2,6	397,2
27	A51-M1-B66	3	2,45	431,2	75	A51-M1-B74	3	2,57	449,2
28	A52-M1-B66	3	1,99	325,1	76	A52-M1-B74	3	2,17	343,1
29	A53-M1-B66	3	2,32	385,2	77	A53-M1-B74	3	2,44	403,2
30	A59-M2-B66	3	2,55	421,1	78	A60-M2-B74	3	3,1	441,2
31	A50-M2-B67	3	2,58	365,2	79	A51-M1-B75	3	2,67	435,1
32	A51-M1-B67	3	2,5	417,1	80	A52-M1-B75	3	2,28	329,1
33	A52-M1-B67	3	2,03	311,1	81	A53-M1-B75	3	2,52	389,1
34	A53-M1-B67	3	2,35	371,1	82	A51-M1-B76	3	2,78	457,1
35	A60-M2-B67	3	3,09	409,2	83	A52-M1-B76	η J	2,43	351,1
36	A50-M2-B68	3	2,35	303,2	84	A53-M1-B76	3	2,66	411,1
37	A51-M1-B68	3	2,32	355,2	85	A52-M1-B77	3	2,21	301,1
38	A52-M1-B68	3	1,76	249,1	86	A53-M1-B77	3	2,48	361,1
39	A53-M1-B68	3	2,16	309,2	87	A51-M1-B78	3	2,55	417,2

·· ···♦ • · · · · · · • · · · · ····· • · · · · · ·♦ · ·· · ·· * • · · • · · · • ····· • · · ·· ·

40	A57-M2-B68	3	2,58	317,2	88	A53-M1-B78	3	2,4	371,2
41	A62-M2-B68	3	2,37	291,2	89	A51-M1-B79	3	2,5	419,2
42	A50-M2-B69	3	2,84	365,2	90	A52-M1-B79	3	2,07	313, 9
43	A51-M1-B69	3	2,75	417,2	91	A53-M1-B79	3	2,35	373,2
44	A52-M1-B69	3	2,35	311,1	92	A52-M1-B80	3	2,08	327,1
45	A53-M1-B69	3	2,61	371,2	93	A53-M1-B80	3	2,35	387,1
46	A61-M2-B69	3	1,71	408,2	94	A52-M1-B81	3	2,16	341,1
47	A50-M2-B70	3	2,77	403,2	95	A53-M1-B81	3	2,43	401,2
48	A57-M2-B70	3	2,95	417,2

Průmyslová využitelnost

Aminoindazolové deriváty podle předkládaného vynálezu nebo jejich farmaceutické sole, společně s farmaceutickými prostředky je obsahujícími, jsou užitečné pro léčbu chorob způsobených a/nebo spojených se změněnou aktivitou protein-kinázy, jako je rakovina, poruchy buněčné proliferace, Alzheimerova choroba, virové infekce, autoimunitní choroby a neurodegenerativní poruchy.

zoo *· · *· » /

9 9 9 9 9 9 9 9 ^V • · · 9 9 9 9 9 9 9 9

999 999 9999 99 9 9999

9 9 9 9 9 9 9 9

9 99 9 99 9

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob léčení chorob způsobených a/nebo spojených se změněnou aktivitou protein-kinázy, vyznačující se t í m, že se savci potřebujícímu toto léčení podává účinné množství aminoindazolu obecného vzorce I kde R je vybírané ze skupiny skládající se z -NHR', -NR'R, -NHCOR', -NHCONHR', -NHCONRR, -NHSO₂R' nebo -NHCOOR', kde R' a R je nezávisle skupina výhodně dále substituovaná vybíraná z přímého nebo rozvětveného Ci-Cé alkylu, C₂-Cé alkenylu nebo alkynylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-Cň alkylu, arylu, aryl Ci-Có alkylu, 5- nebo 6-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Cé alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry; nebo R je ftalimidoskupina obecného vzorce II (II) všechna Ri, pokud jsou přítomná, jsou v poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu a znamenají skupinu, výhodně dále substituovanou, jak je uvedeno výše pro R' nebo R;

m je 0 nebo 1;

nebo jeho farmaceuticky přijatelné sole.

