CZ266893A3

CZ266893A3 - Novel preparations for x-ray blood check agent nano particles employing surface-active substances of high molecular mass

Info

Publication number: CZ266893A3
Application number: CZ932668A
Authority: CZ
Inventors: George C Na; Natarajan Rajagopalan
Original assignee: Sterling Winthrop Inc
Priority date: 1992-12-17
Filing date: 1993-12-07
Publication date: 1994-08-17
Also published as: NO934425L; NO934425D0; FI935396A0; NZ248727A; CA2107165A1; AU664115B2; PH30158A; SK142793A3; US5326552A; KR940013544A; MY109875A; US5447710A; AU4867293A; MX9306012A; IL107875A0; FI935396A7; HUT67265A; EP0602700A2; EP0602700A3; JPH06192131A

Description

Oblast techniky

Předložený vynález se týká rentgenových zobrazujjcích přípravků s adsorbovanou povrchově aktivní látkou, a způsobu jejich výroby a použití.

Dosavadní stav, techniky

Zobrazování rentgenovými paprsky je dobře známo a je zvláště cenné pro včasnou detekci a diagnosu různých chorobných stavů v lidském těle. Použití kontrastních činidel pro lepší zobrazení v medicinálních postupech rentgenového zobrazení je známé a používané, Vynikajíaí přehled kontrastních činidel a medií v medicinálním zobrazení je poskytnut v pnáci D.P. Swansona a spol., Pharmaceuticals in -^edicinal ímaging, 1990, Mac^illan Publishing Company.

Stcučně vyjádřeno, v rentgenovém zobrazování je tramnsraitované záření použito pro získání radiografu založeného na zeslabovacích charakteristikách všech tkání. Rentgenové paprsky procházejí různými tkáněmi a jsou zeslabovány rozptylem, tj. odrazem nebo lomem nebo absorpcí energie, ^icméně určité tělesné orgány, cévy a anatomická“místa vykazují tak malou absorpci rentgenových paprsků, že je jen velmi obtížné získat radiograf těchto tělesných orgánů. Pro překonání tohoto problému rentgenologocé rutinně zavádějí do těchto tělesných orgánů, cév a míst těla medium, absorbující rentgenové paprsky, obsahující kontrastní činidlo.

Maximální zesílení majoritních krevních cév se dosáhne během kinetiky tzv. vaskulární fáze kontrastního media, která se projevuje v asi prvních dvou minutách po intravaskulární infuzi nebo injekci bolusu kontrastního

-2media. K tomu dochází proto, že koncentrace intravaskulárního kontrastního media v plasmě se rychle snižuje v důsledku vaskulárního promísení, transkapilární difuse media a oběhu do intersticiálních prostor a renální exkreci. Následkem toho zobrazení krevních cév musí být provedeno v úzkém časovém rozpětí, typicky během několika málo minut po infuzi nebo injekci rentgenového kontrastního činidla.

Bylo by žádoucí poskytnout zlepšené rentgenové kontrastní přípravky pro zobrazení cév, anatomických míst a tělesných orgánů jako jsou játra a slezina. Navíc by bylo velmi žádoucí poskytnout intravcnozně podávané rentgenové kontrastní přípravky, které demonstrují účinné zobrazení krevního řečiště po prodlouženou dobu.

Povrchově modifikované krystalické nanočástice ve vodě nerozpustných rentgenových kontrastních činidel poskytují zobrazení neobyčejné jasnosti a mohou být formulovány pro zesílené doručení do specifické tkáně nebo kapalných míst, např. krve, jater, ledvin,kostní dřeně, lymfatických uzlin a sleziny. ⁿavíc jsou-li preferovaná rentgenová kontrastní činidla podávána intravenozně, poskytují účinné zobrazení krevního poolu ve vaskulárním systému po výrazné delší časová období.

Nanočástice byly poprvé popsány v US patentu č. 5145684. Tyto částice tvoří krystalické léčivá substance, mající na povrchu adsorbovaný modifikátor povrchu tak, že průměrná velikost částic je menší než asi 400 nm.

Činidla, obsahující jod v nanočásticové formě disper govaná pouze v povrchově aktivním činidle Tetronic jako je T-908, jak bude definován dále, mohou zůstávat v krvi hodiny a poskytují bezpečné výsledky zobrazení.

-3Nicméně za účelem dosažení autoklávové sterilizace je často vyžadováno aniontové povrchově aktivní činidlo jako je dioktylsulfosukcinát (DOSS) nebo aniontový fosfolipid jako je dimyristo.ylf oafatidylglycerol (DMPG). Avšak náboje poskytnuté iontovou povrchově aktivní látkou/fosfolipidem vedou k rychlejšímu vyloučení léčivé substance a špatným výsledkům zobrazení.

