CZ397091A3

CZ397091A3 - Azaspiranové deriváty a farmaceutické prostředky sjejich obsahem

Info

Publication number: CZ397091A3
Application number: CS913970A
Authority: CZ
Inventors: Alison M Badger; Elaine N Cheeseman; Michael J Dimartino; James W Dorman; Christopher K Mirabelli; Donald H Picker; David A Schwartz
Original assignee: Smithkline Beecham Corp
Priority date: 1988-09-13
Filing date: 1991-12-20
Publication date: 1994-01-19
Also published as: SK397091A3; PH25812A

Abstract

Analogy spivogermaniových sloučenin, které jsou-li aplikovány v účinném množství, působí imunomodulačně u zvířat eventuálně u lidí, kteří to potřebují a farmaceutické prostředky s obsahem takových sloučenin.

Description

Oblast vynálezu .Ρ; · [ ;

i ;z

Vynález se vztahuje na spirogermaniový analog obsahující nekovy , farmaceutické prostředky obsahující tutový analog a farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a na způsob léčení rheumatoidní arthritidy u zvířat, která to potřebují, který je tvořen aplikací účinného množství takového analogu takovým zvířátkům.

Dosavadní stav techniky

Geschichter et al., patent č. 4,468 393 uveřejněný 28.září 1984 nárokuje způsob léčení arthritidy pouzí vající různé germanium obsahující spirogermaniové analogy včetně: N- (3-dimethylaminopropyl)-2-aza-8,8-dimethyl-8-gennanspiro/4,5/ děkan; N-{3-dimethylaminopropyl) -2-aza-8,8-diethyl-8-germanspiro/4,5/dekan;

N- (3-dimethylaminopropyl)-2-aza-8,8-dipropyl-8-germanspiro/4,5/dekan; a N-(3-dimethylaminopropyl)-2-aza-8,8-dibutyl-8-germanspiro/4,5/dekan.

Tenoso et al. U.S. patent č. 4,654 333 uveřejněný

31.března 1987 nárokuje způsob pro léčení roztroušené sklerosy, který je tvořen léčením postiženého pacienta roztroušenou sklerosou účinným množstvím spirogermania vybraného ze skupiny tvořené:

N-(3-dimethylaminopropyl)-2-aza-8,8-dimethyl-8-germanspiro/4,5/dekanem;

N-(3-dimethylaminopropyl)-2-aza-8,8-diethyl-8-germanspiro/4,5/dekanem;

N- (3-dimethylaminopropyl)-2-aza-8,8-dipropyl-8-germanspiro/4,5/de^ánem; a .N.-(3-dimethylaminopropyl) -2-aza-8,8-dibutyl-8-germanspiro/4,5/dekanem.

Rice et al., J.Heterocycl.Chem,10(5), 731-735 (1973), (Rice I) objevuje synthesu N-(2-dimethylaminopropyl)-8,8-dimethyl-2-azaspiro/4,5/dekanu;

N- {2-dimethylaminopropyl) 8,8~-'diethyl-2-azaspiro /4,5/dekanu a N-{3-dimethylaminopropyl)-9,9-dřne±hyl-3-aza2 spiro/5,5/undekanu a N-(3-dimethylaminopropyl)-9,9-dietyl-3-azaspiro/5,5/-undekanu. Rice I ukazuje, Že biologické hodnocení těchto aminů vykazuje signifikantní inhibici růstu rakovinných buněk, u lidských rakovinných buněk pěstovaných v tkáňové kultuře .

V Rice I není žádný objev a podnět, že by taková aminy měly antiarthritické působení.

Rice et al., J. Heterocvcl, Chem., 10(5), 737 741 (1973) (Rice II) objevuje synthesu N-{2-dimethylaminooropyl)-3,8 dimethyl-S-sila-2 azaspiro/4,5/dekanu a N- (3-dimethyLaminopropyl) -9-9-dimethyl-9-silá-3-azaspiro/5,5/undekanu a dále konstatuje, že biologické hodnocení takových sloučenin indikuje cytotoxické působení proti lidským rakovinným buňkám pěstovaným v tkáňové kultuře. V Rice II není žádný objev nebo podnět, že by takové sloučeniny mely antiarthritický účinek.

Rice et al., U.S. patent č. 3,256 277 uveřejněný

14. června 1966 (Rice III) nárokuje sloučeninu vybranou ze skupiny sestávající ze sloučenin vzorce (I)

ve kterém A je kruh s nejméně 5 atomy kruhu, všechny atomy kruhu jsou atomy uhlíku výjma r\ R^ je vybrán ze skupiny tvořené kyslíkem a sírou; X je vybrán ze skupiny tvořené nejméně jednou skupinou z vodíku, nižší alkoxyskupinv, nižší alkylové skupiny, nižší alkenylové skupiny; cyklonižší alkylové skupiny a monokarbocvklického arvlu; B je nasycený kruh z 5 až 6 atomů kruhu, atomy kruhu ^iné než atom dusíku jsou atomy uhlíku.;—Y—j-e—vybrán— ze—skupiny~tvořsne~aIkvTenovoTr^a alkenylenovou až do 6 atomů uhlíku; n je 0-1; a R je vybrán ze skupiny tvořené nižší akylovou, nižší aikenylovou, cyklonižší alkylovou a alkenylaminoskupinou, nasycenou heterocyklickou skupinou vybranou ze skupiny tvořené morfolinovou, piperidinóvou, pyrrolidinovou, piperazinovou, tetrahydrofurylovou a jejích nižšími alkylovými a alkenylovými substituovanými deriváty, monokarbocyklický aryl, nafthyl, pyridyl, cuinolyl, furvl a nižší alkoxyskupina; (2) netoxicke addiční sole s kyselinami (1) a (3) netoxické kvarternární soli (1). Rice III konstatuje, že takové sloučeniny jsou charakterisovány svoji farmakologickou aktivitou na nervový a kardiovaskulární systém. V Rice III není žádný objev nebo podnět, že by takové sloučeniny měly antiarthritický účinek.

Rice et al. U.S. patent Č. 3,282 947 uveřejněný 1.listopadu 1966 (Rice IV), nárokuje sloučeniny vzorce

ve kterém R a jsou každý vybrán odlišně ze skupiny tvořené: ...

(a) vodíkem (b) nižším alkylem

--—tc-)—aralky-l-em—vybraným-ze—skupiny-tvořené' ‘pyřidýlem*,’”' __ nižším alky.lem_a_feny-l^ni.ž.šim-a-l-k-y-l-eni---·---(d) di-nižší alkylamino nižší alky lenová skupir*^ nebo (e) hydroxy nižší alky lenový skupině/Rice IV konstatuje, že takové sloučeniny jsou hodnotné jako meziprodukty a že také mají nedefinované farma koTo'gickě^—účinky. V^-Ric ě IV nejsou žádné objevy nebo podněty, že takové aminy mají antiarthritické účinky.

Rice et al., J. Med. Chem., 6, 388-402 (1963) (Řiče V) objevuje preparáty široké skupiny X-dialkyiaminoalkylazaspiroalkanů a uvádí, že byla ve skupině pozorována silná (ale nedefinovaná) farmakologie ká aktivita a že jsou činěna určitá pozorování o zna ných růstově inhibičních účincích určitých členů sku plny (na příklad 3-(3-áimethylaminopropyl-9-terc-butvl-3-azaspiro/5,3/undekan) na rakovinné buňky v tkáňových kulturách a objektivní klinické účinky u lidských rakovinných buněk. V Rice V není žádný objev nebo domněnka, že by měl antiarthritické účinky·

Rice et al., J. Heterocycl. Chem., 1(3), 125-127 (1964), (Rice VI) objevuje synthetické postupy k rúz ným symetrickým a asymetrickým 3,9-diazaspiro/5,5/-undekanům. V Rice VI není žádný objev nebo domněnka že by takové sloučeniny měly nějakou biologickou aktivitu.

Rice et al., U.S. patent č. 3,825 546 uveřejněný 23.července 1974 (Rice VII) nárokuje sloučeninu ma-

ve kterém

12.

R a R jsou stejné nebo různé alkylove skupiny Λ

1-4 atomy uhlíku

X je silikon nebo germanium

A a jsou stejné a oba jsou

II

CH^ nebo C n je Ο nebo 1

Β je CH₃, když n je jedna a B je stejné jako A, když n je nula

R.3 je alky len nebo alkenylen y je 2-6, když R³ je alkylen a 3-4, když R³ je alkenylen

45.

R a R jsou stejné nebo různé nižší alkyly mající 1-4 atomy uhlíku, nižší alkenyly mající 3-4 atomy uhlíku nebo spolu cyklizují k vytvoření heterocyklic ké skupiny vybrané z morfolinové, pvrrolidinové, piperidinové a nižší alkyl (1-4 atomy uhlíku) píperazi nové skupiny, ve které zmíněný nižší alkyl je připojen k terminálnímu atomu dusíku. Rice VII uvádí, že biškvaternární soli takových sloučenin vykazují antihypertensivni účinky a jsou zejména užitečné._ v blokování ganglionické aktivity u psu a jiných zvířat. V Rice VII není žádný objev nebo podnět_rže by takové sloučeniny měly antiarthritická účinky.

Sanwa KK, Evropská patentová přihláška publikační číslo EO, 186 505 A 2, publikovaná 2.července 1986, navrhuje přípravek.tvořený organogermaniovou sloučeninou vyjádřenou vzorcem

R R

I- - I Ge-C-C-COOH l-5n (S) ve-kte-rém-n-j’e“cei'é^—číslo 1 nebo vetší? R je vodík, alky-l-,^COOH-,_-COOR-,—f-eny-1- '----—— ·— /3 33 íd nebo

a R'”je nižší alkylová skupina a vysokomolekulární nosič pro farmaceutická činidla. Sanwa KK popisuje, že takové sloučeniny nemají imunitu akcelerující působení, ale místo toho mají imunitu upravující ►

<

ta.

nebo regulující působení.

Di Martino et al., J.Pharmacol.,Exp.Therapeut., 235 , 103-110. (1986) referují o schopnosti spirogermania indukovat supresorové buňky.

Badger et al., Immunopharmacol., 10, 201-207(1935) referují o generaci supresorových buněk u normálních potkanů ovlivněných spirogermaniem.

Australská národní universita, PCT Patentová přihláška publikační číslo W0 85/05031, publikovaná 21.listopadu 1985, nárokuje metodu modulace nebo suprese imunitní odpovědi zvířat, kterou tvoří aplikace účinného množství nejméně jednoho am^J-filu, který je schopný interakcí na povrchu buňky modifikovat její povrchové vlastnosti, takže inhibuje nebo modifikuje rekognici antigenu ovlivněnými buňkami. Výhodně am^Lifile je kationický surfaktant, takový jako dvojitě zřetězený kvarternární amoniový surfaktant.

Gerschichterův fond·, Britská patentová přihláška číslo 929 739 publikovaná 26.června 1967 popisuje azaspiranové sloučeniny vzorce

-i i

c N-R¹—N—R¹ (CH^-Cřh ve kterém A- je mono nebo bi cyklický uhlíkový kruh nejméně z 5 atomů uhlíku, Z je vybrán z jednoho nebo více vodíků, alkylů a alkoxyskupin, n je 0 nebo 1, R^ je alkylenový řetězec ze 2 nebo 6 atomů uhlíku nebo alkylenový řetězec, ze 2 až 6 uhlíkových atomů substituovaných hydroxylovou skupinou na atomu uhlíku _ 2 alespoň v poloze beta nebo dusíkem, a R je dialkyl, jehož každá alkylová sk-up.ina_má—1-a-ž—6—atomů—uh-bí-kut nebo alkylenový řetězec tvořící spolu s atomem dusíku, ke kteremu je připojen, morfolinovv, nioeridinový,. pyrrolidinový nebo piperazinový kruh, nebo alkylsubstituovaný derivát, kteréhokoliv z nich, obsahující od 1 do 6 atomů uhlíku v substituentové skupině a jejich netoxické addiční soli s kyselinami. Gerschichtsrův patent rovněž specificky pooisuje

N-(3-dimethylaminopropyl)-9-teřc-butyl-3-azaspiro-(5,5)undekan.

