DD299150A5 - Akarizides mittel und verfahren zur herstellung seiner wirkstoffe - Google Patents
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Landscapes
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Die Erfindung betrifft ein akarizides Mittel, insbesondere zur Bekaempfung der auf der Honigbiene (Apis mellifera) schmarotzenden Milbe Varroa jacobsoni. Das Mittel enthaelt als Wirkstoff die gegebenenfalls von den Zellen befreite Fermentbruehe oder den Extrakt der gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbruehe oder die festen (zum Beispiel getrockneten) Formen der gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbruehe des Bacillusstammes NCAIM 001083 oder des Pseudomonasstammes NCAIM 001086 oder der gemischten Mikropopulation der beiden Staemme (NCAIM National Collection of Agricultural and Industrial Microorganism, Budapest, Ungarn). Das Mittel wird zum Bespruehen des Stockes beziehungsweise der Rahmen und Waben, insbesondere jedoch, vorzugsweise mit Zuckersaft oder Honig vermischt, zum Fuettern und Traenken der Bienen verwendet.{Akarizid; Bekaempfung; Milbe; Honigbienenmilbe; Varroa jacobsoni; Fermentbruehe; Fermentextrakt; Bacillusstamm NCAIM 001083; Pseudomonasstamm NCAIM 001086; Bespruehen; Futterzusatz}
Description
insbesondere von der Haemolymphe der sich entwickelnden Bienen ernährt. Als Ergebnis der Verseuchung des Stockes und vonder Schwere der Verseuchung abhängend erscheinen mißgebildete Binnen, das Volk wird geschwächt und anfällig gegen
beträchtlich. Der Befall eines Volkes wird anfangs 3-4 Jahre, in späteren Jahren 2-3 Jahre nach dem Befall offenkundig; die
1) Die Stöcke werden mit unterschiedlichen ätherischen Ölen behandelt beziehungsweise ausgeräuchert;
2) Anwendung unterschiedlicher synthetischer organischer Wirkstoffe, zum Beispiel
- synergistische Kombination mit Pyrethrinpiperonylbutoxyd Chemical Abstracts World Index (im folgenden: WPI Acc No.) 86-212705/33;
- Tetradifon (The Pesticide Manual, 8th Ed. The British Crop Protection Council, Registry Number (im folgenden: Reg. No. 116-29-0]) und Dicofol (Reg. No. 115-32-2) als Kombination; WPI Acc No. 86-037330/06;
- Bienenwachs mit antiparasitären Wirkstoffen, zum Beispiel 4,4-Dibrombenzylsäureisopropylester, WPI Acc No. 85-290439/ 47;
- 1-Pyridylformimino-2-phenoxymethyl-2-imidazolin-Derivate WPI Acc No. 85-224091/37;
- die 2-Anilinomethyl-2-imidazolin-Derivate WPI Acc No. 85-217891 /36
- das 2-Dimethylphenylimino-3-methyl-thiazolin WPI Acc No. 84-284115/46;
- Azoxybenzol enthaltene^ Mittel WPI Acc No. 82-95526E/45
- die mit Aceton bereitete Lösung von Aryl-N-methyl-carbamaten WPI Acc No. 78-82396A/46
- Futtermittel und Trinkwasser mit einem Gehalt en synthetischen Pyrethroiden WPI Acc. No. 87-130020/19.
Die synthetische organische Wirkstoffe enthaltenden Mittel werden durch Zerstäuben oder Räuchern in den Stock (die Beuten) eingebracht. Derartige Mittel sind zum Beispiel Mitac EC (200g/l) und Mitac WP (250-500g/kg), die als Wirkstoff das nicht in allen Ländern zugelassenen Amitraze enthalten, ferner Ectodex EC (50g/l) (The Pesticide Manual 8th Ed.). Diese Präparate dürfen nur bei entsprechenden Außentemperaturen (über 100C) angewendet werden. Wird die Behandlung nicht zum richtigen Zeitpunkt vorgenommen oder zu oft wiederholt, so kann es, wie angenommen wird, zu einer Anhäufung schädlicher Nebenprodukte kommen, die für die Bienen, aber auch für die Imker schädlich sein können.
3) Lock-und Abschreckstoffe
- WPI Acc No. 87-129545/19 und
- WPI Acc No. 84-018266/04;
4) sonstige Bekämpfungsverfahren, zum Beispiel
- mechanische Bekämpfung WPI Acc No. 84-302720/49 und
- Sterilisation der Milben mittels Röntgenstrahlen WPI Acc No. 86-048672/08.
ihrer gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbrühe oder die aus der gegebenenfalls von den Zellen befreiten
(National Collection of Agricultural and Industrial Microorganism, NCAIM) an der Budapester Universität für Gartenbau(Budapest, Ungarn) unter den Nummern 001083 und 001086 hinterlegt. Von den beiden Stämmen ist der Bacillusstamm 001083neu, der Pseudomonasstamm 001086 bekannt. Die gemischte Mikropopulation der beiden Stämme ist ebenfalls neu.
gewonnenen Anwendungsformen unmittelbar nach dom Einwintern angewendet werden. Die Toxizität für Bienen beträgt etwa
normale Leben der Völker weniger stört als Räuchermethoden, das partielle Zerlegen d6r Beuten usw., wie das aus dem Beispiel38 hervorgeht. Auch ist es nie gelungen, mit der sehr verbreiteten Amitraze-Behandlung eino 100%ige Wirkung zu erreichen. Die
einer identischen Wirkung immer höhore Mengen eingesetzt werden müssen, d. h. daß die Entstehung einergewissen Resistenzzu beobachten ist.
getrockneten Formen der gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbrühe des Bacillusstammes NCAIM 001083 oder des
erfindungsgemäßen Bekämpfungsverfahren werden die Honigbienen oder der Stock beziehungsweise dessen Rahmen mit demdie gegebenenfalls von den Zellen befreite Fermentbrühe oder den Extrakt der gegebenenfalls von den Zellen befreiten
des Bacillusstammes NCAIM 001083 oder des Pseudomonasstammes NCAIM 001086 oder der gemischten Mikropopulation derbeiden Stämme enthaltenden Mittel behandelt oder die Bienen werden mit dem Mittel gefüttert oder getränkt.
