CZ292373B6

CZ292373B6 - Derivát ze skupiny 15-deoxyspergualinových analogů, způsob jeho přípravy, meziprodukty tohoto způsobu, použití a farmaceutický prostředek

Info

Publication number: CZ292373B6
Application number: CZ19961423A
Authority: CZ
Inventors: Luc Ing. Lebreton; Patrice Ing. Renaut; Christine Ing. Dumas
Original assignee: Fournier Industrie Et Sante
Priority date: 1995-05-17
Filing date: 1996-05-16
Publication date: 2003-09-17
Also published as: UA42798C2; CA2176670A1; AU694342B2; DK0743300T3; TW354782B; EP0743300A1; FR2734263B1; RU2130015C1; EP0743300B1; JPH0977733A; KR960041153A; CN1063744C; CN1143075A; NO961891L; CZ142396A3; US5733928A; ES2137634T3; HUP9601323A2; GR3031684T3; FR2734263A1

Abstract

Deriv t ze skupiny 15-deoxyspergualinov²ch analog obecn ho vzorce I, ve kter m: A znamen skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, R znamen vod k nebo skupinu CH.sub.3.n., a *C v p° pad , e R neznamen vod k, p°edstavuje asymetrick² uhl kov² atom jeho konfigurace m e b²t (RS) nebo (R); a jeho adi n soli. Do rozsahu °eÜen rovn n le postup p° pravy t chto slou enin za pou it meziprodukt obecn ho vzorce II, ve kter m R, A a C* maj stejn² v²znam a p°inejmenÜ m jeden R.sub.1.n. je chr nic skupina aminov skupiny a ostatn jsou vod k, a obecn ho vzorce III, ve kter m R znamen methylovou skupinu, R.sub.1.n. je chr nic skupina aminoskupiny a C* m stejn² v²znam, p°i em tyto meziprodukty rovn n le do rozsahu vyn lezu. Uveden deriv ty se pou vaj pro l en nebo prevenci poruch imunitn ho syst mu nebo mal rie.\

Description

(ΙΠ)

Derivát ze skupiny 15-deoxyspergualinových analogů, způsob jeho přípravy, meziprodukty tohoto způsobu, použití a farmaceutický prostředek

Oblast vynálezu

Vynález se týká derivátů ze skupiny 15-deoxyspergualinových sloučenin. Dále se vynález týká způsobu přípravy těchto nových sloučenin, meziproduktů tohoto postupu, farmaceutického prostředku obsahující uvedené účinné látky a použití těchto sloučenin pro léčení nebo prevenci poruch imunitního systému nebo malárie.

Dosavadní stav techniky

Z dosavadního stavu techniky je znám 15-deoxyspergualin (DSG), který má následující strukturní vzorec:

NH O

II II

HjN NH CH NH NH NH₂ *

O OH přičemž tato sloučenina je běžně známa pod mezinárodně nechráněným označením „Gusperimus“. Tato sloučenina projevuje významný imunosupresivní účinek. Z dosavadního stavu techniky jsou známy četné publikace, které popisují tuto účinnost, zejména je možno citovat sérii článků na toto téma v publikaci: „Immunomodulating Drugs “ - Annals of the New York Academy ofSciences, Vol. 685, str. 123 až 201.

Ovšem je nutno uvést, že tento 15-deoxyspergualin nemá uspokojivou chemickou stabilitu, takže již delší dobu jsou vyvíjeny snahy o získání stabilnějších sloučenin, například:

(i) náhradou α-hydroxyglycinové skupiny 15-deoxyspergualinu různými a-aminokyselinami nebo -kyselinami, (ii) modifikací části řetězce obsahujícího guanidinovou skupinu.

Příklady těchto modifikovaných látek je možno nalézt v evropských zveřejněných patentových přihláškách č. EP-A-0 181 592 a EP-A-0 105 193 a ve francouzské zveřejněné patentové přihlášce č. FR-A-2 698 628.

Modifikace uvedených sloučenin týkající se hydroxyglycinového zbytku jsou uváděny například v publikaci J. Antibiot., 38, 886-898; a J. Antibiot. 41, 1629-1643. Podle těchto publikací je zřejmé, že se žádnou zvýše uvedených struktur není možno dosáhnout účinnosti větší než u výše uvedeného DSG. Podobným způsobem je možno uvést, že modifikace provedené na spermidinovém zbytku, což bylo publikováno například v J. Antibiot. 40, 1303-1315, většinou vedly ke ztrátě účinnosti, přičemž ve snaze o získání účinných sloučenin se přítomností spermidinové vazby jeví jako nepostradatelná.

Podstata vynálezu

Podle uvedeného vynálezu bylo zjištěno, že sloučeniny, které mají strukturu podobnou DSG, ovšem které neobsahují hydroxyglycinový zbytek a spermidinový zbytek, jsou přesto schopny

-1CZ 292373 B6 projevovat imunosupresivní účinek, přičemž tento účinek může být ještě větší než u DSG (to znamená 15-deoxyspergualinu).

Podstatu řešení podle vynálezu představují deriváty ze skupiny 15-deoxyspergualinových analogů obecného vzorce I:

(I), ve kterém:

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-,

R znamená atom vodíku nebo skupinu CH₃, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom jehož konfigurace může být (AS) nebo (R);

a jeho adiční soli s minerálními nebo organickými kyselinami.

Výhodný je podle předmětného vynálezu derivát uvedeného obecného vzorce I, ve které R představuje methylovou skupinu a asymetrický uhlíkový atom *C má konfiguraci (A).

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží postup přípravy derivátu obecného vzorce I nebo některé z jeho adičních solí s minerálními nebo organickými kyselinami, přičemž podstata tohoto postupu spočívá v tom, že zahrnuje následující stupně:

(i) odstraní se chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce Π:

ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s konfigurací (A<S) nebo s konfigurací (R);

a přinejmenším jeden substituent Ri znamená chránící skupinu aminové skupiny oxykarbonylového typu nebo benzylového typu, přičemž ostatní substituenty Ri znamenají atom vodíku,

-2CZ 292373 B6 což se provede běžně známým Způsobem, a cílem je odstranění chránící skupiny aminoskupiny, neboli nahražení všech chránících skupin aminoskupiny atomem vodíku, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I ve formě volné báze nebo popřípadě ve formě některé z adičních solí této sloučeniny, a popřípadě (ii) se získají její adiční soli z této volné báze nebo z adiční soli této sloučeniny.

Podle dalšího aspektu podstata tohoto postupu přípravy sloučeniny obecného vzorce I, spočívá v provedení následujících kroků:

(a) provede se postup sestávající z následujících stupňů:

(i) kondenzují se alkohol obecného vzorce ΙΠ:

_(iii) ,

I I ¹

Rj R ve kterém znamená:

R atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), s chlormravenčanem nebo se symetrickým uhličitanem, v přítomnosti bazické sloučeniny, v inertním reakčním rozpouštědle a při teplotě v rozmezí od 15 do 25 °C, (ii) a potom se do reakce uvede sloučenina získaná ve shora uvedeném stupni (i) s aminem obecného vzorce IV:

ve kterém:

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny, v inertním reakčním rozpouštědle a při teplotě pohybující se v rozmezí od 25 do 50 °C za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

-3CZ 292373 B6

N O

II II x-(CH₂)₆^ ^.ch₂^ _x(CH₂)₄^ ^(CH₂)₂^

NH NH A ⁴ NH 0 N · ^rl

ve kterém:

A znamená skupinu -NH-CO-,

R je atom vodíku nebo methylová skupina, *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), a

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny, (b) nebo se provede postup sestávající z následujících stupňů:

(i) do reakce se uvede kyselina obecného vzorce V:

_X(CH₂)_6>x ^NH_x .COOH

NH C CH<

ve kterém:

R₂ představuje chránící skupinu aminoskupiny, s difenylfosforylazidem obecného vzorce VI:

(C₆H₅O)₂—P-N₃ (VI) v přítomnosti bazické sloučeniny, v rozpouštědle při teplotě místnosti, čímž se získá meziprodukt obecného vzorce VH:

O

H ^R:'-NH^XtCH5’⁶’^XC^xh'^H'‘CHZ^C’'N₃ (VII >

II

O (ii) sloučenina obecného vzorce VH se podrobí přesmyku, známému pod označením Curtiusova reakce, přičemž současně reaguje takto získaný izokyanát s alkoholem obecného vzorce ΙΠ:

HO N

I *CH R,

I ^]

R (III),

-4CZ 292373 B6 ve kterém znamená:

R atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, která se odlišuje od skupiny R₂ uvedené výše, a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), v rozpouštědle, při teplotě pohybující se v rozmezí od 80 do 140 °C a po dobu v rozmezí od 5 do hodin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VID:

ve kterém mají R, R_b R₂ a *C stejný význam jako to bylo uvedeno shora, (iii) odstraní se chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce Vin náhradou atomem vodíku, čímž se získá sloučenina obecného vzorce IX:

r¹ L ^x°^(CH₂)₄ ^/N^(CH2)f (IX), ve kterém R, Ri a *C mají stejný význam jako bylo uvedené shora, (iv) a potom sloučenina obecného vzorce IX reaguje s kyselinou aminoiminomethansulfonovou v rozpouštědle, prováděnou při teplotě v rozmezí od 15 do 25 °C a po dobu v rozmezí od 8 do 50 hodin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

Rl R (II), ve kterém:

R a *C mají stejný význam jako bylo uvedeno shora,

A je skupina -CO-NH-, a

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, s výjimkou dvou těchto skupin Ri vázaných na guanidinovou skupinu, kde každá představuje atom vodíku,

-5CZ 292373 B6 nebo se provede varianta (iv') výše uvedeného stupně (iv), při které se do rekce uvede sloučenina obecného vzorce IX se sloučeninou obecného vzorce X:

ve kterém:

Ri představuje chránicí skupinu aminoskupiny, v inertním rozpouštědle, zejména tetrahydrofiiranu, v přítomnosti bazické sloučeniny při teplotě v rozmezí od 15 do 25 °C a po dobu v rozmezí od 8 do 100 hodin za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

®·1Νι N II

NH ^VNH

O x(CH₂)_6X-^CH₂^ _x.C_x>xz(CE₂)_4X>x.(CH₂)₂\ -NH_>v

A NH O N *CH R_t

R_t R (U) ve kterém:

A znamená skupinu -CO-NH-,

R je atom vodíku nebo methylová skupina,

Ri znamená chránicí skupiny aminoskupiny, a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (RS) nebo o konfiguraci (/?);

přičemž pro provedení těchto postupů (a) nebo (b) se odstraní chránicí skupiny sloučeniny obecného vzorce Π:

ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s konfigurací (RS) nebo s konfigurací (/?);

-6CZ 292373 B6 a přinejmenším jeden substituent R] znamená chránící skupinu aminové skupiny, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I ve formě volné báze nebo popřípadě ve formě některé z adičních solí této sloučeniny, a potom se popřípadě získají jiné adiční soli této volné báze nebo adiční soli této sloučeniny.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží sloučenina obecného vzorce Π:

ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s konfigurací (R,S) nebo s konfigurací (R);

a přinejmenším jeden substituent Ri znamená chránící skupinu aminové skupiny oxykarbonylového typu nebo benzylového typu, přičemž ostatní substituenty Ri znamenají atom vodíku, představují meziprodukt pro přípravu sloučenin podle vynálezu.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží sloučenina obecného vzorce ΙΠ:

ve kterém znamená:

R methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, a *C představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), představující meziprodukt pro přípravu sloučenin podle vynálezu.

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží použití imunosupresivní sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující deriváty obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelné soli této sloučeniny pro přípravu léčiva pro terapeutické použití k léčení nebo prevenci imunitních poruch a malárie, a pro přípravu farmakologického činidla.

CZ 292373 Β6

Do rozsahu předmětného vynálezu rovněž náleží, farmaceutický prostředek obsahující přinejmenším jednu sloučeninu vybranou ze skupiny zahrnující deriváty obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelné soli s minerálními nebo organickými kyselinami v kombinaci s fyziologicky přijatelným excipientem.

Uvedený vynález se tedy týká nových sloučenin, jejichž obecný vzorec je podobný 15-deoxyspergualinu, přičemž tyto sloučeniny jsou chemicky stabilní a mají větší účinek než dosud známé sloučeniny podle dosavadního stavu techniky, zejména sloučeniny v oblasti imunosupresiv.

Podstatný rozdíl mezi sloučeninami podle uvedeného vynálezu a známými sloučeninami podle dosavadního stavu techniky spočívá v podstatné modifikaci centrální části molekuly, kde je vytvořena skupina karbamátového typu. Kromě toho je nutno uvést, že na rozdíl od všech dosud známých sloučenin podle dosavadního stavu techniky, které jsou podobné 15-deoxyspergualinu, obsahují sloučeniny podle uvedeného vynálezu skupinu aminoalkoholového typu místo polyaminového spojení spermidinového typu.

Termín „adiční soli“ se v textu tohoto vynálezu míní adiční soli s kyselinami, které se získají reakcí sloučeniny obecného vzorce I s minerální kyselinou nebo s organickou kyselinou. Mezi výhodné minerální kyseliny, vhodné k přípravě soli, patří kyselina chlorovodíková, kyselina bromovodíková, kyselina fosforečná a kyselina sírová. K přípravě solí je možno rovněž použít organické kyseliny, přičemž mezi tyto výhodné organické kyseliny patří kyselina fúmarová, kyselina maleinová, kyselina methansulfonová, kyselina šťavelová, kyselina citrónová a kyselina trifluoroctová.

Jak již bylo uvedeno v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce I, mají tyto sloučeniny podle uvedeného vynálezu uhlík označený *C, kteiý v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom. V případě, že R nepředstavuje atom vodíku, potom sloučeniny obecného vzorce I, podle uvedeného vynálezu představují racemické sloučeniny, jestliže *C má (R,S) konfiguraci, a enantiomer, jestliže *C má (7?) konfiguraci, což vyplývá z pravidel strukturálního určení sloučenin uvedených v publikaci autorů Cahn, Ingold and Prelog. V případě, že R představuje atom vodíku, potom atom uhlíku označený jako *C není asymetrický.

V praktických podmínkách jsou výhodnými sloučeninami obecného vzorce I podle uvedeného vynálezu, které obsahují asymetrický atom *C takové sloučeniny, ve kterých má uvedený uhlíkový atom (R) konfiguraci.

Výše uvedené sloučeniny obecného vzorce I podle vynálezu je možno získat běžnými známými postupy podle dosavadního stavu techniky, přičemž se aplikuje běžný reakční mechanizmus, zejména reakce, kterými je možno získat skupiny karbamátového typu.

Jak již bylo uvedeno výše, zahrnuje postup přípravy sloučenin podle uvedeného vynálezu obecného vzorce I, který byl doporučován v předchozím textu, odstranění chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce Π. Při praktickém provádění tohoto postupu jsou těmito skupinami nebo touto skupinou R_b které je třeba při této reakci nahradit vodíkovými atomy, chránící skupiny aminoskupiny běžně známého typu, zejména z oboru chemie peptidových sloučenin, které slouží k přechodnému blokování „aminových“ skupin, které nejsou zcela substituovány.

K tomuto účelu je možno použít následující skupiny, které patří ke vhodným skupinám k dosažení daného cíle podle vynálezu:

(a) skupiny oxykarbonylového typu, jako je například alkoxykarbonylová skupina nebo benzyloxykarbonylová skupina:

-8CZ 292373 B6

BOČ: t-butoxykarbonylová skupina (neboli 1,1-dimethylethoxykarbonylová skupina);

FMOC: 9-fluorenylmethyoxykarbonylová skupina;

Z: benzyloxykarbonylová skupina (neboli fenylmethoxykarbonylová skupina);

Z(p-OMe): 4-methoxybenzyloxykarbonylová skupina;

(b) skupiny benzylového typu, jako je například fenylmethylová skupina (Bn).

Z uvedených chránících skupin aminoskupiny je výhodnou skupinou podle uvedeného vynálezu BOČ skupina.

Postup přípravy sloučenin podle vynálezu a rovněž meziproduktů pro tento postup bude v dalším vysvětlen podrobněji.

Postup přípravy sloučenin obecného vzorce I nebo některé z jejich adičních solí zahrnuje následující stupně, které zahrnují:

(i) odstranění chránících skupin ze sloučeniny obecného vzorce Π:

ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, *C v případ, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s neurčenou konfigurací (R,S) nebo s určenou konfigurací (R);

a přinejmenším jeden substituent Ri znamená chránící skupinu aminové skupiny oxykarbonylového typu nebo benzylového typu, přičemž ostatní substituenty Ri popřípadě znamenají atom vodíku, které se provede zpracováním této sloučeniny přizpůsobeným povaze chránící skupiny aminoskupiny, jako například v případě, že touto chránící skupinou aminoskupiny je skupina alkoxykarbonylového typu, se toto zpracování provede reakcí se silnou kyselinou, jako je například kyselina trifluoroctová, nebo ještě je touto chránící skupinou aminoskupiny skupina benzylového typu, potom se toto zpracování provede katalytickou hydrogenaci v přítomnosti katalyzátoru na bázi palladia, čímž se získá sloučenina obecného vzorce I ve formě volné báze nebo ve formě některé z jejích adičních solí, (ii) případně následuje získání jiné další adiční soli z této volné báze nebo z její adiční soli získané v předchozím stupni (i). V tomto stupni (ii) se konverze jedné adiční soli nebo jinou adiční sůl provede prakticky přes sloučeninu obecného vzorce I ve formě její volné báze, nebo výměnou opačně nabitého iontu v přítomnosti přebytku kyseliny odpovídající soli, která se má získat.

-9CZ 292373 B6

Uvedenou sloučeninu obecného vzorce Π je možno připravit za použití metody vybrané z násle dujících variant:

(a) Varianta A, která představuje postup sestávající z následujících stupňů:

(i) kondenzace alkoholu obecného vzorce ΙΠ:

HO N *CH R.

| |

Rj R ve kterém znamená:

R atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, jako je například BOC skupina, a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (RS) nebo o konfiguraci (R), s chlormravenčanem nebo se symetrickým uhličitanem, jako je například 4-nitrofenylchlormravenčan, v přítomnosti bazické sloučeniny, jako je například triethylaminu, v inertním reakčním rozpouštědle a při teplotě místnosti (to znamená v rozmezí od 15 do 25 °C), načež potom následuje:

(ii) reakce sloučeniny získané ve shora uvedeném stupni (í) s aminem obecném vzorce IV:

ve kterém:

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny, jako je například BOC skupina, v inertním reakčním rozpouštědle a při teplotě pohybující se v rozmezí do 25 do 50 °C za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

(II) ve kterém:

A znamená skupinu -NH-CO-,

-10CZ 292373 B6

Ri znamená chránící skupinu aminoskupiny, jako je například BOC skupina, (b) Varianta B, která představuje postup sestávající z následujících stupňů:

(i) reakce kyseliny obecného vzorce V:

NH ‘ C CH* II o

ve kterém:

R₂ představuje chránící skupinu aminoskupiny, jako je například benzyloxykarbonylová skupina, s difenylfosfoiylnitridem obecného vzorce VI:

(c₆h₅o)₂—p-n₃ k (VI) v přítomnosti bazické sloučeniny, jako je například triethylamin, v rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, a při teplotě místnosti, čímž se získá meziprodukt obecného vzorce VII:

^R2'^sNH''^ÍCH2>6''c'^tra''CHZ^CN₃ <^V1I>

O (ii) takto získaná sloučenina obecného vzorce VII se podrobí přesmyku, známému pod označením Curtiusova reakce, přičemž současně reaguje takto získaný izokyanát s alkoholem obecného vzorce ΠΙ:

(III)

I f

Rj R ve kterém znamená:

R atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, která se odlišuje od skupiny R₂ uvedené výše, jako je například BOC skupina, a

-11 CZ 292373 B6 *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), v rozpouštědle, jako je například konkrétně toluen, při teplotě pohybující se v rozmezí do 0 do 140 °C a po dobu v rozmezí do 5 do 50 hodin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce VDI:

T¹ Í ^CH'^XN’H''^RL (W ve kterém mají R, R_b R₂ a *C stejný význam jako bylo uvedeno shora, (iii) odstranění chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce VHI, získané shora uvedeným způsobem, specifickým zpracováním této sloučeniny, při které se nahradí chránící skupina R₂aminoskupiny atomem vodíku, jako například v případě, kdy R₂ znamená benzyloxykarbonylovou skupinu, se provede katalytickou hydrogenaci v přítomnosti katalyzátoru na bázi palladia, čímž se získá sloučenina obecného vzorce IX:

ve kterém R, Ri a *C mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, (iv) a potom následuje reakce takto získané sloučeniny obecného vzorce IX ve stupni (iii) s kyselinou aminoiminomethansulfonovou v rozpouštědle, jako je například methanol, při teplotě místnosti (to znamená při teplotě v rozmezí od 15 do 25 °C) a po dobu 8 až 50 hodin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

ve kterém:

R a *C mají stejný význam jako bylo uvedeno shora,

A je skupina -CO-NH-, a

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, jako je například BOC skupina, s výjimkou dvou těchto skupin Ri vázaných na guanidinovou skupinu, kde každá představuje atom vodíku, (iv') nebo se provede varianta výše uvedeného stupně (iv), při které se do reakce uvádí sloučenina obecného vzorce IX se sloučeninou obecného vzorce X:

-12CZ 292373 B6

ve kterém:

Ri představuje chránící skupinu aminoskupiny, jako je například skupina BOC, v rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, v přítomnosti bazické sloučeniny, zejména triethylaminu, přičemž tato reakce se provádí při teplotě místnosti a po dobu v rozmezí od 8 hodin do 100 hodin za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

*CH l R x(Ce₂)₄^^(ch₂)_2S__tt>,nh.

R_x (H), ve kterém:

A znamená skupinu -NH-CO-,

R je atom vodíku nebo methylová skupina,

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny, jako je například BOC skupina, a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom vodíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R).

Sloučeninu obecného vzorce ΙΠ:

HO Ν

I *CH R, l ¹

R ve kterém:

R znamená methylovou skupinu, *C představuje uhlíkový atom s konfigurací (RS) nebo s konfigurací (7?), a

Ri znamená chránící skupinu aminoskupiny, jako je například skupina BOC, je možno připravit:

(a) reakcí 4-aminobutanolu se sloučeninou obecného vzorce:

-13CZ 292373 B6

R_X^H—*CH—(CH₂)₂—O—SO₂—G^h ₃ ve kterém:

Ri znamená chránící skupinu aminoskupiny, j ako j e například BOC skupina, za vzniku sloučeniny obecného vzorce:

R₁—NH—*CH—(CH₂)₂—NH—(CH₂)₄—OH

I ch₃ načež se potom zavede chránící skupina aminoskupiny na volnou aminovou skupinu, například reakcí s t-butyldikarbonátem (BOC₂O), jestliže Ri znamená skupinu BOC, přičemž se získá požadovaná sloučenina obecného vzorce ΙΠ, (b) reakcí halogenidu obecného vzorce:

X-(CH₂)₄-O-R₃ ve kterém:

X znamená atom halogenu, jako je například atom jodu nebo atom bromu, a

R₃ představuje chránící skupiny hydroxylové skupiny, zejména tritylovou skupinu, se sloučeninou obecného vzorce:

Ř_r—NH—*CH—(CH₂)₂—NH—CH₂ ch₃ ve kterém:

R¹ znamená chránící skupinu aminoskupiny, jako je například skupina BOC, přičemž se získá sloučenina obecného vzorce:

Rj—NH—*CH—(CH₂)₂—N“ (CH₂)₄—O—R₃

načež se potom podrobí tato sloučenina selektivnímu odstranění chránící skupiny za vzniku sloučeniny obecného vzorce:

-14CZ 292373 B6

Rj—-NH—*CH—(CH₂) ₂—NH—-(CH₂) ₄—OH

I ch₃ a do této sloučeniny se potom zavede chránící skupina Ri aminoskupiny, například s t-butyldikarbonátem, jestliže Ri představuje skupinu BOC, čímž se získá požadovaná sloučenina obecného vzorce ΙΠ.

Sloučenina obecného vzorce ΙΠ, ve které R znamená methylovou skupinu a Ri znamená skupinu BOC, představuje novou sloučeninu, která náleží do rozsahu uvedeného vynálezu.

Sloučeninu obecného vzorce V:

^COOH NH ’ C CH*

S ' <^v>· ve kterém:

R₂ znamená chránící skupinu aminoskupiny, zejména skupinu Z (to znamená benzyloxykarbonylovou skupinu), je možno získat ze sloučeniny vzorce:

Br— (CH₂ ) ₅—C—NH—CH₂—COO—C₂H₅

II o

následně provedenými reakcemi:

(a) s kyanidem za vzniku sloučeniny vzorce:

NsC—(CH₂)₅—C—NH—CH₂—COO—C₂H₅

O (b) s roztokem hydroxidu sodného za vzniku kyseliny vzorce:

(c) s vodíkem v přítomnosti hydrogenačního katalyzátoru za vzniku aminu vzorce:

H₂N—(CH₂)₆—c—NH—CH₂—COOH

II o

- 15CZ 292373 B6 (d) a nakonec s reakčním činidlem k zavedení chránící skupiny aminoskupiny, jako je například benzylchlormravenčan, čímž se získá požadovaná sloučenina obecného vzorce V, ve kterém R₂znamená benzyloxykarbonylovou skupinu (Z).

Příklady provedení vynálezu

15-Deoxyspergualinové analogy, způsob jejich přípravy, meziprodukty tohoto způsobu, použití těchto sloučenin a výsledky získané při provádění farmakologických testů, při kterých byly testovány sloučeniny podle vynálezu a porovnávány se známými sloučeninami podle dosavadního stavu techniky budou v dalším blíže vysvětleny a uvedeny v následujících příkladech provedení, které jsou pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah tohoto vynálezu. Použitá nomenklatura v těchto příkladech odpovídá doporučované nomenklatuře v Chemical Abstracts', to znamená ester typu „t-butyl....-oáť bude uváděn jako 1,1-dimethylethylester kyseliny ...-ové.

V této příkladové části budou nejprve uvedeny „Přípravy“ které se vztahují k přípravě meziproduktů podle uvedeného vynálezu, a potom „Příklady“, které popisují postup přípravy sloučenin podle vynálezu.

V případě, že sloučeniny ve své struktuře obsahují asymetrický atom, potom uvedení žádaného specifického označení nebo označení (R,S) znamená, že se jedná o v podstatě ekvimolekulámí směs dvou enantiomerů (to znamená „racemickou“ sloučeninu). Jestliže budou tyto sloučeniny označeny symbolem (R) nebo (5) bezprostředně po identifikaci polohy substituentu, potom toto označení znamená, že uhlíkový atom, ke kterému je připojen tento substituent, má konfiguraci (7?) nebo konfiguraci (S), což odpovídá pravidlům podle Cahna, Ingolda a Preloga.

Spektrální charakteristiky vztahující se na signály získané metodou nukleární magnetické rezonance (NMR) jsou uváděny pro proton (*H) a pro izotop uhlíku 13 (¹³C) a znamená následující: chemický posun vzhledem k tetramethylsilanovému signálu a v závorce uváděný tvar signálu (s pro singlet, d pro dublet, t pro triplet, q pro kvadruplet, m pro multiplet, bs pro pás signálu) a číslo protonu, ke kterému se daný signál vztahuje. Pro identifikaci byla Ή NMR spektra prováděna při 300 MHz.

Příprava I

Postup přípravy bis-(l,l-dimethylethyl)esteru kyseliny 3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl[amino]-21-[( 1, l-dimethylethoxy)karbonyl]-l 2,15-dioxo-l 6-oxa-2,4,11,14,21,25-hexaazahexakos-2-endiové.

Podle tohoto postupu byl 1 gram (což představuje 2,89.10^-3 mol (1,1-dimethylethylesteru kyseliny [3-[[( 1, l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]propyl]-(4-4iydroxybutyl)karbamové rozpuštěn ve 20 mililitrech tetrahydrofuranu (THF), načež bylo přidáno 0,45 gramu (což představuje

4,5.10^-3 mol) triethylaminu a potom následoval přídavek roztoku obsahujícího 0,58 gramu (což představuje 2,89.10^-3 mol) 4—nitrofenylchlormravenčanu v 5 mililitrech THF. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 15 hodin při teplotě místnosti, načež byl přidán roztok obsahující 1,2 gramu (což je 2,89.10^-3 mol) 1,1-dimethylethylesteru kyseliny 13-amino3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]-12-oxo-2,4,ll-triazatridec-2-enové v 6 mililitrech THF a takto získaná reakční směs byla potom zahřáta na teplotu 40 °C a promíchávána při této teplotě po dobu 5 hodin. Po zkoncentrování této reakční směsi za sníženého tlaku byl získaný zbytek přečištěn chromatografickou metodou při středním tlaku na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi methylcyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 7:3a potom čistého ethylacetátu, a tímto shora uvedeným způsobem byl získán požadovaný produkt ve formě transparentního oleje.