Gerschchterúv patent rovněž popisuje, že takové sloučeniny jsou užitečné pro svoje farmakologické účinky na nervový a kardiovaskulární systém.

Podstata vynálezu:

Tento vynález se vztahuje na sloučeninu vzorce:

R,

Rz (CHi) - N (CHi?

'v.

ve kterém:

n je 3-7;

m je, l· nebo 2;... :..... ....... · . .

a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo Alkylu s přímým řetězcem, větveným řetězcem nebo cyklického alkylu, za předpokladu, že celkový p^et atomů uhlíku obsažených v R a R₂ , když jsou počítány společně, je 4-10; nebo R a R₂jsou spolu spojeny k vytvoření cyklické alkylové s-k-up-i-ny-obsahuj-í-cí—3--7^-atomů—uhTíku?------“

R^ a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vo díku nebo alkylu s přímým řetězcem obsahujícím 1t3 atomy uhlíku; nebo R^ a R^ jsou spolu spojeny k vytvoření cyklické alkylové skupiny obsahující

4-7 atomů uhlíku; za předpokladu, že když R₇ a R£ jsou R^ a Rj j.sou CH^ a-bje 1 nebo 2, n je jiné než 3 a dále za předpokladu, že když R₂ 3® ^H’ R₁ je (CHgJ^C; R^ ^a ^4 jsou CH^ a m je 2, n je ji né'než 3; nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl hydrát nebo solvát.

Tento vynále ce:

X ^í·. Ca) z se rovněž vztahuje na sloučeninu vzor

Rj /

X \

R4

2;

ve kterém·: n je 3-7; m je 1 nebo R|, R₂' ^5 ^a ^6 jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo methylu;

R^ a jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo z alkylu s přímým řetězcem obsahujícím .1=3—atomy—uhlík-u-·;—nebo-Ry-ar-R^—j-sou^-spolu sptrje^

-9 ny k vytvoření cyklické alkylové skupiny obsahující 4-7 atomů uhlíku, nebo její farmaceuticky přijatelná, sůl, hydrát nebo solvát.

i

Tento vynález se vztahuje na farmaceutické prostřed- j ky obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a účinné množství sloučeniny vzorce:

R) (CHi) tu ve kterém:

n je 3-7; m ' je 1 nebo 2;

R^ a jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým řetězcem, větveným řetězcem nebo cyklického alkylu, za předpokladu, že celkový počet atomů uhlíku obsažených v a R2, jsou-li počítány společně,· je 4-10; nebo R^ a R2 jsou spolu spojeny k vytvoření cyklické alkylové skupiny obsahující 3-7 atomů uhlíku; i, _Ro a R^_jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vo-____{_}___4 díku nebo alkylu s přímým řetězcem obsahujícím .1-3 atomy uhlíku; nebo R^ a R^ jsou spolu spojeny k vytvoření cyklické alkyiové skupiny obsahující 4-7 atomů uhlíku; nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, hydrát nebo solvát.

Tento vynález se vztahuje na farmaceutické prostředky obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a účinné množství sloučeniny vzorce (XI).

Vynález se rovněž vztahuje na způsob léčení zvířat, které potřebují imunomodulaci, která/pozůstává v ap' likaci takovým zvířatům účinného množství sloučeniny { vzorce (I) nebo vzorce (II) nebo její farmaceuticky přijatelné soli, hydrátu nebo solvátu.

Odborníkům bude zřejmé, že všechny sloučeniny vzorce (IA) jsou zahrnuty v rozsahu vzorce (I).

Výhodné sloučeniny vzorce (I) a vzorce (II) jsou uvedeny v níže popsané tabulce 1, zejména výhodná je sloučenina //02 z tabulky 1.

Odborníkům jsou dobře známé farmaceuticky přijatelné soli a jejich výroba. Výhodné farmaceuticky přijatelné soli sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) zahrnují, ale neomezují se na hydrochloridy, dihydrochloridy, citráty, maleáty, laktáty, hydrobromidy a sírany. Zejména výhodná je dihydrochloridová sůl.

Sloučeniny vzorce (I) a (II) mohou tvořit hydráty nebo solváty. Odborníkům je známo, že nabité sloučeniny tvoří hydrátové druhy, když jsou lyofilizovány vodou nebo tvoří solvátové druhy, když jsou koncetro· vány v roztoku s vhodným organickým rozpouštědlem.

R i

Sloučeniny vzorce (I) a vzorce (II) se mohou vyro• bit způsoby popsanými v níže uvedených příkladech.

Všechny sloučeniny vzorce (I) a vzorce (II) jsou užitečné pro léčení .zvířat včetně lidí,· kteří potřebují imunomodulaci. Taková imunomodulační účinnost se zjišČuje s použitím zkoušky adjuvantně vyvolané arthriticky u potkanů, výsledky jsou shrnu-lity v tabulce I, a/nebo zkoušce supresorové buněčné aktivity, jejíž výsledky jsou shrnuty v tabulce II·.

TABULKA 1

Účinnost sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) ve zkoušce adjuvantně vyvolané arthri-tidy

R«

	» fa).	ro	Π	R\|	Ri	R)	fU	(b)	(C)
	01	1	3	CHjCHi	ch₃ch₂	ch₃	CHj	0.57	30
	02	1	3	CHjCH₂CH₂	ch₃ch₂ch₂	CHj	CHj	1.35	30
	03	1	3	CHjfCHíhCHi	CHj(CHj)₂CH₂	CHj	CHj	0.3S	30
	04	1	3	CHj(CH2)₃CHj	CHj(CH₂)jCH₂	CHj	CHj	0.4 \|	30
	OJ	1	3	(CHjhCHCH₂	(CH₃hCHCH₂	ch₃	CHj	0.97	30
	.06	2	3	CHjCH₂CH₂	CHjCH₂CH₂	CHj.	CHj	0.90	30
	07	1	3	CHjCH₂CH₂	CHjCH₂CH₂	H	H	1.52	30
	OS	1	3	'CHjCH₂CH₂	ch₃ch₂ch₂	CHj_r .	H	1.02
	09	1	3	CHjCHi(CHj)CH	CHj	CHj	CHj	1.27	30
	10	1	3	CHj	CH₃CH₂<CHj)CH ,	CHj	CHj	2.84	60
	11	1	3	CHjCHi	CHj(CH₂)₂CH₂	CHj	CHj	l.U	U
	12	l	, 3	CH^CHOiCHi	CHjCH₂	CHj	.CHj	4.00	.30
	13	1	3	H	CHj(CHi)₃CHí	ch₃	CHj	0.78	30
-		i	3	H ' ’' ·	cvclohejcvl ‘	...CH₃ /	ch₃ .	’ .019.8.	.130 ...
	1J		3	H	(CHj)jC	ch₃	CHj	0.31	30
	,6	1	3	(CH₃)₃C	H	ch₃	CHj	0.90	30
	17	1	3	—CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂—	CHj	CHj	1.70	60
	13	1	3	CHjCH₂CH₂	ch₃ch₂ch₂	CHjCH₂	CHjCH₂	1.42	30
	19	1	3	CHjCHiCH:	CH₃CHíCH₂	—CH₂(CHj)jCH₂—	1.39	30
	20	I	4	CHjCHjCHi	CH₃CHjCH₂	CHj	ch₃	0.4J	30
	21	l	S	CHjCH₂CH₂	ch₃ch₂ch₂	CHj	CHj	0.S1	30
	22	l	6	CHjCH₂CH₂	ch₃ch₃ch₂	CHj	ch₃	1.2S	30
	23	1	7	CHjCH₂CH₂	ch₃ch₂ch₂	CHj	CH]	1.57	30
	24	1	3	Spiroadamintan		CHj	CHj	0.76	30
	25		3	Adanunun		CHj	CHj	0.33	30
	26	1	3	BicvClo(3.3. l)nonan-9-on.	CHi	CHi	0.92 .	.30„
	27		3	CHjCH₂CH₂	CHjCHjCHí	-CHKCHíhCHí-	1.03	30
	23	1	6	ch₃ch₂ch₂	CHjCH₂CH₂	-CHjCH₂)₂CH₂-	.63	30
	29		6	ch₃ch₂ch₂	ch₃ch₂ch₂	—CHKCH^jCHj—	n,t.
	30	1	3	ch₃ch₂	CHjCH₂	—CH₂{CH₂)íCH₂—	n.t.
	31	1	3	ch₃ch₂	CHjCH₂	—CHj(CH₂)]CHj—	n.l,
	32	1	3	chjCH₂	ch₃ch₂	CHjCHi	CHjCHj

n.t. = netestováno (a) ir číslo sloučeniny. Čísla sloučenin 01 až 23 a 27 až 32 patří číslům sloučenin vzorce (I) (b) AA Potkani % inhibice pravé packy (den 16) g relativně k spirogermaniu. (d,e) i (c) dávka (mg/kg) (d) vypracování/modifikace testu

Adjuvantní arthritida se vyvolá jednotlivou intradermální injekcí 0,75 mg M. butyricum suspendovaném v bílém parafinovém oleji (lehký N.F.) do levé zadní šlapky. Injikovaná packa se zanítí (její objem vzroste) a dosáhne maximální velikosti v průběhu

3-5 dnů (primární lese). Zvířata vykazují pokles v nárůstu tělesné hmotnosti v průběhu tohoto počátečního období. Adjuvantní arthritida (sekundární lese) . ’ se objeví po zpoždění přibližně 10 dnů a je vyznačena zánětem neinjikované strany (pravá zadní packa), snížením tělesné hmotnosti a dalším vzrůstem objemu injikované zadní packy. Testované sloučeniny se aplikuji denně, počínaje dnem injekce adjuvans bud po · dr..-t vyjma 4., 5., 11. a 12. dne pro 11 následných dnů nebo pro 17, následných dnů. Očinek farmak na primární (levá packa - den 3) a sekundární (pravá zadní packa - den 16) lese .je určena srovnáním obje- I mu pacek léčené skupiny s kontrolní arthritickou (ve- I hikulovou) skupinou. Objemy zadní;pacek se měří pono- I • řením .packy do rtuti vodního reservoáru a zaznamená- ; I ním následného posunutí. I • (e) Definice signifikantní aktivity( )

Sloučenina se považuje za sloučeninu s antiarthritickou účinností, produkuje-li statisticky významný (p 0,05) pokles třiceti procent (30%) nebo více objemů zanícených zadních tlapek a/nebo arthritického skóre léčených skupin při srovnání s arthritickými kon i_roiami. Kladina signifikantního rozdílu mezi léčenými skupinami a kontrolní skupinou je určena Studentovým t testem,. Změny tělesné hmotnosti ode dne 0 jsou rovněž statistiokv srovnávány 't a^tnriticxe kontrolní skuoine. % inhioroe sloučeniny vzorce (I) a. vzorce (II) ve dni 16. se dělí spirogermaniovou aktivitou 16. dne k získání relativního profilu aktivity. Poznámka: V některých z experimentů, sloučenina rr 2 tabulky 1- byla užita jako standard místo spirogermania . sloučenina ++2 je l_r35krát účinnější než SG v AAkrysím modelu.- Proto byly účinnosti všech slouče nin normalizovány na SG násobením tí m .to_f.ak .t o ne m -.·

