CZ238197A3 - Growth hormone formation stimulating compounds - Google Patents

Growth hormone formation stimulating compounds

Info

Publication number
CZ238197A3
CZ238197A3 CZ972381A CZ238197A CZ238197A3 CZ 238197 A3 CZ238197 A3 CZ 238197A3 CZ 972381 A CZ972381 A CZ 972381A CZ 238197 A CZ238197 A CZ 238197A CZ 238197 A3 CZ238197 A3 CZ 238197A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
naphthyl
independently
hydrogen
ethyl
amino
Prior art date
Application number
CZ972381A
Other languages
English (en)
Inventor
Jesper Lau
Bernd Peschke
Thomas Kruse Hansen
Nils Langeland Johansen
Michael Ankersen
Original Assignee
Novo Nordisk As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Novo Nordisk As filed Critical Novo Nordisk As
Publication of CZ238197A3 publication Critical patent/CZ238197A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/06—1,2,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,2,4-oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/10—Drugs for disorders of the endocrine system of the posterior pituitary hormones, e.g. oxytocin, ADH
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C233/00—Carboxylic acid amides
    • C07C233/01—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C233/34—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by amino groups
    • C07C233/35—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by amino groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom
    • C07C233/38—Carboxylic acid amides having carbon atoms of carboxamide groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by amino groups with the substituted hydrocarbon radical bound to the nitrogen atom of the carboxamide group by an acyclic carbon atom having the carbon atom of the carboxamide group bound to a carbon atom of an acyclic unsaturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/22—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton having nitrogen atoms of amino groups bound to the carbon skeleton of the acid part, further acylated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/28—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C07C237/32—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring of the carbon skeleton having the nitrogen atom of the carboxamide group bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/28—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring of the carbon skeleton
    • C07C237/36—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atom of at least one of the carboxamide groups bound to a carbon atom of a non-condensed six-membered aromatic ring of the carbon skeleton having the nitrogen atom of the carboxamide group bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/36—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/60—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D211/62—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/10—1,3,4-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,3,4-oxadiazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D277/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings
    • C07D277/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings
    • C07D277/20—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D277/32—Heterocyclic compounds containing 1,3-thiazole or hydrogenated 1,3-thiazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D277/56—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/60—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Fodder In General (AREA)