suspendiert werden. Aus der Suspension wird unter ständigem Rühren mit physiologischer Kochsalzlösung eine
mit etwa der zehnfachen Menge an verflüssigtem Nähragar der Temperatur von 40-45°C aufgefüllt. Nach gründlichem
| a) | b) | |
| Fleischextrakt | 3,0 g | 3,0 g |
| Pepton | 10,0 g | B1Og |
| Agar | 20,0 g | 15,0 g |
| destilliertesWasser | 1000,0 ml | 1000,0 ml |
| pH | 7,2 | 7.0 |
Die Nährböden werden bei 120°C 20 Minuten lang sterilisiert. Die Petrischalen werden, vorzugweise nach unten umgewendet, einige (2-6) Tage bei 25-30X inkubiert. Im Laufe der Inkubation erscheinen auf dem Nährmedium Kolor/ ; im allgemeinen werden die etwa 10-20 Kolonien aufweisenden Petrischalen weiter verarbeitet. Die Kolonien werden in an sich bekannter Weise weiter vereinzelt. Auf diese Weise erhält man Kolonien, die morphologisch homogen sind oder spontan entstandene gemischte Mikropopulationen enthalten. Die spontan entstandenen reinen oder gemischten Mikropopulationen werden auf Schrägagar aufechterhalten, der zum Beispiel die folgende zweckmäßige Zusammensetzung haben kann:
| Fleischextrakt | 1,0g |
| Hefeextrakt | 2,0 g |
| Pepton | 5,0 g |
| NaCI | 5,O0 |
| Agar | 15,0 g |
| destilliertesWasser | 1000,0 ml |
| pH 7,4 |
gelagert.
Von der Oberfläche der auf diese Weise gelagerten Schrägagar werden die Zellen mit physiologischer Kochsalzlösung abgewaschen und mit ihnen eine Nährlösung von vorzugsweise der folgendon Zusammensetzung beimpft;
| Pepton | 7,8 g |
| Triton | 7,8 g |
| Hefeextrakt | 7.8 g |
| NaCI | 5,6 g |
| Glucose | 1,0 g |
| destilliertes Wasser | 1000,0 ml |
| pH 7,5 |
Sterilisation bei 120°C 20 Minuten. Die Kulturen werden 2-3 Tage lang bei 30-350C, vorzugsweise in einer Schüttelkultur, oder aber in einer stehenden Kultur (unter teilweise anaeroben Bedingungen) fermentiert.Die Formentbrühe kann gewünschtenfalls, vorzugsweise mit einem Membranfilter, von den Zellen befreit werden. Die biologische, insbesondere akarizide Wirkung der gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbrüho wird untersucht. Ist die biologisch wirksame Population eine gemischte Population, so wird sie auf folgende Weise in ihre Stämme zorlegt. Die Population wird unter Verwendung eines für differentialdiagnostische Zwecke geeigneten Nährmediums erneut vereinzelt. Dieses Nährmedium kann zum Beispiel folgende Zusammensetzung aufweisen.
| a) | 20,0 g |
| Pepton | 5,0 g |
| NaCI | 15,0 g |
| Agar | 1000,0 ml |
| destilliertesWasser | 20-5OmI |
| defibriertesBlut | |
Das Nährmedium wird ohne Einstellung des pH bei 120°C 20 Minuten lang sterilisiert, dann auf 480C gekühlt und unter sterilen Bedingungen mit dem defibrierten Blut verseht.
| b) | 0,3 g |
| Fleischextrakt | 1,0g |
| Pepton | 2,ög |
| Agar | 1000,0 ml |
| destilliertes Wasser | 10,0 m! |
| steriles, defibriertes Blut | |
Das Blut wird zu dem verflüssigten, auf 480C gekühlten Nährmedium gegeben. Das Medium wird für 5 Minuten auf ein 800C warmes Wasserbad gestellt und dann in sterilen Petrischalen zu Platten vergossen.
| C) | 5,0 g |
| Fleischextrakt | 10,0 g |
| Pepton | 5,0 g |
| Dextrose | 4,0 g |
| Dinatriumhydrogenphosphat | 0,3 g |
| EisendDsulfat | 8,0 g |
| Wismutsulfit | 0,025 g |
| Brillantgrün | 20,0 g |
| Agar | 1000,0 ml |
| destilliertesWasser | |
| pH 7.7 | |
Die sämtliche Komponenten enthaltende Lösung wird unter ständigem Rühren so lange erwärmt, bis sie bis zum Kolbenhals schäumt. Dann läßt man unter ständigem Rühren auf etwa 50-5G0C abkühlen und gießt das Nährmedium in Petrischalen.
| d) | 10,0 g |
| Proteasep ~oton | 3,0 g |
| Hefeextrakt | 10,0 g |
| Lactose | 10,0 g |
| Saccharose | 5,0 g |
| NaCI | 0,08 g |
| Phenolrot | 0,0125 g |
| Brillantgrün | 12,0 g |
| Agar | 1000,0 ml |
| destilliertesWasser | |
| pH 6,9 | |
Das Nährmedium wird bei 12O0C15 Minuten lang sterilisiert und dann in sterile Pauschalen gegossen.
Auf diese Weise werden die Fermentbrühe beziehungsweise ihre unterschiedlichen Aufarbeitungsformen (s. Beispiel 3-11), die unmittelbar oder in formulierter Form (s. Beispiele 12-37) zur Bekämpfung der auf der Honigbiene Apis mellifera schmarotzenden Milbe Varroa jacobsoni verwendet werden können.
Erfindungsgemäß kann der Wirkstoff (im Sinne der Erfindung werden hier unter Wirkstoff die rohe Fermentbrühe oder deren extrakt, die von den Zellen befreite Fermentbrühe oder deren Extrakt, die beziehungsweise die festen, zum Beispiel getrockneten, gewünschtenfalls strahlensterilisierten Formen der Fermentbrühe verstanden) zu an sich bekannten Mitteln formuliert werden (Pesticid Formulations, Wade van Valkenburg; Marcel Dekker Inc. New York 1973), zum Beispiel zu Stäubemitteln, Spritzpulvern, Suspensionskonzentraten, wasserlöslichen Konzentraten, Aerosolpräparaten oder zu anderen, zum Beispiel zum Füttern und Tränken geeigneten Mitteln.
Diese Mittel enthalten neben dem Wirkstoff feste oderflüsnige Trägerstoffe, Lösungsmittel, Tenside und gegebenenfalls sonstige Hilfsstoffe, die den Wirkstoff für die Anwendung geeignet machen (s. zum Beispiel GB1552 277). An die Hilfsstoffe (Trägerstoffe, Lösungsmittel, Tenside, Schaumhemmer, Stabilisatoren usw.) besteht ferner die Anforderung, daß sie für die Bienen - beziehungsweise mittelbar für den Menschen - nicht toxisch sein dürfen.
