CZ28099A3 - Transkripční regulační DNA z křeččího EF-1alfa - Google Patents

Transkripční regulační DNA z křeččího EF-1alfa Download PDF

Info

Publication number
CZ28099A3
CZ28099A3 CZ1999280A CZ28099A CZ28099A3 CZ 28099 A3 CZ28099 A3 CZ 28099A3 CZ 1999280 A CZ1999280 A CZ 1999280A CZ 28099 A CZ28099 A CZ 28099A CZ 28099 A3 CZ28099 A3 CZ 28099A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
fluoro
demethoxy
esters
daunorubicinone
fucosyl
Prior art date
Application number
CZ1999280A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ296544B6 (cs
Inventor
Daniel S. Allison
Original Assignee
Icos Corporation
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Icos Corporation filed Critical Icos Corporation
Publication of CZ28099A3 publication Critical patent/CZ28099A3/cs
Publication of CZ296544B6 publication Critical patent/CZ296544B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4702—Regulators; Modulating activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/67—General methods for enhancing the expression
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

8-Fluoranthracykliny, způsoby jejich výroby a farmaceutické přípravky je obsahující
Oblast techniky
Vynález se týká glykosidických derivátů 8-fluoranthracyklinonu obecného vzorce I
kde
R je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a 0R4, kde R4 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího CHO, COCH3 a acylový derivát karboxylové kyseliny s až 6 uhlíkovými atomy,
R, je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
OCH3,
Rj je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
NHZ,
R3 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH, NH, a zbytek vzorce A (A)
kde R5 a R6 jsou stejné nebo různé substituenty, vybrané ze souboru zahrnujícího H, OH a NH2, a symbol (------) znamená, že substituenty R2, Rv R5 a RĚ mohou být v axiální nebo v ekvatoriální konfiguraci, přičemž skupiny 8-F a 9-OH jsou v poloze cis, jejich farmaceuticky přijatelných solí, způsobů jejich výroby a farmaceutických přípravků je obsahujících.
Dosavadní stav techniky
Daunorubicin (daunomicin) a 4-demethoxydaunorubicin (idarubicin) a jejich deriváty obsahující hydroxylovaný postranní řetězec (doxorubicin) jsou glykosidy se známými protinádorovými vlastnostmi; jejich příprava a použití již byly popsány (F. Arcamone, „Doxorubicin: Anticancer Antibiotics, Medicinal Chemistry Series sv. 17, Academic Press 1981) .
8-Fluoranthracykliny jsou skupina anthracyklinů, již známá (viz například EP-A-0436474, EP-A-0457215, WO 95/09173) pro svou vyšší aktivitu a selektivitu vzhledem k odpovídajícím nefluorovaným sloučeninám.
Bylo překvapivě zjištěno, že jestliže substituenty 8-F a 9-OH mají stereochemii cis, jsou odpovídající deriváty překvapivě aktivnější, zejména vzhledem k nádorovým buňkám, rezistentním vůči známým sloučeninám.
Podstata vynálezu
Předmětem vynálezu jsou glykosidické deriváty 8 fluoranthracyklinonu obecného vzorce I
kde
R je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a 0R4, kde R4 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího CHO, COCH3 a acylový derivát karboxylové kyseliny s až 6 uhlíkovými atomy,
R, je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
OCH3,
R2 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
NH2,
Rj je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH, NH2 a zbytek vzorce A
Re Rs (A) kde R5 a R6 3 sou stejné nebo různé substituenty, vybrané ze souboru zahrnujícího H, OH a NH2, a symbol (~-----) znamená, že substituenty R2, R3, R5 a Rc mohou být v axiální nebo v ekvatoriální konfiguraci, přičemž skupiny 8-F a 9-OH jsou v poloze cis, jejich farmaceuticky přijatelné soli, způsoby jejich výroby a farmaceutické přípravky je obsahující.
Konkrétněji se vynález vztahuje na tyto sloučeniny:
1) 4-demethoxy-8 -(R)-fluordaunorubicin (I: R = R3 = H; R2 - NH2 ; R3 = OH)
2) 4 -demethoxy-8-(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-amino- daunorubicin (I: R = RT = R2 = H; R3 = NH2)
3) 4-demethoxy-8 -(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-amino- daunorubicin (I: R _ R, = R2 - H; R3 = NH2)
4) 4-demethoxy-8 -(R)-fluor-4'-epi-daunorubicin (I: R = R3 = H; R, = NH;; R3 - OH)
5) 4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)- daunorubicinon (I: R = R3 = H; R3 = A; R? - R6 = OH; R,, = NH2)
6) 4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)- daunorubicinon (I: R = Rx - H; R3 = A; R; - R, - OH; Rs = NHý
7) 4-demethoxy-8 - (R) - fluor-7 - (2, 3, 4-tndeoxy-4-ammo- esapiranosylfukosyl)-daunorubicinon (I: R = R, = r5 - H; R3 = A;
R, = OH; R6 - NHj)
8) 4-demethoxy-8 - (R) -fluor-7- (2, 3, 4-trideoxy-4-amino- esapiranosylramnosyl)-daunorubicinon (I: R = Rx = r5 = H; R3 = A; R2 = OH; R6 = NHJ 9) 4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-fukosyl)- daunorubicinon (I: R = = H; R3 = A; R2 - R5 = R6 = 0H)
4-demethoxy-8- (R) -fluor-7-fukosyl-4' -O-ramnosyl) daunorubicinon (I: R = Rx = H; R} =A; R2 = R5 = R6 = OH)
11) 8 - (R) -fluordaunorubicin (I: R - Hr R = ooh d _ ™ . Ό ' 1 j * —2 ^“2 r -
OH)
12) 8 (R) fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin (I: R - R, = Π; R, = OCH3; R3 = NHJ 8- -fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin (I: R = R2 = H; R3 = OCH3; R3 = NH2)
14) 8-(R) -fluor-4'-epi-daunorubicin (I: R - H; R, = OCH3; R2 = NH2; R3 = OH)
15) 8-(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)-daunorubicinon (I: R = H; , R, = OCH3; R3 = A; R2 = Re = OH; R5 = NHJ
16) θ-(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)-daunorubicinon (I: R = H; R3 - OCH3; R, = A; R, = R6 = OH; R5 = NH2) θ- (R) -f luor-7- (2 ,3 , 4-trideoxy-4-aminoesapiranosyl fukosyl)-daunorubicinon (I; R = Rs = H; R3 = OCH,; R3 - A; R2 = OH; R6 - NHJ 8~(R)-fluor-7-(2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosylramnosyl) -daunorubicinon (I: R - R5 = H; RT - OCH,; R3 = A; R, = OH; R6 = NH2)
19) 8 -(R) - fluor-7 - (fukosyl-40-fukosyl)-daunorubicinon (I: R = H; R3 - OCH,; R. = A; R2 - Rl? - R_ = OH)
20) 8 (R) fluor 7-fukosyl-4'-O ramnosyl) -daunorubicinon (I: R = H; Rj = OCH3; R3 = A; R2 = R5 = Rc = OH)
21) 4-demethoxy-8-(R)-fluordoxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R - R3 = OH; Rt = H; R2 = NH2) 22) 4-demethoxy-8 -(R)- fluor-3'-deamino-4'-deoxv-4'-ami no- doxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R - OH; R1 = R2 = H; R. = W
23) 4-demethoxy-8-(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-amino- doxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R- OH; R1 = r2 = h; R3 = NHJ
24) 4-demethoxy-8 -(R)-fluor-4'-epi-doxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R = R3 = CH; R, = H; R2 = NH2) 25) 4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl) - doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = r6 = OH; R3 = A; Rj = H; R5 = NH2) 26^ 4-demethoxy-8-(R) -fluor-7-(daunosaminylramnosyl)doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = rg = OH; R, = A; Rj - H; Rs = NH2)
27) 4-demethoxy-8- (R) -fluor-7- (2,3,4-trideoxy-4-amino- esapiranosylfukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R ’ R2 = 0H; Ri - A; Rj = R5 = H; Rfi = NH2)
28) 4-demethoxy-8 - (R) -fluor-7- (2, 3, 4-trideoxy-4''-amino- esapiranosylramnosyl)-doxorubicinon (I: R = R2 = OH; R3 = A; R3 = Rs = H; R6 = NHJ
2$) 4-demethoxy-8 -(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-fukosyl)doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R - R, = Rs = R6 - OH; R, - A; R, = H) 30 > 4-demethoxy-8 -(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-ramnosyl)- doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = R5 = Rg - OH; R = A; R1 = H)
31) 8-(R)-fluordoxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R = r3 = OH; R3 = OCH3; R2 = NH2)
32) 8 -(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R = OH; R, - OCH3; R2 = H; R3 = NH2)