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká nových sloučenin, prostředků, které je obsahují, a j jejich použití pro léčení poruch následkem nedostatku růstového hormonu. I
Dosavadní stav techniky i
Růstový hormon stimuluje růst všech tkání, které jsou růstu schopné, a má řadu účinků na metabilismus, např. stimulaci syntézy bílkovin a mobilizaci volných ‘ mastných kyselin pro převedení cukrů na mastné kyseliny v energetickém metabolismu. Nedostatek růstového hormonu vede k řadě vážných chorob např. nanismu. <
Růstový hormon se tvoří v hypofýze. Jeho tvorba je přímo nebo nepřímo řízena I řadou hormonů a nervových přenašečů a stimulována „hormonem stimulujícím růstový hormon“ (GHRH) a inhibována somatostatinem. V obou případech jsou f hormony uvolňovány hypotalamem, ale jejich působení je primárně zprostředkováno přes specifické receptory v hypofýze. Dále byly popsána i jiné sloučeniny, které stimulují tvorbu růstového hormonu v hypofýze. Např. arginin, L-3,4-dihydroxyfenylalanin (L-Dopa), glukagon, vasopresin, PACAP (peptid | aktivující adenylylcyklasu hypofýzy), antagonisté muskarinových receptorů a 5 umělý hexapeptid GHRP (peptid stimulující růstový hormon) stimulují I endogenní růstový hormon buď přímým působením na hypofýzu nebo působením na tvorbu GHRH a/nebo somatostatinu v hypotalamu.
U chorob, kdy je třeba zvýšit hladinu růstového hormonu, jeho bílkovinná povaha dovoluje pouze nitrožilní podávání. I jiné přímo působící přirozené ' stimulující látky např. GHRH a PCAP jsou delší polypeptidy, což je opět příčinou nemožnosti orálního podávání.
Již dříve bylo pro zvýšení hladiny růstového hormonu u savců navrženo použití některých sloučenin - např. EP 18 072, EP 83 864, WO 89/07110, WO 89/01711, WO 89/10933, WO 88/9780, 10 WO 83/02272, WO 91/18016, WO 92/01711, WO 93/04081, WO 95/17422, WO 95/17423 a WO 95/14666.
• · ·
U prostředků obsahujících sloučeniny stimulující tvorbu růstového hormonu je důležitá jak jejich účinnost, tak jejich biologická dostupnost. Proto je předmětem předkládaného vynálezu získání sloučenin stimulujících tvorbu růstového hormonu, který má proti známým peptidům tohoto typu zlepšené vlastnosti.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká sloučenin obecného vzorce I
G
J (0 kde n je 0 a 1, m je 1 a 2, p je 0,1 a 2,
A je
R1
—ch=ch— nebo
kde R1 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W je O nebo S
B je
R2
-CH—CH— nebo
R2
kde R2 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W' je O nebo S • · · ·
D je o
N_(CH2)r-
o
N-CH— nebo
-(CH,)— (CR7R8)s- (CH,)t-(M)qkde R3, R4, R5, R6, R7 R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl volitelně substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 volitelně tvoří -(CH2)j-U-(CH2)r, kde „i“ a „j“ jsou nezávisle 1 a 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba
M je nebo volitelně substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
q a s jso nezávisle 0 a 1;
a r+s+t je 0, 1,2, 3 nebo 4;
E je vodík;
-CH-L nebo kde L je vodík, -OR9, CONHR9R10, C1-C6 alkyl volitelně substituovaný hydroxyskupinou nebo C1-C6 alkoxylem,
nebo
V
Y=V kde R9 a R10 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nebo spolu tvoří tvoří -(CH2)kU’-(CH2)i- , kde k a I jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k+l je 3, 4, 5 nebo 6,
U' je O, S, nebo kovalentní vazba;
Xje N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R12) nebo N a Z je C(R12) nebo N
R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)vNR16R17, (CH2)uOR15, haloge, hydroxy, rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl, R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl volitelně substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0 až 6;
R18 ^>Q-(CH2)a- (CR20R21)b-(CH2)d r19
K je vodík nebo kde R18, R19, R20 a R21 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl volitelně substituovaný halogenem, aminoskupinou, C1-C6 alkylaminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem; R18 a R19, R18 a R21, R19 a R20 nebo R20 a R21 volitelně tvoří
-(CH2)k -Z-(CH2)i -, kde k' a Γ jsou nezávisle 1,2 nebo 3 a k+Γ je 3, 4, 5, 6;
Z je O, S nebo kovalentní vazba; b je 0 nebo 1;
„a“ a „d“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4 a a+b je 1 až 4;
Q je > CR22 nebo N, kde R22 je vodík nebo C1-C6 alkyl;
Fje
kde R23 je vodík nebo C1-C6 alkyl, W je O nebo S;
G je vodík, ;
i s
volitelně substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
J je
volitelně substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
nebo její farmaceuticky vhodná sůl a sloučenina obecného vzorce I zahrnuje všechny optické izomery ve formě izolované, čisté nebo částečně čisté i jejich racemické směsi.
Výhodné substituenty sloučenin obecného vzorce I jsou uvedeny v závislých nárocích. Zejména výhodné substituenty jsou uvedeny níže.
Výhodná skupina A je
W kde R1 a W jsou definovány výše.
Výhodná skupina R1 je C1-C6 alkyl, výhodněji C1-C3 alkyl jako methyl, ethyl, cyklopropyl a isopropyl.
m je s výhodou 1 a/nebo p je 1.
Výhodná skupina B je
R2
nebo —ch=ch— vZ
Výhodná skupina R2 je C1-C6 alkyl, výhodněji C1-C3 alkyl jako methyl, ethyl, cyklopropyl a isopropyl.
Výhodná skupina D je
R5 \N-(CHJ--(CR7R8)sR6 ' (CHJt—<M)q— (CHJ— kde R5 až R8, M, s, t, q a o byly definovány výše.
R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 volitelně tvoří -(CH2)i-U-(CH2)j-, kde „i“ a j“ a U byly definovány výše.
U je s výhodou kovalentní vazba.
M je s výhodou O, -CH=CH- nebo o, r a t jsou s výhodou nezávisle 0 až 3.
Zejména výhodná skupina D je 4-piperidinyl, 3-aminomethylfenyl, 3-amino3-methylbutenyl nebo 4-amino-4-methylpemtenyl.
K je s výhodou vodík.
F je s výhodou nebo
kde R23 je defin. výše.
G je s výhodou
Označení výše uvedených výhodných substituentů není v žádném případě omezením vynálezu na tyto substituenty. Reprezentativní sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem jsou následující:
3-Aminomethyl-N-((1 R, 2E, 4S)-4-karbamoyl-5-(2-naftyl)-1-(2-naftyl)methylpent2-enyl)benzamid:
((1 R,2E,4S)-4-karbamoyl-5-(2-naftyl)-1 -(2-naftyl)methylpent-2-enyl) amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
N-((1R)-1-((1R)-1-((1S)-5-Amino-1-(dimethylkarbamoyl)pentylkarbamoyl)2-fenylethoxy)methyl-2-(2-naftyl)ethyl)-3-aminomethylbenzamid:
((1 R,2R, 4S)-4-((( 1 S)-5-am»no-1 -(dimethylkarbamoyl)pentyl)karbamoyl)2-hydroxy-1 -(2-naftyl)methyl)-5-fenylpentyl)amid piperidin-3-karboxylové kys.:
Ethylester kyseliny 5-((1 R)-1-(N-methyl-N-((2R)-3-(2-naftyl)-2-(piperidin4-karbonylamino)propionyl)amino)-2-(2-naftyl)ethyl)-(1,2,4)ox3clÍ3Zole3-karboxylové:
Ethylester kyseliny 5-((1 R)-1 -(N-((2R)-2-(3-aminomethylbenzoylamino)3-(2-naftyl)propionyl)-N-methylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol3-karboxylové:
o
Amid kyseliny 5-((1 R)-1-(N-((2R)-2-(3-aminomethylbenzoylamino)3-(2-naftyl)propionyl)-N-methylamino)-2-feny,ethyl)-[1,3,4]oxadiazole2-karboxylové;
Má se za to, že sloučeniny obecného vzorce I vykazují lepší odolnost enzymatické proteolýze, protože nejsou přírodní povahy, protože je přírodní amidická vazba nahrazena nepřírodní. Zvýšená odolnost proteolýze spolu se zmenšením molekuly (látek v souladu s předkládaným vynálezem v porovnání se známými peptidy stimulujícími tvorbu růstového hormonu) potenciálně zlepšuje jejich biologickou dostupnost.
Ve výše uvedených vzorcích a dále v popisu mají následující termíny uvedený význam;
C1-C6 alkyl znamená lineární, rozvětvený nebo cyklický alkyl uvedené délky. Příklady lineárních alkylů jsou methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl a hexyl. Příklady rozvětvených alkylů jsou isopropyl, sek-butyl, terc-butyl, isopentyl a isohexyl. Příklady cyklických alkylů jsou cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl a cyklohexyl.
Zejména výhodné C1-C6 alkyly jsou C1-C3 alkyly. Výhodné C1-C3 alkyly jsou methyl, ethyl, isopropyl a cyklopropyl.
Výše uvedená C1-C6 alkoxylová skupina znamená lineární, rozvětvený nebo cyklický alkoxyl uvedené délky. Příklady lineárních alkoxylů jsou methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, pentoxy a hexoxy skupiny. Příklady rozvětvených alkoxylů jsou isopropoxy, sec-butoxy, ter.-butoxy, isopentoxy a isohexoxy • · ··· ··· ·· «· ··· ··· ·· ·· · skupiny. Příklady cyklických alkoxylů jsou cyklopropyloxy, cyklobutyloxy, cyklopentyloxy a cyklohexyloxy skupiny.
Zejména výhodné C1-C6 alkoxyly jsou C1-C3 alkoxyly. Výhodné C1-C3 alkoxylyjsou methoxyl, ethoxyl, isopropoxyl a eyklopropoxyl. j
S:
Výše uvedená C1-C6 alkylamino skupina znamená lineární, rozvětvená nebo i cyklická alkylamino skupina uvedené délky. Příklady lineárních ž
alkylaminoskupin jsou methylamino, ethylamino, propylamino, butylamino, j pentylamino a hexylamino skupiny. Příklady rozvětvených alkylaminoskupin i jsou isopropylamino, sek-butylamino, terc.-butylamino, isopentylamino a » isohexylamino skupiny. Příklady cyklických alkylaminoskupin jsou cyklopropylamino, cyklobutylamino, cyklopentylamino a cyklohexylamino j
skupiny. \
Termín „aryl“ znamená obsahující aromatický kruh, který může obsahovat f heteroatom a nést karboxylovou skupinu a jeho příkladem je fenyl, naftyl, pyridyl, 1-H-tetrazol-5-yl, thiazolyl, imidazolyl, indolyl, chinolin, pyrimidinyl, thidiazolyl, pyrazolyl, oxazolyl, isoxalyl, thiofenyl, chinolinyl, pyrazinyl nebo isothiazolyl, volitelně substituovaný jedním nebo několika C1-6 alkyly, C1-6 alkoxyly, aminoskupinou, halogenem nebo arylem. Aryl je s výhodou fenyl, i
thienyl, imidazolyl, pyridyl, indolyl nebo naftyl volitelně substituovaný ! halogenem, amino skupinou, hydroxylem, C1-6 alkylem nebo alkoxylem.
Termín halogen znamená Cl, F, Br a I. *
Sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem mají jedno nebo několik asymetrických center a do rámce vynálezu patří stereoizomery, oddělené, čisté nebo částečně čištěné stereoizomery nebo jejich racemické směsi. Sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem lze připravit z přírodních i umělých aminokyselinových zbytků obecným postupem A až E, kdy se výchozí aminokyseliny připravují způsobem v tomto oboru známým:
Obecný způsob A - Reakční schéma I:
1) BuU
2)
OHC
CHjOTBDMS
Jonesovo činidlo ——
3) Na(Hg)
4) HF
1) soa2
2) amoniak
Sloučeniny obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu I.
Vychází se z vhodné N-chráněné aminokyseliny, která se známým způsobem (např. Spaltenstein, J. Org. Chem. 1987, 52, 375,9) převede na sulfon 1. Další výchozí látku 2 lze připravit dimethyl malonátu a aromatického alkylhalogenidu a následnou redukcí LiAIH4, monosilylací TBDMS a oxidací na aldehyd 2 za podmínek Swernovy reakce (postup např. podle Jermalma, J. Org. Chem 1994, 59, 1139). Reakce z 1 na 2 se provede působením silné báze např. BuLi ve vhodném rozpouštědle např. THF a následnou redukcí amalgamem sodíku a odstraněním silylové chránící skupiny postupem např. podle T. W. Greene, Protective Groups in organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley a Sons 1991) za získání alkenu 3. Tyto kroky lze provést najednou nebo postupně. Intermediát 3 se oxiduje např. Jonesovým činidlem na karboxylovou kyselinu 4, která se převede na amid 5 působením např. thionylchloridu a amoniaku. Sloučenina 5 se nakonec nechá reagovat s chráněnou aminokyselinou za použití vhodného kondenzačního činidla, např. DCC a produkt se odehrání např. podle
T.W. Greene (Protective Groups in organic Chemistry, 2. vyd. John Wiley a
Sons, 1991) za vzniku sloučeniny 6, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob B - Reakční schéma II:
BOC o HN.
nr'
1. )Zn(Cu)
2. ) T»Cl3(OiPr) nr (ΟϊΡΟα,Γι o <A„
BOC OH I HN
AcOH
HN
BOC báze ,<C%>p Cl G
Y^nr
C
1. )OH'
2. ) TBDMSCI imidazol
3. ) HjOZHOAc
TBOMS ,
TBOMS G
BOC O (CHJp
Η,Ν
EDAC/HOBT
-<CHJ„ /
BOC O (CH,^
ΛγΜγ, °
TBOMS _
I ' \
O (CHJ
TBDMS .
1.JH
2.) TBDMSCI
H/l
P
NH nCl9
J m
EDAC/HOBT
D- -O
HN
OH (CHJ
W /(CHJ O y m
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu II. Vychází se ze syntézy intermediátu 10 např.podle postupu A. E. DeCamp a kol. (Tetrahedron Letters, 1991, 32, 1867 -1870.): titan-homenolate 9 se vytvoří z
3-jodopropionové kyseliny 8 a přidá k vhodnému aldehydu 7. Cyklizace např. kyselinou octovou poskytne lakton 11, jehož alkylace se provede např. podle A.H. Fray a kol. (J. Org. Chem., 1986, 51, 4828 - 4833). Působením báze jako lithium hexamethyldisilazanu (LHDS) nebo lithium diisopropylamidu (LDA) se vytvoří enolát, který se alkyluje vhodným činidlem jako je alkylchlorid za získání sloučeniny 12. Tento lakton se převede na silyl chráněnou hydroxykyselinu 13 např. podle A. H. Fray a kol. (J. Org. Chem., 1986, 51, 4828 - 4833). Spojení s aminem (případně chráněným např. ftalimidovou skupinou nebo FMOC) působením EDAC a HOBT poskytne amid 14. Odchránění aminoskupiny známým způsobem (např. T.W. Greene, Protective Groups in organic
Chemistry, 2.ed. John Wiley a Sons 1991) je následováno spojením s vhodnou kyselinou, která může obsahovat chránící skupinu, a to reakcí s EDAC a
HOBT, což vede ke sloučenině 16. Nakonec se odstraní všechny chránící | skupiny např. podle T. W. Greene, Protective Groups in organic Synthesis, j i
2. vyd., John Wiley a Sons, New York 1991.) za získání konečného produktu
17, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob C - Reakční schéma III:
BOC O I
HN
TBDMS Q (CH,)
BOC OH I HN (CHJ
P
NH oxidace j-<CHAn
1.)H+
2)
O
OH
EDAC/HOBT
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu III. Vychází se z odchránění amidu 14 reakcí např. s tetrabutylamonium fluoridem a následnou oxidací vhodným činidlem jako PCC nebo PDC za získání sloučeniny 19. Aminoskupina se odehrání např. kyselinou chlorovodíkovou v ethyl acetátu. Následuje spojení s vhodnou kyselinou, která může obsahovat chránící skupinu. Nakonec se odstraní všechny chránící skupiny např. podle T.
W. Greene, Protective Groups in organic Synthesís, 2. vyd., John Wiley a Sons, New York 1991.) za získání konečného produktu 20, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob D - Reakční schéma IV;
H.N.
“%rcl o
-. ='y o ,/íCH,)
J m
J
1.) base
G 2) (CHPp
Cl
3) rezoluce
G i
J
1JH4
2.)(BOC)2O
NaOH
^(CH,) EDAC. HOBT
G p
2Z
EDAC. HOBT
g'(CH’V
Sloučeninu obecného vzorce I lze pňpravit podle reakčního schématu IV. Vychází se z aminoalkoholu 21, který se nechá známým způsobem reagovat s chloracetylchloridem (např. E. D. Nicolaids a kol., J. Med. Chem. 1986, 29, 959 - 971). Reakce s bází jako je hydrid sodný v THF poskytne morfolinon 23, který se alkyluje za použití báze jako LDA nebo LHDS a následného přidání vhodného alkylačního činidla např. alkylchloridu. Po oddělení diastereomerů se kruh otevře reakcí s kyselinou např. podle R. E. TenBrink (J. Org. Chem. 1987, 52, 418 - 422) a pro získání sloučeniny 25 se ochrání aminoskupina. Fragment E, který může nést chráněné skupiny, se připojí reakcí vhodného aminu za použití např. 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimidu (EDAC) a
1-hydroxybenzotriazol (HOBT). Aminoskupina sloučeniny 26 se odehrání působením chlorovodíku v ethyl acetátu a nechá se reagovat s vhodnou kyselinou (případně obsahující chránící skupiny), EDAC a HOBT. Nakonec se odstraní všechny chránící skupiny např. podle T. W. Greene, Protective Groups in organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley a Sons, New York 1991.) za získání konečného produktu 28, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob D - Reakční schéma V:
i
I ¢, í
š
Boc-HN θ 1)OCC < 2) R12
Boc-HN
O-N
HCI
G
CfNOHJNH?
pyridin
EtOAc
O-N
O-N
Boc-HN
H/1 L Kn>’ atóehyd· NíCMBH3 rV-«hA >-r”
OH
MeOH. ]%HOAc
DCC.DWF
Γ I °\ Boc+inB
HCI < R1 í
OH
BOAc
DCC.DkF
HCI
BOAc
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu V. Vychází se z N-chráněné aminokyseliny 29 aktivované např. EDAC a následnou reakcí s amid-oximem 30 v pyridinu např. podle J. Heterocyclic Chem. 1989, 26, 125; za získání 1,2,4-oxadiazolu 31. Po odchránění aminoskupiny podle T.W. Greene (Protective Groups in Organic synthesis,
2. vyd. John Wiley and Sons 1991) se sloučenina redukčně alkyluje za použití aldehydu a mírného redukčního činidla - např. kyanoborohydridu sodného za získání požadovaného intermediátu 33. Další reakce 33 s N-chráněnou přírodní nebo umělou aminokyselinou 34 za použití známých postupů (např. DCC spojení v DMF) poskytne intermediát 35. Tento lze, po odchránění chlorovodíkovou kyselinou ve vhodném rozpouštědle jako je ethyl acetát, spojit známým způsobem (např. DCC spojení v DMF) s jinou N-chráněnou aminokyselinou 37 za získání intermediátu, který po odchránění chlorovodíkovou kyselinou ve vhodném rozpouštědle jako je ethyl acetát poskytne požadovaný produkt 38, což je sloučenina obecného vzorce I. Pokud je R12 funkční skupina (např. ester), může být v příslušném kroku reakční sekvence derivatizována.
Obecný způsob F - Reakční
BOC
Z o
J *0 iéma VI:
íř í
Λ
HO-R I _„ HN
PPha
DEAD J
NH3
OC Q
O
EOAC
HOBT
NH,
BOC OH I
HN
H*
HjN
J
NH,
4CH,)
R4 o o' ^(CH,)m O
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu VI. Vychází se z laktonu 40, který se nechá reagovat s amoniakem za vzniku amidu 41. Reakce za podmínek podle Mitsunobu (viz. M. S. Manhas, J. Chem.
• · · · · · • · ··· .:. .:. ·
Soc. Perkin Trans 1,1975, 461 - 463.) poskytne ether 42, který lze v kyselém prostředí odchránit. Spojení s vhodnou kyselinou případně nesoucí chránící skupiny poskytne sloučeninu 43, kterou lze známými postupy odchránit (T.W.
Greene, Protective Groups in Organic synthesis, 2. vyd. John Wiley and Sons
1991) za získání produktu 44, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob G - Reakční schéma VII:
1. ) anhydrid kyseliny
2. ) NaBH4A2
G (CH,) p
O [Rh|OAc)2!2
HN
I
R
OH (BOC)2O
NaOH
G ✓
Ř’
G z
,.ΝΗ , R R*
G z
LiOH dioxan/voda
TFA
EDAC. HOAT
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu VII. Vychází se z aminokyseliny 45, která se acyluje např. acetanhydridem a po zpracování se redukuje např. diboranem, natriumborohydridem s jodem nebo lithiumaluminiumhydridem (viz. např. M. J. McKennon a kol., J. Org. Chem, 1993, 58, 3568 - 3571) ve vhodném rozpouštědle jako je THF, diethylether,
dioxan nebo uhlovodíky za získání aminoalkoholu 46. Tento se známým způsobem ochrání (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis,
2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991) např. diterc-butoxy dikarbonatem nebo benzoylkarbonylchloridem za získání chráněného alkoholu
47. Reakce s ethyl diazoacetatem za katalýzy rhodium acetatem (s výhodou ?
0,01 -15 % hmotn.) podle J. Hlaváčka a V. Krále (Collect. Czech. Chem. |
Commun., 1992, 57, 525 - 530) poskytne ester 48. Tento ester se známým způsobem hydrolyzuje (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, j
2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991) bází jako je hydroxid lithný nebo J i
draselný za získání kyseliny 49 (která se aktivuje např. hydrochloridem 1-ethyl- »
3-(3-dimethyl aminopropyl)karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxybenzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzotriazolem), která reakcí s aminem 50 poskytne amid 51. Aminoskupina 51 se odehrání známým způsobem (T. W. j
Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, j
New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou. Kyselina 34a se aktivuje např. hydrochloridem 1-ethyl3-(3-dimethylaminopropyÍ)-karbodÍimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxybenzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzotriazolem a pak nechá reagovat ve vhodném rozpouštědle např. DMF nebo dichloromethanu s 52 za získání amidu 53. Chránící skupina aminu se odstraní známým způsobem (T. W. Greene,
Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou. j
Chráněná kyselina 37 se aktivuje např. hydrochloridem 1-ethyl3-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1 -hydroxybenzotriazolem nebo 1 -hydroxy-7-azabenzotriazolem a pak nechá reagovat ve vhodném rozpouštědle např. DMF nebo dichloromethanu s aminem 54. Po odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne 55, což je sloučenina obecného vzorce I.
• · · · · ·
Obecný způsob H - Reakční schéma Vlil
BOC\
G (CHJ,
R O 56 p OH
EtOH
EDAC. OMAP
H’c^°Srcl
O
NEt3
G
1JSOC^ py
Z) toluen (reflux
G G
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu Vlil. Vychází se z aminokyseliny 56, která se podle např. S. Borg a kol. (J. Org. Chem. 1995, 60, 3112 - 3120.) převede na ester 57 (např. reakcí s ethanolem v přítomnosti hydrochloridu N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu a
4-dimethylaminopyridinu), který se následně nechá reagovat s hydrazin ·· ·· ····
Od ··· ··· ··
Z Ί ····· · ♦ · · · · · · j hydrátem za získání hydrazidu 58. Ester 60 se získá z 58 reakcí s ethyl oxalylchloridem (59) v přítomnosti báze jako např. triethylaminu. Uzavření kruhu se provede thionylchloridem v pyridinu a následným zahřátím, což poskytne [1,3,4]oxadiazol 61. Amid 62 se získá aminolýzou esterové skupiny např.
i v kapalném amoniaku. Odchránění aminoskupiny známým způsobem (T. W. |
Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, |
New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou j i
s kyselinou, poskytne amin 63. Jeho spojením s vhodně chráněnou | aminokyselinou 34a za použiti známého činidla např. hydrochioridu 1
N-(3-dimethyl aminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu nebo jeho kombinací s 1
1-hydroxy-benzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzotriazolem se získá 64.
Odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic i
Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem ’ v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne amin 65. Tento se f působením známého činidla např. hydrochloridem 1-ethyl- ?
3-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxybenzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzotriazolem převede na 64. ’
Odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne amin 65. Tento se | působením známého činidla např. hydrochloridem 1-ethyl3-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxy- j benzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzotriazolem spojí s vhodně chráněnou aminokyselinou 37 a produkt odehrání známým způsobem (T. W. Greene,
Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou za získání 66, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob J - Reakční schéma IX;
Sloučeninu obecného vzorce I lze připravit podle reakčního schématu IX. Vychází se z vhodně chráněného aminoalkoholu 47, který se známým způsobem oxiduje činidlem jako DMSO/oxalylchlorid/triethylamin (A. E. DeCamp, A. T. Kawaguchi, R. P. Volante, I. Shinkai, Tetrahedron Letters,
1991, 32, 1867 -1870; J. R. Luly, J. F. Dellaria, J. J. Plattner, J. L. Soderquist, N. Yi, J. Org. Chem. 1987, 52,1487 -1492.) nebo DMSO/SO2 pyridinium komplex s triethylaminem (J. S. Ng, C. A. Przybyla, C. Liu, J. C. Yen, F. W. Muellner, C. L. Weyker, Tetrahdron 1995, 51, 6397 - 6410; P. L. Beaulieu, D. Wernic, J.-S. Duceppe, Y. Guindon, Tetrahedron Letters, 1995, 36, 3317 3320.) za získání aldehydu 67. Tento aldehyd reaguje s Grignardovým činidlem např. allylmagnesiumbromidem za získání nenasycené sloučeniny 68. Hydroborace např. 9- borabicyclo[3.3.1]nonanem a následné působení peroxidu vodíku a hydroxidu sodného poskytne diol 69. Aminoskupina se odehrání známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, za získání 70. Tento se ve vhodném rozpouštědle jako DMF nebo dichlormethanu působením známého činidla např. hydrochloridu 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxy-benzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzo triazolem spojí s Vhodně chráněnou aminokyselinou 34a za získání 71. Odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne amin 72. Tento se ve vhodném rozpouštědle jako DMF nebo dichlormethanu působením známého činidla např. hydrochloridu 1-ethyl-3-(3-dimethylamino propyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxy-benzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzo triazolem spojí s vhodně chráněnou aminokyselinou 37 a po odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne 73. Tento se známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd.,
John Wiley and Sons, New York 1991) hydrolyzuje hydroxidem sodným nebo draselným za získání 74, což je sloučenina obecného vzorce I.
Obecný způsob K - Reakční schéma X:
Ether 48 se redukuje známým způsobem např. lithiumborohydridem, natriumborohydridem nebo diisobutylamoniumhydridem na alkohol 75. Aminoskupina se odehrání známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, a poskytne amin 76. Tento se ve vhodném rozpouštědle jako DMF nebo dichlormethanu působením známého činidla např. hydrochloridu 1-ethyl-3-(3-dimethylamino propyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxy-benzotriazolem nebo 1hydroxy-7-azabenzo triazolem spojí s vhodně chráněnou aminokyselinou 34a za získání aminu 77. Odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne amin 78. Tento se ve vhodném rozpouštědle jako DMF nebo dichlormethanu působením známého činidla např. hydrochloridu 1-ethyl3-(3-dimethylamino propyl)-karbodiimidu nebo jeho kombinací s 1-hydroxybenzotriazolem nebo 1-hydroxy-7-azabenzo triazolem spojí s vhodně chráněnou aminokyselinou 37 a po odchránění známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991), např. chlorovodíkem v ethyl acetatu nebo trifluoroctovou kyselinou, poskytne amin 79, což je sloučenina obecného vzorce I. Pro zvýšení výtěžku je vhodná hydrolýza esterů (které mohly vzniknout během tvorby amidické vazby) v methanolu, a to známým způsobem (T. W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., John Wiley and Sons, New York 1991) hydroxidem sodným nebo draselným.
• · · · • · · • · · · ·
Obecný způsob L - Reakční schéma XI:
·£’ £
Thioamidy 81 lze získat stejným způsobem jako v postupu K. Připravují se z odpovídajících amidů 80 působením Lawessonova činidla. Tento postup je popsán v článku S. Scheiby, B.S. Pedersen, S.O. Lawesson, Bull. Chim. Soc. Belg., 1978, 229-38.
Obecný způsob M - Reakční schéma XII:
i á
i
PPh3, DEAD
-► tmsn3
G
Tetrazolová analoga 83 amidů 82 lze získat stejným způsobem jako v postupu K. Připravují se působením trifenylfosfinu, diethylazodikarboxylátu a trimethylsilylazidu na amidy typu 82. Tento postup je popsán v článku J.V. Dunica, M.E. Pierce, J.B. Santella III, J. Org. Chem. 1991, 56, 2395-2400.
Obecný způsob N - Reakční schéma XIII
-S.
Thiazoly 89 se připravují stejným způsobem jako v postupu F. Látka 89 se připraví acylaci iminu 84 za použití silné báze jako tBuOK nebo LDA a acylačního činidla jako chloridu kyseliny 85. Výsledná 3-ketoaminokyselina 85 se spojí s dipeptidem 88 známým způsobem např. způsobem pro asymetrické anhydridy za použití spojovacího činidla jako je isobutylchlorformát. Dipeptid 88 se cyklizuje řadou způsobů - např. Lawessonovým činidlem (LR) za získáni požadovaných thiazolů 89. Tento postup je popsán v článku T.D. Gordon, J. Singh, P.H. Hansen, B.A. Morgan, Tett. Lett., 1993, 1901-1904.
Farmaceuticky vhodné kyselé adiční soli sloučenin obecného vzorce I se připravují reakcí sloučeniny s anorganickou nebo organickou kyselinoujako je chlorovodíková, bromovodíková, sírová, octová, fosforečná, mléčná, maleinová, ftalová, citrónová, glutarová, glukonová, methansulfonová, salicylová, jantarová, vinná, toluensulfonová, trifluoroctová, sulfamová nebo fumarová. Dále se předkládaný vynález týká farmaceutických prostředků obsahujících jako aktivní složku sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodnou sůl s farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem. Farmaceutické prostředky • · obsahující sloučeninu v souladu s předkládaným vynálezem se připraví běžnými technikami např. podle Remingtonovy Farmaceutical Sciences, 1985.
Tyto prostředky jsou pak ve formě kapslí, tablet, aerosolů, roztoků, suspenzí nebo topických prostředků.
Farmaceutický nosič nebo ředidlo je běžný pevný nebo tekutý nosič jako např. laktosa, terra alba, sacharosa, cyklodextrin, mastek, želatina, agar, pektin, akácie, stearat hořečnatý, stearová kyselina, nižší alkyl ethery celulosy, sirup, podzemnicový olej, olivový olej, fosfolipidy, mastné kyseliny, amidy mastných kyselin, polyoxyethylen nebo voda. Podobně nosič nebo ředidlo obsahuje známé látky zpožďující vstřebávání jako glyceryl monostearat nebo glyceryl distearat (samostatně nebo ve směsi s voskem). Pokud se pro orální podávání použije pevný nosič, prostředek se tabletuje, dává do želatinových kapslí, j pilulek, karamel nebo pastilek. Množství pevného nosiče je různé, ale f s výhodou 25 mg až 1 g. Pokud se použije tekutý nosič, je prostředek ve formě f sirupu, emulze, kapsle z měkké želatiny nebo sterilní injekce jako vodný nebo ne-vodný roztok nebo suspenze.
Typická tableta připravená běžnou tabletovací technikou obsahuje:
jádro aktivní sloučenina (volná nebo její sůl) 100 mg koloidní SiO2 (Aerosil) 1,5 mg mikrokryst. celulosa (Avicel) 70 mg modifikovaná celulosová klovatina (Ac-Di-Sol) 7,5 mg potah
HPMC 9 mg
Mywacett 9-40 T* 0,9 mg *acylovaný monoglycerid používaný jako změkčovadlo film. potahů
Pro nosní podávání jako aerosol obsahuje prostředek v souladu s předkládaným vynálezem sloučeninu obecného vzorce I rozpuštěnou nebo suspendovanou v tekutém zejména vodném nosiči. Nosič obsahuje přísady jako činidla zvyšující rozpustnost (propylenglykol), povrchově aktivní látky, • · · · · · nn · · · ·
Z.O ·· ··· ··· činidla zlepšující vstřebávání (lecitin, což je fosfatidylcholin, nebo cyklodextrin) nebo konzervační látky jako paraben.
Obecně je sloučenina v souladu s předkládaným vynálezem spolu s farmaceuticky vhodným nosičem v jedné jednotce dávky v množství 50200 mg aktivní složky.
Dávkování sloučeniny v souladu s předkládaným vynálezem je při podávání pacientům např. lidem jako léku s výhodou 0,1-500 mg/den, např. 5 až 50 mg, | s výhodou 10 mg v jedné dávce. | !
Bylo dokázáno, že sloučenina obecného vzorce I stimuluje tvorbu růstového hormonu in vivo. Sloučeninu lze proto použít pro léčení, když je potřeba zvýšit hladinu růstového hormonu v plazmě, např. při jeho nedostatku, u starších <
pacientů nebo zvířat.
Konkrétněji se tak předkládaný vynález týká farmaceutického prostředku stimuluje tvorbu růstového hormonu hypofýzou. Prostředek obsahuje aktivní složku, což je sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodná sůl, spolu s farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem.
Dále se předkládaný vynález týká způsobu stimulace tvorby růstového hormonu i
hypofýzou, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli potřebnému pacientovi.
í
Dále se předkládaný vynález týká použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli pro přípravu léčiv pro stimulaci tvorby růstového hormonu hypofýzou.
Odborníkům je dobře známé, že použití růstového hormonu u lidí je různé a široké. Sloučeniny obecného vzorce I tak lze podávat za účelem stimulace tvorby růstového hormonu hypofýzou, a proto má její použití podobný účinek jako použití samotného růstového hormonu. Použití růstového hormonu je následující: stimulace tvorby růstového hormonu u starších lidí, prevence vedlejších katabolických účinků glukokortikoidů, prevence a léčba osteoporosy,
stimulace immunního systému, zrychlení léčení zranění, zrychlení hojení zlomenin kostí, léčba zpoždění růstu, léčba selhání ledvin nebo poruch, které vyplývají ze zpoždění růstu, léčba fyziologiky krátké výška, která zahrnuje děti s nedostatkem růstového hormonu a krátkou výšku spojenou s chronickými poruchami, léčba obezity a zpoždění růstu spojeného s obezitou, léčení zpoždění růstu sdružené se Prader-Willi syndromem a Turnérovým syndromem; zrychlení uzdravení a zkrácení hospitalizace pacientů s popáleninami; léčba zpoždění nitroděložního růstu, kostní dysplazie, hypercortisolismový Cushingův syndrom; indukce pulsní tvorby růstového hormonu, náhrada růstového hormonu u pacientů se stresem, léčba osteochondrodysplasie, Noonanova syndromu, schizofrenie, deprese, Alzheimerovy nemoci, pomalé hojení zranění a psychosociální deprivace , léčba plicních poruch a ventilační závislosti, omezení katabolické proteinové reakci po větším chirurgickém zákroku, omezení kachexie, nedostatek proteinů kvůli chronické nemoci např. rakovině nebo AIDS; léčba hyperinsulinemie, která zahrnuje nesidioblastosu, adjuvantní léčba pro indukci ovulace; stimulace vývoje štítné žlázy a prevence s věkem související poruchy funkce štítné žlázy, léčba pacientů s poruchami imunity, zlepšení síly svalu, pohyblivosti, držení tloušťky kůže, homeostasy metabolismu, ledvinné homeostasy ve vyšším věku, stimulace osteoblastů, přetvoření kosti a růstu chrupavky, stimulace immunního systému u zvířat a léčení poruch při stárnutí zvířat, podpora růstu u dobytku a stimulace růstu vlny u ovcí.
Pro výše uvedené indikace se dávka mění podle použité sloučeniny obecného vzorce I, způsobu podávání a požadovaného léčení. Obecně je ale dávka pro zvýšení hladiny růstového hormonu 0,0001 až 100 mg/kg tělesné váhy a den pacienta resp. zvířete. Obvykle dávky vhodné pro orální, nosní, plicní nebo transdermální podávání obsahují 0,0001 až 100 mg, s výhodou 0,001 až 50 mg sloučeniny obecného vzorce I ve směsi s farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem.
Sloučeniny obecného vzorce I se podávají jako kyselé adiční soli, nebo soli alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin nebo nižší alkylamoniové soli. Má se za to, že tyto soli mají stejnou účinost jako volné báze.
·..· .:. .:. ·.
Farmaceutický prostředek v souladu s předkládaným vynálezem s výhodou obsahuje sloučeniny obecného vzorce I ve směsi s jednou nebo několika sloučeninami vykazujícími jinou aktivitu - např. antibiotiky nebo jinými farmakologicky účinnými látkami.
Způsob podávání je jakýkoliv, který účinně dopraví aktivní složku na požadované místo účinku - např. orální, nosní, plicní, transdermální nebo parenterální, s výhodou orální.
Kromě farmaceutického použití jsou sloučeniny obecného vzorce I vhodné jako in vitro nástroj pro výzkum regulace hladiny růstového hormonu.
Sloučeniny obecného vzorce I jsou vhodné i jako in vivo nástroj pro hodnocení schopnosti hypofýzy produkovat růstový hormon. Např. vzorky séra odebrané před a po podávání těchto sloučenin pacientům podrobí analýze na růstový hormon. Porovnání jeho obsahu ve vzorcích přímo stanoví schiopnost hypofýzy pacienta tvořit růstový hormon.
Sloučeniny obecného vzorce I lze podávat komerčně zajímavým zvířatům pro zvýšení jejich růstu a produkce mléka.
Další využití sloučeniny obecného vzorce i je v kombinaci s jinou sloučeninou stimulující tvorbu růstového hormonu jako GHRP (2 nebo 6), GHRH a jejich analogy, růstovým hormonem a jeho analogy nebo somatomediny včetně IGF-1 a IGF-2.
Farmakologické metody
Sloučeniny obecného vzorce I byly in vitro testovány na schopnost stimulovat tvorbu růstového hormonu v primární kultuře krysí hypofýzy.
Izolace buněk krysí hypofýzy se provede podle 0. Sartor a kol., Endocrinology 116, 1985, 952-957. Samci bílých Sprague-Dawley krys (250 +/- 25 g) od firmy Mollegaard, Lilie Skensved, Denmark byly chováni v klecích po čtyřech.
V místnosti byl 12 h světelný cyklus, teplota 19-24 °C a vlhkost 30 - 60 %. Krysám byla utnuta hlava a vyjmuta hypofýza. Neurointermediální laloky byly vyjmuty a zbývájicí tkáň byla okamžitě umístěna do ledem chlazeného
• ·· ·· ···· ·· · « · · · • · · · · · • · · · ··· · • · · · · ··· ·· ·· ·ί izolačního pufru (Gey medium, Gibco 041-04030) doplněného 0,25 % hmotn.
D-glukosy, 2 % hmotn. neesenciálními aminokyselinami (Gibco 043-01140) a 1 % hmotn. albuminu hovězího séra (BSA (Sigma A-4503)). Tkáň byla nakrájena na malé kousky a převedena do izolačního pufru doplněného 3,8 mg/ml trypsinu (Worthington #3707 TRL-3) a 330 pg/ml DNasy (Sigma D-4527). Tato směs byla inkubována při 70 ot/min 35 min při 37 °C v 95/5% atmosféře O2/CO2. Tkáň pak byla třikrát promyta výše uvedeným pufrem a za použití standardní Pasteurovy pipety byly odsáty jednotlivé buňky. Po disperzi byly buňky filtrovány přes nylonový filtr (160 pm) za odstranění zbylé tkáně. j
Suspenze buněk byla třikrát promyta izolačním pufrem doplněným inhibitorem * trypsinu (0,75 pg/ml, Worthington #2829) a nakonec suspendována v kultivačním médiu DMEM (Gibcú 041-01965) doplněném 25 mM HEPES (Sigma H-3375), 4 mM glutaminu (Gibco 043-05030H), 0,075 % hmotn. | hydrogenuhličitanu sodného (Sigma S-8875), 0,1 % hmotn. neesenciální j aminokyseliny, 2,5 % hmotn. plodového telecího séra (FCS, Gibco 011-06290), % hmotn. koňského séra (Gibco 034-06050), 10 % hmotn. čerstvého krysího séra, 1 nM T3 (Sigma T-2752) a 40 pg/L dexametasonu (Sigma D-4902) pH 7,3; do hustoty 2 x 105 buněk/ml. Buňky byly rozděleny do mikrolitrových destiček (Nunc, Denmark), 200 pl/jamku a kuůtivovány 3 dny při 37 °C a 8 %
CO2. j
Testování sloučenin í
Po kultivaci byly buňky dvakrát promyty stimulačním pufrem (Hanks rovnovážný roztok solí (Gibco 041-04020) doplněný 1 % hmotn. BSA (Sigma A-4503),
0,25 % hmotn. D-glukosy (Sigma G-5250) a 25 mM HEPES (Sigma H-3375) pH 7,3) a inkubován 1 h při 37°C. Pufr byl vyměněn za 90 pl stimulačního pufru j (37 °C). Pak bylo přidáno 10 pl roztoku testované sloučeniny a destičky byly inkubovány 15 min při 37°C a 5 % CO2. Medium bylo dekantováno a rGH SPA testovacím systémem byl stanoven obsah růstového hormonu.
»Jř| ·
Všechny sloučeniny byly testovány v dávkách 10 pM až 100 pM. Vztah dávky a reakce byl stanoven pomocí Hillovy rovnice (forma F, Biosoft). Účinnost (maximum GH, Emax) byla vyjádřena v % GHRP-6. Síla (EC50) byla stanovena jako koncentrace indukující polovinu maximální stimulace tvorby růstového hormonu.
Dále byla u sloučenin obecného vzorce I stanovena metabolická stabilita.
i
Sloučeniny byly rozpuštěny v koncentraci 1 pg/pl vody. 25 μΙ tohoto roztoku í bylo přidáno do 175 μΙ roztoku enzymu, což vedlo ke hmotnostnímu poměru » enzym:substrát (w/w) 1:5). Roztok byl ponechán při 37 °C přes noc. Různé rozkladné roztoky (10 μΙ) byly analyzovány proti příslušnému slepému pokusu | za použití elektrosprejové hmotnostní spektroskopie (ESMS) se sledováním f vybraného molekulového iontu. Pokud se signál v porovnání se slepým ?
pokusem snížil o více než 20 %, byl zbytek roztoku analyzován pomocí HPLC a hmotnostní spektroskopie za účelem zjištění přesného stupně a místa rozkladu. .
i
V testu stability bylo použito několik standardních peptidů (ACTH 4-10,
Angiatensin 1-14 a Glukagon) za účelem ověření možnosti rozkladu různých roztoků.
Standardy peptidů (ACTH 4-10, Angiatensin 1-14 a Glukagon) byly koupeny od firmy Sigma, MO, USA).
Enzym (trypsin, chymotrypsin, elastasa aminopeptidasa M a karboxypeptidasa
I
Y a B) byly koupeny od firmy Boehringer Mannheim GmbH (Mannheim,
Germany) »
Pankreatická směs enzymů: trypsin, chymotrypsin a elastasa ve 100 mM amoniumbikarbonatu pH 8,0 (všechny koncentrace 0,025 pg/μΙ).
Směs karboxypeptidas: karboxypeptidasa Y a B n 50 mM amoniumacetatu, pH
