DK145612B - Diagnostisk indretning til brug ved identifikation af mikroorganismer - Google Patents

Description

(19) DANMARK

f\Ra/

(12) FREMLÆGGELSESSKRIFT od 145612 B

Dl REKTORATET FOR PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET

(21) Ansøgning nr. 3955/77 (51) IntCI.3 C 12 M 1/20 (22) Indleveringsdag 6. s ep. 1977 (24) Løbedag 6. sep. 1977 (41) Aim. tilgængelig 8. mar. 1978 (44) Fremlagt 27. dec. 1982 (86) International ansøgning nr.

(86) International indleveringsdag - (85) Videreførelsesdag (62) Stamansøgning nr. -

(30) Prioritet 7. sep. 1976, 721021, US

(71) Ansøger WARNER-LAMBERT COMPANY, Morris Plains, US.

(72) Opfinder Walter Earl Jacobson, US: Donalc Paul Kronish, US:

Doris Barbara Taylor, US: William Donald Young, US.

(74) Fuldmægtig Ingeniørfirmaet Hofraan-Bang & Bout ard.

(54) Diagnostisk indretning til brug ved identifikation af mikroor= ganismer.

Opfindelsen angår en diagnostisk indretning af den i krav l's indledning angivne art til brug ved identifikation af mikroorganismer.

Bakteriesygdomme diagnosticeres og behandles ved isolering og identifikation af de forårsagende mikroorganismer. Konventionelt bør medicinsk behandling først påbegyndes efter bestemmelse af det ætio-logiske agens. Denne bestemmelse baseres hovedsageligt pa klinisk

O

O

d" έ 3 1456 12 2 information, men bekræftende laboratoriedata bør altid søges for at hjælpe med til og muliggøre passende behandling af infektionssygdommen. Kliniske prøvninger til bakterieidentifikation afhænger af sammenligningen af et antal fysiologiske, morfologiske og positive- og/eller negative biokemiske reaktioner for det mistænkte ætiologiske agens og sammenligning af disse med reaktionerne af kendte arter. For at opnå dette formål er det nødvendigt at opnå prøvekulturer af organismen fra sådanne kilder som spyt, blod, urin o.s.v. og underkaste disse prøver identifikationsprocedurer.

Midlerne til identifikation er sammensatte og tidkrævende og derfor åbne for mulige fejl og forkert identifikation. Endvidere medfører den tidkrævende natur af de mange prøvninger, som må gennemføres, en omkostningsbyrde på laborotoriedriften og overdrevent beslag på uddannet personale i lange tidsrum.

Forskellige fremgangsmåder og apparater er blevet anvendt i et forsøg på at lette identifikationen af mikroorganismer. Disse har hovedsageligt været rettet mod at fremskynde den besværlige fremgangsmåde og gøre identifikationen mere positiv. En sådan indretning er beskrevet i US patentskrift nr. 3 784 448, som angiver et separat opdelt glas indeholdende de i forvejen fremstillede dyrkningsmedier til differentiel identifikation af mikroorganismer, især af familierne Enterobacteriaceae. Ved anvendelse af denne indretning trækkes et stift stavlignende organ indeholdende en kultur af organismen gennem glasset, hvorved det poder hvert af kamrene.

Denne kendte indretning giver kun mulighed for anvendelse af et begrænset antal prøvninger i enheden, og dens anvendelse indskrænkes såvel af dens pris som af opbevarings- og stabilitetsproblemer.

Et af de hidtil mest succesfulde fremskridt inden for dette område af klinisk laboratorieprøvning indebærer anvendelsen af et sugende papir eller andet absorberende substrat imprægneret med reagenser, som sporer tilstedeværelsen af specifikke enzymer eller metaboliske slutprodukter, som er karakteristiske for visse mikroorganismer. Disse reagenser inkluderer substrat, som påvirkes af et specifikt bakterieenzym, og et påvisningssystem, som reagerer med det metaboliske slutprodukt til opnåelse af en let identifi- 145612 3 cerbar farveændring. US patent skrifterne nr. 3 122 480, 3 341 427, 3 359 180, 3 378 346, 3 597 321, 3 616 258, 3 645 853 og 3 649 461 angiver fremstillingen og sammensætningen af de forskellige substrat- og påvisningsreagenser såvel som deres anvendelse til identifikation af disse organismer.