2. Způsob podle nároku 1, v y z n a č u j í c í se t í m, že choroba způsobená a/nebo spojená se změněnou aktivitou protein-kinázy je porucha buněčné ·· ···» • r · ··· ·«· • · · · · φ · ···* • · · · · · ···* · · · ··· no ··· ······

VO *· · ·♦ · «* · proliferace vybíraná ze skupiny skládající se z rakoviny, Alzheimerovy choroby, virových infekcí, autoimunitních chorob a neurodegenerativních poruch.

3. Způsob podle nároku 2, v y z n a č u j í c í se t í m, že rakovina je vybíraná z karcinomu, karcinomu plochých buněk; hematopoézových nádorů lymfoidní nebo myeloidní skupiny, nádorů mezenchymálního původu, nádorů cetrální a periferní nervové soustavy, melanomu, seminomu, teratokarcinomu, osteosarkomu, xenodermu pigmentosum, keratoxanthomu, thyroidní folikulární rakoviny a Kaposiho sarkomu.

4. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že porucha buněčné proliferace je vybíraná z benigního zbytnění prostaty, familiální adenomatózy, polypózy, neurofibromatózy, psoriázy, proliferace buněk hladkého svalstva spojené s atherosklerózou, plicní fíbrózy, artritické glomerulonefritidy a pooperační stenózy a restenózy.

5. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že se poskytuje inhibice angiogeneze tumorů a metastází.

6. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že se savec potřebující takové léčení dále podrobí radiační terapii nebo chemoterapii v kombinaci s alespoň jedním cytostatickým nebo cytotoxickým činidlem.

7. Způsob podle nároku 1, vyznačující se t í m, že savec potřebující takové léčení je člověk.

8. Způsob inhibice protein-kinázové aktivity vyznačující se tím, že se kináza dostane do kontaktu s účinným množstvím sloučeniny obecného vzorce I, jak se definuje v nároku 1.

9. Aminoindazolový derivát obecného vzorce I

R (RiO)_m

N

H

N (I) kde R je vybírané ze skupiny skládající se z -NHR¹, -NR'R, -NHCOR', -NHCONHR', -NHCONRR, -NHSO₂R' nebo -NHCOOR', kde R' a R je nezávisle skupina výhodně dále substituovaná vybíraná z přímého nebo rozvětveného Ci-Có alkylu, C₂-Cé alkenylu nebo alkynylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Cj-Có alkylu, arylu, aryl C|-Cé alkylu, 5- nebo 6-ělenného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Cg alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry; nebo R je fitalimidoskupina obecného vzorce II

O — N

O všechna R,, pokud jsou přítomná, jsou v poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu a znamenají skupinu, výhodně dále substituovanou, jak je uvedeno výše pro R' nebo R;

mje 0 nebo 1;

nebo jeho farmaceuticky přijatelná sůl, s výhradou že :

a) pokud R je -NHCOR' a m je 0, pak R' je substituent jiný než methyl, «-propyl, benzyl, 2,2-difenylethyl, 3,5-dimethylisoxazol-4-yl, 2-(morfolin-4—yljethyl nebo fenyl výhodně substituovaný chlorem, hydroxyskupinou, methylem, nitroskupinou nebo aminoskupinou;

b) pokud indazol je substituovaný v poloze 5 nebo 6 methoxyskupinou, pak R je substituent jiný než 3-(jV,V-diethylamino)propylamino-, 3-[(3-methyl)morfolin-4-yl]propylamino- nebo 1 -hydroxy-2-methyl-2-propylaminoskupina;

c) je vyloučená sloučenina 3-ftalimidoindazol.

