ES2197950T3

ES2197950T3 - Antagonistas del receptor de la integrina.

Info

Publication number: ES2197950T3
Application number: ES96923553T
Authority: ES
Inventors: William E. Bondinell; William H. Miller
Original assignee: SmithKline Beecham Corp
Current assignee: SmithKline Beecham Corp
Priority date: 1995-06-29
Filing date: 1996-06-28
Publication date: 2004-01-16
Anticipated expiration: 2016-06-28
Also published as: EP0910563B1; JP3960482B2; NO965607L; HUP9603432A3; JPH11508887A; NO965607D0; DE69627899T2; EP0910563A4; CZ292925B6; HUP9603432A2; ATE238996T1; EP0910563A1; CA2192764C; CA2192764A1; DK0910563T3; PT910563E; HK1019594A1; AU736487B2; CZ367996A3; BR9606200A

Abstract

LA INVENCION SE REFIERE A COMPUESTOS DE FORMULA (I), DONDE, A 1 ES C O N; E ES UN ANILLO AROMATICO DE SEIS MIEMBROS O UN ANILLO HETEROAROMATICO DE SEIS MIEMBROS OPCIONALMENTE SUSTITUIDO POR R 3 O R 4 ; X 1 - X 2 ES CHR S UP,1 - CH, CR 1 = CH, NR 1 - CH, S(O) U - CH O O - CH; X 3 ES CR 5 R 5'' , NR 5 , S(O) U O O; R 2 ES - OR'', - NR''R", - NR''SO 2 R'''''', - NR''O''R'', - OCR'' 2 C(O)OR'', - OCR'' 2 OC(O) - R'', - OCR'' 2 C(O)NR'' 2 , CF 3 O - COCR'' 2 R 2'' ; R 3 , R 4 Y R 7 SON INDEPENDIENTEMENTE, H, GRUPO HALO, - OR 12 , - SR 12 , - CN, - NR''R 12 , - NO 2 , CF 3 , CF 3 S(O) R -, - CO 2 R'', - CONR'' 2 , R 14 - ALQUILO C 0-6 -, R 14 - OXOALQUILO C 1-6 , R 14 - ALQUENILO C 2-6 -, R 14 - ALQUINILO C 2-6 -, R 14 - OXIALQUILO C 0-6 , R SUP ,14 - ALQUILAMINO C 0-6 -, O R 14 ALQUILO C 0-6 - S(O) R -, R 6 ES W (CR'' 2 ) Q - Z - (CR''R 10 ) R - U CR'' 2 ) S - V - O W'' - (CR'' SUB ,2 ) Q - U (CR'' 2 ) S - U Y V ESTAN AUSENTES O SON CO, CR'' 2 , C(= CR 15 2 ), S(O) N , O, NR SUP,15 , CR 15 OR 15 , CR''(OR'''')CR'' 2 , CR'' 2 CR''(OR''''), C(O)CR'' 2 , CR 15 2 C(O), CONR 15 , NR 15 CO, OC(O), C(O)O, C(S)O, OC(S), C(S)NR 15 , NR SUP,15 C(S), SO 2 NR 15 , NR 15 SO 2 , N = N, NR 15 NR 15 , NR 15 CR 15 2 , NR 15 CR 15 2 , CR 15 2 , OCR 15 2 , C$(M) ZC, CR 15 = CR 15 , HET, O AR, A CONDICION DE QUE U Y V NO ESTEN AUSENTES SIMULTANEAMENTE, Y W Y W'' SEAN UN GRUPO SUSTITUYENTE QUE CONTENGA NITROGENO. DICHOS COMPUESTOS SON ANTAGONISTAS DE LOS RECEPTORES DE INTEGRINA.

Description

Antagonistas del receptor de la integrina.

Campo de la invención

Esta invención se refiere a compuestos farmacéuticamente activos que se unen a integrinas, tales como el receptor de vitronectina y el receptor de fibrinógeno. Tales compuestos son útiles para inhibir la agregación plaquetaria y la unión de osteoclastos al hueso.

Fundamento de la invención

Las integrinas son una familia de proteínas heterodímeras que generalmente son mediadoras de la adhesión celular. Son típicas de tales proteínas el receptor de vitronectina (un heterodímero \alpha_{v}\beta_{3}) y el receptor de fibrinógeno (un heterodímero \alpha_{IIb}\beta_{3}). Se ha encontrado que los ligandos naturales de estos receptores (p. ej. vitronectina y fibrinógeno) comparten una secuencia común de aminoácidos -Arg-Gly-Asp-, que parece ser crítica para la unión. De hecho, muchos de los receptores de integrina parecen presentar reacción cruzada con ligandos que poseen tal secuencia de aminoácidos. Por ejemplo el receptor \alpha_{IIb}\beta_{3} reacciona con fibronectina y vitronectina, trombospondina y factor de von Willebrand, así como con fibrinógeno. Funcionalmente el fibrinógeno, un dímero que tiene dos sitios de unión para \alpha_{IIb}\beta_{3}, reacciona con receptores activados que se encuentran en la superficie de las plaquetas. La unión de receptores \alpha_{IIb}\beta_{3} en plaquetas adyacentes por el fibrinógeno da lugar a reticulación, y se considera que es un factor primordial en la agregación plaquetaria. Se ha demostrado que los compuestos que inhiben la unión del receptor \alpha_{IIb}\beta_{3} al fibrinógeno inhiben la agregación plaquetaria in vitro, y la formación de trombos in vivo. Véase, por ejemplo, el documento EP-A 0 341 915.

El receptor de vitronectina se encuentra en diversos tipos de células, tales como los osteoclastos y las células endoteliales que revisten los vasos sanguíneos. Estudios recientes han indicado que la unión de los osteoclastos a la matriz ósea está mediada por estos receptores de adhesión a la superficie de la célula. Por ejemplo, Davies et al., J. Cell Biol., 1989, 109, 1817, describen que el antígeno funcional osteoclástico, que está implicado en la regulación de la resorción ósea, está relacionado bioquímicamente con el receptor de vitronectina. Se sabe que el receptor de vitronectina se une a proteínas de la matriz ósea tales como la osteopontina, la sialoproteína ósea y la trombospondina, que contienen el motivo tripéptido Arg-Gly-Asp (o RGD). Así, Horton et al., Exp. Cell Res. 1991, 195, 368, describen que péptidos que contienen RGD y un anticuerpo receptor antivitronectina (23C6) inhiben la resorción de dentina y la diseminación celular por los osteoclastos. Bertolini et al., J. Bone Min. Res. 6, Sup. 1, S146, 252, han indicado que la amida de la ciclo-S,S-N^{\alpha}-acetil-cisteinil-N^{\alpha}-metil- argininil-glicil-aspartil-penicilamina inhibe la unión de los osteoclastos al hueso. Además, Sato et al., J. Cell Biol. 1990, 111, 1713, describen que la equistatina, un péptido del veneno de las serpientes que contiene la secuencia RGD, es un potente inhibidor de la resorción ósea en cultivo de tejidos, e inhibe la fijación de los osteoclastos al hueso. Fisher et al., Endocrinology 1993, 132, 1411, han indicado también que la equistatina inhibe la resorción ósea in vivo en ratas. Los documentos EP 528 587 y 528 586 publican derivados de fenilo sustituidos que inhiben la resorción ósea mediada por osteoclastos.

Bondinell et al., en los documentos WO 93/00095 (PCT/ US92/05463) y WO 94/14776 (PCT/US93/12436), describen que ciertos compuestos que tienen un sistema de anillo bicíclico 6-7 sustituido, son útiles para inhibir el receptor de fibrinógeno (\alpha_{IIb}\beta_{3}). Otros sistemas de anillo bicíclico 6-7 que inhiben el receptor de fibrinógeno se describen en Blackburn et al., en el documento WO 93/08174 (PCT/US92/ 08788). Blackburn et al., en el documento WO 95/04057 (PCT/ US94/07989) describen también compuestos que tienen un anillo de cinco o seis miembros fusionado con tal anillo bicíclico 6-7, formando un sistema de anillo tricíclico, que son útiles como antagonistas del receptor de fibrinógeno. Otros compuestos que tienen sistemas de anillo bicíclico 6-7 que inhiben selectivamente el receptor de vitronectina, se describen en los documentos WO 96/00730 (PCT/US95/08306) y WO 96/00574 (PCT/US95/08146). El documento US 3.906.040 (Vincent et al.) describe una serie de dibenzo(a,d)cicloheptenos sustituidos que se afirma que tienen uso en el campo cardiovascular. El documento US 5.302.602 (Oshima et al.) describe compuestos tricíclicos que tienen potencial para antagonizar el tromboxano A2 y que se afirma que tienen actividad anti-alérgica y/o anti-histamínica. El documento US 3.972.936 (Christy) describe derivados tetrafluoro de 10,11-dihidro-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno que se afirma que tienen actividad antidepresiva. Se ha descubierto ahora que ciertos nuevos sistemas de anillo tricíclico son plantillas útiles para preparar antagonistas del receptor de integrina. También se ha descubierto que tal sistema de anillo puede usarse como plantilla, que puede ser adecuadamente sustituida para preparar compuestos que son selectivos para el receptor de fibrinógeno o bien para el receptor de vitronectina.

Sumario de la invención

Es un objeto de esta invención proporcionar compuestos de fórmula (IV), como se describe más adelante, que tienen actividad farmacológica para la inhibición de receptores de integrina. Es un objeto de esta invención proporcionar una plantilla que puede ser adecuadamente sustituida para proporcionar la unión selectiva para receptores de integrina específicos, especialmente el receptor de fibrinógeno (\alpha_{IIb}\beta_{3}) o de vitronectina (\alpha_{v}\beta_{3}) relativa entre sí y otros receptores de integrina.

Esta invención es también una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la fórmula (IV) y un vehículo aceptable farmacéuticamente.

Esta invención es también el uso de compuestos de fórmula (IV) en la Elaboración de un medicamento para tratar enfermedades cuya patología puede modificarse por unión a un receptor de integrina, especialmente el receptor de vitronectina o el receptor de fibrinógeno. En un aspecto particular, los compuestos de esta invención son útiles en la elaboración de un medicamento para tratar osteoporosis, aterosclerosis, reestenosis, cáncer y condiciones en las que es deseable inhibir la agregación plaquetaria, tales como el trastorno cerebro-vascular, ataques de isquemia transitoria, infarto de miocardio y retrombosis después de terapia trombolítica.

Descripción detallada

Esta invención comprende compuestos de fórmula (IV):

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en la que

X^{1}-X^{2} es CHR^{1}-CH, CR^{1}=CH, NR^{1}-CH, S(O)_{u}-CH o O-CH;

X^{3} es CR^{5}R^{5\;'}, NR^{5}, S(O)_{u} o O;

R' es H, alquilo(C_{1}-C_{6}), cicloalquilo(C_{3}-C_{7})-alquilo(C_{0}-C_{4}) o Ar-alquilo(C_{0}-C_{4});

R'' es R', -C(O)R' o -C(O)OR^{5};

R''' es alquilo(C_{1}-C_{6}), cicloalquilo(C_{3}-C_{7})-alquilo(C_{0}-C_{4}) o Ar-alquilo(C_{0}-C_{4});

R^{1} es H, alquilo(C_{1}-C_{6}), cicloalquilo(C_{3}-C_{7})-alquilo(C_{0}-C_{4}) o Ar-alquilo(C_{0}-C_{4});

R^{2} es -OR', -NR'R'', -NR'SO_{2}R''', -NR'OR', -OCR'_{2}C(O)OR', -OCR'_{2}OC(O)R', -OCR'_{2}C(O)NR'_{2}, CF_{3} o

\break\hbox{-COCR' _{2} R ^{2} '}

;

R^{2}' es -OR', -CN, -S(O)_{r}R', S(O)_{2}NR'_{2}, -C(O)R'C(O)NR'_{2} o -CO_{2}R';

R^{5} y R^{5\;'} son independientemente H, alquilo(C_{1}-C_{6}), cicloalquilo(C_{3}-C_{7})-alquilo(C_{0}-C_{4}) o Ar-alquilo(C_{0}-C_{4});

R^{6} es W'-(CR'_{2})_{q}-U elegido entre:

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R''HNC(=NH)NH-(CH_{2})_{3}(CHR^{10})-U y R''HN-(CH_{2})_{5}-U

en donde G es N o CH, R^{20} es hidrógeno, amino, mono o di-alquil(C_{1}-C_{4})amino, hidroxi o alquilo(C_{1}-C_{4}), y U es NR'CO, CONR', (CH_{2})CO, CH=CH, C\equivC, CH_{2}O, OCH_{2} o (CH_{2})_{2}; o R^{6} es W'-(CR'_{2})_{q}-U en donde W' es

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en donde Q es NH; R^{a} es alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), halógeno o R'NH, R^{b} y R^{c} se juntan para formar un anillo ciclohexilo, fenilo o piridilo opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo (C_{1}-C_{4}), OR^{1}, SR^{1}, COR^{1}, OH, NO_{2},

\hbox{N(R ^{1} ) _{2} ,}

CO(NR^{1})_{2}, CH_{2}N(R^{1})_{2}, CN o R''R'NC(=NR')- y -(CR'_{2})_{q}-U- es (CH_{2})_{q}-NR'CO, (CH_{2})_{q}-CH_{2}O o

\break\hbox{(CH _{2} ) _{q} -CH _{2} CH _{2} }

;

R^{3} es H, halo, -OR^{12}, -SR^{12}, -CN, -NR'R^{12}, -NO_{2}, -CF_{3}, CF_{3}S(O)_{r}-, -CO_{2}R'-, -CONR'_{2}, R^{14}- alquilo(C_{0}-C_{6}),

\hbox{R ^{14} -oxoalquilo(C _{1} -C _{6} )-}

, R^{14}-alquenilo(C_{2}-C_{6})-, R^{14}-alquinilo(C_{2}-C_{6})-, R^{14}-alquiloxi(C_{0}-C_{6})-,

\hbox{R ^{14} -alquilamino(C _{0} -
C _{6} )-,}

o R^{14}-alquilo(C_{0}-C_{6})-S(O)_{r}-;

R^{10} es H, alquilo(C_{1}-C_{4}) o -NR'R'';

R^{12} es R', -C(O)R', -C(O)NR'_{2}, -C(O)OR^{5}, -S(O)_{m}R' o S(O)_{2}NR'_{2};

R^{14} es H, cicloalquilo(C_{3}-C_{6}), Het o Ar;

m es 1 ó 2;

q es 0, 1, 2 ó 3;

r es 0, 1 ó 2;

u es 0, 1 ó 2; y

v es 0 ó 1;

Ar representa fenilo o naftilo opcionalmente sustituido con uno a tres de los grupos alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi

\hbox{(C _{1} -C _{4} )}

, alquiltio (C_{1}-C_{4}), trifluoroalquilo, OH, F, Cl, Br o I.

Het representa un anillo monocíclico de cinco o seis miembros o un anillo bicíclico de nueve o diez miembros que contiene de uno a tres heteroátomos elegidos entre el grupo formado por nitrógeno, oxígeno y azufre, opcionalmente sustituido con uno a tres de los grupos alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{4}), alquiltio (C_{1}- C_{4}), trifluoroalquilo, OH, F, Cl, Br ó I.

\code{N} representa un heterociclo nitrogenado que puede ser un anillo monocíclico saturado o insaturado estable, de cinco, seis o siete miembros, o un anillo bicíclico de siete a diez miembros que contiene hasta tres átomos de nitrógeno o que contiene un átomo de nitrógeno y un heteroátomo elegido entre oxígeno y azufre y que puede estar sustituido con H, alcoxi (C_{1}-C_{4}), F, Cl, Br, I, NO_{2}, NR'_{2}, OH, CO_{2}R', CONHR', CF_{3}, R^{14}-alquilo (C_{0}-C_{4}), R^{14}-alquilo (C_{1}-C_{4})-S(O)_{u} o alquilo (C_{1}-C_{4}) sustituido con cualquiera de los sustituyentes antes mencionados.

Cicloalquilo (C_{3}-C_{7}) se refiere a un sistema carbocíclico de tres a siete átomos de carbono, que puede contener hasta dos enlaces carbono-carbono insaturados, opcionalmente sustituidos con hasta tres sustituyentes tales como los elegidos entre R^{3}, en el anillo de cicloalquilo; o una sal del mismo aceptable farmacéuticamente.

En los casos en los que los compuestos de esta invención pueden tener uno o más centros quirales, a menos que se especifique otra cosa, esta invención incluye cada uno de los compuestos racémicos únicos que pueden ser sintetizados y separados por técnicas convencionales. En los casos en los que los compuestos tienen dobles enlaces carbono-carbono insaturados, tanto el isómero cis (Z) como el trans (E) están dentro del alcance de esta invención. En los casos en los que los compuestos pueden existir en formas tautómeras, tales como los tautómeros ceto-enólicos, tales como

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y tautómeros de grupos del tipo de la guanidina, tales como

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cada forma tautómera se considera incluida dentro de esta invención, sea existiendo en equilibrio o encerrada en una forma por la sustitución apropiada con R'. El significado de cualquier sustituyente en un caso cualquiera es independiente de su significado, o el significado de cualquier otro sustituyente, en cualquier otro caso, a menos que se especifique otra cosa. En particular, el compuesto puede ser de las fórmulas (V-1) a (V-9).

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Preferentemente X^{1}-X^{2} es CHR^{1}-CH o NR^{1}-CH.

Adecuadamente, X^{3} es CR^{5}CR^{5\;'}. Preferentemente, X^{3} es CH_{2}.

Adecuadamente, R^{1} es H. Adecuadamente, R^{2} es OR'. Adecuadamente, R^{3} es H.

Particularmente buenos sustituyentes para favorecer la actividad selectiva antagonista de fibrinógeno son:

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en donde R' son H o alquilo(C_{1}-C_{4}). Preferentemente R' es metilo y R'' es H.

