DK149754B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af et dermorphinanalogt tetra-, penta-, hexa- eller heptapeptidderivat eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf - Google Patents

Analogifremgangsmaade til fremstilling af et dermorphinanalogt tetra-, penta-, hexa- eller heptapeptidderivat eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf Download PDF

Info

Publication number
DK149754B
DK149754B DK394280AA DK394280A DK149754B DK 149754 B DK149754 B DK 149754B DK 394280A A DK394280A A DK 394280AA DK 394280 A DK394280 A DK 394280A DK 149754 B DK149754 B DK 149754B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
tyr
phe
gly
ala
seryl
Prior art date
Application number
DK394280AA
Other languages
English (en)
Other versions
DK394280A (da
DK149754C (da
Inventor
Roberto De Castiglione
Fiorenzo Faoro
Giuseppe Perseo
Silvano Piani
Francesco Santangelo
Original Assignee
Erba Farmitalia
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Erba Farmitalia filed Critical Erba Farmitalia
Publication of DK394280A publication Critical patent/DK394280A/da
Publication of DK149754B publication Critical patent/DK149754B/da
Application granted granted Critical
Publication of DK149754C publication Critical patent/DK149754C/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/665—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans derived from pro-opiomelanocortin, pro-enkephalin or pro-dynorphin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1002—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/1016—Tetrapeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

