CZ291499B6 - Způsob výroby chemických látek - Google Patents
Způsob výroby chemických látek Download PDFInfo
- Publication number
- CZ291499B6 CZ291499B6 CZ19961213A CZ121396A CZ291499B6 CZ 291499 B6 CZ291499 B6 CZ 291499B6 CZ 19961213 A CZ19961213 A CZ 19961213A CZ 121396 A CZ121396 A CZ 121396A CZ 291499 B6 CZ291499 B6 CZ 291499B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- microorganism
- target chemical
- nicotinamide adenine
- adenine dinucleotide
- transhydrogenase
- Prior art date
Links
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 42
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 39
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims abstract description 78
- 150000008575 L-amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 27
- ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N NADPH Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 ACFIXJIJDZMPPO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 48
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 45
- 229930027945 nicotinamide-adenine dinucleotide Natural products 0.000 claims description 39
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 34
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 claims description 21
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 19
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 19
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 17
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 12
- BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N nicotinamide-adenine dinucleotide Chemical compound C1=CCC(C(=O)N)=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O2)N2C3=NC=NC(N)=C3N=C2)O)O1 BOPGDPNILDQYTO-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims description 12
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 11
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 claims description 11
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 claims description 11
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 9
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 7
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- 102000000818 NADP Transhydrogenases Human genes 0.000 claims description 6
- 108010001609 NADP Transhydrogenases Proteins 0.000 claims description 6
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 claims description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 241000186254 coryneform bacterium Species 0.000 claims description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 claims description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 3
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 claims description 3
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 claims description 3
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 claims description 3
- WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N subtilin Chemical compound CC1SCC(NC2=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C(C)CC)C(=O)NC(=C)C(=O)NC(CCCCN)C(O)=O)CSC(C)C2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(NC(=O)C2NC(=O)CNC(=O)C3CCCN3C(=O)C(NC(=O)C3NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CCCCN)NC(=O)C(N)CC=4C5=CC=CC=C5NC=4)CSC3)C(C)SC2)C(C)C)C(C)SC1)CC1=CC=CC=C1 WPLOVIFNBMNBPD-ATHMIXSHSA-N 0.000 claims description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 2
- BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N NAD zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-NNYOXOHSSA-N 0.000 claims 1
- 229950006238 nadide Drugs 0.000 claims 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 10
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 abstract description 7
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 7
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 abstract description 5
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 abstract description 5
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 abstract description 5
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 abstract description 5
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 abstract description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 abstract description 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 48
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 33
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 33
- XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N NADP zwitterion Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-NNYOXOHSSA-N 0.000 description 28
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 26
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 23
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 22
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 21
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 17
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 17
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 16
- 230000006696 biosynthetic metabolic pathway Effects 0.000 description 12
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 8
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 8
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 8
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 8
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 8
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- 239000013600 plasmid vector Substances 0.000 description 8
- 101150073820 pntA gene Proteins 0.000 description 8
- 101150011666 pntB gene Proteins 0.000 description 8
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 7
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 7
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 6
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 6
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 6
- 241000186031 Corynebacteriaceae Species 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000012410 DNA Ligases Human genes 0.000 description 4
- 108010061982 DNA Ligases Proteins 0.000 description 4
- 108020001019 DNA Primers Proteins 0.000 description 4
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 4
- -1 L-amino acids Chemical class 0.000 description 4
- UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N L-homoserine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-VKHMYHEASA-N 0.000 description 4
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 4
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 4
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020003215 DNA Probes Proteins 0.000 description 3
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 3
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 3
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001851 biosynthetic effect Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 3
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 3
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 3
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 3
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 3
- DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M thiamine hydrochloride Chemical compound Cl.[Cl-].CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N DPJRMOMPQZCRJU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N -2-Amino-4-hydroxybutanoic acid Natural products OC(=O)C(N)CCO UKAUYVFTDYCKQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 2
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 2
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 2
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 2
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010061592 cardiac fibrillation Diseases 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 2
- 230000002600 fibrillogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 2
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 2
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 2
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 2
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 2
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 2
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019190 thiamine hydrochloride Nutrition 0.000 description 2
- 239000011747 thiamine hydrochloride Substances 0.000 description 2
- LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K tripotassium phosphate Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P([O-])([O-])=O LWIHDJKSTIGBAC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- BZSALXKCVOJCJJ-IPEMHBBOSA-N (4s)-4-[[(2s)-2-acetamido-3-methylbutanoyl]amino]-5-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[2-[[(2s)-1-amino-1-oxo-3-phenylpropan-2-yl]amino]-2-oxoethyl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-hydroxy Chemical compound CC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCC)C(=O)N[C@@H](CCCC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(=O)N[C@H](C(N)=O)CC1=CC=CC=C1 BZSALXKCVOJCJJ-IPEMHBBOSA-N 0.000 description 1
- KJTLQQUUPVSXIM-ZCFIWIBFSA-N (R)-mevalonic acid Chemical compound OCC[C@](O)(C)CC(O)=O KJTLQQUUPVSXIM-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-[3-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]propanoic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CC1=CC=CC(N(CCCl)CCCl)=C1 QDGAVODICPCDMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004567 6-phosphogluconate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108020001657 6-phosphogluconate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102100031126 6-phosphogluconolactonase Human genes 0.000 description 1
- 108010029731 6-phosphogluconolactonase Proteins 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004254 Ammonium phosphate Substances 0.000 description 1
- 108020004652 Aspartate-Semialdehyde Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 101000950981 Bacillus subtilis (strain 168) Catabolic NAD-specific glutamate dehydrogenase RocG Proteins 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- KJTLQQUUPVSXIM-UHFFFAOYSA-N DL-mevalonic acid Natural products OCCC(O)(C)CC(O)=O KJTLQQUUPVSXIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006820 DNA synthesis Effects 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 241000702189 Escherichia virus Mu Species 0.000 description 1
- 108700039691 Genetic Promoter Regions Proteins 0.000 description 1
- 108010018962 Glucosephosphate Dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 102000016901 Glutamate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- OYIFNHCXNCRBQI-BYPYZUCNSA-N L-2-aminoadipic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCC(O)=O OYIFNHCXNCRBQI-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 235000013878 L-cysteine Nutrition 0.000 description 1
- 239000004201 L-cysteine Substances 0.000 description 1
- BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N L-lysine hydrochloride Chemical compound Cl.NCCCC[C@H](N)C(O)=O BVHLGVCQOALMSV-JEDNCBNOSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WAEMQWOKJMHJLA-UHFFFAOYSA-N Manganese(2+) Chemical compound [Mn+2] WAEMQWOKJMHJLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700010674 N-acetylVal-Nle(7,8)- allatotropin (5-13) Proteins 0.000 description 1
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 1
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 229930003451 Vitamin B1 Natural products 0.000 description 1
- BAWFJGJZGIEFAR-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3s,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)O[P@@](O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 BAWFJGJZGIEFAR-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 229910000148 ammonium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019289 ammonium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019730 animal feed additive Nutrition 0.000 description 1
- 101150076125 aroG gene Proteins 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000035 biogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012824 chemical production Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 210000000349 chromosome Anatomy 0.000 description 1
- YSYKRGRSMLTJNL-URARBOGNSA-N dTDP-alpha-D-glucose Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)C1 YSYKRGRSMLTJNL-URARBOGNSA-N 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N diammonium hydrogen phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].OP([O-])([O-])=O MNNHAPBLZZVQHP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- 230000009109 downstream regulation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 238000012215 gene cloning Methods 0.000 description 1
- 230000004153 glucose metabolism Effects 0.000 description 1
- 235000013928 guanylic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 1
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000013902 inosinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 1
- 229960005337 lysine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 229910001437 manganese ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 101150023849 pheA gene Proteins 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000160 potassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011009 potassium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000002987 primer (paints) Substances 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000006722 reduction reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000012827 research and development Methods 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 1
- 235000013599 spices Nutrition 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000011426 transformation method Methods 0.000 description 1
- 239000011691 vitamin B1 Substances 0.000 description 1
- 235000010374 vitamin B1 Nutrition 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/848—Escherichia
- Y10S435/849—Escherichia coli
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Produkce c lov²ch chemick²ch l tek, jako jsou L-aminokyseliny, antibiotika, vitaminy, r stov faktory a fyziologicky aktivn slou eniny, kter jsou vytv °eny kvaÜen m za pou it mikroorganismu, je zlepÜov na zv²Üen m produkce redukovan ho nikotinamidadenindinukleotidfosf tu v bu k ch mikroorganismu.\
Description
Způsob výroby chemických látek
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká způsobu výroby cílové chemické látky za použití mikroorganismu. K typickým příkladům mikroorganismů, používaných v předkládaném vynálezu, patří mikroorganismy, náležející do rodu Escherichia a koryneformní bakterie, které byly již běžně používané k výrobě různých sloučenin. K cílovým chemickým látkám zde vyráběným patří L-aminokyseliny, antibiotika, vitaminy, růstové faktoiy, fyziologicky aktivní látky a jiné látky, obecně produkované mikroorganismy. Tato přihláška předkládá způsob, zlepšující produktivitu postupu výroby cílové chemické látky za použití mikroorganismů.
Dosavadní stav techniky
Kvašení L-aminokyselin je typicky doloženo jako dobře známý způsob výroby cílové chemické látky za použití mikroorganismu. L-aminokyseliny se používají nejen do koření a jídel, ale také jako složky různých léčebných výživných směsí, jako přídavky krmných směsí pro zvířata, činidla ve farmaceutickém a chemickém průmyslu a dále jako růstové faktory k výrobě L-aminokyselin, jako je L-lysin a L-homoserin za použití mikroorganismu.
Koryneformní bakterie, mikroorganismy patřící do rodů Escherichia, Bacillus, Serratia a podobně, jsou známé jako mikroorganismy, jichž lze použít ke kvasné výrobě L-aminokyselin.
Ke kvasné výrobě L-aminokyselin lze použít divoké typy bakterií (kmeny divokých typů), auxotrofní kmeny indukované z kmenů divokého typu, metabolické regulační mutanty indukované z kmenů divokého typu jako mutanty odolné vůči růžným léčivům, a kmeny, mající vlastnosti jak auxotrofních kmenů, tak i metabolických regulačních mutantů. Sloučeniny, vyžadované auxotrofními kmeny, se liší v závislosti na jednotlivých kmenech a auxotrofní kmeny, které vyžadují shodné sloučeniny, se liší stupněm auxotrofie. Podobně vykazují odlišnosti i metabolické regulační mutanty, získané jako mutanty, odolné vůči různým léčivům.
