DD202579A5 - Bicyclische, als antihypersensiva geeignete lactame - Google Patents

Abstract

Beschrieben wird die Herstellung bicyclischer Lactame und verwandter Verbindungen, als Antihypertensiva geeignet sind.

Description

AP G 07 D /238 350 _A . a 60 624 12

23 8 3 50 4 -'-

Verfahren zur Herstellung von Lactamen

Anwendungsgebiet der Brfindung

Die Erfindung betrifft im weitesten Sinne bicyclische Lactame und deren Derivate, die geeignet sind als Inhibitoren für Umwandlungs-Enzyme und als Antihypersensiva. Sie können somit als Heilmittel in der Mediain eingesetzt werden.

Bekannte technische Lösungen

In der US-PS 4 052 511 sind blutdrucksenkende Carboxyacylprolin—Verbindungen offenbart· In den US-PSen 4 129 571 und 4 154 960 sind substituierte Acylderivate von Aminosäuren beschrieben, welche zur Familie der durch Mercapto substituierten Acylaminosäuren gehören. Hier ist erwähnt die klinisch wirksame blutdrucksenkende Verbindung D-3-Mercapto-2-methylpropanoyl —L—prolin.

Die De-OSen 27 04 985 und 27 20 996 nennen blutdrucksenkende Carboxyaeylprolinverbindungen und (H)-Carboxyalkanoy1aminosäure verbindungen, während in der DE-OS 28 10 261 thio— substituierte (H)-Propinoylaminsäureverbindungen offenbart sind, welche Inhibitoren für Angiotension umwandelndes Enzym sind. In der Zusammenfassung des ACS-Meetings vom 11.9.1978 "Superactive Analogs of the Angiotensin Converting Enzyme Inhibitor BPP₉₃ Containing L-3,4-dehydroproline" ist die Verwendung von Dehydroprolin an verschiedenen Peptiden beschrieben.

US—PS 3 334 091 beschreibt heterocyclische und annellierte heterocyclische Ringstrukturen, die als Sedativa, Depressants und für andere Wirkungen auf das zentrale Nervensystem verwendet werden können.

AP C 07 D /238 350/4

238350 4 ' --- ^6O62412

In allen den vorstehend erwähnten Literaturstellen sind bicyclische Lactame, die eine Aminoalkylseitenkette aufweisen und brauchbar sind als blutdrucksenkende Mittel, nicht beschrieben«

In einem Aufsatz von A.G. Schultz in J. Org. Chem., Band 45 Ur. 24 (1980), S. 5008 und 5009 sind annellierte cyclische Ringverbindungen einschließlich von Lactamen erläutert. Jedoch haben diese Verbindungen keine Aminoalkylseitenkette. Auch findet sich in dieser Literaturstelle kein Hinweis auf eine Verwendung der dort beschriebenen Verbindungen als blutdrucksenkende Mittel·

Ziel der Erfindung

Es ist das Ziel der Erfindung,neue Pharmaka bereitzustellen.

Darlegung des Wesens der Erfindung

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Herstellungiiaeuer bicyclischer Lactame zu entwickeln·

Die erfindungsgemäßen Verbindungen werden durch folgende 3?ormel dargestellt:

/\ H COgE ^ö

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worin R und Rp unabhängig voneinander Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl und Aralkyl· sind; IL die Bedeutung hat von Wasserstoff; Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, einschließlich verzweigte, cyclische und ungesättigte Alkylgrüppen (wie 3-Methyl-1-butyl, 2-Cyclohexyläthyl, 3₅3-Dimethylallyl und dergleichen) ;

substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Halogen, Hydroxy, Carboxy, Niedrigalkylthio, Niedrigalkoxy, Niedrigalkoxycarbonyl, Niedrigaralkoxycarbonyl, Amino, Niedrigalkylamino, Niedrigdialkylamin, oder Acylamino sein kann;

substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel R^(CHg)-Q-(CH₀) , worin η 0-2 ist, m 1-3 ist, R. Aryl oder Heteroaryl, gegebenenfalls substituiert durch Amino, Niedrigdialkylamino, Niedrigalkylamino, Hydroxy, Hydroxyniedrigalkyl, Aminoniedrigalkyl, Trihalogenniedrigalkyl, Cyano, Nitro, SuIfonamido, Aroyl, Niedrigalkyl, Halogen, Dihalogen und Niedrigalkoxy ist, und Q 0, S, N-R-g, CONR_C, NR_CCO, CH=CH, worin R_ß Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl, Aralkyl, Niedrigalkanoyl oder Aroyl ist, und Rq Wasserstoff oder Niedrigalkyl ist, bedeutet; Aryl (wie Phenyl, Naphthyl oder Biphenyl); substituiertes Aryl, worin der Substituent Nie'drigalkyl, Aminoniedrigalkyl, Niedrigalkoxy, Aryloxy, Aroyl, Hydroxy, Halogen oder Dihalogen ist; Aralkyl oder Heteroaralkyl einschließlich verzweigter Niedrigalkylgruppen (wie 2,2-Dibenzyläthyl); substituiertem Aralkyl oder substituiertem Heteroaralkyl, einschließlich verzweigter Alkylgrüppen, worin.die Niedrigalkylgruppen substituiert sein können durch Amino, Acylamino oder Hydroxyl und die Aryl- und Heteroarylgruppen substituiert sein können durch Halogen, Dihalogen, Niedrigalkyl, Hydroxy, Niedrigalkoxy, Aryloxy,

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238350 A

Aroyl, Arylthio, Amino, Aminoniedrigalkyl, Niedrigalkanoylamino, Aroylamino, Niedrigdialkylamino, Niedrigalkylamino, Hydroxy, Hydroxyniedrigalkyl, Trihalogenniedrigalkyl, Nitro, Cyano oder SuIfonamido; und die pharmazeutisch brauchbaren Salze davon.

Die Niedrigalkylgruppen, die durch jegliche der Variablen dargestellt werden, stellen, falls nicht anders angegeben, gerade, verzweigte und ungesättigt-kettige Kohlenwasserstoffreste mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen dar, beispielsweise Methyl, Äthyl, Propyl, Isopropyl, Butyl, Isobutyl, t-Butyl, Pentyl, Isopentyl, Hexyl oder Vinyl, Allyl, Butenyl und dergleichen. Die Aralkyl- und Heteroaralkylgruppen, die durch jegliche der vorstehenden Variablen dargestellt werden, weisen 1 bis 6 Kohlenstoffatome in deren Alkylteil auf und umfassen beispielsweise Benzyl, Phenäthyl, 3>5-Diphenylpropyl, 3-Iudolylmethyl und dergleichen. Halogen bedeutet Chlor, Brom, Jod oder Fluor. Aryl stellt, wenn es in einem der Reste vorhanden ist, falls nicht anders angegeben, Phenyl, Naphthyl oder Biphenyl dar. Aroyl umfaßt Benzoyl, 1-Naphthoyl und dergleichen. Heteroaryl umfaßt beispielsweise Indolyl, Thienyl, Imidazolyl, Furyl, Benzimidazo-IyI, Pyridyl, Chinolinyl, Isochinolinyl und Benzothienyl. Acylamino bezeichnet Niedrigalkanoylamino- und Aroylaminogruppen, wie beispielsweise Acetylamino, Benzoylamino und dergleichen.

Bevorzugt sind solche Verbindungen der Formel I, worin R und Rp Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl oder Aralkyl s ind; und R_x. die Bedeutung hat von Alkyl mit 1 bis 10 Kohlenstoff-.

atomen, einschließlich verzweigter, cyclischer¹ und ungesättigter Alkylgruppen;

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substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Hydroxy, Niedrigalkylthio, Amino, Alkylamino, Niedrigdialkylamino und Acylamino sein kann; substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel E_n(CHp)-Q-(CHo) - worin η 0-2 ist, m 1-3 ist, R. Aryl oder Heteroaryl, gegebenenfalls substituiert durch Alkyl, Halogen, Dihalogen, Amino, Cyano, Hydroxy oder Alkoxy ist und QO, S, N-E-g, CONR₀, NR₀CO oder CH=CH ist, worin Rg Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aralkyl, Niedrigalkanoyl oder Aroyl ist und R₀ Wasserstoff oder Niedrigalkyl ist;

Aralkyl oder Heteroaralkyl einschließlich, verzweigter Niedrigalkylgruppen;

substituiertem Aralkyl oder substituiertem Heteroaralkyl einschließlich verzweigter niedriger Alkylgruppen, worin die Niedrigalkylsubstituenten Amino, Acylamino oder Hydroxy sein können und die Aryl- und Heteroarylsubstituenten Niedrigalkyl, Halogen, Dihalogen, Amino, Cyano, Hydroxy, Niedrigalkoxy, Aminoniedrigalkyl oder Hydroxyniedrigalkyl sein können.

Noch bevorzugter sind solche Verbindungen der Formel I, worin

R und Sp unabhängig Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl oder Aralkyl sind; und

R^ die Bedeutung hat von Alkyl mit 1-10 Kohlenstoffatomen einschließlich verzweigter Alkylgruppen; substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Amino, Acylamino oder Niedrigalkylthio sein kann; substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel R^ (C^)_n-Q-(C^)_1n-, worin η 0-1 ist, m 1-2 ist, R. Phenyl, gegebenenfalls substituiert durch Halogen, Dihalogen, Alkoxy oder Cyano ist und Q 0 oder S ist; Aralkyl oder Heteroaralkyl ;

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ο ο Q ο π, π Α

«£. O *J O ,j U H

substituiertem Aralkyl oder substituiertem Heteroaralkyl worin die Aryl- und Heteroarylsubstituenten Halogen, Dihalogen, Cyano, Hydroxy, Hydroxyniedrigalkyl, Amino und Aminoniedrigalkyl sind.

Besonders bevorzugt sind Verbindungen der Formel I, worin

H und H₂ unabhängig Wasserstoff, Niedrigalkyl mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Phenyl oder Benzyl sind; und IL die Bedeutung hat von Alkyl mit 1-8 Kohlenstoffatomen einschließlich verzweigter Alkylgruppen; substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Amino oder Niedrigalkylthio sein kann-, substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel E.(GHp) -Q-(CHo)_-, worin η O ist, m Λ ist, R₄ Phenyl ist und Q O oder S ist; Aralkyl, worin das Aryl Phenyl oder Naphthyl ist und die Alkylgruppe 1 bis 3 Kohlenstoffatome aufweist, oder Heterοaralkyl, worin die Heteroarylgruppe Indol, Thiophen, Imidazol, Pyridin, Ghinolin oder Isochinolin ist und die Alkylgruppe 1 bis 3 Kohlenstoffatome aufweist; substituiertes Aralkyl, worin das Aryl eine Phenylgruppe ist, das Alkyl 1 bis 3 Kohlenstoffatome enthält und die Phenylsubstituenten Halogen, Hydroxy, Phenoxy, Niedirigalkoxy, Amino oder Aminomethyl sein können.

Die vorstehend genannten bevorzugten, bevorzugteren und besonders bevorzugten Verbindungen umfassen auch die pharmazeutisch brauchbaren Salze davon.

Die Produkte der Formel (I) können hergestellt werden aus dem bicyclischen Zwischenprodukt VIII und aus den ³^ getrennten bevorzugten Diastereomeren von VIII, d. h. Villa und VIIIb. Die Synthese der Verbindung VIII kann

— 5 —

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durchgeführt werden ausgehend von beispielsweise 2(S)-Amino-6-hydroxyhexansäure-II, wie in dem nachstehenden Reaktionssenema I gezeigt, worin E^ wie vorstehend defi

niert ist.

HEAXTIONSSCHEMA I

COOH

II

III

COOH

-CHO

IV

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3 8 ό

CO₂R₂

Villa

VIIIb

Wie in dem vorstehenden Reaktionsschema I gezeigt, wird das "bekannte Ausgangsmaterial II als Phthalimidoderivat III geschützt und mit Pyridiniumdichromat zum Aldehyd 5-5Ormyl-2(S)-phthalimidopentansäure-IV oxidiert- Die Kondensation mit einem Ester von R-Cystein führt zu einem Diastereomerengemisch der Thiazolidine^ V, das bei Behandlung mit N-Athoxycarbonyl-2-äthoxy-1,2-dihydrochinolin einen Eingschluß eingeht unter Bildung von S, R, R(VI)- und S, S, R(VIl)-methyl-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazol<£3 ,2-a]-azepin-3-carboxylat. Die Isomeren werden durch Flüssigkeitschromatografie getrennt und die Schutzgruppen werden durch Behandeln mit Hydrazin entfernt unter Bildung der Aminoester YIIIa und VIIIb. Die Estergruppe kann anschließend mit verdünntem Alkali entfernt werden unter Bildung der Säuren (R₂=H) von Villa und VIIIb.

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Wie aus dem nachstehenden Seaktionsschema II zusammengefaßt, können die Produkte der Formel I hergestellt werden aus dem Diastereomerengemisch von amino-cyclischen Lactamen VIII oder aus diastereomer reinen Verbindungen Villa und VIIIb durch reduktive Alkylierung dieser Zwischenprodukte mit oc-Ketosäuren oder a-Ketoestern IX. Bei diesen Alkylierungen verwendet man typischerweise Natriumcyanborhydrid unter neutralen Bedingungen, jedoch ist es auch möglich, Hydride zu verwenden, die optisch aktive Liganden oder sterisch voluminöse Liganden tragen, die ausgewählt sind, um die stereochemische Steuerung dieser Reduktionen zu verbessern-Alternativ können die reduktiven Alkylierungen erzielt werden durch katalytisches Hydrieren über ΛΟ % Palladium-auf-Kohle oder anderen geeigneten Katalysatoren.

Die Endstufen in diesen Synthesen liegen in der Trennung der gewünschten Diastereomeren durch Chromatografie oder Kristallisieren und der Entfernung von Schutzgruppen, falls vorhanden, durch Standardverfahren. Werden identische Diester der Formel I gewünscht, so können sie beispielsweise hergestellt werden aus Disäuren I (^=Ro=H) unter Verwendung der gewünschten Alkohole unter wasserfreien sauren Bedingungen.

30

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38350 4

HEAXTIONSSCHEMA II

R₁-CH-HN

viii

R₁COCO₂R

IX

R₁-CH-HN

In dem folgenden Reaktionsschema III ist ein alternativer Weg zu den Verbindungen der Formel I dargestellt, der eine Variation der Reaktionsfolge, die in den ßeaktionsschemata I und II dargestellt wird, umfaßt. Im Reaktionsschema III wird die reduktive Alkylierung unter Verwendung von IX am Zwischenprodukt X durchgeführt, gefolgt von dem Ringschluß des Zwischenprodukts XII unter Bildung der Produkte der Formel I nach Chromatografie und Entfernen der Schutzgruppen- In dieser Folge sind R, R. und R₂ wie vorstehend definiert (mit der Ausnahme R, R₂^H) und Z ist gegebenenfalls Wasserstoff oder eine geeignete Schutzfunktion, wie "beispielsweise die Formylgruppe. Die Ringbildung und reduktiven Alkylierungsreaktionen werden unter im wesentlichen den gleichen Bedingungen durchgeführt, wie sie vorstehend j__n £_eEL Reaktionsschemata I und II verwendet und beschrieben werden.

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¹ 238 3 10

ίο

15

20 fiEAKTIONSSCHEKA III

lti"

CO₂R₂

CO₂H

,Ν*Ίθ.

N.

BOC

u»iH

R₁COCO₂R IX

25

30

35

XI

Rn

CO₂R CO₉H XII

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Das Zwischenprodukt VIII weist' drei asymmetrische Kohlenstoff atome auf: eines trägt die ITHp-Gruppe; ein anderes trägt den Wasserstoff an der Hing-Verbindung; und ein drittes trägt die CQ^IL-j-Gruppe. Die bevorzugte absolute Konfiguration an diesen Zentren ist 6(S), 9a(H), 3(H)(VIIIa) und 6(S), 9a(S), 3(H)(VIIIb).

In der Formel I ist auch das Kohlenstoffatom, das H. trägt, asymmetrisch (E.^H). Beide Isomeren in dieser Stellung weisen die gleiche biologische Aktivität auf, obwohl die natürliche L-AminoSäurekonfiguration bevorzugt ist. In den meisten Fällen ist die absolute Konfiguration an diesem Zentrum die (S)-Konfiguration.

Bevorzugte Diastereomeren werden durch Chromatografie oder Kristallisation von Zwischenprodukten oder den Endprodukten oder ihren Salzen isoliert. Man kann die Zwischenprodukte auch unter Anwendung von optisch aktiven Salzen oder Basen trennen. Schließlich können falls gewünscht - die erfindungsgemäßen Verbindungen auch als ein Gemisch ihrer Enantiomeren oder Diastereomeren verwendet werden.

25 .

