DK149200B - Bleomycinsyreester til anvendelse som mellemprodukt ved fremstillingaf bleomycinsyre samt fremgangsmaade til fremstilling af bleomycinsyreesteren - Google Patents
Bleomycinsyreester til anvendelse som mellemprodukt ved fremstillingaf bleomycinsyre samt fremgangsmaade til fremstilling af bleomycinsyreesteren Download PDFInfo
- Publication number
- DK149200B DK149200B DK084373AA DK84373A DK149200B DK 149200 B DK149200 B DK 149200B DK 084373A A DK084373A A DK 084373AA DK 84373 A DK84373 A DK 84373A DK 149200 B DK149200 B DK 149200B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- acid
- bleomycinic
- bleomycinic acid
- product
- bleomycin
- Prior art date
Links
- 108700023993 bleomycinic acid Proteins 0.000 title claims description 61
- MRNLLBXPSWMYCK-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[[2-[[4-[[2-[[6-amino-2-[3-amino-1-[(2,3-diamino-3-oxopropyl)amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-3-[3-[4-carbamoyloxy-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-3-(1h-imidazol-5-y Chemical compound N=1C(C=2SC=C(N=2)C(O)=O)=CSC=1CCNC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C(C)C(O)C(C)NC(=O)C(C(OC1C(C(O)C(O)C(CO)O1)OC1C(C(OC(N)=O)C(O)C(CO)O1)O)C=1NC=NC=1)NC(=O)C1=NC(C(CC(N)=O)NCC(N)C(N)=O)=NC(N)=C1C MRNLLBXPSWMYCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims description 58
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 28
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 4
- -1 3-aminopropyl ester Chemical class 0.000 claims description 49
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 claims description 33
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 24
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 5
- 150000002366 halogen compounds Chemical class 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 150000004699 copper complex Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 54
- 239000000047 product Substances 0.000 description 43
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 42
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 39
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 37
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 33
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 30
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 29
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 25
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 14
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 10
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 9
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 9
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 9
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 8
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 8
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 8
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 8
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 8
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 8
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 5
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 5
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 4
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 4
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 1-fluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=C(F)C([N+]([O-])=O)=C1 LOTKRQAVGJMPNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- WUGQZFFCHPXWKQ-UHFFFAOYSA-N Propanolamine Chemical compound NCCCO WUGQZFFCHPXWKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 3
- PQJJJMRNHATNKG-UHFFFAOYSA-N ethyl bromoacetate Chemical compound CCOC(=O)CBr PQJJJMRNHATNKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 3
- JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N iodoacetic acid Chemical compound OC(=O)CI JDNTWHVOXJZDSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 238000004816 paper chromatography Methods 0.000 description 3
- SSOLNOMRVKKSON-UHFFFAOYSA-N proguanil Chemical compound CC(C)\N=C(/N)N=C(N)NC1=CC=C(Cl)C=C1 SSOLNOMRVKKSON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 3
- BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 3-azaniumyl-2-hydroxypropanoate Chemical compound NCC(O)C(O)=O BMYNFMYTOJXKLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N Heavy water Chemical compound [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 2
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 2
- 235000008331 Pinus X rigitaeda Nutrition 0.000 description 2
- 235000011613 Pinus brutia Nutrition 0.000 description 2
- 241000018646 Pinus brutia Species 0.000 description 2
- 241001147844 Streptomyces verticillus Species 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940116318 copper carbonate Drugs 0.000 description 2
- GEZOTWYUIKXWOA-UHFFFAOYSA-L copper;carbonate Chemical compound [Cu+2].[O-]C([O-])=O GEZOTWYUIKXWOA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;methanol Chemical compound OC.CCOCC MDKXBBPLEGPIRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 2
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 2
- FUKUFMFMCZIRNT-UHFFFAOYSA-N hydron;methanol;chloride Chemical compound Cl.OC FUKUFMFMCZIRNT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N iodoacetamide Chemical compound NC(=O)CI PGLTVOMIXTUURA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 2
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 2-METHOXYETHANOL Chemical compound COCCO XNWFRZJHXBZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CQYQBMRDUAGCGK-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(2-aminoethyl)-1,3-thiazol-4-yl]-1,3-thiazole-4-carboxylic acid Chemical compound S1C(CCN)=NC(C=2SC=C(N=2)C(O)=O)=C1 CQYQBMRDUAGCGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000022 2-aminoethyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])N([H])[H] 0.000 description 1
- BPSNETAIJADFTO-UHFFFAOYSA-N 2-pyridinylacetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=N1 BPSNETAIJADFTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKYSBGWCYXYOHA-UHFFFAOYSA-N 3-methylthiopropylamine Chemical compound CSCCCN KKYSBGWCYXYOHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N Butyl acetate Natural products CCCCOC(C)=O DKPFZGUDAPQIHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical group S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010015899 Glycopeptides Proteins 0.000 description 1
- 102000002068 Glycopeptides Human genes 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QRXFDPRISA-N L-gulose Chemical compound OC[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QRXFDPRISA-N 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N Nitric acid Chemical class O[N+]([O-])=O GRYLNZFGIOXLOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBLHOLNNKJBEDC-XOGQCRKLSA-N [(2r,3s,4s,5r,6r)-2-[(2r,3s,4s,5s,6s)-2-[(1r,2s)-2-[[6-amino-2-[(1s)-3-amino-1-[[(2s)-2,3-diamino-3-oxopropyl]amino]-3-oxopropyl]-5-methylpyrimidine-4-carbonyl]amino]-3-[[(2r,3s,4s)-5-[[(2s,3r)-1-[2-[4-[4-[4-(diaminomethylideneamino)butylcarbamoyl]-1,3-th Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCCCN=C(N)N)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1NC=NC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C NBLHOLNNKJBEDC-XOGQCRKLSA-N 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 1
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- NBLHOLNNKJBEDC-UHFFFAOYSA-N bleomycin B2 Natural products N=1C(C=2SC=C(N=2)C(=O)NCCCCN=C(N)N)=CSC=1CCNC(=O)C(C(O)C)NC(=O)C(C)C(O)C(C)NC(=O)C(C(OC1C(C(O)C(O)C(CO)O1)OC1C(C(OC(N)=O)C(O)C(CO)O1)O)C=1NC=NC=1)NC(=O)C1=NC(C(CC(N)=O)NCC(N)C(N)=O)=NC(N)=C1C NBLHOLNNKJBEDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 208000013557 cerebral hemisphere cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000010439 graphite Substances 0.000 description 1
- 229910002804 graphite Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000009422 growth inhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 108700016226 indium-bleomycin Proteins 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006140 methanolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000011505 plaster Substances 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N propylamine Chemical group CCCN WGYKZJWCGVVSQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003039 volatile agent Substances 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K9/001—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof the peptide sequence having less than 12 amino acids and not being part of a ring structure
- C07K9/003—Peptides being substituted by heterocyclic radicals, e.g. bleomycin, phleomycin
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/19—Antibiotic
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
Description
149200
Den foreliggende opfindelse angår en hidtil ukendt bleo-raycinsyreester til anvendelse som mellemprodukt ved fremstilling af bleomyeinsyre samt fremgangsmåde til fremstilling af bleomycin-syreesteren.