En typisk anvendelse af disse former for teknik omfatter de følgende materialer og fremgangsmådetrin: 1. Papirstrimler indeholdende egnede substrat- og påvisningsreagenser fremstilles til et antal specifikke kemiske prøvninger, f.eks. Voges-Proskauer, nitratreduktion, phenylalanindeaminase, urease, indol, lysindecarboxylase o.s.v.

2. Prøveglas svarende til antallet og rækkef ølgen af de prøvninger, som skal gennemføres, anbringes i et stativ.

3. Bakteriekolonier dyrket på eller i et egnet næringsmedium, f.eks. et agarmedium, overføres til og suspenderes i et glas indeholdende 0,3 ml saltvand for hver prøvning, som anvendes. Den resulterende suspension skal have en uklarhed, som er tilnærmelsesvis lig med en Kirby-Baver-standard.

4. Ca. 0,3 ml af suspensionen pipetteres i hvert af prøveglassene.

5. Prøvestrimler svarende til den specifikke prøvning indsættes i hvert af prøveglassene og inkuberes heri i omkring fire timer ved en temperatur på 35 - 37 °c.

6. Prøvningens positive eller negative indikation aflæses derpå af farven på substratzonen, hvor dette er påregnet, som f. eks. ved lysindecarboxylase-prøvningen, eller glasset tippes, således at den inkuberede suspension befugter påvisningszonen, hvor igen farveændringen eller manglen derpå giver en positiv eller negativ indikation, som f. eks. ved indolprøvningen.

Denne prøvningsprocedure har vist sig yderst velegnet, idet den giver lige så nøjagtige resultater som standardlaboratorieprocedurer på meget kortere tid. Til hjælp ved bestemmelsen af den nøjagtige involverede organisme på basis af de sandsynligheder, som er be- 145612 4 stemt ved hver af de specifikke prøvninger, beskriver US patentskrift nr. 3 957 586 en type identifikationssystem, som giver hurtig og nøjagtig bestemmelse af det forårsagende agens. Dette system anvender et antal prøvningsdata-hulkort, som når de anbringes i stak, giver en indikation med hensyn til identifikationen af den involverede organisme efter de kendte principper og Bool's logik. En anden vej er at anvende et datamaskineprogram baseret på egentlige talsystemer til at give identifikationssandsynligheden.

Den foreliggende opfindelse er rettet imod yderligere at forbedre og lette den ovenstående prøvningsprocedure. Selv om den hurtige identifikationsprocedure ved prøvning med reagensimprægneret strimmel i høj grad har forkortet den nødvendige tid og forøget nøjagtigheden af organismens identifikation, har det vist sig, at denne prøvning kan forbedres yderligere ved anvendelsen af en indretning, som afskaffer behovet for et stort antal prøveglas såvel som den sammenlagte tid og arbejde, som kræves til deres håndtering, rensning og præparering.

