DD141827A5 - Verfahren zur herstellung von halogensubstituierten mercaptoacylaminosaeuren - Google Patents

Description

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Anwendungsgebiet der Erfindung

Die Anwendung der vorliegenden Erfindung erfolgt auf dem Gebiet der Arzneimittel zur Verringerung oder Linderung von mit Angiotensin im Zusammenhang stehendem Überdruck.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen

Die.Verbindungen der allgemeinen Formel I lassen sieb, nach verschiedenen Verfahren herstellen. ·

Im allgemeinen werden diese Verbindungen hergestellt, indem man eine Säure der allgemeinen Formel IV ...

I⁴

"; ·· R S (^CH)fi * ^{CH C00H} (IV)

mit einer Aminosäure der allgemeinen Forme1 V

•CM COOR₁

1 1155

nach einem beliebigen Verfahren, .das sich zur Bildung von Amidbindungen eignet, kuppelt. Diesbezüglich wird beispielsweise auf "Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie", Teil I, S. 376 ff. (1974) verwiesen.

Halogenierte Verbindungen der allgemeinen Formel V, die als Ausgangsprodukte verwendet werden, lassen sich nach bekannten Verfahren herstellen; vgl. z.B. Biochemistry, Bd. 4 (1965), S. 2509; Aust. J. Chem., Bd. 20 (1967), S. 1493; J. Amer. Chem. Soc, Bd. 86 (1964), S. 4709; und J. Med. Chem., Bd. 20 (1977), S. 1176,

Ziel der Erfindung

Ziel der Erfindung ist es, neue Arzneistoffe zur Bekämpfung von Bluthochdruck bereitzustellen.

Darlegung des Wesens der Erfindung

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, neue Arzneistoffe ZUj.¹ Verringerung oder Linderung von mit Angiötensin im Zusammenhang stehendem Überdruck bereitzustellen. Da diese Krankheit sehr häufig ist, besteht ein großes Bedürfnis nach weiteren Verfahren zur Herstellung entsprechender Arzneistoffe.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von halogensubstituierten Mercaptoacylaminosäuren der allgemeinen Formel I

R₄ R? H₉C · (CHR.)

R- S -(CH) CH-CO— N CH-COOR₁

η * ^J

in der die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben; R ein Wasserstdffatom, einen niederen Alkancyirest oder einen Rest der allgemeinen Formel

1 1155

R₄ R₃ H₂C (CHR₆

(CH)-CH-CO N CH-COOR₁

m den Wert 1 oder 2 und η den Wert 0 oder 1» R^ ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkylrest, Rp und R'o jeweils ein Wasserstoff atom oder ein Halogenatom, R^ ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluöimethylgruppe oder, wenn η den Wert 1 hat, auch ein

Halogenatom, ' '.'.

R^, ein Wasserstoff atom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluormethylgruppe und

Rg ein Wasserstoff atom^v und _t wenn m den Wert 1 hat_v auch

ein Halogenatom, ·

wo"bei mindestens einer der Reste R2,'R^lov Rt₅ Rj, 'and R^ ein Halogenatom oder die Trifluormethylgruppe bedeutet und nur Ro und R'p gleichzeitig Halogenatome sein können, sowie deren Salze mit Basen,

gekennzeichnet dadurch , daß man entweder a) eine Säure der allgemeinen Formel IV

^R3

(IV)

R—— ti f Γ*ΊΊ \ ., /"ΐττ ,, . ^/ΛίΛΤΤ

art eine Aminosäure der allgemeinen Formel V

?H^R6>m

_HN . _CH COOK,

kuppelt, wobei R ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkänoylrest oder eine anschliessend zu entfernende p-Methoxybenzylschutzgruppe bedeutet und die anderen Reste die vorstehend angegebene Bedeutung haben, wobei man ein Produkt erhält, in dem R ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkanoylrest bedeutet, und das Produkt, in dem R ein Wasserstoff atom bedeutet, durch Behandlung mit Jod zu einem Produkt oxidiert, in dem R einen Rest der allgemeinen Formel

(CH)

bedeutet, oder b) eine Säure der allgemeinen Formel V

H₂C

HN-

COOR₁

mit einer Halogenalkansaure der allgemeinen Formel VI

R-

CH-

COOH

wobei X ein Halogenatom bedeutet und die übrigen Reste die vorstehende Bedeutung haben, unter Bildung einer Verbindung der allgemeinen Formel VII

'155

^R2 3*2

R₃ H₂C (CHR₆)_m (VII)

X (CH)- CH CO-N

COOR

kuppelt und

die erhaltene Verbindung mit einer Thiosäure der allgemeinen Formel VIII .

E₇-CO-SH (VIII)

in der E₁-, einen niederen Alkylrest bedeutet, unter Bildung eines Produkts, in dem E einen niederen Alkanoylrest "bedeutet, umsetzt und-

das erhaltene Produkt der Hydrolyse unter Bildung eines Produkts, in dem E ein Vasserstoffatom bedeutet, unter-. wirft und

das. erhaltene Produkt durch Behandlung mit Jod zu einem Produkt, in dem E den Eest der allgemeinen !Formel

²y<f ²

N *3 H₂C (CHR₆)_m -S (CH)- CH- CO— N * COOR₁

" .

bedeutet, oxidiert,/ oder _:

c) eine Verbindung der allgemeinen Formel XII

.

R. R- H₀C (CHR_C) .4 ,3 2. ι 6 m

I · · (tit")

CH=C CO-N- J -COOR₁ ^Α^·^χ r

L J

in der die einzelnen Reste die vorstehende Bedeutung haben, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel VIII

· · E₇-CO-SH (VIII) "

in der IU einen niederen Alkylrest "bedeutet, umsetzt, das erhaltene Produkt, in der R einen niederen Alkanoylrest bedeutet, auf herkömmliche Weise hydrolysiert und das erhaltene Produkt, in,dem R ein Wasserstoffatom be» deutet, mit Jod unter. Bildung eines Produkts, in dem E einen Rest der allgemeinen Formel

R₄ R₃ H₂C (CHR₆)_m

. Γ Ι Ί

-S-(CH) -CH—CO N "— CH-COOR₁

bedeutet, behandelt.

Besonders bevorzugt sind diejenigen Ausführungsformen des erfindungsgemäßen Verfahrens, die im Erfindungsanspruch, Punkt 2 bis 2Ö im einzelnen angegeben sind.

1 1155

Von den Prolinen (m hat den Wert i) sind zwei Gruppen von Verbindungen innerhalb der allgemeinen Formel I besonders "bevorzugt, und zwar Verbindungen der allgemeinen Formel II

R-S -(CH)

Rr

^R3 Γ

-CH

CO

COOR-,

(H)

in der die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben: R ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkanoylrest oder einen Rest der allgemeinen Formel

-S-

.T⁴

(CH)

X¹

CO — N-

- COOR₁

ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkylrest, und R^ jeweils ein V/asserstoff- oder Fluoratom,

jeweils ein Wasserstoffatom oder die Trifluor-

methylgruppe, wobei einer dieser Reste ein Wasserstoffatom und der andere die Trifluormethylgruppe "bedeutet und η den Vert O oder 1 oder

Verbindungen der allgemeinen Formel III .

R— S (CH)- CH CO-N -J-COOR₁ (ill)

in der die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben: R und R^j die vorstehend für die allgemeine Formel II angegebenen Bedeutungen,

Rg und Rc jeweils ein Wasserstoff- oder Halogenatom, R^ ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder einen niederen Alkylrest, wobei R₅- ein Halogenatom ist, wenn sowohl Rp als auch Br jeweils ein-Wasserstoffatom ist, und R₇ kein Halogenatom, wenn. Ro' oder Rc- ein Halogenatom ist, R. ein Wasserstoffatom und η den Wert O oder 1, sowie Salze der Verbindungen der allgemeinen Formel II und III mit Basen. -.: ·.

Somit bedeutet im Fall der allgemeinen Formel II R^ die Trif luorme thylgruppe, wenn η den Wert O hat und Rp "und R^ ijeweils ein Wasser stoff atom darstellt. Wenn η den Wert 1 hat, bedeutet entweder E, oder R^ die Trifluorme thylgruppe, während der andere Rest ein Wasserstoff atom darstellt. Dies heisst, dass in der Acylseitenkette des Moleküls eine Trifluormethylgruppe vorhanden ist. Sie befindet sich am α-Kohlenstoff atom zur Carbonyl gruppe (R^ = CF,), wenn η den Wert O hat. Sie befindet sich entweder am α-Kohlenstoff atom zur Carbonylgruppe (R₅ = CF₅, R_{4 =} H). oder am ß-Kohlenst off atom zur Carbonylgruppe ( R^ = E, E^ = CF^), wenn η den Wert 1 hat« In diesem Fall ist dann der andere der beiden Reste R₅ und R^ ein Wasserstoffatonu Wenn ent-

— 3 -

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weder R, oder R₇, die Trifluormethylgruppe "bedeutet, sind und Rj- jeweils Wasserstoff- oder Ealogenatome.

Im Fall der allgemeinen Formel III "bedeuten vorzugsweise einer oder beide der Reste R2 und Rc Halogenatome und R, und R^ jeweils Wasserstoffatome oder niedere Alkylreste oder sowohl Ro und Rc ein Wasser stoff atom, R^ ein Halogenatom, vorzugsweise ein Chlor- oder Bromatom und R^ ein Wasserstoffatom. "

Besonders "bevorzugt sind Verbindungen der allgemeinen Formel I, in der R ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkanoylrest, insbesondere ein Wasserstoffatom oder dis Acetylgruppe, R^ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkylrest, insbesondere ein Wasserstoffatom, Rg und Rc jeweils, ein Wasserstoff- oder Halogenatom, insbesondere ein Wasserstoff- oder Fluoratom, R^ und R₂, jeweils ein Wasserstoffatom, die Trifluormethylgruppe oder einen niederen Alkylrest bedeutet, wobei einer der Reste R^ oder R₁, die ü?rif luormethylgruppe und der andere ein Wasserstoffatom darstellt, wenn Rp, Rn und Rg jeweils Wasserstoffatome sind, und η den Wert O oder 1, insbesondere Λ , hat.

Am Pyrrolidinring können 1 oder 2 Halogenatome vorhanden sein» Ein einzelnes Halogenatom kann entweder am Kohlenstoffatom in der 3-Stellung oder am Kohlenstoffatom in der 4—Stellung vorhanden sein. In der 4-Stellung können sich 2 Halogenatome befinden, die vorzugsweise die gleiche Bedeutung haben. An diesem Ring sind Fluoratcme bevorzugt, insbesondere 1 oder 2 Fluoratome am Kohlenstoffatom in der ¹V- Stellung. · ' :

Im Fall von Pipe colinsäuren (m = 2) sind Verbindungen der allgemeinen Formel I bevorzugt, in der R ein Wasserstoff— atom oder einen niederen Alkanoylrest, insbesondere ein

Wasserstoff atom oder die Acetylgruppe, R^ ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest, insbesondere ein Wasserstoff atom, Ro und R'p jeweils ein Wasserstoff— oder Halogenated^ insbesondere ein Wasserstoff.-!.oder Fluoratom, einer der Reste R^ und R^ die Trifluormethylgruppe und der andere ein Wasserstoffatom bedeutet und n-den Wert O.oder 1, insbesondere 1, hat. R2 und R^ können unabhängig voneinander Wasserstoff- oder Halogenatome, insbesondere Fluoratome bedeuten. Wenn R^ oder R^, die Trifluormethylgruppe bedeutet, sind vorzugsweise sowohl R2 als auch R^ Wasserstoffatome.

Die L-Konfiguration für die Proline und Pipecolinsäuren sind besonders bevorzugt«,

Unter dem Ausdruck "niederer Alkylrest" sind durchgehend vorzugsweise geradkettig^ oder verzweigte Kohlenwasserstoffreste von der Methyl- bis zur Heptylgruppe bevorzugt. Beispiele dafür sind' die Methyl-, Ithyl-, Propyl-, Isopropyl-j Butyl-, Isobutyl-, tert.-Butyl-, Pentyl- und Isopentylgruppe. Alkylreste mit 1Ms¹A- Kohlenstoffatomen und insbesondere mit 1 bis 2 Kohlenstoffatomen sind besonders bevorzugt.

Bevorzugte Beispiele für niedere Alkanoylreste sind Acylreste, die sich von niederen Fettsäuren mit 2 bis 7 Kohlenstoffatomen ableiten, beispielsweise die Acetyl-, Propionyl- und Butyrylgruppe. In ähnlicher Weise sind niedere Alkanoylreste mit höchstens 4- Kohlenstoff atomen und insbesondere'die Acetylgruppe besonders bevorzugt.

Als Halogenatome kommen die vier üblichen Halogenatome in Frage, wobei Chlor-, Brom- und Fluoratome und insbesondere Fluoratome bevorzugt sind.

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DieVerbindungen der allgemeinen Formel I lassen sich nach verschiedenen Verfahren herstellen.

Im allgemeinen werden diese Verbindungen hergestellt, indem man eine Säure der allgemeinen Formel IV

R S — (CH)- CH--^COOH (iy>

mit einer Aminosäure der allgemeinen Formel V ..

H₂C (CHR₆)_m . (V)

COOr₁ ; ·

nach einem "beliebigen Verfahren, das sich zur Bildung von Amidbindungen eignet, kuppelt. Diesbezüglich wird beispielsweise auf "Houben-Weyl, Methoden"der organischen Chemie", Teil I, S. 376 ff. (1974) verwiesen«,

Die Säuren der allgemeinen Formel IV, in der η den Wert 1 hat, lassen sich durch Addition einer Thiosäure der allgemeinen Formel R-SH an eine entsprechend substituierte Acrylsäure herstellen. Als zeitweiliger Schutz der Mercaptogruppe in den Verbindungen der allgemeinen Formel IV kann R eine p-Methoxybensylgruppe darstellen. Diese Gruppe wird anschliessend mit Trifluoressigsäure und Quecksilber (Il)-acetat entfernt. Die Säuren der allgemeinen Formel IV, in der η den Wert O hat, lassen sich durch eine Verdrängungsreaktion unter Vervrendung einer Thiosäure der · allgemeinen Formel R-SE' und einer 2-Kalogensäure herstellen.

