ES2201198T3 - Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos. - Google Patents

Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos.

Info

Publication number
ES2201198T3
ES2201198T3 ES96930536T ES96930536T ES2201198T3 ES 2201198 T3 ES2201198 T3 ES 2201198T3 ES 96930536 T ES96930536 T ES 96930536T ES 96930536 T ES96930536 T ES 96930536T ES 2201198 T3 ES2201198 T3 ES 2201198T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
oligonucleotides
oligonucleotide
inverted
substituted
phosphorothioate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
ES96930536T
Other languages
English (en)
Inventor
Sudhir Agrawal
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Aceragen Inc
Original Assignee
Hybridon Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hybridon Inc filed Critical Hybridon Inc
Application granted granted Critical
Publication of ES2201198T3 publication Critical patent/ES2201198T3/es
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
    • C12N15/1137—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against enzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
    • C12N2310/315—Phosphorothioates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/321—2'-O-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/32—Chemical structure of the sugar
    • C12N2310/322—2'-R Modification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/341—Gapmers, i.e. of the type ===---===
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/345—Spatial arrangement of the modifications having at least two different backbone modifications
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
    • C12N2310/30—Chemical structure
    • C12N2310/34—Spatial arrangement of the modifications
    • C12N2310/346—Spatial arrangement of the modifications having a combination of backbone and sugar modifications

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Transition And Organic Metals Composition Catalysts For Addition Polymerization (AREA)

Abstract

Oligonucleótido híbrido invertido que comprende una región de ribonucleótidos 2¿-O-substituidos, en el que dicha región de ribonucleótidos 2¿-O-substituidos tiene de 4 a 13 nucleósidos situados entre dos regiones de oligodesoxirribonucleótidos con enlaces fosforotioato, en el que dichas regiones de fosforotioato tienen de 5 a 46 desoxirribonucleótidos, donde 2¿-O-substituido significa la sustitución de la posición 2'' del grupo pentosa con un grupo -O-alquilo inferior que contiene de 1 a 6 átomos de carbono saturados o insaturados, o con un grupo -O-arilo o alilo que tiene de 2 a 6 átomos de carbono, en el que dicho grupo alquilo, arilo o alilo puede estar no sustituido o puede estar sustituido.