Particularmente preferidos de tales grupos para R^{6} son:

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Sustituyentes R^{6} específicos preferidos para potenciar la actividad de vitronectina son

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Mediante la selección apropiada de la separación del sustituyente W y/o W' del anillo de fenilo del sistema de anillo 6-7, pueden obtenerse compuestos que tienen actividad selectiva para el receptor de vitronectina o para el de fibrinógeno, o la doble actividad para ambos receptores. En general, la actividad antagonista de fibrinógeno se favorecerá mediante una distancia intramolecular de aproximadamente 16 angstroms entre el oxígeno del resto carbonilo unido al anillo de siete miembros, y el resto de nitrógeno básico de W o W', mientras que la actividad antagonista de vitronectina se verá favorecida por aproximadamente 14 angstroms entre los respectivos centros ácido y básico.

Son compuestos específicos de esta invención:

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]amino]carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético;

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[(4-aza-5-metil-1H-bencimidazol-2- il)metil]metilamino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético;

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[(1H-bencimidazol-2- il)metil]metilamino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético;

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[1-(4,4'-bipiperidinil)carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético;

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-bencimidazolil)-1-propil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético;

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[2-(2-piridilamino)etil]amino]carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético;

ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-piridilamino)-1-propiloxi]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético; y

ácido 2-[[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]metilamino]carbonil]-6,11-dihidro-5H- dibenz[b,e]azepina-6-acético.

Las abreviaturas y símbolos usados comúnmente en la técnica de los péptidos y en la técnica química se utilizan en el presente texto para describir los compuestos de esta invención.

Se entiende que alquilo(C_{1}-C_{4}), como se utiliza en el presente texto, incluye metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo y t-butilo. Alquilo(C_{1}-C_{6}) incluye adicionalmente pentilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo y hexilo, y sus isómeros alifáticos simples. Cualquier grupo alquilo(C_{1}-C_{4}) o alquilo(C_{1}-C_{6}) puede estar opcionalmente sustituido con R^{7}, a menos que se indique otra cosa. Alquilo(C_{0}-C_{4}) y alquilo(C_{0}-C_{6}) indican adicionalmente que no es necesario que esté presente ningún grupo alquilo (es decir, que existe un enlace covalente).

Alquenilo(C_{2}-C_{6}), como se utiliza en el presente texto, significa un grupo alquilo de 2 a 6 carbonos en el que un enlace simple carbono-carbono ha sido reemplazado por un doble enlace carbono-carbono. Alquenilo(C_{2}-C_{6}) incluye etileno, 1-propeno, 2-propeno, 1-buteno, 2-buteno, isobuteno y los diversos pentenos y hexenos isómeros. Se incluyen ambos isómeros cis y trans. Cualquier grupo alquenilo(C_{2}-C_{6}) puede estar opcionalmente sustituido con R^{7}, a menos que se indique otra cosa.

Alquinilo(C_{2}-C_{6}) significa un grupo alquilo de 2 a 6 carbonos en el que un enlace simple carbono-carbono ha sido reemplazado por un triple enlace carbono-carbono. Alquinilo(C_{2}-C_{6}) incluye acetileno, 1-propino, 2-propino, 1-butino, 2-butino, 3-butino y los isómeros simples del pentino y el hexino. Cualquier átomo de carbono sp^{3} en el grupo alquinilo(C_{2}-C_{6}) puede estar opcionalmente sustituido con R^{7}.

Oxoalquilo(C_{1}-C_{4}) se refiere a un grupo alquilo de hasta cuatro carbonos, en el que un grupo CH_{2} ha sido reemplazado por un grupo C(O), o carbonilo. Son grupos representativos los grupos sustituidos formilo, acetilo, 1-propanal, 2-propanona, 3-propanal, 2-butanona, 3-butanona, 1- y 4-butanal. Oxoalquilo(C_{1}-C_{6}) incluye adicionalmente los análogos superiores e isómeros de cinco y seis carbonos, sustituidos con un grupo carbonilo. Oxoalquenilo(C_{3}-C_{6}) y oxoalquinilo(C_{3}-C_{6}) se refieren a un grupo alquenilo(C_{3}-C_{6}) o alquinilo(C_{3}-C_{6}), en el que un grupo CH_{2} ha sido reemplazado por un grupo C(O). Oxoalquenilo(C_{3}-C_{4}) incluye 1-oxo-2-propenilo, 3-oxo-1-propenilo, 2-oxo-3-butenilo, y similares.

Un sustituyente en un grupo alquilo(C_{1}-C_{6}), alquenilo(C_{2}-C_{6}), alquinilo(C_{2}-C_{6}) u oxoalquilo(C_{1}-C_{6}), tal como R^{7}, puede estar sobre cualquier átomo de carbono que tenga por resultado una estructura estable y sea disponible por técnicas de síntesis convencionales.

R^{14}-alquilo(C_{1}-C_{6}) se refiere a un grupo alquilo(C_{1}-C_{6}) en el que, en cualquier posición, un enlace carbono-hidrógeno ha sido reemplazado por un enlace carbono-R^{14}. R^{14}-alquenilo(C_{2}-C_{6}) y R^{14}-alquinilo(C_{2}-C_{6}) tienen un significado similar con relación al alquenilo(C_{2}-C_{6}) y al alquinilo(C_{2}-C_{6}).

Heterociclos ilustrativos para Het son benzofurano, bencimidazol, benzopirano, benzotiofeno, furano, imidazol, indol, indolina, morfolina, piperidina, piperazina, pirrol, pirrolidina, tetrahidropiridina, piridina, tiazol, tiofeno, quinoleína, isoquinoleína, y tetra- y per-hidroquinoleína e isoquinoleína. Un heterocíclico de anillo de seis miembros que contiene uno o dos nitrógenos, tal como piperidina, piperazina, tetrahidropiridina y piridina, son heterociclos preferidos para el resto Z.

Son típicos para cicloalquilo(C_{3}-C_{7}) el ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo y cicloheptilo.

Son representativos de \code{N} pirrolina, pirrolidina, imidazol, imidazolina, imidazolidina, pirazol, pirazolina, pirazolidina, piperidina, piperazina, morfolina, piridina, piridinio, tetrahidropiridina, tetrahidro- y hexahidro-azepina, quinuclidina, quinuclidinio, quinoleína, isoquinoleína y tetra- y perhidro-quinoleína e isoquinoleína. En particular, \code{N} puede ser piridilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, azetidinilo, quinuclidinilo o tetrahidropiridinilo. \code{N} es preferentemente 4-piridilo, 4-(2-amino-piridilo), 4-tetrahidropiridilo, 4-piperidinilo o 4-piperazinilo. El bencimidazolilo, 4-azabencimidazolilo, 5-azabencimidazolilo, y derivados sustituidos de los mismos son restos preferidos para W'.

En el presente texto se abrevian ciertos grupos de radicales. t-Bu se refiere al radical butilo terciario, Boc se refiere al radical t-butiloxicarbonilo, Fmoc se refiere al radical fluorenilmetoxicarbonilo, Ph se refiere al radical fenilo, Cbz se refiere al radical benciloxicarbonilo, BrZ se refiere al radical o-bromobenciloxicarbonilo, ClZ se refiere al radical o-clorobenciloxicarbonilo, Bn se refiere al radical bencilo, 4-MBzl se refiere al radical 4-metilbencilo, Me se refiere a metilo, Et se refiere a etilo, Ac se refiere a acetilo, Alk se refiere a alquilo(C_{1}-C_{4}), Nph se refiere a 1- ó 2-naftilo y cHex se refiere a ciclohexilo. MeArg es N^{\alpha}-metil-arginina. Tet se refiere a 5'-tetrazolilo.

En el presente texto se expresan con abreviaturas ciertas sustancias reaccionantes. DCC se refiere a diciclohexilcarbodiimida, DMAP se refiere a dimetilaminopiridina, DIEA se refiere a diisopropiletilamina, EDC se refiere a N-etil-N'(dimetilaminopropil)carbodiimida. HOBt se refiere a 1-hidroxibenzotriazol, THF se refiere a tetrahidrofurano, DMF se refiere a dimetilformamida, NBS se refiere a N-bromo-succinimida, Pd/C se refiere a catalizador de paladio sobre carbono, DPPA se refiere a difenilfosforil-azida, BOP se refiere a hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)fosfonio, HF se refiere a ácido fluorhídrico, PPA se refiere a ácido polifosfórico, TEA se refiere a trietilamina, TFA se refiere a ácido trifluoroacético, y PCC se refiere a clorocromato de piridinio.

Un producto intermedio en la preparación de compuestos de fórmula (IV) particularmente útil es un compuesto de fórmula (X):

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en la que X^{1}, X^{2}, X^{3}, R^{2} y R^{3} son como se definieron en la fórmula (IV), R^{4} representa hidrógeno, A_{1} representa C, E representa fenilo y L^{1} es meta respecto de la unión del anillo y es CHO, CO_{2}R', Br, I, OH, CF_{3}SO_{3}, CH_{2}-T o NR'R^{15}, y T es OH, NHR^{15}, Cl, Br o I, en donde R^{15} es H, alquilo (C_{1}-C_{10}), cicloalquilo(C_{3}-C_{7})- alquilo(C_{0}-C_{8}) o aralquilo(C_{0}-C_{8}). Preferentemente L^{1} es OH, CF_{3}SO_{3}, CO_{2}R' o NR'R'' y R^{1} es H, alquilo(C_{1}-C_{4}), oxoalquilo(C_{1}-C_{4}), R^{2} es alquilo(C_{1}-C_{6}), o bencilo, y R^{5}/R^{5\;'} son H,H. Preferentemente, X^{1}-X^{2} es CHR^{1}-CH o NR^{1}-CH, y X^{3} es CHR^{5}.

Los compuestos de fórmula (IV) se preparan generalmente acoplando el producto intermedio de fórmula (X) con un compuesto de fórmula (XI):

R^{6\;'}-L^{2}\eqnum{(XI)}

en la que R^{6\;'} es W'-(CR'_{2})_{q}-L^{2}, en donde W', R' y q son como se definieron en la fórmula (IV), y L^{2} es OH, NHR^{15}, C\equivC, CHO, CO_{2}R', Br, I o Cl, y R^{15} es H, alquilo(C_{1}-C_{10}), cicloalquilo(C_{3}-C_{7})-alquilo(C_{0}-C_{8}) o aralquilo(C_{0}-C_{8}). En ciertos casos, puede ser deseable modificar más el grupo W o el W' mediante reacciones apropiadas para introducir un grupo funcional, o eliminar un grupo protector, como se ilustra con más detalle en el presente texto. El acoplamiento tendrá por resultado generalmente la formación del grupo U, y los métodos para tal acoplamiento son bien conocidos en la técnica. Los documentos WO 93/08174 (PCT/US92/08788; Genentech), WO 93/08174 (PCT/US92/08788; Genentech), WO 96/00730 (PCT/US95/08306; SmithKline Beecham), WO 96/00574 (PCT/US95/08146; SmithKline Beecham), WO 93/00095 (PCT/US92/ 05463; SmithKline Beecham), y WO 94/14776 (PCT/US93/12436; SmithKline Beecham) describen de un modo general tales reacciones, y se incorporan al presente texto como referencia.

Los compuestos de fórmula X pueden prepararse por el método descrito en el Esquema 1:

ESQUEMA 1

13

130

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ESQUEMA 1 (continuación)

131

a) Tf_{2}O, 2,6-lutidina, CH_{2}Cl_{2}; b) alil-tributil-estaño, LiCl, (Ph_{3}P)_{2}PdCl_{2}, DMF; c) RuCl_{3}, H_{5}IO_{6}, CCl_{4}, CH_{3}CN, H_{2}O; d) PPA; e) EtOAc/LiHMDS, THF; f) H_{2}, 10% Pd/C, HCl conc., AcOH; g) EtSH, AlCl_{3}, CH_{2}Cl_{2}; h) Tf_{2}O, 2,6-lutidina, CH_{2}Cl_{2}; i) CO, Pd(OAc)_{2}, KOAc, dppf, DMSO.

El 2-bencil-4-metoxifenol (J. Am. Chem. Soc. 1949, 71, 64) se convierte en el correspondiente éster trifluorometanosulfonato, compuesto 2-Esquema 1 (es decir 1-2) mediante la reacción con anhídrido trifluorometanosulfónico (Tf_{2}O) en presencia de una base adecuada, por ejemplo 2,6-lutidina, en un disolvente inerte, generalmente CH_{2}Cl_{2}. La reacción de 1-2 con alil-tributil-estaño en presencia de LiCl y un catalizador de paladio, por ejemplo cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) Ph_{3}P)_{2}PdCl_{2}), en un disolvente inerte tal como DMF, por el método descrito por Tilley (J. Org. Chem. 1990, 55, 906), proporciona 1-3. La segmentación oxidativa de la olefina en el 3-Esquema 1 para dar directamente el ácido carboxílico 1-4 puede realizarse mediante la reacción con un agente oxidante apropiado, típicamente KMnO_{4}, en un disolvente acuoso adecuado, tal como acetona acuosa o ácido acético acuoso. Sin embargo, preferentemente la segmentación oxidativa de la olefina en 1-3 para dar directamente el ácido carboxílico 1-4 se realiza de acuerdo con el método general de Sharpless (J. Org. Chem. 1981, 46, 3936; J. Org. Chem. 1985, 50, 1560, nota al pie 4), en el que se genera RuO_{4} in situ por la reacción de RuCl_{3} o RuO_{2} con NaIO_{4} o H_{5}IO_{6} en una mezcla disolvente de CCl_{4}, CH_{3}CN y H_{2}O. Alternativamente, la oxidación podría realizarse en dos operaciones, implicando la primera etapa una segmentación oxidativa de la olefina para dar el correspondiente aldehído, que puede realizarse por procedimientos bien conocidos por los expertos en la técnica, seguida por la oxidación del aldehído para dar el ácido carboxílico usando, por ejemplo, NaClO_{2}, como describen Pinnick (Tetrahedron 1981, 37, 2091) o Dalcanale y Montanari (J. Org. Chem. 1986, 51, 567). La ciclización de 1-4 para dar 1-5 puede realizarse usando ácido polifosfórico, de acuerdo con el método descrito por Proctor, Renfrew y Savage (J. Chem. Soc. (C) 1969, 1000). Alternativamente, 1-4 puede convertirse en 1-5 a través del correspondiente cloruro de ácido de 1-4, que puede ser preparado por métodos bien conocidos por los expertos en la técnica. El tratamiento de este cloruro de ácido con un catalizador de Friedel-Crafts apropiado, tal como AlCl_{3} o SnCl_{4}, en un disolvente inerte tal como CH_{2}Cl_{2} o CS_{2}, proporciona la cetona cíclica 1-5. La reacción de 1-5 en una reacción de tipo aldol con el enolato de acetato de etilo, que puede ser generado a partir del acetato de etilo al exponerlo a una base de amida apropiada, por ejemplo litio-diisopropilamida (LDA) o litio-bis(trimetilsilil)amida (LiHMDS), da 1-6. Frecuentemente, el THF es el disolvente elegido para una reacción aldólica, aunque suele usarse THF en presencia de varios aditivos, por ejemplo HMPA o TMEDA. La reducción de 1-6 para dar 1-7 puede realizarse por hidrogenolisis sobre un catalizador apropiado, por ejemplo paladio metálico sobre carbono activado (Pd/C), en un disolvente apropiado, tal como ácido acético, en presencia de un ácido mineral tal como HCl. Alternativamente, esta reducción puede realizarse mediante el tratamiento de 1-6 con trietilsilano en presencia de eterato de trifluoruro de boro, por el método general de Orphanopoulos y Smonu (Synth. Commun. 1988, 833). La eliminación del éter de metilo de 1-7 para dar 1-8 puede realizarse con BBr_{3} en un disolvente inerte, por ejemplo CH_{2}Cl_{2}, o por reacción con etanotiol y AlCl_{3} en un disolvente inerte, preferentemente CH_{2}Cl_{2}. Otros métodos útiles para eliminar un éter metílico se describen en Greene, ``Protective Groups in Organic Synthesis'' (publicado por John Wiley and Sons). 1-9, el éster rifluorometanosulfonato de 1-8, preparado por el método descrito antes para la conversión de 1-1 en 1-2, reacciona con monóxido de carbono en presencia de acetato potásico, 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (dppf) y un catalizador de paladio, por ejemplo acetato de paladio (Pd(OAc)_{2}), en un disolvente adecuado, preferentemente DMSO, de acuerdo con el método general descrito por Cacchi y Lupi (Tet. Lett. 1992, 33, 3939), para dar 1-10.

De la anterior descripción resultará evidente que si se deshidrata el compuesto 1-6 en vez de realizar una hidrogenación, se obtienen compuestos de fórmula general (V-2).

Los compuestos de fórmula (IV) en la que X^{3} es NR^{5}, O o S(O)_{0-2} se preparan usando el método general del Esquema 1, excepto, por ejemplo, que se sustituye el compuesto 1-4 con un ácido 4-metoxi-2-(fenilamino)-, 2- (feniloxi)-, o 2-(feniltio)-fenilacético, que puede prepararse por métodos conocidos en la técnica.

Los compuestos de fórmula (X) en la que X^{1}-X^{2} es NR^{1}-CH y X^{3} es CR^{5}CR^{5\;'}, NR', O o S(O)_{0-2}, se preparan usando el método general descrito en el Esquema 2:

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ESQUEMA 2

14

a) HCO_{2}H, Ac_{2}O, \Delta; b) POCl_{3}, PPA, \Delta; c) CH_{2}=C(OCH_{3})Si(CH_{3})_{2}-t-Bu, TMSCN, [Rh(COD)Cl]_{2}, CH_{2}Cl_{2}; d) CO, Pd(OAc)_{2}, KOAc, dppf, DMSO.