-16CZ 292373 B6

Výtěžek: 1 gram (44%).

Ή NMR (CDC1₃):

I, 3-1,9 (m, 50H)

3,85 (d,2H),

4,7-5,3 (bs, 1H), 6,0-6,2 (bs, 1H),

II, 5 (s, 1H).

3,05-3,55 (m, 10 H),

4,10 (t,2H),

5,4-5,6 (bs, 1 H)

8,3 - 8,5 (bs, 1 H),

Příklad 1

Postup přípravy tris(trifluoracetátu) [4-[(3-aminopropyl)amino]butoxykarbonylamino]-jV-[6[(aminoiminomethyl)amino]hexyl]acetamidu.

Podle tohoto příkladu byla připravena směs obsahující 1 gram (což představuje l,27.10‘³ mol) sloučeniny získané postupem podle shora uvedené Přípravy I v 10 mililitrech dichlormethanu a 10 mililitrech kyseliny trifluoroctové, načež bylo toto reakční médium promícháváno po dobu 15 hodin při teplotě místnosti. Použitá rozpouštědla byla potom odstraněna za sníženého tlaku a vzniklý zbytek byl potom přečištěn chromatografickou metodou za středního tlaku (MPLC) na oxidu křemičitém typu RP18 (velikost částeček 5 až 20 pm), přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethanolu, vody a kyseliny trifluoroctové v objemovém poměru 2 : 7,5 : 0,5. Frakce obsahující čistý produkt byly potom zkoncentrovány za sníženého tlaku, tento podíl byl opětně rozpuštěn ve vodě a lyofilizován, čímž bylo získáno 0,78 gramu požadovaného produktu ve formě transparentní bílé amorfní pevné látky.

Výtěžek: 84 %.

Ή NMR (DMSO-d₆):

1,2-1,55 (m, 8H),

1,8-1,95 (m,2H),

3,55 (d, 2H),

6,7 - 7,4 (m, 4H),

7,75 - 8,0 (m, 4H),

1,6 - 1,75 (m, 4 H),

2,8-3,1 (m, 10 H),

3,95 (t,2H),

7,55 (t,lH),

8,5 - 8,65 (m, 3H).

¹³C NMR (D₂O/dioxan-h_g):

Příklad Ibis

Postup přípravy tris(hydrochloridu) [4-[(3-aminopropyl)amino]butoxykarbonylamino]-V-[6[(aminoiminomethyl)amino]hexyl]acetamidu.

Podle tohoto příkladu byl připraven roztok obsahující 3,5 gramu sloučeniny podle příkladu 1 (což představuje 4,8.10'³mol) v 7 mililitrech bezvodého ethanolu, načež bylo přidáno 10 mililitrů 1,3 M roztoku chlorovodíku v ethanolu, přičemž tento přídavek byl proveden po kapkách při teplotě 0 °C. Po dokončení tohoto přidávání byla reakční směs promíchávána po dobu 30 minut a získaná sraženina byla potom odfiltrována. V dalším postupu byla získaná pevná látka promyta bezvodým ethanolem, usušena za použití vakua při teplotě v rozmezí do 35 do 40 °C, čímž byl získán požadovaný produkt (v množství 1,72 gramu) ve formě hygroskopického bílého prášku.

-17CZ 292373 B6

Výtěžek: 1,72 gramu (72 %);

Teplota tání: 107,5 °C.

Příprava Π

Postup přípravy 1,1-dimethylesteru kyselin [3-[[4-(tris)fenyl]methoxy]butyl](fenylmethyl)amino]-l-(lř)-methylpropyl]karbamové.

Podle tohoto provedení byl připraven roztok obsahující 3,77 gramu (což představuje

13.5.10^- ³ mol) 1,1-dimethylethylesteru kyseliny [3-(fenylmethylamino)-l-(R)-methylpropyl]karbamové kyseliny ve 270 mililitrech butanolu, načež bylo přidáno 12 gramů (což představuje

27.1.10^- ³ mol) 1-jod—4—[tris(fenyl)methoxy]butoxy]butanu a 3,74 gramu (což představuje

27,1.10^-3 mol) uhličitanu draselného. Tato reakční směs byla potom promíchávána při teplotě v rozmezí do 95 do 100 °C po dobu 48 hodin. Po ochlazení byla tato reakční směs zfiltrována a zkoncentrována za sníženého tlaku. Získaný zbytek byl potom vložen do dichlormethanu a promyt vodou. Po zkontrolování organické fáze za sníženého tlaku byl takto získaný produkt přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 80 : 20, přičemž tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt ve formě oleje.

Výtěžek: 6 gramů (75 %).

[a]_D ²⁴ = -0,22° (c-1,8; CHCI3).

Ή NMR (CDC1₃):

1,02 (d, 3 H),

2,38 (m, 3 H),

3,40 (d,lH),

7,21 - 7,43 (m, 20H).

1,40 (s, 9 H),

2,55 (m, 1 H),

3,6 (d, 2 H),

1,59 (m, 6 H),

3,0(bs,2H),

5,70 (s, 1H),

Příprava ΙΠ

Postup příprava 1,1-dimethylethylesteru (hydrochlorid) kyseliny [3-[[4-hydroxybutyl]amino-l(R)-methylpropyl]karbamové.

Podle tohoto provedení bylo 4,94 gramu (což představuje 8,33.10^-3 mol) sloučeniny připravené postupem podle Přípravy Π rozpuštěno ve 230 mililitrech 95 %-ního ethanolu (to znamená přibližně směs ethanolu a vody v objemovém poměru 95/5), načež bylo přidáno 4,37 mililitru 4,3 N roztoku kyseliny chlorovodíkové HC1 v 95 % ethanolu a 1 gram 5%-ního palladia na aktivním uhlí. Takto připravená reakční směs byla potom hydrogenována po dobu 40 hodin při atmosférickém tlaku a při teplotě místnosti. Použitý katalyzátor byl potom odfiltrován a filtrát byl zkoncentrován za sníženého tlaku. Podle tohoto postupu bylo po přečištění, které bylo provedeno chromatografickou metodou na silikagelu za použití směsi chloroformu a methanolu v objemovém poměru 9 : 1 jako elučního činidla, získáno 2,09 gramu požadovaného produktu. Potom byl tento produkt promyt ethyletherem, čímž byl získán požadovaný čistý produkt ve formě bílé krystalické pevné látky.

Výtěžek: 1,6 gramu (64 %);

-18CZ 292373 B6

Teplota tání: 135 °C;

[a]_D ²² = -7,6° (c = 1; CHC1₃).

Příprava IV

Postup přípravy 1,1-dimethylesteru kyseliny [3-[(4-hydroxybutyl)(l,l-dimethylethoxykarbonyl)amino]-l-(7?}-methylpropyl]karbamové.

Podle tohoto provedení byla připravena směs, která obsahovala 1,54 gramu (což představuje 5,18.10 ³ mol) sloučeniny připravené postupem podle Přípravy ΙΠ, 8 mililitrů dioxanu a roztok obsahující 0,77 gramu (což představuje 7,26.10^-3 mol) uhličitanu sodného ve 5,7 mililitru vody. Tato reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 5 °C, načež byl k této reakční směsi přidán roztok obsahující 1,13 gramu (což představuje 5,18.10^-3 mol) diterc-butyldikarbonátu (BOC₂O) ve 3 mililitrech dioxanu a tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 15 hodin. Po přídavku 10 mililitrů vody byla provedena extrakce ethylacetátem a organická fáze byla potom zkoncentrována za sníženého tlaku. Po přečištění chromatografíckou metodou na silikagelu, za použití směsi hexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50: 50 jako elučního činidla, byl získán požadovaný produkt ve formě bezbarvého viskózního oleje.

Výtěžek: 1,82 gramu (97 %);

[a]_D ²² = +4,25° (c = 2; CHC1₃).

’H NMR (CDC1₃):

0,87 (d, 3 H),

1,50 - 1,70 (m, 6 H),

3,67 (t, 3 H),

1,44-1,46 (2s, 18 H),

3,20 (m, 4 H),

4,41-4,56(2 bs, 1 H)

Příprava V

Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny [3-[N-[4-[(4-nitrofenoxy)karbonyloxy]butyl]-N-[ 1, l-dimethylethoxykarbonyl]amino]-l-(R)-methylpropyl]karbamové.

Podle tohoto provedení byl připraven roztok obsahující 2,73 gramu (což představuje 7,57.10'³ mol) sloučeniny získané postupem podle předchozí Přípravy IV ve 55 mililitrech toluenu a 0,62 mililitru (což představuje 7,7.10^-3 mol) pyridinu, načež bylo přidáno 1,6 gramu (což představuje 7,7.10^-3 mol) 4-nitrofenylchlormravenčanu. Tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 3 hodin a vytvořené soli byly potom odfiltrovány. Získaný filtrát byl zkoncentrován za sníženého tlaku a potom byl tento podíl přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi dichlormethanu a ethylacetátu v objemovém poměru 90 : 10, a tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt.

Výtěžek: 3,1 gramu (78 %);

*H NMR (CDC1₃):

1,15 (d, 3H), 1,44 (s, 9H),

1,5-1,8 (m, 6H), 3,24 (m, 4H),

4,30 (t, 2H), 7,39 (d, 2H),

1,46 (s, 9H),

3,63 (m, 1H),

8,28 (d, 2H).

