DK200301685A - Isoleret polypeptid med hæmatopoietiske biologiske egenskaber som naturligt forekommende hpG-CSF, DNA-sekvens kodende for denne, plasmider indeholdende sekvensen, hermed transformerede/transficerede værtsceller, - Google Patents

Description

PATENTKRAV 1. Isoleret polypeptid med de hæmatοροίetiske biologiske egenskaber for naturligt forekommende plu-ripotent granulocyt kolonistimulerende faktor (hpG-CSF), hvor polypeptidet har en aminosyresekvens valgt blandt den i Tabel VII angivne polypeptidsekvens og en hvilken som helst allelisk variant, et derivat, en sletningsanalog, substitutionsanalog eller additionsanalog deraf, kendetegnet ved at være ikke naturligt forekommende og være et produkt af proka-ryotisk eller eukaryotisk ekspression af en exogen DNA-sekvens. 2. Ikke naturligt forekommende polypeptid ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det kun består af den i Tabel VII angivne aminosyresekvens 1-174 . 3. Polypeptidanalog ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den exogene DNA-sekvens er en cDNA-sekvens. 4. Polypeptidanalog ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den exogene DNA-sekvens er en genomisk sekvens. 5. Polypeptidanalog ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den exogene DNA-sekvens bæres af et autonomt replikerende DNA-plasmid eller viral vektor . 6. Polypeptid ifølge krav 1, kendetegnet ved at være kovalent associeret med en påviselig markørsubstans, især en radioaktiv markør. 7. DNA-sekvens, der ved eksprimering i en prokaryotisk eller eukaryotisk værtscelle koder for et polypeptidprodukt, der besidder i det mindste en del af den primære struktur og de hæmatopoietiske biologiske egenskaber for naturligt forekommende pluripo-tent granulocyt kolonistimulerende faktor, hvor DNA-sekvenden er kendetegnet ved at kode for et polypeptid med en aminosyresekvens valgt blandt den i Tabel VII angivne polypeptidsekvens og en hvilken som helst allelisk variant, et derivat, en sletningsanalog, substitutionsanalog eller additionsanalog deraf. 8. cDNA-sekvens ifølge krav 7. 9. Genomisk DNA-sekvens ifølge krav 7. 10. DNA-sekvens ifølge krav 7, kendetegnet ved, at den er kovalent associeret med en påviselig markørsubstans, især en radioaktiv markør . 11. Enkeltstrenget DNA-sekvens ifølge krav 10. 12. Biologisk funktionelt plasmid eller viral DNA-vektor, kendetegnet ved, at det inkluderer en DNA-sekvens ifølge krav 7. 13. Prokaryotisk eller eukaryotisk værtscelle, kendetegnet ved, at den er transformeret eller transficeret med en DNA-sekvens ifølge krav 7 på en sådan måde, at værtscellen kan eksprimere det pågældende polypeptidprodukt. 14. Prokaryotisk eller eukaryotisk værtscelle, kendetegnet ved, at den er stabilt transformeret eller transficeret med en DNA-vektor ifølge krav 12. 15. Værtscelle ifølge krav 13 eller 14, kendetegnet ved, at værten er E. coli. 16. Værtscelle ifølge krav 13 eller 14, kendetegnet ved, at værten er en pattedyrscelle. 17. Fremgangsmåde til fremstilling af isolerede polypeptider med de hæmatopoietiske egenskaber for naturligt forekommende human granulocyt kolonistimulerende faktor, hvor polypeptidet har en aminosyrese-kvens valgt blandt den i Tabel VII angivne polypep-tidsekvens og en hvilken som helst allelisk variant, en sletningsanalog, substitutionsanalog eller additionsanalog deraf, kendetegnet ved, at man under egnede næringsbetingelser dyrker prokaryotiske eller især eukaryotiske værtsceller, der er transformeret eller transficeret med en DNA-sekvens ifølge krav 7 på en sådan måde, at de kan eksprimere det nævnte polypeptid, og at man isolerer det ønskede po-lypeptidprodukt fra ekspressionen af DNA-sekvensen. 18. Farmaceutisk præparat, kendetegnet ved, at det omfatter en effektiv mængde af polypeptidet ifølge krav 1 og/eller fremstillet ifølge krav 17, og et farmaceutisk acceptabelt fortyndingsmiddel, adjuvans eller bærer. 19. Farmaceutisk præparat ifølge krav 18, yderligere kendetegnet ved at være frit for association med noget som helst humant protein. 20. Anvendelse af polypeptidet ifølge krav 1 til fremstilling af et lægemiddel til tilvejebringelse af hæmatopoietisk terapi på et pattedyr.