Los compuestos 1-Esquema 2 (es decir, 2-1), se sintetizan por métodos conocidos en la técnica. Alternativamente, el bromo puede reeemplazarse por yodo, trifluorometanosulfoniloxi o un grupo que pueda ser convertido en bromo, yodo o trifluorometanosulfoniloxi. Los compuestos 2-1 se convierten en los compuestos N-formilo 2-2 mediante tratamiento con un reactivo adecuado tal como ácido fórmico, un éster del ácido fórmico, o anhídrido acético-fórmico, en un disolvente adecuado, a una temperatura adecuada. Los compuestos 2-2 se convierten en las iminas cíclicas 2-3 mediante el tratamiento con un agente adecuado, tal como una mezcla de ácido polifosfórico y cloruro de fosforilo, a una temperatura adecuada. Los compuestos 2-3 se convierten en los acetatos 2-4 mediante el tratamiento con un reactivo adecuado tal como el t-butildimetilsilil-cetal-acetal de acetato de metilo, en presencia de cianuro de trimetilsililo y un catalizador adecuado, tal como di-\mu-cloro-bis(1,5-ciclooctadieno)-dirrodio ([Rh(COD)Cl]_{2}) en un disolvente adecuado, tal como diclorometano, usando el procedimiento general de Bull. Chem. Soc. Jpn. 1990, 63, 3122-3131. Alternativamente, puede emplearse un reactivo de Reformatsky usando el procedimiento general de Bull. Soc. Chim. Fr. 1973, 1668. Alternativamente, puede emplearse anhídrido acético en ácido acético, usando el procedimiento general de J. Am. Chem. Soc. 1950, 72, 3874.

Los compuestos 2-4 se convierten en los ácidos carboxílicos 2-5 de acuerdo con el método general descrito en el Esquema 1.

También puede llegarse directamente a los compuestos de fórmula (IV) en la que U es NR'CO a partir de los compuestos 1-9 ó 2-5, mediante tratamiento con CO, una amina primaria o secundaria y un catalizador de paladio, usando el método general de J. Org. Chem. 1974, 39, 3327.

Los materiales de partida de benceno trisustituido simples son disponibles comercialmente, o se preparan por métodos de rutina bien conocidos en la técnica.

Los métodos de acoplamiento para formar enlaces amida son generalmente bien conocidos en la técnica. Los métodos de la síntesis de péptidos expuestos de forma general por Bodansky et al., The Practice of Peptide Synthesis, Springer-Verlag, Berlín, 1984, Ali et al., en J. Med. Chem., 29, 984 (1986) y J. Med. Chem., 30, 2291 (1987), son generalmente ilustrativos de la técnica, y se incorporan al presente texto como referencia. La expresión agentes de acoplamiento, como se usa en el presente texto, denota reactivos que pueden ser usados para formar enlaces amida. Los métodos de acoplamiento típicos emplean carbodiimidas, anhídridos y ésteres activados y haluros de acilo. Son típicos reactivos tales como EDC, DCC, DPPA, reactivo BOP, HOBt, N- hidroxisuccinimida y cloruro de oxalilo.

Típicamente, la amina o anilina se acopla mediante su grupo amino libre con un sustrato de ácido carboxílico apropiado usando un agente de acoplamiento de carbodiimida adecuado, tal como N,N'-diciclohexil-carbodiimida (DCC), opcionalmente en presencia de catalizadores tales como 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) y dimetilaminopiridina (DMAP). También son adecuados otros métodos, tales como la formación de ésteres activados, anhídridos o haluros de ácido, del carboxilo libre de un sustrato ácido adecuadamente protegido, y la subsiguiente reacción con la amina libre de una amina adecuadamente protegida, opcionalmente en presencia de una base. Por ejemplo, se trata un Boc-aminoácido protegido o un ácido Cbz-amidino-benzoico en un disolvente anhidro, tal como cloruro de metileno o tetrahidrofurano (THF), en presencia de una base tal como N-metil-morfolina, DMAP o una trialquilamina, con cloroformiato de isobutilo, para formar el ``anhídrido activado'', que subsiguientemente se hace reaccionar con la amina libre de un segundo amino-ácido protegido o anilina.

Compuestos tales como 1-10 se convierten en compuestos de fórmula (IV) mediante una reacción de acoplamiento, tal como una reacción de acoplamiento de amida como en el Esquema 3.

ESQUEMA 3

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a) 1-BOC-4,4'-bipiperidina [R^{p}], EDC, HOBt.H_{2}O, (i-Pr)_{2}NEt, DMF; b) LiOH 1,0N, THF, H_{2}O; c) HCl 1,0N, H_{2}O; d) TFA, CH_{2}Cl_{2} [R = 1-(4,4'-bipiperidina)].

El (\pm)-10,11-dihidro-3-carboxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (1-10), preparado como se describió en el Esquema 1, es convertido en una forma activada del ácido carboxílico usando, por ejemplo, EDC y HOBt, o SOCl_{2}, y la forma activada se hace reaccionar subsiguientemente con una amina apropiada, por ejemplo 1-BOC-4,4'-bipiperidina o dihidrocloruro de 2- (metilamino)metilbencimidazol, en un disolvente adecuado tal como DMF, CH_{2}Cl_{2} o CH_{3}CN, para dar el compuesto 2-Esquema 3 (es decir, 3-2). Dependiendo de si se requiere la neutralización del ácido, puede usarse una base añadida tal como diisopropiletilamina ((i-Pr)_{2}NEt) o piridina. Se conocen varios métodos adicionales para convertir un ácido carboxílico en una amida, y pueden encontrarse en libros de consulta normales, tales como ``Compendium of Organic Synthetic Methods'', Vol. I-VI (publicado por Wiley Interscience). El éster etílico 5-2 se hidroliza usando una base acuosa, por ejemplo LiOH en THF acuoso, o NaOH en metanol acuoso, y la sal carboxilato intermedia se acidifica con un ácido adecuado, por ejemplo TFA o HCl, para dar el ácido carboxílico 1-3. Alternativamente, puede aislarse la sal carboxilato intermedia, si se desea, o puede prepararse una sal carboxilato del ácido carboxílico libre por métodos bien conocidos por los expertos en la técnica. Si el componente amina de la reacción de formación del enlace amida (1-10 a 3-2) contiene un grupo protector, el grupo protector puede ser eliminado bien sea antes o bien después de la etapa de hidrólisis del éster, usando métodos adecuados para la desprotección selectiva del grupo protector específico empleado. Tales métodos se describen en Green, ``Protective Groups in Organic Synthesis'' (publicado por Wiley-Interscience). Por ejemplo, si el componente de amina contiene un grupo nitrógeno que está protegido por un grupo terc-butoxicarbonilo (BOC), tal como en el compuesto 3-3, el grupo BOC se elimina bajo condiciones ácidas usando, por ejemplo, HCl 4N en dioxano o ácido trifluoroacético (TFA) en CH_{2}Cl_{2}, para dar la sal de amonio de 3-4. La sal de amonio puede neutralizarse, si se desea, por métodos conocidos por los expertos en la técnica.

El Esquema 4 es ilustrativo de un método de acoplamiento para la formación de un enlace carbono-carbono, que puede ser usado para introducir un triple enlace, un doble enlace o un enlace simple carbono-carbono, mediante la aplicación opcional de un agente reductor apropiado (p. ej. en la etapa b).

ESQUEMA 4

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ESQUEMA 4 (continuación)

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a) THPOCH_{2}CH_{2}CCSn(Bu)_{3}, (PPh)_{3}PdCl_{2}, LiCl, dioxano; b) H_{2}, 10% Pd/C, EtOAc; c) p-TsOH-H_{2}O, EtOH; d) cloruro de 2,2,6,6- tetrametiloxopiperidinio, CH_{2}Cl_{2}; e) NaClO_{2}, Na_{2}HPO_{3}, 2-metil-2-buteno, H_{2}O; f) cloroformiato de isobutilo, 4- metilmorfolina, después 1,2-fenilediamina; g) AcOH, THF; h) NaOH 1,0N, EtOH, después acidificación.

El compuesto 1-Esquema 4 (4-1) se hace reaccionar con 4-(2- tetrahidropiraniloxi)-1-tributilestanil-1-butino en una reacción de acoplamiento del tipo Stille de triflatos aromáticos y organoestannatos (J. Am. Chem. Soc0. 1987, 109, 5478-5486) para dar 4-2. La reacción es catalizada por una sal de paladio, preferentemente cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) ((PPh_{3})_{2}PdCl_{2}), y se realiza en presencia de cloruro de litio en un disolvente inerte apropiado, generalmente DMF o 1,4-dioxano. La reducción de la unidad acetilénica de 4-2 se realiza bajo condiciones de hidrogenación estándar que son bien conocidas por los expertos en la técnica. El compuesto resultante, 4-3, es desprotegido bajo condiciones estándar para la eliminación de un tetrahidropiranil- (THP) éter, para dar 4-4. Se describen diversas condiciones de desprotección de THP-éteres en textos de consulta normales, tales como Greene, ``Protective Groups in Organic Synthesis'' (publicado por Wiley-Interscience). El resto de alcohol primario de 4-4 es oxidado para dar el correspondiente ácido carboxílico 4-5 por el método en dos etapas descrito por Wovkulich (J. Org. Chem. 1993, 58, 832-839). Se han descrito muchos métodos alternativos para la oxidación de un alcohol primario para dar el correspondiente ácido carboxílico, y pueden encontrarse en dichos textos de consulta. La conversión del ácido carboxílico de 4-5 en el derivado de bencimidazol 4-6 sigue el procedimiento general descrito en WO. Así, el 4-5 es convertido inicialmente en una forma activada del ácido carboxílico usando, por ejemplo, cloroformiato de isobutilo, en presencia de una base adecuada, generalmente 4-metilmorfolina, trietilamina o iisopropiletilamina, en un disolvente inerte tal como THF o CH_{2}Cl_{2}. La forma activada se hace reaccionar posteriormente con un exceso de un derivado 1,2-diaminoaromático apropiado, por ejemplo 1,2- fenilendiamina, para dar la correspondiente mono-amida. La mono-amida es después ciclizada bajo condiciones estándar, por ejemplo ácido acético en THF a reflujo, para dar 4-6. El éster etílico de 4-6 se hidroliza usando una base acuosa, por ejemplo, LiOH en THF acuoso o NaOH en metanol o etanol acuosos, y la sal carboxilato intermedia se acidifica con un ácido adecuado, por ejemplo TFA o HCl, para dar el ácido carboxílico 4-7. Alternativamente, la sal carboxilato intermedia puede ser aislada, si se desea, o puede prepararse una sal carboxilato del ácido carboxílico libre por métodos bien conocidos por los expertos en la técnica.

El Esquema 5 es ilustrativo de un método de acoplamiento para la formación de un enlace carbono-oxígeno, que puede ser usado para formar una unión éter. También pueden usarse métodos de acoplamiento similares para formar uniones sulfuro y amina.

ESQUEMA 5

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ESQUEMA 5 (continuación)

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a) 2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridina-N-óxido, DEAD, (Ph)_{3}P, DMF; b) ciclohexeno, Pd/C al 10%, 2-propanol; c) NaOH 1,0 N, EtOH, después acidificación.

El compuesto 1 del Esquema 5 (5-1) se hace reaccionar con 2-[(3-hidroxi-1- propil)amino]piridina-N-óxido en una reacción de acoplamiento de tipo Mitsunobu (Organic Reactions 1992, 42, 335-656; Synthesis 1981, 1-28) para dar 5-2. La reacción está mediada por el complejo formado entre el azocarboxilato de dietilo y la trifenilfosfina, y se realiza en un disolvente aprótico, por ejemplo THF, CH_{2}Cl_{2} o DMF. El resto piridina-N-óxido de 5-2 se reduce dando la correspondiente piridina 5-3 bajo condiciones de hidrogenación por transferencia de usando un catalizador de paladio, preferentemente paladio metálico sobre carbono activado, en un disolvente inerte, por ejemplo metanol, etanol o 2-propanol. El ciclohexeno, el 1,4- ciclohexadieno, el ácido fórmico, y sales del ácido fórmico, tales como formiato potásico o formiato amónico, se usan comúnmente como reactivo de transferencia de hidrógeno en este tipo de reacción. El éster etílico de 5-3 se saponifica como se describe en el Esquema 1 para dar 5-4.

Las sales de adición de ácido de los compuestos se preparan de manera estándar en un disolvente adecuado a partir del compuesto progenitor y un exceso de ácido, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, fluorhídrico, sulfúrico, fosfórico, acético, trifluoroacético, maleico, succínico o metanosulfónico. Algunos de los compuestos forman sales internas o iones anfotéricos que pueden ser aceptables. Las sales catiónicas se preparan tratando el compuesto progenitor con un exceso de un reactivo alcalino, tal como un hidróxido, un carbonato o un alcóxido, que contiene el catión apropiado; o con una amina orgánica apropiada. Los cationes tales como Li^{+}, Na^{+}, K^{+}, Ca^{++}, Mg^{++} y NH_{4}^{+} son ejemplos específicos de cationes presentes en sales aceptables farmacéuticamente.

Esta invención proporciona también una composición farmacéutica que comprende un compuesto de acuerdo con la fórmula (IV) y un vehículo aceptable farmacéuticamente. En consecuencia, los compuestos de fórmula (IV) pueden ser usados en la preparación de un medicamento. Las composiciones farmacéuticas de los compuestos de fórmula (VI) preparados como se describió anteriormente, pueden ser formuladas como soluciones o polvos liofilizados para administración parenteral. Los polvos pueden ser reconstituidos mediante la adición de un diluyente adecuado u otro vehículo aceptable farmacéuticamente antes de su uso. La formulación líquida puede ser una solución acuosa tamponada isotónica. Los ejemplos de diluyentes adecuados son solución salina isotónica normal, dextrosa al 5% estándar en agua o solución tamponada de acetato sódico o amónico. Tal formulación es especialmente adecuada para administración parenteral, pero puede ser usada también para administración oral, o introducida en un inhalador o nebulizador de dosis medidas, para ser insuflada. Puede ser deseable añadir excipientes tales como polivinilpirrolidona, gelatina, hidroxicelulosa, acacia, polietilenglicol, manitol, cloruro sódico o citrato sódico.

Alternativamente, estos compuestos pueden ser encapsulados, preparados en comprimidos o preparados en una emulsión o jarabe para la administración oral. Pueden añadirse vehículos sólidos o líquidos aceptables farmacéuticamente para mejorar o estabilizar la composición, o para facilitar la preparación de la composición. Los vehículos sólidos incluyen almidón, lactosa, sulfato cálcico dihidrato, alabastro, estearato de magnesio o ácido esteárico, talco, pectina, acacia, agar o gelatina. Los vehículos líquidos incluyen jarabe, aceite de cacahuete, aceite de oliva, solución salina y agua. El vehículo puede también incluir un material de liberación retardada tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solos o con una cera. La cantidad de vehículo sólido varía pero, preferentemente, estará entre aproximadamente 20 mg y aproximadamente 1 g por unidad de dosificación. Los preparados farmacéuticos se hacen siguiendo las técnicas de farmacia convencionales, que implican la molienda, el mezclado, el granulado y la compresión, si es necesaria, para las formas en comprimidos; o la molienda, el mezclado y el rellenado para las formas en cápsulas de gelatina dura. Cuando se usa un vehículo líquido, el preparado estará en forma de jarabe, elixir, emulsión o suspensión acuosa o no acuosa. Tal formulación líquida puede administrarse directamente por vía oral, o introducirse en una cápsula de gelatina blanda.

Para administración rectal, los compuestos de esta invención pueden también combinarse con excipientes tales como manteca de cacao, glicerina, gelatina o polietilenglicoles, y moldearse en forma de supositorios.

Los compuestos descritos en el presente texto que son antagonistas del receptor de vitronectina, son útiles en la elaboración de un medicamento para tratar enfermedades en las que la patología de fondo es atribuible al ligando o célula que interacciona con el receptor de vitronectina. Por ejemplo, estos compuestos son útiles en la elaboración de un medicamento para el tratamiento de enfermedades en las que la pérdida de la matriz ósea crea una patología. Así, los presentes compuestos son útiles para tratar la osteoporosis, el hiperparatiroidismo, la enfermedad de Paget, la hipercalcemia de las neoplasias malignas, las lesiones osteolíticas producidas por metástasis óseas, la pérdida de hueso debida a la inmovilización o deficiencia de hormona sexual. También se cree que los compuestos de esta invención tienen utilidad en la elaboración de un medicamento como agentes antitumorales, antiinflamatorios, antiangiogénicos y antimetastáticos, y son útiles en la elaboración de un medicamento para el tratamiento del cáncer, la ateroesclerosis y la reestenosis. En particular, los compuestos de esta invención son útiles en la elaboración de un medicamento para inhibir la reestenosis después de la angioplastia.

Los compuestos de esta invención que inhiben la unión de fibrinógeno proporcionan un uso en la elaboración de un medicamento para inhibir la agregación de las plaquetas y la formación de coágulos en mamíferos, especialmente en seres humanos, que comprende la administración interna de un compuesto de fórmula (IV) y un vehículo aceptable farmacéuticamente. Las indicaciones de tal terapia incluyen el infarto agudo de miocardio (AMI: Acute Myocardial Ifarction), la trombosis venosa profunda, embolia pulmonar, aneurisma disecante, ataque isquémico transitorio (TIA: Transient Ischemia Attack), trastorno cerebro-vascular y otros trastornos relacionados con el infarto, y angina inestable. Los estados crónicos o agudos de hiperagregabilidad, tales como la coagulación intravascular diseminada (DIC: Disseminated Intravascular Coagulation), septicemia, choque quirúrgico o infeccioso, trauma post- operatorio y post-parto, cirugía de by-pass cardiopulmonar, transfusión de sangre incompatible, desprendimiento de placenta, púrpura trombocitopénica trombótica (TTP: Thrombotic Thrombocytopenic Purpura), envenenamiento por mordedura de serpiente y enfermedades inmunológicas, responden probablemente a tal tratamiento. Además, los compuestos de esta invención pueden ser útiles en la elaboración de un medicamento para la prevención de las condiciones de metástasis, la prevención o el tratamiento de infecciones fúngicas o bacterianas, induciendo la inmunoestimulación, el tratamiento de la anemia drepanocítica, y la prevención o el tratamiento de enfermedades en las que es un factor la resorción ósea.

