DK169681B1

DK169681B1 - Fremgangsmåde til fremstilling af pristinamycin IIB-derivater

Info

Publication number: DK169681B1
Application number: DK350187A
Authority: DK
Inventors: Jean-Claude Barriere; Jean-Pierre Bastart; Jean-Marc Paris
Original assignee: Rhone Poulenc Sante
Priority date: 1987-07-07
Filing date: 1987-07-07
Publication date: 1995-01-09
Also published as: DK350187A; DK350187D0

Description

i DK 169681 B1

Den foreliggende opfindelse angår en særlig fremgangsmåde til fremstilling af pristinamycin IIB-S-oxid-deri-vater med den almene formel I

0 (I) cVcx CH, R-SO^S/ ° 10 hvori R betyder a) en nitrogenholdig heterocyclylgruppe med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder et eller flere andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen og svovl i form af sulfoxid eller 15 sul fon, og som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, eller b) en alkylkæde med 2-4 carbonatomer, der er substitueret med en eller to grupper valgt blandt phenyl, cycloalkylamino eller N-alkyl-N-cycloalkylamino indeholdende 3-6 ringled, 20 alkylamino, dialkylamino og dialkylcarbamoyloxy (idet alkyl-delene i de to sidstnævnte grupper eventuelt sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan danne en mættet eller umættet heterocyclisk gruppe med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder et andet heteroatom valgt blandt nitro-25 gen, oxygen og svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe) eller c) en alkylkæde med 2-4 carbonatomer, der er substitueret med en eller flere nitrogenholdige heterocycliske grupper med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder et eller to andre 30 heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen og svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, idet de nævnte heterocycliske grupper er bundet til kæden, som bærer dem, via et carbonatom, eller 35 d) en [l-methyl-2(S)-pyrrolidinyl]-methylgruppe, idet mindst en af substituenterne, der bæres af den nævnte DK 169681 B1 2 alkylkæde, er en nitrogenholdig substituent, der kan danne salte,og idet de ovennævnte alkylgrupper er ligekædede eller forgrenede og indeholder 1-10 carbonatomer, med mindre der er anført andet, i form af deres isomere eller deres blan-5 dinger;- eller deres additionssalte med syrer, hvilken fremgangsmåde er ejendommelig ved det i krav l's kendetegnende del angivne.

Når R i den almene formel I betyder en heterocyclyl-gruppe, kan denne gruppe f.eks. være valgt blandt 3-azeti-10 dinyl, 3-pyrrolidinyl, 3- eller 4-piperidyl eller 3- eller 4-azepinyl.

Når R betyder en heterocyclylalkylgruppe, kan hetero-cyclylgruppen f.eks. være valgt blandt de ovennævnte grupper eller 2-azetidinyl, 2-pyrrolidinyl, 2-piperidyl, 2-azepinyl, 15 piperazinyl, 4-alkylpiperazinyl, quinolyl, isoquinolyl eller imidazolyl.

Når R indeholder en dialkylamino- eller dialkylcar-bamoyloxygruppe, hvis alkyldele sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, danner en heterocyclisk gruppe, kan 20 denne sidstnævnte f.eks. være valgt blandt 1-azetidinyl, 1--pyrrolidinyl, piperidino, 1-azepinyl, morpholino, thiomor-pholino i form af sulfoxid eller sulfon, 1-piperazinyl, 4--alkyl-l-piperazinyl, N-alkyl-l-homopiperazinyl og l-imid-azolyl.

25 I EP patentansøgning nr. 191.662 beskrives forbindel ser svarende til forbindelerne med formlen I.

Ifølge EP patentansøgningen fremstilles forbindelserne med formlen I ved oxidation af et pristinamycin lig-derivat eller et salt eller et beskyttet derivat deraf med den almene 30 formel II: ' ....

DK 169681 B1 3

Som oxidationsmidler Kan der anvendes organiske persyrer eller uorganiske persyrer, f.eks. persvovlsyre.

Det har nu vist sig, at forbindelserne med den almene formel I kan fremstilles ved, at man ved hjælp af kalium-5 monopérsulfat i form af tripelsaltet [2KHSO5 · KHSO4 · K2SO4] oxiderer et pristinamycin lig-derivat med den almene formel C«, R-S^^ 15 hvori R har den ovenfor angivne betydning, bortset fra, at når R indeholder en svovlholdig heterocyclisk gruppe, kan svovlatomet også foreligge i form af et sulfid eller et salt eller beskyttet derivat deraf, og eventuelt derefter adskiller de fremkomne isomere.

20 Kaliummonopersulfat i form af tripelsaltet [2KHSO5 · KHSO4 · K2SO4] forhandles under navnet "Oxone".

Når der tages hensyn til de fordele, som opnås med "Oxone", nemlig let anvendelse og forøget sikkerhed, i forhold til persvovlsyre, kunne det være nærliggende for en 25 fagmand at anvende dette oxidationsmiddel.

Imidlertid skulle det på baggrund af de publikationer, hvori anvendelsen af dette oxidationsmiddel omtales, forventes, at det ikke ville være anvendeligt til oxidation af forbindelser med formlen II.

30 Pristinamyciner er nemlig komplekse molekyler, der indeholder talrige funktioner, som kan oxideres (dobbeltbindinger, konjugerede dobbeltbindinger, hydroxygrupper). R.J. Kennedy, J. Org. Chem. 25, 1901 (1960) (ref. I)-, viser, at talrige funktioner oxideres af "Oxone" (sulfid, dobbeltbin- 35 dinger, alkoholer, ketoner, aminer). R. Bloch et al., J.

Org. Chem. 50, 1544 (1985) (ref. 2), viser, at "Oxone" giver DK 169681 B1 4 anledning til dannelse af en betydelig mængde epoxid, når molekylet indeholder en umættethed: "Vi rapporterer nu, at kaliumhydrogenpersulfat alene er i stand til at epoxidere vandopløselige eller -uopløselige 5 alkener" med gode til udmærkede udbytter, hvilket åbner en ny, effektiv og simpel vej til syntese af epoxider."

Forskellige eksempler, som er anført i tabel I i denne publikation, viser bl.a. epoxidering af konjugerede systemer af dobbeltbindinger.

10 Ifølge den kendte teknik fører oxidationer ved hjælp af "Oxone” især til sulfoner (se ovennævnte ref. 1 og 2), medens omsætningen ifølge den foreliggende opfindelse i stort omfang fører til sulfoxid.

Det kunne også formodes, at aminogruppeholdige kæder 15 substitueret på svovlatomet ville blive nedbrudt under oxidationen, enten ved eliminering af amin eller ved oxidation af nitrogen (se ref. 1).

Det er således overraskende, at "Oxone" kan føre til selektiv oxidation af svovlfunktionen i pristinamyciner til 20 en sulf oxidfunktion, men det har desuden vist sig, at denne oxidation fortrinsvis fører til dannelse af isomer A2 og gør det muligt at opnå produkter med bedre renhed. Det er således blevet muligt at krystallisere produkterne direkte efter fremstillingen og undgå de tidligere nødvendige, suc-25 cessive chromatografier. Det ovenfor anførte er der gjort nærmere rede for senere i beskrivelsen.

Omsætningen gennemføres i vand eller i en blanding af vand og alkohol (f.eks. vand/methanol) eller vand og chloreret opløsningsmiddel (f.eks. vand/dichlormethan) ved 30 temperaturer mellem -60 og +25°C.

Når pristinamycin lig-derivatet med den almene formel II anvendes i form af et salt deraf, anvendes salte dannet med organiske eller uorganiske syrer, fortrinsvis med tri-fluoreddikesyre, vinsyre, eddikesyre, benzoesyre, saltsyre 35 eller svovlsyre, eller med kaliumhydrogensulfat.

Når R indeholder en alkylamino- eller cycloalkylami- DK 169681 B1 5 nosubstituent, er det ligeledes muligt at anvende et beskyttet derivat af forbindelsen med den almene formel II, idet denne kan være beskyttet med enhver amin-beskyttelsesgruppe, hvis indføring og fjernelse ikke påvirker resten af moleky-5 let. Dér anvendes fordelagtigt en trifluoracetylgruppe, der efter omsætningen kan fjernes ved behandling med et alkali-metalhydrogencarbonat (natrium- eller kaliumhydrogencarbonat) i vandig opløsning.

Kaliummonopersulfatet fremstilles ved metoden be-10 skrevet i US patentskrift nr. 2.802.722.

Forbindelserne med den almene formel II kan fremstilles ved metoden, der beskrives i EP patentansøgning nr. 191.662. Det er ikke absolut nødvendigt at isolere pristi-namycin ΙΙβ-derivatet med den almene formel II for at anvende 15 det ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

Forbindelserne med den almene formel I, der fås ved den omhandlede fremgangsmåde, kan renses ved kendte metoder, f.eks. ved krystallisation, chromatografi eller successive ekstraktioner i surt eller basisk medium. På baggrund af 20 synergistinernes følsomhed for basisk medium forstås der ved basisk medium et medium, der netop er tilstrækkelig basisk til at frigøre forbindelsen fra dens additionssalt med en syre, dvs. et medium, hvis pH-værdi ikke overskrider 8.

25 Isomerene af forbindelserne med den almene formel I

kan adskilles ved enhver kendt metode. Der anvendes fordelagtigt chromatografi eller højtryksvæskechromatografi.

