DK161255B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af terapeutisk aktive 18-substituerede pregn-4-en-3,20-dioner - Google Patents

Description

DK 161255 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte, terapeutisk aktive 18-substituerede pregn-4-en-3,20-dioner med formlen

5 Z

CH2 y * ?s° 0$^ o i hvilken 15 Y er hydrogen eller hydroxy Z er hydrogen eller hydroxy, og R er 1,2-propadienyl eller 2-propynyl.

Aldesteron er et steroidhormon, der syntetiseres i • cellerne i zona glomerulosa i binyrerne. Denne forbindelses 20 primære biologiske funktion er regulering af saltretentionen, og aldesteron spiller især en stor rolle ved reguleringen af nyrernes reabsorption af natriumioner fra urinen. Mangel på det enzym, der er ansvarligt for aldosteronsyntesen, er således karakteristisk for patienter med salttabssyndrom, 25 medens primær hyperaldosteronisme kan stamme fra hyperbiosyn-tese af aldosteron, som kan forårsages af en adrenocortical tumor eller indgivelse af visse lægemidler. Hyperaldosteronisme kan medføre hypertension, hypoalkalæmi, alkalose, muskelsvaghed, polyuri og polydipsi. Behandling af hyperaldo-30 steronisme og de dermed forbundne lidelser vil således være mulig ved at blokere den enzymatiske syntese af aldosteron.

De ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser er aktive som aldosteroninhibitorer, jfr. nærmere herom i det følgende.

35 Propadienylgruppen i formlen I kan også kaldes allenyl og har følgende struktur

DK 161255 B

2 CH2=C=CH-

Eftersom carbonatomet med den fri valens også er 18-carbonatomet i pregnanskelettet i forbindelserne, der fremstilles 5 ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, kan sådanne forbin- j delser også betragtes som 18-vinylidenpregnaner. 2- Propynyl- gruppen har en tredobbelt binding ved det andet carbonatom i forhold til den fri valens og kan gengives ved følgende struktur 10 hc=c-ch2-

Forbindelserne med formlen I kan fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen ud fra en passende pregnan-15 18-al. 3- og 20-carbonylgrupperne, der forekommer i udgangs materialerne, beskyttes i reglen som ketaler, fortrinsvis den, der fås ved anvendelse af ethylenglycol. Især kan de pågældende beskyttede forbindelser opnås ved behandling af den tilsvarende pregnan-3,20-dion med ethylenglycol i nær-20 værelse af et spor af syre. Alternativt er det muligt at beskytte 3-stillingen ved reduktion af 3-ketonen til alkohol med lithiumaluminiumhydrid, efterfulgt af omsætning med tert.butyldimethylsilylchlorid, hvilket giver den tilsvarende ether. Alle tilstedeværende hydroxygrupper kan beskyttes 25 som den tilsvarende acetylester, men det skal bemærkes, at alle forbindelser, der indeholder en 11-hydroxygruppe, kan forekomme i form af en acetal med 18-oxogruppen.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at 30 a) en forbindelse som svarer til en forbindelse med formlen I, men i hvilken R er l-acetoxy-2-propynyl, og 3- og 20-carbonylgrupperne er ketaliserede og en eventuel Z-hy-droxygruppe er hensigtsmæssigt beskyttet ved forestring, omsættes med lithium(butyl)(1-pentynyl)cuprat til dannelse 35 af en tilsvarende forbindelse med en 13-allenylgruppe, efterfulgt af fjernelse af en eventuel ketal-beskyttende gruppe

DK 161255 B

3 ved behandling med syre, og fjernelse af enhver ester-beskyttende gruppe ved alkalisk hydrolyse, eller at b) en forbindelse som svarer til en forbindelse med formlen I, men i hvilken R er 3-chlor-2-propenyl, og 3- og 5 20-carbonylgrupperne er ketaliserede og en eventuel Z-hy-droxygruppe er hensigtsmæssigt beskyttet ved forestring, omsættes med en stærk base til dannelse af en tilsvarende forbindelse med en 13-(2-propynyl)-gruppe, efterfulgt af fjernelse af en eventuel ketal-beskyttende gruppe ved behand-10 ling med syre, og fjernelse af en eventuel ester-beskyttende gruppe ved alkalisk hydrolyse.

