DE69422980T2

DE69422980T2 - Extrakte von Piliostigma thonningii, deren Verwendung und diese enthaltende Zubereitungen

Info

Publication number: DE69422980T2
Application number: DE69422980T
Authority: DE
Inventors: Ezio Bombardelli; Paolo Morazzoni; Giuseppe Mustich
Original assignee: Indena SpA
Current assignee: Indena SpA
Priority date: 1994-06-01
Filing date: 1994-07-13
Publication date: 2000-08-17
Anticipated expiration: 2014-07-14
Also published as: DE685235T1; PT685235E; ES2081782T3; JPH07330788A; ITMI941135A1; KR960000244A; KR100235685B1; EP0685235A1; IT1269880B; FI943295L; GR3032621T3; FI943295A0; EP0685235B1; AU6751794A; DK0685235T3; FI943295A7; DE69422980D1; HK1012567A1; ES2081782T1; AU684781B2

Description

Piliostigma thonninqu Schum, eine Pflanze, die auf dem afrikanischen Kontinent weit verbreitet ist, ist eine Leguminosenpflanze mit niedrigem Stamm, die typisch für die Savanne ist; in Tanganyka und in Rhodesien wird die Wurzelrinde dieser Pflanze in Milch gekocht und zur Behandlung von Husten verwendet; die Swahilis essen die Blätter in kleinen Mengen, um Lungenkomplikationen zu behandeln, und die Has kauen frische Blätter als Heilmittel gegen Husten. Ähnliche Verwendungen werden in vielen anderen afrikanischen Ländern beschrieben. Wieder werden in Afrika verschiedene Teile der Pflanze zur Heilung von entzündetem Zahnfleisch und zur Medikation von Wunden und verschiedenen Geschwürsbildungen verwendet.
Während experimenteller Forschungen zur Bestätigung der pharmakologischen Eigenschaften der Pflanze wurde überraschenderweise gefunden, daß die erfindungsgemäß hergestellten Extrakte eine antivirale Aktivität auf menschenpathogene Viren, die jüngst aus infizierten Personen isoliert wurden, haben.
Vom chemischen Standpunkt aus ist wenig über die Zusammensetzung der Wurzeln, Zweige und Blätter von Piliostigma thonningii bekannt. Bis zu 20% Tannin wurde aus der Rinde von Zweigen isoliert, aber die Zusammensetzung wurde nicht geklärt, während einige Flavonoide und Terpene, wie Lambertiansäure und Lambertianol in den Blättern identifiziert wurden.
Die erfindungsgemäßen Extrakte werden durch Extrahieren aller Pflanzenteile getrennt oder in einem Gemisch davon mit aliphatischen niedermolekularen Alkoholen oder Ketonen, die mit Wasser verdünnt sind, hergestellt. Die Rinden der Wurzel und des Stamms werden hauptsächlich mit wäßrigem Aceton in einer Konzentration, die von 9 : 1 bis 2 : 8, bevorzugt 6 : 4, variiert, bei Temperaturen im Bereich von 25ºC bis 60ºC, bevorzugt bei 40ºC, extrahiert. Blätter werden im Gegensatz dazu hauptsächlich mit Gemischen aus Alkoholen oder Ketonen, üblicherweise mit Aceton, in einem Lösungsmittel/Wasserverhältnis von 4 : 6 extrahiert, um die Extraktion des Chlorophylls und unerwünschter lipophiler Substanzen zu vermeiden, die sich während des Screenings als inaktiv erwiesen. Die so erhaltenen Extrakte werden, wie in den folgenden Beispielen näher erläutert wird, den folgenden Behandlungsstufen unterworfen:
a) Entfernen des Lösungsmittels durch Konzentrieren bei einer Temperatur unter 40ºC;