o 1 149754
Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangs-måde til fremstilling af hidtil ukendte dermorphinana-loge tetra-, penta-, hexa- eller heptapeptider og deres farmaceutisk acceptable salte. Disse forbindelser har kraftig 5 virkning på centralnervesystemet og udviser specielt gunstig analgetisk virkning og er derfor anvendelige i sådanne terapeutiske midler.
De ifølge opfindelsen fremstillede peptidderivater har den almene formel 10 Y
X - Tyr - A - Phe - B - C - W (I) hvori Y er hydrogen eller benzyl, A er en D-aminosyrerest valgt blandt D-alanin, D-methionin og D-methioninsulfoxid, 15 B er en glycin-, en sarcosin-, en L-N-methylphenylalanin-, en phenylalanin- eller en prolinrest, C kan være tilstedeværende eller fraværende, og såfremt den er til stede, er C en aminosyrerest valgt blandt L-tyrosin, D-tyrosin, L-leucin, L-methionin, L-methioninsulfoxid, L-prolin, 20 L-serin og L-norvalin eller et dipeptid valgt blandt (O-benzyl)-L-tyrosyl-L-propyl, L-tyrosyl-L-prolyl, L-tyro-syl-L-seryl og L-prolyl-L-seryl eller en tripeptidrest valgt blandt L-tyrosyl-L-prolyl-L-seryl, (0-benzyl)-L-tyrosyl--L-prolyl-L-seryl, L-tyrosyl-L-3- eller -4-hydroxy-prolyl-25 -L-seryl, (0-benzyl)-L-tyrosyl-L-3- eller -4-hydroxy-prolyl-L-seryl, (0-benzyl)-L-tyrosyl-L-3- eller -4-hy-droxyprolyl-(0-benzyl)-L-seryl, L-tyrosyl-L-valyl-L-seryl, L-tyrosylglycyl-L-seryl, L-phenylalanyl-L-3- eller -4-hy-droxyprolyl-L-seryl, L-tryptophyl-L-prolyl-L-seryl, 30 L-phenylalanyl-L-prolyl-L-seryl, L-phenylalanyl-L-3- eller -4-hydroxyprolyl-(0-benzyl)-L-seryl, glycyl-L-prolyl--L-seryl, L-tyrosyl-L-pipecolyl-L-seryl, L-tyrosyl-L--thiazolidyl-4-carbonyl-L-seryl, L-tyrosyl-L-3,4-dehy-droprolyl-L-seryl, L-tyrosyl-D-3,4-dehydroprolyl-L-seryl, 35 L-tyrosyl-L-prolyl-L-a-aminobutyryl, L-tyrosyl-L-prolyl- 2 149754 o glycyl, (O-benzyl)-L-tyrosyl-L-prolyl-(O-benzyl)-L-seryl, . L-tyrosyl-L-prolyl-(O-benzyl)-L-seryl og (4-nitro)-L- -phenylalanyl-L-prolyl-L-seryl, og W er OH, OR, NH2, NHR, NHNH2 eller NHNHR', hvori R er C-^-alkyl, adaman-5 tyl eller 2,2,2-trifluorethyl, og R' er benzyloxycarbonyl, adamantyloxycarbonyl, tert.butyloxycarbony1, butyryl, lauryl, benzoyl, D-tyrosyl eller phenyl, eller er et farmaceutisk acceptabelt salt deraf.
Fra beskrivelserne til fire tilgængelige danske an-10 søgninger nr. 331/77, 1580/77, 4347/78 og 1782/79 kendes beslægtede peptider med enkephalin-struktur. I modsætning hertil er de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser dermorphinanaloge peptidderivater og udgør som sådanne en helt ny klasse peptider, der nu har vist sig at have opioid 15 aktivitet. De fra ovennævnte danske ansøgninger, kendte forbindelser er derimod enkephalin-lignende peptider. Disse udviser således altid en glycingruppe (Gly) i 3-stillingen regnet fra peptidkædens N-ende. Dette er ikke tilfældet med de ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede for-20 bindeiser med den almene formel I, hvoraf tydeligt ses, at den fremstillede peptidsekvens altid indeholder en phenyl-alaningruppe (Phe) i 3-stillingen regnet på samme måde.
Til tydeliggørelse af disse forhold tjener den følgende oversigtstabel over de typer af forbindelser, som frem-25 stilles ifølge de nævnte danske patentansøgninger, idet der herfra er udvalgt sæt af strukturelt tilsvarende forbindelser. Denne tabel indeholder tillige de tilsvarende referencestandardforbindelser, som er benyttet i de hermed nedenfor anførte sammenligningsforsøg over biologisk ak-30 tivitet, nemlig CNS virkning og specielt analgesis.
35 3 149754
Si 0) β & tj> I Λ τ3 ° — σ' . _.
3 υ O' ^ Η ίΊ >(Γ» · · · χ m σι Μ·-* μ · Μ · y · ft Η β fito G W G Μ <υ - . . μ μ .¾ υχ Ο · 03 · β · 0) · 0) G Φ * Ο -> mX α ω ω
0) ιβ ιο ·Η ο β β βΙ β I G I
μ βΗ |5(Ν β β β «* β Η ιη · · - · r~ · αο · σι m G η p γ* ρ £- Pr- Ρ r* β ,¾ β -Η Ο β Γ" β\ β\ β \ (¾ ofl ·> ft\ ft° ftt" ft 01 μ -H > · Γ' · H *00 · -ri* · oo β ω tl x! co ^ m a m Kci Kf'
S rtj &H p ro q H Q'tf Q H
G β •H ,¾ i—! β β W β Λ I Ό Οι -Ρ -Η β mg β χ s (3
> G I
-β Η CM β I I I J
13 I β ·Η I I I 1
LO r-1 pH
β ril β
·· β I P
β PI P 04 β --------r P H J- m y β a 1 p a a a \ / m o a o 's trJ ^ p g ii i i g ™ β -H s a P Η β P >1 β 1 § tpH tn β β Η β ·~· ®
®-Η p s o P © S
HP e , mm li i i g i β "" η -η βββ βββ
** A A , A A A A
ιβΌ ft ft ft ft ft ft β β g g i i__I__I__I__1 J-| · >1 >t >t >1 >1
βΡ nHH Η H HH
mm OCJO U O O
h a----—.----
β β I I
Γβ m i i i β >1 β >1 βββ
HH CM Η Η Η H "H rH
Xj O rij (5 ri! <! ri!
μ H I III
O β I P I p p O
in i I III
u U U U U U M
ββ H>)>1 >1 >1 >1>1 P fe EhEhEh Eh Eh &h
'O
fi , III III
S a a a a a a 4 T497S4 o
En sammenligning af strukturerne i ovennævnte tabel med den ovenfor anførte almene formel I: Y 3
5 H - Tyr - A - Phe - B - C - W
hvori symbolerne Y, A, B, C og W er som defineret i kravet, viser med ønskelig tydelighed en klar strukturel forskel, eftersom de ifølge ansøgernes opfindelse fremstillede peptider altid har en phenylalaningruppe (Phe) i 3-stillingen.
Det vil således forstås, at der er tale om en helt ny klasse peptider.
Netop på grund af denne strukturforskel i peptidkædens opbygning har det vist sig, at de ny peptider fremstillet ifølge opfindelsen udviser en ganske særegen og meget for-15 delagtig biologisk virkning sammenlignet med de kendte forbindelsers.
Det er således ved forsøg godtgjort, at forbindelserne fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse udviser langt den kraftigste aktivitet i centralnervesystemet sammenlignet 20 med de almindelige enkephalin-analoge peptider således som f.eks. kendt fra de ovenfor anførte danske patentansøgningers beskrivelser. Dette fremgår tydeligt af det nedenfor anførte forsøgsmateriale ( se tabellen), der vedrører forsøg med rotter anbragt på en varm plade såvel som den nedenfor omtalte hale-25 piskeprøve.
Ved disse forsøg er som referencestandardforbindelser an-5 2 vendt henholdsvis Leu -enkephalin og D-Ala -Met-enkephalin-amid, som er kendte forbindelser, der er tilgængelige på markedet.
30
Det bemærkes specielt, at de i beskrivelsen til dansk patentansøgning nr. 331/77 beskrevne forbindelser er nært beslægtede med Leu -enkephalin. Således som det fremgår af ovennævnte tabel, har man udskiftet den sidste aminosyrerest i kæden (Leu) med en anden aminosyrerest (Gly). Endvidere be-35 5 US-7'64 o mærkes, at de ifølge dansk patentansøgning nr. 1580/77, 1782/79 og 4347/78 fremstillede peptider på den anden side har større strukturel lighed med den anden referencestandard-2 forbindelse D-Ala -Met-enkephalinamid, hvor de modificerede 5 grupper er peptidkædens OH-ende eller Phe-resten i 4-stil-1ingen.
I alle de anførte beskrivelser ses tydeligt, at samtlige peptidkæder i 3-stillingen indeholder en glycinrest. Forklaringen herpå er, at det naturlige humane β-endorphin (se 10 Merck indeks 10. udg. side 516) udviser dette strukturtræk, der hidtil har været anset for essentielt under hensyn til den biologiske aktivitet. Det må derfor regnes for udtalt overraskende, når det nu med den foreliggende opfindelse påvises, at man ved at vende sekvensen Gly3-Phe^ hos enke-15 phalin om (således at man får sekvensen Phe -Gly ) tilvejebringer peptider, for hvilke det først nu er godtgjort med de foreliggende forsøg, at disse udviser en langt bedre aktivitet i centralnervesystemet, jfr. den nedenfor anførte tabel, som viser,at samtlige derivater fremstillet ifølge 20 den foreliggende opfindelse er fra 10 til 10.000 gange mere aktive end referencestandardforbindelserne.
Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilles faktisk ikke et enkephalin-analogt peptidderivat, men derimod et dermorphin-analogt peptidderivat. Derfor udgør de her 25 omhandlede peptider som defineret i formel I en fuldstændig ny klasse opioide peptider, der karakteriseres ved tilstedeværelsen af en Phe-rest i 3-stillingen.
I modsætning hertil udviser alle de naturlige opioide peptider (de såkaldte endogene opioide peptider(enkefaliner), 30 der er biogenetisk afledt fra pro-opionmelanokortin, pro-enkefalin A og pro-enkefalin B eller pro-dynorfin) en 3 35
Gly -rest, således som tilfældet er med de i de ovennævnte fire danske ansøgninger omhandlede peptider.
o 6 149754 3
Udskiftningen af Gly med Phe udgør dog ikke blot en simpel "ændring", således som man måske umiddelbart kunne antage.
I virkeligheden fører denne udskiftning eller ombytning 5 i peptidkæden hos de ved fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse fremstillede peptider nemlig overraskende nok til derivater, der udviser en højere analgetisk aktivitet, hvorimod det i almindelighed har været rapporteret og hævdet, at man ikke kunne tolerere substituering i 3-stil-10 lingen (jfr. således J.S. Morley Ann. Rev. Pharmacol.
Toxicol. 20 (1980) side 88, samt Yoshiaki Kiso med flere J. Pharm. Dyn 8 8-91 (1984).
Peptidgrundkæden, der udgør afstandsleddet mellem de to aromatiske rester (Tyr og Phe) udgør endnu et særegent 15 trask, hvorved de to klasser peptider kan sondres (nemlig henholdsvis de her omhandlede forbindelser og endogene opio-ide peptider), og dette er en af de vigtigste faktorer, der bestemmer opiat-receptor-profilen (og derfor de respektive forbindelsers pharmakologiske aktivitet).
20 Et 1-4-indskud (således som hos enkephalin) begun stiger cf -receptorselektivitet, hvorimod et 1-3 indskud (således som hos de her omhandlede peptider) i høj grad forbedrer selektiviteten over for μ-receptorerne. Dette fremgår således af R. de Castiglione, Highlights in Recep-25 tor Chemistry (1984) udgivet på forlaget Elseviers Publishers, B.V. p. 168.
Dette kan afgøres direkte ved bindingsundersøgelser eller kan udledes tilnærmelsesvis ud fra de klassiske in vitro prøver for opioid aktivitet: muse vas defena (MVD) og 30 marsvine ileum (GPI) for henholdsvis 6- og μ-receptorer.
Analgesi medieres eller styres således i hovedsagen af ^-receptorer, navnlig på superspinalt niveau.
Substitueringer eller elimineringer i andre stillinger kan modificere de opioide peptiders farmakologiske 35 profil ved ændring af f.eks. den iboende aktivitet, affi- o 7 140754 nitet, absorption, distribution, enzymatiske stabiliteter osv., men er sekundære i forhold til det ovenfor omtalte 1 4 grundkædeindskud mellem Tyr og Phe (således som dette forekommer hos de naturlige opioide peptider, enkephalinerne og 5 hos de fra ovennævnte litteratursteder kendte forbindelser) eller Phe (således som dette forekommer hos de dermorphin-analoge peptider fremstillet ifølge den foreliggende opfindelse) .
Således ses, at 10 a) de her omhandlede peptider og de fra ovennævnte ældre ansøgninger kendte peptider tilhører to forskellige klasser, der karakteriseres for det første ved aminosyren i 3-stillingen og for det andet ved indskudsstykket mellem de to aromatiske rester (Tyr og Phe), og de har 15 derfor forskellig pharmakologisk profil, og b) før den foreliggende opfindelse blev det antaget, at de opioide peptider uden Gly i 3-stillingen var inaktive.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at aminosyrer, aminosyrederivater og/eller peptid-20 fragmenter ved opløsningsmetoder eller i fast fase kondenseres i den rækkefølge, hvori de indgår i det ønskede peptid, idet en eventuel usubstitueret eller substitueret hydrazidogruppe ved C-terminalen i det ønskede peptid indføres på et vilkårligt trin af syntesen, og idet ved 25 hver kondensation enten en endestillet carboxylsyregruppe eller en endestillet aminogruppe er aktiveret til dannelse af den pågældende peptidbinding og de øvrige reaktionsdygtige grupper om nødvendigt er beskyttet midlertidigt, hvorefter tilstedeværende beskyttelsesgrupper om nødvendigt 30 fjernes, og en fremstillet forbindelse med formlen I, hvori W er OR, om ønsket omdannes til en forbindelse med formlen I, hvori W er OH, eller NHR, hvorefter det fremkomne peptid om ønsket omdannes til et farmaceutisk acceptabel salt deraf.
35 3 149754 o
Acceptable salte af forbindelser med den almene formel I kan fås med trifluoreddikesyre, flussyre, eddikesyre, saltsyre, brombrintesyre samt andre farmaceutisk acceptable syrer.
5 Syntesen af peptiderne ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan enten gennemføres efter i og for sig klassiske opløsningsmetoder eller i fast fase på polymere bærere. Eksempler på de to fremgangsmådetyper er anført nedenfor. Ved den klassiske opløsningsmetode består syntesen i 10 det væsentlige i egnede efter hinanden følgende kondensationer af beskyttede aminosyrer eller peptider. Kondensationen gennemføres således, at de opnåede peptider udviser den ønskede rækkefølge eller sekvens på 4-7 aminosyrerester. Aminosyrerne og peptiderne, der kondenseres ved den inden 15 for polypeptidkemien i og for sig kendte metode, har de af deres amino- og carboxylgrupper, som ikke er involveret ved peptidbindingens dannelse, beskyttet med én eller flere egnede beskyttelsesgrupper.
De hydroxylerede aminosyrers hydroxylfunktioner 20 kan beskyttes med egnede beskyttelsesgrupper (under hele syntesen eller kun på enkelte trin), eller de kan lades helt ubeskyttede. Beskyttelsesgrupperne kan fjernes ved acidolyse, forsæbning eller hydrogenolyse.