Bleomycin-antitumor-antibiotika er vandopløselige grundlæggende glycopeptider, der er chelateret med divalent kobber, og som frembringes af Streptomyces verticillus. De blev først opdaget af Hamao Umezawa, m.fl. i 1966 omtalt, i Journal of Antibiotics 19A, side 200 (1966).
Seksten typer bleomycin er blevet fremstillet og isoleret ved hjælp af almindeligt kendte dyrkningsmetoder, herunder bleomycin A·^, ®2* 2 149200
Disse sidstnævnte typer har været anvendt på kompleks form til behandling af skælcelle carcinoma, malign lymphoma og cerebrale tumorer og udviser antitumor-virkninger og omfattende cancer-indikationer.
Den kemiske formel for bleomyciner er vist nedenfor. Det er kendt, at de forskellige typer af bleomyc-in kan opnås ved at variere den endestillede aminogruppe "R", I udgangsmaterialet, 3~ methylmercaptopropylamino-bleornycin, for fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse er R en 3-methylmercaptopropylaminogruppe.
Når R i den foreliggende beskrivelse er en -OH-gruppe, er der tale om bleomycinsyre. Når R er en -OC^CH^CH^NHg-gruppe, er der tale om 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre.
Når R er en -NHCH2-^^ -gruppe, er der tale om benzyl -aminob1eomycin.
o nh2 Y 8 . o
i) f ϊ nfR
^Vy0 vy> ΐίπΛΕ^Η CH3 S'CH^Sr011'«!,0 -'""'S "Si “I H 3 ή 3
Ay-»
0Hn b - H \sO-1iriLOH
H V.^6 H1h ft o^m2 3 149200
OVERSIGT
R gruppe forbindelse -NH-CH0-CH0-CH0-S-CHX ...... , _ . , _ 222 3 3-methylmercaptopropylaminobleomycin Θ -NH-CH2-CH2-CH2-S - CH^ 3-(S,S-dimethylmercapto)-propylamino- j bleomycin CH^ -OH Bleomycinsyre -0-CH2-CH2-CH2-NH2 3-aminopropylester af bleomycinsyre -nhch2 Ό Benzylamino-bleomycin
Det er kendt, at når Streptomyces verticillus podes og dyrkes i et dyrkningsmedium, og en amin, der svarer til aminside-kæden i den tilsigtede bleomycin, tilsættes som precursor, kan der fremstilles og isoleres en ny bleomycin, der har en amidbinding til den til R svarende amin (jfr. f.eks. beskrivelsen til belgisk patent nr. 7^5*926).
Typen af biologisk aktivitet vil variere i væsentlig grad afhængig af den særlige type bleomycin, og det er følgelig muligt at udvikle nye udmærkede antitumor-midler ved at isolere en sådan hidtil ukendt bleomycin og afprøve dens antitumor-virkning. Ved ovennævnte forgæringsproces til fremstilling af bleomyciner er imidlertid de endestillede aminer begrænset på grund af den biokemiske syntese.
Store fremskridt med hensyn til f.eks. antitumor-virkninger og cancer-indikationer i bred almindelighed ville imidlertid kunne opnås, såfremt nye bleomyciner kunne fremstilles syntetisk i stedet for ved den kendte biokemiske syntese, f.eks. ved kemisk at forbinde bleomycinsyre og den ønskede amin under anvendelse af bleomycinsyre og forskellige aminer som udgangsmateriale.
At det forholder sig således har nu vist sig at være rigtigt, og det har vist sig muligt at fremstille bleomycinsyre ud fra det nye mellemprodukt ifølge opfindelsen, hvilket mellemprodukt er en hidtil ukendt bleomycinsyreester, som er ejendommelig 4 149200 ved, at den er 3-aminopropylesteren af bleomyeinsyre og har den i krav l's kendetegnende del angivne formel, eller et syresalt eller kobberkompleks heraf.
Den nye bleomycinsyreester ifølge opfindelsen har vist sig at kunne fremstilles ved en fremgangsmåde, som er ejendommelig ved, at 3-methylmereaptopropylaminobleomycin eller et syresalt heraf bringes til at reagere med en halogenforbindelse med formlen: R - X, hvor R er -CN, -CH2C00H, -C^COOR1, -CH2C0NH2 eller —^ N02 , no2 hvor R1 er en lavere alkylgruppe, og X er et halogenatom, i et surt vandigt medium eller et surt vandholdigt organisk medium.
Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen opløses 3-methyl-mercaptopropylaminobleomycin i en sur vandig opløsning indeholdende en mineralsyre, såsom saltsyre, brombrintesyre, svovlsyre, eller en organisk syre, såsom myresyre, eddikesyre, trifluor-eddikesyre eller vinsyre, og derefter tilblandes opløsningen ovennævnte halogenid, såsom cyanogenbromid (BrCN), jodeddikesyre (ICH2COOH), ethyl-bromacetat (BrCH2C00C2H^), jodaeetamid (ICH2C0NH2) eller 2,4-dinitrofluorbenzen (F—f y—N02) i et forhold på 1-50 mol, fortrinsvis 3—30 mol halogenid i forhold til 3-methylmercaptopropylaminobleomycin og omsættes ved 0-90°C, fortrinsvis i fra 14-48 timer.
Por at forøge opløseligheden af halogenidforbindelsen er det hensigtsmæssigt at tilsætte et organisk opløsningsmiddel, såsom methanol, acetone, dioxan, dimethylsulfoxid, dimethylformamid eller methylcellosolve.
Ifølge ovennævnte reaktion knyttes halogenforbindelsen til S-atomet i 3-methylmereaptopropyl-gruppen (I) for at indføre N0„ hvor R har den ovenfor angivne betydning, således at der dannes en sulfoniumsaltstruktur (II). Derefter fjernes denne gruppe sammen med methylmercaptotruppen til dannelse af en iminolactonstruktur (III),og derefter hydrolyseres iminobindingen til dannelse af en 5 149200 esterbinding, hvorved 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre (IV) fremkommer.
Reaktionstemperaturen er sædvanligvis stuetemperatur, selvom omdannelsen fra strukturen (II) til strukturen (IV) undertiden fremmes ved at opvarme reaktionsblandingen til 80-90°C i 30-40 minutter i det tilfælde, hvor bestemte halogenforbindelser, f.eks. jodacetamid, anvendes.