Doba zdržení v krvi je u intravenosně injektovaných nanočástic nepřímo úměrná zeta potenciálu nanodisperze. Nanočástice se silným zeta potenciálem mají sklon být odstraněny z krve dříve, pravděpodobně retikuloendotheliálním systémem (RES).

Pro překonání tohoto nábojového účinku byly testovány zeta potenciály nanočástic dispergovaných s různými povrchově aktivními látkami ze řady Tetronic. Je nutno uvést, že zeta potenciály nanočástic dispergovaných s řadou povrchově aktivních látek Tetronic, jak jsou zde definovány, za přítomnosti DOS 3 nebo DMPG jsou nepřímo úměrné molekulové hmotnosti povrchově aktivní látky tj. povrchově aktivní látky vyšší molekulové hmot-^f' nosti vykazují nižší (absolutní hodnotu) zeta potenciály a tak větší schopnost maskovat náboje na částici.

Ty to'výsledky vedou k nápadu- použít povrchově aktivní látky o vyšší molekulové hmotnosti pro překonání účinků náboje dodaného iontovými druhy látek, přítomnými v přípravku. Při testu s ethyl-3,5-diacetoamido-2,4,6 trijodbenzoátem, T-1508- povrchově aktivní látkou s nejvyšší molekulovou hmotností v řadě Tetronic, mají nejnižší zeta potenciál nanočástice za přítomnosti buů DOSS nebo BMPG.

-4Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká přípravku, obsahujícího nanočástice, obsahující rentgenovou diagnostickou sloučeninu, mající na svém povrchu absorbovanou povrchově aktivní látku s vysokou molekulární hmotností jako modifikátor povrchu a s ní spojený modifikátor bodu zákalu

V dalším aspektu vynález poskytuje způsob přípravy nanočástic, obsahujících rentgenovou diagnostickou sloučeninu, majících na svém povrchu jako modifikátor povrchu adsorbovanou povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností a připojený modifikátor bodu zákalu, vyznačující se stupni

i) uvedení částic, obsahujících rentgenovou diagnostickou sloučeninu do kontaktu s uvedenou povrchově aktivní látkou s vysokou molekulovou hmotností na dobu a za podmínek, dostačujících ke vzniku nanočásti ce s modifikátorem povrchu adsorbovaným na jejím povrchu a ii) kontakt uvedené nanočástice s modifikátorem Dovrchu adsorbovaným na jejím povrchu s uvedeným modifikátorem bodu zákalu po dobu a za podmínek dostačujících ke tvorhě nanočástice, obsahující rentgenovou diagnostickou sloučeninu, mající na svém povrchu adsorbovanou povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností jako modifikátor povrchu a s ní spojený modifikátor bodu zákalu.

V jiném provedení tohoto vynálezu je poskytnut způsob přípravy nanočástic?, obsahujících rentgenovou diagnostickou sloučeninu, majících neiontovou povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností, například poloxaminovou PAL, mající molekulovou hmotnost asi alespoň 30000, jako modifikátor povrchu adsorbovaný na svém povrchu, zahrnující kontakt nanočástice, obsahující rentgenovou diagnostickou sloučeninu s ' 5 povrchově aktivní neiontovou látkou s vysokou molekulovou hmotností po dobu a za podmínek, dostačujících ke vzniku nanočástice s modifikátorem povrchu adsorbovaným na jejím povrchu.

Zde se také popisuje způsob diagnostického zobrazení pro použití v lékařských postupech, zahrnující dodání do těla testovaného subjektu, v případě nutnosti rentgenování, účinného, konstrast produkujícího množství přípravku obsahujícího nanočástice, který obsahuje rentgenovou diagnostickou sloučeninu, mající na svém povrchu adsorbovanou povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností a s ní spojený modifikátor bodu zákalu.

Rentgenový kontrastní přípravek podle vynálezu obsahuje částice rentgenového konstrastního činidla, majícího na svém povrchu adsorobovanou povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností, výhodně v množství dostačujícím k udržení účinné průměrné velikosti částice menší než 400 nm a s ní spojený modifikátor bodu zákalu.