Propadienylforbindelserne kan fås ud fra den anførte pregnan-18-al ved en reaktionsrække, der kan gengives på følgende måde 15

HC

lu ° ν°Ί ? ν°Ί

CH X J HO-CH X J

20 /\U ^ BC=C-MgBr^ |^S^\ ° AC2q Ψ

H2C HC

25 ti tn C \ 0^ C \ .0 -v, li \/ i lithium- * \/ Ί

CH X J ✓ (bu tyl)- AcO-CH X J

TsOH ^ (pentynylj- 0*^ acetone j \ cuprat j \ Ψ λΑ/ 30 H2C ' L Vo „ φ i

DK 161255B

Ovenstående skema viser kun C- og D-ringene i steroidet i en forbindelse uden hydroxysubstituenter. Specifikt omsættes 18-alforbindelsen med ethynylmagnesiumbromid hvilket giver den tilsvarende 13-(l-hydroxy-2-propynyl) forbindelse.

5 Denne omdannes derefter til den tilsvarende ester ved hjælp af et anhydrid af eddikesyre, såsom eddikesyreanhydrid og behandling af esteren med lithium(butyl)(1-pentynyl)cuprat giver den tilsvarende 13-(propadienyl)-forbindelse. Derefter fjernes alle beskyttende grupper såsom 20-ketalgruppen ved 10 hjælp af standardmetoder såsom behandling med p-toluensulfonsyre og acetone eller hydrogenchlorid i vandig methanol, hvilket giver de ønskede propadienylprodukter.

Til fremstilling af 13-(2-propynyl)-forbindelserne anvendes 18-carboxaldehydet i nedenstående reaktionsrække: 15 0 CHC1 f> π ?H \ /0^ HC \ CK.

CH2 X Ί ch2V Ί 20 0^ (C6H5)3g=eHCl 0·^ η 1Da (lithium-W diisopropyl- HC HC amid) tv» L2v0^

jQO ^ jCD

30 T '

Også her er kun C- og D-ringene i hvert enkelt molekyle vist.

Det angivne 18-carboxaldehyd kan fås ud fra det tilsvarende nitril ved reduktion med diisobutylaluminiumhydrid, eller det 35 5

DK 161255 B

kan fås ud fra 18-al-forbindelsen, der tidligere er omtalt, ved omsætning med (methoxymethylen)triphenylphosphoran, efter-fulgt af Hg -katalyseret hydrolyse. 18-Carboxaldehydet omsættes med (chlormethylen)triphenylphosphoran, hvilket giver 5 den tilsvarende 13-(3-chlor-2-propenyl)-forbindelse som en blanding af cis- og trans-isomere. Derefter dehydrohalogene-res chlorforbindelsen ved hjælp af en stærk base såsom lithi-umdiisopropylamid eller lithiumamid i ammoniak, hvilket giver propynylforbindelsen, og enhver beskyttende ketalgrup-10 per fjernes endelig ved standardmetoder såsom behandling med p-toluensulfonsyre i nærværelse af acetone.

De omhandlede forbindelser med formlen I er aldosteronin-hibitorer, dvs. de inhiberer aldosteronsyntesen. De er således nyttige til behandling af hyperaldosteronisme og forskel-15 lige lidelser, hvor det ville være gavnligt med en reduktion af en for stor mængde aldosteron, der er ansvarlig for lidelsen. Mere specifikt er de anvendelige til almen behandling af hyperaldosteronisme og en hvilken som helst dermed forbun-' det form for ødem og/eller saltretention, hvadenten denne 20 er resultatet af en eller anden somatisk lidelse eller den er et resultat af indgivelse af et eller andet præparat. På grund af de foreliggende forbindelsers virkning på de faktorer, der er ansvarlige for ødemer og/eller natriumretention, er de anvendelige som diuretica.

25 De omhandlede forbindelsers aktivitet som aldesteron- inhibitorer kan påvises ved hjælp af følgende metode, der indebærer måling af inhiberingen af enzymer ved aldosteronsyntesen.

Der fremstilles okseadrenocorticale mitochondriale 30 fraktioner ved hjælp af differentialcentrifugering, og de anvendes som kilde for adrenal steroidhydroxylase· Enzyminkuber ingsmediet indeholder 8,5 mmol MgC^/ 2,7 mmol CaCl, 3,13 mmol KCl, 7,59 mmol NaCl og pufres til pH 7,0 med 10 mmol phosphatpuffer. Der medtages et NADPH-dannelsessystem, der inde-35 holder 0,5 mmol NADP+, 2,5 mmol glucose-6-phosphat og 1,0 enhed glucose-6-phosphatdehydrogenase i prøvepufferen.

O

6

DK 161255 B

Tritium-mærket desoxycorticosteron eller cortico-steron (40-60 Ci/mmol specifik aktivitet) opløses i prøvepuffer, så at der fås en prøvekoncentration på 1 jiCi i 100 jil puffer. Forbindelser, der skal afprøves som enzyminhibitorer, op- 5 løses i enten ethanol eller dimethylsulfoxid og fortyndes med -4 -9 puffer, så at der fås prøvekoncentrationer fra 10 til 10 molær.

Prøveforbindelserne bedømmes med henblik på tidsafhængig enzyminhibering. Forbindelsen i 100 μΐ puffer sæt-10 tes til 35 ml -centrifugeglas, der indeholder 60 μΐ NADPH-dannelsessystem. Præinkuberingen påbegyndes med tilsætning af 700 yil mitochondrial fraktion (i reglen 2-4 mg protein/ml) . Disse komponenter blandes og præinkuberes i en Dubnoff metabolisk ryster i 0, 10, 20 eller 40 minutter ved 37°C under en 15 atmosfære af C^/CC^ (95:5). Efter præinkuberingsperioden tilsættes 100 ja] af det tritiummærkede substrat ved en koncentration på mindst 3 gange Km for enzymet til prøveglassene.,Inkube-ringen fortsættes i yderligere 10 minutter. Enzymreaktionen standses ved tilsætning af 10 ml methanol/chloroform (1:1, vo-20 lumen/volumen). Der tilsættes ikke-mærket bærestof, desoxycorticosteron, corticosteron, 18-hydroxy-corticosteron og al-dosteron. Chloroformfasen fjernes, inddampes til tørhed, opløses i 50 jil chloroform og påføres en silicagel tyndtlags-chromatografiplade. Efter chromatografiske standardmetoder lo-25 kaliseres steroidpletterne ved UV-belysning. Hver TLC-plet overføres til et væskescintillationsglas, steroidet opløseliggøres fra siliciumoxidet med ethanol før tilsætning af tælleblandingen til væskescintillation. Enzymprodukternes radioaktivitet måles med β-scintillationsspektrometer, og om-30 fanget af aldosteronsyntesens inhibering beregnes derudfra.

Desoxycorticosteron anvendes som substrat i prøverne til særlig bedømmelse af inhibitorernes virkning på 118-hy-doxylasesystemet. Substrater til 18-oxygenasesystemet er corticosteron til 18-hydroxylase og 18-hydroxycorticosteron til 35 18-hydroxydehydrogenas e· 7

DK 161255B

Farmaceutiske forsøgsresultater Når enkeltforbindelser fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen afprøves ved et forsøg, hvor der anvendes mito-chondriale fraktioner som beskrevet i US patentskrift nr.

5 4.293.548, opnås der følgende resultater:

Reaktiv inhiberina af aldosteronsvntesen

Forbindelse Koncentration % Inhiberina 10 Præinkuberinasinterval 0 min. 20. min 18-vinylidenpregn- 10 μΜ 40 28 -4-en-3,20-dion 15 18-ethynylpregn-4- 10 μΜ 46 41 -en-3,20-dion 18-ethynyl-21-hy- 10 μΜ 48 40 20 droxy-pregn-4-en--3,20-dion 18-ethynyl-ll^-hy- 10 μΜ 24 100 droxy-pregn-4-en-25 . 3,20-dion

For at opnå en ønsket virkning såsom en diuretisk virkning kan forbindelserne, der fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen,indgives oralt, parenteralt, f.eks. in-30 tramuskulært og subcutant,til en patient, der har behov for behandling. Udtrykket "patient" skal betyde varmblodede pattedyr, rotter, mus, hunde, katte, heste, svin, køer, får og mennesker. De omhandlede forbindelser kan indgives alene eller passende blandet i form af et farmaceutisk præparat til 35 den patient, der behandles. Mængden af forbindelse, der indgives, varierer med lidelsens sværhed, og gentagen behandling kan være ønskelig. Til oral og parenteral indgivelse ligger mængden af indgivet forbindelse, dvs. den diuretisk effektive mængde, fra 0,1 til 150 mg/kg legemsvægt pr. dag og fortrins-40 vis fra 1 til 50 mg/kg legemsvægt pr. dag. Enhedsdoseringer til oral og parenteral indgivelse kan f.eks. indeholde fra 5 til 200 mg aktivt stof. Forbindelserne kan indgives alene eller kombineret med hinanden.

O

8

DK 161255 B

Til oral indgivelse kan forbindelserne oparbejdes til faste eller flydende præparater såsom kapsler, piller, tabletter, pastiller, pulvere, opløsninger, suspensioner eller emulsioner. De faste enhedsdoseringsformer kan være en kap-5 sel, der kan være af den almindelige gelatinetype indeholdende aktivt stof og et bærestof, f.eks. smøremidler og inaktivt fyldstof såsom lactose, saccharose og majsstivelse. En aktiv forbindelse fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan også slås til tabletter sammen med gængse tabletbasisstof-10 fer såsom lactose, saccharose og majsstivelse kombineret med bindemidler såsom akacie, majsstivelse eller gelatine, desintegreringsmidler såsom kartoffelstivelse eller algininsyrer og et smøremiddel såsom stearinsyre eller magnesiumstearat.

Til parenteral indgivelse kan de omhandlede forbin-15 delser indgives som injicerbare doser af en opløsning eller suspension af forbindelsen i et fysiologisk acceptabelt for-tyndingsmiddel med et farmaceutisk bærestof, der kan være en steril væske såsom vand-i-olie med eller uden tilsætning af et overfladeaktivt stof eller andre farmaceutisk acceptable 20 hjælpestoffer. Som eksempel på olier, der kan anvendes i disse præparater kan nævnes jordolie, olier af animalsk, vegetabilsk eller syntetisk oprindelse, f.eks. jordnøddeolie, sojabønneolie og mineralolie. I reglen foretrækkes vand, saltvandsopløsning, vandig dekstrose og dermed beslægtede sukkeropløs-25 ninger, ethanoler og glycoler såsom propylenglycol eller poly-ethylenglycol som flydende bærestoffer, især til injicerbare opløsninger.

Forbindelserne kan indgives i form af en depotinjektion eller implantat, der kan sammensættes på en sådan måde, 30 at der fås protraheret virkning af det aktive stof. Det aktive stof kan være komprimeret i pellets eller små cylindre og implanteres subcutant eller intramuskulært som depotinjektioner eller implantater. Implantater kan indeholde inaktive materialer såsom bionedbrydelige polymere og syntetiske silico-35 ner, f.eks. "Silastic®", et siliconegummi fremstilles af Dow-Cor-ning Corporation.

9

DK 161255 B

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen vil i det følgende blive nærmere belyst ved hjælp af eksempler. Alle temperaturer er anført ukorrigeret, og medmindre andet er angivet, er alle dele og procentmængder efter vægt.

5 Når beskrivelsen af et særligt fremgangsmådetrin er anført i almene vendinger, er metoden baseret på en kendt omsætning, og er i det væsentlige den samme som beskrevet nøjere andetsteds i eksemplerne. Således er omdannelsen af ketoner til ketaler beskrevet i eksempel 2, medens omdannel-10 sen af en ketal tilbage til en keton er beskrevet i eksempel 1. Eksempel 1 indeholder også en beskrivelse af fremstillingen og anvendelsen af 1ithium(butyl)(1-pentynyl)cuprat (P.

Baret m.fl., Tetrahedron, 35, 2931 (1979).

15

Eksempel 1

En opløsning af 3,0 g 3,3,20,20-bis(ethylendioxy)--pregn-5-en-18-al i 35 ml tetrahydrofuran afkøles til 0°C, og der tilsættes dråbevis en opløsning af 7,2 mmol ethynylmagne-20 siumbromid i tetrahydrofuran. Når tilsætningen er afsluttet, opvarmes blandingen ved tilbagesvaling i en time, afkøles og fortyndes med ether, og den fremkomne opløsning hældes i en isafkølet mættet vandig opløsning af ammoniumchlorid. Det organiske lag skilles fra, vaskes omhyggeligt med vand og salt-25 vandsopløsning og tørres, og opløsningsmidlet afdampes. Remanensen chromatograferes på silicagel ved hjælp af hexan/e-thylacetat, hvilket giver 3,3,20,20-bis(ethylendioxy)-18-ethy-nylpregn-5-en-18-ol.

2,2 g af den ovenfor fremstillede 18-hydroxyforbin-30 delse opløses i 25 ml pyridin og afkøles derefter til 0°C.

Der tilsættes 610 mg eddikesyreanhydrid, og blandingen får lov at varme langsomt op til stuetemperatur natten over. Derefter fortyndes den med ether og vaskes med IN saltsyre, mættet natriumbicarbonat og saltvandsopløsning og tørres derefter. 35 10

DK 161255 B

o

Opløsningsmidlet afdampes, og remanensen tørres omhyggeligt under højvakuum, hvilket giver 18-acetoxy-3,3,20,20-bis(e-thylendioxy)-18-ethynylpregn-5-en, der anvendes direkte i næste trin.

5 Til en suspension af 6,6 g 1-pentynylkobber i 110 ml ether sættes 23 ml n-butyllithium (en 2,2 molær hexan-opløsning) ved -40°C. Den fremkomne opslæmning af lithium-(butyl)(1-pentynyl)cuprat holdes på denne temperatur i en time og afkøles derefter til -70°C. Der tilsættes en opløsning 10 af den i foregående afsnit fremstillede 18-acetoxyforbindelse i 15 ml ether. Efter 6 minutter ved -70°C tilsættes der 2 ml methanol efterfulgt af mættet vandig ammoniumchloridopløsning. Derefter fortyndes blandingen med ether og filtreres gennem "Celite®". Derefter skilles det organiske lag fra, vaskes med 15 IN saltsyre og mættet vandig natriumbicarbonat og tørres derefter og inddampes. Den fremkomne remanens chromatograferes på silicagel ved anvendelse af ethylacetat/hexan, hvilket giver 3,3,20,20-bis(ethylendioxy)-18-vinylidenpregn-5-en, der omkrystalliseres ud fra methylenchlorid/hexan.

2o En opløsning af 1,1 g af den overfor fremstillede 18-vinylidenforbindelse i 15 ml acetone behandles med en katalytisk mængde p-toluensulfonsyre natten over ved stuetemperatur. Den fremkomne opløsning inddampes, og remanensen opløses i ether. Etheropløsningen vaskes med mættet vandig na-25 triumbicarbonat og med saltvandsopløsning og tørres, og opløsningsmidlet åfdampes. Remanensen renses ved chromatografi på silicagel ved hjælp af ethylacetat/hexan efterfulgt af omkrystallisation ud fra methylenchlorid/hexan, hvilket giver 18-vinylidenpregn-4-en-3,20-dion med smp. 104,5-106°C. Denne 30 forbindelse har følgende formel

H2C

ΊΙ C CH3 HC C=0 0$°

O

O

DK 161255 B

η

Eksempel 2

En blanding af 3,5 g 18-cyano-3,3-ethylendioxypregn--5-en-20-on, 2,8 g ethylenglycol, 0,2 g p-toluensulfonsyre og 45 ml benzen opvarmes ved tilbagesvaling i 16 timer ved anven-5 delse af et Dean-Stark apparat. Reaktionsblanding afkøles derefter, vaskes med vandig mættet natriumcarbonat, vand og saltvandsopløsning og tørres derefter, og opløsningsmidlet afdampes. Det tiloversblevne råprodukt opløses i vandfri tetrahydrofuran og afkøles til -70°C. Derefter tilsættes 10 dråbevis 9,1 ml af en 1 molær opløsning af diisobutylalumi-niumhydrid, og opløsningen får lov at varme langsomt op til stuetemperatur. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med ether og hældes i vandig IN saltsyre. Etherlaget skilles fra, vaskes med IN saltsyre, natriumbicarbonat og saltvands-15 opløsning og tørres, og opløsningsmidlet afdampes. Remanensen renses ved chromatografi på silicagel og omkrystalliseres, hvilket giver 3,3,20,20-bis(ethylendioxy)pregn-5-en-18-carb-oxaldehyd.

En opløsning af lithiumdiisopropylamid fremstil-20 les af 0,67 g diisopropylamin og 2,9 ml 2,2 molær n-butylli-thiumopløsning i hexan i 10 ml tetrahydrofuran og afkøles til -70°C og sættes derefter til en opløsning af 2,3 g (chlor-methyl)triphenylphosphoniumchlorid i 10 ml tetrahydrofuran.

Til den fremkomne ylid[(chlormethylen)triphenylphosphoran]op-25 løsning sættes en opløsning af 2,8 g 3,3,20,20-bis(ethylendi-oxy)pregn-5-en-18-carboxaldehyd i 10 ml vandfri tetrahydrofuran. Derefter får blandingen lov at varme op til stuetemperatur, før den bratkøles med vand og ekstraheres med ether. Etherekstrakten tørres og inddampes, og produktet renses ved 30 chromatografi på silicagel, hvilket giver 18-(2-chlorethenyl)--3,3,20,20-bis(ethylendioxy)pregn-5-en som en blanding af cis- og trans-isomere.

En opløsning af lithiumdiisopropylamid fremstilles af 0,3 g diisopropylamin og n-butyllithium i 10 ml tetrahydro-35 furan ved -70°C,og til denne kolde opløsning sættes en opløsning af 1,5 g af den ovenfor fremstillede 2-chlorethenylfor-

O

DK 161255 B

12 bindelse i 5 ml tetrahydrofuran. Blandingen amrøres ved -70°C i 1,5 time og bratkøles derefter ved tilsætning af mættet vandigt ammoniumchlorid. Blandingen ekstraheres med ether, og etherekstrakten vaskes med IN saltsyre, mættet vandigt natri-5 umbicarbonat og saltvandsopløsning. Den tørres derefter, og opløsningsmidlet afdampes. Det tiloversblevne rå 3,3,20,20--bis(ethylendioxy)-18-ethynylpregn-5-en opløses i 25 ml acetone, der tilsættes en katalytisk mængde p-toluensulfonsyre, og blandingen omrøres natten over ved stuetemperatur. Der-10 efter afdampes acetonen, og remanensen opløses i chloroform. Chloroformopløsningen vaskes med mættet natriumbicarbonatop-løsning og tørres, og opløsningsmidlet afdampes. Den fremkomne remanens chromatograferes på silicagel ved hjælp af ethylacetat/hexan, hvilket giver 18-ethynylpregn-4-en-3,20-15 -dion, der renses yderligere ved omkrystallisation ud fra me-thylenchlorid/hexan og har smp. 164-169°C. Denne forbindelse

har følgende struktur. CH

ih C CH3 i i J H2C C=0 20 H3C ) o 25

Eksempel 3

En opløsning af 4,2 g 18-ethynylpregn-4-en-3,20-dion 30 i 125 ml methanol afkøles til 0°C, og der tilsættes 950 mg na-triumborhydrid. Den fremkomne blanding omrøres ved 0°C i en time og får derefter lov at varme op til stuetemperatur i løbet af yderligere en time. Derefter tilsættes eddikesyre, og opløsningen inddampes. Den fremkomne remanens suspenderes 35 i ethylacetat, vaskes med vand, vandigt natriumbicarbonat og saltvandsopløsning og tørres, og opløsningsmidlet afdampes.

13

DK 161255 B

O

Remanensen opløses i 400 ml chloroform, der tilsættes 42 g aktiveret mangandioxid, og den fremkomne suspension omrøres i 24 timer. Det uorganiske faste stof fjernes derefter ved filtrering gennem "Celite®", og filterkagen vaskes omhygge-5 ligt med varm chloroform. Derefter inddampes filtratet, og remanensen renses ved omkrystallisation ud fra acetone/hexan, hvilket giver 18-ethynyl-20-hydroxypregn-4-en-3-on.

Denne forbindelse behandles først med ethylengly-col og p-toluensulfonsyre i benzen og oxideres derefter med 10 pyridiniumchlorchromat, hvilket giver 3,3-ethylendioxy-18--ethynyIpregn-5-en-2 0-on.

En blanding af 3,8 g 3,3-ethylendioxy-18-ethynyl--pregn-5-en-20-on og 4,4 g blytetraacetat i 50 ml eddikesyre opvarmes ved 70°C i 24 timer. Blandingen afkøles derefter 15 og hældes i vand og ekstraheres med ether. Etherekstrakten vaskes med vand, vandigt natriumbicarbonat og saltvandsopløsning og tørres derefter og inddampes. Remanensen chromato-graferes på silicagel ved hjælp af ethylacetat/hexan, hvilket giver 21-acetoxy-3,3-ethylendioxy-18-ethynylpregn-5-en-20-on.

20 Ovennævnte produkt behandles først med acetone og p-toluensulfonsyre og derefter med natriumhydroxid i ethanol, hvilket giver 18-ethynyl-21-hydroxypregn-4-en-3,20-dion med smp. 167-170°C. Denne forbindelse har følgende strukturformel:

CH

«c

25 C CH2OH

H2C c=o øx

O

35

O

DK 161255 B

14

Eksempel 4

En opløsning af 4f0 g (methoxymethyl)triphenylphos-phoniumchlorid og 20 ml tetrahydrofuran tilsættes til lithi-umdiisopropylamid fremstillet af 1,2 g diisopropylamin og 5 5,3 ml af en 2,2 molær opløsning af n-butyllithium i hexan alt i 20 ml tetrahydrofuran ved -70°C. Efter omrøring i 10 minutter ved denne temperatur tilsættes 3,3,20,20-bis(ethylen-dioxy)-ll|3-hydroxypregn-5-en-18-al (5 mmol) i 20 ml tetrahydrofuran. Kølebadet fjernes derefter, og opløsningen får lov 10 at varme op til stuetemperatur. Derefter bratkøles reaktionsblandingen ved tilsætning af vand og fortyndes derefter med ether. Etherlaget skilles fra, vaskes med IN saltsyre, vandigt natriumbicarbonat og saltvandsopløsning og tørres derefter og inddampes. Remanensen chromatograferes på sili-15 cagel ved hjælp af ethylacetat/hexan, hvilket giver 3,3,20,20--bis(ethylendioxy)-18-(methoxymethylen)pregn-5-en-113-ol.