Forbindelserne med den almene formel I, der fås ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen, udviser en antibakteriel 30 aktivitet over for grampositive bakterier (staphylokokker, streptokokker, pneumokokker, enterokokker) og gramnegative bakterier (haemophilus, gonokokker, meningokokker). Desuden udviser de den fordel, at de kan opløses i vand, i almindelighed i form af salte, i anvendelige terapeutiske doser 35 og udviser en synergistisk antibakteriel virkning med pristi-namycin 1^, virginiamycin S eller opløselige synergistinderi- DK 169681 B1 6 vater som beskrevet i EP patentansøgning nr. 191.662, side 16.

Endvidere kan forbindelserne med den almene formel I, der fremstilles ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen,

5 være anvendelige til fremstilling af pristinamycin IIB-sul-fonderivater med den almene formel III

C«, R-S'V C0)2 15 hvori R har den samme betydning som i formel I, hvilke derivater er aktive som antimikrobielle midler og ligeledes udviser en synergistisk virkning sammen med pristinamyciner af gruppe I.

Pristinamycin IIB-sulfonderivaterne med den almene 20 formel III fremstilles ved oxidation af et pristinamycin lig-derivat med den almene formel I under betingelserne beskrevet i EP patentansøgning nr. 191.662.

Ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstilles især forbindelser med den almene formel I, hvori R betyder en 25 alkylkæde med 2-4 carbonatomer, der er substitueret med en eller to grupper valgt blandt phenyl, cycloalkylamino eller N-alkyl-N-cycloalkylamino indeholdende 5 eller 6 ringled, alkylamino med 1-4 carbonatomer, dialkylamino (hvis alkyldele indeholder 1-3 carbonatomer eller sammen med nitrogenatomet, 30 hvortil de er bundet, danner en mættet heterocyclisk gruppe med 5 eller 6 ringled), eller R betyder en 5- eller 6-leddet nitrogenholdig heterocyclisk gruppe, der eventuelt er substitueret med en alkylgruppe med 1-4 carbonatomer, idet mindst en af substituenterne, som bæres af den ovennævnte 35 alkylkæde, er en nitrogenholdig substituent, der er i stand til at danne salte, og idet mindst en af grupperne, der DK 169681 B1 7 bæres af denne kæde, er placeret i 1-stilling eller 2-stil-ling.

De således fremstillede forbindelser med den almene formel I kan omdannes til syreadditionssalte heraf.

5 "Som farmaceutisk acceptable salte kan der især nævnes additionssalte med uorganiske syrer, såsom hydrochlorider, hydrobromider, sulfater, nitrater eller phosphater, eller med organiske syrer, såsom acetater, propionater, succinater, maleater, fumarater, methansulfonater, p-toluensulfonater, 10 isethionater, citrater eller tartrater eller substitutionsderivater af disse forbindelser.

Opfindelsen illustreres ved de følgende eksempler. NMR-Spektrene af forbindelserne, der er illustreret i disse eksempler, udviser generelle karakteristika, som er fælles 15 for alle forbindelserne med den almene formel I, og særlige karakteristika, som er specielle for hver af forbindelserne afhængigt af substituenterne. I eksemplerne er der kun anført de særlige karakteristika, der skyldes variable grupper.

For forbindelserne med den almene formel I betegnes protoner-20 ne ved den nummerering, der er anført i den følgende formel: 0 V-'T'n Ry „ 8 10 >53 lis o 25 32 0 0 j^6 s CHj 20 °" 30

Med mindre andet er anført, er alle spektre optaget ved 250 MHz i deuterochloroform. De kemiske forskydninger er udtrykt i ppm i forhold til signalet af tetramrethylsilan.

De i det følgende anvendte forkortelser har følgende betyd-35 ning: DK 169681 B1 8 s = singlet d = dublet t = triplet mt = multiplet 5 ~m = massiv dd = dublet af dubletter dt = dublet af tripletter ddd = dublet af dubletter af dubletter dddd = dublet af dubletter af dubletter af dubletter.

10

De forskellige isomere er klassificeret arbitrært efter de kemiske forskydninger, der observeres i NMR-spektre-ne.

Som isomer A^ og isomer A2 af forbindelserne med den 15 almene formel I betegnes isomere, der har følgende karakteristika: ca. 1,7 (s, -CH3 i 33); ca. 3,8 (s, ^CH2 i 17); <5 (d, -H27) isomer A2 eller >5 (d, -H27) isomer A^; ca. 5,50 (d bred, -H13); ca. 6,20 (d, -Ηχχ); ca. 6,6 (2^NH i 8) ; >8 (s, 20 -H20).

Som isomer og isomer B2 af forbindelser med den almene formel I betegnes isomere, der udviser følgende karakteristika ; ca. 1,5 (s, -CH3 i 33); ca. 3,7 og 3,9 (2d,^TCH2 i 17); 25 ca. 4,8 (mt, -H13); <5 (d, -H27) isomer B2 eller >5 (d,-H27) isomer Blf· ca. 5,70 (grænse-AB, -H^ og -H10) ; ca.

7,7 C^NH i 8); ca. 7,8 (s, -H20).

Som isomer A af forbindelsen med den almene formel II betegnes isomeren, der udviser NMR-karakteristika, der 30 er identiske med de ovenfor anførte for isomerene A^ og A2 af forbindelserne med den almene formel I, idet H i 27-stil-ling er karakteriseret ved 4,7 (d, J < 1 Hz).

Som isomer B af forbindelsen med den almene formel II betegnes isomeren, der udviser NMR-karakteristika, der 35 er identiske med de ovenfor anførte for isomerene B^ og B2 af forbindelserne med den almene formel I, idet H i 27-stil- DK 169681 B1 9 ling er karakteriseret ved 4,6 (d, J > 2,5 Hz).

Eksempel 1

Til 13 g 26-(2-diethylaminoethyl)-thiopristinamycin 5 lig (is'omer A) suspenderet i 170 ml destilleret vand sættes i løbet af 15 minutter ved 0°C 40 ml af en vandig opløsning af 8,1 g "Oxone". Den fremkomne blanding omrøres i 30 minutter ved 0°C, hvorefter der tilsættes 1,3 g "NORIT® SX ULTRA"--sort og en lille mængde natriumthiosulfat. Efter 30 minut-10 ters omrøring ved 20°C filtreres suspensionen gennem "Ce-lite®" og skylles derefter med 50 ml destilleret vand. Opløsningen indstilles til en pH-værdi på 7 ved tilsætning af fast natriumhydrogencarbonat og vaskes derefter med 3 gange 100 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, tørres 15 over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30"C, hvorved der fås 9,9 g af et lyst beige fast stof, der indeholder 85% 26-(2-diethylaminoethyl)-sulfinylpristinamycin lig (isomere A2) / 10% isomer A^ og 5% 26-(2-diethylaminomethyl)-sulfonylpri-20 stinamycin II3.

Den krystallinske form af 26-(2-diethylaminoethyl)--sulfinylpristinamycin II3 kan fås på følgende måde.

5 g af det ovenfor fremstillede fast stof optages i 13 ml acetonitril. Efter opløsning i varmen tilsættes der 25 10 ml ether, og krystallisationen startes ved skrabning.

Krystallerne frafiltreres, vaskes med ether og tørres derefter under formindsket tryk (270 Pa) ved 20°C. Der fås på denne måde 3,9 g 26-(2-diethylaminomethyl)-sulfinylpristi-namycin lig (isomere A2: 85%, isomere A^: 15%) i form af 30 hvide krystaller, der smelter nær 116°C.

NMR-Spektrum (isomer A2): 1,03 (t, -N(CH2CH3)2) 1,75 (S, -CH3 i 33) 2,05 og 2,55 (2mt, ^CH2 i 25) 35 2,45-2,70 (mt, -N(CH2CH3)2) DK 169681 B1 10 2,70 - 3,10 (mt, -SCH2-CH2) o 2,75 (mt, H i 4) 2,92 - 3,10 (mt, ^?CH2 i 15) 5 “3,22 (mt, H i 26) 3.82 (S, >CH2 i 17) 4,81 (d, H i 27) 5,5 (d, H i 13) 6,19 (d, H i 11) 10 6,50 (dd, ^TNH i 8) 6,58 (dd, H i 5) 8,12 (s, H i 20) NMR-Spektrum (isomer A^J : 15 1,04 (t, -N(CH2CH3)2) 1,69 (S, -CH3 i 33) 2-2,3 (mt, ^:CH2 i 25) 2.60 (mt, ^N-CH2-CH3) 2,7-2,95 (mt, -S(O)-CH2-CH2-NiC, ) 20 2,7 (mt, H i 4) 2,86 og 3,04 (2dd, ^CH2 i 15) 3,28 (mt, H i 26) 3,78 (AB-system, ^CH2 i 17) 5,25 (d, H i 27) 25 5,4 (d, H i 13) 6,15 (d, H i 11) 6.60 (dd, H i 5) 6.83 (dd, /NH i 8) 8,08 (S, H i 20) 30 26-(2-Diethylaminoethyl)-thiopristinamycin lig kan fremstilles som beskrevet i US patentskrift nr. 4.590.004.

Eksempel 2

Til 3 g 26-(2-diethylaminoethyl)-thiopristinamycin 35 IIB (isomer A) suspenderet i en blanding af 30 ml destilleret vand og 6 ml ethanol sættes i løbet af 10 minutter ved -5°C

DK 169681 B1 11 10 ml af en vandig opløsning af 1,9 g "Oxone". Efter 10 minutters omrøring vaskes reaktionsblandingen med 2 gange 20 ml dichlormethan. Den vandige fase indstilles til en pH--værdi på 7 ved tilsætning af fast natriumhydrogencarbonat 5 og ekstraheres derefter med 4 gange 50 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 40°C. Der fås på denne måde 2,4 g af et hvidt fast stof, der indeholder 26-(2-diethylaminoethyl)-sulfinylpristi-10 namycin IIB (isomer A2: 88%, isomer A^: 6%) og 6% 26-(2— diethylaminoethyl)-sulfonylpristinamycin Hg. Produktet har samme NMR-karakteristika som produktet ifølge eksempel 1.