Når pH for den vandigeopløsning er under 1,0, er det at foretrække at afkøle til ca. 0°C for at hindre sidereaktioner for bleomycinet. Reaktionen fremgår af nedenstående reaktionsskema, der viser den endestillede -COR-gruppe i bleomycin.
ch2 - ch2 ch2 - ch2 / \ RX / \ -C - NH CH7 -» - C - NH CH2
o S O R - S - XU
I 1 ch3 ch3 il) (II) s > - (R-S-CH3) ^N-CH2 > -C CH2 \ s c
l °-ch2 J
(III) Θ Θ h3o o h3n-ch^ -:-* -C CH2 o — ch2 .
(IV) hvor R har den ovenfor angivne betydning.
6 149200
Efter reaktionen fjernes overskud af halogenforbindelse.
En flygtig forbindelse, såsom cyanogenbromid,afdrives f.eks. ved formindsket tryk.
I det følgende er der anført en kort omtale vedrørende ion-bytteharpikser, gelfiltreringsmiddel, adsorbent og tyndlags chroma-tografiplader, der er benyttet ved de udførte forsøg.
"CM-Sephadex C-2511 (Sephadex er et i DK reg.varemærke)
Handelsnavn for et tørt uopløseligt pulver bestående af mikroskopiske kugler af syntetisk organiske forbindelser indeholdende earboxymethylgrupper afledt af dextranpolysaccharid fremstillet og markedsført af firmaet Pharmacia Pine Chemicals, Inc.
"Amberlit^CG-So» "Amber lit#45::
Handelsnavn for en ion-bytteharpiks fremstillet og markedsført af firmaet Rohm and Haas Co.
nDowex®W (OH -type)
Handelsnavn for en ion-bytteharpiks fremstillet og markedsført af firmaet The Dow Chemical Co.
,rSephadex®G-2ff:
Handelsnavn for et gelfiltreringsmiddel bestående af et dextran derivat fremstillet af firmaet Pharmacia Pine Chemicals, Inc.
'Silicagel G':
Handelsnavn for en adsorbent til tyndlags chromatografi bestående af silicagel og gips fremstillet af firmaet Merck Inc.
"Avicel®Sff';
Handelsnavn for en tyndlags chromatografiplade bestående af krystallinsk cellulose fremstillet af firmaet PMC Corporation.
"Amberlist 15': '
Handelsnavn for en ion-bytteharpiks fremstillet og markedsført af firmaet Rohm and Haas Co.
" Amb e r 1 ItffilAD - 2':
Handelsnavn for en adsorbent harpiks bestående af styren-di- 3 vinylbenzen copolymer fremstillet og markedsført af firmaet Rohm and Haas Co.
Det er at foretrække at fjerne overskud af f.eks. jodeddikesyre eller 2,4-dinitrofluorbenzen ved at ekstrahere det med et organisk opløsningsmiddel, såsom æter. Reaktionsopløsningen neutraliseres derefter med en vandig natriumhydroxidopløsning til pH på 4,5“5j0. Efter neutralisationen adsorberes produktet og ikke-omsat bleomycin af en svagt sur ion-bytteharpiks, såsom "Amberlite® CG-50"(H+-type)(handelsnavn for firmaet Rohm and Haas Co.) ved at føre opløsningen gennem en søjle pakket 7 149200 med nævnte ionbytterharpiks og fyldt med destilleret vand.
Søjlen vaskes med vand og derefter med en o,1-1,o# vandig eddikesyreopløsning og den elueres derefter med en sur methanol-vand-blanding såsom en blanding af 5o# methanol-o,o2 N HC1, således at der opsamles en fraktion med maksimal absorption ved 29o mp . Fraktionen blandes med pyridin, således at den indstilles på pH 4,5-5,0. Produktstrømmen koncentreres og tørres ved formindsket tryk til opnåelse af et råpulver. Produktet bringes i kontakt med en søjle af "CM-Sephadex C-25" (handelsvare fremstillet af Pharmacia Fine Chemicals, Inc.), der er bufferet med 0,05 M-pyridineddikesyre-stødpudeopløsning med pH på 4,5.
Reaktionsproduktet og det ikke-omsatte bleomycin kan adskilles i hver sin fraktion ved eluering med en pufferopløsning me'd samme pH ved gradvis af forøge koncentrationen af pyridineddikesyre-pufferopløsningen fra 0,05 M til 0,5 M. Det vil sige det ikke-omsatte bleomycin elueres med 0,3 M pyridineddikesyre-pufferopløsning, medens 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre elueres med 0,5 M pyridineddikesyre-puf feropløsning. I overensstemmelse hermed opsamles afløbet af 0,5 M opløsningen og tørres, og produktet genudfældes fra metha-nolether til opnåelse af et amorft pulver af dieddikesyresaltet af 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre, og produktet bringes i kontakt med "Amberlite® IR-45' [(Cl -type)] (handelsvare fra Rohm and Haas Co.) ved at føre det gennem søjlen, der er pakket med nævnte ionbytteharpiks, således at dihydrochloridet af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-complex) opnås. De fysisk-kemiske egenskaber af dihydrochloridet af 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre (Cu-complex) er anført i nedenstående tabel I.
TABEL I
(1) Udseende blåt amorft pulver · (2) Opløselighed opløselig i vand, methanol og eddike syre, i ringe grad opløselig i dime-thylsulfoxid og uopløselig i ethanol, acetone, æter og benzen.
(3) Reaktion positiv ved ninhydrin-reaktion, Dra- gendorf-reaktion, Pauly-og Ehrlich-re-aktion, negativ ved Toliens reaktion, ferrichlorid-reaktion, Fehling- og Molisch-reaktion og Sagaguchi-reaktion.
149200
; O
TABEL I (fortsat) (4) Smeltepunkt (dekomponerer ved 201-203°C) (5) Specifik drejning . H ^ = -78,6° (c. = 0,1, destilleret vand) (6) Tyndlags-chromatografi (Rfværdi) x (a) o,74 (b) o,5o (7) Papir-chromatografi (R„værdi) o,8o (HToyo"-filterpapir nr. 51: lo# ammonium ehlorid) (8) . Papir elektrophorese (Rm værdi — alanin: l,o) o,815 (ved 3ooo V i 4o min.,) (25: 75: 9oo myresyre:) (eddikesyre: vand ) (9) Ultraviolet maksimumabsorption my (E^m) 29o my- (131) 246 my (147) i destilleret vand (10) Infrarødt absorptions- ved 34oo, 172o, l66o, l64o, spektrum (KBr metode) 15lli 1ή6°* 12203 lo5°> 765 (cm-1) (11) Grundstofanalyse (%)
som C^^H^gN1g022S2Cu, 2HC1, HgO
Beregnet C: 42,21; H: 5,35; N: 14,87; 0: 24,4o; S: 4,25; Cl: 4,70; Cu: 4,21
Pundet C: 41,82; H: 5,41; N: 15,31; 0: 24,52; S: 4,19; Cl: 4,46; Cu: 4,22 x) (a) ’Silicagel G” methanol: lo# ammonium acetat =1:1 (b)"Avieel SF" n-propanol: pyridin: eddikesyre:vand = 15 : lo:3:12
Det ultraviolette absorptions spektrum for produktet er vist 9 149200 på fig. 1, og det infrarøde spektrum for produktet bestemt ved hjælp af KBr-tabletmetoden er vist på fig. 2.