V nedávné době byla pro kvašení (fermentací) L-aminokyselin používána technika rekombinantní DNA. Teoretický základ této techniky spočívá v posílení biosyntetického systému L-aminokyseliny v hostitelském mikroorganismu obohacením genu(ů), kódujících enzym(y) biosyntézy L-aminokyseliny. Podrobnosti takové techniky jsou popsány například v práci „Amino Acid Fermentation, Society Přes Japan (1986)“.
Ovšem mikroorganismy, běžně používané v kvasné výrobě L-aminokyselin, vykazují biosyntetické dráhy, zahrnující dráhy biosyntézy L-aminokyseliny a dráhy biosyntézy koenzymů, shodné s těmi, které se vyskytují u mikroorganismů divokého typu. Mikroorganismy produkující L-aminokyseliny byly namnoženy desenzitizací inhibice konečným produktem nebo jiným produktem, existujícím v biosyntetické dráze L-aminokyseliny. K dosažení takového namnožení bylo použito například poskytnutí auxotrofních vlastností či odolnosti vůči lékům buňkám mikroorganismu, nebo zmnožení genu(ů), kódujícího biosyntetický enzym (enzym) technikou rekombinace DNA.
Kvašením pomocí mikroorganismů lze vyrábět mnoho sloučenin, odlišných od L-aminokyselin. Jako příklady takových sloučenin jsou uváděny vitaminy a antibiotika. Existuje mnoho typů antibiotik a jako prekurzorů biosyntézy takových antibiotik se používá množství látek. Například se používají cukry, aminokyseliny, kyselina octová, kyseliny propionová a mevalonová. Cílové antibiotikum je z takových prekurzorů vyráběno postupem konverze (přeměny) různých metabolitů, odlišných od prekurzorů. Stejný mechanismus je pozorován u vitaminů a jiných biogenních sloučenin.
Při výrobě výše zmíněných sloučenin za použití mikroorganismu je každá sloučenina vyráběna biosyntetickou dráhou v buňkách mikroorganismu. Jedním z důležitých koenzymů, nezbytným pro účinné fungování odpovídajících enzymů biosyntetického systému, je redukovaný „nikotinamidadenindinukleotidfosfát“, uváděný zde dále jako NADPH. Ovšem vztah mezi NADPH a produkcí sloučenin za použití mikroorganismu nebyl popsán.
Enzym nikotinamiddinukleotidtranshydrogenáza, dále zde pro zjednodušení uváděný jako „transhydrogenáza“, je známý jako jeden z enzymů, které odpovídají za produkci NADPH. Je známo, že tento enzym je přítomný v různých organismech včetně mikroorganismů, patřících k rodu Escherichia. V Escherichia coli, typickém mikroorganismu patřícím do rodu Escherichia, bylo provedeno vyčištění transhydrogenázy (David M. Clarke a Philip D. Bragg; Eur.
J. Biochem. 149, 517-523, 1985) klonování genu, který ji kóduje (David M. Clarke a Philip
D. Bragg; J. Bacteriology 162, 367-373, 1985), a stanovení sekvence nukleotidů genu) David M. Clarke, Tip W. Loo, Shirley Gillam a Philip D. Bragg; Eur. J. Biochem. 158, 647-653, 1986), stejně jako byla potvrzena (ozřejměna) existence enzymu. Fyziologická funkce enzymu je však stále téměř neznámá. To typicky ukazuje skutečnost, že defektní varianty enzymu nevykazují žádnou fenotypovou expresi.
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je zlepšit produktivitu výroby cílové chemické látky za použití mikroorganismu, zahrnující kroky kultivace mikroorganismu v kultivačním médiu k umožnění produkce cílové sloučeniny a její akumulace v kultivačním médiu, a shromažďování cílové sloučeniny z kultivačního média.
Produktivita výroby cílové chemické látky byla běžně zvyšována desenzitizací zpětné regulace syntézy konečným produktem (produkty nebo podobnými látkami, vyráběnými biosyntetickou cestou (dráhou) cílové sloučeniny a koenzymu, vyžadovaného pro syntézu cílové chemické látky, která existuje v buňkách mikroorganismu. Konkrétním předmětem předkládaného vynálezu je zajištění prostředků ke zlepšení produktivity výroby cílové chemické látky podle zcela nové teorie, lišící se od teorie, která byla uvedena výše.
Při biosyntéze sloučenin, jako jsou L-aminokyseliny, dochází v živoucím organismu k různým redukčním reakcím. Koenzym NADPH je v mnoha případech fyziologicky používán jako intravitální redukční sloučenina. Enzym glutamátdehydrogenáza například vyžaduje NADPH jako koenzym při biosyntéze kyseliny L-glutamové. Aspartátsemialdehyddehydrogenáza a dihydrodipikolátreduktáza vyžaduje NADPH jako koenzym při biosyntéze L-lysinu.
NADPH má jako koenzym důležitou roli i u jiných cest biosyntézy L-aminokyselin. Kyselina L-glutamová je navíc nezbytná jako donor aminové skupiny u mnoha cest biosyntézy L-aminokyselin a proto jek zabezpečení aminoskupin pro biosyntézu L-aminokyselin vyžadován rovněž NADPH.
NADPH se převážně připravuje využitím metabolismu glukózy v pentózofosfátovém cyklu, v němž jsou obsaženy enzymy glukóza-6-fosfátdehydrogenáza a fosfoglukonátdehydrogenáza. V pentózofosfátovém cyklu lze vypočítat, že účinnost produkce NADPH činí 12 molekul na jednu molekulu glukózy za uvolnění oxidu uhličitého.
Redukovaný nikotinamidadenindinukleotid, dále zde uváděný jako NADH, je molekulou extrémně podobnou NADPH, která však ve většině případů nemůže být využívána pro biosyntézu L-aminokyselin jako koenzym. NADH je biosyntetizován v cyklu TCA (citrátovém cyklu) a v buňce je obvykle přítomno jeho dostatečné množství.
-2CZ 291499 B6
Stejně jako u cest biosyntézy L-aminokyselin, jsou v postupu biosyntézy požadovaných
L-aminokyselin z glukózy často produkovány intravitální složky, které nemohou být účinně upotřebeny. Předpokládá se, že takové složky jsou běžně oxidovány v citrátovém cyklu, čímž je vytvářeno velké množství NADH.
Autoři tohoto vynálezu stanovili hypotézu, že během produkce cílové chemické látky ve výrobním postupu za využití mikroorganismu je vyžadováno velké množství NADPH, k doplňování NADPH je nezbytně spotřebovávána glukóza a následně se snižuje produktivita výroby cílové sloučeniny v poměru ke spotřebovanému cukru (hypotéza 1).
Autoři tohoto vynálezu dále stanovili hypotézu, že intravitální složky, které nemohou být účinně využity během produkce cílové chemické látky, jsou nevyhnutelně v procesu výroby cílové chemické látky pomocí mikroorganismu akumulovány a metabolizovány v citrátovém cyklu, výsledkem čehož je zvýšení koncentrace NADH v buňce (hypotéza 2).
Na základě výše popsaných hypotéz 1 a 2 se předpokládá, že pokud může být intracelulámí NADH účinně přeměňován na NADPH, může být cukr, vyžadovaný pro biosyntézu NADPH pomocí mikroorganismu, zachován a cílová chemická látka může být vyráběna s vyšší produktivitou. Současně se předpokládá, že transhydrogenáza může být použita jako prostředek pro konverzi (přeměnu) NADH, vznikajícího v citrátovém cyklu, na NADPH.
Autoři vynálezu provedli studie na základě výše uvedeného konceptu. Výsledkem důkladných studií byl úspěch autorů vynálezu v tom, že fragment DNA, obsahující gen transhydrogenázy, byl získán z bakterie patřící do rodu Escherichia, a schopnost mikroorganismu produkovat redukovaný nikotinamidadenindinukleotidfosfát byla použitím fragmentu DNA zvýšena. Autoři vynálezu dále zjistili, že produktivita výroby cílové chemické látky se u výše uvedených mikroorganismů, majících zvýšenou schopnost produkovat NADPH, zlepšuje.
Předkládaný vynález jmenovitě obsahuje:
(1) způsob výroby cílové sloučeniny za použití mikroorganismu, zahrnující kroky: kultivace mikroorganismu v kultivačním médiu k umožnění produkce cílové chemické látky a její akumulace v kultivačním médiu; a shromažďování cílové chemické látky z kultivačního média, přičemž uvedený mikroorganismus byl modifikován tak, aby schopnost uvedeného mikroorganismu produkovat redukovaný nikotinamidadenindinukleotidfosfát z redukovaného nikotinamidadenindinukleotidu byla zvýšena, čímž je zvýšena produktivita uvedeného mikroorganismu vzhledem k redukovanému nikotinamidadenin dinukleotidfosfátu;
(2) způsob podle (1), kde cílovou chemickou látkou je chemická látka, jejíž biosyntéza vyžaduje redukovaný nikotinamidadenin dinukleotidfosfát;
(3) způsob podle (1), kde cílovou chemickou látkou je L-aminokyselina;
(4) způsob podle (2), kde L-aminokyselina je zvolena ze skupiny, skládající se z L-threoninu, L-lysinu, kyseliny L-glutamové, L-leucinu, L-izoleucinu, L-valinu a L-phenylalaninu;
(5) způsob podle (1) či (2), kde mikroorganismem je mikroorganismus, patřící do rodu Escherichia;
(6) způsob podle (1) či (2), kde mikroorganismem je koryneformní bakterie;
(7) způsob podle kteréhokoli z bodů (1) až (6), kde zvýšení produkce redukovaného nikotinamidadenindinukleotidfosfát (NADPH) mikroorganismem je dosaženo zvýšením enzymové aktivity nikotinamidnukleotidtranshydrogenázy v buňkách mikroorganismu;
-3CZ 291499 B6 (8) způsob podle (7), kde zvýšení produkce redukovaného nikotinamidadenindinukleotidfosfát (NADPH) mikroorganismem je dosaženo zvýšením množství exprimovaného genu, kódujícího nikotinamidnukleotidtranshydrogenázy v buňkách mikroorganismu; a (9) způsob podle (8), kde zvýšení produkce redukovaného nikotinamidadenindinukleotidfosfátu (NADPH) mikroorganismem je dosaženo zvýšením počtu kopií genu, kódujícího nikotinamidnukleotidtranshydrogenázu v buňkách mikroorganismu.
