DE60319021T2 - Verfahren zur Behandlung von Sepsis - Google Patents
Verfahren zur Behandlung von Sepsis Download PDFInfo
- Publication number
- DE60319021T2 DE60319021T2 DE60319021T DE60319021T DE60319021T2 DE 60319021 T2 DE60319021 T2 DE 60319021T2 DE 60319021 T DE60319021 T DE 60319021T DE 60319021 T DE60319021 T DE 60319021T DE 60319021 T2 DE60319021 T2 DE 60319021T2
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- compound
- alkyl
- use according
- phenyl
- snp
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 title claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 title abstract description 16
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 25
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims abstract description 23
- -1 pyrazolyl compound Chemical class 0.000 claims abstract description 18
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 17
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 13
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims abstract description 9
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims abstract description 9
- 125000001544 thienyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 125000004076 pyridyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 125000000168 pyrrolyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 6
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 23
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 7
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 claims 3
- 125000004051 hexyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 abstract 4
- JJWKPURADFRFRB-UHFFFAOYSA-N carbonyl sulfide Chemical compound O=C=S JJWKPURADFRFRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 229940126214 compound 3 Drugs 0.000 description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 39
- XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N disodium;azanylidyneoxidanium;iron(2+);pentacyanide Chemical compound [Na+].[Na+].[Fe+2].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].[O+]#N XEYBHCRIKKKOSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 37
- 229940083618 sodium nitroprusside Drugs 0.000 description 37
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 20
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 20
- 125000003226 pyrazolyl group Chemical group 0.000 description 19
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 15
- ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 3',5'-cyclic GMP Chemical compound C([C@H]1O2)OP(O)(=O)O[C@H]1[C@@H](O)[C@@H]2N1C(N=C(NC2=O)N)=C2N=C1 ZOOGRGPOEVQQDX-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 14
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 13
- 102000003952 Caspase 3 Human genes 0.000 description 11
- 108090000397 Caspase 3 Proteins 0.000 description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 11
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 11
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 10
- 102100030497 Cytochrome c Human genes 0.000 description 9
- 108010075031 Cytochromes c Proteins 0.000 description 9
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 9
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 8
- 102100021569 Apoptosis regulator Bcl-2 Human genes 0.000 description 7
- 101000971171 Homo sapiens Apoptosis regulator Bcl-2 Proteins 0.000 description 7
- 230000002424 anti-apoptotic effect Effects 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 108091008611 Protein Kinase B Proteins 0.000 description 6
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 6
- 230000034994 death Effects 0.000 description 6
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 6
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 6
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 6
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 108091054455 MAP kinase family Proteins 0.000 description 5
- 102000043136 MAP kinase family Human genes 0.000 description 5
- 102000003993 Phosphatidylinositol 3-kinases Human genes 0.000 description 5
- 108090000430 Phosphatidylinositol 3-kinases Proteins 0.000 description 5
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- QDLHCMPXEPAAMD-QAIWCSMKSA-N wortmannin Chemical compound C1([C@]2(C)C3=C(C4=O)OC=C3C(=O)O[C@@H]2COC)=C4[C@@H]2CCC(=O)[C@@]2(C)C[C@H]1OC(C)=O QDLHCMPXEPAAMD-QAIWCSMKSA-N 0.000 description 5
- QDLHCMPXEPAAMD-UHFFFAOYSA-N wortmannin Natural products COCC1OC(=O)C2=COC(C3=O)=C2C1(C)C1=C3C2CCC(=O)C2(C)CC1OC(C)=O QDLHCMPXEPAAMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 4
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 4
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 4
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 4
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 231100000002 MTT assay Toxicity 0.000 description 3
- 238000000134 MTT assay Methods 0.000 description 3
- 150000001204 N-oxides Chemical class 0.000 description 3
- MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N Nitric oxide Chemical compound O=[N] MWUXSHHQAYIFBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000003923 Protein Kinase C Human genes 0.000 description 3
- 108090000315 Protein Kinase C Proteins 0.000 description 3
- 108010052164 Sodium Channels Proteins 0.000 description 3
- 102000018674 Sodium Channels Human genes 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000005735 apoptotic response Effects 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000010562 histological examination Methods 0.000 description 3
- 238000000099 in vitro assay Methods 0.000 description 3
- 239000012139 lysis buffer Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 125000002950 monocyclic group Chemical group 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 3
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 description 3
- BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N renifolin D Natural products CC(=C)[C@@H]1Cc2c(O)c(O)ccc2[C@H]1CC(=O)c3ccc(O)cc3O BOLDJAUMGUJJKM-LSDHHAIUSA-N 0.000 description 3
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 3
- 210000005167 vascular cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N (+/-)-1,3-Butanediol Chemical compound CC(O)CCO PUPZLCDOIYMWBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000034486 Multi-organ failure Diseases 0.000 description 2
- 208000010718 Multiple Organ Failure Diseases 0.000 description 2
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 2
- 102100029438 Nitric oxide synthase, inducible Human genes 0.000 description 2
- 101710089543 Nitric oxide synthase, inducible Proteins 0.000 description 2
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N Piperazine Chemical compound C1CNCCN1 GLUUGHFHXGJENI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007637 Soluble Guanylyl Cyclase Human genes 0.000 description 2
- 108010007205 Soluble Guanylyl Cyclase Proteins 0.000 description 2
- OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M Superoxide Chemical compound [O-][O] OUUQCZGPVNCOIJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 230000006909 anti-apoptosis Effects 0.000 description 2
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 2
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 102000055102 bcl-2-Associated X Human genes 0.000 description 2
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 2
- 238000007398 colorimetric assay Methods 0.000 description 2
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 2
- 229940099112 cornstarch Drugs 0.000 description 2
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N ethylene glycol bis(2-aminoethyl)tetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCOCCOCCN(CC(O)=O)CC(O)=O DEFVIWRASFVYLL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007760 free radical scavenging Effects 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 208000029744 multiple organ dysfunction syndrome Diseases 0.000 description 2
- VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N n'-amino-n-iminomethanimidamide Chemical compound N\N=C\N=N VMGAPWLDMVPYIA-HIDZBRGKSA-N 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- CMFNMSMUKZHDEY-UHFFFAOYSA-N peroxynitrous acid Chemical compound OON=O CMFNMSMUKZHDEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 2
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 2
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 2
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 239000004575 stone Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 2
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 2
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZNGWEEUXTBNKFR-UHFFFAOYSA-N 1,4-oxazepane Chemical compound C1CNCCOC1 ZNGWEEUXTBNKFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide Chemical compound [Br-].S1C(C)=C(C)N=C1[N+]1=NC(C=2C=CC=CC=2)=NN1C1=CC=CC=C1 AZKSAVLVSZKNRD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 4-nitroaniline Chemical compound NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 TYMLOMAKGOJONV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 101710099705 Anti-lipopolysaccharide factor Proteins 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 0 CC(*1)=CC=C1c1n[n](Cc2ccccc2)c2ccccc12 Chemical compound CC(*1)=CC=C1c1n[n](Cc2ccccc2)c2ccccc12 0.000 description 1
- SVSSITIRSDDOMU-UHFFFAOYSA-N CC1C=CC=C(C[n]2nc(-c3ccc(CO)[o]3)c(cc3)c2cc3OC)C1 Chemical compound CC1C=CC=C(C[n]2nc(-c3ccc(CO)[o]3)c(cc3)c2cc3OC)C1 SVSSITIRSDDOMU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DYOQOKDSMANCEY-UHFFFAOYSA-N Cc(cc1)ccc1-c(c1ccccc11)n[n]1-c(cc1)ccc1[N+]([O-])=O Chemical compound Cc(cc1)ccc1-c(c1ccccc11)n[n]1-c(cc1)ccc1[N+]([O-])=O DYOQOKDSMANCEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVSRYHCPPBVWBI-UHFFFAOYSA-N Cc(cc1)ccc1-c(c1ccccc11)n[n]1Nc1cccc(Cl)c1 Chemical compound Cc(cc1)ccc1-c(c1ccccc11)n[n]1Nc1cccc(Cl)c1 PVSRYHCPPBVWBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZYXNTJTACSVPK-UHFFFAOYSA-N Cc(cc1)ccc1-c1n[nH]c2c1cccc2 Chemical compound Cc(cc1)ccc1-c1n[nH]c2c1cccc2 OZYXNTJTACSVPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBTROCATWAYBEH-UHFFFAOYSA-N Cc(cc1)ccc1-c1n[n](Cc2cccc(Cl)c2)c2ccccc12 Chemical compound Cc(cc1)ccc1-c1n[n](Cc2cccc(Cl)c2)c2ccccc12 HBTROCATWAYBEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229920000858 Cyclodextrin Polymers 0.000 description 1
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 230000005778 DNA damage Effects 0.000 description 1
- 231100000277 DNA damage Toxicity 0.000 description 1
- AHCYMLUZIRLXAA-SHYZEUOFSA-N Deoxyuridine 5'-triphosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)[C@@H](O)C[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 AHCYMLUZIRLXAA-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 101001076386 Homo sapiens Interleukin-1 family member 10 Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 102100026015 Interleukin-1 family member 10 Human genes 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N Leupeptin Natural products CC(C)CC(NC(C)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124647 MEK inhibitor Drugs 0.000 description 1
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 102000006386 Myelin Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010083674 Myelin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000034827 Neointima Diseases 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 description 1