Fra DE fremlæggelsesskrift nr. 1 220 083 kendes en indretning til prøvning af biokemiske reaktioner på bakterier, hvilken indretning indeholder et kammer, der er sammensat af flere langs en fælles midterlinie liggende delkamre, hvor skillevæggene mellem delkamrene er udformet som overløb, og overløbsfladernes hældning til- hhv. aftager i den fælles midterlinies retning. Ved drejning af kammeret om en akse vinkelret på delkamrenes midterlinie flyder indholdet af det øverste delkammer først ind i nabokammeret, og ved yderligere drejning flyder det samlede indhold af de to kamre ind i næstfølgende delkammer osv. Herved er det muligt at blande en bakteriekultur, indført sammen med en substratopløsning i det første delkammer, med forskellige, hver for sig opbevarede reagenser i en ønsket rækkefølge. Imidlertid kræver anvendelsen af denne indretning flere forholdsvis små drejninger af indretningen i samme retning, så der er stor risiko for at hælde for lidt, så ikke al væsken kommer med over i det følgende delkammer, eller for meget, så en del af væsken løber videre over i det næstfølgende delkammer; og desuden er det vanskeligt at opretholde en bestemt stilling i et længere tidsrum.

145612 5

Opfindelsens formål er at angive en diagnostisk indretning til hurtig og nøjagtig identifikation af mikroorganismer, hvilken indretning har form af en enhed til engangsbrug, som indeholder substrat- og påvisningsreagenser til identifikation af mikroorganismer og hvori der let og hurtigt kan gennemføres en række biokemiske prøvninger ved podning med en prøve, drejning af indretningen til en veldefineret første og anden rumlig orientering og visuel bedømmelse af prøvningsresultaterne.

Dette opnås med den diagnostiske indretning ifølge opfindelsen, som er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del anførte.

Indretningen ifølge opfindelsen tilvejebringer et alment U-formet arrangement af de forskellige kamre, som er indbyrdes forbundet af strømningskanalerne. Væskeoverførslen fra det første hul til det andet hul sker, når rammen drejes fra sin normale vandrette stilling omkring en første akse, som løber parallelt med rammens tværgående kant, og væskeoverførslen fra det andet hul til det tredie hul sker, når rammen derefter drejes omkring en anden akse, som er vinkelret på rammens øvre flade. Normalt drejes rammen hver gang en vinkel på omkring 90° for at frembringe væskeoverførsel fra et hul til et andet. Dette arrangement gør det muligt at lede prøvesuspensionen let og nøjagtigt fra et reagenshul til et andet uden risiko for at skyde forbi et hul og/eller træde for tidligt ind i et andet, fordi indretningen hældes for hurtigt eller i en forkert vinkel.

I en foretrukken udførelsesform omfatter indretningen ifølge opfindelsen en ramme til engangsbrug, hvori kamrene og de forbindende passager er dannet ud i et. Denne ramme indeholder et første kammer i form af et hul med åben top. Det andet kammer, som også er et hul med åben top, er forbundet til det første hul ved hjælp af en første passage bestående af en kanal.

I bunden af kanalen er udformet en rampe, hvis hældning er således, at den forhindrer passage af væske fra det første hul til det andet hul, når indretningen er i vandret plan. I det andet 145612 6 hul kan anbringes et substratreagens, som reagerer med kulturen under et podningstrin til dannelse af typiske metaboliske slutprodukter for den omhandlede prøvning. Efter inkubation af kulturen i det andet hul sendes suspensionen igennem en anden passage eller kanal til et tredie kammer i form at et hul med åben top, hvori suspensionen frembringer en bestemt farvereaktion i et påvisningsreagens. Stillingen af det tredie hul i forhold til det andet udvælges således, at der kun skabes væskeforbindelse i den anden kanal, når indretningen indtager en bestemt rumlig orientering. Det tredie hul kan være forbundet til et fjerde kammer til optagelse af overskud af prøvningssuspension, og et udluftningsorgan sørger for undslippel-se af luft, når podematerialet overføres fra det første hul til det andet hul.

