DK147621B - Fremgangsmaade til fremstilling af antimikrobielt virksomme, epidermalt taalelige 2-chlor-6-methyl-4-benzylphenoler - Google Patents

Description

147621

Opfindelsens anvendelsesområde

Opfindelsen angår en fremgangsmåde til fremstilling af antimikrobielt virksomme, epidermalt tålelige 2-chlor-6-methyl-4-benzylphenoler, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i kravets kendetegnende del angivne.

Karakteristik af de kendte tekniske løsninger 4-chlor-2-methylphenol anvendes mangfoldigt til teknisk brug. Det indsættes især som mellemprodukt ved syntesen af plantebeskyttelsesmidler. Til fremstilling af 4-chlor-2-methylphenol chloreres 2-methylphenol ifølge forskellige fremgangsmåder, fortrinsvis med sulfurylchlorid. Derved fås en - 2 - 147621 blanding, som hovedsageligt består af 2-methylphenol, 2-chlor-6-methylphenol og 4-chlor-2-methylphenol. Destillation af denne reaktionsblanding resulterer i et fordestillat, som hovedsageligt består af 2-chlor-6-methylphenol og små mængder 2-methyl-phenol og 4-chlor-2-methylphenol, og et hoveddestillat, som består af det ønskede 4-chlor-2-methylphenol.

Syntesen af 4-chlor-2-methylphenol, som bruges i store mængder, medfører naturligvis et betydeligt kvantum fordestillat, som det er nødvendigt at anvende nyttebringende·

Fordestillatet er hidtil blevet forbrændt.

Denne fremgangsåde er for det første ikke økonomisk forsvarlig, da der destrueres værdifuldt råmateriale. For det andet opstår der ved forbrændingen HC1, som ikke kun fremmer beskadigelser som følge af korrosion i installationerne, men også er overordentlig betænkelig på grund af forurening.

X US-patentskrift 1.926.873 beskrives benzylphenoler, som er bakterio-statisk virksomme. Virksomheden af forbindelserne beskrives ikke nærmere.

Endvidere kendes der fra DE-offentliggørelsesskrift 21 04 995 benzylphenoler, som har en god aktivitet over for staphylokokken Londres« Forbindelserne ifølge disse skrifter besidder ikke nogen antimykotisk virksomhed, hvorfor disse forbindelser ikke kan siges at være antimikrobielt virksomme.

Opfindelsens formål

Opfindelsens formål er at anvende det nævnte fordestillat nyttebrin-gende således, at de ovennævnte økonomiske og tekniske mangler undgås.

Forklaring af opfindelsens væsen

Ovennævnte formål opnås ved en fremgangsmåde, som gør det muligt at fremstille antimikrobielt virksomme, epidermalt tålelige forbindelser ud fra det nævnte fordestillat.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fås forbindelserne med den almene formel I

- 3 - 147621

OH

h3c--Cl

V

ch2 (i)

A

- R2 % hvori og R2 betyder H eller Cl, ved, at det nævnte fordestillat, som hovedsageligt består af 2-chlor-6-methylphenol, bringes til reaktion med ben-zylchlorid, substituerede benzylchlorider, benzylalkoholer eller substituerede benzylalkoholer.

Ved større mængder af 2-methylphenol og 4-chlor-2-methylphenol i fordestillatet er det med henblik på renhed og udbytte af forbindelserne med den almene formel I formålstjenligt at formindske indholdet cif 2-methylphenol og 4-chlor-2-methylphenol. Dette er fx. også muligt ved at destillere 4-chlor-2-methylphenolet fra, og dernæst chlorere indholdet af 2-methylphenol i den resulterende blanding af 2-chlor-6-methylphenol og 2-methylphenol, og derefter destillere.

Syntesen af forbindelserne med den almene formel I foretages under de almindelige betingelser for en Friedel-Crafts-alkylering.

Benzyleringsmidlet kan anvendes i mindre mængder end i ækvivalente mængder eller også i overskud.

Som katalysatorer er aluminiumchlorid, antimon(V)-chlorid, bortrifluo-rid, jern(III)-chlorid, titan(IV)-chlorid, tin(IV)-chlorid, men især zink-chlorid velegnede. Deuden virker metaller som fx. zink eller titan katalytisk. Ved anvendelsen af bezylalkoholer kan der yderligere anvendes hydro- - 4 - 147621 genfluoridsyre, svovlsyre, phosphorsyre og phosphorpentoxid.