Når produktet blev fuldstændigt hydrolyseret i 6N-HC1, fandtes intet 3-methylmercaptopropylamin, som forekom i udgangsmaterialet, 3-methylmereaptopropylamino bleomycin, men i stedet 3-aminopropanol. Ved 2, 4-dinitrofluorphenyl-reaktionen blev amino-gruppen i 3-aminopropanol bragt til at reagere med 2,4-dinitrofluor-phenylgruppen.
Ved sammenligning med udgangsforbindelsen 3-methylmercapto-propylaminobleomycin var NMR-spektret (i tungt vand, ved 100 MHz og tetramethylsilan som ydre standard) for produktet ikke forskelligt med undtagelse af, at den ikke udviste 62,50 milliontedele (3 proton enkeltspektrallinie), og det infrarøde spektrum for produktet var' ikke forskelligt med undtagelse af, at absorptionen steg ved 1720 cm 1 som følge af estercarbonyl-gruppen. Ovennævnte forhold og de fysisk-kemiske egenskaber, der er anført i ovenstående tabel viser, at produktet var 3-aminopropylesteren af bleomycin.
Den resulterende 3-aminopropylester af bleomycinsyre kunne let omdannes til bleomycinsyre. Nærmere bestemt blev hydrochloridet eller acetatet af 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre opløst i destilleret vand, og opløsningen blev indstillet på pH 2,0-5,5 ved tilsætning af saltsyre eller vandig natriumhydroxidopløsning. Opløsningen opvarmedes til 40-120°C i en autoklave eller en åben reaktor til hydrolyse og selektiv fjernelse af den endestillede gruppe i 3-aminopropylgruppen som 3-aminopropanol til dannelse af bleomycinsyre.
Ved reaktionen er pH-området den vigtige faktor. Ved pH over 5,5 er sidereaktionen til fremstilling af 3-hydroxypropylamino-bleomyein ved Ν,Ο-acylomlejring dominerende i forhold til hydrolysen af esterbindingen, hvorved fremstillingen af bleomycinsyre bliver temmelig nedsat. Ved pH under 5,5 forøges hydrolysehastigheden af esterbindingen i afhængighed af pH-faldet, men en sidereaktion med dekomponering af glycosidbindinger fremkaldes imidlertid samtidig, når pH er for lav. På baggrund af ovenstående er det optimale pH-område følgelig fra 2 til 5,5· Reaktionstidsrummet kan vælges indenfor området 1-24 timer afhængigt af pH-værdien og reaktionstemperaturen.
Por at isolere reaktionsproduktet neutraliseres reaktionsopløsningen med en vandig opløsning af natriumhydroxid til en pH-værdi på 6-7, og derefter fortyndes opløsningen med vand, således at der opnås en uorganisk saltkoncentration under o,.o5 M, og den fortyndede 10 149200 opløsning føres gennem en søjle pakket med "CM-Sephadex C-25" (Na+-type) (handelsvare eller"Amberlite® CG-50"(Na+-type)(handelsvare). Produktet elueres med destilleret vand, hvorved bleomycin-syren, der ikke er adsorberet, elueres, medens den ikke-reagerede 3-aminopropylester af blebmycinsyre stadig er adsorberet. Pølgelig opsamles den fraktion indeholdende bleomycinsyre, som har maksimal absorption ved 292 my. Afløbet bringes endvidere i kontakt medrtAm-berlite® XAD-2"(handelsvare) eller aktivt carbon ved søjleehromato-. grafiadsorption og elueres dernæst til afsaltningsbehandling, og eluatet neutraliseres til indstilling af pH på 6-7, hvorefter det koncentreres og tørres til opnåelse af et amorft pulver af bleo-myeinsyre. Specielt fra en sur opløsning med et pH på under 4,5 opnås det amorfe pulver af bleomycinsyre som monohydrochlorid. De fysisk-kemiske egenskaber af bleomyeinsyren (Cu-complex) er vist i nedenstående tabel II.
TABEL II
(.1) Udseende blåt amorft pulver (2) Opløselighed opløselig i vand, ringe opløselig i • methanol, eddikesyre og dimethylsul- foxid samt uopløselig i ethanol, acetone, æter og benzen.
(3) Reaktion positiv ved Pauly-og Ehrlich-reaktion, negativ ved Dragendorff-reaktion, ninhydrinreaktion, Tollens reaktion, ferrichloridreaktion, Pehling-og - Molisch-reaktion og Sakaguchi-reaktion.
(4) Smeltepunkt 224-227°C
(dekomponering) 228-23o°C (hydrochlorid) (5) Specifik drejning [bf] -84,6° |V| -81,5° (hydrochlorid) (C = 0,1, destilleret vand) (6) Tyndlags-chromatografi x) (a) 0,78 (Rj værdi) (b) o,46 (7) Papir chromatografi 0,86 ("Toyo"-filterpapir nr. 51, 1055 (R^ værdi) ammoniumchlorld) n 149200 TABEL II (fortsat) (8) Papir elektrophorese 0,65 (Rm værdi ... alanin: l,o) (ved 3000 V i 4o min., 25:75:900 myresyre: eddikesyre: vand) (9) Ultraviolet maksimumabsorption my (E^ ) 292 my (145) 1 cm 246 my (148) i destilleret vand (10) Infrarød absorptions- ved 335ο, 172ο, 1670, 164ο, 1580, l46o, spektrum (KBr metode) 1365, lo5o, 77° (cm ^) (11) Grundstofanalyse (%) som C5oH69N15022S2Cu
Beregnet C: 44,16; H: 5,11; N: 15,45 0: 25,88; S: 4,72; Cu: 4,67
Fundet C: 43,56; H: 5,27; N: 16,25; 0: 25,60; S: 4,68; Cu: 4,51 x) (a) "Silicagel G"methanol: lo# ammonium acetat: lo# ammoniakvand = lo:9:1 (b)"Avicel SF" n-propanol: pyridin: eddikesyre: vand = 15:lo:3:12
Det ultraviolette absorptionsspektrum for produktet er vist på fig. 3, og det infrarøde spektrum for produktet bestemt ved hjælp af KBr tabletmetoden er vist på fig. 4. Når produktet blev fuldstændig hydrolyseret i 6N-HC1, blev der ikke dannet en forbindelse med endestillet aminogruppe som R. Når den resulterende bleomycinsyre blev esterificeret ved opløsning i methanol-saltsyre og henstand ved stuetemperatur i 48 timer blev methylesteren fremstillet. Når methyl-esteren blev reduceret med LiBH^ i vandfri tetrahydrofuran og yderligere fuldstændig hydrolyseret, og hydrolysatet undersøgtes ved 2-dimens ional chromatografi (første dimension: højspændingspapirelek-trophorese: myresyre : eddikesyre : vand = 25:75:900, anden dimension af papirchromatografi: n-propanol : pyridin : eddikesyre : vand = 15:10:3:12. "Toyo"-filterpapir nr. 51: opstigende metode) fandtes 12 149200 det, at 2,-(2-aminoethyl)-2,4'-bithiazol-4-carbinol var blevet dannet i stedet for 2’-(2-aminoethyl)-2,4'-bithiazol-4-carboxylsyre.