Gemäss einem Verfahren, das bevorzugt wird, wenn η den Vert 0 hat, wird eine Säure der allgemeinen Formel Y mit einer Kalogenalkansäure der allgemeinen Formel VI

R · R-*

I⁴ I³

X (CH) ^:—CH-COOH (VI)

in der X ein Halogenatom und vorzugsweise ein Chlor- oder Bromatom "bedeutet, gekuppelt, wobei .ein übliches'Verfahren, bei dem die Säure der allgemeinen Formel VI vor der Umsetzung mit der Säure der allgemeinen Formel V unter Bildung eines gemischten Anhydrids, eines symmetrischen Anhydrids, eines Säurechlorids, eines aktiven·Esters oder unter Verwendung von Woodward-Reagens K oder von EEDQ. (N~Äthoxycarbonyl~2-ätho:xy~'1 ,2-dihydrochinolin) oder dergleichen aktiviert wird, angewendet wird.

Als Produkt dieser Umsetzung erhält man eine Verbindung der allgemeinen Formel VII

^R2 \ ' ' ^Rl 2

R, R₀ H₀C -(CHR,-) 4 .3 2, . 6 m

(CH) „ CH -CO N

Diese Verbindung wird sodann einer Verdrängungsreaktion mit dem Anion· einer Thioessigsäure der allgemeinen.Formel VIII

H₇-CO-SH . . (VIII)

in der R^ einen niederen Alkylrest bedeutet unterworfen, wobei man eine Verbindung der allgemeinen Formel IX , :.

1 1 155

^R2

R₄ R-> H₉C (CHR.)m

• I I I (ix)

R₇-CO-S-(CH)-CH-CO-N- L-C00R,

erhält, die durch übliche alkalische Hydrolyse oder Amm.onolyse in eine Verbindung der allgemeinen Formel

^R4 ^R3

4 3 2? _6m

HS (CH)-CK- CO-N

COOR_n

umgewandelt werden kann. Venn' E^ einen Esterrest (d.h. 3L· bedeutet einen niederen Alkylrest; erhalten, wenn ein Ester der als Ausgangsverbindung verwendeten Säure der allgemeinen Formel. V verwendet wird) darstellt, lässt sich diese Estergruppe leicht nach üblichen "Verfahren entfernen. Venn R^ beispielsweise die tert.-Butoxy- oder tert,-Amyloxygruppe bedeutet, ergibt die Behandlung des Esters der allgemeinen Formel IX oder X mit Trifluoressigsäure und Anisol die entsprechende freie Säure» Sofern andere Alkoxyreste vorhanden sind, führt eine alkalische Hydrolyse zu den entsprechenden Säuren. .

Wenn als Ausgangsverbindung eine Säure der allgemeinen Formel V verwendet wird oder wenn das Endprodukt in Form der freien Carbonsäure erhalten wird, lässt sich diese Säure in einen entsprechenden Ester überführen, bei spiels- ·" weise durch Veresterung mit einem Diazoalkan, wie Diazomethan, einem i-Alkyl-3-p-tolyl-triazeny wie 1-n-Butyl-3-p-tolyltriazen, oder einer entsprechenden.Verbindung.

Gemäss einer weiteren Ausführungsform wird ein Ester, vorzugsweise der Methyl- oder tert.-Butylester, der allgemeinen Formel V in einem wasserfreien Medium, wie Dichlormethan, Tetrahydrofuran oder Dioxan mit einer Acylthioalkänsäure der allgemeinen Formel XI

^R4

CO

CH COOH (XI)

in/Gegenwart von Dicyclohexylcarbodiimid, IT, M"'-Carbonylbisimidazol, ÄthoxyacetyleD.,Diphenylphosphorylazid oder einem ähnlichen Kupplungsmittel "bei Temperaturen im Bereich von etwa O "bis etwa 10⁰C "behandelt. Die Estergruppe kann ans'chliessend entfernt werden_? "beispielsweise durch Behandlung mit Trifluoressigsäure und Anisol bei Raumtemperatur«. Dadurch erhält man die freie Säure, mit R^ = H.

Gemäss einer. Ausführungsform, die bevorzugt ist, wenn η den Wert 1 hat, R₁, die Trifluormethylgruppe und R, ein Wasserstoffatom bedeutet, wird eine Thioessigsäure der allgemeinen Formel VIII mit einem Acrylsäurederivat der allgemeinen Formel XII

„^ vCHRJ^ . · ^CH-C- A__J_- "---' Ο=¹'

^R4 ?3 °

anstelle" der Verbindung der allgemeinen Formel VII umgesetzt. Anschliessend verfährt man entsprechend den vorstehenden Ausführungen. Die Verbindungen der allgemeinen Formel XII erhält man aus J-Trifluormethylacrylsäure und einem Ester der allgemeinen Formel V gemäss dem. Verfahren von BeisDiel

- Λ5 -

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Verbindungen der allgemeinen Formel· I, in der R einen Rest der allgemeinen Formel

R R* . 2

-S — (CH) — CH CO — N

"bedeutet, lassen sich, durch direkte Oxidation einer Verbindung der allgemeinen Formel I, in der S ein Wasserstoffatom bedeutet, beispielsweise mit Jod herstellen. Auf diese Weise erhält man die symmetrischen bis-Verbindungen.

Halogenierte Verbindungen der allgemeinen Formel V₅ die als Avisgangsprodukte verwendet werden, lassen sich nach bekannten Verfahren herstellen; vgl. z.B. Biochemistry, M. 4 (1965), S..2509; Aust. J.Chem., Bd. 20 (1967),-S. 1493; J. Amer. Chem. Soc., Bd. 86 (1964), S. 4709; und J. Med. Chem. , Bd. 20 (1977), S..1176.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I haben ein oder mehrere asymmetrische Zentren, wobei das grundlegende asymmetrische Zentrum in der allgemeinen Formel I mit einem Stern gekennzeichnet ist. Demzufolge liegen von diesen Verbindungen stereoisomere Formen oder racemische Gemische vor. Alle diese Verbindungsarten sind Gegenstand j des erfindungsgemäßen Verfahrens. Beim vorstellend erläuterten Verfahren können als Ausgangsprodukte Racemate oder eines der. Enantiomeren verwendet werden. Bei Verwendung eines racemischen Ausgangsprodukts, lassen sich die erhaltenen Stereoisomeren im Endprodukt nach herkömmlichen Verfahren trennen, beispielsweise durch Chromatographie oder fraktionierende Kristallisation. Im allgemeinen wird die in bezug auf das grundlegende asymmetrische Kohlenstoffatom L-isomere Verbindung bevorzugt.

Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen.bilden mit verschiedenen anorganischen und organischen Basen Salze. Diese Salze mit Basen sind ebenfalls Gegenstand des erfindungsgemäßen Verfahrens. Beispiele dafür sind Ammoniumsalze, Alkalimetallsalze, wie Natrium- und Kaliumsalze (diese sind bevorzugt), Erdalkalimetallsalze, wie Calcium- und Magnesiumsalze, Salze mit'Organischen Basen, wie Dicyclohexylämin--, Benza&hin-, N-Methyl-D-glucamin- und Hydrabaminsalze, und Salze mit Aminosäuren, wie Arginin und Lysin. Nicht-toxische, physiologisch verträgliche Salze werden bevorzugt₅ obgleich auch andere Salze wertvolle Eigenschaften aufweisen, beispielsweise bei der Isolation oder Reinigung der Pro-.dukte, .

Die Salze werden auf an sich übliche Weise durch Umsetzung der freien Säure mit mindestens 1 Äquivalent einer entsprechenden Base, die das gewünschte Ion liefert, in einem Lösungsmittel oder in einem Medium, in dem das Salz unlöslich ist, oder in Wasser unter anschliessender Entfernung des Wassers durch Gefriertrocknen hergestellt. Earch Neutralisation des Salzes in einer unlöslichen Säure, beispielsweise einem Kationenaustauscherharz in der Wasserstoff orm, wie Polystyrolsulfonsäure-Harz (z.B. Dowex 50), oder mit einer wässrigen Säure und Extraktion mit einem, organischen Lösungsmittel, wie Essigsäureäthylester oder Dichlormethan, kann die freie Säure erhalten werden, die gegebenenfalls in ein anderes Salz überfuhrt werden kann.

Weitere experimentelle Einzelheiten sind in den Beispielen wiedergegeben. Diese Beispiele dienen als Modell für die Herstellung von anderen erfindungsgemassen Verbindungen.

Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen sind wertvolle hypotensive Wirkstoffe. Sie hemmen die Umwandlung des Decapeptids Angiotensin I in Angiotensin II. Deshalb eignen sich die

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erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen zur Verringe- ,. rung oder Linderung von mit Angiotensin im Zusammenhang stehendem Überdruck.

Durch die„ Wirkung des Enzyms Renin auf Angiotensinogen, einem Pseudoglobulin im Blutplasma, wird Angiotensin I gebildet. Angiotensin I wird durch das Angiotensin Converting Enzyme (ACE) in Angiotensin II umgewandelt. Beim letztgenannten Produkt handelt es sich um eine aktive blutdruckerhöhende Substanz, die als Ursache von verschiedenen Formen von Überdruck bei verschiedenen Säugetieren, wie Ratten und Hunden, angesehen wird. Die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen greifen in die Reaktionsfolge Angiotensin -* (Renin) -> Angiotensin I ·> (ACE) -> Angiotensin II ein, indem sie das. Angiotensin Converting Enzyme hemmen und die Bildung der blutdruckerhöhenden Substanz Angiotensin II vermindern oder verhindern. Auf diese Weise lässt sich durch Verabreichung eines Präparats, das eine oder mehrere Verbindungen der allgemeinen Formel I oder deren physiologisch verträgliche Salze enthält, ein von Angiotensin abhängiger Überdruck bei Säugetieren bessern. Eine einzelne Dosis, die vorzugsweise in 2 bis 4- Tagesdosen unterteilt ist, von etwa 0,1 bis 100 mg/kg/Tag und vorzugsweise etwa 1 bis 50 mg/kg/ Tag bewirkt eine Verringerung des Blutdrucks bei Tierversuchen gemäss S.L. Engel, T.R. Schaeffer, M.H. Waugh und B. Rubin, Proc. Soc. Exp. Biol. Med., Bd, 14-3 0973)- Eas Präparat wird vorzugsweise oral verabfolgt, es kommen jedoch auch parenterale Verabfolgungswege, beispielsweise eine subkutane,' intramuskuläre, intravenöse oder intraperitoneale Verabfolgung in Frage. ' ; . . ·;

Beispielsweise können die Verbindungen

der Formel I zur

oralen Verabfoigung zu Tabletten, Kapseln oder Elixieren und zur parenteralen Verabfolgung zu sterilen Lösungen oder Suspensionen konfektioniert werden. Etwa 10 bis 500 mg einer oder mehrerer Verbindungen der allgemeinen Formel I oder von deren physiologisch verträglichen Salzen werden zusammen mit physiologisch verträglichen Trägerstoffen, Verdünnungsmitteln, Bindemitteln, Konservierungsmitteln, Stabilisatoren, Aroma- und Geschmacksstoffen und dergleichen gemäss üblicher, pharmakologischer Praxis zu Einheitsdosen verarbeitet* Die Menge an Wirkstoffen' in diesen Präparaten wird so gewählt, dass entsprechende Dosen innerhalb der vorstehend angegebenen Bereiche erzielt werden.

Beispiele für Hilfsstoffe, die den Tabletten, Kapseln oder dergleichen einverleibt werden können sind: Bindemittel, wie Tragant, Gummi arabicum, Maisstärke oder Gelatine, Verdünnungsmittel, wie Dicalciumphosphat oder mikrokristalline Cellulose, Sprengmittel, wie Maisstärke, Kartoffelstärke oder Alginsäure, Gleitmittel, wie Magnesiumstearat, Süssmittel, wie Saccharose, Lactose oder Saccharin,und Aromastoff e, wie Pfefferminzaroma, Wintergrünöl oder Kirschöl. Zur Herstellung von Kapseln können zusätzlich zu den vorgenannten Bestandteilen flüssige Trägerstoffe, wie Fettöle, verwendet werdenJFerner können verschiedene andere Bestandteile vorhanden sein, die beispielsweise als Überzüge oder zur "anderen.Modifikation der physikalischen Form der Dosiseinheiten dienen. Beispielsweise können Tabletterimit Schellack und/oder Zucker überzogen werden. Sirups oder Elixiere" können den Wirkstoff, Saccharose als Süsstoff, Hydroxybenzoesäuremethyl- oder Propylester als Konservierungsmittel, Farbstoffe und Aromastoffe, wie Kirsch- oder Orangearomen,enthalten. . .

Sterile Präpara/ne für Injektionszwecke lassen sich nach

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üblicher pharmakologischer Praxis herstellen, indem man den Wirkstoff in einem Trägerstoff, wie Wasser für Injektionszwecke oder einem natürlich auftretenden Pflanzenöl, zum Beispiel Sesamöl, Kokosnussöl, Erdnussöl oder Leinsamenöl, löst oder suspendiert.

Ausführungsbeispiele .

