DK2865751T3 - Stabiliseret alpha-galactosidase og anvendelser deraf - Google Patents

Claims (17)

1. Stabiliseret alpha-qalactosidase og anvendelser deraf

   1. Multimerisk proteinstruktur, der omfatter mindst to a-galactosidasemonomerer, der er kovalent bundet til hinanden via en linker-del, hvor linker-delen ikke er til stede i nativ α-galactosidase, hvilken multimerisk proteinstruktur er beregnet til anvendelse til behandling af Fabry-sygdom.
2. 2. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge krav 1, hvor den multimeriske proteinstruktur har en egenskab, der er udvalgt fra gruppen bestående af: (a) en α-galactosidaseaktivitet efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for humane plasmaforhold i en time, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for en nativ α-galactosidase efter udsættelse af den native α-galactosidase for humane plasmaforhold i en time; (b) en α-galactosidaseaktivitet, der falder efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for humane plasmaforhold i en time ved en procentsats, der er mindst 10 % mindre end procentsatsen, ved hvilken en aktivitet for den native α-galactosidase falder efter udsættelse af den native α-galactosidase for de humane plasmaforhold i en time; (c) en α-galactosidaseaktivitet, der forbliver i alt væsentligt uændret efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for humane plasmaforhold i en time; (d) en α-galactosidaseaktivitet efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en uge, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for den native α-galactosidase efter udsættelse af den native α-galactosidase for de lysosomale forhold i en uge; (e) en α-galactosidaseaktivitet, der falder efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en dag ved en procentsats, der er mindst 10 % mindre end procentsatsen, ved hvilken en aktivitet for den native α-galactosidase falder efter udsættelse af den native α-galactosidase for lysosomale forhold i en dag; (f) en α-galactosidaseaktivitet, der forbliver i alt væsentligt uændret efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en dag; (g) en α-galactosidaseaktivitet umiddelbart efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for nativ α-galactosidase umiddelbart efter udsættelse af den native α-galactosidase for lysosomale forhold; (h) en α-galactosidaseaktivitet umiddelbart efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for en vandig opløsning, der har et pH på 7 og en temperatur på 37 °C, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for nativ α-galactosidase umiddelbart efter udsættelse af den native α-galactosidase for den vandige opløsning, der har et pH på 7 og en temperatur på 37 °C; og (i) en halveringstid i kredsløbet i et fysiologisk system, der er højere end en halveringstid i kredsløbet for den native α-galactosidase.
3. 3. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge krav 2, hvor a-galactosidaseaktiviteten for den multimeriske proteinstruktur, der forbliver i alt væsentligt uændret efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en dag, endvidere forbliver i alt væsentligt uændret efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en uge.
4. 4. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 3, hvor den multimeriske proteinstruktur omfatter to α-galactosidasemonomerer, hvilken proteinstruktur er en dimerisk proteinstruktur.
5. 5. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 4, hvor α-galactosidasen er en α-galactosidase genereret ved rekombinant teknologi.
6. 6. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 5, hvor α-galactosidasen er en human α-galactosidase, der er udvalgt fra gruppen bestående af agalsidase alpha og agalsidase beta.
7. 7. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 5, hvor α-galactosidasen har en aminosyresekvens, der er udvalgt fra gruppen bestående af SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 og SEQ ID NO: 3.
8. 8. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 7, hvor linker-delen er mindst 20 atomer lang.
9. 9. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 8, hvor linker-delen omfatter en poly(alkylenglycol).
10. 10. Multimeriske proteinstrukturer til anvendelse ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 8, hvor linker-delen har en almen formel: -Xi-(CRi R2-CR3R4-Y)n-X2- hvor hver af Xi og X2 er en funktionel gruppe, der danner en kovalent binding med mindst én a-galactosidasemonomer; Y er O, S eller NR5; n er et heltal fra 1 til 200; og hver af Ri, R2, R3, Rt og Rs uafhængigt er udvalgt fra gruppen bestående af hydrogen, alkyl, cycloalkyl, alkenyl, alkynyl, alkoxy, hydroxy, oxo, thiol og thioalkoxy.
11. 11. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge krav 10, hvor n er mindst 25.
12. 12. Multimerisk proteinstruktur til anvendelse ifølge krav 10, hvor den multimeriske proteinstruktur omfatter to α-galactosidasemonomerer, hvor proteinstrukturen er en dimerisk proteinstruktur, hvor α-galactosidasen har en aminosyresekvens, der er udvalgt fra gruppen bestående af SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2 og SEQ ID NO: 3, hver af de funktionelle grupper danner en amidbinding med en α-galactosidasemonomer, og n er et heltal fra 40 til 70.
13. 13. Multimeriske proteinstruktur til anvendelse ifølge krav 7, hvor den multimeriske proteinstruktur omfatter to a-galactosidasemonomerer, hvilken proteinstruktur er en dimerisk proteinstruktur, hvor linker-delen har formlen:

    hvor en molekylvægt af polyethylenglycolen i linker-delen er 2 kDa, og de terminale grupper af linker-delen hver danner en amidbinding med en a-galactosidasemonomer.
14. 14. Farmaceutisk sammensætning til anvendelse til behandling af Fabry-sygdom ved parenteral administration, hvilken sammensætning omfatter den multimeriske proteinstruktur ifølge et hvilket som helst af kravene 1 til 13 og en farmaceutisk acceptabel bærer.
15. 15. Sammensætning til anvendelse ifølge krav 14, hvor den parenterale administration er intravenøs infusion.
16. 16. Sammensætning til anvendelse ifølge krav 14 eller 15, hvor en koncentration af den multimeriske proteinstruktur er 2 mg/ml.
17. 17. Farmaceutisk sammensætning til anvendelse til behandling af Fabry-sygdom ved parenteral administration, hvilken sammensætning omfatter: (i) en multimerisk proteinstruktur, der omfatter mindst to a-galactosidasemonomerer, der er kovalent bundet til hinanden via en linker-del; og (ii) en farmaceutisk acceptable bærer, hvor den multimeriske proteinstruktur har en egenskab, der er udvalgt fra gruppen bestående af: (a) en α-galactosidaseaktivitet efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for humane plasmaforhold i en time, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for nativ α-galactosidase efter udsættelse af den native α-galactosidase for humane plasmaforhold i en time; (b) en α-galactosidaseaktivitet, der falder efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for humane plasmaforhold i en time ved en procentsats, der er mindst 10 % mindre end procentsatsen, ved hvilken en aktivitet for den native α-galactosidase falder efter udsættelse af den native α-galactosidase for humane plasmaforhold i en time; (c) en α-galactosidaseaktivitet, der forbliver i alt væsentligt uændret efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for humane plasmaforhold i en time; (d) en α-galactosidaseaktivitet efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en uge, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for nativ a-galactosidase efter udsættelse af den native α-galactosidase for lysosomale forhold i en uge; (e) en α-galactosidaseaktivitet, der falder efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en dag ved en procentsats, der er mindst 10 % mindre end procentsatsen, ved hvilken en aktivitet for den native α-galactosidase falder efter udsættelse af den native α-galactosidase for lysosomale forhold i en dag; (f) en α-galactosidaseaktivitet, der forbliver i alt væsentligt uændret efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold i en dag; (g) en α-galactosidaseaktivitet, umiddelbart efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for lysosomale forhold, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for native α-galactosidase umiddelbart efter udsættelse af den native α-galactosidase for lysosomale forhold; (h) en α-galactosidaseaktivitet, umiddelbart efter udsættelse af den multimeriske proteinstruktur for en vandig opløsning, der har et pH på 7 og en temperatur på 37 °C, der er mindst 10 % højere end en aktivitet for nativ α-galactosidase umiddelbart efter udsættelse af den native α-galactosidase for den vandige opløsning, der har et pH på 7 og en temperatur på 37 °C; og (i) en halveringstid i kredsløbet i et fysiologisk system, der er mindst 20 % højere end halveringstiden i kredsløbet for den native α-galactosidase.