Die festen Träger- und Streckmittel können natürlich oder synthetisch, anorganischer oder organischer Natur sein. Die natürlichen festen Träger- und Streckmittel sind zumeist aus unterschiedlichen Mineralien durch Mahlen gewonnene Gesteinsmehle (Kieselerde, Bentonit, Perlit, Kaolin, Dolomit usw.). Zu den festen Träger- und Streckmittel synthetischen Ursprungs zählen zum Beispiel die auf unterschiedliche Weise hergestellten, eine große spezifische Oberfläche aufweisenden Kieselsäuren (Aerosile) und Silikagele, ferner das durch Neutralisierung von Kalkmilch hergestellte feinverteilte Calciumcarbonat, das Aluminiumhydrat oder das durch dessen Wärmebehandlung und Vermahlung hergestellte Aluminiumoxyd. Als feste organische Träger natürlichen Ursprungs kommen Mehl, Zucker, Mahlgut aus Pflanzenabfällen (Holzmehl) in Frage.
Flüssige Träger und Lösungsmittel sind Wacser, organische Lösungsmittel oder deren Gemische, Alkananole, polyfunktionelle Alkenole, deren mit unterschiedlichen Säuren, zum Beispiel mit Fettsäuren, aromatischen Säuren, Hydroxy- und Aminosäuren gebildeten Ester, wie zum Beispiel Äthyl- oder Isobutylacetat, Amylacetat, Benzoesäuremethylester, Dioctylphthalat usw. Es können auch andere polare organische Lösungsmittel, zum Beispiel Säureamide wie Dimethylformamid, Lactone wie gamma· Butyrolacton, Lactame wie N-Methylpyrrolidon gewählt werden.
Zu den in den unterschiedlichen Mitteln eingesetzten oberflächenaktiven Stoffen werden hier die Emulgier-, Dispergier- und Netzmittel gezahlt, die zjr Formulierung von Pestiziden allgemein bekannt sind. Die Tenside können nichtionisch oder ionisch
Zu den nichtionischen Tensiden zählen die mit Alkoholen gebildeten Äther beziehungsweise die mit Fettsäuren gebildeten Ester des Äthylenoxyds, ferner saina mit Aralkylphsiiolan gebildeten Äther, seine mit Propylenoxyd gebildeten Copolymerisate, deren
Ester und Äther, dio mit den Hexitanhydriden von Fettsäuren gebildeten Derivate des Äthylenoxyds usw. Als Beispiele seien die
Nonylphonolpolyglycoläther, die Ölsäurepolyoxyäthylenester und das Polyoxyäthylensorbitanmonooleat erwähnt.
Die Ioni&chen Tenside können anionisch oder kationisch oder amphoter sein.
Zu den anionischen Tensiden gehören die unterschiedlichen'organischen Säuren, zum Beispiel Carbonsäuren, die Sulfonsäuren, die Alkoholsulfate und -sulfonate, die Phosphatester der Polyoxyäthylenäthor und -ester und ihre mit Alkali-, Erdalkali- oder organischen Anionen gebildeten Salze, zum Beispiel Schmierseife, Dodecylbenzolsulfonsäure-Ca-, -Na-, Ammonium- und Diisopropylammoniumsalz, Natriumdiisooctylsulfosuccinat und die mit den angegebenen Kationen gebildeten Salze der Polyacrylsäure.
Kationische Tenside sind zum Beispiel die Halogenide, Sulfonate der langkottigen Alkyiamine, das St^ar '.dimethyiammoniumchlorid, die langkettigen Äthanolamine oder deren Salze sowie auch die mit anionischen Tensiden gebildeten Salze.
Amphotere Tenside sind zum Beispiel die Betaine, die Lecithine, das Natrium-N-methylalkyltaurimid usw.
Als Hilfsstoffe kommen zum Beispiel haftungsvermittelnde natürliche oder synthetische Polymere in Betracht, zum Beispiel Stärke, Dextrin, Mono- ur.d Disaccharide, Carboxymethylcellulose, Hydroxyäthylcellulose, Polyvinylpyrrolidon, Polyacrylsäure, Xanthangummi, Alginate. Als Antischaummittel können Polyoxyäthylen-polyoxypropylen-Copolymerisate, langkettige Alkenole oder spezielle Silikonöle verwendet werden. Weiterhin können als Hilfsstoffe Lockstoffe wie Honig, Mono- oder Disaccharide, Duftstoffe wie Isoamylacetat verwendet werden. Zu den Hilfsmitteln sind auch die Stabilisatoren zu rechnen, die die Stabilität des Mittels gewährleisten. Als Beispiele seie ι Benzoesäure, Natriumbenzoat, die Ester der p-Hydroxybenzoesäure genannt.
Die Wirkstoffe können als flüssige, feste oder Aerosolpräparate formuliert werden.
Zur Herstellung flüssiger Formulierungen wird der Wirkstoff in einem geeigneten Lösungsmittel, vorzugsweise in Wasser, gelöst oder suspendiert, wobei die erwähnten Hilfsstoffe gleichzeitig oder nacheinander zugegeben werden.
Die flüssigen Präparate können nicht nur homogen, sondern auch dispers sein. Letztere werden hergestellt, indem der feste Wirkstoff auf eine geeignete Teilchengröße zerkleinert, dann in einem die entsprechenden oberflächenaktiven Stoffe enthaltenden Dispersionsmedium dispergisrt und dann zum Beispiel in einer Perlmühle weiter vermählen wird. Zu den erhaltenen Suspension werden in einem Rührwerk mit niedriger Drohzahl das Antischaummittel und gewünschtenfalls ein viskusitätserhöhendeä Mittel gegeben.
Zur Herstellung pulverförmiger Mittel wird der Wirkstoff in einer geeigneten Vorrichtung gemahlen und dann mit dem Träger und den oberflächenaktiven Stoffen homogenisiert. Man kann auch Wirkstoff, Träger und oberflächenaktive Substanzen zuerst homogenisieren, dann mahlen und schließlich erneut homogenisieren. Zum Mahlen können Hammermühlen, Schlagleistenmühlen, Stiftmühlen oder Luftstrahlmühlen verwendet werden. Es ist auch möglich, den Träger und die oberflächenaktiven Stoffe in der den Wirkstoff enthaltenden Disp', sion oder Lösung zu dispergieren und die erhaltene FlüssigkeK dann auf eine bekannte Weise, zum Beispiel durch Zerstäubungstrocknung oder Lyophilisieren, zu trocknen.
