CZ2007537A3

CZ2007537A3 - Nové zpusoby výroby benzofuranové slouceniny

Info

Publication number: CZ2007537A3
Application number: CZ20070537A
Authority: CZ
Inventors: Schneider@Peter; Tahtaoui@Chouaib; Braun@Martin; Greiveldinger-Poenaru@Sorana; Jaeger@Jürgen; Schmitt@Laurent
Original assignee: Arpida Ag
Priority date: 2005-02-18
Filing date: 2006-02-10
Publication date: 2008-02-20
Also published as: US20080161561A1; JP2009505943A; TW200640914A; CN101115746A; CN102079727A; RO122853B1; NZ556800A; WO2006087143A1; RU2397980C2; RU2007134583A; NO20073678L; RU2007134584A; AU2006215785A1; ZA200706421B; RO122912B8; IL184404A0; WO2006087140A1; HUP0700605A3; NO20073701L; WO2006087143A8

Abstract

Zpusob výroby slouceniny vzorce I, která je inhibitorem dihydrofolát reduktasy a meziprodukty cennépri tomto zpusobu.

Description

Způsob výroby sloučeniny vzorce I, která je inhibitorem dihydroíolát reduktasy a meziprodukty cenné při tomto způsobu.

CZ 2007 - 537 A3

H.N

Nové způsoby výroby benzofuranové sloučeniny

Oblast techniky

Vynález se týká nových způsobů výroby sloučeniny vzorce I. což je sloučenina, která se řadí k inhibitorům dihydrofolát reduktasy

Vynález se dále týká cenných meziproduktů tohoto způsobu.

Dosavadní stav techniky

Sloučenina vzorce I má cenné antibiotické vlastnosti a lze ji používat při léčení nebo prevenci infekčních chorob u savců, lidí i zvířat. Sloučenina vzorce I vykazuje zejména značnou antibakteriální účinnost, a to i proti multiresistentním Gram-pozirivním kmenům a proti oportunním pathogenům, jako je například Pneumocystis carinii. Sloučeninu lze také podávat v kombinaci se známými látkami s antibakteriální účinností, přičemž s některými z nich vykazuje synergické účinky.

Jako typické sloučeniny, se kterými ji lze kombinovat, lze uvést sulfonamidy nebo jiné inhibitory enzymů podílejících se na biosyntéze kyseliny listové, jako jsou například deriváty pteridinu.

Současny způsob přípravy sloučeniny vzorce I je popsán v patentově přihlášce PCT/EP2004/007482. Hlavní nevýhodou tohoto způsobuje délka syntézy, a tedy nízký celkový výtěžek. Většina meziproduktů není krystalická, takže je tato syntéza ekonomicky méně atraktivní při provádění v průmyslovém měřítku. Kromě toho některá drahá reakční činidla, která se používají při této syntéze, nelze regenerovat.

Bylo by tedy třeba vyvinout způsob výroby sloučeniny vzorce I, při němž by se dosahovalo vyššího celkového výtěžku za použití menšího počtu meziproduktů, které by bylo možno izolovat a purifikovat. Úkolem vynálezu je vyvinout způsob, při němž by všechny izolované meziprodukty byly krystalické a nevyžadovaly by chromatografii a který by umožňoval syntetizovat sloučeniny příbuzné sloučenině vzorce I z běžného meziproduktu a levné výchozí látky.

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je způsob výroby sloučeniny vzorce I z meziproduktu vzorce 6.

Meziprodukt vzorce 3 se syntetizuje ve třech stupních ze snadno dostupné výchozí látky 1 (viz Schéma 1). Diaminopyrimidinový substituent v meziproduktu 1 se selektivně chrání způsobem popsaným v R.J. Griffin et al., J.Chem.Soc. Perkin Trans I, 1811 (1992), čímž se získá sloučenina vzorce 2, která se dále formvluje za vzniku sloučeniny vzorce 3 (viz schéma 1).

Schéma 1:

Další způsob, kterým lze získat sloučeninu vzorce 3. je znázorněn ve schématu 2. Sloučenina vzorce 4 se chrání na diaminopyrimidinové skupině za vzniku sloučeniny vzorce 5, která se poté karbonyluje za vzniku meziproduktu vzorce 3 (viz schéma 2).

Schéma 2:

Sloučenina vzorce 3 se selektivní demethylací převede na klíčový meziprodukt vzorce 6 (viz schéma 3).

Schéma 3:

I

K syntéze sloučeniny vzorce I slouží další meziprodukt vzorce 10 nebo 12. Sloučeniny vzorce 10/12 se syntetizují ze sloučeniny vzorce 7, která je dostupná na trhu (například od firmy Fluka AG nebo Biosynth AG). acetylací na sloučeninu vzorce 8. Sloučenina vzorce 8 se na dusíku chrání reakcí s tosylchloridem, čímž se získá sloučenina vzorce 9, která se poté brómuje na sloučeninu vzorce 10, nebo se sloučenina vzorce 8 nejprve brómuje za vzniku sloučeniny vzorce 11, která se podrobí N-protekční reakci s diterc-butyldikarbonátem za vzniku sloučeniny vzorce 12 (viz schéma 4).

Schéma 4:

Alkylací sloučeniny vzorce 6 na fenolické skupině za použití bromketonu vzorce 10 nebo 12 a následnou cyklizací se získá furanový derivát vzorce 13 respektive 15. Sloučeniny vzorce 13 a 15 se podrobí deprotekci, čímž se získá sloučenina vzorce 14 (viz schéma 5).

Schéma 5:

Ketonová karbonylskupina sloučenin vzorce 13 nebo 15 se převede na methylenovou skupinu a získají se sloučeniny vzorce 16 respektive 17 (viz schéma

6).

Schéma 6:

'7

Transformace ketonové karbonylskupiny ve sloučenině vzorce 14 vede přímo k cílové sloučenině vzorce I. Redukci lze také provádět ve dvou stupních, přes alkohol vzorce 14A (viz schéma 7).

Schéma 7:

Deprotekcí sloučeniny vzorce 16 a 17 se také přímo získá sloučenina vzorce I (viz schéma 8).

Schéma 8:

Sloučenina vzorce l má bazickou povahu a v případě potřeby ji lze za použití kyseliny převádět na farmaceuticky vhodné soli. Jako vhodné kyseliny je možno uvést například kyselinu chlorovodíkovou, kyselinu maleinovou, kyselinu jantarovou, kyselinu L(+)-mléčnou, kyselinu DL-mléčnou, kyselinu glykolovou, kyselinu 1 -hydroxynaftalen-2-karboxylovou, kyselinu vinnou, kyselinu citrónovou, kyselinu methansulfonovou. Největší přednost se dává karboxylovým kyselinám.

Následuje podrobný popis vynálezu.

Způsob podle tohoto vynálezu má oproti dosavadnímu způsobu syntézy sloučeniny vzorce 1, jak je popsán v patentové přihlášce PCT/EP2004/007482. řadu výhod a zlepšení. Odpovídající výchozí látky vzorců 1 a 7 jsou dostupné na trhu ve velkých množstvích.

Ústřední meziprodukt vzorce 6 při přípravě sloučeniny vzorce I je možno připravovat reakČními sekvencemi znázorněnými ve schématech 1 až 3. Chránění AI trimethoprimu 1 lze provádět tak, že se sloučenina vzorce 1 zahřívá s anhydridy, například acetanhydridem, anhydridem isomáselné kyseliny nebo anhydridem kyseliny pivalové, v inertním vysokovroucím rozpouštědle, jako toluenu, p-xylenu, nebo samotném anhydridu kyseliny na teplotu asi 120°C až 160°C. Formylaci B1 chráněného trimethoprimu 2 lze provádět v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu, dichlorethanu, přednostně dichlormethanu, za použití dichlormethylmethyletheru a Lewisovy kyseliny, například chloridu cíničitého, při 0°C až -30°C, přednostně při -10°C. Alternativně je sloučeninu vzorce 3 také možno syntetizovat tak, že se chrání A2 sloučenina vzorce 4 za použití anhydridu kyselin, jako například acetanhydridu, anhydridu methylpropionové kyseliny nebo pivaloylanhydridu, v inertním vysokovroucím rozpouštědle, jako toluenu, p-xylenu, nebo v samotném anhydridu kyseliny, přednostně za použití anhydridu methylpropionové kyseliny, při asi 120°C až 160°C. Karbony láci B2 sloučeniny vzorce 5 lze provádět v inertní atmosféře v rozpouštědle, například tetrahydrofuranu, za přítomnosti palladia tetrakis jako katalyzátoru, oxidu uhelnatého a tributylcínhydridu při 60°C až 80°C. Selektivní demethylaci A3 je možno provádět v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu, acetonitrilu, v kombinaci s Lewisovou kyselinou, jako chloridem hlinitým, chloridem boritým, bromidem boritým, chloridem manganatým, jodidem manganatým, přednostně chloridem hlinitým, a nukleofilu, například jodidu sodného, dimethylsulfidu, diethylsulfidu, tetrahydrothiofenu, přednostně jodidu sodného při teplotě místnosti až 40°C.