-19CZ 292373 B6

Příprava VI

Postup přípravy bis(l,l-dimethylethyl)esteru kyseliny 3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]-21-[( 1, l-dimethylethoxy)karbonyl]-24-(J?)-methyl-l 2,15-dioxo-l 6-oxa-2,4,11,14,21,25-hexaazahexakos-2-endiové.

Podle tohoto provedení bylo 2,8 gramu (což představuje 5,33.10'³ mol) sloučeniny získané podle shora uvedené Přípravy V rozpuštěno ve 300 mililitrech THF, načež bylo přidáno 0,85 mililitru (což představuje 6,1.10^-3 mol) triethylaminu a roztok obsahující 2,54 gramu (což představuje

6,1.10^-3 mol) 1,1-dimethylethylesteru kyseliny 13-amino-3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonylJamino]-12-oxo-2,4,ll-triazatridec-2-enové kyseliny v 50 mililitrech tetrahydrofuranu THF. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 4 hodin při teplotě místnosti a potom byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Získaný pevný zbytek byl potom přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 30 : 70 a potom 10 : 90, a tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt ve formě světle žluté pevné látky.

Výtěžek: 3,85 gramu (90,2 %);

[a]_D ²² =+0,4° (c = 2; CHC1₃).

Ή NMR (CDCI3):

1,15 (d, 3H),	1,3 - 1,70 (m, 50 H),
3,25 (m, 6H),	3,39 (q,2H),	3,63 (m, 1H),
3,83 (d, 2H),	4,14 (t,2H,	4,6 (bs, 1H),
5,60 (bs, 1H),	5,60 (bs, 1H),	6,13 (bs, 1H),
8,31 (s, 1H),	11,50 (s, 1H).

Příklad 2

Postup přípravy tris(trifluoracetátu) [4-[(3-(J?)-aminobutyl)amino]butoxykarbonylammo]-7V-[6(aminoiminomethylamino]-V-[6-(aminoiminomethylamino)hexyl]acetamidu.

Podle tohoto provedení bylo 3,7 gramu (což představuje 4,6.10’³ mol) sloučeniny získané postupem podle shora uvedené Přípravy IV ochlazeno na teplotu 0 °C v nádobě s kulatým dnem, načež bylo přidáno 37 mililitrů trifluoroctové kyseliny. Takto získaná reakční směs byla promíchávána po dobu 15 hodin při teplotě v rozmezí od 5 do 10 °C, načež byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Získaný surový produkt byl potom přečištěn chromatografickou metodou na oxidu křemičitém typu RP18 a za použití směsi vody, acetonitrilu a trifluoroctové kyseliny v objemovém poměru 70 : 15 : 15 jako elučního činidla, a tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt ve formě hygroskopické bílé pevné látky.

Výtěžek: 3,1 gramu (což je 92 %).

[a]_D ²² = +0,89 (c = 2; CH₃OH).

-20CZ 292373 B6 ‘HNMRCDMSO-de):

1,18 (d,3H), 1,26 (m,4H),

1.61 (m,4H), 1,75 (m,lH),

2.85 - 3,20 (m, 8H), 3,28 (m, 1H),

3,96 (bs, 2H), 7,25 (t, 1H),

7.86 (t, 1H), 7,98 (s, 3H),

8.62 (s, 2H).

1,41 (m, 4H),

1,91 (m, 1H), 3,54 (d,2H),

7,64 (s, 1H),

7,98 (s, 3H), ¹³C NMR (D₂O + dioxan):

Příklad 2bis

Postup přípravy tris(hydrochloridu) [4-[(3-(7?)-aminobutyl)amino]butoxykarbonylamino]-N-[6(aminoiminomethylamino)hexyl]acetamidu.

Podle tohoto provedení byl připraven roztok obsahující 200 miligramů (což představuje 0,27.10^-3 mol) sloučeniny, která byla připravena postupem podle příkladu 2, a 0,5 mililitru ethanolu, načež bylo přidáno 0,235 mililitru 10,4 N roztoku kyseliny chlorovodíkové v ethanolu. Takto získaná směs byla potom promíchávána po dobu 15 minut při teplotě místnosti a potom byly přidány 2 mililitry diizopropyletheru. Takto získaný vysrážený produkt byl potom oddělen dekantováním, dále byl opláchnut diizopropyletherem a potom byl znovu rozpuštěn ve 3 mililitrech vody a lyofilizován, čímž byl připraven požadovaný produkt ve formě amorfní pevné bílé látky.

Výtěžek: 117 miligramů (85 %);

[a]_D ²² = +1,45° (c = 2, CH₃OH).

*H NMR (DMSO-de):

1,21 (d,3H), 1,26 (m,4H), 1,42 (m,4H)

1,64 (m, 4H), 1,88 (m, 1H), 2,04 (m, 1H),

2,89 - 3,10 (m, 8H), 3,35 - 3,70 (m, 3H),

3,97 (bs, 2H), 7,32 (t, 1H), 7,80 (t, 1H),

7,92 (t, 1H), 8,24 (s, 3H), 9,16 (s, 2H).

Příprava VII

Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny [3-[?/-[4-hydroxybutyl]ammo]-l-(7?,S)methylpropyljkarbamové.

Podle tohoto provedení byl připraven roztok, který obsahoval 6,2 gramu (což představuje

23,25.10^-3 mol) 1,1-dimethylethylesteru [l-(J?,5)-methyl-3-[(methylsulfonyl)oxy]propyl]karbamové kyseliny, ve 40 mililitrech 1,2-dimethoxyethanu, načež byl k tomuto roztoku přidán roztok obsahující 4,14 gramu (což představuje 46,5.10^-3 mol) 4—aminobutanolu v 10 mililitrech

1,2-dimethoxyethanu, přičemž tento přídavek byl proveden po kapkách. Takto získaná reakční směs byla zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin a potom byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Takto získaný surový produkt byl přečištěn chromato

-21 CZ 292373 B6 grafickou metodou na silikagelu za použití směsi ethylacetátu, ethanolu a 33 %-ního vodného roztoku amoniaku v objemovém poměru 6 : 3 : 0,1 jako elučního činidla, a tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt ve formě oleje.

Výtěžek: 2,5 gramu (41,5 %).

’H NMR (CDClj):

1.14 (d,3H), 1,44 (s,9H), 1,5 - 1,8 (m, 6H).

2,64 (m, 4H), 3,58 (t, 2H), 3,71 (m, 1H),

4,50 (d, 1H).

Příprava Vin

Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny [3 -[V-(4-hydroxybutylj-V-ý 1,1 -dimethylethoxykarbonyl)amino]-l-TR<S)-methylpropyl]karbamové.

Postup podle tohoto provedení se prováděl stejným způsobem jako je uvedeno v Přípravě IV, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny získané postupem podle Přípravy VII, a požadovaný produkt byl získán ve výtěžku 70 %.

*H NMR (CDCI3):

1.15 (d,3H), 1,44 - 1,46 (s, 18H).

1,5 - 1,7 (m, 6H), 3,20 (m, 4H), 3,67 (t, 3H),

4,39-4,56 (2bs, 1H).

Příprava IX

Postup přípravy bis(l,l-dimethylethyl)esteru kyseliny 3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]-21—[(1, l-dimethylethoxy)karbonyl]-24-(R,₁S)-methyl-l 2,15-dioxo-l 6-oxa-2,4,11,14,2 l,25-hexaazahexakos-2-endiové.

Podle tohoto postupu bylo 1,8 gramu sloučeniny získaná postupem podle Přípravy VHI, viz výše, rozpuštěno ve 36 mililitrech tetrahydrofuranu THF, načež bylo k tomuto roztoku přidáno 1,1 gramu (což představuje 7,8.10'³ mol) triethylaminu a 1,10 gramu (což představuje 5,45.10'³ mol) 4-nitrofenylchlormravenčanu. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 15 hodin a potom byl přidán roztok obsahující 2,1 gramu (což představuje 5,06.10’³ mol) 1,1-dimethylethylesteru kyseliny 13-amino-3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]-12-oxo-2,4,ll-triazatridec-2-enové ve 30 mililitrech tetrahydrofuranu THF a takto připravená reakční směs byla potom promíchávána po dobu 18 hodin. Tímto způsobem vznikla pevná látka, která byla odfiltrována a roztok byl zkoncentrován za sníženého tlaku, přičemž získaný zbytek byl přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu za použití směsi methylcyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50 a potom 20 : 80 jako elučního činidla, a tímto shora uvedeným způsobem byl získán požadovaný produkt ve formě oleje.

Výtěžek: 0,97 gramu (24,2 %);

-22CZ 292373 B6 *H NMR (CDCI3):

I, 15 (d, 3H),

3,26 (m, 6H),

3,83 (d, 2H),

5,60 (bs, 1H),

II, 49 (s, 1H).

Příklad 3

Postup přípravy tris(trifluoracetátu) [4—[(3-(RS)aminobutyl)amino]butoxykarbonylamino]-7V[6-(aminoiminomethylamino)hexyl]acetamidu.

Podle tohoto provedení bylo 0,95 gramu (což představuje 1.18.10'³ mol) sloučeniny připravené postupem podle Přípravy IX rozpuštěno v 10 mililitrech dichlormethanu, načež bylo přidáno 10 mililitrů kyseliny trifluoroctové. Takto připravená reakční směs byla potom promíchávána po dobu 24 hodin při teplotě místnosti, načež byla zkoncentrována za sníženého tlaku a vzniklý zbytek byl vyčištěn chromatografickou metodou na silikagelu RP18-type za použití směsi acetonitrilu, vody a kyseliny trifluoroctové v objemovém poměru 15 : 80 : 5 jako elučního činidla. Po lyofilizování čistých frakcí byl získán požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky.

Výtěžek: 580 miligramů (66 %);

*H NMR (DMSO-dé):

1,18 (d, 3H), 1,26 (m, 4H),

1,61 (m, 4H), 1,74 (m, 1H),

2,85 - 3,10 (m, 8H), 3,28 (m, 1H),

3,96 (t,2H), 7,23 (t,lH),

7,84 (t, 1H), 7,93 (s, 3H),

1,41 (m,4H),

1,91 (m, 1H),

3,54 (d,2H),

7,58 (t, 1H),

8,56 (m, 2H).

¹³C NMR (D₂O + dioxan-hg):

Příprava X

Postup přípravy ethylesteru V-(6-kyanohexanoyl)glycinu.

Podle tohoto provedení bylo 23,73 gramu (což představuje 84,7.10³ mol) ethylesteru N-(6bromhexanoyl)glycinu rozpuštěno ve 200 mililitrech ethanolu, načež bylo přidáno 6,5 gramu (což představuje 0,1 mol) práškového kyanidu draselného. Takto získaná reakční směs byla zahřáta kvaru pod zpětným chladičem a při této teplotě varu pod zpětným chladičem byla promíchávána po dobu 15 hodin. Po zkoncentrování této reakční směsi za sníženého tlaku byl získaný zbytek vložen do dichlormethanu a organická fáze byla promyta vodným roztokem chloridu sodného. Organická fáze byla usušena a zkoncentrována za sníženého tlaku, čímž byl připraven požadovaný produkt.

Výtěžek: 19 gramů (99 %);

-23CZ 292373 B6 'HNMRCCDCh):

1,29 (ζ3Η),

1,6-1,8 (m, 4H),

4,03 (d, 2H),

1,45 - 1,55 (m, 2H),

1,27 (t, 2H), 2,36 (t,2H),

4,22 (q, 2H), 5,36 - 6,05 (bs, 1H).

Příprava XI

Postup přípravy jV-(6-kyanohexanoyl)glycinu.

Podle tohoto postupu byla připravena reakční směs obsahující 19 gramů (což představuje 84.10‘³ mol) sloučeniny připravené postupem podle Přípravy X, dále 120 mililitrů 1,2—dimethoxyethanu a 120 mililitrů 1 M roztoku hydroxidu sodného, přičemž tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 15 minut při teplotě místnosti. Ktéto reakční směsi bylo potom přidáno 100 mililitrů vody a 200 mililitrů dichlormethanu a tato reakční směs byla potom okyselena na hodnotu pH 1 za současného chlazení na ledové lázni. Získaná vodná fáze byla potom několikrát extrahována dichlormethanem a organické fáze byly spojeny, přičemž tento spojený podíl byl usušen a zkoncentrován za sníženého tlaku, a tímto shora uvedeným postupem byla získána požadovaná sloučenina ve formě slámově žlutého oleje.

Výtěžek: 10,2 gramu (61 %);

*H NMR (CDC1₃):

1,45 - 1,55 (m, 2H), 1,6 - 1,8 (m, 4H),

2,3 (t, 2H), 2,36 (t, 2H), 4,08 (d, 2H),

6,15 -6,25(bs, 1H).

Příprava ΧΠ

Postup přípravy V-(7-aminoheptanoyl)glycinu (sodná sůl).

Při provádění tohoto postupu bylo 8,2 gramu (což představuje 41,4.10'³ mol) JV-(6-kyanohexanoyl)glycinu rozpuštěno ve 100 mililitrech ethanolu, načež bylo přidáno 60 mililitrů 1 M roztoku hydroxidu sodného a 800 miligramů Raneyova niklu. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána pod atmosférou vodíku 3,5.10⁵ Pa a při teplotě místnosti po dobu 8 hodin. Po dokončení této reakce bylo přidáno 20 mililitrů 1 M kyseliny chlorovodíkové a takto připravená reakční směs byla potom zkoncentrována za sníženého tlaku, čímž bylo připraveno 10,2 gramu bílé pastovité pevné látky, která obsahovala požadovanou sůl a chlorid sodný, přičemž tato látka byla potom použita pro další postup bez dalšího přečišťování.

'HNMRÍDMSO-dé):

1,15-1,6 (m,8H), 2,08 (t, 2H), 2,56 (t,2H).

3,32 (d, 2H), 7,1 - 7,25 (bs, 1H).

Příprava ΧΙΠ

Postup přípravy A^r-[7-[(fenylmethoxykarbonyl)amino]heptanoyl]glycinu.

Podle tohoto postupu byly 2 gramy sloučeniny získané postupem podle Přípravy ΧΠ rozpuštěny ve směsi 50 mililitrů vody a 50 mililitrů ethanolu, načež bylo přidáno 1,06 gramu (což

-24CZ 292373 B6 představuje 10'² mol) uhličitanu sodného a potom 2,34 gramu (což představuje 19,8.10^-3 mol) benzylchlormravenčanu. Takto připravená reakční směs byla potom promíchávána po dobu 15 hodin při teplotě místnosti, načež bylo toto reakční médium upraveno na hodnotu pH 1 za pomoci 1 M kyseliny chlorovodíkové a potom byla tato reakční směs extrahována dichlormethanem. Organická fáze byla usušena a zkoncentrována za sníženého tlaku, čímž vznikl surový produkt, který byl přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylacetátu, ethanolu a vodného roztoku amoniaku v objemovém poměru 6:3: 0,5, a tímto shora uvedeným postupem byl připraven požadovaný produkt ve formě pastovité pevné látky.

*H NMR (DMSO-de):

1,2-1,6 (m, 8H),

3,64 (d, 2H)

7,3 - 7,4 (m, 5H),

2,09 (t, 2H),

5,01 (s,2H),

7,94 (t,lH).

2,98 (td, 2H),

7,25 (t,lH),

Příprava XIV

Postup přípravy l-(fenylmethyl) 24-(1,l-dimethylethyl)esteru kyseliny 19-[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]-9,13-dioxo-14-oxa-2,10,12,19,23-pentaazatetrakosandiové.

Podle tohoto postupu bylo 0,5 gramu (což představuje 1,49.10’³ mol) kyseliny získané postupem podle Přípravy ΧΠΙ rozpuštěno ve 25 mililitrech tetrahydrofuranu THF, načež bylo přidáno 0,18 gramu (což představuje 1,8.10^-3 mol) triethylaminu a takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 0 °C. Potom bylo k této reakční směsi přidáno 0,46 gramu (což představuje

1.67.10^- ³ mol) difenylfosforylnitridu v 5 mililitrech tetrahydrofuranu THF, přičemž tento přídavek byl proveden po kapkách, a tato reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 45 minut. Z této reakční směsi bylo odstraněno rozpouštědlo za sníženého tlaku a zbytek byl přemístěn do 2 mililitrů toluenu, načež bylo přidáno 0,18 gramu (což představuje

1.8.10^- ³ mol) triethylaminu a 1,04 gramu (což představuje 3.10^-3 mol) 1,1-dimethylethylesteru kyseliny [3—[[(1, l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]propyl](4-hydroxybutyl)karbamové. Tato reakční směs byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 20 hodin, načež byla zkoncentrována za sníženého tlaku. Získaný surový produkt byl potom přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu za použití směsi methylcyklohexanu a ethylacetátu (gradient objemového poměru 8 : 2 až 1 : 9), a tímto shora uvedeným postupem byl připraven požadovaný produkt ve formě bílé pevné látky.

Výtěžek: 0,4 gramu (39,6 %);

Teplota tání: 115 °C;

*H NMR (CDClj):

1,2-1,7 (m, 32H), 2,15 (t, 2H),

3,05 - 3,3 (m, 8H), 4,05 (t, 2H), 4,5 (t, 2H),

4,7-4,9 (bs, IH), 5,08 (s,2H),

5,7 - 5,9 (bs, IH), 6,4 - 6,6 (bs, IH),

7,3 - 7,4 (m, 6H).

-25CZ 292373 B6

Příprava XV

Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny 22-amino-6-[( 1,1-dimethylethoxy)karbonyl]12,16-dioxo-l l-oxa-2,6,13,15-tetraazadokosanové.

Podle tohoto postupu byl roztok, který obsahoval 0,33 gramu (což představuje 0,48.10’³ mol) sloučeniny získané postupem podle Přípravy XIV v 15 mililitrech ethanolu, podroben katalytické hydrogenaci v přítomnosti 30 miligramů 5% palladia na aktivním uhlí, což bylo prováděno při atmosférickém tlaku a při teplotě místnosti po dobu 5 hodin. Po odfiltrování použitého katalyzátoru bylo rozpouštědlo odstraněno za sníženého tlaku a tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt ve formě oleje.

Výtěžek: 0,26 gramu (99 %);

’HNMR(CDC1₃):

1,2-1,75 (m, 32 H),

2,85 - 3,3 (m,8H),

4,7-5,4 (bs, 1H), 6,4-7,1 (bs, 1H).

2,2(t,2H), 2,8(t,2H),

4,07 (t, 2H), 4,53 (t, 2H).

5,7 - 6,1 (bs, 1H),

Příprava XVI

Postup přípravy bis(l,l-dimethylethyl)esteru kyseliny 3-[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino]-21-((1,1 -dimethylethoxy)karbony 1]-11,15-dioxo-16-oxa-2,4,12,14,21,25-hexaazahexakos-2-endiové.

Podle tohoto postupu byla připravena reakční směs obsahující 0,26 gramu (což představuje 0,477.10’³mol sloučeniny připravené postupem podle Přípravy XV, 0,276 gramu (což představuje 0,95.10'³ mol) 1,1-dimethylethylesteru kyseliny [[[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]amino](methylthio)methylen]karbamové a 200 μΐ triethylaminu ve 12 mililitrech tetrahydrofuranu THF, přičemž tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 4 dní při teplotě místnosti. Po odpaření použitého rozpouštědla, což bylo provedeno za sníženého tlaku, byl získaný surový produkt přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu za použití směsi methylcyklohexanu a ethylacetátu (gradient objemového poměru byl 7 : 3 až 2 : 8) jako elučního činidla, a tímto shora uvedeným postupem byl získán požadovaný produkt ve formě oleje.

Výtěžek: 0,10 gramu (26,7 %).

*H NMR (CDC1₃):

1,0-1,8 (m, 50H), 2,16 (t,2H),

3,05 - 3,3 (m, 6H), 3,4 (td, 2H), 4,07 (t, 2H),

4,55 (t,2H), 5,2 - 5,3 (bs, 1H),

5,7 - 5,8 (bs, 1H), 6,45 - 6,55 (bs, 1H),

8,3 (t, 1H), ll,5(s, 1H).

-26CZ 292373 B6

Příklad 4

Postup přípravy tris(trifluoracetátu) 7-[(aminoiminomethyl)amino]-V-[[4-[(3-aminopropyl)amino]butoxy]karbonylaminomethyl]heptanamidu.

V tomto příkladu bylo použito obdobného postupu jako je postup uvedený v příkladu 3, přičemž se vycházelo ze sloučeniny získané postupem podle Přípravy XVI, a požadovaný produkt byl získán ve výtěžku 54 %.

^!H NMR (DMSO-de):

1,2 - 1,35 (m, 4H), 1,4 - 1,7 (m, 8H),

1.8 - 1,95 (m, 2H), 2,06 (t, 2H),

2,8-3,1 (m,8H), 3,96 (t,2H),

6,85-7,4 (bs,3H), 7,55 - 7,7 (m, 2H).

7.8 - 8,0 (m, 4H), 8,33 (t, 1H),

8,55 - 8,7 (m, 2H).

4,32 (t,2H),

Příprava XVII

Postup přípravy l-(fenylmethyl) 24-(1,l-dimethylethyl)esteru kyseliny 19-[(l,l-dimethyloxy)karbonyl]-22-(7?)-methyl-9,13-dioxo-l 4-oxy-2,10,12,19,23-pentaazatetrakosandiové.

V tomto příkladu bylo použito obdobného postupu jako je postup uvedený v Přípravě XIV, přičemž jako výchozích látek bylo použito kyseliny získané podle Přípravy ΧΠΙ a alkoholu získaného postupem podle Přípravy IV, a tímto způsobem byl získán požadovaný produkt ve formě amorfní pevné látky.

Výtěžek: 46 %;

[a]_D ²⁴ = -2,2° (c = 1,06; CHC1₃).

*H NMR (CDC1₃):

1,15 (d,3H), 1,2 - 1,7 (m, 32 H), 2,15 (t,2H),

3,05 - 3,35 (m, 6H), 3,55 - 3,7 (m, 1H),

4,05 (t, 2H), 4,55 (t, 2H), 4,8 - 4,9 (bs, 1H),

5,09 (s,2H), 5,1-5,2 (bs, 1H),

5,5 - 5,9 (bs, 1H), 6,45 - 6,6 (bs, 1H),

7,3-7,4 (m, 5H).

Příprava XVm

Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny 22-amino-6-[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]3-(J?)-methyl-12,16-dioxo-l l-oxa-2,6,13,15-tetraazadokosanové.

V tomto příkladu bylo použito obdobného postupu jako je postup uvedený v Příprava XV, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny připravené postupem podle Přípravy XVH, a požadovaný produkt byl získán ve formě oleje.

Výtěžek: 99 %;

-27CZ 292373 B6 [a]_D ²⁰ = -2,l°(c= 1; CHC1₃).

‘HNMRÍCDCla):

1,15 (d,3H), l,2-l,7(m,32H), 2,19 (t,2H),

2,77 (t, 2H), 2,85 - 3,3 (m, 6H),

3,55-3,7 (m,lH), 4,07 (t,2H) 4,52 (t,2H),

5,7 - 6,3 (bs, 2H), 6,8 - 7,0 (bs, 1H).

Příprava XIX

Postup přípravy 1,1-dimethylethylesteru kyseliny 22-[(aminoiminomethyl)amino]-6-[(l,l-dimethylethoxy)karbonyl]-3-(7ř)-methyl-l 2,16-dioxo-l l-oxa-2,6,13,15-tetraazadokosanové.

Podle tohoto postupu bylo 0,4 gramu (což představuje 0,716.10^-3 mol) sloučeniny získané postupem podle Přípravy XVIII rozpuštěno v 10 mililitrech methanolu, přičemž dále bylo přidáno 0,186 gramu (což je 1,5.10^-3 mol) aminoiminomethansulfonové kyseliny a takto připravená reakční směs byla promíchávána při teplotě místnosti po dobu 3 dní. Po odstranění použitého rozpouštědla za sníženého tlaku byl získaný surový produkt přečištěn chromatografickou metodou na silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito směsi ethylacetátu, ethanolu a vodného roztoku amoniaku v objemovém poměru 6 : 3 : 0,1 a potom 6 : 3 : 1, a tímto shora uvedeným postupem byl připraven požadovaný produkt ve formě oleje.

Výtěžek: 0,37 gramu (86 %). [al_D ²² = -1° (c = 0,89; CHC1₃).

‘H NMR (CDCI3):

1,15 (d, 3H),

2,9 - 3,3 (m, 6H), 4,05 (t, 2H),

6,3-6,5 (bs, 1H),

7,8-8,0 (bs, 1H).

1,2-1,7 (m, 32 H),

3,5-3,75 (m,lH),

4,52 (t,2H),

7,05 - 7,3 (bs, 4H),

2,2(t,2H),

5,4-5,7 (bs, 2H),

Příklad 5

Postup přípravy tris(trifluoracetátu) 7-[(aminoiminomethyl)amino]-V-[[4—[(3-(R)-aminobutyl)amino]butoxy]karbonylaminomethyl]heptanamidu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu bylo použito obdobného postupu jako je postup podle příkladu 3, přičemž jako výchozí sloučeniny bylo použito sloučeniny připravené postupem podle Přípravy XIX, a tímto postupem byl připraven požadovaný produkt ve formě amorfní pevné látky.

Výtěžek: 42 %;

[a]_D ²³ = +l,2°(c= 1,CH₃OH).

-28CZ 292373 B6 'HNMRfDMSO-de):

1,18 (d, 3H),

1,4-1,55 (m, 4H),

1,7 - 1,85 (m, 1H),

2,05 (t,2H),

3,2-3,35 (m, 1H),

6,8-7,5 (bs, 3H),

7,95 (s, 4H),

1,2-1,35 (m,4H), 1,55-1,7 (m,4H),

1.85- 2,0 (m, 1H),

2.85- 3,1 (m,6H),

3,96 (t, 2H),

7,60 (t, 1H),

8,35 (t, 1H),

4,32 (t,2H),

7,68 (t, 1H),

8,5 - 8,7 (m, 2H), ¹³C NMR (D₂O + dioxan-hg):

18,0, 23,06, 25,79, 26,12, 26,25, 28,50, 31,22, 36,27, 41,86, 41,86, 44,61, 46,08, 46,55, 48,17, 65,48,15,52,159,06, 178,36.

Imunosupresivní účinek sloučenin podle uvedeného vynálezu byl prokázán pomocí testu, který je všeobecně znám pod označením reakce štěp versus hostitel. Podle tohoto testu byl u samečků myší B6D2F1 (C57B1/6 x DBA/2 první generace hybridů) potlačen imunitní systém intraperitoneálním (i.p.) podáním (injekčně) cyklofosfamidu. Po třech dnech (označen jako den 0 pokusu : Do) tyto myši obdržely 4 x 10⁷ C57B1/6 myších solenocytů intravenózním podáním. Tato zvířata byla potom rozdělena do skupin o přinejmenším 8 zvířatech, přičemž byla denně ošetřována v intervalu Di až D5 a v intervalu D7 až D10 intraperitoneálním podáním dále specifikovaných látek. Kontrolní skupina dostávala pouze vehikulum. Úmrtnost byla sledována až do Deo- Získané výsledky, které byly vyjádřené jako střední hodnota úmrtnosti ve dnech při dané dávce, jsou uvedeny v dále uvedené tabulce I, přičemž hodnoty uvedené v této tabulce jsou platnými hodnotami podle Logrankova testu (pravděpodobnost menší nebo rovnající se 5 %). Pro porovnání jsou v této tabulce I rovněž uvedeny hodnoty získané při použití známých látek (nebo látek o podobné struktuře) podle dosavadního stavu techniky):

(A) 15-deoxyspergualinu [ve formě tris(hydrochloridu)], a (B) sloučeniny, která odpovídá provedení podle příkladu 16 a EP-A-600 762:

Sloučenina B:

NH O

II II ^(CH₂)_6X .0^ ^NH

H₂N NH NH CHf C (CH₂)< ^X

O

Z tohoto porovnání je patrné, že sloučeniny podle uvedeného vynálezu projevují lepší účinnost než látky podle dosavadního stavu techniky nebo k dosažení stejné účinnosti vyžadují použití menších dávek.

-29CZ 292373 B6

Tabulka I

NH O

I

R

Látka	A	R	*0	Dávka (mg/kg)	Účinnost (dny)
příklad 1	-NH-CO-	H		1	53
příklad 2	-NH-CO-	ch₃	R	0,3	56
příklad 3	-NH-CO-	ch₃	R.S	1	56
příklad 4	-CO-NH-	H		0,3	45
příklad 5	-CO-NH-	ch₃	R	1	58
A(DSG)	porovnávací		1	43
B	porovnávací		1	46

Poznámka:

^(a) Všechny testované sloučeniny podle příkladu 1 až příkladu 5 podle vynálezu byly ve formě tris(trifluoracetátu).

Sloučenina podle uvedeného vynálezu jsou použitelné jako terapeuticky účinné látky nebo jako preventivní imunosupresivní činidla, zejména při prevenci odmítnutí vaskulámích nebo nevaskulámích alogenních nebo xenogenních orgánů nebo při reakci štěp versus hostitel, ke kterému dochází u vaskularizovaného nebo ne-vaskularizovaného štěpu při léčení geneticky určeného nebo získaného autoimunitního onemocnění (jako je například lupus erythematodes, roztroušená skleróza, revmatoidní polyartritida) nebo chronická zánětová onemocnění, jako je například kloubní revmatismus, a rovněž tak nejrůznějších patologických stavů, kdy se objevuje imunitní porucha, která se jeví jako příčina nebo faktor zodpovědný za udržování degradovaného klinického stavu.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu je možno rovněž podávat v kombinaci s cytotoxickými protinádorovými léčivy, přičemž účelem je omezit jejich vedlejší účinky, a rovněž je možno je podávat v kombinaci s látkami biotechnologického původu, zejména s rekombinantními cytokiny

-30CZ 292373 B6 nebo monoklonálními a polyklonálními protilátkami, přičemž účelem je snížení výskytu ochranných protilátek produkovaných pacientem.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu je možno použít k léčení parazitóz, zejména se to týká malárie.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu je možno podávat perorálně nebo injekčně (zejména intramuskulámími nebo intravenózními injekcemi), místně (zejména ve formě krémů nebo prostředků pro lokální aplikaci, nebo ve formě očních kapek), transdermálně, rektálně ve formě čípků nebo inhalováním.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu jsou zejména vhodné jako farmakologická činidla, zejména pro studium autoimunitních onemocnění.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Derivát ze skupiny 15-deoxyspergualinových analogů obecného vzorce I:

(I), ve kterém:

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-,

R znamená atom vodíku nebo skupinu CH₃, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom jehož konfigurace může být (R,S) nebo (R);

a jeho adiční soli s minerálními nebo organickými kyselinami.
2. Derivát podle nároku 1, obecného vzorce I, ve kterém R představuje methylovou skupinu a asymetrický uhlíkový atom *C má konfiguraci (R).
3. Způsob přípravy derivátu obecného vzorce I nebo některé z jeho adičních solí s minerálními nebo organickými kyselinami podle nároku 1, vyznačuj ící se tím, že:

(i) odstraní se chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce Π:

NO

II ^R1X x-C. ^(CH₂)₆. _zCH_2S .c. _x(CH₂)_4>w UCH₂)_2Vfc -NEL ^{2 2} O ^{2 42} ^*CH

R_lR

-31 CZ 292373 B6 ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s konfigurací (R,S) nebo s konfigurací (R);

a přinejmenším jeden substituent Rj znamená chránící skupinu aminové skupiny oxykarbonylového typu nebo benzylového typu, přičemž ostatní substituenty Ri znamenají atom vodíku, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I ve formě volné báze nebo popřípadě ve formě některé z adičních solí této sloučeniny, a popřípadě (ii) se získají jiné adiční soli z této volné báze nebo z adiční soli této sloučeniny.
4. Způsob přípravy derivátu podle nároku 1 obecného vzorce I, vyznačující se tím, že se provede:

(a) postup sestávající z následujících stupňů:

(i) kondenzuje se alkohol obecného vzorce ΙΠ:

_s (III),

I I ¹

Rj R ve kterém znamená:

R atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, a *C v případě, že R nemá atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), s chlormravenčanem nebo se symetrickým uhličitanem, v přítomnosti bazické sloučeniny, v inertním reakčním rozpouštědle a při teplotě v rozmezí od 15 do 25 °C, a potom (ii) se do reakce uvede sloučenina získaná ve shora uvedeném stupni (i) s aminem obecného vzorce IV:

ve kterém:

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny, v inertním reakčním rozpouštědle a při teplotě pohybující se v rozmezí do 25 do 50 °C za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

-32CZ 292373 B6 ve kterém:

A znamená skupinu -NH-CO-,

R je atom vodíku nebo methylová skupina, *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R), a

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny, (b) nebo se provede postup sestávající z následujících stupňů:

(i) do reakce se uvede kyselina obecného vzorce V:

Rt«. C OOH ' NH C CHZ^

II o

ve kterém:

R₂ představuje chránící skupinu aminoskupiny, s difenylfosforylazidem obecného vzorce VI:

(C₆H_sO)₂-?-N₃

O (VI) v přítomnosti bazické sloučeniny, v rozpouštědle při teplotě místnosti, čímž se získá meziprodukt obecného vzorce VH:

O ^?'^xh^^(CH?’⁵''c^xNHch/^Cxn₃ (VII), o

kde R₂ má uvedený význam, (ii) sloučenina obecného vzorce VII se podrobí přesmyku, známému pod označením Curtiusova reakce, přičemž současně reaguje takto získaný izokyanát s alkoholem obecného vzorce ΙΠ:

-33CZ 292373 B6 _HO^^(CH2)4>4^x(CH2)2^*CH^xNK^R<

I I

ΧχR ve kterém znamená:

R atom vodíku nebo methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, která se odlišuje od skupiny R₂ uvedené výše, a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (7ř), v rozpouštědle, při teplotě pohybující se v rozmezí do 80 do 140 °C a po dobu v rozmezí od 5 do 50 hodin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce Vlil:

O ve kterém mají R, R_b R₂ a *C stejný význam jako to bylo uvedeno shora, (iii) odstraní se chránící skupiny ze sloučeniny obecného vzorce Vm náhradou atomem vodíku, čímž se získá sloučenina obecného vzorce IX:

í^l L

L O (IX), ve kterém R, R] a *C mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, (iv) a potom sloučenina obecného vzorce IX reaguje s kyselinou aminoiminomethansulfonovou v rozpouštědle, prováděnou při teplotě v rozmezí do 15 do 25 °C a po dobu v rozmezí od 8 do 50 hodin, za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

Xi 'x.

N O

11 li ^Ri^._{T x}CH₂s. _xc_{x x}(CH₂)_4Sfc ^(CH₂)₂^

ΝΉ NH A NH O N *CH R_t

R ve kterém:

R a *C mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, (II),

-34CZ 292373 B6

A je skupina -CO-NH-, a

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, s výjimkou dvou těchto skupin Ri vázaných na guanidinovou skupinu, kde každá představuje atom vodíku, nebo se provede varianta (iv') výše uvedeného stupně (iv), při které se do reakce uvede sloučenina obecného vzorce IX se sloučeninou obecného vzorce X:

ve kterém:

Ri představuje chránící skupinu aminoskupiny, v inertním rozpouštědle, zejména tetrahydrofuranu, v přítomnosti bazické sloučeniny při teplotě v rozmezí od 15 do 25 °C a po dobu v rozmezí od 8 hodin do 100 hodin za vzniku sloučeniny obecného vzorce Π:

ve kterém:

A znamená skupinu -CO-NH-,

R je atom vodíku nebo methylová skupina,

Ri znamená chránící skupiny aminoskupiny a *C v případě, že R není atom vodíku, představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,S) nebo o konfiguraci (R);

přičemž po provedení těchto postupů (a) nebo (b) se odstraní chránící skupiny sloučeniny obecného vzorce Π:

NO ^{11 11} ^R1\VTT/^CX /(CH2)_{sx x}CH_{2Sb X}(CH₂)_2X

NH NH A' NH O N *CH R,

I I ^Ri (Π), ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

-35CZ 292373 B6

A znamena skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s konfigurací (R,S) nebo s konfigurací (R);

a přinejmenším jeden substituent Ri znamená chránící skupinu aminové skupiny, za vzniku sloučeniny obecného vzorce I ve formě volné báze nebo popřípadě ve formě některé z adičních solí této sloučeniny, a potom se popřípadě získají jiné adiční soli této volné báze nebo adiční soli této sloučeniny.
5. Sloučenina obecného vzorce Π:

is.

no

IIII

NH^{X x}nh^{x 2Sx}a^{x 2X}nh^{x %}o^x •fn

R,R (Π), ve kterém:

R znamená atom vodíku nebo methylovou skupinu,

A znamená skupinu -CO-NH- nebo skupinu -NH-CO-, a *C v případě, že R neznamená atom vodíku, představuje asymetrický uhlíkový atom s konfigurací (R,S) nebo s konfigurací (R);

a přinejmenším jeden substituent Ri znamená chránící skupinu aminové skupiny oxykarbonylového typu nebo benzylového typu, přičemž ostatní substituenty Ri znamenají atom vodíku.
6. Sloučenina obecného vzorce ΙΠ:

ve kterém znamená:

R methylovou skupinu,

Ri představuje chránící skupiny aminoskupiny, a *C představuje asymetrický atom uhlíku o konfiguraci (R,5) nebo o konfiguraci (R).
7. Použití imunosupresivní sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující deriváty obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelné soli této sloučeniny podle nároku 1, pro přípravu léčiva pro terapeutické použití k potírání imunitních poruch.

-36CZ 292373 B6
8. Použití sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující deriváty obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelné soli této sloučeniny podle nároku 1, pro přípravu léčiva pro terapeutické použití k potírání malárie.

5
9. Použití sloučeniny vybrané ze skupiny zahrnující deriváty obecného vzorce I a farmaceuticky přijatelné soli této sloučeniny podle nároku pro přípravu farmaceutického činidla.
10. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje přinejmenším jednu sloučeninu vybranou ze skupiny zahrnující deriváty obecného vzorce I a jejich farmaceuticky io přijatelné soli s minerálními nebo organickými kyselinami podle nároku 1 v kombinaci s fyziologicky přijatelným excipientem.