·» ··«· • · · * · · ··· • · * ···· ···· • · · · · ♦ ···· · · · ···» 1 ΛΑ ··· ·»····

I UU ·· » ** * ·«» ο

10. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, kde R je skupina -NHR' nebo -NR'R a R', R, Ri a m jsou definované v nároku 9.

11. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 10, kde m je 1 a Rj, R' a R jsou nezávisle vybírané z C₂-Có alkenylu, C₃-Có alkynylu, arylu, aryl C|-Có alkylu,

5- nebo 7-čIenného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

12. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, kde R je skupina -NHCOR' a R', R| a m jsou definované v nároku 9.

13. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 12, kde m je 1 a Ri a R' jsou nezávisle vybírané z Ci-Có alkylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-Cg alkylu, arylu, aryl Ci-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Cj-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

14. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, kde R je skupina -NHCONHR' nebo -NHCONR'R a R', R, R| a m jsou definované v nároku 9.

15. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 14, kde m je 1 a R|, R' a R jsou nezávisle vybírané z Cj-Cé alkylu, C3-C6 cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-Có alkylu, arylu, aryl Ci-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

16. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, kde R je skupina -NHSO₂R' a R', R| a m jsou definované v nároku 9.

17. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 16, kde m je 1 a Ri a R' jsou nezávisle vybírané z C|-Có alkylu, C₃-Có cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-Cé alkylu, arylu, aryl Cj-Có alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo • · · · • · • · · · · · • · · · · · · • · · · · · ···· * • · · · · ·

101 ......

heterocyklyl C|-C6 alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

18. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, kde R je skupina -NHCOOR' a R’, Ri a m jsou definované v nároku 9.

19. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 18, kde m je 1 a Ri a R' jsou nezávisle vybírané z Ci-C₆ alkylu, C₃-C₆ cykloalkylu nebo cykloalkyl Cj-Có alkylu, arylu, aryl Ci-Cé alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Cj-Cé alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

20. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, kde R je ftalimidoskupina obecného vzorce II a R, a m jsou definované v nároku 9.

21. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 20, kde m je 1 a Ri je vybírané z C₂-C6 alkenylu, C₃-C6 alkynylu, arylu, aryl Ci-Cď alkylu, 5- nebo 7-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl Ci-Có alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry.

22. Sloučenina obecného vzorce I podle nároku 9, výhodně ve formě farmaceuticky přijatelné sole, vybíraná ze skupiny skládající se z

1) methyl-2-({3-[(anilinokarbonyl)amino]-l//-indazol-5-yl}oxy)butanoátu;
2) N-benzyl-V-[5-(2-pyrrolidin-l-yl-ethoxy)-lH-indazol-3-yl]moěoviny;
3) methyl-2-[(3-{[(benzylamino)karbonyl]amino}-l//-indazol-5-yl)oxyjbutanoátu;
4) yV-isopropyl-V-{5-[(l-fenyl-2-oxopyrrolidin-3-yl)oxy]-l//-indazol-3-yl}močoviny;
5) 2-[(3-{[(isopropylamino)karbonyl]amino}-l//-indazol-5-yl)oxy]-V-fenyIpropanamidu,
6) methyl-2-[(3-{[(isopropylamino)karbonyl]amino}-l//-indazol-5-yl)oxy]butanoátu;
7) /V-isopropyl-7V-{5-[2-(4-methyl-l,3-thiazol-5-yl)ethoxy]-l//-indazol-3-yl}• ·

