DE19937839A1 - OLFXY (gen, cDNA, Expression, Aminosäuresequenz) - Google Patents
OLFXY (gen, cDNA, Expression, Aminosäuresequenz)Info
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Description
1. Mit Hilfe der Aminosäuresequenz eines G Protein gekoppelten Rezeptors wurde durch
Homologiesuche in einer öffentlich zugänglichen Datenbank ein potentielles Gen für einen
neuen G Protein gekoppelten Rezeptor auf dem humanen Chromosom 6 identifiziert. Aus der
Gensequenz wurden Oligonukleotide zur Amplifikation des potentiellen Rezeptorgens und
dessen abgeleiteter cDNA (mRNA) Sequenz hergestellt und für die PCR-Amplifikation des
Gens und der cDNA eingesetzt. Mittels dieser Primer konnte das intronlose Gen aus humaner
genomischer DNA kloniert und sequenziert werden. Sequenzierung des Gens ergab folgende
Eigenschaften des Gens: das Gen (3600 Basenpaare) enthält (wie viele Gene von G Protein-
gekoppelten Rezeptoren) keine Introns im kodierenden Bereich. Der kodierende Bereich des
Gens (Pos. 1179 bis 2141) besteht aus einem offenem Leseraster von 963 Basen und kodiert
somit ein Protein von 321 Aminosäuren. Hydrophobizitätsanalyse der Aminosäuresequenz
ergibt, daß es sich um einen G Protein-gekoppelten Rezeptor mit sieben transmembranalen
Domänen handelt. Die Aminosäuresequenz ist neu und bisher unbekannt und weist die beste
Homologie (50% Identität; 72% Homologie) zu einem olfactorischen Rezeptor (OLF3) des
Hundes auf. Die zweithöchste Homologie (48% Identität; 69% Homologie) besteht zu einem
olfactorischen Rezeptor der Ratte (OL1) und zu einem olfactorischen Rezeptor des Menschen
(51% Identität und 68% Homologie). Weiterhin gehören zu der zu patentierenden Sequenz
1178 Basen des 5' nichttranslatierten Bereichs des Gens, welche vermutlich den Promotor
(mit typischer TATA Box und CAP Signal) enthalten, sowie 1459 Basen des 3'
nichttranslatierten Bereichs des Gens, welche ein typisches Polyadenylierungssignal in
Position 2923 bis 2928 enthalten.
2. Die Expression dieses Gens konnten wir bestätigen durch das Auffinden eines humanen
ESTs (expressed Sequence Tag) in einer Datenbank (NCBI). Diese Sequenz ist 387 Basen
lang und entspricht unserem Gen im Bereich von Pos. 1095 bis 1265 also dem 5'
nichttranslatierten Bereich und dem N-terminalen codierenden Bereich. Die Sequenz des
ESTs entstammt aus einer Mischung von drei Geweben (Lunge, Testes und B-Zellen), sodaß
davon ausgegangen werden kann, daß der olfactorische Rezeptor zumindest in einem dieser
Gewebe exprimiert wird.
3. Die von der cDNA Sequenz abgeleitete Aminosäuresequenz des Rezeptors ist 321
Aminosäuren lang. Hydrophobizitätsanalyse der Aminosäuresequenz ergibt eine putative
Sekundärstruktur des Proteins als integrales Membransprotein mit 6 bis 8 transmembranalen
Domänen (je nachdem, welche Software angewendet wird). Das Protein enthält zwei
potentielle N-Glykosylierungstellen (Aminosäure Positionen 5, und 191). Weiterhin sind in
der Aminosäuresequenz drei potentielle Proteinkinase C Phosphorylierungsstellen
(Aminosäure Positionen 87, 267, und 291) enthalten, deren fakultative Phosphorylierung
(sofern sie intrazellulär lokalisiert sind) an der Modulation der Rezeptorfunktion beteiligt sein
können. In den Positionen 49, 193 und 313 der Aminosäuresequenz befinden sich drei
potentielle Caseinkinase II Phosphorylierungsstellen.
4. Einordnung und potentielle Funktionen des zu patentierenden Rezeptors und seines
Gens (bzw cDNA; mRNA):
Der Rezeptor gehört zur großen Genfamile der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs). Innerhalb dieser Großfamile zählt er zur Sub-Famile der "Klasse A Rhodopsin-ähnlichen" Rezeptoren. Er besitzt hohe Homologie zu verschiedenen olfactorischen Rezeptoren, welche Duftstoffe, Lockstoffe, chemotaktische Substanzen, Sexuallockstoffe, Immunmodulatorstoffe oder andere Substanzen binden können und dann intrazellulär durch second messenger ein Signal weiterleiten, welches dann direkt oder indirekt zu einem Effekt führt.