TABULKA 2

Supresorová buněčná aktivita sloučenin	vzorce (I) a _s
	vzorce (II) ^c
Sloučenina	Supresorová buněč-
číslo	dávka ná	aktivita ^b
1.	30 mg/kg	88
2.	30 mg/kg	172
3.	30 mg/kg	176
4.	7,5 mg/kg	118
5.	30 mg/kg	162
6.	30 mg/kg	158
7.	30 mg/kg	217
8.	15 mg/kg	67
9.	30 mg/kg	132
10.	, 30 mg/kg	112
11.	15 mg/kg	139
12.	15 mg/kg	172
13.	15 mg/kg	96
14.		n. t.
15.		n. t.
16.		n.t.
17.		n. t.
18.	30 mg/kg	201
19.	30 mg/kg	241
20.	30 mg/kg	178
21.	30 mg/kg	177
22.	15 mg/kg	141
23.	30 mg/kg	146
24.	30 mg/kg	84
25.		n. t.
26.	30 mg/kg	7
27.		n. t.
28.		n.t.
29.		n.t.
30.		n.t.
31.		n. t.
32.		n.t.

n.t. = netestováno (a) viz tabulka 1 pro strukturu sloučeniny (b) Supresorová buněčná aktivita se vypočte následujícím způsobem. Diagram percentuelní suprese {závislá proměnná) proti logaritmu (base e) počtu supresorových buněk (nezávisle proměnná) byl generován a plocha pod křivkou representovaná body dat tohoto diagramu byla určena cestou lichoběžníkového pravidla. Lichoběžníkové pravidlo poskytuje plochu pod křivkou způsoby sumace ploch lichoběžníků, jejichž vertikály jsou lokalisovány na přilehlých hodnotách nezávisle proměnné. Všechny údaje jsou normalisovány na spirogermaniuvív (SG) . V některých pokusech sloučenina // 2 z tabulky 1 byla užita jako standard místo spiroger—mania.—Sloučenina——2—j-e—1-,-7-2-krá-t-lepší-než-SG--—-ve zkoušce supresorových buněk. Proto všechny aktivity byly normalizovány na SG násobením tímto faktorem (to je SG = 100, sloučenina // 2 = 172).

(c) . Zkouška užitá k testování sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) na schopnost generace supresorových buněk je stejná s popisovanou Badgerem et al·., Immunopharmacology, 10, 201-207 (1985). Krátce: samci inbredních Lewisových potkanů byli získáni z Charles River Laboratories (Wilmington, MA, OSA). Potkani byli pěsto— váni při podávání vody a běžné krysí potravy a byli.....

užiti ve stáří 6-8 týdnů (160-180 g). V průběhu jakéhokoliv daného pokusu jsou užíváni pouze potkani stej-

-—-ného—s-táí-í-,—kmene-a—pohTáv-í—GončanavaT-iň-A—ÍGon-^A)·'———--byl získán od Pharmacia Fine-iChemi.cal.s_(.P.is.cataway_,.__...

NJ) a rozpuštěn v RPMI-1640 (Flow Laboratories, Rockville, MD), který byl doplněn penicilinem , streptomycinem a L-glutaminem (Grand Island Biological Co.,

Grand Island, NY) a 10% teplem inaktivovaným (56*C 30 min) fetálním telecím šerem. Toto medium je dále referováno jako RPMHO. Pro in vivo působení sloučeniny byly rozpuštěny v 0,5 % tragacanthu a aplikovány orálně jednou denně. Slezinové buňky ze zvířat léčených sloučeninami vzorce (I) a vzorce (II) se stabili16 sovaly v RPMI-10 při 5 x. 10^/ml. Spolu-kultivační pokusy k určení supresorových buněk byly provedeny nejprve přidáním různého počtu údajných supresorových buněk (0,15 až 5 x 10³) do 96 jímkových s kulatým dnem, mikrotitrovacích destiček (Linbro, Flow Labs) v 100 μΐ RPMI-10. Tyto buňky byly pak ozářeny (2000 Rad) v Gamma komůrce 40 s 137 Cs zdrojem.

K těmto kultůrám bylo přidáno 5 x IQ⁵ normálních bu něk a optimální koncentrace Con A (5 ng/rnl) a konečný objem byl upraven na 200 ^il. Buněčné kultůry byly inkubovány 72 hodin při 37 ’C v 5 % CO- atmosféře, impulsově modulovány /5» 0,5 ýuCi ( H)thymidinem (specifické aktivity 1,9· Ci/mmol; Schwarz/Mann, Orangenburg, NY)- po nejméně 16 hodin kultivace. Buňky byly shromážděny na automatickém mnohotnéro sběrači vzorků a s buňkami spojená radioaktivita počítána v Beckmanově kapalinovém scinetilačním počítači. Supresivní aktivita je určena srovnáním cpm spolukulti- vovaných kultur obsahujících neovlivněné buňky s těmi, jež obsahují ovlivněné buňky Studentovým t testem.

Svrchu uvedená tabulka 2 ukazuje působení sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) v generaci supresorových buněk in vivo. generací supresorových buněk je míněno, že sloučenina indukuje supresorovou buněčnou aktivitu, to je, buňka je' schopná potlačení imunní funkce normální buňky v in vitro spolukultivační zkoušce, takové, jako je zkouška Riche a Pierce, J. Exp.Med., 137, 649 (1973). Slezinové buňky z léčených zvířat byly přechovávány při měnících se koncentracích s normálními buňkami: tyto supresorové buňky jsou rovněž schopné inhibice smíšených lymfocytových reakcí, synthesy protilátek a odpovědí hypersensitivity zpožděného typu.

Tento vynález se také vztahuje na farmaceutický prostředek obsahující farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a účinné množství sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II).

Sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) se aplikuje v běžné dávkové formě, připravené kombinováním therapeuticky účinného množství (to je účinné imunomodulační množství) sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) (aktivní složka) se standardními farmaceutickými nosiči nebo ředidly podle běžných postupů. Tyto postupy mohou zahrnovat míšení, granulování a stlačování nebo rozpouštění složek jak je to vhodné pro žádaný přípravek.

Už -i-t6—f-a-rmae eut-i-ck-é-—no s-i-č e-mohou—bý t-na^př íkiadpevné nebo kapalné. Příklady pevných nosičů jsou laktosa, bílá hlinka, sacharosa, mastek, želatina, agar, pektin, akacie,. stearan hořečnatý, kyselina stearová, a podobně. Příklady kapalných nosičů jsou sirup, podzemnicový olej, olivový olej, voda a podobně. Vedle toho nosič nebo ředidlo může zahrnovat zpoždováč. dobře v oboru známý, jako. je glycer^lmonostearát nebo glyceryldistearáV\ neíjo^vosk/ethylcellulosí^y hydroxypropylmethylcellulos^s methymethakrylát^a podobně.

Může se užít široká řada farmacet<ckých forem. Tak je-li použit pevný nosič, preparát se může tabletovat, umístit do tvrdých želatinových kapslí v práškované nebo^-pěletbvaňe^-formě^-nebo tvořit pastilky pro rozpuštění v ústech nebo orální aplikaci. Množství pevného nosiče se bude široce měnit, ale bude se pohybovat od asi 25 mg do 1,0 g. Užije-li se kapalný nosič, preparát bude mít formu sirupu, emulse, měkké želatinové kap s-l-e—s-t e r-i-l-n-í-h o —i-n-j ekč n-ího-r or t oku-nebo ~suspe n se---v ampuli nebo lahvičce, nebo nevodné kapalné suspensí.

K získání stabilní vo vodě rozpustné dávkové formy, farmaceuticky přijatelná sůl sloučeniny vzorce (I) ne18 bo vzorce (II) se rozpustí ve vodním roztoku organické nebo anorganické kyseliny, takovém jako 0,3M roztoku ky$'í(ďiny jantarové nebo výhodně citrónové.

Jestliže nerj,dostupná rozpustná solná forma, sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) se rozpustí vé , . vhodném spolurozpouštědle nebo jejich kombinaci.

Příklady takových vhodných spolurozpouštědel zahrnují, ale neomezují se na alkohol, propylenglykol, polyethylenglykol 300, polysorbát 80, glycerin a podobně v koncentracích v rozsahu od 0-60% celkového objemu. Výhodně každá parenterální dávková jednotka bude obsahovat aktivní složku v množství od 0,1 mg do asi 500 mg. Výhodně každá orální dávková jednotka bude obsahovat aktivní složku v množství od. asi 1 mg .v do asi 1000 mg;

i¹' ‘ ·Λ«

Sloučeniny vzorce (i) a vzorce (II) jsou všechny aktiv- . ·¥ ní jako imunomodulační činidla u zvířat včetně lidí, potřebujících takovou imunomodulaci, když jsou takové ...n sloučeniny aplikovány těmto zvířatům podle způsobu to- . hoto vynálezu. Pojmem imunomodulační činidlo je s?

míněno, že každá ze sloučenin vzorce (I) nebo vzorce (II) je schopná vyvolání imunitní suprése cestou indukce aktivity surpesorových buněk (jak je dokázáno jejich aktivitou ve zkoušce supresorových buněk popsané v tabulce 2) a/nebo cestou vyvolání statisticky signifikantního poklesu v zánětu imunitním systémem i

mediované odpovědi sekundární lese ve zkoušce adjuvantně vyvolané arthritidy (viz tabulka 1). Indikace pro therapii užívající imunomodulační činidlo zahrnují, ale nejsou omezeny na léčení, následujících chorobných stavů:

rheumatoidní arthritida systémový lupus erythematosis roztroušená sklerosa _______________________akutní, .rej ekce—transplantační ch - štěpům------------------------- myasthenia gravis progresivní systémová sklerosa mnohotný myelom atopické dermatitis hepatitis B - antigen negativní chronická aktivní hepatitis

Hashimotova thyroiditis

Familialní středozemní horečka

Gravesova choroba primární biliární cirkosa zánětlivé střevní onemocnění

Tento vynález se rovněž vztahuje na-užití sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II)· v léčení zvířat potřebujících imunomodulaci, včetně lidí a ostatních savců·, které^-tvoří aplikování^-takovým zvířatům^-účinného množství sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, hydrátu nebo solvátu. Pojmem léčení je míněno profylaktické nebo therapeutické použití. Sloučenina vzorce (I) nebo (II) s.e aplikuje zvířatům, která potřebují imunomodulační léčení v dostatečném množství vyvolat imunomodulaci v therapeutickém nebo profylaktickém stupni. Taková sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) .se může takovým zvířatům aplikovat v běžné dávkové formě, připravené smísením sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (ÍI) s běžným farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředidlem, podle známých technik. Odborníkům bude yásne~že~-forma a vlastnosti farmaceuticky přijatelného-nos ič e^-nebo^-ř eďidla^-ýe^_u r č o ván'a“mn'o'ž'st v£m^-akti'v= ní složky, se kterým má být kombinován, aplikační cestou a-dalších dobře známých proměnných.

Aplikační cesta sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) .může_bý-t-orální.,—parenterální-,—inhalační-nebo -mí-st-ní-.— Pojem parenterální, jak je zde použit, zahrnuje intravenosní, intramuskulární, subkutanní, rektální , vaginální nebo intraperitoneální aplikaci. Obecně se dává při parenterální aplikaci přednost podání subkutannímu a intramxcůj.kulárnímu. Denní parenterální dávkový režim bude výhodně od asi 0,1 mg do asi

1000 mg na den. Denní orální dávkový režim bude vý- | hodně od asi 1 mg do asi 2 000 mg. ·

Sloučeniny vzorce (I) a vzorce (II) se také mohou aplikovat lokálně.