Die cc-Ketosäuren und ct-£eto ester IX, die beim erfindungsgemäßen Verfahren verwendet werden, sind auf diesem Gebiet bekannt und können nach verschiedenen bekannten Methoden hergestellt werden. Beispielsweise können

30 Synthone, wie

in a-Ketosäuren oder -Ester umgewandelt werden unter Anwendung von Methoden einschließlich der Alkylierung,

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gefolgt von der Hydrolyse, wie in der Literatur beschrieben. Ein ausgezeichnetes Verfahren besteht in der Reaktion von Grignard-Reagentien R^MgX mit ClCOCCuI oder lOoCCOpY. Eine weitere Methode umfaßt die Kondensation von substituierten Essigsäureestern mit Diäthyloxalat, gefolgt von der hydrolytischen Decarboxylierung unter sauren Bedingungen, unter Erzielung von a-Ketosäuren.

Die sorgfältig gesteuerte saure Hydrolyse in Alkohol von Acylcyaniden, die hergestellt werden aus Säurechloriden und Kupfer(I)-cyanid, erweist sich ebenfalls als ein durchführbarer Syntheseweg zu ct-Ketοestern. Auch nukleophile Verschiebungsreaktionen an Chlor- oder Brom-Brenztraubensäure (Ester) können zur Herstellung verschiedener interessanter a-Ketosäuren (Ester) verwendet werden. In diesen Formeln stellt Y eine Gruppe, wie Niedrigalkyl oder Benzyl dar und Schutzgruppen werden - falls notwendig - in der Gruppe R^ verwendet, wenn eine eingreifende Funktion vorhanden ist.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen bilden Salze mit verschiedenen anorganischen und organischen Säuren und Basen, die- ebenfalls in den Rahmen der Erfindung fallen. Derartige Salze umfassen Ammoniumsalze, Alkalimetallsalze wie Natrium- und Kaliumsalze, Erdalkalimetallsalze, wie Calcium- und Magnesiumsalze, Salze mit organischen Basen, z. B. Dicyclohexylaminsalze, N-Methyl-D-glucamin , Salze mit Aminosäuren wie Arginin, Lysin und dergleichen. Auch Salze mit organischen und anorganischen Säuren können hergestellt werden, z. B. HCl,- HBr, H₂SO^, H^PO., Methansulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Kampfersulfonsäure. Die nichttoxischen physiologisch brauchbaren Salze sind bevorzugt-, obwohl auch andere Salze brauchbar sind, z. B. zum Isolieren oder Reinigen des Produkts.

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Die Salze können nach, üblichen Nethoden hergestellt werden, wie durch Reaktion der freien Säure oder der freien Base des Produkts mit einem oder mehreren Äquivalenten der geeigneten Base oder Säure in einem Lösungsmittel oder Medium, in dem das Salz unlöslich ist, oder in einem Lösungsmittel,.wie Wasser, das anschließend im Vakuum entfernt wird, oder durch Gefriertrocknen oder durch Austausch der Kationen eines vorhandenen Salzes durch ein anderes Kation an einem geeigneten Ionenaustauscherharz.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen inhibieren das Angiotensin umwandelnde Enzym und blockieren somit die Umwandlung des Decapeptids Angiotensin I zu Angiotensin II. Angiotensin II ist eine potente blutdruckerhöhende Substanz. So kann die Senkung des Blutdrucks aus der Inhibierung seiner Biosynthese resultieren, insbesondere bei Tieren und Menschen, deren Hypertension durch Angiotensin II bedingt wird. Darüber hinaus zersetzt das umwandelnde Enzym die Vasodepressossubstanz Bradykinin. Daher können Inhibitoren des Angiotensin umwandelnden Enzyms· den Blutdruck auch durch. Potenzieren von Bradykinin erniedrigen. Zwar ist die relative Bedeutung dieser und anderer möglicher Mechanismen noch zu ergründen, jedoch sind Inhibitoren für das Angiotensin umwandelnde Enzym wirksame antihypertensive Mittel bei vielen Tiermodellen und sind klinisch brauchbar, beispielsweise bei vielen menschlichen Patienten mit renovasculärer, maligner und essentieller Hypertension. Vergleiche beispielsweise D. W. Cusman et al., Biochemistry, 16, 54-84 (1977).

Die Bewertung der Inhibitoren für umwandelndes Enzym erfolgt.nach in vitro Enzyminhibierungsassays.

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Beispielsweise ist eine wirksame Methode, die von Y. Piquilloud, A. Reinharz und M. Roth, Bioehem. Biophys. Acta, 206, 136 (1970), bei der die Hydrolyse von Carbobenzyloxyphenylalanylhistidinylleucin gemessen wird. In-vivo-Bewertungen können beispielsweise mit normotensiven Ratten durchgeführt werden, die mit Angiotensin I nach der Technik von J. R. Weeks und J. A. Jones, Proc'. Soc. Exp. Biol. Med. , 104, 646 (i960)

gereizt wurden, oder am hohen-Renin-Rattenmodell, wie dem von S. Koletsky et al., Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 125, 96 (1967).

Die erfindungsgemäßen Verbindungen sind somit brauchbar als Antihypertensiva bei der Behandlung von hypertensiven Säugern, einschließlich Menschen, und sie können zur Erzielung der Verringerung des Blutdrucks durch Formulierung zu Zusammensetzungen verwendet werden, wie Tabletten, Kapseln oder Elixieren zur oralen Verabreichung oder in sterilen Lösungen oder Suspensionen zur parenteralen Verabreichung. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können an Patienten, die eine derartige Behandlung benötigen, in einem Dosisbereich von 0,5 bis 100 mg pro Patient, im allgemeinen verabreicht

während mehrerer Male, so daß sich eine Gesamttagesdosis von 0,5 bis 400 mg pro Tag ergibt, verabreicht werden. Die Dosis variiert je nach der Schwere der Erkrankung, dem Gewicht des Patienten und anderen Paktoren, die dem Fachmann auf diesem Gebiet geläufig sind.

Häufig ist es vorteilhaft, erfindungsgemäße Verbindungen in Kombination mit anderen Hypertensiva und/oder Diuretika zu verabreichen. Beispielsweise können die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination verabreicht werden mit Verbindungen, wie Amilorid, Atenolol,

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Bendroflumethiazid, Chlorothalidon, Chlorothiazid, Glonidin, Cryptenaiiiinacetat und.Cryptenamintannate, Deserpidin, Diazoxid, Äthacrynsäure, Furosemid, Guanethidensulfat, Hydralazinhydrochlorid, Hydrochlorthiazid, Hydroflumethiazid, Metolazon, Metoprololtartrat, Methy clothiazid, Methyldopa, MethyldopathydroChlorid, Minoxidil, (S)-I-£[2-(3 ,4-Dimetiioxypnenyl)-ätliylJ amino-3-£C4-(2-thienyl)-1H-imidazol-2-yl]-piienoxy^- 2-propanol, Polythiazid, dem Pivaloyloxyäthylester von Wethyldopa, Indacrinon und verschiedenen Verhältnissen seiner Enantiomeren, Hifedipin, Verapamil, Diltiazam, Plumethiazid, Bendroflumethiazid, Atenolol, (+)-4-^3-{[2-(1-Hydroxycyclohexyl)-äthyl]-4-oxo-2-thiazolidinyl·^- propyl}-benzoesäure, Bumetanid, Prazosin,.Propranolol, Rauwolfia serpentina, Eescinnamin, Reserpin, Spirοnolacton, Timolol, Trichlormethiazid, Benzthiazid, Chinäthazone, Tricrynafan, Triamteren, Acetazolamid, Aminophyllin, Gyclothiazid, Merethoxylline procaine und dergleichen, sowie Gemischen und Kombinationen davon.

Typischerweise können die individuellen täglichen Dosierungen für diese Kombinationen im Bereich von etwa 1/5 der minimalen empfohlenen klinischen Dosierungen bis zu den maximalen empfohlenen Dosierungen für die Gesamtheit liegen, wenn sie einzeln verabreicht werden.

Um diese Kombinationen zu veranschaulichen kann eines der erfindungsgemäßen Antihypertensiva, das klinisch

im Bereich von 0,5 bis 100 mg pro Tag wirksam ist, * wirksam kombiniert werden zu Niveaus im Bereich von 0,1 bis 100 mg pro Tag mit folgenden Verbindungen in dem angegebenen Dosisbereich pro Tag: Hydro-chlorthiazid (10-100 mg), Timolol (5-60 mg), Methyldopa (65-2000 mg), dem Pivaloyloxyäthylester von Methyldopa (30-1000 mg),

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Indacrinon und verschiedenen Verhältnissen seiner Enantiomerer (25-150 mg) und (+)-4-{3-{[2-(i-Hydroxycyclohexyl)-äthyl]-4-oxo-2-thiazolidinyl}-propyl}- benzoesäure (10-100 mg)·.

Darüber hinaus sind die Dreif ach-Arzneimittelkombinationen von Hydrochiorthiazid (10-100 mg) plus Timolol (5-60 mg) plus Inhibitor für das umwandelnde Enzym gemäß der Erfindung (0,5-100 mg) oder Hydrochlorthiazid (10-100 mg) plus Amilorid (5-20 mg) plus Inhibitor für das umwandelnde Enzym gemäß der Erfindung (0,5-100 mg) wirksame Kombinationen zur Steuerung des Blutdrucks bei hypertensiven Patienten. Natürlich können diese Dosie-~ rungsbereiche auf einer Einheitsbasis eingestellt werden, je nach Notwendigkeit, die unterteilte tägliche Dosis zu ermöglichen und, wie vorstehend erwähnt, variiert die Dosis je nach der Natur und der Stärke der Erkrankung, dem Gewicht des Patienten, spezieller Diäten und anderer Faktoren.

Typischerweise werden die vorstehend gezeigten Kombinationen zu pharmazeutischen Zusammensetzungen wie nach-.stehend diskutiert formuliert.

Etwa 0,1 bis 50 mg einer Verbindung oder eines Gemischs der Verbindungen der Formel I oder eines physiologisch brauchbaren Salzes werden mit einem physiologisch brauchbaren Vehikel, Träger, Exzipienten, Bindemittel, Konservierungsmittel, Stabilisierungsmittel, Geschmacksstoff, usw., in einer Einheitsdosisform, wie sie der üblichen pharmazeutischen Praxis entspricht, compoundiert. Die Menge der aktiven Substanz in diesen Zusammensetzungen oder Präparaten ist derart, daß eine geeignete Dosis im angegebenen Bereich erzielt wird. *·

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Beispiele für die Zusätze, die in Tabletten, Kapseln und dergleichen eingearbeitet werden können, sind im folgenden aufgeführt: Ein Bindemittel, wie Traganthgummi,·Akaziengummi, Mais- bzw. Kornstärke oder Gelatine; ein Exzipient wie mikrokristalline Cellulose; ein desintegrierendes Mittel, wie Mais- oder Kornstärke, vorgelatinierte Stärke, Alginsäure und dergleichen; ein Gleitmittel wie Magnesiumstearat; ein Süßstoff wie Saccharose, Lactose oder Saccharin; ein Geschmacksstoff wie Pfefferminzöl, Wintergrünöl oder Kirsche. Venn die Dosiseinheitsform eine Kapsel ist, kann sie zusätzlich zu den Materialien des vorstehenden Typs einen flüssigen Träger wie Fettöl enthalten. Verschiedene andere Materialien können als Überzüge oder zur anderweitigen Modifizierung der physikalischen Form der Dosiseinheit vorhanden sein. Beispielsweise können Tabletten mit Schellack, Zucker oder beidem überzogen sein. Ein Sirup oder Elixier kann die aktive Verbindung, Saccharose als Süßstoff, Methyl- und Propylparabene als Konservierungsmittel, einen Farbstoff und einen Geschmacksstoff, . wie Kirschen- oder Orangenaroma, enthalten.

Sterile Zusammensetzungen zur Injektion können nach üblicher pharmazeutischer Praxis formuliert werden, durch Auflösen oder Suspendieren der aktiven Substanz in einem Vehikel, wie Wasser zur Injektion, einem natürlieh vorkommenden pflanzlichen Öl, wie Sesamöl, Kokos-

nußöl, Erdnußöl, Baumwollsamenöl, usw., oder einem

synthetischen Fettvehikel, wie Äthyloleat oder dergleichen. Puffer, Konservierungsmittel, Antioxidationsmittel und dergleichen können je nach Erfordernis eingearbeitet werden

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Die folgenden Beispiele dienen zur Erläuterung der Erfindung und stellen besonders bevorzugte Ausführungsformen

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dar. Die bevorzugten Diastereomeren dieser Beispiele werden durch übliche Säulenchromatografie oder fraktionierte Kristallisation isoliert. Palis nicht anders angegeben, beziehen sich alle Temperaturen auf Grad Celsius.

BeisOJel 1 10

6-Hydroxy-2(S)-phthalJjnidohexansäure

4,82 g Natriumcarbonat und 6,70 g 2(S)-Amino-6-hydroxyhexansäure wurden in 70 ml Wasser gelöst und mit 9,98 g N-Carbäthoxyphthalimid behandelt. Das Gemisch wurde 1,5 Stunden gerührt und anschließend zur Entfernung von nicht umgesetztem N-Carbäthoxyphthalimid filtriert. Das Filtrat wurde gekühlt und mit 6 η HCl angesäuert. Die weiße Ausfällung (10,6 g) wurde durch Filtrieren isoliert und aus Wasser umkristallisiert unter Bildung von feinen Nadeln vom Pp. 162-163; ^ΐψ° = -36,3° (MeOH, c = 2,0). Das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (4:1 Äthylacetat:Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck an, E_f = 0,67. Das ¹H NME-Spektrum (dg-DMSO)

zeigte ein Singulett bei <$7,9O (4H), Tripletts bei S 4,77 (1H, J = 7,9 Hz) und <f3,36 (2H, J = 6,0 Hz) und Multipletts, zentriert bei 2,15 (2H) und 1,40 (4H).

Analyse auf C^H^NO^:

berechnet: C 60,64 H 5,4-6 N 5,05 gefunden: C 60,69 H 5,44 N 4,97

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Beispiel 2

5-Formyl-2 (S) -phthalimidopent ansäure

g 6-Hydroxy-2(S)-phthaiimidohexansäure wurden in 145 ml CH₂Cl₂, die 2,26 ml Pyridin enthielt, gelöst. 1,95 S Pyridiniumdichromat wurden zugesetzt und das Gemisch wurde über Nacht unter Stickstoff gerührt. Durch Zusatz zu 200 ml Äthylacetat und Filtrieren wurden Chromsalze entfernt. Das Filtrat wurde unter Vakuum konzentriert. Der Rückstand wurde in 250 ml Äthylacetat erneut gelöst und die Lösung wurde erneut filtriert.

Das Filtrat wurde schließlich durch einen MgSO^-Pfropfen geleitet, um Spurenmengen von Chromsalzen zu entfernen, , und konzentriert unter Bildung eines weißen Feststoffs, 0,475 g; Fp. 219-22°; [α] ψ° = -41,6° (THF, c=1,5). Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (4:1 Äthylacetat:Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck bei R = 0,79- Das ¹H NMR-Spektrum (d₆~DMS0) zeigte Tripletts bei 6 9,65 (1H) und S4,85 (1H, J = 7,5 Hz), ein Singulett bei & 7,95 (4H), und ein breites Multiplett bei <S 0,9 - 2,50 (6H) ppm. Das ¹^C NMR-Spektrum (d_&- DMSO) zeigte einzelne Absorptionen bei 202,9, 170,5, 167,5, 134,9, 131,3, 123,5, 51,7, 42,4, 27,8 und 18,7 ppm.

Analyse auf C^H. .,NO₁-:

berechnet: C 61,09 H 4,76 N 5,09 30

gefunden: C 60,93 H 5,05 N 5,39-

Beispiel 3

Alternative Synthese für 5-Formyl-2(S)-phthalimido-35

ρentansäure

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23 8 3 50 4

5,0 g 6-Hydroxy-2(S)-phthalimidohexansäure wurden in einem Gemisch von 90 ml Methanol und 9 ml Wasser gelöst. Zu dieser Lösung wurde eine wäßrige Lösung von 0,5 m Casiumcarbonatlosung (18 ml) gefügt und das Gemisch wurde einige Minuten gerührt. Der größte Teil des Methanols wurde im Vakuum entfernt und der resultierende wäßrige Rückstand wurde gefriergetrocknet. Das lyophilisierte Material wurde in 70 ml DMF gelöst und mit 3,08 g Benzylbromid behandelt. Nach dem Rühren unter Stickstoff während 6 Stunden wurde das Reaktionsgemisch mit 4-50 ml Wasser verdünnt und wiederholt mit Äthylacetat extrahiert.- Die organischen Schichten wurden dann mit Wasser rückgewaschen, getrocknet (NapSO^) und konzentriert unter Bildung von 6,58 g Benzyl-6-hydroxy-2-(S)-phthalimidohexanoat. Durch Umkristallisieren aus Äther erhielt man einen weißen Feststoff vom Fp. 106,5-108°; [α] ψ° -27,6° (MeOH, c=1,77).