- IMMNVNRSYVDGDK-UHFFFAOYSA-N OC(CCC(OCc1ccc(-c2n[n](Cc3ccccc3)c3c2cccc3)[o]1)=O)=O Chemical compound OC(CCC(OCc1ccc(-c2n[n](Cc3ccccc3)c3c2cccc3)[o]1)=O)=O IMMNVNRSYVDGDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229940116355 PI3 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N Potassium ion Chemical compound [K+] NPYPAHLBTDXSSS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 1
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 1
- 108010090931 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Proteins 0.000 description 1
- 102000013535 Proto-Oncogene Proteins c-bcl-2 Human genes 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N Sodium cation Chemical compound [Na+] FKNQFGJONOIPTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000004357 Transferases Human genes 0.000 description 1
- 108090000992 Transferases Proteins 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 206010054094 Tumour necrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 108010093894 Xanthine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 102100033220 Xanthine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 230000006368 anti-apoptosis response Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 210000003433 aortic smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009925 apoptotic mechanism Effects 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 108010078837 aspartyl-glutamyl-valyl-aspartyl-p-nitroanilide Proteins 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 230000036983 biotransformation Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000009134 cell regulation Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 230000002301 combined effect Effects 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 1
- 229940097362 cyclodextrins Drugs 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 229910003460 diamond Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010432 diamond Substances 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 230000003292 diminished effect Effects 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 1
- 231100000284 endotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002346 endotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000000763 evoking effect Effects 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N fluorescein Chemical compound O1C(=O)C2=CC=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 GNBHRKFJIUUOQI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N gamma-aminobutyric acid Chemical compound NCCCC(O)=O BTCSSZJGUNDROE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 1
- 125000005597 hydrazone group Chemical group 0.000 description 1
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 1
- XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N hydrogen iodide Chemical compound I XMBWDFGMSWQBCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002883 imidazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 1
- 238000012750 in vivo screening Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 125000003453 indazolyl group Chemical class N1N=C(C2=C1C=CC=C2)* 0.000 description 1
- 125000001041 indolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 229940102213 injectable suspension Drugs 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007917 intracranial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000007919 intrasynovial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007913 intrathecal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N leupeptin Chemical compound CC(C)C[C@H](NC(C)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C=O)CCCN=C(N)N GDBQQVLCIARPGH-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 1
- 108010052968 leupeptin Proteins 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 210000003584 mesangial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008811 mitochondrial respiratory chain Effects 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000005012 myelin Anatomy 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008692 neointimal formation Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000004112 neuroprotection Effects 0.000 description 1
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 description 1
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000346 nonvolatile oil Substances 0.000 description 1
- QNDVLZJODHBUFM-WFXQOWMNSA-N okadaic acid Chemical compound C([C@H](O1)[C@H](C)/C=C/[C@H]2CC[C@@]3(CC[C@H]4O[C@@H](C([C@@H](O)[C@@H]4O3)=C)[C@@H](O)C[C@H](C)[C@@H]3[C@@H](CC[C@@]4(OCCCC4)O3)C)O2)C(C)=C[C@]21O[C@H](C[C@@](C)(O)C(O)=O)CC[C@H]2O QNDVLZJODHBUFM-WFXQOWMNSA-N 0.000 description 1
- VEFJHAYOIAAXEU-UHFFFAOYSA-N okadaic acid Natural products CC(CC(O)C1OC2CCC3(CCC(O3)C=CC(C)C4CC(=CC5(OC(CC(C)(O)C(=O)O)CCC5O)O4)C)OC2C(O)C1C)C6OC7(CCCCO7)CCC6C VEFJHAYOIAAXEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 125000002971 oxazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004792 oxidative damage Effects 0.000 description 1
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 1
- 229920002866 paraformaldehyde Polymers 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229940124531 pharmaceutical excipient Drugs 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000002935 phosphatidylinositol 3 kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 1
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 229910001414 potassium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000002731 protein assay Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 125000001725 pyrenyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000714 pyrimidinyl group Chemical group 0.000 description 1
- 125000002294 quinazolinyl group Chemical group N1=C(N=CC2=CC=CC=C12)* 0.000 description 1
- 235000012752 quinoline yellow Nutrition 0.000 description 1
- 229940051201 quinoline yellow Drugs 0.000 description 1
- FZUOVNMHEAPVBW-UHFFFAOYSA-L quinoline yellow ws Chemical compound [Na+].[Na+].O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C1C1=NC2=C(S([O-])(=O)=O)C=C(S(=O)(=O)[O-])C=C2C=C1 FZUOVNMHEAPVBW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108700038606 rat Smooth muscle Proteins 0.000 description 1
- 239000011535 reaction buffer Substances 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 230000021419 recognition of apoptotic cell Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 125000006413 ring segment Chemical group 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 230000026799 smooth muscle cell apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J sodium diphosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O FQENQNTWSFEDLI-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 1
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008718 systemic inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 238000012353 t test Methods 0.000 description 1
- QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N tetramethylammonium Chemical compound C[N+](C)(C)C QEMXHQIAXOOASZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019818 tetrasodium diphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 125000000335 thiazolyl group Chemical group 0.000 description 1
- BRNULMACUQOKMR-UHFFFAOYSA-N thiomorpholine Chemical compound C1CSCCN1 BRNULMACUQOKMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 210000004885 white matter Anatomy 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/415—1,2-Diazoles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
- C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D491/04—Ortho-condensed systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
- C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
- C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
- C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
- C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
- C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D495/04—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Storage Of Fruits Or Vegetables (AREA)
- Food Preservation Except Freezing, Refrigeration, And Drying (AREA)
Description
- HINTERGRUND
- Die Sepsis reicht von der systemischen Entzündungsantwort über die Organsdysfunktion bis zum mehrfachen Organversagen und letztendlich dem Tod. Siehe zum Beispiel Stone (1994) Science 264: 365-367; Stone (1994) Science 264: 365-367; Karima et al. (1999) Mol. Med. Today 5: 123-132; und Parrillo et al. (1990) Ann. Int. Med. 113: 227-242). Zur Verhinderung der Sepsis wurden Studien an Verbindungen, einschließlich Antioxidanzien, Entzündungshemmern und Inhibitoren der Lipopolysaccharid-induzierten (LPS-induzierten) Stickoxid-Synthese (NO-Synthese) durchgeführt. Siehe zum Beispiel Ortolani et al. (2000) Am. J. Respir. Crit. Care Med. 161: 1907-1911; Kox et al. (2000) Intensive Care Med 26: S124-128; und Boyle et al. (2000) Circ. Res. 87: E18-24). Die Ergebnisse von diesen Studien sind nicht zufriedenstellend (Glauser (2000) Crit. Care Med. 28: S4-8).
- Einige Daten zeigten, dass große NO-Mengen zur Pathogenese des Gefäßversagens bei der Sepsis beitragen (Rees (1995) Biochem. Soc. Trans. 23: 1025-1029). In vivo ergeben sich große NO-Mengen aus: (i) der übersteigerten Synthese von NO im Endothel nach schweren Attacken, wie zum Beispiel Sepsis, siehe zum Beispiel Ochoa et al. (1991) Ann. Surg. 214: 621-626; Nakatsu & Diamond (1989) Can. J. Physiol. Pharmacol. 67: 251-262; und Guh et al. (1998) Mol. Pharmacol. 53: 467-474; und (ii) der Upregulation der induzierbaren NO-Synthase (iNOS), da Zellen auf Bakterienprodukte (z. B. LPS) oder inflammatorische Cytokine (z. B. Interleukin-1θ und den Tumornekrosefaktor-I), siehe zum Beispiel Curran et al. (1989) J. Exp. Med. 170:1769-1774; und Nakayama et al., (1992) Am. J. Respir. Cell Mol. Biol. 7:471-476, ansprechen. NO kann mit einem Superoxid zur Produktion von Peroxynitrit reagieren, das für die oxidative Verletzung verantwortlich ist (Szabo (1996) Shock. 6: 79-88). Es wurde auch berichtet, dass Peroxynitrit an der vaskulären Zellapoptose beteiligt ist (Cuzzocrea et al. (1998) Br. J. Pharmacol. 123: 525-537).
-
WO 01/57024 - Verbindungen, die die vaskuläre Zellapoptose inhibieren und folglich das vaskuläre Versagen und mehrfache Organversagen verhindern, stellen Arzneimittelkandidaten zur Behandlung oder Verhinderung der Sepsis oder der mit der Sepsis assoziierten Symptome dar.
- Es wurde festgestellt, dass – wie in
WO01/57024 - ZUSAMMENFASSUNG
- Ein erfindungsgemäßer Aspekt zeichnet sich durch die Verwendung zur Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung der Sepsis aus. Das Arzneimittel ist zur Verabreichung einer kondensierten Pyrazolylverbindung der Formel (I) an einen Patienten (z. B. einen Säuger oder ein Tier) mit Bedarf daran vorgesehen:A steht für H, C1~6-Alkyl oder
(hierin nachstehend als „(CH2)nAr3(R5)(R6)" bezeichnet), worin n für 0, 1, 2 oder 3 steht; jedes von Ar1, Ar2 und Ar3 unabhängig Phenyl, Pyridinyl, Thienyl, Furyl oder Pyrrolyl darstellt; jedes von R1, R2, R3, R4, R5 und R6, unabhängig XYZ darstellt; oder R1 und R2 zusammen, R3 und R4 zusammen oder R5 und R6 zusammen O(CH2)1-6O darstellen; worin X eine Bindung oder C1~C6-Alkyl darstellt, Y eine Bindung, O, S, OC(O), OC(O)(CH2)1-6C(O)O, C(O)O, C(O)S, C(O)NH, C(O)NC1~C6-Alkyl, NH oder NC1~C6-Alkyl darstellt, and Z für H, Halogen, CN, NO2 oder C1~C6-Alkyl steht; vorausgesetzt, dass mindestens eines von R3 und R4 nicht H darstellt. (CH2)1-6 kann verzweigt oder linear sein. Es ist zu beachten, dass das in jedweder vorstehend beschriebenen substituierten Gruppe gezeigte linke Atom sich am nächsten zu dem kondensierten Pyrazolylring befindet. Auch beachtet werden sollte, dass wenn ein oder mehr R-Teil(e) vorhanden ist/sind, die R-Teile gleich oder verschieden sein können.