15 Eksempel 3

Til 3,2 g 26-[l-diethylamino-2 (R) -propyl]-thiopristi-namycin IIB (isomer A: 87%, isomer B: 13%) opløst i 48 ml methanol sættes langsomt ved -30°C 1,65 g 'Oxone" opløst i 32 ml destilleret vand. Efter 30 minutter ved -30°C og der-20 efter 15 minutter ved -40°C tilsættes 30 ml destilleret vand og derefter 3 g "NORIT® SX ULTRA"-sort. Blandingen amrøres i 30 minutter ved 20°C, filtreres over "Celite®", hvorefter der skylles med 50 ml destilleret vand. Den vandige fase vaskes med 2 gange 100 ml ethylacetat og derefter 50 25 ml ethylether, indstilles til en pH-værdi på 7 ved tilsætning af fast natriumhydrogencarbonat og ekstraheres med 2 gange 250 ml dichlormethan. De organiske faser vaskes med 50 ml destilleret vand, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) 30 ved 30°C. Der fås på denne måde 2,4 g af et meget lysegult marengsagtigt stof, som omrøres i 40 ml af en blanding af pentan og diethylether i volumenforholdet 50:50. Efter filtrering og tørring under formindsket tryk (270 Pa) ved 20°C fås 2,2 g 26-[l-diethylamino—2(R)-propyl]-sulfinylpristi-35 namycin IIB (isomer A: 80%) i form af et råhvidt fast stof, der smelter nær 140°C.

DK 169681 B1 12 NMR-Spektrum: 1,02 (t, -N(CH2-CH3)2)

S H

5 —1,34 (d, ) O - CH2 - N(C2H5) 2

Cfi3 1.72 (S, - CH3 i 33) 10 2,01 og 2,55 (2mt, I^CH2 i 25) 2,45 - 2,70 (mt, IH af -CH2-N(CH2-CH3) 2 og -N(CH2-“CH3)2) 2,90 (mt, IH af -CH2-N(CH2CH3)2) 2,76 (mt, H i 4) 15 2,88 og 3,08 (2dd, ^CH2 i 15) 3 (mt, -S-CH-) } 1“ o ch3 3.73 (mt, H i 26) 3,80 (s, ^:ch2 i 17) 20 4,92 (s bred, Η i 27) 5,42 (d, H i 13) 6,15 (d, H i 11) 6,55 (dd, H i 5) 6,70 (dd, ^NH i 8) 25 8,06 (s, H i 20) 26- [l-diethylamino-2 (R) -propyl] -thiopristinamycin lig kan fremstilles på følgende måde.

Til 10,5 g pristinamycin IIA suspenderet i 200 ml 30 methanol sættes ved -30°C under nitrogen 3,2 ml l-diethylamino-2 (R)-propanthiol. Efter 18 timers omrøring ved -30°C tilsættes 2 ml methylacrylat, og der omrøres i 1 time. Der tilsættes derefter 200 ml destilleret vand, kal-iumhydrogen-sulfat indtil en pH-værdi på 4 ved -10° C og derpå 10 g 35 "NORIT® SX ULTRA"-sort. Efter 30 minutters omrøring ved 0eC filtreres blandingen gennem "Celite®", hvorefter der vaskes med 150 ml destilleret vand. Den vandige fase vaskes med DK 169681 B1 13 100 ml ethylacetat og derefter 100 ml ethylether, hvorefter den indstilles til en pH-værdi på 7 ved tilsætning af fast natriumhydrogencarbonat. Efter ekstraktion med 200 ml di-chlormethan vaskes den organiske fase med 100 ml vand, tørres 5 over mågnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Det fremkomne faste stof udrives i 100 ml ethylether, filtreres på en glasfritte og tørres derpå under formindsket tryk (270 Pa) ved 20°C. Der fås på denne måde 3,36 g 26-[l-diethylamino-10 2 (R)-propyl]—thiopristinamycin IIB (isomer A: 85%, isomer B: 15%) i form af et lyst beige fast stof, der smelter nær 130 eC.

NMR-Spektrum (isomer A): 1,03 (t, -N(CH2CH3)2)

15 \-N

1.32 (d, ) T«(ch2ch3)2 20 CH3 1,72 (S, -CH3 i 33) 1,88 og 2,10 (2mt, I>CH2 i 25) 2,55 (mt, -N(CH2CH3)2) 2,45 og 2,60 (2mt, -CH2-N(CH2CH3)2) 25 2,78 (mt, H i 4) 2,92 og 3,10 (2dd, I^CH2 i 15) 3 (mt, -S-CH-) CH3 3,52 (rnt, H i 26) 30 3,82 (S, ^CH2 i 17) 4,79 (s bred, H i 27) 5,49 (d, H i 13) 6.13 (d, H i 11) 6.32 (m, NH i 8) 35 6,52 (dd, H i 5) 8.13 (S, H i 20) DK 169681 B1 14 (isomer B): 1 (t, -n(CH2CH3)2)

\_N

5 1,34 (d, > \ * ch3 10 1,50 (s, -CH3 i 33) 2.05 og 2,5 (2mt,^CH2 i 25) 2.5 (mt„>NCH2-CH3) 2,44 og 2,55 (2mt, -CII2-N(CH2CH3) 2) 2,62 (mt, H i 4) 15 2,74 og 3,10 (2dd, ^CK2 i 15) 3,01 (mt, -S-Cg-) CH3 3,69 og 3,89 (2d, ^:CH2 i 17) 3,74 (mt, H i 26) 20 4,01 (d, J = 2,5, H i 27) 4,80 (AB-system, H i 13 og H i 14) 5,65 (d, H i 11) 6,60 (dd, H i 5) 7,71 (mt, ^NH i 8) 25 7,80 (s, H i 20) l-Diethylamino-2(R)-propanthiol kan fremstilles på følgende måde.

Til en suspension af 34,2 g lithiumaluminiumhydrid i 30 1600 ml ethylether sættes dråbevis i løbet af 1 time og 20 minutter 137,5 g N,N-diethyl-2-mercapto-(R)-propionamid opløst i 500 ml ethylether. Reaktionsblandingen holdes derpå i 2 timer og 30 minutter under tilbagesvaling} hvorefter den afkøles til en temperatur nær 0°C. Der tilsættes derpå 35 40 ml destilleret vand, således at blandingens temperatur ikke overskrider 20°C, og derefter 29,4 ml 5N natriumhydro- DK 169681 B1 15 xidopløsning og derpå 133 ml destilleret vand. Reaktionsblandingen filtreres, og filtratets pH-værdi indstilles til 8 ved tilsætning af 70 ml eddikesyre. Den fremkomne blanding filtreres på ny, der skylles med 3 gange 300 ml ethylether, 5 og derefter tørres filtratet over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°C. Der fås en gul olie, som renses ved destillation under formindsket tryk (1,3 kPa). Der fås på denne måde 101 g l-diethylamino-2 (R) -propanthiol i form 10 af en farveløs olie med et kogepunkt ved 1,3 kPa på 55-56“C, [a]p° - -37,1°C (c = 4,8, CH3OH).

N,N-Diethyl-2-mercapto-(R)-propionamid kan fremstilles på følgende måde.

Til 517 ml af en 5N natriumhydroxidopløsning, der 15 holdes ved 20°C, sættes i løbet af 30 minutter 105 g N,N--diethyl-2-acetylthio-(R)-propionamid i 600 ml ethylether. Reaktionsblandingen omrøres i 2 timer og 30 minutter ved en temperatur nær 20°C. Den vandige base fraskilles ved dekantering.

20 pH-Værdien af den vandige fase indstilles derefter til 5-6 ved langsom tilsætning af 140 ml eddikesyre. Den fremkomne blanding ekstraheres med 300 ml dichlormethan og derefter 200 ml, dichlormethan, og de organiske baser forenes, tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres 25 derefter til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30“C. Der fås på denne måde 78,6 g N,N-die-thyl-2-mercapto-(R)-propionamid i form af en violet olie ([a]2° = -21,1“ (c = 3,8; CH3OH)).

N,N-diethyl-2-acetylthio-(R)-propionamid kan fremstil-30 les på følgende måde.

Til en suspension af 72,6 g af kaliumsaltet af thiol-eddikesyre i 300 ml ethanol sættes 88,3 g N,N-diethyl-2--chlor-(S)-propionamid opløst i 150 ml ethanolReaktionsblandingen opvarmes derefter i 2 timer til en temperatur 35 nær 60°C, hvorefter den filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (130 Pa) ved en temperatur nær 50°C.

DK 169681 B1 16

Den fremkomne remanens optages og omrøres i 500 ml dichlor-methan, hvorefter den vaskes med 300 ml destilleret vand, 300 ml af en 10%'s vandig kaliumhydrogencarbonatopløsning og med 300 ml destilleret vand. Den organiske fase dekante-5 res, tørres over natriumsulfat og 1 g "3S"-sort, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30*C. Den fremkomne remanens destilleres under formindsket tryk (17 Pa). Der fås på denne måde 105,5 g N,N-diethyl-2-acetylthio-(R)-propionamid i form af 10 en svagt gul olie med et kogepunkt ved 17 Pa på 105-107°C.