4,0 g Benzyl-6-hydroxy-2(S)-phthalimidohexanoat wurden in CH2CI2 gelöst und mit 3,64 g Pyridiniumchlorchromat behandelt. Das Reaktionsgemisch wurde unter Stickstoff 4 Stunden gerührt und anschließend mit 116 ml Äther verdünnt. Das Gemisch wurde durch einen Celite-Pfropfen filtriert und unter Bildung eines Öls konzentriert. Dieses Öl wurde durch eine kurze Florisilsäule mit Äther als Eluiermittel geführt. Durch Konzentrieren und Trocknen im Vakuum erhielt man 3,16 g reines Benzyl-5-formyl·?

2(S)-phthalimidopentanoat; Ca] jp° =-18,6° (CH₂Cl₂, c=4,1); IR (rein): 2730 cm"¹

4,72 g Benzyl-5-formyl-2(S)-phthalimidopentanoat wurden in 230 ml Äthylacetat gelöst und bei einem Überdruck von 0,34- bar (5 psig) Wasserstoff über 0,82 g 10 % Palladium-auf-Kohle hydriert. Nach der Aufnahme von

- 20 -

16605Ϊ

1 Äquivalent Wasserstoff wurde der Katalysator durch Filtrieren entfernt. Durch Entfernen des Lösungsmittels erhielt man 3,64- g 5-^ormyl-2(S)-phthalimidopentansäure.

Beispiel 4- '

Methyl-2-(4-^!-carboxyl'-phthalimidobutyl)-4(B)-thiazolidincarboxylat

Eine Lösung von 1,71 g L-Cysteinmethylester und 3,^9 g 5-3?ormyl-2(S)-phthalimidopentansäure in 120 ml Tetrahydrofuran wurde unter Stickstoff 2,5 Stunden gerührt und anschließend unter Bildung eines weißen Schaums zur Trockene gebracht. Dieser Rückstand wurde in 250 ml Chloroform gelöst und mit Wasser (2 χ 30 ml) gewaschen. Die vereinten wäßrigen Schichten wurden mit Chloroform (2 χ 30 ml) rückextrahiert. Die organischen Schichten

wurden getrocknet (Na₂SO^) und anschließend im Vakuum konzentriert unter Bildung von 4-,83 g eines weißen Schaums. Das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (4:1 Äthylacetat Essigsäure) zeigte einen Hauptfleck bei B.£ = 0,72. Die exakte Massenmessung zeigte ein Molekularion bei 392.1024- (berechnet 392.104-1). Das ¹H NME-Spektrum (CDCl₃) zeigte ein Multiplett bei <£ 7,72 (4-H) und ein Singulett bei S 3,78 (3H)

Analyse auf C₁₃H₂₀Ii₂O₆S-I/2H₂O:

berechnet: C 53,85 H 5,27 N 6,98 S 7,99 30

gefunden: C 54-,OO H 5,30 N 6,58 S 7,61

- 21 -

16605Y -22

23 8 3 5

Beispiel 5

. Methyl-C3R-(3α,6α,9aa) ]-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazoloL3,2-a]-azepin-3-carboxylat und Methyl-[3R-(3&, 6a,9aß) ]-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazoli-3 ,2-a]-azepin-3-carboxylat

677 mg des Gemischs von diastereomeren Thiazolidinen, das in Beispiel 4 erhalten wurde und 469 nig N-Äthoxycarbonyl-2-äthoxy-1,2-dihydrochinolin (EEDQ) wurde in 30 ml Tetrahydrofuran gelöst und bei Raumtemperatur über Nacht unter Stickstoff gerührt. Durch Konzentrieren erhielt man einen klaren Rückstand, der in 175 ^ml Äthylacetat gelöst und mit 0,5 π verdünnter Chlorwasserstoffsäure, 5 % Natriumbicarbonatlösung, Wasser und Salzlösung gewaschen wurde. Der Rückstand wurde nach dem-Trocknen mit ITa₀SO, an Siliziumdioxidgel (Eluiermittel 1:1 Äthylacetat:Hexan) chromatografiert unter Bildung eines Isomerengemischs mit einem Gewicht von 3^-θ mg. Die Diastereomeren wurden an einer Whatman-ODS-3-Umkehrphasensäule getrennt unter Vervendung eines 70:30 Wasser-Acetonitril-Gemischs als Eluiermittel.

Die erste aus der Säule eluierte Komponente war Methyl-[ 3R-(3<2i6a,9aa)]-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazolo [3,2-a]-azepin-3-carboxylat (9a(S)-Isomeres), 141 mg. Durch Umkristallisieren aus Äthylacetat/Hexan erhielt

man feine weiße Nadeln vom Pp. 159,5-61°; Ca] Jp =

-202,1 (GHCl₅); 300 MHz ¹HNMR (CDCl₃) <$-1 ,99 (>, 3H), 2,29 (m, 2H), 2,94 (m, 1H), 3,27 (1/2 ABq, J_AB = 12 Hz, ^Jax = 7 Hz,-1H), 3,16 (1/2 ABq, J_AB = 12 Hz, ^JBX ^{= 7 Hz}' ^1H)' ³'^{75 (s}' ^3H)' ⁵'^{01 (d}' ^{J =} 12 Hz, 1H), 5,21 (t, J = 7 Hz, 1H), 5,27 (dd, J = 9,5 Hz, J = 4 Hz, 1H), 7,75 (m, 2H), 7,88 (m, 2H); IR (KBr):

1710 und 1650 cm"¹

- 22 -

16605Y 23

238 3 50 4

Analyse auf C₁₈H₁₈N₂O₅S:

berechnet: G 57,74 H A-,84 N 7,48 S 8,57 gefunden: C 57,70 H 4,87 N 7,41 S 8,45

Die zweite Komponente, die aus der Säule eluiert wurde, war MethylC3fi-(3^a,6^a,9aß)]-6-phthalimidooctahydro-5-oxo thiazolo[3,2-a]-azepin-3-carboxylat (9a(E)-Isömeres, dessen Konfiguration durch Röntgenstrahlenanalyse bestimmt wurde), 177 mg· Durch Umkristallisieren aus Äthylacetat/Hexan erhielt man feine Nadeln vom ]?p. 157-157,5°; Ca] ψ° = -32,2 (CHCl ); 300 MHz ¹HNME

(CDCl,) 6 1,75-2,26 °

(m, 5H), 2.85 (q, J = 12Hz, IH)), 3.22 (1/2ABq, = 12Hz, AV_AB = 21.7; £_Αχ = 6.5 Hz , IH), 3.29 (1/2ABq. J_AB= 12 Hz, AV^ = 21.7; £_βχ = 2 Hz,

IH), 3.7 9 (s, 3H) , 4.99 (d, J = 12Hz, IH) , 5.15 (d, J = lOHz, IH), 5.34 (dd, £_Αχ = 6.5Hz, £_βχ = 2Hz, IH), 7.74 (m,2H), 7.87 (m,2H); I.R. (KBr):1750, 1710, und 16 4 0 cm" .

Analyse auf C₁₈H₁₈IT₂O₅S:

berechnet: C 57,74 H 4,84- N 7,48 S 8,57

gefunden: C 58,04 H 4,90 N 7,43 S 8,62

Beispiel 6

Äthyl-Ü3ß-(3a,6a,9aa)l-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3~carboxylat und Äthyl-C3E-(3a,6a, 9aß)]-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazoli£3,2-a]-azepin-3-carboxylat

Eine Lösung von 0,205 g L-Cysteinäthylester und 0,379 g 5-iOrmyl-2(S)-phthalimidopentansäure in 10 ml trockenem

- 23 -

16605Y

23 8 ^ ^

Tetrahydrofuran wurde 2 Stunden unter Stickstoff gerührt. Durch Konzentrieren des Heaktionsgemischs erhielt man einen Schaum. Dieser Rückstand wurde in 150 ml Chloroform gelöst und mit Wasser (2.x 25 ml) gewaschen. Die wäßrigen Schichten wurden mit Chloroform (2 χ 25 ml) rückgewaschen. Die organischen Schichten wurden getrocknet und anschließend unter verringertem Druck unter BiI-dung eines weißen Schaums, 0,554- g, konzentriert. Das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (4:1 Äthylacetat: Essigsäure) zeigte einen Hauptfleck bei E_ = 0,80. Dieses Thiazolidin wurde in 15 nil trockenem Tetrahydrofuran gelöst und mit N-Äthoxycarbonyl-2-äthoxy-i,2-dihydrochinolin (EEDQ) behandelt. Das Heaktionsgemisch wurde 4 Tage unter Stickstoff gerührt. Durch Konzentrieren erhielt man ein Öl, das in 150 ml Äthylacetat gelöst und mit 0,5 n Chlorwasserstoffsäure, 5 % Natriumbicarbonatlösung, Wasser und Salzlösung gewaschen wurde. Nach dem Trocknen mit NapSO. wurde das Produkt (0,681 g) an Siliziumdioxidgel chromatografiert (3:2 Hexan:Äthylacetat, H„ = 0,26) unter Bildung eines Gemischs von Diastereomeren mit einem Gewicht von 0,294 g. Die HPLC-Analyse (Umkehrphase) zeigte ein 50:50 Isomerengemisch an. Das Massenspektrum zeigte ein Molekularion bei ^QQ m/e. ¹H NMR (200MHz, CDCl₃)^ 1.28 (t, J = 7Hz) 1.32 (t, J = 7Hz)[3H], 1.68-2.40 (m, 5H), 2.82 (m, IH), 3.20 (m, 2H), 4.19 (m, 2H), 4.94 (d, J = 12Hz) 5.06-5.30 (m) [3H], 7.66 (m, 2H), 7.79 (m, 2H).

Die Diastereomeren können durch Chromatografie getrennt werden.

166O5Y 25

2383 50 4

Beispiel 7

Methyl-C3R-(3a,6a,9aß) ]-6-aminooetahydro-5-oxothiazole C 3,2-a]-azepin-3-carboxylathydrochlorid

259 mg Methyl-[3R-(3a,6a,9aß)]-6-phthalimidooctahydro-5-oxothiazolOC3,2-a]-azepin-3-carboxylat wurden in 15 ml absolutem Äthanol unter gelindem Erwärmen gelöst. 0,037 ml Hydrazinhydrat wurden zugesetzt und das Gemisch wurde Λ Tage unter Stickstoff bei Raumtemperatur gerührt. Nach dem Konzentrieren unter Vakuum, zur Trockene wurde der Rückstand mit 20 ml 0,5 m HCl bei 0 während 3 Stunden behandelt. Das ausgefällte Ehthalhydrazid wurde abfiltriert und das i'iltrat wurde gefriergetrocknet unter Bildung von 220 mg Produkt. Das Dünnschichtdiromatogramm an Siliziumdioxid (1:1 :1,:1 Äthylacetat: n-Butanol:Wasser!Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck durch Ninhydrin, R_f =0,63· ¹H NMR (200 MHz, CD OD)

S 1,8-2,18 (m, 6H), 3,30 (2H), 3,77 (s, 3H), ^,26 (d, J = 9Hz, 1H), 5,17 (dd, J = 7 Hz, J = 3,5Hz, 1H), 5,25 (t, J = 4-,5 Hz, 1H); exakte Massenmessung (freie Base), festgestellt 244-.0878, berechnet 244.0881.

Beispiel 8

C3R-(3a,6a,9aß) ]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazoloL3,2-alazepin-3-carbonsäure 30

220 mg Methyl-C3R-(3cx,6a,9aß) ]-6-aminooctahydro-5-oxothia-Z0I0C3,2-a3-azepin-3-carboxylat wurden in 5 nil CH-,ΟΗ gelöst und mit 4,3 ml 1m NaOH bei Raumtemperatur über Nacht behandelt. Das Reaktionsgemisch wurde an 15 ml stark saurem Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert unter Bildung von 133 mg

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166051 26

23 8 3 50 4

Produkt. Das Dünnschichtehromatοgramm. an Siliziumdioxid (1:1:1 :1 )Äthylacetat: η-Butanol: Wasser'..Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck bei E~ = 0,56.

Umkristallisiert aus Methanol,. Fp. 208-210° (Zers.) [α] 25° ₌ _84,5° (c=1,58, 1n HCl); Ή HME (200 MHz, D₂O)S 2,02 (m, 6H), 3,27 (d, J = 5 Hz, 2H), 4,32 (m, 1H), 4,97. (t, J = 5Hz, 1H), 5,16 (m, 1H). ₁₀. Analyse auf CqH^J^O^S: .

berechnet: C 46,94- H 6,13 N 12,17 S 13,93 gefunden: C 46,66 H 6,3^ N 12,01 S 13,69

Beispiel 9 15

Methyl-C3E-C3a,6a(S*R*) ,9aß]]-6-[ (i-methoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC 3,2-a]-azepin-3-carboxylat

Eine Lösung von 414 mg Methyl-C3E-L3a,6a, 9aß]]-6-aminooctahydro-5-oxothiazolöL3,2-a]-azepin-3-carboxylathydrochlorid in wäßrigem Methanol wurde mit 1 m NaOH auf den pH-Wert 6,25 eingestellt. Das Gemisch wurde konzentriert und anschließend erneut in 20 ml absolutem Methanol gelöst 1,42 g Methyl-2-oxo-4-phenylbutyrat und 4 g pulverisierte 3A-Molekularsiebe wurden zugesetzt. Eine Lösung von mg Natriumcyanborhydrid in 4 ml Methanol wurde, über eine Injektionsspritzenpumpe während 24 Stunden zugesetzt. Wenn die Eeaktion vollständig war, wurden die Siebe durch Filtrieren entfernt und das Filtrat wurde konzentriert. Der Eückstand wurde zwischen CH₂Cl₂ und Wasser aufgeteilt. Die CH₂C1₂-Schicht wurde getrocknet und zur Trockene konzentriert. Das Gemisch der Diastereomeren wurde durch Siliziumdioxidgelchromatografie mit 1:1 Hexan:Äthylacetat als Eluiermittel getrennt.

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16605X 27

Das erste Diastereomere (E~ = 0,23), das aus der Säule ' eluiert wurde, war Methyl-C3R-C3a,6a(E*),9aß]1-6-C(1-methoxycarbönyl-3-phenylpropyl)-amino]-ο ctahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carboxylat, 177 ^gΓ '2

NMR (200MHz, CDCl₃)& 1.52-2.14 (m, 8H), 2.71 (t, J = 8Hz, 2H), 3.18 (m, 4H), 3.66 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 4.85 (d, J = 9Hz, IH), 5.27 (dd, J = 7Hz, J = 3Hz, IH), 7.26 (m, 5H); exakte Massenmessung, festgestellt 420.1711, berechn.420.1718; [ct]^⁵° = -42.9° (CHCl₃)

Analyse auf G₂₁H₂₃Ii₂O₅S:

berechnet: C 59,98 H 6,71 N 6,66 S 7,63 gefunden: C 59,98 H 6,76 N 6,49 S 7,35

Das zweite Diastereomere (E~ = 0,29), das.aus der. Säule eluierte, war Methyl-C3E-C'3_aj6a(S').»9.aß33-6-C(i-methoxy-'carbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3-carboxylat, 290 mg; Ή NMR (200MHz, CDCl₃)^ 1.62 - 2.24 (m, 8H), 2.74 (t, J = 8Hz, 2H), 3.14 - 3.46 (m, 4H), 3.73 (s, 3H), 3.80 (s, 3H), 4.99 (d, J = 9Hz, IH), 5.28 (dd, J = 7Hz, J

OC "~

= 3Hz, IH), 7.28 (m, 5H); exakte Massenmessung, festgestellt 420.1711,berechn.420.1718; I.R. 1730 and 1650 cm" ; [a]^⁵° = -65.8° (CHCl₃).

Analyse auf C₂₁H₂₈Ii₂O₅S:

berechnet: C 59,98 H 6,71 N 6,66 S 7,63

gefunden: C 60,24 H 6,80 N 6,47 S 7,57

— 27 —

16605X 28

238 3 50 4

Beispiel 10

• C 3α,6α (S*),9aß]]-6-C(i-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC 3,2-a]-azepin-3-carbonsäure

180 mg Methyl-C3H-L3a,6a(S*) ,9aß]]-6-C (1-methoxycarbo-

IQ nyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazol·?- L"3,2-a]-azepin-3-carboxylat wurden in 2 ml CH^OH und 2 ml 1 m NaOH gelöst. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Produkt an stark saurem Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert. Die entsprechende Fraktion wurde konzentriert und im Vakuum getrocknet unter Bildung eines weißen Feststoffs, 165 mg. Umkristallisiert aus Methanol, Fp. 212-13° (Zers.); [α] ψ° = -90,0° (0,1 η NaOH, c = 0,2); IH (KBr) 1718 und 1654 cm" ; das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (1 :1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte ein einziges Produkt an, H_f = 0,78; ¹H NMH (200 MHz, dg-DMSO)<J 1,36-2,20 (m, 8H), 2,69 (m, 2H), 3,24 (m, 3H), 3,81 (d, J = 10Hz, 1H), 5,07 (dd, J = 7Hz, J = 3,5 Hz, 1H) 5,19 (d, J = 8Hz, 1H), 7,26 (m, 5H).