Strategie konvergentní syntézy sloučeniny vzorce I využívá dalšího meziproduktu vzorce 10 nebo 12. Výchozí látka vzorce 7 se acetyluie ( A4) za použití acetylchloridu a Lewisovy kyseliny, jako chloridu hlinitého nebo chloridu cíničitého, při teplotě okolí za vzniku meziproduktu vzorce 8. Sloučeninu vzorce 8 lze převést na sloučeninu vzorce 10 tak, že se nejprve (B4) chrání dusík za použití sulfonylchloridu, například benzyl- nebo p-toluensulfonylchloridu a báze, jako triethylaminu, pyridinu, v inertním rozpouštědle při teplotě místnosti, čímž se získá sloučenina vzorce 9 a poté se brómuje (C4) acetylskupina například bromem. N bromsukcinimidem, bromidem měďnatým. přednostně bromem, v dioxanu. čímž se získá sloučenina vzorce 10, nebo se sloučenina vzorce 8 nejprve brómuje (B5) za použití například bromu, N-bromsukcinimidu, přednostně bromu, v inertním rozpouštědle, jako dioxanu, při teplotě místnosti, čímž se získá sloučenina vzorce 11, která se poté chrání (C5) za použití diterc-butyldikarbonátu a pyridinové báze, například 2,6-dimethylpyridinu s 4-dimethylaminopyridinem, jako katalyzátoru, při teplotě místnosti, čímž se získá sloučenina vzorce 12.

Alkylací sloučeniny vzorce 6 sloučeninou vzorce 10 (A6) nebo sloučeninou vzorce 12 (A7) a následnou cyklizací v inertním rozpouštědle, například dimethylformamidu, tetrahydrofuranu, přednostně tetrahydrofuranu, za použití báze, jako uhličitanu sodného, terc-butoxidu draselného, přednostně terc-butoxidu draselného, při teplotě okolí až 40°C, přednostně při teplotě místnosti, se získá sloučenina vzorce 13 respektive 15. Deprotekce (B6, B7) obou sloučenin vzorce 13 a 15 se provádí ve směsi rozpouštědel, například tetrahydrofuranu, methanolu, přednostně tetrahydrofuranu a vody, za použití silné báze, jako hydroxidu sodného nebo draselného, přednostně hydroxidu sodného, při teplotě 40°C až 80°C, přednostně při 50°C, a získá se sloučenina vzorce 14.

Redukci A8 respektive A9 ketonové funkční skupiny sloučeniny vzorce 13 respektive 15 lze provádět při teplotě místnosti za použití trimethylsilanu v trifluoroctové kyselině. Získají se sloučeniny vzorce 16 a 17, znázorněné ve schématu 6.

Redukci A10 ketonové funkční skupiny sloučeniny vzorce 14 lze provádět za použití redukčního činidla, jako tetrahydroboritanu sodného, kyanoborohydridu sodného, tetrahydroboritanu zinečnatého. acetoxvborohydridu sodného, přednostně kyanoborohydridu sodného, tetrahydroboritanu sodného nebo tetrahydroboritanu zinečnatého, v organickém rozpouštědle, jako methanolu, isopropylalkoholu, tetrahydrofuranu, dimethoxyethanu nebo jejich směsi, přednostně isopropylalkoholu nebo tetrahydrofuranu, při teplotě v rozmezí -20°C až 70°C v závislosti na použitém redukčním činidle, za vzniku cílové sloučeniny vzorce I. Alternativně je sloučeninu vzorce 14 možno podrobit dvoustupňové redukci BIO a Cl 0, při níž se sloučenina 14 nejprve redukuje za použití tetrahydroboritanu sodného při teplotě -20°C nebo za použití katalyzátorů obsahujících ruthenium při teplotě místnosti a získaný intermediámí alkohol vzorce 14A následně redukuje tetrahydroboritanem sodným při 0°C za přítomnosti fluoridu boritého nebo trifluoroctové kyseliny jako katalyzátoru, a tak se získá sloučenina vzorce 1.

Deprotekci Al 1 a A12 sloučenin vzorce 16 a 17 je možno provádět ve směsi organických rozpouštědel, například tetrahydrofuranu, methylalkoholu, přednostně tetrahydrofuranu a vody, za přítomnosti silné báze, jako hydroxidu sodného nebo draselného, přednostně hydroxidu sodného, při teplotě 40°C až 80°C, přednostně při 50°C, za vzniku cílové sloučeniny vzorce I.

Sloučeniny vzorce 2, 3, 5, 6, 8 až 17 jsou nové a jsou rovněž předmětem tohoto vynálezu. Lze je připravovat reakčními sekvencemi znázorněnými ve schématech 1 až 8 a podrobněji popsanými v příkladech provedení vynálezu.

Jak již bylo uvedeno výše, sloučenina vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli mají cenné antibakteriální vlastnosti. Tyto sloučeniny jsou účinné proti velkému počtu patogenních mikroorganismů, jako je napříkla S. aureus. P. carinii atd., díky své aktivitě při inhibici bakteriální dihydrofolát reduktasy (DHFR). Aktivita sloučeniny vzorce I je popsána v patentové přihlášce PCT/EP 2004/007482.

Další předměty, výhody a nové znaky vynálezu budou odborníkům v tomto oboru zřejmé na základě následujících příkladů provedení. Tyto příklady mají výhradně ilustrativní charakter a rozsah vynálezu v žádném ohledu neomezují. V příkladech 1 až 11 je popsána příprava sloučeniny vzorce 6, v příkladech 12 až 16 je popsána příprava sloučenin vzorce 10 a 12 a v příkladech 17 až 32 je popsána kondenzace sloučeniny vzorce 6 se sloučeninou vzorce 10 nebo 12 za vzniku konečného produktu vzorce I.

Příklady provedení vynalezu

Sloučeninu vzorce 4 lze připravovat způsobem popsaným v M. Calas et a!.. Eur.J.Med.Chem.Chim.Ther., 17 (6), 497 (1982). Sloučeninu vzorce 7 lze připravovat podobným způsobem, jaký je popsán například v W.B. Wright et al., J. Med.Chem., 11(6). 1164 (1968). Všechna ostatní činidla a rozpouštědla jsou dostupná na trhu, například od firmy Fluka nebo od podobných dodavatelů. Teploty jsou udávány ve stupních Celsia.

Systém LCMS

Kolona HPLC 01: reversní fáze, sloupec Waters 3,5 pm 4,6x75 mm

Gradient 01:

Čas (min)	Průtok (ml)	A (%) voda/lOmM kyselina mravenčí	B (%) acetonitril
0,00	1,2	95	5
5,00	1,2	50	50
6,00	1,2	5	95
9,00	1,2	5	95
11.00	1,2	95	5
12.00	1,2	95	5

Kolona HPLC 02: reversní fáze, sloupec Waters C|g 3,5x20 mm

Gradient 02:

Čas (min)	Průtok (ml)	A (%) voda/lOmM kyselina mravenčí	B (%) acetonitril
0,00	0,7	95	5
3,00	0,7	5	95
3,50	0,7	5	95
3,60	0,7	95	5
4,50	0,7	95	5

Rozpouštědlo A: lOmM kyselina mravenčí. Kyselina mravenčí (377 μΐ) se přidá do vody o HPLC kvalitě (1 litr, Millipore, filtrované).

Rozpouštědlo B: Acetonitril o HPLC kvalitě (Biosolve Ltd.)

Vlnová délka: 210 nm až 400 nm

Typ zařízení na HPLC: Finnigan StartSystem SCN1000, detektor s diodovým polem (PDA) UV6000LP

Typ zařízení na MS: Finnigan LCQ (iontová past), způsob ionizace: EST

Zkratky:

AcOEt	ethylester kyseliny octové
AlCh	chlorid hlinitý
CH₃CN	acetonitril
DCM	dichlormethan
DMAP	4-dimethylaminopyridin
DMF	d imethy lformam id
DMSO	dimethylsulfoxid
ekv.	ekvivalent
íPAc	isopropylacetát
iPrOH	isopropylalkohol
LCMS	vysokotlaká kapalinová chromatografie s MS detekcí

MgSO₄ síran hořečnatý

MOM-C1 chlormethylmethylether

t.t. teplota tání

NaHCOj nydrogen uhličitan sodný

t.m. teplota místnosti

R_t (01) retenční doba v koloně 01

R, (02) retenční doba v koloně 02

TBME terc-butylmethylether tBuOK terc-butoxid draselný

TFA trifluoroctová kyselina

THF tetrahydrofuran

Příklad 1

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[4-(2.2-dimethylpropionylamino)-5(3,4,5-trimethoxy benzy l)pyrimidin-2-y l]-2,2-dimethy lpropionamidu 2 (R = C(CH₃)₃) (stupeň AI)

Roztok trimethoprimu (5 g, 17,24 mmol) v anhydridu kyseliny pi valové (8,74 ml, 43,10 mmol, 2,5 ekv.) se pod atmosférou argonu 2 hodiny zahřívá na 150°C a přidá se k němu horký AcOEt. Organické vrstvy se promyjí 10% vodným NaHCO₃, vodou a vodným chloridem sodným. Organické vrstvy se poté vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Po překrystalování z TBME se získá 3.02 g sloučeniny 2 (R = C(CH₃)₃). ^-NMRÍCDCB, 400 MHz) δ: 8.35 (s, 1 H), 8.21 (br s, 1 H), 7,65 (br s, 1 H), 6.30 (s, 2 H) 3.86 (s. 2 H), 3,79 (s, 3 H). 3.77 (s, 6 H), 1.31 (s. 9 H), 1,12 (s, 9 H). t.t.: 130-133 C.