[a]p° = +156° (c = 18,1; CHC13).

N,N-diethyl-2-chlor-(S)-propionamid kan fremstilles på følgende måde.

Til en opløsning af 175,2 g 2-chlor-(S)-propionylchlo-15 rid i 900 ml chloroform, der holdes ved 0°C, sættes 480 ml diethylamin i løbet af 1 time. Til reaktionsblandingen sættes 400 ml destilleret vand og 300 ml dichlormethan. Den organiske fase dekanteres og vaskes med 300 ml 2N saltsyre og derefter 400 ml destilleret vand. Den organiske fase tørres 20 over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°C.

Den fremkomne remanens destilleres under formindsket tryk (17 Pa). Der fås på denne måde 161,9 g N,N-diethyl-2-chlor-- (S) -propionamid i form af en farveløs olie med et kogepunkt

Of) 25 ved 17 Pa på 83-85°C. [a]p = +39,7° (c = 10,4; CHC13).

2-Chlor-(R og S) -propionylchlorid kan fremstilles ifølge metoden beskrevet af S-C.J. FU, S.M. BIRNBAUM og J.P. GREENSTEIN, J. Am. Chem. Soc. 76, 6054 (1954).

30 Eksempel 4

Til 2 g 2 6- [ l-diethylamino-2 (S) -propyl ] -thiopristi-namycin IIB (isomer A) opløst i 30 ml methanol sættes i løbet af 30 minutter ved -60°c 20 ml af en vandig opløsning af 1,01 g "Oxone". Den fremkomne suspension omrøres i 30 35 minutter ved -60°C og derefter i 16 timer ved -20°C. Der tilsættes derpå 0,2 g "Oxone" opløst i 5 ml vand, hvorefter DK 169681 B1 17 der omrøres i 30 minutter ved t20'C. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml vand, der tilsættes 0,5 g "NORIT® SX ULTRA"-sort, omrøres i 15 minutter, filtreres på "Celite®" og skylles derefter med 3 gange 5 ml vand. Den vandige fase 5 ekstraheres med 3 gange 50 ml ethylacetat, indstilles til en pH-værdi på 7 ved tilsætning af fast natriumhydrogencar-bonat, mættes med natriumchlorid og vaskes med 3 gange 50 ml dichlormethan.

De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsul-10 fat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Der fås på denne måde et hvidt marengsagtigt stof, som omrøres i 20 ml diethylether. Det fremkomne faste stof frafiltreres og tørres under formindsket tryk (270 Pa) ved 20eC, hvorved der fås 1,5 g 26-[l-diethyl-15 amino-(S)-propyl]-sulfinylpristinamycin IIB i form af et hvidligt fast stof (isomer A2: 90%, isomer A^: 5%), der smelter nær 130°c, og som har de samme NMR-karakteristika som produktet fremstillet ifølge eksempel 5 nedenfor.

26-[l-diethylamino-2(S)propyl]-thiopristinamycin IIB 20 (isomer A) kan fremstilles på følgende måde.

Til 10,5 g pristinamycin IIA opløst i 200 ml af en blanding af methylenchlorid og methanol i volumenforholdet 50:50 sættes ved -20°C under nitrogen 3,2 g 1-diethylamino--2(S)-propanthiol. Efter 70 timers omrøring ved -20°c kon-25 centreres reaktionsblandingen til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, hvorefter der optages med 100 ml ethylacetat. Den fremkomne opløsning vaskes med 100 ml af en 0,2N vandig opløsning af kaliumhydrogensulfat. Den vandige fase dekanteres og vaskes med 3 gange 100 ml ethylacetat.

30 Den organiske fase vaskes med 50 ml destilleret vand, hvorefter de vandige faser forenes, indstilles til en pH-værdi på 7 ved tilsætning af 2 g fast natriumhydrogencarbonat og vaskes med først 100 ml og derefter 2 gange 50 ml dichlormethan. De sidstnævnte organiske faser forenes, tørres over 35 natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Det fremkomne faste DK 169681 B1 18 stof omrøres i 150 ml ethylether, hvorefter der filtreres og skylles med 3 gange 10 ml ether. Der fås på denne måde 9,2 g af et beige fast stof, som omkrystalliseres fra 20 ml acetonitril. Efter filtrering og tørring ved 20°C under 5 formindsket tryk (270 Pa) fås 2,3 g 26-[l-diethylamino-2(S)--propyl]-thiopristinamycin IIB (isomer A) i form af hvide krystaller, der smelter nær 128“C.

NMR-Spektrum: 1,04 (t, -N(CH2CH3)2) 10 1,39 (d, \ h 15 1,73 (S, -CH3 i 33) 1,90 og 2,13 (2mt, ]>CH2 i 25) 2,4-2,7 (mt, -CH2-N(CH2CH3)2) 2,78 (mt, H i 4) 2,93 og 3,12 (2dd, ^CE2 i 15) 20 3,02 (mt, -S-CH-) ch3 3,55 (mt, H i 26) 3/84 (s, ^:CH2 i 17) 4,81 (s bred, H i 27) 25 4,49 (d, H i 13) 6,15 (d, H i 11) 6,30 (m, ^>NH i 8) 6,53 (dd, H i 5) 8,13 (s, H i 20) 30 l-Diethylamino-2(S)-propanthiol kan fremstilles på følgende måde.

Til en suspension af 42,6 g lithiumaluminiumhydrid i 1500 ml ethyl ether sættes dråbevis i løbet af 1 time og 20 35 minutter 171 g N,N-diethyl-2-mercapto-(S) -propionamid opløst i 500 ml ethylether. Reaktionsblandingen holdes derpå under DK 169681 B1 19 tilbagesvaling i 2 timer og 30 minutter, hvorefter den afkøles til en temperatur nær 0°C. Der tilsættes derpå 49,8 ml destilleret vand på en sådan måde, at blandingens temperatur ikke overskrider 20°C, og derefter 36,6 ml 5N natriumhydro-5 xidopløsning og 166 ml destilleret vand. Reaktionsblandingen filtreres, og filtratets pH-værdi indstilles til 8 ved tilsætning af 70 ml eddikesyre. Den fremkomne blanding filtreres på ny, og filtratet tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) 10 ved en temperatur nær 30°C. Der fås en gul olie, som renses ved destillation under formindsket tryk (1,3 kPa). Der fås på denne måde 100 g l-diethylamino-2 (S) -propanthiol i form af en farveløs olie med et kogepunkt ved 1,3 kPa på 55-56°C.

20 [a]^ = +39,6° (c = 5,6, CH30H).

15 N,N-Diethyl-2-mercapto-(S)-propionamid kan fremstilles på følgende måde.

Til 1100 ml af en 5N natriumhydroxidopløsning, der holdes ved 20°c, sættes i løbet af 30 minutter 223 g N,N--diethyl-2-acetylthio-(S)-propionamid i 1000 ml ethylether.

20 Reaktionsblandingen omrøres i 20 timer ved en temperatur nær 20°C. Den vandige fase fraskilles ved dekantering og vaskes med 3 gange 250 ml ethylether. pH-Værdien af den vandige fase indstilles derpå til 5 ved langsom tilsætning af 280 ml eddikesyre. Den fremkomne blanding ekstraheres 25 med 500 ml og derefter 2 gange 250 ml dichlormethan, og de forenede organiske faser tørres over natriumsulfat i nærværelse af carbonsort, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°c.

Der fås på denne måde 71,7 g N,N-diethyl-2-mercapto-(S)-30 -propionamid i form af en violet olie ([α]β = +20,7° (c = 3. CH30H)).

N, N-diethyl-2 -acetylthio- (S) -propionamid kan fremstilles på følgende måde.

Til en suspension af 16 g af kaliumsaltet af thioled-35 dikesyre i 70 ml ethanol sættes 20 g N,N-diethyl-2-chlor--(R)-propionamid opløst i 30 ml ethanal. Reaktionsblandingen DK 169681 B1 20 opvarmes derpå til en temperatur nær 55°C i 2 timer, hvorefter den koncenteres til tørhed under formindsket tryk (130 Pa) ved en temperatur nær 60°C. Den fremkomne remanens udrives med 300 ml dichlormethan, hvorefter den vaskes med 200 5 ml destilleret vand. Den organiske fase dekanteres, tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°c.

Den fremkomne remanens destilleres under formindsket tryk (17 Pa) . Der fås på denne måde 22 g N,N-diethyl-2-acetylthio-10 -(S)-propionamid i form af en svagt gul olie med et koge- punkt ved 17 Pa på 105-107eC. [a]£ = -169° (c = 10, CHC13).

N,N-diethyl-2-chlor-(R)-propionamid kan fremstilles på følgende måde.

Til en opløsning, der holdes ved 20°C, af 87,7 g 2-15 chlor-(R)-propionylchlorid i 600 ml chloroform sættes 153 g diethylamin i løbet af 1 time. Reaktionsblandingen vaskes med 500 ml destilleret vand, 3 gange 500 ml IN saltsyre og derefter 500 ml destilleret vand. Den organiske fase tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed 20 under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°c.

Den fremkomne remanens destilleres under formindsket tryk (17 Pa). Der fås på denne måde 43 g N,N-diethyl-2-chlor-- (R)-propionamid i form af en farveløs olie med et kogepunkt ved 17 Pa på 75-80eC. [a]p° = -43,3° (c = 10; CHC13).