102 • · · • φ • · • ·« močoviny;
8) jV-[5-(but-3-ynyl-oxy)-l//-indazol-3-yl]-7V-isopropylmočoviny;
9) methyl-2-({3-[(3-fenylpropanoyI)amino]-l//-indazol-5-yl}oxy)butanoátu;
10) /V-{5-[(l-fenyl-2-oxopyrrolidin-3-yl)oxy]-l//-indazol-3-yl}cyklopropankarboxamidu;
11) methyl-2-( {3 - [(cyklopropylkarbonyl)amino] -1 //-indazol-5 -yl} oxy)butanoátu;
12) 2-(4-Zerc-butylfenoxy)-A-[5-(2-pyrrolidin-l-yl-ethoxy)-l//-indazol-3-yl]acetamidu;
13) 2-(4-methoxyfenyl)-A-[5-(2-pyrrolidin-l-ylethoxy)-l//-indazol-3-yl]acetamidu;
14) methyl-2-[(3- {[(4-methoxyfenyl)acetyl]amino}-177-indazol-5-yl)oxy]butanoátu;
15) /V-isopropyl-ÝV- {6-[( 1 -fenyl-2-oxopyrrolidin-3-yl)oxy]-1 //-indazol-3-yl} močoviny;
16) TV-{6-[(2-methylbenzyl)oxy]-l//-indazol-3-yl}cyklopropankarboxamidu;
17) N- {6-[(1 -fenyl-2-oxopyrrolidin-3-yl)oxy]-1 //-indazol-3-yl} cyklopropankarboxamidu;
18) methyl-2-({3-[(cyklopropylkarbonyl)amino]-l//-indazol-6-yl}oxy)butanoátu;
19) methyl-2-({3-[(3-chlorbenzoyl)amino]-1//-indazol-6-yl}oxy)butanoátu;
20) /V-benzyl-jV-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)močoviny;
21) //-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)-/V-isopropylmočoviny;
22) 2-(4-Zerc-butylfenoxy)-/V-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)acetamidu;
23) jV-(5-hydroxy-2//-indazol-3-yl)-2-(4-methoxyfenyl)acetamidu;
24) A-(6-hydroxy-2//-indazol-3 -ylj-TV-fenylmočoviny;
25) /V-(6-hydroxy-2//-indazol-3-yl)-3-fenylpropanamidu;
26) 7V-(6-hydroxy-2//-indazol-3-yl)cyklopropankarboxamidu.

23. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I definovaných v nároku 9 a jejich farmaceuticky přijatelných solí, kde R je definované v nároku 9 a není to ftalimidoskupina obecného vzorce II, vyznačující se tím, že:

a) 2-aminobenzonitrilový derivát obecného vzorce III • · · · • · · · · ·

103 • · · • ··· (R O)m (III) kde m je definované v nároku 9 a R', pokud je přítomno, je methylová nebo benzylová skupina reaguje za kyselých podmínek s nitritem sodným v přítomnosti chloridu cínatého, za vzniku sloučeniny obecného vzorce IV (IV)

b) sloučenina obecného vzorce IV reaguje s ftalanhydridem za vzniku sloučeniny obecného vzorce V

c) sloučenina obecného vzorce V reaguje s vhodným činidlem štěpícím ether za vzniku odpovídajícího hydroxyderivátu obecného vzorce VI • · • ·

104

d) sloučenina obecného vzorce VI reaguje s vhodným sililačním činidlem (R^lv)3SiZ, kde každé R^IV je shodné nebo rozdílné, a je to přímá nebo rozvětvená C1-C4 alkylová skupina, a Z je atom halogenu, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VII

e) sloučenina obecného vzorce VII reaguje s vhodným činidlem chránícím indazolový dusík, nebo se indazolový dusík ochrání ukotvením na vhodnou polymerní pryskyřici, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VIII

Q kde Q je výše uvedená chránící skupina nebo představuje nosnou pryskyřici;

• ·

105

f) sloučenina obecného vzorce VIII reaguje s hydrazin-monohydrátem za vzniku sloučeniny obecného vzorce IX

Q a sloučenina obecného vzorce IX reaguje v libovolném z následujících kroků g.l) nebo g.2);

g.l) s vhodným činidlem obecného vzorce R'-Z (X), obecného vzorce R'-COZ (XI), obecného vzorce R-NCO (XII), obecného vzorce R'-SO₂Z (XIII) nebo obecného vzorce ROCOZ (XIV), kde R' je definované v nároku 9 a Z znamená atom halogenu nebo vhodnou odstupující skupinu, za vzniku odpovídající sloučeniny obecného vzorce XV