Til beskyttelse af aminogrupperne kan anvendes 25 f.eks. følgende beskyttelsesgrupper: benzyloxycarbonyl (Z), tert.butyloxycarbony1 (Boc), trityl, formyl, tri-fluoracetyl og/eller o-nitrophenylsulfenyl.
S'' X' s'~' 9 149754
O
Til beskyttelse af carboxylgrupperne kan f.eks. anvendes følgende beskyttelsesgrupper: methyl, ethyl, tert.-butyl, benzyl og/eller p-nitrobenzyl.
Til beskyttelse af hydroxygrupperne kan f.eks. an-5 vendes følgende beskyttelsesgrupper: acetyl, tert.butyl-oxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, 2-brombenzyloxycarbonyl, tetrahydropyrany1, tert.butyl, trityl, benzyl, 2,4-di-chlorbenzyl og/eller methyl.
Kondensationen mellem en aminogruppe i et mole-10 kyle og en carboxylgruppe i et andet molekyle til dannelse af peptidbindingen kan ske via et aktiveret acylderi-vat såsom et blandet anhydrid, et azid, en aktiveret ester og lignende eller ved direkte kondensation mellem en fri aminogruppe og en fri carboxylgruppe i nærværelse 15 af et kondensationsmiddel såsom dicyclohexylcarbodiimid, der kan foreligge alene eller sammen med et middel til forhindring af racemerisering såsom N-hydroxysuccinimid eller 1-hydroxybenzotriazol.
Kondensationen kan gennemføres i et opløsnings-20 middel såsom dimethylformamid, pyridin, acetonitril, tetrahydrofuran eller lignende.
Reaktionstemperaturen kan ligge fra -30°C til stuetemperatur.
Reaktionstiden udgør i almindelighed fra 1 til 25 120 timer.
Synteseskemaet, beskyttelsesgrupperne og kondensationsmidlerne vælges alle således, at faren for race-merisering undgås.
Reaktioner til fjernelse af beskyttelsesgrupperne 30 udvirkes efter i og for sig kendte metoder inden for po-lypeptidkemien.
Peptider, hvori W er OR, fremstilles f.eks. ved at gå ud fra aminosyren med endestillet C-atom, der er forestret med en i dette øjemed hensigtsmæssig alkohol.
35 Peptider, hvor W betyder OH, kan f.eks. fås ved hydrolyse af peptider, hvori W er OR. Peptider, hvori W har betydningen NH2, NHR eller NR2, kan fås ved hjælp af ammonolyse af den tilsvarende ester.
o 149754 ίο
Ved fastfasemetoden anvendes en polymer bærer.
Polymeren er fortrinsvis en copolymer af styren med 1 til 2 vægtprocent divinylbenzen som tværbindingsmiddel, hvilket bevirker, at polystyrenpolymeren er fuldstæn-5 dig uopløselig i de fleste organiske opløsningsmidler.
Syntesen begyndes ved peptidets endestillede C--atom, idet den ønskede aminosyre hægtes på eller kobles til en chlormethyleret harpiks, en hydroxymethylharpiks eller en benzhydrylaminharpiks.
Amino- og sidekædebeskyttelsesgrupperne er sådanne, som er beskrevet ved den klassiske syntese i opløsningsmiddel .
Ved forbindelsernes fremstilling ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen kobles en aminobeskyttet aminosyre 15 ved hjælp af f.eks. en cæsiumbicarbonatkatalysator til den chlormethylerede harpiks eller ved hjælp af et kondensationsmiddel såsom dicyclohexylcarbodiimid til en hydroxymethyl- eller benzhydrylaminharpiks.
Efter den første kobling fjernes aminobeskyttel-20 sesgruppen ved hjælp af egnede reagenser, herunder tri-fluoreddikesyre- eller saltsyreopløsninger i organiske opløsningsmidler ved stuetemperatur. Efter aminogruppens fjernelse kobles resten af de beskyttede aminosyrer trinvis i den ønskede rækkefølge til opnåelse af det ønskede 25 peptid.
Hver beskyttet aminosyre omsættes i almindelighed i trefoldigt overskud under anvendelse af en egnet carb-oxylgruppeaktivator såsom dicyclohexylcarbodiimid i opløsning, f.eks. i methylenchlorid—dimethylformamidblan-30 dinger.
Efter at den ønskede aminosyresekvens er opnået, fjernes det ønskede peptid fra harpiksbæreren ved behandling med et reagens såsom hydrogenfluorid, der ikke alene spalter peptidet fra harpiksen, men også fraspalter stør-35 stedelen af de tilbageblivende sidekædebeskyttelsesgrupper.
Når der anvendes en chlormethyleret eller hydroxymethyle- o 11 149754 ret harpiks, fører behandlingen med hydrogenfluorid til dannelse af den frie peptidsyre (W = OH). Når der anvendes en benzhydrylaminharpiks, fører behandlingen med hydrogenfluorid direkte til det fri peptidamid (W = NH2).
5 Når der anvendes en chlormethyleret eller hydroxyme- thyleret harpiks, kan på den anden side det sidekædebe-skyttede peptid spaltes ved behandling af peptidharpiksen med ammoniak eller med en alkyl- eller dialkylamin, hvorved det ønskede sidekædebeskyttede amid, alkylamid 10 eller dialkylamid fås (W = NH2, NHR eller NR2). Side-kædebeskyttelsesgruppen kan så fjernes på i og for sig kendt måde.
Ved fremstillingen ifølge opfindelsen af esteren (W = OR) anvendes harpiksen til fremstilling af syren 15 (w = OH), og det sidekædebeskyttede peptid spaltes med en base og den hertil egnede alkohol. Sidekædebeskyttelsesgruppen fjernes på sædvanlig måde.
På den anden side kan peptidsyrerne og -amiderne fås ud fra peptidestrene ved forsæbning eller ammonolyse.
20 Hydrazido- eller substituerede hydrazidoderiva- ter fås ifølge opfindelsen ved kondensation af det N-beskyttede peptid eller af aminosyren med en passende substitueret hydrazin såsom benzylcarbazat, tert.butylcarb-azat, adamantylcarbazat, phenylhydrazin eller adamantyl-25 hydrazin eller ved omsætning af det N-beskyttede peptid eller aminosyrehydrazid med et egnet alkyleringsmiddel såsom et alkylchlorid eller med et egnet acyleringsmiddel såsom benzylchlorformiat, tert.butylchlorformiat og ada-mantylfluorformiat.
30 De her anvendte symboler er dem, der sædvanlig vis benyttes inden for peptidkemien. I den følgende beskrivelse er D-aminosyrerester angivet ved brugen af små bogstaver, idet f.eks. ala = D-Ala.
Rf-værdierne et bestemt under anvendelse af i for-35 vejen udvalsede silicagel 60 F254 Pla<^er (fra Merck) med lagtykkelsen 0,25 mm og pladelængden 20 cm under anvendel- 12 149764 Ο se af følgende udviklingssystemer (elueringsmidler):
System A: Benzen-ethylacetat-eddikesyre-vand (10:10:2:1) (øvre fase)
System B: Benzen-ethylacetat-eddikesyre-vand (100:100:40:15) 5 (øvre fase)
System C: n-butylalkohol-eddikesyre-vand (4:1:1)
System D: Chloroform-methylalkohol- 32%'s ammoniumhydroxid (65:45:20)
System E: Chloroform-methylalkohol (8:2).
10 Tyndtlagschromatografianalyser er ikke gennemført under standardbetingelser. Derfor kan R^-værdierne, især ved forskellige temperaturer, ændre sig. Smeltepunkterne er bestemt i åbent kapillarrør og er ukorrigerede. De fleste af derivaterne bliver bløde og sønderdeles før 15 smeltning. Opløsningsmiddel for krystallisation, udfældning og formaling er anført i parentes.
Høj spændingspapirelektroforese er gennemført med et Pherograph-Original-Frankfurt type 64-apparat på papir fra Schleicher og Schull nr. 2317 ved 1600 V (40 v/cm) 20 og pH 1,2 (myresyre-eddikesyre-vand 123:100:777). Elektroforetiske mobiliteter (E. _) er anført med hensyn til glutaminsyres.
Forbindelser med den almene formel I udviser interessante farmakologiske aktiviteter ved forsøg gennemført 25 på laboratoriedyr. Især viser forbindelserne med den almene formel I virkning på centralnervesystemet som analge- tika, antipsykotica og neuroendokrinologiske midler.
Den analgetiske virkning er undersøgt på mus ved halepiskeprøven således som beskrevet af Haffner i Deutsch.
30 Med. Wochenschrift 55, side 731, (1929). De afprøvede forbindelser indgives intravenøst, subcutant, intraperitone-alt eller oralt. Ved intravenøs eller subcutan indgivelse viser de afprøvede produkter analgetisk virkning i doser, som i almindelighed ligger fra 0,2 til 50 mg/kg.
35 Forbindelser med den almene formel I udviser receptoraffiniteter overfor centralanalgetika, når de af- 13 149754
O
prøves "in vitro" på rottehjerner ifølge den af Pert og Snyder i Molec.Pharmacol. 10, 878, (1974) beskrevne fremgangsmåde. I overensstemmelse hermed kan forbindelser med den almene formel I finde terapeutisk anvendelse ved be-5 handling af smerter.
Forbindelser med den almene formel I udviser også aktivitet på centralnervesystemet med de karakteristiske egenskaber for antipsykotica således som påvist ved forsøg, der er gennemført ifølge den af Janssen, Jageneau og Schellekens i Psychopharmacologia (Berl.) 1, 389 (1960) beskrevne fremgangsmåde på rotter. Aktive doser udgør i almindelighed fra 0,2 til 60 mg/kg. Forbindelserne med den almene formel I kan altså finde terapeutisk anvendelse som antipsykotica.
15 Forbindelser med den almene formel I stimulerer blandt andet frigivelsen af væksthormonet og af prolactin således som påvist ved radioimmunforsøg på rotter, der er gennemført ifølge den af Niswender, Chen, Midgley, Mettes,
Ellis i Proc.Soc.Exp.Biol.Med. 130, 793, (1968) beskrev- 20 ne fremgangsmåde. Aktive doser er i almindelighed fra 0,01 til 10 mg/kg. i overensstemmelse hermed kan forbindelserne med formlen I finde terapeutisk anvendelse ved stimulering af frigivelsen af væksthormon og af prolactin.
I overensstemmelse hermed kan de ved fremgangs- 25 måden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser med den almene formel I og/eller deres salte ved anvendelse til terapeutiske formål bringes sammen med gængse farmaceutisk acceptable bærere eller fortyndingsmidler til fremstilling af sædvanlige præparationsformer.
30
Biologisk afprøvning af repræsentative forbindelser med ovenstående formel I fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er foretaget på følgende måde og med de i følgende tabel anførte resultater: 35 149754 14 o
Biologisk afprøvning
Forbindelsernes aktivitet i centralnervesystemet og herunder specielt deres analgesiske virkning afprøves in vivo på rotter ad intracerebroventriculær vej (ved haleudsvings-g prøven og ved varmepladeprøven). Styrken bedømmes ved 2 til 3 dosisniveauer, og til hver enkelt niveau anvendes en gruppe på 5 rotter.
Der benyttes hanrotter af stammen Wistar med en vægt på 240 til 260 g. Dermophinanaloge-peptidderivater og dermed 10 beslægtede forbindelser injiceres intracerebroventriculært således som beskrevet af Chermat & Simon (1975) i et rumfang på 10 jil saltvandsopløsning. Ved haleudsvingsprøven (der gennemføres ifølge D'Amour & Smith (1941)) måles rotternes latente trang til at fjerne halen, når den udsættes for strå-15 lingsvarme, hvilket gennemføres automatisk med en nøjagtighed på 0,1 sekund. Der anvendes grupper på 10 dyr til hvert enkelt forsøg.
Reaktionstiderne efter udsættelse for strålingsvarme og ved anbringelse på varmeplade måles henholdsvis 20 30 og 15 minutter før injektion og derpå hver 15. minut un der den første post-injektion og derpå hver 30. minut i løbet af de næstfølgende timer. ED^q og 95%'s pålideligheds-grænserne beregnes som beskrevet for mus. Aktiviteten for forbindelsen med formlen 25
H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2.TFA
ansættes til 100 som sammenligningsgrundlag, og dennes styrke er som følger: bestemt ved varmeplade ED5Q = 13,3 pmol/-30 rotte og bestemt ved haleudsvingsprøven ED^q = 23 pmol/rot-te. Resultaterne er iøvrigt anført i nedenstående tabel.
o 15 149754
Bibliografi 1. CHERMAT R. & SIMON P. (1975) Injection intraventricu laire cérebrale chez le rat anesthésié. J. Pharmac. (Paris) 5 6, 489-492.
2. D'AMOUR F.E. & SMITH D.L. (1941) A method of evaluating analgesic activity in the rat. J. Pharmac. exp. Ther. 72, 74-79 10 Tabe 1
Rotte (i.c.v.) varme- hale-
Eks. nr. Formel plade udsving 1 H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 · TFA ' 100 100 LIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-Me · HC1 30 1 15 L V) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-Et · HC1 5 1 CIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH2 · 2HC1 70-80 7-15 6 H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z · HC1 120 25-30
Bzl LXXX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 · HC1 20 8 LXXVIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Gly-NH2 · HC1 20 8 20 XXI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2 * HC1 90-110 70-80 o 16 149754 XXXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Val-Ser-NH2 · TFA 5 2 XXXVII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Gly-Ser-NH2 · TFA 10 2 XXXIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Pro-Ser-NH2 · HC1 70 10-20 XLV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Trp-Pro-Ser-NH2 · HC1 30 3-5 5 LII) H-Tyr-ala-Phe-Sar-Tur-Pro-Ser-NH2 · HC1 100 70 XLVII) H-Tyr-ala-Phe-Phe-Tyr-Pro-Ser-NH2 · HC1 10 4 XLI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser-NH2 * HC1 70 5
Bzl Bzl
I I
XXXII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2 · HCl 10 2 10 Bzl XLII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser-NH2 · HCl 55 8 XXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-NH2 * TFA 25 14