Esta invención proporciona además un método para inhibir la reoclusión de una arteria o una vena después de la terapia fibrinolítica, que comprende la administración interna de un compuesto de fórmula (IV) y un agente fibrinolítico. La administración de un compuesto de fórmula (IV) en la terapia fibrinolítica previene la reoclusión completamente, o bien prolonga el tiempo de reoclusión. Cuando se usa en el contexto de esta invención, se supone que la expresión agente fibrinolítico significa cualquier compuesto, sea un producto natural o sintético, que directa o indirectamente provoca la lisis de un coágulo de fibrina. Los activadores del plasminógeno son un grupo bien conocido de agentes fibrinolíticos. Los activadores de plasminógeno útiles incluyen, por ejemplo, anistreplasa, uroquinasa (UK), pro-uroquinasa (pUK), estreptoquinasa (SK), activador tisular del plasminógeno (tPA) y mutantes y variantes de los mismos.

Los compuestos de esta invención pueden también usarse in vitro para inhibir la agregación de las plaquetas en la sangre y en los productos hematológicos, p. ej. para almacenamiento, o para manipulaciones ex vivo tales como el empleo para diagnóstico o en investigación.

El compuesto se administra al paciente oralmente o parenteralmente, de tal manera que la concentración de fármaco sea suficiente para inhibir la resorción ósea, o inhibir la agregación plaquetaria u otra de tales indicaciones. La composición farmacéutica que contiene el compuesto se administra a una dosis oral entre aproximadamente 0,1 y aproximadamente 50 mg/kg de manera consistente con el estado del paciente. Preferentemente la dosis oral sería de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 20 mg/kg. Para la terapia aguda, se prefiere la administración parenteral. Lo más eficaz es una infusión intravenosa del compuesto en dextrosa al 5% en agua o solución salina normal, o una formulación similar con excipientes adecuados, aunque también es útil una inyección intramuscular en bolo. Típicamente, la dosis parenteral será de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 100 mg/kg; preferentemente entre 0,1 y 20 mg/kg. Los compuestos se administran de una a cuatro veces al día, a un nivel que consiga una dosis diaria total de aproximadamente 0,4 a aproximadamente 400 mg/kg/día. El nivel concreto y el método por el que se administran los compuestos son fácilmente establecidos por un experto en la técnica rutinaria, comparando el nivel en sangre del agente con la concentración requerida para que tenga un efecto terapéutico.

Los compuestos pueden ser ensayados en uno entre diversos ensayos biológicos, para determinar la concentración de compuesto requerida para que tenga un efecto farmacológico dado.

Inhibición de la unión de vitronectina

Unión de [^{3}H]-SK&F-107260 en fase sólida a\alpha_{v}\beta_{3}: se diluyó \alpha_{v}\beta_{3} de placenta humana o plaquetas humanas (0,1-0,3 mg/mL) en tampón T (que contiene CaCl_{2} 2 mM y 1% de octilglucósido) con tampón T que contiene CaCl_{2} 1 mM, MnCl_{2} 1 mM, MgCl_{2} 1 mM (tampón A) y NaN_{3} al 0,05%, y después se añadió inmediatamente a placas de ELISA de 96 pocillos (Corning, Nueva York, NY) a razón de 0,1 mL por pocillo. Se añadió por pocillo 0,1-0,2 \mu de \alpha_{v}\beta_{3}. Las placas se incubaron durante la noche a 4ºC. En el momento del experimento, los pocillos se lavaron una vez con tampón A y se incubaron con 0,1 mL de albúmina de suero bovino al 3,5% en el mismo tampón, durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación, los pocillos fueron aspirados completamente y lavados dos veces con 0,2 mL de tampón A.

Los compuestos se disolvieron en DMSO al 100% para dar una solución madre 2 mM, que se diluyó con tampón de unión (Tris-HCl 15 mM (pH 7,4), NaCl 100 mM, CaCl_{2} 1 mM, MnCl_{2} 1 mM, MgCl_{2} 1 mM) hasta una concentración final de compuesto de 100 \muM. Esta solución se diluye después hasta la concentración de compuesto final requerida. Se añadieron a los pocillos varias concentraciones de antagonistas sin marcar (0,001 - 100 \muM) en triplicados, y después se añadió 5,0 nM de [^{3}H]-SK&F-107260 (65-86 Ci/mmol).

Las placas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. Después de la incubación se aspiraron los pocillos completamente y se lavaron una vez con 0,2 mL de tampón A enfriado con hielo, pocillo por pocillo. Los receptores se solubilizaron con 0,1 mL de SDS al 1%, y se determinó el [^{3}H]-SK&F-107260 unido por conteo de centelleo de líquido con la adición de 3 mL de Ready Safe en un contador de centelleo de líquido Beckman LS, con un 40% de eficacia. La unión no específica de [^{3}H]-SK&F-107260 se determinó en presencia de [^{3}H]- SK&F-107260 2 \muM, y fue consistentemente menor que el 1% de la alimentación total de radioligando. La IC_{50} (concentración de antagonista para inhibir el 50% de unión de [^{3}H]-SK&F-107260) se determinó mediante una rutina de ajuste no lineal a una curva por mínimos cuadrados, que fue modificada a partir del programa LUNDON-2. La K_{i} (constante de disociación del antagonista) se calculó de acuerdo con la ecuación: K_{i} = IC_{50}/(1 + L/K_{d}), en la que L y K_{d} eran la concentración y la constante de disociación de [^{3}H]-SK&F-107260, respectivamente.

Los compuestos de la presente invención inhiben la unión de vitronectina a SK&F-107260 en el margen de concentración de 0,1 a 25 micromolar. Los compuestos preferidos inhiben la unión de vitronectina a una concentración menor que 1 micromolar.

En los compuestos de esta invención se ensaya también la resorción ósea in vivo e in vitro en ensayos estándar en la técnica, para evaluar la inhibición de la formación ósea, tal como el ensayo de formación de alvéolos descrito en el documento EP 528 587, que puede realizarse también usando osteoclastos humanos en vez de osteoclastos de rata, y el modelo de rata ovarectomizada, descrito por Wronski et al., Cells and Materials 1991, Sup. 1, 69-74.

Modelo de rata paratiroidectomizada

Cada grupo experimental consiste en 5-6 ratas Sprague-Dawley machos. Las ratas son paratiroidectomizadas (por el suministrador, Taconic Farms) 7 días antes de emplearlas. Veinticuatro horas antes de emplearlas, se miden en la sangre entera los niveles de calcio ionizado circulante, inmediatamente después de extraerla, en tubos heparinizados, mediante punción venosa en la cola. Las ratas son incluidas si el nivel de Ca ionizado (medido mediante un analizador de pH de calcio Ciba-Corning modelo 634) es \leq1,2 mM/L. Las ratas se ponen después a dieta de alimento carente de calcio y agua desionizada. Al comienzo del experimento las ratas pesan aproximadamente 100 g. Se miden los niveles de calcio de línea base, y se administra a las ratas vehículo testigo (solución salina) o compuesto (disuelto en solución salina) en forma de inyección intravenosa única en bolo (en la vena de la cola), seguida inmediatamente por una única inyección subcutánea bien sea de péptido 1-34 de la hormona paratiroidea humana (hPTH1-34: human ParaThyroid Hormone, dosis 0,2 mg/kg en solución salina/0,1% albúmina suero bovino, Bachem, Ca), o bien del vehículo de la PTH. La respuesta calcémica a la PTH (y cualquier efecto del compuesto sobre esta respuesta) se mide 2 horas después de la administración del compuesto/PTH.

Modelo de desplazamiento del cubito de la rata

Cada grupo experimental consiste en 8-10 ratas machos Sprague-Dawley o Wistar de aproximadamente 30-40 g de peso corporal al comienzo del experimento. El agente bajo ensayo es administrado por una vía apropiada como dosis diaria simple o múltiple, durante un periodo de siete días. Antes de la administración de la primera dosis, se administra a las ratas una dosis única de un marcador fluorescente (25 mg/kg de tetraciclina o 10 mg/kg de calceína) que marca la posición de las superficies de formación de los huesos en ese momento. Después de haberse completado la dosificación del compuesto, las ratas son sacrificadas y se separan las dos extremidades delanteras por el codo, se retiran los pies y se retiran los tobillos y la piel. La muestra se congela y se monta verticalmente en un plato de microtomo. Se cortan en el criostato secciones transversales de la región del eje medio del cúbito. La velocidad de resorción ósea se mide morfométricamente en la porción medial-dorsal del hueso cortical. La medida se realiza de la forma siguiente: la cantidad de hueso reabsorbido en la superficie periostial es igual a la distancia en la que la superficie periostial ha avanzado hacia la marca fluorescente que había sido incorporada en la superficie endostial de formación de hueso en el día cero; esta distancia se calcula restando la anchura de hueso entre la marca y la superficie periostial en el día 7 de la anchura en el día cero; la velocidad de resorción en micrómetros por día se calcula dividiendo el resultado por 7.

Ensayo de resorción de osteoclastos humanos (``ensayo de alvéolos'')

\bullet Se sacan del almacenamiento en nitrógeno líquido partes alícuotas de suspensiones de células derivadas de osteoclastoma, se calientan rápidamente a 37ºC y se lavan una vez en medio RPMI-1640 mediante centifugación (1000 rpm, 5 min. a 4ºC).

\bullet Se aspira el medio y se reemplaza con anticuerpo murino anti-HLA-DR, diluido 1:3 en medio RPMI-1640. Se incuba durante 30 minutos en hielo y se mezcla frecuentemente la suspensión de células.

\bullet Las células se lavan dos veces con medio RPMI-1640 frío mediante centrifugación (1000 rpm, 5 min. a 4ºC), y se pasan a un tubo de centrífuga estéril de 15 mL. Se cuenta el número de células mononucleares en un cámara de recuento Neubauer mejorada.

\bullet Se saca de su frasco de almacenamiento un número suficiente de esferas magnéticas (5/célula mononuclear), recubiertas con IgG anti-ratón de cabra, y se ponen en 5 mL de medio fresco (esto elimina por lavado el conservante tóxico de azida sódica). Se elimina el medio inmovilizando las esferas en un imán y se reemplaza con medio fresco.

\bullet Las esferas se mezclan con las células y se incuba la suspensión durante 30 minutos en hielo. La suspensión se mezcla con frecuencia.

\bullet Las células recubiertas de esferas se inmovilizan sobre un imán y las células restantes (fracción rica en osteoclastos) se decantan en un tubo de centrífuga estéril de 50 mL.

\bullet Se añade medio fresco a las células recubiertas de esferas para desalojar cualquier osteoclasto atrapado. Este proceso de lavado se repite 10 veces. Las células recubiertas de esferas se desechan.

\bullet Se recuentan los osteoclastos en una cámara de recuento usando una pipeta pasteur desechable de material plástico, de perforación grande, para cargar la cámara con la muestra.

\bullet Las células se sedimentan por centrifugación y la densidad de osteoclastos se ajusta en 1,5x10^{4}/mL en medio EMEM, suplementado con suero de ternera fetal al 10% y 1,7 g/litro de bicarbonato sódico.

\bullet Se decantan partes alícuotas de 3 mL de la supensión celular (por tratamiento) en tubos de centrífuga de 15 mL. Las células se sedimentan por centrifugación.

\bullet A cada tubo se añaden 3 mL del tratamiento apropiado (diluido hasta 50 \muM en medio EMEM). También se incluyen los testigos de vehículo apropiados, un control positivo (87MEM1 diluido a 100 \mug/mL) y un control de isotipo (IgG2a diluida hasta 100 \mug/mL). Se incuba a 37ºC durante 30 minutos.

\bullet Se siembran partes alícuotas de 0,5 mL de las células en rodajas estériles de dentina en una placa de 48 pocillos, y se incuban a 37ºC durante 2 horas. Cada tratamiento se criba por cuadruplicado.

\bullet Las rodajas se lavan en seis cambios de PBS caliente (10 mL/pocillo en una placa de 6 pocillos) y después se ponen en tratamiento fresco o testigo. Se incuba a 37ºC durante 48 horas.

Procedimiento de la fosfatasa ácida resistente a tartrato (trap: tartrate resistant acid phosphatase) (tinción selectiva para células de la línea de los osteoclastos)

\bullet Las rodajas se lavan en solución salina tamponada con fosfato y se fijan en glutaraldehído al 2% (en cacodilato sódico 0,2M) durante 5 minutos.

\bullet Se lavan en agua y se incuban en tampón TRAP durante 5 minutos a 37ºC.

\bullet Después de un lavado en agua fría, se incuban en tampón de acetato frío/granate rojo fijo durante 5 minutos a 4ºC.

\bullet Se aspira el exceso de tampón, y las rodajas se secan al aire después de un lavado en agua.

\bullet Los osteoclastos positivos para TRAP se cuentan mediante microscopía de campo claro y después se eliminan de la superficie de la dentina mediante tratamiento con ultrasonidos.

\bullet Se determinan los volúmenes de los alvéolos usando el microscopio homofocal Nikon/Lasertec ILM21W.

Inhibicion de la unión de \alpha_{IIb}\beta_{3} mediada por RGD Purificación de \alpha_{IIB}\beta_{3}

Se lisaron diez unidades de plaquetas humanas caducadas lavadas (obtenidas de la Cruz Roja), agitando suavemente en octilglucósido al 3%, Tris-HCl 20 mM, pH 7,4, NaCl 140 mM, CaCl_{2} 2 mM, a 4ºC durante 2 horas. El lisado se centrifugó a 100.000 g durante 1 hora. El sobrenadante obtenido se aplicó a una columna de lectina de lentejas sepharose 4B de 5 mL (E. Y. Labs) preequilibrada con Tris-HCl 20 mM, pH 7,4, NaCl 100 mM, CaCl_{2} 2 mM, octilglucósido al 1% (tampón A). Después de 2 h de incubación, la columna se lavó con 50 mL de tampón A frío. El \alpha_{IIB}\beta_{3} retenido por la lectina se eluyó con tampón A que contiene 10% de dextrosa. Todos los procedimientos se realizaron a 4ºC. El \alpha_{IIB}\beta_{3} obtenido era de más del 95% de pureza, como se demostró por electroforesis en gel de SDS poliacrilamida.

Incorporación del \alpha_{IIB}\beta_{3} en liposomas

Una mezcla de fosfatidilserina (70%) y fosfatidilcolina (30%) (Avanti Polar Lipids) se secó contra las paredes de un tubo de vidrio bajo una corriente de nitrógeno. El \alpha_{IIB}\beta_{3} purificado se diluyó hasta una concentración final de 0,5 mg/mL y se mezcló con los fosfolípidos en una relación proteína:fosfolípido de 1:3 (p/p). La mezcla se resuspendió y se sometió a tratamiento en un baño de ultrasonidos durante 5 minutos. Después se dializó la mezcla durante la noche usando tubos de diálisis de un valor de corte de 12.000-14.000 de peso molecular, frente a un exceso de 1000 veces de Tris-HCl 50 mM, pH 7,4, NaCl 100 mM, CaCl_{2} 2 mM (con 2 cambios). Los liposomas que contienen \alpha_{IIB}\beta_{3} se centrifugaron a 12.000 g durante 15 minutos y se resuspendieron en el tampón para diálisis a una concentración final de proteína de aproximadamente 1 mg/mL. Los liposomas se almacenaron a -70ºC hasta que se necesitaron.

Unión competitiva a \alpha_{IIB}\beta_{3}

La unión al receptor de fibrinógeno (\alpha_{IIB}\beta_{3}) fue ensayada mediante un método indirecto de unión competitiva usando [^{3}H]-SK&F-107260 como ligando de tipo RGD. El ensayo de unión se llevó a cabo en un conjunto de placa de filtración de 96 pocillos (Millipore Corporation, Bedford, MA) usando membranas hidrofílicas de durapore de 0,22 \mum. Los pocillos fueron previamente recubiertos con 0,2 mL de polilisina 10 \mug/mL (Sigma Chemicals Co., St. Louis, MO) a temperatura ambiente durante 1 hora, para bloquear la unión no específica. Se añadieron a los pocillos, por cuadruplicado, varias concentraciones de benzadiazapinas no marcadas. Se aplicó [^{3}H]-SK&F- 107260 a cada pocillo, a una concentración final de 4,5 nM, seguido por la adición de 1 \mug de los liposomas que contienen \alpha_{IIB}\beta_{3} de plaquetas purificados. Las mezclas se incubaron durante 1 hora a temperatura ambiente. El [^{3}H]-SK&F-107260 unido a \alpha_{IIB}\beta_{3} se separó del no unido mediante filtración usando un distribuidor de filtración Millipore, y después de lavó con tampón enfriado con hielo (2 veces, 0,2 mL cada una). Se contó la radiactividad unida que queda en los filtros en 1,5 mL Ready Solve (Beckman Instruments, Fullerton, CA) en un contador de centelleo de líquido Beckamn (Modelo LS6800), con un 40% de eficacia. La unión no específica se determinó en presencia de SK&F-107260 no marcado 2\muM, y fue consistentemente menor que el 0,14% de la radiactividad total añadida a las muestras. Todos los datos son la media de determinaciones por cuadruplicado.