Rentgenové kontrastní činidlo použitelné v praktickém provedení vynálezu je neradioaktivní a existuje jako diskrétní, krystalická fáze organické substance. Krystalická fáze se liší od amorfní nebo nekrystalické fáze, která vzniká technikami srážení rozpouštědly jak je popsány v US patentu č. 4 826 689. Organická substance může být přítomna v jedné nebo více krystalických fázích. Vynález může být uskutečněn ' v praxi s mnoha krystalickými, neradioaktivními rentgenovými konstrastními činidly. Rentgenové kontrastní činidlo však musí být špatně rozpustné a dispergovatelné alespoň v jednom kapalném mediu. Fráze špatně rozpustný jak je zde použita, znamená, že činidlo má rozpustnost v kapalném dispergačním rc

-6mediu, např. ve vodě, menší než asi 10 mg/ml a výhodně menší než asi 1 mg/ml. Preferovaným kapalným dispergačním mediem je voda. Dále může být vynález proveden s jiným kacalným mediem, ve kterém je rentgenové kontrastní činidlo špatně rozpzstné a dispergovatelné, zahrnujícím například vodné solné roztoky jako je fosforečnanem· pufrovaný solný roztok (P3S), plasma, směsné vodné a nevodné roztoky, například voda a alkohol a vhodná nevodná rozpouštědla jako je alkohol, gl.ycerol a podobně.

Diagnostická činidla použitelná v přípravcích podle předloženého vynálezu zahrnují ta, která jsou popsána v US patentu č. 5145684 a v popise zveřejněné evropské patentové přihlášky EP-A-0498492. Výhodným diagnostickým činidlem je rentgenové zobrazovací činidlo ethyl-3,5-diacetoamido-2,4,6-trijodbenzoát.

Částice použitelné v provedení předloženého vynálezu obsahují modifikátor povrchu. Použité povrchové modifikátory jsou fyzikálně adherovány k povrchu rentgenového kontrastního činidla, ale nereagují chemicky s činidlem nebo vzájemně mezi sebou. Individuálně adsorbované molekuly povrchového modifikátoru jsou v podstatě prosté intermolekulárního zesítění. Použitý výraz povrchově akťlvní^látka s vysokou molekulovou hmotností označuje jakékoliv povrchově aktivní látky s molekulovou hmotností nad 4000. Preferované modifikátory p_evrchu s Tvaokou molekulovou hmotností (povrchově aktivní látky) jsou neionogenní s polyethylenovým řetězceaóřetězci) jako hydrofilním segmentem. Zvláště preferované povrchově aktivní látky obsahují jeden nebo více polyethylenglykolových (PEG) řetězců, tvořících, hydrofilní segment molekuly s molekulovou hmotností nad 4000 u PEG řetězce. Hydrofobním segmentem povrchově aktivní látky může být alkylová, ac.ylová, alkylfenolová, polypropylenoxidová nebo

-7diacylfosfatidylová skupina. Povrchově aktivní látky s polyprop.ylenoxidovým segmentem zahrnují poloxaminy jako je Tetronic T-908 a 'íetronic T—1508 (také známé jako poloxamin 908 a poloxamin 1508), které jsou tetrafur.kčními blokovými kopolymery odvozenými z postupného přidávání propylenoxidu a eth.ylenoxidu k eth.ylendiarainu, dostupné od 3ASF. Pov.uhově aktivní látky s alkylfenolovou skupinou jako h.ydrofobea zahrnují ICONOIS“^ NP-50, NP-70,

NP-100, OP-10, OP-30 a OP-40 dostupné od BASF. Povrchově aktivní látky s fosfatidylovou skupinou jako hyórofobem zahrnují dipalmitylfosfatid.yiethanolaminopolyethylenoxid-5000 dostupný od Avanti. Preferované povrchově aktivní látky mají molekulovou hmotnost nad 4000, výhodně nad 5000, výhodněji nad 20000 a zejména nad asi 30000. Například preferované povrchově aktivní látky mohou obsahovat jeden nebo více polyethylenoxidových řetězců, majících molekulovou hmotnost nad 4000, nejvýhoóněji nad asi 30000. Preferované modifikátory povrchu mohou být vybrány ze zámých neiontových povrchově aktivních látek, zahrnujících poloxaminy jako je T-908 nebo zejména T-15Q8.

Modifikátory povrchu jsou obchodně dostupné a/nebo mohou být připraveny technikami zrámými v oboru. Je možné použít kombinaci dvou nebo více povrchových modifikátorů.