Das Massenspektrum zeigte ein Molekularion bei 536 m/e für die disilylierte Species. Die ßöntgenstrahlenkristallstrukturanalyse zeigte,daß die Stereochemie der Seitenkette (S) war

Analyse auf C₁QH₂^N₂O₅S - 1/2 H₃O

berechnet: C 56,84 H 6,28 N 6,98 S 7,99 gefunden: C 56,68 H 6,11 N 6,82 S 7,87

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16605Y -29

23 8 3 50 4

Beispiel 11

no]-octatLydro-5-oxotliiazoloC3 ,2-al -azepin~3-carbonsäure

100 mg MethylC3ß-[3a,6a(H*)] ,

azepin-3~carboxylat wurden in 1 ml Methanol gelöst und mit 1 ml 1m NaOH "behandelt. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Produkt an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in H₂O eluiert. Durch Konzentrieren und Trocknen erhielt man 93 ^g eines weißen Feststoffs. Umkristallisiert aus. Methanol, Fp. 250-51° (Zers.). Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (1:1 :T:1 Athylacetat:n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck, R^ = 0,73· Ca] d = -67.7° (0.1N NaOH, C = 0.2). ¹H NMR (200MHz, CD₃OD) al.68-2.36 (m, 8H), 2.75 (m, 2H), 3.24 (m, 2H), 3.68 (t, J= 5Hz, IH), 4.04 (d, J = 10 Hz, IH) , 5.04 (d, J = 9Hz, IH), 5.16 (dd, J = 5Hz, J = 3Hz, IH), 7.24 (m, 5H). Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei $36 m/e für die disilylierte Species. Analyse auf C₁QH₂₄N₂O₅S: .

berechnet: G 58,14 H 6,16 N 7,14 S 8,17 gefunden: G 57,95 H 6,22 N 6,98 S 8,12

Beispiel 12 30

L3E- L3cc,6cc(S* ,fi*) ,9aß]l-6- [(i-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino ]-octahydro-5-oxothiazolo L3,2-a l-azepin-3-carbonsäure

83 mg C3H-(3a,6a,9aß) ]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazolo L3,2-a]-azepin-3-carbonsäure und 0,32 g

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16605Y 30

ι 23 8 3 50 4

2-Qxo-4-phenylbuttersäure wurden in 5 ml Hp⁰ suspendiert und mit 1 m NaOH auf den pH-Wert 6,0 eingestellt. 4-5 mg Natriumcyanborhydrid in 2 ml HpO wurden langsam zugesetzt. Nach vollständiger Reaktion wurde das Reaktionsgemisch an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in H^O eluiert unter Bildung von 117 mg Produkt. Das Dünnschichtehromatοgramm an SiIiziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat :n-Butanol:Wasser -.Essigsäure) zeigte zwei Flecken, R_f = 0,73 und 0,78. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 536 m/e für die disilylierte Species. Ή NMS (60MHz, GD₃OD) S1,5-2,45 (m, 8H), 2,75 U, 2H), 3,25 (1, 2H), 3,60 (m, 1H), 4,1.0 (1, 1H), 5,01 (m, 2H), 7,18 (s, 5H).

Beispiel 13

C3H-L3a,6a(S*),9aß]]-6-[(1-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbon- säure und C3R-C3a,6cc(R*),9aß]]-6-[(i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a] azepin-3-carbonsäure

Eine Lösung von 345 mg C3ß-(3cc,6a,9aß)]-6-Aminoοetahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure in 10 ml H^O wurde mit verdünnter NaOH auf den pH-Wert 6,3 eingestellt. Die Lösung wurde anschließend gefriergetrocknet. Der Rückstand und 1,55 g Äthyl-2-oxo-4-phenylbutyrat wurden teilweise in 25 ml absolutem Äthanol gelöst. 3,5 g pulverisierte 3A-Molekülsiebe wurden zugesetzt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 282 mg Natriumcyanoborhydrid in 5 ml Äthanol langsam über eine Injektionsspritzenpumpe gefügt. Nach beendeter Reaktion wurde· d_ag Gemisch filtriert und das Filtrat wurde zur Trockene gebracht. Der Rückstand wurde zwischen 100 ml Wasser und

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23 8 3 50 4

50 ml Äther aufgeteilt. Die Schichten wurden getrennt. Die wäßrige Schicht wurde an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit Wasser und anschlies send 3 % Pyridin in Wasser eluiert unter Bildung des Titelprodukts als ein Gemisch der Diastereomeren vom Gewicht 638 mg. Das Dünnschichtehromatogramm an_Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen Hauptfleck vom E_f = 0,80. Die Diastereomeren wurden durch Chromatografie an Sephadex LH-20 getrennt (MeOH, 2,5^ cm χ 2 m).

Das aus der Säule zuerst eluierte Diastereomere war 1,5 C 3E-C 3a,6a(S*) ,9aß]]-6-[ (i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3 ,2-a]-azepin-3-carbonsäure vom Gewicht 338 mg; exakte Massenmessung, fest-. gestellt 420.1715, berechnet 420.1718; 'H NME (200MHs, CDGl₅) <5 1,29-Ct,- J = 6Hz, 3H)₁ 1,56-2,32 (m, 8H), 2,7^ Ct, J = 8Hz, 2H), 3,18 Cm, 1H), 3,42 (m, 3H), 3,77 (br s, 2H, austauschbar), 4,20 (m, 2H), 4,96 (d, J = 8Hz, 1H), 5,19 (br s, 1H), 7,25 (m, 5H). Das ¹³C MMR-Spektrum in CDCl,/MeOH (3:1) zeigte einzelne Absorptionen bei 174,5 172,8, 141,4, 128,7, 126,3 64,1 62,9, 61,4 60,4, 60,3, 35,7, 3^,9, 32,2, 31,9, 31,5, 28,3 und 14,4 ppm.

Das zweite aus der Säule eluierte Diastereomere war C3R-C3a,6a(E*),9aß]]-6-C(i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-aminoj-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäure mit einem Gewicht von 101 mg; exakte Massenmessung, festgestl. 420.1727, berechn. 420.1718; ¹H NME

(200MHz, CDCl₃) 61.28 (t,J= 7Hz, 3H), 1.54-2.22 (m, 8H), 2.77 (t, J = 7Hz, 2H), 3.15 (m, IH), 3.34 (m, 3H), 3.54 (br s, 2H,austauschbar) , 4.19 (q, J = % 7HZ, 2H), 4.88 (d, J = 7Hz, IH), 5.24 (d, J = 5Hz, IH), 7.27 (m, 5H).

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Beispiel 14

C 3E-C 3α, 6α (S*) ,9aß] ]-6-C (i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloL3,2-a]-azepin-3-carbonsäurehydrochlorid

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde in eine Lösung von 320 mg [3S-C3a,6aCS*),9aß]]-6-[(i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino] -octahydro-5-oxothiazolc>[ 3 _s2-a] azepin-3-carbonsäure in 30 ml Äthylacetat bei 0° eingeblasen. Die Ausfällung wurde getrocknet, Gewicht 305 mg; Fp, 224-25 ° (Zers.); [α]§⁵° = -38,5° (EtOH, c=1,2); IE (ICBr): 1730, 1690 und 1658 cm"¹; das Dünnschi cht ehr omat ο gr amm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat :n-Butanol:Wasser!Essigsäure) zeigte einen einzelnen Fleck vom R~ = 0,81

Analyse auf G₂₁ H₂₈Ii₂O₅S-HCl-I/2H₂O:

berechnet: C 5^,12 H 6,49 N 6,01 S 6,88 Cl 7,61 gefunden: C 54-,19 H 6,4-7 IT 6,07 S 6,71 Cl 7,85

Beispiel 15

- '

L3E-[3a,6a(E*) ,9aß] ]-6-C(i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoleC3,2-aJ-azepin-3-carbonsäurehydrochlorid

^^ Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde in eine Lösung von 120mg C3E-[3a,6a(E*),9aß]]-6-[(i-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3>2-a]-azepin-3-carbonsäure in 20 ml Äthylacetat bei 0 geblasen. Die Ausfällung wurde gesammelt, Gewicht 122 mg;

Pp. 123-25°; Ca] ψ° = -77,2° (EtOH, c = 0,6); das Dünnschichtehromatοgramm (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanols

- 32 -

16605Y 33

ι 238350 4

Wasser,Essigsäure) zeigte einen einzelnen Fleck vom H- = 0,85

Analyse auf G₂₁H₂₈N₂O^S-HCl-O,25 H₂O:

berechnet: G 54,65 H 6,« N 6,07 S 6,95 Cl 7,68 gefunden: C 54,75 H 6,40 -N 5,90 S 6,83 Cl 7,29

Beispiel 16

,2-a]-azepin-3-carbonsäure

Eine Lösung von 14-7 mg C3R-[3a ,6a (S*) ,9aß] 1-6-C (1-Äthoxycarbonyl-3-piLenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3-carbonsäurehydrochlorid in. 2,5 ml Methanol wurde mit 1,6 ml 1 M NaQH-Lösung behandelt. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Reaktionsgemisch an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert.

Durch Eluieren mit Wasser und anschließend 4 % Pyridin in Wasser konnte das Produkt gewonnen werden, Gewicht 126 mg. Dieses Material war identisch mit dem in Beispiel 10 beschriebenen.

° Beispiel·' 17

Äthyl-C 3£-C 3a ,6a (S*),9aß]]-6-C(i-äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[ 3,2-a] azepin-3-carboxylathydroChlorid

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung von 116 mg [ 3H-[ 5x,6a (S*),9aßl] -6-C(1-Äthoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino] -octahydro-5-oxothiazoiöC 3,2-a] azepin-3-carbonsäure in 30 ml absolutem Äthanol bei während 10 Minuten geblasen. Das Reaktionsgemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und anschließend

- 33 -

166Ο5Ϊ 34

«^ ^i O O Γ" Λ /

23 8 3 s O 4

unter verringertem Druck zur Trockene gebracht. Der Bückstand wurde zwischen 10 ml H₂O und 20 ml Äther aufgeteilt. Zu diesem Gemisch wurden 0,28 ml 1 m NaOH-Lösung gefügt. Nach wenigen Minuten wurden die Schichten getrenn Die ätherische Schicht wurde getrocknet (HapSO^,)· und anschließend konzentriert unter Bildung von 100 mg Produkt. Die Chromatografie an Siliziumdioxidgel (2:1 Hexan: Äthylacetat, H_f = 0,26) ergab 80 mg reines Produkt. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei

448. ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) ^1.32 (2 triplets, 6H), 1.60 (br s, IH), 1.68-2.20 (m, 8H), 2.75 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.28 (m, 2H), 3.4 (m, 2H), 4.25 (m, 4H), 5.01 (d, J = 10Hz₇ IH), 5.29 (dd, J = 6Hz, J = 3Hz, IH) , 7.28 (m, 5H). Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung des gereinigten Diesters in 30 ml Äther bei 0° gebläsen. Überschüssiger HCl wurde entfernt und das Titelprodukt.wurde durch Filtrieren gewonnen,

Gewicht 84 mg; Fp. 68-70°; [α] ψ°- _β .52,98° (EtOH,

c = 0,44).	C	56	2°5S	H	Jl-	90	H2O:	,72
Analyse auf C,	C	56	,4-3	H	6,	95	N 5	,4-2
berechnet:			,4-7		6,		N 5
gefunden:
Beispiel 18

]-6-aminooctahydro-5-oxothiazol0 [3,2-a]-azepin-3-carboxylat

205 mg [3B-(3a,6a,9aß)]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3~carbonsäure wurden in 2,5 ml Benzylalkohol suspendiert und mit.einem Eisbad gekühlt. 0,26 ml Thionylchlorid wurden zugesetzt. Nach wenigen Minuten wurde das Eisbad entfernt und das Gemisch wurde bei

- 34 -

166051 35

ι 238350 4

Haiamtemperatur unter Stickstoff über Nacht gerührt. 30 ml Äther wurden zugesetzt und die resultierende Ausfällung wurde gesammelt, Gewicht 313.^g* Dieses Material wurde in 20 ml H^O suspendiert und mit 0,878 ml 1 m NaOH-Lösung behandelt. Nach einigen Minuten wurde das Gemisch mit GH₂CIp (3 x 20 ml) extrahiert. Die organischen Schichten wurden getrocknet (Na₂SO^) und konzen-

IQ triert unter Bildung von 193 ^g reinem Produkt. Das Dünnschichtchromatοgramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat :n-Butanol :Wasser'.Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck vom E^ = 0,74·· Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 320 m/e. Ή NME (200 MHz, CDCl₃)^ 1.40-2.02 (m, 6H), 1.68 (br s, -NH₂), 3.15 (in/ 2H) , 3.47 (d, J= llHz , IH), 4.92 (d, J = 8Hz, IH), 5.15 (s, 2H), 5.28 (dd, J = 7 Hz, J = 3Hz, IH), 7.3 2 fs, 5H).

Beispiel 19

Benzyl-[3E-Ϊ3α,6α(3*Ε*),9aJ3]1-6-C(1-tert.-butoxycarbonyl- 3-pb.enylpropyl)-amino]-oetahydro-5-oxothiazole C3 »2-a]-azepin-3-carboxylat.

Zu einer'Lösung von 24-9 mg Benzyl-[3E-(3a,6a,9aß) ]-6-aminooctahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carboxylat und 910 mg t-Butyl-2-oxo-4— phenylbutyrat in 12 ml absolutem Äthanol wurden 2,5 g 3^-~^°l^e^^:ul^arsist^{>e un(}i 0,04-5 ml Essigsäure gefügt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 146 mg Natriumcyanborhydrid in 2,5 ml Äthanol langsam (Injektionsspritzenpumpe) gefügt. Nach beendeter Heaktion wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat wurde konzentriert. Der Eückstand wurde zwischen Wasser und CH₂Gl₂ aufgeteilt. Die organische Schicht wurde ' '

- 35 -

16605Y 36

238350 4

getrocknet (NaoSO^) und konzentriert unter Bildung eines Öls, Gewicht 1,1 g. Die Chromatografie an Siliziumdioxid (3:1 Hexan:Äthylacetat) ermöglichte die Isolierung der Diastereomeren: R*-Diastereomeres, 101 mg; exakte Massenmessung, gefunden 538.24-70; berechnet 538.2500; Ή NMR

(200MHz, CDCl₃) 1.47 (s, 9H), 1.52-2.14 (in, 8H), 2.76 (t, J = 8Hz, 2H), 3.20 (m, 4H), 4.86 (d, J = 9Hz, IH), 5.21 (q, 2H), 5.40 (dd, J = 6Hz, J = 3Hz, IH), 7.26 (m, 5H), 7.39 (s, 5H) . : S*-Diastereoisomeres, 120 mg; exakte Massenmessung, gefunden 538.24-65; berechn.

538.2500; ¹HNMR (200MHz, CDCl₃)^l.50 (s, 9H), 1.55-2.16 (m, 8H), 2.32 (br s, N-H), 2.73 (t, J= 8Hz, 2H), 3.25 (m, 4H), 4.97 (d, J = lOHz, IH), 5.22 (q, 2H), 5.34 (dd, J = 7Hz, J = 2.5Hz, IH), 7.26 (m, 5H), 7.39 (m, 5H).

Beispiel 20

3enzyl-C3R-L3a,6cc(S*) ,9a.ß] 1-6-C (i-carboxy-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazol0[3,2-a]-azepin-3-carboxylathydrochlorid

Eine Lösung von 118 mg Benzyl-[3R-C3cc,6α(S*) ,9aß] ]-6-[(1-1 ert.-butoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino J-ο et ahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carboxylat in 4- η HCl/Äthylacetat wurde bei 0° hergestellt. Die Lösung wurde anschließend bei Raumtemperatur 3 Stunden gerührt. Durch Konzentrieren und Triturieren mit Äther erhielt man die Titelverbindung, Gewicht 114- mg. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 4-82 m/e für die freie Base. Das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (4-:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck vom R_f = 0,57·

- 36 -

166051 . 37

23 8 3 50 A

(EtOH₇ c = 0.48); m.p. 111-113°; ¹H NMR (200MHz, CD₃OD) „1.72-2.48 (in, 8H), 2.89 (τη, 2H), 3.35 (m,

2H), 4.05 (t, J = 6Hz/ IH), 4.35 (d, J = 10.5 Hz,

IH) , 5.19 (m, IH) , 5.27 (q, 2H) , 5.35 (t, J = 4.5 Hz,

IH), 7.38 (m, IOH).

Analyse auf C₂₆H₅₀Ii₂O₅S-HCl:

berechnet: C 60,16 H 6,02 N 5,40

,gefunden: C 59,81 H 6,12 N 5,15

BeisOiel 21 .