33) 8 - (R) - fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4epi - aminodoxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R = OH; Rx = OCH3; R2 = H; R3 = NH2)
34) 8-(R)-fluor-4'-epi-doxorubicin a jeho estery na C-14 (I: R = R3 = OH; Rj = OCH3; R2 = NHJ
35) 8 -(R)- fluor-7 -(daunosaminylfukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R R, = R. _ OH; R, = OCH3; R3 = A; R5 = NHJ
36) 8-(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = R6 = OH; R3 = A; R3 = OCH3; R5 = NH2)
37) 8- (R) -fluor-7- (2, 3, 4''-trideoxy-4-aminoesapiranosyl - fukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = OH; R, = OCH3; R3 = A; R5 = H; R6 = NH2)
38) 8-(R)-fluor-7-(2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosyl- ramnosyl) -doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = OH; R, - OCH3; R3 = A; Rs = H; R6 = NH2)
39) 8 - (R) -fluor-7-(fukosyl-4'-0-fukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R, = R_ _ Rg - OH; R, = A; R, = OCH3)
40) 8 -(R)- fluor-7-fukosyl-4'-0-ramnosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 (I: R = R2 = R5 = Rg = OH; R3 = OCH,; R3 = A) .
Sloučeniny vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli se připravují způsobem, zahrnujícím tyto stupně:
Kondenzace mezi 8-fluoranthracyklinonem obecného vzorce II (ID
kde R a Rt má výše uvedený význam, a sloučeninou obecného vzorce III
(III) kde X je snadno odštěpítelná skupina, schopná za podmínek kondenzace tvořit stabilní karbokation, který múze reagovat s hydroxylem v poloze C-7 sloučeniny vzorce II. Takováto skupina se výhodně volí ze skupin, používaných při glykosidačních reakcích, jako je například halogen nebo pnitrobenzoyloxyskupina, R7 je H nebo vhodně chráněná skupina OH nebo NH2, RB je H nebo vhodně chráněná skupina OH nebo NH; nebo zbytek vzorce III' (III1 )
kde R, a R10 představují stejné nebo různé substituenty, vybrané ze souboru zahrnujícího H a vhodně chráněnou skupinu OH nebo
Skupiny OH jsou chráněny allyloxykarbonyl.
Skupiny NH2 jsou chráněny triíluoracetamidem.
Symbol (----označuje, že mohou být v axiální a/nebo Kondenzací sloučenin vzorců II a I jako p-nitrobenzoát nebo jako allylkarboxyamid nebo substituenty R,, Rs, R9 a R_ v ekvatoriální konfiguraci. [I vznikne glykosid vzorce IV
(IV)
Glykosidační reakce se provádí v organickém rozpouštědle v přítomnosti kondenzačního činidla. Jako kondenzační činidlo se používá například trifluormethansulfonát stříbra, chloristan stříbrný, směsi oxidu nebo bromidu rtuti, halogenid boru nebo iontovýměnná pryskyřice, jako je Amberlite.
Přednostně se glykosidační reakce provádí s použitím inertního organického rozpouštědla, jako je benzen, toluen, ethylether, tetrahydrofuran, dioxan, chloroform, methylenchlorid nebo dichlormethan a jejich směsi.
Reakční teplota se může pohybovat mezi -40 a 40 °C, přednostně mezi -20 a 20 °C, a doba nutná k reakci se muže pohybovat mezi 5 min a 2 h.
V reakční směsi muže být přítomno dehydratační činidlo, jako jsou aktivovaná molekulární síta.
Během reakce, nebo po jejím skončení, se může k reakční směsi přidat organická báze, jako je pyridin, kollidin nebo triethylamin.
Odstranění chránících skupin ze skupin OH a/nebo NH2 ve sloučeninách vzorce IV pro získaní požadovaných sloučenin vzorce I se muže měnit podle použité chránící skupiny.
Jestliže symboly R7 a/nebo Rs a/nebo R9 a/nebo R10, stejné nebo různé, představují skupinu NH2, chráněnou jako 11 if1uoracetamid, a/nebo skupinu OH, chráněnou jako pnitrobenzoat, provádí se reakce sejmutí chránících skupin v polárním rozpouštědle, jako je voda, methanol, ethanol, pyridin, dimethylformamid nebo jejich směsi, v přítomnosti stechíometrického množství nebo přebytku anorganické báze, jako je NaOH, KOH, LiOH, Ba(OH)2 a jejich karbonáty. Reakční teplota se může pohybovat od 0 do 50 °C a reakční doba od 3 h do 3 dní.
Jestliže symboly R7 a/nebo R8 a/nebo Rs a/nebo R10, stejné nebo různé, představují skupinu NH2, chráněnou jako allylkarboxyamid, a/nebo skupinu OH, chráněnou jako allyloxykarbonát, provádí se reakce sejmutí chránících skupin v inertním rozpouštědle a v přítomnosti kovového komplexu, jako je (tetrakistrifenylfosfin)Pd, jak je popsáno například v Tetrahedron Letters 30 (1989), 3773, nebo (tetrakarbonyl)Ni, jak je popsáno například v J. Org. Chem. 38 (1973), 3233.
Je-li to žádoucí, mohou být sloučeniny vzorce I, kde Rj, R2 a Rj mají výše uvedený význam a R je skupina OH, připraveny z glykosidů vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných solí, kde R1Z R, a R3 a symbol (----mají výše uvedený význam a R je H, bromací uhlíkového atomu v poloze 14 bromem v chloroformu s následující hydrolýzou získaného 14bromderivátu mravenčanem sodným při teplotě místnosti po dobu 48 h.
Tentýž produkt je možno rovněž získat výše uvedeným postupem bromací uhlíkového atomu v poloze 14 aglykonu vzorce II, kde R, má výše uvedený význam a R je H. Tato sloučenina se po hydrolýze, kterou se R přeměnění na skupinu OH, glykosyluje výše popsanou glykosidační reakcí výše definovanou sloučeninou vzorce III za vzniku požadovaného produktu.
Je-li to žádoucí, je možno glykosidy vzorce I přeměnit na odpovídající farmaceuticky přijatelné soli, například hydrochloridy, působením kyseliny chlorovodíkové v methanolu.
Dále jsou předmětem vynálezu 8-fluoranthracyklinony vzorce II, kde skupiny 8-F a 9-OH jsou navzájem v poloze cis a kde R a Rj má výše uvedený význam, a způsob jejich výroby.
Tento způsob je znázorněn na připojeném schématu.
Prvním stupněm je bromofluorace allylakoholu vzorce V, kde Rj má výše uvedený význam, za vzniku sloučeniny vzorce VI.
Bromofluoraci sloučeniny vzorce V je možno provádět různými metodami, popsanými v literatuře (například Gazz. Chim. It. 121 (1991), 537 až 545; J. 0. C. 58 (1993), 2791 až 2796) pro bromofluoraci alkenů.
Druhým stupněm je tvorba epoxidu z bromhydrinu vzorce VI za vzniku sloučeniny vzorce VII, kde R, má výše uvedený význam. Tato reakce může být prováděna s použitím silné báze známými metodami popsanými v literatuře ve vztahu k tomuto typu reakce.
Třetím stupněm je otevření epoxidu za vzniku produktu vzorce VII, kde Rj má výše uvedený význam. I v tomto případě jsou reakční metody popsány v literatuře, týkající se otevření epoxidu za vzniku diolu kyselou katalýzou, přednostně směsmi vody, minerálních kyselin a inertních organických rozpouštědel.
Čtvrtým stupněm je reakce oxidace diolu vzorce Vlil na hydroxyketon vzorce IX. Oxidační reakce může být prováděna známými postupy. Výhodné jsou metody zahrnující použití dimethylsulfoxidu, jako je například Moffatova oxidační reakce apod., nebo komplexů pyridin-chrom, jako je chlorochromát pyridinu.
Posledním stupněm je přeměna fluorhydroxyketonu vzorce IX na sloučeninu vzorce II. Tu je možno provádět známými metodami, jako je bromace a solvolýza, s případnou ochranou ketoskupiny, je-li to nutné (Can. J, Chem. 49 (1973), 2712 ; J.A.C.S. 98 (1976), 1969; J.A.C.S. 98 (1976), 1967).
Vynález se týká rovněž farmaceutických přípravků, obsahujících jako účinnou složku anthracyklin-glykosid vzorce I nebo jeho farmaceuticky přijatelnou sůl.
Terapeuticky účinné množství sloučeniny podle vynálezu (mezi 2 a 20 mg/m2 povrchu těla nebo 0,05 až 0,5 mg/kg tělesné hmotnosti, podává-li se produkt endovenózně, nebo 10 až 200 mg/m2 povrchu těla nebo 0,25 až 5 mg/kg tělesné hmotnosti v případě orální aplikace) se kombinuje s inertním nosičem. Mohou být použity běžné nosiče a přípravek se formuluje známými postupy.
Přednost se dává přípravkům vhodným pro endovenózní nebo orální aplikaci.
Sloučeniny podle vynálezu jsou vhodné pro terapeutické ošetření lidí a zvířat. Sloučeniny podle vynálezu jsou použitelné zejména jako protinádorové prostředky pro podávání terapeuticky účinného množství sloučeniny ošetřovanému pacientovi.