Množství sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) (v dalším referované jako aktivnísložka ) vyžadované pro terapeutický účinek v lokální aplikaci, se bude ovšem měnit s vybranou sloučeninou, povahou a závažností podmínek zánětu a zvířat podrobujících se léčení a konečné rozhodnutí je na lékaři, vhodná imunomódulační dávka sloučeniny vzorce (I) nebo , ·,· vzorce (II) je od 1,5 pg do 500 mg base na kg tělesné hmotnosti pro lokální aplikaci, nejvýhodnější dávkování je 1 ^jg až 50 mg/kg tělesné hmotnosti ¹ I zvířete na příklad 5 ^ug až 25 mg/kg aplikované dva až třikrát denně.. Pro aplikaci na kůži od 1 ýig ..· do několika miligramů' aktivní složky se může podávat na aplikaci, výhodně od. 10 ^ig do. 100 jig na aplikaci.

Lokálním podáním je míněno nesystémové podání a zahrnuje aplikaci sloučeniny vzorce (I) a vzorce (II) zevně na epidermis, do ústní dutiny á instalaci ¹ takové sloučeniny do ucha, oka a nosu a tam, kde sloučenina se významně nedostává do krevního oběhu.

Systémovou aplikací je míněno orální, intravenosní, intraperitoneální a intramuskulární podání.

Kdykoli je možné aktivní složku aplikovat samostatně, jako surovou chemikálii, je výhodné podávat ji jako farmaceutický přípravek. Aktivní složka může tvořit pro lokální aplikaci od 0,001 % do 10 % (hmotnostních) , např. do 1 % do 2 % (hmotnostních) přípravku, ačkoliv může tvořit až 10 % (hmotnostních), ale výhodně nepřekračuje 5 % (hmotnostních) a mnohem výhodněji od 0,1 % do 1 % (hmotnostních) přípravku. ’

Lokální přípravky podle vynálezu jak pro veterinární, m tak humánní lékařské užiti, tvoří aktivní složka spolu s jedním nebo více přijatelnými nosiči a případně jakoukoli další therapeutickou složkou (event. složkami) . Nosiči musí být přijatelní’¹ v tom smyslu, Že jsou kompatibilní s dalšími složkami přípravku a nejsou škodlivé pro příjemce přípravku.

Přípravky vhodné pro lokální aplikaci zahrnují tekuté nebo polotekuté preparáty vhodné k penetraci kůží. na místo potřebující léčení jako jsou : linimenta, omývací vody, krémy, masti nebo pasty a kapky vhodné k aplikaci do očí, uší nebo nosu.

Kapky podle vynálezu mohou, tvořit sterilní vodné nebo olejové roztoky nebo suspense' a mohou se připravit, rozpuštěním aktivní složky ve vhodném vodném roztoku baktericidního a/nebo fungicidního činidla a/nebo jakéhokoliv vhodného konservačního prostředku a výhodně včetně povrchově aktivního činidla. Výsledký roztok se pak může vyčeřit filtrací, přenést do vhodné nádoby, ve které je uzavřen a sterilisován autoklavováním

--------------~nebo”udržování-m-při-*4O—-—10 0—^? é - půl hodiny v Alternativ- —----------..-ně-se-roz-tok-můž.e-s-teriliso-v-a.t-fil-trac.í-a-asep-ticko.u---L_ technikou přenést do nádobky. Příklady baktericidních a fungicidních činidel vhodných pro zahrnutí do kapek jsou nitrát nebo acetát fenyl rtutnatý (0,002 %), bencalkonium chlorid (0,01 %) a chlorhexidinacetát _____(0,01 %) . Vhodná rozpouštědla pro oe 1 jové_ roztoky_za_g_______ hrnu jí glycero-ý, zředěný alkohol a propylenglykol.

Omývací vody podle vynálezu zahrnují přípravky vhodné k aplikaci na kůži nebo na oči. Oční omývací vody mohou obsahovat sterilní vodní roztok popřípadě obsahující baktericidní látku a mohou se připravit způsoby podobnými jako u přípravy kapek. Omývací vody nebo linimenta k aplikaci na kůži mohou také zahrnovat činidla urychlující vysoušení a chladící kůži, jako jsou alkohol nebo aceton, a/nebo zvlhčovadla jako je glycerol nebo ricinový nebo arašídový olej.

Krémy, masti a pasta podle vynálezu jsou polopevné přípravky aktivní složky k zevnímu použití. Mohou se připravit smíšením aktivní složky v jemně rozdělené nebo práškované formě. Samotné, nebo v roztoku nebo suspensi ve vodné nebo nevodné kapalině, s pomocí vhodné aparatury s mastným nebo nemastným základem. Základ může obsahovat uhlovodíky jako je tvrdý, měkký nebo tekutý parafin, glycerol, včelí vosk.,, kovové mýdlo, mucilago, olej přírodního původu jako je mandlový, kukuřičný, arašídový, ricinový nebo olivový olej, tuk., z vlny nebo jeho deriváty, nebo mastné kyseliny, takové, jako stearová nebo olejová spolu s alkoholem jako je propylenglykol nebo makrogoly. Přípravek může také zahrnovat jakékoliv vhodné povrchově aktivní agens takové jako anionické, kationické nebo nejonické povrchové činidlo takové jako sorbitanové estery nebo jejich polyoxyethylenové deriváty. Mohou být rovněž zahrnuty suspendující činidla taková jako přirozené gumy, celulosové deriváty-nebo anorganické- materiály jako oxidy křemíku a další složky takové jako lanolin.

Odborníkům je zřejmé, že optimální kvantita a dělení individuelního dávkování sloučeniny vzorce (I) nebo vzorzce (II) bude záviset na povazue a rozsahu podmínek jež mají být léčeny, formě, cestě a miste aplikace a zejména na zvířeti jež má být léčení/a že taková optima se mohou stanovit běžnými technikami. Odborníkům bude rovněž zřejmé, že optimální průběh léčení to je počet dávek sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) na den, po definovaný počet dnů, se může stanovit odborníkem s použitím běžného- průběhu testů určujících léčení.

Má se za to, že odborník bez dalšího propracování, s užitím předchozího popisu využije vynález v jeho nejširším rozsahu. Následující příklady jsou proto konstruovány. jako pouze ilustrativní a žádným způsobem neomezující rozsah tohoto vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

1. Přípravkové příklady

PŘIKLAD A - KAPSLOVÝ PŘÍPRAVEK

Farmaceutický přípravek podle vynálezu se připraví ve formě kapsle naplněním dvoudílné tvrdé žélatinové kapsle 50 mg sloučeniny ..vzorce (I) .nebo vzorce {II) v práškové formě, 110 mg laktosy, 32 mg mastku a 8 mg stearanu horečnatého..

PŘIKLAD B - INJEKČNÍ PARENTERÁLNl PŘÍPRAVEK '

Farmaceutický přípravek podle vynálezu ve formě vhodné k aplikaci injekcí se připraví mícháním

1,5 % hmotnostních sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) v 10 % (objemově), propylenglykolu a vodě. Roztok se sterilisuje filtrací.

PŘIKLAD C - MASŤOVÝ PŘÍPRAVEK

Sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) 1,0 g

Bílý měkký parafin”^- ^aď' 100,0 g’

Sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) se dispersuje v malém objemu vehikula a postupně se inkorporuje do celku vehikula, aby vznikl hladký, homogenní produkt. Stlačitelné kovové tu/γ se potom naplní dispersí.

PŘÍKLAD D - LOKÁLNÍ KRÉMOVÝ PŘÍPRAVEK

Sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) 1,0 g Polawax GP 200 20,0 g Bezvodý lanolin 2,0 g Bílý včelí vosk 2,5 g Methylhydroxybenzoát 0,1 g Destilovaná voda ad 100,0 g

Polawax, včelí vosk a lanolin se spolu zahřejí na 60*C. Přidá se roztok methylhydroxybenzoátu a dosáhne se homogenisace s použitím vysokorychlostního míchání. Teplota se pak nechá klesnout na 50’c. Přidá se a pečlivě dispersuje sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II), přípravek se ponechá zchladnout za míchání při nízké rychlosti.

PŘÍKLAD E - LOKÁLNÍ OMÝVACÍ PŘÍPRAVEK

Sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) 1,0 g Sorbitanmonolaurát 0,6 g Polysorbát 20 0,6 g Cetostearylalkohol 1,2 g Glycerin 6,0 g Methylhydroxybenzoát 0,2 g Přečištěná voda B.P. ad 100,0 g

Methylhydroxybenzoát a glycerin se rozpustí v 70 ml 75’C teplé vody. Sorbitanmonolaurát, polysorbát 20 a cetostearylalkohol se společně roztaví při 75'C a přidají se k vodnému roztoku. Výsledná emulse se homogenisuje, ponechá se zchladnout za pokračujícího míchání a přidá se sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II) jako suspense ve zbývající vodě. Celková suspense se míchá dokud se nestane homogenní.

-----PŘlKLAD“F““PŘlPRAVEK'OČNÍCH’KAPEK *

Sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (II)

0,5 g

0,01 g

0,04 g

Methylhydroxybenzoát Propylhydroxybenzoát Přečištěná voda B.P.

ad

100,0 ml (B.P. = British Pharmacopea)

Methyl a propylhydroxybenzoáty se rozpustí v 70 ml 75*C teplé přečištěné vody a roztok se ponechá zchladnout, sloučenina vzorce (I) nebo vzorce (IX) se pak přidá a roztok se sterilisuje filtrací přes membránový filtr (0,22 mikrometrů velikost pórů) a balí se za aseptických podmínek do vhodných sterilních obalů.

PŘIKLAD G - PŘÍPRAVEK PRO INHAIÁCNÍ APLIKACI

Pro aerosolovou nádobku s kapacitou 15-20 ml: Smísí se 10 mg sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) s 0,1-:0,2% lubrikačním činidlem, takovým jako polysorbát 85 nebo -kyseiina^-oieýbvá a směs se ďispersuje v hnací látce, takové jako. je freon, výhodně ve směsi (1,2-dichlortetrafluorethanu) a difluorchlormethanu a naplní se do vhodné aerosolové nádobky upravené bud pro intranasální nebo orální inhalačňí podání .

PŘIKLAD H - PŘÍPRAVEK PRO. INHALAČNÍ APLIKACI

Pro aerosolovou nádobku s kapacitou 15-20 ml: Rozpustí se 10 mg sloučeniny vzorce (I) nebo vzorce (II) v 6-8 ml ethanolu·, přidá-se 0,1-0,2 % lubrikačního' činidla takového jako.je polysorbát 85 nebo kyselina olejová; a dispersuje se v hnacím plynu, .jako je 'freon, výhodně-jve-směs i- -(-1-, 2—dit: hlo rte tra fluor ethanu) ‘a di'f luorchlormethanu a naplní se._do_-vhodné-aerosolové-nádobk-y-upravené bud pro intranasální nebo orální inhalační aplikaci.

II, Synthetické příklady

-V—ná-sieduj-í-ci-ch-příkia-dech^ťěplófá''jěVe stupních Celsia (’C). Elementární analysy a teploty tání sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) připravených podle způsobu následujících synthetických příkladů jsou uvedeny v ta26 bulkách 3 a 4.

Hydrid sodný, trimethylsulfoxoniumjodid, methylvinylketon, ethylkyanoacetát, morfolin, hydrid lithnohlinitý, etherát fluoridu boritého,heptan-4-on, nonan-5-on, undekan-6-on, 4-{1,1-dimethylethyl)cyklohexanon, 4-cyklohexvlcvklohex&non, valeraldehyd, allylbromid, dodekanal, 2.3-dimethylvaleraldehyd, 2-ethyibutyryialdehyd,

2- ethylhexanai, adamantanon, bícyklo(3.3.1)nonan-9-on,

3- dimethylaminopropylamin, 3-diethylaminopropylamin, diisobutylamin, 2,6-dimethylheptan-4-on, cykloheptb„non, anhydrid kyseliny, Triton B a 3-methylaminopropylamin byly za.Aoupeny od Aldrich Chemicals_ (Milwaukee, Wiš, USA). 3-(l piperidin)propylamin byl synthetisován hydridem lithiohlinitým redukcí 1-piperidinpropionitrilu (Aldrich Chemicals; Milwaukee, Wis., USA).

