CZ384898A3

CZ384898A3 - Antimikrobiální přípravky pro produkty k orální hygieně

Info

Publication number: CZ384898A3
Application number: CZ983848A
Authority: CZ
Inventors: Lokanathan M. Iyer; James R. Scott; Douglas F. Whitfield
Original assignee: Optiva Corp.
Priority date: 1997-04-04
Filing date: 1998-04-01
Publication date: 1999-04-14
Also published as: CN1225576A; BR9804814A; CA2257596A1; IL127259A0; EP0921784A1; KR20000016351A; NO985644D0; NZ333146A; SK162898A3; JP2000512660A; HUP0001257A2; AU6877398A; NO985644L; WO1998044901A1

Description

Tento vynález se týká antimikrobiálních činidel k použití v produktech pro hygienu úst a způsobů použití takových činidel.

Dosavadní stav techniky

Onemocnění paradentosou a zubní kasy jsou na celém světě předmětem jak zdraví, tak i ekonomických problémů.

Jest nyní zcela bezpečně známo, že obě tato onemocnění úst jsou způsobena bakteriemi, které rostou hromadně na zubech a v oblasti čásnío Obvykle používaným termínem při popisu těchto bakteriálních útvarů jaou zubní destičky.

V případě onemocnění paradantosou popisuje Schluger a spol., viz Schluger, Yuodelis, Psge a Johnson, Periodontal Disease','

2.vyd₀, str,153-262, Lea a Febiger, 1990, že bakterie zubních destiček, rostoucí v prostoru, kde se setkávají zuby s tkání dásní, způsobují zánět dásně, tzv, gingivitis_o Onemocnění je charakterizováno zduřením s otokem dásní, které se jsnaano v

sbarvují Červeně i blednou. Je-li odstraňování destiček nedostačující, pak může gingivitis piejít u četných jedinců do formy paradentosy. Ta je obvykle charakterizována chronickým zánětem tkáně kolem zubů, což vede k resorpci podpůrné kosti. Onemocnění paradentosou vede u dospělých ke ztrátě zubů. Zubní kazy (kavity) jsou rovněž způsobeny bakteriemi, přičemž hlavním etiol ogickým činidlem je Streptococcus mutans, viz McGhee, Michalek _G Cassell, Dental Microbiology, str.

279, Harper a Rov/, 1982.

Prevence zubních destiček nebo jejich odstranění jest již dlouho středem zájmu s cílem inhibovat jek zubní kazy, tak i onemocnění pahadentosou. Zatím co tvorbu zubních destiček lze inhibovat qo jisté míry čistěním zubů v častých Časo• Μ • 00 0 0 · 0

-2odstupech, jest samotné čistění zubů nedostačující k účinné prevenci tvorby zubních destiček nebo k odstranění v podstatě všech, které vznikly na zubech.

Protože samotné čistění zubů nedostačuje k prevenci tvorby destiček či jejich odstranění, byly navršeny chemické postupy se použita' antibakteriálních činidel, jako jsou chlorhexidin, benzalkoniumchlorid a cetylpyridiniumchlcrid, Dále pak se ujelo v praxi při čistění zubů použití přírodních produktů, to je poměrně starý způsob, který se praktikuje zhruba od r. 1880, Od té doby byly popsány četné patentované postupy pro orální komposice a podobné produkty s obsahem extraktů z přírodních produktů. Jsou k míní četné přírodní oleje a četné z nich jsou popsány, viz Kirk-Othmer Sncyclopedia of Chemical Technology, 4,vyd. sv.17, str.603-674, J.Wiley and Sons, lne. Uorton Pader popisuje v Oral Hygien© Products and Prsctice, Cosmetic Science and Technology Series, sv,6 na str.356-373 (Marcel Dekker, lne) extrakty ze sanguinarie jako činidla účinná proti destičkám s antimikrobiálními vlastnostmi. Pader rovněž popisuje těkavé oleje, jako je eukalyptol, menthol,, thymol, methylester kyseliny salic_i:lové s různými stupni antimikrobiální účinnosti, jakož i účinností proti vzniku destiček, jak je to uvedeno u vhodných podmínek a postupů testování. Pader popisuje, že skořicový olej je velmi slabým antiseptikem a eukalyptový olej i eukalyptol jsou antiseptiky. Pader poznamenává, že některé z olejů jsou používány v jiných produktech hlavně se zřetelem na vůni. Mezi ty patří skořicový olej, kasiový olej, hřebíckový olej, dymiánový olej , olej z máty peprné, anizový a anethol. Pader také uvádí, že některé z uvedených, olejů se vyznačují zjistitelnou antimikrobiální účinností.

Je známo například, že kokamidopropylbetsin, hinokitiol a berhsrin, dále etherické oleje, citral, geraniol a olej z jalovcových bobulek zvyšují antimikrobiální účinnost proti některým bakteriím.

U.S.patentový spis 3 940 476 popisuje způsob inhibování tvorby zubních destiček, zahrnující topické použití na zuby jako aktivní složku bud samotnou, nebo v kombinaci tyto látky:

* · · · « · · _3_

a) allylisothiokyanát,

b) uranin,

c) obtusastyren,

d) citral

é) citronellol, £j nerol, nebo

g) geraniol.

U.S.patentový spis 4 913 895 popisuje orální kompozici, obsahující lineární polyiosforečnan nebo cyklický polyfosforečnan a menthol, anethol nebo jejich směsi ve vodném prostředí. Uvádí se, že kompozice se vyznačuje antibakterielními účinky a předchází vývoji shluků a onemocnění paradentosou.

U.S.patentový spis 4 966 754 popisuje, že některé etherické oleje a jejich kombinace se vyznačují antimikrobiálními vlastnostmi proti Aspergillus niger, Candida albi_Tcans, Staphylococcus aureus a Pseudomonas aeruginosa a jsou proto vhodné jako ochranné prostředky v kosmetických komposicích. Popisuje se směs 14 etherických olejů, jez zajištuje potřebné antimikrobiální vlastnosti proti zmíněným mikroorganismům.

U.S,patentový spin 4 999 184 popisuje olejovitou komposici, obsahující určité soli kyseliny pyrofosíorecné, a tvrdí se, že zajištuje ochranu proti bakteriovým shlukům.