Description

Oligonucleótidos quiméricos e híbridos invertidos.
Antecedentes de la invención Campo de la invención
La invención se refiere a oligonucleótidos modificados que son útiles para el estudio de la expresión génica y para la estrategia terapéutica antisentido.
Sumario de la materia relacionada
Las posibilidades de utilización de oligonucleótidos como inhibidores de la expresión de genes específicos en una estrategia terapéutica antisentido se sugirió en primer lugar en tres artículos publicados en 1977 y 1978. Paterson et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 74: 4370-4374 (1977) describe cómo la traducción del ARNm en medio exento de células puede inhibirse por la unión de un oligonucleótido complementario al ARNm. Zamecnik y Stephenson, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 75: 280-284 y 285-288 (1978) describen cómo un oligonucleótido sintético de 13 unidades que es complementario a una parte del genoma del virus del sarcoma de Rous (VSR) puede inhibir la replicación del VSR en cultivos de células infectadas y puede inhibir la transformación, mediada por VSR, de fibroblastos primarios de pollo en células malignas de sarcoma.
Desde la realización de estos primeros estudios ha quedado firmemente demostrada la capacidad de los oligonucleótidos antisentido para inhibir la propagación de virus. La patente U.S. nº 4.806.463 describe la inhibición de la propagación del virus de la inmunodeficiencia humana por oligonucleótidos que son complementarios a cualquiera de las diversos regiones del genoma del VIH. La patente U.S. nº 5.194.428 describe la inhibición de la replicación del virus de la gripe por oligonucleótidos con enlaces fosforotioato complementarios al gen de la polimerasa 1 del virus de la gripe. Agrawal, hace una revisión, en Trends in Biotechnology 10: 152-158 (1992), de la utilización de oligonucleótidos antisentido como agentes antivíricos.
También se han desarrollado oligonucleótidos antisentido como agentes antiparasitarios. La publicación PCT nº WO93/13740 describe la utilización de oligonucleótidos antisentido para inhibir la propagación de parásitos de malaria resistentes a fármacos. Tao et al., Antisense Research and Development 5: 123-129 (1995), describe la inhibición de la propagación de un parásito de esquistosoma por oligonucleótidos antisentido.
Más recientemente, los oligonucleótidos antisentido han resultado ser candidatos prometedores en aplicaciones terapéuticas para enfermedades originadas por la expresión de genes celulares. La publicación PCT nº WO95/09236 describe la neutralización de las anomalías morfológicas, provocadas por beta-amiloide en líneas celulares neuronales, por oligonucleótidos que inhiben la expresión de beta-amilooide. La publicación PCT nº W094/26887 describe la neutralización del corte y empalme aberrante de un transcrito de un gen de globina por oligonucleótidos complementarios a ciertas porciones de dicho transcrito. La solicitud PCT no PCT/US94/13685 describe la inhibición de la tumorogenicidad por oligonucleótidos complementarios al gen que codifica la ADN-metiltransferasa.
El desarrollo de varios oligonucleótidos antisentido como agentes terapéuticos y diagnósticos ha sido revisado recientemente por Agrawal e Iyer, Current Opinion in Biotechnology 6: 12-19 (1995).
Con el aumento del interés en la estrategia terapéutica antisentido, se han realizado diversos esfuerzos para mejorar las propiedades farmacocinéticas de los oligonucleótidos modificando la cadena principal de azúcar-fosfato. La patente U.S. nº 5.149.797 describe oligonucleótidos quiméricos tradicionales que tienen una región principal de fosforotioato interpuesta entre regiones flanqueantes de metilfosfonato o fosforamidato. La publicación PCT no W094/02498 describe oligonucleótidos híbridos tradicionales que tienen regiones de ribonucleótidos 2'-O-sustituidos flanqueando una región principal de ADN.
En la actualidad se están haciendo muchos descubrimientos sobre las propiedades farmacodinámicas de los oligonucleótidos. Agrawal et al., Clinical Pharmacokinetics 28: 7-16 (1995) y Zhang et al., Clinical Pharmacology and Therapeutics 58: 44-53 (1995) describen la farmacodinámica de oligonucleótidos anti-VIH en pacientes humanos. Algunos de estos nuevos descubrimientos han permitido superar nuevos obstáculos para la optimización de oligonucleótidos como agentes terapéuticos. Por ejemplo, Kniep et al., Nature 374: 546-549 (1995) describe el efecto mitogénico in vivo de oligonucleótidos que contienen el dinucleótido CG flanqueado por determinadas secuencias. Galbraith et al., Antisense Research and Development 4: 201-206 (1994) describen la activación del complemento por oligonucleótidos. Henry et al., Pharm. Res. 11: PPDM8082 (1994) describe la posible interferencia de oligonucleótidos con la coagulación sanguínea. Los documentos WO-A-94/08003, WO-A-95/02069 y WO-A-93/13114, así como J. Biol. Chem. vol. 268(19), págs. 14514-22 (1993) describen oligonucleótidos con una región de enlaces internucleosídicos fosforotioato, flanqueada en ambos lados por regiones de nucleósidos 2'-O-sustituidos.
Por consiguiente, se necesitan oligonucleótidos modificados que conserven las propiedades de inhibición de la expresión génica produciendo al mismo tiempo menos efectos secundarios que los oligonucleótidos convencionales.
Breve sumario de la invención
La invención se refiere a oligonucleótidos modificados que son útiles para los estudios de la expresión génica y para la estrategia terapéutica antisentido. La invención proporciona oligonucleótidos modificados que inhiben la expresión génica y que producen menos efectos secundarios que los oligonucleótidos convencionales. En particular, la invención proporciona oligonucleótidos modificados que presentan mitogenicidad reducida, activación del complemento reducida y propiedades antitrombóticas reducidas, en comparación con los oligonucleótidos convencionales.
En un primer aspecto, la invención proporciona oligonucleótidos híbridos invertidos y composiciones de material para la inhibición de la expresión de genes específicos con menos efectos secundarios. Dicha inhibición de la expresión génica puede utilizarse como un método alternativo al análisis de mutantes para determinar la función biológica de genes específicos. Dicha inhibición de la expresión génica también puede utilizarse para el tratamiento terapéutico de enfermedades causadas por la expresión de los genes de un virus o de un patógeno, o por la expresión inapropiada de genes celulares.