4- dimethylaminobutylamin a 6-dimethylaminohexylamin byly zakoupeny od Pfaltz and Bauer (Waterbury, Conn., USA) . 5-dimethylaminoperitylamin a 7-dimethylaminoheptyl amin byly zakoupeny od Karl Industries (Aurora, Ohio, USA) .

3-aminopropanitril a 3-(1-pyrrolidin)propylamin byly zakoupeny od Alfa Chemicals (Danvers, Mass., USA)

6-(1-piperidin)hexylamin byl připraven.ve dvou stupních alkylácí· 6-bromhexylaminu (Aldrich Chemicals) s piperidinem a potom redukcí hydridem

6-(1-pyrrolidin)hexylamin byl podobně připraven z požadovaných bromonitrilú a pyrrolidinu.

Oddíl 1: Synthesa 4,4-disubstituovaného cyklohexanonu

Schéma 1 zobrazuje generickou synthesu 4,4-disubstituovaných cyklohexanů začínající but z komerčně dostup ného ketonu nebo tk, OČ -disubstituovaného aldehydu.

R2 ((CHibS

NaH. OMSO

Schemítl

Pokračování Schéma 1

Triton 3 methyl vinyl kctor. teitucanq| »I.Ó X* methyl vinyl Itetoni H2SO4 (cet) o

II

Níže uvedené příklady 1-5 p_op.is.u jí—spec-i-ř-i-c-k-y—synthesu

4,4-dipropylcyklohexanonu z heptanu 4-onu, avšak tato metoda byla užita k výrobě následujících cyklohexanů vycházejíc z uvedených komerčně dostupných ketonů keton cyklohexanon

2,6-dimethylheptan-4-on nonan-5-on undekan-6-on cykloheptanon ' 2-adamantanon

4,4 bis(2-methylpropyl4.4- dibutyl4.4- pipenylsp iro(5,6)dočekán-3-on spiro(cyklohexan-1,2'-tricyklo ('3'.3Τί7ΐ^' Ί) děkan-4-on

V následujícíh případech d/at-disubstituované aldehydy byly dostupné a byly synthetisovány 4,4 disubstituované cyklohexanony:

aldehyd cyklohexanon

2-ethylbutyraldehyd

2-ethylhexanal

4,4-diethyl4-butyl-4-ethyl28

2,3-dimethylvaleraldehyd 4-methyl-4-(1 methyIpropyl)Druhá cesta s lepším výtěžkem specificky pro synthesu 2-propylpentanalu je popsána v schématu 2. Postuoy jsou vyloženy v příkladech 5 a 6.

(1) H]O^

Příklad 1: 2-PROPYL-l,2-EPOXYPENTAN

Dimethylsulfoxid (1 1/mol) se pomalu přidá k mechanicky míchané směsi hydridu sodného (1,1 ekvivalentů) a trimethylsulfoxoniumjodidu (1 ekvivalent) pod inertní atmosférou. Vznikne silný vývoj vodíku a po ukončení vývinu plynu, se přidá heptan-4-on (0,4 ekvivalenty) a reakční směs se zahřeje na 75’C po 3-24 hodiny.

Reakční směs _s_e vlije do vody (3-5 objemů) a extrahuje se ethylacetatem. Organický extrakt se suší síranem horečnatým, filtruje se a koncentruje se, čímž poskyt29 ne žádaný produkt (85 % výtěžek), který se užije bez dalšího čištění.

Příklad 2 : 2-PROPYLPENTANAL

K silně míchanému roztoku 2-propyl-l,2-epoxypentanU^> (1 ekvivalent) připraveném jak je popsáno v příkladu 1, v benzenu chlazeném na 0*, se přidá roztok etherátu floridu boritého (0,5 ekvivalentů) v benzenu. Reakční směs se míchá 1 minutu a prudce se zchladí přidáním vody. Po oddělení fásí, organická řáse se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a vodou, suší se síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje se za vzniku bezbarvého oleje. Olej se destiluje, čímž poskytne žádaný produkt jako bezbarvý olej;

-7-5—%-výtěžek—teplo ta^_varu“6 0^63''7 Ό7Γ^-mm) :

Příklad 3 : 4,4 DIPROPYLCYKLOHEX-2-ENON

Způsob 1: K roztoku zásady (Triton B, 0,05 ekvivalentů) v terc-butanolu se současně přidá z oddělených nálevek 2-propylpentanal (1 ekvivalent), připravený jak je popsáno v příkladu 2, a methylvinylketon (1,2 ekvivalentů) v průběhu 1 hodiny tak, že teplota se udržuje pod 15’.

K reakční směsi se potom přidá koncentrovaná kyselina chlorovodíková <0,02 - 0,2 ekvivalentů) a roztok se koncentruje na viskosní olej. Olej se rozpustí v ethylacetátu a dvakrát se promyje 0,5 M. roztokem hydroxidu .s.o.dného.._O.rg.an i cká_ f á se—s e - suší—nad- - s Íránem* hořec n a tým, ~ filtruje se a koncentruje se,._č.imž__vznikne^žádaný—pr-o—dukt po Kugelrohrově destilaci, teploty varu 75-80’/0,05 mm, výtěžek 20-35 %.

Způsob 2: K roztoku 2-propylpentanalu (1 ekvivalent) a methylvinylketonu (1 ekvivalent) v benzenu (400 ml/mol) se-přidá-koňčěňtrovaná^kyseiina sírová (3 ml/mo'l) . Reakční směs se zahřívá pod zpětným chladičem s použitím Dean-Starkova odlučovače. Zahřívání pod zpětným chladičem pokračuje 3-5 hodin a nebylo pozorováno další oddělování vody. Černá reakční směs se chladí na teplotu místnosti a promyje se nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáse se suší se síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje se, b

čímž vznikne tmavohnědý olej.Olej se destiluje podle Kugelrohra, čímž vznikne žádaný produkt jako bezbarvý olej, teploty varu 75-85*/0,075 mm, výtěžek 65-75 %.

Příklad 4 : 4,4-DIPROPYLCyKLOHEXANON . K suspensi 10% palladia na aktivním uhlí (0,1 ekvivalentu ( v ethylacetátu se přidá 4,4-dipropylcyklohex-2-on, připravený jak je popsáno v příkladu 3. Reakční 2 směs se hydrogenuje při 300 N/m vodíku v Parrově hydrogenačním aparátu, při teplotě místnosti , dokud vychytávání vodíku neklesne (0,5 - 5 hodin). Katalysátor se odstraní filtrací přes celit a filtrát se koncentruje, čímž vznikne žádaný produkt jako bezbarvý olej. Produkt se užije bez dalšího čištění. Výtěžek 98%.

Příklad 5 : 2-PROPYLPENT-4-ENAL

Toluen, valeraldehyd (1 ekvivalent) a diisobutylamin (1 ekvivalent) se smísí a zahřívají pod zpětným chladičem s použitím Dean-Starkova odlučovače. Zahřívání pokračovalo dokud voda se nepřestala shromažďovat v odlučovači (byl nasbírán 1 ekvivalent vody). Reakční směs se chladí na teplotu místnosti a toluen se odstrab, ní za sníženého tlaku. K bezbarvému zbytku se přidá acetonitril (500 ml/mol) a potom allylbromid (1,5 ekvivalentu). Reakční směs se zahřívá 16-24 hodin pod zpětným chladičem.

Na reakční směs se působí roztokem pufru (kyselina . _.--------------... octová -(60· ml)/acetát. sodný (3.0 ..g)/ voda . .(.300 ml/mol).____ a zahřívá se 5 hodin pod zpětným chladičem. Černý oranžohnedý roztok se chladí na teplotu místnosti a přidají se ethylacetát (300 ml/mol) a nasycený roztok chloridu sodného (150 ml/mol). Organická fáse se následně promyje 10% vodnou kyselinou chlorovodíkovou, vodou, nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného a nasyceným roztokem chloridu sodného. Organický extrakt se suší nad síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje se, čímž vznikne hnědý olej. Olej se frakcionovaně destiluje, čímž vznikne žádaný produkt, teploty varu 68-73*/30 mm, výtěžek 50%.

Příklad 6 : 2-PROPYLPENTANAL

Parrova hydrogenační baňka se naplní 10% palladiem na aktivním uhlí (0,1 ekvivalentu) a ethylacetátu. Přidá se roztok 2-propylpent~4-enalu, připraveného jako_

VpříKládu 5, v ethylacetátu. Směs se hydrogenuje při 300 N/m^£ vodíku v Parrově hydrogenačním aparátu při teplotě místnosti dokud nepřestane vychytávání vodíku. Katalysátor se odstraní filtrací přes celit. Filtrát se koncentruje, čímž vznikne žádaný produkt jako bezbarvý olej. Produkt se užije bez dalšího čištění.

SEKCE 1A : SYNTHESA 4-SUBSTITUOVANYCH CYKLOHEXANONU.

Synthesa 4-decylcyklohexanonu je popsána v příkladu 7. Podobně ostatní alfa-substituované aldehydy s řetěz- dera-přímým, rozvětveným nebo cyklickým se mohou přeměnit na 4-substituované cyklohexanony.,_ . . ,

Příklad 7 ; SYNTHESA 4-DECYLCYKLP.BEXANONU-·-·--Směs uhličitanu draselného (1 ekvivalent) a morfolinu (3,3 ekvivalentů)· se chladí na -5* pod inertní atmosférou a v průběhu 30 minut se po kapkách přidá dodekanal (1 ekvivalent). Reakční směs se ponechá ohřát na -teplo-tu—m-í-shnosti^-a^-v^_michání se pokračuje po 3-6 hodin Přidání k etheru následované filtrací a koncentrací poskytne surový morfolinový enamin. Zbytek se destiluje a poskytne žádaný produkt, teploty varu 103-108*/ 0,07 mm, výtěžek 74·%·.

Pod inertní atmosférou svrchu uvedený morfolinový enamin (1 ekvivalent) a methylvinylketon (1,05 ekvivalentů) se smísí a míchá se přes noc při teplotě místnosti.

Přidá se roztok pufru (acetát sodný (70 g)/kyselina octová (700 ml)/ethanol (525 ml)/voda (175 ml)/mol) a roztok se zahřívá 4-6 hodin .pod zpětným chladičem. Tekavé složky se odstraní za sníženého tlaku a hustý hnědý olejový zbytek se rozdělí mezi ethylacetát a vodu. Organická fáse se promyje vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného, suší se nad síranem hořečnatým,filtruje a koncentruje se, čímž vznikne světle hnědý viskosní olej. Olej poskytne Kugelrohrovou destilací žádaný produkt jako bezbarvý viskosní olej,, teploty varu 122-135’/0,22 mm; výtěžek 40%.

Svrchu synthetisovaný cyklohexenon se hydrogenuje způsobem podobným postupu popsaném v příkladu 6, čímž vznikne 4-decylcyklohexanon. Produkt se užije bez dalšího čištění.

Sekce 2 : SLOUČENINY VZORCE (I) , VE KTERÝCH m JE 1

4, R,4z R. JSOU JINÉ NEŽ H 3 4

Schéma 3 vykresluje generickou synthesu azaspiranových analogů vzorce (I) , ve kterých m je 1; R^ a R₄ jsou spolu jiné než vodík a m, a R^ mají svrchu definovaný význam, vycházejíc z vhodně substituovaných cyklohexanonů.