Rentgenové kontrastní přípravky podle předloženého vynálezu obsahují výše popsané částice a jejich nosič. Například mohou být částice dispergovány ve vodné kapalině, která slouží jako nosič rentgenového kontrastního činidla. Jiné vhodné nosiče zahrnují kapalné nosiče jako jsou směsi vodných a nevodných rozpouštědel, například voda a alkoholy, a vhodná nevodná rozpouštědla, jako jsou alkoholy; gely; plyn^ jako je vzduch a prášky. Rentgenový kontrastní přípravek může obsahovat asi 1-99,9 %, výhodně 2-45 % a výhodněji 10-25 % hmotnostních výše popsaných částic· a zbytek přípravku tvoří nosič, přísady a

-8podobně. Přípravky s až asi 100 % hmotnostními částic jsou rovněž zahrnuty,jestliže jp přípravek v lyofilizované formě.

Nanočástice vhodné v praktickém provedení tohoto vynálezu mohou být připraveny podle metod popsaných v US patentu č. 5145684. Obecně je postup přípravy částic podle vynálezu následující. Diagnostické činidlo, které je vybráno, se získá obchodně a/nebo se připraví technikami známými v oboru jak bylo popsáno dříve, v konvenční hrubé formě. Je výhodné, ale ne podstatné, aby velikost částic hrubé diagnostické substance, která byla zvolena, byla menší než asi 100 /um stanoveno sítovou analýzou. Je-li velikost hrubých částic činidla větší než asi 100 ^um, je potom výhodné, aby byla zmenšena velikost hrubých částic diagnostického činidla na méně než 100 /um za použití obvyklých mlecích metod jako je vzduchová tryska nebo fragmentační mletí.

Zvolené hrubé diagnostické činidlo může být pak přidáno ke kapalnému mediu, ve kterém je v podstatě nerozpustné, za vzniku premixu. Koncentrace diagnostického činidla se může měnit od asi 0,1 do 60 % a výhodně je oď 5 do 30 % (hmotn./hmotn.). Je výhodné, ale ne podstatné, že modifi.kátpr poyrchu je přítomen v premixu. Koncentrace modifikátoru povrchu se může měnit od asi 0,1 do 90 & a výhodně je 1 až 75 %, výhodněji 10 až 60 % a nejvýhodněji 10 až 30 % hmotnostních vztaženo na celkovou spojenou hmotnost léfcové subsstance a modifikátoru povrchu. Zjevná viskozita premixavé suspenze je výhodně menší než asi 1000 centipoise.

Premix může být noužit přímo mokrým mletím pro snížení průměrné velikosti částic v disperzi na méně než 400 nm. Je výhodné, že premix se použije přímo, jestliže se pro otěr použije kulový mlýn. Alternativně mohou být diagnostické činidlo a popřípadě modifikátor povrchu, disper-9govény v kapalném mediu za použití vhodného míchání, např. válcového mlýna nebo mixéru typu Cowler, až do zjištění homogenní disperze, ve které již nejsou oouhým okem viditelné žádné velké aglomeráty. Je výhodné, když se premix podrobí takovému stupni předemletí disperze, jestliže se pro otěr použije mlýn s recirkulujícím mediem.

Mokré mletí může být orovedeno v jakémkoliv vhodném disperzním mlýnu, zahrnujícím například kulový mlýn, otěrový mlýn, vibrační mlýn a mediové mlýny, jako je pískový mlýn a kuličkový mlýn. Mediový mlýn je preferován díky relativně kratší době mletí potřebné pro dosažení zamýšleného výsledku, tj. požadovaného snížení velikosti částic. ^ťro mlecí media je výhodně zdánlivá viskózita premixu výhodně od asi 100 do asi 1000 centipoise. U kulového mletí je zdánlivá viskózita premixu výhodně od asi 1 do asi 100 centipoise. Taková rozmezí mají tendenci dosáhnout optimální rovnováhy mezi účinnou fragmentací a erozí media.

^lecí media pro stupen snížení velikosti částic mo-*hou být vybrána z tuhých medií, výhodně kulového nebo částicového tvaru, majících průměrnou velikost menší než asi 3 mm, výhodněji menší než asi 1 mm. Taková media mohou poskytovat^..částice podle vynálezu s kratšími dobami zpracování a poskytovat menší opotřebení u mlecího zařízení. Výběr materiálu pro mlecí medium není považován za podstatný. Nicméně mají preferovaná media hustotu větší než asi 3 g/cm\ Oxid zirkonatý, jako je S5% ZrO stabilizovaný oxidem· hořečnatým, silikátem zirkonu a skleněným mlecím mediem poskytuje částice, mající hladiny kontaminace, které jsou považovány za přijatelné pro přípravu diagnostických přípravků. Je však možno použít i jiné medium, jako je nerezová ocel, oxid titaničitý, oxid hlinitý a 95%

-10ZrO stabilizovaný yttriem.