25

Eksempel 5

Til en suspension af 63 g pristinamycin 1¾ i 630 ml methanol sættes under nitrogen ved -38°C i løbet af 30 minutter 17,6 g l-diethylamino-2(S)-propanthiol. Efter 20 timers 30 omrøring tilsættes der ved -38°C 150 ml destilleret vand og derefter i løbet af 30 minutter 410 ml af en vandig opløsning af 33,6 g "Oxone". Den fremkomne suspension omrøres i l time ved -38°C, der tilsættes 1,2 g natriumthiosulfat, filtreres ved 20° C på en glas fritte og vaskes derpå med 3 gange 35 200 ml destilleret vand. Der sættes 20 g "NORIT® SX ULTRA"- -sort til den vandige fase, omrøres i 30 minutter og filtre- DK 169681 Bl 21 res på "Celite®", og filtratet vaskes med 3 gange 200 ml destilleret vand. Opløsningen indstilles til en pH-værdi på 7 med 15 g fast natriumhydrogencarbonat, hvorefter den vaskes med 3 gange 500 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, 5 tørres"over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Der fås 55 g af et beige marengsagtigt stof, som omrøres i 500 ml ethylether. Efter filtrering, vaskning med 3 gange 50 ml ethylether og tørring under formindsket tryk (270 Pa) ved 10 20°C fås 46,6 g af et hvidt fast stof, som opløses i 150 ml af en blanding af dichlormethan og methanol i volumenforholdet 98:2, hvorefter der tilsættes 4 ml eddikesyre. Denne opløsning renses ved flashchromatografi, idet der elueres med en blanding af dichlormethan og methanol i volumenforhol-15 det 98:2 og opsamles fraktioner på 100 ml. Efter koncentrering under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 36 g af et fast stof, som opløses i 400 ml destilleret vand tilsat 6,5 g kaliumhydrogensulfat. Opløsningen vaskes med 4 gange 500 ml ethylacetat, indstilles til en pH-værdi på 7 ved 20 tilsætning af 5 g fast natr iumhydrogencarbonat og ekstraheres derefter med først 200 ml og derefter 2 gange 150 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°c, hvorved der fås 33,8 g af et beige 25 marengsagtigt stof, som omrøres i 300 ml ethylether. Efter filtrering isoleres 29,3 g 26-[i-diethylamino-2-(S)-propyl]--sulfinylpristinamycin lig (isomer A2) i form af et bleggult pulver, der smelter nær 140°C.

NMR-Spektrum (isomer A2): 30 1,05 (t, -N(CH2-CH3)2) I .¾ , 1,27 (d, OS jx ) X 1»«W2

H

35 1,74 (s, -CH3 i 33) 2,10 (mt, IH af ^>CH2 i 25) DK 169681 B1 22 2,45-2,70 (mt, IH af^CH2 i 25, IH af >ch2-n(CH2CH3) 2, -N(CH2CH2) 2,80 (mt, H i 4) 2,88 (mt, IH af I>CH2-N(CH2CH3) 2) 5 '2,90 og 3,15 (2dd, 2^CH2 i 15) 3,06 (mt, -S-CH-) 4-1 0 ch3 3,41 (mt, Η i 26) 3,83 (S, ^CH2 i 17) 10 4,77 (s bred, Η i 27) 5,50 (d, H i 13) 6,20 (d, H i 11) 6,55 (mt,^NH i 8) 6,63 (dd, H i 5) 15 8,11 (s, H i 20)

Eksempel 6

Til 50 g 26-(2-diethylaminoethyl)-thiopristinamycin lig opløst i 200 ml dichlormethan og 250 ml destilleret 20 vand sættes ved 0°C i løbet af 20 minutter 30,7 g "Oxone" opløst i 140 ml destilleret vand. Efter 10 minutters omrøring dekanteres den organiske fase, og den vandige fase vaskes med 100 ml dichlormethan og indstilles derefter til en pH--værdi på 7 ved tilsætning af 120 ml mættet natriumhydro-25 gencarbonatopløsning. Den vandige fase vaskes med 5 gange 100 ml dichlormethan, idet pH-værdien indstilles til 7 ved hver vaskning ved tilsætning af natriumhydrogencarbonat. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 30 kPa) ved 40eC der fås på denne måde 31 g 26-(2-diethylamino-ethyl)-sulfinylpristinamycin lig (isomer A2: 85%, isomer 10%) i form af et lyst beige pulver, der har samme karakteristika som produktet fremstillet ifølge eksempel 1.

35 Eksempel 7

Til 2 g 26-[l-diethylamino-2(S)-propyl]-thiopristi- DK 169681 B1 23 namycin lig (isomer A) opløst i 30 ml ethanol og 20 ml vand sættes langsomt ved 0eC 0,08 ml koncentreret svovlsyre og derefter 0,9 g "Oxone" opløst i 10 ml destilleret vand. Den fremkomne opløsning omrøres i 4 timer ved 20°C. Der tilsættes 5 derpå fast natriumhydrogencarbonat til en pH-værdi på 4, og omrøringen fortsættes i 2 timer ved 20°C. Der tilsættes derefter 25 ml destilleret vand og 2 g "NORIT® SX ULTRA"--sort. Blandingen filtreres på "Celite®", og der skylles med 20 ml dichlormethan, hvorefter pH-værdien indstilles til 7 10 med fast natriumhydrogencarbonat.

Den vandige fase dekanteres og vaskes med 2 gange 25 ml dichlormethan. De organiske faser tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 40“C.

15 Der fås på denne måde 1,6 g af et beige fast stof indeholdende 80% 26-[l-diethylamino-2(S)-propyl]-sulfinylpri-stinamycin lig (isomer A2), 10% isomer A^ og 10% udgangs--sulfid, der har de samme karakteristika som produktet beskrevet i eksempel 4.

20

Eksempel 8

Til 5 g 26-[l-diethylamino-2(S)-propyl]-thiopristi-namycin IIB (isomer A) opløst i 20 ml destilleret vand og 90 ml methanol, der holdes ved -5-30°C, sættes 0,24 ml kon-25 centreret svovlsyre og derefter langsomt 2,7 g "Oxone" opløst i 10 ml destilleret vand. Den fremkomne uklare opløsning omrøres ved -30°C i 1 time. Der tilsættes derefter 0,6 g "NORIT® SX ULTRA"-sort, hvorefter blandingen filtreres på "Celite®". Filtratet indstilles til en pH-værdi på 7 ved 30 tilsætning af fast natriumhydrogencarbonat og vaskes derefter med 3 gange 50 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C.

Det fremkomne faste stof omrøres i en blanding af 20 35 ml ethylacetat og 70 ml ethylether, hvorefter der filtreres og vaskes med 50 ml ethylether. Der fås på denne 4,5 g af DK 169681 B1 24 et lyst beige fast stof, der renses ved flashchromatografi, idet der elueres med en blanding af ethylacetat og methanol i volumenforholdet 90:10 og opsamles fraktioner på 15 ml. Efter koncentrering til tørhed af fraktionerne 47-54 under 5 formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C fås 1,7 g 26-[l-diethyl-amino-2-(S)-propyl]-sulfinylpristinamycin lig (isomer A2), der indeholder 10% udgangs-sulfid og har de samme karakteristika som produktet beskrevet i eksempel 4.

10 Eksempel 9

Til 25,5 g 26-[2-diethylamino-(2S)-propyl]-thiopristi-namycin lig opløst i 350 ml ethanol sættes ved -30°C 200 ml destilleret vand og derefter langsomt 15,1 g "Oxone" opløst i 70 ml destilleret vand. Efter omrøring i 1 time og 30 mi-15 nutter ved -30"C tilsættes 3,7 g natriumthiosulfat opløst i 20 ml vand. Reaktionsblandingen udhældes derefter på 400 ml destilleret vand og 200 ml dichlormethan, hvorefter pH-værdi-en indstilles til 7 med natriumhydrogencarbonat. Den organiske fase dekanteres, og den vandige fase vaskes med 3 20 gange 200 ml dichlormethan. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Der fås på denne måde 24 g af et lysegult fast stof, som renses ved flash-chromatografi, idet der elueres med en blanding af 25 chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10. Efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30eC af fraktionerne 23-28 (volumen 50 ml) fås et gult marengsagt igt stof, som omrøres i 100 ml ethylether, hvorefter der filtreres og tørres under formindsket tryk (90 Pa) ved 30 20°C. Der fås på denne måde 11,3 g 26-[2-diethylamino-(2S)- -propyl]-sulfinylpristinamycin IIB (isomer A2) i form af et lysegult pulver, der smelter nær 128"C.

NMR-Spektrum: 1 1 .N(CH5CH)„ 35 1,1 (mt, -CH2CH3 og S-CK^C 2 3 2 ) 1,77 (s, -CH3 i 33) / 1 *CS3 DK 169681 B1 25 2 (mt, IH af -CH2- i 25) CH2-CH3 2,30-2,7 (mt, IH af -CH2- i 25, -N ,

Nsca2-cH3 5 ” IH af -SO-CH2-) 2,97 (mt, IH af -SO-CH2-) 2,78 (mt,^ CH- i 4) 2,92 og 3,10 (2dd, -CH2- i 15) 3,13 (mt,^CH- i 26) 10 3,50 (mt,>N-CH-) 3,81 (s, -CH2- i 17) 4,77 (d,^CH- i 27) 5,52 (d, =CH i 13) 6,18 (d, =CH- i 11) 15 6,48 (mt,-NH- i 8) 6,57 (dd, =CH- i 5) 8,12 (S, =CH- i 20) 1 6- [ 2-Diethylamino- (2S) -propyl ] -thiopristinamycin IIB 20 (isomer A) kan fremstilles på følgende måde.