b) Filtration oder Zentrifugation, um die gummiartigen Rückstände unerwünschter Substanzen, die während der Entfernung des Lösungsmittels gebildet wurden, zu entfernen;
c) Extraktion des klaren wäßrigen Extrakts mit Ethylacetat, um die vollständige Extraktion der extrahierbaren Substanzen zu gewährleisten und Entfernen der organischen Extrakte;
d) Chromatographie der wäßrigen Phase über eine Säule eines Adsorptionsharzes, wie XAD-4, XAD-2, Duolit oder andere Polystyrolmatrixharze; Reelution mit niedermolekularen aliphatischen Alkoholen oder Ketonen, die mit Wasser verdünnt sind, bevorzugt mit wäßrigem Aceton, in verschiedenen Prozentsätzen, üblicherweise mit 40%igem wäßrigem Aceton;
e) Teilkonzentrieren des Eluats aus der Säule im Vakuum bei Temperaturen nicht über 60ºC;
f) Eindampfen des Konzentrats zur Trockene im Vakuum;
g) Auflösen des Rückstands in einem kleinen Volumen Methanol; und
h) Behandlung der Lösung mit einer Menge an Methylenchlorid, die ausreicht, den Wirkstoff auszufällen.
Ein reichlicher rötlicher Niederschlag wird erhalten, der in Wasser löslich ist und in allen aprotischen Lösungs mitteln unlöslich ist und antivirale Aktivität besitzt. Dieses Produkt kann als solches verwendet werden oder über eine Säule aus beispielsweise Sephadex LH 20 oder über äquivalente Matrices gemäß dem folgenden Standard fraktioniert werden; der Extrakt wird in 95% Ethanol aufgelöst und an der Matrix adsorbiert, anschließend werden mit dem gleichen Lösungsmittel die unerwünschten niedermolekularen Substanzen eluiert; die Elution wird mit Ethanol/Wasser-Gemischen, bevorzugt im Bereich von 30 bis 60%, in einem organischen Lösungsmittel oder besser mit Aceton/Wasser-Gemischen im Bereich von 29 bis 70% in einem organischen Lösungsmittel, bevorzugt von 35 bis 45%, fortgesetzt. Die Wasseralkohol- oder Acetoneluate werden in Fraktionen gewonnen, die nach Überprüfung mit Gelpermeation gemäß ähnlichen Molekulargewichten vereinigt werden und konzentriert werden, um das Lösungsmittel zu entfernen, und dann gefriergetrocknet werden. Die Fraktionen mit Molekulargewichten von 1500 bis 2500 Dalton, bevorzugt mit einem Molekulargewicht von etwa 2100 Dalton, erwiesen sich als besonders aktiv.
Alternativ betrifft die Erfindung ein Verfahren zur Herstellung von Extrakten aus Piliostigma thonningii, wobei alle Teile der Pflanze separat oder miteinander vermischt mit niedermolekularen aliphatischen Alkoholen oder Ketonen, die mit Wasser verdünnt sind, extrahiert werden, und anschließend die so erhaltenen Extrakte einer Behandlung aus den folgenden Stufen unterworfen werden:
a) Entfernen des Lösungsmittels durch Konzentrieren bei einer Temperatur unter 40ºC;
b) Filtration oder Zentrifugation, um die gummiartigen Rückstände unerwünschter Substanzen, die sich während der Entfernung des organischen Lösungsmittels gebildet haben, zu entfernen;
c) Extraktion des klaren wäßrigen Extrakts mit Ethylacetat, um die vollständige Extraktion der extrahierbaren Substanzen zu gewährleisten, und Entfernen der organischen Extrakte;
d) Extraktion der wäßrigen Lösung aus Stufe c) mit n- Butanol/Toluol-95 : 5-Gemischen, gefolgt von Konzentrierung, Behandlung mit Methylchlorid zum Erhalt eines Niederschlags.