U₀S.patentový spis 5 316 7čO popisuje produkt s ohledem na péči o ústa, obsahující kombinaci extraktu z kopřivy (Urtics dioice) a jalovce (Juniperus communisjo Popisuje se, že kombinace těchto extraktů je spojena se synergickou redukcí jak zubních destiček, tak i krvácení či zánětů na sliznici. Popisuje se rovněž extrakt u řebřícku obecného (Achillea milíefoliům) jako vhodná přísada ao kombinace extraktů kopřivy (Urtica úioica) a jalovce (Juniperus communis).

U₀S. patentový spisy 472-684 popisuje kompozici, obsahující thymol a eugenol a případně nekterý ze seskviterpenických alkoholů, jako je farnesol, jež dle zjištění se vyznačuje protidestičkovými účinky, jakož i účinky proti gingivitis. Olej z australského čajovníku a eukalyptol jsou popisovány jako podpůrné složky proti tvorbě destiček a proti gingivitis při vyplachování úct pomocí uvedených • fc • fc « · • fc

11« · · fc · kompo sic.

.V

Jedou z vlastnosti, jez charakterizuje antimikrobialm činidlo jako účinné proti tvorbě cestiček a shluků, je minimální inhibiční koncentrace (nadále MIC) Činidla. MIC je minimální koncentrace v mikrogramech ns mililitr, za které nelze pozorovat růst bakterii» Zs koncentrace vyšší, nez je HIC, je antimikrohiální činidlo účinné v tom smyslu, že usmrtí bakterie, nebo inhibuje jejich růst i reprodukci.

Typicky se gntimikrobiální činidla zavádějí do ústní dutiny s určitou počáteční koncentrací. Téměř bezprostředně se počáteční koncentrace počne snižovat se zřetelem na dynamiku ústního prostoru» Případně i koncentrace antimikrobiálního činidla v ústní dutině klesne pod hotnotu HIC. Takže bylo cílem této práce vyvinout formulaci proti tvorbě destiček a shluků s použitím antimikrobiálního činidla s nízkou hodnotou MIC»

Hodnota chlorhexidinu HIC odpovídá asi 1 jig/ml a je standartem proti dalším měřeným sntimikrobiálním činidlům, Ačkoliv chlorhexidin má potřebnou hmdnotu HIC, má nevhodnou chut a nežádoucí vedlejší účinky, projevující se zbarvením zubů»

Podstat a vy nále zu

Podle jednoho rysu je předmětem tohoto vynálezu orální hygienická kompozice, jež obsahuje antimikrohiální činidlo, zvolené ze skupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřeva, chloramfenikol, olej z citronovníku, extrakt z lékořice v

(Glycyrrhiza glabra), bazalkový olej z šťavnatého ovoce, bazalkový olej z citronů a olej z rozmarýnu lékařského (Rosmarinus ofíicinalis). Podle tohoto vynálezu jsou orální hygienické komposice, obsahující tato antimikrohiální činidla, účinnými látkami při inhibování a prevenci růstu bakterií, přítomných v ústních dutinách, jako jsou Actinomyces viscosus, Pusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus mutans a Streptococcus sanguis. Orální kompozice, připravené ve shodě s postupem dle tohoto vynálezu, jsou charakterizovány tím, že obsahují antimikrohiální Činidla v množství dostačujícím k pozdržení růstu bakterií nebo jejich fsmrcení.

• ·

-5« · »

Antimikrobiální činidla lze kombinovat se zařízeními, typicky používanými na úseku zubní hygieny a hygieny úst, jako jsou třeba zubní pasty, V iombinaci mohou být oděrné látky, zvlhčovadla, pojivá a povrchově aktivní látky. Jiné přípravky v souvislosti se z'ubními pastami obsahují příchutě a thistovsdla.

Ve shodě s tímto vynálezem se tedy mohou kompozice pro hygienu úst a produkty dle tohoto vynálezu použít při hygieng- úst, jež zahrnuje styk ústní dutiby s antimikrobiálním činidlem ze skupiny, kterou tvoří ojej z cedrového dřeva, chloramfenikol, olej z citronovníku, extrakt z lékořice (Glycyrrhiza glabra), extrakty a oleje ze stavnatého ovoce, olej z citronovníku a olej z rozmarýnu lékařského (Rosmarinus officinalis).

Podrobný nonis vynálezu

Jak jsou dále uvedené názvy použity, p3k znamenají:

Olej z cedrového dřeva” znamená ^škavé olejovité extrakty ze dřeva jalovce (Juniperus virginiana nebo Juniperus ashei), Složkami takového olejovitého extraktu jsou thujopsen, cedrol, -kopaen, oL-cedren^ £>-cedren a widdrol.

CAS-číslo oleje z cedrového dřeva je 8000-27-9.

Chloramfenikol je 2,2-dichlor-E^T-(.2-hydroxy-l-(hydroxymethyl)-2-(4-nitrofenyl)-ethylj-acotamid. Původ může být buď Streptomyces venezuelae nebs organická syntéza,

CAS-číslo chloramfenikoli je 56-75-7.

Citronelový olej je běžně dostupný olej jako produkt destilování s párou buď za použití Cymbopogon nardus nebo Gymbopogon winterianus.

CAS-číslo v tomto případě: 8000-29-1,

Extrakt z lékořice (Glycyrrhiza glabra), známý rovněž jako kořenový lékořicový extrakt, se týká surového práškovaného extraktu z lékořice. Existuje několik variant, jako je G.typica a G_e glandulifera. Lékořice (Glycyrrhiza glabra) obsahuje v extraktu kyselinu glycyrrhizovou a glycyrrhetinovou. Extrakt jako celek je obchodně dostupný nebo se může získat extrakcí rozpouštědlem, třeba ethanolem, jak je to jeate dále popsáno.

Bazalkový olej c ovocnou šťávou se týká celkového extraktu z bazalky a složek povahy ovocných šťáv. Jde o *

-6Citronový bazaltový olej je těkavý olejovitý extrakt ze zvoleného druhu bazalky s citralovou složkou. Citrónový bazalkový olej je produkt kultivace bazalty Onimum bascilicum s vysokým obsahem citralu®

Citrónový olej je celkový olejovitý extrakt z čerstvé citrónové kůry citronu Citrus limon. Též je znám pod jinými podobnými oznsčeními₀

CAS-Čísle: 8008-5&-8.