Katalysatorerne anvendes hensigtsmæssigt ved anvendelsen af benzylchlo-rider i mindre mængder end i ækvivalente mængder. Ved anvendelse af benzyl-alkoholer er også et overskud af katalysatoren mulig.

Reaktionen kan gennemføres uden opløsningsmidler eller i opløsningsmidler. Som sådane er fx. petroleumsether, carbondisulfid, chloroform og eddikesyre velegnede·

Omsætningen med benzylchlorider eller benzylalkoholer er mulig i tempe-raturområdet mellem 20’C og 200’C. Uden anvendelse af opløsningsmiddel foretages reaktionen hensigtsmæssigt ved opvarmning til 60‘C - 200*C, fortrinsvis til 100*C - 160*C, i få timer. Udførelsen af opfindelsen i lavtkogende opløsningsmidler kræver længere rektionstider.

Isoleringen af produkterne fra reaktionsblandingen og deres rensning foretages ifølge de gængse fremgangsmåder: destillation og krystallisering.

Forbindelserne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen udmærker sig ved gode virkninger mod dyre- og menneskepathogene bakterier og svampe. Forbindelserne virker især fremragende mod dermatophyter samtidig med, at de ikke blot har en ringe akut toxicitet, men også overhovedet ikke bevirker nogen sensibilisering af huden. Forbindelserne anvendes derfor fortrinsvis på det epidermale område som fx. i pharmaka, kosmetika, sæber og andre produkter.

Dermed udnyttes et værdiløst råmateriale, som forurener, og der fås et antimikrobielt stof af høj kvalitet.

Opfindelsen forklares nærmere i de følgende udførelseseksempler.

Eksempel 1 500g af et fordestillat, som indeholder 70,9% 2-chlor-6-methylphenol, 10,4% 2-methylphenol, 14,4% 4-chlor-2-methylphenol, 0,9% 2,4-dichlor-6-me-thylphenol, 3,3% forskellige chlorerede phenoler og 0,1% vand, og 11g vandfrit zinkchlorid, opvarmes under omrøring og udelukkelse af fugtighed til 100*C. I løbet af 2 timer tildryppes 535g benzylchlorid. I løbet af 1 time opvarmes der til 150 *C - 155*C, og ved denne temperatur omrøres der i 5 timer. Efter afkøling vaskes der med vand og der destilleres.

- 5 - 147621

Der fås 214g analyserent 2-chlor-6-methyl-4-benzylphenol.

20

Kp. 128*C - 129*C/0,2Torr; n 1,5944

D

Beregnet: Cl 15,24%

Fundet: Cl 14,79%

Eksempel 2 500g af et fordestillat med den samme sammensætning som i eksempel 1 og 13g vandfrit zinkchlorid, opvarmes under omrøring og udelukkelse af fugtighed til 100*C. I løbet af 2 timer tildryppes der 682g 4-chlor-benzylchlorid.

I løbet af 1 time opvarmes der til 150*C - 155*C, og der omrøres ved denne temperatur i 5 timer. Efter afkøling vaskes der med vand og der destilleres.

Der fås 158g analyserent 2-chlor-6-methyl-4-(4'-chlorbenzyl)-phenol.

20

Kp. 144*C - 150*C/0,1Torr; n 1,6029

D

Beregnet: Cl 26,54%

Fundet: Cl 26,18%

Eksempel 3 500g fordestillat med den samme sammensætning som i eksempel 1 og 13g vandfrit zinkchlorid opvarmes under omrøring og udelukkelse af fugtighed til 100*C. I løbet af 2 timer tildryppes der 828g 3,4-dichlorbenzylchlorid. I løbet af 1 time opvarmes der til 150*C - 155*C, og der røres i 5 timer ved denne temperatur. Efter afkøling vaskes der med vand; der destilleres og omkrystalliseres fra benzin (kp. 60*C - 70'C).

Der fås 188g analyserent 2-chlor-6-methyl-4-(31,41-dichlorbenzyl)-phen- ol.

Smp. 106*C - 107*C

Beregnet: Cl 35,27%

Fundet: Cl 35,08%

Eksempel 4 I 494g destillat af teknisk 2-chlor-6-methylphenol, som indeholder 84,8% 2-chlor-6-methylphenol og 15,2% 2-methylphenol, indledes der i løbet af en time ved 35’C 25g chlor. Der omrøres ved 35*C, vaskes med vand og destilleres .