Die antivirale Aktivität wurde nach herkömmlichen Verfahren, die in der Literatur beschrieben sind oder teilweise vom Anmelder modifiziert wurden, getestet. Beispielsweise werden Affenzellen (Zellen des afrikanischen Grünaffen (VERO), Flow Laboratories Ltd. Irvine, Schottland) in TC- 199-Medium, das 1% Glutamin enthält und mit Kälberserum versetzt ist (5% in den nichtinfizierten Kulturen und 2,5% in den infizierten Kulturen), das das zu testende Virus enthält oder nicht und in Gegenwart oder Abwesenheit der zu testenden aktiven Substanz gezüchtet.
Um die erfindungsgemäßen Extrakte zu bewerten, wurden zwei verschiedene Arten von Kontrollen durchgeführt: eine betreffend die reale antivirale Aktivität und eine bezüglich der Cytotoxizität der Substanzen, um das Aktivitäts/Toxizitätsverhältnis zu definieren. Die. VERO-Zellen wurden in einer Konzentration zu 2 · 10&supmin;&sup4; auf eine Platte geschichtet; nach 24stündiger Inkubation wurden die Zell-Monolayer mit dem ausgewählten Virus infiziert und unmittelbar danach mit skalaren Konzentrationen der Piliostigma thonningii-Derivate behandelt; 24 h später wurden sie durch ein Mikroskop bezüglich der spezifischen Aktivität bewertet.
Für die Bewertung der Cytotoxizität wurden die VERO- Zellen in einer Konzentration von 1 · 10&sup5; geschichtet; 24 h später wurden die Zellen aus dem Kulturmedium freigesetzt, das seinerseits durch ein Kulturmedium, das verschiedene Konzentrationen der zu testenden Extrakte enthielt, ersetzt wurde. Nach 48 h wurden die Zellen mit 1% Glutaraldehyd in Hanks-Lösung fixiert, die Platten wurden mit entionisiertem Wasser 15 min gewaschen und an Luft getrocknet; der an die Zellen adsorbierte Farbstoff (Kristallviolett) wurde mit einer 0,2%igen Lösung von Triton X-100 2 extrahiert und spektrophotometrisch überprüft. Die Cytotoxizität wurde leichter durch Inkubieren der Zellen, wie vorstehend angegeben, in einer Dichte von 2 · 10&sup4; Zellen pro Kavität getestet; nach 24 h wurde das Medium entfernt, und die Zellen wurden mit den Testsubstanzen getestet; nach 48stündiger Inkubation wurden die Zellen mit 0,5 mCi/Platte ³H-Thymidin versetzt. Die Zellen wurden weitere 16 h unter CO&sub2;-Atmosphäre inkubiert, anschließend wurde quantitativ der Einbau mit einem Szintillationszähler gemessen. So wurde die CC&sub5;&sub0; (Konzentration, die um 50% die Thymidinaufnahme verringerte, verglichen mit den Kontrollen) bewertet.
Das Screening der Piliostiama thonningii-Derivate erlaubte die Identifikation von Substanzen mit antiviraler Aktivität gegen menschliche Herpesviren (Herpes Simplex 1 und 2), Cytomegalivirus und HSV-1 und HSV-2; ferner erwiesen sich die Extrakte als aktiv gegenüber verschiedenen Stämmen von Influenza- und syncytischen Viren. Beispielsweise wurde bei Herpesviren unter Verwendung des noch unfraktionierten Extrakts (Beispiel I) in einer Konzentration von 15,6 ug/ml eine 100%ige Verringerung der Bildung der Plaques gegenüber den Kontrollen und eine Cytotoxizität von 62,5 ug/ml erhalten; das Aktivitäts/Cytotoxizitätsverhältnis spricht deutlich für die Aktivität, wobei das Produkt einen wertvollen therapeutischen Index besitzt. Der EC&sub5;&sub0;-Wert