Bzl XXVI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-NH2 * TFA 2 1 15 XXIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Ser-NH2 * TFA 8 1 2 H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH2 * TFA 27 12 CVIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-OTNH · 2 HCl 20-30 6 7 H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NHNHZ * HCl 20-40 12 LXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-tyr-NH2 * HCl 6 1,5 20 L) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Leu-NH2 * HCl 0,5 0,1 LXXXVI) H-Tyr-ala-Phe-Sar-Tyr-NH-NH-Z * HCl 20-40 14 5) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH2 ‘ HCl 22 12 4) H-Tyr-ala-Phe-Gly-OB 6 1 XX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 ’ 2HC1 12 0,5 25 8 H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z -HCl 8 2 3 H-Tyr-ala-Phe-Gly-OMe 1 0,5 LVII) H-Tyr-met-Phe-Gly-NHNHZ'HCl 1 0,5 LVIII) H-Tyr-met(O)-Phe-Gly-NHNHZ * HCl 1 0,5 LXIX) H-Tyr-ala-Phe-Pro-Tyr-Pro-Ser-NH2 3 1 30 CVII) H-Tyr(Bzl)-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2-HCl 2 0,5 LXIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Pro-NH2'HCl 0,5 0,5 LXIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Ser-NH2*HCl 6 4 CVI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Nva-NH2’HCl 1 0,5 CII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Pro-Ser-NH2‘HCl 2,5 1 35 17 149754 o CIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-Ser-NH2*HCl 2 0,5 LIU) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-NH2 'HCl 0,5 0,1 LXXII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Ppa-Ser-NH2 *HCl 1 0,5 LXXIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Tia-Ser-NH 'HC1 1 0,5 5 LXXA) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-L-Δ3 Pro-Ser-NH *HC1 20 15 * ^ LXXB) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-D-4 Pro-Ser-NH2’HCl 2 1 LXXVII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Abu-NH2 * HCl 2,5 1 LXXIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-Ser(Bzl)- 0,5 1 -nh2'hci 10 LXI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNH-Adoc.HCl 2 0,5 LXII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNH-Boc.HCl 1 0,5 9 H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNH-BufHCl 1 0,5 LIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNH-Lr1.HCl 2 1 LX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNH-Bnl.HCl 2 0,5 15 10 H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNH-tyr.2HC1 0,5 0,5 LXXXI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-Ad.HCl 6 4 LXXXIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-CH2CF3.HCl 1 0,5 XCIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NHNHPh 3 1 LXX) H-Tyr-ala-Phe-MePhe-Tyr-Pro-Ser-NH2.HCl 7 2 20 LI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Met-NH2.HCl 18 12 CV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Met(0)-NH2.HCl 6 2
Standard H-Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu-OH 0,01 0,01 " H-Tyr-ala-Gly-Phe-Met-NH2 0,01 0,01 25 18 149754 o Følgende eksempler tjener til nærmere belysning af fremgangsmåden ifølge opfindelsen.
5 Eksempel 1
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 "CF^ COOH
(XIII)_
Trin 1: Boc-Pro-Ser-NH2 (I)
Til en opløsning af 1,0 g (4,65 mmol) Boc-Pro-OH 10 i 10 ml vandfri tetrahydrofuran tilsættes 0,52 ml (4,65 mmol) N-methylmorpholin og 0,45 ml (4,65 mmol) ethyl-chlorformiat efter hinanden ved en temperatur på -12°C.
Efter omrøring i 2 minutter tilsættes en kold opløsning af 0,48 g (4,65 mmol) H-Ser-NE^ (R.W. Hanson og H.N. Rydon 15 J.Chem.Soc., 836, 1964) i 10 ml dimethylformamid. Reaktionsblandingen omrøres i 3 timer ved -10°C og i 1 time ved 20°C, hvorpå salte filtreres fra og opløsningen inddampes i vakuum. Remanensen optages i tetrahydrofuran og filtreres, og opløsningen inddampes endnu engang i vakuum.
20 Ved krystallisation fra methanol-diethylether fås 1,1 g af forbindelsen (I) med smeltepunkt 138°C [a]^ = ~58,9° (c = 1 i methanol) , Rf* = 0,15, Rf_ = 0,33.
Ά 13
Trin 2: H-Pro-Ser-NH2.CF3COOH (II) 25 1,0 g (3,3 mmo) Boc-Pro-Ser-NH2 (I) opløses i 10 ml trifluoreddikesyre ved 0°C. Efter 30 minutter ved 0°C inddampes opløsningen i vakuum, fortyndes med methanol og inddampes endnu engang i vakuum. Produktet (II) isoleres fra diethylether-petroleumsether i et udbytte på 30 1,0 g med smeltepunkt 48-50°C, Rf^ = 0,10.
Trin 3: Boc-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH2 (III)
En opløsning af 1,0 g (3,0 mmol) H-Pro-Ser-NH2.CF3~ COOH (II) i 35 ml dimethylformamid køles til 0°C, hvorpå qr tilsættes 0,36 ml (3,2 mmol) N-methylmorpholin og deref- o 19 149754 ter 1,2 g (3,2 mmol) Boc-Tyr (Bzl)-OH, 0,43 g (3,2 mmol) 1-hydroxybenzotriazol og 0,73 g (3,52 mmol) dicyclohexyl-carbodiimid. Reaktionsblandingen omrøres i 1 time ved 0°C og natten over ved stuetemperatur, hvorefter den filtre-5 res og inddampes i vakuum. Remanensen opløses i ethyl-acetat, og opløsningen vaskes successivt med NaCl-mæt-tede opløsninger af 1M citronsyre, 1M NaHC03 og vand.
Den organiske opløsning tørres over vandfrit Na^O^, og opløsningsmidlet fjernes i vakuum. Produktet (III) udvin-10 des i et udbytte på 1,4 g ved krystallisation fra ethyl-acetat-petroleumsether, smeltepunkt 115°C, [a]^ = -22,9° (c = i methanol) Rf^ = 0,20.
Trin 4: Η-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH2.CF3COOH (IV) 15 Der gås frem i 2 trin, idet der ud fra 1,0 g (1,8 mmol) Boc-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH2 (IIII) fås 1,0 g af forbindelsen (IV), [a]^ = -7,4° (c = i methanol),
Rfc = 0,59, smeltepunkt 54-57°C (sønderdeling).
20 Trin 5: Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (V) 0,42 ml (3,8 mmol) N-methylmorpholin og 0,3 ml (3,8 mmol) ethylchlorformiat tilsættes efter hinanden ved -12°C til en opløsning af 1,0 g (3,8 mmol) Boc-Phe--OH i 10 ml vandfri tetrahydrofuran. Efter omrøring ved 25 denne temperatur i 2 minutter tilsættes en kold opløsning af 0,95 g (3,7 mmol) H-Gly-NH-NH-Z-Hcl (K. Hofmann m.fl.
J.Amer.Chem.Soc. 94, 6171, 1972) og 0,4 ml (3,7 mmol) N-methylmorpholin i 15 ml dimethylformamid. Reaktionsblandingen omrøres i 3 timer ved -10°C og i 1 time ved 30 20°C, hvorpå salte filtreres fra og der inddampes i vakuum.
Remanensen opløses i ethylacetat og vaskes flere gange efter hinanden med NaCl-mættede opløsninger af 1M citronsyre, 1M NaHCC>3 og vand. Det organiske lag tørres over vandfrit Na~SO. og opløsningsmidlet fjernes i vakuum. Pro- 35 λ 4 duktet (V) udvindes i et udbytte på 1,4 g fra methanol--diisopropylether, smeltepunkt 143°C, [a]^ = +5,6° (c = 1 i methanol), RfA = 0,63.
0 149754 20
Trin 6: H-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VI) 1.0 g (2,1 mmol) Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (V) behandles i 30 minutter ved stuetemperatur med 10 ml af en 1,3 N opløsning af hydrogenchlorid i iseddike. Ved fjernelse af op- 5 løsningsmidlet i vakuum ved 30°C og formaling af remanensen med diethylether fås 0,89 g af forbindelsen (VI), smeltepunkt 178°C, [α]ρ5 = +45° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,78.
Trin 7: Boc-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (VII)
Idet man går ud fra 1,0 g (5,3 mmol) Boc-ala-OH og 2,09 g (5,1 mmol) H-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VI), og idet man går frem som i trin 5, fås 2,5 g af forbindelsen (VII) fra 25 o methanol-diisopropylether, smeltepunkt 165°C, [a]p = +8° (c = 1 i methanol), RfA = 0,51.
15
Trin 8: H-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VIII)
Ved at gå ud fra 1,0 g (1,8 mmol) Boc-ala-Phe-Gly--NH-NH-Z (VII), idet man går frem som i trin 6, fås 0,84 g af forbindelsen (VIII), smeltepunkt 180°C, [a]^ = +0,2° 20 (c = 1 i methanol), Rfc = 0,75.
Trin 9: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX)
Ved at gå ud fra 1,0 g (3,5 mmol) Boc-Tyr-OH og 1,65 g (3,4 mmol) H-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VIII), idet 25 der gås frem som i trin 5, fås 2,24 g af forbindelsen (IX), der efter krystallisation fra methanol-diisopropylether har smeltepunkt 148°C og specifik optisk drej-25 o ning [a]^ = +16,2 (c = 1 i methanol) og referencevær dien Rf^ = 0,38.
30
Trin 10: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (X) 1.0 g (1,4 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX) i 10 ml methanol hydrogeneres ved stuetemperatur i nærværelse af 0,27 g 10%'s Pd/C. Katalysatoren filtreres fra, og 35 opløsningen inddampes i vakuum. Ved fortynding med ethyl-acetat fås 0,64 g af forbindelsen (X), smeltepunkt 148°C, 21 149754
O
[α]ρ5 = +26,6° (c = 1 i methanol), Rfg = 0,34.
Trin 11: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr (Bzl)-Pro-Sér-NH2 (XI)
Til en opløsning af 2,0 g (3,5 mmol) Boc-Tyr-ala-5 -Phe-Gly-NH—NH2 (X) i 20 ml vandfri dimethylformamid tilsættes 2,18 ml (8,75 mmol) 4 N hydrogenchlorid i vandfri tetrahydrofuran og 0,45 ml (3,85 mmol) n-butylnitrit efter hinanden ved en temperatur på -30°C. Efter omrøring ved denne temperatur i 30 minutter tilsættes 1 ml 10 (8,75 mmol) N-methylmorpholin og derpå en kold opløsning (-30°C) af 1,66 g (2,91 mmol) Η-Tyr (Bzl)-Pro-Ser-NH^CF^-COOH (IV) og 0,33 ml (2,91 mmol) N-methylmorpholin i 40 ml dimethylformamid. Reaktionsblandingen lades reagere i 3 dage ved -9°C, hvorpå saltene filtreres fra, opløs-ningsmidlet fjernes i vakuum, og produktet udfældes fra methanol-ethylacetat-diethylether. Det rå produkt renses ved søjlechromatografi på silicagel (Merck 70-230 mesh), idet der elueres med ethylacetat-methanol (8:2).
Herved fås 2,0 g af forbindelsen (XI) fra methanol-di-20 ethylether, smeltepunkt 135°C, [ct]^ = -5,3° (c = 1 i methanol), Rfg = 0,24.
Trin 12: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2 (XII) 1,3 g (1,3 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr (Bzl)-25 -Pro-Ser-NH2 (XI) opløst i 20 ml methanol hydrogeneres ved 35°C i nærværelse af 0,30 g 10%'s Pd/C. Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen inddampes i vakuum.
Ved fortynding med diethylether fås 1,1 g af forbindelsen (XII) , smeltepunkt 160-163°C (sønderdeling) , [a]^5 = 30 “7,6° (c = 1 i methanol), Rf_ = 0,11, Rf_ = 0,80.
D C
Trin 13: H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH2.CF3COOH (XIII) 1,0 g (1,1 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro--Ser-NH2 (XII) behandles med 10 ml trifluoreddikesyre 33 i 30 minutter ved 0°C. Opløsningsmidlet fjernes i vakuum, og remanensen formales med diethylether, hvorved fås 0,90 g af forbindelsen (XIII) , smeltepunkt 159-160°C, [a]^ = +5,5° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,51.
149754 22
O
Eksempel 2
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH^.CF^COOH (XV)
Trin 1: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NI^ (XIV) 2,74 g (4,8 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH—NH2 5 (x) opløses i 50 ml vandfri dimethylformamid og afkøles til -30°C. 2,0 ml (12 mmol) 6 N hydrogenchlorid i vandfri tetrahydrofuran og 0,63 ml (5,28 mmol) n-butylnitrit tilsættes efter hinanden, og reaktionsblandingen omrøres i 30 minutter ved -30°C. 1,34 ml (12 mmol) N-methylmor-10 pholin tilsættes ved -40°C, hvorpå en forkølet (~40°C) opløsning af 0,856 g (4,0 mmol) H-Tyr-N^.HCl (K. Blau og S.G. Waley, Biochem.J. 57, 538, 1954) og 0,456 ml (4,0 mmol) N-methylmorpholin i 50 ml dimethylformamid tilsættes. Reaktionsblandingen lades reagere i 7 dage 15 ved -10°C, hvorpå den inddampes til et lille rumfang, salte filtreres fra, og produktet udfældes ved fortynding med chloroform. Ved krystallisation fra methylal-kohol-chloroform fås 2,0 g af forbindelsen (XIV), smeltepunkt 127-129°C, [a]^ = +19,9° (c = 1 i methanol), 20 Rf = 0,15, RfB = 0,56.
Trin 2: H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NI^ .CF^COOH (XV) 1,0 g (1,4 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NI^ (XIV) lades reagere med 12 ml trifluoreddikesyre i 30 25 minutter ved 0°C. Syren afdampes i vakuum, og remanensen males med diethylether. Ved krystallisation fra iso-propylalkohol-diisopropylether fås 0,94 g af forbindelsen (XV), smeltepunkt 145-146°C, [a]p5 = +34,5° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,65.
30
Fastfasesyntese:
Syntesen på en polymer bærer kan f.eks. gennemføres ifølge én af følgende fremgangsmåder.
Fremgangsmåde A: 35 Fremstilling af Boc- (AA)n~ (AA) n_^. · · · (AA) ^-hydroxymethyl- -polystyrenester___
Chlormethyleret polystyrenharpiks forestres med den første Boc-aminosyre (Boc-AA^-OH) ifølge Gisin, Helv.Chim.
O
23 149764
Acta 56, 1476 (1973). Polystyrenesteren behandles ifølge forskrift A til indlæmning af Boc-(AA)2-0H, ....Boc-(AA)n~ -0H til opnåelse af den i overskriften nævnte harpiks.
Forskrift A: 5 1) der vaskes tre gange med CH2C12, 2) der behandles to gange med TFA-CH2C12 (1:1) i løbet af 1 minut, 3) der behandles med TFA-CH2C12 (1:1) i 30 minutter, ^0 4) der vaskes fire gange med CH2C12, 5) der behandles to gange med 10% TEA i CH2C12 i 1 minut, 6) der behandles med 10% TEA i CH2C12 i 10 minutter, 7) der vaskes tre gange med CH2Cl2, 15 8) der vaskes tre gange med DMF, 9) der vaskes tre gange med CH2Cl2, 10) der tilsættes 2 eller 3 ækvivalenter af det symetriske anhydrid af det tilsvarende aminosyre-derivat fremstillet således som beskrevet af 20 Hagenmayer og Frank i Heppe-Seyler's Z.Physiol.