B e i s ρ i e T 1 3-Ac ety1thi o~2~trifluorme thyIpropansäure

Ein Gemisch aus 50 S Thiolessigsäure und 66 g 2-(Trifluormethyl)-acrylsäure (vgl. M.Vo Buxton und Mitarb.,. J. Chem. Soc. (1954), S. 366) werden 1 Stunde auf einem Dampfbad erwärmt und anschliessend 18 Stunden bei Saumtemperatur, stehengelassen. Durch Destillation des Reaktionsgemisches unter vermindertem Druck erhält .man J-Acetylthio^-trif luorme thy lpropansäure«, *

B e i s ρ i e 1 2

^j(j5~Aj^3j^yJ^

butylester

5,1 g L-Prolin-tert.-butylester werden in 4-0 mg Dichlor-. methan gelöst. Die Lösung wird gerührt und in einem Eis-* bad gekühlt. Sodann werden eine Lösung von 6, g Dicyclo— hexylcarbodiimid in 15 ml Dichlormethan und unmittelbar danach eine Lösung von 6,5^: S 3-Acetylthio~2-trifluormethylpropansäure in 5 ^ml Dichlormethan zugesetzt. Nach 15-minütigem" Rühren auf einem Eisbad und 16-stündigem Rühren bei Raumtemperatur wird der gebildete Niederschlag abfiltriert. Das 2?iltrat wird unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft« Der Rückstand wird in Essigsäureäthylester gelöst und mit Wasser bis zur neutralen Reaktion gewaschen. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und sodann unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft«. Man erhält 1-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin-tert.-butylester. * ·

. Beispiel 3 1 - ( 3-Ace tylthio-2--trifluormethylpropanoyl)-L~prolin

8 g 1-(3~Acetylthio-2-trif luorme thylpropanoyl )-L-prolintert.-butylester werden in einem Gemisch aus 55 ml Anisol und 110 ml Trifluoressigsäure gelöst, Fach 1-stündiger Lagerung bei Baumtemperatur wird das Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wird mehrmals aus Äther/Hexan gefällt«.Man erhält 1-(3-Acetylthio~2-trifluormethylpropanoyl)~L-prolin. .

B e i s ρ i e 1 4

1.-C5-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin

4- S 1"(3-Acetylthio-2-trifluörmethylpropanoyl)-L-prolin werden in einem Gemisch aus 8 ml Wasser und 8 ml konzentriertem Ammoniak unter Stickstoff als Inertgas gelöst. Nach 25-minütigem Rühren "bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch gekühlt, angesäuert und mit Essigsäure- . äthylester extrahiert. Die organische Phase wird unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Man erhält 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin.

Beispiel 5

2-Brom-3,3,5-trifluorpropansäure .

88;, g 3,3 3~^TrA£^^uor^^-^ⁿ werden in einem Gemisch aus 250 g Kaliumbromid und 1240 ml 2,5 D- Schwefelsäure gelöst. Die Lösung wird mit einem Eis/Salz-Bad auf 0⁰C gekühlt und in kleinen Mengen innerhalb von 1 Stunde unter heftigem Rühren mit 65,5 g Natriumnitrit versetzt. .Das Reaktionsgemisch wird eine weitere Stunde auf dem Kühlbad gerührt und sodann mit Diäthyläther extrahiert«, Die organische Phase wird mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Man erhält 2~Brom-3,3_i3~t^r:L'Q^uorP^roPansäure.

-SA-

1 1155

Beispiele

2—Brom—3 1 3 1 3-trif luorpropansäurechlorid

Eine Lösung von 5 S 2-Brom-3,3₅3-trifluorpropansäure in 5 ml Thionylchlorid wird 2 Stunden auf dem Dampfbad unter Rückfluss erwärmt. Das überschüssige Thionylchlorid wird unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wird unter vermindertem Druck destilliert. Man erhält 2-Brom-3,3»3-trifluorpropansäurechlöridi '.';

Beispiel 7

1 -C2-Acetylth.io-3 ·> 3 v3-trif luorpropanoyl )-L-prolin

Eine Lösung von 5,75 g L-Prolin in 5P ml 1 η Natriumhydroxidlösung wird unter Kühlung in einem EisAJasser-Bad mit 12 g 2-Brom-3₅3^-"trifluorpropansäurechlorid. versetzt. Das Gemisch, wird bei Raumtemperatur 3 Stunden heftig gerührt. Anschliessend wird eine Lösung von 4- ml Thiolessigsäure und 4,8 g Kaliumcarbonat in 50 ml Wasser zugesetzt« Das Gemisch wird 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt«, Nach Extraktion mit Essigsäureäthylester wird die wässrige Phase mit konzentrierter Salzsäure angesäuert und wieder mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die letztgenannte . organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird an einer mit Kieselgel gepackten Säule unter Verwendung eines Gemisches aus Benzol und Essigsäure (7: 2) chromatographiert. Man erhält 1-(2-Acetylthio-3i3i3-trifluorpropanoyl)-L-prolin. ·

Beispiel 8

1 - ( 2-Mer cap to-3. _ν3, _λ3~tri f luorpr op anoyl_t)-L--pr ο 1 in.

4- g 1~(2-Acetylthio-3,3_?3~trifluorpropanoyl)"L~prolin werden in einem Gemisch aus 8 ml Wasser und 8 ml konzentriertem Ammoniak unter Stickstoff als Schutzgas gelöst. "Nach einer Reaktionszeit von 30 Minuten bei Raumtemperatur

1 1155

wird aas Geraisch..angesäuert und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Phase'wird über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Man erhält 1~(2~Mercapto~33s3~trifluorpropanoyl) L-prolin.

Beispie 19

1,1 ^f-/^rDithio'bis-C2-trifluormethyl-5-propanoyl) 7-Ms-... Ir-prolin

Ί S 1-(3-Mercapto-2~trif luorme thylpropajioyl)-L-prolin werden in Wasser, das mit 1 η Hatriumhydroxidlösung auf den pH-Wert 7 eingestellt ist, gelöst. Sodann wird eine äthanolische Jodlösung zugetropft, wobei der pH-Wert durch sorgfältige Zugabe von 1 η Matriumhydroxidlösung im Bereich zwischen 6 und 7 gehalten wird. Nach Erreichen einer beständigen gelben Färbung wird die Jodzugabe beendet. Sodann wird mit Natriumthiοsulfat entfärbt. An— schliessend wird das Reakt ions gemisch angesäuert und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und ' ·.·."' '. .'·- zur Trockne eingedampft„ Man erhält 1,1 ^/"Mt-M-Obi³" (2~trifluormethyl-3~propanoyl)_7~bis~L-prolin.

Beispiel 10

ITatriumsalz \^ron 1 -(3"Acetylthio-2-trifluormethylpropanpyl^)-

.Eine Suspension von Λ g 1 ~(3~Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-Ir-prolin in 10 ml Wasser wird durch Zugabe, von 1 η XTatriuähydroxidlösung auf den pH-Wert 8 eingestellt«, .Die erhaltene Lösung wird gefriergetrocknet. Man erhält das Natriinnsalz von 1 --(3-Acetylthio-'-2~trifluormethylpropanoyl)«Ir-prolin. · ·

-» - 21 Π 55 .

- Beispiel 11 , ~ .

1-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-4,4-difluor-L-prolin

Eine Lösung von 7 »5 S 4-,4-Difluor-2-prolin in 50 ml 1 η Natriumhydroxidlösung wird auf einem Eis/Wasser-Bad gekühlt und mit 12 g 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid (hergestellt gemäss Beispiel 6 aus 3-Acetyl~ thio-2-trifluormethylpropansäure und Thionylchlorid) versetzt«, Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur heftig gerührt. Hach Ansäuern mit konzentrierter Salzsäure wird das wässrige Gemisch mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Phase wird über Magnesiumsulfat getrocknet und zur Trockne eingedampft. Man erhält. 1-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-4,4-difluor-L-prolin«, .

. B e i s ρ i e 1 12

1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)~4-,4-difluor-L-prolin

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 4 1-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-4-,4-difluor-L~prolin anstelle von 1-(3-Acetylthio-2-trif luorme thy lpropanoyl)-L-prolin so erhält man 1-(3-Mercapto- 2-trifluormethylpropanoyl)-4,4-difluor-L-prolin.

Beispiel 13 .

I^_T1J-/~Dithiobis- (2-1rif luormethyl-3~propaa-oy 1 )^ 7-bis~ .

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 9 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-4,4-difluor-L-prolin anstelle von 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin so erhält man 1 _s1-/~Dithiobis-(2-trif?tUormethyl-3-propanoyl )_7-bis—^ ,4-dif luor~L-prolin,

. Beispiel 14

1-(4Λ·,4-Trifluor-g-butenoyl)-L-prolin

7*0 g (0,1 Mol)= Borsäurealihydrid (hergestellt durch Schmelzen von Borsäure in einem Platinschmelztiegel und Zerkleinern unter Stickstoff) werden in einem 50 ml-Kolben, der mit einer Dean-Stark-Falle ausgerüstet ist, mit 32,2 g (0,173 Mol) lthyl-3-hydroxy-4,4,4-trifluorbutanoat versetzt. Das Gemisch wird mit einem Salzbad auf 180⁰C erhitzt, "bis das gesamte Anhydrid gelöst ist (6 Stunden)» Sodann wird die Temperatur auf 35O°C erhöht, wobei sich 23 ml Destillat in der Falle ansammeln. Das Destillat wird in den Reaktionskolben zurückgegeben und die Erhitzungsstufe wird wiederholt. Dieses Verfahren wird 4 mal wiederholt, um eine komplette Entwässerung des Hydroxyesters zu gewährleisten. Das Destillat wird in Petroläther gelöst, über Phosphorpentoxid ge trocknet, und destilliert* Man erhält 10 g 4,4,4~Trifluor-2~butensäureäthylester vom Ep. 115 bis 120⁰C und 65Ο mg 4,4,4-Trifluor--2-butensäure vom Kp.. 150⁰C und vom F. (nach Umkristallisation aus Pentan) 53 Ms 55°G.

Der Ester wird mit 24 ml 10-prozentiger wässriger Natriumhydroxidlösung vereinigt und 6 Stunden bei 25°C gerührt«. Das Gemisch wird sodann mit Wasser verdünnt und zur Entfernung von unverändertem Material mit "Methylenchlorid · extrahiert«, Die wässrige Phase wird mit konzentrierter Salzsäure auf den pH-Wert 3 eingestellt. Das Gemisch wird 3 mal mit je 50 ml Methylenchlorid extrahiert« Die organischen Phasen werden vereinigt, über Natriumsulfat getrocknet und eingedampft» Bei der Destillation des Eückstands erhält man kristalline 4,4-,4-~Trifluor-2~butensäure vom Kp. 145 bis 153°C, die nach Umkristallisation aus Pentan einen F. vom 5^ "bis 55⁰C aufweist. Die Ausbeute beträgt 4,6 g.

11 155.

Ein.Gemisch aus 4,91 g (35 mMol) 4,4,4-Trifluor-2-butensäure, 4,73 S (35 κΜοΙ) Hydroxybenzotriazol, 6,00 g (35 .mMol) L-Prolin-tert.-butylester und 7,22 g (35 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid in 200 ml Methylenchlorid wird über Nacht bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt. Sodann wird das Gemisch filtriert und das Piltrat 2 mal . mit je 50 ml 5-proζentiger Natriumhydrogensulfatlösung und 2 mal mit je 50 ml gesättigter Natriuinhydrogencarbonatlösung gewaschen* Anschliessend wird über Natriumsulfat getrocknet und : ^:. eingedampft. Das

erhaltene Öl wird in Diäthyläther. gelöst. Die Lösung wird abgekühlt und der gebildete Niederschlag abfiltriert. Das Filtrat.wird eingedampft. Man erhält 8,7 g Feststoff vom P. 95 bis 100⁰C, der bei der Dünnschichtchromatographie an Kieselgel EM unter Verwendung eines 50/50-Gemisch.es von Essigsäureäthylester und Methylenchlorid einen einzigen Flecken vom R_f-Wert 0,85 ergibt.

/ · 4,0 g (13,6 mMol) des vorstehend erhaltenen 1-(4,4,4-Trifluor--2-butenoyl)-L~prolin-tert-butylesters werden mit 60 ml Trifluoressigsäure und 13 .ml Anisol '.· . vermischt .; und 1 Stunde unter Stickstoff gerührt. Der nach dem Abdampfen der Lösungsmittel unter vermindertem Druck erhaltene Rückstand wird in 10 ml Diäthyläther gelöst. Die Lösung wird in 5OO ml Pentan gegossen. Dieses Fällungsverfahren wird wiederholt. Der Rückstand wird 72 Stunden bei 0⁰C stehengelassen, wobei Kristallisation eintritt. Das erhaltene 1-(4,4,4-Trifluor-2-butenoyl)-L-prolin'wird aus Essigsäureäthylester/Hexan umkristallisiert, fran erhält 2,48 g Produkt vom F. 119 bis 120⁰C.

Bei s ρ i e 1 15

I-^O-Merc^

1,5 ml Thiolessigsäure werden unter Argon mit 720 mg (3 mMol) 1~(4,4_i4-Trifluor~2~butenoyl)~L~prolin vereinigt.