I en særlig udførelsesform findes hullernes og de forbindende kanalers bund i parallele planer, og hullernes akser er i det væsentlige vinkelret på rammens plan. Både hullerne og kanalerne er åbne til visuel undersøgelse, idet åbningerne er i samme plan som rammens øvre overflade. Et klart gennemsigtigt organ anvendes til at dække den første kanal og det andet, tredie og fjerde kammer såvel som deres forbindende kanaler og forhindrer tab af indhold. Det første hul eller kammer holdes i åben tilstand for at tillade podning med prøvesuspensionen. Et hængslet låg er anbragt langs den ene kant af rammen til lukning af det åbne podningskammer, når det klappes henover rammens øvre flade. Lågets indre overflade kan være forsynet med et sugende eller absorberende materiale for at forhindre udsivning af prøvesuspensionen, når det er i lukket tilstand. Flere diagnostiske indretninger kan være inkorporeret i en enkelt bærestruktur for at tillade gennemførelsen af flere specifikke biokemiske prøvninger.

Ved anvendelse af indretningen ifølge opfindelsen til identifikation af bestemte mikroorganismer indpodes en prøvesuspension dannet af en bakteriekultur fra visse legemsvæsker ellerprøver i det første kammer. Prøvekammeret bringes til at indtage en bestemt rumlig orientering, således at væskesuspensionen passerer igennem den første kanal til et andet kammer, hvori den om- 7 1456 12 sættes med et udvalgt substrat udformet til at give en kendt reaktion med den involverede organisme. Efter at suspensionen er inkuberet med reagenset i et fonid fastsat tidsrum anbringes det andet kammer i en anden rumlig orientering, som får væsken i kammeret til at stå i forbindelse med det tredie kammer indeholdende et påvisningsreagens. Påvisningsreagensets farvereaktion indicerer en positiv eller negativ prøvning og giver derved information om organismens identitet.

Opfindelsen skal i det følgende beskrives nærmere med henvisning til tegningen, som viser eksempler på udførelsesformer af opfindelsen, og på hvilken der er anvendt standard tegnesymboler og overensstemmende nummerering i alle de forskellige figurer til lettelse af forståelsen. På tegningen er fig. 1 et perspektivisk delbillede af en diagnostisk indretning ifølge opfindelsen, fig. 2 et tværsnit af en del af den diagnostiske indretning i fig.

1 langs linien 2-2, fig. 3 et tværsnit af den diagnostiske indretning i fig. 1 langs linien 3-3, fig. 4 et perspektivisk skematisk delbillede af den diagnostiske indretning i fig. 1 i en bestemt orientering, og fig. 5 et perspektivisk skematisk delbillede af den diagnostiske indretning i fig. 1 i en anden rimlig orientering.

I fig. 1 er der vist en diagnostisk indretning med flere på tværs anbragte indbyrdes forbundne kamre og huller til brug ved i-dentifikation af mikroorganismer. I den øvre flade 42 af en ram-.; me 10 er dannet et første kammer eller hul 11, hvori der kan pipetteres en prøvesuspension indeholdende en bakteriekultur. Det første hul 11 er forbundet med et andet kammer eller hul 13 igennem en første passage 12. Det andet hul er forbundet med et tredie kammer 8 145612 eller hul 15 igennem en anden passage eller kanal 14, og det tredie hul er forbundet med et fjerde kammer 17 igennem en tredie passage eller kanal 16. En udluftningskanal 18 står i forbindelse med det fjerde kammer 17 for at give udluftning· under indretningens brug.

I fig. 2 og 3 ses, at hullet 11 består af et kammer med åben top udformet som en fordybning i overfladen 42. Hullet 11 er i det væsentlige cylindrisk med en sidevæg 21 og en bund 23, som er parallel med overfladen 42. Et ringformet organ, som er dannet ud i et med bunden 23, danner en skulder 22 og en indre cylindrisk del med snævrere diameter. Et segment af væggen 21 åbner sig ud i og står i forbindelse med kanalen 12. Segmentet omfatter en bue på omkring 30°, og væggene 25 i kanalen 12 går glat over i væggen 21. Bunden 26 af kanalen 12 er i det væsentlige parallel med bunden 23, men i et andet plan, idet overgangen mellem bunden 23's plan og bunden 26's plan dannes af en stigende rampe 24, som forhindrer passage af prøvesuspensionen fra hullet 11 til hullet 13.