147621 - 6 -

Der fås 434g 2-chlor-6-methylphenol.

Kp. 72*C/7Torr

Beregnet: Cl 24,9%

Fundet: Cl 24,1%

Til en blanding af 356,4g 2-chlor-6-methylphenol, 800ml chloroform og 60g vandfrit zirikchlorid dryppes i løbet af 25min. under kraftig omrøring 126,6g benzylchlorid. Der røres i 12 timer under tilbagesvaling, vaskes med vand, opløsningsmidlet inddampes og der destilleres.

204,Og 2-chlor-6-methylphenol genvindes.

Der fås 163,2g 2-chlor-6-methyl-4-benzylphenol.

20

Kp. 127,5*C/0,2Torr; n 1,5935

D

Beregnet: Cl 15,24%

Fundet: Cl 15,07%

Antiseptisk virksomhed og toxicitet af 2-chlor-6-methyl-4-benzylphenol (CMB)·

Bakteriostatisk og fungistatisk virksomhed CMB blev sammenlignet med kommercielle antiseptika. For at få et udsagn om den praktiske anvendelighed af CMB, blev dets virkning prøvet i en antiseptisk hudplejende tensidblandingssæbe og sammenlignet med denne tensidblandings sæbes egenvirkning (tabel 1).

I bakteriostase- henholdsvis fungistaseprøven tilsattes prøvesubstanserne til faste næringssubstrater i geometrisk aftrappede koncentrationer.

I bakteriostaseprøven anvendtes staph. aureus, enterokokker, f. coli, prot. mirabilis og pseud. aeroginosa som testkim, i fungistaseprøven svampestammerne trich. metagrophytes pleomorph og typisk voksende trich. rubrum, trich. tonsurans schonleinii, mikrosporon audouinii, mikrosporon canis, trichosporon cutaneum og to candida-albicans-stammer. Den samlede bedømmelse af prøveresultaterne foretoges med karakteristikken for den bakteriostatiske (KbWs) henholdsvis fungistatiske (KfWiq) virksomhed, en afvejet middelværdi af grænseværdierne for henholdsvis den "absolutte hæmning" og den "formind- 2 skede vækst" af testkimkulturerne, udtryktsom - log af den virksomme substansfortynding (W. Weuffen, D. Martin und W. Schade, Pharmazie 18, 420 - 7 - 147621 (1963); W. Weuffen und B. Hermann, Z. med. Labortechnik 8, 301 (1967).

Resultaterne viser, at CMB har en god virksomhed mod bakterier og er meget godt virksomt mod svampe. Bakteriostase kunne registreres indtil en fortynding på 1 : 10 000. Indtil fortyndingen 1 s 10 000 undertryktes bakterievæksten fuldstændigt. Fungistase kunne registreres indtil en fortynding på 1 ; 50 000. Den absolutte væksthæmning gik indtil en fortynding på 1 : 32 000. Det overgår hexamethylentetramin både i bakteriostatisk og fungista-tisk henseende og er også fungistatisk tetramethylthiuramidsulfid tydeligt overlegen. Kombineret med en antiseptisk hudplejende tensidblandingssæbe bibeholdes den bakteriostatiske virkning ikke blot, men forbedres stærkt (mere end 6 gange). Ligeledes stiger den f ungistatiske virksomhed af tensidblandingssæben ved tilsætning af CMB.

Antimykotisk virksomhed ved den experimentelle hanekamkandidose CMB prøvedes igen i tensidblandingssæben såvel som i propylenglykol, og et opløsningsmiddel med fungistatisk egenvirkning. Til sammenligning prøvedes tensidblandingssæben og propylenglykolet alene, såvel som natriumborat, der ved candidosis har vist sig velegnet i humanmedicin.

På den rugjorte hanekam på 5 uger gamle haner blev der anbragt et can-dida-albicans-svampekultur-stykke, der var så stort som en ært (Kramer, R.

R3del, R. Krause, W. Weuffen og R. Kuhne, Z. ges. Hyg. Grenzgeb. 20, 509 (1974)). Hanekammen blev to gange daglig besprøjtet med 20% dextrose-opløs-ning. Fra 5. til 7. dag efter infektionen begyndte prøven af præparaterne på mykoseherden.