- 33 o

Schéma 3

Níže uvedené příklady 8-12 popisují synthesu dihydrochloridu 2- (3-dimethylaminopropyl)-8,8-diethyl-2-azaspiro /4,5/ děkanu z 4,4-diethylcyklohexanonu. Podobným způsobem následující cyklické ketony byly uvedeny do reakce k získání analogických derivátů sloučenin vzorce (I) včetně:

4.4- dipropylcyklohexanon

4.4- dibutylcyklohexynon

4.4- dipentylcyklohexanon

4.4- bis(2-methylpropyl)cyklohexanon

4-ethyl-4 butylcyklohexynon

4-methyl-4-(1-methylpropyl)cyklohexynon

4-cyklohexylcyklohexynon

4-decylcyklohexynon

4-(1,1-dimethylethyl)cyklohexynon

Příklad 11'popisuje reakci anhydridu s dimqthylaminopropylaminem k 2ískání žádaného imidu. Podobným způsobem . anhydrid kyseliny 4,4-dipropylcyklohexan-l-karboxy-l-octové kondensuje s:

4- dimethylaminobutylamin

5- dimethylaminopentylamin

6- dimethylaminohexylamin

7- dimethylaminoheptylamin

3-diethylaminopropylamin

3-(1-piperidin)propylamin

6-(1-piperidin)hexylamin

3-(1-pyrrolidin)propylamin

6-(1-pyrrolidin)hexylamin a následně se redukují jak je popsáno v příkladu 12, čímž poskytnou žádaný produkt po vytvoření hydrochloridu.

Podobným způsobem, jakýkoli anhydrid odvozený z vhodně substituovaného cyklohexanonu, se může uvést do reakce s jakýmkoli svrchu uvedených aminů a následně uvést do reakce jako v příkladu 12, čímž vznikne žádaný azaspiranový analog.

Příklad 8 : ETHYL- X-KYANO- <X - (4,4-DIETHYLCYKLOHEXYLIDEN)ACETÁT

K roztoku 4,4-diethylcyklohexynonu (1 ekvivalent) v toluenu se přidá ethylkyanoacetát (1 ekvivalent), kyselina octová (0,2 ekvivalentů) a octan amonný (0,1 ekvivalentů). Směs se zahřívá pod zpětným chladičem s užitím Dean-Starkova aparátu k shromáždění vody azeotropicky odstraněné z reakce. Po nasbírání 1 ekvivalentu vody se reakční směs chladí a promyje se vodou a nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáse se suší naci síranem hořečnatým, filtruje se a koncetruje se. Zbytek se přečistí destilací s ušitím Kugelrohrova přístroje, čímž vznikne žádaný produkt jako bezbarvý olej, teploty varu 92-98*/0,15nm; výtěžek 80-95%. „

Příklad 9: KYSELINA 4,4-DIETHYLCYKLOHEXAN-l-KARBOXY-l-OCTOVÁ

K roztoku ehtyl- Λ - kyano- - (4,4-diethylcyklohexiliden)acetátu (1 ekvivalent) připraveném jak svrchu popsáno, v ethanolu se přidá roztok kyanidu draselného (1,15, ekvivalentů), ve vodě. Reakční směs se 3-9 hodin zahřívá na 50-85’C a potom se koncentruje do sucha.

Na zbytek-se působí kyselinou.chlorovodíkovou a extrahuje se.ethylacetátem. Smíšené organické extrakty se suší nad síranem hořečnatým, filtrují se a koncentrují se. Zbytek se rozpustí ve směsi kyseliny octové/kyseliny chlorovodíkové/vody ¢/4,5^,/2 1/O;žýinol) a zahřívá se 2-5 dnů pod zpětným chladičem. Tekavé látky se odstraní za sníženého tlaku a pevný zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Organický extrakt se suší síranem hořečnatým, filtruje se a koncentruje se., čímž vznikne žádaná dvojsytná kyselina jako bílá pevná látka. Rekrystalisací z ethylacetátu vznikne krystaričká pevná^-látka, teploty tání 150-152', výtěžek 75-85%.

Příklad 10 : ANHYDRID KYSELINY 4,4-diethylcyklohexan-lKABOXY -l-OCTOVÉ

Kyselina 4,4-diethylcyklohexan-l-karboxy-l-octová (1 ekvivalent) připravená jak je popsáno v příkladu 9 se rozpustí v anhydridu kyseliny octové a zahřívá se pod zpětným chladičem 1-6 hodin. Přebytek anhydridu kyseliny octové se odstraní destilací za sníženého tlaku a zbytek se rekrystalisuje z hexanů, teplota tání 91-93’, výtěžek 90-95%.

Poznámka: V případech, ve kterých substituenty na 4.poloze výchozího cyklohexanonu nejsou identické, geometrické isometrické anhydridy se oddělí chromatografií na Waters 500 preparačním systému s užitím hexan/ethylaceťátových směsí jako eluantu.

Příklad 11: 2-(3-DIMETHYLAMINOPROPYL)-8,8-DIETHYL-2- _ _ ~

AZASPIRO /4 5/ DĚKAN-1,3-DION .......

K roztoku anhydridu kyseliny 4,4-diethylcyklohexan-lkarboxy-l-octové {1 ekvivalent) v toluénu se přidá’

3-dimethylaminopropylamin (1,05 ekvivalentů) a reakční.

=> i:»'

J * ;· i (!» směs se zahřívá pod zpětným chladičem s užitím Dean-Stárková odlučovače. Po shromáždění vody (1 ekvivalent) v lapači se reakční směs chladí na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odstraní, za sníženého tlaku. Zbytek se přímo užije bez dalšího čištění.

Příklad 12: DIHYDROCHLORID 2-(3-ĎIMETHYL-AMINOPROPYL)'

-8,8-DIETHYL-2-AZASPIRO /4,5/-DĚKANU

Ke směsi hybridu lithiohlinitého v ekvivalentním množství v diethyletheru se po kapkách přidá roztok

2-(3-dimethylaminopropyl)-8,8-diethyl-2-azaspiro /4 ,.5/dekan-1,3 dionu (1 ekvivalent), připraveného jak je popsáno v příkladu 11, v diethyletheru. Reakční směs se po dokončení přidání míchá 2-6 hodin. Přebytek hydridu se rychle zchladí dekahydrátem síranu sodného a výsledná směs· se filtruje a filtrát se koncentruje,

- 37 aby poskytl žádaný amin jako bezbarvý olej, výtěžek 90-95% .

Olej se rozpustí v minimálním množství bezvodého ethanolu a přidá se chlazený roztok chlorovodíku v ethbnolu. Po přidání velkého objemu etheru, se vytvoří bílý precipitát, který se isoluje filtrací. Bílá pevná látka se ,£,ekrystalisuje z ethanolu, teplota tání 293-299', (za rozkladu), výtěžek 90%.

Sekce 3 ; SLOUČENINY VZORCE (I) VE KTERÝCH m JE 1

A R_ A R, JSOU VODÍK 3 4

Schéma 4 popisuje generickou synthesu azaspiranových analogů vzorce (I), ve kterých m je 1, R^ a R^ jsou vodík a n, R^ a R^ mají svrchu definovaný význam, z vhodně substituovaných cyklohexanonů.

Schéma 4

h ;

.2HC1

Příklady 13 a 14 popisují synthesu dihydrochloridu 2- (3-aminopropyl)-8,8-dipropyl-2-azaspiro/4,5/dekanu

-z-anh-y-d-r-id-u—k-y-se-l-i-n-y— 4-,-4-d-i-p-ropy-l-cyk-l-ohex-a-n—1—karbox-y·

-1-octové.

Podobným způsobem vhodně substituované cyklohexynony a od nich dříve popsané odvozené anhydridy se mohou uvést do reakce s Λ -aminoalkynitrily (n=4-7) jako v příkladech 13 a 14 k synthetisaci žádaných azaspiranů, ve kterých = R = H

Příklad 13 : '2-(2-KYANOETHYL)-8,8-DIPROPYL-2-AZASPIRO. '· ../4,5/-DEKAN-l,3-DION

K roztoku anhydridu kyseliny 4,4-dipropylcyklohexanu1-karboxy-l-octové ¢1 ekvivalent), připraveného analogicky s 4,4-diethylóvým derivátem připraveným v příkladu 10, se přidá 3-aminopropannitril (1,1 ekvivalentů) a toluen. Reakční směs se zahřívá pod zpětnýmchladičem s použitím Dean-Starkova odlučovače. Po nasbírání vody (1 ekvivalent), se reakční směs chladí na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku. Zbytek se přečistí chromatografii na sloupci (hexan/ethylacetát-2/1), čímž vznikne bílá pevná látka, teploty tání 117-117,5', výtěžek 95%.

Příklad 14 : 2-(3-AMINOPROPYL)-8,8-DIPROPYL-2-A2ASPIRO/4,5/-DEKANDIHYDROCHLORID

Ke směsi hydridu lithfťohlinitého (4 ekvivalenty) v diethyletheru se po kapkách přidá roztok 2-(2-kyanoethyl)-8,8-dipropyl-2-azaspiro/4,5/-dekan-l,3-dionu (1 ekvivalent) připraveného jak popsáno v příkladu 13, v diethyletheru. Po dokončeni přidání se reakční směs míchá 2-4 hodiny. Přebytek hydridu se rychle zchladí s dekahydratem síranu sodného a výsledná směs,se filtruje a filtrát se koncentruje. Výsledná kapalina^- se přečistí preparativní kapalinovou chromatografii (silikagel, 2,5 % hydroxid amonný v methanolu), čímž vznikne žádaný amin jako bezbarvý olej, výtěžek 73%.

- - - Ole-j - se- rozpustí v minimálním-množství- bezvodého......“ ethanolu a přidá se roztok chlorovodíku v ethanolu.

Roztok-se koncentruje, čímž vznikne bílá pevná látka, teploty tání 245-249*,(za rozkladu), výtěžek 95%.

Sekce 4 : SLOUČENINY VZORCE (I) , VE KTERÝCH m JE 1 A R^ JE JÍNĚ NEŽ VODÍK A R^ JE VODÍK

Schéma 5 zobrazuje generickou synthesu azasoiranovýcn analogů vzorce (I), ve kterých m je 1, jeden z R^ a R^ je vodík, zatímco druhý je jiný než vodík a n, R^ a R^ mají svrchu definovaný význam, z vhodně substituovaných cyklohexanonů.

Schéma 5

Rs

Ra

Příklad 15 a 16 popisují synthesu dihydrochloridu (Ů-měthyiaminopropyl)-8,8-dipropyl-2-azaspiro/4,5/de— ......k-anu- -z-anhydridu ^kyseliny ^_474-dÍp'řdpýrčyklohéxan'-Í-karboxy-l-octové.

Podobným způsobem vhodně substituované dříve popsané cyklohexanony a od nich odvozené anhydrihy se mohou uvést do reakce, jak je popsáno v příkladech 15 a 16 ’S í\~al'ky lamino alky laminy (n=4-8) k získání azaspiranových derivátů, ve kterých R₃ = alkyl a Rj = H.

Příklad 15 ; 2-(3-MZTHYLAMINOPRGPYL)-3,3-3IPRGPYL-2-AZASPIRO/4,5/DEKAN-l,3-DION

K roztoku toluenu a anhvdrihu kyseliny 4,4-dipropylcyklohexan-l-karbcxy-l-octcvé {1 ekvivalent)' se přidá 1,05 ekvivalentu aminopropylaminu. Reakční směs se zahřívá pod zpětným chladičem s použitím Dean-Starkova odlučovače. Po shromáždění 1 ekvivalentu vody se pak reakční směs zchladí na teplotu místnosti a odpaří za sníženého tlaku. Odparek se

I užije bez dalšího čištění.