Äthyl-C3R-C3a,6cc,9aß]]-6-aminooctahydro~5-oxothiazolo [5j2-a]-azepin-3-carboxylat

C3E-(3^a ₅6a,9aß)]-6-Aininooctahydro-5-oxothiazoloC3?2-a]-azepin-3-carbonsäure wurde in absolutem Äthanol, das mit wasserfreiem Chlorwasserstoff gesättigt war, bei 0° gelöst. Das Reaktionsgemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur stehengelassen. Das Gemisch wurde anschliessend zur Trockene gebrächt und der Rückstand in Wasser neutralisiert. Durch Extrahieren mit "OH₂Cl₂ erhielt man das gewünschte Produkt, dessen spektrale Eigenschaften mit seiner Struktur übereinstimmten.

Beispiel 22

Äthyl-[3R-C3cc,6a(S*R*) ,9aß] ]-6-[ (i-Carboxy-3~piienylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carboxylathydroChlorid

Zu einer Lösung von Äthyl-[3R-C3a,6cx,9aß]]-6-aminoοeta- hydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carboxylat und t-Butyl-2-oxo-4—phenylbutyrat in absolutem Äthanol wurden

- 37 -

166051 38

238 3 50 4

pulverisierte 3A-Molekularsiebe und 1 Äquivalent Essigsäure gefügt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von Natriumcyanborhydrid in Äthanol langsam mittels einer Injektionsspritzenpumpe gefügt. Wenn die Reaktion beendet war, wurden die Siebe durch Filtrieren entfernt und das Piltrat wurde konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Wasser und CILjCl₂ aufgeteilt. Durch Konzentrieren der organischen Phase erhielt man ein Gemisch von a-Eetoester, a-Hydroxyester und Produkt, Äthyl-C3B-E3a,6a(S*E*),9aß]]-6-C(i-tert.-butoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazol LJ ,2-al-azepin-3-carboxylat. Die Chromatografie an Siliziumdioxid ermöglichte die Isolierung jedes Diastereomeren in hoher Reinheit. Jedes Diastereomere wurde mit 4 η HCl in Äthylacetat entblockiert unter Bildung der Titelverbindungen, die die erwarteten spektralen Charakteristika zeigten.

Beispiel 23

C3R-[3a,6a(S*R*),9aß]]-6-C(1-Benzyloxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure 25 '

Eine Lösung von 200 mg[3R-(3ct,6a,9aß)]-6-aminooctahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure in 10 ml HpO wurde mit 0,5 m NaOH-Lösung auf den pH-Wert 6,3 eingestellt. Die Lösung wurde gefriergetrocknet. Dieser Rückstand und 1,165 g Benzyl-2-oxo-4-phenylbutyrat wurden teilweise in 10 ml absolutem Äthanol gelöst. 2,25 g pulverisierte 3A-Molekularsiebe wurden zugesetzt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 164· mg Natriumcyanborhydrid in 2 ml Äthanol langsam mittels einer Injek-· tionsspritzenpumpe gefügt. Bei vollständiger Reaktion wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat wurde

- 38 -

16605X ' 39

238 3 50 4 .

konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 25 ml Äther und 25 ml Wasser aufgeteilt. Nach dem Trennen der Schichten wurde die wäßrige Phase 'mit 1 m H,PCL auf den pH-Wert 4,5 eingestellt. Dieses angesäuerte Gemisch wurde anschließend wiederholt mit Chloroform extrahiert. Der organische Anteil wurde getrocknet und konzentriert unter Bildung von 239 mg Produkt. Die Diastereomeren wurden durch Chromatografie an Sephadex LH-20 (MeOH) getrennt.

Das erste Diastereomere, das aus der Säule eluiert wurde, war das (S*)-Isomere; Gewicht 0,103 g. Das Massenspektrum zeigte ein schwaches Molekülion hei 482 m/e. Das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzelnen Heck, E_f = 0,85·

¹H NMR (20 OMHz, CD₃OD) 3 1. 52-2.24 (m, 8H), 2.65 (τη, 20^; 2H) , -.3.06-3.37 (m, 2H), 3.69 (m, 2H), 4.92 (m, IH), 5.09 (m, IH), 5.26 (q, 2H), 7.22 (m, 5H), 7.45 (m, 5H) .

Das zweite Diastereomere, das aus der Säule eluiert wurde, war das (H*)-Isomere, Gewicht 66 mg. Das Massenspektrum zeigte ein (M-1)-Ion "bei 481. Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat: n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzelnen Fleck, R_f = 0,86. ¹H NME

(200MHz, CD₃OD) ^1.50-2.14 (m, -8H)., 2.66 (in,. 2H), 3.03-3.30 (m, 3H), 3.43 (t, J = 7 Hz, IH), 4.78 (d, J = 9Hz, IH), 5.09 (m, IH), 5.20 (q, 2H), 7.22 (in, 5H), 7.42 (m, 5H).

- 39

16605Ϊ

238350 4

Beispiel 24

*),9aß]]-6-[(i-Benzyloxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazol^[3,2-a]-azepin-3-carbonsaureiiydro Chlorid

Wäßriger Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung von 85mg [3H-C3a,6a(S*),9aß]]-6-C(i-Benzyloxycarbonyl-3-phenylpropyl)-a.mino]-octahydro-5-OxothiazoloC5 , 2-alaζepin-3-carbonsäure in 10 ml Äthylacetat geblasen. Nach Entfernen von überschüssigem HCl wurde die Ausfällung gesammelt, Gewicht 93,7 mg; [a] ^ = -44,1° " (EtOH₁ c = 0,3)·

Analyse auf C₃₆H N₂O₅S-HCl:

berechnet: C 60,16 H 6,02 N 5,40 S 6,18 Cl 6,83 gefunden: C 59,78 H 6,06 N 5,25 S 6,19 Cl 6,36

Beispiel 25

C3E-[3a,6a(S*R*) ,9aß] ]-6-C(i-Methoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäure

Zu einer Lösung von 252 mg C3R-(3a,6a,9aß)]-6-Aminoοetahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure und 1,05 g Methyl-2-oxo-4-phenylbutyrat in 20 ml Methanol wurden 2,8 g pulverisierte 3A-Molekularsiebe gefügt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 205 mg Natriumcyanborhydrid in 2 ml Methanol langsam mittels einer Injektionsspritzenpumpe gefügt. Wenn die Reaktion vollständig war, wurde das Gemisch filtriert und der Pilterkuchen wurde zur Trockene gebracht. Der Rückstand wurde

H zwischen 30 ml Äther und 30 ml Wasser aufgeteilt. Die

- 40 -

16605T 41

23 8 3 50 4 '

Schichten wurden getrennt und die wäßrige Schicht wurde mit 1 m Η,ΡΟ. auf den pH-Wert 3,5 angesäuert. Die angesäuerte Schicht wurde dann wiederholt mit Chloroform extrahiert. Die Chloroformextrakte wurden getrocknet und konzentriert unter Bildung von 370 mg des Diastereomerengemisens. Die Trennung der Diastereomeren erfolgte durch Chromatografie an Sephadex LH-2O (MeOH).

'

Das erste aus der Säule eluierte Diastereomere war das (S*)-Isomere; Gewicht 0,180 g. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion "bei 478 m/e für die monosilylierte Species. ,_{H mR} .(200MHz,' CD₃OD) 6

1.74-2.28 (in, 8H), 2.77 (t, J = 7Hz, 2H), 3.26 (m, 2H), 3.70 (t, J= 6Hz, IH), 3.77 (s, 3H), 3.84 (m, IH), 5.13 (m, 2H), 7.28 (in, 5H).

Das zweite Diastereomere war das (R*)-Isomere; Gewicht on

0,101 g. Das Massenspektrum zeigte ein'Molekülion bei 406 m/e. <h NMR (200MHz, CD₃OD)^1.64-2.20 (m, 8H), 2.74 (t, J = 7Hz, 2H), 3.27 (m, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 5.06 (d, J = HHz, IH), 5.13

(dd, J = 7Hz, J = 3Hz, IH), 7.26 (m, 5H). — —

Beispiel 26

C3'R- L3a,6a(S*) ,9aß ] 1-6- C(i-Methoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino ]-octahydro-5-oxothiazoloL3,2-a ]-azepin-3-carbonsäurehydrochlorid

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung von 0,180 g C3H-[3cc,6a(S*) ,9aß] l-e-Cil-methoxycarbonyl-Sö 3-pti.enylpropyl)-amino ]-octahydro-5-oxothiazolo C3 ,2-alazepin-3-carbonsäure in 20 ml Äthylacetat bei 0 geblasen.

16605Y 42

23 8 3 50 4

Nach. Entfernen des überschüssigen HCl wurde die Ausfällung gesammelt; Gewicht 0,188 g

[α] ψ° = -39,5° (MeOH, c = 1 ,6) Analyse auf

berechnet: C 54,23 H 6,14 N 6,32 S 7,24 Cl 8,00 gefunden: C 54,14 H 6,10 N 6,01 S 7,17 Cl 7,93

3eispiel 27

C 3E-C 3a,6a(H*),9aß]1-6-C(i-Methoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäurehydrochlorid

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung von 0,1 g L3H-C3cc,6a(±i*) ,9aß]]-6-C(i-Methoxycarbonyl-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäure in 10 ml Äthylacetat bei 0° geblasen. Nach Entfernen des überschüssigen HCl wurde die Ausfällung gesammelt, Gewicht 0,105 g ' Ca] ψ° = 74,1° (MeOH, c = 0,7) Analyse auf C_orNH_Oi;-N_o0_cS-HCl-H_o0:

berechnet: C 52,11 H 6,34 N 6,08 S 6,96 Cl 7,69 gefunden: C 52,14 H 5,98 N 5,68 S 6,95 Gl 7,87

Beispiel 28

C3E-L3a,6a(S*fi*),9aß]]-6-L(1-Athoxycarbonyl-4-methylpentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloL3,2-a]-azepin- 3-carbonsäure

Zu einer Lösung von 0,348 g C3^-(3a,6a,9aß)]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäure und 1,30 g Äthyl-5-methyl-2-oxo-hexanoat in 15 ml absolutem Äthanol wurden 3,9 g pulverförmige 3-A·-Molekularsiebe

- 42 -

16605T .4-3

23

gefügt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 0,28.5 g Natriumcyanborhydrid in 2 ml Äthanol langsam gefügt. Nach vollständiger Reaktion wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat wurde zur Trockene konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 35 nil Wasser und 35 ml Äther aufgeteilt und die Schichten wurden getrennt. Die wäßrige Schicht wurde mit 1 m IUPQ^ auf den pH-Wert 4-,5 angesäuert und anschließend wiederholt mit Chloroform extrahiert. Die Chloroformschichten wurden getrocknet und anschließend unter Bildung des Produkts, Gewicht O₅538 g, konzentriert. Die Trennung der (S*R*)-Diastereomeren erfolgte durch Chromatografie an Sephadex LH-20 (MeOH).

Das erste Diastereomere, das aus der Säule kam, war das (S*)-Isomere: Gewicht 0,219 g; exakte Massenmessung, gefunden 386.1855, berechnet 386.1874. .Das-Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:.

n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck vom R = 0,83. Ή NMR

(200MHz, CD₃OD)O 0.92 (dd, J= 7Hz₇ J= 2.5Hz, 6H), 1.30 (t, J = 7Hz, 3H), 1.32 (m, 2H), 1.57 (m, IH), 1.70-2.26 (m, 8H), 3.24 (ra, 2H), 3.68 (t, J = 6.5Hz, IH), 3.86 (d, J = 10Hz, IH), 4.26 (m, 2H), 5.08 (ra, 2H) .

Das zweite aus der Säule eluierte Diastereomere war das (R*)-Isomere: Gewicht 0,210 g; exakte Massenmessung, gefunden. 386.1847, berechnet 386.1874. ¹H NMR

(200MHz, CD₃OD) £o.91 (d, J = 7Hz, 6H), 1.20 (m, 2H), 1.28 (t, J = 8Hz,' 3H) 1.54 (ra, IH), 1.64-2.20 (m, 8H), 3.23 (ra, 2H), 3.49 (m, 2H), 4.21 (m, 2H), 5.13 (m, 2H). *,.

16605Ϊ 44

* 23 8 3 50 4

Beispiel 29

C3R-C3a,6ct(S*) ,9aß]]-6-[(i-Äthoxycarbonyl-4-methylpentyl)-amino]-octahydro-5~oxo thiazole? C3,2-a]-azepin-3~carbonsäurehydroChlorid

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung von 114 mg [3S-C3a,6cc(S*),9aß]]-6-[(i-Äthoxycarbonyl-4-methylpentyl)-amino]-oetahydro-5-oxothiazole C3 ,2-a]-azepin-3-carbonsäure in 10 ml Äthylacetat bei 0° geblasen. Nach Entfernen des überschüssigen HCl wurde die Ausfällung gesammelt, Gewicht 0,120 g p°

[α] J^ = -54	,7°	(MeOH,	C	=	0,5).	6	,49	S	7	,42	Cl	8	,21
Analyse auf C-,	3H3(	)N2°5S"	HC]	L.-'	0,5H2O:	6	,31	s-	7	,39	Cl	8	,39
berechnet:	C	50,05	H	7	,47 N
gefunden:	C	49,74	H	7	,36 N
Beispiel 30

C3H-C3a,6a(S*),9aß]]-6-[(i-Carboxy-4-methylpentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-al-azepin-3-carbonsäure

105 g [3E-C3a,6a(S*),9aß]]-6-C(I-Athoxycarbonyl-4-methylpentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäure wurden in 1,5 ml Methanol gelöst und mit 1,4 ml 1 m NaOH-Lösung behandelt. Nach dem Stehen über Nacht wurde das ßeaktionsgemisch an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit -3 % Pyridin in Wasser eluiert. Die geeignete Fraktion wurde konzentriert und im Vakuum getrocknet unter Bildung eines weißen Feststoffs vom Gewicht 97 mg; [α] ^ = -103,9° (0,1 m NaOH, c = 0,7). Das Massenspektrum zeigte ein

16605Y 45

* 23 8 350 4

Molekülion bei 502 m/e für die disilylierte Species. i_{H NMR} (200MHz, CD₃OD)^ 0.94 (dd,J = 7 Hz, J= 2.5Hz, 6H), 1.41 (m, 2H), 1.59 (m, IH),

1.76-2.36 (m, 8H), 3.30 (m, 2H), 3.60 (t, J= 6Hz, IH), 4.20 (d, J=8 Hz,IH), 5.20 (m, 2H)

Analyse auf C_x, ,-H₀^N₀QcS-IAH₀O:

berechnet: G 52,95 -H 7,36 N 7,72 S 8,83 gefunden: G 52,86 H 7,44 N 7,51 S 8,64

Beispiel 31

[3H-L3ct,6a(R*),9aß]]-6-[(i-Carboxy-4-methylpentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolö[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure

110 mg [3Ε-[3α,6α(ΒΌ. ,9aß]]-6-[(i-Äthoxycarbonyl-4-methylpentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]- azepin-3-carbonsäure wurden in 1,5 nil Methanol gelöst und mit 1,43 ml 1 m NaOH-Lösung behandelt. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Eeaktionsgemisch an stark starkem Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % 'Pyridin in Wasser eluiert. Die geeignete Fraktion wurde konzentriert und getrocknet unter Bildung von 96 mg Produkt, [al *p = -67,8° (0,1 m NaOH, c = 0;,4). Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 502 m/e für die disilylierte Species. ¹H NMR (200MHz, CD₃OD)^O.92 (d, J = 6Hz, 6H), 1.37 (m,

2H), 1.60 (τη, IH), 1.78-2.28 (m, 8H), 3.32 (m, 2H), 3.72 (t, J = 6Hz, IH), 4.13 (d, (d, J = 9Hz, IH), 5.26 (dd, J =

Analyse auf C.^Hp₆NpQC-S-I/4H_OQ:

berechnet: C 52,95 H 7,36

gefunden: G 53,00 H 7,30

- 45 -

J	7	9Hz	=	S	IH)	t	83	5.16
	7	' 1	S	3 Hz,	53	IH)
6Hz	,72	8,
N	,81	8,
N

16605Y

23 8 3 50 4

Beispiel 52

C3H-C3a,6a(S*fi·) ,9aß]]-6-[[1-Carboxy-3-(4-chlorphenyl)-propyl ]-amino ]-octahydro-5-oxothiazolj C3,2-a]-azepin-3-carbonsäure

100 ml C3H-(3a,6a,9aß)]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3-carbonsäure und 0,692 g 4—(4—Chlorphenyl)-2-oxo-buttersäure wurden in 2 ml Wasser suspendiert und mit 1 m HaOH auf den pH-Wert 6,1 eingestellt. 82 mg ITatriumcyanborhydrid in 2 ml Wasser wurden langsam mittels einer Insektionsspritzenpumpe zugesetzt.