Til 31,5 g pristinamycin 1¾ opløst i 230 ml methanol og 70 ml chloroform, der er anbragt under nitrogenatmosfære, sættes ved -40°C 10 g 2-diethylamino-(S)-propanthiol opløst i 50 ml chloroform. Efter 4 dages omrøring ved 4-40°C kon-25 centreres blandingen til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 35“C, hvorefter det fremkomne faste stof omrøres i 500 ml ethylether, filtreres og på ny omrøres i 300 ml die-thylether. Efter filtrering tørres dét faste stof ved 90 Pa og 20°C, hvorefter det renses ved flashchromatografi, idet 30 der elueres med en blanding af chloroform og methanol i volumenforholdet 90:10 og opsamles fraktioner på 100 ml. Efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30eC af fraktionerne 18-30 fås 26,6 g 26-[2-diethyl--amino-(2S)-propyl]-thiopristinamycin IIB (isomer A) i form 35 af et lysegult fast stof, der smelter nær 110°C.

DK 169681 B1 26 NMR-Spektrum: H (CH2 CH3) 2 1,05 (mt, ch3-ch2- og -s-ch2-c ) VCH3 1,72 (s, -CH3 i 33) 5 "1,97-2,10 (mt, -CH2- i 25) ^CH2-CH3 2,50 (mt, ) ^cn2-CE3 2,60, 2,87 og 3,04 (mt, -S -CH2-CH ) 10 2,77 (mt, ^>CH- i 4) 2,9 og 3,10 (2dd, -CH2- i 15) 3,35 (mt,>CH- i 26) 3,82 (S, -CH2- i 17) 4,7 (d, ^CH- i 27) 15 5,47 (d, =CH- i 13) 6,15 (d, =CH- i 11) 6,46 (m, -NH- i 8) 6,54 (dd, =CH- i 5) 20 2-Diethylamino-(S)-propanthiol kan fremstilles på følgende måde.

Til 39 g 2-diethylamino-(S)-propylisothiouronium--dihydrochlorid i 140 ml diethylether sættes 59,4 ml 5N vandig natriumhydroxidopløsning. Efter 30 minutter omrøring 25 under nitrogenatmosfære dekanteres den vandige fase og vaskes med 3 gange 150 ml ethylether. De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C. Den fremkomne væske destilleres ved 78°C under et tryk på 2,7 kPa, 30 hvorved der fås 10,6 g 2-diethylamino-(S)-propanthiol i form af en fairveløs væske, der indeholder 6% 1-diethylamino--propanthiol. [a]^0 = +32 ± 0,6° (c = 0,943; ethanol).

2-Diethylamino- (S) -propylisothiouronium-dihydrochlorid kan fremstilles på følgende måde.

35 Til 18,2 g thiourinstof opløst i 80 ml N,N-dimethyl- formamid sættes ved 130°c en opløsning af 45 g 2-diethylami- DK 169681 B1 27 no-l-chlor-(S) -propan-hydrochlorid i 150 ml N,N-dimethy 1 formamid. Efter 5 minutter ved 130°C afkøles opløsningen. De fremkomne krystaller frafiltreres, vaskes med ethylether og tørres under formindsket tryk (90 Pa) ved 20'C. Der fås på 5 denne made 39 g 2-diethylamino-(S)-propylisothouronium-dihy-drochlorid i form af hvide krystaller, der smelter ved 209"C. [a]p° = -2,6" (c = 1; ethanol).

2-Diethylamino-l-chlor-(S) -propan-hydrochlorid kan fremstilles på følgende måde.

10 Til 110 ml thionylchlorid sættes ved 2"C 50 g 2-die- thylamino-(S)-propanol-hydrochlorid i små portioner. Den fremkomne opløsning opvarmes derefter til 60°c i 4 timer. Overskuddet af thionylchlorid fjernes ved destillation under formindsket tryk (90 kPa), hvorefter der sættes 250 ml ethyl-15 ether til den fremkomne remanens. Det fremkomne faste stof frafiltreres, skylles med 300 ml ethylether og omkrystalliseres derefter fra 150 ml methylisobutylketon. Efter filtrering og vaskning med ethylether fås 45,6 g 2-diethylamino- -1-chlor-(S)-propan-hydrochlorid i form af hvide krystaller, 20 20 der smelter ved 103"C. [a]D =0" (c = 0,7; ethanol).

2-Diethylamino-(S)-propanol-hydrochlorid kan fremstilles på følgende måde.

Til en suspension af 18,23 g lithiumaluminiumhydrid i 2000 ml tetrahydrofuran sættes i løbet af 20 minutter 25 48,66 g L-acetyl-N-2-ethylamino-(S)-propanol opløst i 300 ml tetrahydrofuran. Reaktionsblandingen holder derpå i 4 timer under tilbagesvaling, hvorefter den afkøles til O'C.

Der tilsættes langsomt 22 ml destilleret vand, derefter 16 ml 5N vandig natriumhydroxidopløsning og derpå 72 ml destil-30 leret vand. Efter 1 times omrøring ved 20°C filtreres blandingen på "Celite®". Filtratet koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30"C, optages_ med 300 ml dichlormethan, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres derpå til tørhed under formindsket tryk (2,7 35 kPa) ved 30°C, hvorved der fås 42,45 g af en lysegul væske, som destilleres under formindsket tryk. Der fås på denne DK 169681 B1 28 måde 26,56 g 2-diethylamino-(S)-propanol i form af en farveløs væske med et kogepunkt ved 1 kPa på 55,5°C.

Der fås 31,41 g 2-diethylamino-(S)-propanol-hydrochlo-rid i form af et hvidt fast stof, der smelter ved 98°C, 5 efter frafiltrering af de fremkomne krystaller og tilsætning af 40,5 ml af en 4,94N opløsning af hydrogenchlorid i ethyl-ether til det ovennævnte produkt opløst i 136 ml acetone.

[a]p° = +20,7“ (c = 1; ethanol).

N-Acetyl-N-2-ethylamino-(S)-propanol kan fremstilles 10 på følgende måde.

Til 9,15 g N-2-ethylamino-(S)-propanol opløst i 100 ml dichlormethan sættes 13,7 ml triethylamin ved 0°C, hvorefter der i løbet af 45 minutter tilsættes 7,1 ml acetylchlo-rid. Efter endt tilsætning får temperaturen lov at stige 15 til 20°C. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml vand, indstilles til en pH-værdi på 9 ved tilsætning af natriumcar-bonat og vaskes derefter med 2 gange 200 ml dichlormethan.

De organiske faser forenes, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk 20 (2,7 kPa) ved 30°C, hvorved der fås 9,54 g af et gul væske, som destilleres ved 108 ± 2"C under formindsket tryk (26,3 Pa). Der fås på denne måde 6 g af en farveløs væske, der indeholder ca. 80% N-acetyl-N-2-ethylamino-(S) -propanol og 20% af det tilsvarende diacetylerede derivat (anvendes som 25 sådan ved den efterfølgende syntese).

N-2-Ethylamino-(S)-propanol kan fremstilles på følgende måde.

Til en suspension af 81 g lithiumaluminiumhydrid i 4000 ml tetrahydrofuran sættes ved 0eC 227 g 2-acetylamino-30 -(S)-propionsyre-ethylester i 800 ml tetrahydrofuran i løbet af 45 minutter. Efter endt tilsætning får temperaturen lov at stige til 20°C, hvorefter blandingen opvarmes til tilbagesvaling i 5 timer. Efter afkøling til 0°C tilsættes langsomt 97 ml destilleret vand, derefter 72 ml 5N vandig natri-35 umhydroxidopløsning og til slut 320 ml destilleret vand. Blandingen filtreres ved 20°C på "Celite®". Filtratet kon- DK 169681 B1 29 centreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, optages med 500 ml dichlormethan, tørres over magnesiumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C, hvorved der fås 143 g 5 af en gul væske. Efter destillation under formindsket tryk (460 Pa) ved 57°C fås 90,8 g N-2-ethylamino-(S)-propanol i form af en farveløs olie.

[α]£ = +45,4° (c = 1,48? ethanol).

2-Acetylamino-propionsyre-ethylester kan fremstilles 10 som beskrevet af J.P. WOLFF III et al., Biochemistry 2., 493 (1963).

Eksempel 10 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksem-15 pel 9, men gås ud fra 9,1 g 26-[N-methyl-N-cyclohexyl-l- -amino-2-(S)-propyl]-thio-pristinamycin IIB (isomer A) og 5,1 g "Oxone", fås 8,3 g af et beigefarvet fast stof, som renses ved flashchromatografi, idet der elueres med en blanding af ethylacetat og methanol i volumenforholdet 90:10 og 20 opsamles fraktioner på 20 ml. Efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C af fraktionerne 32-70 og omrøring af det fremkomne faste stof i ethylether fås 3,4 g 26-[N-methyl-N-cyclohexyl-l-amino-2-(S)-propyl]-sulfinyl-pristinamycin IIB (isomer A2) i form af et bleggult 25 fast stof, der smelter nær 140°C.