Vurderingen af mykosen foretoges i fem trin; 1. trin — mykoseherdens diameter 5 mm 2. trin = " " 5 - 10 mm 3. trin = " " 10 - 20 mm 4. trin = " " 20 mm (mere end 2/3 af kammen) 5. trin = " " hele kammen

Piguren viser, at en tensidblandingssæbe med 3% CMB bevirker et helbredelsesforløb, som er lige så hurtigt som ved therapeutiket natriumborat. Både propylenglykol og tensidblandingssæben virker betydeligt bedre, når der - 8 - 147621 tilsættes CMB.

Resultatkoefficienten, som angiver hvor mange gange hurtigere helbredelsen foregår i behandlings gruppen end i kontrolgruppen, udgør for 20% natriumbor at i glycerin 3,5, for 3% CMB i propylenglycol 2,4, for propylengly-col 1,9, for 3% CMB i tensidblandingssæbe 2,6 og for tensidblandingssæben 2,4.

Antiseptisk virksomhed og kompatibilitet på det experimentelle 3. grads brandsår på marsvin CMB blev prøvet i en 1% opløsning i propylenglycol. Til sammenligning prøvedes en 10% vandig opløsning af den antiseptiske hudplejende tensidblandingssæbe og en 1% opløsning af eddikesyre-(4-chlor-2-ethylphenylester) i propylenglyco1.

Med en infrarødstråler blev der fremstillet standardiserede 3. grads forbrændingssår (diameter ca. 3 cm).

I forsøgsanordning A begyndte substansprøven efter forbrændingen og fjernelsen af brandskorpen den 12. dag. I forsøgsanordning B påbegyndtes lige efter fremstillingen af brandsåret for prophylaktisk at undgå sårinfektion, som ellers indtræffer, i det mindste hos de ubehandlede kontroldyr, (bl.a. staph. aureus og F.coli kunne isoleres som infektionsårsag). Substanserne blev sprøjtet på 1 gang om dagen.

CMB udviser i forsøgsanordning A og B en udmærket antiseptisk, sårhelingsf remmende virkning (tabel 2). Sårene var allerede på andendagen af behandlingen fri for betændte belægninger og tørre.

Den hudplejende tensidblandingssæbe virkede væsentlit mindre fremmende på sårhelingen. På 2. behandlingsdag var sårene ganske vist ligeledes fri for betændte belægninger og tørre, men granulationen begyndte dog først langsomt den 3. dag (tabel 3). CMB's fremragende virkning bliver særlig tydelig ved sammenligningen med eddikesyre-(4-chlor-2-ethylphenylester), som udviser en god virkning i bakteriostase- og fungistaseprøven, men ikke har nogen fordelagtig virkning på sårhelingen. Ved prøven af disse forbindelser døde 40% - 50% af dyrene mellem den 3. og 5. behandlingsdag, næsten ligesom i kontrolgruppen (tabel 4 og 5)· 147621 - 9 -

Oral, intravenøs og subcutan toxicitet for mus CMB har kun en ubetydelig akut toxicitet over for hvide mus. LD5g udgør ved peroral applikation 1700 ± 180yg/kg, ved subcutan applikation 1000yg/kg og ved intravenøs applikation 95 ± 2pg/kg.

Hudtoxicitet og hudsensibiliseringsevne for narsvin CMB blev prøvet i sammenlingmed det antimikrobielt yderst virksomme 4-bromphenylisothiocyanat, antimykotiket 3,5-dibenzyl-tetrahydro-1,3,5-thia-diazin-2-thion (dibenzthion) og 4-chlor-1,3-dinitrobenzol, som er kendt som yderst sensibiliserende.

Til hudtoxicitetsprøven blev hvide marsvin på ca. 250g barberet elektrisk på ryggen. 24 timer senere gennemførtes toxicitetsprøven med en substanskoncentration på 12, 8, 6, 4, 3, 2, 0,8%, 0,2% og 0,05% i tmg. lanetti cum oleo, altså lanettevoks på oliebasis. Applikationen foretoges med gotha-test, som er et testplaster. Efter en indvirkningstid på 48 timer blev prøveplastrene fjernet. 30min. senere og dernæst daglig blev hudreaktionerne vurderet. Ved tilsvarende resultater af prøverne blev der også prøvet en koncentration, som var fire gange mindre (W. Shcwencke og W. Weuffen, Arch. exp. Veterinårmed. 23, 705 (1969)).