Tyto sloučeniny vykázaly zejména překvapivou účinnost proti velkému počtu tuhých nádorů (například nádor vaječníku, prsu, plic, dělohy) a rovněž proti těm nádorům, které si vyvinuly rezistenci vůči známým běžně používaným protinádorovým prostředkům.
Příklady provedení vynálezu
Vynález je blíže osvětlen pomocí příkladů provedení, které jej však nijak neomezují.
Příklad 1
- (1'-Hydroxyethyl) - 7,10-dihydro-6,11 dihydroxy-8-fluor 9-brom5,12-naftacendion (VI, R, = H)
K suspenzi
9-(11-hydroxyethyl)-7,10-dihydro-6,11-di hydroxy-5,12-naftacendionu (V, R^ = H) (9,4 g, 28 mmol) v methylenchloridu (900 ml) se za míchání při -5 °C přidá roztok tetrabutylamonium-dihydrogenu (18,4 g, 55%; 33,6 mmol) v methylenchloridu, načež se, stále při -5 °C a za udržování reaktoru v temnu, přidá N-bromsukcinimid (6,0 g; 33,6 mmol). Reakce se nechá probíhat 5 h. Delší reakční doba nezvyšuje výtěžek. Přidá se 10% roztok NaHCO3 do neutrálního pH. Organická fáze se vysuší nad Na2SO4, přefiltruje a odpaří. Zbytek se přečistí mžikovou chromatografií s použitím CHCI3 jako eluentu.
Získá se 3,6 g (výtěžek 29 %) sloučeniny VI (R^ = H).
NMR (CDCI3, δ): 1,45 (3H, d) ; 3,0-3,5 (2H, q) ; 3,2-3,4 (2H, q) ; 3,93 (1H, m) ; 5,4-5,6 (1H, d) ; 7,90 (2H, m) ; 8,30 (2H, m) ; 13,36 (III, s) ; 13,46 (1H, s).
Analogickým postupem byl získán 4-methoxy-9-(1'hydroxyethyl)-7,10-dihydro-6, ll-dihydroxy-8-fluor-9-brom-5,12naftacendion (VI, Rj = OCH3).
Příklad 2
9-(9-1'-Epoxyethyl)-7,10-dihydro-6,11-dihydroxy-8 - fluor-5,12naftacendion (VII, Rj = H)
Roztok 9-(1'-hydroxyethyl) -7, 10-dihydro-6,11-dihydroxy-8 fluor-9-brom-5,12-naftacendionu (3,6 g, 8,3 mmol), získaného podle příkladu 1, v 5% NaOH (16 ml) se ponechá 2 h za míchání při teplotě místnosti. K reakční směsi se přidá IN HC1 produkt se extrahuje CHCI3; organická fáze se vysuší nad Na2SO4, přefiltruje a odpaří. Získaný zbytek se přečistí mžikovou chromatografií s použitím CHCI3 jako eluentu. Získá se 1,6 g (výtěžek 57 %) titulní sloučeniny.
NMR (CDCI3, δ): 1,4 (3H, d) ; 2,62-3,48 (2H, q) ; 2,9-3,1 (2H, q) ; 3,26-3,68 (2H, m) ; 3,10 (1H, m) ; 4,80-4,96 (1H, d); 7,80 (2H, m); 8,40 (2H, m); 13,35 (1H. s) ; 14,42 (1H, s) .
Analogickým postupem se získá 4-methoxy-9- (9-1'epoxyethyl)-7,10-dihydro-6,11-dihydroxy-8 - fluor-5,12-naftacendion (VII, RT = OCH3).
Příklad 3
9- (11-Hyydroxyethyl)-7 , 10-dihydro-6 , 9, ll-trihydroxy-8-fluor-
5,12-naftacendion (VIII, Rx = H)
K roztoku 9-(9-11-epoxyethyl)-7,10-dihydro-6,11-dihydroxy8 - fluor - 5,12-naftacendionu (1,6 g; 4,7 mmol), získaného podle příkladu 2, v dioxanu (700 ml) se přidá H5O (700 ml) a pak se za udržování reaktoru v lázni při 0 °C pomalu přikape oleum (700 ml) . Po skončení přídavku olea se nechá teplota stoupnout na teplotu místnosti a roztok se míchá 6 h. Ke směsi se přidá roztok NaHCO3 do neutrálního pH a produkt se extrahuje CH2C12. Organická fáze, vysušená nad Na2SO4, se odpaří. Získá se titulní produkt (výtěžek 100 %).
NMR (CDCla, δ): 1,40 (3H, d) ; 2,8-3,1 (2H, q) ; 3,0-3,3 (2H, q) ; 4,05 (1H, q) ; 5,0-5,2 (1H, q) ; 7,80 (2H, m) ; 8,30 (2H, m) ; 13,30 (1H, s) ; 13,32 (1H, s) .
Analogickým postupem se získá 4-methoxy- 9- (1'hydroxyethyl)-7,10-dihydro-6,9,11- trihydroxy-8 - fluor-5,12naftacendion (VIII, R]_ = OCH3) .
Příklad 4
9-Acetyl-8(8H)-fluor-7,10-dihydro-6,9,11-trihydroxy-5,12naftacendion (IX, Rj = H)
- (1'-Hydroxyethyl)- 7,10-dihydro-6,9,11-trihydroxy-8 fluor-5,12-naftacendion (1,7 g; 4,7 mmol), připravený podle příkladu 3 za bezvodých podmínek, se solubilizuje v DMSO (90 ml) pak se k roztoku přidá směs pyridinu (1,14 ml; 14,1 mmol) a kyseliny trifluoroctové (0,83 ml; 10,8 mmol) in DMSO (16 ml) . Ke směsi se přidá acetanhydrid (4,44 ml; 47 mmol) a roztok sc ponechá za míchání při teplotě místnosti po dobu 4 h. Po přídavku vody k roztoku se vysráží požadovaný produkt.
Další množství produktu, případně přítomné v roztoku, se získá extrakcí CHCI3. Takto získaný surový produkt se přečistí mžikovou chromatografií s použitím CHCI3 jako eluentu. Získá se titulní sloučenina (1,2 g; výtěžek 70 %).
NMR (CDCI3, 8): 2,48 (3H, s) ; 3,18 (2H, s); 3,1-3,6 (2H, m) ;
3,90 (1H, s) ; 5,2-5,4 (1H, s) ; 7,82 (2H, m) ; 8,38 (2H, m); 13,34 (1H, s); 13,36 (1H, s).
Analogickým postupem se získá 4-methoxy-9-acetyl-8(SH)fluor-7,10-dihydro-6,9,11-trihydroxy-5,12-naftacendion (IX, = OCH3).
Příklad 5
9-Acetyl-8(8H)- fluor-10-hydro-6,7(7H),9,11-tetrahydroxy-5,12naftacendion (II; Ry - H)
V baňce opatřené Dean-Stárkovým nástavcem se k suspenzi 9acetyl-8(8H)-fluor-7,10-dihydro-6,9,11-trihydroxy-5,12naftacendionu (1,2 g; 3,3 mmol), připraveného podle příkladu 4, v bezvodém benzenu (200 ml) přidá ethylenglykol (5 ml) a katalytické množství kyseliny p-toluensulfonové (60 mg; 0,3 mmol) . Směs se refluxuje 15 h při 120 °C. Karbonylová funkce v poloze 13 se chrání ketalizací. Po skončení reakce se teplota zvýší na teplotu místnosti a produkt se vysráží, shromáždí a promyje vodou.
Takto získaný produkt se brómuje v poloze 7 PHPP a AIB v CCI4 refluxováním v proudu dusíku při 120 °C po dobu 8 h. Teplota reakční směsi se zvýší na teplotu místnosti, sraženina se odfiltruje a roztok se odpaří. Zbytek se hydrolyzuje kyselinou trifluoroctovou (240 ml) a vodou (60 ml) refluxováním po dobu 1 h.
Teplota se zvýší na teplotu místnosti, pak se ochladí na 7 °C. Produkt se vysráží, promyje vodou a vysuší. Jedná se o směs epimerú v poloze 7 (a = 70 %, b = 30 %) . Požadovaný epimer se izoluje HPLC a získá se titulní produkt (312 mg; výtěžek 24 %).
NMR (CDCI3, 6): 2,50 (3H, s) ; 3,1-3,4 (2H, m) ; 3,85 (1H. d);
4,82 (1H, S) ; 5,04-5,22 (1H, q) ; 5,50 (1H, m);
7,85 (2H. m) ; 8,40 (211, m) ; 13,28 (1H, s);
, 54 (1H, s) .
Analogickým postupem se získá 4-methoxy-9-acetyl-8(8H) fluor-10-hydro-6,7(7H),9,11-tetrahydroxy-5,12-naftacendion (II; Ri - OCH3).
Příklad 6
Chráněný 4-demethoxy-8(R)-fluordaunorubicin (TV, R = R4 - H, R7
- NHCO2CH2CH=CH2, Rg - p-CO-C6H4-NQ2)
K roztoku 9-acetyl -8(8H)-fluor-10-hydro-6,7{7H) ,9,11tetrahydroxy-5,12-naftacendionu (77 mg; 0,2 mmol), získaného podle příkladu 5, a chráněného daunosaminu (III, X = Rg = OCOC6H4NO2; R7 = NHCO2CH2CH=CH2) (127 mg; 0,24 mmol) v bezvodém methylenchloridu (40 ml) a bezvodém ethyleteru (10 ml) se přidají molekulární síta 4 A (1,2 g) . K tomuto roztoku, udržovanému na -10 °C v proudu bezvodého dusíku, se přidá trimethylsilyltriflát (107 mg; 0,48 mmol). Reakce se provádí při -10 °C po dobu 30 min. K roztoku se přidá roztok NaHCOg, organická fáze se extrahuje, vysuší nad Na2SO4 a odpaří. Takto získaný surový produkt se přečistí mžikovou chromatograf11 (CHCI3 + 1% iPrOH) . Získá se 61 mg (výtěžek 40 %) titulní sloučeniny.
NMR (CDCI3, δ): 1,2 (3H. d) ; 2,0 (2H, m) ; 2,5 (3H, d) ; 3,1-3,5 (2H, q) ; 4,2-4,7 (5H, m) ; 5,0-5,3 (BII, m) ; 5,45,6 (2H, m) ; 5,8 (1H, s) ; 5,9 (1H, m) ; 7,8 (2H, m) ; 8,3 (6H, m) ; 13,7 (1H, s) ; 13,2 (1H, s) .
Analogickým postupem se získá chráněný 8-(R)-fluordaunorubicin (IV, R = H, R^ = OCH3, R7 = NHCO2CH2CH-CH2, Rg = p-CO-C6H4-NO2)·
Příklad 7
4-demethoxy-8-(R)-fluordaunorubicinhydrochlorid (I, R = Rj = H;
R2 = NH2.HC1, R3 = OH)
Produkt popsaný v příkladu 6 musí být podroben dvojímu sejmutí chránících skupin, aby byl přeměněn na odpovídající sloučeninu vzorce 1.
Produkt získaný podle příkladu 6 (61 mg; 0,08 mmol) se suspenduje v MeOH/H2O a přidá se 0 , 5M roztok K2CO3 za účelem odstranění chránící skupiny z hydroxyskupiny v poloze 4' .
Získaný produkt poskytne působením tetrakis Ph3P, kyseliny 2-methylmáselné v CH2C12 za bezvodých podmínek v temnu při teplotě místnosti odstraněním chránící skupiny z aminoskupiny v poloze 3' požadovanou sloučeninu (32 mg; 75 %).
Tento produkt se působením 0,01N HC1 převede na titulní sloučeninu.
NMR (CDCI3, δ): 1,3 (3H, d); 2,0-2,2 (2H, m); 2,5 (3H, s); 3,23,4 (2H, m) ; 3,6-3,8 (2H, m) : 4,4-4,5 (1H, m) ;
5,2-5,4 (1H, m) ; 5,5 (1H, m) ; 5,7 (1H, m) ; 8,0 (2H, s) ; 8,4 (2H, s)
Analogickým postupem se získá 8 -(R)-fluordaunorubicinhydrochlorid (I, R = H; R3 = OCH3; R2 = NH2.HCl; R3 = OH).