NMR-Spektrum (400 MHz) 1-1,3 og 1,5-1,85 (2mt, CH2 af cyclohexyl) 30 1>27 <d' οΑ/“2ΐ“0 ’ ! C-3 1,76 (s, -CH3 i 33) 2,09 og 2,55 (2mt, ^CH2 i 25) 35 2,31 (s, ^N-CH3) 2,37 (mt, CH cyclohexyl) DK 169681 B1 30 2,55 og 2,90 (2dd, ^N-CH2-) 2.78 (mt, H i 4) 2,92 og 3,16 (2dd, CH2 i 15) 3 (mt, -S-CHcC) 5 “ 0 3,41 (d bred, H i 26) 3,83 (s, ^=-CH2 i 17) 4.78 (s, H i 27) 5,48 (d, H i 13) 10 6,18 (d, H i 11) 6,53 (dd, NH i 8) 6,60 (dd, H i 5) 8,10 (S, H i 20) 15 26- [N-methyl-N-cyclohexyl-l-amino-2- (S) -propyl]-thio- -pristinamycin lig (isomer A) , kan fremstilles på følgende måde.

På samme måde som beskrevet i eksempel 4 for fremstillingen af 26-[l-diethylamino-2-(S) -propyl]-thio-pristinamycin 20 lig (isomer A), men ved at arbejde i en blanding af methanol og chloroform i volumenforholdet 70:30 og gå ud fra 15 g pristinamycin IIÅ og 5,9 g N-methyl-N-cyclohexyl-l-amino-2--(S)-propanthiol, fås der efter 48 timer ved -30°C 10,6 g 26- [N-methyl-N-cyclohexyl-l-amino-2- (S) -propyl] -thio-pristi-25 namycin lig (isomer A) i form af et beigefarvet fast stof, der smelter nær 160°C.

NMR-Spektrum: 1-1,35 (mt, ^CH2 af cyclohexyl) 1,55-1,85 (mt, ^CH2 af cyclohexyl) 30 1,36 (d, -S-CH-NcC ) %3 1,72 (s, -CH3 i 33) 1,90 og 2,10 (2 mt,^CH2 i 25) 2,31 (s, ^iN-CH3) 35 2,40 (mt, -^r-CH af cyclohexyl) 2,5-2,6 (2dd, ]>N-CH2“) DK 169681 B1 31 2,77 (mt, -H i 4) 2,92 og 3,13 (2dd, ^CH2 i 15) 3,05 (mt, -SCH-) 3,56 (mt, -H~i 26) 5 "3,82 (s, ^CH2 i 17) 4,82 (s bred, -H i 27) 5.48 (d, -H i 13) 6,17 (d, -H i 11) 6.48 (mt, ^NH i 8) 10 6,54 (dd, -H i 5) 8,13 (s, -H i 20) N-Methyl-N-cyclohexyl-l-amino-2- (S) -propanthiol kan fremstilles på følgende måde.

15 Til en suspension af 15,7 g lithiumaluminiumhydrid i 850 ml ethylether sættes dråbevis i løbet af 1 time og 20 minutter 79,34 g N-methyl-N-cyclohexyl-2-mercapto-(S)-prop-ionamid opløst i 200 ml ethylether. Reaktionsblandingen holdes derefter i 2 timer under tilbagesvaling, hvorefter 20 den afkøles til en temperatur nær 0°C. Der tilsættes derefter 45 ml destilleret vand på en sådan måde, at blandingens temperatur ikke overskrider 20°C, og derefter 45 ml 5N natriumhydroxidopløsning og 150 ml destilleret vand. Reaktionsblandingens pH-værdi indstilles til 8 ved tilsætning af 40 25 ml eddikesyre. Den fremkomne blanding filtreres, filtratet dekanteres, og den vandige fase vaskes med 4 gange 400 ml ethylether. Etherfaserne forenes, tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30eC. Der fås en gul olie, 30 som renses ved destillation under formindsket tryk (1,3 kPa). Der fås på denne måde 37 g N-methyl-N-cyclohexyl-1--amino-2-(S)-propanthiol i form af en farveløs olie med et kogepunkt ved 0,2 kPa på 110-113°C.

[a]p° = +27,2° (c = 2,4, CHC13).

35 N-Methyl-N-cyclohexyl-2-mercapto-(S)-propionamid kan fremstilles på følgende måde.

DK 169681 B1 32

Til en opløsning af 89,76 g N-methyl-N-cyclohexyl-2--acetylthio-(S)-propionamid i 85 ml methanol sættes ved 13° C under nitrogenatmosfære 80 ml ION natriumhydroxidopløsning. Efter 3 timers omrøring ved 40°C koncentreres blandin-5 gen tiT tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa), hvorefter den opløses i 200 ml destilleret vand og vaskes med 2 gange 200 ml ethylether. Efter dekantering indstilles pH-værdien af den vandige fase til 5 ved langsom tilsætning af 30 ml eddikesyre. Den fremkomne blanding ekstraheres med 3 gange 10 100 ml chloroform. De forenede organiske faser tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°C. Der fås på denne måde 80,54 g N-methyl-N-cyclohexyl-2-mercapto- -(S)-propionamid i form af en olie.

20 15 [ct]£u = +24,5° (c = 1,1, CHC13).

N-Methyl-N-cyclohexyl-2-acetylthio- (S) -propionamid kan fremstilles på følgende måde.

Til en suspension af 56,2 g af kaliumsaltet af thiol-eddikesyre i 200 ml ethanol sættes 80 g N-methyl-N-cyclohe-20 xyl-2-chlor-(R)-propionamid opløst i 60 ml ethanol. Reaktionsblandingen opvarmes derefter til en temperatur nær 69°C i 45 minutter, hvorefter den koncentreres til tørhed under formindsket tryk (130 Pa) ved 40°c. Den fremkomne remanens udrives med 300 ml dichlormethan, filtreres og 25 vaskes derefter med 2 gange 300 ml destilleret vand, 300 ml 10%'s vandig hydrogencarbonatopløsning og 300 ml destilleret vand. Den organiske fase dekanteres, tørres over natriumsulfat, filtreres og koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°C. Der fås på denne 30 måde 90,6 g N-methyl-N-cyclohexyl-2-acetylthio-(S)-propionamid i form af en orangegul olie.

[a]£° - -97,8° (c = 1, CHCI3).

N-Methyl-N-cyclohexyl-2-chlor-(R) -propionamid kan fremstilles på følgende måde.

35 Til en opløsning, der holdes mellem -ί-4 og +2°C, af 70,7 g 2-chlor-(R)-propionylchlorid i 320 ml chloroform DK 169681 Bl 33 sættes 294 ml N-methyl-N-cyclohexylamin i løbet af 1 time. Reaktionsblandingen vaskes med 250 ml destilleret vand, 3 gange 250 ml IN saltsyre og 4 gange 250 ml destilleret vand.

Den organiske fase tørres over natriumsulfat, filtreres og 5 koncentreres til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved en temperatur nær 30°C. Den fremkomne remanens destilleres under formindsket tryk (135 Pa). Der fås på denne måde 80,46 g N-methyl-N-cyclohexyl-2-chlor-(R)-propionamid i form af en farveløs olie med et kogepunkt ved 0,13 kPa på 10 125°C.

20 [ar]* = -34° (uden opløsningsmiddel).

Eksempel 11 Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksem-15 pel 9, men gås ud fra 14,4 g 26-[l-diisopropylamino-2-(S)--propyl]-thio-pristinamycin IIB (isomer A) og 8,2 g "Oxone", fås 14,1 g af et beigefarvet fast stof, som renses ved flash-chromatografi, idet der elueres med en blanding af ethylace-tat og methanol i volumenforholdet 90:10 og opsamles fraktio-20 ner på 20 ml. Efter koncentrering til tørhed under formindsket tryk (2,7 kPa) ved 30°C af fraktionerne 62-81 fås et gult fast stof, som omrøres i ethylether. Efter filtrering og tørring ved 20°C under formindsket tryk (270 kPa) fås 9,7 g 26-[l-diisopropylamino-2-(S)-propyl]-sulfinyl-pristi-25 namycin IIB (isomer A2) i form af et gult fast stof, som smelter nær 120°C.

NMR-Spektrum: 1 (mt, -CH3 isopropyl) 1,24 (d, ^S-CH-Ci^-N^C) 30 cf CH3 1,74 (s, -CH3 i 33) 2 og 2,53 (2mt,^CH2 i 25) 2,67 og 2,84 (2mt, ^N-CH2-) 2,77 (mt, -H i 4) 35 2,87 (mt, -S-CH^C) 0 DK 169681 B1 34 2,85-3,05 (mt, -N(-CH=C)2 + 1H af i 15) 3,15 (dd, IH af ^CH2 i 15) 3,37 (d bred, -H i 26) 3,81 (s, ^.CH2 i 17) 5 ~~4,65 (s bred, -H i 27) 5,51 (d, -H i 13) 6,20 (d, -H i 11) 6,64 (dd + mt, -H i 5 og ^NH i 8) 8,11 (s, -H i 20) 10 2 6- [ l-diisopropylamino-2- (S) -propyl ] -thio-pristinamy-cin Hg (isomer A) kan fremstilles på følgende måde.

Når der gås frem på samme måde som beskrevet i eksempel 4 for fremstillingen af 26-[l-diethylamino-2-(S)-propyl]-15 -thio-pristinamycin IIB (isomer A), men arbejdes i en blanding af methanol og chloroform i volumenforholdet 80:20 og gås ud fra 20 g pristinamycin IIÅ og 8,88 g l-diisopropylamino-2-(S)-propanthiol, fås der efter 48 timer ved -30* C et lyst beigefarvet fast stof, som omrøres i 150 ml af en blan-20 ding af ethyl ether og pentan i volumenforholdet 50:50. Efter filtrering og tørring ved 20°C under formindsket tryk (270 Pa) fås 16,8 g 26-[l-diisopropylamino-2-(S)-propyl]-thio--pristinamycin IIB (isomer A) i form af et lyst beigef arvet fast stof, der smelter nær 140*0.