Prøvesubstansernes sensibiliseringspotens blev hver prøvet på 40 dyr i epicutanprøven. Dyrene blev igen barberet på ryggen. Efter 24 timer blev der 1 gang daglig gnedet prøvesalve ind, manuelt under let tryk i løbet af 2min. Sensibiliseringen gennemførtes i 10 døgn. Efter en pause på 10 døgn blev der igen barberet, og 24 timer senere prøvedes resultatreaktionen i epicutanprøven med testplaster på den anden side af kroppen. Som negativ kontrol tjente substansfrit salvegrundlag. Som positiv kontrol blev ved forsøgets slutning sensibilitetsevnen på hvert af dyrene kontrolleret med 4-chlor-1,3-dinitrobenzol (W. Schwencke og W. Weuffen, Arch. exp. Veterinårmed. 23, 705 (1969).

CMB forårsagede selv i den højeste prøvede koncentration på 12,8% ikke nogen irritation af huden (tabel 6). Det undersøgte isothiocyanat irriterede derimod huden, selv i yderst ringe koncentrationer (tabel 7). Skønt dibenzthion, som anvendtes som antibiotikum, forholdt sig yderst fordelagtigt i hudtoxicitetsprøven, er det CMB underlegen med hensyn til den vigtige sensibiliserende virkning (tabel 7).

Ved præparaterne på dibenzthion-basis viste sensibiliseringsreaktionen - 10 - 147621 sig gennemsnitlig 24 timer efter pikutanprøven i form af et erythem, hvoraf den i almindelighed på 2. og 3· dagen opstod et ødem, som fra 4. - 7. forsøgsdag gik over til en skældannelse af reaktionsherden.

En typisk eksem med knuder, vabler og nekrose opstod ikke i noget tilfælde. Skønt alle præparater indeholder dibenzthion, er den positive reaktionsdeltagelse med 0 - 84% helt forskellig (tabel 8). Sandsynligvis er dette forårsaget af grundsubstansen. Alt i alt kan sesibiliseringspotensen betegnes som middelmådig.

Hudtoxicitet for patienter med syg og med sund hud CMB blev prøvet både i ungventum lanetti cum oleo (15) og i den antiseptiske hudplejende tensidblandingssæbe. Sidstnævnte anventes både ufortyn-det og i 5% vandig opløsning.

Prøven gennemførtes i epikutantest på 32 patienter på det højre lår. Parallelt med de to prøvesubstanser blev grundsubstanserne prøvet alene. Salverne henholdsvis opløsningerne anbragtes med "Gothatest" på låret i 24 timer. 5min. efter fjernelsen af testplasteret blev reaktionerne aflæst daglig indtil 96 timer henholdsvis indtil et negativt reaktionsresultat· Syg-domstilfældene omfattede: eksem (5 gange), exanthem (1 gang), asthma bron-chiale (1 gang), lues (2 gange), epidermophyti (1 gang), soor (2 gange), erythematodes (1 gang), ulcus cruris (7 gange), gonorrhoe (2 gange), vorter (1 gang), basaliom (1 gang), herpes zoster (2 gange), furunculus (1 gang), condylomata (1 gang), pididymitis (3 gange), fedtvævsnekrose (1 gang).

Tensidblandingssæben forårsagede i ufortyndet tilstand irritation af huden hos 3 eksempatienter og 2 andre hudsyge i form af erythemer. Disse varede op til 72 timer, i et tilfælde op til 8 døgn. Derimod forårsagede hverken CMB 1% eller den 5% tensidblandingssæbeopløsning nogen irritation.

Dette resultat for CMB's gode hudtålelighed også hos mennesker er bemærkelsesværdigt, fordi prøven blev gennemført under betydeligt strengere betingelser, end det i almindelighed kan forventes i praksis.

147621 - 11 -

Toxicitetsprøve i ophtalmotest på marsvin CMB blev prøvet i propylenglycol (1%) og i tens idblandings sæben. Til sammenligning prøvedes nitrofural og en gængs nitrofuralsalve (indhold af nitrofural 0,2%, af carbamid 5%) 1% i propylenglycol.