Gewünschtenfalls kann das erhaltene Pulver gemahlen und homogenisiert werden.
Bei der Herstellung und Anwendung flüssiger Präparate ist zu bedenken, daß die zum Einsatz kommende Flüssigkeitsmenge nicht zu groß sein kann; die Bienen würden so naß werden, daß das ihre Bewegung verhindert. Von der gemäß Beispiel 8a hergestellten zellfreien Fermentbrühe können vorzugsweise 5-50OmI pro m2 Bienenrahmen verwendet werden. Da die Fermentbrühe bzw. deren Verarbeitungsformen jedoch für die Blenne nicht toxisch sind, können auch größere oder kleinere Dosen verwendet werden. Häufigkeit der Behandlung und Größe der Dosis hängen im allgemeinen vom Befallsgrad ab. Wegen des erwähnten Nachteils der flüssigen Präparats ist im allgemeinen der Einsatz der unterschiedlichen pulverförmiger! Präparate bevorzugt. Davon werden im allgemeinen Mengen eingesetzt, die 0,01-1 Og Wirkstoff/m2 Bienenrahmen entsprechen. Eine sehr vorteilhafte Anwendungsform sind die Fütter- und Tränkpräparate, weil bei ihrer Anwendung die Beute nicht auseinandergenommen werden muß, ferner eine gleichmäßige und andauernde Dosierung möglich ist, im Gegensatz zu den Sprüh- und Stäubemitteln. Im Falle der Fütter- und Tränkemittel wird statt der Dosis der Fütterungs- bzw. Tränkzeitraum angegeben, der zur Verringerung beziehungsweise Beseitigung erford jri' n ist.
Die Erfindung wird an Hand der folgenden Beispiele Weiter erläutert, :st jedoch nicht auf diese Beispiele beschränkt. Die %-Angaben in den Beispielen sind Ma.-%.
1986) isoliert. 1 g Bodenprobe wurde in 99 ml physiologischer Kochsalzlösung suspendiert. Aus der Suspension wurde eine
gegeben wurden. Aus jedem Kolben wurde 1 ml in eine sterile Petrischale von 4cm Durchmesser pipettiert und mit je 9mlverflüssigtem Nährboden einer Temperatur von 40-450C versetzt, der 0,02 mg/ml Actidion enthielt.
erstarren gelassen. Die nach unten gedrehten Petrischalen wurden bei 28°C 72 Stunden lang inkubiert. Für die weiteren
mehrmals nach an sich bekannten Methoden vereinzelt, wodurch neun sich voneinander unterscheidende, in sich homogene
bzw. 8a und b hergestellten Fermentbrühen bzw. zellfreien Fermentbrühen der isolierten reinen beziehungsweise gemischtenκ "i wurden auf die in den Beispielen 38-40 beschriebene Weise auf ihre akarizide Wirkung untersucht.
der Kulturen zwei Stämme (reine Subkulturen) isoliert und bei der NCAIM unter den Nummern 001083 und 001086 hinterlegt.
a) Der Pseudomonasstamm NCAIM 001086 bildet auf einfachem Nähragar glänzende graue Kolonien von 0,5-1 mm Durchmesser. Das Wachstum ist bei 370C schwach, bei 30°C besser.
b) Der Bacillusstamm NCAIM 001083 bildet auf einfachem Nähragar matte, schwachgraue Kolonien von 1-2 mm Durchmesser.
| a) | Gram: | positiv |
| b) | Sporenbildung | oval |
| c) | Bewegung | positiv |
| d) | Wachstum anaerob | positiv |
| θ) | Wachstum auf Wismutsulfit-Agar | +/- |
| f) | auf Eosin-Methylenblau-Agar | +/- |
| g) | in Gegenwart von 7% NaCI | positiv |
| h) | Katalaso | positiv |
| i) | No3-NO2-Umwandlung | negativ |
| j) | Voges-Proskauer | negativ |
| k) | Indol | negativ |
| I) | Urease (Kristensen) | negativ |
| m) | Arginindihydrolase | negativ |
| n) | Lysindecarboxylase | negativ |
| o) | Ornithindecarboxylase | negativ |
| P) | Eskulinhydrolyse | positiv |
| q) | Stärkehydrolyse | negativ |
| r) | Kaseinhydrolyse | negativ |
| s) | Lecithinhydrolyse | negativ |
| t) | Gelatinehydrolyse | positiv |
| u) | Ammoniumeitrat | negativ |
| ü) | Säurebildung auf Oxydations-Fer- | |
| mentations-Nährboden nach Hungh-Leifson | oxydativ | |
| v) | Gasbildung in Peptonwasser-Glucose | negativ |
| Säurebildung (BBS) | Glucose | positiv |
| Fructose | positiv | |
| Lactose | negativ | |
| Maltose | negativ | |
| Mannit | positiv | |
| Ramnose | negativ | |
| Saccharose | positiv | |
| Xylose | negativ | |
| (Peptonwasser) | Arabinose | negativ |
| Adonit | negativ | |
| ONPG | positiv |
a) Die Zellen der auf Schrägnähragar aufrechterhaltenen gemischton Mikropopulation werden mit pro Röhrchen je 5ml physiologischer Kochsalzlösung suspendiert. Je ein ml der Suspension wird in 100ml Nährmedium gegeben, das sich in Kolben von 500ml Volumen befindet und die folgende Zusammensetzung hat:
0,78%Pepton
0,78% Triton
0,78 % Hefeextrakt
0,56% NaCI
0,1 % Glucose
(pH 7,5, sterilisiert bei 12O0C 20 Minuten lang), die beeimpften Kolben werden bei 320C 72 Stunden lang mit einer Frequenz von 300min"1 geschüttelt.
b) Man arbeitet auf die unter a) beschriebene Weise mit dem Unterschied, daß der Pseudomonasstamm NCAIM 001086 fermentiert wird.
Ein Liter der gemäß Beispiel 3a erhaltenen Fermentbrühe (Trockensubstanzgehalt 2,4%) wird mit Luft einer Eintrittstemperatur von 12O0C und einer Austrittstemperatur von 65-750C zerstaubungsgetrocknet. Das erhaltene Trockenprodukt hat eine Masse von 25,5g, sein Feuchtegehalt beträgt 5,8%.
Belsplel5
Das gemäß Beispiel 4 erhaltene Produkt wird mit Gammastrahlen in einer Dosis von 5 kGr bestrahlt. Der Erfolg der Strahlensterilisation wird in an sich bekannter Weise mit der Plattenmethode kontrolliert.