Das Gemisch wird über Nacht "bei Raumtemperatur gerührt. Die überschüssige Thiolessigsäure wird unter vermindertem Druck entfernte Das verbleibende i-CJ-Acetylthio—^^,^- trifluorbutanoyl)-L-prolin wird mit wässriger Ammoniaklösung (15 ml konzentriertes Ammoniak + 15 ml Wasser) vermischt und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschliessend wird das Gemisch mit Eis verdünnt und mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Das saure Gemisch wird 3 mal mit je 50 ml Methylenchlorid extrahiert. Die Extrakte werden über Natriumsulfat getrocknet und zu einem Öl eingedampftο Dieses Öl wird durch Lösen in Wasser (2-fach destilliert), Behandeln der Lösung mit Aktivkohle tmd Filtrieren durch ein Millipore-Filter (0,4 m und an~ schliessend 0,08 m) gereinigt. Nach Lyophilisation dieser Lösung erhält man 700 mg 1-(3-Mercapto~4,4_?4-Trifluorbutanoyl)~L-Prolin als farblose s_ Glas. Der R_f-Wert (Benzol-Essigsäure = 7 : ·Ό· beträgt 0,24«

B e i s ρ i e 1 16 3~Acetylthio-4-,4,4-trifluorbutansäurechlorid

Verv/endet man im Verfahren von Beispiel 1 4,4,4-Trifluor-2-butensäure anstelle von 2-Trifluormethylacrylsäure, so erhält man 3-Acetylthio~4,4,4-trifluorbutansäure, die anschliessend gemäss Beispiel 6 mit Thionylchlorid zu 3-Acetylthio-4,4,4-trifluorbutansäurechlorid chloriert wird. ·

B e i s ρ i e 1 I7 ' . 1 -.( 5-Mercap to-4,4,4-trif luorbutanoyl^)

Verv;endet man im Verfahren von Beispiel 11 1-(3-Acetylthio-4,4,4-trifluorbutansäurechlorid anstelle von 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 4_V so erhält man 1-(3-Mercapto~-4_?4,4-trifluorbutanoyl)-4,4-difluor-Xj-prolin.

-»- 21 1155

.Beispiel '18 \

1,1 ^t-/~Dithiobis-(4,4,4-trifluor-3-butanoyl·) 7-bis-L-prolin

Verwendet-man im Verfahren von Beispiel 11 1-(3-Mercapto-4,4,4-trifluorbutanoyl)-L-prolin anstelle von 1-(3-Mercapto-2~trifluormethylpropanoyl)-L-prolin, so erhält man 1,1'-/~Ditaiobis-(4,4,4-trif luor-3-"butanoyl )_7-bis-L-prolin.

B e i s ρ i e 1 19

ei s-4-Fluor-L-pTOlin-hydrobr ojflid

a) N-Carbobenzyloxy^:-4-hydroxy-L-prolin-methylester ·.

12,4 g (0,047 Mol) IJ-Carbobenzyloxy-^-hydroxy-Ii-prolin werden gemäss JACS, Bd. 79 (1957), SV 191 mit Diazomethan in Dioxan/Diäthyläther \rerestert„ Um ein Gefrieren des Dioxans zu vermeiden, beginnt die Zugabe der Diazomethanlösung bei 10°C und wird bei 0 bis 2°C beendet. Die Aus-. beute an nahezu farblosem, viskosem Öl beträgt 14,6 g (100 Prozent d.Th.).

bjMjI-Carb ob e nzy1oxy~4-t ο sy 1 oxy-L-p r öl i n-me thy I ester

Eine Lösung von 14,5 S (0,052 Mol) N-Carbobenzyloxy-4-hydroxy-L-prolin-methylester in 30 ml Pyridin wird bei -5 "bis -8°C tropfenweise unter Rühren mit einer Lösung von 11 g (0,058 Mol) Tosylchlorid in 15 ml Pyridin versetzt. Die blassgelbe Lösung wird 3 Tage in der Kälte stehengelassen und anschliessend mit 300 ml eiskalter 2 η Salzsäure versetzt. Das ausgefällte gummiartige Produkt wird mit 200 ml Chloroform extrahiert, Die wässrige Phase wird 3 mal mit je 100 ml zusätzlichem Chloroform extrahiert. Die organischen Phasen werden vereinigt und über MgSO_z, getrocknet. Nach dem Abdampfen des Lösungsmitteis erhält man ein blassgelbes viskoses Öl. Dieses Öl wird in 100 ml Methanol gelöst. Die Lösung wird zur Fällung eines öligen Produkts mit 400 ml Wasser versetzt. Dieses Produkt kristallisiert allmählich beim Animpfen, Schaben an

- 2g -

der Glaswand und Abkühlen. Man erhält 17,4- g (77 Prozent d.Th.) Produkt vom P. 62 bis 65°C. Nach Umkristallisation aus 85 ml Isopropanol erhält man 15,9 g (70 Prozent d.Th.) N-Carbobenzyloxy^-tosyloxy-L-prolin-methylester als farblosen Feststoff vom F.. 67 bis 69°C. /Ix Τ?⁶ -30° (c = 1; Methanol).

c ) cis-N-Carbobenzyloxy-4-fluor-L-prolin~methylester

Eine Suspension von 19,1 g (0,044 Mol) N-Carbobenzyloxy-4-tosyloxy-L-prolin-methylester in 100 ml redestilliertem Diäthylenglykol wird unter Rühren bei 42⁰G (unter Argon) mit 19,1 g (0,33 Mol) wasserfreiem Kaliumfluorid behandelt. Die erhaltene Lösung wird 20 Stunden auf 81 bis 84°C erwärmt. Die nach dem Abkühlen erhaltene hellgelbe Lösung . wird zu 18,6 g (100 Prozent d.Th.) cis-N-Carbobenzyloxy-4-fluor-L-prolin-methylester in'Form eines hellgelben Öls aufgearbeitet.

_d) cis-ff-Carbobenzyloxy-4-fluor-L-prolin

18,4- g (etwa 0,044 Mol) cis-N-Carbobenzyloxy-4-fluor-L~ prolin-inethylester werden in 140 ml Methanol gelöst. Die Lösung wird bei -1 bis 4°C tropfenweise mit 33 ml (0,066 Mol) 2 η Natriumhydroxidlösung versetzt und anschliessend 1 Stunde bei O⁰C und über Kacht bei Raumtemperatur stehengelassen» Nach Entfernen von etwa der Hälfte des Lösungsmittels mittels eines Rotationsverdampfers wird die Lösung mit 300 ml Wasser verdünnt, mit Diäthyläther gewaschen (die Vaschflüssigkeit wird verworfen), unter Kühlung mit 12,5 ml 1 ' 1-Salzsäure auf den pH-Wert 2 angesäuert und 4 mal mit je I50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt, mit 100 ml gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und über MgSO^ getrocknet« Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels erhält man 13,8 g eines blassgelben viskosen Öls. Dieses Öl wird in 60 ml Äthanol gelöst, mit 5,1 S Cyclohexylamin

- 33 -

in ΊΟ ml lthanol behandelt und mit. 900 ml Diäthyläther verdünnt«. Beim Animpfen und Schaben fällt kristallines Cyclohexylaminsalz von cis-N-Cari)obenzyloxy-4-fluor-L-prolin aus- Fach Abkühlen über Nacht erhält man 11,0 g Produkt vom F. 180 "bis 183⁰C (Sintern "bei 175⁰C). Nach Umkristallisation aus 70 ml Äthanol erhält man 7_V6 g farblosen Peststoff vom P. 185 "bis 187°C. a /'S⁵ -40° (c = 1; Methanol).

Das Cyclohexylaminsalz wird' in 75 ^ml Essigsäureäthylester suspendiert, gerührt und mit 45 ml Salzsäure behandelt. Die Phasen werden getrennt. Die wässrige Phase wird 2 mal mit je 75 ml zusätzlichem Essigsäureäthylester extrahiert. Anschliessend werden die vereinigten organischen Phasen über MgSO^ getrocknet* Die nach dem Abdampfen des Lösungsmittels erhaltene freie.Säure, d.h. cis-N-Carbobenzyloxy—4-fluor-L-prolin, kristallisiert nach einer endgültigen Trocknung bei 0,2 Torr und 45⁰C Die Ausbeute beträgt 5,7 g (49 Prozent d.Th.). Der F. beträgt 116 bis

e ) eis-4-Fluor-r-L-prolin-hydrobromid

5»5 g (0,021 Mol) cis-N-Carbobenzyloxy^-fluor-L-prolin werden mit 28 ml Bromwasserstoff in Essigsäure (JO bis J2 Prozent) behandelt, lose verstöpselt und 1 Stunde gerührt«, Das gelbe Gemisch wird mit 300 ml Diäthyläther versetzt. Nach dem Absetzen des kristallinen Produkts wird die Ätherphase dekantiert. Das Material wird durch Dekantieren mit 300 ml frischem Diäthyläther gewaschen. Das Produkt wird schliesslich auf einem Dampfbad mit 70 .ml Methylethylketon erwärmt^ 2 Stunden gekühlt, mit kaltem Methyläthylketon und mit Diäthyläther gewasohen und schliesslich unter vermindertem Druck getrocknet. Die Ausbeute an nahezu farblosem Feststoff, d.h. cis-4-Fluor-L-prolin-hydrobromid beträgt 3,8 g (86 Prozent d.Th.).

-. 30 -

Der P. beträgt 189 Ms 191°C (Zers.)- C^J^ -19° (c = 1; Methanol).

Ein Teil des rohen Hydrobromids wird in die freie Säure übergeführt, indem man es über:eine mit dem Ionenaus— tauscherharz Dowex1~X8 gepackte Säule gibt.

Beispiel 20

eis-1-/~D~3-(Acetylthio)_r2-methylpropanoyl 7-4~fluor-, L~-p.ro! in

^»5 S (0,021 Mol) cis-^-Fluor-L-prolin-hydrobromid und Vg (0,023 Mol).D-3-Acetylthio-2~methylpropansäurechlorid werden in 50 ^ml Wasser in Gegenwart von Natriumcarbonat, um wahrend der Acylierung (etwa 20 Minuten) den pH-Wert bei 8,0 bis 8,2 zu halten, umgesetzt. Das Gemisch wird nach einer weiteren Stunde durch 2-maliges Waschen mit je 50 ml Essigsäureäthylester, Oberschichten mit Essigsäureäthylester, Ansäuern mit Salzsäure auf den pH-Wert 2, Sättigen mit Natriumchlorid und Trennen der Phasen aufgearbeitet. Die wässrige Phase wird mit zusätzlichem Essigsäureäthylester extrahiert. Die organischen Phasen werden vereinigt, getrocknet und eingedampft. Der nach dem Abdampfen des Essigsäureäthylesters erhaltene feste Rückstand wird unter Diäthyläther verrieben. Sodann wird das Eindampfen wiederholt. Man erhält 5»4- g (93 Prozent d.Th.) farbloses Produkt vom P. 146 bis 148°C (Sintern bei 133°C). /~a_7 ^⁶ -132° (c = 1; Methanol). Das Dicyclohexylaminsalz wird hergestellt durch Zugabe von Dicyclohexylamin zum cis-1~/~D-3~(Acetylthio)-2-methyl-propanoyl_7~4-fluor-L-prolin ^¹¹ 7° ^ml Essigsäureäthylester. Es kristallisieren 8,1 g Salz vom F. 202 bis 204⁰C (Sintern bei 187°C) aus. /~aj/ ^⁵ ~72° (c = 1; Methanol). Nach Kristallisation aus 90 ml Isopropanol. erhält man 7*0 g .Produkt vom P. 205 bis 207°C (Sintern bei 190°C). . /~a 7 n^ -74-°- Eine aus Äthanol umkristallisierte Probe zeigt keine weiteren Veränderungen des Schmelzpunkts .

2Ϊ 1 155

und des /~«._/_D -Werts.

9 S des Dicyclohexylaminsalzes werden durch Verteilung zwischen 10-prozentiger Kaliumhydrogensulfatlösung und Essigsäureäthylester wieder in die freie Säure zurückverwandelt (60 ml 10% KHSO₄; 4 Extraktionen mit je 50 ml Essigsäureäthylesber). Die organischen Phasen werden ^: vereinigt und zur Trockne eingedampft. Man erhält 4,1 g (71 Prozent'd.Th.) farblose freie Säure vom F. 154 bis 156°C (Sintern bei 140⁰C). Cv-J ψ -142° (c := 1; Methanol).

B e i s ρ i e 1 21

cis-4-Fluor-1-(D-3-m'ercapto-2-methylp_^ropa.noyl)-L·-prolin

3t9 g (0,014 Mol) cis-1-/~D-3-(Acetylthio)-2-methylpropanoyl_7-4-fluor-L-prolin werden in 22 ml Wasser, das 9 ml konzentrierte Ammoniaklösung enthält, hydrolysiert. Das Reaktionsgemisch wird mit Salzsäure angesäuert und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Phase wird unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 3,3 g glasartiges Produkt, das beim Trocknen bei 0,2 Torr und 50⁰C langsam kristallisiert. Dieses Material wird mit 20 ml Essigsäureäthylester (unter leichtem Erwärmen unter Argon) verrieben, mit 25 ml Hexan verdünnt, angerieben und über Nacht (unter Argon) gekühlt. Nach Filtration unter Argon, Waschen mit Hexan und Trocknen unter vermindertem Druck erhält man 2,8 g (85 Prozent d.Th.) cis-4-Fluor-1-(D-3-mercapto-2-methyl~ propanoyl)-L-prolin als farblosen Feststoff vom F. 135 bis 137°C (Sintern bei 129°C). /~α_7 ψ -116° (c = 1; Methanol)« . . . ·

B e i s ρ i e 1 22

1 -/""3-(Acetylthio)-2-chlorpropanoyl 7-L-prolin (Isomer A)

Ί?^-. S L-prolin und 667 ^mS Natriumcarbonat^ werden in 17 ml

Wasser gelöst und auf einem Eisbad gerührt. Anschliessend werden 2 g Natriumcarbonat in 8,5 mg Wasser und unmittelbar darauf 2,5 g 3-Acetylthio-2-chlorpropansäurechlorid · zugesetzt. Sodann wird'das Eisbad entfernt. Nach 30 Minuten bildet sich ein Niederschlag, der durch Zusatz von 17 ml Wasser in Lösung gebracht wird. Nach insgesamt 1,5 Stunden wird das Reaktionsgemisch 2 mal mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die wässrige Phase wird gekühlt, mit konzentrierter Salzsäure angesäuert, mit Natriumchlorid gesättigt, in. Essigsäureäthyle-ster extrahiert, über Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zur ^: Trockne eingedampft. Man erhält 3,3 g Produkt in Form eines rohen Öls. .

