DK2363461T3 - Fusionskollagenase med tilknyttede affinitetsmærker samt fremgangsmåde til dens fremstilling - Google Patents

Fusionskollagenase med tilknyttede affinitetsmærker samt fremgangsmåde til dens fremstilling Download PDF

Info

Publication number
DK2363461T3
DK2363461T3 DK09827488T DK09827488T DK2363461T3 DK 2363461 T3 DK2363461 T3 DK 2363461T3 DK 09827488 T DK09827488 T DK 09827488T DK 09827488 T DK09827488 T DK 09827488T DK 2363461 T3 DK2363461 T3 DK 2363461T3
Authority
DK
Denmark
Prior art keywords
lys
asn
asp
ser
gly
Prior art date
Application number
DK09827488T
Other languages
English (en)
Inventor
Masafumi Goto
Takayoshi Fukushima
Kengo Yokoyama
Koichiro Murashima
Youhei Yamagata
Original Assignee
Meiji Seika Pharma Co Ltd
Univ Tohoku
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Meiji Seika Pharma Co Ltd, Univ Tohoku filed Critical Meiji Seika Pharma Co Ltd
Application granted granted Critical
Publication of DK2363461T3 publication Critical patent/DK2363461T3/da

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/78—Connective tissue peptides, e.g. collagen, elastin, laminin, fibronectin, vitronectin or cold insoluble globulin [CIG]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K19/00—Hybrid peptides, i.e. peptides covalently bound to nucleic acids, or non-covalently bound protein-protein complexes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • C12N9/50—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25)
    • C12N9/52—Proteinases, e.g. Endopeptidases (3.4.21-3.4.25) derived from bacteria or Archaea
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/20—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand
    • C07K2319/21—Fusion polypeptide containing a tag with affinity for a non-protein ligand containing a His-tag

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Claims (8)

1. Fremgangsmåde til fremstilling afen fusionskollagenase, ved hvilken: en ved dyrkning af E. coli, der er transformeret med en vilkårlig af en for fusionskollagenasen kodende DNA og en ekspressionsvektor, der omfatter DNA'en, opnået kultur renses ved affinitetschromatografi svarende til et affinitetsmærke for derved selektivt at opsamle fusionskollagenasen med et kollagenbindende domæne, idet fusionskollagenasen har følgende træk (i) til (ii): (i) affinitetsmærket er direkte eller indirekte koblet til en carboxylterminal på kollagenasen; (ii) kollagenasen er valgt blandt følgende (a) til (h): (a) en kollagenase, der omfatter en aminosyresekvens fra stilling -110 til 1008 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 1 og 2; (b) en kollagenase, der omfatter en aminosyresekvens fra stilling -110 til 1008 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 1 og 2, i hvilken 1 til 30 aminosyrer er fjernet, erstattet, indsat eller tilføjet; (c) en kollagenase, der omfatter en aminosyresekvens med en homologi på 80% eller derover med aminosyresekvensen fra stilling -110 til 1008 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 1 og 2; (d) en kollagenase, i hvilken en aminosyresekvens fra stilling -110 til -1 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 1 og 2 er fjernet fra en vilkårlig af de i (a) til (c) beskrevne kollagenaser; (e) en kollagenase, der omfatter en aminosyresekvens fra stilling -40 til 981 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 5 og 6; (f) en kollagenase, der omfatter en aminosyresekvens fra stilling -40 til 981 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 5 og 6, i hvilken 1 til 30 aminosyrer er fjernet, erstattet, indsat eller tilføjet; (g) en kollagenase, der omfatter en aminosyresekvens med en homologi på 80% eller derover med aminosyresekvensen fra stilling -40 til 981 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 5 og 6; (h) en kollagenase, i hvilken en aminosyresekvens fra stilling -40 til -1 i en vilkårlig af SEQ ID NOS: 5 og 6 er fjernet fra en vilkårlig af de under (e) til (g) beskrevne kollagenaser.
2. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 1, ved hvilken fusionskollagenasen er en fusionskollagenase, i hvilken affinitetsmærket er to eller flere på hinanden følgende histidinrester.
3. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 1, ved hvilken fusionskollagenasen omfatter en aminosyresekvens fra stilling -110 til 1021 i SEQ ID NO: 3.
4. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 3, ved hvilken fusionskollagenasen er en fusionskollagenase, fra hvilken en aminosyresekvens fra stilling -110 til -1 i SEQ ID NO: 3 er fjernet.
5. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 1, ved hvilken fusionskollagenasen omfatter en aminosyresekvens fra stilling -40 til 994 i SEQ ID NO: 7.
6. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 5, ved hvilken fusionskollagenasen er en fusionskollagenase, fra hvilken en aminosyresekvens fra stilling -40 til -1 i SEQ ID NO: 7 er fjernet.
7. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 1, ved hvilken den DNA, der koder for fusionskollagenasen, er en DNA, der omfatter en basesekvens fra stilling 1 til 3396 i SEQ ID NO: 4.
8. Fremstillingsfremgangsmåde ifølge krav 1, ved hvilken den DNA, der koder for fusionskollagenasen, er en DNA, der omfatter en basesekvens fra stilling 1 til 3105 i SEQ ID NO: 8.
DK09827488T 2008-11-19 2009-11-06 Fusionskollagenase med tilknyttede affinitetsmærker samt fremgangsmåde til dens fremstilling DK2363461T3 (da)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008295922 2008-11-19
PCT/JP2009/068968 WO2010058707A1 (ja) 2008-11-19 2009-11-06 アフィニティタグが結合した融合コラゲナーゼおよびその製造法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
DK2363461T3 true DK2363461T3 (da) 2015-03-02