Beispiel β
Lyophilisieren der Fermentbrühe
Je 100ml der gemäß Beispiel 3a erhaltenen Fermentbrühe werdan 24Stunden lang bei -250C gehalten und in einem Gerät des Typs Edwards Supermodulyo 12K innerhalb von 24 Stunden lyophilisiert. Die Trockenmasse eines Lyophilisates beträgt 2,3-2,5g.
Das gomäß Bespiel 6 erhaltene Lyophilisat wird mit Gammastrahlen in einer Dosis von 5KGr bestrahlt. Der Erfolg der Strahlensterilisation wird in an sich bekannter Weise mit der Plattenmethode kontrolliert.
a) Ein Liter der die gemischte Mikropopulation enthaltenden Fermentbrühe gemäß Beispiel 3a wird in einer kühlbaren Zentrifuge des Typs LU 418H mit einer Drehzahl von 4000 min'1 bei 4°C eine Stunde lang zentrifugiert. Der klare Überstand wird mehrfach durch Membranen einer Porenweite von 0,45, dann 0,2 Mikron (Hersteller: Sartorius) filtriert, wodurch die Zellen restlos entfernt werden. Die filtrierte Fermentbrühe hat einen Trockensubstanzgehalt von 1,02%. Der Erfolg der Zellenentfernung wird in an sich bekannter Weise mit der Plattenmethode kontrolliert.
b) Man arbeitet auf die im Punkt a) beschriebene Weise, geht jedoch von der Fermentbrühe des Pseudomonasstammes NCAIM 001086 aus.
Ein Liter der gemäß Beispiel 8 a erhalteien zellfreien Fermentbrühe (Trockengehaltsubstanz 1,02%) wird mit Luft einer Eingangstemperatur von 12O0C und einer Ausgangstemperatur von 65-750C zerstäubungsgetrocknot. Die Masse des erhaltenen Produktes beträgt 10,57g, sein Feuchtegehalt 3,7%.
Ein Liter der gemäß Beispiel 8a erhaltenen zellfreien Fermentbrühe wird 48 Stunden lang bei -25°C gehalten und in einem Gerat des Typs Edwards Supermoduiyo 12 K innerhalb von 24 Stunden Iyophiiisiert. Die Masse des Lyophiiisates beträgt 10,2 g.
Ein Liter der gemäß Beispiel 8a erhaltenen zellfreien Fermentbrühe wird In einem Filmeindampfer bei 5O0C unter einem Druck von 380Hgmm auf ein Volumen von 0,33Liter eingedampft.
Zu einem Liter der gemäß Beicpiel 8 a erhaltenen zellfreien Fermentbrüi ie wird Saccharose in einer Menge von 1 /60 seiner Masse gegeben. Die Flüssigkeit wird 48 Stunden lang bei -250C gehalten und in einem Gerät des Typs Edwards Supermoduiyo 12 K innerhalb von 24 Stunden Iyophiiisiert.
Flüssige Präparate Sprühmittel
Wirkstoff gemäß Beispiel 3a oder 3b 99,8%
Polyoxyäthylensorbitanmonooleat 0,1 %
Methylsilikinöl-Emulsion (10%ig) 0,1 %
Das Präparat wrid durch Vermischen (Homogenisieren) der Komponenten hergestellt.
| Beispiel 14 | 97,8% |
| Wirkstoff gemäß Beispiel 8a | 2,0% |
| Dextrin | 0,1% |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | 0,1 % |
| Methylsilikonöl-Emulsion (10%ig) | |
| Herstellung wie in Beispiel 13. | |
| Beispiel 15 | 92,0 Vo |
| Wirkstoff gemäß Beispiel 11 | 7,2% |
| Saccharose | 0,5% |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | 0,3% |
| Methylsilikonöl-Emulsion (10%ig) | |
| Herstellung wie in Beispiel 13. | |
| Beispiel 16 | 93,0% |
| Wirkstoff gemäß Beispiel 11 | 6,3% |
| Saccharose | |
| Fettalkohol-polyoxyäthylenäther- | 0,25% |
| phosphatester-Kaliumsalz | 0,15% |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | 0,25% |
| Methylsilikonöl-Emulsion (10%ig) | 0,05% |
| Isoamylacetat | |
| Herstellung wie in Beispiel 13. | |
| Beispiel 17 | 99,7% |
| Wirkstoff gemäß Beispie 3 a oder b | 0,1 % |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | 0,1 % |
| Methylsilikonöl-Emulsion (10%ig) | 0,1 % |
| Xanthangummi | |
| Herstellung wie in Beispiel 15. | |
| Beispiel 18 | 30,0% |
| Wirkstoff gemäß Beispiel 4 | 1,0% |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | 10,0% |
| Saccharose | 0,5% |
| Methylsilikonöl-Emulsion (10%ig) | 58,0% |
| Wasser | 0,5% |
| Isoamylacetat | |
| Herstellung gernäß Beispie 13. | |
Wirkstoff gemäß Beispiel 5 30,0%
Polyoxyäthylensorbitanmonooleat 10%
Saccharose 10,0%
Methylsilikonöl-Emulsion(10%ig) 0,5%
Wasser 58,0%
Isoamylacetat 0,5% Herstellung gemäß Beispiel 13.
Wirkstoff gemäß Beispiel 11 . 93,0%
Saccharose . 6,4%
Fettalkoholpolyoxyäthylenätherphosphatester 0,25%
Polyoxyäthylensorbitanmonooleat 0,15%
Lecithin 0,15%
Isoamylacetat 0,05% Herstellung gemäß Beispiel 13.
Wirkstoff gemäß Beispiel 8 a 79,95%
Saccharose 20,0%
Isoamylacetat 0,025%
Äthylacetat 0,025%
Das Präparat wird durch Vermischen der Komponenten hergestellt.
Wirkstoff gemäß Beispiel 8 b 50,0%
gemischter Blütenhonig 50,0%
Wirkstoff gemäß Beispiel 11 80,0%
Saccharose 20,0%
Herstellung gemäß Beispiel 21.
Wirkstoff gemäß Beispiel 8 a 98,0% Saccharose 1,95%
Isoamylacetat 0,025%
Äthylacetat 0,025%
Herstellung gemäß Beispiel 21.
Wirkstoff gemäß Beispiel 4 90,0%
Silikagel mit großer Oberfläche 8,0%
Saccharose 2,0%
Das Präparat wird durch Vermischen der Komponenten und anschließendes Vermählen auf eine Teilchengröße von unter Mikron hergestellt.
