CZ307444B6 - Mukoadhezivní polymerní film pro fotosenzitivní terapii v ústní dutině s obsahem fotosenzitizérů - Google Patents

Mukoadhezivní polymerní film pro fotosenzitivní terapii v ústní dutině s obsahem fotosenzitizérů Download PDF

Info

Publication number
CZ307444B6
CZ307444B6 CZ2015-272A CZ2015272A CZ307444B6 CZ 307444 B6 CZ307444 B6 CZ 307444B6 CZ 2015272 A CZ2015272 A CZ 2015272A CZ 307444 B6 CZ307444 B6 CZ 307444B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
polyethylene glycol
copolymer
polyvinyl acetate
citrate
aminolevulinic acid
Prior art date
Application number
CZ2015-272A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ2015272A3 (cs
Inventor
Jakub Rak
Vladimír Král
Original Assignee
Jakub Rak
Vladimír Král
ASKLEPION - Lasercentrum Praha , s.r.o.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jakub Rak, Vladimír Král, ASKLEPION - Lasercentrum Praha , s.r.o. filed Critical Jakub Rak
Priority to CZ2015-272A priority Critical patent/CZ307444B6/cs
Priority to EP16166700.1A priority patent/EP3085359A1/en
Publication of CZ2015272A3 publication Critical patent/CZ2015272A3/cs
Publication of CZ307444B6 publication Critical patent/CZ307444B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A61K9/006—Oral mucosa, e.g. mucoadhesive forms, sublingual droplets; Buccal patches or films; Buccal sprays
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/70—Web, sheet or filament bases ; Films; Fibres of the matrix type containing drug
    • A61K9/7007—Drug-containing films, membranes or sheets
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/70—Web, sheet or filament bases ; Films; Fibres of the matrix type containing drug
    • A61K9/7023—Transdermal patches and similar drug-containing composite devices, e.g. cataplasms
    • A61K9/703—Transdermal patches and similar drug-containing composite devices, e.g. cataplasms characterised by shape or structure; Details concerning release liner or backing; Refillable patches; User-activated patches
    • A61K9/7038—Transdermal patches of the drug-in-adhesive type, i.e. comprising drug in the skin-adhesive layer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/70—Web, sheet or filament bases ; Films; Fibres of the matrix type containing drug
    • A61K9/7023—Transdermal patches and similar drug-containing composite devices, e.g. cataplasms
    • A61K9/703—Transdermal patches and similar drug-containing composite devices, e.g. cataplasms characterised by shape or structure; Details concerning release liner or backing; Refillable patches; User-activated patches
    • A61K9/7038—Transdermal patches of the drug-in-adhesive type, i.e. comprising drug in the skin-adhesive layer
    • A61K9/7046—Transdermal patches of the drug-in-adhesive type, i.e. comprising drug in the skin-adhesive layer the adhesive comprising macromolecular compounds
    • A61K9/7053—Transdermal patches of the drug-in-adhesive type, i.e. comprising drug in the skin-adhesive layer the adhesive comprising macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl, polyisobutylene, polystyrene
    • A61K9/7061—Polyacrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/502—Plasticizers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/20—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing organic materials
    • A61L2300/21—Acids

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Mukoadhezivní topický polymerní film působící na mukózních sliznicích po dobu 5 až 60 minut pro řízené uvolňování 5-aminolevulové kyseliny a/nebo jejího derivátu pro fotosenzitivní terapii superficiálního basocelulárního karcinomu, který obsahuje alespoň jednu vrstvu obsahující fotosenzitizér a alespoň jednu ochrannou vrstvu, přičemž vrstva obsahující fotosenzitizér obsahuje 5-aminolevulovou kyselinu a/nebo její derivát.

