ES2197240T3

ES2197240T3 - Nuevos inhibidores de trombina, su preparacion y uso.

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Publication number: ES2197240T3
Application number: ES96922355T
Authority: ES
Inventors: David Gustafsson; Jan-Erik Nystrom
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 1995-07-06
Filing date: 1996-07-02
Publication date: 2004-01-01
Anticipated expiration: 2016-07-02
Also published as: AU6325396A; EP0836615B1; HK1008995A1; ATE238342T1; PL185606B1; AU709710B2; WO1997002284A1; PL324483A1; SI0836615T1; MX9800146A; HUP9802315A3; NZ509474A; CA2226256A1; US20020042396A1; US20040087647A1; CZ298487B6; NO980015L; US6337343B1; TR199800009T1; DE69627659T2

Abstract

SE PRESENTAN LOS DERIVADOS AMINOACIDOS DE FORMULA (I), DONDE P, Q, R SUP,1}, R SUP,2}, R SUP,3}, R SUP,4}, Y, N Y B CORRESPONDEN A LO EXPUESTO EN LA DESCRIPCION, QUE SON UTILES COMO INHIBIDORES COMPETITIVOS DE LAS PROTEASAS SIMILARES A TRIPSINA, COMO TROMBINA, Y EN PARTICULAR EN EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES DONDE ES NECESARIA LA INHIBICION DE LA TROMBINA (P. EJ., TROMBOSIS) O COMO ANTICOAGULANTES.

Description

Nuevos inhibidores de trombina, su preparación y uso.

Campo de la invención

Esta invención se refiere a nuevos compuestos farmacéuticamente útiles, en particular a inhibidores competitivos de serin-proteasas análogas a tripsina, especialmente trombina, su uso como medicamentos, composiciones farmacéuticas que los contienen y rutas sintéticas para su producción.

Antecedentes

La coagulación de la sangre es el proceso clave involucrado en ambas: homeóstasis (es decir, la prevención de pérdida de sangre por un vaso dañado) y trombosis (es decir, la formación de un coágulo de sangre en un vaso sanguíneo o en el corazón, que algunas veces conduce a la obstrucción del vaso).

La coagulación es el resultado de una serie compleja de reacciones enzimáticas. Una de las últimas etapas en esta serie de reacciones es la conversión de la proenzima protrombina en la enzima activa trombina.

Es sabido que la trombina juega un papel central en la coagulación. Activa las plaquetas conduciendo a la agregación de las mismas, convierte el fibrinógeno en monómeros de fibrina los cuales polimerizan espontáneamente en polímeros de fibrina y activa el factor XIII que, a su vez, entrecruza los polímeros para formar fibrina insoluble. Además, la trombina activa el factor V y el factor VIII conduciendo a una generación de trombina a partir de protrombina con ``retroalimentación positiva''.

Al inhibir la agregación de las plaquetas y la formación y entrecruzamiento de fibrina, se debería esperar que los inhibidores eficaces de trombina exhibieran actividad antitrombótica. Además, se debería esperar que la actividad antitrombótica fuese potenciada por la inhibición eficaz del mecanismo de retroalimentación positiva.

Estado de la técnica

El desarrollo de inhibidores de trombina de bajo peso molecular ha sido descrito por Claesson en Blood Coagul. Fibrinol. (1994) 5, 411.

Blombäck et al. (J. Clin. Lab. Invest. 24 suppl. 107, 59, (1969)) revelaron inhibidores de trombina basados en la secuencia de aminoácidos situados alrededor del sitio de corte para la cadena A\alpha de fibrinógeno. De las secuencias de aminoácidos discutidas, estos autores sugirieron la secuencia Phe-Val-Arg (P9-P2-P1, a la que en este documento en lo sucesivo se hace referencia como secuencia P3-P2-P1) sería el inhibidor más eficaz (para una clasificación de especificidad de sustrato, véase Schechten and Bergen, Biophys. Res. Commun. (1967) 27, 157 y (1968) 32, 898.

Los inhibidores de trombina basados en derivados dipeptidilo con una \alpha,\omega-aminoalquil-guanidina en la posición P1 son conocidos por la patente de EE.UU. nº 4,346,078 y solicitud internacional de patente WO 93/11152. También se han revelado derivados dipeptidilo similares relacionados estructuralmente. Por ejemplo, la solicitud de patente internacional WO 94/29336 descubre compuestos con, por ejemplo, aminometilbenzamidinas, aminoalquilamidinas cíclicas y aminoalquilguanidinas cíclicas en posición P1. La solicitud europea de patente 0 648 780 descubre compuestos con, por ejemplo, aminoalquilguanidinas cíclicas en posición P1.

Los inhibidores de trombina basados en derivados peptidilo que tienen también aminoalquilguanidinas cíclicas (p. ej. cualquiera de 3- ó 4-aminometil-1-amidinopiperidina) en la posición P1 son conocidos por las solicitudes europeas de patente 0 468 231, 0 559 046 y 0 641 779.

Los inhibidores de trombina basados en derivados tripeptidilo con argininaldehído en la posición P1 fueron descubiertos primero en la solicitud europea de patente 0 185 390.

Más recientemente, se han revelado derivados peptidilo basados en arginin-aldehído modificado en la posición P3. Por ejemplo, la solicitud de patente internacional WO 93/18060 descubre hidroxiácidos, la solicitud europea de patente 0 526 877 des-aminoácidos y la solicitud europea de patente 0 542 525 ácidos O-metil-mandélicos en posición P3.

Los inhibidores de serín-proteasas (p. ej. trombina) basados en cetonas electrófilas en posición P1 son también conocidos. Por ejemplo, la solicitud de patente europea 0 195 212 descubre peptidil-\alpha-ceto-ésteres y -amidas, la solicitud de patente europea 0 362 002 fluoroalquilamido-cetonas, la solicitud de patente europea 0 364 344 \alpha,\beta,\delta-triceto-compuestos y la solicitud de patente europea 0 530 167 derivados \alpha-alcoxicetona de arginina en la posición P1.

Otros inhibidores de serín-proteasas análogas a tripsina basados en derivados de ácido bórico de arginina C terminales y análogos a isotiouronio de los mismos son conocidos por la solicitud de patente europea 0 293 881.

Más recientemente, se han descubierto inhibidores de trombina basados en derivados tripeptidilo en las solicitudes de patente europea 0 669 317, 0 686 642 y 0 648 780 y solicitudes de patente internacional WO 95/35309, WO 95/23609, WO 96/25426, EP 672 658 y WO 94/29336.

Por supuesto, permanece una necesidad de inhibidores eficaces de serín-proteasas análogas a tripsina, tal como trombina. Hay una particular necesidad de compuestos que sean ambos: oralmente biodisponibles y selectivos en la inhibición de trombina sobre otras serín-proteasas. Se debería esperar que los compuestos que exhiben actividad inhibitoria competitiva hacia trombina fuesen especialmente útiles como anticoagulantes y, por lo tanto, útiles en el tratamiento terapéutico de trombosis y alteraciones relacionadas.

Descubrimiento de la invención

Conforme a la invención, se proporciona un compuesto de fórmula I,

1

en donde

p y q, independientemente, representan 0;

R^{1} representa H;

R^{2} representa H;

R^{3} representa fenilo (cuyo último grupo está sustituido por uno o más de alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{4}), halógeno, hidroxi, ciano, nitro, metilendioxi, trifluorometilo, N(H)R^{27} ó C(O)OR^{28});

R^{27} representa H, alquilo (C_{1}-C_{4}) ó C(O)R^{29};

R^{28} y R^{29}, independientemente, representan H o alquilo (C_{1}- C_{4})

R^{4} representa H o alquilo (C_{1}-C_{4});

Y representa alquileno (C_{1}-C_{3}), opcionalmente sustituido por alquilo (C_{1}-C_{4}), hidroxi, metileno u oxo;

n representa 1; y

\newpage

B representa un fragmento estructural de fórmula IVa

2

en donde

R^{5} representa H, halógeno o alquilo (C_{1}-C_{4});

o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable (a lo que en lo sucesivo en el presente documento se hace referencia como ``los compuestos de la invención'').

Los compuestos de la invención pueden exhibir tautomería. Todas las formas tautómeras y mezclas de las mismas están incluidas dentro de la extensión de la invención.

Los compuestos de la invención pueden contener también uno o más átomos de carbono asimétricos y, por lo tanto, pueden exhibir actividad óptica y/o diastereoisómeros. Todos los diastereoisómeros se pueden separar usando técnicas convencionales, p. ej. cromatografía o cristalización fraccionada. Los varios estereoisómeros se pueden aislar por separación de una mezcla racémica o de otro tipo de los compuestos usando técnicas convencionales, p. ej. cristalización fraccionada o HPLC. De modo alternativo, los deseados isómeros ópticos se pueden preparar por reacción de los materiales de partida ópticamente activos adecuados bajo condiciones que no causen racemización o epimerización, o por derivatización, por ejemplo con un ácido homoquiral seguido de separación de los ésteres diastereómeros por medios convencionales (p. ej., HPLC, cromatografía sobre sílice). Todos los estereoisómeros están incluidos dentro de la extensión de la invención.

Los grupos alquilo que R^{4}, R^{5}, R^{27}, R^{28} y R^{29} pueden representar y por los que pueden estar sustituidos R^{3} e Y, y grupos alcoxi por los cuales puede estar sustituido R^{3}, pueden ser lineales o ramificados, saturados o insaturados. Los grupos alquileno que Y puede representar pueden ser saturados o insaturados.

Los grupos halógeno que R^{5} puede representar y por los que R^{3} puede estar sustituido incluyen flúor, cloro, bromo y yodo.

Las líneas onduladas sobre el átomo de carbono en el fragmento de fórmula IVa significan la posición de enlace del fragmento.

Las abreviaturas están alistadas al final de esta memoria descriptiva.

Los compuestos preferidos de la invención incluyen aquellos en los que R^{5} representa H.

Los compuestos preferidos de fórmula I incluyen aquellos en donde:

Y representa CH_{2}, (CH_{2})_{2}, (CH_{2})_{3}, CH_{2}CH(CH_{3})CH_{2}, CH_{2}C(=O)CH_{2} ó CH_{2}C(=CH_{2})CH_{2};

R^{4} representa H.

Compuestos más preferidos de la invención incluyen aquellos donde

Y representa CH_{2}, (CH_{2})_{2} ó CH_{2}C(=CH_{2})CH_{2}.

Los sustituyentes preferidos en R^{3} incluyen hidroxi, flúor, cloro, metilo, metoxi, amino, nitro, trifluorometilo, metilendioxi, etoxi y propoxi. Los sustituyentes particulares incluyen hidroxi, mono o diflúor, cloro, metilo, metoxi y metilendioxi.

Los compuestos particularmente preferidos de la invención incluyen aquellos en donde Y representa CH_{2}.

Los compuestos de la invención en los cuales el carbono de \alpha-aminoácido en el fragmento

3

está en la configuración S son preferidos. Las líneas onduladas sobre los átomos de nitrógeno y de carbono en el fragmento anterior significan la posición de enlace del fragmento.

Son compuestos preferidos de la invención, aquellos en los cuales el carbono \alpha en el fragmento

4

está en configuración R. La línea ondulada sobre el átomo de carbono en el fragmento anterior significa la posición de enlace del fragmento.

Los compuestos preferidos de la invención incluyen:

Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe, 4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe, 4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,4-(-O-CH_{2}O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,4-(-O-CH_{2}O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab, y

Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab.

Preparación

Conforme a la invención, se proporciona también un proceso para la preparación de compuestos de fórmula I, el cual comprende:

(a): El acoplamiento de un compuesto de fórmula V,

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en donde p, q, R^{1}, R^{2} y R^{3} son lo anteriormente definido en el presente documento, con un compuesto de fórmula VI,

6

en donde R^{4}, Y, n y B son lo anteriormente definido en el presente documento, o

(b): El acoplamiento de un compuesto de fórmula VII,

7

\newpage

en donde p, q, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} e Y son lo anteriormente definido en el presente documento, con un compuesto de fórmula VIII,

H_{2}N-(CH_{2})_{n}-B\eqnum{VIII}

en donde n y B son lo anteriormente definido en el presente documento,

por ejemplo en presencia de un sistema de acoplamiento (p. ej. cloruro de oxalilo en DMF, EDC, DCC o TBTU), una base adecuada (p. ej., piridina, DMAP o DIPEA) y un disolvente orgánico adecuado (p. ej., diclorometano, acetonitrilo o DMF).

Los compuestos de fórmula V son comercialmente asequibles siendo bien conocidos en la bibliografía o son asequibles usando técnicas conocidas.

Por ejemplo, los compuestos de fórmula V se pueden preparar por reacción de un aldehído de fórmula IX,

R^{3a}CHO\eqnum{IX}

en donde R^{3a }representa fenilo sustituido por uno o más de alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{4}), halógeno, hidroxi, ciano, metilendioxi, nitro, trifluorometilo, N(H)R^{27} ó C(O)OR^{28} y R^{27} y R^{28} son lo anteriormente definido en el presente documento, con:

(i) un compuesto de fórmula X,

R''CN\eqnum{X}

en donde R'' representa H o (CH_{3})_{3}Si, por ejemplo a elevada temperatura (p. ej. por encima de la temperatura ambiente pero por debajo de 100ºC) en presencia de un disolvente orgánico adecuado (p. ej., cloroformo) y, si es necesario, en presencia de un sistema catalizador adecuado (p. ej., cloruro de bencilamonio), seguido de hidrólisis en presencia de una base adecuada (p. ej., NaOH);

(ii) cloroformo, por ejemplo a elevada temperatura (p. ej. por encima de la temperatura ambiente pero por debajo de 100ºC) en presencia de un disolvente orgánico adecuado (p. ej., cloroformo) y, si es necesario, en presencia de un sistema catalizador adecuado (p. ej., cloruro de bencilamonio), seguido de hidrólisis en presencia de una base adecuada (p. ej., NaOH);

un compuesto de fórmula XI,

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en donde M representa Mg o Li, seguido de escisión oxidante (p. ej., ozonólisis o catalizada por osmio o rutenio) bajo condiciones que son bien conocidas por los especialistas en la materia; o

(iv) tris(metiltío)metano bajo condiciones que son bien conocidas por los especialistas en la materia, seguido de hidrólisis en presencia de una base adecuada. Los compuestos de fórmulas VI y VII son comercialmente asequibles siendo bien conocidos en la bibliografía o asequibles usando técnicas conocidas. Por ejemplo, los compuestos de fórmula VI se pueden preparar por acoplamiento estándar de péptidos de un compuesto de fórmula XIII,

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en donde R^{4} e Y son lo anteriormente definido en el presente documento, con un compuesto de fórmula VIII como se ha definido anteriormente en el presente documento, por ejemplo bajo condiciones tales como aquellas descritas anteriormente en el presente documento para la síntesis de compuestos de fórmula I. De modo similar, el compuesto de fórmula VII se puede preparar también por acoplamiento estándar de péptidos de un compuesto de fórmula XIII como se ha definido anteriormente en el presente documento con un compuesto de fórmula V como se ha definido anteriormente en el presente documento, por ejemplo bajo condiciones tales como aquellas descritas anteriormente en el presente documento para la síntesis de compuestos de fórmula I.

Los compuestos de fórmulas VIII, IX, X, XI y XIII son comercialmente asequibles siendo bien conocidos en la bibliografía o son asequibles usando técnicas conocidas. Los sustituyentes del grupo fenilo en compuestos de fórmulas V, VII y IX se pueden interconvertir por técnicas bien conocidas por los especialistas en la materia.

Los compuestos de la invención se pueden aislar a partir de sus mezclas de reacción usando técnicas convencionales.

Los especialistas en la materia apreciarán que en el proceso descrito anteriormente puede ser necesario proteger los grupos funcionales de compuestos intermedios con grupos protectores.

Los grupos funcionales que es deseable proteger incluyen hidroxi, amino, amidino, guanidino y ácido carboxílico. Los grupos protectores adecuados para hidroxi incluyen grupos trialquilsililo y diarilalquilsililo (p. ej., t- butildimetilsililo, t-butildifenilsililo o trimetilsililo) y tetrahidropiranilo. Los grupos protectores adecuados para grupos hidroxi, cuyos grupos están unidos a átomos de carbono adyacentes incluyen O,O'-isopropilideno. Los grupos protectores adecuados para amino, amidino y guanidino incluyen t-butiloxicarbonilo o benciloxicarbonilo. Los nitrógenos de amidino y guanidino pueden estar mono- o biprotegidos. Los grupos protectores adecuados para ácidos carboxílicos incluyen alquilo (C_{1}-C_{6}) o ésteres bencílicos.

La protección y desprotección de grupos funcionales puede tener lugar antes o después del acoplamiento.

En particular, los compuestos de la invención se pueden preparar por procesos que comprendan el acoplamiento de un aminoácido N-acilado o un aminoácido N-protegido. Cuando se usa un aminoácido N-protegido, el grupo acilo se puede añadir después del acoplamiento y entonces, después de eso, se puede efectuar la desprotección del átomo de nitrógeno se puede efectuar usando métodos estándar.

Los grupos protectores se pueden eliminar de acuerdo con técnicas que son bien conocidas por los especialistas en la materia y como se describirá posteriormente en el presente documento.

Ciertos intermedios protegidos de fórmula I, en los cuales los nitrógenos de amidino y guanidino en B están protegidos, y los cuales se pueden preparar antes de una etapa final de desprotección para formar compuestos de la invención, son nuevos.

\newpage

Conforme a un aspecto más de la invención, se proporciona un compuesto de fórmula XIV,

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en donde B' representa un fragmento estructural de fórmula IVd

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D^{1} y D^{2}, independientemente, representan H o benciloxicarbonilo y p, q, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, Y, n y R^{5} son lo anteriormente definido en el presente documento, siempre que D^{1} y D^{2} no representen ambos H.

Las líneas onduladas sobre el átomo de carbono en el fragmento de fórmula IVd significan la posición de enlace del fragmento.

El uso de grupos protectores está completamente descrito en ``Protective Groups in Organic Chemistry'', editado por J W F McOmie, Plenum Press (1973) y ``Protective Groups in Organic Synthesis'', 2ª edición, T W Greene & P G M Wutz, Wiley-Interscience (1991).

Los especialistas en la materia apreciarán también que aunque tales derivados protegidos de compuestos de fórmula I pueden no poseer actividad farmacológica como tales, pueden ser administrados por vía parenteral u oral y ser metabolizados después en el organismo para formar compuestos de la invención, los cuales son farmacológicamente activos. Tales derivados pueden ser descritos, por lo tanto, como ``profármacos''. Todos los profármacos de compuestos de fórmula I están incluidos dentro de la extensión de la invención.