- Unter Bezugnahme auf die Formel (I), stellt ein Subset der kondensierten Pyrazolylverbindungen das dar, worin A für H steht, Ar1 Phenyl darstellt, Are Phenyl oder Furyl darstellt, und jedes von R1 und R2 für H steht.
- Ein anderes Subset der kondensierten Pyrazolylverbindungen stellt das dar, worin A für (CH2)nAr3(R5)(R6) steht, Ar1 Phenyl oder Thienyl darstellt, Are Phenyl oder Furyl darstellt, Ar3 Phenyl darstellt und n für 0 oder 1 steht. In einigen Ausführungsformen steht eines von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 für COOH, COO-C1~C6-Alkyl, CH2OH, CN, NO2 oder Halogen.
- Wie hierin verwendet, schließt der Begriff „Alkyl" sowohl lineares als auch verzweigtes Akyl ein, das optional einen oder mehr der gerade beschriebenen substituierten Teile einschließt. Unter dem Begriff „Aryl" versteht man ein Kohlenwasserstoffringsystem (monocyclisch oder bicyclisch) mit mindestens einem aromatischen Ring. Beispiele von Arylteilen schließen Phenyl, Naphthyl und Pyrenyl ein, sind aber nicht darauf beschränkt. Der Begriff „Heteroaryl" verweist auf ein Kohlenwasserstoffringsystem (monocyclisch oder bicyclisch) mit mindestens einem aromatischen Ring, der mindestens ein Heteroatom, wie zum Beispiel O, N oder S als Teil des Ringsystems enthält. Beispiele von Heteroarylteilen schließen Furyl, Pyrrolyl, Thienyl, Oxazolyl, Imidazolyl, Thiazolyl, Pyridinyl, Pyrimidinyl, Chinazolinyl und Indolyl ein, sind aber nicht darauf beschränkt. Unter den Begriffen „Cyclyl" und „Heterocyclyl" versteht man ein teilweise oder vollkommen gesättigtes monocyclisches oder bicyclisches Ringsystem mit von 4 bis 14 Ringatomen. Ein Heterocyclylring enthält ein oder mehr Heteroatom(e) (z. B. O, N oder S) als Teil des Ringsystems. Beispielhafte Cyclyl- und Heterocyclylringe stellen Cyclohexan, Piperidin, Piperazin, Morpholin, Thiomorpholin und 1,4-Oxazepan dar.
- Nachstehend ersichtlich sind spezifische Beispiele der kondensierten Pyrazolylverbindungen, die zur praktischen Ausführung der Erfindung verwendet werden können. Verbindung 1Verbindung 2
Verbindung 3
Verbindung 4
Verbindung 5
Verbindung 6
Verbindung 7
Verbindung 8
Verbindung 9
Verbindung 10
Verbindung 11
Verbindung 12
Verbindung 13
Verbindung 14
Verbindung 15
Verbindung 16
Verbindung 17
Verbindung 18
Verbindung 19
Verbindung 20
Verbindung 21
Verbindung 22
- Ein anderer erfindungsgemäßer Aspekt zeichnet sich durch eine Verbindung der Formel (I) aus, worin A für H, C1~C6-Alkyl oder (CH2)nAr3(R5)(R6) steht, worin n für 0, 1, 2, 3 oder 4 steht; jedes von Art, Ar2 und Ar3 unabhängig Phenyl, Pyridinyl, Thienyl, Furyl oder Pyrrolyl darstellt; jedes von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 unabhängig XYZ darstellt; worin X eine Bindung oder C1~C6-Alkyl darstellt, Y eine Bindung, O, S, OC(O), OC(O)(CH2)1-6C(O)O, C(O)O, C(O)S, C(O)NH, C(O)NC1~C6-Alkyl, NH oder NC1~C6-Alklyl darstellt, und Z für H, Halogen, CN, NO2 oder C1~C6-Alkyl steht; vorausgesetzt, dass optional R1 und R2 zusammen oder R5 und R6 zusammen O(CH2)1-6O darstellen; und weiter vorausgesetzt, dass X für R stehen muss, Y für OC(O)(CH2)1-6C(O)O stehen muss und Z für H oder C1~C6-Alkyl in einem von R3 und R4 stehen muss. (CH2)1-6 kann verzweigt oder linear sein.
- Ein Subset der gerade beschriebenen erfindungsgemäßen kondensierten Pyrazolylverbindungen stellt das dar, worin A für (CH2)nAr3(R5)(R6) steht, Ar1 Phenyl darstellt, Are Furyl darstellt, Ar3 Phenyl darstellt, n für 0 oder 1 steht, jedes von R1, R2, R5 und R6 für H steht, und eines von R3 und R4 für H steht. Eine beispielhafte erfindungsgemäße Verbindung stellt Verbindung 9 dar.
- Die vorstehend beschriebenen kondensierten Pyrazolylverbindungen schließen die Verbindungen selbst, ebenso wie ihre Salze und gegebenenfalls ihre Prodrugs ein. Derartige Salze können zum Beispiel zwischen einem negativ geladenen Substituenten (z. B. Carboxylat) an einer kondensierten Pyrazolylverbindung und einem Kation gebildet werden. Geeignete Kationen schließen ein Natriumion, Kaliumion, Magnesiumion, Calciumion und ein Ammoniumkation, wie zum Beispiel ein Tetramethylammoniumion ein, sind aber nicht darauf beschränkt. Ebenso kann ein positiv geladener Substituent (z. B. Amino) mit einem negativ geladenen Gegenion ein Salz bilden. Zu geeigneten Gegenionen zählen Chlorid, Bromid, Iodid, Sulfat, Nitrat, Phosphat oder Acetat, sind aber nicht darauf beschränkt. Beispiele von Prodrugs schließen Ester und andere pharmazeutisch verträgliche Derivate ein, die nach der Verabreichung an einen Patienten zur Bereitstellung der vorstehend beschriebenen kondensierten Pyrazolylverbindungen fähig sind (siehe Goodman und Gilman's, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8. Aufl., McGraw-Hill, Int. Aufl. 1992, „Biotransformation of Drugs").
- Außerdem weisen einige der hierin beschriebenen kondensierten Pyrazolylverbindungen eine oder mehr Doppelbindung(en) oder ein Asymmetriezentrum/mehr Asymmetriezentren auf. Derartige Verbindungen können als Racemate, racemische Gemische, einzelne Enantiomere, individuelle Diastereomere, diastereomere Gemische und cis- oder trans- oder E- oder Z-doppelt isomere Formen vorkommen.
- Die vorstehend erwähnten kondensierten Pyrazolylverbindungen können überdies auch ihre N-Oxide einschließen. Unter dem Begriff „N-Oxide" versteht man ein oder mehr Stickstoffatom(e), das/die wenn es/sie in einer kondensierten Pyrazolylverbindung anwesend ist/sind, in der N-Oxidform, d. h. N→O vorliegt/vorliegen.
- Bei Kombinationen von Substituenten und Variablen, an die in dieser Erfindung gedacht wird, handelt es sich nur um die, die zur Bildung von stabilen kondensierten Pyrazolylverbindungen führen. Der Begriff „stabil", wie hierin verwendet, verweist auf Verbindungen, die eine ausreichende Stabilität besitzen, um die Herstellung zuzulassen und die die Integrität der Verbindung für eine ausreichende Zeitdauer aufrechterhält, um sie für die hierin detaillierten Zwecke (z. B. für die Behandlung der Sepsis) nützlich zu machen.
- Andere erfindungsgemäße Merkmale, Gegenstände und Vorteile werden anhand der Beschreibung und den Zeichnungen und aus den Ansprüchen deutlicher hervorgehen.
- BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN
-
1 zeigt die Wirkung der Verabreichung von Verbindung 3 auf das Überleben von Mäusen, die an einer Form der LPS-induzierten Sepsis leiden (durchgehende Linie: Vehikel; lang-gestrichelte Linie: Verabreichung zwei Stunden nach der LPS-Injektion; und kurz-gestrichelte Linie: Verabreichung sechs Stunden nach der LPS-Injektion). - AUSFÜHRLICHE BESCHREIBUNG
- Eine im Abschnitt „Zusammenfassung" beschriebene kondensierte Pyrazolylverbindung kann mittels der dem Fachmann gut bekannten Verfahren hergestellt werden (siehe zum Beispiel
US-Patent Nr. 5574168 ). Sie schließen die folgende Syntheseroute ein: zuerst wird ein Aryl-Aryl-Keton mittels Kopplung eines Arylcarbonylchlorids mit einer anderen Arylverbindung hergestellt. Eine der beiden Arylverbindungen ist optional ein- oder mehrfach substituiert. Das Keton reagiert dann mit einem Arylalkylhydrazin (oder einem Alkylhydrazin, Hydrazin), dessen Arylgruppe auch optional ein- oder mehrfach substituiert ist, um ein Hydrazon zu bilden, das drei (oder zwei) Arylgruppen enthält. Die Hydrazongruppe wird über einen Alkylen-Linker in einen kondensierten Pyrazolylkern transformiert, eine andere Arylgruppe wird an 4-C und 5-C des Pyrazolylkerns kondensiert, und die dritte Arylgruppe wird direkt an 3-C des Pyrazolylkerns gebunden. Derivate der kondensierten Pyrazolylverbindung können durch Modifizieren der Substituenten an jedweder der Arylgruppen erhalten werden. - Die in den vorstehend beschriebenen Syntheserouten verwendeten Chemikalien können zum Beispiel Lösungsmittel, Reagenzien, Katalysatoren und Reagenzien zum Schützen und Entschützen von Gruppen einschließen. Die vorstehend beschriebenen Verfahren können zusätzlich auch Schritte, entweder vor oder nach den hierin spezifisch beschriebenen Schritten einschließen, um geeignete Schutzgruppen zuzufügen oder zu entfernen, um letztendlich die Synthese der kondensierten Pyrazolylverbindungen zu ermöglichen. Außerdem können verschiedene Syntheseschritte in einer alternativen Sequenz oder Reihenfolge durchgeführt werden, um die gewünschten Verbindungen zu ergeben. Synthetische chemische Transformationen und Schutzgruppen-Methodologien (Schützen und Entschützen), die beim Synthetisieren zutreffender kondensierter Pyrazolylverbindungen nützlich sind, sind im Stand der Technik bekannt und schließen zum Beispiel die im Folgenden beschriebenen ein: R. Larock, Comprehensive Organic Transformation, VCH Publishers (1989); T.W. Greene und P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. Aufl., John Wiley and Sons (1999); L. Fieser und M. Fieser, Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1994); und L. Paquette, Hrsg., Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis, John Wiley and Sons (1995) und nachfolgende Auflagen davon.
- Eine auf diese Weise synthetisierte kondensierte Pyrazolylverbindung kann mittels der Flash-Säulenchromatographie, Hochleistungsflüssigkeitschromotographie oder Kristallisation weiter gereinigt werden.
- Ein erfindungsgemäßer Aspekt stellt die Verwendung zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung der Sepsis dar. Das Arzneimittel ist zur Verabreichung an einen Patienten mit Bedarf daran in einer wirksamen Menge von einer oder mehr der vorstehend beschriebenen kondensierten Pyrazolylverbindungen und einem pharmazeutisch verträglichen Träger vorgesehen. Unter dem Begriff „Behandlung" versteht man die Anwendung einer kondensierten Pyrazolylverbindung bei einem Patienten für den Zweck der Heilung, Abheilung, Linderung, Erleichterung, Veränderung, des Kurierens, der Verbesserung, Besserung oder Beeinflussung der Sepsis, der Symptome der Sepsis oder der Prädisposition für Sepsis. „Eine wirksame Menge" ist als die Menge einer kondensierten Pyrazolylverbindung definiert, die nach Verabreichung an einen Patienten mit Bedarf daran erforderlich ist, um die therapeutische Wirkung an den Patienten zu verleihen. Eine wirksame Menge der kondensierten Pyrazolylverbindung kann im Bereich von ca. 0,1 mg/kg bis ca. 100 mg/kg liegen. Wie vom Fachmann erkannt werden wird, variieren auch die wirksamen Dosen, und zwar in Abhängigkeit von der Anwendungsweise, der Verwendung der Hilfsstoffe und der Möglichkeit der Anwendung zusammen mit anderen Mitteln zur Behandlung der Sepsis.
- Eine kondensierte Pyrazolylverbindung kann oral, parenteral, mittels Inhalationsspray oder über ein implantiertes Reservoir verabreicht werden. Der Begriff „parenteral", wie hierin verwendet, schließt die subkutane, intrakutane, intravenöse, intramuskuläre, intraartikuläre, intraarterielle, intrasynoviale, intrasternale, intrathekale, intraläsionale und intrakraniale Injektion oder Infusionsverfahren ein.
- Bei einer Zusammensetzung zur oralen Verabreichung kann es sich um jedwede oral verträgliche Arzneiform, einschließlich, aber nicht beschränkt auf Tabletten, Kapseln, Emulsionen und wässrige Suspensionen, Dispersionen und Lösungen handeln. Zu allgemein verwendeten Trägem für Tabletten zählen Lactose und Maisstärke. Gleitmittel, wie zum Beispiel Magnesiumstearat werden auch in der Regel den Tabletten zugefügt. Zur oralen Verabreichung in Kapselform schließen nützliche Verdünnungsmittel Lactose und getrocknete Maisstärke ein. Wenn wässrige Suspensionen oder Emulsionen oral verabreicht werden, kann der Wirkstoff in einer Ölphase kombiniert mit Emulgier- und Suspendiermitteln suspendiert oder aufgelöst werden. Gegebenenfalls können bestimmte Süßmittel, Geschmacksstoffe oder Farbstoffe zugefügt werden.
- Eine sterile injizierbare Zusammensetzung (z. B. eine wässrige oder ölhaltige Suspension) kann gemäß im Stand der Technik bekannter Verfahren unter Verwendung geeigneter Dispergier- oder Netzmittel (wie zum Beispiel Tween 80) und Suspendiermitteln formuliert werden. Das sterile injizierbare Präparat kann auch eine sterile injizierbare Lösung oder Suspension in einem nicht toxischen parenteral vertraglichen Verdünnungs- oder Lösungsmittel, wie zum Beispiel als eine Lösung in 1,3-Butandiol, darstellen. Unter den verträglichen Vehikeln und Lösungsmitteln, die eingesetzt werden können, befinden sich Mannitol, Wasser, Ringer-Lösung und isotonische Natriumchloridlösung. Außerdem werden üblicherweise sterile, fixierte Öle als ein Lösungsmittel oder Suspendiermedium (z. B. synthetische Mono- oder Diglyceride) eingesetzt. Fettsäuren, wie zum Beispiel Ölsäure und ihre Glyceridderivate sind bei der Herstellung von Injektionspräparaten ebenso wie natürliche, pharmazeutisch verträgliche Öle, wie zum Beispiel Olivenöl oder Ricinusöl, insbesondere in ihren polyoxyethylierten Versionen, nützlich. Diese Öllösungen oder -suspensionen können auch ein langkettiges alkoholisches Verdünnungs- oder Dispergiermittel oder Carboxymethylcellulose oder ähnliche Dispergiermittel enthalten.
- Eine Inhalationszusammensetzung kann gemäß den im Stand der Technik der pharmazeutischen Formulierung überall bekannten Verfahren hergestellt und kann als Lösungen in Kochsalzlösung hergestellt werden, wobei Benzylalkohol oder andere geeignete Konservierungsmittel, absorptionsfördernde Mittel zur Förderung der Bioverfügbarkeit, Fluorkohlenwasserstoffe und/oder im Stand der Technik bekannte andere Lösungsvermittler oder Dispergiermittel eingesetzt werden.
- Ein Träger in einer pharmazeutischen Zusammensetzung muss in dem Sinne „verträglich" sein, dass er mit dem Wirkstoff der Formulierung kompatibel (und bevorzugt zu ihrer Stabilisierung fähig ist) und nicht für den zu behandelnden Patienten schädlich ist. So können zum Beispiel Lösungsvermittler, wie zum Beispiel Cyclodextrine (die mit kondensierten Pyrazolylverbindungen spezifische, löslichere Komplexe bilden), als pharmazeutische Hilfsstoffe zur Abgabe von kondensierten Pyrazolylverbindungen verwendet werden. Beispiele anderer Träger schließen kolloidales Siliciumdioxid, Magnesiumstearat, Cellulose, Natriumlaurylsulfat und D&C Yellow No. 10 ein.
- Es kann ein geeigneter in vitro-Assay zur vorläufigen Bewertung der Wirksamkeit einer kondensierten Pyrazolylverbindung bei der Inhibition der vaskulären Zellapoptose eingesetzt werden. In vivo-Screening kann anhand der folgenden im Stand der Technik überall bekannten Verfahren auch durchgeführt werden. Spezifische Beispiele sind nachstehend ersichtlich.
- Es wird angenommen, dass die vorstehende Beschreibung die vorliegende Erfindung, ohne weitere Ausführungen, angemessen ermöglicht hat. Die folgenden spezifischen Ausführungsformen sind deshalb lediglich als erläuternd und nicht als den Rest der Offenbarung, auf welche Weise auch immer, einschränkend zu verstehen. Alle hierin angeführten Veröffentlichungen, einschließlich Patenten, sind hierdurch unter Bezugnahme in ihrer Gesamtheit eingeschlossen.