Chem. 353, 1973 (1972) opløst i CH2C12, idet reaktionstiden udgør 1 til 2 timer, 11) der vaskes tre gange med CH2Cl2, 12) der vaskes tre gange med isopropylalkohol, 25 13) aer vaskes tre gange med CH2C12, og 14) der prøves ved ninhydrinreaktion ifølge Kaiser m.fl. Annal.Biochem. 34, 595 (1970). I tilfælde af ufuldstændig reaktion gentages operationerne 4 til 14.
30 De i ovenstående forskrift A anvendte forkortelser for opløsningsmidler og reagenser er som følger: TFA betyder trifluoreddikesyre TEA betyder triethylamin DMF betyder dimethylformamid.
35
O
24 U*76*
Fremgangsmåde B:
Fremstilling af H- (AA) n~ (AA) ... (AA) .^hydroxymethyl- -polystyrenester_
Efter indføring af det sidste aminosyrederivat ^ ifølge forskrift A (fremgangsmåde A) vaskes harpiksen tre gange med eddikesyre, hvorpå operationerne 1-9 gentages, og der vaskes fire gange med isopropylalkohol.
Fremgangsmåde C: 10 Fremstilling af Boc- (AA) n~ (AA) .. (AA) .^-benzhydrylamin- harpiks_
Boc-(AA)^-OH bindes via dicyclohexylcarbodiimid til benzhydrylaminharpiks således som beskrevet af Piet-ta m.fl. i J.Org.Chem. 39, 44 (1974). Ikke-omsatte amino-^ grupper acetyleres med acetanhydrid/pyridin/CH2Cl (2:1:10) .
Polystyrenamidet behandles så ifølge ovenstående forskrift A (fremgangsmåde A) til indlæmning af de andre aminosyre-rester til opnåelse af den i overskriften nævnte harpiks.
^ Fremgangsmåde D:
Fremstilling af H- (AA) n~ (AA) n_]_ · ·«· (AA) ^-benzhydrylamin- harpiks_
Der arbejdes som ved fremgangsmåde B, idet man dog går ud fra peptidharpiksen opnået ved fremgangsmåde C.
25
Eksempel 3
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-Ome (XVI) 1 g peptidharpiks fra fremgangsmåde B med den fornødne sekvens af aminosyreestere (indført som Boc-Gly-OH, Boc-Phe-OH, Boc-ala-OH og Boc-Tyr-OH i denne rækkefølge) suspenderes i 25 ml methylalkohol og 2 ml trimethylamin i 3 dage ved stuetemperatur. Harpiksen frafiltreres, vaskes med dimethylformamid og befries for opløsningsmiddel ved afdampning i vakuum. Ved krystallisation af remanensen fra isopropylalkohol fås 0,16 g af den i overskriften nævnte forbindelse (XVI), smeltepunkt 216-218°C, [α3 = -32,6° (c = 1 i DMF), Rfc = 0,70. Aminosyreforhold: Gly o 25 149754 1,04, ala 1,06, Tyr 0,99, Phe 1,00.
Eksempel 4
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-OH (XVII) 5 i) 1 g af den samme peptidharpiks som i eksempel 3 behandles i 45 minutter ved 0°C med 10 ml vandfri HF (destilleret over CoF^) med et indhold på 1 ml anisol. Hydrogenfluoridet afdampes under nedsat tryk, og anisolen fjernes ved vaskning med diisopropylether. Det rå peptid 10 ekstraheres fra harpiksen med 50%'s eddikesyre, hvorpå det renses ved chromatografi på en søjle af "Sephadex" ® G-15 ved eluering med 0,5 N eddikesyre og overføres derefter ved behandling med "Amberlite" ®IRA-45 (CH^COO ) til acetatet.
15 ii) På den anden side suspenderes 0,10 g peptid ester (XVI) i 5 ml H20 og 3 ml methylalkohol og forsæbes med 0,32 ml 1 N NaOH i 90 minutter ved stuetemperatur.
0,32 ml 1 N HC1 tilsættes, og opløsningen koncentreres i vakuum. Ved fortynding med 95% ethanol fås 0,08 g af den 20 i overskriften nævnte forbindelse (XVII), smeltepunkt 250-252°C (sønderdeling), [a]^8 = -2,8° (c = 1 i DMF),
Rfc = 0,56. Aminosyreforhold: Gly 1,04, ala 0,94, Tyr 1,00, Phe 1,05.
25 Eksempel 5
Fremstiling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH^ (XIX) 1 g af den samme peptidharpiks som anført ovenfor i eksempel 3 suspenderes i 10 ml af en (1:1) blanding af methylalkohol og dimethylformamid og mættes med ammoniak 30 ved 0°C. Reaktionsblandingen omrøres i 3 dage ved stuetemperatur, hvorpå harpiksen frafiltreres, vaskes med dimethyl-formamid og befries for opløsningsmiddel ved inddampning i vakuum. Remanensen behandles med en opløsning af hy-drogenchlorid i vandfri tetrahydrofuran, og produktet ud-35 vindes som hydrochloridet fra isopropylalkohol. Der fås 0,09 g af den i overskrift nævnte forbindelse (XIX), smel- 26 143754 o tepunkt 206°C, [a]^ = +49,9° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,58. Aminosyreforhold: Gly 1,05, ala 1,00, Tyr 0,91,
Phe 1,03.
5
Eksempel 6
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z.HC1 (XIV)_ 10 Trin 1: Boc-Ser-NH-NH-Z (I·)
Til en opløsning af 1,0 g (4,87 mmol) Boc-Ser-OH i 20 ml vandfri tetrahydrofuran tilsættes 0,55 ml (4,87 mmol) N-methylmorpholin og 0,49 ml (4,87 mmol) ethyl-chlorformiat efter hinanden ved en temperatur på -12°C.
15 Efter omrøring ved denne temperatur i 2 minutter tilsættes en kold opløsning af 1,0 g (0,87 mmol) I^N-NH-Z.HCl og 0,55 ml (4,87 mmol) N-methylmorpholin i 20 ml dimethyl-formamid. Reaktionsblandingen omrøres i 3 timer ved -10°C og i 1 time ved 20°C, hvorpå salte filtreres fra og der 20 inddampes i vakuum.
Remanensen opløses i ethylacetat og vaskes flere gange efter hinanden med NaCl-mættede opløsninger af 1M citronsyre, 1M NaHCC>3 og vand. Det organiske lag tørres over vandfrit Na2S04, og opløsningsmidlet fjernes i vakuum.
25 Produktet renses ved søjlechromatografi på silicagel, idet der elueres med CHClgiMeOH = 98:2. De ved tyndtlags-chromatografi som homogene bestemte fraktioner samles, og opløsningsmidlet fjernes i vakuum.
Ved formaling med diethylether-petroleumsether 30 fås 1,4 g af forbindelsen (I1), smeltepunkt 42-46°C, [a]J5 = -25,8° (c = 1 i methanol), RfA = 0,52.
O
27 149754
Trin 2: H-Ser-NH-NH-Z.HCl (II') 1.0 g (2,83 mmol) Boc-Ser-NH-NH-Z (I') opløses i 10 ml af en 4 N opløsning af hydrogenchlorid i vandfri tetrahydrofuran ved stuetemperatur. Efter 30 minutter ved 5 stuetemperatur tilsættes diethylether, og bundfaldet filtreres fra.
Det rå produkt omkrystalliseres fra absolut etha-nol-diethylether, hvorved fås 0,7 g af den i overskriften nævnte forbindelse, smeltepunkt 110-115°C, [a]^ = +20,7° 10 (c = 1 i methanol), Rfc = 0,49, 2 = 1*16.
Bzl f
Trin 3: Boc-Tyr-Pro-OH (III1) 1.0 g (8,7 mmol) H-Pro-OH opløses ved stuetemperatur i 4,35 ml 2 N NaOH. Derpå afkøles opløsningen til 0°C, 15 fortyndes med 10 ml dimethylformamid og befries for opløsningsmiddel, som fjernes i vakuum ved 35°C. Remanensen suspenderes i 10 ml dimethylformamid, og 4,3 g (8,7 mmol)
Bzl
Boc-Tyr-ONp tilsættes. Reaktionsblandingen omrøres ved 20 stuetemperatur og inddampes så i vakuum.
Remanensen opløses i vand og vaskes flere gange med ethylacetat. Det vandige lag afkøles til 0°C, syrnes med 5 N vandig saltsyreopløsning til pH 2 og ekstraheres så med ethylacetat. Det organiske lag vaskes med NaCl-mæt-25 tet vandig opløsning til neutralitet og tørres over vandfrit Na2SO^. Ved fjernelse af opløsningsmidlet ved 30°C fås 3,7 g af forbindelsen (III1), smeltepunkt 97-100°C (sønderdeling), [a]= -15,7° (c = 1 i methanol), RfA = 0,70, Eg g = 0,35.
30
Trin 4: Boc-Tyr-Pro-OH (IV)
Bzl 1.0 g (2,13 mmol) Boc-Tyr-Pro-OH (III') i 15 ml methanol hydrogeneres i nærværelse af 0,27 g 10%'s Pd/Cl.
35 Katalysatoren filtreres fra, og opløsningen fortyndes med ethylacetat og koncentreres i vakuum til udfældning. Her- 28
O
149754 ved fås 0,7 g af forbindelsen (IV), smeltepunkt 136-138°C, [<x]p5 = -25,0° (c = 1 i methanol), RfA = 0,42, E^g = 0,52.
Trin 5: Boc-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (V)
5 Ved at gå ud fra 1,0 g (2,65 mmol) Boc-Tyr-Pro-OH
(IV) og 0,77 g (2,65 mmol) H-Ser-NH-NH-Z.HCl (II'), idet der gås frem som i eksempel 1, fås 1,46 g af forbindelsen (V) , som efter krystallisation fra diethylether-petro-leumsether har smeltepunkt 116-118°C, [a]j^ = -46,5° (c = 1 10 i methanol), Rf_ = 0,17, Rf„ = 0,37.
A o
Trin 6: H-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z.HCl (VI')
Idet der gås ud fra 1,0 g (1,63 mmol) Boc-Tyr-Pro--Ser-NH-NH-Z (V), og idet der gås frem som i eksempel 2 15 ovenfor anført, fås 0,78 g af forbindelsen (VI'), der ved omkrystallisation fra diethylether har smeltepunkt 172--174°C, [a]p5 = -38,4° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,46, =1,2 - °'79· 20 Trin 7: Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (VII’)
Ved at gå ud fra 1,0 g (3,8 mmol) Boc-Phe-OH og 0,95 g (3,7 mmol) H-Gly-NH-NH-Z.HCl (K. Hofmann m.fl. J.Am.Chem.Soc. 94, 6171 (1972)) og ved at gå frem som anført i trin 1 fås 1,4 g af forbindelsen (VII'), der om-25 krystalliseret fra methanol-diisopropylether har smelte punkt 143°C, [a]^ = +5,6° (c = 1 i methanol), Rf^ = 0,63.
Trin 8: H-Phe-Gly-NH-NH-Z.HC1 (VIII') 1,0 g (2,1 mmol) Boc-Phe-Gly-NH-NH-Z (VII') behand-30 les i 30 minutter ved stuetemperatur med 10 ml af en 1,3 N opløsning af hydrogenchlorid i eddikesyre. Ved fjernelse af opløsningsmidlet i vakuum ved 30°C og formaling af remanensen med diethylether fås 0,89 g af forbindelsen (VIII'), smeltepunkt 178°C, [a]p5 = +45° (c = 1 i methanol), Rfc = 35 0,78, E1 2 = 0,88.
29
O
149754
Trin 9: Boc-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (IX')
Idet man går ud fra 1,0 g (5,3 mmol) Boc-ala-OH og 2,09 g (5,1 mmol) H-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (VIII*), og idet man går frem som anført i trin 5 ovenfor, får man 5 2,5 g af forbindelsen (IX') efter omkrystallisation ud fra methanol-diisopropylether med smeltepunkt 165°C, [a]^ = +8° (c = 1 i methanol), Rf^ = 0,51.
Trin 10: H-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z.HCl (X') 10 Ved at gå ud fra 1,0 g (1,8 mmol) Boc-ala-Phe- -Gly-NH-NH-Z (XI') og ved at gå frem som anført ovenfor i trin 6 fås 0,84 g af forbindelsen (X')» smeltepunkt 180°C, [o]p5 = +0,2° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,75, E1 2 = °'80· 15 '
Trin 11: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z (XI')
Ved at gå ud fra 1,0 g (3,5 mmol) Boc-Tyr-OH og 1,65 g (3,4 mmol) H-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z.HC1 (X*) og ved at gå frem som anført ovenfor under trin 5 fås 4,24 g af 20 forbindelsen (XI'), som efter krystallisation fra metha- nol-diisopropylether har smeltepunkt 148°C, [a]^ = +16,2° (c = 1 i methanol), RfA = 0,38.
Trin 12: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII')
25 1,0 g (1,4 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z
(XI') i 10 ml methanol hydrogeneres ved stuetemperatur i nærværelse af 0,27 g 10% Pd/C. Ved at arbejde som i trin 4 ovenfor anført fås 0,64 g af forbindelsen (XII'), smeltepunkt 148°C, [a]p5 = +26,6° (c = 1 i methanol), 30 RfB - 0,34, Εχ 2 - 0,57.
Trin 13: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (XIII')
Til en opløsning af 5 g (1,75 mmol) Boc-Tyr-ala--Phe-Gly-NH-NH2 (XII') i 15 ml vandfri dimethylformamid 35 tilsættes efter hinanden 1,1 ml (4,38 mmol) 4 N hydrogen-chlorid i vandfri tetrahydrofuran og 0,2 ml (1,93 mmol) 0 149754 30 n-butylnitrit ved en temperatur på -30°C. Efter omrøring ved denne temperatur i 30 minutter tilsættes 0,5 ml (4,38 mraol) N-methylmorpholin, hvorpå en kold opløsning (-30°C) af 0,803 g (1,46 mmol) H-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z.HC1 (VI') 5 og 0,16 ml (1,46 mmol) N-methylmorpholin i 15 ml vandfri dimethylformamid tilsættes. Reaktionsblandingen lades reagere i 2 dage ved -9°C, hvorpå saltene filtreres fra, opløsningsmidlet fjernes i vakuum, og produktet udhældes i 10%'s citronsyreopløsning afkølet til 0°C. Bundle faldet filtreres fra, vaskes med vand til neutralitet og tørres i vakuum. Produktet omkrystalliseres fra ethylace-tat-diethylether, hvorved fås 1,15 g af forbindelsen (XIII1), smeltepunkt 140-150°C, [a]^ = -20,3° (c = 1 i methanol) ,
Rfg = 0,17, Rfc = 0,92.
15
Trin 14: H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z .HC1 (XIV)
Ved at gå ud fra 1,0 g (0,95 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe--Gly-Tyr-Pro-Ser-NH-NH-Z (XIII1) og ved at gå frem som anført ovenfor i trin 2 fås 0,89 g af forbindelsen (XIV) ud 2 5 20 fra ethylacetat, smeltepunkt 170°C (sønderdeling), [a]^ = -1,08° (c = 1 i methanol), [a]g^ = +1/0° (c = 1 i eddikesyre), Rfc = 0,69, E1 2 = 0,50.
Eksempel 7 25 Fremstilling af H-tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z.HC1 (XVIII1)
Trin 1: Boc-Tyr-NH-NH-Z (XV)
Til en opløsning af 1,0 g (3,55 mmol) Boc-Tyr-OH i 20 ml vandfri tetrahydrofuran tilsættes 0,4 ml (3,55 mmol) N-methylmorpholin og 0,48 ml (3,55 mmol) isobutylchlor-30 formiat efter hinanden ved en temperatur på -12°C. Efter omrøring ved denne temperatur i 2 minutter tilsættes en kold opløsning af 0,72 g (3,55 mmol) ^N-NH-Z.HCl og 0,4 ml N-methylmorpholin i 20 ml dimethylformamid. Reaktionsblandingen omrøres i 90 minutter ved -10°C, hvorpå salte 35 filtreres fra, og der inddampes i vakuum. Remanensen opløses i ethylacetat og vaskes flere gange efter hinanden 31
O
149754 med en vandig opløsning af 1M citronsyre, 1M NaHCO^ og mættet NaCl.
Det organiske lag tørres over vandfrit Na2S0^ og befries for opløsningsmiddel, hvorved fås 1,3 g af for-^ bindeisen (XV'), smeltepunkt 68-70°C, [a]^5 = -5,85° (c = 2 i methanol), RfÅ = 0,76.
Trin 2: H-Tyr-NH-NH-Z.HC1 (XVI') 1,0 g (2,33 mmol) Boc-Tyr-NH-NH-ζ (XV) opløses i io ml af en 4 N opløsning af hydrogenchlorid i vandfri te-trahydrofuran ved stuetemperatur. Efter 30 minutter ved stuetemperatur fjernes opløsningsmidlet i vakuum, og produktet udfældes fra isopropylalkohol-diethylether. Der fås 0,76 g af forbindelsen (XVI'j, smeltepunkt 103-105°C, 15 [<x]p5 = +48,8° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,70, 2 = 0,92.