Cílovou chemickou látkou, která má být produkována mikroorganismem podle tohoto vynálezu, jsou různé aminokyseliny, jako L-threonin, L-lysin, kyselina L-glutamová, L-leucin, L-izoleucin, L-valin a L-fenylalanin. Z jiných látek než jsou výše uvedené může být za předpokladu, že je při její biosyntéze požadován NADPH, použitelná jakákoli z látek, které byly až dosud produkovány mikroorganismy, jako jsou nukleové kyseliny jako kyselina guanylová a inosinová, vitaminy, antibiotika, růstové faktory a fyziologicky aktivní sloučeniny.
Dále je nutno říci, že i v případě, kdy sloučenina dosud nebyla vyráběna za použití mikroorganismu, lze aplikovat předkládaný vynález za předpokladu, že je k jeho biosyntéze vyžadován NADPH.
Například při biosyntéze streptomycinu je NADPH používán k syntéze dTDP-4-oxo-4,6-dideoxy-D-glukózy z dTDP-glukózy. Aminokyseliny navíc slouží jako prekurzory v případě peptidových antibiotik, a NADPH je tedy k jejich biosyntéze vyžadován jako samozřejmý materiál. Prekurzory penicilinu, beta-laktamového antibiotika, jsou L-valin, L-cystein a kyselina L-alfa-aminoadipová a k jejich syntéze je vyžadován NADPH.
Pokud je třeba vědět, jaká sloučenina vyžaduje ke své biosyntéze NADPH, může být tato skutečnost zjištěna z dráhy její biosyntézy, pokud byla tato biosyntetická dráha již objevena.
Mikroorganismus pro použití v tomto vynálezu není speciálně vymezen, za předpokladu, že patří k mikroorganismům, které byly až dosud používány k produkci sloučenin, jako jsou bakterie patřící krodu Escherichia, koiyneformní bakterie, bakterie patřící krodu Bacillus a bakterie patřící k rodu Serratia.
Přednost se dává takovému mikroorganismu, u něhož lze získat fragment DNA, obsahující začátek replikace plazmidu a funkce genu transhydrogenázy a počet kopií transhydrogenázového genu mohou být zvýšeny. Na druhé straně se jako kmenu, který je používán pro zlepšení produktivity výroby podle tohoto vynálezu, dává největší přednost kmenu, který má původní (vrozenou) schopnost vytvářet cílovou sloučeninu. Předpokládá se, že u kmenu s vysokou produktivitou se účinek zlepšení produktivity podle tohoto vynálezu projeví velmi silně, neboť jevy podle výše popsaných hypotéz 1 a 2 silně působí.
Příkladem jsou kmen Escherichia coli B-3996 a podobné pro cílovou sloučeninu L-threonin, kmen Escherichia coli AJ12604 (FERM BP-3597) a podobné pro cílovou sloučeninu L-fenylalanin, kmen Escherichia coli AJ12624 FERM BP-3853) a podobné pro cílovou sloučeninu kyselinu L-glutamovou a Brevibacterium lactofermentum AJ3990 (FERM P-3387, ATCC 3129) a podobné pro cílovou sloučeninu L-lysin.
Žádné obtíže nenastávají s médiem, používaným k výrobě cílové chemické látky, pokud se v závislosti na zvoleném mikroorganismu používá dobře známé, až dosud používané médium. Vhodné je zejména obyčejné médium, obsahující zdroj uhlíku, zdroj dusíku, anorganické ionty a podle volby další organické složky. K uskutečňování předkládaného vynálezu není potřebné žádné speciální médium.
-4CZ 291499 B6
Pokud se týká zdroje uhlíku, je možné použít cukry jako glukózu, laktózu, galaktózu, fruktózu a škrobový hydrolyzát; alkoholy jako glycerol a sorbitol; a organické kyseliny jako je kyselina fumarová, kyselina citrónová a kyselina jantarová a podobně.
Jako zdroj dusíku je možné použít anorganické amonné soli jako je sulfát amonný, chlorid amonný a fosfát amonný; organický dusík jako hydrolyzát ze sojových bobů; plynný čpavek a čpavkovou vodu.
Je žádoucí, aby jako organické stopové výživné zdroje byly v médiu v příslušných množstvích obsaženy látky jako vitamin Bl, L-homoserin a L-tyrosin; nebo kvasničný extrakt. Kromě výše uvedených se volitelně přidávají malá množství fosfátu draselného, sulfátu hořečnatého, iontu železa, iontu manganu a podobně.
Kultivace se může provádět za dobře známých, až dosud používaných podmínek, které závisejí na použitém mikroorganismu. Přednost se dává zvláště provádění kultivace po dobu 16-120 hodin za aerobních podmínek. Teplota kultivace je udržována mezi 25 až 40 °C a pH je během kultivace udržováno v rozmezí 5-8. Občas mohou být pro úpravu pH použity anorganické či organické kyselé nebo alkalické sloučeniny.
V předkládaném vynálezu se nevyžaduje žádná speciální metoda pro shromáždění metabolického produktu z kapaliny média po skončení kultivace. Předkládaný vynález může být prováděn zejména spojením běžných, dobře známých metod, jako je metoda iontově výměnné pryskyřice, s metodami srážení a podobně.
Prostředky ke zvýšení produkce NADPH mikroorganismem jsou představovány prostředky pro zvýšení enzymové aktivity transhydrogenázy v mikrobiálních buňkách.
Prostředky pro zvýšení enzymové aktivity transhydrogenázy jsou představovány prostředky ke zvýšení množství exprimovaného transhydrogenázového genu v mikrobiálních buňkách. Jiným prostředkem ke zvýšení enzymové aktivity transhydrogenázy je dále modifikace transhydrogenázového genu a vytvoření transhydrogenázy se zvýšenou aktivitou.
Příkladem prostředků pro zvýšení množství exprimovaného transhydrogenázového genu v mikrobiálních buňkách jsou prostředky ke zvýšení počtu kopií transhydrogenázového genu v mikrobiálních buňkách.
Ke zvýšení počtu kopií transhydrogenázového genu je nezbytný fragment DNA, obsahující výše uvedený gen. Transhydrogenázový gen byl klonován u kmene Escherichia coli K-12 jako bakterie, patřící do rodu Escherichia, a byla stanovena jeho nukleotidové sekvence (D. M. Clarke se spol.; Eur. J. Biochem. 158, 647-653, 1986). Příprava fragmentu DNA, obsahujícího výše uvedený gen, je tedy dosažitelná za použití metody, objevené D. M. Clarkem a spoluautory. Požadovaný fragment DNA může být získán také hybridizační metodou za použití sondy syntetické DNA, připravené podle nukleotidové sekvence, objevené D. M. Clarkem a spoluautory, a metodou PCR za použití syntetizovaných primerů (oček, startérů) DNA, připravených vzhledem kvýše uvedené nukleotidové sekvenci. Pokud je fragment DNA, obsahující transhydrogenázový gen, spojen s DNA vektoru autonomně replikovatelné v cílovém mikroorganismu a je provedena inzerce (vložení) do výše zmíněného mikroorganismu, je možné zvýšit počet kopií transhydrogenázového genu.
DNA primer, používaný během klonování transhydrogenázového genu z bakterie, patřící k rodu Escherichia, za použití metody PCR, může být vhodně připraven například na základě známé sekvence z Escherichia coli (D. M. Clarke se spol.; Eur. J. Biochem. 158, 647-653, 1986). Transhydrogenáza obsahuje dvě podjednotky a tak může být nezbytné amplifikovat oba geny pntA a pntB každé z podjednotek. Vhodné jsou dva primery, 5'-CTGATTTTTGGATCCAGATCACAG-3' (sekvence identifik. číslo 1) a 5 -CGTTCTGTTAAGCTTTCTCAATAA-3'
-5CZ 291499 B6 (sekvence id. č. 2), které mohou amplifikovat (rozšířit) oblast o rozsahu 3 kilobází (kb), obsahující jak geny pntA, tak i pntB. Tyto primery jsou slabě odlišné od sekvence, popsané
D. M. Clarkem a spoluautory. Ovšem vzhledem ke změně sekvence je možné zavést místo štěpení účinkem BamHI protisměrně vzhledem k oběma genům, pntA i pntB, a místo štěpení účinkem Hindlll po směru vzhledem k oběma genům, pntA i pntB. Ani místo pro BamHI, ani místo pro Hindm neexistují v obou genech, ani v jejich blízkosti. Hodí se proto v průběhu klonování amplifikovaného fragmentu DNA za pomoci těchto restrikčních enzymů a při transferu do jiné vektorové DNA. Syntéza příměrové DNA může být prováděna obvyklou metodou za použití přístroje DNA Synthesizer Model 380B, vyráběného firmou Applied Biosystems, a použitím fosfoamiditové metody (vit Tetrahedron Letters 22, 1859, 1981). Metoda PCR může být prováděna za použití přístroje DNA Thermal Cycler Model PJ2000, vyráběného firmou Takara Shuzo Co., Ltd., a za použití Taq DNA polymerázy podle metody, popsané výrobcem.
Fragment DNA, obsahující transhydrogenázový gen, může být získán z jiných mikroorganismů než jsou bakterie, náležející k rodu Escherichia. Požadovaný fragment DNA může být získán použitím metody hybridizace za použití sondy syntetické DNA, připravené jako odpovídající nukleotidové sekvenci, objevené D. M. Clarkem a spoluautory, nebo použitím metody PCR za použití primerů syntetické DNA, připravené jako odpovídající výše uvedené sekvenci nukleotidů.
DNA sonda pro použití při hybridizační metodě nebo DNA primery pro použití v klonování genu za použití metody PCR mohou být vhodně připraveny například na základě sekvence, známé z Escherichia coli (D. M. Clarke se spol.; Eur. J. Biochem. 158, 647-653,1986). Je stanoveno, že nukleotidové sekvence genu je pro každý mikroorganismus odlišná. Je tedy žádoucí připravit syntetické DNA, obsahující části, konzervující transhydrogenázy, z každého mikroorganismu.