Claims (6)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1- 8-Fluoroanthracykllny obecného ς
    kde
    R je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a 0R4, kde R4 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího CHO, COCH3 a acylový derivát karboxylové kyseliny s až 6 uhlíkovými atomy,
    R: je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
    OCH3,
    R2 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
    NH2,
    R3 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH, NH3 a zbytek vzorce A
    (A) kde R5 a Rs jsou stejné nebo různé substituenty, vybrané ze souboru zahrnujícího H, OH a NH2, a symbol ——) znamená, že substituenty R2, R3, R5 a R6 mohou být v axiální nebo v ekvatoriální konfiguraci, přičemž skupiny 8-F a 9-OH jsou v poloze cis, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
  2. 2. 8-Fluoroanthracykliny podle nároku 1, kterými jsou
    4-demethoxy-8-(R)-fluordaunorubicin,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-4'-epi-daunorubicin,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)-daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosylfúkosy1)-daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(2, 3, 4-trideoxy-4''-ammoesapi ranosylramnosy1)-daunorub i c inon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-fukosyl)daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-ramnosyl)daunorubi c inon,
    8- (R)-fluordaunorubicin,
    PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučeniny obecného vzorce I
    kde
    R je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a OR4, kde R4 je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího CHO, COCHj a acylový derivát karboxylové kyseliny s až 6 uhlíkovými atomy,
    Rj je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
    OCH3,
    R, je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH a
    NH2,
    r. je substituent vybraný ze souboru zahrnujícího H, OH, NH2 a zbytek vzorce A
    kde R5 a Rg jsou stejné nebo různé substituenty, vybrané ze souboru zahrnujícího H, OH a NH., a symbol () znamená, že substituenty R2, R3, R5 a R. mohou být v axiální nebo v ekvatoriální konfiguraci, přičemž skupiny 8-F a 9-OH jsou v poloze cis, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.
    2. Sloučeniny podle nároku 1, kterými jsou
    4-demethoxy-8 -(R)-fluordaunorubicin,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin,
    4-demethoxy-8 -(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-4'-epi-daunorubicin,
    4-demethoxy-8 -(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)-daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)daunorubicinon,
    4 -demethoxy-8- (R) -fluor-7- (2”, 3”, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosylfukosyl)-daunorubicinon,
    4-demethoxy-8- (R) -fluor-7- (2, 3, 4''-trideoxy-4-aminoesapiranosylramnosyl)-daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-0-fukosyl)daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-0-ramnosyl)daunorubicinon,
    8-(R)-fluordaunorubicin,
    8-(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodaunorubicin,
    8- (R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodaunorubicin,
    8-(R)-fluor-4'-epi-daunorubicin,
    8- (R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)-daunorubicinon,
    8- (R) -fluor-7-(daunosaminylramnosyl)-daunorubicinon,
    8-(R)-fluor-7 (2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosyl f ukosyl)daunorubicinon,
    8- (R) -fluor-7- (2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosylramnosyl) daunorubicinon,
    8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-fukosyl)-daunorubicinon,
    8 - (R)-fluor-7-fukosyl-4'-O-ramnosyl)-daunorubicinon,
    4-demethoxy-8-(R)-fluordoxorubicin a jeho estery na C-14,
    4-demethoxy-8 -(R)- fluor-3'-deamino-4 ' -deoxy-4'- amino doxorubicin a jeho estery na C-14,
    4 -demethoxy-8 -(R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin a jeho estery na C-14,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-4 ' -epi-doxorubicin a jeho estery na C14 ,
    4-demethoxy-8 -(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    4-demethoxy-8 -(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7- (2, 3,4-trideoxy-4-aminoesapiranosylfukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    4 demethoxy- 8 -(R)- fluor-7 -(2, 3, 4-1rideoxy-4-ami noesapiranosyiramnosy1)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    J J UU J 23 X
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-fukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    4-demethoxy-8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-ramnosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    8-(R)-fluordoxorubicin a jeho estery na C-14,
    8_(r)- fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-aminodoxorubicin a jeho estery na C-14,
    8- (R)-fluor-3'-deamino-4'-deoxy-4'-epi-aminodoxorubicin a jeho estery na C-14,
    8-(r)-fluor-3'-deamino-4'-epi-doxorubicin a jeho estery na C14 ,
    8-(R)-fluor-7-(daunosaminylfukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    8-(R)-fluor-7-(daunosaminylramnosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    8- (R) -fluor-7- (2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosylf ukosyl) doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    8- (R) -fluor-7- (2, 3, 4-trideoxy-4-aminoesapiranosylramnosyl) doxorubicinon a jeho estery na C-14,
    8-(R)-fluor-7-(fukosyl-4'-O-fukosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14 a/nebo
    8-(R)-fluor-7-fukosyl-4'-O-ramnosyl)-doxorubicinon a jeho estery na C-14.
  3. 3. 8-Fluoroanthracykliny vzorce II
    (Π) kde R a R, ma výše uvedený význam a skupiny 8-F a navzájem stereochemii cis.
    9-OH mají
  4. 4. Způsob výroby 8-fluoroanthracyklinů nároku 3, vyznačující 5e allylalkohol vzorce V vzorce tím,
    II podle že se
    (V) bromofluoruje za vzniku sloučeniny vzorce VI
    která se působením báze přemění na epoxid vzorce VI i
    (VII) odpovídající diol vzorce VIII v°dném roztoku přemění na
    (VIII) který se oxiduje na fluorhydroxyketon vzorce IX
    (IX) který se nakonec brómuje a podrobí solvolýze v poloze 7 běžnými činidly za vzniku aglykonu vzorce II
  5. 5. Farmaceutický přípravek, vyznačující se t i m , ze jako účinnou složku obsahuje terapeuticky účinné množství sloučeniny vzorce I podle nároku 1 nebo jejích farmaceuticky přijatelných solí v kombinaci s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem.
  6. 6. Přípravek podle nároku 5 pro léčbu nádorů.
CZ0028099A 1997-05-01 1998-05-01 Purifikovaná a izolovaná transkripcní regulacní DNA kreccího EF-1alfa, hostitelské bunky, vektory, chimérické polynukleotidy, plasmidy a zpusob zvysování transkripce genu CZ296544B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/847,218 US5888809A (en) 1997-05-01 1997-05-01 Hamster EF-1α transcriptional regulatory DNA