Der Rezeptor gehört zur großen Genfamile der G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs). Innerhalb dieser Großfamile zählt er zur Sub-Famile der "Klasse A Rhodopsin-ähnlichen" Rezeptoren. Er besitzt hohe Homologie zu verschiedenen olfactorischen Rezeptoren, welche Duftstoffe, Lockstoffe, chemotaktische Substanzen, Sexuallockstoffe, Immunmodulatorstoffe oder andere Substanzen binden können und dann intrazellulär durch second messenger ein Signal weiterleiten, welches dann direkt oder indirekt zu einem Effekt führt.
Wir haben diesem neuen olfactorischen Rezeptor die Bezeichnung OLFXY gegeben.
Claims (16)
1. Das dargestellte Gen inclusive des 5' und 3' nichttranslatierten Bereichs.
2. Transkriptionsfaktoren, RNA Polymerasen und Pharmaka sowie Chemikalien, die die
Expresssion des Gens in positiver oder negativer Weise beeinflussen.
3. Die von dem Gen transkribierte messenger RNA inclusive davon abgeleitete
Spleißvarianten und Isoformen.
4. Die von der mRNA oder von dem intronlosen Gen abgeleitete cDNA.
5. Das von der mRNA (oder dem Gen oder der cDNA) abgeleitete oder hergestellte Protein.
6. Antikörper oder Antiseren, welche gegen einzelne oder mehrere Epitope des Proteins oder
gegen das ganze Protein hergestellt werden.
7. Monoklonale Antikörper oder Antiseren, die gegen einzelne oder mehrere Epitope des
Proteins oder gegen das ganze Protein hergestellt werden.
8. Expressionssysteme (eukaryotische Zellinien, Hefezellen, Xenopus Oocyten,
Baculovirussysteme, bakterielle Expressionssysteme), welche das genannte Protein
exprimieren (nativ oder recombinant).
9. Ligand Bindungsstudien und Screening assays an nativen oder recombinanten Rezeptoren
oder Zellen oder Zellmembranen, welche diesen Rezeptor enthalten.
10. Transgene Tiere und knock out Tiere, welche diesen Rezeptor in veränderter Dichte oder
gar nicht exprimieren.
11. Methoden der Gentherapie, welche sich auf diesen Rezeptor bzw. sein Gen oder seine
mRNA (cDNA) erstrecken und deren Entwicklung und Anwendung.
12. Sense und Antisense Oligonukleotide, welche von diesem Gen abgeleitet wurden sowie
deren Anwendung.
13. Die Diagnose und Behandlung von Krankheiten, die mit diesem Rezeptor in direkter oder
indirekter Weise in Verbindung stehen.
14. Methoden zur Diagnose von Erkrankungen, die mit diesem Rezeptor (oder dessen Gen,
mRNA) in direkter oder indirekter Weise in Verbindung stehen wie z. B.
Hybridisierungstechniken, Sequenzierung, SSCP, RFLP, Northern Blot, Southern Blot,
Western Blot, Expressions Arrays, Antikörper, Mutationsanalysen.
15. Die Benutzung der Informationen zur Entwicklung neuer Pharmaka, Verbindungen und
Chemikalien und Therapien und die Evaluierung vorhandener Pharmaka, Verbindungen und
Chemikalien sowie zur Entwicklung neuer Technologien oder Evaluierung vorhandener
Technologien.
16. Das Patent soll sich auch erstrecken auf die Punkte 1. bis 15. für modifizierte Proteine,
und Gen, cDNA und mRNA Sequenzen (Aminosäureaustausche, Basenaustausche).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE1999137839 DE19937839A1 (de) | 1999-08-13 | 1999-08-13 | OLFXY (gen, cDNA, Expression, Aminosäuresequenz) |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE1999137839 DE19937839A1 (de) | 1999-08-13 | 1999-08-13 | OLFXY (gen, cDNA, Expression, Aminosäuresequenz) |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE19937839A1 true DE19937839A1 (de) | 2001-02-15 |
Family
ID=7917918
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE1999137839 Withdrawn DE19937839A1 (de) | 1999-08-13 | 1999-08-13 | OLFXY (gen, cDNA, Expression, Aminosäuresequenz) |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| DE (1) | DE19937839A1 (de) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1925286A1 (de) | 2006-11-24 | 2008-05-28 | KPSS-Kao Professional Salon Services GmbH | Körperreinigungszusammensetzung |
-
1999
- 1999-08-13 DE DE1999137839 patent/DE19937839A1/de not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1925286A1 (de) | 2006-11-24 | 2008-05-28 | KPSS-Kao Professional Salon Services GmbH | Körperreinigungszusammensetzung |
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