Příklad 2

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[4-isobutyrylamino-5-(3,4.5- trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]isobutyramidu 2 (R = CH(CH₃)₂) (stupeň AI)

Roztok trimethoprimu (50 g, 172,4 mmol) v anhydridu kyseliny isomáselné (100 g, 105 ml, 632 mmol, 3,6 ekv.) se pod atmosférou argonu 2 hodiny zahřívá na 150°C. Teplý roztok se nalije do 1 1 cyklohexanu, z něhož pomalu vykrystaluje. Produkt se odfiltruje a důkladně promyje cyklohexanem (2 x 200 ml). Získá se 70 g sloučeniny 2 (R = CH(CH₃)₂).

'H-NMR (D₆-DMSO, 400 MHz) δ: 10,42 (s, 1 H, NH); 10,15 (s, 1 H, NH); 8,41 (s, 1H, pyrimidin); 6,41 (s, 2H, PhH); 3.81 (s, 2H, CH₂); 3,70 (s, 6H, 2xOCH₃); 3.59 (s, 3H, OCH₃); 2,72-2,85 (m, 2H, CH); 1.06 (d, 6H, J=6,6Hz, 2xCH₃), 1,01 (d, 6H, J=6,6Hz, 2xCH₃. t.t.: 153-154°C. R_t (02) = 1,65 minuty.

Příklad 3

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[4-isobutyrylamino-5-(3,4,5- trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]-isobutyramidu 2 (R= CH(CH₃)₂) (stupeň AI)

Roztok trimethoprimu (50 g. 172,4 mmol) v anhydridu isomáselné kyseliny (62 g, 65,5 ml, 392 mmol, 2.3 ekv.) se pod atmosférou argonu 2 hodiny zahřívá na 150°C a míchá mechanickým míchadlem. Roztok se ochladí na 130°C a přidá se k němu 200 ml toluenu (čirý roztok) a poté za intenzivního míchání 1000 ml TBME (po přídavku 500 ml začne krystalizace). Hustý koláč krystalů se 1 hodinu míchá při vnější teplotě 100°C. Poté se suspenze ochladí na teplotu místnosti, 2 hodiny míchá a na závěr ochladí na 10°C a 2 hodiny míchá. Krystaly se odfiltrují a promyjí třikrát 90 ml TBME, aby se odstranila zbytková isomáselná kyselina a anhvdrid. Krystaly se suší 8 hodin za vakua při 70°C. Získá se 70 g sloučeniny 2 (R = CH(CH₃)₂).

^! H-NMR (D₆-DMSO, 400 MHz) δ: 10,42 (s, 1H.NH); 10,15 (s. 1 H, NH); 8.41 (s, 1H, pyrimidin); 6.41 (s, 2H, PhH); 3,81 (s, 2H, CH₂); 3,70 (s, 6H. 2xOCH₃); 3,59 (s, 3H, OCH₃); 2,72-2,85 (m, 2H, CH); 1,06 (d, 6H, J=6,6Hz, 2xCH₃). 1.01 (d. 6H. J=6.6Hz, 2xCH₃. t.t.: 153-154 C. R_t (02) - 1,65 minuty .

Příklad 4

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[4-(2.2-dimethylpropionylamino)-5-(2formyl-3.4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]-2,2-dimethylpropÍonamidu 3 (R = C(CH₃)₃) (stupeň Bl).

K roztoku sloučeniny 2(1 g, 2,18 mmol, R = C(CH₃)₃) v DCM (5 ml) se přidá dichlormethylmethylether (0,58 ml, 6,54 mmol). Výsledný roztok se ochladí na -30 C a poté se k němu pomalu přidá chlorid cíničitý (0,285 ml. 2,18 mmol). Vzniklá směs se míchá při teplotě v rozmezí -10°C až -5°C. Reakční směs se při 0°C nalije do 1N roztoku K₃PO4. Výsledná směs (pH 7-8) se poté 15 minut intenzivně míchá a extrahuje dvakrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Surový produkt se přečistí flash chromatografií na silikagelu (AcOEt/cyklohexan 7/3). Získá se 709 mg sloučeniny 3 (R = C(CH₃)₃). ‘H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 10,23 (s, 1 H),

8,44 (s, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 8,09 (s. 1 H), 6,59 (s, 1 H), 4,10 (s, 2 H), 3,96 (s, 3 H), 3,89 (s, 3 H). 3,85 (s, 3 H), 1,29 (s, 9 H), 1,27 (s, 9 H). t.t.: 124-126°C.

Příklad 5

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[5-(2-formyl-3,4.5-trimethoxybenzvl)4-Ísobutyrylaminopyrimidin-2-yl]isobutyramidu 3 (R = CH(CH₃)?) (stupeň Bl)

K roztoku sloučeniny 2 (70 g, 162 mmol, R = CH(CH₃)₂) v DCM (500 ml) se přidá dichlormethylmethylether (30 ml, 325 mmol). Výsledný roztok se ochladí na -10°C a poté se k němu pomalu přidá chlorid cíničitý (35 ml, 300 mmol). Vzniklá směs se míchá při teplotě v rozmezí -10°C až -5°C. Nejprve vznikne gumovitá sraženina (je nutno použít mechanického míchadla), z niž po 1 hodině míchání při -5°C vznikne homogenní suspenze. Reakční směs se při 0°C za chlazení v ledové lázni nalije do roztoku 300 ml 1N K3PO4 a 200 ml 1M vinanu sodno-draselného. Výsledná směs (s pH upraveným pomocí hydroxidu sodného na 7 až 8) se míchá 15 minut, do dokončení hydrolýzy a poté extrahuje DCM (300 ml) spolu s AcOEt (500 ml). Organická vrstva se promyje 0,lN roztokem HC1 (2x200 ml) a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltruje a odpaří. Produkt se vysráží při zkoncentrování na asi polovinu výchozího objemu. Po přídavku cyklohexanu (200 ml) dojde k dalšímu vysrážení produktu, který se poté odfiltruje. Získá se 50 g sloučeniny 3 (R = CH(CH₃)₂). ’Η-NMR (D₆-DMSO, 400 MHz) δ: (s, 1 H, NH); 10,27 (s, 1 H, NH); 10,17 (s, 1H, CHO); 8,00 (s, 1H, pyrimidin); 6,72 (s, 1H, PhH); 4,05 (s, 2H, CH₂); 3,90 (s, 3H, OCH₃); 3,85 (s, 3H, OCH₃); 3,77 (s, 3H, OCH₃); 2,75-2,85 (m, 2H, CH); 1,05 (d, 6H, J=6,6Hz, 2xCH₃), 1,01 (d, 6H, J=6.6Hz. 2xCH₃). t.t.: 162-163°C. R_t (02) = 1,85 minuty.

Příklad 6

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[5-(2-formyl-3,4,5-trimethoxybenzyl)4-isobutyrylaminopyrimidin-2-yl]isobutyramidu 3 (R = CH(CH₃)₂) (stupeň B1)

Dichlormethylmethylether (4,3 ml, 46.4 mmol, 2 ekv.) se v reakční nádobě vybavené mechanickým míchadlem rozpustí v DCM (30 ml) a ochladí na -15°C až -20°C. Ke vzniklému roztoku se během 15 minut přidá chlorid cíničitý (5 ml, 42.8 mmol, 1.8 ekv.). Čirý roztok se 30 minut míchá při -18°C a poté se k němu během 60 minut kontinuálně přidá roztok sloučeniny 2 (10 g, 23.2 mmol, vykrystalované z toluenu a TBME) v DCM (40 ml), přičemž se od počátku vylučuje žlutá pevná látka, a vznikne hustá suspenze (zelenožlutá). Tato suspenze se míchá 2 hodiny při -15°C. 1 hodinu při -10 a 30 minut při -5°C a poté se k ní při -5°C přidá 40 ml

DCM. Vyloučené krystaly v horní rozpouštědlové vrstvě se odstraní intenzivním 15minutovým mícháním. Vzniklá řídká suspenze se při 10°C přidá k dobře míchané směsi 35 g Na₂CO₃ (monohydrátu) rozpuštěného ve 100 ml vody a 35 ml DCM. Výsledná směs se 15 minut míchá při teplotě místnosti a poté znovu přemístí do reakční nádoby, v níž se dokončí zpracování, a nadále míchá při teplotě místnosti. Po 30 minutách intenzivního míchání při teplotě místnosti se oddělí vrstvy. Organická fáze se promyje dvakrát směsí 30 ml nasyceného NaCl, 5 ml nasyceného Na₂CO₃ a 40 ml vody (nutno několikrát protřepat, vodné fáze by měly vykazovat pH 7 až 8). Kalné vodné fáze se odděleně promyjí 50 ml DCM a 30 ml DCM. Organické vrstvy se vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Surový bílý krystalický produkt se nechá vykrystalovat z DCM a TBME. Za použití 10,67 g surového produktu se 30minutovým mícháním při 44°C připraví suspenze ve 25 ml DCM. K suspenzi se přidá 100 ml TBME. Výsledná suspenze se 30 minut míchá při 44°C a poté za míchání 6 hodin chladí na teplotu místnosti. Krystaly se odfiltrují, promyjí 40 ml TBME a 6 hodin suší za vakua při teplotě místnosti. Získá se 9.6 g sloučeniny 3 (R = CH(CH₃)₂).