Rozmarinový olej se týká celkového olejového extraktu z rozmarýnu lékařského (Rosmarinus officinslis). Je znám tento olej rovněž jako Rosemary-olej_o

CAS-čísl?: .04604-14-8_o

Všechny látky, uvedené výše, jsou obchodně dostupné.

minimální inhibiční koncentrqse'tóále MIC) znamená minimální koncentraci v mikrogrameeh ns mililitr antimikrobiálního činidla, za které nelze pozorovat další růst bakterií. Při koncentraci nižší než je MIC je antimikrobiální činidlo neúčinné při usmrcení, inhibování nebo reprodukci bakterií. Při koncentraci nad MIC antimikrobiální činidlo účinné usmrtí nebo inhibuje vývoj bakterie nebo její reprodukce.

Kompozice pro hygienu úst, připravené ve shodě s tímto vynálezem, obsahují antimikrobiální činidlo ze skupiny oleje z cedrového dřeva, chloramfenikol,, citronelový olej, extrakt v

z lékořice, bazalkový olej s ovocnou štávou, bazslkový citrónový olej a olej z rozmarýnu lékařského. Tyto kompozice pro orální hygienu lze včlenit do produktů pro orální hygienu, připravených dle tohotc vynálezu,, jsko jsou kartáčky na zuby, ústní vody a ústní výplachy®

Výhodné komposice pro hygienu úst obsahují antimikrobiální činidlo, zvolené se skupiny olej z cedrového dřeva, chloramfenikol a extrakt z lékořice. Zvláště pak výhodné kompozice pro hygienu úst ve shodě s tímto vynálezem obsahují antibakterielní činidlo ze skupiny olej z cedrového dřeva a extrakt z lékořice. Výhodná antibakteriální činidla se volí proto, že taková činidla jsou překvapivě účinná při zpomalování růstu a/nebo inhibování růstu příkladných gram-pozitivních | gram-negativních orá^lních pathogenních bakterií, jako jsou Actinomyces viscosus, PusobcjCterium nucleatum, Porphytomonas gingivalis, Streptococcus mutans a Streptococcus Sanguis. Příklady, které následují, jsou důkazem účinnosti antibakteric^Lních Činidel dle tohoto vynálezu zvláště proti těmto právě uvedeným bakteriím. 3 výrobou se použije ontibakteriajLní činidlo, účinné proti více než jedné bakterii, jak jsou uvedeny zde výše, a s výhodou proti všem uvedeným zde výše.

Množství antimikrobiójníko činidla, jak je přítomno v kompozici dle tohoto vynálezu, není v žádném případě jakkoli omezováno, to za předpokladu, že přítomné množství v kompozici je postačující k účinnému zpoždění růstu bakterií a/nebo prevenci takového růstu. Tedy musí to být množství vetší, než je hodnota MIC antibakteriejního činidla se zřetelem na tu či onu bakterii.

Jak je to doložena v příkladech, které následují, antibskterieJLní činidla dle tohoto vynálezu se vyznačují hodnotami MIC v rozsahu od asi 3,1 co asi 156 proti reprezentativním ústním pathogenům, jako jsou Actinomyces viscosus, Pusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus mutans a Streptococcus sanguis.

Prášky na zuby nebo zubní pasty představují obvykle zahuštěnou zmet oděrových leštících materiálů ve vodném zvlhČujícím prostředí. Typicky obsahují zubní pasty obvyklé oděrové činidlo k odstranění zbarvujících nánosů, zvlhčovedlo Či zvlčovadla, které|Či která zajišťují vehikulu příchut, oděrová činidla a zhuštovadla k upravení struktury a stabilizace zubního prášku, povrchové aktivní látky pro tvorbu pěny při použití, fluoridy k předcházení zubnímu kazu a přrchut, aby produkt měl přijatelnou chut,

K použití v případě zubních past se hodí četná oděrná činidle a jako příklady lze uvést xerogel oxidu, křemičitého, vysrážený oxid křemičitý, dikalciumfosfát, jeho dihydrát, trihydrát oxidu hlinitého, pyrofosíorečnan vápenatý, uhličitan vápenatý a nerozpustný metafosforecnan sodný.

-8• · • · · • · · • · « « « * » » «·*· · • · · · · ««·«««« «« tt

Jako příklady vhodných zvlhčovadel lze jmenovat sorbitol, glycerol a pólyethylebglykoly.

Jako shušlovadla jsou vhofiná: aerogely oxidu křemičitého, pyrogenní nebo vysrážený oxid křemičitý, karboxymethylcelulosa, karboxyvinylové polymery, xenthanová guma a karrageenan.

Jako příklady vhodných povrchové aktivních látek lze uvést sodnou sůl laurylsírové kyseliny a dodecylbenzensulfonovou kyselinu a její soli.

Četná příchutová činidla jsou dostupná obchodně se zahrnuv tím oněch, jež zahrnují mátu i další osvěžující příchutě, jako je skořicový olej_o

Orálními vodičkami či výplachy jsou zpravidla vodné, pohyblivá emulze s příchutěmi, do kterých se v největším počtu případů přidává antimikrobiální činidlo»Typické složky vodních výplachů obsahují též příchutová činidla, aby byle možno produkt použít s potěšením, se zdůrazněním therapeutických a osvěžujících kvalit, jsou tam přítomné povrchově aktivní látky aby udržely příchut ve stabilní disperzi, zvlhčovadla k vylepšení celkového pocitu v ústech, zhustovadla a aktivní látky, často se přidává povrchově aktivní látka, aby se docílilo lehké napěnění přípravku.