Los derivados protegidos de compuestos de fórmula I que son particularmente útiles como profármacos incluyen compuestos de fórmula XIV.

Uso médico y farmacéutico

Los compuestos de la invención son útiles porque poseen actividad farmacológica. Por lo tanto, están indicados como fármacos.

Conforme a otro aspecto de la invención, se proporcionan de este modo los compuestos de la invención para uso como fármacos.

En particular, los compuestos de la invención son potentes inhibidores de trombina como se demostrará, por ejemplo, en los ensayos que se describirán más adelante.

De este modo, se espera que los compuestos de la invención sean útiles en aquellas condiciones donde se requiera la inhibición de trombina.

De este modo, los compuestos de la invención están indicados en el tratamiento o profilaxis de trombosis o hipercoagulabilidad en la sangre y tejidos de animales, incluido el ser humano.

Los compuestos de la invención están indicados, además, en el tratamiento de condiciones donde hay un indeseable exceso de trombina sin signos de hipercoagulabilidad, por ejemplo en enfermedades neurodegenerativas tales como la enfermedad de Alzheimer.

Estados particulares de enfermedad que pueden ser mencionados incluyen el tratamiento y/o profilaxis de trombosis venosa y embolia pulmonar, trombosis arterial (p. ej., en infarto de miocardio, angina inestable, choque basado en trombosis y trombosis arterial periférica) y embolia sistémica generalmente auricular durante la fibrilación arterial o del ventrículo izquierdo después de infarto de miocardio transmural.

Además, se espera que los compuestos de la invención tengan utilidad en la profilaxis de la reoclusión (a saber, trombosis) tras trombólisis, angioplasia trans-luminal percutánea (PTCA), operaciones de bypass coronario, microcirugía y cirugía vascular en general.

Indicaciones adicionales incluyen el tratamiento y profilaxis de coagulación intravascular diseminada causada por bacterias, traumatismo múltiple, intoxicación o cualquier otro mecanismo; tratamiento anticoagulante cuando la sangre está en contacto con superficies ajenas al cuerpo tales como injertos vasculares, stents vasculares, catéteres vasculares, válvulas prostéticas médicas o biológicas o cualquier otro dispositivo médico; y tratamiento anticoagulante cuando la sangre está en contacto con dispositivos médicos fuera del organismo tal como durante cirugía cardiovascular usando una máquina corazón-pulmón o en hemodiálisis.

Además de sus efectos sobre el proceso de coagulación, es sabido que la trombina activa un gran número de células (tales como neutrófilos, fibroblastos, células endoteliales y células musculares lisas). Por lo tanto, los compuestos de la presente invención pueden ser también útiles para el tratamiento o profilaxis del síndrome de distrés respiratorio idiopático y adulto, fibrosis pulmonar siguiendo a tratamiento con radiación o quimioterapia, choque séptico, septicemia, respuestas inflamatorias, las cuales incluyen, pero no se limitan a, edema, aterosclerosis aguda o crónica tal como enfermedad arterial coronaria, enfermedad arterial cerebral, enfermedad arterial periférica, daños por reperfusión y restenosis tras angioplasia transluminal percutánea (PTCA).

Los compuestos de la presente invención que inhiben tripsina y/o trombina pueden ser útiles también en el tratamiento de la pancreatitis.

Conforme a un aspecto más de la invención, se proporciona un uso de un compuesto de la invención en método de tratamiento de una condición donde se requiere inhibición de trombina, cuyo método comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I como se ha definido anteriormente o una sal del mismo aceptable farmacéuticamente a una persona que padece se, o es susceptible a, tal condición.

Preparaciones farmacéuticas

Los compuestos de la invención se administrarán normalmente por vía oral, subcutánea, bucal, rectal, dérmica, nasal, traqueal, bronquial, por cualquier otra vía parenteral o vía inhalación, en forma de preparaciones farmacéuticas que comprenden el ingrediente activo en forma de una base libre o una sal de adición de ácido orgánico o inorgánico, no tóxica, farmacéuticamente aceptable, en una forma de dosificación aceptable farmacéuticamente. Dependiendo de la alteración y el paciente a tratar y la vía de administración, los composiciones se pueden administrar con dosis variables.

Los compuestos de la invención se pueden combinar también con cualquier agente antitrombótico con un mecanismo de acción diferente, tal como los agentes antiplaquetas ácido acetilsalicílico, ticlopidina, clopidogrel, inhibidores de receptor y/o sintetasa de tromboxano, antagonistas de receptor de fibrinógeno, miméticos de prostaciclina e inhibidores de fosfodiesterasas.

Los compuestos de la invención se pueden combinar, además, con trombolíticos tales como activador de plaminógeno tisular (natural o recombinante), estreptoquinasa, uroquinasa, prouroquinasa, complejo activador anisolado plasminógeno-estreptoquinasa (ASPAC), activadores de plasminógeno de glándula salivar animal y análogos, en el tratamiento de enfermedades trombóticas, en particular infarto de miocardio.

Conforme a un aspecto más de la invención, se proporciona de este modo una formulación farmacéutica que incluye un compuesto de fórmula I como se ha descrito anteriormente en el presente documento o una sal del mismo aceptable farmacéuticamente, en mezcla con una sustancia coadyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptables.

La dosis diaria adecuada de los compuestos de la invención en el tratamiento terapéutico de seres humanos es de aproximadamente 0,001-100 mg/kg de peso corporal en la administración oral y 0,001-50 mg/kg de peso corporal en la administración parenteral.

Los compuestos de la invención tienen la ventaja de que pueden ser más eficaces, menos tóxicos, actuar durante más tiempo, tener un espectro de actividad más amplio, ser más potentes, producir menos efectos secundarios, ser más fácilmente absorbidos que, o que pueden tener otras propiedades farmacológicas útiles superiores a, compuestos conocidos del estado de la técnica.

Ensayos biológicos Ensayo A Determinación del tiempo de coagulación de trombina (TT)

Se incubaron trombina humana (T6769, Sigma Chem Co) en solución tampón, pH 7,4, 100 \mul, y solución de inhibidor, 100 \mul, durante 1 min. Se añadió entonces plasma humano normal mezclado citrado, 100 \mul, y se midió el tiempo de coagulación en un dispositivo automático (KC 10, Amelung).

Se representó el tiempo de coagulación en segundos frente a la concentración de inhibidor, y se determinó el IC_{50}TT.

IC_{50}TT es la concentración de inhibidor que duplica el tiempo de coagulación de trombina para plasma humano.

Ensayo B Determinación del tiempo parcial de tromboplastina activada (APTT)

El APTT se determinó en plasma humano normal citrado mezclado con el reactivo PTT Automated 5 fabricado por Stago. Se añadieron al plasma los inhibidores (10 \mul de solución de inhibidor a 90 \mul de plasma) seguido del reactivo y solución de cloruro cálcico y se determinó el APTT en la mezcla con el uso del analizador de coagulación KC 10, (Amelung) conforme a las instrucciones del productor del reactivo. Se representó el tiempo de coagulación en segundos frente a la concentración de inhibidor en plasma, y se determinó el IC_{50}APTT por interpolación.

Se define el IC_{50}APTT como la concentración de inhibidor en plasma humano que duplica el tiempo de tiempo parcial de tromboplastina activada.

Ensayo C Determinación del tiempo de trombina ex vivo

La inhibición de trombina tras la administración oral o parenteral de los compuestos de la invención se examinaron en ratas conscientes las cuales, uno o dos días antes del experimento, fueron dotadas de un catéter para muestreo de sangre de la arteria carótida. En el día del experimento, se extrajeron muestras de sangre a tiempos fijos después de la administración del compuesto en tubos de plástico que contenían 1 parte de solución de citrato sódico (0,13 moles

\hbox{por l}

) y 9 partes de sangre. Los tubos se centrifugaron para obtener plasma pobre en plaquetas. El plasma se usó para la determinación del tiempo de trombina como se describirá más adelante.

El plasma de rata citrado, 100 \mul, se diluyó con una solución salina, 0,9%, 100 \mul, y se inició la coagulación del plasma por la adición de trombina humana (T6769, Sigma Chem Co, EE.UU.) en una solución tampón, pH 7,4,

\hbox{100   \mu l.}

El tiempo de coagulación se midió en un dispositivo automático (KC 10, Amelung, Alemania).

Cuando se administró un compuesto de fórmula XIV, se estimaron concentraciones del inhibidor activo de trombina de fórmula I adecuado en el plasma de rata con el uso de curvas estándar que relacionaban el tiempo de trombina en el plasma citrado de rata mezclado a concentraciones conocidas del correspondiente inhibidor ``activo'' de trombina disuelto en solución salina.

Ensayo D Determinación de tiempo de trombina en orina ex vivo

Se pusieron ratas conscientes en jaulas de metabolismo durante 24 horas, seguido de la administración oral de compuestos de la invención. Se determinó el tiempo de trombina en la orina recolectada como se describirá más adelante.

Se incubó plasma humano normal citrado mezclado (100 \mul) con la orina de rata concentrada o diluciones salinas de la misma durante un minuto. Entonces, se inició la coagulación del plasma por la administración de trombina humana (T6769, Sigma Chem Company) en una solución tampón (pH 7,4, 100 \mul). El tiempo de coagulación se midió en un dispositivo automático (KC 10, Amelung).

Cuando se administró un compuesto de fórmula XIV, se estimaron concentraciones del inhibidor de trombina activo de fórmula adecuado en la orina de rata con el uso de curvas estándar que relacionaban el tiempo de trombina en el plasma humano normal citrado mezclado a concentraciones conocidas del correspondiente inhibidor ``activo'' de trombina disuelto en orina de rata concentrada (o disoluciones salinas de la misma). Multiplicando la producción total de orina de rata durante el período de 24 h por la concentración media estimada del inhibidor activo anteriormente mencionado en orina, se pudo calcular la cantidad de inhibidor activo excretado.

La invención se explica por medio de los siguientes ejemplos. Cuando cualquier ejemplo de los que siguen no está cubierto por la extensión de las reivindicaciones acompañantes, debe entenderse que tal ejemplo se manifiesta a continuación sólo con propósitos ilustrativos.

Ejemplos Procedimientos experimentales generales

Los espectros de masas se registraron en un espectrómetro de masas Finnigan MAT TSQ 700 de triple cuadrupolo equipado con una interfaz de electropulverización (EM-FAB) y espectrómetro de masas VG Platform II equipado con una interfaz de electropulverización (EM-LC). Las medidas de ^{1}H RMN y ^{13}C RMN se efectuaron en espectrómetros BRUKER ACP 300 y Varian UNITY plus 400 y 500, operando a frecuencias para ^{1}H de 300.13, 399.96 y 499.82 MHz respectivamente y a frecuencias para ^{13}C de 75.46, 100.58 y 125.69 MHz respectivamente.

Ejemplo 1 Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Boc-Aze-OH

A una mezcla de 5,777 g (57 mmol) de ácido L-azetidin-2- carboxílico (H-Aze-OH) y 6,04 g (57 mmol) de carbonato sódico en 50 ml de agua y 100 ml de THF se añadió con agitación, a temperatura ambiente, dicarbonato de di-t-butilo (13,75 g; 63 mmol). Después de 60 h, se eliminó el THF a vacío y la mezcla se diluyó con agua y se acidificó con bisulfato potásico 2M. La extracción con cloruro de metileno seguida de secado (sulfato magnésico) y evaporación del disolvente proporcionó un residuo que se cristalizó en cloruro de metileno:hexano para proporcionar 10,87 g (95%) de cristales incoloros.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 4,85-4,7 (br s, 1), 4,0-3,75 (m, 2), 2,65-2,35 (m, 2), 1,4 (s, 9).

(ii) Boc-Aze-Pab(Z)

A temperatura ambiente, se añadió EDC (13,5 g; 70 mmol) a una mezcla de Boc-Aze-OH (10,87 g; 54 mmol; de la etapa (i) anterior), H-Pab(Z) x HCl (18,31 g; 57 mmol; preparado conforme al método descrito en la solicitud de patente internacional WO 94/29336) y DMAP (9,9 g; 81 mmol) en acetonitrilo (270 ml). Después de 16 h se eliminó el disolvente a vacío y se reemplazó por acetato de etilo. La mezcla se lavó con agua y una solución acuosa de ácido cítrico. La capa orgánica se secó (sulfato magnésico) y el disolvente se eliminó a vacío para proporcionar un residuo que proporcionó Boc-Aze-Pab(Z) (17,83 g) al cristalizar de una mezcla de cloruro de metileno, tolueno, diisopropiléter y éter de petróleo.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,85-7,75 (d, 1), 7,45-7,2 (m, 7), 5,2 (s, 2), 4,7 (t, 1), 4,6-4,4 (m, 2), 3,95-3,8 (``q'', 1), 3,8-3,7 (q, 1), 2,5-2,3 (m, 2), 1,4 (s, 9).

(iii) H-Aze-Pab(Z)

Se disolvió Boc-Aze-Pab(Z) (2,44 g; 5,2 mmol; de la etapa (ii) anterior) en una mezcla de 10 ml de ácido trifluoroacético y 10 ml de cloruro de metileno. Después de 30 minutos, se eliminaron a vacío el disolvente y el ácido trifluoroacético y el residuo se disolvió en cloruro de metileno. La fase orgánica se lavó con solución de carbonato sódico al 10% y se secó (carbonato potásico). La eliminación del disolvente a vacío dio un residuo que proporcionó H-Aze-Pab(Z) (1,095 g; 57%) en forma de cristales incoloros al cristalizar en cloruro de metileno.

^{1}H RMN (300 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,85-7,75 (d, 2), 7,45-7,25 (m, 7), 5,2 (s, 2), 4,5 (s, 2), 4,3 (d, 1), 3,65 (q, 1), 3,4-3,3 (m, 1), 2,7-2,5(m, 1), 2,4-2,2 (m, 1).

(iv) Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

Preparado conforme al método descrito por Kelly y LaCour (Synth. Comm. 22, 859 (1992)) del siguiente modo: a una solución de ácido (R,S)-hexahidromandélico (0,30 g; 1,9 mmol), una cantidad catalítica de DMAP y piridina (0,31 g, 3,9 mmol) en cloruro de metileno (5 ml) se añadió gota a gota TMSCl (0,42 g, 3,9 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. La reacción se enfrió a 0ºC y se añadió una cantidad catalítica de DMF (3 gotas con una jeringa de 2 ml), seguido de cloruro de oxalilo (0,25 g, 2,0 mmol). La reacción se agitó durante 1 h a 0ºC, se añadió una mezcla de H-Aze-Pab(Z) (0,67 g, 1,8 mmol, de la etapa (iii) anterior) y piridina (0,50 g, 6,3 mmol) y se dejó que la reacción se calentara a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Se añadió a la reacción una solución de ácido cítrico en metanol del 10% (6 ml). Después de 30 minutos, se pasó la reacción a un embudo decantador y se diluyó con 30 ml de acetato de etilo y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con una solución saturada de bicarbonato seguido de aguas madres y se secó (Na_{2}SO_{4}). Después de la evaporación y cromatografía de evaporación súbita sobre gel de sílice usando cloruro de metileno:metanol (99:1 a 92:8) como eluyente se obtuvo el compuesto del subtítulo (60 mg, 6%).

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 1,0-1,9 (m, 11H), 2,4- 2,7 (m, 2H), 3,80 (d, 1H), 4,05-4,25 (m, 1H), 4,3-4,5 (m, 2H), 4,85-5,0 (m, 1H), 5,18 (s, 2H), 7,1-7,5 (m, 7H), 7,65-7,8 (m, 2H), 7,86 (bt, 1H, diastereómero menor y/o rotámero), 8,33 (bt, 1H, diastereómero mayor y/o rotámero).

^{13}C RMN (75 MHz; CDCl_{3}): carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,8, 170,6, 168,0 y 164,5.

(v) Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

Se disolvió Ch-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (60 mg; 0,12 mmol, de la etapa (iv) anterior) en etanol (5 ml) y se añadieron 5% de Pd/C y HCl (0,1 ml, conc.). La mezcla se hidrogenó a presión atmosférica durante 2 horas. Después de la filtración y evaporación el producto se purificó mediante HPLC preparativa usando (NH_{4}OAc 0,005M, HOAc 0,005M):CH_{3}CN 4:1 como eluyente. Después de liofilización, se añadió HCl (aq.) y la solución se liofilizó. El rendimiento del producto del título fue de 15 mg (31%).

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O) el espectro era complicado debido a diastereoisómeros y/o rotámeros: \delta 0,7-2,0 (m, 11H), 2,25- 2,4 (m, 1H), 2,65-2,9 (m, 1H), 3,79 (d, 1H, menor), 4,03 (d, 1H, mayor), 4,05-4,15 (m, 2H, menor), 4,35-4,45 (m (bt), 2H, mayor), 4,5-4,6 (m, 2H), 5,20 (m, 1H, menor, la señal mayor solapando con la señal de HOD), 7,5-7,65 (m, 2H), 7,75-7,85 (m, 2H).

^{13}C RMN (75 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros y/o rotámeros): \delta 176,3, 175,4, 173,7, 173,3, 167,2 y 167,0.

Ejemplo 2 Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(iv) a partir de ácido (R)- hexahidromandélico (a partir de 0,60 g, 3,8 mmol) proporcionando 0,15 g (10%).

(ii) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Aze- Pab(Z) (0,12 g, 0,24 mmol, de la etapa (i) anterior). Rendimiento: 52 mg (54%).

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O, el espectro era complicado debido a rotámeros): \delta 0,7-2,0 (m, 11H), 2,25-2,4 (m, 1H), 2,6-2,9 (m, 1H), 3,79 (d, 1H, menor), 4,02 (d, 1H, mayor), 4,05-4,15 (m, 2H, menor), 4,35-4,45 (m (bt), 2H, mayor), 4,5-4,6 (m, 2H), 5,19 (m, 1H, menor, la señal mayor solapando con la señal de HOD), 7,5-7,65 (m, 2H), 7,75-7,85 (m, 2H).

^{13}C RMN (75 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico (rotámeros): \delta 171,9, 170,2, 169,8 y 163,8.

Ejemplo 3 (Et)_{2}C(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) H-Aze-Pab(Z) x 2 HCl

El compuesto del subtítulo se preparó por reacción de Boc-Aze-Pab(Z) (véase Ejemplo 1(ii) anterior) con EtOAc saturado con HCl gaseoso. La mezcla de reacción se evaporó después de media hora para proporcionar H-Aze-Pab(Z) x 2 HCl con rendimiento cuantitativo.