Kanalen 12 strækker sig radialt fra aksen af hullet 11 og parallelt med kanten eller siden 44. Ved dens fjerneste ende drejer den på tværs for at forbindes med hullet 13, hvis akse er forskudt i tværretningen og excentrisk i forhold til aksen af hullet 11. Hullet 13 dannes af en cylindrisk væg 29, som er vinkelret på bunden 28, som igen er i det væsentlige parallel med bunden 26 og i det væsentlige i samme plan som bunden 23. Bunden 26's plan går over i niveauet eller planet for bunden 28 via en skarp cylindrisk vægstruktur 27, som danner en del af væggén 29. Ribber 30 i aksens retning, anbragt indvendig på væggene 29 og 27, virker som klemorganer til at fastholde en substratskive, når den anbringes deri.

Den anden kanal 14 skærer hullet 13's væg 29 excentrisk og strækker sig i det væsentlige parallelt med kanalen 12. Kanalen 14 har en bund 32 i samme plan som bunden 28 og har lodrette sidevægge 31a og 31¾. Det tredie kammer eller hul 15 dannes af en cylindrisk væg 33 og en derpå vinkelret bund 34, som er i samme plan som bunden 28. Væggen 33’s radius er i det væsentlige lig med radius af væggen 29, og på væggen strækker sig lodrette ribber 35.

Ribberne 35 strækker sig ikke i hele højden af væggen 33, men ender 9 145612 i skuldre 35a i et mellemliggende niveau. Skuldrene 35a, hvoraf der er anbragt tre rundt om på væggen 33, danner et sæde, hvorpå påvisningsreagenset anbringes, således at den hævede stilling giver bedre synliggørelse af en farveændring ved fuldførelsen af inkubationsperioden. Andre ribber 33a medvirker til at holde substratskiven i en ønsket stilling. Hullet 15's akse og hullet 13’s akse er i et plan parallelt med kanten 44. Kanalen 14’s væg 31b er tangentiel til væggene 29 og 33, og væggen 31a skærer cylindervæggene 29 og 33 i planet indeholdende hullernes akser.

' t

Den tredie kanal 16 har parallelle vægge 36a og 36b vinkelret på bunden 37. Planet indeholdende bunden 37 er over bunden 34 og i det væsentlige i samme plan som ribberne 35’s skuldre 35a. Derfor må dybden af prøvesuspensionen overskride niveauet for bunden 37 og må passere over påvisningsreagensskiven, før væsken får lov at passere igennem kanalen 16. Væggene 36a og 36b er i det væsentlige parallele med kanalen 12's vægge 25, og væggen 36b er i det samme plan som væggen 31a. Væggen 36a er tangentiel til den cylindriske væg 33.

Kanalen 16 står i forbindelse med kammeret 17, som består en cylindrisk væg 38 og en derpå vinkelret bund 39, som er i samme plan som bunden 34. Udluftningsorganet 18 består af en kanal med lodrette vægge 40 og en derpå vinkelret bund 41. Bunden 41 er parallel med overfladen 42 og gennemskærer kammeret 17's væg 38. Kanalen 18 muliggør undslippelse af eventuelle flygtige stoffer frembragt af reagenserne og indesluttet luft fra indførelsen af prøvesuspensionen.