Zubní p-sty a ústní vody, obsahující antimikrobiální činidla pro inhibování růstu bakterií v ústním prostoru ve shodě o tímto vynálezem se připravují běžnými postupy s tím, se antimikrobielní Činidlo je tsmže v množství v rozsahu od asi 0,001 % (hmotn) do asi 5,0 % (hmotn), přepočteno na celkovou hmotnost přípravku S výhodou je t&mže antimikrobielní činidlo v množství v rozsahu od asi 0,01 % (hmotn) do asi 2,5 % (hmotn)o Specifické složky použité v zubních pastách a ústních vodách s obs_ahem antimikrobi&lního činidla dle tohoto vynálezu nejsou omezeny jen ta ty, které byly uvedeny zde výse_e S výhodou vsak vyvolené složky nemají antagonistické účinky na antimikrobielní vlastnosti svoleného antimikrobielnífeo činidle.

Další příklady dokládají účinnost orálních hygienických kompozic dle tohozčo vynálezu proti bakteriím, přítomným v ústním • * · • · « · · α · • « ·

-9f prostoru, uvádějí hodnoty MIC antimikrobiálních činidel v kompozicích proti bakteriím, popisují zubní pasty a ústní vody s obsahem antimikrobiálních kompozic dle tohoto vynálezu, výhody spotřebitele z hlediska takových přípravků pro ošetření zubů a data účinnosti in vivo takových přípravků pro hygienu

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Stanovení minimální inhibiční účinnosti a koncentrace antimikrobiálních činidel.

Z

Další příklad dokládá, jak antimikrobiqlní činidla, použitelná ve shodě s tímto vynálezem zpoždují růst, nebo mu předcházejí s přihlédnutím k zubním destičkám bakterií, přítomných v ústní dutině. Dále pak příklad uvádí nejnižší kony centraci různých antimikrobiálních činidel, která viditelně in vitro inhibují růst odpovídající bakterie.

Test využívá mikrotitrační destičku k ředění antimikro/ biqlního činidla na různé koncentrace se zřetelem stanovit MIC,

Z

Tabulka 1 uvádí výčet antimikrobiálních činidel, použitých v tornto příkladu i jejich zkratky:

Tabulka 1

Z

Antimikrobiální činidla a jejich zkratky

Před olej z cedrového dřeva (RG1) chloramfenikol (CR1) citronolový olej (CTR1) olej z lékořice (GLY) Glgcyrrhiza glabra bazalkový olej s ovocnou štávou (JPB1) bezolkový citrónový olej (LMB1) citrónový olej (LM01) olej z rozmarýnu (R0P1) Rosmarinus officinalis

Kultura bakterie byla inkubována po dobu noci při 37° C.

x ředěním antimikrobiálního Činidla, jak se to popisuje dále, • · < · • · • ·< · i e ι

-10byla kultura bakterií sražen^(při 2000 otáček za minutu)do pelety, jež byla resuspendována ve fosforecnanovém pufru. Inokulum bylo normalizováno spektrofotometrem na optickou hustotu Při 550 nanometrech mezi 0,18-0,22, což je ekvivalent 5,0 ♦ 10⁷ jednotek, tvořících kolonii (CPU na mililitr). Inokulum bylo potom dáno stranou až: do skončení ředění antimikrobielfflího činidla, ,

K ředění antimikrobialních činidel byla použita sterilní polystyrénová destička s 96 žlábky, do každého bylo vneseno 100 mikrolitrů destilované vody. Do prvého žlábku každého sloupečku bylo přidáno 100 mikrolitrů antimikrobialního činidla. Byly připraveny zásobní roztoky antimikrobielních Činidel za použití methanolu jako rozpouštědla, aby se činidla udržela v roztoku. Výsledkem bylo poloviční zředění zásobního roztoku. Z těchto žlábku bylo přeneseno 100 mikrolitrů do dalšího žlábku sloupečku a tak dále vždy do dalšího sloupečku. Egždý přenos znamenal poloviční zředění koncentrace předcházejícího žlábku. Poté, co ředění cntimikrobiolního činidla bylo skončeno, bylo do každého žlubku vneseno 80 mikrolitrů růstového prostředí, specifického pro studovanou bakterii. Specifická růstová prostředí pro uvedenou bakterii jsou v tabulce 2_e

Dále pak do každého žlábku bylo vneseno 20 mikrolitrů inokula. Výsledkem v prvém žlubku každého sloupečku bylo konečné zředění, odpovídající čtvrtino zásobního roztoku. Zbývající zlábky znamenaly vždy poloviční zředění předchozího žlábku při každém přenosu_o

Destička a 96 žlábky byla ihkubována zs podmínek, které se měnily v závislosti na tom či onom mikroorganizmu. Podmínky inkubování jsou v tabulce 2. ,

Aerobní bakterie byly inkubovány za podmínek teploty, obvyklé v místnosti a anerobní bakterie byly inkubovány v atmosféře 10% plynného vodíku, 5% oxidu uhličitého, zbytek tvořil plynný dusík. Z a 48 hodím po inkubování byl proveden odečet mikrobiálního růstu na inkubované destičce spektrometrem s využitím optické hustoty (OD). Zlábek, obsahující • « 0

-110 0 0 0 ’ « 4 «· ·0 nejnižsí dosažitelné zředění se spektrofotometrickým odečtením pod 0,05 OD (to znamená nedokazatelný mikrobielní růst) byl pokládán za příkladný pro intimikrobieCLní činidlo. Hodnota í.ilC činidla byla stanovena propočtem z koncentrace výchozího základního roztoku a vzniklého zředění na destičce s 96 žlábky.

Specifické bakterie, očkované na destičce s 96 žlábky, jsou uvedeny v tabulce 2 spolu s růstovým prostředím a podmínkami inkubování takového mikroorganizmu,,

Ta b u 1 k a 2

Mikroorganizmus/růstové prostředí/podmínky inkubování mikroorganizmus

ATCC o. Růstové orostředí

Campylobacter rectus 33238

Actinomyces viscosus (AV) 19246

Puso bacteriura nucleatum (FN) 10933

Porphyromonas gingivslis (FG) 33277

Streptococcus mutsns (SI.·) 25175 Streptococcus sanguis (SS)49295

Poznámky:

CR~

TSB¹

TSB

PG“ ,1

1.

4.

Podmínky inkubování hod/37°C/anerobně ” aerob anaerob

Π

IT

1T

II tl u

Π aerob υ

Tryptická. sojová, zápara, 3,0% hmotn./obj., kvasinkový extrakt 0,1% a 999 mililitrů dest»vody.