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ28099A3 true CZ28099A3 (cs) 2000-02-16
CZ296544B6 CZ296544B6 (cs) 2006-04-12

Family

ID=25300098

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ0028099A CZ296544B6 (cs) 1997-05-01 1998-05-01 Purifikovaná a izolovaná transkripcní regulacní DNA kreccího EF-1alfa, hostitelské bunky, vektory, chimérické polynukleotidy, plasmidy a zpusob zvysování transkripce genu

Country Status (19)

Country Link
US (1) US5888809A (cs)
EP (2) EP0920498B1 (cs)
JP (1) JP2000513948A (cs)
CN (2) CN100430477C (cs)
AT (1) ATE318900T1 (cs)
AU (1) AU742561B2 (cs)
BR (1) BR9804896B1 (cs)
CZ (1) CZ296544B6 (cs)
DE (1) DE69833649T2 (cs)
DK (1) DK0920498T3 (cs)
ES (1) ES2263206T3 (cs)
HU (1) HU225764B1 (cs)
IL (1) IL127897A (cs)
NO (1) NO323853B1 (cs)
PL (1) PL195604B1 (cs)
PT (1) PT920498E (cs)
RU (2) RU2249617C2 (cs)
SK (1) SK285664B6 (cs)
WO (1) WO1998049289A1 (cs)