Dieses Öl wird auf eine mit 100 g Kieselgel gepackte Säule aufgesetzt und mit einem Gemisch aus Benzol und Essigsäure (7 : 1) eluiert. Man erhält 2 g Produkt, das aus Wasser zu 4-50 mg 1-/~3-(Acetylthio)--2-chlorpropanoyl_J7_L-prolin vom F„ 111 bis 113°C kristallisiert, /"aj^ -I70⁰ (c = 1; Äthanol).

Beispiel 23 · "

1 -/"*3~ (Acetyl thio )-2-chlorpropano7/;l7-L-prolin (Isomer B) ,

Die wässrigen Mutterlaugen von Beispiel 22 werden lyophilisiert und an Kieselgel unter Verwendung eines Gemisches aus Benzol und Essigsäure im Verhältnis von 7 :1 chromatographiert. Die Fraktionen mit einem Gehalt an TJV-absorbierendem Material, die sich bei der Dünnschichtchromatographie als homogen verhalten, werden vereinigt, zur Trockne eingedampft und aus Wasser kristallisiert.

Man erhält 800 mg Produkt vom F. 90 bis 109⁰C /~a 7 §5

— i)

-4° (c = 2,1; Äthanol). Die Mutterlaugen werden durch Gefriertrocknen zur Trockne eingedampft. Das verbleibende

111 5 5

1-/£~3-(Acetyl thio)-2~chlorpropanoyl-L-prolin (Isomer B) wird aus einer Mischung von Diäthyläther und Hexan ki-istallisiert.. Man erhält 380 mg Produkt vom F. 108 bis 110⁰C. /~α_7 ψ +.17*6 (c = 1,25; Äthanol).

B e i s ρ i e 1 24 1~/~3-(Acetylthio )-2-brompropanoyl 7-L-prolin

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 22 3-Acetylthio-2-brompropansäurechlorid anstelle von 3-Acetylthio-2-chlorpropansäurechlorid, so erhält man 1-/~3-(Acetylthio)-2~ brompropanoyl__7-L-prolin vom F. 109 bis 110°C. /~α_7_Ώ -162° (c = 1,39; Äthanol).

' B e i s ρ i e 1 25 . eis—l·-Chlor-1-(D-3-Iπercapto-2-methylpropanoyl)-L~prolin

Verwendet man im Verfahren von'Beispiel 20 cis-A—Chlor-L-prolin (aus J.Chem., Bd. 20 (1967), S.1493) anstelle von cis-4--Pluor-L-prolin-hydrobromid und unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man cis-1-/~D~3~(Acetylthio)~2-methylpropanoyl-4-~chlorprolin und cis-4~Chlor-1-(D-3"^ercapto-2-methylpropänoyl)-L-prolin. . .

Beispiel'26- ·

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 20 trans—4-Brom-L-prolin (aus J. Chenu, Bd. 20 (1967), S. 14-93) anstelle von cis-^-Fluor-L-prolin-hydrobromid und unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man trans--1-/~I)-3~(Acetylthio)-2~methylpropanoyl_7-4-brom—L-prolin und trans—4-Brom-1-(D-3-mercapto-2-methylpropanoyl)-L-prolin.

' _: Beispiel 2? cis-4-Jod-1~(D-3-mercapto-2-methylpropanoyl-L-prolin

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 20 cis-4— Jod-L-prolin anstelle von cis-4-Fluor-L-prolin-hydro'bromid und unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man cis-1-^D~3<Acetylthio)-2-methylpropanpyllb^.L-^god-L-prolin und cis-4— Jod-1~/~D-3-mercapto-2-me thylpr opanoyl_7-L-pr olin.

Beispiel· 28

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 20 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid anstelle von 3~Acetylthio-2-methylpropansäurechlorid und unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man cis-1-/~5-( A cetylthio)-2-trifluornlethylpropanoyl__7-^z^-fluoΓ-L-prolin und cis-^Pluor-i-Cj-mercapto^-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin.

Beispiel 29 cis~3-Fluor-pL-prolin-hydrobromid

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 19 N-Carbobenzyloxy-3-hydroxy-DL-prolin (J. Aia. Chem. Soc, Bd. 85 (196J), S. .2824) anstelle von N-CarlDObenzyloxy—^-hydroxy-L-prolin, so ' erhält man cis-J-Fluor-DL-prolin-hydrobromid,

/EeispielJO'.-'·

ei s-3-^luor-i -(D- 5-me rc apt o-2-me thylp^rjgpan^ylJ^DL^

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 20 cis-3-Fluor-DL-prolin-hydrobromid anstelle von cis-4—Fluor-DL-prolin und unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man cis-1~/~D-3-(Acetylthio)-2-methylpropanoy3v^?>3~fluor--DL-prolin und cis-3-Fluor~1-(I)-3-mercapto-2-methylpropanoyl )-I)L-prolin.

\ 21 1155 ' .·

'Beispiel 31· ^

cis-3-Chlor~1-(D~3-mercapto-2~methylpropanoyl)-L-prolin

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 20 cis~3-Chlor-L-prolin (erhalten aus J-Hydroxyprolin gemäss Aust. J. Chem., Ed. 20 (1967), S. 1493) anstelle von cis-4-Fluor-L-prolin lind unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man cis-1-/"~iD-3-(Acetylthio)-2~iaethylpropanoyl_7-3-chlor-L-prolin und cis-3-Chlor-1-(D-3~mercapto~2-methylpropanoyl)-L-prölin.

Beispiel 32

4,4-Sichlor-1-(D-3-mercapto-2-methylpropanoyl)-L-prolin

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 20 4-,4-Dichlor~L-prolin (hergestellt aus ^-Keto-L-prolin-diketopiperazin

und Phosphorpentachlorid gemäss J. Med. Chem.. Bd, ^20 , * Dromid und

(1977), S.1176) anstelle von cis-4-Fluor-L-prolin-hydro/ unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 21, so erhält man 1-/~D-3~(Acetylthio)-2-methyl™ propanoylJ7-4,4-dichlor~L-prolin und 4,4-mercapto-2-methylpropanoyl)-L-prolin.

Beispiel 33

1,1 ^t~/~Dith.iobis-(2-I)>-methylpropanoyl) 7- fluor)-L-prolin "J

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 9 cis-4—Fluor-1-(D~3-mercaptO"2-methylpropanoyl)-L-prolin anstelle von 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin, so erhält man 1,1 '-/TDithiobis--(2"I)-meth.ylpropanoyl)_7-bis~ /"(eis—4-fluor)-L-prolin. ·.'.'

B e i s ρ i e 1 3^;+

K, 4-Dif luor-1 - ( 3-mercapt obutanoyj-X-ji₌p_rolin Verv;endet man im Verfahren von Beispiel 11 3-Acetylthiobutansäurechlorid anstelle von 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid und unterwirft das erhaltene

Produkt dem Verfahren von Beispiel 12, so erhält man ^/l-(3-Acetylthiobutanoyl)-4,4-difluor-L-prolin und 4,4-Difluor-1-(3-mercaptobutanoyl)-L-prolin.

Beispiel 35

1-(3-Propanoylthio~2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 1 Thiopropansäure anstelle von Thioessigsäure und unterwirft das erhaltene Produkt den Verfahren der Beispiele 2 und 3-, so erhält man 3~Propanoylthio-2-trifluormethylpropansäure, 1-(3-Pro~ panoylthio-2~trifluormethylpropanoyl )-L~prolin-tert. -butyl ester und 1-(3-Propanoylthio~2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin. . ;

Beispiel 36

3-.(4-Methoxybenzyl)-thio-2-trifl·uormethylp_ιropansäure

Ein reines Gemisch aus 3,9 g "1-Trifluormethylacrylsäure und 4,3 g 4-Methoxybenzylthiol wird 1 Stunde bei 100 bis 110⁰C gerührt. Das Gemisch wird auf Raumtemperatur abgekühlt. Der erhaltene Feststoff wird aus Cyclohexan umkristallisiert. Man erhalt ein Produkt vom P. 72 bis ?4^OG.

B e i s ρ i e 1 37

Il^-prolin-tert'."butylester

Eine Lösung von 6,5 g 3-(4~Methoxybenzyl)-thio~2-trifluor methylpropansäure und 3?76 g Prolin-tert.-butylester in 500 ml Dichlormethan wird bei 0⁰C gerührt und mit 4,53 g Dicyclohexylcarbodiimid behandelt. Nach einer Behandlungs zeit von 30 Minuten bei O⁰C und über Nacht bei Raumtemperatur wird das Gemisch abfiltriert und das Filtrat bis zur neutralen Reaktion gewaschen. Die organische Phase wird getrocknet und unter vermindertem Druck zur Trockne eingedampft. Bei der Dünnschichtchromatographie an Kiese].

gel.unter Verwendung eines Gemisches aus Methylenchlorid und Essigsäureäthylester im Verhältnis von 95 · 5 ergeben sich zwei Hauptflecken, mit R--Werten von 0,46 und 0,51, entsprechend den "beiden Diastereoiscmeren.

Beispiel 38

1 - ( 3-Mer c ap to-2~trifluorme thy Ip r op anoyl) -L-pr ο lin

Eine Lösung von 4,47 g 1~/~3-(4-Methoxybenzyl)-thio-2-trif luorme thy lpropanoyl^-L-.prolin-tert.-butylester (erhalten gemäss Beispiel 37) in. 10 ml Anisol wird auf 0⁰C gekühlt und mit 100 ml Trifluoressigsäure und anschliessend mit 3,18-g Quecksilber(II)-acetat versetzt. Anschliessend wird das Kühlbad entfernt und das Gemisch 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührte Der nach dem Eindampfen des Gemisches unter vermindertem Druck erhaltene Rückstand wird mit einem Gemisch aus Diäthyläther und Hexan verrieben. Das unlösliche Material wird in Wasser suspendiert. Durch die Suspension wird 10 Minuten Schwefelwasserstoff durchgeleitet. Der Niederschlag wird abfiltriert und das Piltrat •gefriergetrocknet. Man erhält 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-L-prolin als amorphen Peststoff vom R»~ Wert 0,29 bis 0,31 (Kieselgel-Benzol: Essigsäure = 7 ϊ

Beispiel 39

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 1 2-Chloracrylsäure anstelle von 2-Trifluormethylacrylsäure und setzt das erhaltene Produkt mit Thionylchlorid um, so erhält man 3-Acetylthio~2-chlorpropansäure und 3-Acetylth.io-2~ch.lorpropansäurechlorid.

Beispiel 40·

Eine Suspension von 150 g (690 mMol) 1-(D-3~Mercapto-2~ jnethylpropanoyl)-L-prolin in 1274 ml Wasser und 426 ml

(5,526 Mol) konzentrierter Salzsäure wird 8 Stunden unter Rückfluss und unter Rühren erwärmt. Die erhaltene Lösung wird über Nacht "bei Raumtemperatur stehengelassen und sodann 10 mal mit je 400 ml Chloroform extrahiert. Die vereinigten Chloroformextrakte werden unter Stickstoff als Schutzgas über Magnesiumsulfat getrocknet und sodann eingedampft. Der Rückstand (81,2 g) wird mit 176 ml (1,809 Mol) Essigsäureanhydrid und 180 ml Pyridin versetzt. Das Gemisch wird 20 Stunden bei Raumtemperatur stehengelassen und anschliessend eingedampft. Der erhaltene ölige Rückstand wird in 1000 ml Essigsäureäthylester gelöst. Die Lösung . wird zunächst mit 200 ml 5-prozentiger, mit Natriumchlorid gesättigter Salzsäure (pH-Wert der Waschflüssigkeit 2) WLd dann mit 200 ml gesättigter Natriumchloridlösung (2 mal, pH-Wert, der zweiten Waschflüssigkeit 7) gewaschen. ·. Anschliessend wird das Lösungsmittel abgedampft. Man erhält 96,9 g (86,5 Prozent d.Th.) eines klaren öligen Rückstands der optischen Drehung /~aJ7 π ⁼ -61,8° (CHCl₅). Dieser Rückstand wird mit 83 ml (1,173 Mol) frisch destilliertem Thionylchlorid versetzt. Die erhaltene Lösung wird 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wobei eine Gasentwicklung auftritt. Das überschüssige Thionylchlorid wird sodann bei einer Badtemperatur von 50⁰C unter vermindertem Druck abgedampft. Der Rückstand wird unter vermindertem Druck destilliert. Man erhält 56,9 S D-3-Acetylthio-2-methylpropansäurechlorid vom Kp. 40 bis 44°C/ 0,17 bis 0,2 Torr. /~α_7 ψ -42,5° (c = 2; Methanol).

Beispiel. W. _i3-Acetylthio-2-brompropansäurechlorid , '

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 1 2-Bromacrylsäure anstelle von 2-Trifluormethylacrylsäure und setzt das erhaltene Produkt mit Thionylchlorid um, so erhält man 3-Acetylthio-2~brompropansäure und 3~Acetylthio-2-brompropansäurechlorid.