Transhydrogenázový gen, amplifikovaný (zmnožený) metodou PCR, je při zavádění do bakterie zrodu Escherichia spojen s vektorovou DNA, autonomně replikovatelnou v buňkách bakterie patřící k rodu Escherichia, a zaveden do buněk bakterie, patřící k rodu Escherichia.
V případě zavedení získaného fragmentu DNA s obsahem transhydrogenázového genu do jiného mikroorganismu, než jsou bakterie rodu Escherichia, je výše uvedený fragment spojen s DNA vektoru, autonomně replikovatelnou v buňkách mikroorganismu, podrobeného zavedení (introdukci) výše zmíněného fragmentu DNA, a zaveden do výše uvedených buněk.
DNA plazmidového vektoru je s výhodou schopna použití v předkládaném vynálezu jako DNA vektoru, příkladem kterého jsou pUC19, pUC18, pBR322, pHSG299, pHSG399, RSF1010 a podobně. Z jiných než jsou výše uvedené jsou dostupné rovněž vektory fágové DNA. K účinnému dosažení exprese transhydrogenázy je možné použít také promotor, schopný pracovat v mikroorganismu, jako lac, trp či PL promotor. Navíc pro zvýšení počtu kopí transhydrogenázového genu může být DNA, obsahující výše uvedený gen, začleněna (integrována) do chromozomu metodou, používající transposon (D. E. Berg a C. M. Berg; Bio/Technol. 1, 417,
1983), fága Mu (Japonský patent sč. zveřejnění 2109985), nebo homologní rekombinací (Experiments in Molecular Genetics, Cold Spring Harbor Lab., 1972).
Pokud je mikroorganismem, do kterého se zavádí gen, koiyneformní bakterie, je DNA vektorem, který lze použít v tomto vynálezu, plazmidový vektor, autonomně replikovatelný v koryneformní bakterii, jako pAM330 (viz japonský patentový spis číslo 1-11280) a pHM1519 (viz japonský patent s č. zveřejnění 58-77895).
Pro výběr kmene, majícího aktuálně zvýšenou enzymovou aktivitu transhydrogenázy, z příslušných kmenů, u kterých je zvýšení enzymové aktivity transhydrogenázy možné, lze použít například známou metodu (D. M. Clarke a P. D. Bragg, Joumal of Bacteriology 162, 367-373, 1985) jako způsobu potvrzení zvýšení enzymové aktivity transhydrogenázy.
-6CZ 291499 B6
Přehled obrázků na výkresech
Obrázek 1 ukazuje přípravu plazmidu pMW::THY z chromozomální DNA a plazmidového vektoru pMW118.
Obrázek 2 ukazuje přípravu plazmidu pHSG::THYB z plazmidu pMW::THY a plazmidového vektoru pHSG399.
Obrázek 3 ukazuje přípravu plazmidu pSU::THY z plazmidu pMW::THY a plazmidového vektoru pSU18.
Nejlepší způsob provádění vynálezu: předkládaný vynález bude dále konkrétněji vysvětlen vzhledem k příkladům.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Klonování transhydrogenázového genu
Nukleotidové sekvence genů pntA a pntB, které kódují transhydrogenázu v Escherichia coli, byly stanoveny již dříve (D. M. Clarke se spol.; Eur. J. Biochem. 158, 647-653, 1986) a bylo uvedeno, že pntA a pntB kódují bílkoviny o 502 aminokyselinových zbytcích a o 462 aminokyselinových zbytcích. Rovněž bylo známo, že obě z výše uvedených bílkovin jsou vyžadovány pro expresi enzymové aktivity transhydrogenázy, že oba geny, pntA i pntB, jsou umístěny v sériích na chromozomální DNA a že tedy oba geny mohou být klonovány najeden fragment DNA.
Pro příhodnost v následných operacích autoři vynálezu současně klonovali nejen oba geny, pntA i pntB, ale i oblast umístěnou protisměrně od těchto genů, která má promotorovou aktivitu. Konkrétně byl fragment DNA, obsahující tyto geny a oblast promotoru, amplifikován metodou PCR k jeho klonování.
Dva syntetické oligonukleotidy o sekvenci 5'-CTGATTTTTGGATCCAGATCACAG-3' (sekvence o id. č. 2) byly syntetizovány běžným postupem jako primery pro metodu PCR. Jako templátová DNA pro metodu PCR byla připravena DNA celkového genomu Escherichia coli K-12 MC 1061 metodou Saitoha a Miuiy (Biochem. Biophys. Acta 72, 619, 1963). Fragment cílové DNA byl amplifikován pomocí PCR za použití dvou příměrových oligonukleotidů a templátové chromozomální DNA podle metody Erlicha a spoluautorů (PCR Technology, Stockton press 1989). Syntetické DNA, použité jako primery, měly nukleotidové sekvence s malou odlišností v příslušných centrálních částech fragmentů syntetické DNA oproti nukleotidové sekvenci, popsané D. M. Clarkem a spoluautory. Účelem je zavedení místa pro štěpení BamHI a místa pro štěpení Hindlll do struktury syntetických oligonukleotidů. Místa štěpení restrikčním enzymem jsou nutná pro inzerci amplifikovaného fragmentu DNA do vektorové DNA. Zavedení restrikčních míst vyvolává nevhodné spojení mezi primeiy a chromozomální DNA v průběhu PCR. Nevhodné spojení však neovlivnilo amplifikací DNA v PCR, neboť restrikční místa byla umístěna v centrálních částech fragmentu syntetické DNA. Amplifikace fragmentu o velikosti 3,0 kilobází (kb) byla potvrzena elektroforézou v agarovém gelu.
Amplifikovaný fragment DNA o velikosti 3,0 kb a plazmidový vektor pMW118, mající markér odolnosti vůči ampicilinu (dostupný od firmy Nippon Gene lne.) byl natráven BamHI a HindUI. Jak natrávený fragment DNA, tak i vektorová DNA byly k přípravě rekombinantní DNA spojeny pomocí DNA ligázy. Výsledný rekombinantní plazmid byl pojmenován pMW::THY (viz obr. 1).
-7CZ 291499 B6
Escherichia coli JMI09 (dostupná od firmy Takara Shuzo Co., Ltd.) byla transformována plazmidem pMW::THY a získána byla transformantní Escherichia coli JM109 (pMW::THY). Enzymová aktivita transhydrogenázy, vyskytující se v roztoku buněčného extraktu jak Escherichia coli JMI09, tak i Escherichia coli JMI09 (pMW::THY), byla měřena známou metodou (D. M. Clarke a P. D. Bragg, J. Bacteriology 162, 367-373, 1985). Výsledek je uveden v tabulce 1.
Tabulka 1
| kmeny | JMI 09 | JM109 (pMW::THY) |
| spec, aktivita transhydrogenágy (U/mg bílkoviny) | 1,0 | 1,7 |
Jak je znázorněno v tabulce 1, je zřejmé, že Escherichia coli JM109 (pMW::THY) měla vyšší enzymovou aktivitu transhydrogenázy než Escherichia coli JM109. Výsledkem bylo ověřeno, že fragment DNA, zavedený do plazmidů pMW::THY, zahrnuje transhydrogenázový gen. Escherichia coli, která je hostitelem plazmidů pMW::THY, byla označena jako kmen AJ12922. Kmen AJ12992 byl uložen v Národním ústavu biologických věd a lidské techniky, Agentura průmyslové vědy a techniky, Ministerstvo mezinárodního obchodu a průmyslu (National Institute of Bioscience and Technology, Agency of Industrial Science and Technology, the Ministry of Intemational Trade and Industry) (1-3, Higashi 1-chome, Tsukuba-shi, Ibaraki-ken, Japonsko, kód 305) 4. října 1993 pod přírůstkovým číslem FERM P-13890, 14. října 1994 byl převeden z původního uložení na mezinárodní uložení na základě Budapešťské dohody a uložen pod číslem FERM BP-4798.
DNA plazmidů pMW::THY byla připravena běžnou metodou a natrávena BamHI a HindlU k izolování fragmentu DNA o 3,0 kg, obsahujícího transhydrogenázový gen. Plazmidový vektor pHSG399, mající markér odolnosti vůči chloramfenikolu (dostupný od firmy Takara Shuzo Co., Ltd.), byl rozštěpen pomocí BamHI a HindUI a byl izolován rozměrnější fragment. Pak byly fragment DNA s obsahem transhydrogenázového genu a objemnější fragment BamHI-Hindin z pHSG399 spojeny DNA ligázou k získání plazmidů pHSG::THY.
Plazmid pHSG::THY se může autonomně replikovat v buňkách mikroorganismů, patřících mezi Escherichia, ale není stabilně uchováván v buňkách koryneformních bakterií. Replikační počátek, získaný z autonomně replikovatelného plazmidů, odvozeného z koryneformní bakterie, byl tedy zaveden do plazmidů pHSG::THY.
Plazmid pHM1519, autonomně replikovatelný v buňkách koryneformní bakterie (viz Japonský patent o č. zveřejnění 58-77895) byl štěpen restrikčním enzymem BamHI k získání fragmentu DNA o velikosti 3,0 kb, obsahujícího počáteční místo replikace. Na druhé straně byl plazmid pHSG::THY štěpen BamHI k získání fragmentu DNA. Oba fragmenty DNA byly spojeny DNA ligázou k přípravě plazmidů pHSG::THY (Obr. 2). Escherichia coli, která je hostitelem plazmidů pHSG::THYB, byla označena jako kmen AJ12872. Kmen AJ12872 byl uložen v Národním ústavu biologických věd a lidské techniky, Agentura průmyslové vědy a techniky, Ministerstvo mezinárodního obchodu a průmyslu, 4. října 1993 pod přírůstkovým číslem FERM P-13889,
14. září 1994 byl převeden z původního uložení na mezinárodní uložení na základě Budapešťské dohody a uložen pod číslem FERM BP-4797.