Families Citing this family (132)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8183344B2 (en) * 1996-04-24 2012-05-22 University Of Michigan Inactivation resistant factor VIII
US6479256B1 (en) 1998-03-04 2002-11-12 Icos Corporation Lectomedin materials and methods
KR20000046969A (ko) * 1998-12-31 2000-07-25 이선경 이종 유전자 유래의 유전자 발현 조절요소를 포함하는 강력한전사 활성을 가진 진핵세포 발현벡더
AU2002213196A1 (en) * 2000-10-12 2002-04-22 Icos Corporation Modulation of ligand binding/enzymatic activity of alpha beta proteins
WO2002050264A2 (en) * 2000-12-18 2002-06-27 Wyeth Promoters and recombinant expression constructs
DE60237048D1 (de) * 2001-07-04 2010-08-26 Chromagenics Bv DNS-Sequenzen mit Anti-Repressor-Aktivität
CA2489475C (en) * 2002-06-14 2011-03-29 Chromagenics B.V. A method for simultaneous production of multiple proteins; vectors and cells for use therein
WO2003106674A2 (en) * 2002-06-14 2003-12-24 Chromagenics B.V. Means and methods for regulating gene expression
DK1573058T3 (da) * 2002-12-18 2012-01-16 Chromagenics Bv Fremgangsmåde til forbedring af proteinproduktion
DK1572994T3 (da) * 2002-12-20 2007-05-29 Chromagenics Bv Midler og fremgangsmåder til fremstilling af en protein gennem chromatinåbnere, som kan göre chromatin mere tilgængeligt for transkriptionsfaktorer
ATE455174T1 (de) 2003-09-23 2010-01-15 Univ North Carolina Zellen, die vitamin-k-reduktase und vitamin-k- abhängiges protein coexprimieren und deren anwendung zur verbesserung der produktivität von diesem vitamin-k-abhängigen protein
US7645602B2 (en) 2003-09-23 2010-01-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for producing vitamin K dependent proteins
US8039230B2 (en) * 2004-11-08 2011-10-18 Chromagenics B.V. Selection of host cells expressing protein at high levels
US20060195935A1 (en) * 2004-11-08 2006-08-31 Chromagenics B.V. Selection of host cells expressing protein at high levels
BRPI0517380A (pt) * 2004-11-08 2008-10-07 Chromagenics Bv molécula de dna, cassete de expressão, célula hospedeira, e, métodos para gerar uma célula hospedeira que expressa um polipeptìdeo de interesse e para produzir um polipeptìdeo de interesse
US8999667B2 (en) * 2004-11-08 2015-04-07 Chromagenics B.V. Selection of host cells expressing protein at high levels
NZ553700A (en) 2004-11-08 2010-09-30 Chromagenics Bv Selection of host cells expressing protein at high levels using a selectable marker with a non-optimal start codon
WO2006063292A1 (en) * 2004-12-08 2006-06-15 Icos Corporation Recombinant method for making multimeric proteins
CA2601574C (en) 2005-03-15 2014-12-02 University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for producing active vitamin k-dependent proteins
WO2007008848A2 (en) * 2005-07-07 2007-01-18 Seattle Genetics, Inc. Monomethylvaline compounds having phenylalanine carboxy modifications at the c-terminus
ES2708763T3 (es) 2005-07-07 2019-04-11 Seattle Genetics Inc Compuestos de monometilvalina que tienen modificaciones de la cadena lateral de fenilalanina en el extremo C
WO2007045465A1 (en) 2005-10-21 2007-04-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Method for the recombinant expression of a polypeptide
EP1945781B1 (en) 2005-10-28 2014-03-05 F.Hoffmann-La Roche Ag Protein expression in rodent cells
ES2503365T5 (es) 2005-12-21 2017-10-31 Cnj Holdings, Inc Método para producir proteínas dependientes de vitamina K biológicamente activas por métodos recombinantes
WO2007081336A1 (en) * 2006-01-13 2007-07-19 Five Prime Therapeutics, Inc. Mammalian vectors for high-level expression of recombinant proteins
BRPI0712073B8 (pt) 2006-05-17 2021-05-25 Hoffmann La Roche ácido nucléico para produção de um polipeptídio ou proteína heteróloga
US20080070251A1 (en) * 2006-06-30 2008-03-20 Kaufman Randal J Method of Producing Factor VIII Proteins by Recombinant Methods
US20090203077A1 (en) * 2006-06-30 2009-08-13 The Regents Of The University Of Michigan Method of producing factor viii proteins by recombinant methods
CL2008000707A1 (es) 2007-03-13 2008-09-22 Hoffmann La Roche Conjugado de polipeptidos antifusogenicos y polipeptidos derivados de la cabeza globular del factor del complemento c1q; composicion farmaceutica que lo comprende; su uso para tratar infecciones viricas; y metodo de produccion.
EP1975228A1 (en) 2007-03-28 2008-10-01 Fachhochschule Mannheim Polynucleotides for enhancing expression of a polynucleotide of interest
AU2008245524A1 (en) 2007-04-26 2008-11-06 Cnj Holdings, Inc. Recombinant vitamin K dependent proteins with high sialic acid content and methods of preparing same
KR101163295B1 (ko) * 2007-06-29 2012-07-05 에프. 호프만-라 로슈 아게 향상된 면역글로불린을 생산하는 중쇄 돌연변이체
PT2592148T (pt) 2007-10-12 2018-11-12 Hoffmann La Roche Expressão proteica de múltiplos ácidos nucleicos
CA2705486C (en) 2007-11-19 2019-04-02 Celera Corporation Lung cancer markers and uses thereof
KR20110016440A (ko) 2008-04-24 2011-02-17 셀틱 파르마 피이지 엘티디. 연장된 반감기를 가진 제 ⅰⅹ 인자 접합체
PL2282773T3 (pl) 2008-05-02 2014-08-29 Seattle Genetics Inc Sposoby i kompozycje do wytwarzania przeciwciał i pochodnych przeciwciał o obniżonej fukozylacji rdzeniowej
DK2462237T3 (da) 2009-08-06 2016-03-29 Cmc Icos Biolog Inc Fremgangsmåder til forbedring af rekombinant proteinekspression
WO2011033005A2 (en) 2009-09-15 2011-03-24 Medimmune Limited Cells for transient expression and uses thereof
WO2011053738A1 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Inspiration Biopharmaceuticals, Inc. Method of producing recombinant vitamin k dependent proteins
EP2339009A1 (en) 2009-12-22 2011-06-29 Sandoz Ag Cold inducible promoter sequences
EP2796467B1 (en) 2010-03-31 2018-03-28 Boehringer Ingelheim International GmbH Anti-CD40 antibodies
UA112062C2 (uk) 2010-10-04 2016-07-25 Бьорінгер Інгельхайм Інтернаціональ Гмбх Cd33-зв'язувальний агент
KR102049223B1 (ko) 2010-11-04 2019-11-28 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 항-il-23 항체
US9631002B2 (en) 2010-12-21 2017-04-25 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for producing active vitamin K-dependent proteins
EP2753644A1 (en) 2011-09-09 2014-07-16 Universiteit Utrecht Holding B.V. Broadly neutralizing vhh against hiv-1
EP2771031B1 (en) 2011-10-28 2018-04-18 Prothena Biosciences Limited Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein
SI2780373T1 (sl) 2011-11-16 2019-12-31 Boehringer Ingelheim International Gmbh Protitelesa proti IL-36R
CN107881196A (zh) 2011-12-22 2018-04-06 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 表达载体组织、新的生产用细胞产生方法及其在重组产生多肽中的用途
EP2794662A1 (en) 2011-12-22 2014-10-29 F.Hoffmann-La Roche Ag Full length antibody display system for eukaryotic cells and its use
SG10201700169PA (en) 2011-12-22 2017-02-27 Hoffmann La Roche Expression vector element combinations, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides
EP2807188B1 (en) 2012-01-27 2019-09-11 Prothena Biosciences Limited Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein
AU2013216863B2 (en) 2012-02-10 2018-09-06 Seagen Inc. Detection and treatment of CD30+ cancers
JP2015507929A (ja) * 2012-02-14 2015-03-16 ポートラ ファーマシューティカルズ, インコーポレイテッド 第Xa因子阻害剤に対する組み換え拮抗剤を製作するためのプロセス
CN109206516A (zh) 2012-05-03 2019-01-15 勃林格殷格翰国际有限公司 抗IL-23p19抗体
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
WO2014081831A1 (en) 2012-11-20 2014-05-30 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for modified factor ix proteins
EP3770263A1 (en) 2013-03-12 2021-01-27 AGC Biologics, Inc. Improved recombinant protein expression using a hybrid chef1 promoter
WO2014165271A2 (en) 2013-03-13 2014-10-09 Neotope Biosciences Limited Tau immunotherapy
US10513555B2 (en) 2013-07-04 2019-12-24 Prothena Biosciences Limited Antibody formulations and methods
RU2535871C1 (ru) * 2013-07-10 2014-12-20 Общество с ограниченной ответственностью "Лаборатория медицинской биотехнологии" (ООО "ЛМБТ") Плазмида для экспрессии в клетке китайского хомячка, клетка китайского хомячка - продуцент белка с Gla-доменом и способ получения белка с Gla-доменом
WO2015004633A1 (en) 2013-07-12 2015-01-15 Neotope Biosciences Limited Antibodies that recognize islet-amyloid polypeptide (iapp)