Tryptická sojová zápara, 3,0% hmotn/obj., kvasinkový extrakt 0,5%, L-cystein 0,05%, hemir 0,0005%, menadion 0,00002%, 990 mililitrů čest.vody.

Tryptická sojová zápara,- 3,0% hmotn/obj., kvasinkový extrakt 0,5%, ponton 1%, L-cysteinový extrakt, hemin 0,0005 %, menadion 0,00002%, 990 mililitrů vodyídest). ílozko-srdcová infuzní zápara 0,74% hmotn/obj., kvasinkový extrakt 0,01%, sodná sůl kyseliny mravenčí 0,2%, sudná sůl kyseliny fumarové 0,01%, hemin 0,005% a 990 mililitrů destilované vody

-12Β·** ♦ k • ·* z

V dále následujících tabulkách jsou antimikrobiQjLní činidla vyznačena zkratkami z tabulky 1, dále pak je uvedeno v tabulce 2 pět mikroorganizmů s odkazem ns zkratky v tabulce 2,

Tabulka 3 /

	Hodnota i	JIC (ug/ml) antimikrobifiilních činidel
pro	vyznačené bakterie
Činidlo	AV	CR		PG	SM	SS
PCI		31,3	31,3	31,3	7,6	31,3	15,6
Chl		3,1	—	3,1	6,3	3,1	3,1
CTR1		62,5	12 5	31,3	31,3	62,5	31,3
GLf		15,6	15,6	15,6	7,8	15,6	7,8
JFB1		156,3	156,3	156,3	62,5	156,3	156,3
LMB1		12 5	12 5	62,5	31,3	62,5	62,5
LM01		312,5	125	62,5	31,3	125	125
R0P1		125	125	62,5	62,5	125	125
	V tomto	příkladu j	sou uvc	ceny mi	nomální	inhibiční

koncentrace uveden s ntinikrobietlmch ých antimikrobiálních činidel a schopnost činidel inhibovat růst scecifických bakterii.

Příklad 2

V tomto příkladě se popisují přípravky k ochraně zubů, obsahující anximxkrobi^ini cimcla cle tohoto vy na z

pravgk 16-88 neobsahují antimikrobiální činidlo v s tímto vynálezem.

/Ί τ,;

shodě

T a b u 1 k a 4

Přípravek 5-82: 0,1% oleje z cedrového dřeva (hmotn/hmotn)

Složka	% hmo t n
sorbitol 70%		37,00
poloxamer 407	(PLUROSIC P127)	9,50
^oda^r. zbavená	iontů	24,50
carbomer 940	(CARBOPOL 940)	0,30

• 0 • » ·

-13» * 0 · • · · ·· ·· pokrač.tabulky 4

Složka % hnotn.

hydroxid sodný	0,20
xanthanová guma	0,40
glycerol	4,75
fluorid sodný	0,25
sodný derivát sscharinu	0,30
sylodent 750 (oxid křemičitý)	9,50
sylodent 15 (oxid křemičitý)	9,50
olej z cedrového dřeva	0,50
příchuť	0,30
FDsnd C modř ??1 1% roztok	0,10
oxid titaničitý	0,90
sodná sůl laurylsírové kyseliny	1,40

Tabulka 5

Přípravek 5-81 : 0,1% oleje z cedrového (hmotn/hnotn) dřeva

Složka % hmotn.

sorbitol 70% 58,63 sodná sůl karboxymethylcelulosy 0,35 iontů-prostá voda 3,00 polyethylenglykol 600 5,00 glycerol 10,00.

fluorid sodný 0,22 soony esnvaL sacharinu 0,30 sodná sůl kyseliny benzoové 0 ,50 sylodent 700 (oxid křemičitý) 15,00 aerosil 200 (oxid křemičitý) 3,00 příchut 0,80 ethanol 1,50

0,10

PDandC modř Ό- 1 1% roztok 0,10 sodná sůl kyseliny laurylsírové 1,50 « · *« · * 1 « # 4 ·· ·*

-14csóarového dřeva ΐ ε b u 1 k ε 6

Přípravek 5-108 : 0,4% oleje hmotn/hmotn

OlozRs sorbitol 70% iontů zbavená voda csrbomer 340 (CAR30P0L 940) hydroxid sodný xanthanová guma fluorid sodný sodný derivát sacharinu SYlODSiíT 750 (oxid křemičitý) SiLODBhT 15 (oxid křemičitý olej s cedrového dřeva pner/j.to v e eim 1 o oxid titaničitý sodná sůl kyseliny laurylsírové % hmotn.

50,00

24,63

0,30

0,20

0,5000

0,22

0,55

10,00

0,40

0,60

1,00

Přínravek 18-37:

T a, b u 1 0,5% oleje k a 7 . , z cedrového dřeva (hmotn/r hmotn.

otn)

Složka

sorbitol 70%	50,00
iontů zbavená voda	24,53
carbomer 940 (CAR30P0L 940)	0,30
hydroxid sosny'	0,2 0
xabthanová guma	0,50
fluorid sodný	0,22
sodný derivát sacharinu	Ά (— Γ’ o, 00
SYLoDEIÍT 750 (oxid křemičitý)	10,00
Sylodent 15 (oxid křemičitý)	K-,00
extrakt zlékořice	0,50
v příchutové činidlo	0,80
oxid titaničitý	1,00
sodná sůl kyseliny laurylsírové	1,40

-15Tabulka δ

Přípravek 15-90 : 1% oleje z ceáro' n/k^otn	/ého dře ba
Složka %	hmot n„
sorbitol 70%	50,00
iontů, zbavena voda	2 4,03
carbomer 940 (CŮR30POL 940)	0,30
hydroxid sodný	0,20
xanthanová suna	0,50
fluorid sodný	0,22
sodný derivát sacharinu	0,55
SýLODENT 750 (oxid křerničitý)	10,00
SYLGOBIT 15 (oxid křemičitý)	10,00
olej s cn drtivého dřeva	1,00
v příchutové činidlo	0,30
oxid titaničitž	1,00
sodná sůl kyseliny Isurylsírové	1,40