'H-NMR (D_ó-DMSO, 400 MHz) δ: (s, 1 H, NH); 10.27 (s, 1H, NH); 10.17 (s, 1 H, CHO); 8,00 (s, 1 H, pyrimidin); 6,72 (s, 1 H, PhH); 4,05 (s, 2H, CH₂); 3.90 (s. 3H, OCH₃): 3,85 (s, 3H, OCH₃); 3.77 (s, 3H, OCH₃); 2,75-2.85 (m, 2H, CH); 1.05 (d, 6H. J=6,6Hz, 2xCH₃), 1,01 (d, 6H, J=6,6Hz. 2xCH₃). t.t.: 162-163 C. R_t (02) = 1.85 minuty.

Příklad 7

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[4-(2,2-dimethvlpropiony lamino)-5-(2jod-3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimídin-2-yl]-2.2-dimethylpropionamidu 5 (R = C(CH₃)₃) (stupeň A2)

K roztoku sloučeniny 4 (5 g, 9,2 mmol, R = C(CH₃)₃) v anhydridu kyseliny pivalové (4,1 ml, 20,24 mmol) se přidá pyridin (1,65 ml, 20.24 mmol). Výsledná směs se během 12 hodin zahřívá na 120°C a přidá se k ní 0,25N HC1 (25 ml). Směs se poté extrahuje dvakrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí postupně vodou. 10% NaHCO₃, poté vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Výsledná sloučenina se získá flash chromatografií na silikagelu (AcOEt/cyklohexan 1/1). Získá se 2,5 g sloučeniny 5 (R = C(CH₃)₃). UV: 238 (282) nm.

Příklad 8

V tomto příkladu je ilustrována přípravaN-[4-(2,2-dimethylpropionylamino)-5-(2formyl-3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamidu 3 (R = C(CH₃)₃) (stupeň B2)

Sloučenina 5 (1 g. 1,71 mmol, R= C(CH₃)₃) se rozpustí v THF (10 ml). Směs se odplyní argonem a přidá se k ní palladium tetrakis (49,4 mg, 4 mol. %). Směs se zahřeje na 70°C a spustí se pomalý proud oxidu uhelnatého. Ke směsi se během 2,5 hodiny pomalu přidá Bu₃SnH (476 μΐ, 1.05 ekv.) v 5 ml THF. Po 12 hodinách při 70°C se flash chromatografií izoluje sloučenina 3 (R = C(CH₃)₃). Analytická data získaného produktu jsou srovnatelná se sloučeninou získanou podle příkladu 4.

Příklad 9

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[4-(2.2-dimethyipropionylamino)-5-(2formyl-3'hydroxy-4,5-dimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]-2.2-dimethyípropionamidu 6 (R= C(CH₃)₃) (stupeň A3)

Sloučenina 3 (2 g, 4,11 mmol, R = C(CH₃)₃) se pod atmosférou argonu rozpustí v DCM (10 ml). Ke směsi se při 0°C přidá A1CI₃ (823 mg, 6,17 mmol). Směs se míchá dalších 10 minut při teplotě místnosti, dokud se A1C1₃ zcela nerozpustí. K roztoku se přidá jodid sodný (616 mg. 4,11 mol) a po 30 minutách 0.5 ml acetonitrilu. Reakce se kontroluje pomocí LCMS. a za účelem jejího dokončení se k reakční směsi přidá 0.5 ml acetonitrilu. Reakční směs se poté nalije do dvoufázového roztoku 1N K3PO4/DCM. Oddělí se dvě fáze. Vodné vrstvy se extrahují dvakrát AcOEt. Organická vrstvy se promyjí vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Po chromatografickém přečištění na sloupci silikagelu za použití směsi AcOEt/cyklohexan 6/4 jako elučního činidla se získá sloučenina 6 (R = C(CH₃)₃) (1,2 g).

'H-NMR(CDC1₃, 400 MHz) δ: 12.07 (s, 1 H), 9.81 (s. 1 H), 8,94 (s, 1 H). 8,26 (s. 1 H), 7,95 (s, 1 H), 6,33 (s, 1 H). 4.07 (s, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3,80 (s, 3 Η), 1,22 (s, 9H), 1,20 (s, 9 H). t.t.: 110-112C.

Příklad 10

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[5-(2-formyl-3-hydroxy-4,5-dimethoxybenzyl)-4-isobutyryIaminopyrimidin-2-yl]-isobutyramidu 6 (R = CH(CH₃)₂) (stupeň A3)

Sloučenina 3 (4 g, 8,7 mmol, 1 ekv., R = CH(CH₃)₂) se pod atmosférou argonu rozpustí v DCM (36 ml). Ke směsi se při teplotě místnosti přidá chlorid hlinitý (3.48 g, 26,1 mmol, 3 ekv.) a jodid sodný (2 g, 13,3 mmol, 1,5 ekv.). Výsledná směs se 20 minut míchá a přidá se k ní acetonitril (2,4 ml). Směs se zahřeje na teplotu 40°C, při níž se 3,5 hodiny míchá, poté ochladí na teplotu místnosti, zředí 75 ml DCM a rozloží tak. že se přidá ke 30 ml ledové vody. Ke směsi se poté pomalu přidá 2,5 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové, čímž se usnadní rozpuštění žluté sraženiny. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se extrahuje ještě jednou DCM (75 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným (50 ml), dvakrát roztokem hydrogenuhličitanu sodného připraveného z 50 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (NaHCOý) + 150 ml vody (2x100 ml). 0.1N roztokem HC1 (50 ml) a znovu vodným chloridem sodným (1x50 ml). Výsledný žlutavý roztok se vysuší MgSO₄ a zkoncentruje. Olejovitý zbytek se nechá vykrystalovat z ethylacetátu (6 ml) a dichlomethanu (2,4 ml) tak, že se nejprve zahřeje na 50°C a poté ochladí na 4°C. Po filtraci se matečný louh zkoncentruje na polovinu a uchovává při 4°C. čímž se získá druhá frakce krystalů. Celkem se izoluje 2,48 g sloučeniny 6 (R = CH(CH₃)₂). 'H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 11,95 (br s, 1H, PhOH); 9,9 (s, CHO, 1 H), 8,04 (s, pyrimidin. 1 H); 6,44 (s, ArH, 1 H), 4,15 (s, CH₂, 2H), 3,93 (s, OCH₃, 3H); 3,90 (s, OCH₃. 3H); 2,7-2,8 (m, CH, 2H); 1,2-1,25 (m, CH₃, 12H).

Příklad 11

V tomto příkladu je ilustrována příprava N-[5-(2-formyl-3-hydroxy-4,5- dimethoxybenzyl)-4-isobutyrylaminopyrimidin-2-yl]isobutyramidu 6 (R = CH(CH₃)₂) (stupeň A3)

Sloučenina 3 (3 g, 6,54 mmol) se pod atmosférou argonu při teplotě místnosti (15 minut) rozpustí v DCM (28 ml). Výsledný roztok se během 30 minut ochladí na 0°C a v jedné dávce se k němu přidá AICI₃ (2,07 g, 15,52 mmol, 2,3 ekv.). Zbarvení roztoku se během 30 minut změní ze žlutého na tmavě žluté a A1C1₃se rozpustí 30minutovým mícháním při 0°C. Ke směsi se poté přidá Nal (1,5 g, 10 mmol, 1,5 ekv.). Směs se zahřeje na 30°C a po lOminutovém míchání se k ní pomalu přidá acetonitril (1,6 ml). Po 2hodinovém míchání při 30°C se přidá dalších 0,2 ml acetonitrilu. Po 4 hodinách míchání při 30°C se reakční teplota na jednu hodinu zvýší na 35°C. přičemž dojde k vyloučení krystalů. Vzniklá suspenze se ochladí na teplotu místnosti a nalije do dobře míchané směsi 20 ml DCM a 30 ml vody obsahující 2 ml koncentrované HC1 (ochlazené na 10°C). Po lOminutovém míchání se čirá žlutá směs znovu nalije do reakční nádoby a míchá, dokud se všechny zbytky nerozpustí (asi 30 minut). Organická fáze se oddělí a promyje 25 ml směsi 10 ml 1N HC1 a 15 ml vody a 25 ml směsi 10 ml nasyceného NaCl a 15 ml vody. Vodné vrstvy se extrahují 2 x 20 ml DCM. Spojený organický roztok se vysuší MgSO.j, přefiltruje a odpaří. Žlutý krystalický zbytek (2,62 g) se nechá vykrystalovat z DCM/TBME. Získá se 2.48 g sloučeniny 6 (R = CH(CH₃)₂). ’HNMR (CDCI₃, 400 MHz) δ: 11,95 (br s, 1 H, PhOH); 9,9 (s, CHO, 1 H), 8.04 (s, pyrimidin, 1 H); 6.44 (s, ArH, 1H), 4,15 (s, CH₂, 2H), 3,93 (s. OCH₃, 3H); 3.90 (s. OCH₃, 3H); 2,7-2.8 (m, CH. 2H); 1,2-1.25 (m, CH₃, 12H).

