DK160497B

DK160497B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af optisk aktive eller racemiske 7-oxo-pgi2-derivater

Info

Publication number: DK160497B
Application number: DK480480A
Authority: DK
Inventors: Vilmos Simonidesz; Agnes Papp; Gabor Kovacs; Jozsef Ivanics; Julia Der; Istvan Stadler; Istvan Pallagi
Original assignee: Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet
Priority date: 1979-11-12
Filing date: 1980-11-11
Publication date: 1991-03-18
Also published as: CS222191B2; PL227771A1; FI69305B; DK480480A; FI803466L; YU287880A; IL61421A0; ATA556280A; AT380016B; DK160497C; GR71859B; IL61421A; PL129277B1; SU1056899A3; DD154295A5; FI69305C; DE3066636D1

Description

DK 160497 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte optisk aktive eller racemisk 7-oxo-PGI2-derivater med den almene formel I

,- COOQ

5 I

r P—\ (I> 10 s O i , Λ v'' 15 hvori Q betyder hydrogen, en pharmakologisk acceptabel kation eller lavere alkyl, X betyder cis- eller trans-CH=CH-, —C—C— eller -CH2-CH2-, R13 betyder hydrogen eller Ci-4_alka-noyl eller tetrahydropyran-2-yl, R4 betyder hydrogen eller 20 lavere alkyl i a- eller jS-sterisk stilling, R1 og R2 betyder hydrogen eller lavere alkyl, Y betyder methylen eller oxygen, og R3 betyder lavere alkyl eller phenyl.

Den her omhandlede analogifremgangsmåde er karakteriseret ved de i den kendtegnende del af krav 1 angivne 25 foranstaltninger.

De hidtil ukendte biologisk aktive forbindelser med den almene formel I kan betragtes som stabiliserede analoge af det yderst potente PGI2 af naturlig oprindelse. PGI2 (prostacyclin) er første gang omtalt i Nature 263, 663 30 (1976) . PGI2 er et af de mest værdifulde led i arachidon- syrestofskiftet, idet det er aktivt i en meget lille mængde.

Den vigtigste pharmakologiske egenskaber hos forbindelsen er dens anti-aggregerende og hypotensive aktivitet. Endog nanogram af PGI2 inhiberer aggregeringen af thrombocyter og 35 opløser de allerede aggregerede thromber. På grund af dets enestående pharmakologiske aktivitet kan PGI2 blive et ene-

DK 160497 B

2 stående lægemiddel ved behandlingen af vort århundredes sygdom, thrombosis og abnorm haemostasis. Adskilige artikler er blevet offentliggjort om den kliniske anvendelse af stof- j fet.

5 Det vigtigste problem ved anvendelsen af PGI2 som lægemiddel er stoffets ustabilitet. I et surt eller neutralt medium sønderdeles det øjeblikkeligt til 6-keto-PGFla, idet i det er i ligevægt med hemiketalformen deraf. PGI2 indeholder en meget reaktiv enol-ether strukturel enhed, idet det straks 10 omsættes med en ekstern eller intern protonkilde. PGI2 i form af en fri syre er således instabil, og derfor anvendes dets salte og estere i kliniske og pharmakologiske forsøg.

Opfindelsen angår fremstillingen af sådanne hidtil ukendte stabile PGI2-analoge, som ikke udviser den instabile 15 karakter af naturligt PGI2, som forhindrer dettes pharmaceu-tiske anvendelse, men som bevarer den terapeutiske, hovedsageligt thrombocyt-aggregering-inhiberende og thrombolytiske aktivitet af PGI2.

Det har nu vist sig, at de hidtil ukendte, optisk 20 aktive eller racemiske 7-oxo-PGI2-derivater med den almene formel I er mere stabile end de kendte PGI2-derivater og er i besiddelse af en værdifuld PGI2-terapeutisk aktivitet.

I definitionen af Q i formel I kan den pharmakologisk acceptable kation betyde en organisk eller uorganisk kation, 25 som ikke udviser nogen toksisk virkning i den anvendte mængde. Som uorganiske kationer kan anvendes ioner af alkalimetaller, såsom natrium, kalium, eller jordalkalimetaller, såsom calcium eller magnesium.

Som egnede kationer kan nævnes den usubstituerede 30 ammoniumion eller ammoniumionen substitueret med organiske grupper, fortrinsvis med alkylgrupper. Substituenterne på de substituerede ammoniumioner kan bære yderligere substitu-enter, såsom hydroxygrupper eller aminogrupper, for at udøve en gunstig virkning på opløseligheds- og krystallisations-35 egenskaberne hos saltene. F.eks. kan nævnes tris-hydroxyme-thyl-ammoniumionen.

DK 160497 B

3

De ligekædede og forgrenede lavere alkylgrupper kan indeholde 1-6 carbonatorner, såsom methyl, ethyl, n- og isopropyl, n-, sek.-, tert. og iso-butyl og forskellige pentyl-og hexylgrupper. De mest foretrukne repræsentanter indehol-5 der 1-4 carbonatomer.

De R6-hydroxy-blokerende grupper er velkendte i pro-staglandinkemien. De blokerende grupper for hydroxylgruppen kan indføres og spaltes ved i og for sig kendte metoder. Hydroxygrupperne bør blokeres for at oxidere hydroxygruppen 10 selektivt i 7-stilling ved oxidering af forbindelser med den almene formel VI

OR5

oA/W

15 i \*==rOH

/V. (VI) O I1

kV' ^ X - C - c - Y - R

30 ** VJ,

Blokeringsgrupperne kan elimineres efter det sidste elimineringstrin eller efter oxidation.

Forbindelserne med den almene formel I fremstilles 25 ud fra forbindelser med den almene formel III

a λ yCOOQ

,/\/\/ i111) 30 · ykj’* OAc " \ 0 'f -1 ——V I 3

Nc . c - c - Y - R·3 HO'V l2

35 R

DK 160497 B

4 som udgangsmaterialer, hvori R1, R2, R3, R4, X, Y og Q har de ovenfor angivne betydninger, og Ac betyder acetyl. Forbindelserne med den almene formel III er kendte (J. Am. Chem.

Soc. 100. 6756 (1978)) eller kan fremstilles ud fra tilsva-5 rende udgangsmaterialer ved den i det ovenfor angivne litteratursted beskrevne metode.

I første trin af fremgangsmåden omsættes forbindelser med den almene formel III med en lavere aliphatisk alkohol, fortrinsvis methanol, i nærværelse af en syrekatalysator i 10 spormængder ved en temperatur i området fra -78°C til +25°C.

Som syrekatalysator foretrækkes mineralsyrer, sulfonsyrer eller Lewissyrer. Især foretrækkes bortrifluoridetherat.

Isomere ketaler med den almene formel IV

' OR5

15 p_\A/VC00Q

λ. y** oac A , HO' ' X - C - C - Y - R3

H0 VM R

hvori R5 betyder lavere alkyl, opnået ved den angivne omsæt-25 ning, omsættes derefter i form af deres blandinger i et vilkårligt forhold eller efter adskillelse ved chromatografi.

For at gennemføre en selektiv deacylering af 7-acet-oxygruppen og en selektiv oxidation af den opnåede hydroxyl-gruppe blokeres derefter de frie hydroxylgrupper i den op-30 nåede forbindelse med den almene formel IV midlertidigt i et basisk eller alkalisk medium med stabile blokeringsgrupper.

Ved fremgangsmåden bringes forbindelser med den almene formel IV til omsætning med 35 a) silyleringsmidler med den almene formel VII

DK 160497 B

5 R7 R8 - si - Cl (VII) 5 R9 hvori R7, R8 og R9 har samme eller forskellige betydninger og kan betyde ligekædede eller forgrenede alkylgrupper med 1-4 carbonatomer, eller

b) enolethere med den almene formel VIII

10 R1X\ \ R12 JL / (vin) 15 /^^—0

RlO^ hvori R10 og Ri3· betyder ens eller forskellige substituenter valgt blandt hydrogen og methyl, og R12 betyder methyl eller ethyl, eller 20 c) 3,4-dihydro-2H-pyran.

Som silyleringsmidler med den almene formel VII kan anvendes trialkyl-chlor-silaner, såsom dimethyl-tert.butyl--chlor-silan eller trimethyl-chlor-silan. Dimethyl-tert.bu-tyl-chlor-silan anvendes fortrinsvis i aprotiske opløsnings- 25 midler, fortrinsvis i dimethylformamid, i nærværelse af katalysatorer, især imidazol, og trimethyl-chlorsilan kan anvendes i pyridir eller i aprotiske opløsningsmidler i nærværelse af tertiære aminer. Reaktionstemperaturen kan variere inden for et stort område, fortrinsvis mellem -20eC og +60“C.

30 Som enolethere med den almene formel VIII kan for trinsvis anvendes ethyl-vinyl-ether eller isopropenyl-methyl-ether i aprotiske opløsningsmidler, fortrinsvis i dichlor-methan, i nærværelse af en katalytisk syremængde. Som egnede katalysatorer kan nævnes mineralsyrer, phosphoryl-chlorid, 35 sulfonsyrer, fortrinsvis p-toluen-sulfonsyre. Reaktionstemperaturen kan variere inden for et stort område fra -78“C til +50’C.

Der kan gås frem på samme måde med 3,4-dihydro-2H-pyran som angivet for enolethere med den almene formel VIII.

40 Forbindelsen med den almene formel V

DK 160497 B

6 OR5 oVV\/C005 L V^OAC <V> <Ύ f ' \ I q

r6o'" X-C-C-Y-R

r6o' VL

R*1 10 opnået ved de ovenfor nævnte omsætninger og indeholdende en blokeret hydroxylgruppe, hvori R1, R2, R3, R4, R5, X, Y, Ac og Q har de ovenfor angivne betydninger, og R6 betyder en silylgruppe med formlen R7R8R9Si, en a-alkoxyalkylgruppe

15 med formlen R11-CH2-CR10-O-R12 eller en tetrahydropyran-2-yl-gruppe, hvori R7, R8, R9, R10, R11 og R12 har de ovenfor angivne betydninger, hydrolyseres derefter i et basisk medium til tilvejebringelse af forbindelser med den almene formel VI

20 orS

0A/Wcooq

ί \*=rOH

/V , <VI)

25 \ / R

r60''' ^ X - C - C - Y - r3 BPrfVl2 R* 30 Hydrolysen af acetylgruppen gennemføres i lavere alkanoler, fortrinsvis i methanol, under anvendelse af svage baser, fortrinsvis kaliumcarbonat eller vandige opløsninger af alkalimetal- eller jordalkalimetalhydroxider. I sidstnævnte tilfælde må de fra reaktionsblandingen isolerede carboxyl- 35 syrer atter omdannes til lavere alkylestere, fortrinsvis til methylesteren, under anvendelse af især en diazoalkan.

DK 160497 B

7

Reaktionstemperaturen ligger i området fra 0°C til kogepunktet for de anvendte opløsningsmidler. Omsætningen gennemføres hensigtsmæssigt ved stuetemperatur. En længere reaktionstid og en stærkere basisk blanding kan resultere i, at alkyl 5 repræsenteret af R5 også erstattes af hydrogen.

Hydroxylgruppen i forbindelse med den almene formel VI indeholdende hydrogen eller lavere alkyl som R5 oxideres derefter med et hvilket som helst oxidationsmiddel, der er i stand til at oxidere en sekundær hydroxylgruppe til en 10 oxogruppe, såsom Jones-reaktant, Collins-reaktant, thioani-sol-chlorkompleks eller pyridiniumchlorchromat, i aprotiske opløsningsmidler, fortrinsvis i chlorerede carbonhydrider.

Reaktionstemperaturen kan variere inden for området -40°c til +50*C.

15 Substituenterne i 7-oxo-derivater med formlen II

OR5

t\SA/C00Q

20 /Ay'' (II) G .> 6 '\ I 3

K 0 / X-C-C-Y-K

R6o' V*· L

25 R

opnået i den ovenfor beskrevne oxidation har samme betydninger som angivet for forbindelserne med formel VI.

Oxidationen kan også gennemføres med forbindelser med den almene formel VI, hvori R5 betyder hydrogen. I dette 30 tilfælde oxideres den sekundære hydroxygruppe selektivt, og således opnås hemiketalderivater med den almene formel II, som indeholder hydrogen for R5.

Blokerende grupper R® i de opnåede forbindelser med den almene formel II kan derefter eventuelt fraspaltes, og 35 de frie hydroxyl grupper kan også acyleres med en alkanoyl-gruppe med 1-4 carbonatomer. I den sidste elimineringsreak-

DK 160497 B

8 tion kan man anvende begge forbindelser med den almene formel II indeholdende frie hydroxylgrupper og R6-blokerede eller acylerede hydroxylgrupper.

7-OX0-PGI2-derivater med den almene formel I opnås 5 fra 7-oxo-derivater med den almene formel II ved eliminering af R^-OH fra de nævnte forbindelser.

Forbindelser med den almene formel I indeholdende hydrogen som R13 kan fremstilles ud fra forbindelser med den almene formel II indeholdende lavere alkyl som R5 og 10 hydrogen som R6 ved eliminering af alkoholen med formel R5--0H. Elimineringen af alkoholen gennemføres ved opvarmning i forskellige dipolære aprotiske opløsningsmidler, såsom dimethylformamid, dimethylsulfoxid eller hexamethyl-phosphor-syretriamid.

15 Reationstemperaturen kan være i området fra 70°C til 180°C. Elimineringen kan accelereres ved anvendelse af substanser, der fremmer elimineringen af alkohol, såsom C1-4-alkananhydrider, benzen og toluen. Når der anvendes syrean-hydrider, kan der også dannes forbindelser med den almene 20 formel I indeholdende acyl for R13, hvilke acylgrupper kan elimineres ved basekatalyseret alkoholyse. Forbindelser med den almene formel I indeholdende lavere alkyl for Q kan isoleres efter rensning, f.eks. ved søjlechromatografi.

Forbindelser med den almene formel I med en hydroxyl-25 blokerende gruppe R® for R13 kan fremstilles ud fra forbindelser med den almene formel II, hvori R5 betyder en lavere alkylgruppe, ved elimineringsomsætning som beskrevet ovenfor. Forbindelser med den almene formel I med en blokeringsgruppe R6 som R13 kan isoleres efter rensning ved søj lechromatogra-30 fi, og blokeringsgrupperne kan eventuelt fraspaltes, hvorved produkterne omdannes til forbindelser med den almene formel I med hydrogen som R13. De trialkyl-silyl-blokerende grupper kan fortrinsvis fjernes med tetrabutyl-ammoniumfluorid i opløsningsmidler af ethertypen, især i tetrahydrofuran, ved 35 en temperatur på -20°C til +50°C, fortrinsvis ved stuetemperatur.

9

DK 160497 B

7-Oxo-PGI2-derivater med den almene formel I kan også fremstilles ud fra forbindelser med den almene formel II indeholdende hydrogen som R5 ved eliminering af vand. Elimineringen kan foretages ved azeotrop destillation i aromatiske 5 carbonhydrider i nærværelse af vandbindende midler. Efter fjernelse af blokeringsgrupperne kan forbindelser med den almene formel I indeholdende lavere alkyl som Q og hydrogen som R13 renses, f.eks. ved chromatografi.

Forbindelser med den almene formel I indeholdende en 10 pharmakologisk acceptabel kation som Q kan opnås fra de tilsvarende estere med den almene formel I med en Ci-4~alkyl-gruppe som Q ved vandig alkalisk hydrolyse. Som hydrolyserende midler kan anvendes vandige opløsninger af alkalimetal-og jordalkalimetalhydroxider ved en temperatur i området 15 fra 0“C til 100°C, og saltene isoleres f.eks. efter lyophi-lisering. Carboxylsyrerne kan frigøres fra vandige opløsninger af saltene ved omhyggelig acidificering, og syrerne kan omdannes til yderligere salte ved at opløse dem i organiske opløsningsmidler og ved at omsætte dem med aliphatiske og 20 aromatiske aminer.

De hidtil ukendte forbindelser med den almene formel I udviser ligesom det naturlige PGI2 en thrombocyt-aggrege-ring-inhiberende og thrombolytisk aktivitet. De kan anvendes ved behandling af astma, myocardiel infarkt, thrombosis, 25 ulcer, vaskuløse forstyrrelser hos pattedyr, især hos mennesker.

Pharmaceutiske præparater, der som aktiv bestanddel indeholder 7-oxo-PGI2-derivater med den almene formel I, kan anvendes til fremme af thrombolysen af allerede påvist throm-30 bosis og til forhindring af dannelsen af en sådan thrombe.

Den profylaktiske aktivitet er af stor betydning i konservering af blod, perfusion af organer, væv og i elimineringen af thrombusfaren efter operationer.

ID5Q-koncentrationer i tilfælde af aggregering frem-35 kaldt med ADP og collagen i plasma beriget med thrombocyter (PRB) isoleret fra humanblod er angivet nedenfor. Til sammen-

DK 160497 B

10 ligning angives ID5o-koncentrationsværdier opnået med PGI2-natriumsalt under de samme forsøgsbetingelser.

Thrombocyt-aggregering-inhiberende aktivitet: ID50(ng/ml) 5

Substans, som fremkalder aggregering ADP Collagen Natriumsalt af PGI2 1-2 1-2

Natriumsalt af 7-0X0-PGI2 15 80 7-Oxo-PGI2-methylester 100-200 50 10

Det er bemærkelsesværdigt, at den mave-funduskontra-herende aktivitet er 0,1 gange aktiviteten af PGI2.

De ovenfor angivne data viser, at den thrombocyt-aggregering-inhiberende aktivitet af de her omhandlede for-15 bindeiser er mindre effektiv end det er tilfældet med det naturlige PGI2, men på grund af stabiliteten af de her omhandlede forbindelser i opløsning og på grund af den ovenfor påviste høje aktivitet er forbindelserne særligt anvendelige som aktive bestanddele i pharmaceutiske præparater. Dosen 20 af 7-oxo-PGI2 -derivater med den almene formel I er i området fra 100 ng til 100 mg pr. dag afhængig af den ønskede effektivitet, af indgivelsesmåde og af sensitiviteten af den person, det dyr, organ eller væv, der skal behandles.

I tilfælde af fortsat infusion er en daglig dosi på 25 1-10 mg almindeligvis tilstrækkelig. Den individuelle dosis kan uden vanskeligheder bestemmes af en læge på basis af intensiteten af patientens reaktion.

Forbindelser med den almene formel I kan anvendes i sædvanlige pharmaceutiske formuleringer, såsom væske, fast-30 stof, semi-faststof, pasta eller salve. Som flydende præparater kan nævnes opløsninger, emulsioner af injicerbare opløsninger, infusionsopløsninger og drops og som faste præparater tabletter, kapsler, store piller, dragéer, pulvere eller pulverglas. Præparaterne kan indeholde de sædvanligvis 35 anvendte fyldstoffer, fortyndingsmidler, additiver, der øver indflydelse på det osmotiske tryk og pH-værdi, smags-

DK 160497 B

11 og aromastoffer, smøremidler, fugtemidler eller midler, som forhaler opløsning.

De yderligere enkeltheder ved opfindelsen angives i de følgende eksempler.

5

Fremstilling af mellemprodukter med formel II.

Eksempel 1 7 β-Acetoxy-6-keto-PGFla-methyl-ester-methyl-ketal 10 (Formel IV, hvori R5 og Q betyder methyl, R1, R2 betyder hydrogen, X betyder trans-vinyl, R4 betyder hydrogen i jø-sterisk stilling, Y betyder methylen, og R3 betyder propyl).

1 g af en forbindelse med den almene formel III, 15 hvori substituenterne har samme betydning som for slutproduktet, opløses i 10 ml methanol, og bortrifluoridetherat sættes til opløsningen i katalytisk mængde. Reaktionsblandingen omrøres i 20 minutter. Efter tilsætning af en lille mængde fast natriumhydrogencarbonat destilleres methanol fra i 20 vakuum, og remanensen opløses i ethylacetat. Ethylacetatop-løsningen vaskes derpå med vand og mættet vandig natriumchlo-ridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres, og opløsningsmidlet destilleres fra. Den resterende olie elueres på 120 g silicagel med ethylacetat, og således opnås 25 240 mg (22%) oxo-methyl-ketal og 680 mg (63%) endo-methyl- ketal i form af en farveløs olie. exo-IV: Rf = 0,31 fremkaldesesmiddel: ethylacetat 6½ NMR 3,64 (3H, C00CH3) , 3,24 (3H, 0CH3)

Endo-IV: Rf = 0,26 fremkaldsesmiddel: ethylacetat 30 5½ NMR 3,57 (3H, COOCH3) , 3,14 (3H, 0CH3)

Eksempel 2 7/3-Acetoxy-6-keto-PGFla-methylester-methyl-ketal-ll, 15-bis-(tert.butyl-dimethyl-silyl)-ether.

35 (Formel V, hvori R6 betyder tert.butyl-dimethyl-silyl, og de andre substituenter har samme betydning som i eksempel 1).

12

DK 160497 B

700 mg (1,52 mmol) methyl-ketal med formel IV opnået ifølge eksempel 1 opløses i 1,4 ml vandfrit dimethyl formamid, og 517 mg (7,6 mmol) imidazol og 552 mg (3,6 mmol) tert.bu-5 tyl-dimethyl-chlor-silan sættes til opløsningen. Reaktionsblandingen omrøres i 4 timer ved 35-40°c og hældes på 30 ml vand. Den vandige opløsning ekstraheres med 3 x 50 ml dichlormethan, og de kombinerede dichlormethanekstrakter vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres 10 med vandfrit natriumsulfat, filtreres, og opløsningsmidlet destilleres fra. Den resterende olie chromatograferes på 120 g silicagel med en 8:l-blanding af hexan og ethylacetat. Således opnås 788 mg (75%) af ovennævnte produkt i form af en farveløs olie. Rf: 0,42 fremkaldt med en 7:l-blanding af 15 hexan og. ethylacetat.

5½ NMR: 2,05 (3H, OAc), 0,88 (6H, tert.butyl).

Eksempel 3 7/3 -Hydroxy- 6 -keto-PGF ^a-methylester-me thyl -ketal -11,15-bis-20 (tert.butyl-dimethyl-silyl)-ether.

(Formel VI, hvori substituenterne har de i eksempel 2 angivne betydninger).

200 mg (0,29 mmol) silylether med den almene formel V ifølge eksempel 2 opløses i 2 ml methanol, og en katalytisk 25 mængde frisk kalcineret kaliumcarbonat sættes til opløsningen. Reaktionsblandingen omrøres i én time ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet destilleres fra i vakuum, remanensen opløses i ethylacetat, vaskes med mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat, filtreres, og opløs-30 ningsmidlet afdrives. Den resterende olie chromatograferes på 20 g silicagel og elueres med en 4:l-blanding af hexan og ethylacetat. Således opnås 150 mg (80%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie. Rf: 0,5 fremkaldelsesmiddel: 4:l-blanding af hexan og ethylacetat.

35 IR (film) 3350 cm-1 (OH).

DK 160497 B

13

Eksempel 4 7/?-Hydroxy-6-keto-PGFla-methylester-hemiketal-ll, 15-bis-(tert.butyl-dimethyl-silyl)-ether.

(Formel VI, hvori R5 = hydrogen, de andre substituen-5 ter har samme betydninger som i eksempel 2).

200 mg (0,29 mmol) silylether ifølge eksempel 2 med den almene formel V opløses i 2 ml methanol, og der tilsættes 50 mg frisk calcineret kaliumcarbonat. Reaktionsblandingen omrøres ved stuetemperatur i 48 timer. Reaktionsblandingen 10 oparbejdes yderligere ifølge eksempel 3. Det rå produkt chromatograferes på 20 g silicagel med en 2:l-blanding af ehxan og ethylacetat. Der opnås således 113 mg (60%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie. Rf: 0,1 fremkaldt med 4:l-blanding af hexan og ethylacetat.

15 5½ NMR: 3,67 (3H, COOCH3) .

Eksempel 5 7-0xo-6-keto-PGFla-methylester-methylketal-ll,15-bis- (tert. -butyl-dimethyl-silyl)-ether.

20 (Formel II, hvori R5 betyder methyl, og de andre substituenter har de i eksempel 2 angivne betydninger).

75 mg (0,11 mol) af en forbindelse med den almene formel VI (produkt ifølge eksempel 3) opløses i 0,7 ml di-chlormethan, og der sættes 63 mg (0,29 mmol) pyridinium-25 chlorchromat til opløsningen.

Reaktionsblandingen behandles med natriumacetatpuffer, hvorefter blandingen omrøres i 5 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen filtreres, vaskes med dichlormethan, og det kombinerede filtrat inddampes. Remanensen chromatografe-30 res på 10 g silicagel ved eluering med en 12:1-blanding af hexan og ethylacetat.

Der opnås således 56 mg (75%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie.

Rf: 0,59 fremkaldt med en 7:1-blanding af hexan og ethylace-35 tat.

IR (film): 1735 cm-1 (C=0). 1000-1250 cm-1 (0-C-0).

DK 160497B

14

Eksempel 6 7-Oxo-6-keto-PGFla-methylester-hemiketal-ll, 15-bis- (tert.butyl-dimethyl-silyl) -ether.

(Formel II, hvori R5 betyder hydrogen, og de andre 5 substituenter har de i eksempel 2 angivne betydninger).

50 mg (0,08 mol) sily lether med formlen VI ifølge eksempel 4, hvori R5 betyder hydrogen, opløses i 0,5 ml dichlormethan, og der tilsættes 45 mg (0,21 mmol) pyridinium-chlorchromat. Reaktionsblandingen omrøres i 6 timer ved 10 stuetemperatur. Reaktionsblandingen oparbejdes derpå ifølge eksempel 5, og råproduktet chromatograferes på 10 g silicagel og elueres med en l:l-blanding af ethylacetat og hexan. Der opnås således 37 mg (75%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie. Rfi 0,55 fremkaldt med en l:l-blanding 15 af ethylacetat og hexan.

IR (film): 3300 cm”1 (OH), 1730”1 (C=0).

Eksempel 7 7/3-Acetoxy-6-keto-PGFla-methylester-methylketal-ll, 15-bis-20 (tetrahydropyran-2-yl)-ether.

(Formel V, hvori R6 betyder tetrahydropyran-2-yl, og de andre substituenter har de i eksempel 1 angivne betydninger) .

570 mg (1,24 mmol) af en forbindelse med formlen IV 25 ifølge eksempel 1 opløses i 5 ml vandfri dichlormethan, og 1,13 ml (12,4 mmol) vandfri 3,4-dihydro-2H-pyran og en katalytisk mængde p-toluen-sulfonsyre tilsættes. Reaktionsblandingen omrøres i 10 minutter ved stuetemperatur, fortyndes med 50 ml ethylacetat, og ethylacetatopløsningen vaskes 30 derpå med mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning, med vand og atter med mættet natriumchloridopløsning. Blandingen tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres, og opløsningsmidlet destilleres fra.

Der opnås således 831 mg (råprodukt) af ovennævnte 35 produkt i form af en lysegul olie.

Rf: 0,53 fremkaldt af en l:l-blanding af benzen og ethylace-

DK 160497 B

15 tat.

IR (film): 1740 cm”1 (C=0), 1000-1200 cm"1 (O-CH-O).

Den nævnte forbindelse fremstillet som beskrevet ovenfor kan omsættes i det næste reaktionstrin uden rensning.

5

Eksempel 8 7/3-Hydroxy-6-keto-PGFia-methylester-methylketal-ll, 15-bis-(tetrahydropyran-2-yl)-ether.

(Formel VI, hvori substituenterne har de i eksempel 10 7 angivne betydninger).

831 mg (1,32 mmol) af en forbindelse med formel V opnået ifølge eksempel 7 opløses i 8 ml methanol, og frisk calcineret kaliumcarbonat i en katalytisk mængde sættes til opløsningen. Reaktionsblandingen omrøres i én time ved stue-15 temperatur og oparbejdes ifølge eksempel 3. Den resterende olie chromatograferes med en l:l-blanding af benzen og ethyl-acetat på 40 g silicagel. Der opnås således 471 mg (65%) af det ovenfor nævnte produkt i form af en farveløs olie.

Rf: 0,35 fremkaldt med en l:l-blanding af benzen og ethyl-20 acetat.

IR (film): 3350 cm”1 (OH), 1735 cm”1 (C=0).

1000-1200 cm”1 (O-CH-O).

Eksempel 9 25 7-Oxo-6-keto-PGFia-methylester-methylketal-ll,15-bis-(tetra-hydropyran-2-yl)-ether.

(Formel II, hvori substituenterne har de i eksempel 7 angivne betydninger).

344 mg (0,59 mmol) af en forbindelse med formlen VI 30 opnået ifølge eksempel 8 opløses i 3,5 ml dichlormethan, og 254 mg (1,18 mmol) pyridiniumchlorchromat sættes til opløsningen. Reaktionsblandingen behandles med natriumacetatpuffer, hvorefter reaktionsblandingen omrøres i 5 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen oparbejdes som beskrevet 35 i eksempel 5. Råproduktet chromatograferes på 30 g silicagel med l:l-blanding af benzen og ethylacetat.

DK 160497 B

16

Der opnås 275 mg (80%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie.

Rf: 0 ,57 fremkaldt med en 1 :l-blanding af benzen og ethyl-acetat.

5 IR (film): 1730-1740 cm”1 (C=0), 1000-1200 cm”1 (O-CH-O).

Eksempel 10 7-0xo-6-keto-PGFla-methylester-methylketal.

(Formel II, hvori R6 betyder hydrogen, og de andre 10 substituenter har de i eksempel 1 beskrevne betydninger).

194 mg (0,33 mmol) methylketal med formel II ifølge eksempel 9, hvori R6 betyder tetrahydropyranyl, og de andre substituenter har de for ovennævnte produkt angivne betydninger, opløses i 10 ml methanol, og en katalytisk mængde 15 p-toluen-sulfonsyre sættes til reaktionsblandingen. Opløsningen omrøres i én time ved stuetemperatur, og opløsningsmidlet destilleres fra i vakuum. Remanensen opløses i ethylacetat, ethylacetatopløsningen vaskes derpå med mættet vandig na-triumhydrogencarbonatopløsning, med vand og med mættet vandig 20 natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat, filtreres, og opløsningsmidlet destilleres fra.

Den resterende olie chromatograferes på 15 g silicagel med en 2:l-blanding af benzen og ethylacetat. Der opnås således 117 mg (85%) af den nævnte forbindelse i form af en 25 farveløs olie.

Rfi 0,34 fremkaldt med ethylacetat.

5½ NMR (CDC13) : 3,67 (COOCH3) , 3,17 (0CH3) IR (film): 3350 cm"1 (OH), 1735 cm"1 (C=0).

Ved anvendelse af de tilsvarende substituerede ud-30 gangsmaterialer med formlen III kan følgende mellemprodukter med den almene formel II fremstilles ifølge de i eksempel 1-10 beskrevne fremgangsmåder: hemiketal af 7-oxo-6-keto-16-methyl-PGF^a-methyl-, ethyl-, propyl- og butylestere og methyl-, ethyl-, propyl- og butyl-35 ketaler deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-16,16-dimethyl-PGFla-methyl-,

DK 160497 B

17 ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl-og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-16-phenoxy-17,18,19,2 0-tetranor-PGFia-methyl-, ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, 5 ethyl-, propyl- og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-20-methyl-PGF]_a-methyl-, ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl- og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-keto-13,14-didehydro-PGFla-methyl-, e-10 thyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl- og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-15-methyl-PGFia-methyl-, ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl- og butylketal deraf, 15 hemiketal af 7-oxo-6-keto-15-epi-PGF^a-methyl-, ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl- og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-15-epi-16,16-dimethyl-PGFla-me-thyl-, ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, 20 propyl- og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-15-epi-16-phenoxy-l7,18,19,20-tetranor-PGFla-methyl-, ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl- og butylketal deraf, hemiketal af 7-oxo-6-keto-15-epi-20-methyl-PGFia-methyl-, 25 ethyl-, propyl- og butylester og methyl-, ethyl-, propyl-og butylketal deraf.

Hvis blokeringsgrupperne i løbet af syntesen ikke spaltes ifølge eksempel 10, så opnås 11,15-bis-silyloxy-, ll,15-bis-(tetrahydropyran-2-yl)- og ll,15-bis-(a-alkoxyal-30 kyl)-derivater af de ovenfor nævnte forbindelser (R6 betyder silyl, tetrahydropyran-2-yl og α-alkoxyalkyl).

Udtrykket "epi-derivat" betyder et derivat, hvori carbonatomet i stillingen angivet ved tallet foran "epi" har en substituent af sterisk stilling, som er den modsatte 35 af det tilsvarende carbonatom i det naturlige prostaglandin.

DK 160497 B

18

Fremstilling af slutprodukter med formel I.

Eksempel 11 7-Oxo-PGI2-methylester 5 (Formel I, hvori Q betyder methyl, R1, R2, R13 betyder hydrogen, X betyder trans-vinyl, R4 betyder β-hydrogen, Y betyder methylen, og R3 betyder propyl).

20 mg (0,31 mmol) af en forbindelse med den almene formel II ifølge eksempel 5, hvori R5 betyder methyl, R6 10 betyder dimethyl-tert.butyl-silyl, og de andre substituenter betyder de samme grupper som defineret for ovennævnte forbindelse, opløses i 5 ml hexamethylphosphorsyretriamid. Reaktionsblandingen omrøres i 3 timer ved 150-160°C og hældes i 18 ml vand. Det vandige lag ekstraheres med 3 x 15 ml ethyl-15 acetat, og den kombinerede ethylacetatekstrakt vaskes med mættet natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres, og opløsningsmidlet destilleres fra. 250 mg af det resterende produkt opløses i 5 ml tetrahydrofuran, og efter tilsætning af 2 ækvivalenter tetrabutyl-ammonium-20 fluorid omrøres blandingen i 3 timer ved stuetemperatur. Opløsningsmidlet destilleres fra i vakuum, og remanensen opløses i ethylacetat. Ethylacetatopløsningen vaskes med vand, mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over vandfrit natriumsulfat, filtreres, og opløsningsmidlet de-25 stilleres fra. Den resterende olie chromatograferes på 10 g silicagel med ethylacetat. Der opnås således 62 mg (50%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie.

Rf: 0,44 fremkaldt af ethylacetat.

% NMR: δ 5,37 (IH, t, 0-C=CH-), 3,76 (3H, s, -C00CH3).

30

Eksempel 12 7-Oxo-PGI2-methylester 200 mg (0,31 mmol) af en forbindelse med den almene formel II ifølge eksempel 6, hvori R5 betyder hydrogen, R6 35 betyder dimethyl-tert.butyl-silyl, og de andre substituenter er som angivet i eksempel 11, opløses i 30 ml vandfrit ben-

DK 160497 B

19 zen, og opløsningen opvarmes i 2 timer i en "Soxhlet"-eks-traktor indeholdende magnesiumsulfat. Det organiske lag vaskes med vand og mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres med vandfrit natriumsulfat, filtreres, og opløsnings-5 midlet destilleres fra. Det rå produkt behandles med 2 ækvivalenter tetrabutyl-ammoniumfluorid i tetrahydrofuran, og reaktionsblandingen oparbejdes derpå som beskrevet i eksempel 11. Produktet chromatograferes på 10 g silicagel, og som elueringsmiddel anvendes ethylacetat. Der opnås således 52 10 mg (45%) af ovennævnte produkt i form af en farveløs olie. Produktets fysiske konstanter er som angivet i eksempel 11.

Eksempel 13 7-Oxo-PGI2-methylester 15 90 mg (0,215 mmol) 7-oxo-6-keto-PGFla-methyl-ester- methylketal ifølge eksempel 10 (formel II, hvori R5 betyder methyl, og R6 er hydrogen) opløses i 0,8 ml hexamethyl-phos-phorsyre-triamid, og reaktionsblandingen omrøres i 2 timer ved 140-150°C. Blandingen oparbejdes ifølge eksempel 11.

20 Den resterende olie chromatograferes på 10 g silicagel og elueres med ethylacetat. Der opnås således 40 mg (47%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie. Produktets fysiske konstanter er som angivet i eksempel 11.

25 Eksempel 14 7-Oxo-PGI2-methylester 11,15-diacetat (Formel I, hvori R13 betyer acetyl, Q betyder methyl, R1 og R2 betyder hydrogen, R4 betyder β-hydrogen, X betyder trans-vinylen, og Y betyder methylen).

30 100 mg 7-oxo-6-keto-PGFla-methylester-methyl-ketal- 11,15-diacetat opløses i 3 ml hexamethylphosphorsyre-triamid i nærværelse af 0,05 ml eddikesyreanhydrid, og opløsningen omrøres i 2 timer ved 80-100“C. Reaktionsblandingen oparbejdes yderligere ifølge eksempel 11. Det rå produkt chromato-35 graferes på 15 g silicagel og elueres med en l:l-blanding af ethylacetat og hexan.

DK 160497 B

20

Der opnås således 70 mg (70%) af ovennævnte forbindelse i form af en farveløs olie.

Rf = 0, 65 fremkaldt med en l:l-blanding af ethylacetat og hexan.

5

Eksempel 15 16,16-Dimethyl-7-oxo-PGl2~methylester (Formel I, hvori R1 og R2 betyder methyl, og de andre substituenter har de i eksempel 11 angivne betydninger).

10 90 mg (0,21 mmol) 16,16-dimethyl-7-oxo-6-keto-PGFla- -methylester-methyl-ketal, hvori R1 og R2 betyder methyl, opløses i 1 ml hexamethylphosphorsyre-triamid, og reaktionsblandingen omrøres i 2 timer ved 140-150°C.

Blandingen oparbejdes yderligere ifølge eksempel 13.

15 Der opnås således 50 mg (56%) af ovennævnte forbin delse i form af en farveløs olie.

Rf = 0 ,52 (i ethylacetat).

Eksempel 16 20 Natriumsalt af 7-0X0-PGI2 (Formel I, hvori Q betyder natrium, og de andre substituenter har de i eksempel 11 angivne betydninger).

50 mg (0,13 mmol) 7-oxo-PGl2-methylester opløses i 0,1 ml methanol, og der tilsættes 1,4 ml 0,1 N vandig na-25 triumhydroxidopløsning. Når tilsætningen er tilendebragt, omrøres reaktionsblandingen i 24 timer ved stuetemperatur. Opløsningen lyophiliseres. Der opnås således 55 mg af oven-nævnte forbindelse i form af en hvid masse. [a]D =+80° (c = 1, H2O), Rf i benzenidioxan:eddikesyre (20:10:10) =0,35, 30 smp. 57-60°C.

Omsætningerne ifølge eksempel 11 til 16 gentages, idet der som udgangsmaterialer anvendes forbindelser med den almene formel II fremstillet ifølge eksempel 1 til 10. Følgende produkter opnås: 35 7-0xo-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-PGl2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,57),

DK 160497 B

21 7-oxo-16-methyl-PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,49), 7-oxo-13,14-didehydro-PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,47), 7-oxo-15-methyl-PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,53), 5 7-oxo-15-epi-PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,50), 7-oxo-15-epi-16,16-dimethyl-PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,58), 7-oxo-15-epi-16-phenoxy-17,18,19,20-tetranor-PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,63), 10 7-oxo-15-epi-20-methy 1 -PGI2-methylester (Rf i ethylacetat: 0,55).

Frie syrer kan fremstilles ved forsæbning som angivet i eksempel 16 fra et alkalimetalsalt, såsom natriumsalt, ved acidificering af den vandige opløsning deraf med en 15 stærk organisk eller uorganisk syre. Den frie syre bundfælder fra opløsningen.

Eksempel 17

Dette eksempel indeholder resultater fra yderligere 20 afprøvninger af forbindelser med formel I.

1. Pharmakoloaiske data.

a). Aktivitet af ll,15-diacetyl-PGI2-ethylester på blod-pladeaggregering (afhængigt af medikamentets inkuba-25 tionstid med blodpladen).

Ved en koncentration på 20 βg/ml kan der i løbet af en inkubationstid på 1 minut opnås en inhibering på 68%, før det aggregogene middel tilsættes. Ved en koncentration 30 på 0,5-5 Mg/ml ved en inkubationstid på 5-10 minutter kan der opnås en inhibering på 35-100%.

DK 160497 B

22

Koncentration Inkubationsperiode Inhibering 0,25 jtxg/ml 5 minutter 100% 0,05 Mg/ml 10 minutter 100% 5 0,025 Mg/ml 10 minutter 30% 0,025 Mg/ml 30 minutter 52% På basis af dette forsøg kan forsøgsforbindelsen 10 betragtes som et medikamentforstadium.

b). Aggregeringsinhiberende aktivitet af 7-oxo-PGI2-me-thylester-11,15-diacetat (forbindelse fra eksempel 14).

15

Også denne forbindelse kan betragtes som et medikamentforstadium, fordi den deacetyleres af esteraser, afhængigt af inkubationstiden. Forsøget udføres med blodplasma, og aktiviteten af den dannede, deacetylerede forbindelse 20 måles kontinuerligt.

ld50

Tid Kaninblod Menneskeblod 0 minutter 500 μg/ml 40-50 μg/ml 25 5 minutter 100 /ig/ml 500 μg/ml 10 minutter 15 μg/ml 100 μg/ml LD50 er den dosis, som bevirker en inhibering af 30 aggregeringen på 50% i kanin- og menneskeblodprøven behandlet med ADP efter det angivne tidsrum.

Det vil ses, at styrken af aktiviteten vokser signifikant i afhængighed af inkubationstiden.

Når de to forsøg sammenlignes, vil det ses, at beskyt-35 telsesgrupperne i forbindelsen med formel I fremstillet ifølge opfindelsen kun medfører et ringe fald i den antiag-

DK 160497 B

23 gregerende aktivitet af det naturligt forekommende PGI2.

c). Anvendelse af andre beskyttelsesgrupper.

5 Ud fra et kemisk synspunkt kan beskyttelsesgrupperne α-alkoxyalkyl og tetrahydropyranyl betragtes som ækvivalente, og begge typer kan anvendes.

2. Stabilitet.

10 I. Der gennemføres sammenligningsforsøg for at vise stabiliteten og den antiaggregerende aktivitet af PGI2 og 7-oxo-PGI2 fremstillet ifølge opfindelsen. Begge forbindelser foreligger i form af deres Na-salt ved forsøget.

15 a) . Stabilitetsprøve. Den tid, som er nødvendig til, at forbindelsen mister 50% af sin aktivitet, måles ved en pH--værdi på 2 ved stuetemperatur.

b). Antiaggregerende aktivitet. Den koncentration af 20 aktiv ingrediens, som bevirker en aggregeringsinhibering på 50%, måles på aggregering forårsaget af ADP i menneskeblod.

Forbindelse IC50 ^1/2 25 PGI2 1 ng/ml 3 minutter 7-Oxo-PGI2 15-20 ng/ml 96 timer II. Forsøgene gennemføres med et 7-oxo-PGI2-ephedrinsalt, fordi natriumsaltet og esteren af forbindelsen ikke er kry-30 stallinske, således at stabiliteten ikke kan efterprøves i fast form.

Ved de ovenfor omtalte afprøvninger er stabiliteten af natriumsaltet og esteren i opløsning praktisk taget den samme som stabiliteten af ephedrinsaltet.

35

DK 160497 B

24

Stabilitet af 7-oxo-PGIo-ephedrinsalt.

a) . Fast form:

Der kan ikke påvises nogen ændring i prøvens NMR-spektrum efter 13 døgn ved 74°C.

5 b) . Opløsning:

Der kan ikke påvises nogen ændring ved NMR-metoden efter henstand i 13 døgn i en koncentreret D20-opløsning.

Der kan ved UV-metoden iagttages en nedgang i absorp-10 tion på 2% efter henstand ved stuetemperatur i 13 døgn i en vandig opløsning med en koncentration på 10“4 mol/liter.

Under samme betingelser iagttages der en nedgang i absorption på 48% i 0,1N HC1 og på 46% i 0,1N NaOH.

Ved en polarimetrisk metode kan der iagttages følgende 15 ændringer i 1,1%'s vandig opløsning ved en temperatur på 25“C. Målingerne foretages ved Na-D-linien.

Tid (timer) Specifik drejning 20 0 +58,19° ± 0,6° 4 +58,27° ± 0,4° 24 +58,53° ± 0,5° 72 +56,99° ± 0,3° 25 .

Derefter holdes opløsningen ved 60°C, og der opnås følgende resultater.

Tid. (timer) Specifik drejning 30 __ 0 +56,99° ± 0,3° 6 +55,54° ± 0,3° 13 +55,29° ±0,4° 18 +55,03° ± 0,5° 35 ___

DK 160497 B

25

Sammenligning med 7-oxo-PGl2-natriumsalt.

a) . 7-Oxo-PGI2 har god opløselighed, ligesom natriumsaltet af PGI2, medens estrene er mindre opløselige.

b) . Når 7-oxo-PGI2 -natriumsalt afprøves i vand ved UV-5 metoden, er Xmax = 289 nm (e = 8200). Der iagttages ingen ændring i 26 døgn under disse betingelser.

I en puffer med pH = 2, hvor PGI2-natriumsaltet sønderdeles i løbet af nogle sekunder, er halveringstiden 96 timer.

10

Stabilitet af PGIn-natriumsalt.