Doba otěru se může měnit v širokém rozsahu a závisí zejména na konkrétním zvoleném mletí. U kulových mlýnů může být vyžadována doba zpracování až do pěti dnů nebo delší. Na druhé straně doby zoracování menší než jeden den (doba zdržení asi jedna minuta až několik hodin) poskytují požadované výsledky z použitím mediových mlýnů s vysokým střihem.

Velikost částic musí být snížena při teplotě, která významně nedegraduje diagnostické činidlo. Teploty zpracování menší než asi 3^υ až 40 °0 jsou obvykle preferovány. Je-li to žádoucí, může být zpracovací zařízení chlazeno obvyklým chladícím zařízením. Způsob se obvykle provádí za podmínek teploty okolí a za zpracovacích tlaků, které jsou bezpečné a účinné pro mlecí proces. Například zpracovévací tlaky rovné tlakům okolí jsou typické pro kulové mlýny, otěrové mlýny a vibrační mlýny. Tlaky při zpracování až do asi 140 kPa jsou typické pro mediové mlýny.

Modifikátor povrchu a modifikátor bodu zákalu, pokud nejsou přítomny v premixu, mohou být přidány k disperzi po otěru v množství jak je popsáno u premixu·. Potom může být disperze promísena, např. intenzivním třepáním. Popřípadě může být disperze podrobena stupni zpracování ultrazvukem např. za použití zdroje ultrazvuku. Například může být disperze podrobena ultrazvukové energii, mající frekvenci 20 až 80 kHz po dobu asi 1 až 120 sekund'.

Relativní množství diagnostického činidla a modifikátoru povrchu se může široce měnit a optimální množství modifikátoru povrchu může záviset například na jednotlivém diagnostickém činidle a modifikátoru povrchu, které byly

-1 1vybrény, kritické micellové koncentraci modifikátoru povrchu, je-li ve formě micel, hydrofilně lipofilní rovnováze (HLB) stabilizátoru, teplotě tání stabilizátoru, jeho rozpustnosti ve vodě, povrchovém napětí vodného roztoku stabilizátoru atd. modifikátor povrchu je výhodně přítomen v množství asi 0,1 až 10 mg/m plochv povrchu diagnostického činidla.

Velikost částic označuje zde průměrnou velikost částic měřenou obvyklými technikami pro měření velikosti částic- dobře známými v oboru, jako je průtoková frakční sedimentace, fotonová korelační spektroskopie nebo diskové odstředění. Fráze (účinná průměrná velikost částic, menší než asi 400 nm znamená, že alespoň 90 % částic má velikost částic menší než asi 400 nm měřeno výše uvedenými technikami. Ve výhodných provedeních vynálezu je účinná průměrná velikost částic menší než asi 300 nm a výhodněji menší než asi 250 nm. V některých provedeních vynálezu bylo dosaženo účinné průměrní velikosti částic· menší než asi 200 nm. Pokud jde o účinnou průměrnou velikost částic je preferováno, že alespoň 95 % a výhodněji alespoň 99 % částic: má velikost částic menší než je účinnýfcrůměr, např. 400 nm. Ve výhodných provedeních, v podstatě všechny částice mají velikost menší než 400 nm. V některých provedeních v podstatě všechny částice mají velikost menší-než-250-nm.

Způsob přípravy nanočósticového přípravku podle vynálezu zahrnuje stupně zavedení diagnostického činidla, kapalného media, mlecího media a popřípadě a modifikátoru povrchu do mlecí nádoby; mokré mletí pro snížení velikosti částic diagnostického činidla na méně než asi 400 nm; a oddělení částic a popřípadě kapalného media z mlecí nádoby a od mlecího media, například sáním, filtrací nebo odpařením. Jestliže modifikátor povrchu není přítomen během mokrého mletí, může být smísen s částicemi po tomto mletí. Kapalné medium, nejčastěji voda, může sloužit

-12jako farmaceuticky přijatelný nosič. Zp°:sob se výhodně pro· vádí za aseptických podmínek. Potom se nanočásticový přípravek výhodně podrobí sterilizačnímu zpracování.

Sterilizace se může provádět za přítomnosti aniontových povrchově aktivní látek jako je BOSS nebo aniontových fosfolipidů jako je BMPG.