4,5 (všechny koncentrace 0,025 pg/μΙ).
Roztok aminopeptidasy M: aminopeptidasa M (0.025 pg/μΙ) ve 100 mM amoniumbikarbonatu pH 8,0.
Hmotnostní spektra byla měřena na dvou různých přístrojích (Sciex API III tříkvadrupólový LC-MS přístroj (Sciex Instruments, Thornhill, Ontario) osazený
elektrosprejovým zdrojem iontů) a Bio-lon dvacetinásobný plasmový desorpční přístroj (Bio-lon Nordic AB, Uppsala, Švédsko).
Kvantita sloučeniny ve vzorku (před a po rozkladu) byla stanovena pomocí přístroje API III při sledování jednoho charakteristického molekulového iontu s průtokovým nástřikem vzorku. Průtok tekutiny (MeOH;voda 1:1) 100 μΙ/min byl řízen jednotkou ABI 140B HPLC (Perkin-Elmer Applied Biosystems Divisions, Foster City, CA). Parametry přístroje byly nastaveny na standardní podmínky provozu a SIM sledování bylo prováděno na nejintenzívnějším molekulovém iontu (většinou odpovídá dvojnásobně nabitému molekulovému iontu).
Stanovení produktů rozkladu dále pokračovalo použitím plasmové desorpční hmotnostní spektroskopie (PDMS). Vzorek byl připraven na nitrocelulosovém terči, podmínky byly standardní. Přesnost takto stanovené hmotnosti je vyšší než 0,1 %. Izolace produktů rozkladu byla provedena na reverzní fázi HY-TACH C-18 4,6 x 105 mm (HPLC kolona, Hewlett- Packard Company, Palo Alto, CA) se standardním separačním gradientem acetonitril: TFA. Použitý HPLC systém byl HP1090M (Hewlett- Packard Company, Palo Alto, CA).
Peptid MW/SIM iont (amu) Směs karboxypeptidas Směs I enzymů pankreatu |
standardy
ACTH 4-10 1124,5/562,8 + -
glukagon 3483/871,8 - -
insulin (B23-29) 859,1/430,6
angiotensin 1-14 1760,1/881,0 - -
GHRP-2 817,4/409,6 - -
GHRP-6 872,6/437,4 - -
+ stabilní (méně než 20% snížení SIM signálu po 24 h rozkladu roztoku)
- nestabilní (více než 20% snížení SIM signálu po 24 h rozkladu roztoku)
Jakýkoliv nový znak nebo kombinace znaků, které jsou zde popsány, je pro předkládaný vynález podstatná (nezbytná).
Příklady provedení vynálezu
Způsob přípravy sloučenin obecného vzorce I prostředky, které je obsahují jsou dále ilustrovány příklady, které ale nejsou omezením vynálezu. | *
Struktura sloučenin byla potvrzena elementární analýzou (MA), nukleární I magnetickou rezonancí (NMR) nebo hmotnostní spektroskopií (MS). NMR posuny (δ) jsou udány v ppm, uvedeny jsou pouze vybrané píky. Teplota tání je I uvedena ve °C. Kolonová chromatografie byla provedena technikou podle | f
článku W.C. Still a kol., J. Org. Chem. 1978, 43, 2923-2925 na Merck silikagelu | (Art 9385). Sloučeniny použité jako výchozí látky jsou buď známé, nebo se dají snadno připravit známým způsobem.
Zkratky: ’
TLC: tenkovrstvá chromatografie |
DMSO: dimethylsulfoxid min: minuty h: hodiny
ESMS = elektrosprej hmotnostní spektroskopie
PDMS = plasmová desorpční hmotnostní spektroskopie í
I
HPLC-Analýzy:
Metoda a I
RP-HPLC analýza byla prováděna s UV detekcí při 254 nm a Lichrosorp RP-18 μΜ kolonou s elučním průtokem 1 ml/min. Byly použity dva systémy rozpouštědel: ;
systém I: 0,1 % trifluoroctová kyselina v acetonitrilu i systém II: 0,1 % trifluoroetové kyseliny ve vodě
Kolona byla uvedena do rovnováhy směsí 20 % systému I a 80 % systému II.
Po nástřiku vzorku byl 30 min používán gradient 20 % až 80 % systému rozpouštědel I v systému rozpouštědel II. Potom byl gradient během 5 minut zvýšen na 100 % systému rozpouštědel I. Následovala 6 min izokratická eluce tímto systémem.
Metoda b
RP-HPLC analýza byla prováděna s UV detekcí při 214, 254, 276 a 301 nm na 218TP54 4,6 mm x 250 mm 5μ C-18 silikagelové koloně (The Seperations Group, Hesperia), která byla eluována 1 ml/min při 42 °C. Kolona byla uvedena do rovnováhy 5% acetonitrilem v pufru obsahujícím 0,1 M síranu amonného, jehož pH bylo upraveno 4M kyselinou sírovou na 2,5. Po nástřiku byl vzorek | eluován 50 min gradientem 5 % až 60 % acetonitrilu ve stejném pufru. |
Příklad 1 [(1 R)-1-((1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl)2-(2-naftyl)ethyl]amid kyseliny (3R)-piperidin-3-karboxylové
Připraven podle postupu E.
Tere.butyl ester kyseliny (R) [1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2fenylethyljkarbamové:
H.
K
1,3-Dicyklohexylkarbodiimid (10,1 g, 49 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (100 ml) a přidán k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-fenylalaninu (10,0 g,
7,7 mmol) v dichlormethanu (250ml) při 0-5 °C. Reakční směs byla zahřána na 20 °C a míchána 1 h. Acetamidoxim (3,63 g, 49 mmol) byl suspendován v pyridinu (200 ml) a do reakční směsi byl přidán Ν,Ν-dimethylformamid (40ml). Dichlaromethan byl odpařen a reakční směs byla 18 h zahřívána k refluxu. Pak · byla ochlazena na 0 °C a zfiltrována. Filtrát byl zředěn ethyl acetatem (100 ml) f a promyt vodnou kyselinou citrónovou (10%, 3 x 50 ml) a vodou (3 x 50 ml). Po ;
vysušení síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek krystalován z ethyl acetatu aheptanu za získání 5,48 g terč.butyl esteru kyseliny | (R) [1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamové. ] j
tt 94-98 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,30(s, 9H); 2,32(s, 3H); 4,90-5,10(m, 1H); 7,15-7,30(m, 5H).
HPLC: Rt= 26,7 min (Metoda a)
Hydrochlorid (R) 1-(3-methyl-[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylaminu
Terc.butyl ester kyseliny (R) [1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2fenylethyl]karbamové kyseliny (2,4 g, 7,9 mmol) byl rozpuštěn v nasyceném roztoku chlorovodíku v ethyl acetatu (40 ml). Po 5 h při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu. Zbytek byl krystalován z ethyl acetatu za získání 2,05 g hydrochlorid (R) 1-(3-methyl-[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylaminu.
t, 144-148 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 2,35(s, 3H); 3,21(dd, 1H); 3,49(dd, IH); 5,05(dd, 1H); 7,137,35(m, 5H).
HPLC: Rt= 9,2 min (metoda a)
Terc.butyl ester ((1 R)-1 -((1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny
Hydrochlorid N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu (6,3 g,
32,9 mmoJ) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (5,0 g, 32,9 mmol) byly přidány do roztoku (R) N-tert-butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)-alaninu (10,4 g,
32,9 mmol) v N,N-dimethylformamidu (140 ml). Po 1 h při 20 °C byla přidána směs hydrochloridu 1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylamin (5,6 g,
23,5 mmol) a triethylaminu (2,37g, 23,5 mmol) v N,N-dimethylformamidu (100 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do vody (1,41) a extrahována několikrát ethyl acetatem (celkem 1,4 I). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10 %, 200ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (200 ml) a vody (3 x 200 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek krystalován z ethyl acetatu a heptanu za získání 9,45 g terc.butyl esteru ((1R)-1-((1R)-1-(3-methyl[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny tt 148-150 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,25(s, 9H); 2,29(s, 3H); 4,25-4,35(m, 1H); 5,25-5,35 (s, 1H); 7,15-7,85 (m, 12H)
HPLC: Rt = 29,6 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C29H32N4O4: C, 69,58; H, 6,44; N, 11,19%;
nalezeno: C, 69,40; H, 6,65; N, 10,93%.
Hydrochlorid (2R)-2-amino-N-({1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu:
Terc.butyl ester ((1R)-1-((1R)-1-(3-methyl-{1,2,4)oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny (4,5g, 8,99 mmol) byl suspendován v ethyl acetatu (50 ml) a byl přidán nasycený roztok chlorovodíku v ethyl acetatu (45 ml). Po 3 h při 20 °C byla rekční směs zfiltrována za získání 3,17 g hydrochloridu (2R)-2-amino-N-((1R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu.
tt 197-199 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 2,28(s, 3H); 3,15-3,35(m, 4H); 4,15(t, 1H); 5,35(q, 1H); 7,20-7,90(m, 12H)
HPLC: Rt= 18,5 min, (netoda a)
EA: vypočteno pro C24H24N4O2, HCI: C, 65,97; H, 5,77; N, 12,82%; nalezeno: C, 66,20; H, 5,90; N, 12,57%.
Terc.butyl ester (3R)-3-((1 R)-1 -((1 R)-1 -(3-methyl-[1 -,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny:
Hydrochlorid N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu (0,42 g,
2,18 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,33 g, 2,18 mmol) byly přidány k roztoku (R)-N-terc.butoxykarbonyl-3-piperidin karboxylové kyseliny (0,50 g, 2,18 mmol) v N,N-dimethylformamidu (7 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs (2R)-2-amino-N-[(1R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethyl]-3-(2-naftyl)propionamid hydrochloridu (0,68 g, 1,56 mmol) a triethylaminu (0,16g, 1,56 mmol) v N.N-dimethylformamidu (8 ml). Po 18 h při i
°C byla reakční směs nalita do ledové vody (90 ml) a několikrát extrahována f ethyl acetatem (celkem 90 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou j kyselinou citrónovou (10 %, 15 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 15 ml) a vodou (3x15 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl | roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na | silikagelu (90 g) za použití ethyl acetatu s heptanem (3:2) jako eluentu za !
získání 0,83 g terc.butyl esteru (3R)-3-(( 1R)-1-((1 R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl]-2-(2j naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kyseliny. j 1H-NMR (DMSO-d6) 1,37(s, 9H); 2,30(s, 3H); 4,60-4,70(m, 1H); 5,25-5,35(m, í
1H); 7,15-7,85(m, 12H)
HPLC: Rt= 31,6 min (metoda a)
Terc.butyl ester 3-((1 R)-[(1 R)-1-(3-Methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové , kyseliny (0,80 g, 1,31 mmol) byl rozpuštěn v ethyl acetatu (20 ml) a byl přidán | nasycený roztok chlorovodíku v ethyl acetatu (20 ml). Po 2 h při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a zbytek krystalován ze směsi methanol a | ethyl acetat za získání 0,66 g sloučeniny z nadpisu.
t, 198-200 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,10-1,80 (m, 4H); 2,30 (s, 3H); 4,60-4,70 (m, 1H);
5,25-5,35(m, 1H); 7,20-7,90(m, 12H) f
HPLC: Rt = 20,9 min (metoda a) ‘
EA: vypočteno pro CsoHasNsOs.HCI: C, 65,74; H, 6,25; N, 12,78% nalezeno: C, 65,57; H, 6,35; N, 12,46%. í
Příklad 2 [(1 R)-1 -((1 R)-1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl)-2-(2naftyl)ethyllamid kyseliny 4-amino-4-methyl-pent-2-enové:
Terc.butyl ester N-2-hydroxy-1,1-dimethylethylkarbamové kyseliny:
CH, 0H3C CH ^ΟΛΝΗ^θΗ
2-Amino-2-methylpropan-1-ol (10,0 g, 112 mmol) byl rozpuštěn v tetrahydrofuranu (100 ml) a byl přidán 1M roztok hydroxidu sodného vévodě (112 ml, 112 mmol). Během 15 min byl přidán roztok diterc.butyl dikarbonatu (29,3 g, 134 mmol) v tetrahydrofuranu (100 ml). Roztok byl při 20 °C míchán 16 h, a pak bylo přidáno 100 ml vody. Fáze byly odděleny a vodná extrahována ethyl acetatem (3 x 150 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým, rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek chromatografován na silikagelu (180 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:1 za získání 19,6 g terc.butyl esteru N-2-hydroxy-1,1-dimethylethylkarbamové kyseliny.
t, 53 °C 1H-NMR (CDC1,) 1,22 (s, 6H); 1,45 (s, 9H); 3,58 (d, 2H); 4,05 (br, 1H); 4,65 (br, 1H).
2-T erc. utoxykarbonylamino-2-methylpropanal:
I H _ CH3 o H3C CH, ^o^nhVo
DMSO (12,4 ml, 174,4 mmol) byl rozpuštěn v dichlaromethanu (240 ml) a roztok ochlazen na -78 °C. Po kapkách byl přidán oxalyl chlorid (7,6 ml, mmol) a roztok byl míchán při -78 °C 15 min. Pak byl po kapkách přidán roztok terč. butyl esteru N-2-hydroxy-1,1-dimethylethylkarbamové kyseliny v dichlormethanu (30 ml) a roztok byl míchán při -78 “C 30 min. Pak byl pomalu přidán triethylamin (55,23 ml, 396,3 mmol) was added slowly. Po 5 min při -78 °C byl roztok vytemperován 20 °C, naředěn dichlormethanem (300 ml) a promyt 1M chlorovodíkovou kyselinou (3 x 200 ml). Spojené vodné fáze byly extrahovány dichlormethanem (2 x 200 ml). Spojené organické fáze byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 200 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek chromatografován na silikagelu (180 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:4 za získání 13,4 g 2-terc.butoxykarbonylamino-2-methylpropanalu.
tt 84 - 85 °C 1H-NMR (CDCI3) 1,35 (s, 6H); 1,45 (s, 9H); 5,00 (br, 1H); 9,45 (s, 1H).
Ethyl ester (2E)-4-tertcbutoxykarbonylamino-4-methylpent-2-enové kyseliny:
ch3 oH3c H3CSl X h3c o NH
CH
o .CH,
Triethyl fosfonoacetat (9,6 ml, 48 mmol) byl pomalu přidán k suspenzi terc.butoxidu draselného (5,39 g, 48 mmol) v tetrahydrofuranu (140 ml). Po 30 min při 20 °C byl přidán 2-terc.butoxykarbonylamino-2-methylpropanal (5,0 g, 26 mmol). Po 2,5 h při 20 °C byla pomylu přidána 1M kyselina chlorovodíková (80 ml). Směs byla extrahována ethyl acetatem (120 ml, 2 x 50 ml) a spojené organické vrstvy promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek chromatografován na silikagelu (100 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:4 za získání 5,7 g ethyl esteru (2E)-4-tertcbutoxykarbonylamino-4-methylpent-2-enové kyseliny.
tt 40 - 41 °CC (heptan) 1H-NMR (CDCI3): 1,29 (t, 3H); 1. 41 (s, 6H); 1. 4 3 (s, 9H); 4,19 (q, 2H); 4,65 (br, IH); 5,84 (d, J = 15,9 Hz, 1H); 6,99 (d, J = 16,0 Hz, 1H).
(2E)-4-tertcbutoxykarbonylamino-4-methylpent-2-enová kyselina:
H,c h3c
OH
O
Ethyl ester (2E)-4-terc.butoxykarbonylamino-4-methylpent-2-enové kyseliny i
(5,0 g, 19,4 mmol) byl rozpuštěn v dioxanu (50 ml) a byl přidán roztok hydroxidu lithného (0,61 g, 25,3 mmol) ve vodě (25 ml). Směs byla míchána 16 h při °C, a pak byl přidán ethyl acetat (75 ml) a voda (20 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná extrahována ethyl acetatem (20 ml). Spojené organické * vrstvy byly extrahovány 1M roztoku hydroxidu sodného (30 ml). Spojené vodné vodné fáze byly okyseleny 1M roztokem hydrogensíranu sodného na pH = 2 a extrahovány ethyl acetatem (2 x 50 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědlo pa bylo odstraněno ve vakuu. ,
Pro další syntézy byla použita (2E)-4-terc.butoxykarbonylamino-4-methylpent2-enová kyselina v surovém stavu. j 1H-NMR (CDCl3): 1,39 (s, 6H); 1,43 (s, 9H); 4,79 (br, 1H) 5,75 (d, 1H); 7,12 (d,
1H); 9,50-11,50 (br, 1H).
Terc.butyl ester “! 1,1-dimethyl-3-[(1R)-1-((1R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl]-allyl(-karbamové kyseliny:
li • · · · ·· ··· .:. ..
Hydrochlorid N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimidu (0,42g,
2,18 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,33 g, 2,18 mmol) byly přidány do roztoku 4-terc.butoxykarbonylamino-4- methylpent-2-enové kyseliny (0,50 g, 2,18 mmol) v N, N-dimethylformamidu (7 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs hydrochioridu (2R)-2-amino-N-[(1R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol5-yl)-2-fenyiethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu (0,68 g, 1,56 mmol) a triethylaminu (0,16 g, 1,56 mmol) v N,N-dimethylformamidu (8ml). Po 18 h při 20 °C byla směs nalita do ledové vody (90ml) a několikrát extrahována ethyl acetate (celkem 90 ml). Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 15 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 15 ml) a vodou (3 x 15 ml) a nakonec vysušeny síranem horečnatým.
Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek chromatografován na silikagelu (95 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:1 za získání 0,90 g terc.butyl esteru {1,1-dimethyl-3-[(1R)-1-((1R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)- 2fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl]-allylí>karbamové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,22(s, 3H); 2,28(s, 3H); 4,70-4,80(m, 1H); 5,72-5,82(m,
1H); 5,89(d, 1H); 6,72(d, IH); 7,15-7,85(m, 12H)
HPLC: Rt = 30,3 min (metoda a)
Terc.butyl ester ·{ 1,1-dimethyl-3-[(1 R)-1 -((1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl]-allylí’karbamové kyseliny (0,90 g, 1,47 mmol) byl rozpuštěn v ethyl acetatu (10 ml) a byl přidán nasycený j roztok chlorovodíku v ethyl acetatu (20 ml). Po 3 h při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu za získání 0,70 g sloučeniny z nadpisu.
tt 161-167 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,32(s, 3H); 1,34(s, 3H); 2,28(s, 3H); 4,75- 4,83(m, 1H);
5,23-5,33(m, 1H); 6,12(d, 1H); 6,61 (d, 1H); 7,15- 7,88(m, 12H)
HPLC: Rt = 20,6 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C3oH33N505,HCI, 0,75 H2O: C, 64,16; H, 6,45; N, 12,47%;
nalezeno: C, 64,42; H, 6,43; N, 12,03%.
··« «««··· • · · · · · ·· · · · · ··· ··· · · ·· ··· · · · · · «· ·
Příklad 3
3-Aminomethyl-N-[[( 1 R)-1 (1 R)-1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl í,-2-(2-naftyl)ethyl]benzamid:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butyl ester (3-<! (1R)-1-[(1R)-1-(3-Methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl^benzyl)karbamové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N’-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0, 92g,
4,82 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,74g, 4,83 mmol) byly přidány do roztoku N-terc.butoxykarbonyl-3-aminobenzoové kyseliny (1,21 g,
4,82 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Po 1 h při 20 °C byla přidána směs (2R)-2-amino-N-[(1R)-1-(3- methyl-[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl)3-(2-naftyl)propionamid hydrochloridu (1,50 g, 3,43 mmol) a triethylaminu (0,35 g, 3,46 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do ledové vody (180 ml) a několikrát extrahována dichlormethanem (celkem 180 ml).
·· ·· ···· ·· fc · ·· ······ · ··· ······ ·· · v · · · * ··· · xr- ··· ··· ·· ·· ··· ··· ·· ·· ·
Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 25 ml) a vodou (3 x 25 ml) a nakonec vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a z ethylacetátu bylo izolováno 1,80 g terc.butyl esteru (3-^ (1 R)-1-{(1 R)-1-(3-Methyl~{1,2,4]oxadiazol-5-yi)-2-fenylethylkarbamoyl]-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl !>benzyl)karbamové kyseliny tt 176-178 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,39(s, 9H); 2,30(s, 3H); 4,70-4,80(m, 1H); 5,29-5,39(m,
1H); 7,15-7,85(m, 17H)
HPLC: Rt = 31,4 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C37H39N5O5: C, 70,12; H, 6,20; N, 11,05% nalezeno: C, 70,20; H, 6,34; N, 10,86%.
Terc.butyl ester (3-4 (1 R)-1 -[(1 R)-1-(3-Methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl K benzyl)karbamové kyseliny (5,51 g, 2,38 mmol) byl suspendován v ethyl acetatu (20 ml) a byl přidán nasycený roztok chlorovodíku v ethyl acetatu (30 ml). Po 4 h při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a krystalizace z ethyl acetatu poskytla 1,26 g sloučeniny z nadpisu.
tt 240-241 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 2,31 (s, 3H); 4,03 (s, 2H); 4,75-4,85(m, 1H) 5,38-5,48(m, 1H);7,15-7,90(m, 16H)
HPLC: Rt = 24,6 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C32H3iN5O3,HCI: C, 67,42; H, 5,66; N, 12,28% nalezeno: C, 67,26; H, 5,76; N, 12,00%.
Příklad 4
N-[(1 R)-1-((1 R)-1-(3-inethyl- [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-phenylethylcarbamoyl)2-(2-naftyl)ethyl]amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butyl ester 4-<! (1 R)-1 -[(1 R)-1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethylkarbamoylj-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyŘpiperidin-1-karboxylové kyseliny;
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,92 g,
4,82 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,74 g, 4,83 mmol) byly přidány do roztoku N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidinkarboxylové kyseliny (1,10 g, 4,80 mmol) v N,N- dimethylformamidu (15 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs (2R)-2-amino-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-fenylethyl-3-(2-naftyl)propionamid hydrochloridu (1,50 g, 3,43 mmol) a triethylaminu (0,35 g, 3,46 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do ledové vody (180 ml) a několikrát extrahována ethylacetátem (celkem 180 ml). Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 25 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 25 ml) a vodou (3 x 25 ml) a nakonec vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a z ethylacetátu bylo krystalizaci získáno 1,84 g terc.butyl esteru 4-^ (1 R)-1-[(1 R)1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl]-2(2-naftyl)ethylkarbamoyl )piperidin-1 -karboxylové kyseliny.
tt 152-155 °C 1H-NMR (DMS0-d6) 1. 35 (s, 9H); 2,29 (s, 3H); 4. 60-4,70 (m, 1H) 5,25-5,35(m, 1H); 7,15-7,85(m, 12H)
HPLC: Rt = 31,3 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C35H4iN5O5: C, 68,72; H, 6,76; N, 11,45% nalezeno: C, 68,65; H, 6,95; N, 11,34%.
Terc.butyl ester 4-“! (1 R)-1-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2- fenylethylkarbamoyI]-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl )piperidin-1-karboxylové kyseliny (1,57 g, 2,57 mmol) byl rozpuštěn v ethyl acetatu (20 ml) a byl přidán nasycený roztok chlorovodíku v ethyl acetatu (30 ml). Po 4 h při 20 °G byla reakční směs zfiltrována za získání 1,34 g sloučeniny z nadpisu.
t, 238-241 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 2,30 (s, 3H); 4. 60-4,70 (m, 1H); 5. 25-5. 35 (m, 1H) 7,207,85(m, 12H)
HPLC: Rt = 23,7 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C3oH33N505,HCI: C, 64,74; H, 6,25; N, 12,78% nalezeno: C, 65,91; H, 6,39; N, 12,42%.
Příklad 5
Sůl ethyl esteru 5-MlR)-1-[(2R)-2-(3-aminomethylbenzoylamino)3- (2-naftyl)propionylamino]-2-fenylethyl )-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny s triflouroctovou kyselinou:
• · ·
Připraví se podle postupu E.
Ethyl ester (R) 5-(1-terc.butoxykarbonylamino-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny.
1,3-Dicyklohexylkarbodiimid (2,1 g, 10 mmol) byl rozpuštěnv dichlormethanu 1 (25 ml) a přidán k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonylfenylalaninu (2,2 g, mmol) v dichlormethanu (50 ml) 0-5 °C. Reakční směs byla zahřána na j °C a míchána 30 min. Pak byl přidán roztok ethyl 2-amino2-(hydroxyimino)acetatu (1,3 g, 10 mmol) v pyridinu (50 ml). Dichlormethan byl odpařen a reakční směs zahřívána k refluxu 18 h. Pak byla ochlazena na 0 °C a zfiltrována. Filtrát byl zředěn ethyl acetatem (25 ml) a promyt vodnou kyselinou citrónovou (10%, 25 ml) a vodou (3 x 25 ml) a nakonec vysušen síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (90 g) s eluentem ethyl acetat/heptan (1:1) za získání 1,68 g ethyl esteru (R) 5-(1 -terc.butoxykarbonylamino-2fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
tt 72-76 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,30(s, 9H); 1,32(t, 3H); 3,10-3,30(m, 2H); 4,41 (q, 2H); 5,10(q, 1H); 7,20-7,50(m, 5H)
Hydrochlorid ethyl esteru (R) 5-(1-amino-2-fenylethyl)-{1,2,4]oxadiazol-3karboxylové kyseliny:
Ethyl ester (R) 5-(1 -terč.butoxykarbonylamino-2-fenylethyl)-[ 1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny (1,5 g, 4,2 mmol) se rozpustí v nasyceném roztoku chlorovodíku v ethyl acetatu (40 ml). Po 5 h při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu za získání 1,2 g hydrochloridu ethyl esteru (R) 5-(1-amino2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,32(t, 3H); 4,41 (q, 2H), 5,20(dd, 1H); 7,10- 7,30(m, 5H).
Ethyl ester 5-[(1R)-1-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino3-(2-naftyl)propionylamino)-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,77 g,
4,03 mmol) a 1-hydroxybenzatriazol monohydrat (0,62 g, 32,9 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (1,27 g,
4,03 mmol) v N,N-dimethylformamidu (20 ml). Po 30 min při 20 °C byl přidán roztok hydrochloridu (R) ethyl 5-(1-amino-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol3-karboxylatu (1,20 g, 4,03 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Reakční směs byla 3 h zahřívána na 50 °C, pak nalita do vody (400 ml) a několikrát extrahována dichlormethanem (celkem 350 ml). Spojené organické fáze byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 50 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Roztok byl zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikageku (40 g) za použití směsi etbylacetat/heptan (3:7) za získání 0,41 g ethyl esteru 5-[(1R)-1-((2R)-2terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionylamino)-2-fenylethyl)(1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,23(s, 9H); 1,32(t, 3H); 4,25-4,35(m, 1H), 4,384,45(q, 2H); 5,38-5,48(m, 1H); 7,20-7,85(m, 12H).
Hydrochlorid ethyl esteru 5-((1R)-1-((2R)-2-amino-3-(2-naftyl)propionyl)amino2-fenylethyl]-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
Ethyl ester 5-[(1R)-1-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3(2-naftyl)propionyiamino)-2-fenylethyl]-[1,2,4]oxadiazol-3- karboxylové kyseliny (0,41 g, 0,7 mmol) byl suspendován v nasyceném roztoku chlorovodíku v ethyl acetatu (10 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs zfiltrována za získání 0,39 g hydrochloridu ethyl esteru 5-[(1R)-1-((2R)-2-amino-3-(2naftyl)propionyl)amino-2-fenylethyl]-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,32 (t, 3H); 4,10-4,20(m, 1H); 4,40-4,45(m, 2H)
5,40-5,50(m, 1H).
..........
Ethyl ester 5-((1 R)-1-((2R)-2-((3-terc. butoxykarbanylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2-naftyl)propionylamino)-2-fenylethyl-[1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochloríd (0,23 g,
1,20 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,18 g, 1,2 mmol) byly ) přidány k roztoku 3-(terc. butoxykarbonylaminomethyl)benzoové kyseliny (0,30 j g, 1,2 mmol) v N,N-dimethylformamidu (8 ml). Po 1 h při 20 °C byla přidána směs hydrochloridu ethyl esteru 5-[(1 R)-1-((2R)-2-amino-3-(2- ?
naftyl)propionylamino)-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (0,39 g, 0,79 mmol) a triethylaminu (0,08 g, 0,79 mmol) v
Ν,Ν-dimethylformamidu (2ml). Po 18 h byla směs nalita do vody (70 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 80 ml). Spojené organické fáze | byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10 %, 15 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a vodou (3x10 ml). Po vysušení síranem j hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek krtystalován ze směsi ethyl acetatu a heptanu za získání 0,44 ethyl esteru 5-((1 R)-1-((2R)-2-((3terc.butoxykarbanylamino-methyi)benzoylamino)-3-(2-naftyl)propionylamino)-2fenylethyl-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
tt 170-176 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,3 0-1,40 (m, 12H); 4,42 (q, 2H), 4,80-4,90 1H);
5,40-5,50(m, 1H).
Ethyl ester 5-[(1R)-1-((2R)-2-((3-terc.butoxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2-naftyl)propionylamino)-2- fenylethyl]52 [1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (0,40 g, 0,58 mmol) byl suspendován v nasyceném roztoku chlorovodíku v ethyl acetatu (10 ml). Po 5 h při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (40 g) s eluentem: 10% amoniak v dichlormethanu/ethanol (9/1) za získání 0,14 g sloučeniny z nadpisu. Sloučenina byla dále čištěna semipreparativní HPLC na třikrát na koloně 25 mm x 250 mm plněné 7μ C-18 silikagelem, který byl uveden do rovnováhy 30% acetonitrilem v 0,5 M roztoku síranu amonného, jehož pH bylo upraveno kyselinou sírovou (4M) na 2,5.
Gradient byl 24% až 50% acetonitrilu v 0,5 M síranu amonného, pH 2,5 při průtoku 10ml/min 47 min při 40 °C. Frakce odpovídající hlavnímu píku byly spojeny, naředěny třemi objemy vody a naneseny na Sep-Pak C-18 filtr (Waters part # WAT036915). Po ustavení rovnováhy 0,1% TFA byla sloučenina vymyta (z filtru Sep-Pak) 70% TFA a z rozpouštědla izolována lyofilizací.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,35(t, 3H); 4,40(q, 2H); 4,85-4,95(m, 1H); 5,355,45(m, 1H); 7,10-7,85(m, 16H)
HPLC: Rt = 28,4 min (metoda: 0-90% 0,1% TFA v acetonitrilu 50 min)
EA: vypočteno pro C34H33N5O5,TFA, 1,5 H2O: C, 69,01; H, 5,09; N, 9,56% nalezeno: C, 68,89; H, 5,10; N, 9,74%.
Příklad 6 i
Ethyl ester 5-( 1 -[2-(3-aminomethylbenzoyl)-3-(2-naftyl)propionyl]N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny: $
Připraví se podle postupu E.
Methyl ester (R)-3-(2-naftyl)alaninu:
Η,Ν^ΎθΟΗ,
O
Thionyl chlorid (5 mi) se při 35 °C po kapkách během 15 min přidá k suspenzi (R)-3-(2-naftyl)alaninu (5,0 g) v methanolu (50 ml). Po přidání se směs 1 h zahřívá na 60 °C. Pak se ochladí a rozpouštědlo odstraní ve vakuu.Přidá se ( voda (75 ml) a ethyl acetat (125 ml) a pH se uhličitanem sodným upraví na 8,5.
Organické fáze se oddělí, vysuší síranem hořečnatým a odpaří za získání
4,86 g methyl esteru (R)-3-(2-naftyl)alaninu. i 1H-NMR (CDCI3) 1,50 (s(br), 2H); 3,03 (dd, 1H); 3,27 (dd, 1H); 3,71 (s, 3H);
3,84 (dd, 1H); 7,30-7,82 (m, 7H).
Methyl ester (R)-2-(3-(terc.butaxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2naftyl)-propionové kyseliny:
3-(terc.Butoxykarbonylaminamethyl) benzoová kyselina (5,32 g; 21,2 mmol) se rozpustí v Ν,Ν-dimethylformamidu (20 ml) a přidá se 1-ethyl3-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimid hydrochlorid (4,06 g, 21,2 mmol). Směs se míchá 20 min, a pak se přidá roztok methyl esteru (R)-3-(2-naftyl)alaninu (4,85 g, 21,2 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (20 ml) a triethylamin (4,4 ml). Míchání pokračovalo dalších 18 h. Pak byla směs zředěna ethyl acetatem (400 ml) a organická fáze promyta vodou (200 ml), 10% vodným ·· ........
hydrogensíranem sodným (50 ml), 5% vodným hydrogenuhkičitanem sodným (100 ml) a vodou (100 ml) a nakonec vysušena síranem hořečnatým. Po odstarnění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 8,9 g methyl esteru (R)-2-(3(terc.butaxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2- naftyl)-propionové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,44 (s, 9H); 3,40 (t, 2H); 3. 76 (s, 3H) 4. 28 (d, 2H);
5,00 (s(br), 1H); 5,18 (q, 1H); 6,75 (d, 1H); 7,20-7,80 (m, 11H) (R)-2-(3-(terc.Butoxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2naftyl)propionová kyselina:
Methyl ester (R)-2-(3-(terc.butaxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2naftyl)-propionové kyseliny (8,8 g, 19,1 mmol) byl rozpuštěn v metahanolu (100 ml) a byl přidán hydroxid lithný (0,55 g, 22,2 mmol). Po 2 h byly přidány dichlormethan (200 ml), voda (200 ml) a 3M hydrogensíran sodný (50 ml). Pak byla oddělena organická fáze, promyta vodou (100 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 7,9 g (R)-2-(3(terc.butoxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2-naftyl)propionové kyseliny.
1H-NMR (DMSO) 1,38, 1,39 (dva s, 9H); 3,30 (m, 2H); 4,12 (d, 2H); 4,71 (m, 1H); 6. 10 (s (br), 1H); 7,30-7,90 (m, 11H); 8,75 (d, 1H); 12,80 (s(br), 1H).
Ethyl ester (R)-5-(1 -(N-methyl-terc.butoxykarbonylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
r
1,3-Dicyklohexylkarbodiimid (1,88 g, 9,1 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (25 ml) a při 0-5 °C přidán k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-(2-naftyl)alaninu (3,0 g, 9,1 mmol) v dichlormethanu (50 ml). Reakční směs byla zahřána na 20 °C a míchána 30 min. Pak byl přidán roztok ethyl 2-amino-2-hydroxyimino) acetatu (1,2 g, 9,1 mmol) v pyridinu (50 ml). Dichlormethan byl odpařen a reakční směs zahřívána 18 h k refluxu. Pak byla ochlazena na 0 °C a zfiltrována. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu, zbytek rozpuštěn v ethyl acetatu (25 ml) a promyt vodnou kyselinou citrónovou (10%,3 x 15 ml) a vodou (3x15 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (90 g) s eluentem ethyl acetat/heptan (1:4) za získání 1,59 g ethyl esteru (R)-5-(1-(N-methylterc.butoxykarbonylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
tt 99-102 °C
Ή-NMR (DMSO-d6) 1,30-1,40 (m, 3H); 4,40-4,50 (m, 2H); 5,70-5,90 (m, 1H); 7,45-7,90(m, 7H).
Hydrochlorid ethyl esteru (R) 5-(1-methylamino-2-(2-naftyl)ethyl)[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
l ·· ··· ·
Ethyl ester (R)-5-(1-(N-methyl-terc.butoxykarbonylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (0,77 g, 1,8 mmol) byl rozpuštěn v nasyceném roztoku chlorovodíku v ethyl acetatu (15 ml). Po 5 h při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu za získání 0,72 g hydrochlorid ethyl esteru (R) 5-(1-methylamino-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,32(t, 3H); 2,71 (s, 3H); 4,40(q, 2H); 5,45(q, 1H);
7,30-7,90(m, 7H)
I
HPLC: Rt = 19,7 min (metoda a)
Ethyl ester 5-( 1-[2-(3-(terc.butoxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)3-(2-naftyl)propionyl-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl ^-[1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,51 g, 2,6 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,36 g, 2,6 mmol) byly přidány k roztoku 2-(3(terc.butoxykarbonylaminomethyl)benzoylamino)-3-(2-naftyl)propionové kyseliny (1,18 g, 2,6 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs hydrochloridu ethyl esteru (R) 5-(1-methylamino-2-(2naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (0,69 g, 1,9 mmol) a triethylaminu (0,19 g, 1,9 mmol) v N,N-dimethylformamidu (10 ml). Po 18 h při 20 °C byla směs nalita do vody (175 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 175 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10 %, 20 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (25 ml) a vody (3 x 25 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl • · roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na ' silikagelu (80 g) s eluentem ethyl acetat/heptan (2:3) za získání 0,8 g 1:1 směsi dvou diastereoisomerů ethyl esteru 5--Í 1-[2-(3-(terc.butoxykarbonyl aminomethyl)benzoylamino)-3-(2-naftyl)propionyl-N-methylamino]-2-(2naftyl)ethyl}-[ 1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny. ( 1H-NMR (DMSO-d6) 1,30-1,42(m, 12H), 4,40-4,48(m, 2H) 4,90- 5,20(m, 1H); I
6,00-6,10(m, 1H) i
HPLC: diastereoisomer I; Rt = 25,6 min (metoda a) | diastereoisomer II; Rt = 30,81 min (metoda a) r
Ethyl ester 5-! 1-[2-(3-(terc.butoxykarbonyl aminomethyl)benzoylamino)3-(2-naftyl)propionyl-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyI J--(1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny (0,34 g, 0,5 mmol) byl suspendován ve směsi ?
trifluoroctové kyselina a dichlormethanu (1:1, 20 ml). Po 10 min při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a čištěna kolonovou chromatografií na silikagelu (40 g) s eluentem: dichlaromethan/10% amoniak v ethanolu (85:15) za získání 0,14 g dvou diastereoismerů sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,35-1,50(m, 3H); 4,40-4,50(m, 2H); 5,00-5,20(m, 1H);
5,98-6,13(m, 1H)
HPLC: diasteroisomer I; Rt = 26,9 min (metoda a) I diastereoisomer II; Rt = 37,7min (metoda a)
EA: vypočteno pro C39H37N5O5: C, 71,43; H, 5,69; N, 10,68% i nalezeno: C, 71,05; H, 5,54; N, 10,41%.
Příklad 7
Ethyl ester 5--( (1 R)-1 -[(2R)-2-(piperidin-4-karbonylamino)-3-(2-naftyl)propionylN-methylamino)-2-(2-naftyl)ethyl }-{1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
I'
Připraví se podle postupu E.
Ethyl ester 5--{ (1R)-1-[(2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)-propionylN-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl |·-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
í,
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,54 g, 2,8 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,38 g, 2,8 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (0,88 g, 2,8 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Po 30 min při 20 °C byl přidán rpztok hydrochloridu ethyl esteru (R) 5-(1-methylamino-2-(2-naftyl)ethyl)[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (0,7 g, 2,0 mmol)
Ν,Ν-dimethylformamidu (15ml). Reakční směs byla 3 h zahřívána na 50 °C, pak nalita do vody (180 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 200 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 25 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a vody • · ··· · (3 x 30 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu za získání 1,3 g ethyl esteru 5-<í(1R)-1-[(2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2naftyl)-propionyl-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethylf,-[1.2,43oxadiazol3-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,00-1,40(m, 12H); 4,45(q, 2H); 5,90-6,20(m, 1H).
Ethyl ester 5-j (1 R)-1-[(2R)-2-amino-3-(2-naftyl)propionyl-N-methylamino]-2(2-naftyl)ethyl}-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
Ethyl ester 5-^ (1R)-1-[(2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)-propionylN-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl <>-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (1,3 g, 20 mmol) byl suspendován ve směsi trifluoroetové kyseliny kyseliny a dichlormethanu (1:1, 50 ml). Po 10 min při 20 °C byla směs zahuštěna vevakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (100 g) s eluentem dichlormethan/10% amoniak v ethanolu (95:5) za získání 0,9 g ethyl esteru
5-Ί (1 R)-1-[(2R)-2-amino-3-(2-naftyl)propionyl-N-methyIamino]-2-(2-naftyl)ethyl K [1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,35(s, 3H); 4,45(q, 2H); 5,88-6,20(m, 1H).
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1 [(1 R)-1-(3-ethoxykarbonyl-(1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2(2-naftyl)ethyl)-N-methylkarbamoyl }>-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin1-karboxylové kyseliny:
f ϊ
N-(3-Dimethylaminopropyl)-NI-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,40 g, 2,1 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,32 g, 2,1 mmol) byly přidány k roztoku N-tere.butoxykarbonyl-4-piperidinkarboxylové kyseliny (0,48 g, 2,1 mmol) v f
N,N-dimethylformamid (10 ml). Po 1 h při 20 °C byl přidán roztok ethyl esteru 5/ (1 R)-1 -((2R)-2-amino-3-(2-naftyl)propionyl-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl / <
[1.2.4] oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (0,73 g, 1,4 mmol) v N,N-dimethyI formamidu (2 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční nalita do vody (120 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 140 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 15 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a vodou (3 x 20 ml). Po vysušení síranem $
hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou ’ chromatografií na silikagelu (40g) s eluentem ethyl acetat/heptan (1:1) za získání 0,9 g terc.butyl esteru 4-((1 R)-1 -'i [(1 R)-1 -(3-ethoxykarbonyl- ’ (1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2- (2-naftyl)ethyl)-N-methylkarbamoyl }>-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,30-1,45(m, 9H); 6,00-6,15(m, 1H) HPLC: Rt = 33,9 min (metoda a)
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1 -{ [(1 R)-1 -(3-ethoxykarbonyl-(1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2(2-naftyl)ethyl)-N-methylkarbamoyl i,-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin1-karboxylové kyseliny (0,21 g, 0,29 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny a dichlormethanu (1:1,12 ml). Po 10 min při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (40 g) s eluentem dichlormethan/10% amoniak v ethanolu (4:1) za í získání 0,12 g sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,30-1,40(m, 3H); 2,80-2,90(2s, 3H), 4,40- 4,50(m, 2H);