Description

Oblast techniky
Vynález se týká přípravy systémů na bázi polymerních nosičů pro řízený transport fotosenzitizérů (5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů) pro fotodynamickou terapii a estetickou medicínu.
Dosavadní stav techniky
V mnoha asijských kulturách je rozšířeným zvykem žvýkání rostlinných drog, což ve svém důsledku vede k velmi významnému zvýšení rizika rozvoje rakoviny ústní dutiny (např. v Indii rakovina ústní dutiny představuje až 40 % všech rakovin, oproti pouhým 4 %, ve Velké Británii). Celosvětově se jedná o 8 % všech rakovin. Tyto karcinomy byly dosud odstraňovány pouze chirurgicky.
5-Aminolevulová kyselina (ALA) je endogenní metabolit obvykle tvořený v mitochondriích ze sukcinyl-CoA a glycinu. Konjugace osmi ALA molekul vede k tvorbě protoporfýrinu IX (PpIX), který je dále metabolizován a nakonec vede ke vzniku hernu. Konverze PpIX na jeho následné substráty vyžaduje aktivitu enzymu ferrochelatázy, kteráje z hlediska rychlosti metabolýzy ALA na hem limitující. Při zevním podání, je konverze ALA na PpIX velmi rychlá, avšak PpIX nemůže být ferrochelatázou rychle převedena na konečný produkt hem, proto se PpIX hromadí v buňkách. Vzhledem k tomu, že PpIX je silný fotosenzibilizátor, tato metabolická cesta je hojně využívána ve fotodynamické terapii (PDT). Vzhledem k nestabilitě ALA jako takové, kteráje způsobena dimerizací na pyrazin-2,5-dipropionovou kyselinu, se ALA používá ve formě relativně hydrofilního hydrochloridu. Ačkoliv PDT na bázi ALA se ukázala být velmi úspěšná v léčbě některých druhů rakoviny včetně rakoviny kůže a řady chorob kůže, omezená difúze hydrofilní ALA do nádoru způsobuje, že lokalizace ALA v tkáni není optimální. Zlepšení biodostupnosti lze dosáhnout použitím derivátů ALA, především ve formě lipofilních esterů ALA, které lépe pronikají do léze. Nejčastěji používané deriváty jsou methylester a hexylester ALA, které se vzájemně liší kinetikou penetrace do kůže a lokalizací v kůži. Jsou popsány i další deriváty, sole a sole derivátů, avšak komerčního uplatnění příliš nenašly. Komerční nejúspěšnější preparáty jsou na bázi ALA (Aladerm, Porphin), hydrochloridu ALA (Gliolan, prášek pro přípravu roztoku, 1,5 g, Medac; Levulan, 20% roztok, DUSÁ Pharmaceuticals, Patents US: 5079262; 5211938; 5954703; Levulan Kerastics, 20% TOPICAL POWDER FOR SOLUT1ON Solution; Topical; Aminolevulinic Acid Hydrochloride 23.6%) a hydrochloridu methylesteru ALA (Metvix, krém s 16% mALA.HCI, Galderma; Metvixia, krém s 16,8% mALA.HCI, Galderma).
ALA se prosadila v posledních letech jako metoda volby pro superficiální basocelulární karcinom, což je nejčastější zhoubný nádor vůbec. Jeho incidence navíc dramaticky roste se stárnutím populace a s vyšší sluneční expozicí. Současně s tím roste zájem o vynikající estetický výsledek takového ošetření, což ALA zcela splňuje. Značný potenciál proto nachází ALA v estetické medicíně. PDT pomocí ALA je osvědčená při stimulaci obměny dysplastických buněk, což spolu s reparativním zánětem přispívá ke značnému omlazení vzhledu kůže spolu s odstraněním eflorescencí. Jinou známou indikací je využití při léčbě akné. Smysl má nasazení v monoterapii při lehké a střední formě, v kombinaci se systémovou léčbou u jizvících forem.
Komerční preparáty pro topické aplikace (roztoky, gely a masti), jejichž terapeutický efekt i vedlejší efekty jsou závislé na zkušenosti ošetřujícího lékaře (množství nanesené masti, homogenita tloušťky nanesené vrstvy apod.), vyžadují velmi zkušený personál a i tak je efekt do určité míry náhodný. V neposlední řadě také stojí za zmínku fakt, že komerční preparáty nejsou
- 1 CZ 307444 B6 příliš vhodné pro estetickou medicínu ani z důvodu příliš vysoké koncentrace fotosenzitizéru, který způsobuje neopodstatněně velké poškození pokožky.
Vzhledem k poměrně vysokým dávkováním 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů (hydrochloridu 5-aminolevulové kyseliny, esterům 5-aminolevulové kyseliny a hydrochloridům esterů 5-aminolevulové kyseliny) jsou obsahy těchto fotosenzitizérů v komerčních preparátech obvykle 15 až 25 hmotnostních procent. Jako alternativa k těmto preparátům byly vyvinuty nosiče pro aplikaci 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů na bázi farmaceuticky akceptovatelných polymerů, jejich směsí anebo kombinací s farmaceuticky akceptovatelnými plastifikátory, které jsou předmětem tohoto patentu.
Podstata vynálezu
Pro aplikaci 5-ALA a jejích derivátů lze s výhodou použít vrstevnatých polymemích nosičů. Tyto nosiče se skládají z vrstvy obsahující léčivo (v našem případě fotosenzitizér) a z ochranné vrstvy. Nároky na vrstvu obsahující léčivo je její adhezivita ke kůži či mukoadhezivita k vlhké sliznici a schopnost z této vrstvy definovaně léčivo uvolňovat. Ochranná vrstva má za úkol bránit uvolňování léčiva mimo jeho terapeutický cíl. Pro aplikaci v ústní dutině je nezbytné ochránit léčebnou vrstvu před slinami a uvolňováním účinné látky do ústní dutiny. Společně musí obě vrstvy tvořit kompaktní celek s požadovanými mechanickými vlastnostmi.
Polymerní film s obsahem fotosenzitizérů, který obsahuje farmaceuticky akceptovatelný polymer a 5-aminolevulovou kyselinu a/nebo její derivát, může být tvořen jednou a více vrstvami. Obsahuje 5-aminolevulovou kyselinu a/nebo její deriváty, které jsou obsaženy alespoň v jedné vrstvě.
Derivát 5-aminolevulové kyseliny je vybrán ze skupiny hydrochlorid 5-aminolevulové kyseliny, ester 5-aminolevulové kyseliny, hydrochlorid esteru 5-aminolevulové kyseliny.
Esterem 5-aminoievulové kyseliny je methylester 5-aminolevulové kyseliny nebo hexylester 5aminolevulové kyseliny. Hydrochloridem esteru 5-aminolevulové kyseliny je hydrochlorid methylesteru 5-aminolevulové kyseliny, hydrochlorid hexylesteru 5-aminolevulové kyseliny.
Polymerní film obsahuje farmaceuticky akceptovatelný polymer a plastifikátor.
Farmaceuticky akceptovatelný polymer je vybrán ze skupiny: polyakrylová kyselina, polyethylenglykol, polypropylenglykol, blokové kopolymery polyethylenglykolu a polypropylenglykolu, polysorbát, polyvinylpyrrolidon, polyvinylalkohol, polyakrylamid, poly(isopropylakrylamid), poly(cyklopropylmethakrylamid), ethylcelulóza, karboxymethylcelulóza, hydroxyethylcelulóza, hydroxypropylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, acetát ftalát celulózy, kyselina alginová, karagenan, chitosan, kyselina hyaluronová, kyselina pektinová, kopolymery kyseliny glykolové a kyseliny mléčné, škrob, sodná sůl karboxymethylškrobu, polyuretan, silikony, polykarbonát, polychloropren, polyisobutylen, polykyanoakrylát, polyvinylacetát, t-oktylfenoxypolyethoxyethanol, polystyren, polypropylen, polyvinylchlorid, polyetylén, polymethylmethakrylát, polyhydroxyethylmethakrylát, kopolymer kyseliny akrylové a butylakrylátu, kopolymer 2ethylhexyl-akrylátu a butylakrylátu, kopolymer vinylacetátu a methylakrylátu, kopolymery ethylenvinylacetátu polyethylentereftalátu a polyethylenu, kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu.
Farmaceuticky akceptovatelný plastifikátor je vybrán ze skupiny: acetyltributyicitrát, acetyltriethylcitrát, triethylcitrát, tributylcitrát, trioktylhliníkcitrát, acety Itrioktylhliníkcitrát, trihexylcitrát, acetyltrihexylcitrát, butyryltrihexylcitrát, tri methyl citrát, p-terc-butylfenylsalicylát, butylstearát, dibutylsebakát, dietylftalát, diisobutyladipát, difenyl-2-ethylhexyl-fosfát, epoxidovaný sojový olej, glycerol monooleát, monoisopropyl citrát, monostearyl citrát, distearyl citrát, tristearyl citrát, triacetin, triethylcitrát, 3-(2-xenolyl)-l,2-epoxypropan.