- VERFAHREN
- ZELLKULTUR
- Aortale Glattmuskelzellen von der Ratte (RASMC) wurden aus Sprague-Dawley-Ratten präpariert und in Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (DMEM) supplementiert mit 10% FBS, 100 Einheiten/ml Penicillin und 100 μg/ml Streptomycin (Gibco, Grand Island, NY), wie zuvor beschrieben (Yang et al. (2001) Br. J. Pharmacol. 132; 1531-1541), kultiviert. In der vorliegenden Studie wurden Zellen innerhalb von sechs Generationen verwendet. Es wurde anhand der Immunfärbung mit für das Glattmuskel-α-Aktin spezifischen monoklonalen Antikörpern nachgewiesen, dass es sich bei den Zellen um die Glattmuskelzellen handelt.
- CYTOTOXIZITÄTSASSAY
- Der Cytotoxizitätsassay wurde unter Verwendung des MTT-Assayverfahrens durchgeführt. MTT (3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid, Sigma Chemical, St. Louis, MO) wurde in phosphatgepufferter Kochsalzlösung (PBS) in einer Konzentration von 5 mg/ml aufgelöst und filtriert (Millipore, Bedford, MA). Aus dieser Stammlösung wurden jedem Well einer Platte 10 μl/100 μl Medium zugefügt, und die Platte wurde vorsichtig geschüttelt und 2 Stunden bei 37°C inkubiert. Die Behandlung lebender Zellen mit MTT führte ein dunkelblaues Formazanprodukt herbei, wohingegen bei toten Zellen keine Färbung beobachtet wurde. Nach dem Beladen mit MTT wurde das Medium durch 100 μl Dimethylsulfoxid (DMSO) ersetzt. Das Ausmaß der Reduktion von MTT zu Formazan in den Zellen wurde durch die Messung von OD550 mit einem Enzyme-linked Immunosorbent Assay-Lesegerät (ELISA-Lesegerät) quantifiziert.
- MARKIERUNG APOPTOTISCHER ZELLEN IN SITU
- Der in situ-Nachweis apoptotischer Zellen wurde unter Verwendung des Verfahrens des terminalen Desoxynuldeotidyl-Transferase (TdT) vermittelten dUTP „Nick End Labeling" (TUNEL) mit einem apoptotischen Nachweiskit (Promega, Madison, WI, USA) wie zuvor beschrieben (Guh et al. (1998) Mol. Pharmacol. 53; 467-474) durchgeführt. Das TUNEL-Verfahren identifiziert apoptotische Zellen in situ unter Verwendung von TdT, um Biotin-dUTP an das freie 3'-OH von gespaltener DNA zu transferieren. Die Biotin-markierten Spaltungsorte wurden dann durch Reaktion mit Fluoresceinkonjugiertem Avidin (Avidin-Fluorescein-Isothiocyanat) sichtbar gemacht. Photomikrographien wurden mit einem Fluoreszenzmikroskop (Nikon) erhalten.
- ASSAY DES cGMP-GEHALTS
- Bei Konfluenz wurden Monolayer-Zellen mit den angegebenen Mitteln 10 Minuten inkubiert. Danach wurden die Zellen zweimal mit eiskalter PBS gewaschen und mit 0,5 ml NaOH (0,1 mol/l) lysiert. Darauf wurden 0,5 ml HCl (0,1 mol/l) zum Neutralisieren der Assay-Lösung zugefügt. Nach dem Zentrifugieren (3 Minuten bei 3000 × g) wurde der Überstand zum Nachweis des cGMP-Gehalts unter Verwendung eines cGMP-ELISA-Kits verwendet.
- BESTIMMUNG DER CASPASE-3-AKTIVITÄT
- Die Caspase-3-Aktivität wurde mit dem Caspase-3-kolorimetrischen Assaykit (R&D Systems, Inc., Minneapolis, Minnesota) bestimmt. Nach der 10-stündigen Behandlung der Zellen mit den angegebenen Mitteln wurden die Zellen zweimal mit eiskalter PBS gewaschen, trypsiniert und zentrifugiert (5 Minuten bei 800 × g), und das Zellpellet wurde in einem vorgekühlten Lysepuffer aus dem Caspase-3-kolorimetrischen Assaykit resuspendiert. Nach 10-minütiger Inkubation auf Eis wurden die Zellhomogenate 1 Minute bei 10000 × g zentrifugiert, und die Überstände wurden zur Bestimmung der Caspase-3-Aktivität entfernt. Proteolytische Reaktionen wurden in einem Gesamtvolumen von 100 μl Reaktionspuffer mit 50 μl cytosolischen Extrakten und 5 μl DEVD-pNA aus dem Kit durchgeführt. Das Reaktionsgemisch wurde ein bis zwei Stunden bei 37°C inkubiert, und die Bildung von p-Nitroanilin wurde danach mit einem ELISA-Lesegerät bei 405 nm gemessen.
- NACHWEIS DER CYTOCHROM-c-FREISETZUNGSREAKTION
- Die Zellen wurden trypsiniert und 10 Minuten bei 800 × g zentrifugiert. Danach wurde das Zellpellet in 50 μl Extraktionspuffer mit 20 mmol/l HEPES, pH 7,5, 10 mmol/l KCl, 1,5 mmol/l MgCl2, 1 mmol/l EDTA, 1 mmol/l EGTA, 1 mmol/l Dithiothretol, 1 mmol/l PMSF) resuspendiert und 3 Minuten auf Eis inkubiert. Die Zellen wurden mit 30 Hüben behandelt und 15 Minuten bei 15000 × g bei 4°C zentrifugiert. Aliquote von 20 μg Protein wurden auf 15% SDS-Polyacrylamidgel aufgelöst und dann auf PVDF-Membranen aufgetragen. Die Membranen wurden mit einem gegen das Cytochrom c gerichteten monoklonalen Antikörper inkubiert. Danach wurden die Membranen mit Antimaus-IgG inkubiert, und die Expression von Cytochrom c wurde wie zuvor beschrieben nachgewiesen.
- WESTERN BLOT-ANALYSE
- Nach der Exposition von Zellen gegenüber den angegebenen Mitteln für die Dauer von vier Stunden (für Bcl-2) oder sechs Stunden (für Cytochrom c) wurden die Zellen zweimal mit eiskaltem PBS gewaschen, und die Reaktion wurde durch das Zufügen von 100 μl eiskaltem Lysepuffer (10 mmol/l Tris-HCl, pH 7,4, 150 mmol/l NaCl, 1 mmol/l EGTA, 0,5 mmol/l Phenylmethylsulfonylfluorid (PMSF), 10 μg/ml Aprotinin, 10 μg/ml Leupeptin und 1% Triton X-100) beendet. Zum Nachweis von phosphoryliertem Akt wurden 1 mmol/l Na3VO4, 1 mmol/l NaF, 50 mmol/l Tetranatriumpyrophosphat, 10 nmol/l Okadainsäure, 0,25% Natriumdesoxycholat in den Lysepuffer eingeschlossen. Der Proteingehalt wurde mithilfe des Bio-Rad Protein-Assays (Bio-Rad Laboratories, CA, USA) bestimmt. Für die Western Blot-Analyse wurden die Zelllysate (25 μg/Spur) auf 10–15% SDS-Polyacrylamidgelen elektrophoriert und auf eine Nitrocellulosemembran transferiert. Die Membranen wurden mit einem gegen Bcl-2 oder gegen α-Tubulin gerichteten monoklonalen Antikörper oder mit einem gegen phosphoryliertes Akt gerichteten polyklonalen Antikörper sondiert. Die transferierten Membranen wurden mit einem sekundären Anti-Maus- oder Anqti-Kaninchen-Antikörper wie zuvor beschrieben entwickelt (Guh et al. (1998) Eur. J. Pharmacol. 359: 281-284). Der Signalnachweis wurde mit einem verstärkten Chemilumineszenz-Nachweiskit (ECL; Amersham International, Little Chalfont, U.K.) durchgeführt.
- INDUKTION DES ENDOTOXISCHEN SCHOCKS UND HISTOLOGISCHE UNTERSUCHUNG
- In diesen Experimenten wurden Mäuse (25–30 g, ICR-Stamm) mit 60 mg/kg LPS (aufgelöst in PBS) intraperitoneal injiziert, und Verbindung 3 (suspendiert in Carboxymethylcellulose) wurde nach der 2- bis 6-stündigen Injektion von LPS oral verabreicht. Die Überlebensrate wurde alle 3 bis 6 Stunden nach der LPS-Injektion überwacht. Die Lungengewebe wurden zur histologischen Untersuchung in 4% Paraformaldehyd gegeben und in Paraffin eingebettet. Die eingebetteten Gewebe wurden in 6 μm dicke Schnitte geschnitten, mit Hämatoxylin-Eosin gefärbt und unter Verwendung eines Mikroskops analysiert.
- STATISTISCHE ANALYSE
- Die Daten werden als der Mittelwert ± SEM für die angegebene Anzahl von gesonderten Experimenten vorgelegt. Die statistische Analyse der Daten wurde mit einer einseitigen Varianzanalyse (ANOVA), gefolgt von einem t-Test durchgeführt, und P-Werte von weniger als 0,05 wurden als signifikant erachtet.