Bod zákalu je teplota, při které se modifikátor povrchu (povrchově aktivní látka) sráží z roztoku jak bylo popsáno výše. Aniontové povrchově aktivní látky a aniontové fosfolipidy působí jako modifikátorv bodu zákalu. Použitá fráze modifikátor bodu zákalu označuje sloučeninu, která ovlivňuje bod zákalu modifikátoru povrchu. Bejména modifikátory bodu zákalu použité v předloženém vynálezu zvyšují bod zákalu modifikátoru povrchu adsorbovaného na nanočásticích. Tímto způsoben se modifikátory povrchu nedisociují z povrchu nanočástic při teplotách použitých při autoklávování. Takto modifikované částice neaglomerují během sterilizačního postupu a tak si udržují svoji průměrnou účinnou velikost-částic menší než asi 400 nm po sterilizaci.

Preferované neiontové modifikátory bodu zákalu zahrnují polyejthylenglykoly, propylenglykol, ethanol a cyklodextrin. Výhodné modifikátory bodu zákalu zahrnují iontové povrchově aktivní látky např. dodecylsulfát sodný, DOSS a cetrimid' a nabité fosfolipidy, např. BMPG, cardiolipin a dimyristoylf oafatidylserini. Modifikát?Eodu zákalu může být přítomen v množství asi 0,01 až 20 %, výhodně 0,05 až 10 % a nejvýhodněji 0,1 až 10

Podávaná dávka kontrastního činidla může být vybrána technikami známými odborníkům tak, že se získá dostačující kontrast zvyšující efekt. Typické dávky mohou být v rozmezí od 50 do 350 mg jodu/kg hmotnosti těla subjektu pro mnoho zobrazovacích aplikací, ^ro některé aplikace, např. lymfografii, mohou být účinné nižší dávky, např.

0,5 až 20 mg I/kg.

Rentgenový kontrastní přípravek může obsahovat jednu nebo více konvenčních přísad použitých pro řízeni a/nebo zesíleni vlastností rentgenového kontrastního činidla. Například mohou být přidána zahušťující činidla jako je dextran nebo lidský sérový albumin, pufry, činidla upravující viskozitu, suspendační činidla, peptizační činidla, protivměstková činidla, směsná činidla a jiná léčiva a podobně. Částečný seznam určitých specifických aditiv zahrnuje gumy, cukry jako je dextran, lidský sérový albumin, želatinu, alginát sodný, agar, dextrin, pektin a natriumkarboxymethylcelulózu. Taková aditiva, povrchové aktivní činidla, ochranné látky a podobně mohou být inkorporovány do přípravků podle vynálezu.

Způsob diagnostického zobrazení pro použití v lékařských postupech zahrnuje podání účinného, kontrast zvyšujícího množství výše popsaného rentgenového kontrastního přípavku do těla subjektu, který potřebuje rentgenovat. Mimo lidských pacientů může testovaný subjekt zahrnovat druhy savců jako jsou králíci, psi, kočky, opice, ovce, prasata, koně, hovězí dobytek a podobně. Potom se alespoň část těla, obsahující podané kontrastní činidlo vystaví rentgenovým paprskům pro získání rentgenového vyobrazení, odpovídajícího přítomnosti konstastního činidla. Zobrazení pak může být vizualizováno. Například mohou být obvyklým způsobem aplikovány jakékoliv rentgenové Vizualizáční techniky, výhodně techniky s vysokým' kontrastem jako je počítačová tomografie. Alternativně může být zobrazení pozorováno přímo kombinaci na rentgenové paprsky citlivé fosforové zobrazovací plochy a fotografického materiálu na bázi halogenidu stříbra.

až 20 mg I/Kg.

Rentgenový kontrastní přípravek může obsahoýat jednuRebo více konvenčních přísad použitých pro řízení a/nebo \esileni vlastností rentgenového kontrastního činidla. Rapříklad mohou být přidána zahušťující činidla jako je dex\tran nebo lidský sérový albumiR, pufry, činidla upravující viskozitu, suspendační Rinidla, peptizační činidla,Xprotivměstková činidla,/směsná činidla a jiná léčiva a podobně, částečný seznán určitých specifických aditiv zahrnuje gumy, cukry/jako je dextran, lidský sérový albumin, želatinu, alginát Rodný, agar, dextrin, pektin a sodnou karooxymethylceli/lozu. Taková aditiva, povrchově aktivní činidla, ochranné látky a podobně mohou být inkorporovány. do přípravků podle vynálezu.