Når bleomycinsyre blev behandlet med den stærkt sure ionbytterharpiks,"Amberlist 15" (H+-type)(handelsvare) som katalysator for methanolysen, og methanolysatet blev omdannet til trimethyl-silylforbindelsen og blev undersøgt ved gasehromatografi fandtes det, . at 1 mol L-gulose og 1 mol af 3-O-earbamoyl-D-manhose var blevet frembragt som methylglycosid.
Ud fra ovennævnte resultater og de fysisk-kemiske egenskaber, der er anført i tabel II konkluderedes det, at produktet var bleomycinsyre.
Bleomycinsyren, der er fremstillet ud fra bleomycinsyre-esteren ifølge den foreliggende opfindelse, har en svag antitumorvirkning, men det er imidlertid muligt at indføre enhver form for amin i den endestillede carboxylgruppe ved en kemisk reaktion uden den begrænsning, der forekommer i forbindelse med de kendte forgæringsprocesser til fremstilling af bleomyeiner.
Følgelig er bleomycinsyre en ret betydningsfuld forbindelse. F.eks. kan det hidtil ukendte benzylaminobleomycin (R = -NHCH2 -O i ovenstående formel), der ikke kan fremstilles ved forgæring, fremstilles ved at koble benzylamin med bleomycinsyre, og produktet har følgende egenskaber. Produktet er et farveløst amorft pulver, der gradvis dekomponerer ved temperaturer over 2l8°C, og som har maksimal ultraviolet absorption (i destilleret vand) ved 243 my (E**cm = 158,0) og ved 293 (E^cm = 120,5).
Produktets antimikrobielle virkning overfor Mycobacterium smegmatis 607 var 2,367 y/mg. Produktets væksthæmningsvirkning overfor dyrkede cancerceller (HeLa S^) er vist i nedenstående tabel VI.
Tabel VI.
Dosis (mcg/ml) 6 3 1*5 -Hæmningsvirkning (%) 92 73 38
Produktets karakteristiske egenskaber vil fremgå af det følgende. Produktet blev indgivet i ICR-SLC hanmus ved intraperitoneal injektion i et omfang på 10 mg/kg over et tidsrum på 10 dage.
Musene blev opdrættet i 5 uger efter den afsluttende indgivelse og 13 149200 derefter aflivet, Højre og venstre lunge blev undersøgt mikroskopisk. Graden af fibrosis var ret lav sammenlignet med den, der opstår i forbindelse med de kendte bleomyciner B2 som vist i nedenstående tabel VII. Almindeligvis er fibrosis i lunger bleomyciners hovedbivirkning i det menneskelige legeme. Det kan forventes, at der kan opnås forskellige hidtil ukendte bleomyciner med mindre bivirkning ved derivatfremstilling ud fra bleomycinsyre fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse.
Tabel VII.
Lunge Grad af fibrosis*_ - ± + ++
Bleomycin B2 Venstre 5 1-3 1 Højre 4 3 3 0
Benzylaminobleomycin Venstre 8 1 1 0 Højre 7 3 0 0
X
Antal prøver Grader af fibrosis - : fravær af fibrosis ± : forekomst af områder med tvivlsom fibrosis + : nogle få foci af ++ : spredte foci af fibrosis, fibrosis
Udgangsmaterialet 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin kan fremstilles ved demethylering af bleomycin A2, 3-(S,S-dimethylmercapto)-propylamino-bleomycin, der fremstilles ved at dyrke den bleomyein-producerende mikroorganisme Streptom'yces verticillus i et nærings-medium ved ca. 80-120°C i ca, 3-24 timer ved normal-t tryk, højt tryk eller formindsket tryk. Det er muligt at tilsætte et medium, der ikke opløser bleomycin A2, såsom toluen, xylen og benzen.
Det resulterende 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks, hydrochlorid) er et blåt pulver, der gradvis dekomponerer ved 201-212°C og er opløselig i vand eller methanol, men er uopløselig i ethanol, propanol, butanol og ethylacetat.
Undertiden er det at foretrække at anvende Cu-komplekset af 3“ methylmercaptopropylamino-bleomycin eller 3-aminopropylesteren af bleo- • + + mycmsyre, der er en chelatforbindelse af et Cu , af følgende grunde.
14 149200 + + ·
Ved at chelatere Cu mindskes sidereaktionen, og placeringen af bleomycinet er synlig i en chromatografikolonne som følge af den blå farve, der følger af Cu-chelatdannelsen.
Det er imidlertid muligt at anvende det Cu-fjernede produkt, der fremstilles ved den kendte Cu-fjernelsesmetode, som udgangsmateriale i forbindelse med den foreliggende opfindelse, selv om nævnte fordele ikke kan forventes opnået.
Som anført ovenfor, er bleomycinsyre en nyttig forbindelse, som kan benyttes udgangsmateriale til fremstilling af nye syntetiske bleomyciner, såsom det hidtil ukendte benzylaminobleomycin. 3-Amino-propylesteren af bleomycinsyre anvendes-som mellemprodukt ved fremstilling af bleomycinsyre.
Fremstilling og anvendelse af mellemproduktet ifølge den foreliggende opfindelse belyses nærmere af nedenstående eksempler.
Eksempel 1.
1,0 g hydrochlorid af 3-methylmercaptopropylamino-bleomyein (Cu-kompleks) blev opløst i 20 ml 1% vandig trifluoreddikesyreopløs-ning,og 2,0 g cyanogenbromid blev tilsat under omrøring. Reaktions-opløsningen havde et pH på 0,7. Reaktoren blev lukket, og indholdet omrørt ved 27°C i 18 timer, og overskud af cyanogenbromid blev afdrevet ved formindsket tryk, og 2N-vandig natriumhydroxidopløsning blev tilsat under kraftig omrøring, og opløsningen blev indstillet på en pH-værdi på 5,1.