- ERGEBNISSE
- IN-VITRO-ASSAYS
- Zuerst wurde die Wirkung von Verbindung 3 auf die Natriumnitroprussid-induzierte (SNP-induzierte) Apoptose in kultivierten RASMC untersucht. Die Daten zeigten, dass SNP (1 mmol/l) eine profunde Zellapoptose induzierte, die mithilfe des MTT-Assayverfahrens und des TUNEL-Reaktionsverfahrens bestimmt wurde. Verbindung 3 (30 μmol/l) hob jedoch die SNP-induzierte Apoptose vollkommen auf. Interessanterweise übte ODQ, ein Inhibitor der löslichen Guanylylcyclase, keinen Einfluss auf die SNP-induzierte Apoptose aus, reversierte aber die durch Verbindung 3 vermittelte antiapoptotische Reaktion signifikant (siehe Tabelle 1), was zu erkennen gab, dass die Aktivierung der löslichen Guanylylcyclase an der durch Verbindung 3 vermittelten Antiapoptose mit Ausnahme der SNP-induzierten apoptotischen Reaktion beteiligt war.
- In der vorliegenden Studie wurden auch die intrazellulären cGMP-Spiegel bestimmt. Verbindung 3 allein induzierte eine deutliche Steigerung der cGMP-Synthese (4,2 ± 0,8 fmol/Well im Vergleich zum Basalwert von 2,3 ± 0,3 fmol/Well). Außerdem rief die Kombination von SNP und Verbindung 3 synergistisch mehr als die sechzigfache Steigerung dieser cyclischen Nukleotidbildung (252,8 ± 81,8 fmol/Well) hervor. ODQ inhibierte jedoch signifikant die Wirkungen von Verbindung 3 allein (Ca. den Basalwert) und die kombinierte Wirkung von SNP und Verbindung 3 (ca. 21 fmol/Well). Unter Verwendung des MTT-Assayverfahrens konnte das zellpermeable cGMP-Analogon Dibutyl-cGMP überdies die SNP-induzierte Apoptose signifikant reversieren (Daten werden nicht gezeigt). Zusammen genommen deuten diese Daten darauf hin, dass SNP eine cGMP-unabhängige apoptotische Reaktion induzierte, während Verbindung 3 die SNP-Wirkung über einen cGMP-abhängigen Signalweg verhinderte.
- Zur Untersuchung, ob die PI-3-Kinase und die Mitogen-aktivierte Proteinkinase (MAPK) an der von Verbindung 3 vermittelten Antiapoptose beteiligt waren, wurden ihre selektiven Inhibitoren bei der Funktionsbestimmung verwendet. Der PI-3-Kinase-Inhibitor, Wortmannin, und der Mitogen-aktivierte Proteinkinase-Inhibitor (MEK-Inhibitor), PD98059, reversierte die Wirkung von Verbindung 3 signifikant, wobei gezeigt wurde, dass die Aktivierung von P13-Kinase bei der durch Verbindung 3 induzierten antiapoptischen Wirkung eine zentrale Rolle spielen könnte.
- Es wurde häufig darauf hingewiesen, dass die Lipidprodukte von PI-3-Kinase mit hoher Affinität und Spezifität an die PH-Domäne von Akt/PKB binden und dann den Signalweg für das Zellüberleben triggern. In der vorliegenden Studie wurde die phosphorylierte Akt-Expression mittels der Western-Blot-Analyse untersucht. Die Ergebnisse zeigten, dass sowohl Verbindung 3 allein als auch ihre Kombination mit SNP die profunde Steigerung der phosphorylierten Akt-Expression induzierte. Diese Wirkungen wurden durch ODQ und Wortmannin profund inhibiert, was darauf hinwies, dass die durch Verbindung 3 induzierte Aktivierung von PI-3-Kinase ein „Downstream"-Ereignis der cGMP-Synthese darstellt.
- Die Wirkungen von SNP und Verbindung 3 auf den Bcl-2-Ebenen und die Cytochrom c-Freisetzungsreaktion wurden untersucht. SNP-Exposition (1 mmol/l) rief eine profunde Down-Regulierung der Bcl-2-Expression und Cytochrom c-Freisetzung in Cytosol hervor. Die Wirkung von SNP wurde durch die Behandlung der Zellen mit Verbindung 3 vollkommen verhindert. ODQ und Wortmannin reversierten jedoch vollkommen die Präventivwirkung von Verbindung 3. Diese Daten weisen darauf hin, dass der cGMP-abhängige, PI3-Kinase-beteiligte Signalweg zur Wirkung von Verbindung 3 der Verhinderung der Down-Regulation von Bcl-2 und der durch SNP hervorgerufenen Cytochrom c-Freisetzung zugeschrieben wird.
- Die Caspase-3-Aktivität wurde nach der Exposition von Zellen gegenüber SNP (1 mmol/l) bestimmt. Die Ergebnisse zeigten, dass SNP die Caspase-3-Aktivität in RASMC signifikant steigerte; Verbindung 3 diese Enzymaktivität zur SNP-Wirkung vollkommen inhibierte. Darüber hinaus wurde die Verbindung 3-vermittelte inhibitorische Wirkung durch ODQ bzw. Wortmannin auch teilweise, aber signifikant reversiert. Wenn der Prozentsatz der Apoptose und die Caspase-3-Aktivität auf jedwede Korrelation weiter analysiert wurden, erhielt man eine positive lineare Regression mit einem Korrelationskoeffizienten (r2-Wert) von 0,980, was auf die ausschlaggebende Rolle der Regulation der Caspase-3-Aktivität bei der SNP-induzierten Wirkung und der antiapoptotischen Wirkung von Verbindung 3 hinweist.
- Die Wirkungen der Verbindungen 1–22 auf die Natriumnitroprussid-(SNP)-induzierte Apoptose in kultivierten VSMC wurden untersucht. 16 Verbindungen wiesen eine inhibitorische Wirkung auf die durch SNP (1 mmol/l) induzierte Apoptose auf. Einige von ihnen hoben die SNP-induzierte Apoptose vollkommen auf.
- IN-VITRO-ASSAYS
- Zur Untersuchung des therapeutischen Potenzials von Verbindung 3 in der Sepsisbehandlung wurde der LPS-induzierte septische Tod in einem Mausmodell verwendet. Die intraperitoneale Verabreichung von LPS (60 mg/kg) rief innerhalb von 10 bis 28 Stunden den kumulativen Tod der Tiere hervor. Die orale Behandlung von Verbindung 3 (10 mg/kg) nach 2-stündiger LPS-Applikation (d. h. der Nachbehandlung von Verbindung 3) erhöhte die Überlebensrate von Mäusen signifikant (
1 ). Diese überlebenden Mäuse blieben überdies mehr als einen Monat nach der LPS-Einleitung aktiv. - Die histologische Untersuchung der in vivo-Tierstudie wurde auch beobachtet. Die Kontrollmaus zeigte ein intaktes histologisches Aussehen der Lungengewebe. Nach 28-stündiger LPS-Applikation wies das Tier die geschädigten Blutgefäße und einen massiven Austritt von Blutzellen aus dem Kreislauf in die Lungengewebe auf. Die gesunde Maus in der mit Verbindung 3 nachbehandelten Gruppe zeigte jedoch die intakten Blutgefäße ohne die Infiltration von Blutzellen.
- Die Wirkung der vaskulären Glattmuskelzellapoptose (VSMC-Apoptose) ist offensichtlich umgebungsabhängig. Die VSMC-Apoptose wurde bei Atherosklerose und der Neointimabildung nach einer Verletzung eingehend untersucht (Mallat et al. (1997) Circulation 96:424-428; und Newby & George (1996) Curr. Opin. Cardiol. 11: 574-582.); weniger Aufmerksamkeit wurde jedoch ihrer Assoziation mit der Sepsis geschenkt. Die Wirkungen von NO auf die Apoptose sind abhängig von den Zelltypen, Zellkonzentrationen, radikalischen Gegebenheiten und auch dem Redoxstatus der Zellen (Yabuki et al. (1997) Free Radical Res. 27: 325-335; und Filippov et al. (1997) J. Clin. Invest. 100: 942-948). Verbindung 3 verhinderte die SNP-induzierte apoptotische Wirkung auf eine cGMP-abhängige Weise basierend auf den Beobachtungen, dass Verbindung 3 in Kombination mit SNP die cGMP-Synthese synergistisch steigerte, Dibutyl-cGMP die durch Verbindung 3 vermittelte Wirkung effizient mimickte und ODQ die Wirkung von Verbindung 3 signifikant reversierte. Bei der durch Verbindung 3 vermittelten Wirkung blieb jedoch noch eine Wirkung von ca. 20%, die nicht auf ODQ ansprach.
- Die für die NO-induzierte Cytotoxizität vorgeschlagenen Mechanismen schließen die Inaktivierung der mitochondrialen Atmungskette, DNA-Schädigung und die Bcl-2-Down-Regulation/Bax-Upregulation ein (Bolanos et al. (1997) J. Neurochem. 68: 2227-2240; und Tamatani et al. (1998) Cell Death Differ. 5: 911-919). Wie vorstehend besprochen, induzierte SNP eine signifikante Downregulation von Bcl-2-Proteinen mit Ausnahme des Einflusses auf die Bax-Expression (Daten werden nicht gezeigt); es stimulierte auch die Freisetzungsreaktion von Cytochrom c in das Cytosol und die Aktivierung der Caspase-3-Aktivität. Diese Daten weisen die Regulation der Signalwege von Bcl-2/Cytochrom c/Caspase-3 im SNP-vermittelten apoptotischen Mechanismus in RASMC nach. Verbindung 3 blockierte jedoch fast vollkommen alle diese apoptotischen Ereignisse bezüglich der SNP-Wirkung. ODQ reversierte außerdem profund die durch Verbindung 3 vermittelten Wirkungen, was zu erkennen gab, dass sich Verbindung 3 mit einer cGMP-abhängigen antiapoptotischen Wirkung verhielt.