Dále byl plazmid pSU18, který je autonomně replikovatelný v buňkách bakterií, patřících k rodu Escherichia, a mající markér odolnosti vůči kanamycinu (Borja, Bartolome a spolupracovníci, Gene 102, 75-78, 1991) rozštěpen restrikčními enzymy BamHI a HindlU k získání objemnějšího fragmentu. Tento objemnější fragment byl za použití DNA ligázy spojen s fragmentem DNA o 3,0 kb, obsahujícím výše popsaný transhydrogenázový gen k přípravě plazmidů pSU::THY (Obr. 3). Kmen Escherichia coli, který hostí pSU::THY, byl označen jako kmen AJ12930. Tento kmen AJ 12930 byl uložen v Národním ústavu biologických věd a lidské techniky, Agentura pro
-8CZ 291499 B6 pěstování průmyslových mikroorganismů, Agentura průmyslové vědy a techniky, Ministerstvo mezinárodního obchodu a průmyslu, 4. října 1993 pod přírůstkovým číslem FERM P—13891,
14. září 1994 byl převeden z původního uložení na mezinárodní uložení na základě Budapešťské dohody a uložen pod číslem FERM BP—4799.
Ovlivnění produktivity tvorby různých L-aminokyselin v buňkách bakterie, patřící krodu Escherichia, a v buňkách koryneformní bakterie zvýšením transhydrogenázové aktivity byly potvrzeno u obou bakterií.
Příklad 2
Kvasná výroba L-threoninu u kmene se začleněnou transhydrogenázou
Jako L-threonin produkující bakterie Escherichia coli vykazuje kmen B-3996 (viz Japonský patent s č. zveřejnění 3-501682 (PCT)) nejvyšší produkční schopnost ze všech až dosud známých. Proto byl kmen B-3996 použit jako hostitel pro stanovení účinku zesílení transhydrogenázy. Kmen B-3996 nese plazmid pVIC40 (vytištěný spis mezinárodní přihlášky WO 90/04 636), který byl získán inzercí threoninového operonu do vektoru plazmidu pAYC32 s širokým hostitelským rozmezím, nesoucího markér odolnosti vůči streptomycinu (A. Y. Chistoserdov a Y. D. Tsygankov, Plasmid 16, 161—167, 1986). Kmen B-3996 byl uložen ve Výzkumném ústavu pro genetiku a pěstování průmyslových mikroorganismů pod přírůstkovým číslem RIA 1867.
Plazmid pMW::THY byl získán z Escherichia coli AJ12929, získané v příkladu 1, metodou Maniatise a spoluautorů (J. Sambrook. E. F. Fritsch a T. Maniatis; Molecular Cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1., 21, 1989). Získaný pMW::THY plazmid byl zaveden do kmene B-3996 metodou D. M. Morrisona (Methods in Enzymology 68, 326, 1979). Kmen B-3996, transformovaný pMW::THY, byl označen jako kmen B-3996(pMW::THY). Kmeny B-3996 a B-3996(pMW::THY) byly kultivovány za následujících podmínek.
Kultivace byla prováděna 38 hodin pri teplotě 37 °C za míchání rychlostí 114-116 otáček za minutu v médiu o složení, udaném v tabulce 2. V tabulce 2 byly složky A, B a C připraveny odděleně, sterilizovány a ochlazeny, aby byly smíšeny za použití 16/20 objemu složky A, 4/20 objemu složky B a 30 g/1 složky C. Výsledky kultivace jsou uvedeny v tabulce 3. Bylo zjištěno, že zlepšení produktivity tvorby L-threoninu bylo dosaženo zvýšením intracelulámí aktivity transhydrogenázy u bakterie, produkující L-threonin, patřící k rodu Escherichia.
| Tabulka 2: Médium k produkci threoninu | (g/D |
| (A) (NH4)2SO4 kh2po4 MgSO4.7H2O FeSO4.7H2O MnSO4.5H2O kvasničný extrakt (Difco) L-Met pH upraveno na 7,0 pomocí KOH, autoklávováno lOminut při teplotě 115 °C (B) 20% glukóza | 16 1 1 0,01 0,01 2 0,5 (16/20 objemu) |
| autoklávována 10 minut při teplotě 115 °C (C) CaCO3 dle lékopisu autoklávován 2 dny při teplotě 180 °C | (4/20 objemu) (30 g/1) |
-9CZ 291499 B6
Antibiotika (streptomycin: 100 gg/mí, kanamycin: 5 pg/ml)
Tabulka 3
| kmeny | B-3996 | B-3996 (pMW::THY) |
| threonin (g/1) | 12,96 | 13,99 |
Příklad 3
Kvasná výroba L-lysinu kmenem se začleněnou transhydrogenázou
Bylo ověřeno, zda je produkce L-lysinu zlepšena zvýšením intracelulámí transhydrogenázové aktivity u koryneformní bakterie, produkující L-lysin. Jako L-lysin vytvářející bakterie, patřící mezi koryneformní bakterie, byl použit kmen AJ3990 Brevibacterium lactofermentum. Kmen AJ3990 byl uložen v Národním ústavu biologických věd a lidské techniky, Agentura průmyslové vědy a techniky, Ministerstvo mezinárodního obchodu a průmyslu a obdržel přírůstkové číslo FERM P-3387. Plazmid pHSG::THYB byl získán z kmene AJ 12872 Escherichia coli, získaného v příkladu 1 metodou Maniatise a spoluautorů (J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis; Molecular Cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1., 21, 1989). Získaný plazmid byl zaveden do kmene AJ3390 transformační metodou, užívající elektrického impulsu (viz Japonský patent sč. zveřejnění 2-207791). Kmen AJ3390, transformovaný pHSG::THYB, byl označen jako kmen AJ3390(pHSG::THYB). Kmen AJ3390 a kmen AJ3390(pHSG::THYB) byly kultivovány za následuj ících podmínek.
Kultivace byla prováděna 72 hodin při teplotě 31,5 °C za míchání rychlostí 114—116 otáček za minutu v médiu o složení, uvedeném v tabulce 4. Tři odlišné cukry, glukóza, sacharóza a fruktóza byly použity jako cukr. Výsledky kultivace jsou uvedeny v tabulce 5. Ukázalo se, že produkce L-lysinu u koryneformní bakterie, produkující l-lysin, byla zlepšena zvýšením intracelulámí aktivity transhydrogenázy.
Tabulka 4: médium k produkci lysinu cukr
NH4CI
KH2PO4
MgSO4.7H2O
FeSO4.7H2O
MnSO4.5H2O sojový bílkovinný hydrolyzát (jako zdroj dusíku) thiamin-HCl biotin g/1 g/1 g/1
0,4 g/1 mg mg mg
100 mg
300 mg
Po autoklávování (10 minut při 115°C) byl přidán 3% uhličitan vápenatý, sterilizovaný odděleně.
Tabulka 5
| množství nashromážděného hydrochloridu lysinu (g/1) | ||
| AJ 3990 | AJ3990 (pHSG::THYB) | |
| glukóza | 13,6 | 14,5 |
| sacharóza | 11,1 | 12,6 |
| fruktóza | 8,2 | 11,9 |
-10CZ 291499 B6
Příklad 4
Kvasná výroba L-fenylalaninu kmenem se začleněnou transhydrogenázou
Bylo zjišťováno, zda se produkce L-fenylalaninu zlepšila zvýšením intracelulámí aktivity transhydrogenázy v bakterii, schopné produkce L-fenylalaninu, patřící do rodu Escherichia. Jako bakterie se schopností produkce L-fenylalaninu a patřící do rodu Escherichia byl použit kmen Escherichia coli AJ12604. AJ12604 je hostitelem plazmidu pBR-aroG4, který byl získán inzercí (vložením) mutantního genu aroG do vektorového plazmidu pBR22, nesoucího markér odolnosti vůči ampicilinu, a plazmidu pACMAB, kteiý byl získán inzercí mutantního genu pheA do vektorového plazmidu pACYC184 s markérem odolnosti vůči chloramfenikolu (viz Japonský patent sč. zveřejnění 5-236947). Kmen AJ12604 byl uložen v Národním ústavu biologických věd a lidské techniky, Agentura průmyslové vědy a techniky, Ministerstvo mezinárodního obchodu a průmyslu, 28.1edna 1991 pod přírůstkovým číslem FERM P-l 1975, 26. září 1991 byl převeden z původního uložení na mezinárodní uložení na základě Budapešťské dohody a uložen pod číslem FERM BP-3579. Plazmid pSU::THY byl zpětně získán z kmene AJ12930 Escherichia coli, získaného v příkladu 1, metodou Maniatise a spoluautorů (J. Sambrook, E. F. Fritsch a T. Maniatis; Molecular Cloning, Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1., 21, 1989). Získaný plazmid byl zaveden do kmene AJ 12604 metodou D. M. Morrisona (Methods in Enzymology 68, 326, 1979). Kmen AJ12604, transformovaný pSU::THY, byl označen jako kmen AJ12604(pSU::THY). Kmeny AJ12604 a AJ12604(pSU::THY) byly kultivovány za následujících podmínek.
Kultivace byla prováděna 16 hodin při teplotě 37 °C za míchání rychlostí 114-116 otáček za minutu v médiu o složení, udaném v tabulce 6. Výsledky kultivace jsou uvedeny v tabulce 7. Bylo zjištěno, že produkce L-fenylalaninu byla u bakterie produkující L-fenylalanin a patřící do rodu Escherichia zlepšena zvýšením intracelulámí aktivity transhydrogenázy.
Tabulka 6: médium k produkci fenylalaninu
| Glukóza | 20 g/1 |
| Na2HPO4 | 29,4 g/1 |
| KH2PO4 | 6 g/1 |
| NaCl | 1 g/i |
| NHtCl | 2 g/1 |
| citrát sodný | 20 g/1 |
| L-glutamát sodný | 0,4 g/1 |
| MgSO4.7H2O | 3 g/1 |
| thiamin-HCl | 2 mg |
| L-tyrosin | 75 mg |
Po autoklávování (10 minut při 115 °C) byl přidán 3% uhličitan vápenatý, sterilizovaný odděleně.