Příklad 12

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-acetyl-5-chlor-lH-indol2-karboxylové kyseliny 8 (stupeň A4)

K suspenzi sloučeniny 7 (30 g, 135 mmol), v DCM (675 ml) se při 0°C pod atmosférou argonu pomalu přidá chlorid hlinitý (36 g, 270 mmol). Reakční směs se 30 minut míchá a při 0°C se k ní přikape acetylchlorid (9,6 ml, 135 mmol). Zlatožlutá reakční směs se další hodinu míchá, dokud reakce není dokončena (ověření pomocí LC-MS). Poté se reakční směs nalije na led (250 ml) a přídavkem 4N roztoku NaOH (80 ml) se její pH upraví na 4,5. Fáze se oddělí a vodná vrstva se extrahuje DCM (2x200 ml). Všechny spojené organické vrstvy se promyjí vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Získá se sloučenina 8 ve formě béžové pevné látky, která se použije v následujícím reakčním stupni bez dalšího přečištění.

'H-NMR (CDCl·,, 400 MHz) δ: 12,6 (br s, 1 H), 8,15 (d. J= 2 Hz, 1 H), 7,47 (d, J= 8 Hz, 1 H), 7,27 (dd, J = 8.6 Hz. J₂= 2.6 Hz, 1 H), 3.08 (s, 3 H), 2,84 (s, 3 H), 2,37 (s, 3 H). t.t.: 150-155°.

Příklad 13

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-acetyl-5-chlor-l-(toluen4-suifonyI)-lH-indol-2-karboxylové kyseliny 9 (stupeň B4) g (151,1 mmol) sloučeniny 8 se při teplotě místnosti pod atmosférou argonu rozpustí v DCM (250 ml). Ke vzniklému roztoku se přidá triethylamin (36,4 ml) a tosylchlorid (31,7 g, 166.2 mmol). Reakční směs se přes noc míchá. Nadbytek tosylchloridu se odstraní tak, že se k reakční směsi přidá 15 ml roztoku amoniaku ve vodě (24%). Směs se 10 minut míchá a poté promyje 0,lN roztokem NaOH (50 ml) a vodným chloridem sodným (50 ml). Organické fáze se vysuší MgSO₄, odpaří na polovinu a přidává se k nim cyklohexan (500 ml), dokud se nezačne srážet produkt. Reakční směs se znovu odpaří na objem asi 200 ml. Sraženina se odfiltruje a promyje cyklohexanem. Po vysušení za vakua se získá

51,7 g bílého prášku.

'H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 8,29 (d, J= 2,8 Hz, 1 H), 8,03 (d, J= 8,4 Hz, 2 H), 7,95 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 7,33 (dd, Jj= 10 Hz. J₂= 2 Hz, 2 H), 7.28 (d, J= 8.8 Hz, 1 H), 3,24 (s, 3 H), 3,03 (s, 3 H), 2,50 (s, 3 H). 2.36 (s, 3 H). t.t.: 96-100°C.

Příklad 14

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-(2-bromacetyl)-5-chlorl-(toluen-4-sulfonyl)-lH-indol-2-karboxylové kyseliny 10 (stupeň C4)

Roztok sloučeniny 9 (25 g, 59,7 mmol) v dioxanu (250 ml) se ochladí ve vodní lázni a příkape se k němu 2M roztok bromu (9,55 g, 1 ekv.) v DCM. Reakční směs se dále chladí a průběh reakce se sleduje pomocí HPLC. Po dokončení přídavku bromu se reakční směs odpaří do sucha. Ke zbytku se přidá I litr AcOEt. Organická vrstva se promyje nasyceným NaHCO₃, vodným chloridem sodným a vysuší MgSO₄. Předpokládaná sloučenina 10 se poté překrystaluje z horkého AcOEt (100 ml). Získá se 18,2 g produktu.

‘H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 8,28 (d, J= 2 Hz, 1 H), 7,97-8,01 (m, 3 H), 7,37 (dd, J)= 9.2 Hz, J₂= 2 Hz, 1 H), 7,28 (d, J= 8 Hz, 2 H). 4,23-4,48 (AB systém. J=

12.2 Hz, 2 H). 3,26 (s, 3 H). 3,04 (s, 3 H), 2,36 (s. 3 H). t.t.: 142-146°C.

Příklad 15

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-(2-bromacetyl)-5-chlor-

H-indol-2-karboxylové kyseliny 11 (stupeň B5)

2M roztok bromu (3 g, 0.5 ekv.) v DCM (10 ml) se při teplotě místnosti přikape k roztoku sloučeniny 8 (10 g, 37,88 mmol) v dioxanu (120 ml). Vzniklá směs se 30 minut míchá a poté se k ní přidá další 2M roztok bromu (0,25 ekv.) v DCM. Průběh reakce se sleduje pomocí HPLC a dokončení reakce se zajistí přídavkem dalšího roztoku bromu v DCM (0,1 ekv.). Po dokončení přídavku bromu se začne srážet bromidová sůl indolu. Směs se odpaří do sucha a přidá se k ní AcOEt (100 ml). Organická vrstva se promyje 2% NaHCO₃ (50 ml), vodou (50 ml) a vodným chloridem sodným (30 ml), vysuší MgSOj, přefiltruje a odpaří do sucha. Předpokládaná sloučenina se poté překrystaluje z horkého AcOEt (150 ml). Získá se 9,1 g sloučeniny 11.

'H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 12,68 (br s, 1 H), 8.09 (d, J= 2 Hz, 1 H). 7.48 (d. J=

8.4 Hz, 1 H), 7.29 (dd, Jf= 8,4 Hz, J₂= 2 Hz, 1 H). 4,46 (s, 2 H), 3,07 (s, 3 H), 2,82 (s, 3 H). t.t.: 165-170°C (za rozkladu).

Příklad 16

V tomto příkladu je ilustrována příprava terč-butylesteru 3-(2-bromacetyl)-5-chlor2-dimethylkarbamoy 1 indol-1-karboxylové kyseliny 12 (stupeň C5)

K roztoku sloučeniny 11 (11 g, 32 mmol) ve směsi THF/CH₃CN (50 ml. 1/1) se přidá 2,6-lutÍdin (4,47 ml, 38,4 mmol) a poté (Boc)₂O (9,07 g. 41.6 mmol). Výchozí látka se zcela nerozpustí. Když se ke směsi přidá DMAP (391 mg, 3.2 mmol), dojde k rychlé solubilizaci nerozpustné sloučeniny a reakční směs pomalu nabude žlutého/oranžového zbarvení. Po 15 minutách je reakce již dokončena. Směs se odpaří do sucha a přidá se k ní AcOEt (300 ml). Organické vrstvy se třikrát promyjí 0.1N HC1 (50 ml), vodou (100 ml) a vodným chloridem sodným (50 ml). Organické vrstvy se vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Předpokládaná sloučenina se překrystaluje z AcOEt (nebo směsi cyklohexan/AcOEt 8/2; 100 ml). Získá se 9,9 g sloučeniny 12.

'H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 8,16 (d, J= 9,2 Hz, 2 H), 7.51-7,48 (dd, J,= 9,2 Hz, J₂= 2,8 Hz, 1 Η), AB systém [4,53 (d, J= 17.6 Hz, 1 H). 4,44 (d, J= 17.6 Hz. 1 H)], 3,04 (s, 3 H), 2,85 (s, 3 H), 1.56 (s, 9 H). t.t.: 110-115 C.

Příklad 17

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-[4-(2,4-bis-isobutyrylaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-karbonyl]-5-chlor-l(toluen-4-sulfonyl)-lH-indol-2-karboxylové kyseliny 13 (R = CH(CH₃)₂) (stupeň A6)

K roztoku sloučeniny 6 (5 g, 11.26 mmol, R = CH(CH₃)₂) v THF (40 ml) se přidá přefiltrovaný roztok tBuOK (1,14 g, 0,95 ekv.) v THF (10 ml). Výsledná směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti, přičemž se k ní pomalu přidává sloučenina 10 (5,35 g, 10,725 mmol). Ke směsi se po 1 hodině přidá další tBuOK (184 g, 0,15 ekv.). Po další hodině je reakce dokončena. Reakční směs se nalije do 0,05N roztoku HC1 a extrahuje třikrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Sloučenina 13 (R = CH(CH₃)₂) se v následující reakci (stupni B6) použije bez dalšího přečištění. R_t (02) = 2,75 minuty.

Příklad 18

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-{4-[2,4-bis-(2,2dimethy!propionylamino)pyrimidin-5-ylmethyI]-6.7-dimethoxybenzofuran-2 ylmethyl}-5-chlor-l-(toluen-4-sulfonyl)-lH-indol-2-karboxylové kyseliny 13 (R = C(CH₃)₃) (stupeň A6)

Roztok sloučeniny 10 (1,03 g, 2,08 mmol) v 8 ml DMF se ochladí na 0^ůC a přidá se k němu roztok sloučeniny 6 (0,98 g, 1 ekv., R = C(CH₃)₃) a poté uhličitan draselný (0.86 g, 3 ekv.). Výsledný roztok se zahřeje na teplotu místnosti, při níž se 16 hodin míchá a přidá se k němu EtOAc (150 ml). Směs se promyje 0,!N HC1 (100 ml), dvakrát vodou (200 ml) a vodným chloridem sodným. Vodná vrstva se promyje dalším EtOAc (100 ml). Organické vrstvy se vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Surový produkt se přečistí flash chromatografií na silikagelu (AcOEt/cyklohexan 6/4). Získá se 0,93 g sloučeniny 13 (R = C(CH₃)₃).