5,98-6,20(m, 1H)
HPLC: Rt = 25,0 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C37H39N5O5, H2O: C, 68,19; H, 6,34; N, 10,75% nalezeno: C, 68,23; H, 6,25; N, 10,60%.
Příklad 8 r
r (1 -{ [1 -(3-Karbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]N-methylkarbamoyl í,-2-(2-naftyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butyl ester 4-(1-^ [1-(3-karbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]methylkarbamoyl f--2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny:
• ·
H,C .O.
Η,Ο-Υ Y H3C O
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1--{ [(1 R)-1-(3-ethoxykarbonyl-[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2^-naftyOethyll-N-methylkarbamoyl^-^-naftyOethylkarbamoyOpiperidin-lkarboxylové kyseliny (0,67 g, 0,91 mmol) byl suspendován ve vroucím amoniaku při tlaku 105 kPa. Po 18 h byla reakční směs zahuštěna ve vakuu za získání 0,58 g dvou diastereoisomerů terc.butyl esteru 4-(1-^ [1-(3-karbamoyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyI)- ethyljmethylkarbamoyl ^-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,30-1,40(m, 9H); 4,80-4,95(m, 1H); 6,00-6,13(m, 1H)
HPLC: diastereoisomer I: Rt = 28,9 min (metoda a) diastereoisomer II: Rt = 29,4 min (metoda a) |
Směs diastereoisomerů terc.butyl esteru 4-(1-^ [1-(3-karbamoyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)- ethyl]methylkarbamoyl ^-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny (0,58 g, 0,29 mmol) byla rozpuštěna ve směsi trifluoroctové kyseliny a dichlormethanu (1:1, 12 ml). Po 5 min při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (80 g) s eluentem dichlormethan/10% amoniak v ethanolu (7:3) za získání 0,44 g dvou diastereoisomerů sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (DMSO-d6) 2,88-2,92(2s, 3H); 4,79-5,00(m, 1H); 6,00-6,13(m, 1H) HPLC: diastereoisomer I: Rt = 21,2 min (metoda a) diastereoisomer II: Rt = 22,1 min (metoda a)
Příklad 9
3-Aminomethyl-N-((1R,2E)-4-(hydroxymethyl)-1-((2-naftyl)-methyl-5-fenylpent2-enyl)benzamid:
Připraví se podle postupu A.
Terc.butyl ester ((1R,2E)-4-(terc.butyldimethylsilanyloxymethyl)1 -(2-naftyl)methyl-5-fenylpent-2-enyl-)karbamové kyseliny:
Roztok diisopropylaluminium methoxidu byl připraven z diisobutylaluminium hydridu (17,9 ml 25% roztoku v toluenu; 26,6 mmol) pod dusíkem, za chlazení v ledové lázni, a pomalým přilitím suchého methanolu (1,1 ml, 26,6 mmol). Terc.butyl ester ((1 R)-1-Benzensulfonylmethyl-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny (2,14 g; 5,0 mmol) (připravený podle článku Spaltenstein a kol.,
J. Org. Chem., 52, 3759-66, 1987) byl zahříván k varu v suchém tetrahydrofuranu (250 ml). Reakční směs byla ochlazena na -70 °C a během 10 min bylo přidáno n-butyllithium (3,92 ml; 2,5M roztok v hexanu, 9,8 mmol) a • · směs byla míchána 30 min. Roztok racemického 2-(terc.butyldimethyl silanyloxymethyl)-3-fenylpropionaldehydu (2,1 g; 7,6 mmol) (připraveného podle článku Jenmalm a kol. J. Org. Chem., 59, 1139-48, 1994) v suchém tetrahydrofuranu (10 ml) pod dusíkem byla ochlazena na -70 °C a byla přidán předem připravený roztok diisopropylaluminium methoxidu (5,4 ml; 7,6 mmol).
Ihned po přidání byl komplex hliníku přidán kanylou k roztoku sulfonových aniontů. Směs byla chlazena 30 minut, a pak byla přidána směs vodného chloridu amonného (40 ml; 10%), vody (200 ml) a dichlormethanu (200 ml).
Jednotlivé fáze byly odděleny a organická vysušena síranem hořečnatým. Po | odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 5,50 g olejovitého zbytku, který f byl suspendován v methanolu (150 ml). Vzniklá sraženina byla odfiltrována a vyhozena. K methanolovému roztoku byl přidán hydrogenfosforečnan sodný (1,7 g) a směs byla ochlazena na 5 °C a byl přidán amalgam sodný (150g; 2%). |
Po 4 h při 20 °C bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (80 g) s eluentem diethylether/heptan (1:6). Bylo získáno 0,85 g směsi izomerů terc.butyl esteru ((1 R,2E)4-(terc.butyldimethylsilanyloxymethyl)-1-(2-naftyl)methyl-5-fenylpent2-enyl)karbamové kyseliny, která byla použita v následném kroku bez dalšího čištění.
H-NMR (CDCi3) -0,02-0,08 (čtyři s, 6H) 0,85-0,90 (čtyři s, 9H) 1,40-1,45 1 (čtyři s, 9H); 2,40-3,60 (m, 7H) 4,45 (s (br), 2H); 5,20-5,46 (m, 2H); 7,02-7,82 (m, 12H) í
Rf: 0,2 diethylether/heptan (1:6)
Terc.butyl ester ((1 R,2E)-4-hydroxymethyl-1-(2-naftyl)methyl-5-fenylpent2-enyl)karbamové kyseliny:
OH
Terc.butyl ester ((1R,2E)-4-(terc.butyldimethylsilanyloxymethyl)- I
1-(2-naftyl)methyl-5-fenylpent-2-enyl-)karbamové kyseliny (0,75 g, 1,38 mmol) byl rozpuštěn 2% fluorovodíku v acetonitrilu (50 ml) a 3 h míchán při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (80g) s eluentem dichlormethan/heptan/methanol (4/10/1). Byly izolovány tři frakce obsahující sloučeniny s Rf 0,1-0,2. Hlavní frakce (v pořadí druhá) byla zahuštěna ve vakuu za získání 0,35 g směsi diastereomerů terc.butyl esteru ((1R,2E)-4-hydroxymethyl-1-(2-naftyl)methyl-5fenylpent-2-enyl)karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,38,1,40 (dva s, 9H); 2,46-3,55 (m, 7H); 4,35 (in, 1H);
4,55 (s(br), 1H); 5,28-5,43 (m, 2H); 7,01-7,82 (m, 12H) (3E,5R)-5-Amino-2-benzyl-6-(2-naftyl)hex-3-en-1-ol:
Terc.butyl ester ((1 R,2E)-4-hydroxymethyl-1-(2-naftyl)methyl-5-fenylpent- í
2-enyl)karbamové kyseliny (350 mg, 0,81 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu a byla přidána trifluoroctová kyselina (5 ml). Po 90 min bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn v dichlormethanu (5 ml) a odpařen. Nakonec byla směs lyofilizována ve vodě okyselené 4M HCI (2 ml) za získání 0,3 g dvou diastereoisomerů (3E,5R)-5-amino-2-benzyl-6-(2naftyl)hex-3-en-1-olu jako hydrochioridu, který byl následně použit bez dalšího čištění.
1H-NMR (CDCI3) 1,8 (s (br), 2H); 2,45-3,70 (m, 7H); 4,35 (m, 1H); 5,32-5,60 (m,
2H); 7,03-7,72 (m,12H).
• ·
3-(Terc.butoxykarbonylaminomethyl)benzoová kyselina (407 mg) byla rozpuštěna v dichlormethanu (6 ml), a pak převedena na symetrický anhydrid (10 min mícháním se 155 mg N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimid hydrochloridu). Ke směsi byl přidán roztok (3E,5R)-5-amino-2-benzyl-6-(2naftyl)hex-3-en-1-ol hydrochloridu (149 mg) a Ν,Ν-diisopropylethylaminu (70 μΙ) v dichlormethanu (3 ml). Směs byla míchána 20 h při 20 °C, a pak zahuštěna ve vakuu a olejovitý zbytek rozpuštěn v ethyl acetatu (50 ml). Roztok byl dostatečně promyt 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (100 ml) a vodou (2 x 100 ml). Spojebné organické fáze byly vysušeny síranem hořečnatým a zahuštěny ve vakuu. Olejovitý zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormethan/ trifluoroctová kyselina 1:1 (6 ml) a míchán. Po 10 min byla směs zahuštěna proudem dusíku a olejovitý zbytek rozpuštěn v kyselině octové (1 ml), a pak byly přidány voda (40 ml) a acetonitril (12 ml). Roztok surové sloučeniny z nadpisu byl čištěn semipreparativní HPLC na pětkrát na 25 mm x 250 mm koloně se 7μ C-18 silikagelem. Sloupec byl předem uveden do rovnováhy 30% acetonitrilem v 0,05M síranu amonném a jeho pH upraveno na 2,5 pomocí 4M kyseliny sírové. Sloupec byl eluován gradientem 30% - 45% acetonitrilu v 0,05M síranu amonném, pH 2,5 (pomocí 4M kyseliny sírové) s průtokem 10 ml/min během 47 min při 40 °C. Byly izolovány frakce odpovídající hlávním dvěma složkám, tyto frakce byly zředěny 3 objemy vody a naneseny na SepPak® filtry C18 zapojené do série (Waters part. #:51910), které byly před tím uvedeny do rovnováhy 0,1% trifluoroctovou kyselinou. Sloučeniny byly z SepPak® filtrů vymyty 70% acetonitrilem v 0,1% trifluoroctové kyselině a izolovány po zředění vodou lyofilizací.
Získaný finální produkt byl charakterizován analytickou RP-HPLC (retenční čas) a plasmovou desorpční hmotnostní spectrometrií (molární hmotnost). Nalezené molární hmotnosti izomerů I a II byly 464J a 464,5, což je ve shodě s očekávanou strukturou a v rámci experimentální chyby metody (+ 0,9 amu).
RP-HPLC analýzy byly provedeny s UV detekcí při 214 nm a Vydac 218TP54
4,6 mm x 250 mm 5 μ C-18 silikagelovou kolonou (The Separations Group, Hesperia), která byla eluována 1 ml/min 42 °C. Byly použity dva různé eluční postupy:
............. /
A1: kolona byla uvedena do rovnováhy 5% acetonitrilem v pufru, který I obsahoval 0,1M síran amonný a jeho pH bylo upraveno na 2,5 4M kyselinou sírovou, a byla 50 min eluována gradientem 5% až 60% acetonitrilu ve stejném pufru.
B1: kolona byla uvedena do rovnováhy směsí 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda a 50 min eluována gradientem 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda až 60% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda.
Retenční čas pro izomer I byl při elučním způsobu A1 32,97 min a B1
34,52 min a pro izomer II 33,67 min při elučním způsobu A1 a 33,67 min při elučním způsobu B1.
Příklad 10 ((1R,2E)-4-hydroxymethyl-1-(2-naftyl)methyl-5-fenylpent-2-enyl)amid (3R) piperidin-3-karboxylové kyseliny:
Připraví se podle postupu A.
((1R,2E)-4-hydroxymethyl-1-(2-naftyl)methyl-5-fenylpent-2-enyl)amid (3R) piperidin-3-karboxylové kyseliny byl připraven a charakterizován stejným postupem jako v příkladu 9. Molární hmotnost izomeru I byla 442,6 a izomeru II 422,5, což je ve shodě s očekávanou strukturou a v rámci experimentální chyby metody (± 0,9 amu). RP-HPLC retenční časy izomeru I při elučním postupu A1 30,02 min a postupu B1 31,30 min, izomeru li při elučním postupu A1 3056 min a postupu B1 31,95 min.
Příklad 11 <{(1 R)-1-[N-methyl-N-((1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl]-2-(2-naftyl)ethyl) amid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kyseliny:
·· ·· ···· • · · · « • · · · ♦ • · · ··· · • · · ·
I · · · · ·
Připraví se podle postupu E.
Terc.butyl ester 3-hydroxy-1,1-dimethylpropylkarbamové kyseliny:
CH3 O h,C CH, h3cvJ j i •V'’ HjC^O^NH^^OH
Ethyl chloraformiat (1,10 ml, 11,5 mmol) byl po kapkách při 0 °C přidán k roztoku 3-terc.butoxykarbonylamino-3-methylbutanové kyseliny (2,50 g,
11,5 mmol) a triethylaminu (1,92 ml, 13,8 mmol) vTHF (10 ml). Roztok byl míchán 40 min při 0 °C. Vzniklá sraženina byla odfiltrována a promyta THF (20 ml). Filtrát byl ihned ochlazen na 0 °C a po kapkách byl přidán 2M roztok lithium borohydridu v THF (14,4 ml, 28,8 mmol). Roztok při 0 °C míchán 2 h a pak zahřát během 4 h na teplotu místnosti. Potom byl opět ochlazen na 0 °C a byl opatrně přidán methanol (5 ml) a následně 1N chlorovodíková kyselina (100 ml). Roztok byl nakonec extrahován ethyl acetatem (2 x 100 ml, 3 x 50 ml) a spojené organické vrstvy promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (110 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:2 za získání 1,84 g terc.butyl esteru 3-hydroxy-1,1-dimethylpropylkarbamové kyseliny.
400 MHz 1H NMR (CDCI3): 1,33 (s, 6H); 1,44 (s, 9H); 1,88 (t, 2H); 1,94 (br,
1H); 3,75 (q, 2H); 4,98 (br, 1H).
3-(Terc.butoxykarbonylamino)-3-methylbutanal:
HjC
HjC
K roztoku oxalyl chloridu (1,1 ml, 12,9 mmol) v dichlaromethanu (15 ml) byl při -78 °C přidán DMSO (1,22 ml, 17,2 mmol) a směs byla při této teplotě míchána 15 min. Potom byl po kapkách během 15 min přidán roztok terc.butyl esteru 3hydroxy-1,1-dimethylpropylkarbamové kyseliny (1,75 g, 8,6 mmol) v dichlormethanu (10 ml) a směs byla při -78 °C míchána dalších 15 min. Následně byl přidán triethylamin (6,0 ml, 43 mmol) a směs byla 5 min míchána -78 °C a pak zahřána na teplotu místnosti. Roztok byl zředěn dichlormethanem (100 ml) a extrahován 1M chlorovodíkovou kyselinou (100 ml). Vodná fáze byla extrahována dichlormethanem (50 ml) a spojené organické vrstvy promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (140 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:3 za získání 1,10 g 3-(terc.butoxykarbonylamino)-3-methylbutanalu.
400 MHz-1H-NMR (CDCI3): 1,39 (s, 6H); 1,45 (s, 9H); 2,85 (d, 2H); 4,73 (br. 1H); 9,80 (t, 1H).
Ethyl (2E)-5-(terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enoat:
Triethylfosfonoacetat (1,96 ml, 9,8 mmol) byl rozpuštěn v THF (30 ml) a byl přidán terc.butoxid draselný (1,10 g, 9,8 mmol). Roztok byl míchán 40 min při teplotě místnosti a pak byl pomalu přidán roztok 3-(terc.butoxykarbonylamino)3-methylbutanalu (1,10 g, 5,5 mmol) v THF (6 ml). Roztok byl míchán 75 min při teplotě místnosti a pak zředěn ethyl acetatem (100 ml) a 1M kyselinou chlorovodíkovou (100 ml). Vodná fáze byla extrahována ethy, acetatem (2 x 50 ml) a spojené organické vrstvy promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (60 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (90 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:4 za získání ethyl (2E)-5-(terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enoatu.
200 MHz-1H-NMR (CDCI3): 1,30 (s, 6H); 1,30 (t, 3H); 1,46 (s, 9H); 2,62 (d, 2H);
4,27 (q, 2H); 4,42 (br, 1H); 5,88 (d, 1H) 6,94 (td, 1H).
(2E)-5-(Terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enová kyselina:
Ethyl (2E)-5-(terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enoat (1,23 g,
4,54 mmol) byl rozpuštěn v dioxanu (20 ml) a byl přidán pevný hydroxid lithný (0,120 g, 5,00 mmol) a voda (10 ml). Roztok byl míchán 16 h při teplotě místnosti a pak zředěn vodou (70 ml) a extrahován terc.butylmethyletherem (2 x 100 ml). Vodné fáze byly okyseleny 1M hydrogensíranem sodným (pH = 1) a extrahovány terc.butylmethyletherem (3 x 70 ml). Organické vrstvy byly spojeny a vysušeny síranem hořečnatým a zahuštěny ve vakuu za získání 1,05 g (2E)-5-(terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enové kyseliny.
Surový produkt byl použit v dalším kroku.
400 MHz-1H-NMR (DMSO d6): 1,15 (s, 6H); 1. 35 (s, 9H); 2,53 (d, 2H); 5,75 (d, 1H); 6,57 (br, 1H); 6,75 (td, 1H); 12,15 (s, 1H).
Terc.butyl ester (R) N-methyl-N-[1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2- (2naftyl)ethyl]karbamová kyselina:
Isobutylchlorformat (1,22 g, 9,0 mmol) byl při -20 °C po kapkách přidán k roztoku (R) N-methyl-N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (3,0 g, 9 mmol) a N-methylmorfolinu (0,91 g, 9,0 mmol) v dichlormethanu (40 ml). Po 15 min při -20 °C byl přidán acetamidoxim (1,33 g, 18 mmol) a pak N-methyl-morfolin (0,91 g, 9 mmol). Po 30 min při -20 °C byla reakční směs zahřána na 20 °C a zředěna N,N-dimethylformamidem (40 ml). Dichlormethan byl odpařen ve vakuu a reakční směs 16 h zahřívána na 120 °C. Potom byla nalita do vody (120 ml) a extrahována ethyl acetatem (celkem 180 ml). Spojené organické fáze byla promyty vodou (40 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Po odpaření ve vakuu bylo získáno 3,5 g surového terc.butyl esteru (R) N-methyl-N-[1-(3methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2- (2-naftyl)ethyl]karbamová kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
- |
Hydrochlorid (R) N-methyl-N-(1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2(2-naftyl)ethyi)aminu:
Terc.butyl ester (R) N-methyl-N-[1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2- (2naftyl)ethyl]karbamové kyseliny (3,3 g, 9,0 mmol) byl rozpuštěn v nasyceném roztoku chlorovodíku v ethyl acetatu (75 ml). Po 3 h při 20 °C byla reakční směs zfiltrována za získání 1,52 g hydrochloridu (R) N-methyl-N-(1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2- (2-naftyl)ethyl)aminu.
tt 198-202 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 2,35(s, 3H); 2,68(s, 3H); 3,43(dd, 1H); 3,80(dd, 1H); f
5,29(dd, 1H); 7,30(d, IH); 7,45-7,90(m, 7H). I
HPLC: Rt = 16,3 min (metoda a)
EA. vypočteno pro C16H17N3O1, HCI; C, 63,26; H, 5,97; N, 13,83% i nalezeno: C, 63,37; H, 6,11; N, 13,53%. I — —— —------—>
Terc.butyl ester (1R)-1 -(N-methyl-N-[( 1 R)-1 -(3-methyl-[ 1,2,4]oxadiazoI-5-yi)-2(2-naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl f-karbamové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochloríd (1,12 g,
5,85 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,8 g, 5,85 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)-alaninu (1,84 g, 5,85 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (45 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs hydrochloridu (R) N-methyl-N-(1-(3-methyl-(1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2(2-naftyl)ethyl)aminu (1,27 g, 4,18 mmol) a triethylaminu (0,42 g, 4,18 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (15 ml). Po 18 h při 20 °C byla směs nalita do vody (200 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 110 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 40 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanem sodným (3 x 40 ml) a vodou (3 x 40 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu za získání 2,4 g surového terc.butyl esteru -{(1R)-1-(N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl73 [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2- (2-naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl ^karbamové kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
Sůl (2R)-2-amino-N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiaz01-5-yl)- 2-(2naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou:
6Χ*ΜΜΊ.Λ’
Tere.butyl ester (1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2(2-naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl (“karbamové kyseliny (2,4 g,
4,2 mmol) byl při 20 °C rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (40 ml) a dichlormethanu (40 ml). Po 10 min byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a znovu odpařena dichlormethanem (80 ml). Zbytek byl krystalován z ethyl acetatu za získání 1,19 g soli (2R)-2-amino-N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl[1.2.4] oxadiaz01-5-yl)- 2-(2-naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamid s trifluoroctovou kyselinou.
t, 190-191 °C.
1H-NMR (DMSO-d6) 2. 33 (s, 3H); 2. 88 (s, 3H); 3. 00-3. 15 (m, 2H)
3,45(dd, 1H); 3,65(dd, 1H); 4,71(t, 1H); 7,25-7,95(m, 14H)
HPLC: Rt = 24,3 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C29H28N4O2, CF3COOH: C, 64,35; H, 5,05; N, 9,68% nalezeno: C, 64,30; H, 5,13; N, 9,44%.
Tere.butyl ester [1,1-dimethyl-4-((1 R)-1-(N-methyl-[(1 R)-1-(3-methyl[1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)but-3-enyl]karbamové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,28 g,
1,48 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,23 g, 1,48 mmol) byly přidány k roztoku (2E)-5-(terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enové , kyseliny (0,36 g, 1,48 mmol) v N,N-dimethylformamidu (5 ml). Po 30 min při >.
°C byla přidána směs soli (2R)-2-amino-N-methyl-N-[(1R)-1 -(3-methyl- I [1.2.4] oxadiaz01 -5-yl)- 2-(2-naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou (0,61 g, 1,06 mmol) a triethylaminu (0,61 g, 1,06 ( mmol) v N,N-dimethylformamidu (7 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do vody (80 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 40 ml).
Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 15 ml) a vodou | (3 x 15 ml) a nakonec vysušeny síranem hořečnatým. Zahuštěním směsi ve vakuu bylo získáno 0,71 g surového [1,1-dimethyl-4-((1R)-1-(N-methyl-[(1R)-1- f (3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)but-3-enyl]karbamové kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
HPLC: Rt = 34,9 min (metoda a)
Terc.butyl ester [1,1-dimethyl-4-((1R)-1-(N-methyl-[(1R)-1-(3-methyl[1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)but-3-enyl]karbamové kyseliny (0,71 g, 1,03 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (10 ml) a dichlormethanu (10 ml). Po 10 min při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (80 g) s eluentem 10% amoniak I v ethanolu/dichlormethan (9:91) za získání 0,44 g sloučeniny z nadpisu.
HPLC: Rt = 23,6 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C36H39N5O3, 0,75 H20: C, 71-68; H, 6,77; N, 11,61% nalezeno: C, 71,76; H, 6,73; N, 11,12%.
Příklad 12 [(1 R)-1 -<! N-methyl-N-[(1 R)-1-(3- methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl í,-2-(2-naftyl)ethyl]amid 4-amino-4-methylpent-2-enové f kyseliny:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butyl ester 'i 1,1-dimethyl-3-[(1R)-1-(N-methyl-N-((1R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl]allyl ^karbamové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,26 g,
1,38 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,21 g, 1,38 mmol) byly přidány k roztoku N-terc.butoxykarbonyl-4-amino-4-methylpent-2-enové j
1.
kyseliny (0,32 g, 1,38 mmol) N,N-dimethylformamidu (5 ml). Po 30 min při °C byly přidána směs soli (2R)- 2-amino-N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl- j [1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)-3-(2-naftyl) propionamidu s trifluoroctovou kyselinou (0. 57 g, 0. 99 mmol) a triethylaminu (0,10 g, 0,99 mmol) in N,N-dimethylformamid (6 ml). Po 18 h pň 20 °C byla reakční směs nalita do vody (75 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 30 ml).
Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 15 ml) a vodou I (3x15 ml) a nakonec vysušeny síranem hořečnatým. Zahuštěním směsi ve vakuu bylo získáno 0,68 g surového terc.butyl esteru i 1,1-dimethyl-3-[(1 R)-1- | (N-methyl-N-((1 R)-1-(3-methyl- [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl) karbamoyi)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl]allyl ^karbamové kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
HPLC: Rt = 33,4 min (metoda a)
Terc.butyl ester ·{ 1,1 -dimethyl-3-[(1 R)-1-(N-methyl-N-((1 R)-1-(3-methyl[1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl]allyl )karbamové kyseliny (0,68 g, 1,01 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (10 mi) a dichlormethanu (10 ml). Po 10 min při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn • ·· ·
.....
kolonovou chromatografií na silikagelu (80 g) s eluentem 10% amoniak v ethanolu/dichlormethan (1:9) za získání 0,48 g sloučeniny z nadpisu.
HPLC: Rt = 23,3 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C35H37N5O3, 0,5 H2O: C, 71,90; H, 6,55; N, 11,98% nalezeno; C, 71,82; H, 6,55; N, 11,71%.
Příklad 13
N-[(1 R)-1-(N-Methyl-N-[(1 R)-]-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyi)-N-methylamid (2E)-4-amino4-methylpent-2-enové kyseliny:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butyl ester N-methyl-N-((1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny:
• ·
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (1,34 g, 7,0 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,95 g, 7,0 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (2,31 g, 7,0 mmol) v N,N-dimethylformamidu (50 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs (R) N-methyl-N-(1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)amin hydrochloridu (1,52 g, 5,0 mmol) a triethylaminu (0,51 g, 5,0 mmol) v N,N-dimethylformamidu (10 ml). Po 18 h při 20 °C byla směs nalita do vody (250 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 130 ml). Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 50 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 50 ml) a vodou (3 x 50 ml) a nakonec vysušeny síranem hořečnatým. Reakční směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (110 g) s eluentem heptan/ethyl acetat (1:1) za získání 2,4 g terc.butyl esteru N-methyl-N-((1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny.
HPLC: Rt = 36,5 min (metoda a)
Sůl (2R)-2-methylamino-N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2(2-naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou:
Terc.butyl ester N-methyl-N-((1 R)-1 -(N-methyl-N-[(1 R)-1 -(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyi)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny (2,4 g, 4,2 mmol) byl při 20 °C rozpuštěn ve směsi trifluoroctové ··· ·«···· • · · · · · ·· ···· • · · ··· ·· ·· ··· ····· ·· · <
kyseliny (40 ml) a dichlormethanu (40 ml). Po 10 mni byla směs zahuštěna ve vakuu a odpařena s dichlormethanem (80 ml). Zbytek byl krystalován z ethyl acetatu za získání 1,9 g soli (2R)-2-methylamino-N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl[1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou.
v $
t, 184-188 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,53(s, 3H); 2,34(s, 3H); 2,63(s, 3H); 3,05(dd, 1H) 3 ,21 | (dd, 1H) 3. 40 (dd, 1H) 3. 55 (dd, 1H) 4. 60 (t, 1H) 6,35(dd, 1H); 7,25(d, 1H); ?
7,40-7,90(M, 14H) f
T
HPLC: Rt = 24,9 min (metoda a)
EA. vypočteno pro C3oH3oN402, CF3COOH: C, 64,86; H, 5,27; N, 9,45% nalezeno: C, 65,01; H, 5,35; N, 9,32%.
Terc.butyl ester (2E)-( 1,1-dimethyl-3-[N-((1R)-1-(N-methyl-N-((1R)-1-(3-methyl[1.2.4) ]oxadiazo1 -5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2- naftyl)ethyl]N-methylkarbamoyl]allyl f-karbamové kyseliny:
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,31 g, 1,6 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,22 g, 1,6 mmol) byly přidány k roztoku (2E)-4terc.butoxykarbonylamino-4-methylpent-2-enové kyseliny (0,37 g, 1,6 mmol) v N,N-dimethylformamidu (5 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs g soli (2R)-2-methylamino-N-methyl-N-[(1 R)-1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou (0,68 g,
1,2 mmol) a triethylaminu (0,12 g, 1,2 mmol) v N,N-dimethylformamidu (5 ml).
• · ··· ·
Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do vody (80 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 55 ml). Organické vrstvy byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 15 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 15 ml) a vodou (3 x 15 ml) a nakonec vysušeny síranem hořečnatým. Reakční směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (80g) s eluentem heptan/ethyl acetat (3:7) za získání 0,75 g terc.butyl esteru (2E)A 1,1-dimethyl3-[N-((1 R)-1-(N-methyl-N-((1 R)-1-(3-methyl- [1,2,4)]oxadiazo1-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2- naftylJethylj-N-methylkarbamoyljally/karbamové kyseliny.
HPLC: Rt = 33,8 min (metoda a)
Terc.butyl ester (2E)-<! 1,1-dimethyl-3-[N-((1R)-1-(N-methyl-N-((1R)-1-(3-methyl[1,2,4)]oxadiazo1 -5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2- naftyl)ethyl]N-methylkarbamoyl]allyl )karbamové kyseliny (0,62g, 1,9 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (9 ml) a dichlormethanu (9 ml). Po 10 min při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (80 g) s eluentem 10% amoniak v ethanolu/dichlormethan (5:95) za získání 0,44 g sloučeniny z nadpisu.
HPLC: Rt = 26,4 min (metoda a)
EA: vypočteno pro C36H39N5O3, 0,75 H2O: C, 71,68; H, 6,77; N, 11,61% nalezeno: C, 71,81; H, 6,72; N, 11,17%.
Příklad 14
3-Aminomethyl-N-((1 R)-1 -(N-[( 1 R)-1 -(((dimethylkarbamoyl)methoxy)methyl)-2fenylethyl]-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylbenzamid
i ···· ···· ·· · ··· ······ • · · · ·· · · · · · · ··· ··· ·· ·· ··· ····· · · ·
Připraví se podle postupu G.
(2R)-2-(Methylamino)-3-fenyIpropan-1-ol:
(2R)-2-(Methylamino)-3-fenylpropan-1-ol byl připraven podle článku |
M.J. McKennon, A.l. Meyers, K. Drauz a M. Schwarm, J. Org. Chem. 1993 (58), |
3568-3571. ?
tt 69-69 °C (lit. pro (2S)-2-(methylamino)-3-fenylpropan-1-ol: M.J. McKennon, |
A.l. Meyers, K. Drauz a M. Schwarm, J. Org. Chem. 1993 (58), l
3568-3571: 71-74 °C; A. Karim, A. Mortreux, F. Petit, G. Buono, G. |
Peiffer, C. Siv, J. Organomet. Chem. 1986, 317, 93: 68 °C)
Terc.butylester N-((1 R)-1 -hydroxymethyl-2-fenylethyl)-N-methylkarbamové kyseliny: |
CHj OH (2R)-2-(Methylamino)-3-fenylpropan-1-ol (6,00 g, 36,3 mmol) byl rozpuštěn v THF (80 ml) abyl přidán 1M roztok hydroxidu sodného (36,3 ml, 36,3 mmol). Při teplotě místnosti byl pomalu přidán roztok di-terc.butyl dikarbonatu (9,50 g,
43,6 mmol) v THF (60 ml), a pak byla směs míchána 16 h při stejné teplotě. Potom byla přidána voda (200 ml) a ethyl acetat (200 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná promyta ethyl acetatem (2 x 100 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým, reakční směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (170g) s eluentem ethylaceat/heptan (1:1) za získání 7,85 g terc.butylesteru N-((1R)-1hydroxymethyl-2-fenylethyl)-N-methylkarbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1,32-1,40 (br, 9H); 2,55 - 2,95 (m, 5H); 3,65 - 3,67 (br, 2H); 4,10-4,35 (br, 1H); 7,05 - 7,35 (m, 5H).
• · · · · · ······ ··· · · · ·· ·· ··· ··· ·· ·· · j
Ethyl ester ((2R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropoxy)octové kyseliny:
N-((1R)-1-Hydroxymethyl-2-fenylethyl)-N-methylkarbamová kyselina (3,98 g, 15,0 mmol) byla rozpuštěna v 1,2-dichlorethanu (150ml) a roztok byl zahřán na 75-80 °C. Potom byl přidán rhodium(ll) acetat (0,1 g, 0,4 mmol), a pak během 6 h roztok ethyl diazoacetatu (2,4 ml, 22,5 mmol) v dichlormethanu (100 ml). Po 3 h byl přidán další podíl rhodium(ll) acetatu (0,1 g, 0,4 mmol). Po přidání veškerého ethyl diazoacetatu byl roztok ochlazen na teplotu místnosti a zfiltrován přes křemelinu. Filtrát byl zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (100 g) za získání 1,53 g ethyl esteru ((2R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropoxy)octové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,28 (m, 3H); 1,39 -1,48 (dva s, 9H); 2,65 - 2,95 (m, 9H);
3,58 (m, 1H); 3,67 (br, 1H); 3,98 - 4,27 (m, 4H); 4,35 - 4,55 (br, 1H); 7,10-7,30 (m, 5H).
((2R)-2-((Terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropoxy)octová kyselina:
H.C
H,C
OH
Ethyl ester ((2R)-2-((terc. butoxykarbony,)methylamino)-3-fenylpropoxy)octové kyseliny (0,60 g, 1,71 mmol) byl rozpuštěn v dioxanu (5 ml) a byl přidán roztok hydroxidu lithného (0,05 g, 2,20 mmol) ve vodě (2 ml). Směs byla 56 h míchána při teplotě místnosti, a pak byl přidán ethyl acetat (10 ml) a voda (2 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná extrahována ethyl acetatem (10 ml).
Spojené organické vrstvy byly extrahovány 1M hydroxidem sodným (20 ml), a pak spojené vodné vrstvy okyseleny 1M hydrogensíranem síranem sodným (pH = 2) a extrahovány ethyl acetatem (2 x 20 ml). Tyto ethyl acetatové vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým, a po odstranění rozpouštědla ve vakuu i bylo získáno 0,38 g surové ((2R)-2-((terc.butoxykarb0nyl)methylamino)- >
i·'
3-fenylpropoxy)octové kyseliny, která byla následně použita bez dalšího čištění. % 1H-NMR (DMSO d6): 1,15-1,27 (dva s, 9H); 2,55 -2,70 (m, 5H); 3,45-3,65 (m, j
2H); 4,00 - 4,10 (m, 2H); 4,30 - 4,50 (m, 1H); 7,15 - 7,35 (m, 5H); 13,60 (br, |
1H). f
N,N-Dimethyl-2-((2R)-2-methylamino-3-fenylpropoxy)acetamid:
((2R)-2-((Terc.butoxykarbonyI)methylamino)-3-fenylpropoxy)octová kyselina (0,37 g, 1,14 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,26 g, 1,14 mmol) byly rozpuštěny v N,N-dimethylformamidu (7 ml) a byl přidán N-ethyl- |
N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid hydrochlorid (0,26 g, 1,37 mmol).
Roztok byl 30 min míchán, a pak byl přidán 33 % hmotn. roztok dimethylamin v j ethanolu (0,33 ml, 1,26 mmol). Roztok byl míchán přes noc, a pak byla přidána voda (20 ml) a ethyl acetat (15 ml). Organická fáze byla promyta 1M hydrogensíranem sodným (30 ml) a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byl roztok zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (15 g) s eluentem ethyl acetat/dichlormethan (1:1). Produkt byl rozpuštěn v dichlormethanu (3ml) a ochlazen na 0 °C a po přidání trifluoroctové kyseliny (1 ml) míchán 20 min.
Rozpouštědlo bylo odpařeno ve vakuu a zbytek rozpuštěn ve směsi dichlormethanu (10 ml) a 1M hydroxidu sodného (10 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná extrahována dichlormethanem (4x10 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědlo odstraněno • · ve vakuu za získání 140 mg surového N,N-dimethyl-2-((2R)-2-methylamino-3fenylpropoxy)acetamidu, který byl použit pro další krok.
1H-NMR (CDCI3) 2,25 (s, 1H); 2,45 (s, 3H); 2,60 - 3,10 (m, 3H); 3,94 (s, 1H); 3,99 (s, 3H); 3,35 - 3,55 (m, 2H); 4,15 (s, 2H); 7,10 - 7,40 (m, 5H)
HPLC : Rt = 12,18 min (metoda b)
Terc.butylester N-((1 R)-1-·^ N-[(1 R)-1-(((dimethylkarbamoyl)methoxy)methyl)-2fenylethyl]-N-methylkarbamoyl}-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylkarbamové kyseliny:
I
CH,
N, N-Dimethyl-2-((2R)-2-methylamino-3-fenylpropoxy)acetamid (126 mg,
O, 50 mmol), (2R)-2((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-(2- naftyl)propionová kyselina (250 mg, 0,75 mmol) a 1-hydroxy-7- azabenzotriazol (103 mg,
0,76 mmol) byly rozpuštěny v dichlormethanu (6 ml) a N,N-diniethylformamidu (5 ml), a pak míchány 30 min při 0 °C s N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid hydrochloridem (146 mg). Pak byl přidán diisopropylethylamin (87 μΙ) a míchání pokračovalo 1 h při 0 °C. Po odpaření dichlormethanu proudem dusíku, byl přidán ethyl acetat (25 ml) a směs postupně extrahována 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (2 x 25 ml), 5% vodným hydrogen síranem draselným (2 x 25 ml) a vodou (25 ml). Po vysušení organické fáze síranem hořečnatým a zahuštění ve vakuu bylo získáno 265 mg surového terc.butylesteru N-((1 R)-1-·^ N-[(1 R)-1-(((dimethylkarbamoyl)methoxy)methyl)-2fenylethyl]-N-methylkarbamoylf’-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylkarbamové kyseliny.
3-Aminomethyl-N-((R)-1--{ N-[(1R)-1-(((dimethylkarbamoyl)methoxy)methyl)-2fenylethyl]-N- methylkarbamoyl !>-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylbenzamid:
····
Polovina (132 mg, 0,23 mmol) byla rozpuštěna ve směsi dichlormethanu a trifluoroctové kyseliny 1:1 (2 ml) a 10 min míchána. Po zahuštění proudem dusíku byl zbytek rozpuštěn v 1 ml 1M chlorovodíkové kyseliny, zředěšn vodou na objem 50 ml a lyofilizován. Produkt lyofilizace byl rozpuštěn v dichlormethanu (5 ml) a byl přidán diisopropylethylamin (171 μ,). K této směsi byl přidán dichlormethanový (5 ml) roztok 3-terc.bbutyloxykarbonylamino methylbenzoové kyseliny (503 mg, 2,0 mmol), která byla těsně před tím převedena na symetrický anhydrid (15 min mícháním s N-ethyl-N'(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimid hydrochloridem (191,6 mg, 1,0 mmol). Reakční směs byla zahuštěna a zbytek rozpuštěn v ethyl acetatu (25 ml). Tato směs byla postupně extrahována 5% vodným hydrogenuhličitanem sodným (50 ml), 5% vodným hydrogen síranem draselným (50 ml) a vodou (50 ml). Po vysušení organické fáze síranem hořečnatým a zahuštění proudem dusíku byl zbytek rozpuštěn ve směsi dichlormethanu a trifluoroctové kyseliny 1:1 (4 ml), a po 10 min byla směs zahuštěna proudem dusíku a zbytek rozpuštěn v 5 ml směsi 70% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina a zředěn vodou na objem 50 mi. Surová sloučenina z nadpisu pak byla čištěna semipreparativní HPLC na čtyřikrát na 25 mm x 250 mm koloně se 71 μ C-18 silikagelem, která byla před tím uvedena do rovnováhy 29% acetonitrilem v 0,05 M síranu amonném, jehož pH bylo 4M kyselinou sírovou upraveno na 2,5.
Kolona byla eluována gradientem 29% - 39% acetonitrilu v 0,05 M síranu amonném, pH 2,5 s průtokem 10 ml/min během 47 min při 40 °C. Peptid obsahující frakce byly spojeny, zředěny 3 objemy vody a naneseny na SepPako C18 filtr (Waters part. #:51910), který byl uveden do rovnáhy 0,1% trifluoroctovou kyselinou a z kterého byl peptid vymyt směsí 70% • · · • · ·· • · · • · · · • · · ·· ··· • ·· ·
4' acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina. Z roztoku byl pak po zředění vodou izolován lyofilizací.
·· ·· • · · · • · · · • · · ··· • · · ·· ··
Konečný produkt byl charakterizován RP-HPLC (retenční čas) a plasmovou , desorpční hmotnostní spektrometrií. Stanovená molární hmotnost MH+: 592,9 | amu je ve shodě s očekávanou strukturou (teor. MH+: 593,4 amu) v rámci I experimentální chyby metody.
RP-HPLC analýza byly provedena s UV detekcí při 214 nm a s Vydac 21BTP54 |
4,6 mm x 250 mm 5g C-18 silikagelovou kolonou (The Separations Group, r
Hesperia), která byla při 42 °C eluována průtokem 1 ml/min.
Byly použity dva rozdílné eluční systémy:
A1: kolona byla uvedena do rovnováhy 5% acetonitrilem v pufru, který obsahoval 0,1M síran amonný a jeho pH bylo upraveno na 2,5 kyselinou sírovou (4M), a byla 50 min eluována gradientem 5% až 60% acetonitrilu ve stejném pufru.
B1: kolona byla uvedena do rovnováhy směsí 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda a 50 min eluována gradientem 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda až 60% acetonitril/0,1% TFA/voda. |
Retenční čas při elučním způsobu A1 byl 30,92 min; při elučním způsobu B1
35,15 min. I
Příklad 15
Amid 5-((1 R)-1-(((1 R)-2-(((2E)-4-amino-4-methylpent-2- enoyl)methylamino)3-(2-naftyl)propionyl)methylamino)-2-fenylethyl)-[1,3,4]-oxadiazol-2-karboxylové kyseliny:
Ethyl ester (2R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropionové kyseliny:
ch3 o (2R)-2-((tertc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropionová kyselina (4,0 g,
14,27 mmol) byla rozpuštěna ve směsi dichlormethanu (5 ml) a ethanolu (0,95 ml, 16,27 mmol). Pak byl přidán 4-dimethylaminopyridin (0,19 g,
1,57 mmol), směs ochlazena na 0 °C a byl přidán N-(3- dimethylaminopropyl)N-ethylkarbodiimid hydrochlorid (2,98 g, 15,55 mmol). Reakční směs byla míchána 2 h při 0 °C a 16 h při teplotě místnosti. Potom bylo rozpouštědlo | odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn ve směsi ethyl acetat/voda (30 ml/30 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a organická promyta nasyceným j roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou a vysušena síranem hořečnatým. Surový produkt byl čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (180 g) s eluentem ethyl acetat/heptan 1:2 za získání 1,95 g ethyl esteru (2R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropionové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1,15 -1,50 (m, 12H); 2,71 (m, 3H); 3. 00 (m, 1H); 3,80 (m, 1H); 4,20 (br q, 2H); 4,55 - 4,90 (dva br dd, dohromady 1H); 7,10 - 7,40 (m, 5H).
Terc.butyl ester ((1R) -1-hydrazinokarbonyl-2-fenylethyl)methylkarbamové kyseliny:
CHj O
Ethyl ester (2R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-fenylpropionové kyseliny (1,9 g, 6,16 mmol) byl rozpuštěn v bezvodém ethanolu (15 ml) a po kapkách byl přidán hydrazin hydrát (3,0 ml, 61,6 mmol). Roztok byl přes noc míchán při teplotě místnosti, a pak rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethyl acetatu (40 ml) a promyt vodou (40 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 1,40 g surového terc.butyl esteru ((1R) -1-hydrazinokarbonyl2-fenylethyl)methylkarbamové kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
1H-NMR (CDCI3): 1,20 - 1,50 (m, 9H); 2,76 (s, 3H); 3,00 (m, 1H); 3,35 (m, 1H) ; 3,85 (br, 2H); 4,75 a 4,85 (dva m, dohromady 1H); 7,10 - 7,40 (m, 5H); 7,45 (br, 1H).
-((2R)-2-((Terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3- fenylpropionyl)2-ethoxykarbonylformylhydrazin:
h3c
HjC
CHj