Způsob diagnostickéhRzobrazení nro použití v lékařských postupech podle/předloženého vynálezu zahrnuje podání účinného kontra/t zvyšujícího množství výše popsaného rentgenového/Kontrastního přípravku do těla subjektu, který potřebuje rentgenovat. Mimo lidských pacientů může testovaný/subjekt zahrnovat druhy savci jako jsou králíci, psi, kočky, opice, ovce, prasata, koně, hovězí z * \ dobytek a podouně. Potom se alespoň Rást těla, obsahující podané kontiRstní 'činidlo vystaví- rentgenovým'paprskům pro' získání rentgenového vyobrazení, obpovrdajíčího přítomnosti kontrastního činidla. Zobrazení pak může být vizualizovármo. Například mohou být obvyklým způaobem aplikovány jakékoliv rentgenové vizualizační techniky, výhodně techniky s vysokým kontrastem jako je počítačová tomografie. Alternativně může být zobrazení pozorováno přímek kombinací ría rentgenové paprsky citlivé fosforové zobrazovací plochy / a fotografického materiálu na bázi halogenidu stříbra.

Přípravky podle vynálezu mohou být podávány různými způsoby v závislosti na typu postupu a anatomické orien-14taci zkoumané tkáně. Vhodné způsoby podání zahrnují intravaskulární (arteriální nebo venosní) podání katetrem, intravenoz.ní injekcí, rektální podání, subkutánní podání, intramuskulární podání, intralesionální podání, intrathekální podání, intracisternální podání, orální podání, podání inhalací, podání přímo do tělesné dutiny např. arthrografie a podobně. Navíc k dříve uvedeným aplikacím, tj.

sleziny a lymfatických uzlin, předpokládá se, že rentgenové kontrastní přípravky podle předloženého vynálezu budou také vhodné jako angiografická kontrastní media, urografická kontrastní media, myelografická kontrastní media, gastrointestinální kontrastní media, cholec.ystografická a cholangiografická kontrastní media, arthrografická kontrastní media, hysterosalpingografická kontrastní media, orální kontrastní media a bronchografická kontrastní media.

Vynález bude nyní blíže vysvětlen následujícími příklady, které jej však v žádném případě nikterak neomezují .

Příklady, provedení vynálezu

Příklad 1

3yl Hodnocen vliv/ povrchově aktivních látek Tetronic· s různou molekulovou hmotností na maskování náboje (zetapotenciál) nanočástic, pocházejícího z nabitého fosfolipidu DMPG. Suspenze nanočástic·· obsahují 15 X ethyl3,5-diacetamido-2,4,6-trijodbenzoátu a 0,2 X DMPG. K 0,5 ml suspenze se přidá 0,075 ml 20X zásobního roztoku testované povrchově aktivní látky. Konečná koncentrace povrchově aktivní látky byla 3 %·

-15Povrchově aktivní látka mol.hmotn. zeta potenciál (mV)

žádná	-	-51
T-707	12200	-20
T-908	25000	-18
T-909	30000	-11
T-1107	15000	-25
T-1107	15000	-22
T-1307	18000	-14
T-1508	30000	-6

Příklad 2

3yl hodnocen, vliv povrchově aktivních látek Tetronic s různýmo molekulovými hmotnostmi na maskování náboje (zeta potenciál) nanočástic, pocházejícího z aniontové povrchově aktivní látky DOSS. Suspenze nanočésticobsahují 15 % ethyl-3,5-diacetoamido-2,4,6-trijodbenzoátu a 0,2 % DOSS, K 0,5 ml suspenzi se přidá 0,075 ml 20% zásobního roztoku testované povrchově aktivní látky, ^onečná koncentrace povrchově aktivní látky byla 3 %.

Povrchově aktivnílátka	mol.hmotn.	zeta potenciál
žádná	-	-6
T-707	12200	“0,5 -0,4
T-908	25000	-0,4 -1,4
T-909	30000	-0,6
T-1107	15000	-0,9
T-1307	18000	-0,8
T-1508	30000	0,2

(mV)

-16Příklad 3

Byl hodnocen vliv různých alkylfenolpolyethoxylátových povrchově aktivních látek o různé molekulové hmotnosti na maskování náboje (zeta DOtenciál) nanočástie, pocházejícího z DMPG. Suspenze nanočástie obsahují 15 % ethyi-3,5-diacetamido-2,4,6-trijodbenzoát a 0,2 % DOSS. k 0,5 ml suspenze bylo přidáno 0,075 ml 20% zásobního roztoku testované povrchově aktivní látky. Konečná koncentrace povrchově aktivní látky byla . 3

Povrchově aktivní látka mol.hmotn. zeta potenciál (mV)

OP-1 0	550	-45,81
OP-30	1530	-37,40
OP-40	2000	. -34,93
NP-50	2500	-27,66
NP-70	3300	-25,50

„»cr—·-

Claims

PATENTOVÉ

1. Přípravek obsahující nanočástice, vyznačující se tím, že obsahuje rentgenovou diagnostickou sloučeninu, mající povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností, jako modifikátor povrchu adsorbovaný na svém povrchu a s ní spojený modifikátor bodu zákalu.