I det venstre øje af 5 henholdsvis 10 sortøjede marsvin på ca. 250g blev der dryppet 1 dråbe prøvesubstansopløsning, i det højre øje 1 dråbe 1,6% sølvnitratopløsning som standardirritation. Indtil den 6. time aflæstes reaktionerne hver time, derefter daglig indtil reaktionen var forsvundet. På conjunctiva skelnes der mellem hyperaani, sekretion, kemosis og nekrose, på cornea mellem mathed og nekrose. Hvert symptomkompleks inddeles i 3 kliniske sværhedsgrader. 1% CMB forårsagede hverken i propylenglycol eller i tens idblandings sæben nogen corneal beskadigelse og var dermed lige så tåleligt som nitrofural (tabel 9). På conjunctiva førte begge forbindelser til lettere irritationer, som allerede forsvandt efter 3 henholdsvis 4 timer.

Ved indvirkning af 1% CMB i propylenglycol kunne der kun i et tilfælde konstateres en punktformet nekrose efter 60min., men den var allerede forsvundet efter 2 timer. Grundsubstanserne bevirkede ingen irritation.

De ovennævnte resutater viser CMB*s egnethed som antiseptikum med en speciel virksomhed mod svampe og også mod bakterier. Blandet med tensidblandingssæber opnås en lignende høj virkning mod bakterier og svampe. Samtidig er CMB velegnet som antiseptikum til prophylaktiske anvendelser fx. i rensemidler til kroppen. Hanekamprøven viser forbindelsens prophylaktiske virkning mod blastomycetinfektioner. Sårhelinger fremmes på fremragende vis af CMB. Forbindelsen fører ikke til nogen sensibilisering i de koncentrationer, som er interessante for en anvendelse. I det sensible øje forårsages der ikke nogle irreversible beskadigelser hos marsvin. Dette resultat understreger CMB's gode tålelighed. CMB forholder sig fremragende i epidermal anvendelse.

12 147621

Tabel 1

Bakteriostatisk og fungistatisk virkning af CMB og sammenlignings-præparater

Prøvesubstans Virksomhed.

EbW KfW

CMB 9,7 14,6

Hexamethylentetramin 5»6 8,2

Tetramethylthiuramidsulfid 9j 3 8,5

Tensidblandingssæbe 5>4 9 »0 CMB, 3$ (bakteriostase) henholdsvis l/o (fungistase) i tensidblandingssæbe 11 >9 9>6

Tabel 2

Prøve af CMB på det exp. 3. grands brandsår på marsvin Sårheling helingsforløb efter fjernelse af nekrosen i

forsøgsanordning A forsøgsanordning B

epithelialisering begyndelse efter 2k timer ved efter 2h timer ved y af sårranden hele sårranden forløb 1-2 mm på 3 d ved 1-2 mm på 3 d hele sårkanten ved hele sårkanten granulation rent tørt sår rent tørt sår såmekrose efter 10 d nekro- efter 10 d ingen serester nekroser mere s år infektion behersket behersket sårlukning: efter 36 d efter 30 d letalitet 20$ 0$ 13 147621

Tabel 3

Prøve af en antiseptisk, hudplejende tensidblandingssæbe på det exp. 3· grads brandsår på marsvin Sårheling helingsforløb efter fjernelse af nekrosen i

forsøgsanordning Δ forsøgsanordning B

epi theliali sering begyndelse efter 24 timer ved efter 24 timer ved 1/4 af sårkanten -3- af sårkanten forløb fra 7. d 0,5 mm i fra 4. d 0,5 - 1 mm 3 d på hele sår- i 3 d langs hele kanten sårkanten granulation uren indtil sår- uren indtil sårlukningen lukningen sårnekrose efter 10 d delvis efter 10 d ikke afstødt afstødt sårinfektion ikke behersket ikke behersket sårlukning efter 72 d efter 66 d letalitet 40$ 50$ 147621 ι4

Tabel 4

Prøve af eddikesyre-(4-chlor-2-ethylphenylester) på det exp. 3· grads brandsår på marsvin Sårheling helingsforløb efter fjernelse af nekrosen i

forsøgsanordning A forsøgsanordning B

epithelialisering begyndelse efter 24 timer ved efter 24 timer \ - 1/4 - i af sårkan- 3/4 af sårkanten ten forløb fra 3· d 0,5 mm på fra 7. d 0,5 ram på 3 d langs hele sår- 3 d langs hele sårkanten kanten granulation efter 10 d ikke af- efter 10 d ikke afstødt stødt sårinfektion ikke behersket ikke behersket sårlukning efter 60 d efter 72 d letalitet 40$ 50$