Terc.butyl ester ((1R) -1-hydrazinokarbonyl-2-fenylethyl)methylkarbamové kyseliny (1,4 g, 4,76 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (40 ml) a byl přidán triethylamin (0,8 ml, 5,71 mmol). Roztok byl ochlazen na -15 °C a po kapkách byl přidán oxalyl chlorid (0,59 ml, 5,24 mmol). Směs byla 15 min míchána při -15 °C, a potom zahřána na teplotu místnosti. Po extrakci vodou (2 x 20ml) a 5% citrónovou kyselinou (30 ml) a promytí nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného byla organická vrstva vysušena síranem _ _ · · · ·
..........
hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (140 g) s eluentem ethyl acetat/dichlormethan 1:3 za získání 1,40g 1-((2R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)3-fenylpropionyl)-2-ethoxykarbonylformylhydrazinu.
1H-NMR (CDCh): 1,30 -1,50 (m, 12H); 2,80 (br, 3H); 3,05 (m, 1H); 3,35 (m, 1H); 4,37 (br m, 2H); 4,82 a 4,95 (br a br t, dohromady 1H); 7,05 - 7. 35 (m, 5H); 8,60, 8,95, 9,15, 9,45 (všechno br, dohromady 2H).
Ethyl ester 5-((1 R)-1-((terc.butoxykarbonyl)m ethylamino)-2-fenylethyl)[1,3,4Joxadiazol-2-karboxylové kyseliny:
ch3
-((2R)-2-((T erc. butoxykarbonyl)methylamino)-3- fenylpropionyl)2-ethoxykarbonylformylhydrazin (1,4 g, 3,55 mmol) byl rozpuštěn ve směsi etheru (25 ml) a THF (10 ml) a při 0 °C byl přidán pyridin (1,44 ml, 17,75 mmol), a pak po kapkách thionyl chlorid (0,3 ml, 3,90 mmol). Reakční směs byla 2 h míchána při 0 °C, a pak byla odfiltrována vzniklá sraženina. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu bez zahřívání, zbytek rozpuštěn v toluenu (25 ml) a 2 h zahříván k varu. Pak byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (70 g) s eluentem ethyl acetat/dichlormethan 1:2 za získání 721 mg ethyl esteru 5-((1 R)-1-((terc.butoxykarbonyl)m ethylamino)-2fenylethyl)- [1,3,4]oxadiazol-2-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1,35 (br d, 9H); 1,47 (t, 3H); 2,70 (br, 3H) 3,30 (br, 1H); 3,50 (br, 1H); 4,52 (br, 2H); 5,55 a 5,88 (dva br, dohromady 1H); 7,15-7,40 (m, 5H).
Terc.butylester ((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)-2-fenyiethyl)methyl karbamové kyseliny:
HjC
H3C
CH, O
A'X o
Ethyl ester 5-((1 R)-1-((terc.butoxykarbonyl)m ethylamino)-2-fenylethyl)[1.3.4] oxadiazol-2-karboxylové kyseliny (600 mg, 1,6 mmol) byl rozpuštěn v j
THF (4 ml) a přidán do vroucího amoniaku. Roztok byl míchán 3 h, a pak amoniak odstraněn proudem dusíku. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi { ethylacetat/10% hydrogensíran sodný (20 ml/20 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a organická promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysušena síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (40 g) s eluentem ethylacetat/heptan 2:1 za získání 383 mg terc.butylesteru ((1R)-1-(5-karbamoyl[1.3.4] oxadiazol-2-yl)-2-fenylethyl)methyl karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,30 (br, 9H); 2,75 (br d, 3H); 3,30 (dd, 1H) 3,50 (br, 1H);
5,55 a 5,85 (dva br, dohromady 1H); 6,27 (br, 1H); 7,10 (br, 1H); 7,20 - 7,40 (m, 5H).
------.----------------------------- |
Amid 5-((1 R)-1 -methylamino-2-fenylethy)-[1,3,4]oxadiazol-2-karboxylové kyseliny: i
Terc.butylester ((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)-2-fenylethyl)methyl karbamové kyseliny (350 mg, 1,01 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (6 ml) a roztok ochlazen na 0 °C. Pak byla po kapkách přidána trifluoroctová kyselina (2 ml) a směs míchána 30 min. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn v dichlormethanu (6ml). Toto bylo opakováno ještě jednou.
··· ······ • · · · ·· ·· ···· ··· ··· ·· • · ··· · · · · · ·· ·
Zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu (10 ml) a promyt vodou. Vodná fáze byla lyofilizována za získání 247 mg surového amidu 5-((1 R)-1 -methylamino-2fenylethy)-[1,3,4]oxadiazol-2-karboxylové kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
á 1H-NMR (DMSO d6): 2,65 (s, 3H); 3,35 (dd, 1H); 3,62 (dd, 1H) 5,20 (dd, 1H); (
7,10 - 7,40 (m, 5H); 8,35 (s, 1H); 8,68 (s, 1H).
Terc.butylester ((1 R)-1-(((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)- |
2-fenylethyl)methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)methylkarbamové kyseliny: d
Amid 5-((1 R)-1-methylamino-2-fenylethy)-[1,3,4]oxadiazol-2-karboxylové kyseliny (240 mg, 0,98 mmoí), (R)-2-((terc.butoxykarbonyl)methylamino)-3-(2naftyl)propionová kyselina (320 mg, 0,98 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol * (133 mg, 0,98 mmol) byly rozpuštěny ve směsi dichlormethanu (8 ml) a DMF (4 ml). Roztok byl ochlazen na 0 °C a byl přidán N-(3-dimethylaminopropyl)- i
Ν'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (230 mg, 1,18 mmol) a po 10 min triethylamin (0,35 ml, 2,46 mmol). Roztok byl míchán 1 h při 0 °C a následně 16 h při teplotě místnosti. Pak byla směs naředěna ethyl acetatem (30 ml) a vodou (20 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná extrahována ethyl acetatem (20 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (30 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu I (50 g) v ethyl acetatu za získání 301 mg terc.butylesteru ((1 R)-1-(((1 R)-1-(5karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)-2-fenylethyl)methylkarbamoyl)-2-(2naftyl)ethyl)methylkarbamové kyseliny.
• · · β
1H-NMR (CDCI3): 0,84, 0,95, 1,07, 1,25 (všechno s, dohromady 9H) 2,05, 2,15, 2,42, 2,75, 2,76, 2,77, 2,87, 3,98 (všechno s, dohromady 6H); 6,90-7,90 (m, 12H).
Amid 5-((1 R)-1 -(methyl((2R)-2-methylamino-3-(2-naftyl)propionyl)amino)2-fenylethyl)-[1,3,4]oxadiazol-2-karboxylové kyseliny:
Terc.butylester ((1 R)-1-(((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)2- fenylethyl)methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)methylkarbamové kyseliny (300 mg, 0,55 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (3 ml) a ochlazen na 0 °C. Pak byla po kapkách přidána trifluoroctová kyselina (3 ml) a roztok 5 min míchán při 0 °C. Rozpouštědlo pak bylo odstraněno ve vakuu a zbytek odpařen s ethyl acetatem (5 ml), a ptom s 3M chlorovodíkem v ethyl acetatu (5 ml), čímž bylo získáno 238 mg surového amidu 5-((1 R)-1 -(methyl((2R)-2-methylamino3- (2-naftyl)propionyl)amino)-2-fenylethyl)-[1,3,4]oxadiazol-2-karboxylové kyseliny, který byl použit pro další syntézu.
1H-NMR (CDCI3) 2,40 (s, 3H); 2,55 - 4,40 (m, 9H); 7,10 - 7,90 (m, 9H).
Tere.butyl ester ((E)-3-(((1 R)-1-(((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)2-fenylethyl)methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)methylkarbamoyl)1,1 -dimethylallyl)karbamové kyseliny:
(2E)-4-Terc.butoxykarbonylamino-4-methylpent-2-enová kyselina (143 mg,
0,62 mmol) byla rozpuštěna v dichlormethane (4 ml) a byl přidán nejdřív
1- hydroxy-7-azabenzotriazol (85 mg, 0,62 mmol) a pak N-(3- dimethylamino propyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (119 mg, 0,62 mmol). Roztok byl 15 míchán při teplotě místnosti, a pak byl přidán amid 5-((1 R)-1 -(methyl((2R)-2methylamino-3-(2-naftyl)propionyl)amino)-2-fenylethyl)-[1,3,4]oxadiazol2- karboxylové kyseliny (230 mg, 0,52 mmol). Po 5 min míchání byl přidán ethyldiisopropylamin (0,11 ml, 0,62 mmol) a míchání pokračovalo při teplotě místnosti dalších 16 h. Pak byla směs zředěna with ethyl acetatem (20 ml) a extrahována vodou (20 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná extrahována ethyl acetatem (2x10 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vysušeny síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (40g) s eluentem dichlormethan/ethyl acetat 1:1 za získání give 126 mg terc.butylesteru <(E)-3-(((1 R)-1-(((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)2-fenylethyl)methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)methylkarbamoyl)1,1-dimethylallyl)karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1,1-1,5 (m, 15H); 2,6-3,7 (m, 12H)
HPLC (metoda b): Rt = 44,95 min
PDMS: 668,8 ([M]+)
Terc.butylester((E)-3-(((1 R)-1-(((1 R)-1-(5-karbamoyl-[1,3,4]oxadiazol-2-yl)2-fenylethyl)methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)methylkarbamoyl)1,1-dimethylallyl)karbamové kyseliny (120 mg, 0,18 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (3 ml) a při 0 °C byla po kapkách přidána trifluoroctová kyselina ·· ····
.............
(3 ml). Reakční směs byla 5 min míchána při O °C a pak bez zahřívání zahuštěna ve vakuu. Zbytek byl třikrát odpařen s dichlormethanem, a pak rozpuštěn ve vodě (5 ml). Byla přidána 1M kyselina chlorovodíková a směs byla zahuštěna ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v 3M roztoku chlorovodíku v ethyl ;
acetate (3 ml) a zahuštěn ve vakuu. Poslední operace byla ještě jednou zopakována a surový produkt čištěn HPLC na 25 mm x 250 mm 5 μ C18 koloně | se silikagelem s gradientem 28% až 38% acetonitrilu v 0,1 M pufru síranu amonného s pH 2,5 (upraveno 4M kyselinou sírovou) za získání 64 mg | sloučeniny z nadpisu.
HPLC (metoda b): Rt = 30,133 min
PDMS: 569,6 ([M+H]+)
Příklad 16
N-Methyl-N-^ 1 -(methyl-[1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl í-amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butylester N-methyl-N-*! (1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl(--2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny:
··· ······ • · · · ·· ·· · · · ·
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (1,34 g, 7,0 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0,95 g, 7,0 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-methyl-N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (2,31 g, 7,0 mmol) v N,N-dimethylformamidu (50 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs (R)N-methyl-N-(1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)amin hydrochloridu (1,52 g, 5,0 mmol) a triethylaminu (0,51 g, 5,0 mmol) v N,N-dimethylformamidu (10 ml). Po 18 h při 20 °C vyla reakční směs nalita do vody (250 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (celkem 130 ml).
Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a vodou (3x50 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byla směs zahuštěna ve vakuu a I zbytek čištěn kolonovou chromatografíí na silikagelu (110 g) s eluentem ethyl acetat/heptan (1:1) za získání 2,4 g terč.butylesteru N-methyl-N-Ί (1 R)-1 -(N- | methyl-N-[(1 R)-1 -(3-methyl- [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl 2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny jako pěny.
HPLC: Rt = 36,5 min (metoda a)
Sůl (2R)-2-Methylamino-N-methyl-N-[(1 R)71 -(3-methyl- [1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-(2-naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluorocotovou kyselinou:
Terc.butylester N-methyl-N--í (1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl Í>-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny (2,4 g, 4,2 mmol) byl při 20 °C rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (40 ml) a dichlormethanu (40 ml). Po 10 min byla směs zahuštěna ve vakuu a odpařena s heptanem (80 ml) a dichlormethanem (80 ml). Zbytek byl krystalován z ethyl acetatu za získání 1,12 g soli (2R)-2-methylamino-N-methylN-[(1 R)71-(3-methyl- [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-3-(2naftyl)propionamidu s trifluorocotovou kyselinou.
t, 184-188 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 1,52 (s, 3H); 2,32 (s, 3H); 2,68 (s, 3H); 3,03 (dd, 1H); 3,22(dd, 1H); 3,5,5(dd, 1H); 4,62(t, 1H); 6,35(dd, IH); 7,25-7,95(m, 14H).
HPLC: Rt = 24,9 min (metoda a)
EA: vyp. pro C3oH30N402, CF3COOH, 0,25 EtOAc: C, 64,49; H, 5,41; N, 9,12%; nalezeno: C, 65,01; H, 5,35; N, 9,32%.
Terc.butyl ester 4-(N-methyl-N-((1 R)-1 -[N-methyl-N-((1 R)-1 -(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2naftyl)ethyl)karbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kyseliny:
• ·
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,37 g, 1,9 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,26 g, 1,91 mmol) byly přidány k roztoku N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidin karboxylové kyseliny (0,44 g, 1,91 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (5 ml). Po 45 min při 20 °C byla přidána směs soli (2R)-2-methylamino-N-methyl-N-[(1 R)71-(3-methyl- [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluorocotovou kyselinou (0,81 g,
1,37 mmoi) a triethylaminu (0,19 g, 1,37 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (10 ml). Po 18 h při 20 °C byla směs nalita do vody (100 ml) a několikrát extrahována ethyl acetatem (cefkem 70 ml). Organické fáze byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 20 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a vodou (3 x 20 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na (80 g) s eluentem ethyl acetat/heptan (3:2) za získání 0,88 g terc.butyl esteru 4-(N-methyl-N-((1 R)-1-[N-methyl-N-((1 R)-1-(3-methyl[1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2- naftyl)ethyl)karbamoyl) piperidin-1 -karboxylové kyseliny.
HPLC. Rt = 36,1 min (metoda a)
Terč. butyl ester 4-(N-methyl-N-(( 1R)-1 -[N-methyl-N-(( 1 R)-1 -(3-methyl[1.2.4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl) piperidin-1-karboxylové kyseliny (0,88 g, 1,28 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (12 ml) a dichlormethanu (12 ml). Po 10 min při 20 °C byla směs zahuštěna a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (75 g) s eluentem 10% amoniak v ethanolu/dichlormethan (1:9) za získání
0,56 g obou izomerů sloučeniny z nadpisu.
HPLC: diastereoisomer I: Rt = 25,24 min (metoda a) diastereoisomer II: Rt = 25,26 min (metoda a) |
EA: vypočteno pro C3oH39N503, H2O: C, 71-15; H, 6,80; N, 11,52%; | nalezeno: C, 71,27; H, 6,68; N, 11,28%.
Příklad 17 (
N-(1-(N-[methyl-N-[1-(3-methyl-[1,2,4]-oxadiazol-5-yl)-2-(2- í naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl]amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
I
Připraví se podle postupu E.
i
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1 / N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl í>-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoylpiperidin-1-karboxylové kyseliny:
I • · · · · · gg ·· ··· ··· ··
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,42 g, 2,2 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,34 g, 2,2 mmol) byly přidány k roztoku N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidin karboxylové kyseliny (0,50 g, 2,2 mmol) v Ν,Ν-dimethyl formamidu (5 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs soli (2R)-2-amino-N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl-[1, 2, 4 ] oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou (0,9 g,
1,54 mmol) a triethylamin (0,16 g, 1,54 mmol) v N,N-dimethylformamidu (10 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do vody (85 ml) a několikrát extrahována ethyl acetátem (celkem 90 ml). Organické fáze byla spojeny, promyty kyselinou citrónovou (10%, 15 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (15 ml) a vodou (3x15 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (110 g) s eluentem ethyl acetát/heptan (1:1) za získání 0,50 g terc.butyl ester 4-((1 R)-1-^ N-methyl-N-[(1R)-1-(3-methyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl ^-2-(2naftyl)ethyl)karbamoylpiperidin-1 -karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6) 2,40(s,3H); 2,95(s,3H); 3,45(dd,1H); 3,60(dd,1H); 4,85(m,1H); 6,08(m, 1H); 7,10(d, 1H); 7,40-7,90(m, 13H)
HPLC: Rt = 34,0 min (metoda a)
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1-^ N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-(1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-(2-naftyl)ethyl]karbamoyl}'-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoylpiperidin-1-karboxylové kyseliny (0,50 g, 0,74 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (10 ml) a dichlormethanu (10 ml). Po 10 min při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (38 g) s eluentem 10% amoniak v ethanolu/dichlormethan (3:7) za získání 0,26 g sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (DMSO-d6) 3,45(dd,1H); 3,61 (dd,1 H); 4,72(m,1H); 6,10(dd, 1H); 7,20(d, 1H); 7,40-8,00(m, 14H)
HPLC: Rt = 24,8 min (metoda a) » ·· ·
100 .........
EA: vypočteno pro CssHazNsOa, 10,5 H2O: C, 71,90; H, 6,55; N, 11,98% nalezeno: C, 71,77; H, 6,52; N, 12,09%.
Příklad 18 (2-Propyl)ester 5-(1-[N-(2-(piperidin-4-karbonylaminoj-3-(2-naftyl)propianyl)N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-(1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
(2-Propyl)ester (R) 5-(1-methylamino-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny:
Hydrochlorid ethyl esteru (R) 5-(1-methylamino-2-(2-naftyl)ethyl)[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (1,64 g, 4,5 mmol) byl suspenován ve 2-propanolu (35 ml). Po přidání tetraisopropyl titanatu (1,3 g, 4,5 mmol) byla reakční směs zahřívána 18 h k varu. Pak byla přidána chlorovdíková kyselina (1M, 30 ml) a směs byla extrahována ethyl acetátem (150 ml). Organické fáze byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml) a vodou • ·
101 ·** (3 x 50 ml). PO vysušení síranem hořečnatým a zahuštěním ve vakuu bylo získáno 1,3 g (2-propyl)esteru (R) 5-(1-methylamino-2-(2-naftyl)ethyl)[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny, který byl následně použit bez dalšího čištění.
1H-NMR (DMSO-d6) 1,31(d,6H); 2,21(d,3H); 3,3(m,2H); 4,40(t,1H); 5,72(m,1H); 7,35-7,95(m, 7H)
HPLC: Rt = 20,5 min (metoda a) (2-Propyl)ester 5--Í (1 R)-1-[N-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionyl)-N-methyl amino]-2-(2-naftyl)ethyl ^-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
I •í
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (2. 15 g, 6,8 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (0. 93 g, 6,8 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (2,15 g, 6,8 mmol) v N,N-dimethylformamidu (50 ml).
Po 30 min při 20 °C byl přidán roztok (2-propyl)esteru (R) 5-(1-methylamino-2(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (1,65 g, 4,9 mmol) v N,N-dimethylformamidu (15 ml). Po 18 h byla reakční směs nalita do vody (500 ml) a několikrát extrahována ethyl acetátem (celkem 450 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 75 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (75 ml) a vodou (3x75 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (160 g) s eluentem ethyl acetát/heptan
102 (1: 2) za získání 2,4 g (2-propyl)esteru 5-((1R)-1-[N-((2R)-2terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)-propionyl)-N-methyl amino]-2-(2naftyl)ethyl }·-[ 1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
HPLC: Rt = 36,5 min (metoda a)
Sůl (2-propyl)esteru 5-((1 R)-1-[N-((2R)-2-amino-3-(2-naftyl)propionyl)-Nmethylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny s trifluoroctovou kyselinou:
TFA,
(2-Propyl)ester 5-“{ (1 R)-1-[N-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionyi)-N-methyl amino]-2-(2-naftyl)ethyl ^-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (2,1 g, 3,3 mmol) byl suspendován v roztoku trifluoroctové kyseliny v dichlormethanu (1:1, 60 ml). Po 10 min při 20 °C byla reakční směs zahuštěna ve vakuu za získání 2,2 g soli (2-propyl)esteru 5-((1 R)-1 -[N-((2R)-2-amino-3-(2naftyl)propionyl)-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3karboxylové kyseliny s trifluoroctovou kyselinou, která byla následně použita bez dalšího čištění.
Terc.butyl ester 4-((1 R)-^ N-[(1 R)-1-(3-(2-propoxy)karbonyl-[1,2,4]oxadiazol-5yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-N-methylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin1-karboxylové kyseliny:
103
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (1,22 g,
6,35 mmol) a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,97 g, 6,35 mmol) byly přidány k roztoku N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidinkarboxylové kyseliny (1,46 g, 6,35 mmol) v N,N-dimethylformamidu (20 ml). Po 30 min při 20 °C byl přidán roztok (2-propyl)esteru 5-((1 R)-1-[N-((2R)-2-amino-3-(2-naftyl)propionyl)N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (2,95 g, 4,53 mmol) a triethylamin (0,47 g, 4,53 mmol) v N,Ndimethylformamidu (20 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do vody (240 ml) a několikrát extrahována ethyl acetátem (celkem 240 ml). Organické fáze byly spojeny a promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 35 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (35 ml) a vodou (3 x 35 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (110 g) s eluentem ethylacetát/heptan (1:1) za získání 2,6 g terc.butyl esteru 4-((1 R)—Ί N-[(1 R)-1(3-(2-propoxy)karbonyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-Nmethylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny. 1H-NMR (DMSO-d6), HPLC: Rt = 35,9 min (metoda a)
Terc.butyl ester 4-((1 R)-/ N-[(1R)-1-(3-(2-propoxy)karbonyl-[1,2,4]oxadiazol-5yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-N-methylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin1-karboxylové kyseliny (1,0 g, 1,34 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny a dichlormethanu (1:1, 25 ml). Po 10 min při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu
104 (75 g) s eluentem dichlormethan/10% amoniak v ethanolu (9:1) za získání t
0,77 g sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (DMSO-d6)
Příklad 19 J
Sůl 5-5-(1 -[N-(2-(piperidin-4-karbonylamino)-3-(2-naftyl)propionyl)-Nmethylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny | s trifluoroctovou kyselinou:
Připraví se podle postupu E.
Terc.butylester 4-(1-([1-(3-karboxy-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-Nmethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1 -([(1 R)-1-(3-ethoxykarbonyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl)-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin105
1- karboxylové kyseliny (0,79 g, 1,06 mmol) byl rozpuštěn v dioxanu (5,5 ml) a byly přidány voda (3 ml) a pevný hydroxid lithný (0,03 g). Po 18 h při 20 °C byla směs zředěna vodou (15 ml) a extrahována terc.butyl-methyletherem (2x10 ml). Vodná fáze byla okyselena 0,5M vodným hydrogenfosforečnanem sodným (2,5mi) a extrahována terc.butyl-methyletherem (3 x 40 ml). Spojené organické fáze byly vysušeny síranem hořečnatým, směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (60 g) s eluentem dichlormethan/10% amoniak v ethanolu (4:1) za získání 0,41 g terc.butylesteru
4-(1-([1-(3-karboxy-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-N-methylkarbamoyl)2- (2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO-d6).
Terc.butylester 4-(1-([1-(3-karboxy-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-Nmethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)-ethylkarbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kyseliny (0,41 g, 0,58 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroetové kyseliny a dichlormethanu (1:1, 12 ml). Po 10 min při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu za získání 0,4 g surové sloučeniny z nadpisu.
PDMS: (teor. MH+ = 606,7; nalezeno MH+ = 605,9)
Příklad 20 <
(1 -·> N-[1-(3-Methylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethy]N-methylkarbamoyl /--2-(2-naftyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
o.
I • ·
106 • ·
Připraví se podle postupu E.
'i
Terc.butyl ester 4-(1-( N-[1-(3-methylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]-N-methylkarbamoyl }-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-
Terc.butyl ester 4-((1 R)-1 -(N-[ (1R)-1-(3-propoxykarbonyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)2-(2-naftyl)ethyl]-N-methylkarbamoyl f--2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin1-karboxylové kyseliny (0,80 g, 1,07 mmol) byl rozpuštěn 33% methylaminu v ethanolu a míchán při 90 °C 18 h v uzavřené reakční nádobě. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (60 g) s eluentem ethyl acetát/heptan (7:3) za získání 0,15 g terc.butyl esteru
4-(1-( N-[ 1 -(3-methylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl]-Nmethylkarbamoyl }-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kyseliny.
HPLC: Rt = 31,5 min (metoda a)
Terc.butyl ester 4-(1-( N-[1-(3-Methylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]-N-methylkarbamoyl r--2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)piperidin1-karboxylové kyseliny (0,15 g, 0,21 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny a dichlormethanu (1:1,4 ml). Po 5 min při 20 °C byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (40 g) s eluentem dichlormethan/10% amoniak v ethanolu (9:1) za získání 0,08 g sloučeniny z nadpisu.
107
HPLC: Rt = 20,9 min (metoda a)
Příklad 21 <! 1 -[N-(1 -(3-Benzylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl)-N-methylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)ethyl (“amid (2E)-5-amino-5-méthylhex-2-enové kyseliny:
Benzylamid (R) 5-(1-methylamino-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny:
Ethylester (R) 5-(1-methylamino-2-fenylethyl)-[l,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny (3,3 g, 9,0 mmol) byl rozpuštěn ethanolu (30 ml) a byl přidán benzylamin (3 ml). Reakční směs byla 18 h míchána při 20 °C, pak zahuštěna ve vakuu a zbytek krystalován z ethanolu za získání 2,07 g benzylamidu (R) 5(1 -methylamino-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny.
tt 128-128,5 °C 1H-NMR (DMSO-d6) 2,22 (s, 3H); 3,08 (dd, 1H); 3,18 (dd, 1H); 4,26 (t, 1H); 4,45 (d, 2H); 7,10-7,45 (m, 1H); 9,50 (t, 1H)
108
HPLC: Rt = 17,3 min (metoda a) ' <
EA: vypočteno pro C19H2oN402, 0,25 EtOH: C, 67,32; H, 6,23; N, 16,10%;
nalezeno: C, 67,35; H, 6,03; N, 16,25%.
Terc.butyl ester 'i (1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-benzylkarbamoyl- čf [1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl ^karbamové kys.: |
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (1,64 g,
8,57 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (1,17 g, 8,57 mmol) byly přidány k roztoku (R) N-terc.butoxykarbonyl-3-(2-naftyl)alaninu (2,70 g, 8,57 mmol) v
N,N-dimethylformamidu (40 ml). Po 20 min při 20 °C byl přidán roztok benzylamidu (R) 5-( 1 -methylamino-2-fenylethyl)-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové i kyseliny (2,06 g, 6,12 mmol) v dimethylformamidu (40 ml). Po 18 h při 20 °C byla reakční směs nalita do vody (250 ml) a několikrát extrahována ethyl * acetátem (celkem 200 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 50 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (3 x 50 ml) a vodou (3 x 50 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (150 g) s eluentem ethyl acetát/heptan (1:1) za získání 3,9 g terc.butyl esteru 'i (1R)-1-(N-methyl-N-[(1R)-1-(3-benzylkarbamoyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl J-karbamové kyseliny.
Sůl 2-amino-N-methyl-N-[1 -(3-benzylkarbamoyl-[1,2,4)oxadiazol-5-yl)-2fenylethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou:
109
Tere.butyl ester ·{ (1R)-1-(N-methyl-N-[(1R)-1-(3-benzylkarbamoyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl^karbamové kyseliny (3,9 g, 6,15 mmol) byl rozpuštěn ve směsi trifluoroctové kyseliny (40 ml) a dichlormethanu (40ml) při 20 °C. Po 10 min byla reakční směs zahuštěna ve vakuu a zbytek odpařen s heptanem a pak dichlormethanem za získání 4 g dvou isomerů surové soli 2-amino-N-methyl-N-[1-{3benzylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou, která byla následně použita bez dalšího čištění.
1H-NMR (DMSO-d6) 2,88 (s); 3,21 (s); 3,32 (m); 3,55 (m); 4,52 (m); 5,95 (m); 6,21 (m)
HPLC: isomer I: Rt = 24,2 min (metoda a) isomer II: Rt = 25,4 min (metoda a)
Terc.butylester [(2E)-1,1-dimethyl-4-(1-'{ N-methyI-N-CI-(3-benzylkarbamoyl[ 1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl rhut-Senyljkarbamové kyseliny:
110
N-(3-Dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochloríd (0,40 g, 2,1 mmol) -<
a 1-hydroxybenzotriazol monohydrat (0,32 g, 2,1 mmol) byly přidány k roztoku (2E)-5-(terc.butoxykarbonylamino)-5-methylhex-2-enové kyseliny (0,51 g,
2,1 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (5 ml). Po 30 min při 20 °C byla přidána směs soli 2-amino-N-methyl-N-[1-(3-benzylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2fenylethyl]-3-(2-naftyl)propionamidu s trifluoroctovou kyselinou (1,0 g,
1,5 mmol) a triethylaminu (0,15 g, 1,5 mmol) v Ν,Ν-dimethylformamidu (12 ml).
Po 18 h při 20°C byla reakční směs nalita do vody (100 ml) a několikrát | extrahována ethyl acetátem (celkem 65 ml). Spojené organické fáze byly promyty vodnou kyselinou citrónovou (10%, 20 ml), nasyceným roztokem * hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a vodou (3 x 20 ml). Po vysušení síranem hořečnatým byla směs zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (85 g) s eluentem ethyl acetát/heptane (1:1) za získání 0,77 g dvou isomerů terc.butylesteru [(2E)-1,1-dimethyl-4-(1--ÍN-methylN-CI-(3-benzylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamoyl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl}but-3-enyl]karbamové kyseliny.
HPLC: isomer i: Rt = 34,1 min (metoda a) isomer II: Rt = 34,4 min (metoda a)
Terc.butylester [(2E)-1,1 -dimethyl-4-(1 -? N-methyl-N-CI-(3-benzylkarbamoyl[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoylf-but-3enyljkarbamové kyseliny (0,77 g, 10 mmol) byl rozpuštěn ve směsi $ trifluoroctové kyseliny (2 ml) a dichlormethanu (2 ml). Po 10 min při 20 °C byla reakční směs zředěna dichlormethanem (25 ml) a neutralizována nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a zahuštěna ve vakuu za získání 0,7 g dvou isomerů sloučeniny z nadpisu.
HPLC: isomer I: Rt = 24. 5 min (metoda a) isomer II: Rt = 25,3 min (metoda a)
111
Příklad 22
N--Í (1 R)-1-[N-((1 R)-1-benzyl-2,5-dihydroxypentyl)-N-methylkarbamoyl]-2-(2naftyl)ethyl {•-N-methylamid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kyseliny:
Připraví se podle postupu J.
Terc.butylester N-((1 R)-1-formyl-2-fenylethyl)-N-methylkarbamové kyseliny:
CH, O
Oxalyl chlorid (4,24 ml, 48,61 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (30 ml) a roztok ochlazen na -63 °C. Po kapkách byl přidán roztok DMSO (4,6 ml,
64,81 mmol) v dichlormethanu (20 ml) a směs byla 5 min míchána. Pak byl během 30 min přidán roztok terc.butylesteru N-((1R)-1-(hydroxymethyl)-2fenylethyl)-N-methylkarbamové kyseliny (8,6 g, 32,41 mmol) in dichlormethanu (200 ml). Reakční směs byla při -63 °C míchána 20 min, a pak byl během 25 min přidán roztok triethylaminu (18,07 ml, 129,62 mmol) v dichlormethanu (40 ml). Roztok byl zahřán na -35 °C a ihned opět ochlazen na -63 °C a při této teplotě míchán 1 h. Pak byla přidána kyselina octová (8,15 ml, 142,58 mmol) a reakční směs byla zahřána na 10 °C. Následovalo promytí vodou (2 x 200 ml) a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (150 ml). Organická fáze
112 byla vysušena síranem hořečnatým a po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo í získáno give 7,53 g terc.butylesteru N-((1R)-1-formyl-2-fenylethyl)-Nmethylkarbamové kyseliny 1H-NMR (CDCI3): 1,40 a 1,44 (dva s, dohromady 9H); 2,52 a 2. 58 (dva s, dohromady 3H); 2,90 a 3. 00 (dva dd, dohromady 1H); 3,81 (dd, 1H); 4,00 a
4,20 (dva dd, dohromady 1H); 7,10-7,35 (m, 5H).
Terč. butylester N-(( 1R)-1 -benzyl-2-hydroxypent-4-enyl)-N-methylkarbamové | kyseliny
CHj OH
Terč. butylester N-((1 R)-1-formyl-2-fenylethyl)-N-methylkarbamové kyseliny (6,0 g, 20,0 mmol) byl rozpuštěn v ether (150 ml) a roztok ochlazen na -78 °C a po kapkách byl přidán allylmagnesium bromid (22 ml 1,0M roztoku v etheru, mmol). Po přidání byl roztok zahřán na teplotu místnosti a byl přidán k 10% roztoku chloridu amonného ve vodě (200 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a Á vodná extrahována extrahována ethyl acetátem (3 x 50 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (100 ml) <
a vysušeny síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (260 g) s eluentem ethylacetát/heptan 1:1 za získání 4,00 g terc.butylesteru N-((1R)-1-benzyl2-hydroxypent-4-enyl)-N-methylkarbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1,10-1,50 (m, 9H); 1,90-3,40 (m, 8H); 3,50-4,10 (m, 2H);
5,00-5,30 (m, 2H); 5,90 (m, 1H); 7,10-7,40 (m, 5H).
Terč.butylester ((1 R)-1-benzyl-2,5-dihydroxypentyl)methylkarbamové kyseliny
113
( I CH, OH
Terc.butylester N-((1R)-1-benzyl-2-hydroxypent-4-enyl)-N-methylkarbamové kyseliny (3,95 g, 11,60 mmol) byl rozpuštěn v THF (90 ml) a přidán k roztoku 9-borabicyklo{3,3,1]nonanu (46,64 ml 0,5M roztoku v THF, 23,32 mmol) v THF (90 ml). Roztok byl 16 h zahříván k varu, a pak ochlazen na teplotu místnosti. Pak byl po kapkách přidán ethanol (22 ml), pak 6M roztok hydroxidu sodného ve vodě (6,6 ml, 39,44 mmol) a nakonec peroxid vodíku (35% roztok ve vodě). Reakční směs byla 1 h zahřívána k varu, a pak ochlazena na teplotu místnosti. Potom byla přidána k 1M roztoku hydroxidu sodného (200 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a vodná extrahována ethyl acetátem (3 x 50 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty 37% roztokem hydrogensiřičitanu sodného (150 ml) a vysušeny síranem hořečnatým. Po opětovném promyt! 37% roztokem hydrogensiřičitanu sodného (200 ml) byly vysušeny síranem hořečnatým a rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethyl acetátu (200 ml), promyt 37% roztokem hydrogensiřičitanu sodného (200 ml) a vysušen síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (180 g) v ethyl acetátu a následně kolonovou chromatografií na silikagelu (100 g) s eluentem dichlormethan/ /methanol/25% vodný amoniak 100:10:1 za získání 586 mg terc.butylesteru ((1 R)-1-benzyl-2,5-dihydroxypentyl)methylkarbamové kyseliny.
MS (El): 365 (20%; (M+1]+) 1H-NMR (CDCI3) 1,22 a 1,40 (dva s, dohromady 9H); 1,60-1,90 (m, 5H); 2,50, 2,60 a 2,73 (všechno s, dohromady 3H); 2,80-4,00 (m, 7H); 7,10-7,35 (m, 5H).
(5R)-4-Hydroxy-5-(methylamino)-6-fenylhexyl acetát ·· ·· ····
114 ···
CH, OH
HN
O CH.
Terc.butylester ((1 R)-1-benzyI-2,5-dihydroxypentyl)methylkarbamové kyseliny (560 mg, 1,52 mmol) byl rozpuštěn v ethyl acetátu (10 ml) a byl přidán 3M roztok chlorovodíku v ethyl acetátu (2,0 ml, 6,08 mmol). Roztok byl 1 h míchán při teplotě místnosti, pak zředěn ethyl acetátem (10 ml) a extrahován 1M roztokem hydroxidu sodného (30 ml). Vodné fáze byly extrahovány ethyl acetátem (3 x 10 ml) a spojené organické vrstvy vysušeny síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn v dichlormethanu (5 ml). Roztok byl ochlazen na 0 °C a byla přidána trifluoroctová kyselina (5 ml). Roztok byl při zmíněné teplotě míchán 5 min, a pak bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethyl acetátu (10 ml) aextrahován 1M roztokem hydroxidu sodného (10 ml). Vodné fáze byly extrahovány ethyl acetát (2x5 ml) a spojené organické vrstvy vysušeny síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (40 g) s eluentem dichlormethan/methanol/25% vodný amoniak 100:10:1 za získání 136 mg (5R)-4-hydroxy-5-(methylamino)-6-fenylhexyl acetát.
^-NMR (CDCIs): 1. 50-2,05 (m, 4H); 2,07 (s, 3H); 2,30 (s, 3H); 2,55 (dd, 1H);
2,65 (td, tH); 2,82 (dd, 1H); 3,75 (td, 1H); 4,15 (m, 2H); 7,15-7,35 (m, 5H).
HPLC (metoda B): 17,87 min (85%) (5R)-5-(((2R)-2-[((2E)-5-Amino-5-methylhex-2-enoyl)methylamino)-3-(2naftyl)propionyl)methylamino)-4-hydroxy-6-fenylhexyl acetát o
CH. OH i
115 (5R)-4-Hydroxy-5-(methylamino)-6-fenylhexyl acetát (126 mg, 0,475 mmol), * i (2R)-2-(terc.butoxykarbonylmethylamino)-3-(2-naftyl)propionová kyselina (313 mg, 0,95 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (65 mg, 0,475 mmol) byly při O °C rozpuštěny ve směsi dichlormethan/dimethylformamid 2:1 (9 ml). Po přidání N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyi)karbodiimid hydrochloridu (91 mg, f
0,475 mmol) při 0 °C byla směs míchána 48 h při teplotě místnosti. Pak byl ze I směsi proudem dusíku odstraněn dichlormethan, a pak byl přidán ethyl acetát (50 ml). Roztok byl postupně promyt 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu | sodného (50 ml), vodným 5% hydrogensíranem draselným (50 ml) a vodou · (50 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a na vakuové I rotační odparce odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormethanu (2 ml) a trifluoroctové kyseliny (2 ml). Po 10 min byla směs zahuštěna proudem dusíku a olejovitý zbytek rozpuštěn v 70% acetonitrilu (1 ml). Pak byly přidány 1M kyselina chlorovdíková (3 ml) a voda (47 mi) a směs byla ihned zmrazená a lyofilizována. Produkt lyofilizace byl rozpuštěn ve směsi dichlormethan/dimethylformamid 2:1 (9 ml) a byly přidány (2E)-5terc.butyloxykarbonylamino-5-methylhex-2-enová kyselina (231 mg, 0,95 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (129 mg, 0,95 mmol). Směs byla ochlazena na °C, a pak byly přidány N-ethyl-N-(3-dimethylaminopropyl)-karbodiimid hydrochlorid (91 mg) a diisopropylethylamin (81 μΙ, 0,475 mmol). Směs byla 1 h míchána při 0 °C a 18 h při teplotě místnosti. Pak byl ze směsi odpařen proudem dusíku dichlormethan a ke zbytku byl přidán ethyl acetát (50 ml).
Roztok byl postupně extrahován 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (50 ml), vodou (50 ml), 5% vodným hydrogensíranem draselným (50 ml) a vodou (50 ml). Organická fáze byla vysušena síranem sodným a rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormethanu (2 ml) a trifluoroctové kyseliny (2 ml) a ponechán 10 min reagovat. Po zahuštění proudem dusíku byl olejovitý zbytek rozpuštěn ve směsi 70% acetonitrilu (5 ml) a vody (45 ml). 15 ml roztoku surového (5R)-5-(((2R)-2[{(2E)-5-amino-5-methylhex-2-enoyl)methylamino)-3-(2-naftyi)propionyl) methylamino)-4-hydroxy-6-fenyihexyl acetátu bylo ochlazeno na 0 C a za míchání byl po kapkách přidán 1M hydroxid sodný (15 ml). Po 10 minmíchání při 0 °C byly přidány kyselina octová (2 ml) a voda (50 ml). Pprodukt byl z roztoku izolován semipreparativní HPLC na třikrát na 25 mm x 250 mm • ·
Λ Λ -ww « V * *
116 koloně s 7μ C-18 silikagelem. Sloupec byl předem uveden do rovnováhy 28% <
acetonitrilem v 0.05M síranu amonném a jeho pH upraveno na 2,5 pomocí 4M kyseliny sírové. Sloupec byl eluován gradientem 28% - 38% acetonitrilu v
0,05M síranu amonném (pH 2,5) s průtokem 10 ml/min během 47 min při °C. Byly izolovány frakce s peptidem a zředěny 3 objemy vody a naneseny na Sep-Pak® filtr C18 (Waters part. #:51910), které byly před tím uvedeny do ;
rovnováhy 0,1 % trifluoroctovou kyselinou. Látka byla z Sep-Pak® filtru vymyta
70% acetonitrilem v 0,1% trifluoroctové kyselině a izolována po zředění vodou | lyofilizací.
ř i
Získaný finální produkt byl charakterizován analytickou RP-HPLC (retenční čas) a plasmovou desorpční hmotnostní spectrometrií (molární hmotnost).
Hmotnostní spektrum bylo měřeno na přístroji Bio-lon Nordic AB, Upsala,
Švédsko. Nalezená molární hmotnost M+H 560,2 (teor. 560,8) je ve shodě s očekávanou strukturou.
RP-HPLC analýzy byly provedeny s UV detekcí při 214 nm a Vydac 218TP54
4,6 mm x 250 mm 5 μ C-18 silikagelovou kolonou (The Separations Group,
Hesperia), která byla eluována 1 ml/min 42 °C. Byly použity dva různé eluční postupy:
C
A1: kolona byla uvedena do rovnováhy 5% acetonitrilem v pufru, který obsahoval 0,1M síran amonný a jeho pH bylo upraveno na 2,5 4M kyselinou i
sírovou, a byla 50 min eluována gradientem 5% až 60% acetonitrilu ve stejném pufru.
B1: kolona byla uvedena do rovnováhy směsí 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda a 50 min eluována gradientem 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda až 60% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda.
Retenční čas elučním způsobu A1 30,08 a elučním způsobu B1 31,78 min.
117 • ·
Příklad 23 I
3-Aminomethyl-N-((1 R)-1 --i N-[( 1 R)-1 -(2-hydroxyethoxymethyl)-2-fenylethyljN-methylkarbamoyl f,-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylbenzamid
Připraví se podle postupu K.
Terc.butylester N-((1 R)-1-(2-hydroxyethoxymethyl)-2-fenylethyl)N-methylkarbamové kyseliny:
Ethyl ester ((2R) -2- (terc.butoxykarbonylmethylamino)-3-fenylpropoxy)octové i kyseliny (0,50 g, 1,42 mmol) byl rozpuštěn v THF (4 ml) a po kapkách byl přidán lithiumborohydrid (1,56 ml 2,0 M roztoku v THF, 3,13 mmol). Pak byl po kapkách přidán ethanol (8 ml) a reakční směs byla míchána 16 h při teplotě místnosti. Roztok byl okyselen 10% kyselinou citrónovou na pH 4, a pak bylo ve vakuu odstraněno rozpouštědlo. Zbytek byl rozpuštěn ve vodě (50 ml) a roztok extrahován dichlormethanem (3 x 40 ml). Spojené organické vrstvy byly vysušeny síranem hořečnatým, směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (30 g) s eluentem dichlormethan/ethyl acetat 1:1 za získání 0,29 g terc.butylesteru N-((1R)-1-(2hydroxyethoxymethyl)-2-fenylethyl)-N-methylkarbamové kyseliny.
1H-NMR (CDC1,): 6 = 1,32 a 1,41 (dva s, dohromady 9H); 2,50 2,85 (m, 5H),
3,40 - 3,80 (m, 6H); 4,40 a 4,60 (dva br, dohromady 1H); 7,10 - 7,35 (m, 5H).
118
2-((2R)-2-Methylamino-3-fenylpropoxy)ethanol:
Terc.butylester N-((1 R)-1 -(2-hydroxyethoxymethyl)-2-fenylethyl)N-methylkarbamové kyseliny (0,29 g, 0,90 mmol) byl rozpuštěn v dichlormethanu (3 ml) a byla přidána trifluoroctová kyselina (1 ml). Roztok byl 15 min míchán při 0 °C, a pak rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v dichlormethanu (10 ml) a extrahován 1M hydroxidem sodným (10 ml). Organická fáze byla vysušena vysušena síranem hořečnatým a rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Bylo získáno 0,11 g 2-((2R)-2-methylamino3-fenylpropoxy)ethanoiu, který byl následně použit bez dalšího čištění.
HPLC (metoda b): 9,10 min 1H-NMR (CDCI3): 2 ,48 (s, 3H) 2; 75 (dd, 1H); 2,80 - 3,00 (m, 2H); 3,40 * (dd, 1H); 3,45 - 3,65 (m, 3H); 3,65 - 3,80 (m, 2H); 7,15 - 7,35 (m, 5H).
2-((2R) -2-Methylamino-3-fenylpropoxy)ethanol (91 mg, 0. 435 mmol), (2R)-2(terc.butoxykarbonylmethylamino)-3-(2-naftyl)propionová kyselina (215 mg,
0,653 mmol) a 1-hydroxy-7-azabenzotriazol (HOAT) (89 mg, 0,653 mmol) byly rozpuštěny ve směsi dichlormethanu (10 ml) a N,N-dimethylfermamidu (5 ml).
Po ochlazení na 0 °C byl přidán N-ÍS-dimethylaminopropylJ-N^ethylkarbodiimid hydrochlorid (125 mg, 0,653 mmol) a po 30 min míchání při 0 °C diisopropylethylamin (75 μΙ, 0. 435 mmol). Po promíchání při teplotě místnosti byl dichlormethan odstraněn proudem dusíku a byl přidán ethyl acetat (25 ml).
Směs byla extrahována 5% roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 25 ml),
5% hydrogensíranem draselným a vodou (25 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a zahuštěním ve vakuu bylo získáno 240 mg • · · ·
119 .............
terc.butylesteru N-((1R)-1-(N-((1R)-1-(2-hydroxyethoxymethyl)-2-fenylethyl)-N- ·* methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylkarbamové kyseliny. Jeho polovina (120 mg, 0,230 mmol) byla rozpuštěna ve směsi dichlormethanu (1 ml) a trifluoroctové kyseliny (1 ml) a nechána 10 min reagovat. Po zahuštění proudem dusíku byl olejovitý zbytek rozpuštěn v 70% acetonitrilu (1 ml) a byly přidány 1M kyselina chlorovodíková (1 ml) a voda (50 ml) a směs byla ihned C zmrazená a lyofilizovány.
Produkt lyofilizace byl rozpuštěn v dichlormethanu (5 ml) a při 0 °C byl přidán roztok 3-(terc.butoxykarbonylaminomethyl)benzoové kyseliny (503 mg, 2,0 t mmol) a N-ethyl-N'-(3-dimethylaminopropyl)karbodiimid hydrochloridu (192 mg, mmol) v dichlormethanu (5 ml). Směs byla nechána při 0 °C 15 min reagovat.
Nakonec byl přidán diisopropylethylamin (171 μΙ, 1,0 mmol) a směs byla míchána 72 h při teplotě místnosti. Pak byl ze směsi proudem dusíku dichlormethan odstraněn a ke zbytku byl přidán ethyl acetát (25 ml). Výsledná směs byla postupně extrahována 5% vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (2 x 25 ml), vodou (25 ml), 5% vodným hydrogensíranem sodným (25 ml) a vodou (25 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a ve vakuu odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormethanu (2 ml) a trifluoroctové kyseliny (2 ml) a ponechán 10 min reagovat. Po zahuštění proudem dusíku byl olejovitý zbytek rozpuštěn ve směsi 70% acetonitrilu (5 ml) a vody (400 ml).
Analytická HPLC za podmínek A1 (viz. níže) ukázala dva hlavní píky s retenčními časy 28,82 min a 35,67 min a minoritní pík 29,98 min.
Plasmová desorpční hmotnostní spektroskopie (Bio-lon Nordic AB, Uppsala,
Švédsko) ukázala, že požadovaný produkt je minoritní pík. Výsledek je ve shodě s očekávanou strukturou (M+H nalezeno = 553,0, M+H teorie = 554,7).
Další produkty vznikly acylací nechráněné hydroxy skupiny.
Všechny tři sloučeniny byly izolovány semipreparativní HPLC na čtyřikrát na mm x 250 mm koloně s 7 μ C-18 silikagelem, která byla uvedena do rovnováhy 37% acetonitrilem v 0,05M síranu amonném a jeho pH upraveno na
2,5 pomocí 4M kyseliny sírové. Sloupec byl eluován gradientem 37% - 44%
120
acetonitrilu v 0.05M síranu amonném, pH 2,5 (pomocí 4M kyseliny sírové) s průtokem 10 ml/min během 47 min při 40 °C. Byly izolovány frakce odpovídající jednotlivým složkám. Tyto frakce byly zředěny 3 objemy vody a naneseny na Sep-Pak® filtry 08 zapojené do série (Waters part. #:51910), které byly před tím uvedeny do rovnováhy 0,1% trifluoroctovou kyselinou. Sloučeniny byly z Sep-Pak® filtrů vymyty 70% acetonitrilem v 0,1% trifluoroetové kyselině a í izolovány po zředění vodou lyofilizací.
Sloučeniny odpovídající hlavním dvěma plkům byly hydrolyzovány (opak nežádoucí acetylace) za zvýšení výtěžku požadované sloučeniny. Látky byly na ř min rozpuštěny v 1,5 ml 0.066M hydroxidu sodném, a pak roztoky neutralizovány 1 ml 1M kyseliny chlorovodíkové. Cílová sloučeniny pak byla izolována semipreparativní HPLC způsobem, který byl uveden výše.
Získaný finální produkt byl charakterizován analytickou RP-HPLC (retenční čas). RP-HPLC analýzy byly provedeny s UV detekcí při 214 nm a Vydac
218TP54 4,6 mm x 250 mm 5 μ C-18 silikagelovou kolonou (The Separations Group, Hesperia), která byla eluována 1 ml/min 42 °C. Byly použity dva různé eluční postupy:
A1: kolona byla uvedena do rovnováhy 5% acetonitrilem v pufru, který i
obsahoval 0,1 M síran amonný a jeho pH bylo upraveno na 2,5 4M kyselinou sírovou, a byla 50 min eluována gradientem 5% až 60% acetonitrilu ve stejném pufru.
B1: kolona byla uvedena do rovnováhy směsí 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda a 50 min eluována gradientem 5% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda až 60% acetonitril/0,1% trifluoroctová kyselina/voda.
Retenční čas při použití systému A1 byl 29,87 min, při použití systému B1
34,28 min.
• · · ·
121
Piperidin-4-karboxylová kyselina ((IR,2E)-4-hydroxymethyl-5-(2-naftyl)-l-((2naftyl)methyl)pent-2-enyl)amid
Příklad 24
Terč. butylester ((1 R)-4-(terc.butyldimethylsilanyloxymethyl)-1-((2-naftyl)methyl)5-(2-naftyl)pent-2-enyl)karbamové kyseliny
Sloučenina se připraví analogicky jako v příkladu 9. Jako výchozí látky byly použity terc.butylester ((1 R)-1 -benzenesulfonylmethy|-2-(2-naftyl)ethyl) karbamové kyseliny (3,71 g; 8,74 mmol) a 2-(terc.butyldimethyl silanyloxymethyl)-3-(2naftyl)propionaldehyd (4,3 g; 13. 11 mmol). Chromatografie byla provedena na silikagelu (5 x 25 cm) s eluentem diethylether/heptan 1:3 za získání 2,20 g terč. butylesteru ((1R)-4(terc.butyldimethylsilanyloxymethyl)-1-((2-naftyl)methyl)-5-(2-naftyl)pent-2enyl)karbamové kyseliny jako směsi izomerů.
1H-NMR (CDCIa) (vybrané píky) 0,0-0,05 (čtyři s, 6H), 0. 85-0,95 (čtyři s, 9H), 1,30-1,40 (tři s, 9H), 5,2-5,5 (m, 2H).
• · • · • · · · • · 1 ······ · < · · · *····· • * · · · 9 9 9
122 .............
(3E,5R)5-Amino-6-(2-naftyl)-2-((2-naftyl)methyl)hex-3-en-1 -ol
Terč. butylester ((1 R)-4-(terc.butyldimethylsilanyloxymethyl)-1-((2-naftyl)methyl)5-(2-naftyl)pent-2-enyl)karbamové kyseliny (2,20 g; 3,60 mmol) byl rozpuštěn ve směsi acetonitrilu (100 ml) a vodného roztoku fluorovodíku (48%, 4,5 ml). Po 3 h míchání byly přidány ethyl acetát (200 ml) a vodný uhličitan sodný (10%,
200 ml) was added. Je dnotlivé fáze byly odděleny a organická vysušena síranem hořečnatým a zahuštěna ve vakuu. Zbytek byl čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (4 x 38 cm) za eluce směsí ethyl acetát (85%), ethanol (14%) a konc. vodný amoniak (1%). Tímto způsobem byly izolovány dvě blízké skvrny. Látka, která vyšla jako první, byla čištěna HPLC a druhá obsahovala několik izomerú. Protože první frakce (3E,5R) 5-amino-6-(2-naftyl)2-((2-naftyl)methyl)hex-3-en-1-olu (220 mg) měla geometrii E, byla použita v dalším kroku.
1H-NMR (CDCIa) 1,45 (s(br), 3H); 2,55-2,92 (m, 5H); 3,35-3,68 (m, 3H); 5,37 (dd, část ABX-syst., Ji=15Hz, J2=7Hz, 1H), 5,52 (dd, část ABX-syst., J^ISHz, J2=5Hz, 1H), 7,15-7. 84 (m, 14 H) ((1R,2E)(4-Hydroxymethyl)-5-(2-naftyl)-1-((2-naftyl)methyl)pent-2-enyl)amid (N-terc.butyloxykarbonyl-piperidin-4-karboxylové kyseliny • · · ·
123
N-Terc.butyloxykarbonylpiperidin-4-karboxylová kyselina (378 mg; 0. 991 mmol) i a EDAC (198 mg; 1,038 mmol) byly rozpuštěny v methylenchloridu (15 ml) a 15 min míchány. Pak byl přidán (3E,5R) 5-amino-6-(2-naftyl)-2-((2- ' naftyl)methyl)hex-3-en-1-ol (180 mg; 0. 472 mmol) a směs byla míchána 6 h.
Pak byl roztok promyt hydrogensíranem sodným (10%, 10 ml) a nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (15 ml), org. fáze vysušena síranem hořečnatým a směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografíí na silikagelu (30 x 2,5 cm) s eluentem ethylacetát/ heptan 1:1 za získání 220 mg ((1R,2E)(4-hydroxymethyl)-5-(2-naftyl)-1-((2-naftyl)methyl)pent2-enyl)amidu (N-terc.butyloxykarbonyl-piperidin-4-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCh): 1,35-1,55 (m, (s 1,45); 15 H); 1,93-2,01 (m, 1H); 2,55-2,68 (m, 4H); 2,70-2,90 (m, 2H); 3,01 (dd, 1H); 3,38 (dd, 1H); 3,55 (d(br), 1H); 4,67 (p, 1H); 5,18 (d, 1H); 5,31 (dd, 1H), 5,37 (dd, 1H), 7,15-7,79 (m, 14H). * ((1 R,2E)(4-Hydroxymethyl)-5-(2-naftyl)-1 -((2-naftyl)methyl)pent-2-enyl)amid « (N-terc.butyloxykarbonyl-piperidin-4-karboxylové kyseliny (220 mg; 0,371 mmol) byl rozpuštěn ve směsi methylenchloridu (5 ml) a trifluoroctové kyseliny (5 ml) a míchán 90 min. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek třikrát odpařen s methylenchloridem (20 ml) za získání 170 mg sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (CDCI3) (vybrané píky): 4,60 (1H); 5,43 (m, 2H); 7,00-7,77 (14 H), 8,7 a 9,05 (s(br), 2H).
ESMS: (M+H)+: 493,2 HPLC (A1): Rt = 3 6. 15 min.
124
Příklad 25 ((1 R)-2-(2-Naftyl)-1 -((1 R)-2 -(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethyIkarbamoyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
Terc.butylester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(fenethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kys.
D-terc.butyloxykarbonyl-(2-naftyl)alanin (5,0 g, 15,85 mmol) byl rozpuštěn v suchém methylenchloridu (80 ml) a byly přidány HOBT (2,14 g; 15,85 mmol) a EDAC (3,34; 17,43 mmol) a směs byla míchána 15 min. Pak byl přidán fenethylamin (2,0 ml; 15,85 mmol) a směs byla míchána 24 h při teplotě místnosti. Pak byl přidán methylenchlorid (200 ml) a organická fáze promyta vodou (100 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (100 ml). Roztok byl vysušen síranem hořečnatým a zahuštěn ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (3,5 x 40 cm) s eluentem methylenchlorid/ethyl acetát (6:1) za získání 4 ,95 g terc.butylesteru ((1R)-2-(2-naftyl)-1(fenethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny.
• · ♦ · · ·*··«· • · · · ·· · · ··*· i · · · · · · ·
125 .............
1H-NMR (CDCI3): 1,39 (s, 9H); 2,52 (m, 1H); 2,64 (m, 1H); 3,15 (dd, 1H); 3,23 (dd, 1H); 3,36 (m; 1H); 3,45 (m, 1H); 4,31 (dd, 1H); 5,08 (s(br); 1H); 5,62 (s(br);
1H); 6,85-7,82 (12 arom.)
Terc.butylester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol-5-yl)ethyl)karbamové kyseliny
Terc.butylester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(fenethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny (2,20 g, 5,26 mmol) byl rozpuštěn v suchém THF (50 ml) a byly podány trifenylfosfin (2,76 g; 10,52 mmol), diethylazodikarboxylat (1,66 g, 10,52 mmol) a trimethylsilyl azid (1,22 g; 10,52 mmol). Směs byla přes noc míchána při j teplotě místnosti, a pak byl do reakční směsi po kapkách přidán dusičnan amonno ceričitý (23,06 g; 21,04 mmol) rozpuštěný ve vodě (400 ml). Pak byl do j směsi přidán THF (120 ml) a tato extrahována methylenchloridem (3 x 300 ml).
Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (5 x 40 cm) s eluentem ethyl acetát/heptan (1:1) za získání 0,30 g terc.butylesteru((1R)-2-(2-naftyl)-1(1-fenethyl-1 H-tetrazol-5-yl)ethyl)karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,32 (s, 9H); 2,72 (m, 1H); 2,98 (m, 1H); 3,13 (dd; IH); 3,41 (dd, 1H); 4,42 (t, 2H); 4,99 (dd; 1H); 5,12 (d, 1H); 6,82-7,80 (12 arom. H) (1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol-5-yl)ethylamin • · • · · · • · ·
Terc.butylester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1-(1-fenethyl-1 H-tetrazol-5-yl)ethy1)karbamové kyseliny (0,30 g; 0,68 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (20 ml) a byla přidána trifluoroctová kyselina (2 ml). Směs byla 3 h míchána při teplotě místnosti, a pak zahuštěna ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (50 ml) a promyt roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 %; 30 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (2,5 x 15 cm) v ethyl acetátu za získání 170 mg (1R)2-(2-naftyl)-1-(1-fenethyl-1H-tetrazol5-yl)ethylaminu.
1H-NMR (CDCIa) 1,75 (s(br); 2H); 3,00 (m 2H); 3,09 (d, 2H); 3,92 (t, 1H); 4,25 (m, 2H); 6,85-7,85 (12 arom.H).
Terc.butyl ester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1-((1 R)-2-(2-naftyl)-1-(1-fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny
• · · · · ·
127
D-terc.butyloxykarbonyl-(2-naftyl)alanin (0,129 g; 0,408 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (10 ml) a byly přidány HOBT (55 mg; 0,408 mmol) a EDAC (86 mg; 0,449 mmol). Směs byla 15 min míchána při teplotě místnosti, a pak byl přidán (1R)2-(2-naftyl)-1-(1-fenethyl-1 H-tetrazol-5-yl)ethylamin (141 mg; 0,408 mmol) a směs míchána přes noc. Pak byl přidán methylenchlorid (25 ml) a organická fáze promyta roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 %; 25 ml), hydrogensíranu sodného (10 %; 25 ml) a vodou (25 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a zahuštěna ve vakuu za získání 237 mg tere.butyl esteru ((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,30 (s, 9H); 2,75 (m, 1H); 2,95 (m, 4H); 3,33 (dd, 1H); 4,15 (m, 2H); 4,30 (m, 1H); 4,65 (d(br), 1H); 5,18 (dd, 1H); 6,60-7,85 (19 aram. H).
(2R)-2-Amino-3-(2-naftyl)-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethyl)propionamid
Tere.butyl ester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1-((1 R)-2-(2-naftyl)-1-(1-fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny (215 mg; 0,34 mmol) byl rozpuštěn ve směsi methylenchloridu (4 ml) a trifluoroctové kyseliny (2 ml) a míchán při teplotě místnosti 30 min. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn v ethyl acetátu a byl přidán vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (10%; 10 ml). Jednotlivé fáze byly odděleny a organická vysušena síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (3 x 20 cm) v ethyl acetátu za získání 152 mg (2R)• · · · · ·
2-amino-3-(2-naftyl)-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1-fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethyl)propionamidu.
H-NMR (CDC1,) 5 2,16 (dd, 1H); 2,80-3,15 (m, 4H); 3,35-3,55 (m, 2H); 4,48 (dd, 2H); 5,19 (dd, 1H); 6,90-8,02 (21 H)
Terc.butylester 4-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethylkarbamoyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny
N-terc.butyloxykarbonylpiperidin-4-karboxylová kyselina (68 mg; 0,296 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (7 ml) a byly přidány HOBT (40 mg; 0,296 mmol) a EDAC (62 mg; 0,326 mmol) a směs míchána 15 min při teplotě místnosti. Pak byl přidán (2R)-2-amino-3-(2-naftyl)-N-((1R)-2-(2-naftyl)-1-(1fenethyl-1H-tetrazol-5-yl)ethyl)propionamid (152 mg; 0. 296 mmol) a míchání * pokračovalo přes noc. Pak byl přidán methylenchlorid (25 ml) a organická fáze promyta roztokem hydrogenuhličitanu sodného (25 ml), vodným hydrogensíra- >
nem sodným (10%; 25 ml) a vodou (25 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a odpařením ve vakuu bylo získáno 170 mg terc.butylesteru 4-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 Htetrazol-5-yl)ethylkarbamoyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,25-1,52 (m a s, 13H); 1,79 (m, 1H); 2,58 (m, 2H); 2,75 (m, 1H); 2,86 (dd, 1H); 2,96 (dd, 1H); 3,05 (d, 2H); 3,27 (dd, 1H); 3,98 (m, 2H);
4,15 (m, 2H); 4,57 (dd, 1H); 5,04 (dd, 1H); 5,72 <d(br); 1H); 6,53 (d(br); 1H);
6,71-7,80 (19 arom. H)
Terc.butylester 4-((1 R)-2-(2-naftyl)-1-((1 R)-2-(2-naftyl)-1-(1-fenethyl-1 H-tetrazol5-yl)ethylkarbamoyl)ethylkarbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny(164 mg;
129
0,218 mmol) byl rozpuštěn ve směsi methylenchloridu (6 ml) a trifluoroctové kyseliny (3 ml) a 20 min míchán při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a ke zbytku byl přidán methylenchlorid (10 ml). Organická fáze byla promyta roztokem hydrogenuhličitanu (10%; 10 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Po odpaření ve vakuu byl zbytek rozpuštěn v ethyl acetátu (5 ml) a byl přidán chlorovodíkový roztok v ethyl acetát (3M; 2 ml). Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek jednou odpařen s methanolem (5 ml) a třikrát s methylenchloridem za získání 110 mg hydrochloridu sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (CDCI3) (vybrané píky) 2. 50 (m, 2H); 2,73 (m, 1H); 2,89- 3,09 (m, 7H); 3,31 (dd, 1H);4,21 (m, 2H); 4,68 (dd, 1H); 5,10 (dd, 1H); 6,70-7,75 (19 arom. H) HPLC: Rt = 38,07 min(A1)
Příklad 26
N-Methyl-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -thiokarbamoylethyl karbamoyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny:
.í
Methylester (2R)-2-(N-terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-3-(2-naftyl) propionové kyseliny
130 ..........
(2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionová kyselina (10,0 g;
32,79 mmol) byla rozpuštěna v suchém DMF (100 ml) a byly přidány jodmethan (12,25 ml; 196,72 mmol) a oxid stříbrný (26,6 g; 114,75 mmol). Reakční směs byla 12 h míchána při teplotě místnosti, a pak zfiltrována.
K filtrátu byl přidán methylenchlorid (400 ml) a organická fáze byla promyta vodným kyanidem draselným (5%; 2 x 100ml), vodou (3 x 150 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání 10,9 g methylesterů (2R)-2-(N-terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-3-(2-naftyl) propionové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) (směs rotamerů) 1,30, 1,35 (dva s, 9H) 2,71, 2,74 (dva s, 3H); 3,45, 3,19 (dva m, 2H); 3,72, 3,74 (dva s, 3H); 4,65, 5,06 (dva dd, 1H); 7,307,80 (7 arom. H) (2R)-2-(N-Terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-3-(2-naftyl)propionová kyselina
Methylester (2R)-2-(N-terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-3-(2-naftyl) propionové kyseliny (15,0 g; 43,73 minol) byl rozpuštěn v dioxanu (150 ml) a ochlazen v ledové lázni. Pak byly přidány voda (115 ml) a hydroxid lithný (1,15 g; 48,10 mmol). Reakční směs byla 4 h míchána při teplotě místnosti, a pak byl přidán ethyl acetát (300 ml) a voda (200 ml). Směs byla okyselena hydrogensíranem sodným (3%) na pH 2,5. Organická fáze byla promyta vodou (200 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 13,5 g (2R)-2-(N-terc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-3-(2naftyl)propionové kyseliny.
131 1H-NMR (CDCI3) (směs rotamerů) 1,30, 1,47 (dva s, 9H) 2,66, 2,78 (dva s, 3H); 3,21, 3,38 (dva dd, 1H); 3,48, 3,51 (dvad, 1H); 4,75, 4,83 (dva dd, 1H); 7,317,82 (7 arom. H).
Terc.butyl ester ((1R)-2-(2-naftyl)-1-thiokarbamoylethyl)karbamové kyseliny
S
Amid (2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionové kyseliny (1,058 g; 3,36 mmol) a 2,4-bis(4-methoxyfenyl)-1,3-dithia-2,4difosfetan-2,4-disulfid (Lawessonovo činidlo) (0,71 g; 1,76 mmol) byly rozpuštěny v dioxanu (6 ml). Reakční směs byla zahřívána 30 min na 60 °C, a pak 12 h míchána při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a ke zbytku přidána směs voda/hydrogenuhličitan sodný (1:1; 15ml). Směs byla 30 min míchána při teplotě místnosti, a pak zfiltrována. Filtrační koláč byl promyt vodou (2x5 ml) a chromatografován na silikagelu (2x15 cm) s eluentem ethyl acetát/heptan (2:1) za získání 0,914 g terc.butyl esteru ((1R)-2-(2-naftyl)-1-thiokarbamoyl ethyl)karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) 1,44 (s,9H); 3,28 (m, 2H); 4,74 (dd, 1H); 4-94 (d(br), 1H); 7,35-7,79 (7 arom. H).
(2R) 2-Amino-3-(2-naftyl)propionthioamid
132 • · · • · · · • · ·· ··· ··· ·· ·· ·
T erc. butyl ester ((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -thiokarbamoylethyl)karbamové kyseliny (0,45 g; 1,36 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (1,5 ml) a byla přidána trifluoroctová kyselina (1,5 ml). Reakční směs byla 40 min míchána při teplotě místnosti, a pak rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu a byl přidáván vodný hydrogenuhličitan sodný (až do zásadité reakce). Vodná fáze byla extrahována methylenchloridem (3x15 ml) a spojené organické fáze pak vysušeny síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 0,311 g (2R) 2-amino-3-(2naftyl)propionthioamidu.
1H-NMR (CDCI3) 2,36 (dd, 1H); 3,79(dd, 1H); 4,19(dd, 1H); 7,40-7,85(7 arom.)
Terc.butylester N-methyl-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1-((1 R)-2-(2-naftyl)1 -thiokarbamoylethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny
(2R) 2-Amino-3-(2-naftyl)propionthioamid (0. 290 g; 1. 2 mmol), (2R)-2-(Nterc.butoxykarbonyl-N-methylamino)-3-(2-naftyl)propionová kyselina (0,436 g; 1,3mmol), HOBT (0,176 g; 1,3 mmol) a EDAC (0,267 g; 1,4 mmol) byly rozpuštěny v methylenchloridu (20 ml) a 12 h míchány při teplotě místnosti. Pak byl přidán methylenchlorid (40 ml) a organická fáze promyta vodným hydrogensíranem sodným (10%; 40ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (40ml) a vysušena síranem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu za získání 0,53 g terc.butylesteru N-methyl-N-((1R)-2-(2naftyl)-1 -((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -thiokarbamoyJethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny.
133
1H-NMR (CDCI3) (směs rotamerů, vybrané píky) 1,28 (s, 9H); 2,45, 2,51 (dva s, 3H); 4,90 (m, 1H); 5,12, 5,20 (dva m, 1H).
(2R)-2-Methylamino-3-(2-naftyl)-N-((1R)-2-(2-naftyl)1-thiokarbamoylethyl) propionamid
Terc.butylester N-methyl-N-((1 R)-2-(2-naftyi)-1-((1 R)-2-(2-naftyl)1-thiokarbamoylethylkarbamoyl)ethyl)karbamové kyseliny (0,25 g; 0,462 mmol) byl rozpuštěn ve směsi methylenchloridu (1,5 ml) a trifluorocotvé kyseliny (1,5 ml). Reakční směs byla 1 h míchána při teplotě místnosti, a pak bylo rozpouštědlo odstraněno vevakuu. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (5 ml) a promyt vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (5 ml). Organická fáze byla vysušena síranem hořečnatým a po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 0,201 g (2R)-2-methylamino-3-(2-naftyl)N-((1 R)-2-(2-naftyl)1-thiokarbamoylethyl) propionamidu.
1H-NMR (CDCI3) 2,16 (s, 3H); 2,46 (dd, 1H); 3,07 (dd, 1H); 3,20- 3,41 (m, 4H); 5,09 (dd, 1H); 7,12-8,13 (m, 16H)
Terc.butylester 4-(N-methyl-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2naftyl)1 -thiokarbamoylethylkarbamoyl)ethyl)karbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kys.
134
N-terc.butyloxykarbonylpiperidin-4-karboxylová kyselina (97 mg; 0,424 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (2 ml) a byly přidány HOAt (58 mg;
0,424 mmol) a EDAC (85 mg; 0,444 mmol). Reakční směs byla 15 min míchána při teplotě místnosti a pak byl přidán roztok (2R)-2-methyiamino-3-(2naftyl)-N-((1 R)-2-(2-naftyl)1 -thiokarbamoylethyl)propionamidu (17 mg;
0,386 mmol) v methylenchloridu (2 ml). Pak byl přidán diisopropylethylamin (0,073 ml; 0,424 mmol) a reakční směs byla 12 h míchána při teplotě místnosti. Pak byl přidán terc.butylmethylether (25 ml) a reakční směs byla promyta vodou (25 ml), vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (15 ml), vodným hydrogensíranem sodným (10%; 15 ml), vodou(15 ml), a pak vysušena síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (3,5 x 30 cm) s gradientovou elucí: ethyl acetát/heptan (1:1) až ethyl acetát/heptan (2:1) za získání 0,190 g terc.butylesteru 4-(N-methyl-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1-((1 R)-2-(2naftyl)1-thiokarbamoylethylkarbamoyl)ethyl)karbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) (směs rotamerů, vybrané píky): 1,40, 1,42 (dva s, 9H); 2,49, 2,70 (dva s, 3H); 3,10 (dd, 1H); 3,48 (dd, 1H) 5,00, 5,09 (dva dd, 1H)
Terč. butylester 4-(N-methyl-N-((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2naftyl)1 -thiokarbamoyiethylkarbamoyl)ethyl)karbamoyl)piperidin-1 -karboxylové kys. (0,190 g; 0,291 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (5 ml), byla přidána trifluoroctová kyselina (5 ml) reakční směs byla míchána 15 min při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek dvakrát odpařen s methylenchloridem (2x5 ml). Zbytek byl čištěn kolonovou chromatografií na • · • ·
135 ·· ···· silikagelu (2 x 30 cm) s eluentem 25 % vodný amoniak/ethanol/methylenchlorid (1:9:90) za získání 57 mg sloučeniny z nadpisu.
ESMS: (M+H)+: 553,2
HPLC (A1): Rt = 29,4 min.
Příklad 27 ((1R)-1-((1R)-1-(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2-yl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyselina
Methylester 2-amino-3-oxo-3-fenylpropionové kyseliny
Suchý tetrahydrofuran (250 ml) byl ochlazen na -78 °C a byl přidán roztok tertbutoxidu draselného (6,37 g; 56,72 mmol) v suchém THF (100 ml). Pak byl přidán methyl ester (benzhydrylidenamino)octové kyseliny (14,35 g;
56,72 mmol) a reakční směs byla 30 min míchána při -78 °C. Pak byl po kapkách přidán benzoyl chlorid (6,59 g; 56,72 mmol) a reakční směs byla 30 min míchána při -78 °C. Pak byla po kapkách přidána chlorovodíková kyselina (1,0M; 175 ml) a reakční směs zahřána na teplotu místnosti a 2/3 ·· · • · ·· • · · • · · · • · · ·· ···
• ·
136 ·· ···· rozpouštědla byly odstraněny ve vakuu. Byla přidána voda (700 ml) a směs promyta diethyletherem (400 ml). Vodné fázebyly odpařeny ve vakuu a zbytek dvakrát odpařen s methanolem (2 x 150 ml). Byl přidán methanol (80 ml), směs zfiltrována a filtrát odpařen ve vakuu. Zbytek byl krystalován ze směsi tetrahydrofuran/diethylether za získání 8,86 g methylesteru 2-amino-3-oxo-3fenylpropionové kyseliny jako hydrochloridu.
1H-NMR (DMSO): 3,66 (s, 3H); 6,25 (s, 1H); 7,57-8,17 (5 arom. H) 9,20 (s(br); 3H).
Methylester 2-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionylamino)3-oxo-3-fenylpropionové kyseliny
(2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionová kyselina (5,49 g;
17,42 mmol) byla rozpuštěna v suchém THF (200 ml) a byl přidán N-methylmorfolin (1,92 ml; 17,42 mmol). Reakční směs byla ochlazena na -20 °C a míchána 15 min. Isobutyl chlorformat (2,27 ml; 17,42 mmol) byl rozpuštěn v suchém THF (3 ml) a po kapkách při -20 °C přidán do reakční směsi. Pak byly do směsi přidány N-methylmorfolin (1,92 ml; 17,42 mmol) a methylester 2-amino-3-oxo-3-fenylpropionové kyseliny (4,0 g; 17,42 mmol) a směs byla 30 min míchána při -20 °C. Potom byla zahřána na teplotu místnosti a rozpouštědlo odstraněno ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (200 ml), promyt vodou (200 ml) a vysušen síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (5 x 45 cm) s eluentem heptan/ethylacetát/methylenchlorid (2:1:1) za získání
6,19 g diastereomerní směsi methylesteru 2-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino3-(2-naftyl)propionylamino)-3-oxo-3-fenylpropionové kyseliny.
137 ........
1H-NMR (CDCI3): 1,48 (s, 9H); 3,28 (m, 2H); 3,59, 3,67 (dva s, 3H); 4,58 (s(br), 1H); 5,00, 5,03 (dva m, 1H); 6,13, 6,17 (dva d, 1H); 7,28-8,12 (m, 13 H).
Methylester 2-((1 R)-1-terc.butoxykarbonylamino-2-(2-naftyl)ethyl) 5-fenyl1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny
Methylester 2-((2R)-2-terc.butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionylamino)3- oxo-3-fenylpropionové kyseliny (2,2 g; 4,069 mmol) a 2,4-bis(4-methoxy fenyl)-1,3-dithia-2,4-difosfetan-2,4-disulfid (Lawessonovo činidlo) (4,1 g;
10,17 mmol) byly 6 h zahřívány k varu v 50 ml tetrahydrofuranu. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (4 x 40 cm) s eluentem ethyl acetát/heptan (1:1) a produkt krystalován ze směsi ethyl acetát/heptan (1:1; 50 ml) za získání 1,45 g methylesteru 2-((1 R)-1terc.butoxykarbonylamino-2-(2-naftyl)ethyl) 5-fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1,39 (s, 9H); 3,48 (dd(br); 1H); 3,55 (dd, 1H); 3,85 (s, 3H); 5,26 (s(br), 1H); 5,38 (m, 1H); 7,24-7,81 (12 arom H).
2-((1 R)-1-(1 -terč. butoxykarbonylamino)-2-(2 -naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol4- karboxylová kyselina
138
Methylester 2-((1 R)-1-terc.butoxykarbonylamino-2-(2-naftyl)ethyl) 5-fenyl1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny (0,35 g; 0,716 mmol) byl rozpuštěn v ethanolu (99 %, 40 ml) a byl přidán hydroxid lithný (0,112 g; 4,654 mmol). Reakční směs byla 12 h míchána při teplotě místnosti, rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a zbytek rozpuštěn ve směsi vody (50 ml) a diethyletheru (50 ml). Směs byla okyselena hydrogensíranem sodným (10%) a organická fáze vysušena síranem hořečnatým. Po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 0,185 g 2-((1R)-1-(1-terc.butoxykarbonylamino)-2-(2 -naftyl)ethyl)-5fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (DMSO): 1,24 (s, 9H); 3,20 (dd, 1H); 3,55 (dd, 1H); 5,11 (m, 1H); 7,487,93 (12 arom. H)
Amid 2-((1 R)-1-(terc.butoxykarbonylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol4-karboxylové kyseliny
2-((1 R)-1 -(1 -terc.butoxykarbonylamino)-2-(2 -naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol4-karboxylová kyselina (0,17 g; 0,362 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (8 ml) a byly přidány 1-hydroxybenzotriazol (0,049 g;
0,362 mmol) a N-(3-dimethylaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,083 g; 0,434 mmol). Reakční směs byla 15 min míchána při teplotě místnosti, a pak byl přidán hydrogenuhličitan amonný (0,057 g; 0,724 mmol) a směs 12 h míchána při teplotě místnosti. Byl přidán methylenchlorid (20 ml) a reakční směs promyta roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10%; 10 mi), hydrogensíranu sodného (5 %; 2 x 10 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na
139 silikagelu (2x15 cm) s eluentem ethyl acetát/heptan (1:1) za získání 0,155 g amidu 2-((1 R)-1 -(terc.butoxykarbonylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3thiazol-4-karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3): 1. 38 (s, 9H); 3,39-3,52 (m, 2H); 5,17 (d (br), 1H); 5,35(m,1H); 5,52 (s(br); 1H); 7,15 (s(br); 7,22-7,82 (12 arom. H).
Amid 2-((1 R)-1-amino-2-(2-naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kys.
Amid 2-((1 R)-1-(terc.butoxykarbonylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol4-karboxylové kyseliny (0,155 g; 0,327 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (4 ml) a byla přidána trifluoroctová kyselina (4 ml). Reakční směs byla 1 h míchána při teplotě místnosti. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek dvakrát odpařen s methylenchloridem (2x2 ml). Zbytek byl rozpuštěn v diethyl etheru (2 ml) a byly přidány kyselina chlorovodíková (1M; 3 ml) a methanol (10 ml). Odstraněním rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 0,106 g amidu 2-((1 R)-1 -amino-2-(2-naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny. 1H-NMR (CDCI3) (vybrané píky): 3,45-3,60 (m, 2H); 5,28 (m, 1H).
Terc.butylester ((1 R)-1-((1 R)-1-(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2-yl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny
140
(2R)-2-terc.Butoxykarbonylamino-3-(2-naftyl)propionová kyselina (0,107 g;
0,341 mmol) byla rozpuštěna ve směsi methylenchlorid/dimethyl formamid (5:1; 20 ml). Pak byly přidány 1-hydroxybenzotriazol (0,046 g; 0,341 minol) a N-(3dimethyiaminopropyl)-N'-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,071 g; 0,369 mmol). Reakční směs byla 15 min míchána při teplotě místnosti, a pak byl přidán amid 2-((1 R)-1-amino-2-(2-naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny (0,106 g; 0,284 mmol). Reakční směs byla míchána 12 h při teplotě místnosti, pak promyta vodou (20 mi), hydrogensíranem sodným (10 %; 20 ml), roztokem hydrogenuhličitanu sodného (satd; 20 ml), vodou (20 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (2x15 cm) s eluentem ethyl acetát/heptan (2:1) za získání 0,22 g terc.butylesteru ((1R)-1-((1R)-1-(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol2-yl)-2-(2- naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny.
1H-NMR (CDCI3) (vybrané píky): 1,32 (s,9H); 3,13-3,41 (m, 4H) 4,42 (dd, 1H);
5,56 (dd, 1H).
Amid 2-((1 R)-1 -((2R)-2-amino-3-(2-naftyl) propionylamino)-2-(2naftyl)ethyl)5-fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny
Ί>!) ΤίίΊ-ΟιΎ
141
Terc.butylester ((1 R)-1 -((1 R)-1 -(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2-yl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamové kyseliny (0,22 g;
0,328 mmol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (2,5 ml) a byla přidána trifluoroctová kyselina (2,5 ml). Směs byla 1 h míchána při teplotě místnosti.
Pak bylo ve vakuu odstraněno rozpouštědlo a zbytek byl dvakrát odpařen s methylenchloridem (2x5 ml). Zbytek byl rozpuštěn v methylenchloridu (10 ml) a promyt nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (10 ml), vodou (10 mi) a vysušen síranem hořečnatým. Po odpaření rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 0,155 g amidu 2-((1 R)-1-((2R)-2-amino-3-(2-naftyl) propionylamino)-2-(2naftyl)ethyl)-5-fenyl-1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny.
1 H-NMR (CDCI3) 2,55 (dd, 1H); 3,22 (dd, 1H); 3,40 (dd, 1H); 3,52 (dd, 1H); 3,69 (dd, 1H); 5,53 (s(br), 1H); 5,67 (dd, 1H); 7,13-8,12 (m, 22H).
T erc.butylester 4-(((1 R)-1 -((1 R)-1 -(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2-yl)2-(2-naftyl)ethylkarbamoyi)-2-(2-naftyl)ethyI)karbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny
N-terc.butyloxykarbonylpiperidin-4-karboxylová kyselina (0,140 g; 0,612 mmol) byla rozpuštěna v methylenchloridu (5 ml) a byl přidán N-(3-dimethylaminopropyl)-N’-ethylkarbodiimid hydrochlorid (0,058 g; 0,306 mmol). Reakční směs byla 15 min míchána při teplotě místnosti, a pak byl přidán roztok amidu 2-((1 R)-1 -((2R)-2-amino-3-(2-naftyl) propionylamino)-2-(2naftyl)ethyl)-5-fenyl1,3-thiazol-4-karboxylové kyseliny (0,155 g; 0,278 mmol) v methylenchloridu (10 ml). Reakční směs byla 8 h míchána při teplotě místnosti, pak promyta vodou (20 ml), nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (20 ml) a vysušena síranem hořečnatým. Směs byla zahuštěna ve vakuu a zbytek čištěn kolonovou chromatografií na silikagelu (2,5 x 30 cm) v ethyl acetátu za získání ·· ··« · *142 ·· **· ·
0,171 g terc.butylesteru 4-(((1 R)-1-((1 R)-1 -(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2yl)-2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)piperidin-1karboxylové kyseliny.
1H-NMR (CDCi3) (vybrané píky) 1,44 (s, 9H); 2,81 (t, 1H) 3,12 (m, 2H);
3,42 (dd, 1H); 3,85-4,02 (m, 4H); 4,88 (dd, 1H) 5,52 (dd, 1H)
Terc.butylester 4-(((1 R)-1 -((1 R)-1 -(4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2-yl)2-(2-naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)karbamoyl)piperidin-1-karboxylové kyseliny (0,171 g; 0,219 mmol) byl rozpuštěn ve směsi methylenchlorid/ trifluoroctové kyselina (1:1; 10 ml) a 20 min míchán při teplotě místnosti. Rozpouštědlo pak bylo odstraněno ve vakuu a zbytek třikrát odpařen s methylenchloridem (3x5 ml) za získání 0,175 g sloučeniny z nadpisu.
1H-NMR (CDCI3) (vybrané píky): 3,37 (m, 2H); 3,44 (dd; 1H); 4,80 (m, 1H);
5,55 (dd, 1H)
ESMS: (M+H)+: 682,4
HPLC: (metoda B): Rt = 35,08 min.
Následující sloučenina se připraví stejným postupem jako v přikladu 21, ale s použitím methylaminu místo benzylaminu:
·{ 1-[N-(1-(3-Methylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyi)N-methylkarbamoyl]-2-(2-naftyI)ethyl ^amid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kyseliny:
·· ····
Následující sloučenina se připraví stejným postupem jako v příkladu 21, ale s použitím dimethylaminu místo benzylaminu:
i 1-[N-(l-(3dimethylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl) -2-fenylethyl)-N-methyl karbamoyl]-2-(2-naftyl)ethyl i-amid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kyseliny
Následující sloučenina se připraví podle postupu K, analogicky příkladu 23, ale za použití (2E)-5-terc.butoxykarbonylamino-5-methylhex-2-enové kyseliny místo 3-terc. butoxykarbonylaminomethylbenzoové kyseliny.
Amid (2E)-5-amino-5-methyl-N-((1 R)-1 -(N-((1 R)-1 -(2-hydroxyethoxymethyl)2-fenylethyI)-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylhex-2-enové kyseliny:
Následující sloučenina se připraví analogicky jako v příkladu 23, ale za použití methylmagnesiumbromidu místoof lithiumborohydridu a (2E)-5terc.butoxykarbonylamino-5-methylhex-2-enové kyseliny místo 3-terc. butoxykarbonylaminomethylbenzoové kyseliny.
144 • · (2E)-5-Amino-5-methyl-N-((1 R)-1 -(N-(( 1 R)-1 -(2-hydroxy-2-methylpropoxy methyl)-2-fenylethyl)-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylhex2-enová kyselina
Průmyslová využitelnost .Růstový hormon stimuluje růst všech tkání, které jsou růstu schopné, a má řadu účinků na metabilismus, např. stimulaci syntézy bílkovin a mobilizaci volných mastných kyselin pro převedení cukrů na mastné kyseliny v energetickém metabolismu. Nedostatek růstového hormonu vede k řadě vážných chorob např. nanismu. Předkládaný vynález se týká nových sloučenin, prostředků, které je obsahují, a jejich použití pro léčení poruch následkem nedostatku růstového hormonu.