Tg bulka	9
Přípravek 18„25 : 0,1% hino	kitiol	,u
Složka	V % :	ό t n.
i o n u ii znavena v o q 3		92,02
carbomer 540 (Gá.RBOPOL 940)		1,00
hydroxid sodný		0,75
sodný derivát sacharinu		0,50
fluorid sodný		0,23
prrcnut		0, bO
hinokitiol		0,10
ethanol		3,50
sodná sůl kyseliny laurylsírové		1,10
T a b u 1 k a	10
Přípravek 18-88: kontrolní
Složka		hmo t n.
sorbitol 70%		17,70
poloxamer 407 (PLURONIC F127)		9,50
iontů zbavená voda		25,50

·· · ·

• · • » »

-16p okr. ta bulky 10

Složka carbomsr 940 (CARBOPOL 940) hydroxid sodný xa nthanová guma glycerol iluorid sodný sodný derivát sacharinu

SYLODERT 750 (oxid křemičitý)

3YL0DENT 15 (oxid křemičitý) oxid ritaničitý sodná sůl kyseliny laurylsírové ρ nmoon. 0,30 0,20 0,40 4,75 0,25 0,40 9,50 9,50 1,00 1,00 fCarbomer je polymer akrylové kyseliny zesítěné allylc e r i v a t e m s ε c ho r o sy, dostupný jako CARBOPOL 940. Týž je běžně dostupný od 3Goodrich, SYLCDSIIT 750 a 700 jsou křemičité gély (oxidy křemičité) a SYLODBIiT 15 rovněž. SYLCDRRT je dostup ný od W.R.Grace and Co., Conn® Davison Chem.Bivision.

Přípravky, popisované zde výše, se získávají vc vakuové míchačce přidáním iontů zbavené vody ε dispergováním carbomeru za vytvoření vakua. Po dobrém dispergování carbomeru se přidá hydroxid sodný. V jiné nádobě se smíchá a vyhřeje 70% sorbitol a poloxsmer, tato směs ce pak přidá do vakuové míchačky a procarbomoru. Xanthanová guma se rozmíchá ε lícha oky s promíchámicna sc srno ccrolem, to se také přidá do vakuové ním. Potom se přidají soli do vakuové míchačky, posléze oxidy křemičité® vyto složky se vmíchávají pomalu. Posléze se přidají aktivní Činidla, příchutě, sodná sůl kyseliny laurylsírové a zbarvující činidla s následným dokonalým promícháním.

Tento příklad popisuje několik přípravků typu zubních / ý past s vnesenými antimikrobiq,lním.i činidly dle tohoto vynálezu.

Příklad 3

Způsobilost z hlediska zákazníka Tento příklad popisuje způsobilost zubních přípravků,

Z obsahujících antimikrobiální činidlo ve shodě s tímto vynálezem

Přípravky, jak jsou zde uvedeny v tabulkách 4-9, byly vy• 9 9 · 1

9 « *9 *·

-17hodnocetiy s hlediska spotřebitele. Pro srovnání byly rovněž vyhodnoceny některé běžně v obchodu dostupné přípravky. Sem patří: Viadent Gel (přípravek 5-35), výrobek Viadent, Inc.j Crest Regular Biue Paste (přípravek 5-97), výrobek Procter an; Gamble Company.j a Listerine Seal Gel (přípravek 5—99), výrobek 'Warner Wellcome.

Prelerencni stuois oyly prováaeny ikumnou asi ru

lidi. Každé z os	00 cyia c	ána jedno tuba	zubního	přípra	v ku k
použití b Ι·:;:; tý	dne. ks konci tý	dne vyc	lnili uc	a s i π í c i	do ta
Π1 IV j V J & X li iij p	růzkumu j	sou shr	nuey v	ta bulce	11 zde	dále.
Rozsah hodnocení	byl 1 až	10 s t	η -r>i r/ a 1:.;,	1 znamená chabý	výši
sek a 10 znamená	dobrý vý	slecek.	Výsled	ky byly	secte ny	a uv
jejich průměr.	T a b	u 1 k	a 11
	Výhod noc	sní spo	třebitelem
Přípravek	5-82	5-81	5-103	5 -35	5-97	5-95
barva	6, ČI	8,00	6,75	2,72	6,64	7,- >
vzezření	o, 4-s	7,90	6,90	3,16	6,62	6,75
< _ 1 !_Á U	5,80	6,20	7,15	3,72	6,27	4,00
v chut, dodatečně	6.80	5,85	6,05	3,38	6,09	i, co
aroma	7,19	6,73	7,05	4,33	6,32	4,55
čistě ní	7,38	5,35	i, Oo	3,94	6,41	6,10
pěna	6,42	5,10	7,55	3,66	6,05	5,85
konzistence	7,23	5,95	7,70	4,00	6,14	5,75
z suchost v uštech	8,14	6,90	7,10	3,89	7,31	5,70
pocit dalšího ji	trs 7,00	6,16	7,05	3 3^Q	5,50	5,15
pocit v ústech celkově	7,33	6,16	7,05	3,11	6,09	/! /’ “r,
vyhovuje celkově	6,90	6,10	6,90	3,05	ς c =	4,20
o t o no t o	příkladu	jo patr	né, že	celková	spokoj a	nost
zákazníka v případě přípr	svků s	aktivní	složkou	dle to	ho to
vynálezu je vyss	í ve srovnání s	oelkovo	u spokoj	eno stí	žáka z

níků v případe některých běžně dostupných produktů.

Snížení přebytku dásnových bakterií ”in vivo ?ento příklad dokazuje, jsk zubní přípravky s obsahem

Příklad 4

-18kompozic dle tohoto vynálezu redukují hladinu bakterií, totiž jejich přebytku ns dásních.

V tomto příkladu zvyky osob, čistících si zuby, zůstsly zachovány. V den zjišťování údajů si testovaní nečistili zuby po 16 až 13 hodin (přes noc) před testováním, hladiny bakterií byl;/ vyhodnoceny oce bráním vzorků in vivo a propočtem kolonií bakterií, vznikl

Stáří testovaných 13 až 65 let, nejméně 20 zubů, normální tok slin. Byli odmítnuti ti s chronickými nemocemi, jež ovlivňují dásnové tkáně, jako je cukrovka, abnormality krevních buněk, Dov;n-ův syndrom nebo známí infekce HIV, dále pokud jsou postiženi sán ctem na jazyku (glossitis), zánětem dásní (gingivitis), periocontitidou nebo oalsimi ústními inzekcemi, nebo jsou-li jim systematicky podávána antibiotika, případně byls-li 2 týdny před zahájením testů.