Q kde R je skupina -NHR', -NHCOR', -NHCONHR', -NHSO₂R' nebo -NHCOOR' a, pokud je to žádoucí, sloučeniny, kde R je skupina -NHR' nebo -NHCONHR', reagují se sloučeninou obecného vzorce RZ (XVI), kde R je definované v nároku 9 a Z je definované výše, za vzniku sloučenin obecného vzorce XV, kde R je skupina -NR'R nebo -NHCONRR;

g.2) se sloučeninou obecného vzorce R'RNH (XVII), kde R' a R jsou definované výše, v přítomnosti 4-nitrofenyl-chlorformiatu, za vzniku odpovídající sloučeniny obecného vzorce XV, kde R je skupina -NHCONRR;

h) libovolná z výše uvedených sloučenin obecného vzorce XV reaguje s tetrabutylamonium-fluoridem za vzniku sloučeniny obecného vzorce XVIII

i) sloučenina obecného vzorce XVIII reaguje s derivátem obecného vzorce R,-Z (XIX), kde Ri je definované v nároku 9 a Z je atom halogenu, vhodná odstupující skupina nebo hydroxyskupina, za vzniku sloučeniny obecného vzorce XX

Q

j) odstraní se chránící skupina ze sloučeniny obecného vzorce XX nebo se odštěpí polymerní pryskyřice za vzniku požadované sloučeniny obecného vzorce I, a pokud je to žádoucí, převede se na jinou sloučeninu obecného vzorce I a/nebo na její farmaceuticky přijatelnou sůl.

24. Způsob podle nároku 23, vy zn a č u j í c í se t í m, že sloučenina obecného vzorce III je 2-amino-4-methoxybenzonitril nebo 2-amino-5-benzyloxybenzonitri 1.

25. Způsob podle nároku 23, v y z n a č u j í c í se t í m, že krok a) se provádí v přítomnosti kyseliny chlorovodíkové.

26. Způsob podle nároku 23, vy zn a č uj í c í se t í m, že silylační Činidlo v kroku d) je /erc-butyl(dimethyl)silylchlorid.

27. Způsob podle nároku 23 vyznačující se tím, že v kroku e) je indazolový derivát obecného vzorce VII ukotven na chlortritylchloridovou polymerní pryskyřici.

• · # 9

9 9

107

9 9 9

9 99 9

28. Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I definovaných v nároku 9, kde R je ftalimidoskupina obecného vzorce II, a jejich farmaceuticky přijatelných solí, vyznačující se t í m, že sloučeniny obecného vzorce VIII, definované v nároku 23, reagují podle kroků h), i) a j) způsobu podle nároku 23.

29. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXa s každou ze sloučenin obecného vzorce X uvedených v tabulce I, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVa (tBu)(Me)₂Si

Q poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVa s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

30. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXb

108 • · ♦ · • · · • ··· \

Q (IXb) s každou ze sloučenin obecného vzorce X uvedených v tabulce I, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVb \

Q poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVb s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

31. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXa (tBu)(Me)₂Si (IXa) s každou ze sloučenin obecného vzorce XI uvedených v tabulce IV, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVc

99 9999

109

9 9 9

9 9999 (tBu)(Me)₂Si

Q poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVc s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

32. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXb

Q s každou ze sloučenin obecného vzorce XI uvedených v tabulce IV, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVd poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVd s tetrabutylamonium- fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II a III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

9 9 9

9 999

110

33. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXa s každou ze sloučenin obecného vzorce XII uvedených v tabulce V, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVe (tBu)(Me)₂Si

NHCONHR'

N (XVe) poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVe s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

34. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXb nh₂ (tBu)(Me)₂Si

N (IXb)