Beispiel 42 ·

trans-1 -/~D-3- (Acetylthio )-2-methyl-1-oxopropyl T-H-- fluor-L-prolin -

A)- trans-i-Carbobenzyloxy"4-fluor-L-prolin

Eine Lösung von 6,2 g trans-1 -Garbobenzyloxy-4-fluor-L-prolin-methylester in 50 ml Methanol wird bei 0 bis 5^CC tropfenweise mit 11,5 ml 2 η Natriumhydroxidlösung versetzt und nach 1-stündigem Stehenlassen bei O⁰C über Nacht auf Raumtemperatur gebracht. Sodann wird das Reaktionsge-' misch unter vermindertem Druck auf etwa die Hälfte seines. ursprünglichen Volumens eingedampft und hierauf mit 100 ml V/asser verdünnt. Das wässrige Reaktionsgemisch wird mit Diäthyläther extrahiert. Die Ätherextrakte werden verworfen. Die wässrige Lösung wird unter Kühlung mit verdünnter Salzsäure auf den pH-Wert 2 angesäuert und sodann 4 mal mit je 50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und sodann unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte Produkt, das durch Umwandlung in das Cyclohexylaminsalz vom F. 194 bis 196°C gereinigt wird. /~a__7 \- -44-° (c = A%\ Methanol).

Die freie Säure erhält man durch Suspension des Cyclohexylaminsalzes in 25 ml Essigsäureäthylester mit 22. ml 1 η Salzsäure und 4-maliges Extrahieren der wässrigen Phase mit je 35 ml Essigsäureäthylester. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem. Magnesiumsulfat getrocknet. Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält man das gewünschte trans-1-Carbobenzyloxy-4-fluor-L-prolin.

B) trans-4-Fluor-L-prolin-hydrobromid

Ein Gemisch aus J g trahs-i-Carbobenzyloxy-4-fluor-L-

_H0 -

prolin und 15 ¹^l einer 30 bis 32-prozentigen Lösung von Bromwasserstoff in Essigsäure wird 1 Stunde gerührt und sodann mit 150= ml wasserfreiem Diäthyläther versetzt. Das Lösungsmittel wird vom Niederschlag dekantiert. Der niederschlag wird sodann mit frischem Diäthyläther und schliesslich mit Methyläthylketon verrieben. Das trans-4-Pluor-L-prolin-hydrobromid weist einen ϊ¹. von 162 bis 164-⁰C (Zers.) auf. AJ^ -30° (c = 1%·, Methanol).

C)trans-1 -/D-3-(Acetylthio )-2~methyl-1 -oxopropyl 7-4— fluor-L-prolin

Eine Lösung von 1,9 g trans-4-Fluor-L-prolin-hydrobromid in 25 ml kaltem Wasser wird unter Rühren mit 1 g Natriumhydrogencarbonat versetzt, um den pH-Wert auf 8,2 einzustellen. Anschliessend werden unter weiterer Kühlung auf 5⁰C 1,8'g D-3-Acetylthio-2-methylpropionylchlorid in 2,5 ml Diäthyläther unter Rühren zugetropft, wobei der pH-Wert durch tropfenweise Zugabe einer 25-prozentigen Natriumcarbonatlösung auf etwa 8,2 bis 8,3 gehalten wird. Nach Beendigung der Zugabe wird noch 1 Stunde gerührt' und gekühlt. Sodann wird das Reaktionsgemisch 2 mal mit je 25 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die Extrakte werden verworfen. Die wässrige Phase wird mit 50 ^l Essigsäureäthylester versetzt und sodann unter Rühren und. Kühlen tropfenweise mit konzentrierter Salzsäure auf den pH-Wert 2,0 eingestellt. Die wässrige Phase wird mit Natriumchlorid gesättigt. Nach dem Abtrennen der Essig-' säureäthylesterphase wird die wässrige Phase 3 mal mit je 25 ml zusätzlichem Essigsäureäthylester extrahiert. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte Produkt. Das Dicyclohexylaminsalz wird hergestellt, indem man das Produkt in 25 ml Essigsäureäthylester löst und die Lösung mit 1,8 g Dicyclohexylamin in 35 ml Essigsäureäthylester

-μ- 21 1155

versetzt. Das ausgefallene Salz wird abfiltriert und aus Isopropanol umkristallisiert. Man erhält das Dicyclohexylaminsalz von trans-1 -//D-(Acetylthio)-2-niethyl-1 ~oxopropyl_7-4-fluor-L-prolin· vom F. 209 his 211⁰C. /~cc_7 Jp' -85° (c = 1%; Methanol). ·

Die freie Säure wird hergestellt, indem man das Dicyclohexylaminsalz in 5-prozentiger wässriger Kaliumhydrogensulfatlösung löst und sodann mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die Essigsäureäthylesterlösung wird über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte trans-1-/~D-3-(Acetyl thio )-2-methyl~1 -oxopropy 1_7-^-fluor-L-prolin.

B e i ε ρ i e 1 4-3

trans-4-Fluor-1-(D-3"mercapto-2~methyl-1-oxopropyl)-L-prolin .

Durch eine kalte Lösung von 4-,2 ml konzentrierter Ammoniaklösung in 16 ml Wasser wird Argon geleitet. Diese Lösung wird unter Rühren und unter Argon als Schutzgas mit 1,8 g trans~1-/~D-3- (Acetyl thio )-2-methyl-1 ~oxopropyl_7-4-fiuor~ L-prolin versetzt. Das Eeaktionsgemisch wird weitere 2. Stunden gerührt und sodann mit Essigsäureäthylester extrahiert, der dann verworfen wird. Die wässrige Phase wird gerührt und mit 30 ml Essigsäureäthylester versetzt. Sodann wird die wässrige Phase mit konzentrierter Salzsäure angesäuert':/ Räch dem Sättigen der wässrigen Phase mit Natriumchlorid wird die Essigsäureäthylesterphase abgetrennt. Die wässrige Phase wird 3 mal mit je 30 ml Essigsäuremethylester extrahiert. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte

- HS. -

1115

/~D-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-L-prolin. _D -112° (c = 1%; Methanol).

Beispiel44

1 -/~Ρ-3-(Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropyl 7-4-_? 4-difluor-L-prolin - '

A-)., 1-Carbobenzyloxy—4,4-difluor-L-prolin-methylester

Eine gekühlte Lösung von 3,3 g I^Carbobenzyloxy-4-keto-L-pi^olin-methyle ster in 80 ml Methylendichlorid wird tropfenweise mit 3,3 ml Diäthylaminoschwefeltrifluorid versetzt«, Man lässt das Reaktionsgemisch über Nacht auf Raumtemperatur kommen. Sodann werden etwa 100 g zerkleinertes Eis unter Rühren zugegeben. Hach 45-minütigem Rühren des Reaktionsgemisches wird die organische Phase abgetrennt und die wässrige Phase 2 mal mit je 40 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten Extrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und sodann unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält den gewünschten 1~Carbobenzyloxy-4,4-difluor-L-prolin-methylester.

B) 1-Carbobenzyloxy-4,4-difluor-L-prölin

Eine Lösung aus 5,6 g 1-Carbobenzyloxy-4,4-difluor-L-prolin-methylester in 50" ml Methanol wird bei O bis 5°C tropfenweise mit 11,5 ml 2_sn'iliatriumhydroxidlösung versetzt.. Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei O⁰C stehengelassen und sodann über Nacht auf Raumtemperatur erwärmt. Anschliessend wird das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck auf etwa die Hälfte seines urspi'ünglichen Volumens eingedampft und sodann mit 100 ml Wasser verdünnt. Das wässrige Reaktionsgemisch wird mit Diäthyläther extrahiert. Die Ätherextrakte v/erden verworfen. Die wässrige Lösung wird unter Kühlung mit verdünnter Salzsäure auf den pH-Vert 2 angesäuert und sodann 3 mal mit je 50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die ^Essigsäureäthylesterextrakte werden vereinigt und mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen, über wasserfreiem Magnesiumsul-

fat getrocknet und eingedampft. Man erhält das gewünschte

durch 1-Carbobenzyloxy-4,4-difruor-L-prolin. Dieses Produkt wird/

Umwandlung in das Cyclohexylaminsalz gereinigt. Der P. des Produkts beträgt 180 bis 185°C. £a.J ψ* = -24° (c = 1%; Äthanol).

Die freie Säure erhält man durch Behandeln einer wässrigen Lösung des Cyclohexylaminsalzes mit Salzsäure, und an— schliessendes 4 maliges Extrahieren des Gemisches mit je 30 ml Essigsäureäthylester. Die-Essigsaureathylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte 1-Carbobenzyloxy-4,4~ difluor-L-prolin.

C) 4,4-Difluor-L-prolin-hydrobromid

Ein Gemisch aus 2,4 g 1-Carbobenzyloxy-4,4~difluor-L-prolin und 12 ml einer' JO bis 32-prozentigen Lösung von Bromwasserstoff in Essigsäure wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und sodann mit 300 ml wasserfreiem Diäthyläther versetzt. Der nach dem Abkühlen des Gemisches ausgefallene Peststoff wird abfiltriert und unter vermindertem Druck getrocknet. Das gewünschte 4,4-Difluor-L-prolin-hydrobromid weist einen P. von 163 "bis 165°C (Zers.) auf. /~α_7 ψ = -14° (c = Λ%\ Methanol).

- * - ' '

P.). /I-/"D-3-(Acetylthio )-2-methyl-1 -oxopropyl J-M-,4-dif luor-L-prolin . ...

EineLösung von 2,7 g 4,4-Difluor-L-prolin-hydrobromid in 30 ml "Wasser wird unter Rühren auf 5⁰C gekühlt und zur Einstellung des pH-Werts auf 8,4 mit festem Carbonat versetzt. Anschliessend werden unter weiteren Kühlen und. Rühren tropfenweise 2,4 g D-3~Acetylthio-2-methylpropionylchlorid in 3 ial wasserfreiem Diäthyläther zugegeben, wobei der pH-Wert der Lösung durch Zugabe einer 25-prozentigen wässrigen Natriumcarbonatlösung auf 8,1 bis

8,5 gehalten wird. Nach beendeter Zugabe wird noch 1 Stunde gerührt und gekühlt. Sodann wird das Reaktionsge-

isch 2 mal mit ne 25 ml Essigsäureäthylester extrahiert, ie Extrakte werden verworfen

Die wässrige Phase wird mit 50 ml Essigsäureäthylester versetzt und unter Rühren und Kühlen'tropfenweise mit konzentrierter Salzsäure auf den pH-Wert 2,0 eingestellt. Die wässrige Phase wird mit Natriumchlorid gesättigt. Die. Essigsäureäthylesterphase wird abgetrennt= Sodann wird die wässrige Phase 3 mal mit je 25 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte Produkt. Das Dicyclohexylaminsalz wird hergestellt, indem man das Produkt in 40 ml Essigsäureäthylester löst und mit 2,3 g Dicyclohexylamin in · .5 ml Essigsäureäthylester versetzt. Das ausgefallene Salz wird abfiltriert und aus Äthanol umkristallisiert. Das DicyclohexylaminsalK von.1-/^-3-(Acetylthio)-2-met;hyl-1-oxopropyl_74,4~difluor-L-prolin weist einen P. von 225 bis 227⁰C auf. £~<x.j ψ = ~70° (c = O,5%5 Methanol).

Die freie Säure wird erhalten, indem man das Cyclohexylaminsalz in 5-prozentiger wässriger Kaliumhydrogensulfatlösung löst und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die Essigsäureäthylesterlösung wird über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte 1-/"D-3-(Acetylthio)~ 2-methyl-1 -oxopropyl_7-4, 4-dif luor-L-prolin.

B e i s ρ i e 1 45

4-,4-Difluor-1-(D--3-mercapto-2-met.hyl-1-oxopropyl)-L-. prolin . . .

Durch eine kalte Lösung von 4,6 ml konzentrierter Ammoniaklösung in 11 ml Wasser wird Argon geleitet. Die Lösung wird unter Rühren und unter Argon als Schutzgas mit 2,1 g

- H5 -

1 -/"D-3- (Ace tylthio )-2-me thyl-1 -oxopropyl_7-4- ,4-dif luor-L-prolin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird weitere 2 Stunden gerührt und sodann mit Essigsäureäthylester extrahiert. Der Essigsäureäthylester wird verworfen. Die wässrige Phase wird gerührt, mit 30 ml Essigsäureäthylester versetzt und sodann mit konzentrierter Salzsäure angesäuert. Die wässrige Phase wird mit Natriumchlorid gesättigt. Die nach dem Abtrennen der Essigsäureäthylesterphase verbleibende wässrige Phase wird 3 mal mit je 25 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält das gewünschte 4-,4—Difluoi¹-1~(D-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)~L-prolin.

ν*

Beispiel 46

,1-/~D-3-(Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropyl_7-5-fluor-2-pipecolinsäure

A) i-Carbobenzyloxy-5-hydroxy-L-pipecolinsäure-methylestei?

Eine Lösung von 5"' S i-Carbobenzyloxy-5-hydroxy-L-pipecolinsäure in 60 ml Dioxan wird portionsweise mit einer Lösung von Diazomethan in Diäthyläther versetzt, bis eine beständige gelbe Färbung entsteht. Während der Zugabe wird die Temperatur auf etwa 5°C gehalten. Das überschüssige Diazomethan wird mit Eisessig zers'etzt. Die erhaltene Lösung wird über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Sodann wird die Lösung unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält den gewünschten 1-Carboben2yloxy-5-hydroxy-L-pipe'colinsäure-methylester als blassgelbes viskoses Öl.

B^I'-Garbobenzyloxy-^-tosyloxy-L-pipecolinsäure-methylester·

Eine Lösung von 5»7 g i-Carbobenzyloxy-5-hydroxy-L-pipecolinsäure-methylester in 12 ml Pyridin wird bei 5 bis

8⁰C tropfenweise mit einer Lösung von 4- g Tosylchlorid in 6 ml Pyridin versetzt. Das Reaktionsgemisch wird 72 Stunden bei 5°C stehengelassen und sodann unter Kühlung mit 200 ml eiskalter 2 η Salzsäure "behandelt. Der Niederschlag wird in Chloroform gelost. Die wässrige Lösung wird 3 mal mit je 75 ml Chloroform extrahiert. Die vereinigten Chloroformlösungen werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält den gewünschten 1-Carbobenzyloxy~5-"fcosyloxy-L-pipecolinsäure~methylester vom F. 74-bis 76⁰C nach Kristallisation aus Isopropanol. /~^α»-Ζ Τ) - -5° (c = 1%; Methanol); />_7 ψ = -11° (c = Λ%\ Chloroform). . .