Tabulka 7
| Kmen | AJ12604 | AJ12604(pSU::THY) |
| Množství nashromážď. L-fenylalaninu (g/1) | 4,28 | 4,89 |
| 3,75 | 4,28 |
-11 CZ 291499 B6
PŘEHLED SEKVENCÍ (1) OBECNÉ INFORMACE (i) Přihlašovatel: Ajinomoto Co. Inc.
ii) Název vynálezu: Způsob výroby chemických látek (iii) Počet sekvencí: 2 (iv) Adresa pro doručování:
(A) adresát:
(B) ulice:
(C) město:
(D) země (kraj):
(E) stát:
(F) PSČ:
(vi) Údaje běžného přihlášení:
(A) číslo přihlášky:
(B) datum podání:
(C) klasifikace:
(vii) Údaje přednostního přihlášení:
(A) číslo přihlášky:
(B) datum podání:
(viii) Zástupce přihlašovatele:
(A) jméno:
(B) číslo registrace:
(C) reference/č. jednací:
(ix) Spojení:
(A) telefon:
(B) telefax:
(2) Informace o sekvenci identif. č. 1:
(i) charakteristiky sekvence:
(A) délka: 24 (B) typ: nukleová kyselina (C) vláknitost: jednovláknová (D) uspořádání: lineární (ii) Molekulární typ: jiná syntetická DNA (iii) Hypotetická: ne (xi) Popis sekvence: sekv. s identifikačním č. 1:
CTGATTTTTG GATCCAGATC ACAG (2) Informace o sekvenci identif. č. 2:
(i) charakteristiky sekvence:
(A) délka: 24 (B) typ: nukleová kyselina (C) vláknitost: jednovláknová (D) uspořádání: lineární (ii) Molekulární typ: jiná syntetická DNA (iii) Hypotetická: ne (xi) Popis sekvence: sekv. s identifikačním č. 2:
CGTTCTGTTA AGCTTTCTCA ATAA
Claims (9)
1. Způsob výroby cílové chemické látky za použití mikroorganismu, zahrnující kroky:
kultivace mikroorganismu v kultivačním médiu k umožnění produkce cílové chemické látky a její akumulace v uvedeném kultivačním médiu; a shromažďování cílové chemické látky z uvedeného kultivačního média, vyznačující se tím, že uvedený mikroorganismus byl modifikován tak, aby schopnost uvedeného mikroorganismu produkovat redukovaný nikotinamidadenindinukleotidfosfát z redukovaného nikotinamidadenindinukleotidu byla zvýšena, čímž je zvýšena produktivita uvedeného mikroorganismu vzhledem k redukovanému nikotinamidadenindinukleotidfosfátu.
2. Způsob výroby cílové chemické látky podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedenou cílovou chemickou látkou je chemická látka, jejíž biosyntéza vyžaduje redukovaný nikotinamidadenindinukletidfosfát.
3. Způsob výroby cílové chemické látky podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedenou cílovou chemickou látkou je L-aminokyselina.
4. Způsob výroby chemické látky podle nároku 3, vyznačující se tím, že uvedená L-aminokyselina je zvolena ze skupiny, skládající se z L-threoninu, L-lysinu, kyseliny L-glutamové, L-leucinu, L-izoleucinu, L-valinu a L-fenylalaninu.
5. Způsob výroby cílové chemické látky podle kteréhokoli z nároků laž4, vyznačující setím, že uvedeným mikroorganismem je mikroorganismus, patřící do rodu Escherichia.
6. Způsob výroby cílové chemické látky podle kteréhokoli z nároků 1 až 4, vyznačující setím, že uvedeným mikroorganismem je koryneformní bakterie.
7. Způsob výroby cílové chemické látky podle kteréhokoli z nároků laž6, vyznačující se tím, že schopnost uvedeného mikroorganismu produkovat redukovaný nikotinamidadenindinukleotidfosfát z redukovaného nikotinamidadenindinukleotidu se zvětší zvýšením enzymové aktivity nikotinamidnukleotidtranshydrogenázy v buňkách zmíněného mikroorganismu.
8. Způsob výroby cílové chemické látky podle nároku 7, vyznačující se tím, že schopnost uvedeného mikroorganismu produkovat redukovaný nikotinamidadenindinukleotidfosfát z redukovaného nikotinamidadenindinukleotidu se zvětší zvýšením množství exprimovaného genu, kódujícího nikotinamidnukleotidtranshydrogenázu v buňkách zmíněného mikroorganismu.
9. Způsob výroby cílové chemické látky podle nároku 8, vyznačující se tím, že schopnost uvedeného mikroorganismu produkovat redukovaný nikotinamidadenindinukleotidfosfát z redukovaného nikotinamidadenindinukleotidu se zvětší zvýšením počtu kopií daného genu, kódujícího nikotinamidnukleotidtranshydrogenázu v buňkách zmíněného mikroorganismu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP27082893 | 1993-10-28 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ121396A3 CZ121396A3 (en) | 1996-09-11 |
| CZ291499B6 true CZ291499B6 (cs) | 2003-03-12 |
Family
ID=17491585
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ19961213A CZ291499B6 (cs) | 1993-10-28 | 1994-10-26 | Způsob výroby chemických látek |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5830716A (cs) |
| EP (1) | EP0733712B1 (cs) |
| JP (1) | JP2817400B2 (cs) |
| KR (1) | KR100230878B1 (cs) |
| CN (1) | CN1082092C (cs) |
| AT (1) | ATE210728T1 (cs) |
| AU (1) | AU687458B2 (cs) |
| BR (1) | BR9407907A (cs) |
| CA (1) | CA2175042C (cs) |
| CZ (1) | CZ291499B6 (cs) |
| DE (1) | DE69429452C5 (cs) |
| DK (1) | DK0733712T3 (cs) |
| ES (1) | ES2166788T3 (cs) |
| HU (1) | HU221120B1 (cs) |
| MY (1) | MY121990A (cs) |
| PE (1) | PE30295A1 (cs) |
| PL (1) | PL185681B1 (cs) |
| RU (1) | RU2182173C2 (cs) |
| SK (1) | SK283058B6 (cs) |
| WO (1) | WO1995011985A1 (cs) |
Families Citing this family (126)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB9622516D0 (en) * | 1996-10-29 | 1997-01-08 | Univ Cambridge Tech | Enzymic cofactor cycling |
| FI980551A7 (fi) * | 1998-03-11 | 1999-09-12 | Valtion Teknillinen | Transformoidut mikro-organismit, joilla on parannettuja ominaisuuksia |
| AU756507B2 (en) | 1998-03-18 | 2003-01-16 | Ajinomoto Co., Inc. | L-glutamic acid-producing bacterium and method for producing L-glutamic acid |
| EP1097217A2 (en) * | 1998-07-10 | 2001-05-09 | Jens Nielsen | Metabolically engineered microbial cell comprising a modified redox activity |
| US7018829B1 (en) | 1998-07-10 | 2006-03-28 | Fluxome Sciences A/S | Metabolically engineered microbial cell with an altered metabolite production |
| JP3965821B2 (ja) * | 1999-03-09 | 2007-08-29 | 味の素株式会社 | Ｌ−リジンの製造法 |
| CA2377693C (en) | 1999-07-23 | 2016-11-08 | Archer-Daniels-Midland Company | Methods for producing l-amino acids |
| US6830903B1 (en) | 1999-07-23 | 2004-12-14 | Archer-Daniels-Midland Company | Methods for producing L-amino acids using a corynebacterium glutamicum with a disrupted pgi gene |
| US6586214B1 (en) * | 1999-09-15 | 2003-07-01 | Degussa Ag | Method for increasing the metabolic flux through the pentose phosphate cycle in coryneform bacteria by regulation of the phosphoglucose isomerase (pgi gene) |
| ES2313878T3 (es) | 2000-01-21 | 2009-03-16 | Ajinomoto Co., Inc. | Procedimiento para la produccion de l-lisina. |
| CN101824392B (zh) * | 2000-01-21 | 2014-09-24 | 味之素株式会社 | 生产l-赖氨酸的方法 |
| MXPA01011643A (es) * | 2000-03-20 | 2003-02-27 | Degussa | Proceso para la preparacion fermentativa de l-aminoacidos con amplificacion del gen gnd. |
| JP4380029B2 (ja) * | 2000-07-05 | 2009-12-09 | 味の素株式会社 | 微生物を利用した物質の製造法 |
| JP4265093B2 (ja) * | 2000-08-11 | 2009-05-20 | 味の素株式会社 | スレオニン及びイソロイシンの製造法 |
| AU2001295456A1 (en) | 2000-09-12 | 2002-03-26 | Degussa A.G. | Nucleotide sequences which code for the gora gene |
| US7326549B2 (en) * | 2001-03-19 | 2008-02-05 | Cargill, Incorporated | Myo-inositol oxygenases |
| RU2299907C2 (ru) * | 2001-09-06 | 2007-05-27 | Адзиномото Ко., Инк. | Бактерия рода bacillus, продуцирующая l-аминокислоту, и способ получения l-аминокислоты |
| FI20012091A0 (fi) * | 2001-10-29 | 2001-10-29 | Valtion Teknillinen | Sienimikro-organismi, jolla on parantunut suorituskyky bioteknisessä prosesseissa |
| ATE423843T1 (de) * | 2001-12-03 | 2009-03-15 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Mutierte 6-phosphogluconat-dehydrogenase |
| GB0227435D0 (en) * | 2002-11-25 | 2002-12-31 | Univ Denmark Tech Dtu | Metabolically engineered micro-organisms having reduced production of undesired metobolic products |
| WO2005010175A1 (en) * | 2003-07-29 | 2005-02-03 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing l-lysine or l-threonine using escherichia bacteria having attnuated malic enzyme activity |
| JP4780783B2 (ja) * | 2004-02-27 | 2011-09-28 | 協和発酵バイオ株式会社 | アミノ酸の製造法 |
| US20070092951A1 (en) | 2005-03-24 | 2007-04-26 | Degussa Ag | Alleles of the zwf gene from coryneform bacteria |
| JP2007185184A (ja) * | 2005-12-16 | 2007-07-26 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸生産菌及びｌ−アミノ酸の製造法 |
| EP1979486B1 (en) | 2006-01-30 | 2013-04-17 | Ajinomoto Co., Inc. | L-amino acid producing bacterium and method of producing l-amino acid |
| JP2009089603A (ja) | 2006-02-02 | 2009-04-30 | Ajinomoto Co Inc | メタノール資化性細菌を用いたｌ−リジンの製造法 |
| JP2009095237A (ja) | 2006-02-02 | 2009-05-07 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2009118740A (ja) | 2006-03-03 | 2009-06-04 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| EP2004803A2 (en) | 2006-03-23 | 2008-12-24 | Ajinomoto Co., Inc. | A method for producing an l-amino acid using bacterium of theenterobacteriaceae family with attenuated expression of a gene coding for small rna |