Los datos de unión de competición fueron analizados por un procedimiento de ajuste no lineal a una curva por mínimos cuadrados. Este método proporciona la IC50 de los antagonistas (concentración de antagonista que inhibe en un 50% la unión específica de [^{3}H]-SK&F-107260 en el equilibrio). La IC50 está relacionada con la constante de disociación en el equilibrio (Ki) del antagonista, según la ecuación de Cheng y Prusoff: Ki = IC50/(1+L/Kd), siendo L la concentración de [^{3}H]-SK&F-107260 usada en el ensayo de unión competitiva (4,5 nM), y Kd la constante de disociación del [^{3}H]-SK&F- 107260, que es 4,5 nM según se determina por el análisis de Scatchard.

La inhibición de la agregación plaquetaria puede medirse por el método descrito en el documento WO 93/00095 (PCT/US/92/05463). La formación de trombos in vivo se demuestra registrando los efectos sistémicos y hemodinámicos de la infusión de los péptidos en perros anestesiados, de acuerdo con los métodos descritos en Aiken et al., Prostaglandins, 19, 620 (1980).

Los compuestos preferidos de esta invención tienen una afinidad por el receptor de vitronectina relativa al receptor de fibrinógeno, o para el receptor de fibrinógeno relativa al receptor de vitronectina, superior a 5:1. Hay compuestos más preferidos que tienen una relación de actividad superior a 10:1. Los compuestos más preferidos tienen una selectividad de más de 100:1. Los resultados comparativos de la unión mejorada de los compuestos de esta invención al receptor de vitronectina relativa al receptor de fibrinógeno, se dan en la Tabla I que sigue.

\catcode`\#=12\nobreak\hskip-\tabcolsep\hskip-\parindent\begin{tabular}{llll}
 Compuesto    \+  (nº de Ej.)   \+  Ki/ \alpha_{IIB}\beta_{3} 
( \mu M)  \+  Ki/ \alpha_{v}\beta_{3}  ( \mu M) \\   \+ 1  \+  >
50  \+ 0,023 \\   \+ 2  \+ 0,009  \+ 15
\\\end{tabular}\par

Ensayo de migración de las células del músculo liso vascular

Los compuestos de la presente invención fueron ensayados en relación con su capacidad para inhibir la migración y proliferación de tejido de músculo liso en una arteria o vena, con el fin de valorar su capacidad para prevenir la reestenosis de una arteria, tal como la que típicamente ocurre después de la angioplastia.

Se usaron células de la musculatura lisa aórtica humana o de rata. La migración de las células se controló en una cámara de cultivo de células Transwell, usando una membrana de policarbonato con poros de 8 \mum (Costar). La superficie inferior del filtro fue recubierta con vitronectina. Las células se suspendieron en DMEM suplementado con albúmina de suero bovino al 0,2%, a una concentración de 2,5-5,0x10^{6} células/mL, y fueron pretratadas con compuesto de ensayo a diversas concentraciones, durante 20 minutos, a 20ºC. Se utilizó como testigo el disolvente solo. 0,2 mL de la suspensión de células se pusieron en el compartimento superior de la cámara. El compartimento inferior contenía 0,6 mL de DMEM suplementado con 0,2% de albúmina de suero bovino. La incubación se llevó a cabo a 37ºC en una atmósfera de 95% de aire/5% de CO_{2} durante 24 horas. Después de la incubación las células no migradas que están en la superficie superior del filtro fueron retiradas mediante un suave rascado. Después se fijó el filtro en metanol y se tiñó con 10% de colorante Giemsa. Se midió la migración a) contando el número de células que habían migrado a la superficie inferior del filtro, o bien b) extrayendo las células teñidas con ácido acético al 10%, y determinando después la absorbancia a 600 nm.

General

Los espectros de resonancia nuclear magnética se registraron a 250 o bien a 400 MHz usando, respectivamente, un espectrómetro Brucker AM 250 o Brucker AC 400. CDCl_{3} es deuteriocloroformo, DMSO-d_{6} es hexadeuterio-dimetilsulfóxido, y CD_{3}OD es tetradeuterio-metanol. Los desplazamientos químicos se expresan en partes por millón (\delta) campo abajo del patrón interno de tetrametilsilano. Las abreviaturas de los datos de NMR son como sigue:

\hbox{s = singulete}

, d = doblete, t = triplete, q = cuartete, m = multiplete, dd = doblete de dobletes, dt = doblete de tripletes, app = aparente, br = ancho. J indica la constante de acoplamiento de NMR medida en Herzios. Los espectros de infrarrojo de onda continua (IR) se registaron en un espectrómetro de infrarrojos Perkin Elmer 683, y los espectros de infrarrojo con transformada de Fourier (FTIR) se registraron en un espectrómetro de infrarrojos Nicolet Impact 400D. Los espectros IR y FTIR fueron registrados en modo de transmisión, y las posiciones de las bandas se indican en números de onda inversos (cm^{- 1}). Se tomaron espectros de masas en instrumentos VG 70 FE, PE Syx API III, o VG ZAB HF, usando las técnicas de bombardeo con átomos rápidos (FAB: Fast Atom Bombardment) o de ionización con electropulverización (ES: ElectroSpray). Los análisis elementales se obtuvieron usando un analizador elemental Perkin-Elmer 240C. Los puntos de fusión se midieron en un aparato para puntos de fusión Thomas-Hoover, y son sin corregir. Todas las temperaturas se expresan en grados Celsius.

Se usaron placas de capa fina Analtech Silica Gel GF y E. Merck Silica Gel 60 F-254 para la cromatografía en capa fina. Las cromatografías rápida y por gravedad se realizaron en gel de sílice Kieselgel 60 de E. Merck (malla 230- 400). Las HPLC analítica y preparativa se realizaron en cromatógrafos Rainin o Beckman. ODS se refiere a un soporte cromatográfico de gel de sílice derivatizado con octadecilsililo. 5 \mum Apex-ODS indica un soporte cromatográfico de gel de sílice derivatizado con octadecilsililo que tiene un tamaño nominal de partículas de 5 \mum, fabricado por Jones Chromatography, Littleton, Colorado. YMC ODS-AQ® es un soporte cromatográfico de ODS y es una marca comercial registrada de YMC Co. Ltd., Kyoto, Japón. PRP-1® es un soporte cromatográfico polimérico (estireno-divinilbenceno), y es una marca comercial registrada de Hamilton Co., Reno, Nevada. Celite® es un coadyuvante de filtración compuesto de sílice de diatomeas lavada con ácido, y es una marca comercial registrada de Manville Corp., Denver, Colorado.

Preparación 1 Preparación de (\pm)-10,11-dihidro-3-carboxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10- acetato de etilo a) 3-bencil-4-(trifluorometanosulfoniloxi)anisol

Se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (10,0 mL, 60 mmoles) a lo largo de 3 minutos, a una solución de 2-bencil-4-metoxifenol (10,71 g, 50 mmoles; preparado de acuerdo con J. Am. Chem. Soc. 1949, 71, 64) y 2,6- lutidina anhidra (12,0 mL, 100 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (250 mL) a -78ºC, bajo argón. La mezcla de reacción se agitó a -78ºC durante 0,5 y después se calentó a temperatura ambiente. Al cabo de una hora, la mezcla de reacción se diluyó con hexanos (250 mL) y se lavó secuencialmente con HCl 1,0 N (2 x 100 mL), NaOH 1,0 N (2 x 50 mL), H_{2}O (100 mL) y salmuera (50 mL). El secado (Na_{2}SO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (10% EtOAc/hexanos) dieron el compuesto del título en forma de un sólido de color amarillo claro (16,65 g, 96%): TLC R_{f} 0,51 (10% EtOAc/hexanos); ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,10-7,40 (m, 6H), 6,77 (dd, J=9,0, 3,1 Hz, 1H), 6,66 (d, J=3,1 Hz, 1H), 4,03 (s, 2H), 3,73 (s, 3H); FTIR (CCl_{4}) 1492, 1423, 1405, 1249, 1216, 1161, 1144, 1039, 869 cm^{-1}; MS (ES) m/e 369 (M+Na)^{+}, 364,0 (M+NH_{4})^{+}, 347,0 (M+H)^{+}.

b) 4-alil-3-bencilanisol

Se secó a la llama LiCl (3,08 g, 72,8 mmoles) en un matraz de fondo redondo, bajo alto vacío, y el sistema se dejó enfriar a temperatura ambiente bajo argón. Se añadieron 3-bencil-4-(trifluorometanosulfoniloxi)anisol ((Preparación (I)a) (21,0 g, 60,6 mmoles), cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (2,13 g, 3,0 mmoles), DMF anhidra (150 mL) y alil-tributil-estaño (22,6 mL, 72,8 mmoles), y la mezcla se purgó con argón mediante tres ciclos de evacuación y paso de argón. La mezcla se calentó en un baño de aceite regulado a 95ºC, dando una solución homogénea de color amarillo. Después de 1,5 horas, la mezcla oscura se concentró en rotavapor (alto vacío), y el residuo se reconcentró en xilenos. El residuo resultante se recogió en Et_{2}O (120 mL) y se agitó vigorosamente con KF al 10% (120 ml) durante 0,5 horas. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con Et_{2}O (2 x 120 mL). Las capas orgánicas reunidas se filtraron a través de celite® para eliminar los sólidos insolubles, y el filtrado se lavó secuencialmente con H_{2}O (60 mL) y salmuera (60 mL). El secado (MgSO_{4}) y la concentración dejaron un aceite turbio de color amarillo. La cromatografía (gel de sílice, 5% EtOAc/hexanos) dio el compuesto del título en forma de un aceite de color amarillo claro (14,21 g, 98%): TLC R_{f} (5% EtOAc/hexanos) 0,51; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,03-7,31 (m, 6H), 6,74 (dd, J=8,3, 2,7 Hz, 1H), 6,66 (d, J=2,7 Hz, 1H), 5,79-5,98 (m, 1H), 4,89-5,07 (m, 2H), 3,97 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,21-3,33 (m, 2H); FTIR (CCl_{4}) 1610, 1496, 1256, 1046, 914 cm^{-1}; MS (ES) m/e 239,2 (M+H)^{+}.

c) Acido 2-bencil-4-metoxifenilacético

Se añadió una solución de H_{5}IO_{6} (23,83 g, 104,5 mmoles) en H_{2}O (56 mL) a una solución de 4-alil-3-bencilanisol (Preparación I(b)) (5,30 g, 22,24 mmoles) en CCl_{4} (28 mL) y CH_{3}CN (28 mL), y la mezcla bien agitada se enfrió a 0ºC. Se añadió RuCl_{3} (231 mg, 1,11 mmoles) y la reacción se agitó vigorosamente a 0ºC durante 4 horas, después a temperatura ambiente durante 45 minutos. La mezcla se filtró a través de celite®, y el lecho filtrante se lavó con CH_{2}Cl_{2} (120 mL) y después con H_{2}O (120 mL). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 120 mL). El secado (Na_{2}SO_{4}) y la concentación dejaron un aceite de color marrón. Este se repartió entre Et_{2}O (90 mL) y NaOH 0,25 N (90 mL), y se separaron las capas. La capa de Et_{2}O se extrajo con NaOH 0,25 N (2 x 10 mL), y las capas acuosas reunidas se acidificaron (pH 2) con HCl concentrado. La extracción con CH_{2}Cl_{2}, el secado (Na_{2}SO_{4}) y la concentración dieron el compuesto del título en forma de un aceite amarillo que solidificó dando un sólido amarillo (4,19 g, 74%): ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,05-7,35 (m, 6H), 6,77 (dd, J=8,3, 2,7 Hz, 1H), 6,71 (d, J=2,7 Hz, 1H), 4,00 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,54 (s, 2H); FTIR (CCl_{4}) 2300-3500 (br), 1710, 1611, 1502, 1496, 1285, 1257, 1045 cm^{-1}; MS (ES) m/e 279,0 (M+Na)^{+}, 274,0 (M+NH_{4})^{+}, 257,0 (M+H)^{+}.

d) 3-metoxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10(11H)-ona

Se añadió ácido 2-bencil-4-metoxifenilacético (Preparación I(c)) (3,26 g, 12,72 mmoles) en forma de polvo fino, a ácido polifosfórico bien agitado (165 g) a 100-110ºC. Después de 15 minutos, la mezcla de reacción se vertió sobre hielo (330 g). Se añadió Et_{2}O (330 mL) y la mezcla se agitó vigorosamente durante 15 minutos. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con Et_{2}O (330 mL). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con NaHCO_{3} al 5% (2 x 80 mL) y después con salmuera (80 mL), se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron. El residuo se reconcentró en tolueno, y después se cromatografió (gel de sílice, 20% EtOAc/hexanos). Se obtuvo el compuesto del título en forma de un sólido amarillo (1,44 g, 48%): TLC R_{f} (20% EtOAc/ hexanos) 0,46; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 8,07-8,15 (m, 1H), 7,39-7,49 (m, 1H), 7,25-7,48 (m, 2H), 7,19 (d, J=8,3 Hz, 1H), 6,86 (d, J=2,6 Hz, 1H), 6,71 (dd, J=8,3, 2,6 Hz, 1H), 4,21 (s, 2H), 4,11 (s, 2H), 3,77 (s, 3H); FTIR (CCl_{4}) 1680, 1501, 1282, 1270 cm^{-1}; MS (ES) m/e 261 (M+Na)^{+}, 256,0 (M+NH_{4})^{+}, 239,0 (M+H)^{+}.

e) (\pm)-10,11-dihidro-10-hidroxi-3-metoxi-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Se añadió gota a gota, en un matraz secado a la llama, EtOAc anhidro (0,58 mL, 6,6 mmoles) a una solución de litio-bis(trimetilsilil)amida (1,0 M en THF, 6 mL, 6 mmoles) en THF seco (24 mL), a -78ºC bajo argón. La solución amarilla se agitó a -78ºC durante 0,5 horas, y después se añadió gota a gota una solución de 3-metoxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10(11H)-ona (Preparación 1(d)) (715 mg, 3 mmoles) en THF seco (3 mL), a lo largo de 3 minutos. Se usó en la transferencia THF seco adicional (0,4 mL). Después de 0,5 horas a -78ºC, la mezcla de reacción se apagó con NH_{4}Cl saturado (15 mL), se calentó a temperatura ambiente y se extrajo con EtOAc (2 x 30 mL). El secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía (gel de sílice, 10% EtOAc/hexanos (400 mL), y después 20% EtOAc/hexanos) dieron 3-metoxi-5H-dibenzo-[a,d]ciclohepteno-10(11H)-ona recuperado (305,4 mg, 43%) en forma de un sólido amarillo, seguido por el compuesto del título en forma de un aceite amarillo claro (531,9 mg, 54%): TLC R_{f} 0,37 (20% EtOAc/hexanos); ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,63 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,00-7,30 (m, 4H), 6,80 (d, J=2,6 Hz, 1H), 6,69 (dd, J=8,2, 2,6 Hz, 1H), 3,95-4,35 (m, 2H), 4,07 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,68 (s, 1H), 3,64 (d, J=14,2 Hz, 1H), 3,35 (d, J=14,2 Hz, 1H), 2,79 (d, J=16,0 Hz, 1H), 2,66 (d, J=16,0 Hz, 1H), 1,22 (t, J=7,2 Hz, 3H); FTIR (CCl_{4}) 3580 (agudo), 3509 (ancho), 1735, 1715, 1503, 1261, 1198, 1156, 1044 cm^{-1}; MS (ES) m/e 675,2 (2M+Na)^{+}, 653,2 (2M+H)^{+}.

f) (\pm)-10,11-dihidro-3-metoxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Se añadió 10% Pd/C (242 mg, 0,23 mmoles) a una solución de (\pm)-10,11- dihidro-10-hidroxi-3-metoxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1(e)) (741,1 mg, 2,27 mmoles) y HCl concentrado (0,19 mL, 2,27 mmoles) en AcOH glacial (23 mL), y la mezcla se agitó en un aparato Parr a temperatura ambiente bajo H_{2} (3,4 at). Después de 6 horas, la mezcla de reacción se filtró a través de celite®, y el lecho filtrante se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró y el residuo se reconcentró en tolueno. El residuo oleoso débilmente amarillo resultante fue cromatografiado (gel de sílice, 20% EtOAc/hexanos) para dar el compuesto del título en forma de un aceite incoloro (643,6 mg, 91%): TLC R_{f} 0,57 (20% EtOAc/hexanos); ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,05-7,22 (m, 4H), 7,01 (d, J=8,2 Hz, 1H), 6,76 (d, J=2,7 Hz, 1H), 6,67 (dd, J=8,2, 2,7 Hz, 1H), 4,30 (d, J=15,0 Hz, 1H), 4,11-4,25 (m, 2H), 3,85 (d, J=15,0 Hz, 1H), 3,70-3,90 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,31 (dd, J=15,0, 4,1 Hz, 1H), 2,93 (dd, J=15,0, 9,2 Hz, 1H), 2,64 (dd, J=15,6, 5,0 Hz, 1H), 2,52 (dd, J=15,6, 9,3 Hz, 1H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); FTIR (CCl_{4}) 1734, 1611, 1504, 1285, 1263, 1155, 1044 cm^{-1}; MS (ES) m/e 333,0 (M+Na)^{+}, 328,0 (M+NH_{4})^{+}, 311,0 (M+H)^{+}, 265,0 (M+H- EtOH)^{+}.

g) (\pm)-10,11-dihidro-3-hidroxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10- acetato de etilo