I fast tilstand kan der ved stuetemperatur iagttages en nedgang i aktivitet på basis af antiaggregeringsaktivite-ten.

15 Halveringstiden for PGI2-natriumsaltet er ca. 5 minut ter i en neutral, vandig opløsning. Saltet kan ikke eksistere i et surt medium. 1

Toksicitet.

20 Ved afprøvningen for akut toksicitet indgives 7-oxo- PGI2-ephedrinsaltet intravenøst til 6 CFLP-mus pr. dosis og pr. køn, hver især i et volumen på 1 ml/100 g. Iagttagelsestiden er 14 døgn, og LD50 er 250 mg/kg for hunner og 400 mg/kg for hanner.

25 Af kliniske symptomer optræder hyperpnoe, toniske kramper og dyspnoe. Dødsårsagen er ødemer, og obduktion viser, at blodkoaguleringen er inhiberet.

Den pharmakologiske og den forventede terapeutiske dosis er af størrelsesordenen μg, og LD50-værdien er af 30 størrelsesordenen mg. Denne forskel berettiger, at afprøvningen for akut toksicitet ikke fortsættes.

Claims

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af optisk aktive eller racemiske 7-oxo-PGI2-derivater med den almene 5 formel ^- COOQ 10 9—\ (I) /==° 15 13 S ^x-C-C-V-r3 r130 * /\4| R130 R4r2 20 hvori Q betyder hydrogen, en pharmakologisk acceptabel kation eller lavere alkyl, X betyder cis- eller trans-CH=CH- eller —C=C— eller -CH2-CH2-, R13 betyder hydrogen eller C1_4-alkan-oyl eller tetrahydropyran-2-yl, R4 betyder hydrogen eller lavere alkyl i a- eller j8-stilling, R1 og R2 betyder hydrogen 25 eller lavere alkyl, Y betyder methylen eller oxygen, og R1 betyder lavere alkyl eller phenyl, kendetegnet ved, at man omsætter en forbindelse med den almene formel III 30 0-< V !f\ OAc ' w ^ a—< I 3 Nc - C - C - Y - R 35 ho' r4 I ft DK 160497 B hvori R1, R2, R3, R4, X, Y og Q har de ovenfor angivne betydninger, og Ac betyder acetyl, med en lavere alkanol i nærværelse af en katalytisk mængde syrekatalysator, og blokerer den opnåede ketal med den almene formel IV 5 '5 PA/yvC00Q : nA ,*"·® OAc A HO' X X - C - C - V - R3 HO V L R^ 15 hvori R1, R2, R3, R4, X, Y, Q og Ac har de ovenfor angivne betydninger, og R5 betyder lavere alkyl, ved omsætning med et silyleringsmiddel med den almene formel VII R7

20 R8 - L - Cl <ra> R9 eller med en enolether med den almene formel VIII R11.

25. R12 (VIII) RlO^ hvori R^, R^ og R^ er ens eller forskellige og betyder C1-.4-30 ligekædet eller forgrenet alkyl, R10 og R11 er ens eller forskellige og betyder hydrogen eller methyl, og R12 betyder methyl eller ethyl, eller med 3,4-dihydro-2H-pyran og derefter deacetylerer den opnåede, beskyttede ketal med den almene formel V 35 DK 160497 B OR5 oVW® 5 / \*=rOAc (V) ft i . s ^x . c - c - y - R RO c/v μ 10 * 0 R> . hvori R1, R2, R3, R4, R5, X, Y, Q og Ac har de ovenfor angivne betydninger, og R6 betyder en silylgruppe med formlen 15 R7R8R9Si eller en a-alkoxy-alkylgruppe med formlen r11_CH2-CR10-O-R12 eller en tetrahydropyran-2-yl-gruppe, i et basisk medium, og oxiderer den opnåede, blokerede ketal med den almene formel VI °R5 · 0VWC00Q I V.OH <VI> 25. x-C-C-V-R R6(f Vl2 R* hvori R1, R2, R3, R4, R6, X, Y og Q har de ovenfor angivne betydninger, i et aprotisk opløsningsmiddel, eventuelt efter 30 hydrolyse af gruppen R5 til hydrogen, og derefter eliminerer gruppen R5-OH fra det opnåede 7-oxo-derivat med den almene formel II 35 DK 160497 B OR5 ^wcooQ CT‘ " 6 '\ I 3 r60' x-c-c-y-r^ r5o' 12

10 R hvori R1, R2, R3, R4, R6, X, Y og Q har de ovenfor angivne betydninger, og R5 betyder hydrogen eller lavere alkyl, idet en fjernelse af blokerende silyl- eller a-alkoxyalkyl-grupper R6 og en eventuel acylering af de frie hydroxygrupper 15 med en Ci-C4-alkanoylgruppe udføres før eller efter elimineringen af R5OH, hvorefter man om ønsket omdanner en estergruppe COOQ til den frie syre eller et salt eller en anden ester indenfor rammerne af betydingen af Q.

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendete g-20 net ved, at omsætningen af forbindelserne med den almene formel III, hvori R1, R2, R3, R4, X, Y, Q og Ac har de i krav 1 angivne betydninger, og en lavere alkanol gennemføres under anvendelse af bortri fluor idetherat som en syrekatalysator.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at ketalen med den almene formel IV, hvori R1, R2, R3, R4, X, Y, Q og Ac har de i krav 1 angivne betydninger, og R5 betyder lavere alkyl, blokeres ved omsætning med tert.-butyl-dimethylchlorsilan.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at ketalen med den almene formel IV, blokeres ved omsætning med 3,4-dihydro-2H-pyran.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at deacetyleringen af forbindelserne med den 35 almene formel V, hvori substituenterne har de i krav 1 angivne betydninger, gennemføres med kaliumcarbonat. DK 160497 B

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at ketalen med en almene formel VI, hvori substi-tuenterne har de i krav 1 angivne betydninger, oxideres med pyridiniumchlorchromat.

7. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendeteg net ved at gruppen R5-0H, hvori R5 betyder lavere alkyl, elimineres fra 7-oxo-derivatet med den almene formel II, hvori substituenterne har de i krav 1 angivne betydninger, ved opvarmning i hexamethyl-phosphorsyre-triamid.

8. Fremgangsmåde ifølge krav 7, kendeteg net ved, at opvarmningen udføres ved 80-160°C.

9. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der fraspaltes vand fra 7-oxo-derivatet med den almene formel II, hvori R5 betyder hydrogen, og de andre 15 substituenter har de ovenfor angivne betydninger, ved azeo-trop destillation.

10. Fremgangsmåde ifølge krav 9, kendetegnet ved, at den azeotrope destillation foretages i benzen i nærværelse af vandfrit magnesiumsulfat. 20