Opløsningen blev tilført en søjle (150 ml) pakket med"Amberlit^* CG-50"(H+ type) fyldt med destilleret vand og derefter i stigende grad vasket med 400 ml 0,3¾ vandig eddikesyreopløsning og 200 ml destilleret vand. Efter vask blev den blåfarvede fraktion indeholdende bleomycin elueret og opsamlet ved at føre 0,02N HCl-methanol (1:1) gennem,og derefter blev methanolet afdrevet ved formindsket tryk. Den resterende opløsning blev indstillet til pH 4,5 ved tilsætning af pyridin og derefter tilført en søjle (100 ml) pakket med "CM-Sephadex C-2^', der var pufret med 0,05N-pyridineddikesyrestødpudeopløsning med et pH på 4,5 for at adsorbere bleomycin.
Endvidere blev 100 ml 0,2N-pyridineddikesyrestødpudeopløsning med det samme pH ført igennem, og derefter blev 100 ml 0,3N-pyridin-eddikesyrestødpudeopløsning med det samme pH ført igennem, hvorved det ikke-reagerede bleomycin begyndte at blive elueret. Følgelig blev 100 ml af den første fraktion opsamlet til udvinding af 254 mg af 15 149200 udgangsmaterialet bleomycin. Når yderligere 80 ml af fraktionen blev elueret, blev der yderligere tilført 115 ml 0,5N-pyridin-eddikesyre-stødpudeopløsning, hvorved 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre begyndte at blive elueret. I overensstemmelse hermed blev der opsamlet 200 ml af den blåfarvede fraktion og koncentreret ved formindsket tryk og tørret.
Produktet blev opløst i methanol-ether og genudfældet til opnåelse af 528 mg blåfarvet amorft pulver af acetatet af 3-aminopropyl-ester af bleomycinsyre (Cu-kompleks), der blev tilført i en søjle (20 ml) pakket med en svag basisk ionbytterharpiks "Amberilte IR-45" (Cl -type). Afløbet blev koncentreret og tørret til opnåelse af 497 mg blåfarvet amorft pulver af dihydrochloridet af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 2.
100 mg hydrochlorid af 3-methylmercaptopropylaminobleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i en blanding af 1 ml 0,2N-HC1 og 1 ml methanol, og 52,3 mg iodacetamid blev tilsat under omrøring.
Blandingen blev omrørt ved 27°C i 20 timer i et lukket rør. Overskud af iodacetamid blev ekstraheret med ether for at fjerne dette. Den resterende opløsning blev opvarmet til 85°C i 35 minutter og derefter indstillet til pH på 5,0 ved tilsætning af vandig 2N-natriumhydroxidopløsning. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 1 blev produktet isoleret til opnåelse af 29,5 mg dihydro-chlorid af 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 3.
100 mg hydrochlorid af 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i 2 ml 95¾ eddikesyre, og 240 mg cyanogen-bromid blev tilsat under omrøring. Blandingen blev omrørt ved 27°C i 24 timer i et lukket rør. Overskud af cyanogenbromid blev afdrevet ' ved formindsket tryk, Og reaktionsopløsningen blev indstillet på pH
5,1 ved tilsætning af vandig 2N-natriumhydroxidopløsning. I overensstemmelse med fremgangsmåden ifølge eksempel 1 blev produktet isoleret til opnåelse af 17,9 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
16 149200
Eksempel 4.
100 mg hydrochlorid af 3-methylmereaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i 2 ml 0,13N-brombrintesyre,og 100 mg cyanogenbromid blev tilsat under omrøring. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 3 blev reaktionsblandingen behandlet til opnåelse af 29,6 mg af dihydrochloridet af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 5« 100 mg hydrochlorid af 3-methylmereaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i en blanding af 1 ml 0,2N-HC1 og 1 ml ethanol, og der blev tilsat 47,7*1 mg ethylbromacetat under omrøring. Blandingen blev omrørt ved 27°C i 20 timer i et lukket rør. Overskud af ethylbromacetat blev ekstraheret med ether, og den resterende opløsning blev indstillet på pH 5,0 ved tilsætning af 2N-natrium-hydroxid. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 1 blev produktet behandlet til opnåelse af 92 mg dihydrochlorid af 3~amino-propylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 6.' 100 mg hydrochlorid af 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i 4 ml vandig 1% trifluoreddikesyreopløs-ning, og der blev tilsat 36,06 mg iodeddikesyre under omrøring. Blandingen blev omrørt ved 27°C i 24 timer i et lukket rør. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 1 blev produktet behandlet til opnåelse af l4 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 7.
100 mg hydrochlorid af 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i en blanding af 1 ml 0,2N-myresyre og 1 ml acetone, og der blev tilsat 250 mg 2,4-dinitrofluorbenzen. Blandingen blev omrørt ved 27°C i 48 timer i et lukket rør. Overskud af 2,4-dinitrofluorbenzen blev elueret med ether for at fjerne dette og derefter indstillet på pH 5,0 ved tilsætning af 2N-natriumhydroxid. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 1 blev produktet behandlet til opnåelse af 8 mg dihydrochlorat af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
149200 17
Eksempel 8.
100 mg hydrochloric! af 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin (Cu-kompleks) blev opløst i 2 ml lN-E^SOjj, og derefter blev der tilsat 100 mg cyanogenbromid under omrøring. Blandingen blev omrørt ved 0°C i 48 timer i et lukket rør. Overskud af cyanogenbromid blev afdrevet ved formindsket tryk, og reaktionsopløsningen blev indstillet på pH 5,0 ved tilsætning af 2N-natriumhydroxid. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 1 blev produktet behandlet til opnåelse af 26 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 9· 100 mg hydrochlorid af 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin (Cu-fjernet) blev opløst i 2 ml 0,1N-HC1, og 200 mg cyanogenbromid blev tilsat. Blandingen blev omrørt ved 27°C i 24 timer i et lukket rør. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 1 blev produktet isoleret til opnåelse af 24 mg lysegult pulver af dihydrochloridet af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-fjernet). Produktet blev opløst i vand, og 10 mg basisk kobbercarbonat blev opslæmmet heri og omrørt i 30 minutter. Overskud af basis kobbercarbonat blev frafiltreret, og filtratet blev behandlet ved hjælp af søjlechromatografi ved © tilførsel til en søjle pakket med"Sephadex G-25"til opnåelse af 25 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 10.