- Es wurde vorgeschlagen, dass die Steigerung der cyclischen Nukleotidsynthese und die folgende Aktivierung der PI3-Kinase eine zentrale Rolle bei der Verhinderung einer apoptotischen Reaktion in mehreren Zelltypen spielen (Webster & Anwer (1998) Hepatology, 27; 1324-1331). Es wurde ferner mitgeteilt, dass cGMP in einigen Zelltypen, wie zum Beispiel in den Cytokin-aktivierten Mesangialzellen, gegebenenfalls die Aktivierung von p42/44 MAPK durch NO regulieren könnte (Callsen et al. (1998) J. Immunol. 161: 4852-4858). Es wurde vorstehend gezeigt, dass Wortmannin, aber nicht PD98059, die durch Verbindung 3 vermittelten Wirkungen reversierte. Ferner wurde die Akt-Phosphorylierung in Anwesenheit von Verbindung 3 deutlich induziert, und diese Wirkung wurde jedoch durch ODQ vermindert. Diese Ergebnisse weisen darauf hin, dass die PI 3-Kinase einen Downstream-Effektor der sGC-Aktivierung nach der Applikation von Verbindung 3 darstellt und an dem antiapoptotischen Mechanismus beteiligt ist. Im Gegensatz dazu ist der p42/44 MAPK-Weg für das durch Verbindung 3 vermittelte Überleben in RASMC nicht relevant. Obwohl dies nicht statistisch signifikant war, induzierte Verbindung 3 allein interessanterweise eine mäßige Steigerung der Zellzahl (11%, Tabelle 1) in RASMC. Sowohl ODQ als auch PD98059 inhibierten diese durch Verbindung 3 induzierte Zellproliferation vollkommen, was die Beiteiligung von sGC- und p42/44 MAPK-Aktivitäten impliziert.
- Diese Studie deutet auf die antiapoptotische Rolle der PKC-Aktivierung hin. Die Daten zeigten jedoch, dass Ro-318220, ein selektiver PKC-Inhibitor, kaum einen Einfluss auf die durch Verbindung 3 vermittelte antiapoptotische Wirkung (107,1 ± 3,1% vs. 100,6 ± 5,5% Überleben der Zellen in der Gruppe der Verbindung 3 plus SNP, P = 0,32, n = 7) aufwies, was auf die Relevanz der PKC-Aktivität bei der Wirkung von Verbindung 3 hinweist.
- Es wurde die Wirkung von Verbindung 3 auf die Verhinderung des LPS-induzierten septischen Tods bei Mäusen gezeigt; es wurde insbesondere die Nachbehandlung von Verbindung 3 durchgeführt. Die Daten weisen eine signifikante Abnahme der Mortalitätsrate in mit LPS behandelten Mäusen auf. Die Lungengewebe wurden auch untersucht, da oftmals darauf hingewiesen wurde, dass das Lungenversagen eine der signifikantesten Ursachen des septischen Tods darstellt. Basierend auf der histologischen Untersuchung zeigten die Ergebnisse, dass das Tier nach der LPS-Applikation die geschädigten Blutgefäße und einen massiven Austritt von Blutzellen aus dem Kreislauf in die Lungengewebe aufwies. Ferner zeigten Mäuse in der mit Verbindung 3 nachbehandelten Gruppe die intakten Blutgefäße ohne die Infiltration von Blutzellen, und verhalten sich wie gewöhnlich aktiv.
- Die Wirkungen von Verbindung 3 auf die anderen pharmakologischen Aktivitäten wurden auch ermittelt. Verbindung 3 hatte zuvor keine Inhibition auf die Cyclooxygenase-Aktivität aufgewiesen (Ko et al. (1994) Blood. 84: 4226-4233); sie zeigte auch wenig Inhibition auf die Freisetzung des LPS/Interferon γ-induzierten Tumornekrosefaktors α in NR8383-Makrophagen (18,5 ± 1,2 ng/ml im Vergleich zur Kontrolle von 15,5 ± 1,3 ng/ml, P = 0,13, n = 4) und die Reduktion von Cytochrom c durch das Superoxid-Anion, das vom Xanthin/Xanthinoxidase-System generiert wurde (40 ± 0,6% im Vergleich zur Kontrolle von 42,0 ± 2,1%, P = 0,4, n = 4). Ferner wurde auch die Aktivität von Verbindung 3 bei der Entsorgung freier Radikale („free Radical Scavenging") unter Verwendung des stabilen Radikals 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl untersucht. Verbindung 3 wies wenig Aktivität bei der Entsorgung freier Radikale auf (Daten werden nicht gezeigt). In einem anderen Experiment wurde nach einer 24-stündigen Stimulation von murinen Makrophagen-RAW 264,7 Zellen durch LPS (1 μg/ml) eine profunde Bildung von NO beobachtet. Trotzdem wirkte sich Verbindung 3 nicht auf diese LPS-evozierte Wirkung in der vorliegenden Studie aus (53,4 ± 12,3 μmol/l Nitrit im Vergleich zur Kontrolle mit 68,8 ± 13,4 μmol/l Nitrit, P = 0,43, n = 4). Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass Verbindung 3 wenig Aktivität hinsichtlich der Entzündungshemmung, Antioxidanz- und Anti-LPS-Wirkung auf die NO-Bildung aufweist und den Beitrag dieser Wirkungen auf das durch Verbindung 3 vermittelte Überleben der Tiere ausschließt. Basierend auf den vorstehenden Besprechungen spielt Verbindung 3 folglich eine signifikante Rolle bei der antiapoptotischen Wirkung auf den septischen Tod bei Mäusen.
TABELLE 1. Wirkungen von Natriumnitroprussid (SNP), Verbindung 3 und ODQ auf die Regulation des Zellüberlebens in aortalen Glattmuskelzellen der Ratte Behandlung Überleben der Zellen (%) n Kontrolle 100 ± 0 6 SNP 49,3 ± 4,4* 6 Verbindung 3 111,3 ± 8,8 6 SNP + Verbindung 3 102,9 ± 8,1* 6 ODQ 99,5 ± 5,7 5 ODQ + Verbindung 3 96,1 ± 4,2 7 ODQ + SNP+ Verbindung 3 69,6 ± 4,0# 6 Die Daten sind als Mittelwert ± SEM von fünf bis sieben Experimenten ausgedrückt, n stellt die Anzahl der unabhängigen Experimente dar. *P < 0,001 im Vergleich zur Kontrolle; +P < 0,001 im Vergleich zu SNP allein: #P < 0,01 im Vergleich zu SNP plus Verbindung 3
Claims (34)
- Verwendung einer Verbindung der Formel (I) zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von Sepsis:worin A für H, C1~C6-Alkyl oder
steht; worin n für 0, 1, 2 oder 3 steht; jedes Ar1, Ar2 und Ar3 unabhängig Phenyl, Pyridinyl, Thienyl, Furyl oder Pyrrolyl ist; und jedes von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 unabhängig XYZ ist; oder R1 und R2 zusammen, R3 und R4 zusammen oder R5 und R6 zusammen O(CH2)1-6O sind; worin X eine Bindung oder C1~C6-Alkyl ist, Y eine Bindung, O, S, OC(O), OC(O)CH2)1-6C(O)O, C(O)O, C(O)S, C(O)NH, C(O)NC1~C6-Alkyl, NH, oder NC1~C6-Alkyl ist, und Z für H, Halogen, CN, NO2, oder C1~C6-Alkyl steht; und vorausgesetzt, dass eines von R3 und R4 nicht H ist.
- Verwendung nach Anspruch 1, worin A für H steht.
- Verwendung nach Anspruch 2, worin Ar1 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 3, worin Ar2 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 4, worin jedes von R1 und R2 für H steht.
- Verwendung nach Anspruch 3, worin Ar2 für Furyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 7, worin jedes von R1 und R2 für H steht.
- Verwendung nach Anspruch 1, worin A für
- Verwendung nach Anspruch 8, worin Ar1 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 9, worin Ar2 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 10, worin Ar3 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 11, worin n für 0 oder 1 steht.
- Verwendung nach Anspruch 12, worin eines von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 für COOH, COO-C1~C6-Alkyl, CH2OH, CN, NO2 oder Halogen steht.
- Verwendung nach Anspruch 9, worin Ar2 für Furyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 14, worin Ar3 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 15, worin n für 0 oder 1 steht.
- Verwendung nach Anspruch 16, worin eines von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 für COOH, COO-C1~C6-Alkyl, CH2OH, CN, NO2 oder Halogen steht.
- Verwendung nach Anspruch 9, worin Ar3 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 9, worin n für 0 oder 1 steht.
- Verwendung nach Anspruch 8, worin Ar1 für Thienyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 20, worin Are für Furyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 21, worin Ar3 für Phenyl steht.
- Verwendung nach Anspruch 22, worin n für 0 oder 1 steht.
- Verwendung nach Anspruch 23, worin eines von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 für COOH, COO-C1~C6-Alkyl, CH2OH, CN, NO2 oder Halogen steht.