des gleichen Produkts bezüglich der Replikation der HSV-1- und HSV-2-Viren betrug 22,4 bzw. 36,2 ug/ml. Die Fraktionen dieses Extrakts sowie die, die in den Beispielen III und IV berichtet sind, weisen eine spezifische Aktivität auf, die höher ist als die des Ausgangsextrakts, wobei ferner das Aktivitäts/Toxizitätsverhältnis positiv erhöht ist. Die EC50- Werte gegenüber Herpesviren waren beispielsweise 5,1 bzw. 6,4 ug/ml mit einer Cytotoxizität von mehr als 100 ug/ml. An dem Parainfluenzavirus erwiesen sich die erfindungsgemäßen Extrakte in allen Tests als überraschend stark aktiv, was anzeigt, daß sie zur Behandlung der überaus verschiedenen Influenzaformen wertvoll sind.
Soweit als der Wirkmechanismus oder die bestimmte Identifikation der Wirkstoffe betroffen ist, ist bis jetzt noch wenig bekannt. Die Wirkstoffe der erfindungsgemäßen Extrakte sind teilweise polyphenolischer Natur und sind wahrscheinlich dahingehend aktiv (HIV-Virus), daß sie die Expression des Antigens in Kultur verringern und die Syncytien verringern. In dieser Hinsicht erwiesen sich die Extrakte als besonders aktiv an den verschiedenen verwendeten Zellmodellen, wenn das Produkt der Kultur gleichzeitig mit dem Eintritt des Virus und nicht nach stattgefundenem Eintritt zugesetzt wurde. Aus diesen Daten kann angenommen werden, daß der Extrakt oder dessen Fraktionen auf die ersten Phasen der Infektion einwirken, obwohl nicht ausgeschlossen werden kann, daß ihre Aktivität die Enzymwirkung der Umkehrtranskriptase und/oder der Protease hemmen könnte.
Die erfindungsgemäßen Extrakte sind beim Menschen in Dosen von 10 mg bis 15 g pro Tag in Abhängigkeit von dem Verabreichungsweg sowie der Schwere der zu behandelnden Krankheit aktiv. Zur Behandlung von Herpes können die Extrakte und ihre Fraktionen in Form von Salben oder Formulierungen für die topische Verwendung, wie für diese Art von Therapie benötigt wird, oder auf oralen oder intravenösen Wegen verabreicht werden; für alle anderen Typen von Viren werden die Extrakte hauptsächlich auf oralen, intravenösen oder Aerosolwegen nur in Wasser aufgelöst oder von herkömmlichen Exzipientien getragen verabreicht.
Gemäß einem weiteren Gesichtspunkt der Erfindung werden die oralen Formulierungen der erfindungsgemäßen Extrakte sowohl in natürlichen als auch synthetischen Phospholipiden vorgenommen. Bevorzugt variiert das Phospholipidextrakt- (oder extrahierte Fraktionen)-Verhältnis von 1 zu 3 Gewichtsteilen; die Gemische dieser Extrakte mit Phospholipiden werden üblicherweise/bevorzugt in Weichgelatinekapseln in Gegenwart von Trägern, wie Migliol und dgl., oder in Hartgelatinekapseln oder in Tabletten verabreicht.
Die erfindungsgemäßen Extrakte können für die akute oder chronische Behandlung in Abhängigkeit von der Pathologie verwendet werden; sowohl der Extrakt als auch dessen Fraktionen verursachen keine besonders bemerkenswerten toxischen Wirkungen bis zu 5 g/kg bei der Ratte und bei der Maus, bei oraler Verabreichung, wohingegen sie bis zu 500 mg/kg bei intravenöser Verabreichung toleriert werden können.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung, ohne sie zu beschränken.