(ii) (Et)_{2}C(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

Una mezcla de ácido dietilglicólico (0,13 g, 0,80 mmol), H-Aze-Pab(Z) x 2 HCl (0,39 g, 0,88 mmol, de la etapa (i) anterior), TBTU (0,28 g, 0,88 mmol) en DMF (15 ml) se enfrió en baño de hielo. Se añadió DIPEA (0,41 g, 3,2 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla resultante se vertió en 500 ml de agua y se extrajo 3 veces con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO_{3} acuoso y agua, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El producto bruto se sometió a cromatografía de evaporación súbita sobre gel de sílice usando cloruro de metileno:THE como eluyente. Rendimiento: 30 mg (8%).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,04 (bt, 1H), 7,77 (d, 2H), 7,40 (d, 2H), 7,35-7,2 (m, 5H), 5,17 (s, 2H), 4,90 (m, 1H), 4,46 (dd, 1H), 4,39 (dd, 1H), 4,3-4,2 (m, 2H), 2,66 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 1,8-1,5 (m, 4H), 0,9-0,75 (m, 6H).

(iii) (Et)_{2}C(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de (Et)_{2}C(OH)-C(O)-Aze- Pab(Z) (30 mg, 0,063 mmol, de la etapa (ii) anterior). Rendimiento: 19 mg (79%).

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O, el espectro era complicado debido a rotámeros): \delta 7,80 (d, 2H), 7,65-7,5 (m, 2H), 5,43 (m, 1H, rotámero menor), 4,90 (m, 1H, rotámero mayor), 4,6-4,5 (m, 3H), 4,11 (m, 1H, rotámero), 3,70 (m, 1H, rotámero), 2,8-2,55 (m, 1H), 2,35-2,15 (m, 1H), 1,9-1,6 (m, 4H), 1,0-0,75 (m, 6H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (rotámeros): \delta 178,3, 177,4, 175,0, 173,5, 167,2.

Ejemplo 4 (Ph)_{2}C(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) (Ph)_{2}C(OH)-C(O)-Aze-Pab (Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido bencílico (0,18 g, 0,80 mmol). Rendimiento: 0,16 g (35%).

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O): \delta 7,93 (bt, 1H), 7,71 (d, 2H), 7,54-7,15 (m, 17H), 5,14 (s, 2H), 4,89 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,48 (dd, 1H), 4,35 (dd, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,44 (m, 1H), 2,44 (m, 1H), 2,23 (m, 1H).

(ii) (Ph)_{2}C(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de (Ph)_{2}C(OH)-C(O)-Aze- Pab(Z) (0,16 g, 0,28 mmol, de la etapa (i) anterior). Rendimiento: 90 mg (68%).

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O) el espectro era complicado debido a rotámeros: \delta 7,65-7,55 (m, 2H), 7,4-7,1 (m, 12H), 5,13 (m, 1H, rotámero menor), 4,77 (m, 1H, rotámero mayor), 4,43 (d, 1H), 4,40 (d, 1H), 4,12 (m, 1H, rotámero mayor), 4,05-3,9 (m, 1H, más 1 H rotámero menor), 2,55 (m, 1H, rotámero menor), 2,39 (m, 1H, rotámero mayor), 2,08 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (rotámeros): \delta 175,7, 174,9, 174,6, 173,4, 167,1.

Ejemplo 5 n-C_{6}H_{13}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) n-C_{6}H_{13}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-2-hidroxioctanoico (0,13 g, 0,80 mmol, proporcionando 0,25 g (61%)).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,24 (bt, 1H, un diastereómero), 7,89 (bt, 1H, un diastereómero), 7,8-7,75 (m, 2H), 7,4-7A5 (m, 2H), 7,35-7,25 (m, 5H), 5,18 (s, 2H), 4,95-4,85 (m, 1H), 4,55-4,35 (m, 2H), 4,2-4,0 (m, 3H), 2,8-2,65 (m, 1H), 2,6-2,4 (m, 1H), 2,0-1,2 (m, 10H), 0,9-0,8 (m, 3H).

(ii) n-C_{6}H_{13}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de n-C_{6}H_{13}- (R,S)CH(OH)-C(O)-Aze- Pab(Z) (0,14 g, 0,28 mmol, de la etapa (i) anterior). Rendimiento: 88 mg (78%).

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 7,7-7,6 (m, 2H), 7,45- 7,3 (m, 2H), 5,03 (m, 1H, un diastereómero), 4,74 (m, 1H, un diastereómero solapando con la señal de agua), 4,45-4,35 (m, 2H), 4,3-4,1 (m, 2H), 4,0-3,8 (m, 1H), 2,65-2,45 (m, 1H), 2,3-2,1 (m, 1H), 1,6-0,9 (m, 10H), 0,75-0,65 (m, 3H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O): carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros y rotámeros): \delta 176,8, 176,4, 176,0, 173,5, 173,3, 173,2, 167,2.

Ejemplo 6 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab (i) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R)-mandélico (0,12 g, 0,8 mmol). El producto bruto (0,315 g) se purificó mediante cromatografía de evaporación súbita (gel de Si; THF:EtOAc (6:4)). Rendimiento: 0,128 g (32%) de polvo blanco de pureza 91,2% (HPLC).

^{1}H RMN (499.803 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,14 (t, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,42 (d, 2H), 7,33 (t, 4H), 7,28 (m, 3H), 7,22, (d, 2H), 5,18 (s, 2H), 4,92 (s, 1H), 4,79 (dd, 1H), 4,54 (s ancho, 1H), 4,39 (d, 2H), 4,00 (q, 1H), 3,53 (q, 1H), 2,48 (m, 1H), 2,24 (m, 1H), 2,19 (s ancho, 1H).

^{13}C RMN (125.688 MHz; CDCl_{3}), (carbonos carboxílico y amidino): \delta 173, 1, 170,3, 168,1, 164,5.

(ii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab

Se disolvió Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (107 mg, 0,214 mmol; de la etapa (i) anterior) en THF:agua (2:1), se añadieron 37 mg de Pd/C (4% mol de Pd) y la solución resultante se hidrogenó durante 6 horas. La solución se filtró a través de hyflo y se evaporó a sequedad. Al polvo blanco resultante se le añadieron 20 ml de agua acidificada con 0,42 ml de HCl 1M (aprox. 2 equivalentes). La solución resultante se lavó con 5 ml de EtOAc y 10 ml de dietiléter y se liofilizó dos veces. Rendimiento: 72 mg (84%) de polvo blanco. Pureza: 91% (HPLC).

^{1}H RMN (399.968 MHz; D_{2}O): \delta 7,57 (t, 2H), 7,36 (d, 1H), 7,32 (s, 3), 7,27 (s, 1H), 7,25 (d, 1H), 7,19 (m, 1H), 5,17 (s, 1H, mayor), 5,09 (s, 1H, menor), 5,00 (dd, 1H, menor), 4,38 (s, 2, mayor), 4,20 (dd, 1H, mayor), 3,98 (dd, 2H, menor), 3,97 (m, 1H, mayor), 3,75 (dd, 1H), 2,68 (s, 1H, menor), 2,65 (m, 1H, menor), 2,35 (m, 1H, mayor), 2,12 (m, 1H, mayor), 2,03 (m, 1H, menor).

^{13}C RMN (111.581 MHz; D_{2}O) (carbonos carbonílico y amidino): \delta 174,5, 173,2, 172,5, 172,4.

Ejemplo 7 Ph(4-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph(4-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-4- trifluorometilmandélico (0,19 g, 0,88 mmol). La cromatografía de evaporación súbita (gel de Si; CH_{2}Cl_{2}:THF (6:4)) proporcionó 0,13 g (26%) de polvo blanco.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 9,6-9,2 (b, 1H), 8,1 (bt, 1H, diastereómero), 7,9 (bt, 1H, diastereómero), 7,7-7,1 (m, 13H), 5,16 (s, 2H), 5,07 (s, 1H, diastereómero), 4,98 (s, 1H, diastereómero), 4,80 (m, 1H), 4,5-4,2 (m, 2H), 4,1-3,5 (m, 2H), 2,5-2,2 (m, 2H).

^{13}C RMN (75 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros): \delta 173,3, 172,4, 170,3, 168,3, 164,4.

(ii) Ph(4-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

Preparado conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ph(4-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (133 mg, 0,23 mmol, de la etapa (i) anterior) para proporcionar el compuesto del título en forma de polvo cristalino blanco. Rendimiento 77 mg (70%).

^{1}H RMN 300 MHz; D_{2}O): \delta 8,84 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 8,73 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 8,52 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 7,8-7,4 (m, 8H), 5,46, 5,44, 5,30, 5,20 (singletes, 1H, diastereómeros/rotámeros), 4,96 (m, 1H, diastereómero/rotámero; otras señales del mismo protón solapando con la señal de HDO), 4,6-4,0 (m, 4H), 2,9-2,5 (m, 1H), 2,4-2,1 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O): carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros y rotámeros): \delta 173,6, 173,3, 173,1, 173,0, 172,9, 167,0.

Ejemplo 8 Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método 3(ii) a partir de ácido (R,S)-4-metoximandélico

\hbox{(0,18  g,}

1,0 mmol). La cromatografía de evaporación súbita (gel de Si; EtOAc:MeOH (95:5)) proporcionó 27 mg (17%) de polvo blanco.

Relación de diastereómeros 85:15; señales del diastereómero principal: ^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,19 (m, 1H), 7,80 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,4-7,2 (m, 7H), 7,13 (d, 2H, rotámero menor), 6,90 (d, 2H, rotámero mayor), 6,82 (d, 2H, rotámero menor), 5,21 (s, 2H), 4,9-4,85 (m, 2H, un singlete del mismo a 4,89 (1H)), 4,6-4,4 (m, 2H), 4,02 (m, 1H), 3,81 (s, 3H), 3,55 (m, 1H), 2,62 (m, 1H), 2,32 (m, 1H).

^{13}C RMN (100 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico: \delta 173,6, 170,3, 167,8, 164,6.

(ii) Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ph(4-OMe)-(R,S)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (27 mg, 0,05 mmol, de la etapa (i) anterior). Rendimiento 15 mg (68%) de polvo blanco.

Relación de diastereómeros 85:15; señales del diastereómero principal:

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 7,7-7,6 (m, 2H), 7,5-7,3 (m, 4H), 7,18 (d, 2H, rotámero), 6,97 (d, 2H, rotámero), 6,9-6,85 (m, 2H, rotámero), 5,19 (s, 1H, rotámero), 5,14 (s, 1H, rotámero), 5,01 (m, 1H, rotámero), 4,76 (m, 1H, rotámero), 4,48 (s, 1H), 4,3-3,7 (m, 7H, 2 singletes del mismo a 3,78, 3,77 (3H)), 2,73 (m, 1H, rotámero) 2,46 (m, 1H, rotámero), 2,3-2,0 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (rotámeros): \delta 175,5, 174,1, 173,3, 173,1, 167,1, 167,0.

Ejemplo 9 Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-4- hidroximandélico (0,34 g, 2,0 mmol). La cromatografía de evaporación súbita (gel de Si; EtOAc/EtOH (9/1)) proporcionó 0,18 g (17%).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,70 (d, 2H, diastereómero menor/rotámero), 7,64 (d, 2H, diastereómero mayor/rotámero), 7,5-7,0 (m, 7H), 6,82 (d, 2H, diastereómero mayor/rotámero), 6,67 (d, 2H, diastereómero menor/rotámero), 6,43 (d, 2H, diastereómero mayor/rotámero), 5,30, 5,26, 5,22, 5,21 (singletes, 2H, diastereómeros/rotámeros), 4,95-4,8 (m, 2H), 4,15-4,05 (m, 2H), 4,0-3,7 (m, 2H), 2,7-2,5 (m, 2H).

(ii) Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ph(4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)- Aze-Pab(Z) (94 mg, 0,18 mmol, de la etapa (i) anterior). Rendimiento 37 mg (49%) de polvo blanco.

^{1}H RMN (600 MHz; D_{2}O): \delta 7,76, 7,72, 7,71, 7,68, 7,52, 7,47, 7,40, 7,35, 7,25, 7,19, 7,11, 6,97, 6,82, 6,76, 6,73, 6,71 (dobletes, 8H, diastereómeros/rotámeros), 5,19 (s, 1H, diastereómero/rotámero), 5,17 (s, 1H, diastereómero/rotámero), 5,14 (s, 1H, diastereómero/rotámero), 5,01 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 4,88 (m, 1H, diastereómero/rotámero, otras señales del mismo protón solapando con la señal de HDO), 4,6-3,8 (m, 4H), 2,77 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 2,62 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 2,49 (m, 1H, diastereómero/rotámero), 2,3-2,1 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros y rotámeros): \delta 175,9, 174,8, 174,3, 173,3, 173,2, 172,9, 167,1.

Ejemplo 10 Ph-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R)-fenil-láctico (0,25 g, 1,5 mmol). La cromatografía de evaporación súbita (gel de Si; CH_{2}Cl_{2}:THF (6:4)) proporcionó 0,28 g (36%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,19 (m, 1H), 7,72 (d, 2H), 7,43 (d, 2H), 7,4-7,1 (m, 10H), 5,19 (s, 2H), 4,73 (m, 1H), 4,45-4,25 (m, 2H), 4,19 (m, 1H), 3,86 (m, 1H), 3,18 (m, 1H), 3,0-2,9 (m, 2H), 2,42 (m, 1H), 2,14 (m, 1H).

^{13}C RMN (125 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,5, 170,2, 167,9, 164,3.

(ii) Ph-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ph-CH_{2}-(R)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (0,22 g, 0,43 mmol, de la etapa (i) anterior) para proporcionar 101,5 mg (57%) de polvo blanco.

^{1}H RMN (600 MHz; D_{2}O): \delta 7,73 (d, 2H, rotámero mayor), 7,62 (d, 2H, rotámero menor), 7,5-7,4 (m, 2H), 7,4-7,2 (m, 5H), 7,10 (m, 2H, rotámero menor), 4,71 (m, 1H, rotámero mayor), 4,5-4,4 (m, 2H), 4,34 (m, 1H, rotámero menor), 4,14 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,05-2,95 (m, 2H, rotámero mayor), 2,9-2,7 (m, 2H, rotámero menor), 2,65-2,5 (m, 1H, rotámero menor), 2,5-23 (m, 1H, rotámero mayor), 2,3-2,1 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (rotámeros): \delta 175,9, 175,0, 173,7, 173,2, 167,1, 166,8.

Ejemplo 11 Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab (i) Boc-Pic-OH

Preparado conforme a M. Bodanszky y A. Bodanszky (``The Practise of Peptide Synthesis'', Editorial Springer) usando THF en lugar de dioxano como disolvente.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 5,0-4,8 (br d, 1H), 4,0 (br s, 1H), 3,0 (br s, 1H), 2,20 (d, 1H), 1,65 (m, 2H), 1,5-1,3 (s+m, 13H).

(ii) Boc-Pic-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(ii) anterior a partir de Boc-Pic-OH (2,02 g, 8,8 mmol, de la etapa (i) anterior proporcionando 1,59 g (44%).

EM-FAB m/z 495 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,83 (d, 2H), 7,43 (d, 2H), 7,36-7,11 (m, 5H), 6,52 (bs, NH), 5,20 (s, 2H), 4,81-4,72 (m, 1H), 4,61-4,34 (m, 2H), 4,10-3,90 (m, 1H), 2,79-2,64 (m, 1H), 2,36-2,25 (m, 1H), 1,7,-1,3 (m, 14H).

(iii) H-Pic-Pab(Z) x 2 HCl

Se disolvió Boc-Pic-Pab(Z) (1,59 g, 325 mmol, de la etapa (ii) anterior) en 100 ml de EtOAc saturado con HCl. La mezcla de reacción se evaporó después de media hora para proporcionar el producto del título con rendimiento cuantitativo.

EM-FAB m/z 395 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O): \delta 7,82 (d, 2H), 7,63-7,41 (m, 7H), 5,47 (s, 2H), 4,69-4,49 (sistema AB centrado en \delta 4,59, 2H), 4,03 (dd, 1H), 3,52 (bd, 1H), 3,10 (dt, 1H), 2,29 (dd, 1H), 2,08-1,61 (m, 5H).

(iv) H-Pic-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se generó disolviendo el diclorhidrato de la etapa (iii) anterior en NaOH 2M seguido de extracción con CH_{2}Cl_{2} y evaporación del disolvente orgánico.

(v) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R)- hexahidromandélico (0,152 g, 0,96 mmol) y H-Pic-Pab(Z) (0,417 g, 1,06 mmol, de la etapa (iv) anterior). La cromatografía de evaporación súbita (gel de Si; primero EtOAc:tolueno (3:2), después EtOAc) proporcionó 90 mg (18%).

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,82 (d, 2H), 7,5-7,2 (m, 7H), 6,63 (t, parte X del sistema ABX, NH), 5,21 (s, 2H), 5,14 (d, 1H), 4,46 (sistema ABX, 2H), 4,26 (s aparente, 1H), 3,61 (bd, 1H), 3,52 (bd, 1H), 3,06 (dt, 1H), 2,30 (bd, 1H), 1,92-1,0 (m, 14H), 0,95-0,8 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,8, 170,3, 167,8 y 164,6.

(vi) Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ch-(R)CH(OH)-C(O)-Pic- Pab(Z) (a partir de 59 mg, 0,11 mmol, de la etapa (v) anterior) proporcionando 19 mg (40%).

EM-FAB m/z 401 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O) el espectro era complicado debido a rotámeros: \delta 7,91-7,72 (m, rotámero mayor y menor, 2H), 7,58 (d, rotámero menor, 2H), 7,53 (d, rotámero mayor, 2H), 5,17 (bs aparente, rotámero mayor, 1H), 4,66-4,28 (m, 3H), 3,96 (bd, rotámero mayor, 1H), 3,26 (bt, rotámero mayor, 1H), 3,05-2,88 (m, rotámero menor, 1H), 2,39-2,20 (m, 1H), 2,0-0,75 (m, 16H).

^{13}C RMN (75 MHz; MeOD), carbonos amidino y carbonílico a \delta 175,86, 173,20, 168,53.

Ejemplo 12 Ch-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab x HCl (i) Ch-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)OH

Una solución de ácido fenil-láctico (2,57 g) y rodio sobre alúmina (0,75 g) en MeOH (170 ml) se hidrogenó en atmósfera de H_{2} a 3 atmósferas durante 2 días. La mezcla se filtró a través de hyflo y se evaporó a sequedad para proporcionar el producto con rendimiento cuantitativo.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 4,23 (bdd, 1H), 3,24 (s aparente, OH), 1,68 (bd, 1H), 1,63-1,43 (m, 6H), 1,43-1,31 (m, 1H), 1,21-1,0 (m, 3H), 0,95-0,75 (m, 157 mg (0,91 mmol) 2H).