Tabel 5

Helingsforløb af det exp. 3· grads brandsår i kontrolgruppen Sårheling helingsforløb efter fjernelse af nekrosen i

forsøgsanordning A forsøgsanordning B

epitheliali s ering begyndelse efter 24 timer ved -j efter 24 timer ved af sårkanten 4' af sårkanten forløb fra 7. d 0,5 mm på 3 fra 7.d 1 mm på 3d d langs hele sårlcanten langs hele sårkanten granulation uren indtil sårlulcning ren efter 13 d sårnekrose efter 10 d ikke af- efter 10 d delvis stødt afstødt .

sårinfektion ikke behersket delvis behersket sårlukning efter 48 d efter 39 d letalitet 40$ 30$ 15 147621 m o . , • I I I I I I I i i o cm . i i i i i i i i i β o o s

•ri CO

-P · I I I I I I I I I

o Ό G\

CM

β · I I I I I I I I I

Φ cn +5

(H

© -3*

. I I I I I I I I I

vo 00

• I I I I I I I I I

CM

H

m o • I I I I I I I I +1 o s

•ri CM

• 1 +1 I I I I I I +1 m β o β 2 © £ £ -ri oo -P · i i i i i i i i +1

°d O

p. CM

o m cm VOS β · 1111111*1 o © cn h f

Φ β *M

η o Φ -d-

(S Ch · I I I I I I I I I

£h VO

+5 Φ -P 00

•ri · I I I I I I I I I

O CM

•ri H

X O -P

b in

3 O

g · I I I I +1 I I I +1 β CM ©

Ό · i +i i i i i i * +* E

H β O 'O

nj ® s fo E β T3 -ri 00 5+3· iiiiiii+i+i 6fl

M O eJ

β oo > O -tf <0 •ri CM ^ +3 p · ιι·ηιιιι·ι X φ cn -ri d -p i? 'i

<D Ch cd *P

X © -d· id . i i i i +i i i +i i Η 2 vo d © <0 © Φ u co k • I I I I I I +1 I * -ri

CM -ri E

H > o ri to

+> H

ni > tøl tø ‘ri d d © > -d · β -ri <n -ri β

tø β£- S II II

S © I

m o β © HCMenj-invoc^-oooN * +i k β o k O O -ri >3

fo W +5 Q

16 147621 u

O I

ra m fi ίϊβ -P +3 ni fi ® æ 43 ·Η ·η -n tn in S Q tø «—- ,0 © ,Εί ,fi -ri

fi © fi fi H

(0 -Η O O © 0\ w h Vi <h to σ\ M -ri w fi SI 03 © © 43

•ri -ri d XX © TJ

c! © © ,y ,y ,c a OD fi 43 Ti -ri fi Λ

•ri © O

H CO ft

S

©

(S

m 1 ©^ to to'--

O fi H

•H fi H

S k ° *

S © -ri O

O ©43 •ri (S Eli)

fi H fi O

0 ·Η -P

(fi æ fi cvi in co

•Η Φ 0Λ O O

£> 03 M O · · ·

fi fi fi O O C"l O

H © © O

© 43 Μ X

A O

fi ft © to

S I

•H fi fi © © O'—' © fl-^ϊ. co

•ri θ'—* O

r-{ X O N

•ri H fi 00 O H

,β X © O ♦ · ·

•H O O O

03 ·Η © 43 H 1A

fi X fi ci © o æ fi 03 E-( 43 4>

Tf fi

A

tø 43 H

O (So

fi N

43 (SS

© £►> © 43 O ,£3 •ri O fi

O Ή O

•ri ÆH

X 43 ,fi

0 O O

4> © I

’ϋ m -ri

fi fi Η I

K fi >> fi 0 P fi O fi

© © -ri -P

A A Λ ·Η fi ft 43 fi © s N *rl © O fi Ό

> fi © I

o g ,n a n fi S 1 -ri

ft O -3- Ό H

ι7 147621 b_ \β &D ri

^ CO O >Λ O o VO

•ri 3 Ό H

w fe-g < g - ft u Φ c s = •ri & ° g φ ίΛ J· G\ O 00 •ri 3 > H CM ^

ft H

-μ < ri = tn

X

C

o ri = •ri fe kpfffiO O CT\ O Ό

3 i> N

Φ ft H

<! «i > = tn C! "ri o η -μ i = X rig •μ H -ri 3 N EtOO „ _ .