Nach vollständiger Reaktion wurde das Gemisch'an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit MeOH:H₂O (1:1), H₂O und anschließend mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert- Die geeigneten Fraktionen wurden konzentriert und getrocknet unter Bildung des Produkts vom Gewicht 14-2 mg. Das Material wurde durch Chromatografie an Sephadex LH-20 (HeOH) gereinigt unter Bildung von 122 mg des Diastereomerengemischs. Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat: n-Butanol: Wasser -.Essigsäure) zeigte zwei Flecken vom H_f = 0,76 und S- = 0,72 für die beiden Diastereomeren. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 4-53 für die disilylierte Species minus

COOTMS. Ή NMR (200MHz, dg-DMSO)£ 1.40-2.26 (8H), 2.63 (m, 2H) , 3.19 (m, 2H)-, 3,48 (m, IH) , 3.80 (m, IH), 5.04 (m, IH), 5.14 (m, IH), 7.31 (m, 4H).

Beispiel 35

C3S-[3a,6a(S*S*),9aßJ]-6-[[1-(Äthoxycarbonyl)-3-(methylthio)-propyl]-amino ]-octahydro-5-oxothiazole C3,2-a]-azepin-3-carbonsäure

- 46 -

16605Y 4-7

238350 4

Zu einer Lösung von 0,14-7 g C3ß-(3a?6a,9aß) ]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazolo [3 ,2-a]-azepin-3-carbonsäure und 0,564- g Äthyl-4—(methylthio)-2-oxobutyrat in 10 ml absolutem Äthanol wurden 1,7g pulverförmige 3A-Molekularsiebe gefügt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 0,121 g Natriumcyanborhydrid in 2 ml Äthanol langsam mittels einer Injektionsspritzenpumpe gefügt. Nach vollständiger Reaktion wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat wurde konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 20 ml Wasser und 20 ml Äther aufgeteilt und die Schichten wurden getrennt. Die wäßrige Schicht wurde mit 1 in Η-,ΡΟ^ auf den pH-Wert 4·,3 angesäuert und anschließend wiederholt mit Chloroform extrahiert. Die Chloroformschichten wurden getrocknet und anschließend konzentriert unter Bildung des unreinen Produkts vom Gewicht 0,24-9 g. Die Trennung der Diastereomeren wurde an einer Sephadex LH-20-Säule (MeOH) erzielt.

Das erste Diastereomere.·, das aus der Säule eluierte, war das (S*)-Isomere: Gewicht 0,067 g· Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (3:1:1:1 Äthylacetat: n-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzelnen Fleck R_f =0,70. ¹H HMR

(200MHZ, CDCl₃)^1.29 (t, J= 7Hz, 3H), 1.59-2.18 (m, 8H), 2.10 (s, 3H)₇ 2.63 (t, J = 7Hz, 2H), 3.18 (m, IH)₇ 3.37 (m₇ IH)₇ 3.50 (t₇ J= 5.5Hz, 2H) _f 4.22

(m, 2H)₇ 4.82 (br s, 2H, austauschbar)/ 4.98 (d, J=

6Hz₇ IH)₇ 5.22 (dd₇ J= 6Hz₇ J= 2Hz₇.IH).

Das zweite Diastereomere, das aus der Säule erlierte, war das (R*)-Isomere: Gewicht 0,065 g· Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid zeigte ebenfalls einen einzigen Fleck vom R_f = 0,71. Ή

_ 47 _

16605X .48

23 8 3 50 A

NMR (200M Hz, CDCl₃) £ 1.28 {t, J = 7.5Hz, 3H),

1.54-2.16 (m, 8H), 2.12 (s, 3H), 2.66 (m, 2H),

3.08-3.56 (m, 4H), 4.10 {br S, 2H, austauschbar) .

4.20 (m, 2H), 4.92 (m, IH), 5.29 (d, J= 5Hz, IH).

Beispiel 34

C3E- L3a,6a(S*) ,9su3 ] ]-6- [ [1-Carboxy-3-(methylthio)-propyl ]-amino ]-octaliydro-5-oxotiiiazoloC3 ,2-a]-azepin-3-carbonsäure

60 mg [3Η-[3α,6α(8*),9aß]]-6-[[1-(Äthoxycarbonyl)-3~ (methylthio)-propyl]-amino]-ο etahydro-5-oxothiazoIo C3,2-a]-azepin-3-carbonsäure wurden in 0,8 ml Methanol gelöst und mit 0,80 ml 1 M NaQH-Lösung behandelt. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Reaktionsgemisch an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und . mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert. Durch Konzentrieren der entsprechenden Fraktionen erhielt man die Titelverbindung, Gewicht 56 mg; Ca] Jp _ -94,1° (0,1 m NaOH, c = 0,37)· Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 5O6 m/e für die disilylierte

Species. Ή NMR (200MHz, CD₃OD) 61.74-2.32 (m, 8H), 2.12 (s, 3H), 2.70 (t, J= 8Hz, 2H), 3.30 (m, 2H), 3.70 (t, J = 6Hz, IH), 4.24 (d, J = lOHz, IH), 5.18 (m, 2H) . j Die HPLC-Analyse (Umkehrphase) zeigt einen einzigen Peak.

Analyse auf C₁^H₂₂N₂O₅S₂:

berechnet: G 46,39 H 6,12 N 7,73 gefunden: C 46,81 H 6,26 N 7,87

16605Y

238350 4

Beispiel 35

C3fi-C3a,6cc(R*) ,9aß]]-6-C [1-Carboxy-3-(methylthio)-propyl ]-amino ]-octahydro-5-oxothiazolo C3 ,2-a ]-azepin-3-carbonsäure

64· mg C3ß-C3a,6a(E*)i9aß]]^6-CCi-(Äthoxycarbonyl)-3-(methylthio-)-propyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazolo [3,2-al-azepin-3-carbonsäure wurden in 0,8 ml Methanol gelöst und mit 0,8 1m NaOH-Lösung behandelt. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Reaktionsgemisch an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert. Die entsprechende Fraktion wurde konzentriert und getrocknet unter Bildung des Produkts, Gewicht 4-2 mg; Ca] *p = -66,4·° (0,1 η NaOH, c = 0,26). Das Massenspektrum zeigt ein (M+l)-lon bei 507 m/e für die disilylierte Species. Die HPLC-Analyse zeigte eine einzige Komponente.

Ή NMR (200MHz, CD₃OD) £> 1. 72-2 . 30 (m,

8H), 2.12 (s, 3H), 2.68 (t, J= 6Hz, 2H), 3.30 (m,

2H) , 3.8 4 (t, J= 7Hz, IH), 4.15 (d, J= 9Hz, IH),

5.16 (d, J ='8Hz, IH) , 5.24 (dd, J= 6Hz, J = 3Hz, IH). ·

Analyse auf C-ι λ^? 2^2^ 5^2^:

berechnet: C 46,39 H 6,12 N' 7,73 gefunden: C 46,22 H 6,09 N 7,67

Beispiel 36

C3R-C3a,6a(S*R*),9aß]]-6-C[1-(Benzyloxycarbonyl)-5-phthal-

imidopentyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure

- 49 - -

16605X 50

23 8 3 50 4

Eine Lösung von 159 mg L3R-(3<* ,6a,9aß) ]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazolc[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure in 10 ml Wasser wurde mit verdünnter NaOH-Lösung auf den pH-Wert 6,65 eingestellt. Die Lösung wurde gefriergetrocknet. Dieser Rückstand und 1,26 g Benzyl-2-oxo-6-phth.alimidohexanoat (hergestellt durch Alkylieren von Benzyl-1,3-dithian-2-carboxylat mit 4~Phthalimidobutylbromid und anschließende oxidative Umwandlung in das Keton mit N-Bromsuccinimid) wurden teilweise in 30 ml absolutem Äthanol gelöst. 1,7 g pulverförmige 3A-Molekularsiebe wurden zugesetzt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 13O mg Natriumcyanborhydrid in 3 ml Äthanol langsam mittels einer Injektionsspritzenpumpe gefügt. Nach Portschreiten der Reaktion bis zum Ende wurde das Gemisch filtriert und das Piltrat wurde konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 50 ml Wasser und 25 ml Äther aufgeteilt. Die Schichten wurden getrennt und die wäßrige Schicht wurde an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert. Durch Eluieren mit Wasser und anschliessend 4- % Pyridin in Wasser konnte man das Produkt als ein Gemisch der Diastereomeren gewinnen, Gewicht 371 mg. Die Diastereomeren wurden durch Chromatografie an Sephadex LH-20 (MeOH) getrennt.

Das erste aus der Säule eluierte Diastereomere war das (S*)-Isomere, Gewicht 135 mg. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 579 m/e. Die HPLC-Analyse (Umkehrphase) zeigte ein einziges Diastereomeres.

¹H NMR (60MHz, CD₃OD) έ1.18-2.48 (br

m, 12H), 3.18 (br s, 2H), 3.62 (br m, 4H), 5.05 (br s, 2H), 5.21 (s, 2H) 7.35 (s, 5H), 7.78 (s, 4H).

Das zweite Diastereomere, das aus der Säule kam, war das (R*)-Isomere, Gewicht 78 mg· Die HPLC-Analyse

- 50 -

16605Y 51

23 8 3 50 4

(Umkehrphase) zeigte ein einzige Diastereomeres. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 579 m/e. ¹H NMR (60MHz, CD₃OD)^ 1.23-2.18 (m, 12H), 3.08-3.85 (m, 6H), 4.93 (m, 2H), 5.12 (s, 2H), 7.30 (s, 5H)₇ 7.78 (S_x 4H).

Beispiel 37

C3fi-C3a ,60c (S*) ,9aß]]-6-C(1-Carboxy-5-aminopentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure · '

Das reduktive Alkylierungsprodukt, 135 mg C3R-L3a,6a(3*), 9aß]1-6-C[i-(3enzyloxycarbonyl)-5-pnthalimidopentyl·]-amino]-octahydro-5-oxotiiiazoloL3,2-al-azepin-3-carbonsäure wurde in 10 ml Methanol in Anwesenheit von 0,012 ml Eisessig bei 2,76 bar (40 psi) über 10 % Palladiumau-f-Kohle (140 mg) hydriert. Nach beendeter Entblockierung wurde der Katalysator durch Filtrieren entfernt und das. Filtrat wurde konzentriert. Das Produkt, 84 mg [3H-[3α,6α(3*),9aß]1-6-C(1-Carboxy-5-phthalimidopentyl)-amino]-oetahydro-5-oxothiazol [3,2-a]-azepin-3-carbonsäure wies die erwarteten spektralen Eigenschaften auf. Eine Lösung dieses Material in 0,75 nil Methanol wurde mit 0,15 nil Hydrazinhydrat behandelt und anschließend über Nacht unter Rückfluß erwärmt. Das ausgefällte

Phthalhydrazid wurde gesammelt und das Filtrat wurde zur Trockene gebracht. Der Rückstand wurde an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert. Durch Eluieren mit Wasser und anschließend 4 % Pyridin in Wasser erhielt man 43 mg Produkt, das an Sephadex LH-20 ^MeOH) chromatografiert wurde. Die Titelverbindung (18 mg) erhielt man als weißen hygroskopischen Peststoff.

- 51 -

16605X . 52

23 8 3 50 A

Das Dünnschientchromatοgramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:WasserEssigsäure) zeigte einen einzigen Fleck vom E_f = 0,4-0. Das Massenspektrum (FeIddesorption) zeigte ein (M+1)-Molekülion "bei 360 m/e

¹H NMR (200MHz_f D₂O)^l.46-2.38 (m,

12H), 3.08 (t, J= 7Hz, 2H), 3.18 (d, J= 5Hz, 2H), 3.68 (t, J = 7Hz, IH), 4.20 (d, J = 9 Hz, IH), 4.97 (m, IH), 5.19 (m, IH).

Beispiel 38

-C3a,6a(E*),9aß]]-6-C(i-Carboxy-5-aminopentyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbon säure

Das geschützte Diastereomere, 78 mg [3S-C3a,6a(E*), 9aß 1 l·- 6-C Ci-(Benzyloxycarbonyl)-5-phthalimidopentyl]-amino]-²^ octahydro-5-oxothiazolo C3,2-al -azepin-3-carbonsäure wurde in 10 ml Methanol bei 2,76 bar (40 psi) über 10 % Palladium-auf-Kohle (80 mg) hydriert. Nach vollständiger Eeaktion (gelegentlich mußte das Eeaktionsgemisch recyclisiert werden) wurde der Katalysator entfernt und das ° Filtrat wurde zur Trockene gebracht. 'Das Produkt, 29 mg C3E-C3a,6a(E*),9aß ] ]-6-C(1-Carboxy-5-phthalimidopentyl)-amino ]-octahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3-carbonsäure wies die erwarteten spektralen Eigenschaften auf.

Eine Lösung dieses Materials.in 1,5 ml Methanol wurde

mit 0,05 ml Hydrazinhydrat behandelt und über Nacht unter

Eückfluß erwärmt. Die Ausfällung wurde gekühlt und das Filtrat wurde unter verringertem Druck konzentriert. Der Eückstand wurde unter Vakuum getrocknet zur Entfernung von überschüssigem Hydrazin und anschließend an

einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert.

Durch Eluieren mit Wasser und anschließend A- % Pyridin

- 52 -

166O5Y

in Wasser erhielt man 13 mg Produkt. Die Chromatografie an Sephadex LH-20 (MeOH) ergab 3 v^· ^mS des gewünschten Produkts. Das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser!Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck von R_f = 0,24, Ή HKE (200M Hz₇ D₂O)^l.36-2.40 (m, '12H-), 3.04 (t, J = 8 Hz, 2H) , 3.26 (d, J = 4Hz, 2H), 3.7 8 (m, IH) , 4.0 2 (d, J = 9Hz, IH), 4.96 (m, IH), 5.11 (m, IH).

Beispiel 39

Methyl-C 3R-(3ct ,6a,9aa)]-6-aminooctahydro-5--oxothiazolo l3,2-a]-azepin-3-carboxylat

1,25 g Methyl-L3E-(3a,6a,9aa]-6-phthaliinidooctahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carboxylat wurden in 80 ml absolutem Äthanol unter gelindem Erwärmen gelöst. 0,1?8 ml Hydrazinhydrat wurden zugesetzt und das Gemisch wurde bei Raumtemperatur 4 Tage unter Stickstoff gerührt. Das Eeaktionsgemisch wurde konzentriert und der Rückstand wurde im Vakuum zur Entfernung von Spurenmengen Hydrazin getrocknet. Der Rückstand wurde mit 85 ml 0,5'm HCl bei 0 während 3 Stunden behandelt. Das ausgefällte Phthalhydrazid (495 mg) wurde gesammelt. Das Filtrat wurde mit 1 m NaOH auf den pH-Wert 10,0 neutralisiert und mit C^Cl^ extrahiert. Durch Konzentrieren

erhielt man 0,8 g des Aminoesters. Genaue Massenmessung: 30

gefunden: 244.0880; berechnet: 244.0881. 'HiiMR

(200 MHz, CDCl₃) 1.58 (br s, 2H, NH₂), 1.66-2.20 (br m, 6H), 3.11 (1/2ABg, J _Aß = 13 Hz, 35, J_AX = 4Hz, IH)> 3.29 (1/2ABg, J_AQ = 13 Hz, Δν_ΛΏ = 35, J_nv = 7Hz, IH), 3.76 (s, 3H), 3.87 (m, IH), 5.23 (dd, J = 7Hz, J = 4Hz, IH), 5.55 (d, J = 10 Hz, IH).

- 53 -

166051

23 8 3 50 4

Beis-pJel 4-0

C3H-(3a,6a,9aa) ]-6-Aminoo et ahydro-5-oxo thiazole· C3 ,2-a]-azepin-3-carbonsäure

0,8 g Methyl-C3R-(3a,6a,9aa)]-6-aminooctahydro-5-oxothiazolo[3>2-a l-azepin-3-carboxylat wurden in 15 ml Methanol gelöst und mit 13»5 ml 1 M NaQH-Lösung behandelt. Das Eeaktionsgemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur unter Stickstoff gerührt und anschließend an einem stark sauren lonenaustauscherharz absorbiert. Durch Entwickeln mit 3 % Pyridin in Wasser konnten 653 mg des Produkts gewonnen werden. Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat: η-Butanol:Wasser:Essigsäure) zeigte einen einzigen Fleck vom S_f = 0,65. Exakte Massenmessung, gef. 230.0727; ber. 23Ο.Ο725. 'HUME (200MHz, D₃O) <fi ,94-2 ,62 (1, 6H), 3.19 (1/2ABq, J__AB = 12Hz," AV_Aß = 57, £_Αχ = 8Hz, IH), 3.45 (1/2ABq, J_Aß = 12Hz, AV_AQ = 57, J_ßX 7Hz, IH), 4.39 (d, J= 11Hz, IH), 4.96 (πι, IH), 5.21 (d, J = 9Hz, IH).