Alle indretningens huller og kanaler er åbne til overfladen 42. Kanalerne 12, 14 og 16 og hullerne 13, 15 og 17 skal dækkes af en transparent klæbende film 43, som er uigennemtrængelig for luft og fugtighed, men tillader visuel undersøgelse af det indre. Den transparente film 43 dækker kun en del af udluftningsorganet 18 og tillader derfor undslippelsen af flygtige stoffer gennem deri ikke overdækkede del deraf. Kammeret 11 forbliver udækket og åbent for at tillade podning af kammeret med prøvekulturen eller- suspensionen. I den foretrukne udførelsesform af opfindelsen er flere rækker prøvekamre og kanaler anbragt parallelt, således at der kan gennemføres flere forskellige prøvninger samtidig tander anvendelse U5612 10 af en enkelt diagnostisk indretning. Rammen og prøvekamrene kan være støbt ud i et af polystyren med høj slagstyrke eller af et andet egnet plastmateriale. Et hængslet låg 19 er anbragt langs en bagkant af rammen og kan svinges omkring en akse 20 til lukning af hullerne 11, når låget 19 klappes ned mod overfladen 42.

Låget 19's indre overflade kan være dækket med et sugende eller andet absorberende materiale til optagelse af overskud af prøvesuspension, i lukket tilstand. Indersiden af låget kan også indeholde egnede kendetegn til identifikation af prøvninger, som skal gennemføres i hvert på hinanden følgende kammer.

Rammen 10 er alment udforpnet med afrundede hjørner og uden skarpe kanter. Dette træk muliggør opbevaring af indretningen i lufttæt forseglede poser uden fare for gennembrud, som ville føre til ødelæggelse af funktionsevnen på grund af tilstedeværelse af luft og fugtighed. Indretningen kan også emballeres med tørringsmidler for at undgå beskadigelse på grund af fugtighed.

I fig. 4 og 5 skildres en typisk brug af en diagnostisk indretning. Med indretningen i et hovedsageligt vandret plan som afbildet i fig. 1 kan hullet .11 podes med prøve suspens i on af en kultur dannet ud fra den mistænkte prøve. Efter podningen drejes indretningen omkring en akse parallel med kanten 45, så den indtager en i hovedsagen 90° lodret forskudt stilling. I denne stilling bringes podematerialet til at overskride rampen 24 og passerer igennem kanalen 12 ind i hullet 13. I hullet 13 er anbragt en skive 46 dannet af sugende papir indeholdende et substratreagens og fastholdt i stillingen af ribberne 30. F. eks. kan der fremstilles en imprægneret papirstrimmel som angivet i US patentskrift nr. 3 645 853, og en skive fremstillet deraf kan anvendes til at gennemføre en nitratreduktionsprøvning. Med skivesubstratet i kontakt med det flydende podningsmateriale inkuberes indretningen i den angivne rumlige orientering i et tidsrum på omkring 4 timer ved en temperatur på 35-37°C. Yed en positiv prøvning har enzymet nitratreduktase, produceret i 100% af kulturer tilhørende familien Enterobacteriaceae og af visse andre bakterier, den virkning at reducere det i skivesubstratet indeholdte nitrat. Efter inkubationsperioden drejes indretningen omkring en akse vinkelret 11 145612 på overfladen 42 omkring 90° som vist i fig. 5. Indretningen bevæges omkring denne stilling for at få den reagerede prøvesuspension i kontakt med indikatorskiven 47 anbragt i det tredie kammer 15. Hvis nitratet er blevet reduceret til nitrit, påvises nitri-tet ved en reaktion med sulfanilsyre og et a-naphthylaminderivat på påvisningsskiven, der producerer et rødt slutprodukt ved en positiv indikation. Overskuddet af prøvesuspensionen kan undslippe ind i kammeret 17, og flygtige stoffer kan undslippe gennem udluftningskanalen 18.

Ved en foreslået anvendelse af indretningen gennemføres et antal forskellige prøvninger, nemlig: Voges-Proskauer, nitratreduktase, phenylamindeaminase, hydrogensulfid, indol, omithindecarboxylase, lysindecarboxylase, malonatudnyttelse, urease, esculinhydrolyse, ONPG (o-nitrophenyl-D-galactosid), samt arabinose-, adonitol-, inositol- og sorbitolforgæringer. Under anvendelse af disse prøvninger kan foretages et væsentligt antal forskellige Enterobacteriaceae-identifikationer med en høj grad af nøjagtighed, f.éks. artsdifferentiering indenfor slægterne Escherichia, Shigella, Edwardsiella, Salmonella. Ariøona, Citrobacter, Klebsiella, Enterobacter, Serratia, Proteus, Providencia og Yersinia. Selvfølgelig kan denne indretning anvendes med andre kombinationer af biokemiske prøvninger til identifikation af de samme såvel som af andre organismer.