1,0 g dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomycinsyre (Cu-kompleks) blev opløst i 10 ml destilleret vand, og opløsningen blev indstillet på pH 4,0 ved tilsætning af 0,1N-HC1. Blandingen blev opvarmet til 105°C i 6 timer i et lukket rør. Reaktionsopløsningen blev indstillet på pH 6,5 ved tilsætning af 0,lN-natriumhydroxid og blev ført gennem en søjle pakket med 20 ml"CM-Sephadex C-25" (Na+-type). Efter fjernelse af 10 ml af det første afløb blev 50 ml destilleret vand ført gennem· søjlen, hvorved alt den resulterende bleomycinsyre blev opsamlet i fraktionen. Opløsningen blev tilført ® en søjle (100 ml) pakket med ikke-ionisk harpiks "Amberlite XAD-2" fyldt med destilleret vand til adsorption af bleomycinsyre. Efter vask af søjlen med 200 ml destilleret vand blev produktet elueret med 200 ml af en blanding af 0,0025N-HC1 og methanol (1:1). Bleomycinsyre blev elueret i 70 ml af den sidste fraktion. Afløbet blev indstillet på pH 6,5 under anvendelse af"Dowex 44" (OH -.type), og opløsningsmidlet blev koncentreret og tørret og genudfældet i acetone indeholdende vand til opnåelse af 780 mg blåfarvet amorft pulver af bleomycinsyre 18 149200 (Cu-kompleks). Når søjlen af'CM-Sephadex C-25" blev behandlet med 0,5M-NaCl blev der udvundet 185 mg ikke-reageret biDsomycirisyreester.
Eksempel 11.
1,0 g dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomyeinsyre (Cu-kompleks) blev opløst i 20 ml destilleret vand, og opløsningen blev indstillet på pH 2,5 ved tilsætning af 0,1N-HC1. Blandingen blev opvarmet til 100°C i 1 time, og reaktionsopløsningen blev indstillet på pH 6,5 ved tilsætning af Ο,ΙΝ-natriumhydroxid og tilført en søjle ® + (50 ml) pakket med "Amberlite CG~50"(Na -type) fyldt med destilleret vand. Efter fjernelse af 20 ml af det første afløb blev der tilført 150 ml destilleret vand til søjlen, og al bleomyeinsyre blev opsamlet i fraktionen. Opløsningen blev ført gennem en søjle (50 ml) pakket med aktivt carbon (chromatografikvalitet fremstillet af firmaet Wako Junyaku K.K.) fyldt med destilleret vand til adsorption af bleomyeinsyre. Efter vask med 200 ml destilleret vand blev produktet elueret med 150 ml af en blanding af 0,1N-HC1 og acetone (1:1), hvorved bleomyeinsyre blev udludet i 100 ml af den afsluttende fraktion.
I overensstemmelse med fremgangsmåden ifølge eksempel 10 blev produktet behandlet til opnåelse af 420 mg bleomyeinsyre (Cu-kompleks).
415 mg ikke-reageret bleomycinsyreester blev udvundet.
Eksempel 12.
100 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomyeinsyre (Cu-kompleks) blev opløst i 2 ml destilleret vand, og opløsningen blev indstillet på pH 3S0 ved tilsætning af 0,1 N-HC1. Blandingen blev opvarmet til 105°C i 6 timer i et lukket rør. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 10 blev produktet isoleret til opnåelse af 83 mg bleomyeinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 13.
100 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomyeinsyre (Cu-kompleks) blev opløst i 2 ml destilleret vand og indstillet på . pH 5,5 ved tilsætning af 0,1N-HC1, og blandingen blev opvarmet til 120°C i 24 timer i et lukket rør. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 10 blev produktet isoleret til opnåelse af 68 mg bleomyeinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 14.
100 mg diacetatsalt af 3-aminopropylester af bleomyeinsyre .(Cu-kompleks) blev opløst i 2 ml destilleret vand og indstillet, til pH 2,0, og blandingen blev opvarmet til 80°C i 6 timer. I overensstemmelse med eksempel 10 blev produktet isoleret til opnåelse af 149200 19 72 mg bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 1'5.
100 mg dihydrochlorid af 3-åminopropylester af bleomycinsyre (Cu-fjernet) blev opløst i 2 ml destilleret vand og indstillet på pH 4,5 ved tilsætning af 0,1N-HC1. Blandingen blev opvarmet til 105°C i 6 timer i et lukket rør. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 10 blev produktet isoleret til opnåelse af 43 mg farveløst amorft pulver af bleomycinsyre (Cu-fjernet). Produktet blev behandlet til forbindelse med kobber i overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 9 til opnåelse af 45 mg bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 16.
100 mg dihydrochlorid af 3-aminopropylester af bleomycinsyra (Cu-fjernet) blev opløst i 2 ral destilleret vand og indstillet på pH 5,0 ved tilsætning af 0,1N-HC1. Blandingen blev opvarmet til 120°C i 24 timer i et lukket rør. I overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 10 blev produktet isoleret til opnåelse af 45 mg bleomycinsyre (Cu-fjernet). Produktet blev behandlet til forbindelse med kobber i overensstemmelse med fremgangsmåden i eksempel 9 til opnåelse af 42 mg bleomycinsyre (Cu-kompleks).
Eksempel 17.
Fremstilling af benzylaminobleomycin-Cu-complex,mono- i _._hydrochlorid_ 250 mg monohydrochlorid af bleomycinsyre (Cu-complex) blev opløst i 5 ml dimethylformamid. En opløsning, der var fremstillet ved opløsning af 187 mg dicyclohexylcarbodiimid i 1 ml dimethyl-formamid blev tilsat denne opløsning under omrøring og afkøling med is, og reaktionen fik lov til at forløbe ved en temperatur på fra 0 til 5°C i 20 timer. Til reaktionsopløsning blev tilsat 50 ml diethylether, hvorved der dannedes et blåt præcipitat. Præ-cipitatet blev indvundet ved filtrering og blev igen opløst i dimethylformamid og afkølet til en temperatur på 0-5°C. Der blev derpå tilsat 194 mg benzylamin og reaktionen fik lov til at forløbe i 16 timer. Til reaktionsopløsningen blev tilsat 50 ml diethylether, hvorved der dannedes et blåt præcipitat. Præcipitatet blev opsamlet ved filtrering og derpå underkastet isolering og rensning på samme måde som i eksempel 1, hvorved der opnåedes 8l mg monohydrochlorid af benzylaminobleomycin-Cu-complex. Udbyttet var 31$, og produktet var et blåt amorft pulver med følgende ultraviolette absorptionstoppe og antimikrobiel aktivitet: 20 149200 ί y
Ultraviolette absorptionstoppe: , *· destilleret vand) 243(158,0), 293 (120,5)
Antimikrobiel aktivitet: 2367 u/mg (Mycobacterium smegmatis ATCC 607)·
Claims (2)
1. Bleoraycinsyreester til anvendelse som mellemprodukt ved fremstilling af bleomycinsyre, kendetegnet ved, at den er 3-aminopropylesteren af bleomycinsyre med formlen:
0 NH0 u I 2 A. /CH NHp 2 xc6 2 U O T 0 U ΙΓΝ CH, „ O N-r °CH2CH2CH2NH2 Λ,Α HOx ✓CH A 1 Jlh ra2 Y Y o (j!H xo (pir n—\\S E CH3 !ΝΟΗ/0νί·Ι'ΟΗΝΟΗ° a j H * É ^ Cil2 u-c^c''\ H 5 ohh a · ηΑ0^\°Η90Η H1h ^ eller et syresalt eller kobberkompleks heraf.