Beispiel I - Herstellung des gesamten gereinigten Extrakts aus Wurzelrinde von Piliostigma thonningii.

5 kg fein vermahlene Wurzelrinde von Piliostigma thonningii werden bei 40ºC mit 10 Volumina eines 60%igen ((Gewicht/Gewicht) Aceton/Wasser-Gemisches extrahiert; die Extraktion wird unter Rühren durchgeführt und wird dreimal wiederholt. Die wäßrigen Acetonextrakte werden konzentriert, um das Aceton vollständig zu beseitigen; während der Konzentrierung fallen wasserunlösliche Substanzen aus und werden sorgfältig durch Zentrifugation entfernt. Nach der Extraktion mit Ethylacetat wird die klare wäßrige Lösung sehr langsam durch eine Säule, die 5 kg XAD4-Adsorptionsharz enthält, geleitet; nach Durchleiten des Extrakts wird die Elution der Säule mit entmineralisiertem Wasser bis zu einem farblosen Wasser oder sonst zu einem Rückstand von geringer als 0,001% fortgesetzt. Anschließend wird das Harz mit 40%igem wäßrigem Aceton eluiert. Die Elution wird bis zu einer farblosen Flüssigkeit fortgesetzt. Das Eluat aus der Säule wird auf 5 l bei einer Temperatur nicht über 40ºC konzentriert; das Konzentrat wird filtriert, um alle unlöslichen Rückstände zu entfernen und sprühgetrocknet, um 250 g Trockenextrakt zu erhalten, der als solcher verwendet werden kann oder gemäß Beispiel II erneut gereinigt werden kann. Dieser Extrakt besitzt einen E1%-Wert von 690 bei 260 nm in MeOH. Das Produkt ist in Wasser, Alkohol, Aceton frei löslich und in chlorierten Lösungsmitteln und Ethern unlöslich. Es kann zur Behandlung von Erkrankungen viralen Ursprungs verwendet werden.

Beispiel II - Reinigung des Extrakts aus Piliostigma thonningii.

200 g des Extrakts aus Piliostigma thonningii, hergestellt gemäß Beispiel I, werden in 1 l wasserfreiem Aceton aufgelöst und nach vollendeter Auflösung unter starkem Rühren in 5 l Methylenchlorid gegossen; ein reichliches Präzipitat bildet sich, das durch Zentrifugation gewonnen wird, erneut mit Methylenchlorid bis zu farblosen Mutterlaugen gewaschen wird und schließlich im Vakuum bei 40ºC getrocknet wird, bis das Lösungsmittel vollständig entfernt ist. 170 g einer rötlichen Verbindung werden erhalten, die zur Behandlung von viralen Erkrankungen verwendet werden können. Die SEC-Chromatographie des Extrakts zeigt das in der beigefügten Figur dargestellte Profil.

Beispiel III - Fraktionierung des Extrakts aus Wurzelrinde von Piliostigma thonningii.

20 g des gemäß der Beispiele I oder II hergestellten Extrakts werden in 500 ml 95%igem Ethanol aufgelöst und über eine Säule, die 350 g Sephadex LH20 enthält und die zuvor mit dem gleichen Lösungsmittel äquilibiert worden war, chromatographiert. Nach Adsorption der Lösung wird die Säule mit Ethanol bis zur vollständigen Extraktion der löslichen Substanzen eluiert. Das ethanolische Eluat wird verworfen, wo hingegen die Säule anschließend mit 40%igem Aceton eluiert wird. Die wäßrige Acetonlösung wird im Vakuum auf 200 ml eingeengt und das Konzentrat wird gefriergetrocknet. 6 g eines ziegelroten Produkts werden erhalten, das ein durchschnittliches Molekulargewicht von 2018 Dalton besitzt, das ohne weitere Reinigungen als antivirales Mittel verwendet werden kann.

Beispiel IV - Herstellung eines Extrakts einer Stammrinde von Piliostigma thonningii.