(ii) Ch-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(iv) a partir de H-Pic-Pab(Z) x 2 HCl (353 mg, 0,76 mmol, véase Ejemplo 11(iii) anterior) y Ch-CH_{2}- (R)CH-(OH)- COOH (157 mg, 0,91 mmol, de la etapa (i) anterior). El producto se sometió a cromatografía de evaporación súbita (gel de Si, EtOAc:tolueno (7:3)) proporcionando 92 mg (22%).

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,72 (d, 2H), 7,46-7,1 (m, 7H), 6,90 (t, NH), 5,18 (s, 2H), 5,07 (d, 1H), 4,45 (bd, 1H), 4,37 (d, 2H), 3,73-3,47 (m, 2H), 3,10 (bt, 1H), 2,24 (bd, 1H), 2,15-2,0 (m, 1H), 1,90 (bd, 1H), 1,80-1,05 (m, 12H), 1,05-0,75 (m, 3H).

^{13}C RMN (75 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,88, 170,43, 168,04 y 164,58.

(iii) Ch-CH_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Pic-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de Ch-CH_{2}- (R)CH(OH)-C(O)-Pic- Pab(Z) (62 mg, 0,113 mmol, de la etapa (ii) anterior) proporcionando 47 mg (92%).

EM-FAB m/z 415 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O) el espectro era complicado debido a rotámeros: \delta 7,85-7,71 (m, rotámero mayor y menor, 2H), 7,56 (d, rotámero menor, 2H), 7,50 (d, rotámero mayor, 2H), 5,12 (bs aparente, rotámero mayor, 1H), 4,68-4,25 (m, 3H, parcialmente oculto por HDO), 3,80 (bd, rotámero mayor, 1H), 3,24 (bt, rotámero mayor, 1H), 2,89 (bt, rotámero menor, 1H), 2,25 (m, 1H), 1,92-0,82 (m, 17H), 0,60-0,40 (m, rotámero mayor, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (rotámeros): \delta 177,10, 173,88, 173,07, 167,24.

Ejemplo 13 Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) H-Aze-Ome x HCl

Se enfrió MeOH (200 ml) a -40ºC bajo una atmósfera de argón. Se añadió gota a gota cloruro de tionilo (47,1 g, 0,396 mol) y la mezcla de reacción se agitó a -10ºC durante 35 minutos. Se añadió H-Aze-OH ( 10,0 g, 0,099 mol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Después, la mezcla de reacción se evaporó para proporcionar 16,1 g (100%) del compuesto del título.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 5,12-5,24 (m, 1H), 4,08-4,29 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 2,65-2,87 (m, 2H).

(ii) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Ome

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al procedimiento descrito en el Ejemplo 1(ii) a partir de ácido (R)-(-)-\alpha-metoxifenilacético (0,60 g, 3,6 mmol) y H-Aze-Ome x HCl (0,55 g, 3,6 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 0,32 g (34%).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,29-7,48 (m, 5H), 4,71-5,08 (m, 2H), 3,92-4,31 (m, 2H), 3,69-3,83 (m, 3H), 3,19-3,46 (m, 3H), 2,13-2,65 (m, 2H).

(iii) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-OH

A una solución de Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Ome (0,32 g, 1,2 mmol, de la etapa (ii) anterior) en THF (10 ml) se añadió una solución de hidróxido de litio monohidrato (0,071 g, 1,7 mmol) en H_{2}O (6 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 3 h y se evaporó a continuación. El residuo se disolvió en H_{2}O y se extrajo con tolueno. El pH de la capa de H_{2}O se ajustó a 3 con HCl acuoso seguido de una extracción con acetato de etilo (4 veces). La capa orgánica combinada se evaporó para proporcionar 0,28 g (92%) del compuesto del título.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,30-7,50 (m, 5H), 4,95-5,10 (m, 1H), 4,80 (s, 1H), 4,10-4,35 (m, 2H), 3,40 (s, 3H), 2,40-2,80 (m, 2H).

(iv) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al procedimiento descrito en el Ejemplo 1(ii) a partir de H-Pab(Z) x HCl (0,36 g, 1,0 mmol) y Ph-CH(OMe)-C(O)-Aze-OH (0,25 g, 1,0 mmol, de la etapa (iii) anterior) para proporcionar 0,39 g (76%) en forma de polvo blanco.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,29 (m, 1H), 7,77 (d, 2H), 7,45 (d, 2H), 7,4-7,2 (m, 10H), 5,22 (s, 2H), 4,93 (m, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,44 (m, 2H), 4,15 (m, 2H), 3,35 (s, 3H), 2,69 (m, 1H), 2,42 (m, 1H).

(v) Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ph-(R)CH(OMe)-C(O)-Aze- Pab(Z) (0,15 g, 0,29 mmol, de la etapa (iv) anterior) proporcionando 50,4 mg (41%) en forma de polvo blanco.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD; el hidrógeno en \alpha de Aze y el hidrógeno bencílico del mandelato fueron oscurecidos por la señal de CD_{3}OH): \delta 7,8-7,6 (m, 2H), 7,6-7,4 (m, 2H), 7,4-7,1 (m, 5H), 4,6-4,4 (m, 2H), 4,3-4,0 (m, 2H), 3,29 (s, 3H), 2,7-2,5 (m, 1H), 2,4-2,1 (m, 1H).

Ejemplo 14 Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3- metoximandélico (270 mg, 1,5 mmol) proporcionando 340 mg (43%); relación de diastereómeros 1:1.

EM-FAB m/z 531 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,14 (m, 1H, diastereómero), 7,87 (m, 1H, diastereómero), 7,8-7,0 (m, 10H), 6,9-6,7 (m, 3H), 5,16 (s, 2H), 4,96 (s, 1H, diastereómero), 4,88 (s, 1H, diastereómero), 4,85-4,7 (m, 1H), 4,4-4,2 (m, 2H), 4,05-3,9 (m, 1H), 3,71 (s, 3H, diastereómero), 3,71 (m, 1H, diastereómero), 3,66 (s, 3H, diastereómero), 3,58 (m, 1H, diastereómero), 2,5-2,35 (m, 1H), 2,32 (m, 1H, diastereómero), 2,20 (m, 1H, diastereómero).

^{13}C RMN (100 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros): \delta 173,9, 173,0, 170,5, 170,4, 168,3, 168,2, 164,5.

(ii) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) a partir de Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (230 mg, 0,43 mmol, de la etapa (i) anterior, proporcionando 126 mg (67%) de producto. Relación de diastereómeros 1:1.

EM-FAB m/z 397 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros y algunas impurezas): \delta 7,6-7,1 (m, 5H), 6,9-6,6 (m, 3H), 5,2-4,7 (m, 1-2H), 4,4-3,7 (m, 4-5H), 3,63(s, 3H, diastereómero/rotámero), 3,55 (m, 3H, diastereómero/rotámero), 2,5-2,3 (m, 1H), 2,2-2,0 (m, 1H).

^{13}C RMN (75 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico (diastereómeros/rotámeros): \delta 175,8, 175,4, 174,8, 174,6, 168,5.

Ejemplo 15 Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-3-metilmandélico

Una mezcla de 3-metilbenzaldehído (12,0 g, 0,1 mol) y cloruro de benciltrietilamonio (1,23 g, 0,005 mol) en CHCl_{3} (16 ml) se agitó a 56ºC. Se añadió gota a gota a la mezcla una solución de NaOH (25 g) en H_{2}O (25 ml). Una vez completada la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con H_{2}O (para llegar a 400 ml) y se extrajo con dietiléter (3 x 50 ml). El pH de la mezcla se ajustó a 1 con H_{2}SO_{4} (conc.) seguido de una extracción con dietiléter (6 x 50 ml). La capa orgánica combinada se secó (MgSO_{4}) y se evaporó. El producto bruto (11,6 g) se recristalizó en tolueno para proporcionar 8,47 g (51%) del compuesto del título.

EM-LC m/z 165 (M-1)^{-}, 331(2M-1)^{-}.

^{1}H RMN (600 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,10-7,28 (m, 4H), 5,08 (s, 1H), 2,32 (s, 3H).

(ii) Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3- metilmandélico (0,22 g, 13 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 0,37 g (54%).

EM-LC m/z 515 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,11-8,21 (t, NH), 6,97-7,89 (m, 13H), 5,18-5,24 (m, 2H), 4,83-5,00 (m, 2H), 4,37-4,58 (m, 2H), 3,50-4,11 (m, 2H), 2,39-2,71 (m, 2H), 2,27-2,38 (m, 3H).

(iii) Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

Una mezcla de Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,105 g, 0,20 mmol, de la etapa (ii) anterior), ácido acético (0,012 g, 0,20 mmol) y Pd/C (5%, 0,14 g) en etanol (12 ml) se hidrogenó a presión atmosférica durante 6 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se evaporó. El producto bruto (97 mg) se disolvió en H_{2}O y se liofilizó resultando un producto pegajoso. El producto se disolvió en HOAc y se liofilizó de nuevo sin mejora alguna. El producto se disolvió en H_{2}O, se filtró a través de un filtro de HPLC y se liofilizó. El rendimiento fue de 67 mg (76%) del compuesto del título.

EM-LC m/z 381 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O,): \delta 6,89-7,72 (m, 8H), 4,79-5,23 (m, 2H), 3,76-4,51 (m, 4H), 2,38-2,82 (m, 2H), 2,15-2,27 (m, 3H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,21, 175,43, 174,38, 173,94, 173,23, 173,06, 172,16, 167,00.

Ejemplo 16 Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-3-etoximandélico

Se disolvió ácido (R,S)-3-hidroximandélico (0,712 g, 4,236 mmol) en acetonitrilo (15 ml). Se añadió gota a gota K_{2}CO_{3} (2,34 g, 16,94 mmol) y yoduro de etilo (1,03 ml, 12,71 mmol). La mezcla de reacción se puso a reflujo durante 2 h y a continuación se evaporó. El residuo se disolvió en H_{2}O (25 ml) y acetona (6 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. La mezcla de reacción se evaporó y la capa de H_{2}O resultante se extrajo con acetato de etilo. El pH de la capa de H_{2}O se ajustó a 2 con KHSO_{4} acuoso y se añadió más H_{2}O para disolver sales formadas. La solución de H_{2}O se extrajo con acetato de etilo (3 veces). La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El residuo se sometió a HPLC preparativa (25% de acetonitrilo:75% HOAc 0,1M) y las fracciones que contenían producto se evaporaron. La capa de H_{2}O resultante se extrajo con acetato de etilo (3 veces) y la capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El rendimiento fue 182 mg (22%) del compuesto del subtítulo.

EM-LC m/z 195 (M-1)^{-}, 391 (2M-1)^{-}, 587 (3M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 6,80-7,27 (m, 4H), 5,08 (s, 1H), 3,99-4,13 (m, 2H), 1,34-1,40 (t, 3H).

(iii) Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3- etoximandélico (0,178 g, 0,907 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 259 mg (52%).

EM-LC m/z 545 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,77-7,77 (m, 13H), 5,16-5,21 (d, 2H), 4,78-4,99 (m, 2H), 4,27-4,51 (m, 2H), 3,53-4,07 (m, 4H), 2,21-2,60 (m, 2H), 1,29-1,41 (m, 3H).

(iii) Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3-OEt)-(R,S)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (0,182 g 0,33 mmol, de la etapa (ii) anterior) proporcionando 157 mg (100%).

EM-LC m/z 411 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,71-7,79 (m, 2H), 7,49-7,60 (m, 2H), 7,19-7,30 (m, 1H), 6,94-7,02 (m, 2H), 6,81-6,90 (m, 1H), 5,09-5,18 (m, 1H), 4,74-4,81 (m, 1H), 4,39-4,62 (m, 2H), 3,93-4,35 (m, 4H), 2,10-2,61 (m, 2H), 1,32-1,40 (m, 3H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 180,68, 174,30, 173,50, 173,07, 172,44, 172,26.

Ejemplo 17 Ph(3-OPr(n))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-3-aliloximandélico

Se disolvió ácido (R,S)-3-hidroximandélico (0,504 g, 3,0 mmol) en acetona seca (25 ml) en atmósfera de nitrógeno. Se añadió bromuro de alilo (0,907 g, 7,5 mmol) y K_{2}CO_{3} sólido(1,037 g, 7,5 mmol) y la mezcla de reacción se agitó en atmósfera de nitrógeno durante 16 h. La mezcla de reacción se evaporó a continuación. El residuo se disolvió en H_{2}O (25 ml) y acetona (6 ml) y la mezcla se agitó durante 2 h (la reacción fue seguida por HPLC). La mezcla se evaporó y la capa de agua se extrajo con acetato de etilo. El pH de la capa de agua se ajustó a 2 con KHSO_{4} acuoso y se extrajo con acetato de etilo (3 veces). La capa orgánica combinada se lavó con H_{2}O, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó para proporcionar el producto del subtítulo con un rendimiento de 0,175 g (28%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,87-7,30 (m, 4H), 5,97-6,10 (m, 1H), 5,26-5,44 (m, 2H), 5,20 (s, 1H), 4,51-4,55 (d, 2H).

(ii) Ph(3-OCH_{2}CH=CH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3- aliloximandélico (0,167 g, 0,8 mmol), de la etapa (i) anterior) proporcionando 260 mg (58%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,09-8,17 (t, NH), 6,79-7,87 (m, 13H), 5,94-6,09 (m, 1H), 5,20-5,44 (m, 4H), 4,86-5,02 (m, 2H), 4,32-4,62 (m, 4H), 3,54-4,15 (m, 2H), 2,30-2,74 (m, 2H).

(iii) Ph(3-OPr(n))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) a partir de Ph(3- OCH_{2}CH=CH_{2})- (R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,06 g, 0,1 mmol, de la etapa (ii) anterior) proporcionando 47 mg (97%).

EM-LC m/z 425 (M+1)^{+}, 423 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 6,70-7,71 (m, 8H), 4,70- 5,25 (m, 2H), 3,78-4,53 (m, 6H), 2,05-2,80 (m, 2H), 1,56-1,75 (m, 2H), 0,82-0,95 (m, 3H).

Ejemplo 18 Ph(3-OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-3-isopropoximandélico

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 16(i) anterior a partir de ácido (R,S)-3-hidroximandélico (0,70 g, 4,16 mmol, Cs_{2}CO_{3} (5,87 g, 16,65 mmol) y yoduro de isopropilo (1,25 ml, 12,49 mmol) proporcionando 62 mg (7%).

EM-LC m/z 209 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 6,81-7,25 (m, 4H), 5,08 (s, 1H), 4,53-4,64 (m, 1H), 1,28-1,32 (d, 6H).

(ii) Ph(3-OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3-isopropoximandélico (0,063 g, 0,3 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 60 mg (34%).

EM-LC m/z 559 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,75-7,79 (m, 13H), 5,18-5,24 (m, 2H), 4,81-4,99 (m, 2H), 4,31-4,58 (m, 3H), 3,97-4,15 (m, 1H), 3,55-3,77 (m, 1H), 2,24-2,64 (m, 2H), 1,23-1,33 (m, 6H).

(iii) Ph(3-OPr(iso))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3- OPr(iso))-(R,S)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (0,05 g, 0,090 mmol, de la etapa (ii) anterior) proporcionando 41 mg (94%).

EM-LC m/z 425 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 6,81-7,80 (m, 8H), 5,08-5,18 (m, 1H), 4,74-4,80 (m, 1H), 4,53-4,64 (m, 2H), 4,41-4,51 (m, 1H), 3,93-4,35 (m, 2H), 2,23-2,60 (m, 2H), 1,25-1,32 (m, 6H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,10, 173,60, 173,15, 172,48, 166,39.

Ejemplo 19 Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-2-metoximandélico (0,18 g, 1,0 mmol) proporcionando 80 mg (17%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,16-8,22 (t, NH), 6,81-7,85 (m, 13H), 5,16-5,20 (m, 2H), 4,79-4,91 (m, 1H), 4,35-4,49 (m, 2H), 3,84-4,02 (m, 2H), 3,63-3,80 (m, 3H), 3,32-3,56 (m, 1H), 2,21-2,57 (m, 2H).

(ii) Ph(2-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(2-OMe)- (R,S)CH(OH)-C(O)- Aze-Pab(Z) (0,08 g, 0,15 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 45 mg (71%).

EM-FAB m/z 397 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 6,83-7,70 (m, 8H), 4,71- 4,97 (m, 1H), 4,34-4,51 (m, 2H), 3,87-4,22 (m, 3H), 3,67-3,75 (m, 3H), 2,00-2,74 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 179,96, 176,28, 174,97, 174,50, 173,44, 173,39, 173,29, 173,10, 167,12.

Ejemplo 20 Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3,5-dimetoximandélico (0,21 g, 1,0 mmol, preparado conforme al método descrito en Synthesis (1974) 724) proporcionando 0,31 g (62%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,11-8,16 (t, NH), 7,17-7,86 (m, 9H), 6,41-6,49 (m, 3H), 5,21-5,24 (d, 2H), 4,84-5,03 (m, 2H), 4,29-4,66 (m, 2H), 3,67-4,17 (m, 8H), 2,32-2,72 (m, 2H).

(ii) Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3,5-diOMe)- (R,S)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (0,15 g, 0,27 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 120 mg (100%).

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,34-7,75 (m, 4H), 6,44- 6,66 (m, 3H), 4,67-5,12 (m, 1H), 3,97-4,55 (m, 5H), 3,79 (s, 3H), 3,71-3,74 (m, 3H), 2,14-2,85 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,17, 174,85, 173,92, 173,53, 173,09, 172,98, 182,90, 166,77.

Ejemplo 21 Ph(3-OMe,4OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph(3-OMe,4OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-4-hidroxi-3-metoximandélico (0,20 g, 1,0 mmol) proporcionando 89 mg (16%).

EM-LC m/z 547 (M+1)^{+}, 545 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,07-8,15 (m, NH), 6,64-7,86 (m, 12H), 5,20-5,27 (m, 2H), 3,57-5,00 (m, 9H), 2,31-2,74 (m, 2H).

(ii) Ph(3OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3-OMe,4- OH)-(R,S)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (0,085 g, 0,16 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 57 mg (78%).

EM-FAB m/z 413 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros): \delta 6,66-7,83 (m, 8H), 4,80-5,25 (m, 2H), 3,88-4,59 (m, 4H), 3,68-3,88 (m, 3H), 2,10-2,85 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 182,01, 175,56, 174,43, 174,04, 173,20, 173,05, 166,90, 166,85.