Každý z přípravků byl testován z hlediska antimikrobiální účinnosti asi na 20 lidech. Testovaní byli požádání, aby noc před testováním měli zakrytá ústa s tím, že další ráno bude vyhodnocen výsledek jednoduchého čistění zubů.

Na začátku byl odebrán vzorek přebytku dásnových destiček sterilním kouskem bavlny s umístěním.do 1 ml pufrované fosforečnanem (PBS), Kousky vaty erilní solanky, ;ěžně posunovaly podél dásnového povrchu dolní čelisti za použití pinzety. Těsto vání si bezprostředné potom po odebrání vzorku vyčistili zuby použitím zubního přípravku a elektrického kartáčku na zuby po 2 minuty. V odstupech jedna hodiny ε dvě hodiny po skončeném čistění byly použitím stejného postupu, jak byl popsán výše, v

odebrány dásnové destičky pomocí chomáčku vaty.

Klinický obraz je průřezem studia, trvajícího delší dobu. Tím se míní studium, kdy testovaní byli použití při prvém působení sledovaného přípravku, potom sledováni po druhé, po třetí a ježto po čtvrté. Pokusný výsledek umožňuje každému testovanému, aby se sám kontroloval, Vymývací doba dvou dnů byla použita vždy mezi testováním různých antibakterielních přípravků.

v

Dásnové vzorky byly pak přeneseny do testovacích zkumavek • · ··« ···9

-19s tsraže ponechán;; as teploty místnosti až do zpracovávání během hodiny. Vzorky ve zkumavkách byl?/ sériově ředěny sterilním roztokem PBS (viz minulá strana) použitím Spirál Platsr, Spirál Systems, Cincinnati, Ohio, USA a umístěny no krevním agaruh dodatkem 5h krve ovcí (BBL, Becton Dickinson, Cockeyville, LJarylanc, USA). Potom byly vzorky inkubovány aerobně při 37° C po 48 hodin. Bakterie byly spočteny se zřetelem na všechny jednotky vytvořených aerobních kolonií.

Bakterielní propočet byl převeden na hodnoty logstanaartní deviace za všech testovacích podmínek, údaje byly spojeny se zřetelem na převažující

Byla mrsoena stranní oorovi li a ε analyzovány použitím nonparametric Uilcoxon sign-rank test¹¹ se zřetelem na zjištění významné hladiny. Hypotetické testování jo založeno na statistických údajích za použití víceperiodického průřezu klinických studií.

Výsledky jsou uvedeny v tabulce 12,

Přípravky 18-25, 18-87 a 18-90 obsahovaly složky, uvedené v tabulkách 9, 7 a 8. Přípravek 18-88 obsohovsl složky, uvede/ né v tabulce 10 íbez ontibakteriqjLního činidle) e bvl použit pro kontrolu a srovnávací úcly v porovnáním s přípravky 18-25, 13-87 s 18-90,

-2012 účinek zubních příýravků s obsahem antibakteriq%ních činidel na hladinu bakterií in vivo

Přípravek Aktivní iconc_osložka hm/hm (1.10 CFU/ml) Snížení Významná Počet doba bakterií hladina testová-

		za čátek	2 hod	proti kontrole	ných
				A'
18-25	hinokitiol 0,1	53.11	4,47	49,8% ++	17
18-87	extrakt z
	lékořice 0,5	3 3,81	2,14	7 υ, Op· +++	17
16-90	cedrové
	dřevo 1,0	31,62	3,10	64,5% +++	17
18-88	kontrola	33,88	8,91	ΪΪΡ IIP	17
	Statistické výsledky	: T	estová	ní účinku proti kontrolnímu
prost	ředku (18-88) za 2 hod	iny ”Vileozon	sign-rank matched	psirs
	přepočet na uda	je log_1Q
M4	p pod 0,01
++	p pod 0,05
4	p pod 0,1
líP -	nepoužitelné
	V tomto příkladu je	dokázáno		ubní přípravky s	obsa-
hem a	z ntimikrobiq%ních činíc	el dle tohoto	vynálezu zničují	in vivo

I ri·—.«-ΊΚ'ΙΛ 1-. -·. I « X -s 1Z| — ·.

XC UXUW UU.OLO¹ 7 J L·!! U Í5 K U ^rJ X IX» . v z . - ·, <— ^!riklaa p

Extrakce třezalky (Glycyrrhiza glabrs) ethanolem

250 g srn _:si práškovaného materiálu z třezalky) se ethanolu a vody 95 : 5. Směs se míchá smísí s za teploty místnosti po dobu jedné noci, pevné chsné směsi na Buchnerově nálevce s podíly se odfiltrují z mípoužitím filtračního papíru «· · ·

-21Whatma n

č.4. Další oddělení pevných podílů následuje na Buchnerově nálevce s filtračním papírem Whatman č.5, s ještě další případné pevné podíly na Buchnerově nálevce s použitím filtračního papíru Whatman 1 miti$nstr. Ke konečnému vyčistění se použije zařízení pro vakuovou filtraci s filtrem 0,2 mikrometru. Čirý roztok se potom zahustí až ks vzniku pevné látky použitím rotační odparky a jako surový extrakt z třezalky se tajto izoluje asi 2,5 g rezavě zbarvené pevné látky.

Ačkoliv byla popsána výhodná provedení ale tohoto vynálezu, jakož i doložena, je samozřejmé, že jsou možné četné obměny, aniž by se vybočilo z rámce tohoto vynálezu.