- Verwendung nach Anspruch 1, worin die Verbindung Folgendes ist:
- Verbindung der Formel (I)worin A für H, C1~C6-Alkyl oder
steht; worin n für 0, 1, 2 oder 3 steht; jedes von Ar1, Ar2 und Ar3 unabhängig Phenyl, Pyridinyl, Theinyl, Furyl oder Pyrrolyl ist; und jedes von R1, R2, R3, R4, R5 und R6 unabhängig XYZ ist; worin X eine Bindung oder C1~C6-Alkyl ist, Y eine Bindung, O, S, OC(O), OC(O)(CH2)1-6C(O)O, C(O)O, C(O)S, C(O)NH, C(O)NC1~C6-Alkyl, NH oder NC1~C6-Alkyl ist, und Z für H, Halogen, CN, NO2 oder C1~C6-Alkyl steht; vorausgesetzt, dass optional R1 und R2 zusammen, oder R5 und R6 zusammen O(CH2)1-6O sind; und ferner vorausgesetzt, dass X für C1~C6-Alkyl stehen muss, Y für OC(O)(CH2)1-6C(O)O stehen muss, und Z für H oder C1~C6-Alkyl in einem von R3 und R4 stehen muss.
- Verbindung nach Anspruch 26, worin A fürsteht.
- Verbindung nach Anspruch 27, worin Ar1 für Phenyl steht.
- Verbindung nach Anspruch 28, worin A2 für Furyl steht.
- Verbindung nach Anspruch 29, worin Ar3 für Phenyl steht.
- Verbindung nach Anspruch 30, worin jedes von R1, R2, R5 und R6 für H steht.
- Verbindung nach Anspruch 31, worin eines von R3 und R4 für H steht.
- Verbindung nach Anspruch 32, worin n für 0 oder 1 steht.
- Verbindung nach Anspruch 33, worin X für CH2 steht, Y für OC(O)CH2CH2C(O)O stehen muss, und Z für H in dem anderen von R3 und R4 stehen muss.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US35178802P | 2002-01-25 | 2002-01-25 | |
| US351788P | 2002-01-25 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE60319021D1 DE60319021D1 (de) | 2008-03-27 |
| DE60319021T2 true DE60319021T2 (de) | 2009-02-05 |
Family
ID=23382397
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE60319021T Expired - Fee Related DE60319021T2 (de) | 2002-01-25 | 2003-01-23 | Verfahren zur Behandlung von Sepsis |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US6943186B2 (de) |
| EP (1) | EP1331223B1 (de) |
| JP (1) | JP2003238405A (de) |
| KR (1) | KR20030095197A (de) |
| AT (1) | ATE386025T1 (de) |
| DE (1) | DE60319021T2 (de) |
| TW (1) | TWI264304B (de) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050209252A1 (en) * | 2002-03-29 | 2005-09-22 | Che-Ming Teng | Cancer treatment |
| US7166293B2 (en) * | 2002-03-29 | 2007-01-23 | Carlsbad Technology, Inc. | Angiogenesis inhibitors |
| US20050119278A1 (en) * | 2002-05-16 | 2005-06-02 | Che-Ming Teng | Anti-angiogenesis methods |
| TW200539874A (en) * | 2004-03-15 | 2005-12-16 | Yung Shin Pharmaceutical Ind | Preferential inhibition of release of pro-inflammatory cytokines |
| US7378532B2 (en) * | 2004-03-26 | 2008-05-27 | Yung Shin Pharmaceutical Ind. Co., Ltd. | Fused pyrazolyl compound |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2701281B2 (ja) * | 1988-01-22 | 1998-01-21 | 吉富製薬株式会社 | ピラゾロピリジン化合物 |
| JP2928079B2 (ja) * | 1994-02-14 | 1999-07-28 | 永信薬品工業股▲ふん▼有限公司 | １−（置換ベンジル）−３−（置換アリール）縮合ピラゾール類、その製造法及びその用途 |
| DE19642255A1 (de) | 1996-10-14 | 1998-04-16 | Bayer Ag | Verwendung von 1-Benzyl-3-(substituierten-hetaryl) -kondensierten Pyrazol-Derivaten |
| DE59713007D1 (de) | 1996-10-14 | 2009-06-25 | Bayer Healthcare Ag | Neue heterocyclylmethyl-substituierte pyrazolderivate und ihre verwendung in der behandlung von herz-kreislauf-erkrankungen |
| DE19744027A1 (de) * | 1997-10-06 | 1999-04-08 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Substituierte Pyrazolo[3,4-b]pyridine, ihre Herstellung und Verwendung in Arzneimitteln |
| DE19744026A1 (de) * | 1997-10-06 | 1999-04-08 | Hoechst Marion Roussel De Gmbh | Pyrazol-Derivate, ihre Herstellung und ihre Verwendung in Arzneimitteln |
| US6462036B1 (en) * | 1998-11-06 | 2002-10-08 | Basf Aktiengesellschaft | Tricyclic pyrazole derivatives |
| GB0002666D0 (en) * | 2000-02-04 | 2000-03-29 | Univ London | Blockade of voltage dependent sodium channels |
-
2003
- 2003-01-21 TW TW092101212A patent/TWI264304B/zh not_active IP Right Cessation
- 2003-01-23 AT AT03250418T patent/ATE386025T1/de not_active IP Right Cessation
- 2003-01-23 KR KR10-2003-0004548A patent/KR20030095197A/ko not_active Ceased
- 2003-01-23 DE DE60319021T patent/DE60319021T2/de not_active Expired - Fee Related
- 2003-01-23 JP JP2003014654A patent/JP2003238405A/ja active Pending
- 2003-01-23 EP EP03250418A patent/EP1331223B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2003-01-24 US US10/350,794 patent/US6943186B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2005
- 2005-03-28 US US11/092,939 patent/US20050187257A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TWI264304B (en) | 2006-10-21 |
| DE60319021D1 (de) | 2008-03-27 |
| US6943186B2 (en) | 2005-09-13 |
| EP1331223A1 (de) | 2003-07-30 |
| ATE386025T1 (de) | 2008-03-15 |
| US20030181502A1 (en) | 2003-09-25 |
| TW200302091A (en) | 2003-08-01 |
| US20050187257A1 (en) | 2005-08-25 |
| JP2003238405A (ja) | 2003-08-27 |
| KR20030095197A (ko) | 2003-12-18 |
| EP1331223B1 (de) | 2008-02-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE60125541T2 (de) | Neue nicht psychotropische cannabinoide | |
| DE60107435T2 (de) | 2-adamantylethylamine und deren verwendung bei der behandlung von abnormalitäten in der glutamat transmission | |
| DE4341403A1 (de) | N-substituierte 3-Azabicycloalkan-Derivate, ihre Herstellung und Verwendung | |
| DE69430695T2 (de) | Verfahren zur verbesserung der wahrnehmung mit partiellen agonisten des glycin/nmda-rezeptorkomplexes | |
| DE2713389C2 (de) | ||
| DE69409796T2 (de) | Neue verwendung bis-heterocyclische verbindungen und dessen zusammensetzungen | |
| DE19602964A1 (de) | Neue Morphinderivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung | |
| DE69009717T2 (de) | Heteroaryl-3-oxo-propan-nitril-derivat verwendbar in erregung von myelopoiesis. | |
| DE3446371A1 (de) | 5-pyrimidincarboxamide und 5-pyrimidinthiocarboxamide und ihre verwendung zur behandlung von leukaemie und tumoren | |
| DE1905765C3 (de) | In 3-Stellung substituierte 5- [3-(4-carbamoyl-4piperidino-piperidino)-proprl] -5H-IO111-dihydrodibenz (b^azepine, Verfahren zu ihrer Herstellung und sie enthaltende Arzneimittel | |
| DD297328A5 (de) | 5-methyl-isoxalol-4-carbonsaeureanilide und 2 hydroxyethyliden-cyanoessigsaeureanilide zur behandlung von augenerkrankungen | |
| DE69005974T2 (de) | Heteroaryl-3-oxo-propannitril-derivate, nützlich zur behandlung von rheumatoider arthritis und anderen autoimmunkrankheiten. | |
| DE2633679A1 (de) | 4,5-dihydro-2-niederalkoxycarbonylamino-4-phenylimidazole und derivate davon mit substituierter phenylgruppe | |
| DE69426620T2 (de) | Antidepressiva | |
| DE69114405T2 (de) | 3-(1,2-Benzisoxazol-3-yl)-4-Pyridinamine und Derivate. | |
| DE3012837A1 (de) | Analgetische und myotonolytische praeparate | |
| DE3779991T2 (de) | Dioxopiperidin-derivate enthaltende anxiolytische zusammensetzungen. | |
| DE2719607C2 (de) | ||
| DE3804936A1 (de) | Piperazincarbonsaeure, ihre herstellung und diese enthaltende arzneimittel | |
| DE69326188T2 (de) | Verwendung von N-Acylderivaten von Aminoalkoholen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von neurogenen endoneuralen Ödemen der peripheren Nerven | |
| EP1331223B1 (de) | Verfahren zur Behandlung von Sepsis | |
| EP0821960A1 (de) | Verwendung von Xanthinderivaten zur Modulation der Apoptose | |
| DE10212564A1 (de) | 1-Allyl-Ergotalkaloid-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Prophylaxe und Therapie von Migräne | |
| DE69029814T2 (de) | Inhibitoren der dihydrofolatreduktase von pneumocystis carinii | |
| EP0417637A2 (de) | Verwendung von Dopamin-Autorezeptor-Agonisten bei der Behandlung von Drogenabhängigkeit |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| 8364 | No opposition during term of opposition | ||
| 8339 | Ceased/non-payment of the annual fee |