Ejemplo 22 Ph(2-F,5-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph(2-F,5-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-2-fluoro-5-trifluorometilmandélico (0,3 g, 1,2 mmol, preparado conforme al método descrito en Org. Synth. Coll. I, 336) proporcionando 0,32 g (51%).

EM-FAB m/z 587 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,15-7,87 (m, 12H), 5,19-5,30 (m, 2H), 4,87-5,00 (m, 1H), 4,36-4,60 (m, 3H), 4,05-4,20 (m, 1H), 3,60-3,73 (m, 1H), 2,32-2,72 (m, 2H).

(ii) Ph(2-F,5-CF_{3})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(2-F,5- CF_{3})- (R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,15 g, 0,26 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 110 mg (90%).

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,28-7,83 (m, 7H), 5,43- 5,65 (m, 1H), 4,82-5,18 (m, 1H), 3,97-4,56 (m, 4H), 2,14-2,85 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 173,61, 173,33, 173,06, 172,83, 172,68, 172,62, 166,86, 164,27, 161,15, 160,92.

Ejemplo 23 Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-2-hidroxi-2-fenilbutanoico (0,18 g, 1,0 mmol, proporcionando 79 g (15%).

EM-LC m/z 529 (M+1)^{+}, 527 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,27-7,86 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 4,82-4,93 (m, 1H), 4,39-4,57 (m, 2H), 3,84-3,98 (m, 2H), 2,02-2,64 (m, 4H), 0,86-0,93 (m, 3H).

(ii) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph- (R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Aze- Pab(Z) (0,08 g, 0,15 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 62 mg (90%) del compuesto del título.

EM-FAB m/z 395 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 7,27-7,84 (m, 9H), 4,83- 5,35 (m, 1H), 3,89-4,60 (m, 4H), 2,40-2,61 (m, 1H), 1,95-2,30 (m, 3H), 0,78-0,95 (m, 3H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 182,09, 175,79, 175,48, 173,53, 73,23, 167,05.

Ejemplo 24 Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (S)-(+)-2- hidroxi-2- fenilpropiónico (0,20 g, 1,2 mmol, proporcionando 0,17 g (31%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,04-8,14 (t, NH), 7,17-7,80 (m, 14H), 5,20 (s, 2H), 4,76-4,86 (m, 1H), 4,31-4,50 (m, 2H), 3,76-3,94 (m, 2H), 2,19-2,44 (m, 2H), 1,70 (s, 3H).

(ii) Ph-(R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph- (R,S)C(Me)(OH)-C(O)-Aze- Pab(Z) (0,08 g, 0,16 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 48 mg (78%).

Relación de diastereómeros: 85:15.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,30-7,79 (m, 9H), 3,99- 4,82 (m, 5H), 2,09-2,74 (m, 2H), 1,70-1,77 (m, 3H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 176,90, 176,34, 173,89, 173,48, 167,00.

Ejemplo 25 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pac x HOAc (i) Boc-Aze-OSu

Una mezcla de Boc-Aze-OH (5 g, 25 mmol) y HOSu (2,88 g, 25 mmol) en 25 ml de THF se enfrió en baño de hielo. Se añadió EDC (4,3 ml, 25 mmol) y la solución se agitó durante la noche. Se evaporó, se disolvió en acetato de etilo, se lavó con KHSO_{4} (aq., 0,3M), Na_{2}CO_{3} (aq., 10%), se secó (MgSO_{4}) y se evaporó. La cristalización en acetato de etilo:éter de petróleo proporcionó 3,78 g (51%) del compuesto del subtítulo.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 4,89 (m, 1H), 4,07 (m, 1H), 3,95 (m, 1H), 2,85 (s, 4H), 2,67 (m, 1H), 2,45 (m, 1H), 1,42 (s, 9H).

(ii) Boc-Aze-Pac(Z)

Una mezcla de H-Pac(Z) x 2 HCl (0,227 g, 0,63 mmol), Boc-Aze-OSu (0,194 g, 0,65 mmol) y trietilamina

\hbox{(0,2  ml,}

1,4 mmol) en 10 ml de THF se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. Después de la evaporación, el residuo se disolvió en acetato de etilo, se filtró a través de un tapón de celite y se cromatografió en una columna de gel de sílice con acetato de etilo:THF (2:1). El eluyente se evaporó, se disolvió en acetato de etilo, se lavó con agua, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó para proporcionar 0,250 g (81%) del compuesto del subtítulo.

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,4-7,2 (m, 5H), 5,05 (s, 2H), 4,55 (bt, 1H), 3,85 (bq, 1H), 3,72 (bq, 1H), 3,2-3,0 (m, 2H), 2,42-2,2 (m, 2H), 2,10 (m, 1H), 1,9-1,7 (m, 4H), 1,5-1,3 (m, 11H, de ellos s a 1,37, 9H), 1,0-0,8 (m, 2H).

(iii) H-Aze-Pac(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(i) a partir de Boc-Aze-Pac(Z) (de la etapa (ii) anterior) seguido por un procesamiento de extracción alcalina.

(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pac(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 1(ii) anterior a partir de Ph- (R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (0,236 g, 0,89 mmol, preparado conforme a Hamada et al., J. Am. Chem. Soc., (1989) 111, 669) y H-Aze- Pac(Z) (0,25 g, 0,53 mmol, de la etapa (iii) anterior, previamente activado al agitar en CH_{2}Cl_{2}:ácido trifluoroacético (1:1, 10 ml) durante 30 minutos), proporcionando 160 mg (48%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,20-7,44 (m, 10H), 5,22 (s, 1H), 5,06-5,16 (m, 2H), 4,80-4,90 (m, 1H), 3,92-4,43 (m, 2H), 2,88-3,12 (m, 2H), 2,35-2,60 (m, 2H), 1,25-2,10 (m, 10H), 0,84-0,94 (m, 9H), 0,00-0,15 (m, 6H).

(v) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pac x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph- (R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze- Pac(Z) (0,16 g, 0,25 mmol, de la etapa (iv) anterior), con purificación por RPLC, proporcionando 15 mg (14%).

EM-FAB m/z 373 (M+1)^{+}.

Ejemplo 26 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pig x HOAc (i) Boc-Aze-Pig(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 1(ii) a partir de Boc-Aze-OH (1,03 g, 5,12 mmol, véase Ejemplo 1(i) anterior) y H-Pig(Z) x 2 HCl (1,86 g, 5,12 mmol, preparado conforme al método descrito en la solicitud de patente internacional WO 94/29336) proporcionando 1,24 g (51%).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,27-7,43 (m, 5H), 5,12 (s, 2H), 4,60-4,67 (t, 1H), 4,16-4,26 (d, 2H), 3,86-3,95 (m, 1H), 3,74-3,82 (m, 1H), 3,11-3,30 (m, 2H), 2,78-2,89 (m, 2H), 2,33-2,52 (bs, 2H), 1,71-1,83 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 1,15-1,29 (m, 2H).

(ii) H-Aze-Pig(Z) x 2 HCl

Se agitó a temperatura ambiente durante 1 h Boc-Aze-Pig(Z) (1,2 g, 2,53 mmol, de la etapa (i) anterior) en acetato de etilo saturado con HCl (75 ml). La mezcla de reacción se evaporó, se diluyó con agua y se extrajo con tolueno. La capa de agua se liofilizó para proporcionar 1,085 g (96%) del compuesto del título.

^{1}H RMN (500 MHz; CD_{3}OD: \delta 7,32-7,46 (m, 5H), 5,28 (s, 2H), 4,99-5,05 (t, 1H), 4,08-4,16 (m, 1H), 3,91-3,99 (m, 3H), 3,13-3,25 (m, 4H), 2,79-2,88 (m, 1H), 2,47-2,57 (m, 1H), 1,82-1,96 (m, 3H), 1,26-1,40 (m, 2H).

(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pig(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 25(iv) anterior a partir de Ph- (R)CH(OTBDMS)- C(O)OH (0,401 g, 1,5 mmol) y H-Aze-Pig(Z) x 2 HCl (0,672 g, 1,5 mmol, de la etapa (iii) anterior), proporcionando 350 mg (46%).

EM-LC m/z 508 (M+1)^{+}, 530 (M+Na)^{+}.

(iv) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pig x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Aze-Pig(Z) (0,1 g, 0,197 mmol, de la etapa (iii) anterior), proporcionando 81 mg (95%) del compuesto del título.

EM-LC m/z 374 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD: \delta 7,25-7,50 (m, 5H), 5,15 (s, 1H), 4,65-4,75 (m, 1H), 4,25-4,35 (m, 1H), 3,80-4,00 (m, 3H), 2,95-3,50 (m, 4H), 2,05-2,50 (m, 2H), 1,75-1,90 (m, 3H), 1,15-1,30 (m, 2H).

Ejemplo 27 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)Hig x HOAc (i) H-(R,S)Hig(Z) x 2 HCl

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(i) a partir de Boc-(R,S)Hig(Z), preparado conforme al método descrito en la solicitud de patente internacional WO 94/29336).

(ii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OBn

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(ii) a partir del bencil éster de L- prolina x HCl (2,0 g, 8,26 mmol) y Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)OH (2,0 g, 7,51 mmol, preparado conforme al método descrito por Hamada et al. en J. Am. Chem. Soc., (1989) 111, 669), proporcionando 2,0 g (59%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}: \delta 7,22-7,55 (m, 10H), 5,45 (s, 1H), 5,15 (s, 2H), 4,45-4,55 (m, 1H), 3,70-3,82 (m, 1H), 3,05-3,15 (m, 1H), 1,65-2,15 (m, 4H), 0,85-1,05 (m, 9H), 0,00-0,22 (m, 6H).

(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OH

Una mezcla de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OBn (1,9 g, 4,19 mmol, de la etapa (ii) anterior) y Pd/C (10%, 0,21 g) en etanol (80 ml) se hidrogenó a presión atmosférica durante 3 h. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y el filtrado se evaporó. El rendimiento fue de 1,36 g (91%) del compuesto del título.

EM-LC m/z 362 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (500 MHz; CD_{3}OD: \delta 7,20-7,50 (m, 5H), 5,45 (s, 1H), 4,30-4,40 (m, 1H), 3,30-3,70 (m, 2H), 1,75-2,30 (m, 4H) 0,85-1,00 (m, 9H), 0,00- 0,20 (m, 6H).

(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-(R,S)-Hig(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 25(iv) anterior a partir de Ph- (R)CH(OTBDMS)-C(O)- Pro-OH (0,36 g, 1 mmol, de la etapa (iii) anterior) y H-(R,S)Hig(Z) x 2 HCl (0,36 g, 1 mmol, de la etapa (i) anterior, proporcionando 0,63 g de producto bruto que se usó en la etapa de proceso sin purificación adicional.

EM-LC m/z 636 (M+1)^{+}.

^{13}C RMN (100,5 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico: \delta 171,57, 171,20, 163,79, 159,22.

(v) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)-Hig(Z)

Una mezcla de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-(R,S)-Hig(Z) (0,63 g, 1 mmol, de la etapa (iv) anterior) y TFA (10 ml, al 20% en CH_{2}Cl_{2}) se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El pH de la mezcla de reacción se ajustó a 9 con K_{2}CO_{3} acuoso y la mezcla de reacción se extrajo después con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica combinada se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El producto bruto se purificó mediante cromatografía de evaporación súbita en una columna de gel de sílice (40 g) eluida con CH_{2}Cl_{2} (100 ml), CH_{2}Cl_{2}:EtOH 95:5 (100 ml) y CH_{2}Cl_{2}:EtOH (9:1, 300 ml). El rendimiento fue de 138 mg (26%) del compuesto del subtítulo.

EM-LC m/z 522 (M+1)^{+}.

^{13}C RMN (100,5 MHz; CDCl_{3}), carbonos amidino y carbonílico: \delta 172,21, 171,20, 163,64, 159,11.

(vi) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-(R,S)-Hig x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OH)- C(O)-Pro-(R,S)- Hig(Z) (0,071 g, 0,14 mmol, de la etapa (v) anterior), proporcionando 49 mg (80%).

EM-LC m/z 388 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros: \delta 7,32-7,56 (m, 5H), 5,37-5,52 (m, 1H), 4,32-4,64 (m, 1H), 3,57-3,75 (m, 2H), 3,24-3,56 (m, 4H), 2,89-3,15 (m, 2H), 1,25-2,80 (m, 9H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,92, 174,92, 173,69, 173,03.

Ejemplo 28 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig x HOAc (i) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-Dig(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 25(iv) anterior a partir de H-Dig(Z) (0,14 g, 0,507 mmol, véase solicitud de patente internacional WO 94/29336) y Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-OH (0,23 g, 0,608 mmol, véase Ejemplo 27(iii) anterior), proporcionando 316 mg de producto bruto que se usó en la etapa de proceso sin purificación adicional.

EM-LC m/z 622 (M+1)^{+}.

(i) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig(Z)

Se añadió ácido trifluoroacético (6 ml, al 20% en CH_{2}Cl_{2}) a Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-Pro-Dig(Z) (0,315 g, 0,506 mmol, de la etapa (i) anterior) a 0ºC y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El pH de la mezcla de reacción se ajustó a 8 con K_{2}CO_{3} acuoso y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se lavó con NaCl acuoso, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El producto bruto (250 mg) se sometió a cromatografía de evaporación súbita en una columna de gel de sílice usando CH_{2}Cl_{2}:MeOH (9:1) como eluyente, proporcionando 180 mg (70%) del compuesto del título.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,25-7,39 (m, 10H), 5,32-5,37 (bs, 1H), 5,08-5,19 (m, 2H), 4,40-4,49 (m, 1H), 4,21-4,35 (m, 2H), 3,87-4,03 (m, 2H), 3,71-3,79 (m, 2H), 3,18-3,32 (m, 2H), 3,00-3,10 (m,1H), 2,61-2,73 (m, 1H), 2,14-2,24 (m, 1H), 1,62-2,07 (m, 8H).

(iii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-Pro-Dig x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OH)- C(O)-Pro-Dig(Z) (0,14 g, 0,276 mmol, de la etapa (ii) anterior, proporcionando 112 mg (94%).

^{1}H RMN (400 MHz, CD_{3}OD): \delta 7,27-7,44 (m, 5H), 5,34 (s, 1H), 4,29-4,35 (m, 1H), 4,17-4,25 (m, 2H), 3,75-3,83 (m, 2H), 3,63-3,73 (m, 1H), 3,25-3,34 (m, 1H), 3,08-3,23 (m, 2H), 2,79-2,90 (m, 1H), 1,71-2,10 (m, 6H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; CD_{3}OD), señales de carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,79, 173,26, 158,16.

Ejemplo 29 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R o S)Pic(cis-4-Me)-Pab x HOAc y Ph- (R)CH(OH)-C(O)-(S o R)Pic(cis-4-Me)-Pab x HOAc (i) (R,S)-N-Boc-Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 1(ii) a partir de (R,S)-N-Boc- Pic(cis-4-Me)-OH (0,88 g, 4,1 mmol, preparado conforme al método descrito en Shuman et al., J. Org. Chem. (1990), 55, 738) proporcionando 405 mg (19%).

EM-FAB m/z 509 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,25-7,90 (m, 9H), 5,20 (s, 2H), 4,45-4,50 (m, 2H), 4,30-4,40 (m, 1H), 3,15-3,70 (m, 2H), 1,70-2,00 (m, 4H), 1,45 (s, 9H), 1,15-1,30 (m, 1H), 0,90-1,05 (m, 3H).

(ii) H-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)

Se disolvió (R,S)-N-Boc-Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,40 g, 0,79 mmol, de la etapa (i) anterior) en CH_{2}Cl_{2} (5 ml). Se añadió ácido trifluoroacético (5 ml) y la mezcla se agitó durante 0,5 h. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2}, se lavó con Na_{2}CO_{3} acuoso, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó. El producto bruto se purificó mediante cromatografía de evaporación súbita en una columna de gel de sílice eluida con CH_{2}Cl_{2}:MeOH 95:5 y CH_{2}Cl_{2}:MeOH 9:1. El rendimiento fue de 300 mg (94%) del compuesto del subtítulo.

EM-FAB m/z 409 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CD_{3}OD): \delta 7,25-7,85 (m, 9H), 5,15 (s, 2H), 4,35-4,45 (m, 2H), 2,55-3,60 (m, 3H), 1,85-2,05 (m, 1H), 1,35-1,65 (m, 2H), 0,90-1,20 (m, 5H).

(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de H- (R,S)Pic(cis-4-Me)- Pab(Z) (0,290 g, 0,71 mmol, de la etapa (ii) anterior) y Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-OH

\hbox{(0,189 g,}

0,71 mmol, preparado conforme al método descrito en Hamada et al., J. Am. Chem. Soc., (1989) 111, 669), proporcionando 0,40 g de producto bruto que se usó en la etapa de proceso sin purificación. (iv) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z)

Se trató Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,40 g, bruto, de la etapa (iii) anterior) con ácido trifluoroacético (al 20% en CH_{2}Cl_{2}) durante 3 h. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía de evaporación súbita en una columna de gel de sílice eluida con CH_{2}Cl_{2}:MeOH (98:2, 95:5 y 9:1). El rendimiento fue de 45 mg (11%) del compuesto del subtítulo.

(v) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R o S)Pic(cis-4-Me)-Pab x HOAc y Ph-(R)CH(OH)- C(O)-(S o R)Pic(cis-4-Me)-Pab x HOAc

Una mezcla de Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(cis-4-Me)-Pab(Z) (0,045 g, 0,083 mmol, de la etapa (iv) anterior) y Pd/C (5%, 0,06 g) en etanol (8 ml) se hidrogenó a presión atmosférica durante 2,5 h. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se evaporó. El producto bruto se sometió a RPLC preparativa (NH_{4}OAc 0,1M, 30% de acetonitrilo) donde se separaron los diastereómeros. El rendimiento fue de 7 mg de compuesto 29 A con una relación de diastereómeros >99:1 y 11 mg de compuesto 29B con una relación de diastereómeros de 98:2.

Compuesto 29A:

EM-LC m/z 409 (M+1)^{+}, 407 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O,): \delta 7,20-7,80 (m, 9H), 5,65 (s, 1H), 4,65-5,35 (m, 1H), 4,40-4,55 (m, 2H), 3,85-4,00 (m, 1H), 3,65-3,75 (m, 1H), 2,65-3,15 (m, 2H), 2,05-2,20 (m, 1H), 1,05-1,75 (m, 2H), 0,70-0,90 (m, 3H).