0 • 0 ·« *00

-22· «0 0

Claims

1. Kompozice pro inhibování nebo prevenci růstu ústních pathogenních bakterií, vyznačující se tím, že obsahuje antibskterÍQ.lní činidlo, zvolené ze skupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřeva, chloramienikol, citronelový olej, extrakt v* z třezalky,bazilkový olej z štsvnatého ovoce, citrónový ba žilkový olej, citrónový olei nebo olej z rozmarýnu.

nároku 1, vyznačující se tím, že o, svolené ze skupiny, kter, c Cr 3Ú O V θ í iv Ci

2 va, chl 'rsmfenikol a extrakt z tře2. Kompozice podle obsahuje antimikrobiální činidlo, svolené se skupiny, kterou tvoří olej

3lky

3_e Kompozice podle nároku 2, vyznačující se tím, že obsahuje antimikrobiQ%ní činidlo, svolené se skupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřeva a extrakt z třezalky.

4. Komposice podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje antimikrobiální činidlo v množství dostačujícím k oozdržení růstu orálních oathogenních bakterií.

5. Kompozice podle nároku 4, vyznačující se tím, žf orálními bakteriemi jsou ony, svolení ze skupiny, kterou tvoří Actinomyces viscosus, Csmpylobacter rectus, Pusobacterium nucleatum, Porphyromonss gingivslis, Streptococcus mutans a Streptococcus ssnguis.

6₀ Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, ?,< obsahuje antimikrobiální činidlo v ' nosství dostačujícím, k usmrcení bakterií,

7. Kompazice podle nároku 6, vyznačující se tím, že bakterie jsou zvoleny se skupiny, kterou tvoří Actinomyces viscosus, Campylobacter rectus, Pugobacterium nucleatua, Porphyroaonas gingivalis, Streptococcus mutans a Strsptosoccus sanguis.

8. Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, z<

obsahuje antimikrobiální činidlo v množství dostačujícím k inhibování tvorby zubních destiček.

• 00 • 0 0··

100 0000 “23Kompozice podle nároku 1, vyznačující se tím, iim, ne z že obsahuje antimikrobiální činidlo v množství v.y je minimální inhibiční koncentrace činidla,

10. Zubní pasta, obsahující antimikrobiální činidlo, zvolené ze skupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřevs, chloramfěnikol, citronelový olej, extrakt z lékořice, basilkový olej ze otavnatého ovoce, bazilkový citrónový olej, citrónový olej a olej z rozmarýnu, dále oderné činidlo, zvlhcovodlo, pojivo a povrchové aktivní látku.

Zubní oasta li.

činidlo jí dřeva, chiorernfenikoi podle nároku 10, kde antimikrobiální svoleno ze skupiny, kterou tvoří olej z cedrového ;rakt z třezalky.

12. Zubní pasta podle nároku 11, kde antimikrobiální činidlo je zvoleno ze skupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřevs a extrakt z třezalky.

13. Zubní pasta podle nároku 10, kde antimikrobiální činidlo je přítomno v množství dostačujícím k pozdržení orální pathogenní bakterie.

Zubní pasta podle nároku 13, kde bat

14.

ne je zvolena ze skupiny, kterou tvoří Actinomyces viscosus, Gampylobsctsr rectuc, Pusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus mutans a Stroptococcud sanguis.

15.

činidlo j — — 4- T- -τ v-. — ·, r ‘i n p <2 U i 1U C L1 L- X U íi ř.l/ G i iti

Zubní oseta oocle nároku 10, kde přítomno v množství cesta ;u .bakteriální kujícím k usmrcení orální

Zubní pasta podle nároku 15, kde orální pathogenní bakterie je zvolena se skupiny, kterou tvoří Actinomyces viscosus, Campylobscter rectus, Pusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus Mutans a Streptococcus sanguis.

X

17. Zubní pasta podle nároku 10, kde antimikrobiální činidlo je přítomno v množství dostačujícím k inhibování tvorby zubních destiček.

« fl - - ” ··» fl v · * * · · • ·

-2418. Sukní posta podle nároku 10, kde antimikrobiq^ní činidlo je přítomno v množství vyšším, než je minimální inhibiční koncentrace Činidla®

13.

Znůsob inhibování nebo nrevence růstu orálních pathogenních bakterií, vyznačující se tím, že obsahuje stupen, kdy sc ústní dutina uvádí co styku s antimikrobiQlním Činidlem, svoleným sc skupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřeva, chloramfsnikcl, citronelový olej, extrakt a třezalky, ba silkový ovoce, orej ze s olrj a olej z rozmarýnu.

ba silkový citrónový olej, citrónový orej

21.

20, Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, že imikrobi^lní činidlo je z.-oleno se skupiny, kterou tvoří dřeva, chloramfenikol s extrakt z třesalky.

Znůsob podle nároku 18, vyznačující ss tím, že

Z ' ” antimikrobiální činidlo jo svoleno ze sxupiny, kterou tvoří olej z cedrového dřeva a extrakt z třesalky.

22 o Způsob podle nároku 13, vyznačující ce tím, že v v f stupen styku obsahuje další stupen, kdy se ústní dutina uvádí do styku s množstvím antinikrobietlního činidlo, jež dostačuje k pozdržení růstu orální pathogenní bakterie.

23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že orální pathogenní bakterie je zvolena ze skupiny, kterou tvoří

Actinomyces viscosus, Campy1' bacter rectus, Fusobacterium nucleatum, Porphyromonas gingivalis, Streptococcus mutnns a Streptococcus sanguis,

24. Způsob podle nároku 13, vyznačující se tím, žc stupen styku obsahuje další ztupen kontaktu ústní dutiny s množstvím antimikrobiQlního Činidla, dostačujícím k usmrcení pathogenní bakterie,

25® Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že orální pathogenní bakterie je zvolena ze skupiny, kterou tvoří Actinomyces viscosus, Campylobacter rectus,, Fusobgcterium nucleatum, Forphyromonss gingivalis, Streptococcus mutans a Streptococcus sanguis® «· · ·*·· >N

26. Způsob podle nároku 19, vyznačující se tím, že stupen uvádění do styku obsahuje další stupen kontaktu ústní dutiny s množstvím sntinikrobiQlníhc činidla, dostačujícím k inhibování tvorby zubních destiček,

27. Způsob podle nároku 19, vyznačující se tím, stupen uvádění do styku zahrnuje dále kontaktování ústní dutiny s množstvím antibaktoriqlního činidla, jež je větší,

Z než je minimální inhiciční koncentrace ontibskteriqiního činidla ₀