Family

ID=42198147

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DK09827488T DK2363461T3 (da) 2008-11-19 2009-11-06 Fusionskollagenase med tilknyttede affinitetsmærker samt fremgangsmåde til dens fremstilling

Country Status (11)

Country Link
US (1) US20110294192A1 (da)
EP (1) EP2363461B1 (da)
JP (1) JP5698536B2 (da)
KR (1) KR101700974B1 (da)
CN (1) CN102216454B (da)
AU (1) AU2009318554B2 (da)
CA (1) CA2744286C (da)
DK (1) DK2363461T3 (da)
ES (1) ES2531402T3 (da)
NZ (1) NZ593239A (da)
WO (1) WO2010058707A1 (da)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2687847B1 (en) * 2011-03-16 2019-03-06 Tohoku University Probe for analyzing biological tissue and method for utilizing same
CA2861033C (en) 2012-01-12 2017-07-25 Auxilium International Holdings, Inc. Clostridium histolyticum enzymes and methods for the use thereof
CN105008519A (zh) * 2013-02-01 2015-10-28 国立大学法人东北大学 从生物组织分离细胞的方法
PT107276B (pt) * 2013-11-07 2018-06-07 Univ Aveiro Método para produção de colagenase recombinante para digestão de colagénios
ES3036011T3 (en) 2017-03-01 2025-09-11 Endo Operations Ltd Apparatus and method for assessing and treating cellulite
KR20240001279A (ko) 2017-03-28 2024-01-03 엔도 벤쳐즈 리미티드 개선된 콜라게나제 생성 방법
CZ308157B6 (cs) * 2017-09-13 2020-01-29 MB PHARMA s.r.o. Kmen bakterie Clostridium histolyticum, kolagenáza připravená s použitím tohoto kmene a její použití
WO2019187691A1 (ja) 2018-03-26 2019-10-03 株式会社カネカ コラゲナーゼ活性を有するポリペプチド及びその製造方法
CN113025599B (zh) * 2021-04-02 2023-09-12 重庆科润生物医药研发有限公司 一种重组溶组织梭菌i型胶原酶及其制备方法和应用
CN114836461B (zh) * 2022-05-31 2024-03-29 华南理工大学 表达胶原蛋白酶的重组质粒、酵母菌株及其发酵培养基和发酵培养方法
CN121320314A (zh) * 2025-11-04 2026-01-13 北京多美康医药科技有限公司 一种重组胶原酶及其制备方法和应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2003284553A (ja) * 2002-03-28 2003-10-07 Seikagaku Kogyo Co Ltd 生理活性タンパク質
EP1433845A1 (en) * 2002-12-23 2004-06-30 Georg-August-Universität Clostridium tetani collagenase and uses thereof
CA2930681C (en) * 2007-04-09 2019-10-15 The Board Of Trustees Of The University Of Arkansas Fusion protein of collagen-binding domain and parathyroid hormone