De følgende tabeller angiver identiteten af kendte kulturer og nøjagtighedsprocenten for deres identifikationer under anvendelse af den diagnostiske indretning ifølge opfindelsen:

'1' TABEL I

1 ' 12 145612

Identitet af 440 kulturer anvendt ved denne undersøgelse

Organisme Antal Organisme Antal

Escherichia 115 Serratia marcescens 11 S. liquefaciens 6

Shigella 5 S. rubicaea 4 S. sonnei 3

Proteus vulgaris 12

Edwardsiella tarda 1 P. mirahilis 51 P. morganii 14

Salmonella typhi 1 P. rettgeri 8 S. enteritidis 12 S. cholerae-suis O Providencia alcalifaciens 5 P. stuartii 7

Arizona hinshawii 3

Yersinia enterocolitica 4

Citrobacter freundii 10 Y. pseudotuberculosis 0 C. di versus 5 Y. pestis 0

Klebsiella pneumoniae .77 K. rhinoscleromatis 3 K. ozaenae 10

Enterobacter cloacae 30 E. aerogenes 29 E. hafniae 7 E. agglomerans 7 * 13 * U5612

TABEL II

Nøjagtighed af individuelle biokemiske mikroidentifikationsprøv-ninger sammenlignet med konventionelle prøvninger under anvendelse af friske kliniske isolater.

Biokemisk prøvning Antal korrekte/antal prøvede # nøjagt.ihed

Voges-Proskauer 427/440 97,0#

Nitratreduktase 434/440 98,6#

Phenylalanindeaminase 436/440 99,1# H2S 427/440 97,1#

Indol 434/440 98,6#

Omi thindecarboxy lase 431/440 98,0#

Lysindecarboxylase 425/440 96,6#

Malonat 434/440 98,6#

Esculin 438/440 99,6# ONPG 433/440 98,4#

Arabinose 435/440 98,9#

Adonitol 433/440 98,4#

Inositol 430/440 97,7#

Sorbitol 432/440 98,2#

Claims (14)

14 145612 I betragtning af det ovenstående er det klart, at den diagnostiske indretning ifølge opfindelsen tillader en hurtig og nøjagtig identifikation af store antal mikroorganismer. Indretningen er en højeffektiv engangsenhed, som fremskynder prøvningsprocedurer og formindsker sandsynligheden for fejl. Den overvinder ulemperne ved den hidtil kendte teknik og forbedrer de eksisterende fremgangsmåder og apparater. Patentkrav :

1. Diagnostisk indretning til brug ved identifikation af mikroorganismer og omfattende en ramme (10) af i hovedsagen plan form med en tværgående kant (45) og med en øvre flade (42), hvori der er udformet et første hul (11) til optagelse af en væskeprøve, et andet hul (13) til at bringe prøven i kontakt med et reagens og et tredie hul (15) til at bringe den reagerede prøvesuspension i kontakt med en indikator samt sådanne forbindelser mellem hullerne, at væsken kan løbe fra det første til det andet hul, når rammen (10) bringes til en forud fastsat første rumlig orientering ved drejning fra sin normale vandrette stilling om en akse parallel med kanten (45) af rammen (10), og væsken yderligere kan løbe fra det andet til det tredie hul, når rammen (10) bringes til en forud fastsat anden rumlig orientering, kendetegnet ved, at en første kanal (12) strækker sig fra det første hul (11) henimod rammens tværgående kant (45) og ved sin fjerneste ende drejer i det væsentlige parallelt med kanten (45) og skærer ind i det andet hul (13), som er forskudt til siden i forhold til det første hul (11), og en anden kanal (14) strækker sig fra det andet hul (13) i retning bort fra kanten (45) i hovedsagen parallelt med den første kanal (12) og skærer ind i det tredie hul (15), som ligger i det væsentlige på linie med det andet hul (13).