-2 CZ 307444 B6
S výhodou alespoň jedna vrstva polymerního filmu obsahuje kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu.
A s výhodou jedna vrstva obsahuje kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu a 5-aminolevuiovou kyselinu a/nebo její derivát.
Předmětem vynálezu je také příprava a využití polymerních filmů pro topickou aplikaci fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů ve formě (muko)adhezivního filmu. Topické aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny ve formě adhezivního filmu umožňuje aplikovat léčivo definovaně s řízeným uvolňováním, aplikace ve formě mukoadhezivního filmu jsou využitelné ve farmaceutickém průmyslu pro léčbu v ústní dutině.
Aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů v ústní dutině ve formě mukoadhezivního filmu. Komerční preparáty (roztoky, gely a masti) jsou vhodné pro topické aplikace, avšak nejsou dobře použitelné pro léčbu v ústní dutině. Aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů v ústní dutině ve formě mukoadhezivního filmu umožňuje využít fotodynamické terapie, která je pro pacienta výrazně šetrnější.
Topické aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů ve formě adhezivního filmu. Tato aplikace umožňuje, aplikovat léčivo definovaně s řízeným uvolňováním, aniž by tato aplikace byla výrazně závislá na zkušenostech ošetřujícího lékaře a personálu.
Aplikaci fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů ve formě adhezivního filmu v oblasti estetické medicíny. Tuto aplikaci fotosenzitizérů lze využít pro léčbu řady kožních onemocnění (dermatitida, akné apod.) a vyhlazování pokožky s výhodou řízeného uvolňování léčiva a použitím nižších koncentrací léčiva, které nezpůsobují tak velké poškození pokožky.
Příprava adhezivních a mukoadhezivních filmů na bázi polymerních nosičů pro aplikaci fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny a jejích derivátů. Polymerní filmy jsou potenciálními systémy podávání léků pro lokální aplikaci na kůži či podávání přes sliznici. Požadavky na tyto filmy jsou jejich schopnost inkorporovat farmaceuticky aktivní látku a řízeně ji uvolňovat, dále jsou požadovány mechanické vlastnosti jako pružnost, ohebnost a přilnavost ke kůži či sliznici. Především v případě sliznice je přilnavost velmi důležitá. V případě vyššího obsahu farmaceuticky aktivní látky jsou vlastnosti polymerního filmu významně ovlivněny samotnou farmaceuticky aktivní látkou.
Z řady připravených systémů nej lepší vlastnosti vykazovaly systémy založené na polymeru Soluplus a jeho směsí s dalšími farmaceuticky akceptovatelnými polymery a farmaceuticky akceptovatelnými plastifikátory (Soluplus je registrovaná značka pro větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu - výrobce BASF). Výhodou těchto systémů je vedle vhodných mechanických vlastností, schopností držet a řízeně uvolňovat fotosenzitizéry, především jejich adhezivita a mukoadhezivita.
Ochranná vrstva má za úkol bránit uvolňování fotosenzitizérů mimo jeho terapeutický cíl, což je při aplikaci v ústní dutině nezbytné. Tato ochrana musí být splněna po celou dobu aplikace filmu, což bývá typicky od deseti minut do dvou hodin. Vzhledem k odlišným vlastnostem a složením obou vrstev lze s výhodou využít vícevrstevných polymerních nosičů, kdy mezi vrstvou obsahující fotosenzitizér a ochrannou vrstvou jsou vmezeřeny další vrstvy s postupně se měnícím složením přecházejícím od složení ochranné vrstvy po složení vrstvy obsahující fotosenzitizér.
Připravené vzorky byly testovány z hlediska mechanických vlastností (tuhost, ohebnost, přilnavost), příklady vzorků splňující požadavky na mechanické vlastnosti jsou uvedeny v příkladech s popisem složení a tlouštěk jednotlivých vrstev.
Vzorky s vhodnými mechanickými vlastnostmi byly testovány in vivo na myších a potkaních modelech. Přilnavost vzorků s léčivem (ALA, ALA.HCI, mALA, mALA.HCI) byla studována na
-3 CZ 307444 B6 zvířecích modelech. Bylo sledováno, zda vzorky drží na pokožce / v tlamě po celou dobu plánované aplikace a zda nedochází k jejich rozpouštění ve slinách. Přilnavost vzorků v ústní dutině byla studována také na dobrovolnících, avšak pro tyto experimenty byly použity vzorky připravené bez léčiva.
Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován nepřímo pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Byl měřen vývoj fluorescence v čase (produkce protoporfyrinu IX) a jeho závislost na složení vzorku a době působení. Optimální doba působení se mezi vzorky lišila, avšak obecně byla v rozsahu 5 až 60 minut. Vhodná doba pro aplikaci záření (maximální množství protoporfyrinu IX v tkáni) se také lišila mezi vzorky a podle doby aplikace, ale obecně bylo maximum intenzity fluorescence v čase 1 až 3 hodiny od začátku podání.
Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfyrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva. Dále bylo sledováno, zdali dojde k rekuranci nádoru (opětovnému vzniku nádoru). Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Ve všech případech uvedených vzorků došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence po dobu 45 dnů od aplikace léčby.
Příklady uskutečnění vynálezu
Byly připraveny vícevrstvé polymerní filmy s inkorporovanou 5-aminolevulovou kyselinou (ALA), hydrochloridem 5-aminolevulové kyseliny (ALA.HCI), methylesterem 5-aminolevulové kyseliny (mALA) a hydrochloridem methylesteru 5-aminolevulové kyseliny (mALA.HCl). Pro přípravu byly použity polymerní nosiče a piastifikátory: větvený kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylenglykoly o různých délkách řetězce (PEG200, PEG6000, PEG40000), polysorbáty (Tween 20, Tween 80), polyvinylpyrrolidon (PVP), blokové kopolymery polyethylenglykolu a polypropylenglykolu (Pluronic F-127, Pluronic F-68), acetyltriethylcitrát, tributylcitrát.
Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny rozpuštěním komponent ve vhodných rozpouštědlech a jejich smícháním vdaném poměru. Rozpouštědly byly typicky voda, methanol, ethanol, případně dichlormethan, aceton, tetrahydrofuran a chloroform.
Roztoky byly vrstveny pomocí techniky sprejování. Pro každou vrstvu byl dodržen následující postup: po nanesení cca. 0,05 mm vrstvičky roztoku sprejováním bylo odpařeno rozpouštědlo, poté byla nanesena další vrstvička a zbavena rozpouštědla. Toto bylo opakováno do nanesení požadované vrstvy nosiče, poté byla změřena tloušťka vrstvy. Rozpouštědlo bylo odstraňováno třemi různými technikami (proudem dusíku, podtlakem, zahřátím) či jejich kombinací v závislosti na použitém rozpouštědle či směsi rozpouštědel a vlastnostech rozpuštěných látek (např. teplotní stabilita, těkavost).
Příklad 1
Byl připraven vícevrstvý polymerní film s inkorporovaným hydrochloridem 5-aminolevulové kyseliny (ALA.HCI). Pro přípravu byly použity polymerní nosiče a piastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus). Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny rozpuštěním komponent ve vodě a jejich smícháním vdaném hmotnostním poměru.
Na sliznici v ústní dutině s superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen polymerní film s inkorporovaným ALA.HCI, a to tak, že byly připraveny roztoky o složení:
-4 CZ 307444 B6 roztok:
pevný podíl: 8 hmotn. dílů ALA.HCI : 92 hmotn. dílů SOLUPLUS, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 25% roztoku pevného podílu.
roztok:
pevný podíl: SOLUPLUS, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 25% roztoku.
Roztok 1 byl postupně nanášen sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odstraněno proudem dusíku a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy, která byla 1,5 mm. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku 1 byl stejným postupem nanesen roztok 2 až do tloušťky 1,8 mm. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Výsledný film měl toto složení:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %]
1 1,5 ALA.HC1 8 SOLUPLUS 92
2 1,8 SOLUPLUS 100
Nanesený film se nechal 40 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží v tlamě po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo kjeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfyrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 2
Byl připraven vícevrstvý polymerní film s inkorporovaným methylesterem 5-aminolevulové kyseliny (mALA). Pro přípravu byly použity polymerní nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylenglykol (PEG200), polyvinylpyrrolidon (PVP).
Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny rozpuštěním komponent ve vodě a jejich smícháním v daném hmotnostním poměru.
Na sliznici v ústní dutině se superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen polymerní film s inkorporovaným mALA, a to tak, že byly připraveny roztoky o složení:
roztok:
pevný podíl: 12 hmotn. dílů ALA.HCI : 75 hmotn. dílů SOLUPLUS, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku pevného podílu.
roztok:
pevný podíl: 83 hmotn. dílů SOLUPLUS : 17 hmotn. dílů PEG200, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku.
roztok:
pevný podíl: 90 hmotn. dílů SOLUPLUS : 10 hmotn. dílů PEG200, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku.
-5CZ 307444 B6 roztok:
pevný podíl: 90 hmotn. dílů SOLUPLUS : 5 hmotn. dílů PEG200 : 5 hmotn. dílů PVP, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku.
roztok:
pevný podíl: 90 hmotn. dílů SOLUPLUS : 10 hmotn. dílů PVP, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku.
roztok:
pevný podíl: 85 hmotn. dílů SOLUPLUS : 15 hmotn. dílů PVP, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku.
roztok:
pevný podíl: 80 hmotn. dílů SOLUPLUS: 20 hmotn. dílů PVP, byl rozpuštěn ve vodě pro získání 26% roztoku.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odstraněno mírným podtlakem a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Výsledný film měl toto složení:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta 3 množství [hmotn. %]
1 1,15 ALA.HCI 12 SOLUPLUS 75 PEG200 13
2 0,2 SOLUPLUS 83 PEG200 17
3 0,2 SOLUPLUS 90 PEG200 10
4 0,2 SOLUPLUS 90 PEG200 5 PVP 5
5 0,2 SOLUPLUS 90 PVP 10
6 0,2 SOLUPLUS 85 PVP 15
7 0,55 SOLUPLUS 80 PVP 20
Nanesený film se nechal 60 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží v tlamě po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo kjeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfýrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfýrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 3
Byl připraven vícevrstvý polymemí film s inkorporovaným hydrochloridem methylesteru 5aminolevulové kyseliny (mALA.HCl). Pro přípravu byly použity polymemí nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylenglykoly o různých délkách řetězce (PEG200, PEG40000), tributylcitrát. Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent ve vodě, aby vytvořily 27% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly
-6CZ 307444 B6 smíchány v daném hmotnostním poměru, jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta 3 množství [hmotn. %]
1 0,75 mALA.HCl 18 SOLUPLUS 62 PEG200 20
2 0,12 SOLUPLUS 80 PEG200 20
3 0,1 SOLUPLUS 85 PEG200 15
4 0,1 SOLUPLUS 90 PEG200 10
5 0,1 SOLUPLUS 90 PEG200 5 PEG40000 5
6 0,1 SOLUPLUS 90 PEG40000 9 tributylcitrát 1
7 o,l SOLUPLUS 85 PEG40000 12 tributylcitrát 3
8 0,45 SOLUPLUS 80 PEG40000 15 tributylcitrát 5
Na sliznici v ústní dutině se superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen připravený polymerní film s inkorporovaným mALA.HCl, a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny v ethanolu pro získání 27% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odstraněno zahřátím a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 30 minut v ústní dutině působit, a poté byl sloupnut Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží v tlamě po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo kjeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporiyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfýrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 4
Byl připraven vícevrstvý polymerní film s inkorporovaným hydrochloridem methylesteru 5aminolevulové kyseliny (mALA.HCl). Pro přípravu byly použity polymerní nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylengíykol (PEG200), blokové kopolymery polyethylenglykolu a polypropylenglykolu (Pluronic F-127, Pluronic F-68), acetyltriethylcitrát. Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent v metanolu, aby vytvořily 20% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly smíchány v daném hmotnostním poměru, jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta 3 množství [hmotn. %]
1 0,75 mALA.HCl 18 SOLUPLUS 62 PEG200 20
2 0,12 SOLUPLUS 80 PEG200 20
3 0,1 SOLUPLUS 85 PEG200 15
4 0,1 SOLUPLUS 90 PEG200 10
5 0,1 SOLUPLUS 90 PEG200 5 Pluronic F- 127 5
6 0,15 SOLUPLUS 90 Pluronic F- 127 9 acetyltriethy 1citrát 1
7 0,15 SOLUPLUS 85 Pluronic F- 127 12 acetyltriethylcitrát Λ 3
8 0,4 SOLUPLUS 80 Pluronic F- 127 15 acetyltriethy 1citrát 5
Na sliznici v ústní dutině se superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen připravený polymemí film s inkorporovaným mALA.HCI, a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny v etanolu pro získání 20% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odstraněno zahřátím a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 30 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží v tlamě po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo kjeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfyrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 5
Byl připraven vícevrstvý polymemí film s inkorporovaným hydrochloridem 5-aminolevulové kyseliny (ALA.HCI). Pro přípravu byly použity polymemí nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polysorbát (Tween 80) Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent ve vodě, aby vytvořily 24% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly smíchány v daném hmotnostním poměru, jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta I množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta o 3 množství [hmotn. %]
1 0,75 ALA.HCI 20 SOLUPLUS 70 Tween80 10
2 0,1 SOLUPLUS 85 Tween80 15
3 0,1 SOLUPLUS 90 Tween80 10
4 0,1 SOLUPLUS 95 Tween80 5
5 0,35 SOLUPLUS 100
Na sliznici v ústní dutině myši se superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen připravený polymemí film s inkorporovaným ALA.HCI a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny v ethanolu pro získání 24% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odpařeno a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem
-8CZ 307444 B6 naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 80 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfýrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 6
Byl připraven vícevrstvý polymemí film s inkorporovaným methylesterem 5-aminolevulové kyseliny (mALA). Pro přípravu byly použity polymemí nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polysorbát (Tween 20), polyvinylpyrrolidon (PVP). Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent v tetrahydrofuranu, aby vytvořily 25% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly smíchány v daném hmotnostním poměru, jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta 3 množství [hmotn. %]
1 0,8 mALA 10 PVP 70 Tween20 20
2 0,1 PVP 80 Tween20 20
3 0,1 PVP 85 Tween20 15
4 0,1 PVP 80 Tween20 15 SOLUPLUS 5
5 0,35 PVP 80 Tween20 10 SOLUPLUS 10
Na pokožce potkana s superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen připravený polymemí film s inkorporovaným mALA a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny v tetrahydrofuranu pro získání 25% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odpařeno a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 100 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží na pokožce po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo kjeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfýrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
-9CZ 307444 B6
Příklad 7
Byl připraven vícevrstvý polymerní film s inkorporovaným hydrochloridem 5-aminolevulové kyseliny (ALA.HCI). Pro přípravu byly použity polymerní nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylenglykol (PEG200), blokové kopolymery polyethylenglykolu a polypropylenglykolu (Pluronic F-68). Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent v chloroformu, aby vytvořily 22% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly smíchány v daném hmotnostním poměru, jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta o D množství [hmotn. %]
1 1,0 ALA.HCI 12 SOLUPLUS 75 PEG200 13
2 0,25 SOLUPLUS 83 PEG200 17
3 0,25 SOLUPLUS 90 PEG200 10
4 0,25 SOLUPLUS 90 PEG200 5 Pluronic F- 68 5
5 0,25 SOLUPLUS 90 Pluronic F- 68 10
6 0,25 SOLUPLUS 85 Pluronic F- 68 15
7 0,50 SOLUPLUS 80 Pluronic F- 68 20
Na slíznici v tlamě myši se superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen připravený polymerní film s inkorporovaným ALA.HCI a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny v chloroformu pro získání 22% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odpařeno a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 110 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží v tlamě zvířete po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo k jeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfyrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 8
Byl připraven vícevrstvý polymerní film s inkorporovaným hydrochloridem methylesteru 5aminolevulové kyseliny (mALA.HCI). Pro přípravu byly použity polymerní nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinyl-kaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylenglykoly (PEG200, PEG6000), tributylcitrát. Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent ve vodě, aby vytvořily 28% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly smíchány v daném hmotnostním poměru jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
- 10CZ 307444 B6
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta 3 množství [hmotn. %]
1 0,75 mALA.HCI 18 SOLUPLUS 62 PEG200 20
2 0,12 SOLUPLUS 80 PEG200 20
-> 3 0,1 SOLUPLUS 85 PEG200 15
4 0,1 SOLUPLUS 90 PEG200 10
5 OJ SOLUPLUS 90 PEG200 5 PEG6000 5
6 0,1 SOLUPLUS 90 PEG6000 9 tributylcitrát 1
7 o,l SOLUPLUS 85 PEG6000 12 tributylcitrát 3
8 0,6 SOLUPLUS 80 PEG6000 15 tributylcitrát 5
Na sliznici v tlamě potkana se superficiálním basocelulámím karcinomem byl nanesen připravený polymemí film s inkorporovaným mALA.HCI a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny ve vodě pro získání 28% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odpařeno a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 50 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží v tlamě zvířete po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo k jeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazuje metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby. Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfýrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Příklad 9
Byl připraven vícevrstvý polymemí film s inkorporovanou 5-aminolevulovou kyselinou (ALA). Pro přípravu byly použity polymemí nosiče a plastifikátory: větvený kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu (Soluplus), polyethylenglykol (PEG200), blokové kopolymery polyethylenglykolu a polypropylenglykolu (Pluronic F-68). Směsi pro přípravu vrstev byly připraveny jako v příkladech 1 a 2 rozpuštěním komponent ve vodě, aby vytvořily 19% roztok, přičemž jednotlivé komponenty byly smíchány vdaném hmotnostním poměru, jak popisuje tabulka výsledného složení jednotlivých vrstev filmu:
vrstva výška vrstvy [mm] komponenta 1 množství [hmotn. %] komponenta 2 množství [hmotn. %] komponenta 3 množství [hmotn. %]
1 1,0 ALA 12 SOLUPLUS 75 PEG200 13
2 0,25 SOLUPLUS 83 PEG200 17
3 0,25 SOLUPLUS 90 PEG200 10
4 0,25 SOLUPLUS 90 PEG200 5 Pluronic F- 68 5
5 0,25 SOLUPLUS 90 Pluronic F- 68 10
6 0,25 SOLUPLUS 85 Pluronic F- 68 15
7 0,50 SOLUPLUS 80 Pluronic F- 68 20
Na pokožce myši se superficiálním basocelulárním karcinomem byl nanesen připravený polymerní film s inkorporovanou ALA, a to tak, že byly připraveny roztoky pro jednotlivé vrstvy v hmotnostních % jednotlivých komponent, které byly rozpuštěny ve vodě pro získání 19% roztoku každé vrstvy.
Roztoky byly postupně nanášeny sprejováním po 0,05 mm tloušťkách, poté bylo rozpouštědlo vždy odpařeno a postup byl opakován nanesením další dávky roztoku až do požadované tloušťky vrstvy roztoku. Po odpaření poslední dávky rozpouštědla roztoku byly stejným postupem naneseny další roztoky v řadě vždy do požadované tloušťky. Tloušťka vrstev byla kontrolována mikrometricky.
Nanesený film se nechal 40 minut v ústní dutině působit a poté byl sloupnut. Bylo vysledováno, že připravený film velmi dobře drží na pokožce zvířete po celou dobu plánované aplikace a ani nedocházelo kjeho rozpouštění ve slinách. Doba aplikace léčiva a čas pro ozáření byl použit na základě transportu do zdravé tkáně. Transport léčiva do zdravé tkáně byl sledován pomocí měření přítomnosti a intenzity fluorescence, kterou vykazoval metabolit léčiva - protoporfyrin IX. Došlo k úplnému vyhojení nádoru a nebyla pozorována rekurence (opětovný vznik nádoru) po dobu 45 dnů od aplikace léčby.
Transport léčiva do nádorové tkáně byl vyvozen na základě nekrózy nádorových buněk vyvolané ozářením (fotodynamická terapie), což je nepřímý důkaz kumulace protoporfýrinu IX, který je metabolitem podaného léčiva.
Průmyslová využitelnost
Aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny v ústní dutině ve formě mukoadhezivního filmu jsou využitelné ve farmaceutickém průmyslu pro léčbu v ústní dutině. Topické aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny ve formě adhezivního filmu jsou využitelné ve farmaceutickém průmyslu. Použití filmů umožňuje aplikovat léčivo definovaně s řízeným uvolňováním. Topické aplikace fotosenzitizérů na bázi 5-aminolevulové kyseliny ve formě adhezivního filmu jsou využitelné v oblasti estetické medicíny.