Wirkstoff gemäß Beispiel 5 80,0%
Silikagel mit großer Oberfläche 8,0%
Saccharose 2,0%
Herstellung gemäß Beispiel 25.
Wirkstoff gemäß Beispiel 9 90,0%
Talkum 9,0%
Saccharose 1,0%
Herstellung gemäß Beispiel 25.
Wirkstoff gemäß Beispiel 6 50,0%
Silikagel mit großer Oberfläche 10,0%
,Talkum 35,0%
Saccharose 5,0% Herstellung gemäß Beispiel 25.
Wirkstoff gemäß Beispiel 7 60,0%
Silikagel mit großer Oberfläche 10,0 %
Talkum 35,0% Saccharose 5,0%
Herstellung gemäß Beispiel 25.
Man arbeitet auf die im Beispiel 29 beschriebenen Weise, verwendet aber den Wirkstoff von Beispiel Spritzpulver (WP-Präparate)
Wirkstoff gemäß Beispiel 4 35,0%
Silikagel großer Oberfläche 4,0%
Natrium-N-methyltaurimid 1,0%
Die Komponenten werden miteinander vermischt und dann auf eine Teilchengröße von unter 40 Mikron vermählen.
Man arbeitet auf die im Beispiel 31 beschriebene Weise, verwendet jedoch den Wirkstoff gemäß Beispiel
Wirkstoff gemäß Beispiel 6 95,0%
Kaolin 4,0%
Sulfitlaugenpulver 0,5%
Cg-Cg-Fettalkoholsulfat-Na auf einem
Silikagelträger mit großer Oberfläche 0,5 %
Herstellung gemäß Beispiel 31.
Man arbeitet wie im Beispiel 33 beschrieben, verwendet jedoch den Wirkstoff gemäß Beispiel
| Beispiel 35 | 98,0% |
| Wirkstoff gemäß Beispiel 9 | 0,6 % |
| Saccharose | 1,0% |
| Silikagel mit großer Oberfläche | 0,5% |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | |
| Herstellung wie in Beispiel 31. | |
| Beispiel 36 | 99,5% |
| Wirkstoff gemäßBeispiel 12 | 0,5% |
| Polyoxyäthylensorbitanmonooleat | |
| Herstellung wie in Beispiel 31. | |
| Beispiel 37 | |
| Aerosolpräparat | 40,0% |
| Wirkstoff gemäß Beispiel 11 | 3,0% |
| Saccharose | 0,1 % |
| NonylphenolpolyglycolätherEO = 10 | 1,0% |
| Lecithin | 0,1 % |
| Isoamylacetat | 0,1 % |
| Butylacetat | 55,7% |
| Treibgas | |
Die Saccharose und die übrigen Zusätze werden unter Rühren in dem Wirkstoff gelöst, die Lösung wird in Aerosoldosen gefüllt. Diese werden mit einem Ventil verschlossen und dann mit Treibgap gefüllt. Als letztes wird der Sprühkopf aufgesetzt.
Biologische Wirkung
Untersuchung der akariziden Wirkung der zellfreien Fermentbrühe gemäß Beispiel 8a gegen die auf der Honigbiene (Apis mellifera) schmarotzende asiatische Bienenmilbe Varroa jacobsoni Drei starke Bienenvölker in neun Rahmen, die mittelstark mit Varroa infiziert wann, wurden dreimal, in Abständen von drei Tagen mit derzellfreien Fermentbrühe gemäß Beispiel 8a behandelt. Dabei wurden jeweiic 60ml derzeüfreien Fermentbrühe mit Hilfe eines Handzerstäubers gleichmäßig auf die Flächen der Waben und die sich dort aufhaltenden Bienen aufgesprüht. Drei Tage nach der letzten Behandlung wurde jedes der Völker noch mit einem 30 mg Amitraze enthaltenden Räucherstreifen (ANTIVAR ad us. vet.) behandelt. Zum Vergleich wurden drei Völker zu den gleichen Zeitpunkten nur mit ANTIVAR-Räucherstreifen behandelt (30 mg Amitraze). Die Anzahl der abgefallenen Milben und die toten Bienen in der Beute wurden gezählt. Außerdem wurden der allgemeine Zustand, das Verhalten der Völker und der Königinnen beobachtet.
Auf die Bodenplatte der Beute wurdeeine aus Aluminiumblech gefertigte, mit einem 6mm hohen Rand versehene Bodoneinlage gelegt, die durch einen in Bodenhöhe in der Wand der Beute befindlichen, verschließbaren Schlitz zu jeder Zeit herausgezogen beziehungsweise wieder eingeschoben werden konnte, ohne daß die Beute auseinandergenommen werden mußte. Diese Bodeneinlage diente zum Sammeln der abgefallenen Milben.
Die Anzahl der toten Bienen, Maden und Puppen wurde mittels einer Falle festgestellt. Diese Leichenfalle ist eine oben und hinten offene, am Boden mit einer herausziehbaren Einlage versehene Schachtel aus Aluminiumblech, die oben mit einem Drahtnetz der Maschenweite 8 mm bedeckt ist. Dieses Netz hat die Aufgabe, die Bienen daran zu hindern, ihre Toten aus dem Stock zu tragen. Die Bienen konnten zwar durch die Maschen kriechen, mit einer toten Biene belastet jedoch nicht; so gab die Vorrichtung die Möglichkeit, die Toten zu beliebigen Zeitpunkten zu zählen. Der hintere offene Teil der Falle wurde auf die Ausgangsöffnung des Stockes aufgesetzt.
Das Betragen der Bienen innerhalb des Stockes, die „Stimme", das Brausen des Volkes, die Bewegung der Bienon auf den Rahmen, das Betragen der einzelnen Bienen wurde durch das bei jeder Behandlung vorgenommene Herausnehmen und Betrachten der Rahmen beobachtet.