5 g fein vermahlene Stammrinde von Piliostiama thonningii werden gemäß dem Verfahren von Beispiel I extrahiert; das wäßrige Konzentrat wird nach Filtration der unlöslichen Materialien mit 20 l Ethylacetat extrahiert; die organische Phase wird verworfen, wohingegen die wäßrige mit einem 95 : 5- n-Butanol/Toluol-Gemisch vollständig an den mit diesem Lösungsmittel extrahierbaren Substanzen extrahiert wird. Die vereinigten Extrakte werden über Na&sub2;SO&sub4; getrocknet und im Vakuum auf 1 l eingeengt. Das Konzentrat wird in 5 l Methylenchlorid unter starkem Rühren gegossen. Der gebildete Niederschlag wird gründlich mit Methylenchlorid gewaschen und im Vakuum bei 40ºC getrocknet. 150 g des Produkts mit antiviraler Aktivität werden erhalten. Dieses Produkt kann weiter gemäß dem Verfahren von Beispiel III gereinigt werden.

Beispiel V - Formulierung, die einen Extrakt von Piliostigma thonningii enthält, zur topischen Verwendung.

20 g gereinigter Extrakt von Piliostigma thonningii, hergestellt gemäß Beispiel III, werden mit 40 g Sojaphosphatidylcholin vermischt und das Ganze wird in 600 ml eines 9 : 1-Methylenchlorid/Methanol-Gemisches aufgelöst; wenn die beiden Produkte vollständig aufgelöst sind, wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen. Der so erhaltene Feststoff wird unter starkem Rühren in 1200 ml entionisiertem Wasser mikrodispergiert. Die wäßrige Mikrodispersion wird durch Zu gabe von 1% Carboxymethylcellulose geliert. Dieses wäßrige Gel wird zur topischen Behandlung von Herpeserkrankungen verwendet.

Beispiel VI - Herstellung von Weichgelatinekapseln, die 150 mg einer gereinigten Fraktion von Piliostigma thonningii enthalten.

20 g gereinigter Extrakt von Piliostigma thonningii, hergestellt gemäß Beispiel III, werden mit 40 g Sojaphosphatidylcholin vermischt und das Ganze wird in 600 ml eines 9 : 1-Methylenchlorid/Methanol-Gemisches aufgelöst; wenn die zwei Produkte vollständig aufgelöst sind, wird das Lösungsmittel im Vakuum abgezogen. Der so erhaltene Feststoff wird in 180 ml Migliol suspendiert und in Weichgelatinekapseln in einer Menge von 450 mg Extrakt/Phospholipidgemisch gefüllt.

Claims

1. Verfahren zur Herstellung von Extrakten aus Piliostigma thonningii, wobei man alle Teile der Pflanze separat oder miteinander vermischt mit aliphatischen Alkoholen oder Ketonen mit niedrigem Molekulargewicht, die mit Wasser verdünnt sind, extrahiert und anschließend die so erhaltenen Extrakte einer Behandlung aus den folgenden Stufen unterwirft:

a) Entfernung des Lösungsmittels durch Konzentrieren bei einer Temperatur unter 40ºC;

b) Filtration oder Zentrifugation, um die gummiartigen Rückstände aus unerwünschten Substanzen, die sich während der Entfernung des organischen Lösungsmittels gebildet haben, zu entfernen;

c) Extraktion des klaren wäßrigen Extrakts mit Ethylacetat, um die extrahierbaren Substanzen vollständig zu extrahieren, und Entfernung der organischen Extrakte;

d) Chromatographie der wäßrigen Phase über eine Absorptions-Harzsäule, Re-Elution mit aliphatischen Alkoholen oder Ketonen mit niedrigem Molekulargewicht, die mit Wasser verdünnt sind,

e) Teilkonzentrieren des Eluats aus der Säule im Vakuum und bei Temperaturen nicht über 60ºC;

f) Eindampfen des Konzentrats zur Trockene im Vakuum;

g) Auflösen des Rückstands in einem kleinen Methanolvolumen; und

h) Behandlung der Lösung mit einer Menge an Methylenchlorid, die ausreicht, den Wirkstoff auszufällen, bestehend aus einem rötlichen Präzipitat, das in Wasser löslich und in aprotischen Lösungsmitteln unlöslich ist, eine antivi rale Aktivität besitzt und teilweise polyphenolischer Natur ist.