Se añadió AlCl_{3} anhidro (1,38 g, 10,35 mmoles) de una vez a una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-metoxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1(f)) (643,6 mg, 2,07 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (21 mL) a 0ºC bajo argón. La solución amarilla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas, y después se enfrió a 0ºC y se apagó con HCl 3N frío (10 mL). Las capas se separaron, y la capa acuosa se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. Las capas orgánicas reunidas se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron. La cromatografía en gel de sílice (25% EtOAc/hexanos) dio el compuesto del título en forma de un aceite casi incoloro (611,7 mg, 100%): TLC R_{f} 0,26 (EtOAc 20%/hexanos); ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,03-7,22 (m, 4H), 6,93 (d, J=8,1 Hz, 1H), 6,69 (d, J=2,6 Hz, 1H), 6,58 (dd, J=8,1, 2,6 Hz, 1H), 5,00 (s, 1H), 4,25 (d, J=14,9 Hz, 1H), 4,11-4,25 (m, 2H), 3,73-3,88 (m, 1H), 3,79 (d, J=14,9 Hz, 1H), 3,28 (dd, J=15,0, 4,1 Hz, 1H), 2,91 (dd, J=15,0, 9,3 Hz, 1H), 2,65 (dd, J=15,6, 4,9 Hz, 1H), 2,53 (dd, J=15,6, 9,5 Hz, 1H), 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3H); FTIR (CCl_{4}) 3611 (agudo), 3447 (ancho), 1734, 1504, 1291, 1272, 1176, 1152 cm^{-1}; MS (ES) m/e 314,2 (M+NH_{4})^{+}, 297,2 (M+H)^{+}.

h) (\pm)-10,11-dihidro-3-(trifluorometanosulfoniloxi)-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (0,45 mL, 2,68 mmoles) gota a gota a una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-hidroxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno- 10-acetato de etilo (Preparación 1(g)) (611,7 mg, 2,06 mmoles) y 2,6-lutidina (0,48 mL, 4,12 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (10,3 mL) a -78ºC, bajo argón. Después de 0,5 h, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 1 hora. La solución amarilla se diluyó con Et_{2}O (50 mL) y se lavó secuencialmente con HCl 1,0 N (5 mL), NaHCO_{3} al 5% (5 mL) y salmuera (5 mL). El secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (20% EtOAc/hexanos) dieron el compuesto del título en forma de un aceite incoloro (808,9 mg, 92%): TLC R_{f} (20% EtOAc/hexanos) 0,58; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,98-7,30 (m, 7H), 4,35 (d, J=15,2 Hz, 1H), 4,19 (q, J=7,1 Hz, 2H), 3,91 (d, J=15,2 Hz, 1H), 3,78-3,95 (m, 1H), 3,37 (dd, J=15,2, 4,1 Hz, 1H), 3,02 (dd, J=15,2, 9,6 Hz, 1H), 2,70 (dd, J=15,8, 4,8 Hz, 1H), 2,53 (dd, J=15,8, 9,6 Hz, 1H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); FTIR (CCl_{4}) 1735, 1493, 1427, 1250, 1215, 1144, 961, 856 cm^{-1}; MS (ES) m/e 451,1 (M+Na)^{+}, 446,2 (M+NH_{4})^{+}, 429,2 (M+H)^{+}.

i) (\pm)-10,11-dihidro-3-(carboxi)-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10- acetato de etilo

Una mezcla de (\pm)-10,11-dihidro-3-(trifluorometanosulfoniloxi)-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1(h)) (808,9 mg, 1,89 mmoles), KOAc (742 mg, 7,56 mmoles), Pd(OAc)_{2} (21,2 mg, 0,095 mmoles), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (210 mg, 0,38 mmoles), y DMSO anhidro (11 mL), fue purgada con monóxido de carbono (tres ciclos de evacuación/paso de CO, seguidos por el burbujeo de CO a través de la mezcla durante 5 minutos), y después se agitó bajo un balón de CO en un baño de aceite regulado a 70ºC. Después de 3,5 horas, la mezcla de reacción se diluyó con H_{2}O (11 mL), se enfrió a 0ºC, y se acidificó con HCl 1,0N (apr. 8 mL). La extracción con CH_{2}Cl_{2} (3 x 30 mL), el secado (Na_{2}SO_{4}), la concentración y la reconcentración en tolueno, dejaron un líquido naranja-rojizo (2-3 mL). La cromatografía (gel de sílice, EtOAc/tolueno/AcOH 3:2:0,1, las fracciones mezcladas de nuevo con EtOAc/tolueno/AcOH 1:1:0,1) dieron el compuesto del título (581,9 mg, 95%) en forma de un aceite viscoso de color amarillo, que cristalizó parcialmente en alto vacío a 40ºC: TLC R_{f} (EtOAc/tolueno/AcOH 3:2:0,1) 0,60; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,95 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,87 (dd, J=7,8, 1,5 Hz, 1H), 7,00-7,35 (m, 5H), 4,40 (d, J=15,2 Hz, 1H), 4,19 (q, J=7,1 Hz, 2H), 3,97 (d, J=15,2 Hz, 1H), 3,82-4,00 (m, 1H), 3,43 (dd, J=15,3, 4,0 Hz, 1H), 3,07 (dd, J=15,3, 9,5 Hz, 1H), 2,69 (dd, J=15,8, 4,8 Hz, 1H), 2,53 (dd, J=15,8, 9,5 Hz, 1H), 1,28(t, J=7,1 Hz, 3H); FTIR (CCl_{4}) 2357-3378 (ancho), 1735, 1692, 1280 cm^{-1}; MS (ES) m/e 342,2 (M+NH_{4})^{+}, 325,2 (M+H)^{+}, 307,2 (M+H-H_{2}O)^{+}.

Preparación 2 Preparación de N-(t-butoxicarbonil)-4,4'-bipiperidina

Se disolvió dihidrocloruro de 4,4'-bipiperidina (2,5 g, 10 mmoles) en agua (10 mL) y se trató con hidróxido sódico 5N hasta pH 8-9, se diluyó a 120 mL con etanol y se agitó a temperatura ambiente. La mezcla resultante se trató con dicarbonato de di-t-butilo (2,4 g, 11 mmoles) en etanol (80 mL) en una porción, y la mezcla se agitó a temperatura ambiente, con adiciones periodicas de hidróxido sódico 5N para mantener un pH de 8-9. Después de 5 horas, la mezcla se concentró y el residuo se disolvió en una mezcla de éter:agua 1:1 (100 mL), y el pH se ajustó a 12 con hidróxido sódico 5N. La fase acuosa se extrajo con éter y la fase orgánica se lavó secuencialmente con salmuera, ácido cítrico diluido y agua. La fase acuosa se ajustó a pH 12-13 con hidróxido sódico 5N y se extrajo con éter. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó (sulfato sódico), se concentró hasta dar un aceite transparente y se secó bajo vacío para dar el compuesto del título (1,7 g, 63%) en forma de un sólido. TLC R_{f} 0,4 (Kieselgel 60 F_{254}, 2-butanol:ácido fórmico:agua 15:3:2); MS (ES) m/e 268,3 [M+H]^{+}.

Preparación 3 Preparación de dihidrocloruro de 2-(metilaminometil)bencimidazol a) 2-[(terc-butoxicarbonil)sarcosil]aminoanilina

Una solución de fenilendiamina (100 g, 0,924 moles) y Boc-sarcosina (175 g, 0,924 moles) en DMF (1750 mL) se enfrió a -10ºC bajo argón, y se añadió una solución de DCC (190,8 g, 0,924 moles) en CH_{2}Cl_{2} (1750 mL) en corriente lenta a lo largo de una hora. La temperatura subió a 0ºC durante la adición. La reacción se agitó durante la noche mientras se dejaba que la temperatura subiese hasta la temperatura ambiente. El precipitado blanco se eliminó mediante filtración, y el filtrado se diluyó con H_{2}O (3,5 L) y salmuera saturada (1 L). Se separó la capa de CH_{2}Cl_{2} y la fase acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 1 L). Las capas orgánicas reunidas se lavaron con H_{2}O (1 L) y salmuera (0,5 L), y después se concentraron para dar un residuo de color amarillo (341 g). Este se trituró con EtOAc para dar el compuesto del título (179,4 g, 70%): p. de f. 134-136ºC.

b) 2-[(N-terc-butoxicarbonil-N-metil)aminometil]bencimidazol

Una solución de 2-[(terc-butoxicarbonil)sarcosil]aminoanilina (Preparación 3(a)) (178,4 g, 0,639 moles) en THF (900 mL) y AcOH (900 mL), se calentó a reflujo bajo argón durante 1 hora, después se aplicó cuidadosamente vacío a la reacción y se eliminó por destilación la mayor parte del THF. La solución residual se vertió en agua con hielo agitada, y se añadió NH_{4}OH concentrado (1150 mL) para ajustar el pH en 10. Se formó un aceite que cristalizó al agitar durante la noche. El sólido se filtró y se secó a 50ºC a presión atmosférica durante dos días, para dejar un sólido de color blanco-amarillento (167 g, 100%): p. de f. 140-150ºC. Un secado más prolongado a temperatura ambiente y presión atmosférica dio el compuesto del título en crudo (162 g, 97%).

c) Dihidrocloruro de 2-(metilaminometil)bencimidazol

Una solución de HCl/dioxano 4M (616 mL, 2,46 moles) y anisol (134 mL, 1,23 moles) se enfrió a 0ºC bajo argón, y se añadió una solución de 2-[(N-terc-butoxicarbonil-N-metil)aminometil]bencimidazol (Preparación 3(b)) (161 g, 0,616 moles) en CH_{2}Cl_{2} (800 mL), en corriente lenta a lo largo de 30 minutos. La temperatura subió a 8ºC durante la dición, y se comenzó a formar un precipitado blanco antes de completarse la adición. La mezcla de reacción se agitó durante 20 minutos y después se recogió el compuesto del título (66,6 g, 46%) mediante filtración: p. de f. 250-255ºC (desc.). Anál. calc. para C_{9}H_{11}N_{3}.2HCl: C, 46,17; H, 5,60; N, 17,95. Encontrado: C, 46,33; H, 5,68; N, 17,55. El filtrado se diluyó con Et_{2}O y la mezcla se dejó en reposo durante la noche. La filtración dio compuesto del título adicional (62 g; rendimiento total 128,6 g, 89%) en forma de sólido de color rosa; p. de f. 248-253 (desc.).

Preparación 4 Preparación de dihidrocloruro de 2-[(2-aminoetil)amino]piridina a) Mono-Boc-1,2-etilendiamina

Una solución de dicarbonato de di-terc-butilo (10,91 g, 50 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} (50 mL) se añadió gota a gota a lo largo de 30 minutos a una solución vigorosamente agitada de 1,2-etilendiamina (33 mL, 500 mmoles) en CH_{2}Cl_{2}

\hbox{(250 mL)}

a 0ºC bajo argón. Se separó un precipitado durante la adición. Cuando se hubo completado la adición, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente, se agitó durante 1 hora y se concentró en rotavapor. El residuo se recogió en H_{2}O (100 mL) y se filtró para eliminar una pequeña cantidad de material insoluble. El filtrado se extrajo con CH_{2}Cl_{2} (3 x 100 mL), y los extractos orgánicos reunidos se secaron (MgSO_{4}) y se concentraron para dar el compuesto del título (6,00 g, 75%) en forma de un líquido turbio: ^{1}H NMR (250, CDCl_{3}) \delta 4,75-5,00 (m, 1H), 3,05,-3,25 (m, 2H), 2,65-2,85 (m, 2H), 1,46 (s, 9H), 1,12 (br s, 2H). b) 2-[[2-(Boc-amino)etil]amino]piridina-N-óxido

Se calentó a reflujo una mezcla de mono-Boc-1,2-etilendiamina (Preparación 4(a)) (5,83 g, 36,39 mmoles), hidrocloruro de 2-cloropiridina-N-óxido (7,25 g, 43,67 mmoles), NaHCO_{3} (15,29 g, 182 mmoles), y alcohol terc-amílico (36 mL). Después de 47 horas, la mezcla de color marrón oscuro se enfrió, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (100 mL) y se filtró por succión para eliminar los materiales insolubles. El filtrado se concentró y se reconcentró en tolueno. La cromatografía en gel de sílice (10% MeOH/CHCl_{3}) dio el compuesto del título impuro (8,23 g, 89%) en forma de sólido amarillo, que se utilizó sin más purificación: TLC (10% MeOH/CHCl_{3}) R_{f} 0,42; ^{1}H NMR (250, CDCl_{3}) \delta 8,16 (dd, J=6,5, 1,3 Hz, 1H), 7,05-7,30 (m, 2H), 6,68 (br d, J=8,6 Hz, 1H), 6,50-6,65 (m, 1H), 5,70-5,95 (m, 1H), 3,25-3,60 (m, 4H), 1,44 (s, 9H); MS (ES) m/e 254 (M+H)^{+}.

c) 2-[[2-(Boc-amino)etil]amino]piridina

Se añadió 10% Pd/C (106,4 mg, 0,10 mmoles) a una solución de 2-[[2-(Boc-amino)etil]amino]piridina-N-óxido (Preparación 4(b)) (126,7 mg, 0,5 mmoles) y ciclohexeno (0,25 mL, 0,25 mmoles) en EtOH absoluto (5 mL), y la mezcla se calentó a reflujo. Después de 16 horas, la mezcla de reacción se filtró a través de celite®, y se concentró el filtrado. El residuo se juntó con el residuo obtenido de una preparación separada (escala de 0,5 mmoles) y los materiales reunidos se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice (5% MeOH/CHCl_{3}). El compuesto del título (148,4 mg, 63% basado en 1 mmol de 2-[[2-(Boc-amino)etil]amino]piridina-N-óxido) se obtuvo en forma de un aceite de color amarillo: TLC (5% MeOH/CHCl_{3}) R_{f} 0,43; ^{1}H NMR (400, CDCl_{3}) \delta 8,05-8,12 (m, 1H), 7,37-7,46 (m, 1H), 6,53-6,61 (m, 1H), 6,41 (d, J=8,3 Hz, 1H), 5,12 (br s, 1H), 4,86 (br s, 1H), 3,26-3,51 (m, 4H), 1,44 (s, 9H); MS (ES) m/e 238 (M+H)^{+}.

d) Dihidrocloruro de 2-[(2-aminoetil)amino]piridina

Se añadió HCl 4N en dioxano (3,2 mL) en una corriente, a una solución de 2-[[2-(Boc-amino)etil]amino]piridina (Preparación 4(c)) (148,4 mg, 0,63 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (3,2 mL) a 0ºC, y después se calentó la mezcla de reacción a temperatura ambiente. Después de 2 horas, la mezcla se filtró mediante succión para recoger el sólido precipitado, que se lavó con Et_{2}O anhidro y se secó para dar el compuesto del título (132,8 mg, cuantitativo) en forma de sólido de color amarillo: ^{1}H NMR (400, CD_{3}OD) \delta 7,99-8,07 (m, 1H), 7,92-7,98 (m, 1H), 7,19 (d, J=9,1 Hz, 1H), 6,98-7,04 (m, 1H), 3,76 (t, J=6,2 Hz, 2H), 3,27 (t, J=6,2 Hz, 2H, parcialmente oscurecido por la señal del disolvente residual); MS (ES) m/e 138 (M+H)^{+}.

Preparación 5 Preparación de 2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridina-N-óxido a) 2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridina-N-óxido

Una mezcla de 2-cloropiridina-N-óxido (16,6 g, 0,1 moles), 3-amino-1-propanol (15,3 mL, 0,2 moles), NaHCO_{3} (42 g, 0,5 moles), y alcohol terc-amílico (100 mL), se calentó a reflujo. Después de 21 horas, la mezcla de reacción se enfrió, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (300 mL) y se filtró por succión para eliminar materias insolubles. El filtrado se concentró y se reconcentró en tolueno para dejar un aceite amarillo. La cromatografía en gel de sílice (20% MeOH/ CHCl_{3}) dio el compuesto del título (15,62 g, 93%) en forma de un sólido amarillo: TLC (20% MeOH/CHCl_{3}) R_{f} 0,48; ^{1}H NMR (250, CDCl_{3}) \delta 8,07 (dd, J=6,6, 1,2 Hz, 1H), 7,34 (br t, 1H), 7,10-7,30 (m, 1H), 6,64 (dd, J=8,5, 1,4 Hz, 1H), 6,40-6,60 (m, 1H), 4,49 (br s, 1H), 3,65-3,90 (m, 2H), 3,35-3,60 (m, 2H), 1,75-2,00 (m, 2H); MS (ES) m/e 169 (M+H)^{+}.

Preparación 6 2-carboxi-6,11-dihidro-5H-dibenzo[b,e]azepina-6-acetato de metilo a) 2-bencil-4-bromo-N-(formil)anilina

Usando el procedimiento general de Coll. Czech. Chem. Commun. 1965, 30, 1163-1172, la 2-bencil-4-bromo-anilina, preparada como en Khim. Geterotsikl. Soedin. 1983, 3, 411-414, se calienta con formiato de etilo para dar el compuesto del título.

b) 2-bromo-11H-dibenz[b,e]azepina

Usando el procedimiento general de Coll. Czech. Chem. Commun. 1965, 30, 1163-1172, el compuesto de la Preparación 16(a) se calienta en una mezcla de ácido polifosfórico y oxicloruro de fósforo para dar el compuesto del título.

c) 2-bromo-6,11-dihidro-5H-dibenz[b,e]azepina-6-acetato de metilo

Usando el procedimiento general de Bull. Chem. Soc. Jpn. 1990, 63, 3122-3131, el compuesto de la Preparación 6(b) se trata en frío con el t-butildimetilsilil-cetena-acetal de acetato de metilo, cianuro de trimetilsililo y una cantidad catalítica de di-1mu-cloro-bis(1,5)cicloctadieno)-dirrodio ([Rh(COD)Cl]_{2}) en diclorometano, para dar el compuesto del título.

d) 2-carboxi-6,11-dihidro-5H-dibenz[b,e]azepina-6-acetato de metilo

El uso del procedimiento general de la Preparación 1(i), excepto que se sustituye el compuesto de la Preparación 6(c) por el compuesto de la Preparación 1(h), da el compuesto del título.