Der gesundheitliche Zustand der Königinnen und ihr Verhalten wurden ebenfalls durch Beobachtung kontrolliert. Die Beobachtung erstreckte sich auf das Verhalten der den Hofstaat der Königinnen bildenden Bienen, die Bewegung der Königin, die Unversehrtheit ihrer Flügel (Bißspuren) und die Art, in derzur Eiablage geeignete Zellen gesucht wurden. Die Kontinuität des Brutgeschehens, aus dem auf die Aktivität der Königin geschlossen werden kann, wurde kontrolliert. Die bewohnten Wabenstraßen wurden bestimmt. Als bewohnte Wabenstraße galt das zwischen zwei benachbarten Waben befindliche Gebiet, wenn die beiden einander zugewandten Wabenflächen zu wenigstens 70-80% mit Bienen bedeckt waren. Mit Hilfe eines von Hand betriebenen Luftzerstäubers wurden zu jeder Behandlung 60ml der unverdünnten, gemäß Beispiel 8 von den Zellen befreiten Fermentbrühe (Temperatur 23-240C) auf die gesamte Fläche der neun Rahmen der drei Völker (Wabengasamtfläche eines Volkes: 27216cm2) aufgesprüht, wobei die Bienen während der Behandlung die Wabenfläche gleichmäßig bedeckten. Die bei den Kontrollvölkern verwendeten, amitrazehaltigen Räucherstreifen (ANTIVAR) wurden keilförmig gefaltet, in die Behandlungsschale aus Aluminium gelegt, angezündet und in den Strock geschoben. Die Ausflugsöffnung wurde eine Stunde lang verschlossen gehalten.
a) Anzahl der nach den Behandlungen abgefallenen Milben: Bestimmung nach 24,48 und 72 Stunden nach der Behandlung
b) Bienensterben: Bestimmung alle drei Tage, unmittelbar vor Beginn der Behandlung
c) Verhalten der Völker und der Königinnen, Anzahl der bewohnten Wabenstraßen: Kontrolle anläßlich der Behandlungen, unter Auseinandernehmen der Beute.
Anzahl der abgefallenen Milben
| Behandlung | Amitraze | Zeit nach der | insgesamt: | 2. 24 | insgesamt: | 3. 24 | insgesamt: | 4. 24 | insgesamt: | Anzahl der abgefallenen Milben | 2.VoIk | 3.VoIk |
| (30 mg) | Behandlung (h) | 48 | 48 | 48 | 1.VoIk | |||||||
| mit Fermentbrühe | 72 | 72 | 72 | 43 | 31 | |||||||
| 1. 24 | 74 | 12 | 10 | |||||||||
| 48 | 5 | 2 | 0 | |||||||||
| 72 | 1 | 57 | 41 | |||||||||
| 80 | 52 | 34 | ||||||||||
| • | 47 | 1 | 3 | |||||||||
| 6 | 1 | 1 | ||||||||||
| 0 | 54 | 38 | ||||||||||
| 53 | 77 | 47 | ||||||||||
| 62 | 9 | 7 | ||||||||||
| 12 | 0 | 1 | ||||||||||
| 2 | 86 | 55 | ||||||||||
| 76 | ||||||||||||
| 134 | 94 | |||||||||||
| 225 | 4 | 11 | ||||||||||
| 24 | 1 | 0 | ||||||||||
| 0 | 139 | 105 | ||||||||||
| 2Ί9 |
-12- 299 150 Anzahl der abgefallenen Milben bei der Referenzbehandlung
| Behandlung | Zeit nach der | insgesamt: | Anzahl der abgefallenen Milben | 2.VoIk | 3.VoIk |
| Behandlung (h) | 1.VoIk | ||||
| Amitraze | |||||
| (30 mg) | 241 | 190 | |||
| 1. 24 | insgesamt: | 164 | 12 | 3 | |
| 48 | 3 | 1 | 0 | ||
| 72 | 0 | 254 | 193 | ||
| 167 | 87 | 37 | |||
| 2. 24 | insgesamt: | 68 | 3 | 1 | |
| 48 | 0 | 1 | 0 | ||
| 72 | 0 | 91 | 38 | ||
| 68 | 35 | 24 | |||
| 3. 24 | insgesamt: | 21 | 2 | 1 | |
| 48 | 0 | 0 | 2 | ||
| 72 | 0 | 37 | 27 | ||
| 21 | 55 | 32 | |||
| 4. 24 | 57 | 0 | 4 | ||
| 48 | 4 | 0 | 1 | ||
| 72 | 1 | 55 | 37 | ||
| 62 | |||||
nicht.
deren erstes Glied 1,00% Fermentbrühe und deren letztes GJied 0,25% Fermentbrühe enthielt.
Aceton 5,0 ml
destilliertes Wasser ad 100,0ml
beziehungsweise 2000 Mg.
wurde an sechs Gruppen zu je 10 Bienen untersucht. Dabei stellte jedes dar drei Völker 2 Gruppen.
gesetzt. Das Drahtnetz hat eine Maschenweite von 4 mm. Die Zylinder sind an der einen Seite mit Aluminiumfolie, an der anderenmit einem Korken verschlossen, der mit Aluminiumfolie überzogen ist. In der Mitte des Korken war als Fütterungsplatz eine
3-4 mm Entfernung voneinander dünne Drähte befestigt.
dor Untersuchungssubstanz war nicht nur durch das einstündige Aushungern der Bienen gesorgt, sondern auch durch die
die relative Luftfeuchtigkeit 55-701;'?. und diese Warte wurden alle 3 Stunden kontrolliert.
folgenden Wirkungstabelie sind die korrigierten Mortalitätsv.'erte angegeben.
mehr als 2,0g/kg Bienenlebendgewicht.) Der LDW-Wert des Wirkstoffes Amitraze beträgt 12 Mikrogramm/Biene.
| Dosis | Konz.der | Gruppe | tote Bienen in den | Tote pro 10 Tiere | korrigierte |
| Mg/10 | Fermentbrühe | Nr. | einzelnen Gruppen | in 48 h | Mortalität |
| Bienen | im Zuckersaft | 4 24 48 | (Durchschnitt) | ||
| w/v% | Stunden nach dem Füttern | % |
0,25
0,67
0,00
0,50
0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0 0
0,83
1,7!»
1,00
1 0 0 0 1 1
1,00
3,57
Kontrolle
0,00
1 0 0 0 0 0
1 0 0 0 1 0
0,67
Die Wirkung der Fermentbrühe gegen die Milbe Varroa jacobsonl wurde an von den Milben befallenen Bienen (Apis mellifera) untersucht. Zu diesem Zweck wurde aus der Fermentbrühe gemäß Beispiel 3 b mit 50%iger Zuckerlösung eine Lösung bereitet, die 2,5% Fermentbrühe enthielt. Die Bienen für den Versuch wurden zur Zeit intensiven Ausfluges von den Brutwaben starker Bienenvölker durch schonendes Abkehren in mit einem perforierten Deckel versehene Kunststoffgefäße gesammelt. Die Bienen wurden sofort ins Laboratorium gebracht und dort mit Kohlendioxyd betäubt. Die Bienen wufdon mit dem Vergrößerungsglas untersucht, die von der Milb9 befallenen Bienen wurden in aus verzinktem Drahtnetz einer Maschenweite von 4 mm gefertigte, an einem Ende mit Aluminiumfolie verschlossene Zylinder von 10cm Höhe und 8cm Durchmesser eingebracht. Am Boden des Zvlindors befand sich ein 3-5cm langer leerer Wabenstreifen. Auf diesen wurde mit einer Injektionsspritze die obenerwähnte Lesung in einer Menge von 5-1OmI aufgebracht. Die Bienen konnten ad libitum davon verzehren. Während der Dauer des Versuches wurde das Laboratorium verdunkelt und auch nicht für andere Zwecke genutzt. Die Temperatur betrug 23-240C, die relative Luftfeuchte 55-70%.