US9850302B2 (en) 2013-07-12 2017-12-26 Prothena Biosciences Limited Antibodies that recognize IAPP
US11191832B2 (en) 2013-11-19 2021-12-07 Prothena Biosciences Limited Monitoring immunotherapy of Lewy body disease from constipation symptoms
CA2934965A1 (en) 2014-01-31 2016-03-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh Novel anti-baff antibodies
PT3116911T (pt) 2014-03-12 2019-09-04 Prothena Biosciences Ltd Anticorpos anti-mcam e métodos de utilização associados
WO2015136472A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Prothena Biosciences Limited Anti-laminin4 antibodies specific for lg4-5
EP3116906A1 (en) 2014-03-12 2017-01-18 Prothena Biosciences Limited Anti-laminin4 antibodies specific for lg1-3
TW201623331A (zh) 2014-03-12 2016-07-01 普羅帝納生物科學公司 抗黑色素瘤細胞黏著分子(mcam)抗體類及使用彼等之相關方法
US10562973B2 (en) 2014-04-08 2020-02-18 Prothena Bioscience Limited Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein
EP3172339A1 (en) 2014-07-24 2017-05-31 Boehringer Ingelheim International GmbH Biomarkers useful in the treatment of il-23a related diseases
TWI769570B (zh) 2015-01-28 2022-07-01 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI786505B (zh) 2015-01-28 2022-12-11 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI718121B (zh) 2015-01-28 2021-02-11 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
KR20170120616A (ko) 2015-02-04 2017-10-31 베링거 인겔하임 인터내셔날 게엠베하 염증성 질환의 치료 방법
KR102554850B1 (ko) 2015-02-06 2023-07-13 더 유니버시티 오브 노쓰 캐롤라이나 엣 채플 힐 최적화된 인간 응고 인자 viii 유전자 발현 카세트 및 그의 용도
MX2017013156A (es) 2015-04-14 2018-02-21 Boehringer Ingelheim Int Metodos para tratar enfermedades.
CA3022547A1 (en) 2015-05-12 2016-11-17 Syntimmune, Inc. Humanized affinity matured anti-fcrn antibodies
WO2017046776A2 (en) 2015-09-16 2017-03-23 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis
WO2017046774A2 (en) 2015-09-16 2017-03-23 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of giant cell arteritis, polymyalgia rheumatica or takayasu's arteritis
TWI811716B (zh) 2015-09-18 2023-08-11 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 治療發炎性疾病之方法
WO2017070167A1 (en) 2015-10-20 2017-04-27 The University Of North Carolina At Chapel Hill Methods and compositions for modified factor ix fusion proteins
WO2017149513A1 (en) 2016-03-03 2017-09-08 Prothena Biosciences Limited Anti-mcam antibodies and associated methods of use
WO2017153953A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases
WO2017153955A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Prothena Biosciences Limited Use of anti-mcam antibodies for treatment or prophylaxis of granulomatous lung diseases
AU2017250583A1 (en) 2016-04-15 2018-08-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Methods of treating inflammatory diseases
KR20190015704A (ko) 2016-04-25 2019-02-14 신티뮨, 인크. 인간화된 친화성 성숙 항-fcrn 항체
US10906964B2 (en) 2016-05-02 2021-02-02 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
EP3452507B1 (en) 2016-05-02 2022-10-19 Prothena Biosciences Limited Tau immunotherapy
MX2018013384A (es) 2016-05-02 2019-02-28 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que reconocen tau.
WO2017208210A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Prothena Biosciences Limited Anti-mcam antibodies and associated methods of use
EP3478714A2 (en) 2016-07-02 2019-05-08 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
JP7017013B2 (ja) 2016-07-02 2022-02-08 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
JP7016470B2 (ja) 2016-07-02 2022-02-07 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
EP3472198B1 (en) 2016-09-29 2020-03-04 H. Hoffnabb-La Roche Ag Improved method for selecting polypeptide producing cells
WO2018071504A2 (en) 2016-10-14 2018-04-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Methods of treating diseases
EP3601350A1 (en) 2017-03-27 2020-02-05 Boehringer Ingelheim International GmbH Anti il-36r antibodies combination therapy
SG11201910066QA (en) 2017-05-02 2019-11-28 Prothena Biosciences Ltd Antibodies recognizing tau
US10793634B2 (en) 2017-06-09 2020-10-06 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-TrkB antibodies
CA3076313A1 (en) 2017-09-28 2019-04-04 Prothena Biosciences Limited Dosing regimes for treatment of synucleinopathies
KR102581734B1 (ko) 2017-10-06 2023-09-22 네오토프 뉴로사이언스 리미티드 트랜스타이레틴의 검출 방법
MA51223A (fr) 2017-11-29 2020-10-07 Prothena Biosciences Ltd Formulation lyophilisée d'un anticorps monoclonal contre la transthyrétine
WO2019139940A1 (en) 2018-01-10 2019-07-18 Cmc Icos Biologics, Inc. Bidirectional chef1 vectors
US12037382B2 (en) 2018-02-05 2024-07-16 Stichting Vu Inverse agonistic anti-US28 antibodies
WO2019156566A1 (en) 2018-02-12 2019-08-15 Umc Utrecht Holding B.V. Bispecific molecules comprising gamma-delta tcr and t-cell or nk cell binding domain
WO2019226050A2 (en) 2018-05-24 2019-11-28 Wageningen Universiteit Novel viral anti-infective reagents
WO2019235923A1 (en) 2018-06-04 2019-12-12 Erasmus University Medical Center Rotterdam Role for low density lipoprotein receptor-related protein 10 in progressive brain diseases
WO2020006347A1 (en) 2018-06-29 2020-01-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-cd40 antibodies for use in treating autoimmune disease
CN110904127B (zh) 2018-09-18 2024-09-20 瓦赫宁恩研究基金会 非洲猪瘟病毒疫苗
WO2020080941A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Umc Utrecht Holding B.V. Anti- low-density lipoprotein receptor-related protein 5/6 antibodies
KR102559149B1 (ko) 2018-10-26 2023-07-24 에프. 호프만-라 로슈 아게 재조합효소 매개 카세트 교환을 이용한 다중특이적 항체 스크리닝 방법
SG11202104549TA (en) 2018-11-08 2021-05-28 Prothena Biosciences Ltd Antibodies recognizing tau
UA128431C2 (uk) 2018-11-26 2024-07-10 Форті Севен, Інк. ГУМАНІЗОВАНЕ АНТИТІЛО ДО c-Kit
WO2020130838A2 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Qvq Holding B.V. Antibodies for preventing or treating candidiasis
TWI859197B (zh) 2019-03-03 2024-10-21 愛爾蘭商普羅帝納生物科學公司 識別tau之抗體
US11730812B2 (en) 2019-03-08 2023-08-22 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-IL-36R antibody formulations
EP3946434A1 (en) 2019-04-02 2022-02-09 Immunetune B.V. Immune-stimulatory compositions and use thereof
MX2021013671A (es) 2019-05-09 2021-12-10 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos anti-sema3a y sus usos para tratar enfermedades oculares.
TWI877179B (zh) 2019-06-27 2025-03-21 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 抗-angpt2抗體
TW202535466A (zh) 2019-09-09 2025-09-16 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 抗-il-23p19抗體調配物
TWI859339B (zh) 2019-09-24 2024-10-21 德商百靈佳殷格翰國際股份有限公司 抗nrp1a抗體及其用於治療眼或眼部疾病之用途
CA3181776A1 (en) 2020-05-26 2021-12-02 Boehringer Ingelheim International Gmbh Anti-pd-1 antibodies
AU2021297540A1 (en) 2020-06-24 2023-02-02 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing sortilin
EP4288457A2 (en) 2021-02-05 2023-12-13 Boehringer Ingelheim International GmbH Anti-il1rap antibodies
PE20250390A1 (es) 2021-12-22 2025-02-11 Boehringer Ingelheim Int Anticuerpos anti-c3 y fragmentos de union al antigeno de estos y sus usos para tratar enfermedades oftalmicas u oculares
CN114540352A (zh) * 2022-02-16 2022-05-27 艾瑞生命科学技术(常州)有限公司 一种多核苷酸、载体元件及表达载体和宿主细胞及应用
EP4612180A1 (en) 2022-10-31 2025-09-10 Stichting Amsterdam UMC Single domain anti-cd169 antibodies
US20260176369A1 (en) 2022-11-08 2026-06-25 Stichting Amsterdam UMC Activation Inducible Antigen Receptors for Adoptive Immunotherapy
EP4777522A2 (en) 2023-09-15 2026-07-22 Prothena Platform Technologies Limited Methods, compositions, and kits including cell-penetrating agents
WO2025059486A1 (en) 2023-09-15 2025-03-20 Prothena Biosciences Limited Anti-tdp-43 antibodies and uses thereof
WO2025059487A2 (en) 2023-09-15 2025-03-20 Othair Prothena Limited Cell penetrating agents and uses thereof
CN122070299A (zh) 2023-09-15 2026-05-19 普罗塞纳生物科学有限公司 细胞穿透剂及其用途
WO2026029677A1 (en) 2024-08-02 2026-02-05 Erasmus University Medical Center Rotterdam Co-stimulatory t-cell receptor to treat patient with tumor or immune-related disease