2. Verfahren zur Herstellung von Extrakten aus Piliostigma thonningii, wobei man alle Teile der Pflanze separat oder miteinander vermischt mit aliphatischen Alkoholen oder Ketonen mit niedrigem Molekulargewicht, die mit Wasser verdünnt sind, extrahiert und anschließend die so erhaltenen Extrakte einer Behandlung aus den folgenden Stufen unterwirft:

d) Extraktion der wäßrigen Lösung aus Stufe c) mit n- Butanol/Toluol 95 : 5-Gemischen, gefolgt von einer Konzentrierung, Behandlung mit Methylenchlorid, um ein Präzipitat zu erhalten.

3. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Re-Elution der Stufe d) mit 40%igem wäßrigem Aceton durchgeführt wird.

4. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Extraktion der Stufe c) mit Ethylacetat durchgeführt wird.

5. Verfahren nach Anspruch 1, wobei die Konzentrierung von Stufe e) bei einer Temperatur nicht über 60ºC durchgeführt wird.

6. Extrakte aus Piliostigma thonningii, erhältlich gemäß den Verfahren nach den Ansprüchen 1 bis 5.

7. Verfahren zur Herstellung von Fraktionen des Extrakts, der nach dem Verfahren von Anspruch 1 bis 5 erhältlich ist, wobei der Extrakt weiter über eine Säule gemäß den folgenden Stufen fraktioniert wird:

i) Auflösung des Extrakts in 95%igem Ethanol;

l) Adsorption an eine Matrix;

m) Elution unerwünschter Substanzen mit niedrigem Molekulargewicht mit 95%igem Ethanol;

n) anschließende Elution mit Ethanol/Wasser- oder Aceton/Wasser-Gemischen;

o) Vereinen der Fraktionen in Abhängigkeit von ihrem Molekulargewicht, Konzentrieren und Gefriertrocknen.

8. Verfahren nach Anspruch 7, wobei die Matrix von Stufe l) Sephadex-LH-20 ist.

9. Verfahren nach Anspruch 7, wobei in Stufe n) die Ethanol/Wasser-Gemische in Konzentrationen von 30 bis 60% in einem organischen Lösungsmittel und die Aceton/Wasser- Gemische in Konzentrationen von 29 bis 70%, bevorzugt von 35 bis 45%, in einem organischen Lösungsmittel verwendet werden.

10. Fraktionen von Extrakten, erhältlich gemäß einem Verfahren nach den Ansprüchen 7 bis 9 mit Molekulargewichten im Bereich von 1500 bis 2500 Dalton.

11. Pharmazeutische Präparate zur Behandlung von Herpes-Erkrankungen, erworbener Immunschwäche im Zusammenhang mit dem HIV-Virus, Influenza und Erkältung, enthaltend als Wirkstoff die Extrakte nach Anspruch 6.

12. Pharmazeutische Präparate zur Behandlung von Herpes-Erkrankungen, erworbener Immunschwäche im Zusammenhang mit dem HIV-Virus, Influenza und Erkältung, enthaltend als Wirkstoff die Fraktionen der Extrakte nach Anspruch 10.

13. Pharmazeutische Präparate nach den Ansprüchen 11 und 12, enthaltend sowohl natürliche als auch synthetische Phospholipide als Träger.

14. Pharmazeutische Präparate nach Anspruch 13, wobei das Verhältnis Phospholipid zu Wirkstoff 1 zu 3 Gew.-Teile beträgt.

15. Verwendung der Extrakte nach Anspruch 6 zur Herstellung von Medikamenten mit antiviraler Aktivität.

16. Verwendung von Fraktionen nach Anspruch 10 zur Herstellung von Medikamenten mit antiviraler Aktivität.