C) ^-Carbobenzyloxy-^-fluor-L-pipecolinsäure-methylester.

Eine Suspension von 5*2 g 1-Carpobenzyloxy-5'-tosyloxy-L-pipecolinsäure-methylester in 50 ml Diäthylenglykol wird unter Rühren mit 5»2 g wasserfreiem Kaliumfluorid behandelt. Das Gemisch wird 14- Stunden unter Rühren auf 80⁰C erwärmt. Die Lösung wird sodann abgekühlt und mit 50 ml Wasser verdünnt» Die nach 3 maliger Extraktion mit je 100 ml Essigsäureäthylester erhaltenen Extrakte werden vereinigt, mit gesättigter Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet» Nach dem Abdampfen des Lösungsmittels unter vermindertem Druck erhält den gewünschten 1-Carbobenzyloxy~5~fluor-L-pipecolinsäure:-me'thylester als gelbes Öl.

D) 1-Carbobenzyloxy-5-fluor-L-pipecorinsäure

Eine auf Ölgekühlte Lösung von 4-,6 g 1 -Carbobenzyloxy-5-f luor-L-pipecolinsäure-methylester in 32 ml Methanol wird mit 7»3 ml 2 η Natriumhydroxidlösung_versetzt» Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei 0 bis 5°C stehengelassen und sodann über Nacht auf Raum, temp era tür erwärmt. Anschliessend wird die Lösung unter vermindertem Druck

.-^- 2M155

auf etwa die Hälfte ihres ursprünglichen Volumens eingeengt und hierauf mit 20 ml Wasser verdünnt. Die Lösung v'7 wird sodann mit Diäthyläther extrahiert. Der Extrakt wird verworfen. Die wässrige Lösung wird gekühlt, mit konzentrierter Salzsäure angesäuert und 3 mal mit je 50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die vereinigten Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält die gewünschte 1-Carbobenzyloxy-5-fluor~L-pipecolinsäure, die durch das Umwandeln in das Cyclohexylaininsalz vom F. 158 bis 161⁰C gereinigt wird. AJ p⁶ =-31° (c = 1%; Methanol). .

Die freie Säure erhält man durch Behandeln einer wässrigen Lösung des Salzes mit Salzsäure, 4- maliges Extrahieren des Gemisches mit je 25 ml Essigsäureäthylester und Eindampfen der getrockneten Extrakte unter vermindertem Druck.

E)·5-Fluor-L-pipecolinsäure-hydrobromid

Ein Gemisch aus 2,2 g i-Carbobenzyloxy-5-iliior-L-pipecolinsäure und 12 ml einer 30 bis 32-prozentigen Lösung vom Bromwasserstoff in Essigsäure wird 30 Minuten "bei Raumtemperatur gerührt und sodann mit 300 ml wasserfreiem Diäthyläther versetzt. Das abgekühlte Gemisch wird filtriert. Der ausgefallene Feststoff.wird unter vermindertem Druck getrocknet. Man erhält 5-Eluor-L-pipecolinsäure-hydrobromid.

ff) 1~/~D~3-(Acetylthio)-2-methyl-1-oxopropyl Υ^-ΐΙμοτ-L-pipecolinsäure' .

Eine Suspension aus 5>1 S 5-2^rl^u-or-L--pipecolinsäurehydrobromid in 100 ml Dimethylacetonid wird mit 10 g N-Methylmorpholin versetzt. Dieses Gemisch wird anschliessend langsam unter heftigem Eühren mit 5 A S D-3-Acetyl-

-Hi-

2~methylpropionylchlorid versetzt. Das Reaktionsgemisch, wird 3 Stunden auf 90⁰C erwärmt. Nach dem Abkühlen wird das Reaktionsgemisch filtriert und unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird mit verdünnter Salzsäure "behandelt und 3 mal mit ge I50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die Essigsäureäthylesterextrakte werden getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Man erhält 1-/~D-3-(Acetylthio)~2-methyl-1-oxopropyl_7-5-flu.or-L-pipecolinsäure. ' "

Die Säure wird durch Umwandlung in das Dicyelohexylaminsalz und durch anschliessende Kristallisation des Salzes aus Acetonitril gereinigt.

B e i s ρ i e 1 4-7

^-I'luor-^<1-(D-3-mercapto-2-methyl-1-oxopropyl)-L-pipecolinsäure ·

Durch eine auf 5⁰C gekühlte Lösung von 11 ml konzentrierter Ammoniaklösung in 25 ml Wasser wird 30 Minuten Stickstoff durchgeleitet. Diese Lösung wird mit 1,6. g 1-/""υ - 3-( Ac e tyl thi ο )-2-me thyl-1 - oxopr opyl_7-5-f luor-L-pipecolinsäure versetzt. Das Gemisch wird 15 Minuten bei 5°C und anschliessend 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Hierauf wird die Lösung abgekühlt, mit konzentrierter Salzsäure angesäuert und"3 mal mit je 50 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die Essigsäureäthylesterextrakte werden über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft» Man erhält 5-Fliior~1-(D-3-mercapto~2-methyl-1-Oxopropyl)- · L-pipecolinsäure.

Beispiel 48

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 2 L-Pipecolin- ·

211155

säure-tert.-butylester anstelle von L-Prolin-tert,-butylester und unterwirft man das Produkt den Verfahren der Beispiele 3 und 4-_s so erhält man 1-(3-Mercapto-2-trif luormethylpropanoyl-L-pipecolinsäure.

B e i s ρ i e 1 A9 ° . /]-(2-Mercapto-3 , 3 , 3-trif luorpropanoyl)-L-pipecolinsäure

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 7 L-Pipecolinsäure anstelle von L-Prolin und unterwirft das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 8, so erhält man 1 -(2-Mercapto-3,3»3~tr.if luorpropanoyl )-L-pipecolinsäure.

B e i s ρ i e 1 50

_i 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-3,5-(iifl"UorpL-pipecolinsäure · '

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 11 DL-pipecolinsäure (erhalten aus 5-Keto-DL-pa.pecolin-Bäure gemäss J. Med. Chem., Bd. 20 (1977), S.1176) anstelle von 4,4~Difluor-L-prolin und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 12, so erhält man 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-5»5-difluor-DL-pipecolinsäure.

Beispiel. 5i'

1,1'-/nPithiohis-(2-trifluormethyl-3-propaiioyl) /-"bis-5 s ^"

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 9 1-(3-Mercapto-2-trif luormethylpropanoyl )-5,5-d.if luor~DL-pipecolinsäure sjistelle von 1-(3-Hercapto-2-trifluormethylpropanoyl)--L-prolin, so erhält man 1,1 '-/~Dithio"bis-(2-trifluormethyl-3-propanoyl )_7"-bis-5,5-cLif luor-DL-pipecolinsäure

Beispiel 52

1_~(3-^l·Iercapto·-4,A ,4-tΓifluoΓbutanoyl)-L-pipecolins'äuΓe

Verwendet mau im Verfahren Von Beispiel 14- L-Pipecolinsaure-tert.-butylester anstelle von L-Prolin-tert.-"butylester und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 15» so erhält man 1~(3-Mercapto- M- ,4- ,4-trif luorbutanoyl )-L-pipe colinsäure.

Beispie 153

1--(3~Mereapt_o~2~tr^^^ pii-pipecolinsäure

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 11 5i5 DL-pipecolinsäure (hergestellt aus 5-Keto~DL-pipecolin~ saure und Phosphorpentachlorid entsprechend dem Verfahren von J. Med. Chenu, Bd. 20 (1977), S.11?6) anstelle von 4,4-Difluor-L-prolin und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 12, so erhält man 1-(3-Mercapto-2~trifluormethylpropanoyi)-5_>5-dichlor~DL~pipecolinsäure.

B e i ε ρ i e 1

colinsäure .

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 11 3~Acetylthio-2-methylpropansäurechlorid anstelle von 3™Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 12, so erhält man 1-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)-5,5-difluor-DL-pipecolinsäure.

Beispiel^ 1^_(3-Mercsj3to-2^ säure ,

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 11 3'-Acetylthio-

- 5A -

1 1 155

2-methylpropansäurechlorid anstelle von 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid und 5-£"luor-DL-pipecolinsäure (hergestellt aus 5-HydxOxypipecolinsäure entsprechend dem Verfahren von Biochemistry, Bd. 4-(1965), S. 2507) anstelle von 4-,4~Difluor-L-prolin und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von . Beispiel 12, so erhält man 1-(3~Acetylthio-2-methylpropanoyl)-5-fluor-DL-pipecolinsäure und 1-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl )~5-f luor-DX-pipecolinsäure-

Beis.piel.56

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 11 3-Acetylthiopropanoylchlorid anstelle von ^-Acetylthio^-tri- £luormethylpropansäurechlorid. und ,5-Brom-DL-pipecolinsäure (hergestellt aus 5-Hydroxypipecolinsäure entsprechend dem Verfahren von Aus. J. Chem., Bd. 20 (1967)? S. 14-93) anstelle von 4,4-Difluor-L-prolin und unterwirft man das erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 12, so erhält man 1~(3~Acetylthiopropanoyl)-5- brom—DL-pipecolinsäure und 1-(3~Mercaptopropanoyl)-5~"brom-DL-pipecolinsäure. ·

Beispiel 57

1-(3-Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl-pL-^ ^äu^Hm£thy_lester_ ' . ...

Verwendet man im Verfahren von Beispiel⁰2 DL-Pipecolinsäure-methylester anstelle von L-prolin-vfcert.-butylester, so erhält man 1-(3~Acetylthio-2-trifluormethylpropanoyl)-DL-pipecolinsäure-methylester.

B e i s ρ i e 1 58 ·

1-(3-Mer-c3.Oto-2-trifluormethylpropanoyl)-JDL-pipecolin·- ' ' _s äur e -me thy I ester .

Ven^endet man im Verfahren von Beispiel 2 DL-Pipecolinsäu-re-Tsethylester anstelle von L-Prolin-tert„~butylester

und 3-Hercapto-2-trifluormethylpropansä\rre anstelle von 3-Acetylthio-2-methylpropansäure, so erhält man 1-(3-Mercapto-2-trifluormethylpropanoyl)-DL-pipecolinsäure-methylester. ·'.',

Beispiel 59 1~(3-Propanoylthio-2'-trifluoimethylpropanoyl)-5-fiuör--

DL-p ip e c olins äure . .

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 1 Thiopropansäure anstelle von Thiolessigsäure und unterwirf t das \ erhaltene Produkt dem Verfahren von Beispiel 26, so \ ' erhält man 1-(3-Propanoylthio-2-trifluormethylpropanoyl) ^-fluor-DL-pipecolinsäure. .

J . B e i s ρ i e 1 60

·* Natriumsalz von "1-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)-^~ fluor-DL-pipecolinsäure

Eine wässrige Lösung von 1-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)-5-fluor-DL-pipecolinsäure wird mit einer äquimolaren Menge einer wässrigen Λ η Natriumhydroxidlösung vermischt. Die erhaltene Lösung wird gefriergetrocknet. .

.Beispiel '61 '

1 - ( 3-Mercaptopropanoyl l-^A.

Verwendet man im Verfahren von Beispiel 53 3-Acetylthiopropansäurechlorid anstelle von 3-Acetylthio-2-trifluormethylpropansäurechlorid, so erhält man 1-(3-Mercaptopropanoyl)-5,5-cLichlor-DL~pipecolinsäure.

Die razemischen Produkte der Endprodukte der vorstehenden Beispiele erhält man unter Verwendung der DL-Pormen der als Ausgangsprodukte verwendeten Aminosäuren endstelle der entsprechenden L-Pormen.

1 1155

In .entsprechender Weise lassen sich die D-Formen der Endprodukte der vorstehenden Beispiele erhalten, indem man die Ausgangsaminosäuren in der D-Form und nicht in der L-Form einsetzt.

..Beispiel^

1000 Tabletten mit einem Gehalt von jeweils 100 mg 1-(D-3-Mercaptopropanoyl)~cis-4-fluor-L-prolin v/erden aus folgenden Bestandteilen hergestellt:

1-(3~Mercaptopropanoyl)-cis-4—

fluor-L-prolin	100	ε
Maisstärke	. 50	g
Gelatine	7	r5 g
Avicel (mikrokristalline Cellulose)	25	ε
Magnesiumstearat	2	,5 ε

Das 1-(D-Mercaptopropanoyl)-eis~4-fluor-L-prolin und die i Maisstärke werden mit einer wässrigen Gelatinelösung vermischt. Das Gemisch wird getrocknet und zu einem feinen Pulver zermahlen. Die mikrokristalline Cellulose und das Kagnesiumstearat werden bei der Granulation zugemischt. Das erhaltene Produkt wird in einer Tablettenpresse zu 1000 Tabletten mit jeweils 100 mg Wirkstoff verpresst. .