Trin 3: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z (XVII'j
Til en opløsning af 1,0 g (1,75 mmol) Boc-Tyr-ala--Phe-Gly-NH-N^ (XII') i 15 ml vandfri dimethylformamid 20 tilsættes efter hinanden 1,1 ml (4,38 mmol) 4 N hydrogenchlorid i vandfri tetrahydrofuran og 0,2 ml (1,93 mmol) N-butylnitrit ved en temperatur på -30°C. Efter omrøring ved denne temperatur i 30 minutter tilsættes 0,5 ml (4,38 mmol) N-methylmorpholin og derefter en kold opløs-25 ning (-30°C) af 0,535 g (1,46 mmol) H-Tyr-NH-NH-Z.HC1 (XVI') og 0,16 ml (1,46 mmol) N-morpholin i 15 ml vandfri dimethylformamid. Reaktionsblandingen lades reagere i 3 dage ved -9°C, hvorefter saltene filtreres fra, og opløsningsmidlet fjernes i vakuum. Produktet hældes i en 30 til 0°C afkølet 10%'s vandig citronsyreopløsning. Bundfaldet filtreres, vaskes til neutralitet med vand og tørres i vakuum.
Produktet omkrystalliseres fra isopropylalkohol--diethylether. Der fås 0,85 g af forbindelsen (XVII'), 35 smeltepunkt 137-150°C [a]^ = +3,8° (c = 1 i methanol) ,
RfA = 0,27, Rfg = 0,52.
32
O
149754
Trin 4: H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z.HC1 (XVIII')
Ved at gå ud fra 1,0 g (1,15 iranol) Boc-Tyr-ala--Phe-Gly-Tyr-NH-NH-Z (XVII') og ved at gå frem som anført ovenfor i trin 2 fås 0,83 g af forbindelsen (XVIII') 5 ud fra ethylacetat, smeltepunkt 190-192°C (sønderdeling), [a]^5 = +19,9° (c = 1 i methanol), Rfc = 0,81, Ε± 2 = 0,59.
Eksempel 8
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-Z.HC1 (XIX1) 10 Ved at gå ud fra 1,0 g (0,60 mmol) Boc-Tyr-ala- -Phe-Gly-NH-NH-Z (XI') og ved at gå frem som anført ovenfor i trin 8 i eksempel 6 fås 0,70 g af forbindelsen (XIX') ud fra ethylacetat, smeltepunkt 215°C, [a]^ = +33° (c = 1 i methanol), Rf^ = 0,70, E^ 2 = 0,62.
15
Eksempel 9
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-CO-CH2-CH2-CH3.HC1 (XXI')__
Trin 1: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-CO-CH2-CH2“CH3 (XX') 20 Ved at gå ud fra 0,12 ml (1,3 mmol) smørsyre og 0,742 g (1,3 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII') og ved at gå frem som anført ovenfor i trin 1 i eksempel 6 fås 0,8 g af forbindelsen (XX') ud fra ethylacetat, smeltepunkt 125°C (sønderdeling), [a]^5 = +18,3° (c = 1 i me-25 thanol), Rfg = 0,37.
Trin 2: H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-CO-CH2-CH2-CH3.HCl (XXI')
Ved at gå ud fra 1,0 g (1,46 mmol) Boc-Tyr-ala--Phe-Gly-NH-NH-CO-CH2-CH2-CH3 (XX') og ved at gå frem som 30 anført ovenfor i trin 2 i eksempel 6 fås efter rensning ved søjlechromatografi på silicagel og eluering med chloroform-methanol (9:1) 0,58 g af forbindelsen (XXI'), der ved omkrystallisation ud fra isopropylalkohol-diethyl- o 25 ether har smeltepunkt 215-218 C (sønderdeling) , [a]D = 35 +40,1 (c = 1 i methanol), Rfc = 0,67, Rf^ = 0,84, E^ 2 = 0,75.
o 33 149754
Eksempel 10 ^
Fremstilling af H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-CO-CH-CH2-/q \-OH. - m2 2 HC1 (H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-H,2HC1) (XXIII') 5 Trin 1: Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-Boc (XXII')
Ved at gå ud fra 1,0 g (3,55 mmol) Boc-tyr-OH og 2,03 g (3,55 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH2 (XII') og ved at gå frem som anført ovenfor under trin 1 i eksempel 6 fås 2,3 g af forbindelsen (XXII1) ud fra ethylacetat, 10 smeltepunkt 145-150°C, [a]^ = +14,8° (c = 1 i methanol),
RfA = 0,26, RfB = 0,39.
Trin 2: H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH-tyr-H.2HC1 (XXIII')
Ved at gå fra 1,0 g (1,2 mmol) Boc-Tyr-ala-Phe-Gly-15 -NH-NH-tyr-Boc (XXII') og ved at gå frem som anført ovenfor under trin 2 i eksempel 1 fås 0,760 g af forbindelsen (XXIII') fra diethylether, smeltepunkt 210-215°C (sønderdeling), [a]^ = +13,5° (c = 1 i methanol), Rf^, = 0,48, E. 0 - 0,84.
20 x * *
Endvidere syntetiseres følgende yderligere derivater ifølge den klassiske opløsningsfremgangsmåde:
XX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NH-NH0.2 HC1, smp. 190-195°C
25 ^ (Søndd.) (Diethylether); Rf^, 0,50; E^ 2 1/09.
XXI) H-Tyr-ala-Phe-Sar-NH-NH2.2 HC1, smp. 193-197°C
(Søndd.) (Tetrahydrofuran); Rfc 0,47; 2 1,12.
XXII) H-Tyr-Ala-Phe-Sar-NH-NH-Z.HCl, smp. 150-155°C
(Søndd.) (Ethylacetat); Rf^, 0,70; E, _ 0,59.
30 ^ i.,δ 0
XXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-NH2.HCl, smp. ca. 200 C
(Søndd.) (Ethylacetat); Rfc 0,58; E^ 2 0,59.
XXVI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-NH2.HCl, smp.
ca. 180°C (Søndd.) (Diethylether); Rfc 0,63; E, 9 0,53.
35 1/2 o 34 149754 XXIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Ser-NH2.CF3COOH, smp. 150--153°C (Søndd.) (Diethylether); Rfc 0,59; E^ 2 0,57, XXXI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Hyp-Ser-NH2.HC1, smp. 210- 5 -220°C (Søndd.) (Isopropylalkohol-Diethylether);
Rfc 0,44; RfD 0,66; ^ 2 0,51.
XXXII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-(Bzl)-Hyp-Ser(Bzl)-NH2.HC1, smp. 175-180°C (Søndd.) (Methylalkohol-Diethyl-ether); Rfc 0,67; E^ 2 0,44.
10 XXXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Val-Ser-NH2.CF3COOH, smp.
203-206°C (Søndd.) (Diethylether); Rfc 0,71; E1 2 0,51.
XXXVII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Gly-Ser-NH2.F-jCOOH, smp. 180-190°C (Søndd.) (Diethylether); Rfc 0,51.
15 RfD 0,73; 2 0,52.
XXXIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Pro-Ser-NH2.HC1, smp. 190--195°C (søndd.) (Methylalkohol-Diethylether);
Rfn 0,84; E. „ 0,52.
XLI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser-NH2.HC1, smp. 300 C 20 (Søndd.) (Methylalkohol-Ethylacetat) ;
Rfc 0,47; RfD 0,75; Εχ 2 0,51.
XLII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Phe-Hyp-Ser(Bzl)-NH2.HCl, smp. 160-170°C (søndd.) (Isopropylalkohol-Ethyl-acetat); Rf^ 0,65; E^ 2 0,5Q.
25 XLy) H-Tyr-ala-Phé-Gly-Trp-Pro-Ser-NH2.HCl, smp. 210- -220°C (Søndd.) (Isopropylalkohol-Ethylacetat);
Rfc 0,54; RfD 0,79; 2 0,50.
XLVII) H-Tyr-ala-Phe-Phe-Tyr-Pro-Ser-NH2.HCl, smp. 195- -200°C (Søndd.) (Diethylether); Rfc 0,66; 30 RfD 0,82; E1 2 0,50.
XLVIII) H-Tyr-ala-Phe-Phe-Tyr(Bzl)-Pro-Ser-NH2.HCl, smp.
160-180°C (Søndd.) (Ethylalkohol-Diethylether);
Rfc 0,72; RfD 0,90; Εχ 2 0,46.
L) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Leu-NH9.HCl, smp. 143-147°C
^ 28 o 35 (Isopropylalkohol-Diethylether); [a]D +8,1 (c l, MeOH) ; Rfc 0,73; E-j^ 2 0,62.
35 149754
O
LI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Met-NH2.HCl, smp. 220-225°C
(Isopropylalkohol-Diisopropylether); [cc] 33 + 13,5° (c 1, MeOH); RfQ 0,68; Εχ 2 0,63.
5 LII) H-Tyr-ala-Phe-Sar-Tyr-Pro-Ser-NH2.HCl, Smp.
195-200°C (Søndd.) (Diethylether); Rf^ 0,49;
El 2 0,49; [a]33 + 18,0° (c 1, MeOH).
LUI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Gly-Pro-Ser-NH2.HC1, Smp.
180°C (Søndd.) (Diethylether); [a]38 0 (c 1, 10 MeOH); Rfc 0,32; E1 2 0,58.
LIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NHMe.HCl, Smp.
28 240°C (Søndd.) (Diethylether); [α]D 0 (c 1,
MeOH); Rf^ 0,55; E^ 2 0,52.
LV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NHEt.HCl, Smp.
15 235°C (Søndd.) (Diethylether); [a]38 - 3,54° (c 1, MeOH); Rf 0,62; Εχ 2 0,52.
LVI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-OMe.HCl, Smp.
240°C (Søndd. (Diethylether) ; [a]^8 -4,5° (c 1,
MeOH); Rfn 0,66; E. 9 0,55.
20 LVII) H.Tyr-met-Phe-Gly-NHNHZ.HCl, Smp. 140-143 C
(CHC13/Diethylether); [a]38 - 21,6° (c 1, DMF);
Rfc 0,79; E1 2 0,54.
LVIII) H-Tyr-met(O)-Phe-Gly-NHNHZ.HCl, Smp. 115-120°C
(CHC13/Diethylether); [a]38 - 23,2° (c 1, DMF); 25 Rf 0,69; E1 2 0,53.
LIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNHLrl.HCl, Smp. 191-198°C
23 (Søndd·) (Isopropylalkohol-Diethylether); [a]^ + 46,0° (c 1, MeOH); Rf_ 0,84 E1 _ 0,41.
LX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNHBnl.HCl, Smp. 254-258 C
30 (Søndd.) (CH3OH/CHCl3/ethylacetat); [a]36 + 41,4° (c 1, MeOH) Rf 0,79; E1 2 0,63.
LXI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNHAdoc, Smp. 142-144°C (Søndd.)
Isopropylalkohol/Diethylether) ; [cc]33 + 20,7° (c 1, MeOH); Rf 0,78; 2 0,47.
35 LXII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-NHNHBoc, Smp. 154°c (Søndd.) (Diethylether); Rfc 0,79; E-j^ 2 0,60; [a]33 + 2η go (c 1, MeOH).
o 36 1 4 9 7 54 LXIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Pro-NH^-HCISm.p.: 235°C (diethylether);
Rfc 0,46; Εχ 2 0,64;
RcJ25 + 2,3° (c 1 MeOH) c LXIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Ser-NH„.HCISm.p.: 100°C (dec.)(isopropyl-5 x alkohol/diisopropylether);
Rfc 0,52; E 0,65; fsj20 + 40,7° (c 1 MeOH).
LXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-tyr-NH2-HCISm.p.: 230°C (diethylether); 10 Kfc 0,76; E1 2 0,57; + 49,4° (c 1 MeOH) .
LXVIII) H-Tyr-met-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH„.HC1: Rf 0,56; E 0,50.
ώ C X / 6 LXIX) H-Tyr-ala-Phe-Pro-Tur-Pro-Ser-NH2·HCISm.p.: 200°-205°C (dec.) _ (diethylether); Rf 0,46; lo V*.
E1 2 0,51; fij25 -29,8° (c 1 MeOH).
LXX) H-Tyr-ala-Phe-MePhe-Tyr-Pro-Ser-NH2.HCISm.p.: 210°C (dec.) (ethylacetat); 20 Rfc 0,74; E 0,44; ^19-22 _49,g° (c i, DMF).
LXXII)H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Ppa-Ser-NH2.HCISm.p.: 222°C (dec.) (ethylacetat); Rf 0,73; E 0,52; L X f Δ, 25 B€^22 +1/1° (c 1 MeOH) LXXIV)H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Tia^Ser-NH2.HCl:Sm.p. 225°-228°C (dec.) (diethylether) Rf^ 0,73;
El,2 0,51; 30 A7d9"22 "8'9° (c 1 MeOH).
A) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-^pr-Ser-NH2.HCl LXXV) B) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-4Pr-Ser-NH2.HCl B) Sm.p. 188°C (dec.) (diethylether); Rf^ 0,58; E. „ 0,52; få™ - 40,6° (c 1 MeOH).
35 X i χ u A) Sm.p. 185°C (dec.) (diethylether)? Rf 0,62? - 20 C El,2 °,52f +106,9° (c 1 MeOH).
37 «9754 o LXXVII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Abu-NH2.HC1 E^ 2 0,52.
LXXVIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Gly-NH2.HCISm.p.: 179°-185°C (dec.) (methylalkoholdiisopropylether);
Hfc 0,57; 5 E 0,51; M2* + 14,8° (c 1 MeOH).
LXXIX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-Ser(Bzl)-NH^.HC1
Sm.p. 160°C (dec.) (isopropylalkoholdiethylether);
Rf 0,81; E. . 0,44; fø20 +9,9° (c 1 MeOH) O X / L· ΰ 1 o LXXX) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser(Bzl)-NH2.HCl Sm.p. 174°C (diethylether);
RfC 0,79; Εχ 2 0,48; M^~22 + 4,8° (c 1 MeOH).
LXXX1)H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NHAd.HCISm.p. 160°C (diethylether);
Rf_. 0,90; E. , 0,52; b9^ 15 +17,2 (c 1 MeOH).
LXXX1I) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-OH.HCISm.p. 215° (dec.) (isopropylalkoholdiethylether);
Rfc 0,57; Εχ 2 0,50; 22 o +2,4 (cl MeOH).
20 LXXXIII) H“Tyr-ala-Phe-Gly~Tyr-NHCH2CF3 . HCISm.p. 200°-230°C
(chloroform-die thyle ther-petroleum-ether); Rfc 0,88;
Blf2 0,57; Sg2° +32,4° LXXXV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-tyr-NHNHZ.HCl 25 Sm.p. 225°C (diethylether); Rf 0,85; E 0,50-,
C* x / A
+48,1° (c 1 MeOH) LXXXVI) H-Tyr-ala-Phe-Sar-Tyr-NHNHZ: Rf_>0,90; Rf_ 0,15; E. . 0,53; C S If 2 +30,6° (c 1 MeOH) .
LXXXVII)H - Tyr - ala - Phe - Sar - NH - NH - Z . HCl, 30 o
Smp. 150-155 C (Søndd.) (Ethylacetat); Rf = 0,70; XCII1) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NHNHPh.HCl
Sm.p. 220°C (dec.) (isopropylalkoholdiisopropylether)
Rf 0,85; E 0,52; +8,6° (som fri base, C c=l MeOH).
35 38
O
CII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Pro-Ser-NH -HC1 Rf 0,32? E 0,67
^ L A^ / A
CIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr(Bzl)-Pro-Ser-NH2.HCl
Sm.p. 169°C (dec.) (methylalkoholethylacetat);
Rf 0,65? E 0,46? +5,4° (c 1 MeOH) .
L> A. f A U
g CIV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NHNH2.2HCl
Sm.p. 198°-200°C (dec.)(isopropylalkoholethylacetat)?
Rf 0,52? E 0,86? f^25 -1,4° (c 1 MeOH)
C A. f A D
CV) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Met(0)-NH2.HClSm.p. 125°C (dec.) (diisopropylether)? 10 Rfc 0,37? Εχ 2 0,60.
CVI) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Nva-NH2.HCISm.p. 210°C (diethylether)?
Rfc 0,70? E 0,63? +27,9° (c 1 MeOH) .
CVII) Η-Tyr(Bzl)-ala-Phe-Gly-Tyr-Pro-Ser-NH„.HC1 15 ^
Sm.p. 189°-192 C (dec.) (methylalkoholdiisopropyl- ether)? Rfc 0,66? E^ 2 0,45.
CVIII) H-Tyr-ala-Phe-Gly-Tyr-NHNH2.2HC1
Sm.p. 203°-204°C (dec.)(ethylacetatdiethylether)
Rfc 0,63? E 1,01 20 I ovenstående formler har de anførte symboler eller forkortelser følgende betydning:
O
39 uem . Me = CH3 ; Et = CH2CH3 ; Z = Benzyloxycarbonyl; Lrl = Lauryl ;
Bnl = Benzoyl; Bzl = Benzyl ;
Ad = Adamantyl ; met(O) = D-Methionin-sulfoxyd; 5 MePhe = N-Methylphenyl- Ppa = Pipecolinsyre; alanin;
Aze = 2-Azetidincarbon- Tia = 4-Thiazolidincarboxylsyre; syre;
Pr = —jr Phe(N02) = p-Nitro-phenylalanin;
10 V^COOH
H
Abu = a-Amino-n-smørsyre; Tyr(Bzl) = Tyrosin-O-benzylether;
Ser(Bzl)=Serin-0-benzyl- Cha = Hexahydrophenylalanin ; ether;
Phg = Phenylglycin ; Phe(F) = p-Fluorphenylalanin; 15 3Ala = β-Alanin ; allo Hyp = 4-Allohydroxyprolin; 3Hyp=enten 3-hydroxy- NvA = Norvalin
prolin eller 3-Allo- Tyr(Me) = Tyrosin-O-methylether; hydroxyprolxn; J
Adoc = Adamantyloxy- Boc = tert.Butyloxycarbonyl; carbonyl; But. = Butyryl;