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8508442D0 (en) * 1985-04-01 1985-05-09 Celltech Ltd Expression vector
US5266491A (en) * 1989-03-14 1993-11-30 Mochida Pharmaceutical Co., Ltd. DNA fragment and expression plasmid containing the DNA fragment
JP3051411B2 (ja) * 1989-03-14 2000-06-12 持田製薬株式会社 新規dnaならびにそれを含有する発現プラスミド
DE779362T1 (de) * 1989-12-22 2001-04-05 Applied Research Systems Ars Holding N.V., Curacao DNS-Konstrukten zur Aktivierung und Veränderung der Expression von endogenen Genen
US5650294A (en) * 1990-06-25 1997-07-22 Basf Aktiengesellschaft Isolated promoter and terminator of elongation factor 1-α
AU664847B2 (en) * 1991-05-15 1995-12-07 Cell Genesys, Inc. Genomic modifications with homologous DNA targeting
CA2051085C (en) * 1991-09-10 2001-08-21 Shigekazu Nagata Expression plasmids
TW402639B (en) * 1992-12-03 2000-08-21 Transkaryotic Therapies Inc Protein production and protein delivery

Also Published As

Publication number Publication date
SK11899A3 (en) 2000-05-16
PL331005A1 (en) 1999-06-21
HUP0004137A3 (en) 2003-08-28
BR9804896A (pt) 1999-08-31
US5888809A (en) 1999-03-30
SK285664B6 (sk) 2007-05-03
AU7277098A (en) 1998-11-24
JP2000513948A (ja) 2000-10-24
HUP0004137A2 (en) 2001-03-28
NO990025L (no) 1999-03-01
PL195604B1 (pl) 2007-10-31
IL127897A (en) 2005-12-18
ES2263206T3 (es) 2006-12-01
RU2249617C2 (ru) 2005-04-10
NO323853B1 (no) 2007-07-16
EP1676916A1 (en) 2006-07-05
DE69833649D1 (de) 2006-04-27
CN100430477C (zh) 2008-11-05
ATE318900T1 (de) 2006-03-15
RU2004136574A (ru) 2006-05-27
PT920498E (pt) 2006-08-31
CN1230991A (zh) 1999-10-06
CZ296544B6 (cs) 2006-04-12
EP0920498B1 (en) 2006-03-01
WO1998049289A1 (en) 1998-11-05
BR9804896B1 (pt) 2013-11-26
NO990025D0 (no) 1999-01-04
CN101570753A (zh) 2009-11-04
HU225764B1 (en) 2007-08-28
IL127897A0 (en) 1999-11-30
DE69833649T2 (de) 2006-12-28
EP0920498A1 (en) 1999-06-09
DK0920498T3 (da) 2006-07-10
HK1022719A1 (en) 2000-08-18
AU742561B2 (en) 2002-01-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU742561B2 (en) Hamster EF-1alpha transcriptional regulatory DNA
US5770421A (en) Human ALK protein tyrosine kinase
KR100996016B1 (ko) 폴리뉴클레오티드
JP2002507895A (ja) 段階的なトランス活性化能を有する転写活性化因子
WO2003038049A2 (en) Method for isolating cell-type specific mrnas
CS267192A3 (en) Expression systems
AU2009266603A1 (en) Gene of porcine alpha-s1 casein, a promoter of the same and use thereof
AU705640B2 (en) Compositions and methods for mediating cell cycle progression
CN115322993B (zh) 一种用于猪基因组定点整合外源基因的安全位点及用其构建猪育种群方法
JP2004500884A (ja) 遺伝子発現の調節方法及び手段
AU700224B2 (en) Alpha-lactalbumin gene constructs
CA2259145C (en) Hamster ef-1.alpha. transcriptional regulatory dna
KR100607527B1 (ko) 인간이 아닌 형질전이된 동물로부터의 고 전사 복합체의 정제방법
AU3200195A (en) Ikaros transgenic cells and animals
HK1022719B (en) HAMSTER EF-1α TRANSCRIPTIONAL REGULATORY DNA
US6410723B1 (en) VDUP1 promoter and methods of use thereof
HK1138320A (en) Hamster ef-1 alpha transcriptional regulation dna
US20020104112A1 (en) Ikaros regulatory elements and uses thereof
WO2004023869A1 (en) Use of plag or plag-inhibitors to diagnose and/or treat disease
AU5718500A (en) Modified mammary specific promoter

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20180501