Příklad 19

V tomto příkladu je ilustrována příprava mesylátové soli dimethylamidu 5-chlor-3[4-(2,4-diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-karbonyl]-lHindol-2-karboxyIové kyseliny 14 (stupeň B6)

Surová sloučenina 13 (R = CH(CH₃)₂) se rozpustí ve směsi THF/H₂O (30 ml, 3/1). K roztoku se přidá NaOH (2,145 g, 53,625 mmol). Výsledná směs se během 4 hodin zahřívá na 50°C, poté nalije do vodného chloridu sodného a extrahuje třikrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Získá se 6.2 g surové látky 14. Surová látka se rozpustí v MeOH (18 g) a k roztoku se přidá 35 ml iPrOH. 20 g rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku (41 °C, 110 mbar, 11 kPa) a ke zbytku se přidá 15 ml iPrOH. Směs se nechá stát 1 hodinu při teplotě místnosti a 2 hodiny při 4°C, odstraní se z ní 11 g rozpouštědla a nakonec se k ní přidá 15 ml iPrOH. Vzniklá suspenze se 18 hodin nechá stát při 4°C. Krystaly se odfiltrují, promyjí 20 ml iPrOH a vysuší za vakua. Získá se 5,0 g sloučeniny 14 ve formě mesylátové soli s 1 ekvivalentem iPrOH.

’Η-NMR (CDC1₃. 400 MHz) δ: 12.8 (s, 1 Η), 11,58 (brs, 1 H), 8,36 (brs. 1 H), 7,96 (s + brs, 2 H), 7,66 (s. 1 H), 7,55 (d - brs, 8,4 Hz. 3 H), 7,34 (d, J= 2 Hz, 1 H), 7,13 (s, 1 H). 4.36 (brs, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3,90 (s, 2 H), 3,88 (s, 3 H), 2.99 (s. 3 H). 2,76 (s, 3 H), 2,34 (s, 3 H, MeSO₃H). R_t (02) = 1,33 minuty.

Příklad 20

V tomto příkladu je ilustrována příprava mesylátové soli dimethylamidu 5-chlor-3[4-(2,4-diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-karbonyl]-lHindol-2-karboxylové kyseliny 14 (stupně A6 a B6 v jedné reakční nádobě)

Mírně zakalený roztok tBuOK (8,62 g, 97% obsah, 74,54 mmol, 1,05 ekv.) v THF (170 ml, čerstvě předestilovaném nad sodíkem) se během 25 minut při 20°C přikape k intenzivně míchanému světle žlutému roztoku sloučeniny 6 (38,2 g, 95% obsah, 81,64 mmol), 1,15 ekv.) v THF (330 ml, čerstvě předestilovaném nad sodíkem). Během přídavku roztoku tBuOK je pozorován exotermický jev (vnitřní teplota pomalu vzroste z 20°C na 24°C) a vznikne intenzivně žlutá suspenze. Směs se 90 minut míchá při 20°C a v jedné dávce se k ní přidá sloučenina 10 (37,2 g, 95% obsah, 70,99 mmol, 1 ekv.) ve formě prášku. Výsledná suspenze se 90 minut míchá při 25°C, přičemž je pozorována změna zbarvení ze žlutého na oranžové. Poté se přidá pevný tBuOK (0,493 g, 97% obsah, 4,26 mmol, 0,06 ekv.) ve formě prášku. Výsledná směs se míchá dalších 90 minut při 30°C, přidá se k ní roztok hydroxidu sodného (110 ml. 440 mmol, 4M, 6,2 ekv.). Zbarvení roztoku se změní na tmavě žluté. Směs se 135 minut míchá při 58°C (vnitřní teplota), poté ochladí na teplotu místnosti a její pH se přídavkem vodného roztoku HC1 (75 ml, 300 mmol, 4M) sníží na přibližně 6,5. Ke směsi se přidá nasycený roztok NaHCO₃ (700 ml), přičemž je pozorován slabý vývoj CO₂. Směs se extrahuje směsí ethylacetát/isopropylalkohol 85/15 (2x1600 ml). Organické vrstvy se promyjí směsi vody a vodného chloridu sodného 90/10 (2x200 ml) a vodným chloridem sodným (1x200 ml), přefiltrují přes vrstvu celitu, spojí a odpaří do sucha. Vzniklá žlutá pěna se 16 hodin nechá stát za vakua při teplotě místnosti. Surový produkt (45 g. což odpovídá

70,2 mmol) se rozpustí v methanolu (140 ml), čímž se získá tmavě žlutý roztok. K roztoku se při teplotě místnosti přidá methansulfonová kyselina (5,28 ml, 81.4 mmoi, 1,146 ekv.) a poté isopropylaikonol (224 mi). Výsledný čirý roztok se zaočkuje. Směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti, přičemž vzniknou světle žluté krystaly. Část rozpouštědla (asi 150 ml) se pomalu oddestiluje při 40°C za tlaku 180 mbar (18 kPa). Srážení se zintenzivní a pomalu se tvoří žluté krystaly.

Suspenze se 2 hodiny míchá při 45°C, poté během 90 minut pomalu ochladí na teplotu místnosti, při níž se 6 hodin míchá. Krystaly se odfiltrují a promyjí směsí isopropylalkohol/methanol 95/5 (200 ml). Získá se 42,5 g žlutých krystalů sloučeniny 14 ve formě mesylátové soli s 1 ekvivalentem iPrOH.

’Η-NMR (CDC1₃. 400 MHz) δ: 12,8 (s, 1 Η), 11,58 (brs, 1 H), 8,36 (brs, 1 H), 7,96 (s + brs, 2 H), 7,66 (s, 1 H), 7,55 (d + brs, J= 8,4 Hz, 3 H), 7,34 (d, J= 2 Hz. 1 H), 7,13 (s, 1 H). 4,36 (brs. 1 H), 3,93 (s, 3 H). 3,90 (s, 2 H), 3,88 (s, 3 H), 2,99 (s, 3 H), 2,76 (s, 3 H), 2,34 (s, 3 H, MeSO₃H). R_t (02) = 1,33 minuty.

Příklad 21

V tomto příkladu je ilustrována příprava terc-butylesteru 3-[4-(2,4-bis-isobutyrylaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-diemthoxybenzofuran-2-karbonyl]-5-chlor-2dimethylkarbamoylindol-l-karboxylové kyseliny 15 (R = CH(CH₃)<) (stupeň A7)

Přefiltrovaný roztok tBuOK (1,14 g, 0,95 ekv.) v THF (10 ml) se přidá k roztoku sloučeniny 6 (5 g, 11.26 mmol, R = CH(CH₃)2) v THF (40 ml). Vzniklá směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti a pomalu se k ní přidá sloučenina 12 (4,75 g, 10,725 mmol). Ke směsi se po 1 hodině přidá další tBuOK (184 mg, 0.15 ekv.). Po jedné hodině je reakce dokončena. Směs se nalije do roztoku 0.05N HC1 a extrahuje třikrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Sloučenina 15 (R =

CH(CH₃)₂) se při následující reakci použije bez dalšího přečištění. R_t (01) = 7,77 minuty.

Příklad 22

V tomto příkladu je ilustrována příprava terc-butylesteru 3-{4-[2,4-bis-(2,2-dimethylpropionylamino)pyrimidin-5-ylmethyl]-6,7-dimethoxybenzofuran-2karbonyl}-5- chlor-2-dimethylkarbamoyIindol-l-karboxylové kyseliny 15 (R = C(CH₃)₃) (stupeň A7).

Přefiltrovaný roztok tBuOK (452 mg, 0,95 ekv.) v THF (3 ml) se přidá k roztoku sloučeniny 6 (2 g, 4,24 mmol, R = C(CH₃)₂) v THF (20 ml). Vzniklá směs se 5 minut míchá při teplotě místnosti a přikape se k ní přidá sloučenina 12 (1.88 g, 4,24 mmol) v THF (20 ml). Ke směsi se po 1 hodině přidá další tBuOK (119 mg, 0,25 ekv.). Po jedné hodině se směs nalije do roztoku 0,lN HC1 a extrahuje třikrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí vodou a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří. Získá se surová sloučenina 15 (R = C(CH₃)₃). ’Η-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 8,33 (s, 1 H), 8.20 (s, 1 H), 8,07 (s, 1 H), 8,01 (d, J= 9,2 Hz, 1 H), 7,85 (brs, 2 H), 7,50 (d, J= 2 Hz, 1 H), 7,19 (d, J= 9,8 Hz, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 3,92 (S, 3 H), 3,90 (s, 2 H), 3,75 (s, 3 H), 2,78 (s, 3 H), 2,71 (s, 3 H), 1,47 (s, 9 H), 1,12 (s. 9 H), 0,99 (s, 9 H). R_t (01) = 8.15 minuty.

Příklad 23

V tomto příkladu je ilustrována příprava mesylátové soli dimethylamidu 5-chlor-3[4-(2,4-diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-karbonyl]-lHindol-2-karboxylové kyseliny 14 (stupeň B7).