Claims (1)

  1. O 40 149754 Patentkrav« Analogifremgangsmåde til fremstilling af et der-morphinanalogt peptid med den almene formel 5 Y H - Tyr - A - Phe - B - C - W (I) hvori Y er hydrogen eller benzyl, A er en D-aminosyrerest valgt blandt D-alanin, D-methionin og D-methioninsulfoxid, B er en glycin-, en sarcosin-, en L-N-methylphenylalanin-, en phenylalanin- eller en prolinrest, C kan være tilstedeværende eller fraværende, og såfremt den er til stede, er C en aminosyrerest valgt blandt L-tyrosin, D-tyrosin, L-leucin, L-methionin, L-methioninsulphoxid, L-prolin, L- -serin og L-norvalin eller et dipeptid valgt blandt (0-15 -benzyl)-L-tyrosyl-L-prolyl, L-tyrosyl-L-prolyl, L-tyro-syl-L-seryl og L-prolyl-L-seryl eller en tripeptidrest valgt blandt L-tyrosyl-L-prolyl-L-seryl, (O-benzyl)-L--tyrosyl-L-prolyl-L-seryl, L-tyrosyl-L-3- eller -4-hydroxy-proly1-L-seryl, (O-benzyl)-L-tyrosyl-L-3- eller -4-hydroxy- 20 prolyl-L-seryl, (O-benzyl)-L-tyrosyl-L-3- eller -4-hy- droxyprolyl-(O-benzyl)-L-seryl, L-tyrosyl-L-valyl-L-seryl, L-tyrosylglycyl-L-seryl, L-phenylalanyl-L-3- eller -4-hy- droxyprolyl-L-seryl, L-tryptophyl-L-prolyl-L-seryl, L-phe- nylalanyl-L-prolyl-L-seryl, L-phenylalanyl-L-3- eller -4-25 -hydroxyprolyl-(O-benzyl)-L-seryl, glycyl-L-prolyl-L-se- ryl, L-tyrosyl-L-pipecolyl-L-seryl, L-tyrosyl-L-thiazo- lidyl-4-carbonyl-L-seryl, L-tyrosyl-L-3,4-dehydroprolyl- -L-seryl, L-tyrosyl-D-3,4-dehydroprolyl-L-seryl, L-tyrosyl- -L-prolyl-L-a-aminobutyryl, L-tyrosyl-L-prolylglycyl, 30 (O-benzyl)-L-tyrosyl-L-prolyl-(O-benzyl)-L-seryl, L-tyro- syl-L-prolyl-(O-benzyl)-L-seryl og (4-nitro)-L-phenyl- alanyl-L-prolyl-L-seryl og W er OH, OR, , NHR, eller NHNHR', hvori R er -alkyl, adamantyl eller 2,2,2-trifluorethyl, og R1 er benzyloxycarbonyl, adaman-35
DK394280A 1979-09-20 1980-09-17 Analogifremgangsmaade til fremstilling af et dermorphinanalogt tetra-, penta-, hexa- eller heptapeptidderivat eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf DK149754C (da)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB7932590 1979-09-20
GB7932590 1979-09-20
GB8015412 1980-05-09
GB8015412 1980-05-09