Compuesto 29B:

EM-LC m/z 409 (M+1)^{+}, 407 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O,): \delta 7,25-7,80 (m, 9H), 4,55-5,75 (m, 2H), 4,35-4,50 (m, 3H), 3,75-3,85 (m, 1H), 2,70-2,80 (m, 1H), 1,80-2,20 (m, 1H), 0,70-1,70 (m, 6H).

Ejemplo 30 Ph(CH_{2})_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph(CH_{2})_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de H-Aze- Pab(Z) x 2 HCl (0,434 g, 0,988 mmol) y ácido (R)-(-)-2-hidroxi-4-fenilbutírico (0,162 g, 0,898 mmol), TBTU (0,433 g, 1,348 mmol) y N-metilmorfolina (0,363 g, 3,59 mmol) en DMF (15 ml) proporcionando 105 mg (22%).

EM-LC m/z 529 (M+1)^{+}, 527 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,17-8,25 (m, NH), 7,05-7,72 (m, 14H), 5,16-5,22 (m, 2H), 4,71-4,88 (m, 1H), 4,32-4,41 (m, 2H), 3,92-4,04 (m, 2H), 3,79-3,88 (m, 1H), 2,62-2,86 (m, 2H), 2,29-2,57 (m, 2H), 1,80-1,98 (m, 2H).

(ii) Ph(CH_{2})_{2}-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de

\hbox{Ph(CH _{2})_{2} }

- (R)CH(OH)- C(O)-Aze-Pab(Z) (0,112 mg, 0,212 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 77 mg (84%).

EM-LC m/z 395 (M+1)^{+}, 393 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,77-7,77 (m, 9H), 4,73-5,19 (m, 1H), 4,40-4,62 (m, 2H), 3,92-4,34 (m, 3H), 2,48-2,84 (m, 3H), 2,09-2,33 (m, 1H), 1,83-2,05 (m, 2H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,66, 174,80, 172,56, 172,49, 166,14, 165,87.

Ejemplo 31 2-naftil-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-(2-naftil)glicólico

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(i) anterior a partir de 2-naftaldehído (15,6 g, 100 mmol) proporcionando 12,37 g (61%).

EM-LC m/z 201 (M-1)^{+}, 403 (2M-1)^{-}.

^{1}H RMN (500 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,43-7,98 (m, 7H), 5,29-5,35 (m, 1H).

(ii) 2-naftil-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-(2-naftil)glicólico (0,162 g, 0,8 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 266 mg (60%).

EM-LC m/z 551 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,18-7,91 (m, 16H), 4,86-5,26 (m, 3H), 4,05-4,60 (m, 3H), 3,52-3,78 (m, 2H), 2,24-2,73 (m, 2H).

(iii) 2-naftil-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de 2-naftil-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,266 g, 0,48 mmol, de la etapa (ii) anterior) proporcionando 202 mg (88%).

EM-LC m/z 417 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,28-7,96 (m, 11H), 5,30-5,40 (m, 1H), 3,95-4,82 (m, 5H), 2,09-2,59 (m, 2H).

Ejemplo 32 3-indolil-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) 3-indolil-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3-(3-indolil)láctico (0,21 g, 1,0 mmol) proporcionando 0,22 g (45%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,57-7,80 (m, 14H), 5,24 (s, 2H), 4,59-4,83 (m, 1H), 4,19-4,51 (m, 3H), 3,69-3,99 (m, 2H), 3,03-3,36 (m, 2H), 2,31-2,56 (m, 2H).

(ii) 3-indolil-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de 3-indolil-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,11 g, 0,20 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 75 mg (80%).

EM-FAB m/z 420 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,00-7,75 (m, 9H), 4,61- 4,71 (m, 1H), 3,74-4,51 (m, 5H), 3,00-3,28 (m, 2H), 1,95-2,42 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 179,38, 176,19, 175,56, 173,06, 166,78.

Ejemplo 33 (CH_{3})_{2}CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) (CH_{3})_{2}CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab (Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R)-2-hidroxi-isovalérico (0,12 g, 1,0 mmol) proporcionando 68 mg (16%).

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 8,25-8,40 (t, NH), 7,15-7,90 (m, 9H), 5,20 (s, 2H), 4,85-4,95 (m, 1H), 4,30-4,55 (m, 2H), 4,05-4,25 (m, 2H), 3,75-3,90 (m, 1H), 1,65-2,75 (m, 3H), 0,70-1,05 (m, 6H).

(ii) (CH_{3})_{2}CH-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de

\hbox{(CH _{3} ) _{2} CH}

-(R)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,068 g, 0,15 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 13 mg (23%).

^{1}H RMN (300 MHz; D_{2}O): \delta 7,45-7,80 (m, 4H), 4,85- 5,25 (m, 1H), 4,45-4,65 (m, 2H), 4,30-4,40 (m, 1H), 3,80-4,10 (m, 2H), 2,60-2,80 (m, 1H), 2,20-2,35 (m, 1H), 1,90-2,05 (m, 1H), 0,70-1,00 (m, 6H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 182,37, 176,34, 175,38, 173,84, 173,26, 167,16.

Ejemplo 34 (CH_{3})_{2}CH-(CH_{2})_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) (CH_{3})_{2}CH-(CH_{2})_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze- Pab (Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-isoleúcico (0,12 g, 0,88 mmol) proporcionando 0,15 g (36%).

^{1}H RMN (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,15-7,80 (m, 9H), 5,20 (s, 2H), 4,85-4,95 (m, 1H), 4,35-4,55 (m, 2H), 3,85-4,20 (m, 3H), 2,40-2,80 (m, 2H), 1,75-2,10 (m, 1H), 1,20-1,55 (m, 2H), 0,75-1,00 (m, 6H).

(ii) (CH_{3})_{2}CH-(CH_{2})_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze- Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de (CH_{3})_{2}CH- (CH_{2})_{2}-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,13 g, 0,27 mmol, de la etapa (i) anterior) proporcionando 0,11 g (100%).

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 7,63-7,69 (m, 2H), 7,37- 7,46 (m, 2H), 4,72-5,12 (m, 1H), 4,40-4,46 (m, 2H), 4,17-4,31 (m, 2H), 3,90-4,02 (m, 1H), 2,50-2,69 (m, 1H), 2,11-2,27 (m, 1H), 1,12-1,72 (m, 3H), 0,61-0,85 (m, 6H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 176,97, 176,80, 176,61, 176,19, 173,38, 173,28, 173,17, 173,10, 166,78, 182,02.

Ejemplo 35 Ph(3-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Boc-Pro-Pab(Z) x HCl

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(ii) a partir de Boc-Pro-OH (10,2 g, 47,4 mmol) y añadiendo H-Pab(Z) x HCl (15,9 g, 49,8 mmol), proporcionando 21,74 g (95,5%).

EM-FAB m/z 481 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 8,0-7,8 (m, 2H), 7,5- 7,25 (m, 7H), 5,17 (s, 2H), 4,6-4,15 (m, 3H), 3,6-3,35 (m, 2H), 2,3-2,1 (m, 1H), 2,1-1,8 (m, 3H), 1,5-1,3 (dos singletes amplios, rotámeros de Boc, 9H).

(ii) H-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(i) a partir de Boc-Pro-Pab(Z) x HCl (de la etapa (i) anterior) seguido por un procesamiento de extracción alcalina.

(iii) Ph(3-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3-hidroximandélico (0,25 g, 1,5 mmol) y H-Pro-Pab(Z) (0,63 g, 1,65 mmol, de la etapa (ii) anterior) proporcionando 51 mg (6%) del compuesto del título.

EM-FAB m/z 531 (M+1)^{+}.

(iv) Ph(3-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de Ph(3-OH)- (R,S)CH(OH)-C(O)-Pro- Pab(Z) (0,05 g, 0,094 mmol, de la etapa (iii) anterior), proporcionando 30 mg (74%).

EM-FAB m/z 397 (M+1)^{+}.

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,36, 175,13, 172,92, 167,13.

Ejemplo 36 Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3,5-dimetoximandélico (0,08 g, 0,38 mmol, preparado conforme al método descrito en Synthesis (1974), 724) y H-Pro- Pab(Z) (0,16 g, 0,42 mmol, véase Ejemplo 35(ii)) proporcionando 61 mg (28%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,70-7,80 (t, NH), 7,08-7,50 (m, 9H), 6,30-6,50 (m, 3H), 5,20 (s, 2H), 5,00-5,10 (m, 1H), 4,25-4,70 (m, 3H), 3,60-3,80 (m, 6H), 3,35-3,55 (m, 1H), 2,95-3,25 (m, 1H), 1,70-2,25 (m, 4H).

(ii) Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,06 g, 0,10 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 35 mg (72%).

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,23-7,80 (m, 4H), 6,41- 6,65 (m, 3H), 5,35-5,45 (m, 1H), 4,35-4,60 (m, 3H), 3,80 (s, 3H), 3,10-3,75 (m, 5H), 1,70-2,35 (m, 4H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,28, 175,05, 174,03, 173,46, 172,80, 172,73, 167,11, 166,95.

Ejemplo 37 Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3-metoximandélico (0,27 g, 1,5 mmol) y H-Pro-Pab(Z) (0,57 g, 1,5 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior) proporcionando 158 mg (20%).

EM-FAB m/z 545 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,77-7,84 (m, 2H), 7,01-7,48 (m, 8H), 6,80-6,91 (m, 3H), 5,20-5,24 (m, 2H), 5,06-5,11 (m, 1H), 4,30-4,72 (m, 3H), 3,68-3,79 (m, 3H), 3,38-3,57 (m, 1H), 2,91-3,17 (m, 1H), 1,68-2,31 (m, 4H).

(ii) Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3-OMe)- (R,S)CH(OH)-C(O)- Pro-Pab(Z) (0,06 g, 0,11 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 39 mg (75%).

EM-LC m/z 411 (M+1)^{+}, 409 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 6,81-7,84 (m, 8H), 5,47 (s, 1H), 4,35-4,59(m, 3H), 3,60-3,88 (m, 4H), 3,07-3,29 (m, 1H), 1,74-2,37 (m, 4H).

Ejemplo 38 Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3,4-metilendioximandélico (0,20 g, 1,0 mmol, preparado conforme al método descrito en Synthesis (1974), 724), proporcionando 0,22 g (44%).

^{1}H RMN (400 MHz; acetona-d_{6}): \delta 6,68-8,12 (m, 12H), 5,94-6,05 (m, 2H), 5,18 (s, 2H), 3,81-5,12 (m, 6H), 2,30-2,54 (m, 2H).

(ii) Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3,4-(-O- CH_{2}-O-))- (R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,11 g, 0,20 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 72 mg (76%).

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 6,64-7,80 (m, 7H), 5,91- 6,01 (m, 2H), 4,80-5,24 (m, 2H), 3,88-4,57 (m, 4H), 2,11-2,84 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 176,03, 175,70, 175,07, 174,82, 168,86.

Ejemplo 39 Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-4-hidroxi-3-metoximandélico (0,40 g, 2,0 mmol) y H-Pro- Pab(Z) (0,76 g, 2,0 mmol, véase Ejemplo 35(ii)), proporcionando 132 mg (12%).

EM-FAB m/z 561 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,62-7,84 (m, 12H), 5,20-5,25 (m, 2H), 4,15-5,08 (m, 3H), 3,42-3,84 (m, 4H), 2,91-3,25 (m, 1H), 1,66-2,37 (m, 4H).

(ii) Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3-OMe,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,048 g, 0,09 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 23 mg (55%).

EM-FAB m/z 427 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 6,72-7,83 (m, 7H), 5,42 (s, 1H), 4,38-4,68 (m, 3H), 3,55-4,10 (m, 4H), 3,09-3,29 (m, 1H), 1,72-2,37 (m, 4H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,12, 173,25, 167,09.

Ejemplo 40 Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-2-hidroxi-2-fenilbutanoico (0,36 g, 2,0 mmol) y H-Pro-Pab(Z) (0,76 g, 2,0 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior), proporcionando 57 mg (5%).

EM-FAB m/z 543 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,24-7,88 (m, 14H), 5,23 (s, 2H), 4,44-4,81 (m, 3H), 2,98-3,25 (m, 2H), 1,49-2,32 (m, 6H), 0,85-0,95 (m, 3H).

(ii) Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R,S)C(Et)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,055 g, 0,1 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 34 mg (72%).

EM-FAB m/z 409 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 7,33-7,82 (m, 9H), 4,38- 4,60 (m, 3H), 3,19-3,71 (m, 2H), 1,54-2,34 (m, 6H), 0,73-0,90 (m, 3H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 182,05, 176,42, 175,73, 175,59, 174,70, 174,47, 167,18.

Ejemplo 41 Ph-(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-3,5-dimetilmandélico

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(i) anterior a partir de 3,5- dimetilbenzaldehído (5,0 g, 37 mmol), proporcionando 2,8 g (42%).

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,05 (s, 2H), 6,94 (s, 1H), 5,04 (s, 1H), 2,28 (s, 6H).

(ii) Ph-(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3,5- dimetilmandélico (0,27 g, 1,5 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 0,403 g (51%).

EM-FAB m/z 529 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,85-7,88 (m, 12H), 5,22-5,26 (m, 2H), 4,84-5,03 (m, 2H), 4,43-4,62 (m, 2H), 3,57-4,13 (m, 2H), 2,25-2,74 (m, 8H).

(iii) Ph-(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) a partir de Ph-(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,102 g, 0,194 mmol, de la etapa (ii) anterior), proporcionando 74 mg (84%).

EM-FAB m/z 395 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 6,76-7,82 (m, 7H), 4,80- 5,27 (m, 2H), 3,87-4,62 (m, 4H), 2,20-2,87 (m, 8H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 182,07, 175,60, 174,49, 174,37, 173,96, 173,23, 173,09, 173,05, 172,93, 166,98, 166,90.

Ejemplo 42 Ph-(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph-(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3- nitromandélico (0,30 g, 1,5 mmol), proporcionando 0,40 g (48%).

EM-LC m/z 545 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,16-8,22 (m, 13H), 5,18-5,23 (m, 2H), 4,85-5,15 (m, 2H), 4,08-4,60 (m, 3H), 3,65-3,81 (m, 1H), 2,31-2,71 (m, 2H).

(ii) Ph-(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) a partir de Ph-(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,102 g, 0,19 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 0,074 g (89%).

EM-LC m/z 382 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 6,58-7,82 (m, 8H), 4,80- 5,25 (m, 2H), 3,60-4,60 (m, 4H), 2,12-2,88 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,96, 175,27, 174,25, 173,84, 173,19, 173,01, 166,93.

Ejemplo 43 Ph-(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

Se añadieron anisol (0,030 g, 0,27 mmol) y ácido trifluorometanosulfónico (0,138 g, 0,92 mmol) a una mezcla de Ph-(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,100 g, 0,18 mmol, véase Ejemplo 42(i) anterior) y CH_{2}Cl_{2} (10 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 minutos. Se añadió H_{2}O y el pH se ajustó a 9 con Na_{2}CO_{3}/aq. El CH_{2}Cl_{2 }se eliminó a vacío y la capa de H_{2}O residual se extrajo con dietiléter (3 x 5 ml) seguido por liofilización. El producto bruto se sometió a RPLC preparativa proporcionando 62 mg (60%) del compuesto del título después de liofilización.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 7,38-8,31 (m, 8H), 4,83- 5,50 (m, 2H), 4,03-4,57 (m, 4H), 2,17-2,86 (m, 2H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,5, 173,84, 173,39, 173,15, 173,04, 172,96, 172,80, 166,85.

Ejemplo 44 Ph-(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph-(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) a partir de ácido (R,S)-3- nitromandélico (0,30 g, 1,5 mmol) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,75 g, 1,65 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior), proporcionando 0,61 g (73%).

EM-LC m/z 560 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,26-8,23 (m, 13H), 5,20-5,28 (m, 3H), 4,33-4,73 (m, 3H), 3,46-3,68 (m, 1H), 2,92-3,14 (m, 1H), 1,79-2,23 (m, 4H).

(ii) Ph-(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) a partir de Ph-(3-NO_{2})- (R,S)CH(OH)-C(O)-Pro- Pab(Z) (0,104 g, 0,19 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 64 mg (76%).

EM-LC m/z 396 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 6,74-7,82 (m, 8H), 5,34- 5,40 (m, 1H), 4,35-4,58 (m, 3H), 3,09-3,78 (m, 2H), 1,75-2,35 (m, 4H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 182,04, 175,38, 175,18, 173,12, 173,04, 167,07.

Ejemplo 45 Ph-(3-NO_{2})-(R o S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 43 a partir de Ph-(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,117 g, 0,21 mmol, véase Ejemplo 44(i) anterior). Algunas fracciones se concentraron para proporcionar 23 mg (45%) de un compuesto con una relación de diastereómeros >99:1.

EM-LC m/z 424 (M-1)^{-}, 426 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,31-8,35 (m, 8H), 5,50- 5,71 (m, 1H), 3,64-4,57 (m, 4H), 3,24-3,32 (m, 1H), 1,76-2,42 (m, 4H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,21, 173,98, 172,58, 172,18, 167,12, 166,82.

(Las primeras fracciones se concentraron para proporcionar 22 mg (43%) del epímero del compuesto anterior con una relación de diastereómeros >99:1).

Ejemplo 46 Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3,4-metilendioximandélico (0,20 g, 1,0 mmol, preparado conforme al método descrito en Synthesis (1974), 724), y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,35 g, 0,91 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior) proporcionando 80 mg (16%).

EM-FAB m/z 559 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,69-7,89 (m, 12H), 5,91-6,04 (m, 2H), 4,30-5,28 (m, 2H), 3,00-3,61 (m, 6H), 1,95-2,35 (m, 4H).

(ii) Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de Ph(3,4-(-O-CH_{2}-O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,08 g, 0,14 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 48 mg (73%).

EM-FAB m/z 425 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 6,81-7,85 (m, 7H), 5,90- 6,05 (m, 2H), 5,33-5,44 (m, 1H), 4,37-4,90 (m, 3H), 3,62-3,77 (m, 1H), 3,13-3,28 (m, 1H), 1,80-2,36 (m, 4H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,37, 175,09, 173,66, 173,08, 173,00, 167,03.

Ejemplo 47 Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3,5-difluoromandélico (0,28 g, 1,5 mmol) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,75 g, 1,65 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior) proporcionando 0,42 g (51%).

EM-LC m/z 549 (M-1)^{-}, 551 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,72-7,84 (m, 12H), 5,22 (s, 2H), 5,08 (s, 1H), 4,34-4,73 (m, 3H), 3,41-3,60 (m, 1H), 2,96-3,19 (m, 1H), 1,80-2,34 (m, 4H).