12 Stunden nach Verabreichung der wirkstoffhaltigen Zuckerlösung wurden die abgefallenen Milben gezählt und die Bienen nach Betäuben mit CO2 auf noch anhaftende Milben untersucht. Es konnte festgestellt werden, daß alle Milben vernichtet worden und auf den Boden des Käfigs gefallen waren. Die die Fermentbrühe gemäß Beispiel 3 b enthaltende Zuckerlösung hatte, zur Fütterung verwendet, innerhalb von 12 Stunden die Milben 100%ig abgetötet.
Claims (9)
1. Akarizides Mittel, dadurch gekennzeichnet, daß es als Wirkstoff die gegebenenfalls von den Zellen befreite Fermentbrühe oder den Extrakt der gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbrühe oder die festen (zum Beispiel getrockneten) Formen der gegebenenfalls von den Zellen befreiten Fermentbrühe des Bacillusstammes NCAIM 001083 oder des Pseudomonasstammes NCAIM 001086 oder der gemischten Mikropopulation der beiden Stämme (NCAIM - National Collection of Agricultural and Industrial Microorganism, Budapest, Ungarn) enthält, gewünschtenfalls in sterilisierter Form, gegebenenfalls zusammen mit festen und/od^r flüssigen Streckmitteln und oberflächenaktiven Stoffen.
Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es als Wirkstoff den Bacillusstamm NCAIM001083 enthält.
Mittel nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß es als Wirkstoff den Pseudomonasstamm NCAIM 001086 enthält.
4. Bacillusstamm, hinterlegt unter der Nummer001083 bei National Collection of Agricultural and Industrial Microorganism, Budapest, Ungarn, dadurch gekennzeichnet, daß er auf einfachem Nähragar matte, hellgraue Kolonien von 1-2 mm bildet und folgende Eigenschaften aufweist:
z) ONPG positiv.
5. Gemischte Mikropopulation, dadurch gekennzeichnet, daß sie den Bacillusstamm NCAIM 001083 gemäß Anspruch 4 und den Pseudomonasstamm NCAIM 001086 enthält.
6. Verfahren zur K ^stellung eines akariziden Wirkstoffes durch in Gegenwart von Kohlehydraten, anorganischem Stickstoff und sonstigen an sich bekannten Zusätzen in einem flüssigen Nährmedium vorgenommene aerobe oder partiell anaerobe Fermentation, dadurch
gekennzeichnet, daß man die gemischte Mikropopulation der Stämme NCAIM 001083 und 001086 fermentiert.
7. Verfahren zur Herstellung eines akariziden Wirkstoffes durch in Gegenwart von Kohlehydraten, anorganischem Stickstoff und sonstigen an sich bekannten Zusätzen in einem flüssigen Nährmedium vorgenommene aerobe oder partiell anaeorobe Fermentation, dadurch gekennzeichnet, daß man den Bacillusstamm NCAIM 001083 fermentiert.
8. Verfahren zur Herstellung und Aufrechterhaltung des Bacillusstammes NCAIM 001083 oder der mit dem Pseudomonasstarnm gebildeten gemischten Mikropopulation dieses Stammes, dadurch gekennzeichnet, daß man
- Bodenproben mit physiologischer Kochsalzlösung extrahiert,
- den Extrakt auf einen Kohlenstoff- und Stickstcffquellen, Mineralsalze und gegebenenfalls Zusatzstoffe enthaltenden Nährboden (Nähragar) überträgt,
- bei 25-300C 2-6 Tage inkubiert,
- die entstandenen Kolonien vereinzelt,
- die entstandene gemischte Mikropopulation gewünschtenfalls abtrennt oder
- die einzelnen Stämme (Subkulturen) aus der gemischten Mikropopulation auf differentialdiagnostischen Nährböden durch erneutes Vereinzeln isoliert und in an sich bekannter Weise aufrechterhält.
9. Verfahren zur Vernichtung von Milben, dadurch gekennzeichnet, daß man den Boden oder
, flanzen oder sonstige Lebewesen mit einem der Mittel gemäß den Ansprüchen 1-3 oder mit deren verdünnten Anwendungsformen behandelt.
10. Verfahren nach Anspruch 9 zur Bekämpfung von Milben, insbesondere zur Bekämpfung von Varroa jacobsoni, dadurch gekennzeichnet, daß man die Honigbiene oder deren Stock oder die Rahmen des Stockes mit einem der Mittel gemäß den Ansprüchen 1-3 oder deren verdünnten Anwendungsformen behandelt.
11. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man die Honigbienen mit einem ein Mittel gemäß einem der Ansprüche 1-3 enthaltenden Tränk- oder Fütterungsmittel füttert oder tränkt, vorzugsweise gleichmäßig und über längere Zeit.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DD34209990A DD299150A5 (de) | 1989-06-27 | 1990-06-26 | Akarizides mittel und verfahren zur herstellung seiner wirkstoffe |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| HU893224A HUT58474A (en) | 1989-06-27 | 1989-06-27 | Herbicidal compositions, as well as process for applying them and for producing the active ingredients |
| DD34209990A DD299150A5 (de) | 1989-06-27 | 1990-06-26 | Akarizides mittel und verfahren zur herstellung seiner wirkstoffe |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DD299150A5 true DD299150A5 (de) | 1992-04-02 |
Family
ID=25748359
Family Applications (1)
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|---|---|---|---|
| DD34209990A DD299150A5 (de) | 1989-06-27 | 1990-06-26 | Akarizides mittel und verfahren zur herstellung seiner wirkstoffe |
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|---|---|
| DD (1) | DD299150A5 (de) |
-
1990
- 1990-06-26 DD DD34209990A patent/DD299150A5/de not_active IP Right Cessation
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