2. Přípravek podle nároku 1,vyznačující se t í m, že rentgenovou diagnostickou sloučeninou je ethyl-3,5-diacetoamido-2,4,6-tri jodbenzoát.

3. Přípravek podle nároku 1,vyznačující se t í m, že povrchově aktivní látka s vysokou molekulovou hmotností je neiontová.

4. Přípravek podle nároku 3,vyznačující se t í m, že neiontovou povrchově aktivní látkou je poloxamin.

5. Přípravek podle nároku 4, vyznačující se t i m, že poloxamin je tetrafunkční blokový kopolymer, získaný postupnou adici propylenoxidu a ethylenoxidu k ethylendiaminu.

6. Přípravek podle kteréhokoliv z předcházejích nároků, v y^ z n^a č u j í c í se tím, že povrchově aktivní látka má molekulovou hmotnost alespoň asi 4000.

7. Přípravek podle nároku 6,vyznačující se t í m, že povrchově aktivní látka má molekulovou hmotnost alespoň asi 5000.

8. Přípravek podle nároku 7,vyznačující se t i m, že povrchově aktivní látka má molekulovou hmotnost alespoň asi 20 000.

9. Přípravek podle nároku 8, vyznaču j íc í se t i m, že povrchově aktivní látka má molekulovou hmotnost alespoň asi 30 000.

10. Přípravek podle nároku 1,vyznačující se t í m, že modifikátorem bodu zákalu je fosfolipid.

11. Přípravek podle nároku 10,vyznačující se t í m, že fosfolipidem je dimyristoylfosfatidylglycerol.

12. Přípravek podle nároku 1, vyznačující se t í m, že modifikátorem bodu zákalu je aniontová povrchově aktivní látka.

13. Přípravek podle nároku 1,vyznačující se t í m, že aniontovou povrchově aktivní látkou je dioktylsulfosukcinát.

14. Přípravek podle nároku 1,vyznačující se t í m, že modifikátorem bodu zákalu je vybrán ze skupiny, která zahrnuje polyethylenglykol, propylenglykol, ethanol, cyklodextrin, dodecylsulfát sodný, dioktylsulfosukcinát, cetrimid, dimyristoylfosfatidylglycerol, kardiolipin a dimyristoylfosfatidylserin.

15. Přípravek podle některého z předcházejích nároků, vyznačující se tím, že modifikátor povrchu je přítomen v množství dostačujícím pro udržení účinné průměrné velikosti částic menší než 400 nm.

16. Přípravek podle některého z předcházejích nároků, vyznačující se tím, že dále obsahuje farma19 ceuticky přijatelný nosič.

17. Způsob přípravy nanočástic, obsahujících rentgenovou diagnostickou sloučeninu, vyznačuj ící se t í m, že obsahuje jako modifikátor povrchu povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností, adsorbovanou na svém povrchu a modifikátor bodu zákalu, který je s ní spojen, zahrnující

i) kontakt uvedené nanočástice, obsahující rentgenovou diagnostickou sloučeninu, s povrchově aktivní látkou o vysoké molekulové hmotnosti po dobu a za podmínek dostačujících ke vzniku nanočástic s modifikátorem povrchu adsorbovaným na jejím povrchu a ii) kontakt uvedené nanočástice s modifikátorem povrchu adsorbovaným na jejím povrchu s uvedeným modifikátorem bodu zákalu po dobu a za podmínek, dostačujících ke tvorbě nanočástic, obsahující rentgenovou diagnostickou sloučeninu, mající jako modifikátor povrchu adsorbovanou na svém povrchu povrchově aktivní látku s vysokou molekulovou hmotností a s ní spojený modifikátor bodu zákalu.

18. Způsob podle nároku 17, vy'značuj íc i se t í m, že uvedené nanočástice jsou v přípravku podle kteréhokoliv--z -nároků 2 až 16. _

- - 19. Způsob výroby nanočástic, obsahujících rentgenovou diagnostickou sloučeninu, vyznačující se tím, že tato sloučenina má na svém povrchu adsorbovánu neiontovou poloxaminovou povrchově aktivní látku, která má molekulovou hmotnost alespoň asi 30 000, jako modifikátor povrchu, zahrnující kontakt uvedené nanočástice obsahující rentgenovou diagnostickou sloučeninu, s uvedenou neiontovou poloxaminovou povrchově aktivní látkou po dobu a za podmínek, dostačujících pro vznik nanočástice s modifikátorem povrchu adsorbovaným na svém povrchu.