(ii) Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,104 g, 0,19 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 79 mg (88%).

EM-LC m/z 415 (M-1)^{-}, 417 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; D_{2}O): \delta 6,86-7,80 (m, 7H), 5,50 (s, 1H), 3,58-4,72 (m, 4H), 3,19-3,32 (m, 1H), 1,80-2,37 (m, 4H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,87, 175,21, 174,98, 174,12, 172,57, 172,12, 171,97, 167,10, 165,24.

Ejemplo 48 Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-CH_{2}OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph-(R)CH(OH)-C(O)OBn

Se disolvió ácido (R)-mandélico (3,0 g, 19,7 mmol) en DMF (50 ml) y se añadió carbonato de cesio (3,21 g, 9,86 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con H_{2}O (200 ml) y la capa de agua se extrajo con EtOAc. Después de la separación, la capa orgánica se lavó con NaCl/aq, se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. El rendimiento del compuesto del subtítulo fue de 4,2 g (88%).

EM-LC m/z 265 (M+Na)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,17-7,44 (m, 10H), 5,12-5,27 (m, 3H).

(ii) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-CH=CH_{2})-C(O)OBn

Una mezcla de Ph-(R)CH(OH)-C(O)OBn (1,0 g, 4,13 mmol, de la etapa (i) anterior), sulfato de magnesio (0,1 g, 0,83 mmol) y óxido de plata(I) (2,58 g, 11,2 mmol) en éter de petróleo (p.e. 40-60ºC, 25 ml) se agitó a temperatura ambiente en atmósfera de nitrógeno y oscuridad. Se añadió gota a gota bromuro de alilo (0,75 g, 6,19 mmol) seguido de óxido de plata(I) (2,58 g, 11,2 mmol) en dos porciones. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a continuación a través de celite y el filtrado se evaporó, proporcionando 1,143 g (98%) del compuesto del subtítulo.

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,20-7,50 (m, 10H), 5,89-5,99 (m, 1H), 5,09-5,31 (m, 4H), 4,99 (s, 1H), 4,03-4,11 (m, 2H).

(iii) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-CH_{2}OH)-C(O)OBn

Una mezcla de Ph-(R)CH(O-CH_{2}-CH=CH_{2})-C(O)OBn (0,74 g, 2,62 mmol, de la etapa (ii) anterior), N-metilmorfolina-N-óxido (0,425 g, 3,15 mmol) y tetróxido de osmio (0,0027 g, 0,01 mmol) en H_{2}O:acetona (2:1, 10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. Se añadió pirosulfito sódico (1,5 g, 7,89 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró a continuación a través de celite y el filtrado se evaporó. El rendimiento del compuesto del subtítulo fue de 0,51 g (62%).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,16-7,44 (m, 10H), 5,09-5,20 (m, 2H), 4,96 (s, 1H), 3,55-3,97 (m, 5H).

(iv) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O- CH_{2}-))-C(O)OBn

Se disolvió Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-CH_{2}OH)-C(O)OBn (0,51 g, 1,61 mmol, de la etapa (iii) anterior en acetona (20 ml). Se añadió ácido p-toluenosulfónico monohidratado (0,007 g, 0,037 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadió carbonato de potasio (0,09 g) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se filtró a continuación a través de celite y el filtrado se evaporó, proporcionando 0,559 g (97%) del compuesto del subtítulo.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,18-7,48 (m, 10H), 5,01-5,21 (m, 3H), 4,27-4,40 (m, 1H), 4,02-4,11 (m, 1H), 3,76-3,90 (m, 1H), 3,49-3,67 (m, 2H), 1,34-1,41 (m, 6H).

(v) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O- CH_{2}-))-C(O)OH

Se disolvió Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)OBn (0,183 g, 0,51 mmol, de la etapa (iv) anterior en etanol (10 ml). Se añadió Pd/C (5%, 0,09 g) y la mezcla de reacción se hidrogenó a presión atmosférica durante 1 h. La mezcla se filtró a continuación a través de celite y el filtrado se evaporó, proporcionando 0,137 g (100%) del compuesto del subtítulo.

EM-LC m/z 265 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,28-7,48 (m, 5H), 4,97 (s, 1H), 4,25-4,35 (m, 1H), 4,01-4,09 (m, 1H), 3,72-3,84 (m, 1H), 3,43-3,65 (m, 2H), 1,30-1,37 (m, 6H).

(vi) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O- CH_{2}-))-C(O)O- Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de Ph-(R)CH(O- CH_{2}-(R,S)CH(- O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)OH (0,165 g, 0,62 mmol, de la etapa (v) anterior), proporcionando 0,20 g (52%).

EM-LC m/z 613 (M-1)^{-}, 615 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,22-7,88 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 4,87-4,95 (m, 2H), 3,40-4,54 (m, 9H), 2,36-2,76 (m, 2H), 1,22-1,42 (m, 6H).

(vii) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O- CH_{2}-))-C(O)- Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R)CH(O- CH_{2}- (R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,20 g, 0,325 mmol, de la etapa (vi) anterior) proporcionando 179 mg (100%).

EM-LC m/z 479 (M-1)^{-}, 481 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,33-7,80 (m, 9H), 4,81- 5,31 (m, 2H), 3,94-4,59 (m, 6H), 3,25-3,80 (m, 3H), 2,16-2,88 (m, 2H), 1,29-1,44 (m, 6H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,99, 173,12, 172,93, 172,18, 166,84.

(viii) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-CH_{2}OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

Se disolvió Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-(O)- Aze-Pab x HOAc (0,094 g, 0,17 mmol, de la etapa (vii) anterior) en HOAc:H_{2}O (4:1, 10 ml) y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. La mezcla se evaporó y el residuo se disolvió en H_{2}O y se liofilizó. El rendimiento del compuesto del título fue de 85 mg (100%).

EM-LC m/z 439 (M-1)^{-}, 441 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,32-7,78 (m, 9H), 4,81- 5,28 (m, 2H), 3,28-4,56 (m, 9H), 2,15-2,90 (m, 2H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 179,14, 172,93, 172,89, 172,51, 171,96, 166,54.

Ejemplo 49 Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-CH_{2}OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)-Pro- Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)OH (0,108 g, 0,4 mmol, véase el Ejemplo 48(v) anterior) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,202 g, 0,46 mmol, véase el Ejemplo 35(ii) anterior), proporcionando 0,10 g (40%).

EM-LC m/z 627 (M-1)^{-}, 629 (M+1)^{+}, 651 (M+Na)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,23-7,87 (m, 14H), 5,03-5,27 (m, 3H), 3,34-4,64 (m, 10H), 1,71-2,39 (m, 4H), 1,23-1,41 (m, 6H).

(ii) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)-Pro- Pab x HOAc

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,100 g, 0,159 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 85 mg (96%).

EM-LC m/z 493 (M-1)^{-}, 495 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,30-7,82 (m, 9H), 5,22- 5,38 (m, 1H), 4,32-4,62 (m, 4H), 4,01-4,11 (m, 1H), 3,22-3,83 (m, 5H), 1,78-2,22 (m, 4H), 1,33-1,44 (m, 6H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 181,47, 174,74, 173,53, 171,64, 171,50, 171,00, 170,94, 166,58.

(iii) Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(OH)-CH_{2}OH)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 48(viii) anterior a partir de Ph-(R)CH(O-CH_{2}-(R,S)CH(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-))-C(O)-Pro-Pab x HOAc (0,038 g, 0,069 mmol, de la etapa (ii) anterior), proporcionando 35 mg (98%).

EM-LC m/z 453 (M-1)^{-}, 455 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,30-7,82 (m, 9H), 5,20- 5,38 (m, 1H), 3,18-4,60 (m, 10H), 1,70-2,38 (m, 4H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 180,26, 174,74, 173,47, 171,80, 171,26, 166,61.

Ejemplo 50 Ph-(R o S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab x HOAc y Ph-(S o R)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)OH

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 48(iv) anterior a partir de ácido \alpha-hidroxitrópico (3,5 g, 20,35 mmol, preparado conforme a Guthrie et al., Can. J. Chem. (1991) 69, 1904), proporcionando 3,37 g (74%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,30-7,65 (m, 5H), 4,95 (d, 1H), 4,10 (d, 1H), 1,70 (s, 3H), 1,50 (s, 3H).

(ii) Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)OH (0,25 g, 1,12 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 0,30 g (53%).

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,20-7,90 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 3,70-5,10 (m, 7H), 2,15-2,75 (m, 2H), 1,40-1,65 (m, 6H).

\newpage

(iii) Ph-(R o S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab x HOAc y Ph-(S o R)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

Una mezcla de Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,30 g, 0,53 mmol, de la etapa (ii) anterior), formiato de amonio (0,30 g, 4,76 mmol), ácido fórmico (3 gotas) y Pd/C (5%, 0,30 g) en metanol (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se filtró a través de celite y el filtrado se evaporó. El producto bruto (0,29 g) se sometió a RPLC preparativa. Algunas fracciones se concentraron para proporcionar 80 mg (35%) de compuesto 50A con una relación de diastereómeros >99:1. Las últimas fracciones se concentraron para proporcionar 80 mg (35%) de compuesto 50B con una relación de diastereómeros de 98:2.

Compuesto 50A:

EM-LC m/z 437 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,28-7,85 (m, 9H), 3,70-4,95 (m, 7H), 2,10-2,55 (m, 2H), 1,55 (s, 3H), 1,50 (s, 3H).

Compuesto 50B:

EM-LC m/z 437 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,25-7,80 (m, 9H), 3,70-5,00 (m, 7H), 2,25-2,45 (m, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,48 (s, 3H).

Ejemplo 51 Ph-(R o S)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl y Ph-(S o R)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl (i) Ph-(R o S)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

Se disolvió Ph-(R o S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (0,060 g, 0,12 mmol, compuesto 50A del Ejemplo 50 anterior) en ácido acético (4 ml) y se añadió H_{2}O (1 ml). La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente siguiendo agitación a 90ºC durante 6 h. Se añadió HCl (conc., 1 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 5 minutos. El ácido acético y el HCl se eliminaron a vacío en presencia de tolueno y EtOH y el residuo se disolvió en H_{2}O (4 ml) y se liofilizó. El producto bruto se sometió a RPLC preparativa para proporcionar 9 mg (16%) del compuesto del título.

EM-LC m/z 395 (M-1)^{-}, 397 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,20-7,85 (m, 9H), 3,90-4,70 (m, 5H), 3,30-3,70 (m, 2H), 2,00-2,65 (m, 2H).

(ii) Ph-(S o R)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Aze-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en la etapa (i) anterior a partir de Ph-(S o R)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (0,060 g, 0,12 mmol, compuesto 50B del Ejemplo 50 anterior) proporcionando 22 mg (40%).

EM-LC m/z 397 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,20-7,85 (m, 9H), 3,90-4,75 (m, 6H), 3,50-3,60 (m, 1H), 2,10-2,50 (m, 2H).

Ejemplo 52 Ph-(R o S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Pro-Pab x HOAc y Ph-(S o R)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Pro-Pab x HOAc (i) Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)OH (0,25 g, 1,12 mmol, véase Ejemplo 50(i) anterior), proporcionando 0,19 g (32%).

EM-FAB m/z 585 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,20-7,95 (m, 14H), 5,25 (s, 2H), 5,10-5,20 (m, 1H), 4,32-4,70 (m, 3H), 3,65-3,95 (m, 2H), 3,00-3,25 (m, 1H), 1,30-2,35 (m, 10H).

\newpage

(ii) Ph-(R o S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Pro-Pab x HOAc y Ph-(S o R)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Pro-Pab x HOAc

Los compuestos del título se prepararon conforme al método descrito en el Ejemplo 50(iii) anterior a partir de Ph-(R,S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,37 g, 0,63 mmol, de la etapa (i) anterior). Algunas fracciones se concentraron para proporcionar 120 mg de compuesto 52A con una relación de diastereómeros >99:1. Las últimas fracciones se concentraron para proporcionar 120 mg de compuesto 52B con una relación de diastereómeros de 98:2.

Compuesto 52A:

EM-LC m/z 451 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,25-7,80 (m, 9H), 4,35-5,05 (m, 4H), 3,80-3,95 (m, 1H), 3,60-3,65 (m, 1H), 3,00-3,10 (m, 1H), 2,10-2,20 (m, 1H), 1,75-1,90 (m, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,45 (s, 3H).

Compuesto 52B:

EM-LC m/z 451 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,25-7,80 (m, 9H), 4,40-5,10 (m, 4H), 3,30-3,80 (m, 3H), 1,75-2,20 (m, 4H), 1,50-1,55 (m, 6H).

Ejemplo 53 Ph-(R o S)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl y Ph-(S o R)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Ph-(R o S)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 51(i) anterior a partir de Ph-(R o S)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)C(O)-Pro-Pab x HOAc (0,060 g, 0,12 mmol, compuesto 52A del Ejemplo 52 anterior), proporcionando 2 mg (2%).

EM-LC m/z 409 (M-1)^{-}, 411 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,20-7,85 (m, 9H), 4,40-4,60 (m, 3H), 4,05-4,30 (m, 1H), 2,95-3,90 (m, 3H), 1,60-2,20 (m, 4H).

(ii) Ph-(S o R)C(OH)(CH_{2}OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 51(i) anterior a partir de Ph-(S o R)C(-O-C(CH_{3})_{2}-O-CH_{2}-)C(O)-Pro-Pab x HOAc (0,060 g, 0,12 mmol, compuesto 52B del Ejemplo 52 anterior), proporcionando 1 mg (1%).

EM-LC m/z 409 (M-1)^{-}, 411 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,25-7,85 (m, 9H), 4,40-4,65 (m, 3H), 4,05-4,20 (m, 1H), 3,25-3,75 (m, 3H), 1,40-2,20 (m, 4H).

Ejemplo 54 Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R)-(-)-2-hidroxi-2-fenilpropiónico (0,20 g, 1,2 mmol) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,50 g, 1,1 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior) proporcionando 0,13 g (22%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,18-7,87 (m, 14H), 5,25 (s, 2H), 4,37-4,61 (m, 3H), 3,03-3,19 (m, 2H), 1,50-2,17 (m, 7H).

(ii) Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de Ph-(R)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,13 g, 0,25 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 94 mg (89%).

EM-FAB m/z 395 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,37-7,91 (m, 9H), 4,33-4,61 (m, 3H), 3,15-4,01 (m, 2H), 1,72-2,23 (m, 7H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 176,06, 175,49, 174,88, 166,90.

Ejemplo 55 Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (S)-(+)-2-hidroxi-2-fenilpropiónico (0,20 g, 1,2 mmol) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,50 g, 1,1 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior) proporcionando 0,19 g (33%).

^{1}H RMN (500 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,20-7,77 (m, 14H), 5,22 (s, 2H), 4,53-4,58 (m, 1H), 4,32-4,44 (m, 2H), 3,13-3,38 (m, 2H), 1,53-2,04 (m, 7H).

(ii) Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de Ph-(S)C(Me)(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,12 g, 0,23 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 80 mg (82%).

EM-FAB m/z 395 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz; D_{2}O): \delta 7,35-7,84 (m, 9H), 4,47-4,63 (m, 3H), 3,30-3,70 (m, 2H), 1,60-2,29 (m, 7H).

^{13}C RMN (75,5 MHz; D_{2}O, complicado debido a rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 175,58, 175,23, 174,79, 167,07.

Ejemplo 56 Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3,4-difluoromandélico (0,20 g, 1,06 mmol) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,53 g, 1,17 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior) proporcionando 445 mg (76%).

EM-LC m/z 549 (M-1)^{-}, 551 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CDCl_{3}): \delta 6,98-7,74 (m, 12H), 5,16-5,21 (m, 2H), 5,06-5,01 (m, 1H), 4,22-4,56 (m, 3H), 3,32-3,58 (m, 1H), 2,88-3,12 (m, 1H), 1,70-2,12 (m, 4H).

(ii) Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 1(v) anterior a partir de Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,175 g, 0,31 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 127 mg (88%).

EM-LC m/z 417 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz; CD_{3}OD): \delta 7,11-7,86 (m, 7H), 5,37 (s, 1H), 4,36-5,00 (m, 4H), 3,66-3,78 (m, 1H), 1,80-2,31 (m, 4H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,66, 174,40, 171,96, 171,82, 166,48.

Ejemplo 57 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab x HOAc (i) Boc-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3}

Una mezcla de Boc-(R,S)Pic(4-hidroxi)-OCH_{3} (1,1 g, 4,25 mmol, preparado conforme a Gillard et al., J. Org. Chem., (1996) 61, 2226), PCC (1,8 g, 8,5 mmol) y tamiz molecular (en polvo, 3\ring{A}, 1,0 g) en CH_{2}Cl_{2} (20 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 4 h. Se añadió dietiléter (60 ml) y la mezcla de reacción se filtró a través de una corta columna de gel de sílice eluida con EtOAc:hexano (1:1). El filtrado se evaporó proporcionando 1,0 g (92%) del compuesto del subtítulo.

EM-FAB m/z 258 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 4,75-5,20 (m, 1H), 3,55-4,15 (m, 5H), 2,40-2,90 (m, 4H), 1,30-1,65 (m, 9H).

(ii) H-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3}

Se trató Boc-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3} (0,48 g, 1,87 mmol, de la etapa (i) anterior) con ácido trifluoroacético en CH_{2}Cl_{2} (50%, 4 ml) a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2}, se lavó con Na_{2}CO_{3}/aq, se secó (K_{2}CO_{3}) y se evaporó. El rendimiento del compuesto del subtítulo fue de 0,23 g (78%).

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 3,65-3,80 (m, 4H), 3,30-3,40 (m, 1H), 2,90-3,00 (m, 1H), 2,30-2,70 (m, 4H).

(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3}

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de H-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3} (0,22 g, 1,4 mmol, de la etapa (ii) anterior) y Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-OH (0,372 g, 1,4 mmol, preparado conforme al método descrito en Hamada et al., J. Am. Chem. Soc., (1989) 111, 669), proporcionando 288 mg (51%).

EM-FAB m/z 406 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,20-7,50 (m, 5H), 5,25-5,70 (m, 2H), 4,15-4,75 (m, 1H), 3,20-3,80 (m, 4H), 2,00-2,90 (m, 3H), 1,30-1,65 (m, 1H), 0,85-1,15 (m, 9H), 0,10-0,35 (m, 6H).