Claims (59)

  1. NÁROKY
    1. Sloučenina obecného vzorce I (0 kde n je 0 nebo 1, m je 1 nebo 2, p je 0,1 nebo 2;
    A je .i kde R1 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W je O nebo S;
    za podmínky, že pokud „n“ je 1, A je sekundární nebo terciární amid nebo sekundární nebo terciární amin, B nebo F není amid nebo amin;
    B je
    R2
    -CH=CH—
    R2 kde R2 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W' je O nebo S;
    146
    D je nebo
    N-CH—
    SN-(CH,)’-(CR7R®)8- (CH,)t-CM)q (CH,)— r6/ kde R3, R4, R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)j-, kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    M je O, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    147 κ
    I
    -CH-L
    E je vodík;
    y-v nebo 'ť y=v kde L je vodík, -OR9, CONHR9R10, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou nebo C1-C6 alkoxylem, nebo L je Y v nebo
    Y=V kde Rs a R10 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nebo spolu tvoří
    -(CH2)k-U'-(CH2)r , kde k a I jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k+l je 3, 4, 5 nebo 6;
    U' je O, S, nebo kovalentní vazba;
    X je N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R13) nebo N a Z je C(R14) nebo N,
    R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16R17, (CH2)uOR15, halogen, hydroxy skupina, rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3,4, 5 nebo 6;
    R18
    -(CH2)a- (CR20R21)b-(CH2>dR1S
    K je vodík nebo kde R18, R19, R20 a R21 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, C1-C6 alkylaminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    148 • · ··· ··· ··
    R18 a R19, R18 a R21, R19 a R20 nebo R20 a R21 s výhodou tvoří
    -(CH2)k -Z-(CH2)r-, kde k' a Γ jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k'+l' je 3, 4, 5 nebo 6;
    Z je O, S nebo kovalentní vazba; b je 0 nebo 1; „a“ a „d“ jsou nezávisle 0, 1,2, 3, 4 a „a+b“ je 1 až 4;
    Q je > CR22 nebo N, kde R22 je vodík nebo C1-C6 alkyl;
    Fje
    R23
    -CH=CH— nebo
    R23
    R23 kde R23 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W je O nebo S;
    G je vodík, nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    149 nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    nebo její farmaceuticky vhodná sůl a sloučenina obecného vzorce I zahrnuje všechny optické izomery ve formě izolované, čisté nebo částečně čisté i jejich racemické směsi.
  2. 2. Sloučenina obecného vzorce I
    G
    J (I) kde n je 0 nebo 1, m je 1 nebo 2, p je 0, 1 nebo 2;
    A je
    R1 o
    Ra kde R1 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W je O nebo S;
    150 za podmínky, že pokud A obsahuje sekundární nebo terciární amid nebo sekundární nebo terciární amin, B ani F neobsahuje sekundární nebo terciární amid nebo sekundární nebo terciární amin;
    B je kde R2 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W' je O nebo S;
    D je
    R
    N—(CMj) — (CR'R°)S-(CH,)—U--N-CH— / ° |
    R6 R3 nebo r5 \N-(CHj)- (CR7R8)s- (CH2)t-(M)q (CH2)-— r6/ kde R3, R4, R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(ΟΗ2)·-υ-(ΟΗ2)Γ , kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    151
    M je Ο, S, -CH=CH-, nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    K
    I
    -CH-L
    E je vodík;
    » « y—v nebo \x
    Y=V kde L je vodík, -OR9, CONHR9R10, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou nebo C1-C6 alkoxylem, nebo L je
    Λ
    Y-V nebo
    Y=V kde R9 a R10 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nebo spolu tvoří
    -(CH2)k-U'-(CH2)i-, kde k a I jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k+l je 3, 4, 5 nebo 6;
    U' je O, S, nebo kovalentní vazba;
    X je N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R13) nebo N a Z je C(R14) nebo N,
    152
    R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16*R1*7, (CH2)UOR15, halogen, hydroxy skupina, rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;
    r18
    -(CH2)a- <CR20R21)b-(CH2>dR19Z
    K je vodík nebo kde R18, R19, R20 a R21 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, C1-C6 alkylaminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R18 a R19, R18 a R21, R19 a R20 nebo R20 a R21 s výhodou tvoří
    -(CH2)r -Z-(CH2)i- , kde k' a Γ jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k'+l' je 3, 4, 5 nebo 6;
    Z je O, S nebo kovalentní vazba; b je 0 nebo 1; „a“ a „d“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4 a „a+b“ je 1 až 4;
    Q je > CR22 nebo N, kde R22 je vodík nebo C1-C6 alkyl;
    Fje
    R23
    -CH—CH— nebo
    R‘
    153 kde R23 je vodík nebo C1-C6 alkyl a W” je O nebo S;
    G je vodík,
    N
    NH £/7
    V—N nebo
    NH '—N S s výhodou nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    J je s výhodou nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    nebo její farmaceuticky vhodná sůl a sloučenina obecného vzorce I zahrnuje všechny optické izomery ve formě izolované, čisté nebo částečně čisté i jejich racemické směsi.
  3. 3. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 nebo 2, kde map jsou nezávisle 1 nebo 2, p je 0,1 nebo 2;
    154
    • · • • • • · • · · • · · <* • · • • · · · • · • • • · • · · · • · • · • • • • w · ♦ · • · • · · • · · · · • · •
    G je a A, B, D, J, E, Fa n byly definovány v nároku 1 a 2.
  4. 4. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 3, kde A je
    CH=CH— nebo kde R1 je vodík nebo C1-C6 alkyl; W je O nebo S; a
    B, D, G, J, E, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 3.
  5. 5. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 4, kde D je \N-(CH2)r- (CR7R8)s-(CHa)t-(M)q-(CH,)o—
    R6/ nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    155 q a s jsou nezávisle 0 nebo 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    a A, B, D, G, J, E, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 4.
  6. 6. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 5, kde G a J jsou nezávisle —O . Hebo XO a A, B, D, J, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 5.
  7. 7. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 6, kde D je
    R'
    Rl y>N-(CH,)— (CR7R8)s-(CHa)t-<M)—(CH^ kde R3, R4, R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)rU-(CH2)j-, kde „i“ a „j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    M je O, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    • ·
    156 q a s jsou nezávisle 0 nebo 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    a A, B, G, J, E, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 6.
  8. 8. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 7, kde D je kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)j-, kde „i“ a „j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    MjeO.S, -CH=CH-, nebo x nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    qje 1 s je 0 nebo 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    a A, B, G, J, E, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 7.
  9. 9. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 8, • · · ·
    157 kde E je vodík;
    K
    I
    -CH-L
    Y-V nebo *
    Y=V kde L je vodík, -OR9, CONHR9R10, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou nebo C1-C6 alkoxylem,
    Y—v nebo
    Y=V kde R9 a R10 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nebo spolu tvoří
    -(CH2)k-U'-(CH2)i-, kde k a I jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k+l je 3, 4, 5 nebo 6;
    U' je O, S, nebo kovalentní vazba;
    X je N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R13) nebo N a Z je C(R14) nebo N,
    R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16R17, (CH2)uOR15, halogen, hydroxy skupina, rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0,1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;
    R18 ^>N-(ΟΗ,ζ- (CR20R21)b-(CH2)d r19
    K je vodík nebo kde R18, R19, R20 a R21 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, C1-C6 alkylaminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    158 ···«
    R18 a R19, R18 a R21, R19 a R20 nebo R20 a R21 s výhodou tvoří
    -(CH2)k -Z-(CH2)i- , kde k' a Γ jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k’+l' je 3, 4, 5 nebo 6;
    Z je O, S nebo kovalentní vazba; b je 0 nebo 1; „a“ a „d“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4 a „a+b“ je 1 až 4;
    a A, B, D, G, J, E, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 8.
  10. 10. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 10, kde E je nebo
    Y=V kde X je N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R13) nebo N a Z je C(R14) nebo N,
    R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16R17, (CH2)uOR15, halogen, hydroxy skupina, C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;
    a A, B, D, G, J, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 9.
  11. 11. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 10, kde E je
    Λ
    Y-V nebo
    Ό
    Y=V kde X je N(R11) nebo O; V je C(R12) nebo N; Y je N a Z je C(R14) nebo N,
    R12 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16R17, (CH2)uOR15, halogen, hydroxy skupina, C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    159
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;
    a A, B, D, G, J, F, n, m a p jsou definovány v předešlých nárocích.
  12. 12. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 11, kde E je
    V z
    n
    -v nebo
    Ύ7
    Y=\Z kde Xje N(R11) nebo O; V je C(R12) nebo N; Y je N a Z je C(R14) nebo N,
    R12 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)vNR16R17, (CH2)uOR15, halogen, hydroxy skupina, C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl,
    5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;
    a A, B, D, G, J, F, n, m a p jsou definovány v nárocích 1 až 11.
  13. 13. Sloučenina obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 12, vybraná ze skupiny, kterou tvoří ((1 R,2E)-4-hydroxymethyl-1 -(2-naftyl)methyl-5-fenylpent-2-enyl)amid (3R) piperidin-3-karboxylové kyseliny,
    3-aminomethyl-N-((1 R,2E)-4-hydroxymethyl-1 -(2-naftyl)methyl5-fenylpent-2-enyl)benzamid, (1-<! [1-(3-karbamoyl-[1,2,4] oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl-1-Nmethylkarbamoyl )-2-(2-naftyl)ethyl]amid piperidin-4-karboxylové kyseliny ethylester 5-<! (1 R)-1-((2R)-2-(piperidin-4-karbonylamino)-3-(2naftyl)propionyl-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl)-[ 1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny, ·· ·« ····
    160 ·· ··· ··· ·· ethylester 5-<i 1 -[2-(3-aminomethylbenzoyl)-3-(2-naftyl)propionylN-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl ^-[1,2,4 ]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny, ethylester 5-^ (1 R)-1-[(2R)-2-(3-aminomethylbenzoylamino)-3-(2naftyl)propionylamino]-2-fenylethyli,-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny nebo její sůl s triflouroctovou kyselinou, [(1 R)-1 (1 R)-1 -(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl l·
    2- (2-naftyl)ethyl)amid piperidin 4-karboxylové kyseliny,
    3- aminomethyl-N-[(1R)-1-^ (1R)-1-(3-methyl-[1, 2,4] oxadiazol-5-yl)2-fenylethy Ikarbamoyl i>-2-(2-naftyl)ethyl)benzamid, [(1 R)-1 -·! (1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethylkarbamoyl }·2-(2-naftyl)ethyl)amid 4-amino-4-methyl-pent-2-enové kyseliny, [(1 R)-1-((1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenyiethylkarbamoyl)2- (2-naftyl)ethyI]amid (3R)-piperidin-3-karboxyiové kyseliny,
    3- aminomethyl-N-((1R, 2E, 4S)-4-karbamoyl-5-(2-naftyl)-1-(2naftyl)methylpent-2-enyl)benzamid, ((1R,2E,4S)-4-karbamoyl-5-(2-naftyl)-1-(2-naftyl)methylpent-2-enyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny
    N-((1 R)-1-(((1 R)-1-(((1 S)-5-amino-1-(dimethylkarbamoyl)pentylkarbamoyl)2-fenylethoxy)methyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-3-aminomethylbenzamid,
    N-((1R,4S)-4-(((1S)-5-amino-1-(dimethylkarbamoyl)pentyl)karbamoyl)1- ((2-naftyl)methyl)-2-oxo-5-fenylpentyl)-3-aminomethylbenzamid,
    N-((1R,2R,4S)-4-(((1S)-5-amino-1-(dimethyikarbamoyl)pentyl)karbamoyl)2- hydroxy-1 -(2-naftyi)methyl-5-fenylpentyl)-3-aminomethylbenzamid, ((1R, 2R, 4S)-4-(((1 S)-5-amino-1-(dimethyl-karbamoyl)pentyl)karbamoyl)2-hydroxy-1 -((2-naftyl)methyl)-5-fenylpentyl)amid piperidin-3-karboxylové kyseliny,
    161 ethylester 5-((1 R)-1 -(N-methyl-N-((2R)-3-(2-naftyl)-2-(piperidin-4-ylkarbonylamino)propionyl)amino)-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4Joxadiazol3-karboxylové kyseliny, ethylester 5-((1 R)-1 -(N-((2R)-2-(3-aminomethylbenzoylamino)-3-(2naftyl)propionyl)-N-methylamino)-2-(2-naftyl)ethyl)-[1,2,4]oxadiazol3- karboxylové kyseliny, amid 5-((1 R)-1-(N-((2R)-2-(3-aminomethylbenzoylamino)-3-(2naftyl)propionyl)-N-methylamino)-2-fenylethyl)-[1,3,4]oxadiazol2-karboxylové kyseliny, {(1 R)-1 -(N-methyl-N-((1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl)karbamoyl]-2-(2-naftyl)ethyl^amid (2E)-5-amino-5-methylhex2-enové kyseliny,
    N-[(1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyilkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl]-N-methylamid 4-amino4- methylpent-2-enové kyseliny,
    N-[(1 R)-1-(N-methyl-N-[(1 R)-1-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl]amid (2E)-4-amino-4-methylpent2- enové kyseliny,
    3- aminomethyl-N-((1 R)-1 -(N-[( 1 R)-1 -(((dimethylkarbamoyl)methoxy) methyl)-2-fenylethyl]-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)N-methylbenzamid, amid 5-((1 R)-1 -(((2R)-2-(((2E)-4-amino-4-methylpent-2-enoyl)methyl amino)-3-(2-naftyl)propionyl)methylamino)-2-fenylethyl)-[1,3,4]-oxadiazol2-karboxylové kyseliny,
    N-methyi-N-^ l-(methyl-[l-(3-methyl-[1,2,4]oxadiazoi-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl |-amid piperidin-4-karboxylové kyseliny, • · • · · ·
    162 ·· · · · ···
    N--j 1-(N-[methyl-N-[1-(3-methyl-[1,2,4]-oxadiazol-5-yl)-2-(2naftyl)ethyl]karbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl (“amid piperidin-4-karboxylové kyseliny, (2-propyl)ester 5-Ί 1-[N-2-(piperidin-4-karbonylamino)-3-(2naftyl)propionyl)-N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl ^-[.1,2,4]oxadiazol3-karboxylové kyseliny, sůl 5-j 1-[N-(2-(piperidin-4-karbonylamino)-3-(2-naftyl)propionyl)N-methylamino]-2-(2-naftyl)ethyl ^-[1,2,4]oxadiazol-3-karboxylové kyseliny s trifluoroctovou kyselinou, (1 -·{ N-[1 -(3-methylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-(2-naftyl)ethyl) N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl (“amid piperidin-4-karboxylové kys.,
    -> 1 -[N-(1 -(3-benzylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl)-N-methylkarbamoyl]-2-(2-naftyl)ethylJ-amid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kys.,
    N-j (1 R)-1-[N-((1 R)-1-benzyl-2,5-dihydroxypentyl)-N-methylkarbamoyl]2- 2-naftyl)ethyl !“-N-methylamid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kys.,
    3- aminomethyl-N-((1 R)-1-(N-“{ (1 R)-1-(2-hydroxyethoxymethyl)2-fenylethyl]-N-methylkarbamoylí“-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylbenzamid, ((1R,2E)-4-hydroxymethyl-5-(2-naftyl)-1-((2-naftyl)methyl)pent-2-enyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny, ((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((IR)-2-(2-naftyl)-1 -(1 -fenethyl-1 H-tetrazol-5-yl)ethylkarbamoyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny,
    N-methy l-N'((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -((1 R)-2-(2-naftyl)-1 -thiokarbamoylethyl karbamoyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kyseliny, ((1 R)-1 -((1 R)-1 -<4-karbamoyl-5-fenyl-1,3-thiazol-2-yl)-2-(2naftyl)ethylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)amid piperidin-4-karboxylové kys., (1 -[N-( 1 -(3-methylkarbamoyl-[ 1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl)-N-methyl163 karbamoyl]-2-(2-naftyl)ethyl)amid (2E)-5-amino-5-methylhex-2-enové kyseliny, (1 -[N-( 1 -(3-dimethylkarbamoyl-[1,2,4]oxadiazol-5-yl)-2-fenylethyl)N-methyl-karbamoyl]-2-(2-naftyl)ethyl)amid (2E)-5-amino-5-methylhex2-enové kyseliny, amid (2E)-5-amino-5-methyl-N-((1 R)-1 -(N-(( 1 R)-1 -(2-hydroxyethoxy methyl)-2-fenyiethyl)-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylhex2-enové kyseliny, (2E)-5-amino-5-methyl-N-((1 R)-1 -(N-(( 1 R)-1 -(2-hydroxy-2-methylpropoxy methyl)-2-fenylethyl)-N-methylkarbamoyl)-2-(2-naftyl)ethyl)-N-methylhex2-enová kyselina, nebo jejich farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  14. 14. Sloučenina obecného vzorce II (II) kde D, G a J byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  15. 15. Sloučenina podle nároku 14, kde D je
    R5
    R6 y>N—(CHj)-— (CR7R8)s— (CH2)t-<M)q—<CH2)~
    164 kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)j-, kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    M je O, S, -CH=CH-, nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4.
  16. 16. Sloučenina podle nároku 14 nebo 15, kde J je
    O . -00 nebo xo • · · · · · • · ·
    165
  17. 17. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 14 až 16, kde G je
  18. 18. Sloučenina obecného vzorce III
    G
    ÍCHJ (lil) kde D, J, G, E, m a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  19. 19. Sloučenina podle nároku 18, kde D je />N-(CH,)— (CR7R8)s— (CH,),-(M)q-(CH3)c kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)r , kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    Mje O, S, -CH=CH-,
    166 • · · · · · : : ·: ·:/&
    • · · · · · • · · · · «· ··· ··· ·· nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4.
  20. 20. Sloučenina podle nároku 18 nebo 19, kde J je
  21. 21. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 18 až 20, kde G je
    NH \—N nebo
  22. 23. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 19 až 22, kde E je
    E je vodík;
    K
    I
    CH-L 'f nebo Ύ >
    Y-V
    Y=V
    167 kde L je vodík, -OR9, CONHR9R10, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou nebo C1-C6 alkoxylem, nebo L je xx » i
    Y-V nebo
    Y=V kde R9 a R10 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nebo spolu tvoří
    -(CH2)k-U'-(CH2)r , kde k a I jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k+l je 3, 4, 5 nebo 6;
    U' je O, S, nebo kovalentní vazba;
    Xje N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R13) nebo N a Z je C(R14) nebo N,
    R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16R17, (CH2)uOR15, halogen, hydroxy skupina, rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0, 1, 2, 3, 4, 5 nebo 6;
    R18 />Q-(CH2)a- <CR20R21)b —(CH2)d R19
    K je vodík nebo kde R18, R19, R20 a R21 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, C1-C6 alkylaminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R18 a R19, R18 a R21, R19 a R20 nebo R20 a R21 s výhodou tvoří
    -(CH2)k--Z-(CH2)t -, kde k' a Γ jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k'+i' je 3, 4, 5 nebo 6;
    168 • · · · · · * · · · · · ··· ··· ·· • · ··· · · · ·· ·· ·
    Z je O, S nebo kovalentní vazba; b je 0 nebo 1; „a“ a „d“ jsou nezávisle 0,
    1, 2, 3,4 a „a+b“ je 1 až 4;
    23. Sloučenina obecného vzorce IV kde D, J, G, E, m a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  23. 24. Sloučenina podle nároku 23, kde D je
    R~ \N-(CHJ— (CR7R8)S- (CHJ,-(M)q-<CHJkde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)r , kde „i“ a „j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    M je O, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    169 o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4.
  24. 25. Sloučenina podle nároku 23 nebo 24, kde J je
  25. 26. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 23 až 25, kde G je nebo
  26. 27. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 23 až 26, kde E je
    E je vodík;
    V t nebo y-v
    Y=V kde L je vodík, -OR9, CONHR9R10, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou nebo C1-C6 alkoxylem, nebo L je
    A t y-v nebo
    Y=V kde R9 a R10 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nebo spolu tvoří
    -(CH2)k-U'-(CH2)r , kde k a I jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k+l je 3, 4, 5 nebo 6;
    U' je O, S, nebo kovalentní vazba;
    X je N(R11), O nebo S; V je C(R12) nebo N; Y je C(R13) nebo N a Z je C(R14) nebo N,
    R12, R13 a R14 jsou nezávisle vodík, COOR15, CONR16R17, (CH2)VNR16R17, (CH2)UOR15, halogen, hydroxy skupina, rozvětvený nebo lineární C1-C6 alkyl, fenyl, oxazol-5-yl, 5-methyl-[1,2,4]oxadiazol-3-yl,
    R11, R15, R16 a R17 jsou nezávisle vodík nebo rozvětvený nebo lineární C1C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný arylem a „u“ a „v“ jsou nezávisle 0,1, 2, 3,4, 5 nebo 6;
    R18
    -(CH2)_ (CR20R21)b-(CH2)d R19Z
    K je kde R18, R19, R20 a R21 jsou nezávisle vodík, C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný halogenem, aminoskupinou, C1-C6 alkylaminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R18 a R19, R18 a R21, R19 a R20 nebo R20 a R21 s výhodou tvoří
    -(CH2)k -Z-(CH2)i -, kde k' a Γ jsou nezávisle 1, 2 nebo 3 a k'+l' je 3, 4, 5 nebo 6;
    Z je O, S nebo kovalentní vazba; b je 0 nebo 1; „a“ a „d“ jsou nezávisle 0, 1,2,3,4a „a+b“ je 1 až 4;
    • ·« ·
    171
  27. 28. Sloučenina obecného vzorce V • * ! .· ' I kde D, J, G, E, m a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  28. 29. Sloučenina obecného vzorce VI l I* o-n (VI) kde D, J, R1, G a R12 byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  29. 30. Sloučenina podle nároku 29, kde D je
    R' y>N—<CH2)ř— (CR7r8)s— (CH2)j—(M)q—<ch3)c kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)rU-(CH2)j-, kde „i“ a „j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    172
    M je Ο, S, -CH=CH-, nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem; o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1; a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4.
  30. 31. Sloučenina podle nároku 29 nebo 30, kde J je
  31. 32. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 29 až 31, kde G je nebo • · · · · ·
    173 ···
  32. 33. Sloučenina obecného vzorce VII ✓
    O O (VII) kde D, J, R4 a m byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  33. 34. Sloučenina podle nároku 33, kde D je kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)j-U-(CH2)r , kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    Mje O, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    • · · · · ·
    174 q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4.
  34. 35. Sloučenina podle nároku 33 nebo 34, kde J je
  35. 36. Sloučenina obecného vzorce Vlil
    G z
    (Vlil) kde D, R2, J, R1, G, R9, R10 a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  36. 37. Sloučenina podle nároku 36, kde D je
    R‘ \>N-(CH,)— (CR7R8)S- (CH,),-(M)q-(CH,)kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)j-U-(CH2)r, kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    175
    M je Ο, S, -CH=CH-, nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0,1, 2, 3 nebo 4.
  37. 38. Sloučenina podle nároku 36 nebo 37, kde J je || nebo
  38. 39. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 36 až 38, kde G je
    N
    NH nebo •'
    176
  39. 40. Sloučenina obecného vzorce IX z
    (IX) kde D, R2, J, R1, G a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  40. 41. Sloučenina podle nároku 40, kde D je kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)j-, kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    MjeO, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0, 1, 2, 3 nebo 4;
    177 q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0, 1, 2, 3 nebo 4.
  41. 42. Sloučenina podle nároku 40 nebo 41, kde J je
  42. 43. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 40 až 42, kde G je
  43. 44. Sloučenina obecného vzorce X kde D, R2, J, R1, G a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
    • · · ·
    178
  44. 45. Sloučenina podle nároku 44, kde D je
    N-(CH,)— (CR7R8)s- (ch2)(—(M)q—(CH,)— kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)i-U-(CH2)j-, kde „i“ a „j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    M je O, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0, 1,2,3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0,1, 2, 3 nebo 4.
  45. 46. Sloučenina podle nároku 44 nebo 45, kde J je
    O . —OO nebo W
    179
  46. 47. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 44 až 46, kde G je vodík, nebo
  47. 48. Sloučenina obecného vzorce XI kde D, R2, J, R1, G a p byly definovány v nároku 1 nebo její farmaceuticky vhodná sůl nebo všechny optické izomery, a to izolované, čisté nebo částečně čištěné nebo jejich racemické směsi.
  48. 49. Sloučenina podle nároku 48, kde D je
    R*·
    Rl ^>N-(CHJ— (CR7R8)s- (CHJ,-(M) — (CHJ— kde R5, R6, R7 a R8 jsou nezávisle vodík nebo C1-C6 alkyl nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou nebo arylem;
    R5 a R6, R6 a R7, R5 a R8 nebo R7 a R8 s výhodou tvoří -(CH2)rU-(CH2)j-, kde „i“ a ,j“ jsou nezávisle 1 nebo 2 a U je O, S nebo kovalentní vazba;
    • · · ·· ·%··
    180
    M je Ο, S, -CH=CH-, nebo nesubstituovaný nebo substituovaný vodíkem, aminoskupinou, hydroxyskupinou, C1-C6 alkylem nebo C1-C6 alkoxylem;
    o, r a t jsou nezávisle 0,1, 2, 3 nebo 4;
    q a s jso nezávisle 0 a 1;
    a r+s+t je 0,1, 2, 3 nebo 4.
  49. 50. Sloučenina podle nároku 48 nebo 59, kde J je
  50. 51. Sloučenina podle kteréhokoliv nároku 48 až 50, kde G je
  51. 52. Farmaceutický prostředek vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou složku sloučeninu obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodnou sůl s farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem.
    • · • · • · • · ··
    181 - ^5 • ·· ·· '· > · • / -· · • · · • · · ··· ·· • · • · ··· ·· ·· ····
  52. 53. Farmaceutický prostředek podle nároku 52 vyznačující se tím, že jednotka jeho dávky obsahuje 10 až 200 mg sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli.
  53. 54. Farmaceutický prostředek pro stimulaci tvorby růstového hormonu hypofýzou vyznačující se tím, že obsahuje jako účinnou složku sloučeninu obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodnou sůl s farmaceuticky vhodným nosičem nebo ředidlem.
  54. 55. Způsob stimulace tvorby růstového hormonu hypofýzou vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který to potřebuje, účinného množství sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodné soli.
  55. 56. Způsob zvýšení rychlosti a zvětšní stupně růstu, produkce mléka a vlny nebo léčení chorob vyznačující se tím, že zahrnuje podávání subjektu, který to potřebuje, účinného množství sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodné soli.
  56. 57. Způsob podle nároku 55 nebo 56 vyznačuj lei se tím, ž e účinné množství sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky vhodné soli nebo jejího esteru je 0,0001 až 100 mg/kg tělesné váhy a den, s výhodou 0,001 až 50 mg/kg tělesné váhy a den.
  57. 58. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodné soli pro přípravu léčiva.
  58. 59. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodné soli pro přípravu léčiva pro stimulaci tvorby růstového hormonu hypofýzou.
  59. 60. Použití sloučeniny obecného vzorce I podle kteréhokoliv nároku 1 až 51 nebo její farmaceuticky vhodné soli pro přípravu léčiva pro podávání zvířatům pro zvýšení rychlosti a zvětšní stupně růstu, produkce mléka a vlny nebo pro léčení chorob.
CZ972381A 1995-01-27 1996-01-26 Growth hormone formation stimulating compounds CZ238197A3 (en)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DK9995 1995-01-27
DK10095 1995-01-27
DK108395 1995-09-28
DK108495 1995-09-28
DK137295 1995-12-04
PCT/DK1996/000045 WO1996022997A1 (en) 1995-01-27 1996-01-26 Compounds with growth hormone releasing properties