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DK394280A DK394280A (da) 1981-03-21
DK149754B true DK149754B (da) 1986-09-22
DK149754C DK149754C (da) 1987-03-23

Family

ID=26272950

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK394280A DK149754C (da) 1979-09-20 1980-09-17 Analogifremgangsmaade til fremstilling af et dermorphinanalogt tetra-, penta-, hexa- eller heptapeptidderivat eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf

Country Status (18)

Country Link
US (1) US4350627A (da)
AT (1) AT381100B (da)
AU (1) AU535769B2 (da)
CA (1) CA1156221A (da)
CH (1) CH645342A5 (da)
DE (1) DE3034897A1 (da)
DK (1) DK149754C (da)
FI (1) FI73699C (da)
FR (1) FR2465713A1 (da)
GB (1) GB2070618B (da)
HU (1) HU186749B (da)
IE (1) IE50793B1 (da)
IL (1) IL61037A (da)
IT (1) IT1196916B (da)
NL (1) NL8005121A (da)
NZ (1) NZ194961A (da)
SE (1) SE448879B (da)
YU (1) YU240880A (da)

Families Citing this family (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI770219A7 (da) 1976-02-02 1977-08-03 Sandoz Ag
US4533657A (en) * 1981-07-24 1985-08-06 Sterling Drug Inc. Analgesic dipeptide amides and method of use and composition thereof
US4454120A (en) * 1981-07-24 1984-06-12 Sterling Drug Inc. Analgesic dipeptide amides and method of use and compositions thereof
US4450155A (en) * 1981-07-24 1984-05-22 Sterling Drug Inc. Analgesic dipeptide amides and method of use and compositions thereof
US4658013A (en) * 1981-07-28 1987-04-14 Sterling Drug Inc. Analgesic and/or opiate antagonist tripeptide amides and processes for preparation and compositions thereof
DE3138233A1 (de) * 1981-09-25 1983-04-07 Farmitalia Carlo Erba S.p.A., 20159 Milano Neuropsychotropisches arzneimittel
US4407746A (en) * 1981-12-14 1983-10-04 G. D. Searle & Co. Cyclohexyl and phenyl substituted enkephalins
US5242798A (en) * 1983-07-21 1993-09-07 Scripps Clinic And Research Foundation Synthetic polypeptides corresponding to portions of proteinoids translated from brain-specific mRNAs, receptors, methods and diagnostics using the same
US4900811A (en) * 1983-07-21 1990-02-13 Scripps Clinic And Research Foundation Synthetic polypeptides corresponding to portions of proteinoids translated from brain-specific mRNAs, receptors, methods and diagnostics using the same
US4460501A (en) * 1983-08-30 1984-07-17 Research Corporation Process for the synthesis of peptides utilizing thioxanthylmethyloxycarbonyl dioxides
DE3333752A1 (de) * 1983-09-19 1985-04-11 Victor Dipl.- Chem. 8000 München Brantl Pharmakologisch aktive peptide
EP0175323B1 (en) * 1984-09-20 1992-04-29 FARMITALIA CARLO ERBA S.r.l. Biologically active peptides, processes for preparing them and pharmaceutical compositions
GB2166139B (en) * 1984-10-25 1988-06-22 Erba Farmitalia Biologically active penta-and heptapeptides
EP0204775A4 (en) * 1984-12-14 1989-10-04 Univ Trobe INHIBITOR OF AMINO ACIDS AND PEPTIDES OF HUMAN LEUCOCYTIC ELASTASE.
US4880778A (en) * 1986-05-12 1989-11-14 Eastman Kodak Company Combinations having synergistic growth hormone releasing activity and methods for use thereof
JPS6360939A (ja) * 1986-08-29 1988-03-17 Shin Etsu Chem Co Ltd 抗菌物質
US4839344A (en) * 1987-06-12 1989-06-13 Eastman Kodak Company Polypeptide compounds having growth hormone releasing activity
US5047502A (en) * 1987-10-23 1991-09-10 Merck And Co., Inc. Gastrin releasing peptide antagonist
DE68922602T2 (de) * 1988-01-28 1995-12-07 Polygen Holding Corp Polypeptide mit hormonwachstumsbefreiender wirkung.
ES2085865T3 (es) * 1988-06-30 1996-06-16 Astra Ab Analogos de dermorfina, sus metodos de preparacion, composiciones farmaceuticas, y metodos de tratamiento terapeutico que los emplean.
US5602100A (en) * 1988-06-30 1997-02-11 Astra Ab Dermorphin analogs having pharmacological activity
DE4124283A1 (de) * 1991-07-15 1993-01-21 Degussa Umesterung von peptiden
SE9203496D0 (sv) * 1992-11-20 1992-11-20 Kabi Pharmacia Ab New oligopeptides
IS4261A (is) * 1994-02-21 1995-08-22 Astra Aktiebolag Nýir peptíð-ópíóíðar til meðhöndlunar á verkjum og notkun þeirra
GB9403263D0 (en) * 1994-02-21 1994-04-13 Iaf Biochem Int Novel opiod peptides
EP1164141A3 (en) * 1994-02-21 2002-01-02 AstraZeneca AB Opioid peptides and their use for treatment of pain
DE4411025A1 (de) * 1994-03-30 1995-10-05 Hoechst Ag Lipopeptid-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung
RU2067000C1 (ru) * 1994-06-29 1996-09-27 Владислав Исакович Дейгин Пептид и способ его получения
US6184208B1 (en) * 1994-06-29 2001-02-06 Immunotech Developments Inc. Peptide, a method for its preparation and a pharmaceutical composition containing the peptide
US6248716B1 (en) * 1995-06-27 2001-06-19 Immunotech Developments Inc. Peptide, a method for its preparation and a pharmaceutical composition containing the peptide
GB9516994D0 (en) * 1995-08-18 1995-10-18 Iaf Biochem Int Solution synthesis of peripheral acting analgestic opioid tetrapeptides
US5885958A (en) * 1997-03-25 1999-03-23 Administrators Of The Tulane Educational Fund Mu-opiate receptor peptides
US6083908A (en) * 1998-01-16 2000-07-04 Novo Nordisk A/S Compounds with growth hormone releasing properties
KR20010034198A (ko) * 1998-01-16 2001-04-25 한센 핀 베네드 성장 호르몬 방출성을 가지는 화합물
HRP20050242B1 (en) * 2005-03-15 2010-09-30 Institut Ruđer Bošković Synthetic peptides containing unnatural adamantane related amino acids for use as antitumour drugs
EP1782819A1 (en) * 2005-11-03 2007-05-09 Cognis IP Management GmbH Oligopeptides and their use
CA3188556A1 (en) * 2020-07-01 2022-01-06 PreveCeutical Medical Inc. Peptides and uses thereof

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA775285B (en) * 1976-09-01 1978-07-26 A Kastin Novel methionine enkephalin derivatives
HU178001B (en) * 1976-09-16 1982-02-28 Gyogyszekutato Intezet Process for preparing new pentapeptides with morphine-like activity and derivatives thereof
US4127532A (en) * 1977-06-16 1978-11-28 Coy David Howard Novel heptapeptides, intermediates therefor, and compositions and methods employing said heptapeptides
GB2000784B (en) * 1977-07-05 1982-01-20 American Home Prod Analgesic polypetide
EP0000559B1 (en) * 1977-07-22 1983-10-05 The Wellcome Foundation Limited Pentapeptide-n-alkylamides and their acid addition salts, methods for preparation of these compounds and pharmaceutical formulations containing them
DE2936099A1 (de) * 1979-09-06 1981-04-02 Victor Dipl.- Chem. 8000 München Brantl Pharmakologisch aktive peptide
US4254024A (en) * 1979-10-16 1981-03-03 Pennwalt Corporation Tetrapeptides and derivatives having opiate activity

Also Published As

Publication number Publication date
IL61037A0 (en) 1980-11-30
IE50793B1 (en) 1986-07-23
DK394280A (da) 1981-03-21
IT1196916B (it) 1988-11-25
SE448879B (sv) 1987-03-23
ATA463580A (de) 1986-01-15
FR2465713B1 (da) 1984-08-31
CA1156221A (en) 1983-11-01
AU535769B2 (en) 1984-04-05
FI73699C (fi) 1987-11-09
NL8005121A (nl) 1981-03-24
AT381100B (de) 1986-08-25
US4350627A (en) 1982-09-21
DE3034897A1 (de) 1981-04-09
YU240880A (en) 1984-02-29
IE801947L (en) 1981-03-20
HU186749B (en) 1985-09-30
NZ194961A (en) 1983-09-30
GB2070618B (en) 1983-06-02
FI73699B (fi) 1987-07-31
FI802876A7 (fi) 1981-03-21
AU6240380A (en) 1981-03-26
SE8006596L (sv) 1981-03-21
CH645342A5 (de) 1984-09-28
DK149754C (da) 1987-03-23
IT8024755A0 (it) 1980-09-19
IL61037A (en) 1984-02-29
FR2465713A1 (fr) 1981-03-27
GB2070618A (en) 1981-09-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK149754B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af et dermorphinanalogt tetra-, penta-, hexa- eller heptapeptidderivat eller et farmaceutisk acceptabelt salt deraf
DK167928B1 (da) Enzym-resistente immunomodulatoriske thymopoietin- eller spleninanaloge peptider og deres farmaceutisk acceptable syre- eller baseadditionssalte samt fremgangsmaade til fremstilling deraf
Nakagawa et al. Synthesis of protected peptide segments and their assembly on a polymer-bound oxime: application to the synthesis of a peptide model for plasma apolipoprotein AI
US4261886A (en) Peptides having thymopoietin-like activity
CN115925790A (zh) 用于合成α4β7肽拮抗剂的方法
FI82255C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya gonadoliberinderivat som paoverkar djurens foeroekningsprocesser.
US4397842A (en) Peptides having thymopoietin-like activity
CA1157466A (en) Peptides having thymopoietin-like activity
FI85866B (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya gonadoliberinderivat vilka foermaor frigoera luteniserande eller follikelstimulerande hormon.
NZ245685A (en) Pseudopeptide bradykinin antagonists and pharmaceutical composition
KORNREICH et al. Peptide N‐alkylamides by solid phase synthesis
US4301045A (en) Synthesis of peptides
JPS59219259A (ja) ゴナドリベリン誘導体
KR850001157B1 (ko) 펩티드의 제조방법
de Leer et al. Synthesis of human growth hormone sequences. Solid‐phase synthesis of protected 1‐10 and 6‐10 HGH
UCHIYAMA et al. Studies on Secretin. I. Synthesis of Completely Protected Secretin
WO2026009243A1 (en) An improved process for the preparation of tirzepatide by using hybrid approach
GB2231051A (en) Bombesin antagonists
EP0056274A1 (en) Indole derivatives and a method for production of peptides
Haridasan et al. Synthesis of substance P partial sequential peptides on a photolytically removable 4-aminomethyl-3-nitrobenzoylaminomethyl polystyrene support
BE885283A (fr) Nouveaux peptides biologiquement actifs et leur emploi comme medicaments
Hashimoto et al. Syntheses and biological activities of neurokinin A analogs substituted with glycine
HU190207B (en) Process for production of new gonadoliberine derivatives
GB1586974A (en) Synthesis of peptide amides
Slaninova et al. Analogs of arginine vasopressin modified in position 3 with (R)-a-hydroxymethylphenylalanine

Legal Events

Date Code Title Description
PBP Patent lapsed