(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OH

Una mezcla de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3} (0,28 g, 0,69 mmol, de la etapa (iii) anterior) y una solución de hidróxido de litio (2M, 10 ml) en THF (10 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 h. El THF se eliminó a vacío, el residuo se acidificó (pH 2) con KHSO_{4} (2M) y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con H_{2}O, se secó (MgSO_{4}) y se evaporó. El rendimiento del compuesto del subtítulo fue de 0,24 g (89%).

EM-FAB m/z 392 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,20-7,55 (m, 5H), 5,15-5,75 (m, 2H), 4,10-4,30 (m, 1H), 3,20-3,80 (m, 1H), 2,05-3,00 (m, 4H), 1,35-1,55 (m, 1H), 0,90-1,05 (m, 9H), 0,10-0,25 (m, 6H).

(v) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 1(ii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-OH (0,227 g, 0,58 mmol, de la etapa (iv) anterior) proporcionando 92 mg (24%).

EM-FAB m/z 657 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 6,90-7,90 (m, 14H), 5,10-5,80 (m, 4H), 3,60-4,70 (m, 3H), 2,10-3,20 (m, 4H), 1,40-1,70 (m, 1H), 0,80-1,10 (m, 9H), 0,00-0,25 (m, 6H).

(vi) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en la etapa (ii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z) (0,09 g, 0,14 mmol, de la etapa (v) anterior) proporcionando 61 mg (82%).

EM-FAB m/z 543 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 6,95-7,90 (m, 14H), 5,00-5,55 (m, 4H), 3,95-4,70 (m, 2H), 3,20-3,70 (m, 2H), 1,20-2,80 (m, 4H).

(vii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(iii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-oxo)-Pab(Z) (0,061 g, 0,11 mmol, de la etapa (vi) anterior) proporcionando 46 mg (90%).

EM-LC m/z 407 (M-1)^{-}, 409 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz, D_{2}O): \delta 7,20-7,85 (m, 9H), 5,00-5,80 (m, 2H), 4,35-4,55 (m, 2H), 3,40-4,05 (m, 2H), 1,80-3,10 (m, 4H).

Ejemplo 58 Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R o S)Pic(4-metilen)-Pab x HOAc y Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(S o R)Pic(4-metilen)-Pab x HOAc (i) Boc-(R,S)Pic(4-metilen)-OCH_{3}

Se secó bromuro de metiltrifenilfosfonio (2,68 g, 7,5 mmol) a vacío durante 20 minutos y se suspendió después en THF seco (20 ml) a 0ºC. Se añadió gota a gota butil-litio (1,6N en hexano, 4,7 ml, 7,5 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a -78ºC y se añadió Boc-(R,S)Pic(4-oxo)-OCH_{3} (1,3 g, 5,0 mmol, véase Ejemplo 57(i) anterior). La mezcla de reacción se agitó a -78ºC durante 30 minutos seguido de 2 h a temperatura ambiente. Se añadió cloruro amónico a la mezcla de reacción y, después de la separación, la capa de H_{2}O se extrajo dos veces con dietiléter. La capa orgánica combinada se secó y se evaporó para proporcionar un producto bruto que se purificó por cromatografía de evaporación súbita eluyendo con EtOAc:hexano (30:70) para proporcionar 480 mg (37%) del compuesto del subtítulo.

EM-FAB m/z 256 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 4,70-5,10 (m, 3H), 3,95-4,15 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,10-3,10 (m, 5H), 1,35-1,60 (m, 9H).

(ii) H-(R,S)Pic(4-metilen)-OCH_{3}

Se trató Boc-(R,S)Pic(4-metilen)-OCH_{3 }(0,48 g, 1,88 mmol, de la etapa (i) anterior) con ácido trifluoroacético (50% en CH_{2}Cl_{2}, 6 ml) a temperatura ambiente durante 40 minutos. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se disolvió en CH_{2}Cl_{2}, se lavó con Na_{2}CO_{3} (saturado), se secó (K_{2}CO_{3}) y se evaporó. El rendimiento del compuesto del subtítulo fue de 0,27 g (95%).

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 4,70-4,85 (m, 2H), 3,75 (m, 3H), 3,35-3,45 (m, 1H), 3,15-3,25 (m, 1H), 2,55-2,70 (m, 2H), 2,10-2,30 (m, 3H).

(iii) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-OCH_{3}

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-OH (0,37 g, 1,4 mmol, preparado conforme al método descrito en Hamada et al., J. Am. Chem. Soc., (1989) 111, 669) y H-(R,S)Pic(4-metilen)-OCH_{3} (0,21 g, 1,4 mmol, de la etapa (ii) anterior), proporcionando 0,283 g (52%).

EM-FAB m/z 404 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,25-7,55 (m, 5H), 5,15-5,70 (m, 2H), 4,20-4,85 (m, 3H), 3,65-3,75 (m, 3H), 1,90-3,20 (m, 5H), 0,90-1,10 (m, 9H), 0,10-0,30 (m, 6H).

(iv) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-OH

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 57(iv) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-OCH_{3} (0,28 g, 0,69 mmol, de la etapa (iii) anterior), proporcionando

\hbox{0,24 g}

(89%).

EM-FAB m/z 390 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,15-7,50 (m, 5H), 5,15-5,95 (m, 2H), 3,55-5,00 (m, 3H), 1,75-3,25 (m, 5H), 0,85-1,05 (m, 9H), 0,10-0,25 (m, 6H).

(v) Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-OH (0,235 g, 0,6 mmol, de la etapa (iv) anterior) y H-Pab(Z) x HCl (0,211 g, 0,66 mmol), proporcionando 0,124 g (35%).

EM-FAB m/z 655 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,10-7,90 (m, 14H), 5,15-5,70 (m, 4H), 4,10-5,05 (m, 4H), 1,75-3,05 (m, 6H), 0,80-1,10 (m, 9H), 0,00-0,25 (m, 6H).

(vi) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 57(vi) anterior a partir de Ph-(R)CH(OTBDMS)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-Pab(Z) (0,08 g, 0,12 mmol, de la etapa (v) anterior), proporcionando 0,06 g (91%).

EM-LC m/z 541 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, CD_{3}OD): \delta 7,15-7,90 (m, 14H), 5,20-5,80 (m, 4H), 4,35-4,90 (m, 4H), 3,70-4,15 (m, 1H), 3,20-3,40 (m, 1H), 1,10-2,90 (m, 4H).

(vii) Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R o S)Pic(4-metilen)-Pab x HOAc y Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(S o R)Pic(4-metilen)-Pab x HOAc

Una mezcla de Ph-(R)CH(OH)-C(O)-(R,S)Pic(4-metilen)-Pab(Z) (0,035 g, 0,065 mmol, de la etapa (vi) anterior), acetato de amonio (0,50 g, 7,4 mmol) e imidazol (0,20 g, 3,0 mmol) en metanol (5 ml) se agitó a 60ºC durante la noche. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se sometió a RPLC preparativa. Algunas fracciones se concentraron para proporcionar 1,8 mg de compuesto 58B. Las últimas fracciones se concentraron para proporcionar 7 mg de compuesto 58A.

Compuesto 58A:

EM-LC m/z 405 (M-1)^{-}, 407 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz, D_{2}O): \delta 7,15-7,80 (m, 9H), 5,65-5,70 (m, 1H), 4,80-5,25 (m, 1H), 4,45-4,60 (m, 2H), 3,60-4,00 (m, 2H), 1,30-3,30 (m, 6H).

Compuesto 58B:

EM-LC m/z 407 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz, D_{2}O): \delta 7,30-7,80 (m, 9H), 5,45-5,75 (m, 1H), 4,80-5,20 (m, 1H), 4,35-4,70 (m, 3H), 3,75-3,90 (m, 1H), 1,70-3,05 (m, 6H).

Ejemplo 59 Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc (i) Ácido (R,S)-3-cloromandélico

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 15(i) anterior a partir de 3-clorobenzaldehído (7,03 g, 50 mmol), proporcionando 2 g (21%).

EM-LC m/z 185 (M-1)^{-}, 370 (2M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz, CD_{3}OD): \delta 7,28-7,51 (m, 4H), 5,14 (s, 1H).

(ii) Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3-cloromandélico (0,149 g, 0,8 mmol, de la etapa (i) anterior), proporcionando 0,30 g (70%).

^{1}H RMN (500 MHz, CDCl_{3}): \delta 7,08-7,84 (m, 13H), 5,18-5,24 (m, 2H), 4,86-5,01 (m, 2H), 4,02-4,56 (m, 3H), 3,57-3,76 (m, 1H), 2,30-2,72 (m, 2H).

(iii) Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab x HOAc

El compuesto del título se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 43 anterior a partir de Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab(Z) (0,10 g, 0,19 mmol, de la etapa (ii) anterior), proporcionando 55 mg (63%).

EM-LC m/z 399 (M-1)^{-}, 401 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (400 MHz, D_{2}O): \delta 7,10-7,85 (m, 8H), 4,82- 5,37 (m, 2H), 3,96-4,79 (m, 4H), 2,14-2,85 (m, 2H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; D_{2}O, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,00, 173,17, 172,83, 172,61, 166,59.

Ejemplo 60 Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl (i) Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z)

El compuesto del subtítulo se preparó conforme al método descrito en el Ejemplo 3(ii) anterior a partir de ácido (R,S)-3-cloro-4-hidroximandélico (0,25 g, 1,23 mmol) y H-Pro-Pab(Z) x 2 HCl (0,615 g, 1,35 mmol, véase Ejemplo 35(ii) anterior), proporcionando 382 mg (55%).

EM-LC m/z 564 (M-1)^{-}.

^{1}H RMN (400 MHz, CD_{3}OD): \delta 6,80-7,85 (m, 12H), 5,16-5,25 (m, 3H), 4,35-4,51 (m, 3H), 3,45-3,75 (m, 1H), 3,07-3,42 (m, 1H), 1,72-2,18 (m, 4H).

^{13}C RMN (100,6 MHz; CD_{3}OD, complicado debido a diastereómeros/rotámeros), carbonos amidino y carbonílico: \delta 174,62, 174,27, 173,02, 172,88, 170,41, 165,04.

(ii) Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab x HCl

El compuesto del título se preparó análogamente al método descrito en el Ejemplo 43 anterior a partir de Ph(3-Cl,4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab(Z) (0,10 g, 0,177 mmol, de la etapa (i) anterior), ácido trifluoroacético (3,7 ml, 48 mmol) y tioanisol (1,04 ml, 8,85 mmol), proporcionando 57 mg (70%).

EM-LC m/z 431 (M+1)^{+}.

^{1}H RMN (500 MHz, D_{2}O): \delta 6,84-7,86 (m, 7H), 5,29- 5,42 (m, 1H), 4,30-4,68 (m, 3H), 3,05-4,05 (m, 2H), 1,70-2,37 (m, 4H).

Ejemplo 61

Los compuestos de los títulos de los Ejemplos 1 a 60 se ensayaron en el Ensayo A anterior, encontrándose que todos exhibían un valor IC_{50}TT menor que 0,3 \muM.

Abreviaturas

\dotable{\tabskip\tabcolsep#\hfil\+#\hfil\tabskip0ptplus1fil\dddarstrut\cr}{
 aq = \+   acuoso\cr  Aze = \+  ácido
azetidin-2-carboxílico\cr  Boc = \+ 
t-butiloxicarbonilo\cr  Bn = \+   bencilo\cr  Bu =
\+   butilo\cr  Ch = \+   ciclohexilo\cr  DCC = \+ 
diciclohexilcarbodiimida\cr  DIPEA = \+  diisopropiletilamina\cr 
DMAP = \+  N,N-dimetilaminopiridina\cr  DMF = \+ 
dimetilformamida\cr  EDC = \+
1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida\cr
 \+ clorhidrato\cr  Et = \+   etilo\cr  EtOH = \+  etanol\cr  h = \+
  horas\cr  HCl = \+  ácido clorhídrico\cr  HOAc = \+  ácido
acético\cr  HOSu = \+  N-hidroxisuccinimida\cr 
H-Dig = \+ 
1-amidino-3-aminoetilazetidina\cr
 H-Dig(Z) = \+ 
3-aminoetil-1-(N-benciloxicarbonil-\cr
 \+ amidino)-azetidina\cr  H-Hig =
\+ 
1-amidino-3-aminoetilpirrolidina\cr
 H-Hig(Z) = \+
3-aminoetil-1-(N-benciloxicarbonil-\cr
 \+ amidino)pirrolidina\cr  H-Pac = \+ 
1-amidino-4-aminometilciclohexano\cr
 H-Pac(Z) = \+
4-aminometil-1-(N-benciloxicarbonil-\cr
 \+ amidino)ciclohexano\cr  H-Pic = \+  ácido
pipecolínico\cr  H-Pig = \+ 
1-amidino-3-aminometilpiperidina\cr
 H-Pig(Z) = \+
3-aminometil-1-(N-benciloxicarbonil-\cr
 \+ amidino)piperidina\cr  H-Pab = \+ 
1-amidino-4-aminometilbenceno\cr
 H-Pab(Z) = \+
4-aminometil-1-(N-benciloxicarbonil-\cr
 \+ amidino)benceno\cr  PCC = \+  clorocromato de
piridinio\cr  HPLC = \+ cromatografía de líquidos de alta\cr  \+
resolución\cr  Me = \+   metilo\cr  Ph = \+   fenilo\cr  RPLC = \+
cromatografía de líquidos de alta\cr  \+ resolución en fase
invertida\cr  Su = \+   succinimido\cr  TBDMS = \+ 
t-butildimetilsililo\cr  TBTU = \+
[N,N,N',N'-tetrametil-O-(benzotriazol-1-\cr
 \+ il)uronio tetrafluoroborato]\cr  THF = \+ 
tetrahidrofurano\cr  THP = \+  tetrahidropiranilo\cr  TMS = \+ 
trimetilsililo\cr  WSCl = \+  carbodiimida soluble en agua\cr  Z =
\+  
benciloxicarbonilo\cr}

Los prefijos n, s, i y t tienen sus significados usuales: normal, secundario, iso y terciario. La estereoquímica de los aminoácidos es (S), por defecto, si no se expresa lo contrario.

Claims

1. Un compuesto de fórmula I,

12

en donde

p y q, independientemente, representan 0;

R^{1} representa H;

R^{2} representa H;

R^{27} representa H, alquilo (C_{1}-C_{4}) ó C(O)R^{29};

R^{28} y R^{29}, independientemente, representan H o alquilo (C_{1}-C_{4})

R^{4} representa H o alquilo (C_{1}-C_{4});

n representa 1; y

B representa un fragmento estructural de fórmula IVa

13

en donde

R^{5} representa H, halógeno o alquilo (C_{1}-C_{4});

o una sal del mismo farmacéuticamente aceptable.

2. Un compuesto como el reivindicado en la reivindicación 1, en donde R^{5} representa H cuando B representa un fragmento estructural de fórmula IVa.

3. Un compuesto como el reivindicado en la reivindicación 1 ó en la reivindicación 2, en donde R^{4} representa H.

4. Un compuesto como el reivindicado en alguna de las reivindicaciones 1 a 3, en donde Y representa CH_{2},

\hbox{(CH _{2} ) _{2} }

, (CH_{2})_{3}, CH_{2}CH(CH_{3})CH_{2}, CH_{2}C(=O)CH_{2} ó CH_{2}C(=CH_{2})CH_{2}.

5. Un compuesto como el reivindicado en la reivindicación 4, en donde Y representa CH_{2}, (CH_{2})_{2} ó CH_{2}C(=CH_{2})CH_{2}.

6. Un compuesto como el reivindicado en la alguna de las reivindicaciones 1 a 5, en donde R^{3} está sustituido por uno o más de hidroxi, flúor, cloro, metilo, metoxi, amino, nitro, trifluorometilo, metilendioxi, etoxi o propoxi.

7. Un compuesto como el reivindicado en la reivindicación 6, en donde R^{3} está sustituido por uno o más de hidroxi, mono o diflúor, cloro, metilo, metoxi o metilendioxi.

8. Un compuesto como el reivindicado en alguna de las reivindicaciones 1 a 7, en donde Y representa CH_{2}.

9. Un compuesto como el reivindicado en alguna de las reivindicaciones 1 a 8, en donde el carbono \alpha del aminoácido en el fragmento

14

está en la configuración S.

10. Un compuesto como el reivindicado en alguna de las reivindicaciones 1 a 9, en donde el carbono \alpha del fragmento

15

está en la configuración R.

11. Un compuesto como el reivindicado en la reivindicación 1, el cual es:

Ph(3-Me)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe, 4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe, 4-OH)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,4-(-O-CH_{2}O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-OMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,5-diOMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,5-diMe)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab;

Ph(3-NH_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3-NO_{2})-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,4-(-O-CH_{2}O-))-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,5-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab;

Ph(3,4-diF)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Pro-Pab, y

Ph(3-Cl)-(R,S)CH(OH)-C(O)-Aze-Pab.

12. Una formulación farmacéutica que incluye un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en mezcla con una sustancia coadyuvante, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptables.

13. Un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como fármaco.

14. Un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina.

15. Un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso en el tratamiento de trombosis.

16. Un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para uso como anticoagulante.

17. El uso de un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como ingrediente activo en la manufactura de un medicamento para el tratamiento de una condición en donde se requiere la inhibición de trombina.

18. Uso como se reivindica en la reivindicación 17, en donde la condición es trombosis.

19. Uso como se reivindica en la reivindicación 17, en donde la condición es hipercoagulabilidad en sangre y tejidos.

20. Uso de un compuesto como el definido en alguna de las reivindicaciones 1 a 11 o de una sal farmacéuticamente aceptable del mismo como ingrediente activo en la manufactura de un anticoagulante.

21. Un proceso para la preparación de un compuesto como el definido en la reivindicación 1, cuyo proceso comprende:

\newpage

a) El acoplamiento de un compuesto de fórmula V,

16

en donde p, q, R^{1}, R^{2} y R^{3} son lo definido en la reivindicación 1, con un compuesto de fórmula VI,

17

en donde R^{4}, Y, n y B son lo definido en la reivindicación 1, o

b) El acoplamiento de un compuesto de fórmula VII,

18

en donde p, q, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} e Y son lo definido en la reivindicación 1, con un compuesto de fórmula VIII,

H_{2}N-(CH_{2})_{n}-B\eqnum{VIII}

en donde n y B son lo definido en la reivindicación 1.

\newpage

22. Un compuesto de fórmula XIV

19

en donde B' representa un fragmento estructural de fórmula Ivd

20

D^{1} y D^{2}, independientemente, representan H o benciloxicarbonilo y p, q, R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, Y, n y R^{5} son lo definido en la reivindicación 1, siempre que D^{1} y D^{2} no representen ambos H.