Claims (7)

1. Mukoadhezivní topický polymerní film působící na mukózních sliznicích po dobu 5 až 60 minut pro řízené uvolňování 5-aminolevulové kyseliny a/nebo jejího derivátu pro fotosenzitivní terapii superficiálního basocelulárního karcinomu, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu vrstvu obsahující fotosenzitizér a alespoň jednu ochrannou vrstvu, přičemž vrstva obsahující fotosenzitizér obsahuje 5-aminolevulovou kyselinu a/nebo její derivát a kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu a ochranná vrstva obsahuje kopolymer polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu a alespoň jeden farmaceuticky akceptovatelný plastifikátor vybrán ze skupiny: acetyltriethylcitrát, triethylcitrát, tributylcitrát, trioktylhliníkcitrát, acetyltrioktylhliníkcitrát, trihexylcitrát, acetyltrihexylcitrát, butyryltrihexylcitrát, trimethylcitrát, p-terc-butylfenylsalicylát, butylstearát, dibutylsebakát, dietylftalát, diisobutyladipát, difenyl-2-ethylhexyl-fosfát, epoxidovaný sojový olej, glycerol monooleát, monoisopropyl citrát, monostearyl citrát, distearyl citrát, tristearyl citrát, triacetin, triethylcitrát, 3-(2-xenolyl)-l ,2-epoxypropan.
- 12CZ 307444 B6
2. Mukoadhezivní topický polymerní film podle nároku 1, vyznačující se tím, že derivát 5aminolevulové kyseliny je vybrán ze skupiny hydrochlorid 5-aminolevulové kyseliny, ester 5aminolevulové kyseliny, hydrochlorid esteru 5-aminolevulové kyseliny.
3. Mukoadhezivní topický polymerní film podle nároku 2, vyznačující se tím, že esterem 5aminolevulové kyseliny je methylester 5-aminolevulové kyseliny nebo hexylester 5aminolevulové kyseliny.
4. Mukoadhezivní topický polymerní film podle nároku 2, vyznačující se tím, že hydrochloridem esteru 5-aminolevulové kyseliny je hydrochlorid methylesteru 5-aminolevulové kyseliny, hydrochlorid hexylesteru 5-aminolevulové kyseliny.
5. Mukoadhezivní topický polymerní film podle nároku 1 pro použití při fotosenzitivní terapii superfaciálního basocelulárního karcinomu.
18 hmotn. % polyvinylacetátu a první ochranná vrstva polyvinylacetátu a ochranná vrstva polyvinylacetátu a ochranná vrstva polyvinylacetátu a čtvrtá ochranná vrstva polyvinylacetátu a pátá ochranná vrstva :, 62 hmotn.
polyethylenglykolu a obsahuje 80 hmotn.
polyethylenglykolu, obsahuje 85 hmotn.
polyethylenglykolu a obsahuje 90 hmotn.
polyethylenglykolu a obsahuje 90 hmotn. polyethylenglykolu a obsahuje 90 hmotn.
6.
jedné vrstvy obsahující fotosenzitizér a 7 ochranných vrstev, přičemž fotosenzitizér obsahuje 18 hmotn. % mALA.HCl po ly v i ny I kapro laktam u, polyethylenglykolu, polyvinylkaprolaktamu, polyethylenglykolu, druhá polyvinylkaprolaktamu, polyethylenglykolu, třetí polyvinylkaprolaktamu, polyethylenglykolu, po ly v i ny I kapro I aktamu, polyethylenglykolu, polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 9 hmotn. % polyethylenglykolu a 1 hmotn. % tributylcitrátu, šestá ochranná vrstva obsahuje 85 hmotn. % kopolymeru polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 12 hmotn. % polyethylenglykolu a 3 hmotn. % tributylcitrátu, sedmá ochranná vrstva obsahuje 80 hmotn. % kopolymeru polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 15 hmotn. % polyethylenglykolu a 5 hmotn. % tributylcitrátu.
Mukoadhezivní topický polymerní film podle nároku 1, vyznačující se tím, že sestává z : vrstva obsahující % %
% %
% %
kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru
18 hmotn. % polyvinylacetátu a první ochranná vrstva polyvinylacetátu a ochranná vrstva polyvinylacetátu a ochranná vrstva polyvinylacetátu a čtvrtá ochranná vrstva mALA.HCl, 62 hmotn.
polyethylenglykolu a obsahuje 80 hmotn.
polyethylenglykolu, obsahuje 85 hmotn.
polyethylenglykolu a obsahuje 90 hmotn. polyethylenglykolu a obsahuje 90 hmotn.
% %
% %
% kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru hmotn. % kopolymeru
7. Mukoadhezivní topický polymerní film podle nároku 1, vyznačující se tím, že sestává z jedné vrstvy obsahující fotosenzitizér a 7 ochranných vrstev, přičemž vrstva obsahující fotosenzitizér obsahuje polyvinylkaprolaktamu, polyethylenglykolu, polyvinylkaprolaktamu, polyethylenglykolu, druhá polyvinylkaprolaktamu, | polyethylenglykolu, třetí polyvinylkaprolaktamu, | polyethylenglykolu, polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 5 hmotn. % polyethylenglykolu a 5 hmotn. % blokového kopolymeru polyethylenglykolu a polypropylenglykolu, pátá ochranná vrstva obsahuje 90 hmotn. % kopolymeru polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 9 hmotn. % blokového kopolymeru polyethylenglykolu a polypropylenglykolu a 1 hmotn. % acetyltriethylcitrátu, šestá ochranná vrstva obsahuje 85 hmotn. % kopolymeru polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 12 hmotn. % blokového kopolymeru polyethylenglykolu a polypropylenglykolu a 3 hmotn. % acetyltriethylcitrátu, sedmá ochranná vrstva obsahuje 80 hmotn. % kopolymeru polyvinylkaprolaktamu, polyvinylacetátu a polyethylenglykolu, 15 hmotn. % blokového kopolymeru polyethylenglykolu a polypropylenglykolu a 5 hmotn. % acetyltriethylcitrátu.
CZ2015-272A 2015-04-22 2015-04-22 Mukoadhezivní polymerní film pro fotosenzitivní terapii v ústní dutině s obsahem fotosenzitizérů CZ307444B6 (cs)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2015-272A CZ307444B6 (cs) 2015-04-22 2015-04-22 Mukoadhezivní polymerní film pro fotosenzitivní terapii v ústní dutině s obsahem fotosenzitizérů
EP16166700.1A EP3085359A1 (en) 2015-04-22 2016-04-22 Photosensitive polymer film based on 5-aminolevulinic acid and its derivatives and its utilisation