•Příklad 16

2- (3-METHYLAMINOPROPYL) -3,8-DIPROPYL-2-AZASPIRO/ 4,5/DEKANDIEYHROCHLORID

Ke směsi hydridu lithiohlinitého {4 ekvivalenty) v diethyletheru se po kapkách přidá roztok 2-{3-methylaminopropyl) -8,8-dipropyl-2-azaspiro/4,5/dekan-l, 3-dionu (1 ekvivalent) připraveného jak je popsáno v příkladu 15. Při reakci se postupuje jako v příkladu 14. Produkt se čistí chromatografií na sloupci (siláka gel, 0,5% hydroxid amonný v methanólu) , čímž vznikne bezbarvý olej, výtěžek 67%.

Olej se rozpustí v minimálním množství bezvodého ethanolu a přidá se roztok chlorovodíku v ethanolu.

Bílý precipitát vytvořený po zchlazení se isoluje filtrací, teplota tání 258-260*, (za rozkladu), výtěžek 84%.

Sekce 5 : SLOUČENINY VZORCE (I) , VE KTERÝCH m JE 2

Schéma 6 popisuje cestu alky]substituovaných azaspi ro/5,5/undekanových analogu vycházejich z substituovanýchjzyklohexanonú. ---------------------------- ------------------41

Níže uvedené příklady 17-21 popisují výrobu dihydrochloridu (3-dimethyl-amino)propyl-9,9-dipropyl-3-azaspiro /5,5/ undekanu z 4,4-dipropylcyklohexanonu.

Podobným způsobem vhodně substituované dříve popsané cyki-ohexanony^-(viz-sekce^-L~iA^—a^- 2j^—a^-od^-nich^—odvozené' anhydridy jak je popsáno v této sekci, se mohou uvést do reakce s:

(a) dialkylaminoalkylaminy, jak jsou popsány v sekci synthetických příkladů k poskytnutí azaspiranových derivátů, ve kterých R^ = R^ = alkyl.

(b) aminoalkylnitrily, jak jsou popsány v sekci 3 synthetických příkladů k poskytnutí azaspiranových derivátů, ve kterých R^ - R^ = H.

(c) alkylaminoalkylaminy, jak jsou popsány v sekci 4 synthetických příkladů k poskytnutí azaspiranových derivátů, ve kterých R^ = alkyl a R^ = H.

Příklad 17 : 9,9-DIPROPYL-l,5-DIKYANO-3-AZASPIRO/5,5/UNDEKAN-2,4-DION

K roztoku 4,4-dipropylcyklohexanonu (1 ekvivalent)· a ethylkyanoacetátu (2 ekvivalenty) v ethanolu chlazen*. na 0, se přidá nasycený.· alkoholický roztok amoniaku. Reakční směs se zazátkuje a ponechá se reago- vat při 0*p° ůva až sedm dní. Precipitovaná amoniová sůl dikyanoimidu se filtruje, stlačí, prómyje etherem a suší se. Sušená sůl se rozpustí v minimálním množství vařící vody a filtruje se za horka. Horký filtrát 'ío se míchá a okyselí se koncentrovanou kyselinou chrovodíkovou a po chlazení precipitovaný produkt se isoluje filtrací k získání žádaného imidu, výtěžek 33%.

I*

Příklad 18 : KYSELINA 4,4-DIPR0PYLCYKL0HEXAN-1,1-DIOCTOVÁ

9,9-dipropyl-l,5-dikyáno-3-azaspiro /5,5/ undekan-2,4-dion, připravený podle způsobu příkladu 17, se rozpustí v roztoku koncentrované kyseliny chlorovodíkové/kyseliny octové/vody (4/7/1) á roztok se zahřívá pod zpětným chladičem po 2-3 dny. Reakční směs se zchladí na teplotu místnosti a těkavé materiály se odstraní na rotavapu (rotačním odpařovací). Zbytek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Organická fáse se promyje nasyceným. roztokem.chloridu sodného, suší -se nad‘síranem ’ hořečnatým, filtruje se a koncentruje se k poskytnutí

- 43 žádané kyseliny, která se rekrystalisuje z ethylacetátu/hexanu, výtěžek 35-50%.

příklad 19 : ANHYDRID KYSELINY 4,4-DIPROPYLCYKLOHEXAN -1,1-DIOCTOVÉ

Kyselina 4,4-dipropylcyklohexan-l,1-dioctová, připravená jak popsáno v příkladu 18, se rozpustí v anhydridu kyseliny octové a zahřívá se 1-6 hodin pod zpětným chladičem. Přebytek anhydridu kyseliny octové se odstraní destilací 5 a. sníženého tlaku a zbytek se rekrystalisuje z hexanů, teplota tání 91-93*C, výtěžek 90-95%.

Příklad 20 : 3-(3-DIEMTHYLAMINOPROPYL)-9,9-DIPROPYL3-AZASPIRO/5,5/UNDEKAN-2,4-DION

Tento imid se připraví z anhydridu kyseliny.9,9-dipropylhexan -1,1-octové-(1 ekvivalent), připraveného jak popsáno v příkladu 19 a 3-dimethylaminopropylaminu (1 ekvivalent) podobným způsobem, jak je popsáno v příkladu 11. Produkt, kterým je bezbarvý olej, se užije bez dalšího čištění.

Příklad 21 : 3-(3-DIMETHYLAMINOPROPYL)-9,9-DIPROPYL. -3-AZASPIRO/5,5/UNDEKANDIHYDROCHLORID - ...

Amin se připraví redukcí 3-(dimethylamino)propyl-9,9-dipropyl-3-azaspiro/5,5/undekan-2,4-dionu, přípravě-___ným jak popsáno v příkladu 16, hydridem lithnohlinitým, způsobem podobným postupu popsanémv příkladu 12 Surová bílá pevná látka-se precipituje přidáním etheru a rekrystalisuje se z ethanolu, teplota tání 320 (za rozkladu), výtěžek 85-90%.

- .44

Sekce 6 : SYNTHESA POLYCYKLICKÝCH AZASPIRANOVÝCH DERIVÁTŮ VZORCE (II)

2-adamantanon se přemění na 4,4-spirůsubstituovaný cy.klohexanon, jak je popsáno v sekci 1, a potom se přemění na žádaný azaspiranový analog s použitím postupu popsaných v sekci 2 (příklady 8-12) , teplota tání 329-330’.

2-adamantanon se přemění na žádaný azaspiranový derivát s použitím postupů popsaných v sekci 2(příklady

8-12), teplota tání 300-302*.

·>

2-adamantanon se také může uvést do reakce podle popisu v sekci 5 k poskytnutí azaspiranových derivátů ve kterých m =.2.

Podobným způsobem anhydrid z 2-adamantanon synthetisovaný bud podle popisu v sekci 2 nebo sekci 5, se mu že uvést do reakce s: . “ (a) dialkylaminoalkylaminy, jak se popisuje v sekci 2 synthetických příkladů, k poskytnutí azaspirano-... vých derivátů, ve kterých R^ = R^ = alkyl.

(b) aminoalkylnitrily, jak se popisuje v sekci 3 synthetických příkladů, k poskytnutí. derivátů, ve kterých R^ “ R^ = H.

(c) alkylaminoalkylaminy, jak se popisuje v sekci 4 synthetických příkladů, k poskytnutí azaspiranových derivátů, ve kterých R^ = alkyl a R₄ = H.

Bicyklo/3.3.1/nonan-9-on se podobně uvede do rekace jako v sekci 2, čímž vznikne žádaný azaspiranový derivát, teploty tání 303-304’. Tento keton se může modifikovat jako 2-adamantanon k získání podobně substituovaných diaminových derivátů.

3,3-dim.ethylbicyklo/3.3/nonan-9-on a 3,3,7,7-tetramethylbicyklo/3.3.l/nonan-9-on (připravené podle V. Chana/ Ph.D. Dišsěrtáťion, University of Utah (1972)

- 45 se může podobně uvést do reakce, jak je svrchu poosáno pro výchozí systém.

Chanova disertace je veřejně dostupný dokument a je snadno dosažitelný z ϋ-Μ-Σ-Dissertation Information Service, 300 N. Zeeb Road, Ann Arbor,Mich. 48 106, telefon (800)521-0600 nebo (313)761-4700. V Chánově disertaci 3,3,7,7-tetramethylbicyklo/3.3.l/nonan-9-on se synthetisuj® následujícím postupem:

3,3,7,7-tetramethylbicyklo/3.3.l/nonan-9-on (1) se synthetisuje pro stavební studii bicyklo/3.3.1/nonanovýcn systémů. Jak výsledná sloučenina (1), 'tak 3,3-dimethylbicyklo/3.3.l/-nonan-9-on byly nalezeny, že jsou při teplotě místnosti v dvojité lodičkové formě.

Výsledná sloučenina (1) se připraví následující cestou:

CHO =0 )=O

OCOR

I

Isobutylaldehyd se alkyluje s methylvínylketonem cestou svého pyrrolidinovéno enaminu, cyklisuje se v kyselině a pak se hydrogenuje k poskytnuti 4,4-dimethylcyklohexanonu (2) . Keton 2 se alkyluje s akroleinem cestou svého morfoiinového enaminu, pak se hydrolysuje k poskytnutí 2-(2-oxocyklohexyl)propanalu (3) Surový 3 se pak čistí přes svůj diketal, cyklisuje se v 7N kyselině chlorovodíkové a esterifikuje se k poskytnutí 7,7-dimethylbicyklo/3.3 . l/-nonan-9-on-2-ylpivalátu (4). Ketalisace,4 následovaná alkalickou hydrolysou, CrO,-pyridinovou oxidací a alkylací jodmethanem a terc-butoxidem draselným poskytne 3,3,7,7-tetramethyl-9,9-ethylendioxybicyklo/3.3.1/nonan-2-on (5) . Když různé snahy Wolf-Kishnerovy redukce selhaly, se redukuje na alkohol s lithium-amoniakem, pak se mesyluje k poskytnutí 3,3,7,7-tetramethy1-9,9-ethylendioxybicyklo/3.3. l/nonan-2-exo-yl-methansulfoivX'' (6) . Lithium-amoniaková redukce 6 následovaná kyselou hydrolysou, poskytne výslednou sloučeninu (1) .