111 ·· ··· · s každou ze sloučenin obecného vzorce XII uvedených v tabulce V, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVf poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVf s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

35. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXa s každou ze sloučenin obecného vzorce XIII uvedených v tabulce VI, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVg (tBu)(Me)₂Si

NHSO₂R'

N (XVg)

112 poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVg s tetrabutylamonium-fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

36. Sloučenina obecného vzorce I definovaná v nároku 9 a její farmaceuticky přijatelné sole, které jsou připravitelné technikou kombinatorické chemie jako u výše uvedeného způsobu podle nároku 23, nejprve reakcí sloučeniny obecného vzorce IXb (tBu)(Me)₂Si

N (IXb) s každou ze sloučenin obecného vzorce XIII uvedených v tabulce VI, za vzniku množství sloučenin obecného vzorce XVh (tBu)(Me)₂Si

N (XVh)

NHSO₂R' poté reaguje každý z derivátů obecného vzorce XVh s tetrabutylamonium- fluoridem jako v kroku h) předkládaného způsobu, a poté s každým z derivátů obecného vzorce XIX uvedených v tabulce II nebo III, a následně postupem podle krokuj) předkládaného způsobu.

37. Knihovna dvou nebo více aminoindazolových derivátů obecného vzorce I

R

N (O ν'

H (R.O)™—k

113 ·· ·*··

99 9

9 9 9 9 • · · · * • 9 9 999

9 9 9

99 9 vyznačující se t í m, že R je vybírané ze skupiny skládající se z -NHR', -NRR, -NHCOR', -NHCONHR', -NHCONRR, -NHSO₂R' nebo -NHCOOR', kde R' a R jsou obě nezávisle skupina výhodně dále substituovaná vybíraná z přímého nebo rozvětveného Ci-Có alkylu, C₂-C6 alkenylu nebo alkynylu, C₃-C₆ cykloalkylu nebo cykloalkyl Ci-C₆ alkylu, arylu, aryl Ci-Có alkylu, 5- nebo 6-členného heterocyklylu nebo heterocyklyl C|-C₆ alkylu s 1 až 3 heteroatomy vybíranými z dusíku, kyslíku nebo síry; nebo R je ftalimidoskupina obecného vzorce II všechna R_h pokud jsou přítomná, jsou v poloze 5 nebo 6 indazolového kruhu a znamenají skupinu, výhodně dále substituovanou, jak je uvedeno výše pro R' nebo R;

m je 0 nebo 1;

nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí.

38. Specifická sloučenina obecného vzorce I, výhodně ve formě farmaceuticky přijatelné sole, jak je definovaná v libovolné z tabulek IX až XVI.

39. Farmaceutický prostředek, vyznačující se t í m, že obsahuje účinné množství aminoindazolu obecného vzorce I definovaného v nároku 9 a nejméně jeden farmaceuticky přijatelný excipient, nosič nebo ředidlo.

40. Farmaceutický prostředek podle nároku 39, v y z n a č u j í c í se t í m, že dále obsahuje jedno nebo více chemoterapeutických činidel, jako kombinovaný prostředek pro simultánní, oddělené nebo postupné použití při léčbě rakoviny.

114 • φφφ • φφφφ φφφ φφ φ

42.

43.

42.

ί

43.

44.

44.

Produkt nebo sada vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 9 nebo farmaceutický prostředek definovaný v nároku 39 a jedno nebo více chemoterapeutických činidel, jako kombinovaný prostředek pro simultánní, oddělené nebo postupné použití při léčbě rakoviny.

Použití sloučeniny obecného vzorce I definované v nároku 9 nebo její farmaceuticky přijatelné soli jako léčiva.

Použití sloučeniny obecného vzorce I definované v nároku 9 nebo její farmaceuticky přijatelné soli pro výrobu léčiva pro léčbu chorob způsobených a/nebo spojených se změněnou aktivitou protein-kinázy.

Použití podle nároku 43 pro léčbu tumorů.