25 NMR-Spektrum (400 MHz) 1 (mt, -CH3 isopropyl) 1,39 (d, -S-CH-CH2-lf/^N' ) 30 CH3 1,75 (s, -CH3 i 33) 1,93 og 2,15 (2mt, ^ CH2 i 25) 2,41 og 2,68 (2dd, ^ N-CH2-) 35 2,82 (mt, -H i 4) 2,96 (mt, -S-CHCC) DK 169681 B1 35 3 og 3,15 (2dd, ^CH2 i 15) 3,05 (mt, -N(-CH<; )2) 3.57 (mt, -H i 26) 3,88 (S, 2^CH2 i 17) 5 '4,88 (s bred, -H i 27) 5.57 (d, -H i 13) 6,17 (d, -H i 11) 6,35 (mt, 2>>NH i 8) 6,56 (dd, -H i 5) 10 8,15 (s, -H i 20) l-Diisopropylamino-2(S)-propanthiol kan fremstilles på følgende måde.

l-Diisopropylamino-2(S)-propanthiol kan fremstilles 15 på samme måde som beskrevet i eksempel 10 for fremstillingen af N-methyl-N-cyclohexyl-l-amino-2(S)-propanthol, idet der gås ud fra 48 g N,N-diisopropyl-2-mercapto-(S)-propionamid og 10,16 g lithiumaluminiumhydrid. Efter destillation under formindsket tryk (225 Pa) fås 24,1 g l-diisopropylamino- 20 -2 (S)-propanthiol i form af en farveløs olie med et kogepunkt ved 235 Pa på 69°C.

20 [a]p = +24,2° (c = 1,3, CHC13).

N,N-diisopropyl-2-mercapto-(S)-propionamid kan fremstilles på samme måde som beskrevet i eksempel 10 for frem-25 stillingen af N-methyl-N-cyclohexyl-2-mercapto-(S)-propionamid, idet der gås ud fra 61,62 g N, N-diisopropyl-2 -acetyl-thio-(S)-propionamid og 55 ml ION natriumhydroxidopløsning.

Der fås på denne måde 48 g N,N-diisopropyl-2-mercapto-(S) - 20 propionamid i form af en rød olie ([a]D = +5,6° [c = 1, 30 CHCI3]), som anvendes som sådan ved den efterfølgende omsætning .

N,N-diisopropyl-2-acetylthio-(S)-propionamid kan fremstilles på samme måde som beskrevet i eksempel 10 for fremstillingen af N-methyl-N-cyclohexyl-2-acetylthio-(S)-35 -propionamid, idet der gås ud fra 46,8 g af kaliumsaltet af thioleddikesyre og 65,01 g N,N-diisopropyl-2-chlor-(R)-pro- 36 DK 169681 B1 pionamid. Der fås på denne måde 70,53 g N,N-diisopropyl-2- -acetylthio-(S)-propionamid i form af gul olie.

2Ω [<*]£ = -91,7° (c = 2, CHC13).

N,N-diisopropyl-2-chlor-(R) -propionamid kan fremstil-5 les på'"samme måde som beskrevet i eksempel 10 for fremstillingen af N-methyl-N-cyclohexyl-2-chlor-(R)-propionamid, idet der gås ud fra 73,6 g 2-chlor-(R)-propionylchlorid i 350 ml chloroform og 166 ml diisopropylamin. Der fås på denne måde 64,5 g N,N-diisopropyl-2-chlor-(R)-propionamid i 10 form af en farveløs olie med et kogepunkt ved 18 Pa på 71°C.

20 [a]D = -73° (uden opløsningsmiddel).

Sammen 1 icminasforsøg: 15 Udbytterne i eksempel 1-4 og 6-9 er sammenlignet med udbyttet opnået i eksempel 3 i EP-A1-191.662. Produktet ifølge dette eksempel er nemlig det eneste, hvor renheden af slutproduktet er sammenlignelig med renheden af produkterne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen.

20 Resultaterne fremgår af tabellen nedenfor.

Det fremgår af sammenligningen, at i næsten alle tilfælde er udbytterne af isomer og A2 samt udbytterne af isomer A2 overlegne til meget overlegne i forhold til de udbytter, der kan opnås ved fremgangsmåden ifølge EP-skriftet 25 (Der er ikke gennemført en sammenligning for eksempel 5* s vedkommende, idet der ved den dér anvendte fremgangsmåde gås direkte ud fra pristinamycin 11¾, uden isolering af det intermediære sulfid).

Ud over den lette gennemførelse har fremgangsmåden 30 ifølge opfindelsen således den fordel, at udbytterne er forøget betydeligt, både af isomer + A2 og af isomer A2 alene. Den har også den betydning, at den retter omsætningen mod dannelse af isomer A2.

35 DK 169681 B1 37

Eksempel Udgangsforbindelse Fremstillet for^ Udbytte nr. bindelse ( g ) ( g ) % 1 ~ 13 g 9,9 g 70,5 % (isomer A) (isomer A2 B5 % (A·) + A2) isomer Αί 10 «} 61,3 % (A2) 2 3 g 2,4 g 72,5 % (isomer A) (isomer A2 88 % (Aj ♦ A2) isomer A1 6 %) 67.9 % (A2) 3 3,2 g 2,2 g 61,7 % (A2) (isomer A (isomer A2 80 %) 4 2 g 1,5 g 70,2 % (isomer A) (isomer A2 90 % (A-j + A2) • · isomer *1 10 %) 66.5 % (A2) 6 50 g 31 g 57,5 % (isomer A2 85 % (A·] + A2) isomer Al 10 %) 51.5 % (A2) 7 2 g 1,6 g 69,7 % (isomer A) (isomer A2 90 % (Αί * A2) isomer Ai 10%) 61.9 % (A2) 8 6 g 1,7 g 24,9 % (A2) (isomer A) (isomer ^2 90%) 9 25,5 g 11,3 g 43,4 % (A2) (isomer *2) DK 169681 B1 38

Eksempel Udgangsforbindelse Fremstillet for- Udbytte nr* bindelse ( 9 ) ( 9 ) % 10 9,1 g 3,4 g 35,7 % (λ2) (isomer A) (isomer A2) 11 14,4 g 9,7 g 63,4 % (A2) (isomer A) (isomer A2) EP 161 662 53,2 g 10,9 g ^ 32,2 % (isomer A ^ 75 %) (isomer A2 60 % (A) * A2) eksempel 3 isomer Ai 15 %) ·♦ 5 g 28,2 % (isomer A2) (A2 i alt)

Claims

DK 169681 B1 39 Patentkrav. Fremgangsmåde til fremstilling af pristinamycin Ilg--derivater med den almene formel I 5 0 II ^ νΐΊΕτ· ίο CH, R-SO-^S/ ° 15 hvori R betyder a) en nitrogenholdig heterocyclylgruppe med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder et eller flere andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen og svovl i form af sulf oxid eller sul fon, og som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, 20 eller b) en alkylkæde med 2-4 carbonatomer, der er substitueret med en eller to grupper valgt blandt phenyl, cycloalkylamino eller N-alkyl-N-cycloalkylamino indeholdende 3-6 ringled, alkylamino, dialkylamino og dialkylcarbamoyloxy (idet alkyl- 25 delene i de to sidstnævnte grupper eventuelt sammen med nitrogenatomet, hvortil de er bundet, kan danne en mættet eller umættet heterocyclisk gruppe med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder et andet heteroatom valgt blandt nitrogen, oxygen og svovl i form af sulfoxid eller sulfon, og 30 som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe) eller c) en alkylkæde med 2-4 carbonatomer, der er substitueret med en eller flere nitrogenholdige heterocycliske grupper med 4-7 ringled, der eventuelt indeholder et eller to andre heteroatomer valgt blandt nitrogen, oxygen og svovl i form 35 af sulfoxid eller sulfon, og som eventuelt er substitueret med en alkylgruppe, idet de nævnte heterocycliske grupper 40 DK 169681 B1 er bundet til kæden, som bærer dem, via et carbonatom, eller d) en [ l-methyl-2 (S) -pyrrolidinyl ] -methylgruppe, idet mindst en af substituenterne, der bæres af den nævnte 5 alkylkæde, er en nitrogenholdig substituent, der kan danne salte, og idet de ovennævnte alkyl grupper er ligekædede eller forgrenede og indeholder 1-10 carbonatomer, med mindre der er anført andet, i form af deres isomere eller deres blandinger, eller deres additionssalte med syrer, kende-10 tegnet ved, at man ved hjælp af kaliummonopersulfat i form af tripelsaltet [2KHS05 · KHS04 · K2S04] oxiderer et pristinamycin IIB-derivat med den almene formel II hvori R har den ovenfor angivne betydning, bortset fra, at når R indeholder en svovlholdig heterocyclisk gruppe, kan 25 svovlatomet også foreligge i form af et sulfid eller et salt eller beskyttet derivat deraf, hvorefter det fremkomne produkt eventuelt adskilles i sine isomere, beskyttelsesgruppen i påkommende tilfælde fjernes, og det fremkomne produkt eventuelt omdannes til et additionssalt heraf med 30 en syre. 35