£ tn ri -ri 00 CM l"- O. -£ φ 3 3 CM M3 1Λ <=0 X O ft O1 •ri <! -ri

•C ft S H

ri O fe fe -ri CO 3

tn ^H

η ri n o φ φ h o XI +> ri 3 0 ri o H _ .

H ft 1-1¾) ft\ CM 0\ O -jT

m +> X ri cm . η n i> tto -μ φ ri s sh •ri ri £*> ri <1 Φ ft

Φ X O

in iH ri •ri τ) ft H •H & •ri

03 H

d ώ

φ -μ Sh O O O O O

(ββ?»Μ·\ΐΛ 1Π ΙΠ»Λ <4 τ) Η ri -¾ o

3 - H O

H ri ^ «i >*

O O fit +* H

•ri -ri 2P

μ tn O -ri ri •ri -ri ® H « ®

O - -ri 3 - 'feS. H

VS.H 'fcS. E -¾¾. «Ο-ΐ CM !* tn n O ΕΛΗ ¢^-¾¾. Φ 01¾¾-ri *3 ft g o o cm φ cm β -μ -ri o ri 3 >> 3 X 53 _ > * '3 O ri fe 43 OH OO O S H OflftTi^rir» ft

03 ·Η tø ·Η Λ *ri *H ·Η *ri ·Η ρ» C*\ O

x X β XH X E in χΕ’ακ Χτΐ H

3 -p® +s 3 -μ 3 H -μ ri ri o ri ri in N H N H Nrio Nri 33+9 +> Φ ri !>> Si*. βφβ fi®..ftft© -Φ > Oft φ N 0ΧΦ Φ X T3 Ο -ri H > Op·

s xo Xfi Xfetn X -μ *ri ri Η H 8 +9 S

ri H ri *ri Φ «ri Φ ri *ri ® 0 *ri Η H ri τ-J fn ft >3ft τ) X OE!> 3 S ri N tn tn o, Oft 18 147621

Ri

® S 1 I I

s ÉH i i i « o ^ o fc i i i i

R

E (tf O I I I I

O ti -d· p cm o

β (fi I I I I

3 •n β o „

O ffi I I I I

(S

O |g I I

S fH I I » I

o

_ O 53 i r I I

R

•ri E (tf O I I I I Ή > s 0 ·Η Λ 00 P (fi I I I I -¾ C HU g

•ri fi S

> 3 H

01 Ή H II

h fi HH Η H

(tf O K X X X X I ^ , 5 O CM H ri H h

(D

o(tf (tf - β 6 ® !g i i i i <d o β « ti

P i i i · o P

oi 0 h itf Φ O |g I I I I X (tf p β β ® ® 0\ 0 O H Z k

E ti E (tf O I I I

Η Η P >- ,11 ® 0) (tf itf O H H itf ,ο Λ (tf cm p H £ ®

(tf P Φ H O (fi I I I X H

6h λ ft β Η β

p. 3 ·> -H

0 ή H 01 H

β Η H itf •Η 0 Η Η Η H 01 O K X X X X i O ®

β cnH r h SO

Φ (!) «Ρ r| a (tf !gi i i i o ώ fi p æ o

η β ^ i i i i II h H

β k ® p (0 O H O ttf itf C) O Z X I I I (tf β ft H k ® β » ω & •Η Η β 01 S (tf o I I i X 0 Tj ©

i> Η ·Η © P

OH P X! 01 Ό P Η Η Η H 0¾)¾)

O Cfi X X X X fi Η H

fi cn CM CM Pl· itf Η H

β ® fi fi •n (fi 0 0 β X H > >

O X Η Η II Η H

<3<~* HH H HH H (tf (tf X XX X XX X Cfi

ft CM H CA HH H

II II

Η Φ H

(tf k -ri Η H

p>% m m m m Ehh β Ό stf «aj fi I Η Φ 0 β Η 0 H ft

1 I (tf Φ (tf I O (tf Η H

β ·Η β τΙΗ i fi 0 >> fi ft H

β Φ P S β fi Η P

0) 'fe'i.H Η 'ίίϊ.Ό 01 «Η ft &D (h II

Φ01 Η |>> O HH® Οβ 0® Η

}> fi ftO 01&D fi Η Φ fi > S

® (tf EO>. ft fi fi PH PH

ftP S fi H ft ® -ri ·Η "ϊ£. £·* tI (tf •—'X

ftoi O ft &D ΟΡΌ β H ft β(Ι) X X