Los compuestos que siguen ilustran métodos para preparar los compuestos biológicamente activos de esta invención a partir de compuestos intermedios, tales como los descritos en las Preparaciones precedentes.

Ejemplo 1 Preparación de ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[(1H-bencimidazol-2- il)metil]metilamino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético a) (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[(1H-bencimidazol-2- il)metil]metilamino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Se añadió de una vez EDC (202,4 mg, 1,06 mmoles) a una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-carboxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1) (285,6 mg, 0,88 mmoles), dihidrocloruro de 2-(metilamino)metilbencimidazol (Preparación 3) (247,2 mg, 1,06 mmoles), HOBt.H_{2}O (142,7 mg, 1,06 mmoles), y diisopropiletilamina (0,61 mL, 3,52 mmoles) en DMF anhidra (4,4 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16,5 horas y después se concentró en rotavapor (alto vacío). El residuo se reconcentró en xilenos y después se disolvió en H_{2}O (5 mL). La extracción con EtOAc (2 x 5 mL), el secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía (gel de sílice, 5% de MeOH en EtOAc/CH_{3}Cl 1:1), dieron el compuesto del título en forma de una espuma de color amarillo tenue (389,2 mg, 95%): TLC R_{f} (10% MeOH en EtOAc/CHCl_{3} 1:1) 0,60; ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,70-7,80 (m, 1H), 7,40-7,50 (m, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,21-7,32 (m, 3H), 7,04-7,21 (m, 5H), 4,76-4,88 (m, 2H), 4,36 (d, J=15,2 Hz, 1H), 4,18 (q, J=7,1 Hz, 2H), 3,90 (d, J=15,2 Hz, 1H), 3,82-3,95 (m, 1H), 3,38 (dd, J=15,4, 4,0 Hz, 1H), 3,11 (s, 3H), 3,03 (dd, J=15,4, 9,5 Hz, 1H), 2,69 (dd, J=15,8, 4,8 Hz, 1H), 2,52 (dd, J=15,8, 9,6 Hz, 1H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); FTIR (CCl_{4}) 2700-3470 (ancho), 1735, 1629 (hombro), 1617, 1484, 1454, 1422, 1397, 1271, 1180, 1157 cm^{-1}; MS (ES) m/e 468,2 (M+H)^{+}.

b) Sal sódica del ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]metilamino]carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético.

Se añadió LiOH 1,0N (1,0 mL, 1,0 mmol) a una mezcla de (\pm)-10,11-dihidro-3- [[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]metilamino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno- 10- acetato de etilo (Ejemplo 1(a)) (389,2 mg, 0,83 mmoles) en THF (4,2 mL) y H_{2}O (3,2 mL), y la solución amarilla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 h, a 40ºC durante 15 horas, y después a reflujo durante 0,5 h. Después se concentró a sequedad la mezcla de reacción, en rotavapor, y el residuo se disolvió en H_{2}O (4 mL). La solución se lavó con Et_{2}O (2 x 4 mL), y se desecharon las capas de Et_{2}O. La capa acuosa se filtró para eliminar el material en partículas y después se neutralizó con HCl 1,0N

\hbox{ (1,0 mL)}

. El sólido precipitado se recogió mediante filtración por succión, y se lavó con H_{2}O, y después se disolvió en CH_{3}CN/H_{2}O 1:1 caliente. La solución se filtró en caliente para separar un aceite marrón insoluble, y se dejó enfriar a temperatura ambiente. Como el producto se ponía aceitoso, la mezcla se concentró a sequedad en el rotavapor. El residuo se disolvió en MeOH (2 mL) y se añadió NaHCO_{3} al 5% (2 mL). La mezcla se calentó hasta que se formó una solución homogénea, y después se concentró para eliminar el MeOH. La cromatografía en ODS (30% MeOH/H_{2}O, después recromatografía con MeOH/H_{2}O 1:1), la concentración y la liofilización dieron el compuesto del título en forma de polvo incoloro (187,5 mg, 45%): HPLC k' 1,47 (Hamilton PRP-1®, 35% CH_{3}CN/H_{2}O-0,1% TFA); ^{1}H NMR (400 MHz, CD_{3}OD) mezcla rotámera; 6,80-7,65 (m, 11H), 4,64-4,05 (m, 2H), 3,68-4,41 (m,3H), 2,87-3,46 (m, 5H), 2,30-2,58 (m, 2H); MS (ES) m/e 440,2 (M+H)^{+}. Análisis calc. para C_{27}H_{24}N_{3}O_{3}Na. 2,25 H_{2}O: C, 64,60; H, 5,72; N, 8,37. Encontrado: C, 64,52; H, 5,80; N, 8,27. Ejemplo 2 Preparación de ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[1-(4,4'-bipiperidinil)carbonil]- 5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético a) (\pm)-10,11-dihidro-3-[1-(1'-BOC-4,4'-bipiperidinil)carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Se añadió de una vez EDC (209,3 mg, 1,09 mmoles) a una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-carboxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (296,3 mg, 0,91 mmoles), 1-BOC-4,4'-piperidina (Preparación 2) (293 mg, 1,09 mmoles), HOBt.H_{2}O (147,6 mg, 1,09 mmoles), y diisopropiletilamina (0,32 mL, 1,82 mmoles) en DMF anhidra (4,6 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche y después se concentró en rotavapor (alto vacío). El residuo se reconcentró en xilenos y después se disolvió en H_{2}O

\hbox{(5 mL)}

. La extracción con EtOAc (2 x 5 mL), el secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (EtOAc/hexanos 7:3), dieron el compuesto del título en forma de una espuma de color amarillo claro (463,4 mg, 89%): TLC R_{f} (EtOAc/hexanos 7:3) 0,59; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,94-7,46 (m, 7H), 4,58-4,88 (m, 1H), 4,37 (d, J=15,2 Hz, 1H), 4,19 (q, J=7,1 Hz, 2H), 3,89 (d, J=15,2 Hz, 1H), 3,68-4,30 (m, 4H), 3,38 (dd, J=15,3, 4,1 Hz, 1H), 3,01 (dd, J=15,3, 9,4 Hz, 1H), 2,40-3,09 (m, 5H), 1,45 (s, 9H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H), 0,85-1,90 (m, 11H); FTIR (CCl_{4}) 1734, 1694, 1637, 1426, 1171, cm^{-1}; MS (ES) m/e 1149,8 (2M+H)^{+}, 597,4 (M+Na)^{+}, 575,4 (M+H)^{+}, 519,4 (M+H- C_{4}H_{8})^{+}. b) Acido (\pm)-10,11-dihidro-3-[1-(4,4'-bipiperidinil)carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético

Se agitó a 40ºC una mezcla heterogénea de (\pm)-10,11-dihidro-3-[1-(1'-BOC- 4,4'-bipiperidinil)carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Ejemplo 2(a)) (463,4 mg, 0,81 mmoles), LiOH 1,0N (1,0 mL, 1,0 mmol), THF (4,1 mL) y H_{2}O (3,1 mL). Después de 17 horas, la solución homogénea se enfrió en hielo y se acidificó con HCl 1,0N (1,5 mL). La extracción con CH_{2}Cl_{2} (3 x 10 mL), el secado (MgSO_{4}) y la concentración, dejaron una espuma blanquecina. Esta se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (4,1 mL) y la solución se enfrió a 0ºC. Se añadió de una vez TFA (4,1 mL) y la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 1,5 horas, la solución de color amarillo claro se concentró a sequedad en rotavapor dejando un aceite. La cromatografía en ODS (30% CH_{3}CN/H_{2}O-0,1% TFA), la concentración y la liofilización dieron el compuesto del título en forma de polvo incoloro (437,2 mg, 86%): HPLC k' 1,91 (Hamilton PRP-1®, 30% CH_{3}CN/H_{2}O-0,1% TFA); ^{1}H NMR (400 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,02-7,29 (m, 7H), 4,53-4,73 (m, 1H), 4,34 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 3,99 (d, J=15,0 Hz, 1H), 3,65-3,89 (m, 2H), 3,30-3,50 (m, 3H), 2,70-3,15 (m, 5H), 2,68 (dd, J=16,0, 5,2 Hz, 1H), 2,52 (dd, J=16,0, 9,1 Hz, 1H), 1,06-2,09 (m, 10H); MS (ES) m/e 447,2 (M+H)^{+}. Análisis calc. para C_{28}H_{34}N_{2}O_{3}.1,5CF_{3}CO_{2}H.0,75 H_{2}O: C, 59,00; H, 5,91; N, 4,44. Encontrado: C, 58,96; H, 6,00; N, 4,50.

Ejemplo 3 Preparación de ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-bencimidazolil)-1-propil]- 5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético a) 4-(2-Tetrahidropiraniloxi)-1-tributilestannil-1-butino

Una solución de n-butil-litio en hexanos (1,6 M, 18,8 mL, 30 mmoles) se añadió en una corriente a lo largo de 2 minutos a una solución de 2-(3-butiniloxi)tetrahidro-2H-pirano (4,7 mL, 30 mmoles) en THF seco (60 mL) a 0ºC bajo argón. Después de 0,5 horas, se añadió cloruro de tributil-estaño (8,1 mL, 30 mmoles) de una vez, y la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente. Después de 3 horas, la mezcla de reacción se diluyó con hexanos

\hbox{(300 mL)}

y se lavó secuencialmente con H_{2}O (2 x 60 mL), KF al 10% (2 x 30 mL) y salmuera saturada (60 mL). El secado (Na_{2}SO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (3% EtOAc/hexanos) dieron el compuesto del título (3,58 g, 27%) en forma de un aceite casi incoloro: TLC (5% EtOAc/hexanos) R_{f} 0,37; ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 4,66 (t estrecho, 1H), 3,75-3,96 (m, 2H), 3,49-3,62 (m, 2H), 2,56 (t ap., 2H), 1,76-1,91 (m, 1H), 1,65-1,78 (m, 1H), 1,42-1,65 (m, 10H), 1,22-1,41 (m, 6H), 0,82-1,08 (m, 15H). b) (\pm)-3-[4-(2-tetrahidropiraniloxi)-1-butin-1-il]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una mezcla de (\pm)-10,11-dihidro-3-(trifluorometanosulfoniloxi)-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1(h)) (1,34 g, 3,13 mmoles), 4-(2-tetrahidropiraniloxi)-1-tributilestannil-1-butino (Ejemplo 3(a)) (

\hbox{1,66 g}

, 3,76 mmoles), LiCl (398 mg, 9,39 mmoles), dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (110 mg, 0,094 mmoles) y dioxano anhidro (31 mL), se calentó a reflujo bajo argón. Después de 1,5 horas, la reacción se concentró para eliminar la mayor parte del dioxano, y el residuo se recogió en Et_{2}O (100 mL). Se añadió KF al 10% (50 mL) y la mezcla se agitó vigorosamente durante 0,5 horas. La capa acuosa se eliminó y la capa de Et_{2}O se filtró a través de una mezcla de celite® y MgSO_{4}. Se concentró el filtrado, y el residuo se cromatografió en gel de sílice (10% EtOAc/hexanos) para dar el compuesto del título (1,12 g, 83%) en forma de un aceite amarillo pálido: TLC (20% EtOAc/hexanos) R_{f} 0,40; ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,21-7,30 (m, 1H), 7,06-7,20 (m, 5H), 7,00 (d, J=7,8 Hz, 1H), 4,69 (t, J=3,6 Hz, 1H), 4,31 (d, J=15,2 Hz, 1H), 4,11-4,23 (m, 2H), 3,76-3,97 (m, 4H), 3,59-3,68 (m, 1H), 3,48-3,57 (m, 1H), 3,34 (dd, J=15,2, 4,1 Hz, 1H), 2,97 (dd, J=15,2, 9,5 Hz, 1H), 2,70 (t, J=7,3 Hz, 2H), 2,65 (dd, J=15,7, 4,8 Hz, 1H), 2,51 (dd, J=15,7, 9,5 Hz, 1H), 1,78-1,92 (m, 1H), 1,68-1,78 (m, 1H), 1,44-1,68 (m, 4H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); MS (ES) m/e 455 (M+Na)^{+}. c) (\pm)-3-[4-(2-tetrahidropiraniloxi)-1-butil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una mezcla de (\pm)-3-[4-(2-tetrahidropiraniloxi)-1-butin-1-il]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Ejemplo 3(b)) (1,2 g, 2,77 mmoles), 10% Pd/C (0,3 g, 0,28 mmoles) y EtOAc (28 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo hidrógeno (3,4 at) en un aparato Parr. Después de 3 horas, la mezcla de reacción se filtró a través de celite® y se concentró el filtrado. La cromatografía en gel de sílice (10% EtOAc/hexanos) dio el compuesto del título (1,06 g, 88%) en forma de un aceite incoloro: TLC (20% EtOAc/hexanos) R_{f} 0,51; ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,05-7,20 (m, 4H), 6,92-7,03 (m, 3H), 4,53-4,60 (m, 1H), 4,34 (d, J=15,1 Hz, 1H), 4,12-4,26 (m, 2H), 3,80-3,90 (m, 3H), 3,71-3,80 (m, 1H), 3,44-3,53 (m, 1H), 3,35-3,44 (m, 1H), 3,33 (dd, J=15,1, 4,1 Hz, 1H), 2,95 (dd, J=15,1, 9,4 Hz, 1H), 2,65 (dd, J=15,5, 4,9 Hz, 1H), 2,49-2,61 (m, 3H), 1,77-1,90 (m, 1H), 1,45-1,77 (m, 9H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); MS (ES) m/e 459 (M+Na)^{+}.

d)\pm)-3-[4-hidroxi-1-butil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una solución de (\pm)-3-[4-(2-tetrahidropiraniloxi)-1-butil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo(Ejemplo 3(c)) (456,0 mg, 1,04 mmoles) y ácido p-toluenosulfónico monohidrato (60 mg, 0,31 mmoles) en EtOH absoluto (10 mL) se agitó a temperatura ambiente. Después de 2 horas, la reacción se apagó con NaHCO_{3} al 5% (1 mL) y se concentró para eliminar el EtOH. El residuo se diluyó con H_{2}O (2 mL) y se extrajo con CH_{2}Cl_{2}. El secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (EtOAc/hexanos 1:1) dierón el compuesto del título (342,4 mg, 93%) en forma de un aceite incoloro: TLC (EtOAc/hexanos 1:1) R_{f} 0,49; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,85-7,25 (m, 7H), 4,34 (d, J=15,1 Hz, 1H), 4,08-4,30 (m, 2H), 3,75-3,95 (m, 2H), 3,53-3,72 (m, 2H), 3,33 (dd, J=15,1, 4,1 Hz, 1H), 2,95 (dd, J=15,1, 9,4 Hz, 1H), 2,40-2,75 (m, 4H), 1,45-1,80 (m, 4H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); MS (ES) m/e 353

\hbox{(M+H) ^{+} }

. e) (\pm)-3-[3-carboxi-1-propil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una solución de (\pm)-3-[4-hidroxi-1-butil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10- acetato de etilo (Ejemplo 3(d))

\break

(

\hbox{342,4 mg}

, 0,97 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} anhidro (19 mL) se enfrió a 0ºC bajo argón, y se añadió en una porción cloruro de 2,2,6,6-tetrametiloxopiperidinio (J. Org. Chem. 1985, 50, 1332- 1334; 260 mg, 1,36 mmoles). La mezcla de reacción se agitó a 0ºC durante 1 hora y después se añadió 2-metil-2-buteno (1,2 mL, 11,64 mmoles) seguido por una solución fría (0ºC) de NaClO_{2} (0,88 g, 7,76 mmoles) y NaH_{2}PO_{4} (0,90 g, 6,50 mmoles) en H_{2}O (26 mL). Después de 10 minutos, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (100 mL) y las capas se separaron. La capa orgánica se lavó secuencialmente con HCl 1,0N frío (10 mL) y salmuera saturada (20 mL), se secó (MgSO_{4}) y se concentró. La cromatografía en gel de sílice (gradiente: EtOAc/CHCl_{3} 1:1, y después EtOAc/CHCl_{3}/EtOH 9:9:2) dio el compuesto del título impuro. La recromatografía en gel de sílice (tolueno/EtOAc/AcOH 7:3:0,1) dio el compuesto del título puro (233,7 mg, 66%). TLC (EtOAc/CHCl_{3} 1:1) R_{f} 0,46; ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,05-7,22 (m, 4H), 6,92-7,05 (m, 3H), 4,34 (d, J=15,0 Hz, 1H), 4,10-4,25 (m, 2H), 3,80-3,90 (m, 2H), 3,33 (dd, J=15,1, 4,1 Hz, 1H), 2,95 (dd, J=15,1, 9,4 Hz, 1H), 2,48-2,60 (m, 4H), 2,48-2, 60 (m, 4H), 2,37 (t, J=7,4 Hz, 2H), 1,87-2,00 (m, 2H), 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3H); MS (ES) m/e 389 (M+Na)^{+}, 367 (M+H)^{+}. f) (\pm)-3-[3-[[(2-Aminofenil)amino]carbonil]prop-1-il]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una solución de (\pm)-3-[3-carboxi-1-propil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10- acetato de etilo (Ejemplo 3(f)) (233,7 mg, 0,64 mmoles) en THF seco (6,4 mL) se enfrió a 0ºC bajo argón, y se añadió 4-metilmorfolina (0,14 mL, 1,28 mmoles). La solución se agitó a 0ºC durante varios minutos, y después se añadió gota a gota cloroformiato de isobutilo 0,11 mL, 0,83 mmoles). La mezcla turbia de reacción se agitó a 0ºC durante 0,5 horas, y después se añadió rápidamente una solución de 1,2-fenilendiamina (138 mg, 1,28 mmoles) en THF seco (0,6 mL). La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 3 horas, y después se diluyó con H_{2}O (2 mL) y se extrajo con EtOAc. El secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (EtOAc/hexanos 3:2) dieron el compuesto del título (257,6 mg, 88%) en forma de una espuma de color amarillo claro: TLC (EtOAc/hexanos 3:2) R_{f} 0,40; ^{1}H NMR (250 MHz, CDCl_{3}) \delta 6,90-7,23 (m, 10H), 6,72-6,80 (m, 2H), 4,33 (d, J=15,0 Hz, 1H), 4,10-4,25 (m, 2H), 3,71-3,91 (m, 4H), 3,32 (dd, J=15,1, 4,0 Hz, 1H), 2,95 (dd, J=15,1, 9,5 Hz, 1H), 2,59-2,72 (m, 3H), 2,54 (dd, J=15,6, 9,5 Hz, 1H), 2,34 (t, J=7,4 Hz, 2H), 1,98-2,09 (m, 2H), 1,27 (t, J=7,1 Hz, 3H); MS (ES) m/e 457 (M+H)^{+}.