Surová sloučenina 15 (R= CH(CH₃)₂) se rozpustí ve směsi THF/H₂O (30 ml. 3/1). K roztoku se přidá NaOH (2,15 g, 53,63 mmol). Vzniklá směs se 4 hodiny zahřívá při 50°C, poté nalije do vodného chloridu sodného a extrahuje třikrát AcOEt. Organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Získá se 6,2 g surové sloučeniny 14. Surový produkt se rozpustí v ivicOn 11 o l.j· K roztoku se přidá j 3 ml iPrOH a 20 g rozpouštědla se odstraní za sníženého tlaku (41 °C. 110 mbar, 11 kPa). K suspenzi se přidá 15 ml iPrOH, po 1 hodině se za vakua odstraní 5 g rozpouštědla (41°C, 110 mbar, 11 kPa) a přidá se 15 ml iPrOH. Směs se nechá stát 1 hodinu při teplotě místnosti a 2 hodiny při 4°C, načež se z ní odstraní lig rozpouštědla. Nakonec se přidá 15 ml iPrOH a výsledná suspenze se 18 hodin nechá stát pří 4°C. Krystaly se odfiltrují, promyjí 20 ml iPrOH a vysuší za vakua. Získá se 5,3 g sloučeniny 14 ve formě mesylátové soli s 1 ekvivalentem iPrOH, která má stejné spektrum NMR. jaké je uvedeno v příkladu 19.

Příklad 24

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 3-{4-[2,4-bis-(2.2dimethylpropionylamino)pyrimidin-5-ylmethyl]-6,7-dimethoxybenzofuran-2ylmethyl}-5-chlor-l-(toluen-4-sulfonyl)-lH-indol-2-karboxvlové kyseliny 16 (R = C(CH₃)₃) (stupeň A8)

Sloučenina 13 (0,065 g, 0,075 mmol, R = C(CH₃)₃) se rozpustí v DCE (1 ml). Ke vzniklému roztoku se přidá BF₃.OEt₂ (28 μΐ, 3 ekv.) a poté triethylsilan (36 μΐ, 3 ekv.). Výsledná směs se 1 hodinu míchá při 85°C. poté ochladí na teplotu místnosti, zředí DCM (15 ml), promyje vodou (3x15 ml) a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄ a oddestiluje se z ní rozpouštědlo. Surová směs sloučeniny 16 se použije při dalším experimentu bez dalšího přečištění.

Příklad 25

V tomto příkladu je ilustrována příprava terc-butylesteru 3- [4-[2,4-bÍs-(2,2dimethylpropionylamino)pyrimidin-5-ylmethyl]-6,7-dimethoxybenzofuran-2ylmethyl}-5-chlor-2-dimethylkarbamoylindol-I-karboxylové kyseliny 17 (R = C(CH₃)₃) (stupeň A9)

Sloučenina 15 (0.12 g. 0.147 mmol, R = C(CH₃)₃) se rozpustí v DCE (2 ml). K roztoku se přidá BF₃.OEt₃ (55 μΐ, 3 ekv.) a poté triethylsilan (70 μΐ, 3 ekv.). Reakční směs se 1 hodinu míchá při 85°C, poté ochladí na teplotu místnosti, zředí DCM (15 ml), promyje vodou (3x15 ml) a vodným chloridem sodným, vysuší MgSO₄ a odpaří do sucha. Surová směs sloučeniny 17 (R - C(CH₃)₃) se v následujícím experimentu použije bez dalšího přečištění.

Příklad 26

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4-diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl]-lH-indol-2karboxylové kyseliny I (stupeň A10)

Mesylátová sůl 14 (4,88 g, 6,932 mmol) se rozpustí ve vodě (50 ml). K roztoku se přidá AcOEt (50 ml). Poté se směs rozloží 10% NaHCO₃ (50 ml) a intenzivně míchá. Organické vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje AcOEt (50 ml). Spojené organické vrstvy se promyjí vodou (100 ml) a vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. K nažloutlé sloučenině se přidá iPrOH (30 ml) a poté NaBH₄ (352 mg, 9,317 mmol). Vzniklá směs se 3 hodiny zahřívá na 50°C a poté se k ní přidá voda (50 ml). Vodná směs se extrahuje třikrát AcOEt (vždy 50 ml). Organické vrstvy se promyjí 0,2N NaOH (50 ml) a poté vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Zbytek se překrystaluje z iPrOH. Získá se 2,75 g sloučeniny I.

‘H-NMR (CDC1₃, 400 MHz) δ: 11,64 (s, 1 H), 7,69 (s, 1 H), 7,37 (of, J= 8,8 Hz, I

H). 7.33 (s, 1 H), 7,15 (dd, J]= 8,4 Hz, J₂= 2 Hz, 1 H), 6,80 (s, 2 H), 6,47 (s, 2 H),

r r\ / Z T T\ T> /n 1 \ __ /1 1 r O /AO \ __ 1 ,4 C ,

Π), Ζ,ϊΜ (S, O n). tx_t (v 1 ) — *+,J 1 Hunuiy. ix._t ^uz. j — 1,45 IHiuuiy,

Příklad 27

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyI]-lH-indol-2karboxylové kyseliny I (stupeň A10)

Mesylátová sůl sloučeniny 14 (+1 iPrOH) (1,7 g, 2,41 mmol) se suspenduje v iPrOH (6 ml) a dimethoxyethanu (4 ml). Výsledná suspenze se ochladí v ledové lázni (0°C, 30 minut) a poté se k ní pomalu přidá NaBFU (364 mg, 9,64 mmol, 4 ekv.) (intenzivní vývoj H₂). Po 5 minutách vznikne čirý žlutý roztok. Po 2 hodinách je sloučenina 14 zcela redukována na alkohol 14A. Roztok se zahřeje na teplotu 35°C, při níž se udržuje po dobu 5 hodin. Poté se reakční směs ochladí v ledové lázni a pomalu se k ní přidá 1N HC1 (15 ml). Výsledný roztok se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti, poté se odstraní polovina organických rozpouštědel a přidá se ethylacetát (20 ml). Ke směsi se přidá 5% NaOH (6 ml) a nasycený NaCl (10 ml). Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje dalším ethylacetátem (20 ml). Organické vrstvy se promyjí nasyceným NaCl (20 ml), přefiltrují přes celit a odpaří do sucha (1,41 g). Získaná žlutá pěna se rozpustí v methanolu (2 ml), roztok se zaočkuje a 24 hodin nechá krystalizovat. Krystaly se odfiltrují, promyjí 10 ml iPrOH/MeOH (1 :1) a suší za vakua při teplotě místnosti. Získá se 1,2 g sloučeniny I, která má stejné spektrum NMR. jaké je uvedeno v příkladu 26.

Příklad 28

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6.7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl]-lH-indol-2karboxylové kyseliny I (stupeň A10)

Mesylátová sůl 14 (6 % isopropanol) (20,0 g, 29,8 mmol) se při teplotě místnosti suspenduje v tetrahydrofuranu (THF) (200 ml). Výsledná suspenze se ochladí v ethanolové lázni vybavené zařízením Cryocool (-25 C, 1 h) a poté se k ní ve třech dávkách (3 x 10 ml každých 15 minut) pomalu přikapé Zn(BH₄)2 (1,5 mol ekv., 1,5M roztok v THF, 30 ml). Během přídavku je pozorován určitý vývoj FF. Po dalších 15 minutách míchání se suspenze zahřeje na 0°C a po dobu 1 hodiny se k ní kontinuálně přidává roztok HC1 (1 ekv., 4M roztok v dioxanu, 745 ml, 124 μΐ/min). Vzniklý roztok se dalších 15 minut míchá při 0°C a poté během 2 hodin nechá zahřát na 20°C. Čirý žlutý roztok se v ledové lázni ochladí na 0°C a během 25 minut se k němu pomalu přikape voda (80 ml). K vodné směsi se po jedné hodině při 0°C během 10 minut přikape 37% HC1 ve vodě (100 ml). Roztok se 14 hodin míchá při teplotě místnosti. Reakční směs se v ledové lázni ochladí na 0°C a pomalu se k němu přidá 10N NaOH (140 ml). Hodnota pH roztoku je přibližně 9. Světle žlutý roztok se třikrát extrahuje směsí ethylacetát/isopropanol (85:15, 3x400 ml). Organické vrstvy se promyjí směsí voda/ΙΟΝ NaOH (80:20, 100 ml), voda/nasycený NaCl (10:40, 50 ml) a dvakrát směsí voda/nasycený NaCl (5:45, 50 ml). Organické vrstvy se vysuší síranem sodným a odpaří do sucha. Získaná žlutá pevná látka se při 45°C 3 hodiny míchá v methanolu, přičemž se pěna změní na krystalickou sraženinu. Výsledná suspenze se 24 hodin míchá při teplotě místnosti. Krystaly se odfiltrují, promyjí 20 ml methanolu a 14 hodin suší za vakua při teplotě místnosti. Získá se 13.56 g sloučeniny I, která má stejné spektrum NMR, jaké je uvedeno v příkladu 26.

Příklad 29

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-{[4-(2,4 diaminopyriniidiri-5-ylinvthyl)-6,7-diiiičthuxybciizAjfuraii-2-yl]hydruxyiíicthyJ}-lH indol-2-karboxylové kyseliny 14A (stupeň BIO)

Mesylátová sůl sloučeniny 14 (100 mg, 0,155 mmol) se rozpustí ve směsi iPrOH/MeOH (2/0,5 ml). Reakční směs se ochladí na -20°C a poté se k ní přidá tetrahydroboritan sodný (17.6 mg, 0,466 mmol). Výsledná směs se 1 hodinu míchá při -20°C a poté se k ní přidá 0,lN NaOH (5 ml). Vzniklá směs se extrahuje třikrát AcOEt (vždy 15 ml). Organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. V následujícím stupni se použije přímo surová směs obsahující sloučeninu 14A. R, (02) = 1,32 minuty.