Also Published As

Publication number Publication date
EP2363461A1 (en) 2011-09-07
EP2363461A4 (en) 2012-08-01
AU2009318554A1 (en) 2011-06-23
US20110294192A1 (en) 2011-12-01
KR20110106286A (ko) 2011-09-28
NZ593239A (en) 2013-01-25
EP2363461B1 (en) 2014-12-24
JP5698536B2 (ja) 2015-04-08
CN102216454B (zh) 2013-05-29
CA2744286C (en) 2018-07-31
KR101700974B1 (ko) 2017-01-31
ES2531402T3 (es) 2015-03-13
JPWO2010058707A1 (ja) 2012-04-19
WO2010058707A1 (ja) 2010-05-27
CN102216454A (zh) 2011-10-12
AU2009318554B2 (en) 2016-06-09
CA2744286A1 (en) 2010-05-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2363461T3 (da) Fusionskollagenase med tilknyttede affinitetsmærker samt fremgangsmåde til dens fremstilling
EP2513306B1 (en) C. histolyticum recombinant collagenases and method for the manufacture thereof
JP2019195327A (ja) 枯草菌（ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ）において真正で生物活性を有する塩基性線維芽細胞増殖因子を発現させる方法及び手段
CN116836955B (zh) 末端脱氧核苷酸转移酶及其制备方法
US20090081754A1 (en) Gene of enzyme having activity to generate lachrymatory factor
JP6302415B2 (ja) ヒト上皮細胞増殖因子の製造方法
JP3570558B2 (ja) Ｄｎａ断片およびそれを含むベクター、該ベクターによって形質転換された形質転換体、該ベクターを用いる蛋白質の産生方法
CA2159079C (en) Methods and dna expression systems for over-expression of proteins in host cells
EP1527181A1 (en) Staphylococcal nuclease fusion proteins for the production of recombinant peptides
JP5401312B2 (ja) 組換えＣ−末端α−アミド化酵素誘導体
EP3210994B1 (en) Purification method, purification kit, and silica-binding tag using same
CN102978211A (zh) 一种目的蛋白制备方法及其用途
CN116478969A (zh) 胶原酶突变体、促进重组胶原酶分泌表达的方法及其应用
WO2002066669A1 (en) Method for purification of soluble ssao
JPH11225763A (ja) タンパク質の精製方法
EP0572088A2 (en) Modified signal sequences
US20060281901A1 (en) Method for the production of amyloid-beta peptide using ubiquitin
JP5877587B2 (ja) 微生物由来の細胞外プロテアーゼの産生ならびにその用途
CN116334051A (zh) 一种对核酸提取裂解液中异硫氰酸胍耐受时间延长的蛋白酶k突变体及其应用
JPH06277088A (ja) 組換えタンパク質の生産・精製方法
WO2022046768A1 (en) Botulinum neurotoxin proteins and methods to engineer and generate same
WO2025050045A1 (en) Igm proteases
JP2006345831A (ja) Ｄｎａ、ベクター、形質転換体、及びａｐａタンパク質の製造方法
JPWO2006129751A1 (ja) メチオニンアミノペプチダーゼ遺伝子を含む高コピー高発現ベクター
JP2008220196A (ja) タンパク質の欠失変異体の作製方法