| JP2009060791A (ja) | 2006-03-30 | 2009-03-26 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸生産菌及びｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2009165355A (ja) * | 2006-04-28 | 2009-07-30 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸を生産する微生物及びｌ−アミノ酸の製造法 |
| WO2007136133A1 (en) | 2006-05-23 | 2007-11-29 | Ajinomoto Co., Inc. | A method for producing an l-amino acid using a bacterium of the enterobacteriaceae family |
| CN103215319A (zh) * | 2006-07-19 | 2013-07-24 | 味之素株式会社 | 使用肠杆菌科细菌产生l-氨基酸的方法 |
| JP2010017082A (ja) | 2006-10-10 | 2010-01-28 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2010017081A (ja) * | 2006-10-10 | 2010-01-28 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| WO2008072761A2 (en) * | 2006-12-11 | 2008-06-19 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing an l-amino acid |
| RU2006143864A (ru) | 2006-12-12 | 2008-06-20 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ cynT, cynS, cynX, ИЛИ cynR, ИЛИ ИХ КОМБИНАЦИИ |
| JP2010041920A (ja) | 2006-12-19 | 2010-02-25 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| RU2006145712A (ru) * | 2006-12-22 | 2008-06-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) | Способ получения l-аминокислот методом ферментации с использованием бактерий, обладающих повышенной способностью к утилизации глицерина |
| JP5540504B2 (ja) | 2007-01-22 | 2014-07-02 | 味の素株式会社 | Ｌ−アミノ酸を生産する微生物及びｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2010088301A (ja) * | 2007-02-01 | 2010-04-22 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2010110216A (ja) | 2007-02-20 | 2010-05-20 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸または核酸の製造方法 |
| JP2010110217A (ja) | 2007-02-22 | 2010-05-20 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸生産菌及びｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2010130899A (ja) | 2007-03-14 | 2010-06-17 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−グルタミン酸系アミノ酸生産微生物及びアミノ酸の製造法 |
| BRPI0823327A2 (pt) | 2007-03-16 | 2013-10-22 | Genomatica Inc | Biocatalisadores microbianos que não ocorrem naturalmente e métodos para a biosíntese de ácido 4-hidroxibutanóico e 1,4-butanodiol |
| EP1975241A1 (de) | 2007-03-29 | 2008-10-01 | Evonik Degussa GmbH | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| JP2010226956A (ja) * | 2007-07-23 | 2010-10-14 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−リジンの製造法 |
| US7947483B2 (en) | 2007-08-10 | 2011-05-24 | Genomatica, Inc. | Methods and organisms for the growth-coupled production of 1,4-butanediol |
| RU2395579C2 (ru) * | 2007-12-21 | 2010-07-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia |
| WO2009031565A1 (ja) | 2007-09-04 | 2009-03-12 | Ajinomoto Co., Inc. | アミノ酸生産微生物及びアミノ酸の製造法 |
| JP2010263790A (ja) * | 2007-09-04 | 2010-11-25 | Ajinomoto Co Inc | アミノ酸生産微生物及びアミノ酸の製造法 |
| DE102007044134A1 (de) | 2007-09-15 | 2009-03-19 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| EP2215243A2 (en) * | 2007-10-31 | 2010-08-11 | GEVO, Inc. | Methods for the economical production of biofuel precursor that is also a biofuel from biomass |
| DE102007052270A1 (de) | 2007-11-02 | 2009-05-07 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| EP2060636A1 (de) | 2007-11-14 | 2009-05-20 | Evonik Degussa GmbH | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| JP2011067095A (ja) | 2008-01-10 | 2011-04-07 | Ajinomoto Co Inc | 発酵法による目的物質の製造法 |
| WO2009093703A1 (ja) | 2008-01-23 | 2009-07-30 | Ajinomoto Co., Inc. | Ｌ-アミノ酸の製造法 |
| RU2008105793A (ru) | 2008-02-19 | 2009-08-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) | Способ конструирования оперонов, содержащих трансляционно сопряженные гены, бактерия, содержащая такой оперон, способ продукции полезного метаболита и способ мониторинга экспрессии гена |
| EP2098597A1 (de) | 2008-03-04 | 2009-09-09 | Evonik Degussa GmbH | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| DE102008002309A1 (de) | 2008-06-09 | 2009-12-10 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| DE102008044768A1 (de) | 2008-08-28 | 2010-03-04 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur Herstellung von organisch-chemischen Verbindungen unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| EP2336347B1 (en) | 2008-09-08 | 2017-03-15 | Ajinomoto Co., Inc. | An l-amino acid-producing microorganism and a method for producing an l-amino acid |
| EP3514242A3 (en) | 2008-09-10 | 2019-08-28 | Genomatica, Inc. | Microrganisms for the production of 1,4-butanediol |
| CA2779262C (en) * | 2008-10-31 | 2021-09-07 | Gevo, Inc. | Engineered microorganisms capable of converting pyruvate to isobutanol under anaerobic conditions |
| JP2012029565A (ja) | 2008-11-27 | 2012-02-16 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| JP2010142200A (ja) | 2008-12-22 | 2010-07-01 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−リジンの製造法 |
| BRPI1007069A2 (pt) | 2009-01-23 | 2015-08-25 | Ajinomoto Kk | Método para produzir um l-aminoácido. |
| JP5521347B2 (ja) | 2009-02-16 | 2014-06-11 | 味の素株式会社 | Ｌ−アミノ酸生産菌及びｌ−アミノ酸の製造法 |
| WO2010141920A2 (en) | 2009-06-04 | 2010-12-09 | Genomatica, Inc. | Microorganisms for the production of 1,4-butanediol and related methods |
| LT2438036T (lt) | 2009-06-04 | 2017-06-26 | Genomatica, Inc. | Fermentacijos sultinio komponentų išskyrimo būdas |
| EP2267145A1 (de) | 2009-06-24 | 2010-12-29 | Evonik Degussa GmbH | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae |
| DE102009030342A1 (de) * | 2009-06-25 | 2010-12-30 | Evonik Degussa Gmbh | Verfahren zur fermentativen Herstellung von organisch chemischen Verbindungen |
| BRPI1014661B1 (pt) | 2009-07-29 | 2020-12-15 | Ajinomoto Co., Inc. | Método para produzir um l-aminoácido |
| JP2012223092A (ja) | 2009-08-28 | 2012-11-15 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| KR20120083908A (ko) * | 2009-10-13 | 2012-07-26 | 게노마티카 인코포레이티드 | 1,4-부탄다이올, 4-하이드록시부탄알, 4-하이드록시부티릴-ｃｏａ, 푸트레신 및 관련 화합물의 제조를 위한 미생물 및 관련 방법 |
| JP2013013329A (ja) | 2009-11-06 | 2013-01-24 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| US8530210B2 (en) | 2009-11-25 | 2013-09-10 | Genomatica, Inc. | Microorganisms and methods for the coproduction 1,4-butanediol and gamma-butyrolactone |
| RU2010101135A (ru) | 2010-01-15 | 2011-07-20 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) | Бактерия семейства enterobacteriaceae - продуцент l-аспартата или метаболитов, производных l-аспартата, и способ получения l-аспартата или метаболитов, производных l-аспартата |
| RU2460793C2 (ru) | 2010-01-15 | 2012-09-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) | Способ получения l-аминокислот с использованием бактерий семейства enterobacteriaceae |
| JP2013074795A (ja) | 2010-02-08 | 2013-04-25 | Ajinomoto Co Inc | 変異型ｒｐｓＡ遺伝子及びＬ−アミノ酸の製造法 |
| RU2471868C2 (ru) | 2010-02-18 | 2013-01-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) | Мутантная аденилатциклаза, днк, кодирующая ее, бактерия семейства enterobacteriaceae, содержащая указанную днк, и способ получения l-аминокислот |
| US8048661B2 (en) | 2010-02-23 | 2011-11-01 | Genomatica, Inc. | Microbial organisms comprising exogenous nucleic acids encoding reductive TCA pathway enzymes |
| US8445244B2 (en) | 2010-02-23 | 2013-05-21 | Genomatica, Inc. | Methods for increasing product yields |
| RU2010122646A (ru) | 2010-06-03 | 2011-12-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) | Способ получения l-аминокислоты с использованием бактерии семейства enterobacteriaceae, в которой ослаблена экспрессия генов, кодирующих транспортер лизина/аргинина/орнитина |
| RU2471870C2 (ru) | 2010-06-03 | 2013-01-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АРГИНИНА И L-ЦИТРУЛЛИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА pepA |
| RU2501858C2 (ru) | 2010-07-21 | 2013-12-20 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae |
| RU2482188C2 (ru) | 2010-07-21 | 2013-05-20 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АРГИНИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ РОДА Escherichia, В КОТОРОЙ ИНАКТИВИРОВАН ОПЕРОН astCADBE |
| JP2014036576A (ja) | 2010-12-10 | 2014-02-27 | Ajinomoto Co Inc | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| CN102191287B (zh) * | 2011-03-18 | 2012-08-15 | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 | 赖氨酸的顺式发酵制备 |
| CN102191288B (zh) * | 2011-03-18 | 2012-08-15 | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 | 赖氨酸的反式发酵制备 |
| CN102191290B (zh) * | 2011-03-18 | 2012-08-15 | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 | 苏氨酸的发酵制备 |
| US20120247066A1 (en) | 2011-04-01 | 2012-10-04 | Ice House America, Llc | Ice bagging apparatus and methods |