2. Fremgangsmåde til fremstilling af bleomycinsyreesteren ifølge krav 1, kendetegnet ved, at 3-methylmercaptopropylamino-bleomycin eller et syresalt heraf bringes til at reagere med en halogenforbindelse med formlen: R - X hvor R er -CN, -CH2COOH, -C^COOR1, -CH2C0NH2 eller N02
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1602072 | 1972-02-17 | ||
| JP1602072A JPS5547039B2 (da) | 1972-02-17 | 1972-02-17 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK149200B true DK149200B (da) | 1986-03-10 |
| DK149200C DK149200C (da) | 1986-08-04 |
Family
ID=11904873
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK84373A DK149200C (da) | 1972-02-17 | 1973-02-16 | Bleomycinsyreester til anvendelse som mellemprodukt ved fremstillingaf bleomycinsyre samt fremgangsmaade til fremstilling af bleomycinsyreesteren |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US3886133A (da) |
| JP (1) | JPS5547039B2 (da) |
| AR (1) | AR195903A1 (da) |
| AU (1) | AU466969B2 (da) |
| CA (1) | CA971165A (da) |
| DE (1) | DE2307976C3 (da) |
| DK (1) | DK149200C (da) |
| FR (1) | FR2181741B1 (da) |
| GB (1) | GB1364036A (da) |
| NL (1) | NL170961C (da) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1540466A (en) * | 1975-10-29 | 1979-02-14 | Meiji Seika Kaisha | Antibiotic polypeptides sf-1771 and sf-1881-b and production thereof |
| US3986125A (en) * | 1975-10-31 | 1976-10-12 | Sperry Univac Corporation | Phase detector having a 360 linear range for periodic and aperiodic input pulse streams |
| US4339426A (en) * | 1980-03-18 | 1982-07-13 | Regents Of The University Of California | Bleomycin analog |
-
1972
- 1972-02-17 JP JP1602072A patent/JPS5547039B2/ja not_active Expired
-
1973
- 1973-02-07 AR AR246470A patent/AR195903A1/es active
- 1973-02-12 NL NLAANVRAGE7301942,A patent/NL170961C/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-02-16 FR FR7305539A patent/FR2181741B1/fr not_active Expired
- 1973-02-16 CA CA163,939A patent/CA971165A/en not_active Expired
- 1973-02-16 DK DK84373A patent/DK149200C/da not_active IP Right Cessation
- 1973-02-16 GB GB785673A patent/GB1364036A/en not_active Expired
- 1973-02-17 DE DE2307976A patent/DE2307976C3/de not_active Expired
- 1973-02-19 AU AU52311/73A patent/AU466969B2/en not_active Expired
- 1973-02-20 US US333629A patent/US3886133A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE2307976A1 (de) | 1973-08-23 |
| JPS4885580A (da) | 1973-11-13 |
| NL170961B (nl) | 1982-08-16 |
| AU5231173A (en) | 1974-08-22 |
| DE2307976C3 (de) | 1980-08-07 |
| FR2181741B1 (da) | 1976-10-22 |
| AU466969B2 (en) | 1975-11-13 |
| CA971165A (en) | 1975-07-15 |
| FR2181741A1 (da) | 1973-12-07 |
| DE2307976B2 (de) | 1979-12-06 |
| NL7301942A (da) | 1973-08-21 |
| JPS5547039B2 (da) | 1980-11-27 |
| NL170961C (nl) | 1983-01-17 |
| US3886133A (en) | 1975-05-27 |
| GB1364036A (en) | 1974-08-21 |
| AR195903A1 (es) | 1973-11-15 |
| DK149200C (da) | 1986-08-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU624130B2 (en) | Gabapentin monohydrate and a process for producing same | |
| Argoudelis et al. | New amino acids from Streptomyces | |
| JPS61227529A (ja) | アクタガルジンの塩基性モノアミド誘導体及びその付加塩 | |
| AU622197B2 (en) | BU-3608 derivatives | |
| DK149200B (da) | Bleomycinsyreester til anvendelse som mellemprodukt ved fremstillingaf bleomycinsyre samt fremgangsmaade til fremstilling af bleomycinsyreesteren | |
| US4428875A (en) | Compounds of dichlorodiethylaminophenylalanine with anti-tumor activity | |
| US4089947A (en) | Antibiotic compositions containing validamycin compounds | |
| DK149775B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af 6'-n-methylkanamycin a- og b-derivater | |
| Keim et al. | Interaction of a radiolabeled cytokinin photoaffinity probe with a receptor protein | |
| US4241064A (en) | 9H-Pyrido[3,4-b]indole derivatives | |
| SE461148B (sv) | Polysilylerat kanamycin a eller b derivat | |
| CH620243A5 (da) | ||
| CA1046513A (en) | Antibiotic derivatives | |
| CA1339595C (en) | New antibiotics of the mureidomycin group, their preparation, and their therapeutic use | |
| US4267102A (en) | Bleomycin group antibiotics | |
| CA1081693A (en) | Kanamycin c derivatives | |
| ATE11416T1 (de) | 4-o-substituierte 2-deoxystreptamin-aminoglucosid-derivate, ihre herstellung und die sie enthaltenden zusammensetzungen. | |
| JPS60123495A (ja) | 新規な抗生物質類 | |
| DE1620592A1 (de) | Neue Lincomycinderivate und Verfahren zu ihrer Herstellung | |
| CA1253499A (en) | Arphemenine-related compounds and uses thereof | |
| EP0135675B1 (en) | Novel 3-(4'-aminobutylamino)-propylamino-bleomycin derivatives, a process for their preparation and their use as medicaments | |
| JPS597319B2 (ja) | アミノサイクリト−ル誘導体及びその製造法 | |
| JPS58103383A (ja) | 新タンニン | |
| DE3248358A1 (de) | (amido)-n-substituiertes bleomycin und verfahren zu dessen herstellung | |
| EP0004059B1 (en) | Synthesis of 1-(thiocarbamoyl)-2-imidazolidinone and immunosuppressive compositions containing it |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PBP | Patent lapsed |