2. Indretning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der er anbragt et fjerde hul (17) til optagelse af overstrømningen af prøvesuspension fra det tredie hul (15), hvilket fjerde hul (17) er forbundet med det tredie hul (15) igennem en tredie kanal (16). 145612 15

3. Indretning ifølge krav 2, kendetegnet ved, at der er anbragt en udluftningskanal (18), som strækker sig lodret fra den plane overflade til et niveau mellem den plane overflade og bunden af det fjerde hul (17) og skærer ind i det fjerde hul (17).

4. Indretning ifølge krav 3, kendetegnet ved, at den tredie kanal (16) og udluftningskanalen (18) er i det væsentlige rektangulære i tværsnit.

5. Indretning ifølge krav 3, kendetegnet ved, at der er anbragt et klart, transparent dække (43) i forseglingskontakt med rammens plane overflade hen over hullerne, undtagen det første, og kanalerne, som er åbne ud til denne overflade.

6. Indretning ifølge krav 5, kendetegnet ved, at det transparente dække (43) dækker en del af udluftningskanalen (18) på forseglende måde.

7. Indretning ifølge krav 6, kendetegnet ved, at rammen indeholder et låg (19), som er hængslet dertil og dækker det første hul (11) og udluftningskanalen (18), når det slås ned over rammens plane overflade.

8. Indretning ifølge krav 7, kendetegnet ved, at lågets (19) inderflade indeholderet absorberende organ til optagelse af væskesuspension, hvilket absorberende organ indeholder et mikrobedræbende middele

9. Indretning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den anden kanal (14) er i det væsentlige vinkelret på den tværgående kant (45).

10. Indretning ifølge krav 2, kendetegnet ved, at hullerne er af i det væsentlige cylindrisk form og strækker sig lodret fra rammens plane overflade. 16 145 & 12

11. Indretning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den første kanal (12) indeholder en opadstigende rampe (24) ved bunden til at forhindre væskeforbindelse mellem det første og det andet hul, når rammen er i sin normale vandrette stilling, og tillade væskeforbindelse derimellem, når rammen bevæges til den forud fastsatte første rumlige orientering.

12. Indretning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det andet hul (13) er udformet til at indeholde reagenset i form af en substratskive (46), og det tredie hul (15) er udformet til at indeholde indikatoren i form af en indikatorskive (47), og det andet og det tredie huls vægge indeholder lodrette ribber (30, 33a, 35) til at holde skiverne i en ønsket orientering.

13. Indretning ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den første kanal (12) strækker sig radialt ud fra det første hul (11) i en retning, som er i hovedsagen vinkelret på den tværgående kant (45), og har en bueformet tværgående forskydning ved sin fjerneste ende, som står i forbindelse med det andet hul (13), idet et plan gennem det andet huls (13) akse vinkelret på den tværgående kant er forskudt til siden for et tilsvarende plan gennem det første huls (11) akse og indeholder det tredie huls (15) akse, hvorhos det andet og det tredie huls bund ligger i det væsentlige i samme plan som det første huls bund, og den anden kanal (14) har en første væg (31a) , som ligger i planet gennem akserne af det andet og det tredie hul, og en anden væg (31b) parallel med den første væg i et tangentplan til det andet og det tredie hul.

14. Indretning ifølge krav 2, kendetegnet ved, at den tredie kanal (16) har vægge, som er i det væsentlige parallelle med den første kanal (12) , og en bund, som er i det væsentlige parallel med og i et plan mellem den plane overflade og det tredie huls (15) bund.