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2015-272A CZ307444B6 (cs) 2015-04-22 2015-04-22 Mukoadhezivní polymerní film pro fotosenzitivní terapii v ústní dutině s obsahem fotosenzitizérů

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ2015272A3 CZ2015272A3 (cs) 2016-11-02
CZ307444B6 true CZ307444B6 (cs) 2018-08-29

Family

ID=56068627

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2015-272A CZ307444B6 (cs) 2015-04-22 2015-04-22 Mukoadhezivní polymerní film pro fotosenzitivní terapii v ústní dutině s obsahem fotosenzitizérů

Country Status (2)

Country Link
EP (1) EP3085359A1 (cs)
CZ (1) CZ307444B6 (cs)

Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201505527D0 (en) 2015-03-31 2015-05-13 Jmedtech Pte Ltd Composition
GB2546356A (en) * 2016-09-28 2017-07-19 Photocure Asa Solid products and their use
EP3691618A1 (en) 2017-10-06 2020-08-12 Foundry Therapeutics, Inc. Implantable depots for the controlled release of therapeutic agents
CN116650732A (zh) * 2018-01-08 2023-08-29 铸造疗法股份有限公司 经由治疗剂的控制递送用于治疗腔内癌症的装置、系统和方法
US12458589B2 (en) 2018-05-12 2025-11-04 Foundry Therapeutics, Inc. Implantable polymer depots for the controlled release of therapeutic agents
EP3843710A1 (en) 2018-08-28 2021-07-07 Foundry Therapeutics, Inc. Polymer implants
AU2019414236B2 (en) * 2018-12-26 2022-10-06 Colgate-Palmolive Company Oral care compositions comprising a polyvinyl capralactam-polyvinyl acetate-polyethylene glycol graft copolymer, and methods for the same
GB202107976D0 (en) * 2021-06-03 2021-07-21 Norbrook Lab Ltd Sol-gel compositions for veterinary use
CN116617193B (zh) * 2023-07-10 2024-01-30 北京丰科睿泰医药科技有限公司 一种吡仑帕奈口溶膜剂