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ238197A3 true CZ238197A3 (en) 1997-12-17

Family

ID=27512745

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ972381A CZ238197A3 (en) 1995-01-27 1996-01-26 Growth hormone formation stimulating compounds

Country Status (20)

Country Link
US (2) US6013658A (cs)
EP (1) EP0805816B1 (cs)
JP (1) JP4073952B2 (cs)
CN (1) CN1225471C (cs)
AR (1) AR003108A1 (cs)
AT (1) ATE272069T1 (cs)
AU (1) AU705744B2 (cs)
CA (1) CA2211381C (cs)
CZ (1) CZ238197A3 (cs)
DE (1) DE69633003T2 (cs)
HU (1) HUP9702388A3 (cs)
ID (1) ID18218A (cs)
IL (1) IL116923A (cs)
MX (1) MX9705710A (cs)
MY (1) MY113488A (cs)
NO (1) NO973446L (cs)
PL (1) PL186511B1 (cs)
TW (1) TW482767B (cs)
UA (1) UA55381C2 (cs)
WO (1) WO1996022997A1 (cs)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5798337A (en) * 1994-11-16 1998-08-25 Genentech, Inc. Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
US20020111461A1 (en) 1999-05-21 2002-08-15 Todd C. Somers Low molecular weight peptidomimetic growth hormone secretagogues
ID18218A (id) * 1995-01-27 1998-03-19 Novo Nordisk As Senyawa dengan sifat-sifat pelepas hormon pertumbuhan
CZ195098A3 (cs) * 1995-12-22 1998-10-14 Novo Nordisk A/S Sloučeniny uvolňující růstový hormon
TW432073B (en) 1995-12-28 2001-05-01 Pfizer Pyrazolopyridine compounds
US6451970B1 (en) 1996-02-21 2002-09-17 Novo Nordisk A/S Peptide derivatives
US5922770A (en) * 1996-07-22 1999-07-13 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
EP1005484A1 (en) 1997-06-20 2000-06-07 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US6127341A (en) * 1997-06-20 2000-10-03 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
HUP0100777A3 (en) 1998-01-16 2001-12-28 Novo Nordisk As Tripeptides with growth hormone releasing properties, pharmaceutical compositions comprising thereof and their use
US6506782B1 (en) 1998-02-27 2003-01-14 Athena Neurosciences, Inc. Heterocyclic compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
US6919315B1 (en) 1998-06-30 2005-07-19 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US6380184B1 (en) 1998-10-28 2002-04-30 Bristol-Myers Squibb Co. Benzoazepines and analogs thereof useful as growth hormone secretagogues
EP1126833A4 (en) * 1998-10-29 2004-09-08 Trega Biosciences Inc OXADIAZOLE, THIADIAZOLE AND TRIAZOLE DERIVATIVES AND COMBINATORIAL LIBRARIES CONTAINING THESE DERIVATIVES
JP2002542151A (ja) 1999-02-18 2002-12-10 科研製薬株式会社 成長ホルモン分泌促進物質としての新規なアミド誘導体
US6525203B1 (en) 1999-03-12 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic aromatic compounds useful as growth hormone secretagogues
US6518292B1 (en) 1999-03-12 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Co. Heterocyclic aromatic compounds usefuls as growth hormone secretagogues
DE60124080T2 (de) * 2000-03-23 2007-03-01 Elan Pharmaceuticals, Inc., San Francisco Verbindungen und verfahren zur behandlung der alzheimerschen krankheit
US6992081B2 (en) 2000-03-23 2006-01-31 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds to treat Alzheimer's disease
ATE310728T1 (de) 2000-05-11 2005-12-15 Bristol Myers Squibb Co Tetrahydroisochinolin-analoga als wachstumshormon-sekretagoga
DE60140285D1 (de) 2000-05-31 2009-12-10 Pfizer Prod Inc Verwendung von Wachstumshormonsekretagoga zur Förderung der Beweglichkeit des Verdauungstrakts
US6846813B2 (en) * 2000-06-30 2005-01-25 Pharmacia & Upjohn Company Compounds to treat alzheimer's disease
PE20020276A1 (es) 2000-06-30 2002-04-06 Elan Pharm Inc COMPUESTOS DE AMINA SUSTITUIDA COMO INHIBIDORES DE ß-SECRETASA PARA EL TRATAMIENTO DE ALZHEIMER
JP2004502664A (ja) * 2000-06-30 2004-01-29 イーラン　ファーマスーティカルズ、インコーポレイテッド アルツハイマー病処置用化合物
EP1666452A2 (en) 2000-06-30 2006-06-07 Elan Pharmaceuticals, Inc. Compounds to treat Alzheimer's disease
US20030096864A1 (en) * 2000-06-30 2003-05-22 Fang Lawrence Y. Compounds to treat alzheimer's disease
BR0210721A (pt) * 2001-06-27 2004-07-20 Elan Pharm Inc Composto, sal ou éster farmaceuticamente aceitável, método para fabricar um composto, e, método para tratar um paciente que tem, ou para evitar que o paciente adquira uma doença ou condição
US20070213407A1 (en) * 2001-06-29 2007-09-13 Elan Pharmaceuticals And Pharmacia & Upjohn Company Llc Compounds to treat Alzheimer's disease
WO2003041641A2 (en) 2001-11-09 2003-05-22 Bristol-Myers Squibb Company Tetrahydroisoquinoline analogs as modulators of chemokine receptor activity
EP1483283A4 (en) 2002-03-13 2007-04-11 Signum Biosciences Inc MODULATION OF PROTEIN METHYLATION AND PHOSPHOPROTEIN PHOSPHATE
MY139563A (en) * 2002-09-04 2009-10-30 Bristol Myers Squibb Co Heterocyclic aromatic compounds useful as growth hormone secretagogues
US7476653B2 (en) 2003-06-18 2009-01-13 Tranzyme Pharma, Inc. Macrocyclic modulators of the ghrelin receptor
WO2005027913A1 (en) * 2003-09-19 2005-03-31 Pfizer Products Inc. Pharmaceutical compositions and methods comprising combinations of 2-alkylidene-19-nor-vitamin d derivatives and a growth hormone secretagogue
AU2005224091B2 (en) * 2004-03-15 2012-02-02 Janssen Pharmaceutica, N.V. Novel compounds as opioid receptor modulators
AU2012202459B2 (en) * 2004-03-15 2014-06-12 Janssen Pharmaceutica, N.V. Novel compounds as opioid receptor modulators
AU2013205089B2 (en) * 2004-03-15 2013-12-19 Janssen Pharmaceutica, N.V. Novel compounds as opioid receptor modulators
US20090149512A1 (en) * 2004-05-14 2009-06-11 Novo Nordisk A/S Use of Ghrelin Antagonists to the Treatment of Certain CNS Diseases
WO2006023608A2 (en) 2004-08-18 2006-03-02 Elixir Pharmaceuticals, Inc. Growth-hormone secretagogues
CA2601777A1 (en) * 2005-02-03 2006-08-10 Signum Biosciences, Inc. Compositions and methods for enhancing cognitive function
US7923041B2 (en) 2005-02-03 2011-04-12 Signum Biosciences, Inc. Compositions and methods for enhancing cognitive function
AU2006223482A1 (en) * 2005-03-14 2006-09-21 Janssen Pharmaceutica, N.V. Process for the preparation of opioid modulators
CU23558A1 (es) 2006-02-28 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Compuestos análogos a los secretagogos peptidicos de la hormona de crecimiento
CN101657436A (zh) 2007-02-09 2010-02-24 特兰齐姆制药公司 大环生长素释放肽受体调节剂及其使用方法
AU2009239430B2 (en) 2008-04-21 2015-01-22 Signum Biosciences, Inc. Compounds, compositions and methods for making the same
WO2013190520A2 (en) 2012-06-22 2013-12-27 The General Hospital Corporation Gh-releasing agents in the treatment of vascular stenosis and associated conditions
AU2013336582A1 (en) 2012-10-26 2015-06-11 Nlife Therapeutics, S.L. Compositions and methods for selective delivery of oligonucleotide molecules to cell types
US9675587B2 (en) 2013-03-14 2017-06-13 Allergan Holdings Unlimited Company Opioid receptor modulator dosage formulations
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
EP3116503A4 (en) * 2014-03-14 2017-08-23 Aerpio Therapeutics, Inc. Hptp-beta inhibitors
WO2017075535A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions
WO2018047139A1 (en) * 2016-09-12 2018-03-15 Aurigene Discovery Technologies Limited Compounds as modulators of tigit signalling pathway
CN113874361B (zh) * 2019-03-29 2024-07-12 医药生命融合研究团 具有抗癌活性的化合物及其制备方法
WO2021086904A1 (en) 2019-10-29 2021-05-06 Aerpio Pharmaceuticals, Inc. Small molecule activators of tie-2

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1995017423A1 (en) * 1993-12-23 1995-06-29 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
US5618792A (en) * 1994-11-21 1997-04-08 Cortech, Inc. Substituted heterocyclic compounds useful as inhibitors of (serine proteases) human neutrophil elastase
ID18218A (id) 1995-01-27 1998-03-19 Novo Nordisk As Senyawa dengan sifat-sifat pelepas hormon pertumbuhan
US5559128A (en) * 1995-04-18 1996-09-24 Merck & Co., Inc. 3-substituted piperidines promote release of growth hormone
CZ195098A3 (cs) 1995-12-22 1998-10-14 Novo Nordisk A/S Sloučeniny uvolňující růstový hormon
US5804578A (en) * 1996-04-03 1998-09-08 Merck & Co., Inc. Piperidines, pyrrolidines and hexahydro-1H-azepines promote release of growth hormone

Also Published As

Publication number Publication date
ATE272069T1 (de) 2004-08-15
DE69633003D1 (de) 2004-09-02
US6013658A (en) 2000-01-11
HUP9702388A3 (en) 1999-01-28
US6350767B1 (en) 2002-02-26
EP0805816B1 (en) 2004-07-28
CN1176645A (zh) 1998-03-18
AU705744B2 (en) 1999-06-03
CN1225471C (zh) 2005-11-02
MY113488A (en) 2002-03-30
EP0805816A1 (en) 1997-11-12
PL321590A1 (en) 1997-12-08
ID18218A (id) 1998-03-19
JP4073952B2 (ja) 2008-04-09
NO973446D0 (no) 1997-07-25
TW482767B (en) 2002-04-11
HUP9702388A2 (hu) 1998-04-28
NO973446L (no) 1997-09-26
AR003108A1 (es) 1998-07-08
WO1996022997A1 (en) 1996-08-01
PL186511B1 (pl) 2004-01-30
IL116923A (en) 2000-09-28
DE69633003T2 (de) 2005-08-18
CA2211381C (en) 2009-05-19
JPH11500107A (ja) 1999-01-06
CA2211381A1 (en) 1996-08-01
UA55381C2 (uk) 2003-04-15
AU4431596A (en) 1996-08-14
MX9705710A (es) 1997-10-31
IL116923A0 (en) 1996-05-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ238197A3 (en) Growth hormone formation stimulating compounds
JP4130519B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
ES2331102T3 (es) Compuestos con propiedades de liberacion de la hormona del crecimiento.
ES2231279T3 (es) Compuesto con propiedades de liberacion de la hormona del crecimiento.
AU722421B2 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
US6127341A (en) Compounds with growth hormone releasing properties
EP1005484A1 (en) Compounds with growth hormone releasing properties
CA2334315C (en) Compounds with growth hormone releasing properties
KR20010106444A (ko) 알파-케토 헤테로사이클을 포함하는 세린 프로테아제 억제제
US6426354B1 (en) Certain heteroaryl substituted thiol inhibitors of endothelin-converting enzyme
KR100450500B1 (ko) 성장호르몬 방출 성질을 가지는화합물
JP3007613B2 (ja) 成長ホルモン放出特性を有する化合物
ES2361606T3 (es) Composiciones con propiedades de liberación de hormonas del crecimiento.
MXPA00010585A (en) Compounds with growth hormone releasing properties

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic