DK163838B - Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af to monoklonale antistoffer og et proeveudstyr til brug ved denne fremgangsmaade - Google Patents

Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af to monoklonale antistoffer og et proeveudstyr til brug ved denne fremgangsmaade Download PDF

Info

Publication number
DK163838B
DK163838B DK315081A DK315081A DK163838B DK 163838 B DK163838 B DK 163838B DK 315081 A DK315081 A DK 315081A DK 315081 A DK315081 A DK 315081A DK 163838 B DK163838 B DK 163838B
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
antigen
monoclonal antibodies
procedure
testing equipment
label
Prior art date
Application number
DK315081A
Other languages
English (en)
Other versions
DK315081A (da
Inventor
Anna Maria Gezina Bosch
Antonius Hermanus Wilh Schuurs
Wilhelmus Johannes Hen Stevens
Bauke Klaas Van Weemen
Original Assignee
Akzo Nv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=19835673&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=DK163838(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Akzo Nv filed Critical Akzo Nv
Publication of DK315081A publication Critical patent/DK315081A/da
Publication of DK163838B publication Critical patent/DK163838B/da

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G01N33/537—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody
    • G01N33/539—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase with separation of immune complex from unbound antigen or antibody involving precipitating reagent, e.g. ammonium sulfate
    • G01N33/541—Double or second antibody, i.e. precipitating antibody
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/26—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against hormones ; against hormone releasing or inhibiting factors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/86—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood coagulating time or factors, or their receptors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/81—Protease inhibitors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G01N2333/968—Plasmin, i.e. fibrinolysin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Description

i
DK 163838 B
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til bestemmelse af et antigen ved hjælp af et immobi1iseret antistof og et andet antistof mod antigenet samt et prøveudstyr til brug ved denne fremgangsmåde.
5 I mange år har det været kendt, at der kan udvikles følsomme og specifikke metoder til bestemmelse af mange stoffer, som er baseret på en immunokemisk reaktion, d.v.s. en reaktion mellem to eller flere immunokomponen-10 ter, f.eks. mellem antigen og antistof.
Et antigen er et stof, som, hvis det injiceres i et dyr, hvor det pågældende antigen er fremmed for legemet, giver anledning til dannelse af en immunologisk forsvarsreak- 15 tion, og et antistof er et proteinmolekyle (et imnunoglobuLin), son dairies af dyret som reaktion på indtrængning af antigenet, og scm kan indgå en specifik binding med antigenet, mod hvilket det er ret tet. Selv om denne mekanisme i princippet betragtes som en forsvarsmekanisme mod skadelige stoffer, der trænger 20 ind i en levende organisme (f.eks. en virusinfektion), kan den anvendes til at skabe antistoffer mod ethvert vilkårligt antigen.
Graden af skadeligheden af antigenet spiller ingen rolle 25 her. Blodserumet fra. et sådant dyr eller fraktioner deraf, indeholdende antistoffer, kan anvendes som reagens for antigenet. Et meget stort antal stoffer med forskellige strukturer kan fungere som antigener. I forsøgsdyr skabes antistoffer således mod næsten alle slags proteinmole-30 kyler, mod glycoproteiner, mod visse kulhydrater, lipider og - efter anvendelse af visse kunstgreb - også mod lavmolekylære stoffer såsom steroidhormoner og prostaglandi-ner.
35 Dette betyder, at for alle disse klasser af stoffer kan der udvikles immunokemiske metoder til bestemmelse.
Omend der selv på basis af simpel udfældning af antigener med antistoffer kan udvikles en immunokemisk metode til 2
DK 163838 B
bestemmelse af antigenet, benytter man sig normalt af mere raffinerede metoder for at få de fulde fordele af de muligheder, som den immunokemiske reaktion frembyder med hensyn til specificitet og følsomhed. I denne for-5 bindelse bliver antigenet eller antistofmolekylet hyppigt forsynet med et mærke, som gør forekomsten af anti-gen/antistof-bindingen synlig eller målelig på en simpel måde.
10 Som mærker er bl.a. blevet anvendt følgende: Røde blodceller (hæmagglutineringsreaktion) , polystyrenlatex-kugler (latex-agglutineringsreaktion) , metalsolpartikler, fint suspenderede farvestofpartikler og - hyppigt kombineret med antistofmolekyler, der er blevet gjort uopløse-15 lige - radioisotoper, enzymer og fluorescerende stoffer.
Det almene ejendommelige trask ved den type immunokemiske bestemmelser, der er tale om her, er, at antigenmolekylet, som skal bestemmes, danner en binding med mindst to anti-20 stofmolekyler.
Den klassiske metode til at skabe antistoffer, nemlig injektion af antigener i forsøgsdyret, resulterer normalt i en yderst 25 heterogen immunoreaktionv Man kan antage, at under denne fremgangsmåde bliver der i forsøgsdyrene stimuleret forskellige populationer af antistofdannende celler (lymfocyter), der hver producerer deres egen slags antistof med enestående struktur, affinitet og specificitet. Endvidere viser 30 det sig, at i et forsøgsdyr kan forskellige populationer af lymfocyter i tidens løb blive dominerende. Resultatet heraf er, at det ikke blot er meget vanskeligt fra forskellige forsøgsdyr at opnå blodsera (antisera) , indeholdende antistoffer af sammenlignelig kvalitet, men også at anti-35 serumprøver, fremkommet af samme forsøgsdyr på forskellige tidspunkter, kan være meget forskellige. 1 nogle år har det nu været muligt at opnå absolut homogene antistoffer i praktisk taget ubegrænsede mængder. Til det- 3
DK 163838 B
te formål gøres brug af et cellefrit system eller en modificeret organisme, hvori genetisk materiale som koder for de ønskede antigenspecifikke globuliner udtrykkes f.eks. ved: 5 a) Cellefusion.
Til dette formål bringes en antistofproducerende celle sammen med en kontinuerligt voksende cellelinie, f.eks. en lymfocytcelle, der er blevet en tumorcelle (myeloma cellelinie). Cellefusion finder sted både spontant XO og under indflydelse af visse stoffer såsom polyethylen= glycol eller lecithin, og som funktionsprodukt dannes en "hybridoma", der både har fået evne til at producere antistoffer fra den ene celle og kontinuerlig vækstevne fra den anden celle.
15 b) Transformation.
1. Antistofproducerende celler bringes til at vokse kontinuerligt, enten ved eller uden transduktion.
2. Isolerede og/eller helt eller delvis syntetisk fremstillede nukleinsyresekvenser indføres i den 20 ønskede værtscelle.
c) Mutation ved kemisk eller fysisk behandling af den antistofproducerende celle.
Også kombinationer af de ovennævnte metoder kan benyttes, 25 hvis det ønskes.
For hver enkelt cellelinie er de producerede antistoffer alle identiske med dem, der produceres af den oprindelige 4
DK 163838 B
antistofproducerende celle. De er således fuldstændigt homogene. Da de er dannet af den ene oprindelige antistofproducerende celle, kaldes de monoklonale antistoffer.
På grund af deres homogenitet og den simple måde, hvorpå 5 de kan produceres i ubegrænsede mængder, er monoklonale antistoffer i princippet særligt egnede som reagenser under de foran beskrevne immunokemiske bestemmelsesmetoder.
Det har imidlertid vist sig, at monoklonale antistoffer hyppigt ikke reagerer ved de prøvemetoder, ved hvilke "klas-10 siske" antistoffer er helt effektive: Monoklonale anti stoffer danner ikke et bundfald med deres tilsvarende antigener. Partikler (erythrocyter, latexkugler, metalpartikler) belagt med monoklonale antistoffer agglutinerer ikke i nærværelse af tilsvarende antigener. Monoiklonale antistof-15 fer mærket med en radioisotop, et enzym, en metalpartikel etc. bindes ikke til en fast fase, som er belagt med de monoklonale antistoffer, i nærværelse af det tilsvarende antigen. Alt dette er i modsætning til opførselen af "klassiske" antistoffer.
20 Der er nu fundet en fremgangsmåde til bestemmelse af et antigen ved hjælp af en immunokemisk reaktion, ved hvilken antigenet skal indgå en binding med to forskellige slags monoklonale antistoffer rettet mod samme antigen.
Nærmere betegnet angår opfindelsen en fremgangsmåde til bestem-25 melse af antigener ved hjælp af en immunokemisk reaktion, som er ejendommelig ved, at antigenet, der skal bestemmes, inkuberes med et immobiliseret monoklonalt antistof rettet mod antigenet og med en anden slags monoklonalt antistof rettet mod samme antigen, og som er mærket.
30 Opfindelsen angår på lignende måde prøveudstyr, der anvendes til at udføre fremgangsmåden.
Cellelinier, der producerer monoklonale antistoffer mod samme 5
DK 163838 B
antigen, kan fås på forskellige måder. Ved cellefusion under et fusionsforsøg fås der normalt 10 - 100 hybridoma-linier, der hver producerer et antistof med forskellig specificitet og affinitet. Det er hensigtsmæssigt at karak-5 terisere disse cellelinier i større enkeltheder for at være i stand til at udvælge en optimal kombination til et immunokemisk prøvesystem.
De monoklonale antistoffer kan forarbejdes på forskellige kendte måder til dannelse af reagenser til ovennævnte immuno-10 kemiske bestemmelsesmetode. De kan således f.eks. kombineres ved fysisk absorption eller ved covalent kombination til overfladen af formalinbehandlede erythrocyter eller af polystyren-latexkugler med forskellige diametre. De kan også kombineres ved fysisk absorption eller ved indeslutning sammen 15 med partikler af en metalsol til brug ved immunobestemmelse af en homogen eller heterogen solpartikel. Endvidere kan de anvendes på analog måde ved en farvestofpartikel-immunobestemmelse, der yderligere frembyder fordelen ved covalent binding. Monoklonale antistoffer kan endvidere kombine 20 res på kendt kemisk eller fysisk måde med faste substrater såsom væggen af et plastreagensglas, plastkugler eller andre genstande, cellulose- eller sepharosepartikler for at tjene som den faste fase i sandwich-bestemmelser.
Her kan samtidig gøres brug af monoklonale antistoffer, der 25 er blevet mærket med f.eks. en radioisotop, et enzym, en fluorophor eller en metalsolpartikel, således at dannelsen af en antistof/antigen-binding kan iagttages. Talrige metoder er blevet beskrevet i den relevante litteratur for alle disse fremgangsmåder, der kan anvendes direkte til 30 monoklonale antistoffer.
Der kræves nogen omhu ved valget af en effektiv kombination af to monoklonale antistoffer til brug i immunokemiske bestemmelsesmetoder, som beskrevet i det foregående.
Ikke enhver vilkårlig kombination af to antistoffer vil
DK 163838 B
6 tilfredsstille rimelige krav med hensyn til følsomhed og specificitet, og det er endog muligt, at en sådan kombination slet ikke vil være effektiv. Etablering af den bedste kombination afhænger udelukkende af erfaringen. I det ideelle 5 tilfælde er der et bredt interval af monoklonale antistoffer til rådighed over for et givet antigen. Dette interval undersøges under alle mulige kombinationer, hvorefter der vælges den kombination, som giver pålidelige, følsomme og specifikke resultater.
10 De beskrevne kombinationer af monoklonale antistoffer, der er forarbejdet til dannelse af reagenser (såsom overfladedele belagt med antistoffer eller enzymmærkede antistoffer) kan oparbejdes med udmærkede resultater til dannelse af immunokemiske prøveudstyr, som er kombinationer af reagenser, der, forudsat 15 at de anvendes i overensstemmelse med den foreskrevne fremgangsmåde, giver prøvemetoder med nærmere angivet følsomhed og pålidelighed. Sådanne udstyr kan f.eks. fremstilles som følger:
Et prøveudstyr til bestemmelse af human placenta lactogent hormon (HPL), bestående af en mikrotitreringsplade, hvori gruber-20 nes vægge er belagt med monoklonalt antistof A mod HPL, ampuller med frysetørrede antistoffer B mod HPL, mærket med enzymet peroxidase, og endvidere af hjælpestoffer såsom vaskestødpude, enzymsubstrat, kontroller og standarder.
Generelt angår opfindelsen et prøveudstyr indeholdende: 25 1. Et monoklonalt antistof rettet mod samme antigen og mærket med et vist mærke.
2. Et monoklonalt antistof, som er forskelligt fra 1, rettet mod samme antigen, der enten er uopløseligt eller er blevet gjort uopløseligt.
30 3, Andre egnede reagenser.
7
DK 163838 B
EKSEMPEL 1. (Fremstilling af reagenser).
la. Fremstilling af monoklonale antistoffer mod HCG.
Mus (stamme Balb/C) blev immuniseret med human chorion gonadotrophin (HCG) med en renhed på 10.000 IU 5 pr. mg. Efter ca. 6 uger blev en cellesuspension frem- 7 stillet af milten, hvorefter 8 x 10 celler deraf blev sammensmeltet med 2 x 10 mycloma-celler (P^ x 63 Ag/8/653) under betingelser, der er beskrevet i litteraturen (Kohier & Milstein, Nature256 (1975) 495).
10 Hybridcmaer blev dyrket i Dulbecco-modificeret Eagle's medium med 10% kalvefosterserum og undersøgt for anti-HCG-produktion. Antistofproducerende hybridomaer blev genklonet mindst to gange. Store mængder monoklonale antistoffer fremkom ved at geninjicere hybridomaerne 15 i bughulen på mus (stamme Balb/C) og udvinde ascites- væsken efter 2-3 uger.
lb. Fremstilling af fåre-erythrocyter dækket med mcnoklonalt anti-HCG.
Fåre-erythrocyter blev stabiliseret ved formalinbehand-20 ling (Wide: Acta endocrinol., Suppl. 70 (1962), 20, som modificeret af Schuurs m.fl.: Acta endocrinol., 59 (1968) 120) og blev dækket med monoklonale antistoffer ved at inkubere dem i 2 1/2 time med antistofferne i en koncentration på 0,2 mg pr. ml.
8
DK 163838 B
lc. Reaktion af fåre-erythrocyter, dækket med monoklonalt anti-HCG, med HCG og LH.
0,025 ml af en opløsning af HCG eller luteiniserende hormon (LH) blev sat til 0,5 ml af en 0,4% erythrocyt-5 suspension i et rundbundet glas. Glassets indhold blev rystet, hvorefter det blev lagret, fri for vibrationer, i 2 timer. Hvis der ikke skete nogen agglutination, blev en mørkebrun ring synlig på bunden af glasset (-). Hvis der skete agglutination, dannedes 10 et jævnt lysebrunt lag på bunden af glasset (+) .
EKSEMPEL 2. (Enzymimmunoprøve for prolactin).
2a. Fremstilling af monoklonale antistoffer mod prolactin (PRL).
Den anvendte metode var identisk med den, der er be-15 skrevet i eksempel la, idet immuniseringen naturlig vis blev foretaget med prolactin.
2b. Fremstilling af koblingsproduktet af monoklonalt anti-PRL med peroxidase.
Ig-f rak tionen af monoklonalt anti-PRL, fremkommet af 20 muse-ascitesvæske, blev koblet med enzymet peberrod- peroxidase (HRP) ved hjælp af natriumperjodat, som beskrevet af Nakane & Wilson (i Immunofluorescence and Related Staining Techniques, Knapp, Holubar, Wick (red.), Elsevier, Amsterdam, 1978).
25 2c. Fremstilling af mikrogruber dækket med monoklonalt anti-PRL.
Gruberne i polystyrenmikrotitreringsplader blev fyldt med 0,1 ml af en opløsning af Ig-fraktionen af muse-ascitesvæske (se 2a) med en koncentration på
DK 163838 B
9 ratur. Derefter blev gruberne vasket med phosphat-stødpude, der indeholdt 0,1% Tween-20, tørret i luft i 24 timer og derpå tørret over phosphorpentoxid.
2d. Bestemmelse af PRL.
5 0,1 ml af opløsninger med forskellige PRL-indhold blev anbragt i gruberne i en mikrotitreringsplade (se 2c), behandlet med et mondklonalt anti-PRL, hvorefter gruberne blev dækket, og pladen blev inkuberet i 2 timer ved 37°C. Derefter blev gruberne ekstraheret og 10 vasket fire gange med phosphatstødpude med Tween-20.
Derefter blev gruberne fyldt med 0,1 ml af en opløsning af et mondklonalt anti-PRL-HRP-koblingsprodukt (se 2b), dækket og inkuberet i 2 timer ved 37°C.
Efter fornyet ekstraktion og vask blev gruberne 15 fyldt med en opløsning af o-phenylendiamin,2HCl og ureumperoxid (substrat for enzymet HRP). Efter 30 minutters inkubation blev enzymreaktionen standset ved tilsætning af 0,1 ml 2 mol/1 svovlsyre, og ekstinktionen blev målt ved 492 nm.
20 Endelig blev der konstrueret kurver over dosis-reaktion ved at afsætte de målte ekstinktioner som funktion af logaritmerne af PRL-koncentrationen i opløsningerne, som først blev anbragt i gruberne. Nogle af disse kurver, fremkommet med forskellige monoklonale anti-22 PRL-præparater, er vist på figur 1, hvor
Anti-PRL i Anti-PRL i
Kurve koblingsprodukt grube 1
A A
2 A B
3 B A
4 B B

Claims (6)

1. Fremgangsmåde til bestemmelse af antigener ved hjælp af en immunokemisk reaktion, kendetegnet ved, at antige-5 net, der skal bestemmes, inkuberes med et immobi1iseret mono-klonalt antistof rettet mod antigenet og med en anden slags monoklonalt antistof rettet mod samme antigen, og som er mærket . 10
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at mærket er valgt blandt røde blodceller, latexkugler, metal-solpartikler, farvestofpartikler, radioisotoper og fluorescerende stoffer. 15
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at mærket er et enzym.
4. Prøveudstyr, der kan anvendes til udførelse af fremgangs-måden ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det omfatter : a) én slags monoklonale antistoffer rettet mod et særligt antigen og mærket med et mærke, b) én anden slags monoklonale antistoffer forskellige fra det 2 5 i a), men rettet mod samme antigen og gjort uopløselige.
5. Prøveudstyr ifølge krav 4, kendetegnet ved, at mærket er valgt blandt røde blodceller, latexkugler, metalsol- partikler, farvestofpartikler, radioisotoper og fluorescerende 3 0 stoffer.
6. Prøveudstyr ifølge krav 4, kendetegnet ved, at mærket er et enzym. 35
DK315081A 1980-07-28 1981-07-15 Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af to monoklonale antistoffer og et proeveudstyr til brug ved denne fremgangsmaade DK163838B (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL8004308 1980-07-28
NLAANVRAGE8004308,A NL185309C (nl) 1980-07-28 1980-07-28 Methode voor het bepalen van antigenen met behulp van twee of meer monoklonale antilichamen alsmede immuunreagens.

Publications (2)

Publication Number Publication Date
DK315081A DK315081A (da) 1982-01-29
DK163838B true DK163838B (da) 1992-04-06

Family

ID=19835673

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK315081A DK163838B (da) 1980-07-28 1981-07-15 Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af to monoklonale antistoffer og et proeveudstyr til brug ved denne fremgangsmaade
DK061990A DK163839C (da) 1980-07-28 1990-03-08 Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af tre eller flere monoklonale antistoffer, og et proeveudstyr til brug ved fremgangsmaaden
DK061890A DK163840C (da) 1980-07-28 1990-03-08 Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af to eller flere monoklonale antistoffer og proeveudstyr til brug ved fremgangsmaaden

Family Applications After (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK061990A DK163839C (da) 1980-07-28 1990-03-08 Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af tre eller flere monoklonale antistoffer, og et proeveudstyr til brug ved fremgangsmaaden
DK061890A DK163840C (da) 1980-07-28 1990-03-08 Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af to eller flere monoklonale antistoffer og proeveudstyr til brug ved fremgangsmaaden

Country Status (8)

Country Link
US (1) US6391563B1 (da)
EP (1) EP0045103B1 (da)
JP (2) JPS5786051A (da)
AU (1) AU549077B2 (da)
DE (1) DE3167698D1 (da)
DK (3) DK163838B (da)
ES (1) ES504285A0 (da)
NL (3) NL185309C (da)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2952816A (en) * 1955-10-21 1960-09-13 Gen Electric Limiting amplifier
EP0042755B1 (en) * 1980-06-20 1988-08-24 Unilever Plc Processes and apparatus for carrying out specific binding assays
US6406920B1 (en) 1980-06-20 2002-06-18 Inverness Medical Switzerland Gmbh Processes and apparatus for carrying out specific binding assays
EP0146654A3 (en) * 1980-06-20 1986-08-20 Unilever Plc Processes and apparatus for carrying out specific binding assays
US4486530A (en) * 1980-08-04 1984-12-04 Hybritech Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4376110A (en) * 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4879219A (en) * 1980-09-19 1989-11-07 General Hospital Corporation Immunoassay utilizing monoclonal high affinity IgM antibodies
US4837167A (en) * 1981-01-30 1989-06-06 Centocor, Inc. Immunoassay for multi-determinant antigens using high-affinity
JPS585659A (ja) * 1981-06-24 1983-01-13 ハイブリテツク　インコ−ポレ−テツド 単クロ−ン性抗体を使用する免疫学的、抑制試験
JPS58127167A (ja) * 1982-01-26 1983-07-28 Green Cross Corp:The 逆受身モノクロ−ナル抗体赤血球凝集反応用抗原検出試薬
GB2118300B (en) * 1982-02-12 1985-06-19 Corning Glass Works Method of immunoassay
US4511662A (en) * 1982-06-18 1985-04-16 Bio-Rad Laboratories, Inc. Simultaneous assay for T and B lymphocyte populations and subpopulations
JPS5954966A (ja) * 1982-09-22 1984-03-29 Mochida Pharmaceut Co Ltd 免疫学的測定試薬
JPS6080768A (ja) * 1983-10-12 1985-05-08 Eisai Co Ltd 塩基性胎児蛋白の測定方法および試薬
US4595661A (en) * 1983-11-18 1986-06-17 Beckman Instruments, Inc. Immunoassays and kits for use therein which include low affinity antibodies for reducing the hook effect
US4690890A (en) * 1984-04-04 1987-09-01 Cetus Corporation Process for simultaneously detecting multiple antigens using dual sandwich immunometric assay
US5011771A (en) * 1984-04-12 1991-04-30 The General Hospital Corporation Multiepitopic immunometric assay
JPH0736016B2 (ja) * 1984-05-11 1995-04-19 和光純薬工業株式会社 免疫グロブリンの定量方法
US4707438A (en) * 1984-08-22 1987-11-17 Tel Aviv University Immunoassay for breast cancer employing monoclonal antibodies
US4654298A (en) * 1984-10-05 1987-03-31 Abbott Laboratories Method for detection of peritoneal inflammation or infection
US4845197A (en) * 1985-09-09 1989-07-04 Agri-Diagnostics Associates Monoclonal antibodies and methods for fungal pathogen detection
JPH07119762B2 (ja) * 1986-04-09 1995-12-20 和光純薬工業株式会社 補体の定量方法
JP2591750B2 (ja) * 1986-06-26 1997-03-19 オ−ソ・ダイアグノステイツク・システムズ・インコ−ポレ−テツド 免疫分析システム
US5187067A (en) * 1986-12-15 1993-02-16 Teijin Limited Immunological determination of free human protein S and C4bp-protein S complex
DE3789284T2 (de) * 1986-12-15 1994-07-14 Teijin Ltd Immunologische Bestimmung von freiem menschlichem Protein-S und c4bp-Protein-S-Komplex.
US5179000A (en) * 1987-07-24 1993-01-12 Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha Method for assaying basic fetoprotein in urine and assay kit therefor
NO884368L (no) * 1987-10-02 1989-04-03 Du Pont Immunanalyse ved anvendelse av igg-innfangelsesantistoff og multippel, monoklonalt antistoffpaavisningssystem.
US4859612A (en) * 1987-10-07 1989-08-22 Hygeia Sciences, Inc. Metal sol capture immunoassay procedure, kit for use therewith and captured metal containing composite
JPH01301165A (ja) * 1988-05-30 1989-12-05 Sekisui Chem Co Ltd 免疫測定法
DE3929119A1 (de) * 1989-09-01 1991-03-07 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zum nachweis von analyten
JPH03118472A (ja) * 1989-09-29 1991-05-21 Sekisui Chem Co Ltd インスリン定量方法及び定量試薬
US5447846A (en) * 1992-07-17 1995-09-05 Fuji Photo Film C., Ltd. Homogeneous Immunoassay process using covalent conjugate of enzyme and plural monoclonal antibodies for different epitopes on analyte
JP2709296B2 (ja) * 1996-05-27 1998-02-04 オリンパス光学工業株式会社 免疫学的分析方法
JP3652029B2 (ja) * 1996-10-16 2005-05-25 積水化学工業株式会社 高感度免疫測定法
EP2042870A1 (en) * 2007-09-28 2009-04-01 Fujifilm Corporation Method of high sensitive immunoassay
GB0820999D0 (en) * 2008-11-17 2008-12-24 Menon Johansson Anatole S Pregnancy testing
JP7313659B2 (ja) * 2019-03-12 2023-07-25 株式会社シノテスト 試料中のｈｍｇｂ１の測定方法及び測定試薬
JP2023550688A (ja) * 2020-10-19 2023-12-05 ベクトン・ディキンソン・アンド・カンパニー ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２抗原側方流動アッセイ検出デバイス及びそれを使用するための方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL154600B (nl) 1971-02-10 1977-09-15 Organon Nv Werkwijze voor het aantonen en bepalen van specifiek bindende eiwitten en hun corresponderende bindbare stoffen.
US3654090A (en) 1968-09-24 1972-04-04 Organon Method for the determination of antigens and antibodies
US4196265A (en) 1977-06-15 1980-04-01 The Wistar Institute Method of producing antibodies
FI64952C (fi) * 1977-06-15 1984-02-10 Wistar Inst Foerfarande foer framstaellning av genetiskt stabila cellinjer
US4115535A (en) * 1977-06-22 1978-09-19 General Electric Company Diagnostic method employing a mixture of normally separable protein-coated particles
US4191739A (en) * 1977-10-17 1980-03-04 General Electric Company Antigen-antibody reaction assay employing particle aggregation and resistive pulse analysis
US4244940A (en) * 1978-09-05 1981-01-13 Bio-Rad Laboratories, Inc. Single-incubation two-site immunoassay
EP0038642B1 (en) * 1980-04-09 1989-02-08 National Research Development Corporation A monoclonal antibody against hepatitis b and its production, a hybridoma producing the monoclonal antibody and compositions containing it, the propagation of the hybridoma and the monoclonal antibody for use as an antiviral agent against hepatitus b and in isolating hepatitus b surface antigen from a sample
CH642458A5 (en) * 1980-04-25 1984-04-13 Hoffmann La Roche Immunological method
US4361647A (en) * 1980-05-22 1982-11-30 Palo Alto Medical Research Foundation Sandwich immunoassay and compositions for use therein
EP0042755B1 (en) * 1980-06-20 1988-08-24 Unilever Plc Processes and apparatus for carrying out specific binding assays
US4486530A (en) * 1980-08-04 1984-12-04 Hybritech Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies
US4376110A (en) * 1980-08-04 1983-03-08 Hybritech, Incorporated Immunometric assays using monoclonal antibodies

Also Published As

Publication number Publication date
DK61990D0 (da) 1990-03-08
US6391563B1 (en) 2002-05-21
EP0045103A2 (en) 1982-02-03
DK163840C (da) 1992-08-24
DK163839B (da) 1992-04-06
NL185309C (nl) 1990-03-01
JPH0340341B2 (da) 1991-06-18
EP0045103A3 (en) 1982-02-10
AU549077B2 (en) 1986-01-16
AU7307881A (en) 1982-02-04
NL8702777A (nl) 1988-03-01
JPS5786051A (en) 1982-05-28
NL186407C (nl) 1990-11-16
DK315081A (da) 1982-01-29
DK163839C (da) 1992-08-24
NL8702776A (nl) 1988-03-01
DK163840B (da) 1992-04-06
ES8206856A1 (es) 1982-08-16
NL8004308A (nl) 1982-03-01
DK61990A (da) 1990-03-08
ES504285A0 (es) 1982-08-16
JPH06258325A (ja) 1994-09-16
DK61890D0 (da) 1990-03-08
NL186407B (nl) 1990-06-18
DK61890A (da) 1990-03-08
DE3167698D1 (en) 1985-01-24
NL188869B (nl) 1992-05-18
EP0045103B1 (en) 1984-12-12
NL185309B (nl) 1989-10-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK163839B (da) Fremgangsmaade til bestemmelse af antigener ved hjaelp af tre eller flere monoklonale antistoffer, og et proeveudstyr til brug ved fremgangsmaaden
EP0782710B1 (en) Method for detecting antibodies
US4894347A (en) Erythrocyte agglutination assay
US6303325B1 (en) Method for detecting analytes
KR101366353B1 (ko) 인슐린 측정 방법
CN105699653B (zh) 一种超敏感超顺磁性纳米免疫微球及其检测gp73抗原的方法
GB2095831A (en) Monoclonal antibody reagent and method for immunological assay
DK158246B (da) Sandwichfremgangsmaade til bestemmelse af carcinoembryonalt antigen og oploesning til brug ved denne fremgangsmaade
CN111308084A (zh) 一种超敏心肌肌钙蛋白i检测方法和试剂盒
JPH01163661A (ja) ＩｇＧ捕捉抗体および多重単クローン性抗体検出系を用いたイムノアツセイ
CN102876634B (zh) 孕马血清促性腺激素双抗体夹心elisa试剂盒
CN109884308A (zh) 甘露多糖半抗原、偶联物及应用
Coombs et al. Assays using red cell-labelled antibodies
CN110579597A (zh) 检测14-3-3 eta蛋白的非均相化学发光免疫检测试剂盒及其应用
JP4458622B2 (ja) 免疫学的測定方法及び測定用試薬
CA2254151A1 (en) Method for immunological assay
US4812395A (en) Method for detecting enzymatic activity using particle agglutination
AU703940B2 (en) Regenerable solid phase for carrying out specific binding reactions
EP0181762B1 (en) Method for detecting enzymatic activity using particle agglutination
JPS5954966A (ja) 免疫学的測定試薬
JPS61218600A (ja) 卵胞刺激ホルモンの測定法、測定試薬、これに好適なモノクロナール抗体及びその取得法
CN103374048A (zh) 链霉素半抗原及其制备方法和应用
CN110079506B (zh) 一种人血清纤维胶凝蛋白ficolin-2的单克隆抗体及其应用
JP2518602B2 (ja) ヒトプロテインｓに対するモノクロ―ナル抗体を用いた免疫学的測定試薬及びキット
JPH11344493A (ja) 免疫的測定法