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ2003118A3 (cs) * 2000-07-17 2003-05-14 Photonamic Gmbh & Co. Kg Dermální aplikační systém pro aminolevulovou kyselinu
WO2003061621A2 (de) * 2002-01-23 2003-07-31 Photonamic Gmbh & Co. Kg Dermales applikationssystem für aminolävulinsäure-derivate
US20030195250A1 (en) * 2001-01-12 2003-10-16 Vorozhtsov Georgy Nikolaevich Method for photodynamic therapy and applicator for carrying out said therapy
WO2010142457A1 (en) * 2009-06-11 2010-12-16 Photocure Asa Semi-solid compositions and pharmaceutical products
WO2011064111A1 (en) * 2009-11-24 2011-06-03 Basf Se Film-like pharmaceutical dosage forms
DE102011111865A1 (de) * 2011-08-31 2013-02-28 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Transdermales therapeutisches System für 5-Aminolävulinsäurehydrochlorid
TW201424776A (zh) * 2012-12-28 2014-07-01 Univ Taipei Medical 光動力療法藥物之遞送薄膜

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5079262A (en) 1989-07-28 1992-01-07 Queen's University At Kingston Method of detection and treatment of malignant and non-malignant lesions utilizing 5-aminolevulinic acid
WO1996006602A1 (en) * 1993-08-27 1996-03-07 Noven Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE ADMINISTRATION OF δ-AMINOLEVULINIC ACID AND PHARMACEUTICAL EQUIVALENTS THEREOF
US5954703A (en) 1997-10-31 1999-09-21 Dusa Pharmaceuticals, Inc. Method and apparatus for applying 5-aminolevulinic acid

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CZ2003118A3 (cs) * 2000-07-17 2003-05-14 Photonamic Gmbh & Co. Kg Dermální aplikační systém pro aminolevulovou kyselinu
US20030195250A1 (en) * 2001-01-12 2003-10-16 Vorozhtsov Georgy Nikolaevich Method for photodynamic therapy and applicator for carrying out said therapy
WO2003061621A2 (de) * 2002-01-23 2003-07-31 Photonamic Gmbh & Co. Kg Dermales applikationssystem für aminolävulinsäure-derivate
WO2010142457A1 (en) * 2009-06-11 2010-12-16 Photocure Asa Semi-solid compositions and pharmaceutical products
WO2011064111A1 (en) * 2009-11-24 2011-06-03 Basf Se Film-like pharmaceutical dosage forms
DE102011111865A1 (de) * 2011-08-31 2013-02-28 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Transdermales therapeutisches System für 5-Aminolävulinsäurehydrochlorid
TW201424776A (zh) * 2012-12-28 2014-07-01 Univ Taipei Medical 光動力療法藥物之遞送薄膜

Also Published As

Publication number Publication date
CZ2015272A3 (cs) 2016-11-02
EP3085359A1 (en) 2016-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ2015272A3 (cs) Polymerní film s obsahem fotosensitizérů a jeho použití
US7074392B1 (en) Controllled delivery system of antifungal and keratolytic agents for local treatment of fungal infections
Riya et al. An overview on Niosomes: Novel Pharmaceutical drug delivery system
EP1720551B9 (en) Alkaloid formulations
FR2959936A1 (fr) Composition nasales a visee systemique a base de cocoyl proline ou d 'au moins un de ses constituants
Li et al. Preparation and characterization of sustained-release rotigotine film-forming gel
CN112089705A (zh) 一种烟酰胺单核苷酸微囊及其制备方法
RU2621128C2 (ru) Фармацевтическая композиция для пролонгированного высвобождения триметазидина
KR20170000745A (ko) 광감응물질 전달용 용해성 미세바늘 패치
KR20190119046A (ko) N-아세틸시스테인의 제제 및 이의 용도
Suvarna et al. Novel vesicular bilosomal delivery systems for dermal/transdermal applications
CN1897927A (zh) 包含vp/va共聚物和非水性载体的透皮喷雾药物组合物
KR20110027434A (ko) 약물의 서방출이 가능한 발수필름 형성용 조성물
Dhama et al. Development and characterization of transdermal patches of tramadol hydrochloride: An approach to pain management
EP3087979A1 (en) Sustained-release pharmaceutical composition containing acebrophylline and hydrophobic sustained-release agent
Nining et al. Effect of isopropyl myristate and oleic acid as the penetration enhancer on transdermal patch: characteristics and in-vitro diffusion
Chauhan et al. Exhaustive review on nail lacquer in the treatment of nail diseases.
US20170056386A1 (en) Topical antifungal composition for treating onychomycosis
Banu et al. Formulation and evaluation of transdermal drug delivery systems of ivabradine hydrochloride
PATEL et al. QBD-GUIDED DESIGN OF NLC-BASED BUCCAL FILMS OF A PHYTOCONSTITUENT FOR ENHANCED CHEMOPREVENTION
ZA200300284B (en) Treatment of burns.
Parambil et al. Assessment of bioavailability enhancement from transdermal formulations of buspirone hydrochloride and trifluoperazinehydrochloride using rabbit as animal model.
S. Mundada et al. In vitro and in vivo characterization of novel biomaterial for transdermal application
Shivalingam et al. Alteration of pharmacokinetic parameters of proton pump inhibitors using transdermal drug delivery system
Chabib et al. Ethyl cellulose-based in-situ film of itraconazole for enhanced treatment of fungal infections

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20210422