Beispiel

Methyl-C3E-L3a,6a(S*E*),9aa]]-6-CCi-(metliox7carbon7l)-3-phenylpropyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-³^ azepin-3-carboxylat

Eine Lösung von 152 mg Methyl-[3E-(3a,6a,9aa)]-6-aminooctahydro-5-oxothiazoloi3,2-a]-azepin-3-carboxyläthydrochlorid in 10 ml wäßrigem Methanol (1:1) wurde auf den pH-Wert 6,2 mit 0,5 m NaOH-Lösung eingestellt. Die Lösungwirde konzentriert und anschließend erneut in

16605A 55

23 8 3 50 4

10 ml absolutem Methanol gelöst. 0,78 g Methyi-2-oxo-4— phenylbutyrat und 1,5 S pulverförmige 3A-Molekülarsiebe wurden zugesetzt. Eine Lösung von 102 mg Natriumcyanborhydrid in 3»5 ml Methanol wurde langsam mittels einer Injektionsspritzenpumpe zugesetzt. Nach vollständiger Reaktion wurden die Siebe durch Filtrieren entfernt und das Piltrat wurde konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 50· ³^l CHpCIp und 50 ml Wasser aufgeteilt. Die CHoClp-Schicht wurde getrocknet und anschließend zur Trockene .konzentriert. Die Diastereomeren wurden durch Siliziumdioxidgel-Chromatografie mit 1:1 Hexan: Äthylacetat als Eluiermittel getrennt.

Das erste Diastereomere (R- = 0,35)? das aus der Säule eluiert wurde, war Methyl-C 3H-C Ja. ,6cc(R*) ,9a<x] 3-6-C [1-(methoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazol [3,2-a]-azepin-3-carboxylat, Gewicht 78 mg· ¹H NMR (200MHz, CDCl₃)S 1.53-2.22 (m, 8H)V 2.72 (t, J = 8 Hz, 2H), 3.12 (m, IH), 3.28 (m, IH), 3.54 (m, IH), 3.66 (m, IH), 3.76 (s, 6H), 5.24 (dd, J - 7Hz, J = 3HZ, IH) , 5.70 (d, J = lOHz, IH)^-, 7.28 (m, 5H);: exakte Massenmessung, festgestellt 420.1685, berechnet 4-20.1718

Analyse auf Cp^HpglipQ^S:

berechnet: C 59,98 H 6,71 N 6,66 S 7,63 gefunden: C 60,05 H 6,93 N 6,52 S 7,79

Das zweite Diastereomere (R^ = 0,26), das aus der Säule kam, war Methyl-[3R-L3a,6a(S*),9a_a]]-6-[[1-(methoxycarbonyl)-3-phenylpropyl!-amino]-octahydro-5-oxothiazolo. [3,2-a]-azepin-3-carboxylat, Gewicht 120 mg. Dieses Isomere wurde aus Äther-Petroläther (1:1) umkristallisiert

16605Y 56

238350 4

Fp. 123,5-24°. Ή NMfi

(200MHz, CDCl₃) S 1.60-2.23 (m, 8H), 2.84 (m, .2H) , 3.14 (m, IH) , 3.30 (m, IH), 3.63 (m, 2H), 3.74 (s, 3H) , 3.76 (s, 3H) , 5.24 (dd, J = 7 Hz, J = 3 Hz, IH) , 5.97 (d, J= 10 Hz, IH), 7.28 (m, 5H); j exakte Massenmessung, festgestellt 4-20.1725, berechnet 420.1718

Analyse auf C₂₁H₂₈N₂O₅S:

berechnet: G 59,98 H 6,71 N 6,66 S 7,63 gefunden: G 60,12 H 6,77 N 6,46 S 7,93

Beispiel 42

[3H-C3a,6a(S*),9aa]]-6-[(i-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbon- säure

125 mg Methyl-C3E-[3α,6α(S*),9aaJ]-6-C[1-(methoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-amino]-o etahydro-5-oxothiazoIo [3 ,2-a]-az ep in-3-carboxyl at wurden in 1 ml MeOH und 2 ml 1 m NaOH-Lösung gelöst (ein leichtes Erwärmen war erforderlich). Nach dem Stehen über Nacht bei Raumtemperatur wurde das fieaktionsgemisch an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert. Die.geeignete Fraktion wurde konzentriert und getrocknet unter Bildung eines weißen Feststoffs vom Gewicht 99 nig· Durch Umkristallisieren aus Wasser-Methanol erhielt man feine weiße Nadeln, Gewicht 76 mg; Fp. 191,5-93° (Zers.); das Dünnschichtehromatοgramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser:

Essigsäure) zeigte einen einzigen Bestandteil, fi~ = 35

16605Y -57

23 83 50

0-75; I.R. (KBr):1725 and 1622 cm"¹; ¹H NMR (200MHz, dg-DMSO) ^1,42-2.24 (τη, 8H), 2.76 (πι, 2H)₇ 3.03 (dd, J= 12 Hz, J= 2.5Hz, IH), 3.38 (m, 3H), 4.99 (d, J = 5Hz, IH), 5.94 (d, J = 9Hz, IH), 7.26

25° " ~

(m, 5H); [a]_D = -57.7° (O.lM NaOH, c = 0.39).

Analyse auf C₁₉H₂^N₂O₅S-H₂O:

berechnet: C 55,59 H 6,39 N 6,83 S 7,81 gefunden: C 55,56 H 6,4-5 N 6,69 S 7,90'

Beispiel 4-3

C3E-C3a,6a(E*),9aa]]-6-C(i-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxotiiiazoloL3,2-a]-azepin-3-car'bonsäure

28 mg Methyl-[3H-C3a,6a(R*) , 9aa] ]-6- C [1-(methoxycarbonyl)-3-piienylpropyl ]-amino ]-octahydro-5-oxothiazolo [3,2-a]-azepin-3-carboxylat wurden in 2 ml Methanol und 0,5 ml 1 m NaOH-Lösung gelöst. Nach dem Stehen über Nacht wurde das Re aktie-ns gemisch an stark saurem Ionenaustauscherharz absorbiert und mit 3 % Pyridin in Wasser eluiert. Durch Konzentrieren der geeigneten Fraktion erhielt man 26 mg Produkt. Das Massenspektrum zeigte ein Molekülion bei 536 m/e für die disilylierte Species. Das Dünnschichtchromatogramm an Siliziumdioxid (1:1:1:1 Äthylacetat:n-Butanol:Wasser Essigsäure) zeigte eine einzige Komponente, E_f = 0,75. Ή NMR (200 MHz dg-DMSO) 51.58 (m, 2H), 1.94 (m, 6H), 2.67 (t, J= 8Hz, 2H), 3.04 (dd, J = 12Hz, J = 3Hz, IH), 3.39 (m, 3H), 4.99 (dd, J = 7Hz, J = 3Hz, IH), 5.64 (d, J = 9Hz, IH), 7.28 (m, 5H).

- 57 -

16605X 58

23 8 3 50 4

Beispiel 44-

[3R-C3a,6a(S*RO

propyll-amino ]-o et ahydr 0-5-0x0 thiazole?C3_?2-a]-azepin-3-carbonsäure

Eine Lösung von 0,133 S C3R-(3ct,6a,9aa) ]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure in 10 ml Wasser wurde mit verdünnter NaOH-Lösung auf den pH-Wert 6,7 eingestellt. Die Lösung wurde anschließend gefriergetrocknet. Der Rückstand und Ο,59β g Äthyl-2-oxo-4—phenylbutyrat wurden in 10 ml absolutem Äthanol gelöst.

¹^ 1i5 S pulverförmige 3A-Molekularsiebe wurden zugesetzt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von 0,109 g Natriumcyanborhydrid in 2 ml Äthanol langsam mittels einer Injektionsspritzenpumpe gefügt. Nach vollständiger Reaktion wurde das Gemisch filtriert und das Eiltrat wurde konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen 50 ml Wasser und 50 ml Äther aufgeteilt. Die Schichten wurden getrennt und die wäßrige Phase wurde an einem stark sauren Ionenaustauscherharz absorbiert. Durch Eluieren mit Wasser und anschließend 3 % Pyridin in Wasser konnte die Titelverbindung als ein Gemisch der Diastereomeren isoliert werden, Gewicht 200 mg. Das Massenspektrum stimmte mit der Struktur überein und die HPLC-Analyse (Umkehrphase) zeigte ein etwa 60:A-O-Gemisch der Diastereomeren. ¹H NMR (200MHz, CDCl^) <H ,25 (t, J_ = 7Hz, 3H), 1.52-2.20 (m, 8H), 2.74 (ni, 2H), 3.23 (m, 2H), 3.54 (m, 2H), 4.18 (m, 2H), 5.22 (m, IH), 5.64 and 5.92 {d, IH) 5.82 (br s, 2H, austauschbar ), 7.26 (m, 5H). Die Diastereomeren können durch Chromatografie

an einer Umkehrphasensäule getrennt werden. 35

16605X -59

Beispiel 4-5

Äthyl-[3R-L3ct,6a(S*R*),9aa]]-6-[[i-(äthoxycarbonyl)-

3-phenylpropyl]-amino]-octahydro-4—oxothiazoloC3, 2-a]-azepin-3-carboxylat

Wasserfreier Chlorwasserstoff wurde durch eine Lösung von C3E-C3a,6a(-S*E*) ,9aa]]-6-CCi-Äthoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-amino]-ο etahydro-5-oxothiazoIoC 3 >2-a]-azepin-3-carbonsäure in absolutem Äthanol bei 0° während 15 Minuten geblasen. Das Reaktionsgemisch wurde bei Raumtemperatur über Nacht gerührt und anschließend unter verringertem Druck konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Wasser und Äther aufgeteilt und dann neutralisiert. Die ätherische Schicht wurde getrocknet und dann zur Trockene gebracht unter Bildung eines Öls als ein Gemisch der Diastereomeren. Die Diastereomeren können durch Chromatografie getrennt werden. Jedes

Diastereomere zeigte die charakteristischen Massenspektren und die ¹H NMR-Spektren stimmten mit ihrer Struktur überein..

BeisOiel

Benzyl-C3H-(3a,6a,9acc)]-6-aminooctahydro-5-oxothiazolö C3,2-a]-azepin-3-carboxylat

C3E-(3a,6a,9aa)]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazoloC3,2-aJ-azepin-3-carbonsäure wurde in Benzylalkohol bei 0 suspendiert und mit Thionylchlorid behandelt. Das Eeaktionsgemisch wurde über Nacht bei Raumtemperatur und unter einer inerten Atmosphäre gerührt. Äther wurde zugesetzt · und die Ausfällung wurde gesammelt. Das Material wurde in Wasser suspendiert und anschließend mit 1 Äquivalent

- 59 -

16605Y 60

ι 238350 4

Base neutralisiert unter Bildung der gewünschten Verbindung beim Extrahieren. Das Dünnschichtchromatοgramm, das Massenspektrum und das ¹H NMR stimmten mit seiner Struktur überein.

Beispiel 4-7

Benzyl-[3R-[3α,δα(S*R*),9aa] ϋ-6-ί (i-carboxy^-phenylpropy^-aminoJ-octahydro^-oxothiazolo^ ,2-a]-azepin-3-carboxylathydrochlorid

Zu einer Lösung von Benzyl-[3R-C3oc,6a,9a.a] ]-6-amino-οetahydro-5-oxothiazole» L3,2-a]-azepin-3-carboxylat und t-Butyl-2-oxo-4-phenylbutyrat in absolutem Äthanol, wurden pulverförmige 3A-Molekularsiebe und 1 Äquivalent Essigsäure gefügt. Zu dem Gemisch wurde eine Lösung von Natriumcyanborhydrid in Äthanol langsam gefügt. Nach vollständiger Reaktion erhielt man unter Standardaufarbeiten des Produkts Benzyl-[3R-[3a,6a(S*R*),9aa]]-6-[[1-(tert.butoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazol^-L3,2-a]-azepin-3-carboxylat als ein Gemisch der Diastereomeren. Die Chromatografie ermög-. lichte die Trennung der Diastereomeren und die Entblokkierung mit 4 η HCl in Äthylacetat ergab die Titelverbindungen. Alle Diastereomeren zeigten spektrale Eigenschaften, die mit ihren Strukturen übereinstimmten.

Beispiel 48

Äthyl-[3R-(3α,δα,9aa)]-6-aminooctahydro-5-oxothiazolp [3,2-a]-azepin-3-carboxylat

C3R-(3a,6a,9aa)]-6-Aminooctahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carbonsäure wurde in Äthanol bei 0° gelöst und

- 60 -

16605Y :61

χ 23 8 3 50 4

die Lösung wurde mit wasserfreiem Chlorwasserstoff gesättigt. Das Reaktionsgemisch wurde anschließend über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wurde zur Trockene gebracht und der Rüeitstand wurde in Wasser suspendiert. Durch Neutralisieren mit Base und anschliessendes Extrahieren erhielt man die Titelverbindung.

Beispiel 4-9

Äthyl- C3H- L3a,6a(S*H*) ,9aa]]-6-C(1-carboxy-3-phen;7lpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoIo[3,2-a]-az epin-3-carboxylathydrochlorid

Zu einer Lösung von Äthyl [-3R-(3cc,6a,9aoc) ]-6-aminoοetahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3-carboxylat und t-3utyl-2-oxo-4-phenylbutyrat in absolutem Äthanol wurden pulverförmige 3A-Molekularsiebe und 1 Äquivalent Essigsäure gefügt. Zu diesem Gemisch wurde eine Lösung von Natriumcyanborhydrid in Äthanol langsam gefügt. Nach vollständiger Reaktion wurden die Siebe durch Filtrieren entfernt und das Filtrat wurde konzentriert. Der Rückstand wurde zwischen Wasser und CEUClp aufgeteilt. Durch Eonzentrieren des CEUClp-Anteils erhielt man das Produkt Äthyl[3R-[3a,6ct(S*R*) ,9act] 1-6-C [1-tert .-butoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazolo[3,2-a]-azepin-3-carboxylat als ein Gemisch der Diastereomeren zusammen mit überschüssigem a-Ketoester und a-Hydroxyester. Durch Chromatografie an Süiziu-mdioxid konnte jedes Diastereomere in hoher Reinheit isoliert werden. Jedes Diastereomere wurde mit 4- η HCl in Äthylacetat entblockiert unter Bildung der Titelverbindungen, die die gewünschten spektralen Eigenschaften aufwiesen.

!6605Y

238350 4

3eispiel 50 Weitere Produkte der Formel I

Weitere Ketosäuren und Ketoester, die in der nachstehenden Tabelle I aufgeführt sind, sowie die in den vorstehenden Beispielen verwendeten, können reduktiv kondensiert werden mit Zwischenprodukten

Villa

VIIIb

nach den vorstehend beschriebenen Methoden, unter Bildung nach Entfernung von gegebenenfals vorhandenen Schutzgruppen, von Produkten der Formel I, die nachstehend in der Tabelle II aufgeführt sind. In den Zwischenprodukten Villa und VIIIb kann Rp Wasserstoff, Benzyl-, Phenyl-, Methyl-, Äthyl-, η-Butyl- und Allylgruppen bedeuten. Die letzteren Estergruppen können nach Methoden eingeführt werden, analog zu der Benzylestersynthese oder nach Methoden, wie sie in der Anmerkung 5 zu Tabelle II angegeben sind. In der Tabelle II bezieht sich die Stereochemie am 9a auf die Wasserstoffkonfiguration, die in der Ringstruktur in der bicyclischen Lactamteilstruktur der Verbindungen der

35 Formel I R oder S ist.

- 62 -

16605T

2383

Tabelle I

£etοsäuren und Ketoester der Formel

(a)

(b)

(C)

(d) Cl

-COCO₂-H-

H₂CH₂COCO₂CH₂CH"= CH₂

H₂CH₂CH₂-COCO₂C₂H₅

(e)

-CH₂COCO₂H

CH₂-COCO₂H

Cl

(f)

(g)

CH₂CH₂COCO₂H CH₂CH₂-COCO₂C₂H₅

16605Y

23 8 3 50

(h)

H2CH2COCO2C2H5

(i) CH3O

(j) HO-

(k)

CH2CH2COCO2C2H5

-CH₂CH₂COCO₂CH₂CsH₅

(D

CH2CH2COCO2CH3

H₂CH₂COCO₂C₂H₅

(m) Cl

CH₂CH₂COCo₂C₂H₅

(n)

CH

CH₃

(O) CH₃CH₂CH₂Ch₂-COCO₂C₂H₅

(P) F

CH₂CH₂COCO₂CH₃

(q) NH₂- (CH₂)₅-COCO₂H (D

- 64 -

16605Y 65

238350

^H₂NH₂ (^r) / ^N) CH₂CH₂COCO₂H

(D

H-iC^__j_____ CH₂CH₂COCO₂H

(t)

(U)

CH₂CH₂COCO₂H

/^) SCH₂S-COOH

(V) HOCH₂CH₂ - COCO₂C₂H₅ (3)

(W)

CH₃

NO₂

(X)

CH₂CH₂COCO₂C₂H₅ (4)

NO₂

(y)

CH₂CH₂COCO₂H

(ζ)

CH₂CH₂COCO₂H

16605Y 66

8 3 50

(aa)

(bb)

(cc) (dd) (ee)

CH₂CH₂COCO₂H

CH₂CH₂COCO₂C₂H₅

CH₂CH₂COCO₂H CH₂C-CO₂C₂H₅

CH₂C-CO₂H

(ff)

H₂SCH₂C-CO₂C₂H₅

(1) geschützt als das N-Phthaloylderivat 25 (2) 2-Lnidazol-NH geschützt als N-Benzylderivat

(3) geschützt als O-Benzylderivat

(4) Vorläufer zum m-Aminoderivat durch Hp/Pd.