Beispiele^

1000 Tabletten mit einem Gehalt an je 200 mg 1-/~D-3-(Acetylthio)-2-methylpropanoyl_7-cis-4~fluor-L-prolin werden aus folgenden Bestandteilen hergestellt;:

1-/~D-3~(Acetylthio)-2-methyl-

propanoyl/-cis-A—fluor-L-prolin 200 g

Lactose 100 g

Avicel (mikrokristalline Cellulose) 150 g

Maisstärke 50 g

Magnesiumstearat 5 S

-SH- £ J

Das 1 —/~D-3- (Acetyl thi ο )-2-me thylpr opanoyl_7-ci s-4—f luor-L-prolin, die Lactose und die mikrokristalline Cellulose werden vermischt und sodann mit der Maisstärke vermengt. Anschliessend wird das Magnesiumstearat zugesetzt. Das trockene Gemisch wird in einer Tablettenpresse zu 1000 Tabletten von je 505 ^mS Gewicht und einem Virkstoffgehalt von je 200 mg verpresst. Die Tabletten werden mit einer Lösung von Methylcellulose (Methocel E 15) mit einem Gehalt an .— Pigmentfarbe (lake), die Gelb Nr. 6 (yellow Nr. 6) enthält, überzogen. .

B e i s ρ i e 1 64

Zweiteilige Nr. 1-Gelatinekapsein mit einem Gehalt an ^mS 1-(3-Mercapto-4,4,4-trifluorbutanoyl)~L-prolin werden hergestellt, indem in die Kapseln jeweils ein Gemisch aus· den folgenden Bestandteilen gefüllt wird:

1 _;(.5_Mercapto-4 _? 4,4-trif luorbutanoyl-L-prolin 250 mg

Magnesiumstearat ....'... 7 mg Lactose (USP) 193mg

Beispiel 65

Aus folgenden Bestandteilen wird eine Injektionslösung hergestellt:

cis-1-/~D-3-(Mercapto)-2~methylpropanoyl)_7-cis-4-fluor-L-prolin 500 g

Parahydroxybenzoesäure- .

methylester ' . 5 S

Parahydroxybenzoesäurepropylester 1g

Natriumchlorid 25 g

Wasser für Injektionszwecke . ad 5 Liter

Der Wirkstoff, die Konservierungsmittel und das Natriumchlorid werden in 3 Liter Wasser für Injektionszwecke gelöst« Anschliessend wird das Volumen auf 5 Liter aufgefüllt. Die Lösung wird durch ein Sterilfilter filtriert

- 5S -

Ml 55

lind aseptisch in vorsterilisierte Fläschchen gefüllt, die sodann mit vorsterilisierten Gummiverschlüssen ver schlossen werden. Die Fläschehen enthalten jeweils 5 Lösung mit einer Wirkstoffkonzentration von 100 mg pro 1 ml Lösung.

Die Produkte der übrigen Beispiele können gemäss den Beispielen 62 bis 65 zu Arzneipraparaten konfektioniert werden.

Claims (14)

1. Erfindungsanspruch

   1. Verfahren zur Herstellung von halogensubstituierten Mercaptoacylaminosäuren der allgemeinen Formel I

   R>

   R.

   R- s~~ (CH)- CH-CO— N

   ^(CHVm

   CH-COOR₁ * J

   in der die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben: R ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkanoylrest oder einen Rest der allgemeinen Formel .

   R₄ R₃ H₂C

   -S- (CH) CH- CO N

   CH-COOR.

   m den Wert 1 oder 2 und η den Wert 0 oder 1, R₁ ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest_f

   R„ und R'₂ jeweils ein Wasserstoff- oder Halogenatom,

   21 1155

   • 1 R^ ein Wasserstoff atom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluormethylgruppe oder, wenn η den Wert i hat, auch ein Halogenatom,

   R. ein Wasserstoff atom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluormethylgruppe und .

   E ein Wasserstoff atom und, wenn m den Wert 1 hat, auch ein Halogenatom, '

   wobei mindestens einer der Reste R₂, R'₂> ^, R_y+ und Rg

   ein Halogenatom oder die Trifluormethylgruppe bedeutet .10 und nur R₂ und R'o gleichzeitig Halogenatome sein können, sowie deren Salze mit Basen,

   gekennzeichnet dadurch, daß man entweder

   a) eine Säure der allgemeinen Formel IV

   R₄ ^R

   R— S (CH) CH COOH

   η ·

   an eine Aminosäure der allgemeinen Formel V.

   Y

   I I co

   HN;; _ — CH COOR₁.

   kuppelt, wobei R ein Viasser stoff a torn, einen niederen Alkanoylrest oder eine anschließend zu entfernende p-Methoxybenzy!schutzgruppe bedeutet und die anderen Reste die vorstehend angegebene Bedeutung haben,

   L J

   ~ 58 -

   11155

   wobei man ein Produkt erhält,. in dem R ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkanoylrest bedeutet, und das Produkt, in dem R ein Wasserstoffatom bedeutet, durch Behandlung mit Jod zu einem Produkt oxidiert, in dem R einen Rest der allgemeinen Formel

   (CHR,-) ο m

   COOR₁

   bedeutet, oder
   b) eine Säure der allgemeinen Formel V

   H₀C 2 ι

   (CHR₆)

   HN-

   COOR₁

   (V)

   mit einer Halogenalkansäure der allgemeinen Formel VI

   (CH)

   -CH-

   -COOH

   (VI)

   wobei X ein Halogenatom bedeutet und die übrigen Reste die vorstehende Bedeutung haben, unter Bildung einer Verbindung der allgemeinen Formel VII

   X—_ (CH)

   H₂C

   CH CO-N-

   (CHR

   - COOR

   - 53 - O

   kuppelt -und

   die erhaltene Verbindung mit einer Thiosäure der allgemeinen Formel VIII

   E₇-CO-SH (VIII)

   in der R₇ einen niederen Alkylrest "bedeutet, unter Bildung eines Produkts, in dem R einen niederen Alkanoylrest "bedeutet, umsetzt und

   das erhaltene Produkt der Hydrolyse unter Bildung eines Produkts, in dem R ein Wasserstoff atom bedeutet, unterwirft und

   das erhaltene Produkt durch Behandlung mit Jod zu einem Produkt, in dem R den Rest der allgemeinen Formel

   . .~ - ,

   2_V /2

   R>.

   ra

   ₄ R₃ H₂C (CHR₆)

   . -S- (CH)- CH— CO— N

   » , — —^w .·» v^OOR»

   bedeutet, oxidiert,/ oder

   c) eine Verbindung der allgemeinen Formel XII

   R₀ R',

   H₄K₃ H₂C

   CH=C CO — N — J -COOR₁

   · in der die einzelnen Reste die vorstehende Bedeutung haben, mit einer Verbindung der allgemeinen Formel VIII

   R₁₇-CO-SH ' (VIII)

   in der Er, einen niederen Alkylrest bedeutet, umsetzt, das erhaltene Produkt, in der R einen niederen Alkanoylrest bedeutet, auf herkömmliche Weise hydrolysiert und das erhaltene Produkt, in dem E ein Wasserstoff atom "bedeutet, mit Jod unter. Bildung eines Produkts, in dem E einen Eest der allgemeinen Formel

   H₂C

   _ g.

   (CH)

   CH-CO

   CH-COOR,

   bedeutet, behandeltο '
2. 2. Verfahren nach Punkt 1, gekennzeichnet dadurch, daß man ein p.rodukt, in dem R einen niederen Alkanoylrest bedeutet, unter Bildung eines Produkts, in dem R ein Wasserstoffatom bedeutet, hydrolysiert.
3. 3. Verfahren nach Punkt 2, gekennzeichnet dadurch, daß man ein Produkt, in dem R einen niederen Alkanoylrest bedeutet, der Ammonolyse unterwirft.
4. 4. Verfahren nach Punkt 1 bis 3, gekennzeichnet dadurch, daß man ein Produkt der allgemeinen Formel

   R-

   R-S-(CH)

   CH-

   COOR₁

   1 1155

   oder deren Salze mit .Basen herstellt, wobei die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben:

   R ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkanoyirest oder einen Rest der allgemeinen Formel

   ^R' ^R3 ^R2\^^R5

   — g -— ZfIT^— ητι . Γ·Π — N '

   R. ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkylrest, Ep, R¹2 und Pv- jeweils ein Wasserstoff- oder Halogenatom, ·.·.· . E-, ein Wasserstoff- oder Halogenatom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluormethylgruppe, H ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluormethylgruppe,

   mit der Massgabe, dass mindestens einer der Reste Ro, R^, R^, Ec und Rg einen Halogensubstituenten "bedeutet, nur* Ro nnd R^ gleichzeitig ein Halogenatom sein können und η den Wert 1 haben muss, wenn R, ein Halogenatom bedeutet.
5. 5. Verfahren nach Punkt 1 bis 3, gekennzeichnet dadurch, daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel III

   R
   ^R4

   R— S (CH) -CH CO — N ^- COOR₁ (Hl)

   oder deren Salze mit Basen herstellt, v/obei die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben: R ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkanoyirest oder einen Rest der allgemeinen Formel

   -CH

   CO —

   COOR₁

   ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkylrest, und Rc jeweils ein Wasserstoff- oder Fluor atom und und R^ jeweils ein Wasserstoff atom oder die Trifluormethy!gruppe, wobei einer dieser Reste ein Wasserstoffatom und der andere die Trifluormethylgruppe bedeutet.
6. 6. Verfahren nach Punkt 1 bis 3, gekennzeichnet dadurch , daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel III

   -(CH>

   R.

   -CH-

   CO-

   COOR_n

   (in)

   oder deren Salze mit Basen herstellt, wobei die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben: . R und Rx, die gleiche Bedeutung wie in Punkt "2", ~ E2 und R₁- Jeweils ein Wasserstoff- oder Fluoratom,

   R-, ein Wasserstoff™ oder Halogenatom oder einen niederen Alkylrest, wobei E,-ein Halogenatom ist, , wenn sowohl R^ als auch. R^ jeweils ein Wasserstoff atom bedeutet und R^ kein Halogenatom ist* wenn R₀ oder R^ ein Halogenatom bedeutet,und E^ ein Wasserstoff atom. ..
7. 7. Verfahren nach Punkt 1 bis 3, gekennzeichnet dadurch , daß R ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkanoylrest, R^ ein Wasserstoffatoin oder einen-niederen Alkylrest, Rp und R'_o ein Wasserstoff- oder Halogenatom, R, ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest und R^ ein Wasserstoff atom oder einen niederen Alkylrest "bedeutet.

   . Verfahren nach Punkt 1 bis 3,- gekennzeichnet dadurch , daß R ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkanoylrest, R₁ ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest, R₂. und R', jeweils ein Wasserstoff- oder Fluoratom, R₃ ein Wasserstoff-

   atom oder einen niederen Alkylrest und R. ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest bedeutet.
8. 9. Verfahren nach Punkt 1 bis 3 , " gekennzeichnet dadurch, daß R ein Wasserstoffatom und R_? und R¹2 jeweils ein Fluorätom bedeutet.

   . Verfahren nach Punkt "1 bis 3, gekennzeichnet dadurch, daß R und R₁ jeweils ein Wasserstof fatom, R_ und R'„ jeweils ein Fluoratom und R-. und R₄ jeweils ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest bedeutet.

   . Verfahren nach Punkt 6 , gekennzeichnet dadurch , daß R₂ ein Wasserstoff- oder Fluoratoro, R_r ein Fluoratom, R ein Wasserstoffatom und R₁, R_ und

   R. jeweils ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest bedeutet.
9. 1.2 . Verfahren nach Punkt 6, gekennzeichnet dadurch, daß R₂ ein Wasserstof fatom, R₁- ein Fluoratom, R ein Wasserstoffatom und R , R₃ und R- jeweils ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest bedeutet.

   .
10. 13. Verfahren nach Punkt 11 und 12, gekennzeichnet dadurch, daß R₁ und R₄ ein Wasserstoffatom und R₃ die Methylgruppe bedeutet.
11. 14. Verfahren nach Punkt 1 bis 3, gekennzeichnet

    dadurch , daß man eine Verbindung der allgemeinen Formel

    H₃ »2

    K-S-(CH)-CH-CO-H -CH-COOR₁

    .sowie deren Salze mit Basen herstellt, wobei die einzelnen Reste folgende Bedeutungen haben R ein Wasserstoffatom, einen niederen Alkanoylrest oder einen Rest der allgemeinen Formel

    P ρ,

    \/²

    R, R-, Ho C (CHn)

    .4 ,3 2 , Y 2⁷Ki

    -S-(CH)- -CH CO N — CH-COOR,

    ti JL

    m den Wert 2,

    ein Wasserstoffatom oder einen niederen Alkylrest,

    R₀ und R'p 0"^ew^eil^{s e}iⁿ Wasserstoff- oder Halogenatom. und .

    R^ un.d R^ jexieils ein Wasser stoff atom, einen niederen Alkylrest oder die Trifluorme-thylgruppe, wobei höchstens

    einer dieser Reste die Trifliiormethylgruppe und min -_ .: 3^

    destens einer der Reste Rg, E'p, R, und R^ einen Halo« gensubstituenten bedeutet.

    ' 15- Verfahren nach Punkt I4, gekennzeichnet dadurch, daß R, R₀, R¹, und R- jeweils ein Wasserstoffatom und R₃ die Trifluormethylgruppe bedeutet. „ . .·
12. 6. Verfahren nach Punkt 14, gekennzeichnet dadurch , daß R₂ ein Halogenatom und R' ein Wasserstoffatom bedeutet.
13. 7. Verfahren nach Punkt 1.6, gekennzeichnet dadurch , daß als Halogenatom ein Fluoratom vorliegt.
14. 1.8.. Verfahren nach Punkt 1 4, gekennzeichnet dadurch , daß R ein Wasserstoffatom und R„ und R' jeweils ein Halogenatom bedeutet.

    ο Verfahren nach Punkt 18/ gekennzeichnet dadurch, daß als Halogenatom ein Fluoratom vorliegt.

    · Verfahren nach Punkt 14, gekennzeichnet dadurch, daß R und R₁ ein Wasserstoffatom, R2 ein Wasserstoff- oder Fluoratom, R' ein Fluoratom, Ro die Methylgruppe und R₄ ein Wasserstoffatom bedeutet und η den Wert 1 hat.