Der fremstilles en opløsning af 6,7 g merkuriacetat i mindst muligt 10;1 tetrahydrofuran/vand ved stuetemperatur, og der tilsættes 3,3 g af den ovenfor fremstillede methoxy-20 methylenforbindelse. Blandingen omrøres i 10 minutter, der tilsættes mættet vandig kaliumiodidopløsning, og opløsningen ekstraheres med ethylacetat. Derefter vaskes ekstrakten med vand, 10%'s vandig natriumbisulfit og saltvandsopløsning. Derefter tørres blandingen og inddampes, hvilket giver 3,3,-25 20,2 0-bis (ethylendioxy) -llfi-hydroxypregn-5-en-18-carboxalde- hyd, der anvendes i næste trin uden yderligere rensning.

Det ovennævnte 18-carboxaldehyd underkastes Wittig-reaktion med to ækvivalenter (chlormethylen)triphenylphospho-ran som beskrevet i eksempel 2. Det rå produkt chromatografe-30 res på silieagel ved hjælp af ethylacetat/hexan, hvilket giver 18-(2-chlorethenyl)-3,3,20,20-bis(ethylenidoxy)pregn-5-en--11β-ο1.

Ved hjælp af den i eksempel 2 beskrevne metode omsættes den ovenfor fremstillede chlorethenylforbindelse først 35 med lithiumdiisopropylamid og derefter med acetone i nærværelse af p-toluensulfonsyre, hvilket giver 18-ethynyl-ll|3--hydroxypregn-4-en-3,20-dion med smp. 183,5-184,5°C.

Claims (2)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af terapeutisk aktive 18-substituerede pregn-4-en-3,20-dioner med formlen

5 Z ch2 Y R c-o cS^ o i hvilken 15. er hydrogen eller hydroxy Z er hydrogen eller hydroxy, og R er 1,2-propadienyl eller 2-propynyl, kendetegnet ved, at a) en forbindelse som svarer til en forbindelse med 20 formlen I, men i hvilken R er l-acetoxy-2-propynyl, og 3- og 20-carbonylgrupperne er ketaliserede og en eventuel Z-hy-droxygruppe er hensigtsmæssigt beskyttet ved forestring, omsættes med lithium(butyl)(1-pentynyl)cuprat til dannelse af en tilsvarende forbindelse med en 13-allenylgruppe, efter-25 fulgt af fjernelse af enhver ketal-beskyttende gruppe ved behandling med syre, og fjernelse af en eventuel ester-beskyttende gruppe ved alkalisk hydrolyse, eller at b) en forbindelse som svarer til en forbindelse med formlen I, men i hvilken R er 3-chlor-2-propenyl, og 3- og 30 20-carbonylgrupperne er ketaliserede og en eventuel Z-hy-droxygruppe er hensigtsmæssigt beskyttet ved forestring, omsættes med en stærk base til dannelse af en tilsvarende forbindelse med en 13-(2-propynyl)-gruppe, efterfulgt af fjernelse af enhver ketal-beskyttende gruppe ved behandling 35 med syre, og fjernelse af en eventuel ester-beskyttende gruppe ved alkalisk hydrolyse. * O DK 161255 B

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af 18-ethynylpregn-4-en-3,20-dionf kendetegnet ved, at 18-(2-chlorethenyl)-3,3,20,2 O-bis(ethylendioxy)pregn-5-en omsættes med lithiumdiisopropylamid , efterfulgt af fjernelse 5 af de keta1-beskyttende grupper ved behandling med p-toluen-sulfonsyre i acetone. 10 15 20 25 30 35