g) (\pm)-10,11-Dihidro-3-[3-(2-bencimidazolil)-1-propil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una solución de (\pm)-3-[3-[[(2-aminofenil)amino]carbonil]prop-1-il]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (257,6 mg, 0,56 mmoles) en AcOH glacial (2,8 mL) y THF seco (2,8 mL) se calentó a reflujo bajo argón. Después de 3 horas, se concentró la mezcla de reacción y el residuo se reconcentró en xilenos. El residuo resultante se recogió en Et_{2}O (30 mL) y se lavó secuencialmente con NaOH 1,0N (2 mL), H_{2}O (2 mL) y salmuera saturada (2 mL). El secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (2% EtOH en EtOAc/hexanos 1:1) dieron el compuesto del título (236,3 mg, 96%) en forma de una espuma blanquecina: TLC (2% EtOH en EtOAc/hexanos 1:1) R_{f} 0,34; ^{1}H NMR (400 MHz, CDCl_{3}) \delta 7,30-7,80 (m, 2H), 7,03-7,24 (m, 6H), 6,80-6,95 (m, 3H), 4,12-4,28 (m,3H), 3,77-3,89 (m, 1H), 3,74 (dd, J=15,1 Hz, 1H), 3,28 (dd, J=15,2, 4,0 Hz, 1H), 2,90 (dd, J=15,2, 9,5 Hz, 1H), 2,84 (t, J=7,7 Hz, 2H), 2,65 (dd, J=15,7, 4,9 Hz, 1H), 2,60 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,52 (dd, J=15,7, 9,6 Hz, 1H), 2,03-2,18 (m, 2H), 1,28 (t, J=7,1 Hz, 3H); MS (ES) m/e 439 (M+H)^{+}.

h) Sal sódica del ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-bencimidazolil)-1- propil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético

Una mezcla de (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-bencimidazolil)-1-propil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Ejemplo 3(g)) (236,3 mg, 0,54 mmoles), NaOH 1,0N (0,65 mL, 0,65 mmoles) y EtOH absoluto (4,8 mL) se calentó en un baño de aceite regulado a 50ºC. Después de 16 horas, la mezcla de reacción se concentró a sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía en ODS (gradiente: 35% MeOH/H_{2}O, después 40% MeOH/H_{2}O). La concentración, seguida por la liofilización, dio el compuesto del título (143 mg, 58%) en forma de polvo incoloro: HPLC (PRP-1®, 40% CH_{3}CN/H_{2}O que contiene 0,1% TFA) K'=1,5; ^{1}H NMR (400 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,41-7,49 (m, 2H), 6,86-7,27 (m, 9H), 4,24 (d, J=14,7 Hz, 1H), 3,87 (d, J=14,7 Hz, 1H), 3,73-3,85 (m, 1H), 3,23-3,25 (m, 1H, parcialmente oscurecido por la señal del disolvente residual), 2,80-2,93 (m, 3H), 2,62 (t, J=7,5 Hz, 2H), 2,56 (dd, J=14,4, 5,1 Hz, 1H), 2,40 (dd, J=14,4, 9,7 Hz, 1H), 2,05-2,17 (m, 2H); MS (ES) m/e 411 (M+H)^{+}. Análisis calc. para C_{27}H_{25}N_{2}O_{2}Na.1,5H_{2}O: C, 70,57; H, 6,14; N, 6,10. Encontrado: C, 70,65; H, 5,95, N, 5,95.

Ejemplo 4 Preparación de ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[2-(2- piridilamino)etil]amino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético a) (\pm)-10,11-Dihidro-3-[[[2-(2-piridilamino)etil]amino]carbonil]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de

\break

etilo

Se añadió de una vez EDC (112,7 mg, 0,59 mmoles) a una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-carboxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1) (157,8 mg, 0,49 mmoles), dihidrocloruro de 2-[(2-aminoetil)amino]piridina (Preparación 4) (123,5 mg, 0,59 mmoles), HOBt.H_{2}O (79,5 mg, 0,59 mmoles) y diisopropiletilamina (0,43 mL, 2,45 mmoles) en DMF anhidra (2,5 mL), a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 18 horas y después se concentró. El residuo se reconcentró en xilenos y después se diluyó con H_{2}O (5 mL) y se extrajo secuencialmente con EtOAc (2 x 5 mL) y CHCl_{3} (2 x 5 mL). Las capas orgánicas se reunieron y se trataron con un poco de MeOH para disolver una pequeña cantidad de materia insoluble. El secado (MgSO_{4}), la concentración y la cromatografía en gel de sílice (5% MeOH/CHCl_{3}) dieron el compuesto del título (199,1 mg, 92%) en forma de un aceite de color amarillo: TLC (5% MeOH/CHCl_{3}) R_{f} 0,42; ^{1}H NMR (400, CDCl_{3}) \delta 8,10 (d, J=3,5 Hz, 1H), 8,02 (br s, 1H), 7,60 (d estrecho ap., 1H), 7,53 (dd ap., 1H), 7,33-7,42 (m, 1H), 7,08-7,22 (m, 5H), 6,57-6,65 (m, 1H), 6,45 (d, J=8,3 Hz, 1H), 4,79-4,90 (m, 1H), 4,36 (d, J=15,1 Hz, 1H), 4,11-4,26 (m, 2H), 3,92 (d, J=15,1 Hz, 1H), 3,80-3,95 (m, 1H), 3,55-3,72 (m, 4H), 3,38 (dd, J=15,2, 4,1 Hz, 1H), 3,03 (dd, J=15,2, 9,5 Hz, 1H), 2,66 (dd, J=15,8, 4,8 Hz, 1H), 2,50 (dd, J=15,8, 9,6 Hz, 1H), 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3H); MS (ES) m/e 444 (M+H)^{+}.

b) Sal sódica del ácido (\pm)-10,11-Dihidro-3-[[[2-(2- piridilamino)etil]amino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético

Una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-[[[2-(2- piridilamino)etil]amino]carbonil]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Ejemplo 4(a)) (199,1 mg, 0,45 mmoles) y NaOH 1,0 N (0,54 mL, 0,54 mmoles) en EtOH absoluto (4 mL), se calentó en un baño de aceite regulado a 45ºC. Después de 23 horas, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en ODS (gradiente: 30% MeOH/H_{2}O, después 40% MeOH/H_{2}O). La concentración y la liofilización dieron el compuesto del título (95,8 mg, 46%) en forma de polvo casi incoloro: HPLC (PRP-1®, 30% CH_{3}CN/H_{2}O que contiene 0,1% TFA) K'=2,0; ^{1}H NMR (400 MHz, CD_{3}OD) \delta 7,92 (d ap., J=4,2 Hz, 1H), 7,61 (d, J=1,8 Hz, 1H), 7,53 (dd, J=7,9, 1,8 Hz, 1H), 7,38-7,47 (m, 1H), 7,01-7,24 (m, 5H), 6,56 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,50-6,60 (m, 1H), 4,34 (d, J=14,9 Hz, 1H), 3,97 (d, J=14,9 Hz, 1H), 3,78-3,89 (m, 1H), 3,44-3,61 (m, 4H), 3,39 (dd, J=15,4, 4,4 Hz, 1H), 3,00 (dd, J=15,4, 10,2 Hz, 1H), 2,61 (dd, J=14,9, 5,1 Hz, 1H), 2,43 (dd, J=14,9, 9,5 Hz, 1H); MS (ES) m/e 416 (M+H)^{+}. Análisis calc. para C_{25}H_{24}N_{3}O_{3}Na.1,33H_{2}O: C, 65,07; H, 5,82; N, 9,11. Encontrado: C, 65,02; H, 5,62, N, 9,17.

Ejemplo 5 Preparación de ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-[2-piridilamino)-1-propiloxi]- 5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético a) (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-(N-oxopiridil)amino]-1-propiloxi]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de

\break

etilo

Una solución de 2-[(3-hidroxi-1-propil)amino]piridina-N-óxido (Preparación 5) (2 mmoles) y azodicarboxilato de dietilo (2 mmoles) en DMF anhidra (10 mL), se añade lentamente, gota a gota, a una solución de (\pm)-10,11-dihidro-3-hidroxi-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Preparación 1(g)) (1 mmol) y trifenilfosfina (2,1 mmoles) en DMF anhidra (10 mL) a temperatura ambiente, bajo argón. Cuando la reacción es completa, los disolventes se eliminan en rotavapor y el residuo se reconcentra en xilenos para eliminar la DMF residual. La cromatografía en gel de sílice proporciona el compuesto del título.

b) (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-piridilamino)-1-propiloxi]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo

Una mezcla de (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-(N-oxopiridil)amino]-1-propiloxi]- 5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Ejemplo 5(a)) (1 mmol), ciclohexeno (10 mmoles), y 10% Pd/C (0,1 mmoles) en isopropanol (10 mL), se calienta a reflujo. Cuando la reacción es completa, la mezcla se filtra a través de celite®, y el filtrado se concentra en rotavapor. El residuo se reconcentra en tolueno, y después se cromatografía en gel de sílice para dar el compuesto del título.

c) Sal sódica del ácido (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-piridilamino)-1- propiloxi]-5H-dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acético

Una mezcla de (\pm)-10,11-dihidro-3-[3-(2-piridilamino)-1-propiloxi]-5H- dibenzo[a,d]ciclohepteno-10-acetato de etilo (Ejemplo 5(b)) (1 mmol) y NaOH 1,0N (1,2 mmoles) en EtOH absoluto (10 mL), se calienta en un baño de aceite regulado a 50ºC. Cuando la reacción es completa, los disolventes se eliminan en rotavapor y el residuo se purifica mediante cromatografía en ODS. La concentración y la liofilización proporcionan el compuesto del título.

Ejemplo 6 Acido 2-[[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]metilamino]carbonil]-6,11-dihidro-5H- dibenz[b,e]azepina-6-acético a) 2-[[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]metilamino]carbonil]-6,11-dihidro-5H- dibenz[b,e]azepina-6-acetato de metilo

El uso del procedimiento del Ejemplo 1(a), excepto que se sustituye el compuesto de la Preparación 1(i) por el compuesto de la Preparación 6(d), da el compuesto del título.

b) Acido 2-[[[(1H-bencimidazol-2-il)metil]metilamino]carbonil]-6,11- dihidro-5H-dibenz[b,e]azepina-6-acético

El uso del procedimiento del Ejemplo 1(b), excepto que se sustituye el compuesto del Ejemplo 1(a) por el compuesto del Ejemplo 6(a), da el compuesto del título.

Claims

1. Un compuesto según la fórmula (IV):

20

en la que

X^{1}-X^{2} es CHR^{1}-CH, CR^{1}=CH, NR^{1}-CH, S(O)_{u}-CH o O- CH;

X^{3} es CR^{5}R^{5\;'}, NR^{5}, S(O)_{u} o O;

R'' es R', -C(O)R' o -C(O)OR^{5};

\break\hbox{-COCR' _{2} R ^{2} '}

;

R^{6} es

21

22

R''HNC(=NH)NH-(CH_{2})_{3}(CHR^{10})-U y R''HN-(CH_{2})_{5}-U,

en donde G es N o CH, R^{20} es hidrógeno, amino, mono o di-alquil(C_{1}-C_{4})amino, hidroxi o alquilo(C_{1}-C_{4}), y U es NR'CO, CONR', (CH_{2})CO, CH=CH, C\equivC, CH_{2}O, OCH_{2} o (CH_{2})_{2}; o

R^{6} es W'-(CR'_{2})_{q}-U en donde W' es

23

Q es NH; R^{a} es alquilo (C_{1}-C_{6}), alcoxi (C_{1}-C_{6}), halógeno o R'NH, R^{b} y R^{c} se juntan para formar un anillo ciclohexilo, fenilo o piridilo opcionalmente sustituido con halógeno, alquilo (C_{1}-C_{4}), OR^{1}, SR^{1}, COR^{1}, OH, NO_{2}, N(R^{1})_{2}, CO(NR^{1})_{2}, CH_{2}N(R^{1})_{2}, CN o R''R'NC(=NR')-; y -(CR'_{2})_{q}-U- es (CH_{2})_{q}-NR'CO, (CH_{2})_{q}-CH_{2}O o (CH_{2})_{q}-CH_{2}CH_{2};

R^{3} es H, halo, -OR^{12}, -SR^{12}, -CN, -NR'R^{12}, -NO_{2}, -CF_{3}, CF_{3}S(O)_{r}-, -CO_{2}R'-, -CONR'_{2}, R^{14}-alquilo(C_{0}-C_{6}),

\hbox{R ^{14} -oxoalquilo(C _{1} -C _{6} )-}

, R^{14}-alquenilo(C_{2}- C_{6})-, R^{14}-alquinilo(C_{2}-C_{6})-, R^{14}-alquiloxi(C_{0}-C_{6})-,

\hbox{R ^{14} -alquilamino(C _{0} -C _{6} )-,}

o R^{14}-alquilo(C_{0}-C_{6})-S(O)_{r}-;

R^{10} es H, alquilo(C_{1}-C_{4}) o -NR'R'';

R^{14} es H, cicloalquilo(C_{3}-C_{6}), Het o Ar;

m es 1 ó 2;

q es 0, 1, 2 ó 3;

r es 0, 1 ó 2;

u es 0, 1 ó 2; y

v es 0 ó 1;

\hbox{(C _{1} -C _{4} )}

, alquiltio (C_{1}-C_{4}), trifluoroalquilo, OH, F, Cl, Br o I.

Het representa un anillo monocíclico de cinco o seis miembros opcionalmente sustituido o un anillo bicíclico de nueve o diez miembros que contiene de uno a tres heteroátomos elegidos entre el grupo formado por nitrógeno, oxígeno y azufre, opcionalmente sustituido con uno a tres de los grupos alquilo (C_{1}-C_{4}), alcoxi (C_{1}-C_{4}), alquiltio

\hbox{(C _{1} -
C _{4} )}

, trifluoroalquilo, OH, F, Cl, Br o I;

\code{N} representa un heterociclo nitrogenado que puede ser un anillo monocíclico saturado o insaturado estable, de cinco, seis o siete miembros, o un anillo bicíclico de siete a diez miembros que contiene hasta tres átomos de nitrógeno o que contiene un átomo de nitrógeno y un heteroátomo elegido entre oxígeno y azufre y que puede estar sustituido con H, alcoxi (C_{1}-C_{4}), F, Cl, Br, I, NO_{2}, NR'_{2}, OH, CO_{2}R', CONHR', CF_{3}, R^{14}-alquilo (C_{0}-C_{4}), R^{14}-alquilo (C_{1}-C_{4})-S(O)_{u} o alquilo (C_{1}-C_{4}) sustituido con cualquiera de los sustituyentes antes mencionados;

2. Un compuesto según la reivindicación 1ª en el que X_{1}-X_{2} es CH_{2}-CH o NH-CH y X_{3} es CH_{2}.

3. Un compuesto según la reivindicación 1ª que es:

4. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según la reivindicación 1ª y un vehículo aceptable farmacéuticamente.

5. El uso de un compuesto según la reivindicación 1ª en la preparación de un medicamento para la inhibición del receptor de fibrinógeno.

6. El uso de un compuesto según la reivindicación 1ª en la preparación de un medicamento para la inhibición de un receptor de vitronectina.

7. El uso de un compuesto según la reivindicación 1ª y un vehículo aceptable farmacéuticamente, en la preparación de un medicamento para el tratamiento de la osteoporosis, aterosclerosis, cáncer o reestenosis posterior a la angioplastia, en un mamífero.

8. El uso de un compuesto según la reivindicación 1ª y un vehículo aceptable farmacéuticamente, en la preparación de un medicamento para el tratamiento del trastorno cerebro-vascular, ataques de isquemia transitoria, infarto de miocardio, o para la inhibición de la reoclusión después de una terapia trombolítica.

9. Un procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (IV) según se define en la reivindicación 1ª, el cual procedimiento comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (X):

24

en la que X^{1}, X^{2}, X^{3}, R^{2} y R^{3} son como se definieron en la fórmula (IV), R^{4} representa hidrógeno, A_{1} representa C, E representa fenilo y L^{1} es meta respecto de la unión del anillo y es CHO, CO_{2}R', Br, I, OH, CF_{3}SO_{3}, CH_{2}-T o NR'R^{15}, y T es OH, NHR^{15}, Cl, Br o I;

con un compuesto de fórmula (XI):

R^{6\;'}-L^{2}\eqnum(XI)

en la que R^{6\;'} es W'-(CR'_{2})_{q}-L^{2}, en donde W', R' y q son como se definieron en la fórmula (IV), L^{2} es OH, NHR^{15}, C\equivC, CHO, CO_{2}R', Br, I o Cl y R^{15} es H, alquilo (C_{1}-C_{10}), cicloalquilo (C_{3}-C_{7})-alquilo (C_{0}-C_{8}) o Ar-alquilo (C_{0}-C_{8});

y a continuación eliminar cualquier grupo protector, y opcionalmente formar una sal aceptable farmacéuticamente.