Příklad 30

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl]-lH-indol-2karboxylové kyseliny I (stupeň C10)

Sekundární alkohol 14A (50 mg, 90,9 pmol) se rozpustí v THF (2 ml). Reakční směs se ochladí na -20°C a přidá se k ní tetrahydroboritan sodný (10,3 mg, 0,273 mmol). Výsledná směs se 5 minut míchá při -20°C a poté se k ní pomalu přidá BF₃.OEt₂ (34 μΐ, 50%). Po přidání každé kapky BF₃.OEt₂ směs zfialoví, ale fialové zbarvení znovu vymizí. Po dokončení přídavku BF₃.OEt₂ se fialové zbarvení udrží po dobu 3 minut a poté znovu vznikne světle žlutý roztok. Reakce je dokončena po 5 minutách. Ke směsi se přidá 0,lN NaOH (10 ml) a směs se extrahuje dvakrát EtOAc (vždy 15 ml). Organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Získá se sloučenina I, která má stejné signály LCMS, jaké jsou uvedeny v příkladu 26.

Příklad 31

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4diamÍnopyrimÍdin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl]-lH-indol-2karboxylové kyseliny 1 (stupeň A11).

Surový produkt z příkladu 20 (sloučenina 16. R = C(CH₃)₃) se rozpustí v methanolu (2 ml) a k roztoku se přidá 4N NaOH (10 ekv.). Vzniklý roztok se 3 hodiny míchá při 50°C, poté ochladí na teplotu místnosti a extrahuje dvakrát EtOAc (vždy 20 ml). Organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Získá se konečná sloučenina I, která má stejné signály LCMS, jaké jsou uvedeny v příkladu 26.

Příklad 32

V tomto příkladu je ilustrována příprava dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl]-lH-indol-2karboxylové kyseliny I (stupeň A12)

Surový produkt z příkladu 21 (sloučenina 17, R = C(CH₃)₃) se rozpustí v methanolu (4 ml) a k roztoku se přidá 4N NaOH (10 ekv,). Vzniklý roztok se 3 hodiny míchá při 50°C. poté ochladí na teplotu místnosti a extrahuje dvakrát EtOAc (vždy 30 ml). Organické vrstvy se promyjí vodným chloridem sodným (50 ml), vysuší MgSO₄, přefiltrují a odpaří do sucha. Získá se konečná sloučenina I, která má stejné signály LCMS, jaké jsou uvedeny v příkladu 26.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob výroby sloučeniny vzorce I (I) za použití nového meziproduktu vzorce 6 kde R představuje -C(CH₃)₃ nebo -CH(CH₃)₂, jako výchozí látky.

při němž se sloučenina vzorce 6 nechá reagovat se sloučeninou vzorce 10 nebo 12 kde R má význam uvedený v definici vzorce 6, za vzniku sloučeniny vzorce 13 respektive 15 kde R má význam uvedený v definici vzorce 6, nová sloučenina vzorce 13 nebo 15 podrobí deprotekci za vzniku nového meziproduktu vzorce 14 (14) a ketonová karbonylskupina ve sloučenině vzorce 14 transformuje jednostupňovou nebo dvoustupňovou redukcí o sobě známým způsobem za vzniku cílové sloučeniny vzorce I.

2,2-dimethylpropionamidu (vzorce 2 (R = C(CH₃)₃)),

N-[4-isobutyrylamino-5-(3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]isobutyramidu (vzorce 2 (R = CH(CH₃)₂)),

N-[4-(2,2-dimethylpropionylamino)-5-(2-formyl-3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamidu (vzorce 3 (R = C(CH₃)₃)),

N-[5-(2-fbrmyl-3,4,5-trimethoxybenzyl)-4-isobutyrylaminopyrimidin-2-yl]isobutyramidu (vzorce 3 (R = CH(CH₃)₂)),

N-[4-(2.2-dimethylpropionyiamino)-5-(2-jod-3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2yl]-2.2-dimethyipropionamidu (vzorce 5 (R = C(CH₃)₃)).

N-[5-(2-jod-3,4.5-trimethoxybenzyl)-4-isobutyrylaminopyrimidin-2-yl]isobutyramidu ( vzorce 5 (R = CH(CH₃)₂)),

N-[4-(2.2-dimethylpropionylamino)-5-(2-formyl-3-hydroxy-4,5-dimethoxybenzyl)pyrimidin-2-yl]-2,2-dimethylpropionamidu (vzorce 6 (R = C(CH₃)₃)),

N-[5-(2-formyl-3-hydroxy-4,5-dÍmethoxybenzyl)-4-isobutyrylaminopyrimidin-2yljisobutyramidu (vzorce 6 (R = CH(CH₃)₂)), dimethylamidu 3-acetyl-5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (vzorce 8), dimethylamidu 3-acetyl-5-chlor-l-(toluen-4-sulfbnyl)-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (vzorce 9), dimethylamidu 3-(2-bromacetyl)-5-chIor-l-(toluen-4-sulfbnyl)-lH-indol-2karboxylové kyseliny (vzorce 10), dimethylamidu 3-(2-bromacetyl)-5-chlor-lH-indol-2-karboxylové kyseliny (vzorce

11), terc-butylesteru 3-(2-bromacetyl)-5-chlor-2-dimethylkarbamoylindol-lkarboxylové kyseliny (vzorce 12), dimethylamidu 3-[4-(2,4-bis-isobutyrylaminopyrimidin-5-yImethyl)-6,7dimethoxybenzofuran-2-karbony l]-5-chlor-1 -(toluen-4-sulfony 1)-1 H-indol-2karboxylové kyseliny (vzorce 13 (R = CH(CH₃)2)), dimethylamidu 3-{4-[2,4-bis-(2,2-dimethylpropionylamino)pyrimidÍn-5-ylmethyl]-

6.7- dimethoxy benzofuran-2-y Imethy I} -5-chlor-1 -(toluen-4-sulfonyl)-1 H-indo 1-2karboxylové kyseliny (vzorce 13 (R = C(CH₃)₃)), mesylátové soli dimethylamidu 5-chlor-3-[4-(2,4-diaminopyrimidin-5-ylmethyl)-

6.7- dimethoxybenzofuran-2-karbonyl]-l H-indol-2-karboxylové kyseliny (vzorce

14), terc-butylesteru 3-[4-(2,4-bis-isobutyrylarninopyrimidin-5-ylrnethy 1)-6,7dimethoxybenzofuran-2-karbonyl]-5-chlor-2-dimethylkarbamoylindol-lkarboxylové kyseliny (vzorce 15 (R = CH(CH₃)₂)), terc-butyiesteru 3-(4-[2,4-bis-(2,2-dimethylpropionylamino)pyrimidin-5ylmethyl]-6,7-dimethoxybenzofuran-2-karbonyl}-5-chlor-2-dimethylkarbamoylindol-1-karboxylové kyseliny (vzorce 15 (R = C(CH₃)₃)), dimethylamidu 3-{4-[2,4-bis-(2,2-dimethylpropionylamino)pyrimidin-5-ylmethyl]-

2. Redukce sloučeniny vzorce 14 (14) borhydridem při teplotě v rozmezí -20°C až 70°C, podle použitého borhydridu nebo dvoustupňovou redukcí přes nový meziprodukt vzorce 14A (I4A) při níž se v prvním stupni používá tetrahydroboritanu sodného při -20°C nebo katalyzátoru obsahujícího ruthenium při teplotě místnosti a ve druhém stupni se používá tetrahydroboritanu sodného při asi 0°C a fluoridu boritého nebo trifluoroctové kyseliny jako katalyzátoru, za vzniku cílové sloučeniny vzorce I.

3. Nové meziprodukty zvolené ze souboru sestávajícího z

N-[

4-(2,2-dimethylpropionylamino)-

5-(3.4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidin-2-ylj-

6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl}-5-chlor-l-(toluen-4-sulfonyl)-lH-indol-2karboxylové kyseliny (vzorce 16 (R = C(CH₃)₃)), dimethylamidu 3-[4-(2,4-bis-isobutyrylaminopyrimidin-5-ylmethy 1)-6,7dimethoxybenzofuran-2-y lmethyll-5-chlor-1 -(toluen-4-sulfonyl)-1 H-indol-2karboxylové kyseliny (vzorce 16 (R - CH(CH₃)₂)), terc-butylesteru 3-{4-[2,4-bis-(2,2-dÍmethylpropionyIamino)pyrimidin-5ylmethyl]-6,7-dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl}-5-chlor-2-dimethylkarbamoylindol-1-karboxylové kyseliny (vzorce 17 (R = C(CH₃)₃)), terc-butylesteru 3-(4-(2,4-bis-isobutyrylaminopyrimidin-5-ylmethyl)-6,7dimethoxybenzofuran-2-ylmethyl]-5-chlor-2-dimethylkarbamoylindoi-lkarboxylové kyseliny (vzorce 17 (R = CH(CH₃)₂)).