- 66 -

16605Ϊ

238350

Tabelle II

Weitere Produkte der Formel I

Rl-CK-NH

(1) n-C^Kg-

(2) CH2=CK-CH₂-

±1.

<f~V-CH₂CH₂

C₂K₅

(2a) St er eochgwt Ϊ

C₂H₅-

(4) C₂K₅-

:k₂ck₂

-CK₂CH₂

C₂F₅-

(5) CH₂=CH-CH2

(6) CH₃-(") H-

-CH₂

-CH₂CH₂ -CH2CH₂

- 67 -

16605Y

23835

R₂

(9 Stereoch

(8) CH₃-(5)

-CH₂CH₂

10

CH₂CH₂ C₂H₅-

(10) CH3-CH2CH2

15

(11) H -CH2CH2-

20

(12) C₂H₅- !

(13) H Cl

-CH2CH2CH2 H

CH₂-

25

(14) H

(15) H

f~% CH2CH2

(16) C₂H₅-

-CH2CH2

CH3

- 68 -

16605Y

¹ 23835

69

Al.

(17) C₂H₅-

(9a) Stereoche

H2CH2 H

(18) C₂H₅-

CH3O f~% CH₂CH₂-

(19)

CH2- HO

(20) CH₃-

(21) C₂H₅

^H2^CH2

H₂CH₂.

H₂CH₂

C2H5

-CH₂ R

(22) C₂H₅-

(23) CH₃

(24) C₂H₅-

(25) CH₃-

(26) H

CH3S-CH2CH2-

(CH₃)2"CH-CH₂-CH₃CH₂CH₂CH₂

-CH₂CH₂-NH₂(CH₂J₅-

C₂H₅

f\ ^H₂

S R

- 69 -

16605Y 23 8 3 50

70

(27) H

(28) H

Rl

CH₂NH2

// \ CH2CH₂

CH₂CH₂

(29)	H	\ ν— O	-SCH2
(30)	C2H5	HOCH2CH2-
(31)	H	CHt 3> -( CH 3	CH2)4-
			Cl

(32) C₂H₅ Cl

(33) H

CH₂CH₂

CH₂CH₂-

C₂H₅

Stereocf

-CH₂ S

-CH₂-

(34) H

(35) H

CH₂CH₂

- 70 -

166051

23835

(36) C₂H₅

(9a) Stereochemifc

10 (37) C₂H₅

(38) C₂H₅

(39) H

(40) C₂H₅

(.41) H

(42) C₂H₅

/-CH₂CH₂-

S-CH₂

CH₂SCH₂

C₂H₅

CH₂=CH-CH₂

(5) Der erforderliche E₂~^Ester kann hergestellt werden dadurch, daß man zuerst VIII als sein t-BOC-Derivat schützt und es anschließend mit DCC und dem gewünschten Alkohol oder Phenol in Anwesenheit von 4— Dimethylaminopyridin umsetzt. In einigen Beispielen kann der R₂~^Es1:er auch eingeführt werden durch Reaktion des geschützten . VIII mit Gäsiumcarbonat und dem geeigneten Alkylhaloge-

35 nid in DIlF.

- 71 -

16605X 72

23 8 3 50 4

3eispiel 51

Komprimierte Tablette , enthaltend 5 nig aktiven Bestandteil

mg pro Tablette

C3R-L 3a ,6a(S*),9aß]]-6-[(1-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino ]-octahydro-5-oxothiazolo C3,2-a]-azepin-3-carbon-

säure 5

zweibasisch.es CaIc iumpho sphat 24-5

Äthylcellulose (als 5 % Lösung in

Äthanol) ^

unvermischte Granulation 255

Zusatz:

Stärke, Mais . 14

Magnesiumstearat 1_

270

Beispiel ^2

Trocken gefüllte Kapseln, enthaltend 5 ^S aktiven Bestandteil von Beispiel 51

mg pro Kapsel

Lactose Magnesiumstearat · gemischte Pulver

Der vorstehende aktive Bestandteil, Lactose und Magnesiumstearat werden vermischt und zu einem Pulver von 0,251 mm (60 mesh) zerkleinert. Zur Einkapselung werden 285 mg in jede Kapsel Nr. 2 gefüllt.

16605Y 73

23 8 3 50 4

Beispiel 53

Komprimierte Tablette,.enthaltend 5 mg aktiven Bestandteil

ms pro Tablette

C3H-C3a,6a(S*),9aß]]-6- [[1-(AtIi- ~

oxycarbonyl)-3-phenylpropyl ]-ajnino ]-octahydro-5-oxothiazoLo

[3,2-a]-azepin-3-carbonsäure 5

zweibasisch.es Calciumphosphat 24-5

Äthylcellulose (als 5 % Lösung

in Äthanol) J2.

unvermisehte. Granulation 255

Zusatz:

Stärke, Mais . 14-

Magnesiumstearat 1_

270

Beispiel 5^

Trocken gefüllte Kapsel, enthaltend 5 mg aktiven Bestandteil des Beispiels 53

mg Orο Kapsel

Lactose 5

Magnesiumstearat 273 gemischte Pulver 2

. 280

Der vorstehende aktive Bestandteil, Lactose und Magnesiumstearat werden vermischt und zu einem Pulver von 0,251 mm (60 mesh) zerkleinert. Zur Einkapselung werden 285 mg in jede Kapsel Nr. 2 gefüllt.

73 -

Claims (7)

16605T

233350 4

Patentanspruch.

1. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung mit der Formel

worin

R und Eo unabhängig Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl und Aralkyl sind;

R. die Bedeutung hat von Wasserstoff; Alkyl mit 1 bis 12 Kohlenstoffatomen, einschließlich verzweigter cyclischer und ungesättigter Alkylgruppen;

substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Halogen, Hydroxy, Carboxy, Niedrigalkylthio, Niedrigalkoxy, Niedrigalkoxycarbonyl, Niedrigaralkoxycarbonyl, Amino, Niedrigalkylamino, Uiedrigdialkylamino oder Acylamino sein kann;

substituiertem Niedrigalkyl mit .der Formel H_n(CH₉) Q-(CH₂)_m, worin η 0-2 ist, m 1-3 ist, R^ Aryl oder Heteroaryl, gegebenenfalls substituiert durch Amino, Hiedrigdialkylamino, Niedrigalkylamino, Hydroxy, Hydroxyniedrigalkyl, Aminoniedrigalkyl, Trihalogenniedrigalkyl, Cyano, Nitro, SuIfonamido, Aroyl, Niedrigalkyl, Halogen, Dihalogen und Niedrigalkoxy ist, und Q O, S, N-R_ß, CONR₀, NR₀CO, CH=CH ist, worin R_ß Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl, ArMLkyl,

λ-,ο,γα / ' 60 624 12

23 8 3 5 0 4 - 75 -

Niedrigalkanoyl oder Aroyl ist, und R^ Wasserstoff oder Niedrigalkyl ist;
Aral;

substituiertem Ary}., worin der Substituent Hie drigalkyl, Aminoniedrigalkyl, Niedrigalkoxy, Aryloxy, Aroyl, Hydroxy, Halogen oderDihalogen ist; Aralkyl oder Heteroaralkyl, einschließlich verzweigter Uiedrigalkylgruppen;

substituiertem Aralkyl oder substituiertem Heteroaralkyl, einschließlich verzweigter Niedrigalkylgruppen, worin die Hiedrigalkylgruppen substituiert sein können durch Amino, Acylamino oder Hydroxyl und die Aryl- und Heteroarylgruppen substituiert sein können durch Halogen,. Bihalogen, Hie drigalkyl, Hydroxy, Niedrigalkoxy, Aryloxy, Aroyl, Arylthio, Amino, Aminoniedrigalkyl, Hiedrigalkanoylamino, Aroylamino, Niedrigdialkylamino, HIedrigalkylamino, Hydroxy, Hydroxyniedrigalkyl, Trihalogenniedrigalkyl, Nitro, Cyano oder Sulfonamido;

gekennzeichnet dadurch, daß man ein bicyclisches Lactam der allgemeinen Formel YIII

YIII

worin Ep wie vorstehend definiert ist, mit ÖL —Ketosäureη und -estern reduktiv alkyliert, worauf man gegebenenfalls vorhandene Schutzgruppen entfernt unter Bildung von Produkten der Formel I und gegebenenfalls das biologisch aktivere Diastereomere durch Chromatografie

ί 6605Τ

23

350 4

oder Kristallisieren isoliert und - falls weiter gewünscht - ein pharmazeutisch "brauchbares Salz davon in üblicher Weise herstellt.

2. Verfahren nach Pkt. 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung die Formel

R₁ -CH-NH-J ¹ I

hat, worin E und Ep Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl ₍oder Aralkyl sind;

E. die Bedeutung hat von Alkyl mit 1-10 Kohlenstoffatomen, einschließlich verzweigter cyclischer und ungesättigter Alkylgruppen;

substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Hydroxy, Niedrigalkylthio, Amino, Alkylamino, Niedrigdialkylamino und Acylamino sein kann; substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel ^aC^EL·) Q-(CH₂)_m-, worin η 0-2 ist, m 1-3 ist, E^ Aryl oder Heteroaryl, gegebenenfalls substituiert durch Alkyl, Halogen, Dihalogen, Amino, Cyano, Hydroxy oder AIk-

oxy ist und QO, S, N-

CONE,

NE_QCO oder CH=CH

ist, worin E-g Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aralkyl, Niedrigalkanoyl oder Aroyl ist, und E_c Wasserstoff oder Niedrigalkyl ist;

Aralkyl oder Heteroaralkyl, einschließlich verzweigter Niedrigalky!gruppen;

16605Ϊ

10

38 3 50

substituiertem Aralkyl oder substituiertem Heteroaralkyl einschließlich verzweigter Niedrigalkylgruppen, worin die Niedrigalkylsubstituenten Amino, Acylamino oder Hydroxy sein können und die Aryl- und Heteroarylsubstituenten Niedrigalkyl, Halogen, Dihalogen, Amino, Cyano, Hydroxy, Niedrigalkoxy, Aminoniedrigalkyl oder Hydroxyniedrigalkyl sein können.

3. Verfahren nach Pkt. 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung die Formel

15 20

O₂R

25 30 35

hat, worin S und IL-, unabhängig Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl oder Aralkyl sind;

H die Bedeutung hat von Alkyl mit 1-10 Kohlenstoffatomen, einschließlich verzweigter Alkylgruppen; substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Amino, Acylamino oder Niedrigalkylthio sein kann; substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel R_n(CH₉) Q-(CH₂) -, worin η 0-1 ist, m 1-2 ist, H_A Phenyl, gegebenenfalls substituiert durch Halogen, Dihalogen, Alkoxy oder Cyano ist und Q 0 oder S ist; Aralkyl oder Heteroaralkyl;

substituiertem Aralkyl oder substituiertem Heteroaralkyl, worin die Aryl- und Heteroarylsubstituenten Halogen, Dihalogen, Cyano, Hydroxy, Hydroxyniedrigalkyl,

- 77 -

16605Ϊ 78

23 8 3 50 4

Amino und Aminoniedrigalkyl sind.

4. Verfahren nach Pkt. 1, dadurch gekennzeichnet, daß die Verbindung die Formel

R₁-CH-NH-J CO₂R

hat, worin H und Hp unabhängig Wasserstoff, Niedrigalkyl mit 1-4- Kohlenstoffatomen, Phenyl oder Benzyl bedeuten; und

R. die Bedeutung hat von Alkyl mit 1-8 Kohlenstoffatomen, einschließlich verzweigter Alkylgruppen; substituiertem Niedrigalkyl, worin der Substituent Amino oder Niedrigalkylthio sein kann; substituiertem Niedrigalkyl mit der Formel R_n(CHo) Q-(CH₂)J₁-, worin η O ist, m 1 ist, E. Phenyl ist und Q O oder S ist;

Aralkyl, worin das Aryl Phenyl oder Naphthyl ist und die Alkylgruppe 1 bis 3 Kohlenstoffatome aufweist, oder Heteroaralkyl, worin die Heteroarylgruppe Indol, Thiophen, Imidazol, Pyridin, Chinolin oder Isochinolin ist und die Alkylgruppe 1-3 Kohlenstoffatome enthäl;

substituiertem Aralkyl, worin das Aryl eine Phenylgruppe ist, das Alkyl 1-3 Kohlenstoffatome enthält und die Phenylsubstituenten Halogen, Hydroxy, Phenoxy, Niedrigalkoxy, Amino oder Aminomethyl sein können.

- 78 -

16605Y . 79

23 8 3 50 4

5· Verfahren nach Pkt. 1, dadurch gekennzeichnet, daß das bicyclische Lactam die Formel

.

_ov H

hat, worin Hp Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl und Aralkyl ist.

6. Verfahren nach Pkt. 1, dadurch gekennzeichnet, daß

das bicyclische Lactam die Formel 20

hat, worin Rp Wasserstoff, Niedrigalkyl, Aryl und Aralkyl ist.

7. Verfahren nach einem oder mehreren der Pkt. 1, 5 6, dadurch gekennzeichnet, daß das bicyclische Lactam hergestellt wurde durch Schützen der Aminogruppe von 2(S)-Amino-6-hydroxy-hexansäure ·, Oxidieren der Hydroxygruppe zum Aldehyd, 5-Formyl-2(S)-geschütztes Amino-pentansäure ;' Kondensieren mit einem Ester von

- 79 -

16605Y 80

χ. 238350 4

R-Cystein unter Bildung des Diastereomerengemischs der entsprechenden Thiazolidine; und ßingschluß mit N-Äthoxycarbonyl-2-äthoxy-i,2-dihydrochinolin unter Bildung des 6-geschütztes-Amino-octahydro-5-oxothiazole? C3 ,2-a]-azepin-3-carboxylats ; gegebenenfalls Trennen der Isomeren; Entfernen der Schutzgruppen; und gegebenenfalls Entfernen der Estergrup pen zur Herstellung der Säuren.

8. Verfahren nach Pkt. 1, dadurch gekennzeichnet, daß die erhaltene Verbindung ausgewählt ist aus der Gruppe:

C3S-C3a,6a(S*) ,9act] ]-6-C (1-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3₅2-a]-azepin-3-carbonsäure;

C3H-C3a,6a(S*),9aß]]-6-[(1-Carboxy-3-phenylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloL3i2-a]-azepin-3~car- bonsäure;

E-C 3a,6a(S*),9aß]]-6-C C1-(Äthoxycarbonyl)-3-phenyl propyl ]-amino]-octahydro-5-oxothiazolö C3,2-a!-azepin 3-carbonsäure;

3E-C3a,6a(S*)_i9aa]]-6-CCi-(Ätiaoxycarbonyl-)-3-plien7lpropyl3-amino ]-octahydro-5-oxothiazol<3[3 ,2-a]-azepin

3-carbonsäure;
30

n-Butyl-C3E-C3a,6a(S*),9aß]]-6-CCi-(methoxycarbonyl) 3-piienylpropyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazolüC3,2-a azepin-3-carboxylat;

Äth.yL-(3R-C3a,6a(S*) ,9aß]].-6-CCi-(äthoxycarbonyl)-3-phenylpropylI-amino]-octahydro-5-oxothiazolo C3₅2-a]-azepin-3-carboxylat;

- 80 -

16605Y 81

8 3 50

Äthyl-C3E-C3α,6α(S*),9aa]]-6-C[i-(äthoxycarbonyl)-3-phenylpropyl]-amino ]-octanydro-5-oxothiazolo C3 ,2-a] azepirL-3-cartioxylat;

Benzyl-C 3H-E3α,6α(S*) ,9aß]]-6-C(1 -carboxy-3-plienylpropyl)-amino]-octahydro-5-oxothiazoloC3,2-a]-azepin-3-carboxylat;
10

Pneiiyl-L3R-C3a,6a(S*),9aß]]-6-C(i-carboxy-3-piieiiylpropyl)-amino ]-οetaiiydro-5-oxothiazoIo[ 3 ,2-a] -azepin-3-carboxylat;

n-Butyl-L 3^-C 3α, 6α ( S* ) , 9aß] ] -6-Γ [ 1 - (methoxycarbonyl)-3-piienylpropyl]-amino]-octahydro-5-oxothiazoloL3,2-a]-azepin-3-carboxylat; und

Benzyl-C3H-13a,6a(S*) ,9a_ß] ]-6-[ Li-(methoxycarbonyl·)-3-piienylpropyl]-amino]-octaliydro-5-oxotliiazoloC3 ,2-a] azepin-3-carboxylat.

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