TABULKA 3

Teploty tání (za rokladu) sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) přípravené podle způsobů synthetických příkladů

teplota tání ( C) ot to

300- 302 299-300 299-301

301- 302 297-29S 243-249 233-240

295- 296

296- 298 239-291 303-304 306-307

TABULKA 3 - pokračování

teplota tání (*C)

13	297-298
14	326-328
lí	325-326
lů	334-335
17	305-307
13	•2Í2-254
19	235-236
20	266-269
21	274-276
22	239-261
23	245-246
24	329-330
23	308-310
26	323-325
27	234-236
'23	287-289
' 29	-293-296
30	271-272
31	275-278
. J2	24^243

Poznámka:

(a)

Viz tabulku1'pro strukturu

TABULKA 4

Elementární analysa sloučenin vzorce (I) a vzorce (II) připravených podle způsobů synthetických příkladů

Moleku- Hmotnost Vypočteno

n	lamí vzorec ^:	pro:	Nalezeno:
C:	H:	N:	CI:	C:	H:	N:	Cl:
ot	CijHnNiCti	353.5	61.17	10.33	7.92	20.06	60.98	10.73	7.64	20.01
02	CwHrtNzCli	331.5	62.97	11. to	7.14	18.59	62.73	10.97	7.32	18.42
03	CuřiuN^Ch	409.5	64.52	11.32	6.34	17.31	64.69	11.34	6.32
O	CmHjoNiCIi	437.6	65.33	11.52	6.40	16.20	66.04	11.42	6.31	16.39
05	Cíl&líNiCli	409.5	64.52	1122	6.34	17.31	64.23	11.32	6.76	17.23
06	CijHjgNiCli	353.4	61.17	10.34	7.93	19.30	61.03	10.90	7.35	19.97
07	CisHxgNiCIj	367.4	6111	10.97	7.62	19.30	62.06	10.99	7.58	19.33
08	CuftuNiCb	395.5	63.73	11.21	7.08	17.93	63.63	11.07	7.03	13.12
09	CiíKíoNiGi	367.4	6111	10.97	7.62	19.30	62,06	10.98	7.61	19.J5
10	C19H40N2G2	367.4	6111	10.97	7.62	19.30	61.99	11.01	7.53	19.36
11	CjoH-uNiCIj	381.5	6197	11.10	7.34	18.59	62.92	11.11	7.30	13.64
12	CmíLiNíCh	331.5	6197	11.10	7J4	13.59	62.38	11.13	7.31	13.65
13	CíbljoNiCk	437.6	65.33	11.52	6.40	16.20	65.39	11.52	6.38	16.17
14	C10H40N2G1	379,5	63.31	10.62	7.38	13.69	63.24	10.64	7.37	18.63
U	CisHjgNiCh	353.4	61.17	10.34	7.93	20.06	61.10	10.77	8.02	20.07
16	C)gH]gNiCli	353.4	61.17	10.34	7.93	20.06	61.16	10.36	7.92	19.94
17	C20H40N2G2	379.5	63.31	10.62	7.38	18.69	63.22	10.67	7.35	18.70
1S	CnfWhCh	409.5	64.52	11.32	6.34	17.31	64.42	11.32	6.32	17.39
19	CufLbkdi	421.5	65.53	11.00	6.65	16.82	65.42	11.03	6.64	16.39
20	CiiHmíůCIi	395.5	63.73	11.21	7.08	17.93	63.64	10.99	6.96
21	C22H44N2CI2	409.5	64.52	11.32	6.34	17.31	64.59'	11.30	6.78	17.30
22	CuHtgNjCk	423.6	65.22	11.42	6.61	16.74	65.05	11.29	6.57
23	CuJíjoNtCti	437.6	65.33	11.52	6.40	16.20	65.91	11.48	6.37	16.19
24	CuíhoNiCli	417.5	66.17	10.14	6.71	1628	66.21	10.16	6.67	16.94
25	CigHuNjCh	349.4	61.33	9.81	8.02	20.29	61.30	9.70	7.35
26	Ci7H2*N2CÍ2	337.4	60.52	10.16	3.30	21.02	60.55	10.12	3.31
27	CuřLxNíCh	407.5	64.34	10.38	6.37	17.40	64.75	10.39	6.87	17.34
23	CuHjoNiCh	449.6	66.79	11.21	6.23	15.77	66.68	11.31	6.30	15.67
29	ClíHnNxCh	463.6	67.36	11.30	6.04	15.29	67.39	11.29	6.03	15.24
30	CioHiořhCh	379.5	63.31	10.62	7.33	18.69	63.24	10.65	7.35	18.65
31	CiiřU2N2a2	393.5	64.10	10.76	7.12	18.02	60.01	10.31	7.10	17.93
32	C2DH42N2CI2	331.5	62.97	11.10	7.34	13.59	62.33	11.11	7.31	13.52

Poznámka:

Sloučeniny 03, 20, 22, 25 a 26 nebyly analysovány na chloridové složení.

Zatímco svrchu uvedené popisy a příklady plně popisují vynález a jeho výhodná uskutečnění, je.třeba. . mít na paměti,že vynález není omezen na určitá popsaná uskutečnění spadající do rozsahu následujících nároků:

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Azaspiranový derivát vzorce (IA).

n je 3-7;

m je 1 nebo 2; , a R₂ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku. nebo alkylu s přímým řetězcem, větveným řetězcem nebo^-cyklického^-alkylu,za“prěapbkTáau“ž'e^—cel- ~ kový počet atomů uhlíku obsažených v R^ a R₂, když jsou brány společně , je 5-10; nebo R^ a R₂ jsou . spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu mající 3-7 atomů uhlíku;

R^ a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým řetězcem majícím 1-3 atomy uhlíku; nebo R^ á R^ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu mající 4-7 atomů uhlíku;

- --nebo -jeho farmaceuticky-přijatelná--sůl nebo hydrát nebo solvát. *
2.Sloučenina“podle nároku 1, vzorce.:- . ... .. .

í í

á
3. Sloučenina podle nároku 1, která je vybrána ze sloučenin vzorce;

s \-t 1- x,·^

H

N H\’ '—S N

Pokračování:

51a
4. Azaspiranové sloučenina vzorce II

V· ve kterém:

n je 3-7? m je 1 nebo 2;

^Rl' R₂, R₅ a Rg jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo methylu;

R3 a R₄ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým řetězcem obsahujícím 1-3 atomy uhlíku; nebo R^ a R^ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu obsahující 4-7 atomů uhlíku nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, hydrát nebo solvát.
5. Sloučenina podle nároku 4, která _je vybrána z:
6. Farmaceutický prostředek vyznačující setím, že obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo a imunomodulačne účinné množství sloučeniny vzorce:

Vzorec (IA) ve kterém:

n je 3-7;

m je 1 nebo 2;

R^ a R2 jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým nebo větveným řetězcem nebo cyklického alkylu, za předpokladu, že celkový počet atomů uhliku obsažených v R^ a R^ - když jsou brány spolu, je 5-10; nebo a R£ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu.mající 3-7 atomů uhlíku;

R3 a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým řetězcem majícím 1-3 atomy uhlíku; nebo R^ a R₄ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu mající 4-7 atomů uhlíku,*

Pokračování:
7. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, vyznačující se tím, že jako účinnou sloučeninu obsahuje:
8. Farmaceutický prostředek podle nároku 6, -vyznačující se tim, že účinná sloučenina je vybrána......z;_

1·.

Η·

r~\ r

ι ,**·’*' /

Ν \

ΐ i

Λ.
9. Farmaceutický prostředek podle nároku 6 vyznačený tím, že je v dávkové formě vhodné pro orální'aplikaci.
10. Farmaceutický prostředek podle nároku 6 vyznačený_ tím, že je v dávkové formě vhodné pro parenterální . aplikaci.
11. Farmaceutický prostředek podle nároku 6 vyznačený tím, že je v dávkové formě vhodné pro inhalační aplikaci .
12. Farmaceutický prostředek podle nároku 6 vyznačený tím, že je v dávkové formě pro lokální aplikaci.,
13. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že je tvořen farmaceuticky přijatelným nosičem nebo ředid. ,.lem a imunomo.dulačně .účinným množstvím, sloučeniny . , vzorce:

nebo ί*;

νΛ*

i.¹?

Λ?!

kde n je číslo 3 až 7, m je 1 nebo 2 ;

&2' ^R5 ^a jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo methylu;

a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým řetězcem obsahujícím 1-3 atomy' uhlíku; nebo a R^ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu obsahující 4-7 atomu uhlíku, nebo její farmaceuticky přijatelná sůl, hydrát nebo solvát.
14. Farmaceutický prostředek podle nároku 13, ve kterém sloučenina je vybrána z:
15. Farmaceutický prostředek podle nároku 13 vyznačující se tím, Že je v dávkové foYmě vhodné pro orální aplikaci.
16. Farmaceutický prostředek podle nároku 13 vyznačující se tím, že je v dávkové formě vhodné pro pa_r.e n t e r.á ln í _ap.l i ka.c.i..__
17. Farmaceutický prostředek podle nároku 13, vyznačující se tím, že je v dávkové formě vhodné pro inhalační aplikaci.
18. Farmaceutický prostředek podle nároku 13 vyznačující se tím, že je v dávkové formě vhodné pro lokální aplikaci.

ΐ
19. Způsob léčení zvířat potřebujících imunomodulaci vyznačující se tím, že je tvořen aplikací takovým

V ·, ^f' zvířatům /Ímunomodulačně účinného množství sloučeniny vzorec:

R:

Jt

Jl· ve /kterém: n je 3-7;, i

m/je 1 nebo 2;

R^ a R2 jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s\přímým nebo větveným řetězcem ’ \ ,hebo cyklického alkylu, za předpokladu, že celkový ./počet atomů uhlíku obsažených v R^ a R2_Zkdyž jsou ; brány společně, je 4-1*0; nebo a R2 ‘jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu obsahující 3-7 atomů uhlíku;

R^ a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku nebo alkylu s přímým řetězcem obsahujícím 1-3 atomy uhlíku; nebo R^ a R^ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu obsahujcí 4-7 atomů \

uhlíku; nebo její farmaceuticky, přijatelná sůl, hyddrát nebo solvát.

, Způsob podle nároku 19 vyznačující se tím, že sloučenina je: \ tím, že slou21. Způsob podle nároku 19 vyznačující cenina je vybrána z:

/ \

N

A

HiiCio

- 63 22. Způsob podle nároku 19 vyznačujícX se tím, že sloučenina je aplikována orálně.
23. Způsob podle nároku 22 vyznačující se tím, že se aplikuje od 1 do 1000 mg sloučeniny za den.
24. Způsob podlé nároku 19 vyznačující se tím, že slouZ cenina je aplikována parentérálně.

f
25. Způsob podle nároku 24 vyznačující se tím, že se aplikuje od 0,1 do 1000 mg sloučeniny za den.

2S. Způsob podle nároku 19 vyznačující se tím, že sloučenina je aplikována inhalací.

Způsob podle nároku·. 26 vyznačující se tím, že se

29.

\ i aplikuje od 10 do 1θ\ mg sloučeniny za den.

Způsob podle nároku 19\yyznačující se tím, že sloučenina je aplikována lokálně.

Způsob podle nároku/28 vyznačující se tím, že se aplikuje sloučenina' v množství od 1,5 mg/kg do 500 mg/kg tělesné hmotnosti za den.

Způsob léčení zvířat potřebujících imunomodulaci vyznačující se tím, že je tvořena aplikací takovým zvířatům imunomodulačně účinného množství sloučeniny vzorce:

Vzorec II

Rj

-64 ve kterém: n je 3-7; m je 1 nebo 2;

ΐ

R^, R₂, R₅ a Rg jsou stejné nebo různé a jsou vybrány f, z vodíku nebo methylu; v

R^ a R^ jsou stejné nebo různé a jsou vybrány z vodíku * nebo alkylu s přímým řetězcem obsahujícího 1-3 atomy uhlíku? nebo

R^ a R^ jsou spolu spojeny a tvoří cyklickou alkylovou skupinu mající 4-7 atomů uhlíku; nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl, hydrát nebo solvát,

31. Způsob podle nároku 30, ve kterém sloučenina je vybrána, z: ^r

32. Způsob podle nároku 30 vyznačující se tím, že slou cenina je aplikována orálně,.

33. Způsob podle nároku 32 vyznačující se tím, že se

-ap-l-i-ku-je-od—1—do—2-000-mg—s-l-oučen-i-n-y—za-den-------34. Způsob podle nároku 30 vyznačující se tím, že sloučenina je aplikována p^renterálně.

35. Způsob podle nároku 34 vyznačující se tím, že se aplikuje od Q-,1 do 1000 mg sloučeniny za den.

Μ¹ l.

I

Η

33.

39.

Způsob podle r^ároku 30 vyznačující se tím, že sloučenina je aplikována inhalačně.

Způsob podle nároku 36 vyznačující se tím, že se aplikuje od 10 do'100 mg sloučeniny za den.

Způsob podle nároku'70 vyznačující se tím, že sloučenina je aolikována \okálně.

* \

Způsob podle nároku 33 vyznačující se tím, že se aplikuje sloučenina v množství od 1,5 mg/kg do 500 mg/kg .tělesné hmotnostl^za den.