| CN102234666B (zh) * | 2011-06-08 | 2012-08-15 | 宁夏伊品生物科技股份有限公司 | 赖氨酸的流加发酵制备 |
| US9169486B2 (en) | 2011-06-22 | 2015-10-27 | Genomatica, Inc. | Microorganisms for producing butadiene and methods related thereto |
| RU2011134436A (ru) | 2011-08-18 | 2013-10-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") | Способ получения l-аминокислоты с использованием бактерии семейства enterobacteriaceae, обладающей повышенной экспрессией генов каскада образования флагелл и клеточной подвижности |
| JP2015013812A (ja) | 2011-11-01 | 2015-01-22 | 味の素株式会社 | 植物ウイルスの感染抑制剤およびそれを用いた植物ウイルス感染抑制方法 |
| WO2013092967A1 (en) | 2011-12-23 | 2013-06-27 | Deinove | Bacteria and the uses thereof |
| SI2855687T1 (sl) | 2012-06-04 | 2020-09-30 | Genomatica, Inc. | Mikroorganizmi in metode za proizvodnjo 4-hidroksibutirat, 1,4-butandiola in sorodne spojine |
| EP2762571A1 (de) | 2013-01-30 | 2014-08-06 | Evonik Industries AG | Mikroorganismus und Verfahren zur fermentativen Herstellung von Aminosäuren |
| RU2013118637A (ru) | 2013-04-23 | 2014-10-27 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ РАЗРЕГУЛИРОВАН ГЕН yjjK |
| EP2868745B1 (en) | 2013-05-13 | 2017-06-21 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for manufacturing an L-amino acid |
| JP2016165225A (ja) | 2013-07-09 | 2016-09-15 | 味の素株式会社 | 有用物質の製造方法 |
| JP2016192903A (ja) | 2013-09-17 | 2016-11-17 | 味の素株式会社 | 海藻由来バイオマスからのｌ−アミノ酸の製造方法 |
| JP5958653B2 (ja) | 2013-10-02 | 2016-08-02 | 味の素株式会社 | アンモニア制御装置およびアンモニア制御方法 |
| RU2013144250A (ru) | 2013-10-02 | 2015-04-10 | Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА, КОДИРУЮЩЕГО ФОСФАТНЫЙ ТРАНСПОРТЕР |
| EP2886651B1 (en) | 2013-10-21 | 2018-08-22 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing l-amino acid |
| JP6519476B2 (ja) | 2013-10-23 | 2019-05-29 | 味の素株式会社 | 目的物質の製造法 |
| RU2014105547A (ru) | 2014-02-14 | 2015-08-20 | Адзиномото Ко., Инк. | СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, ИМЕЮЩЕЙ СВЕРХЭКСПРЕССИРУЕМЫЙ ГЕН yajL |
| CN104789516B (zh) * | 2015-04-22 | 2017-12-22 | 天津大学 | 一种产三羟基丙酸的集胞藻6803基因工程菌及构建方法及应用 |
| RU2015114955A (ru) | 2015-04-22 | 2016-11-10 | Аджиномото Ко., Инк. | Способ получения L-изолейцина с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, в которой сверхэкспрессирован ген cycA |
| RU2015120052A (ru) | 2015-05-28 | 2016-12-20 | Аджиномото Ко., Инк. | Способ получения L-аминокислоты с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, в которой ослаблена экспрессия гена gshA |
| JP6623690B2 (ja) | 2015-10-30 | 2019-12-25 | 味の素株式会社 | グルタミン酸系ｌ−アミノ酸の製造法 |
| WO2017146195A1 (en) | 2016-02-25 | 2017-08-31 | Ajinomoto Co., Inc. | A method for producing l-amino acids using a bacterium of the family enterobacteriaceae overexpressing a gene encoding an iron exporter |
| JP7066977B2 (ja) | 2017-04-03 | 2022-05-16 | 味の素株式会社 | Ｌ－アミノ酸の製造法 |
| KR101956510B1 (ko) * | 2018-07-27 | 2019-03-08 | 씨제이제일제당 (주) | 신규 5'-이노신산 디하이드로게나아제 및 이를 이용한 5'-이노신산 제조방법 |
| EP3608409A1 (en) | 2018-08-09 | 2020-02-12 | Evonik Operations GmbH | Process for preparing l amino acids using improved strains of the enterobacteriaceae family |
| EP3861109A1 (en) | 2018-10-05 | 2021-08-11 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing target substance by bacterial fermentation |
| WO2020138178A1 (en) | 2018-12-27 | 2020-07-02 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing basic l-amino acids or salts thereof by fermentation of an enterobacteriaceae bacterium |
| BR112021014194A2 (pt) | 2019-02-22 | 2021-12-28 | Ajinomoto Kk | Método para a produção de um l-aminoácido |
| BR112021017870A2 (pt) | 2019-04-05 | 2021-12-07 | Ajinomoto Kk | Método para produzir um l-aminoácido |
| JP7655312B2 (ja) | 2019-09-25 | 2025-04-02 | 味の素株式会社 | 細菌の発酵によるｌ－アミノ酸の製造方法 |
| JP7845187B2 (ja) | 2020-10-28 | 2026-04-14 | 味の素株式会社 | Ｌ－アミノ酸の製造法 |
| CN119012914A (zh) | 2022-04-04 | 2024-11-22 | 味之素株式会社 | 防治寄生植物的方法 |
| US20240117393A1 (en) | 2022-09-30 | 2024-04-11 | Ajinomoto Co., Inc. | Method for producing l-amino acid |
| JP7716823B1 (ja) | 2023-12-28 | 2025-08-01 | 味の素株式会社 | Ｌ－グルタミン酸生産菌およびｌ－グルタミン酸の製造方法 |
| EP4692312A1 (en) | 2023-12-28 | 2026-02-11 | Ajinomoto Co., Inc. | L-glutamic acid-producing bacterium and method for producing l-glutamic acid |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5943157B2 (ja) * | 1982-10-29 | 1984-10-19 | 工業技術院長 | ピキア属菌によるソルビト−ルの製造法 |
| EP0136359B1 (en) * | 1983-02-17 | 1991-04-03 | Kyowa Hakko Kogyo Kabushiki Kaisha | Process for preparing l-histidine |
| US4849345A (en) * | 1985-04-17 | 1989-07-18 | Sagami Chemical Research Center | L-phenylalanine dehydrogenase and use thereof |
| JP2742281B2 (ja) * | 1988-12-29 | 1998-04-22 | 旭化成工業株式会社 | グルコース―６―リン酸デヒドロゲナーゼ遺伝子 |
-
1994
- 1994-10-26 SK SK537-96A patent/SK283058B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1994-10-26 EP EP94931158A patent/EP0733712B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 CZ CZ19961213A patent/CZ291499B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1994-10-26 AT AT94931158T patent/ATE210728T1/de not_active IP Right Cessation
- 1994-10-26 CA CA002175042A patent/CA2175042C/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 PL PL94314090A patent/PL185681B1/pl unknown
- 1994-10-26 KR KR1019960702113A patent/KR100230878B1/ko not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 DK DK94931158T patent/DK0733712T3/da active
- 1994-10-26 AU AU80026/94A patent/AU687458B2/en not_active Expired
- 1994-10-26 DE DE69429452T patent/DE69429452C5/de not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 HU HU9601085A patent/HU221120B1/hu unknown
- 1994-10-26 ES ES94931158T patent/ES2166788T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 BR BR9407907A patent/BR9407907A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-10-26 MY MYPI94002845A patent/MY121990A/en unknown
- 1994-10-26 JP JP7512515A patent/JP2817400B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 RU RU96110201/13A patent/RU2182173C2/ru active
- 1994-10-26 US US08/619,521 patent/US5830716A/en not_active Expired - Lifetime
- 1994-10-26 WO PCT/JP1994/001791 patent/WO1995011985A1/ja not_active Ceased
- 1994-10-28 PE PE1994253805A patent/PE30295A1/es not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-10-26 CN CN94194707A patent/CN1082092C/zh not_active Ceased
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2175042A1 (en) | 1995-05-04 |
| SK283058B6 (sk) | 2003-02-04 |
| KR100230878B1 (ko) | 1999-11-15 |
| HU9601085D0 (en) | 1996-06-28 |
| AU8002694A (en) | 1995-05-22 |
| EP0733712B1 (en) | 2001-12-12 |
| DK0733712T3 (da) | 2002-03-18 |
| MY121990A (en) | 2006-03-31 |
| CZ121396A3 (en) | 1996-09-11 |
| CN1139956A (zh) | 1997-01-08 |
| CA2175042C (en) | 2002-05-28 |
| AU687458B2 (en) | 1998-02-26 |
| DE69429452C5 (de) | 2012-10-25 |
| JP2817400B2 (ja) | 1998-10-30 |
| PL185681B1 (pl) | 2003-07-31 |
| DE69429452T2 (de) | 2002-08-29 |
| ES2166788T3 (es) | 2002-05-01 |
| KR960705947A (ko) | 1996-11-08 |
| HU221120B1 (en) | 2002-08-28 |
| CN1082092C (zh) | 2002-04-03 |
| EP0733712A1 (en) | 1996-09-25 |
| BR9407907A (pt) | 1996-11-26 |
| RU2182173C2 (ru) | 2002-05-10 |
| DE69429452D1 (de) | 2002-01-24 |
| US5830716A (en) | 1998-11-03 |
| WO1995011985A1 (en) | 1995-05-04 |
| EP0733712A4 (en) | 1998-05-27 |
| SK53796A3 (en) | 1996-10-02 |
| HUT74840A (en) | 1997-02-28 |
| PE30295A1 (es) | 1995-10-26 |
| PL314090A1 (en) | 1996-08-19 |
| ATE210728T1 (de) | 2001-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US5830716A (en) | Increased amounts of substances by modifying a microorganism to increase production of NADPH from NADH | |
| AU782560B2 (en) | Method for producing substance utilizing microorganism | |
| EP1651758B1 (en) | Method for producing l-lysine or l-threonine using escherichia bacteria having attenuated malic enzyme activity | |
| KR100823044B1 (ko) | 트레오닌 및 이소류신의 제조방법 | |
| EP0723011B1 (en) | Variant phosphoenolpyruvate carboxylase, gene thereof, and process for producing amino acid | |
| EP0877090B1 (en) | Process for producing l-amino acids | |
| JP2926991B2 (ja) | 発酵法によるｌ−リジン及びｌ−グルタミン酸の製造方法 | |
| KR20060101545A (ko) | 발효에 의한 ｌ-아미노산의 생산방법 | |
| HU225538B1 (en) | Process for producing l-amino acid through fermentation | |
| JP3861290B2 (ja) | ストレス耐性微生物及び発酵生産物の製造法 | |
| US7163810B2 (en) | Method for producing target substance | |
| EP0974647A1 (en) | Process for producing target substances by fermentation | |
| JP2003159065A (ja) | 発酵法による目的物質の製造法 | |
| JP2000050894A (ja) | 発酵生産物の製造法及びストレス耐性微生物 | |
| JPWO1995011985A1 (ja) | 物質の製造法 | |
| JP2003204783A (ja) | 発酵法による目的物質の製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MK4A | Patent expired |
Effective date: 20141026 |