La invención se refiere a oligonucleótidos híbridos invertidos que tienen una región de ARN 2'-O-substituida de 4-13 nucleósidos entre dos regiones, de oligodesoxirribonucleótidos con enlaces fosforotioato, de 5-46 oligodesoxirribonucleósidos. De acuerdo con la invención, la región de ARN 2'-O substituida se encuentra entre dos regiones de oligodesoxirribonucleótidos con enlaces fosforotioato, una estructura que está "invertida" en comparación con los oligonucleótidos híbridos tradicionales.
La invención proporciona un método para la preparación de un medicamento para modular la expresión génica en un mamífero, con menos efectos secundarios. En el método según este aspecto de la invención, una composición de material según la invención se administra a el mamífero, en la que el oligonucleótido es complementario a un gen que se expresa en el mamífero. Tras la administración de la composición de material, se realizan una o más mediciones de efectos biológicos seleccionados a partir del grupo formado por activación del complemento, mitogénesis e inhibición de la formación de coágulos por la trombina.
La invención proporciona un método para la preparación de un medicamento para el tratamiento terapéutico, con menos efectos secundarios, de una enfermedad causada por la expresión génica aberrante, en el que la composición de material según la invención se administra a un individuo que tenga la enfermedad, en el que el oligonucleótido es complementario a un gen que se expresa de modo aberrante, en el que dicha expresión aberrante causa la enfermedad. En este contexto, la expresión génica aberrante significa expresión en un organismo hospedador de un gen necesario para la propagación de un virus o de un patógeno procariótico o eucariótico, o la expresión inapropiada de un gen celular del hospedador. Expresión génica inapropiada en la célula hospedadora incluye la expresión de un alelo mutante de un gen celular, o la infraexpresión o sobreexpresión de una alelo normal de un gen celular, estando causada dicha enfermedad por dicha expresión génica inapropiada en la célula hospedadora. Tras la administración de la composición de material, se realizan una o más mediciones de efectos biológicos seleccionados a partir del grupo formado por activación del complemento, mitogénesis e inhibición de la formación de coágulos por la trombina.
Breve descripción de los dibujos
La Figura 1 muestra los oligonucleótidos híbridos invertidos, oligonucleótidos híbridos y oligonucleótidos con enlaces fosfodiéster y fosforotioato utilizados en los presentes estudios. Los 2'-O-metilrribonucleótidos aparecen perfilados y los nucleótidos con enlaces fosfodiéster aparecen subrayados; los restantes son nucleótidos unidos con enlaces fosforotioato.
La Figura comparativa 2 muestra los oligonucleótidos de cadena principal mixta, quiméricos y quiméricos invertidos utilizados en los presentes estudios. Los nucleótidos unidos por enlaces metilfosfonato están subrayados; todos los restantes son nucleótidos unidos con enlaces fosforotioato.
La Figura 3 muestra la captación de timidina por esplenocitos de ratón en función de la concentración de oligonucleótidos con enlaces fosforotioato o de cualquiera de los diversos oligonucleótidos híbridos invertidos.
La Figura 4 muestra el grado de inhibición de la hemólisis, mediada por el complemento, observada cuando se trata el suero con oligonucleótidos con enlaces fosforotioato o con cualquiera de los diversos oligonucleótidos híbridos invertidos.
La Figura 5 muestra la prolongación del TTPa obtenida cuando se trata el suero humano normal con oligonucleótidos con enlaces fosforotioato o con cualquiera de los diversos oligonucleótidos híbridos invertidos.
La Figura comparativa 6 muestra la captación de timidina por esplenocitos de ratón en función de la concentración de oligonucleótidos con enlaces fosforotioato o de cualquiera de los diversos oligonucleótidos quiméricos invertidos.
La Figura comparativa 7 muestra el grado de inhibición de la hemólisis, mediada por el complemento, observada cuando se trata el suero con oligonucleótidos con enlaces fosforotioato o con cualquiera de los diversos oligonucleótidos quiméricos invertidos.
La Figura comparativa 8 muestra la prolongación del TTPa obtenida cuando se trata el suero humano normal con oligonucleótidos con enlaces fosforotioato o con cualquiera de los diversos oligonucleótidos quiméricos invertidos.
Descripción detallada de las realizaciones preferidas
La invención se refiere a oligonucleótidos modificados que son útiles para los estudios de la expresión génica y para la estrategia terapéutica antisentido. La invención proporciona oligonucleótidos modificados que inhiben la expresión génica y que producen menos efectos secundarios que los oligonucleótidos convencionales. En particular, la invención proporciona oligonucleótidos modificados que presentan mitogenicidad reducida, activación del complemento reducida y propiedades antitrombóticas reducidas, en comparación con los oligonucleótidos convencionales..
En un primer aspecto, la invención proporciona oligonucleótidos híbridos invertidos y composiciones de material para la inhibición de la expresión de genes específicos, con menos efectos secundarios. Dicha inhibición de la expresión génica puede utilizarse como un método alternativo al análisis de mutantes o a los experimentos de "desactivación" de genes para determinar la función biológica de genes específicos. Dicha inhibición de la expresión génica también puede utilizarse para el tratamiento terapéutico de enfermedades causadas por la expresión de los genes de un virus o de un patógeno, o por la expresión inapropiada de genes celulares.
Una composición de material para la inhibición de la expresión de genes específicos con menos efectos secundarios comprende, según este aspecto de la invención, un oligonucleótido modificado que es complementario a una porción de una región o gen genómico del que se desea inhibir la expresión, o a un transcrito de ARN obtenido a partir de dicho gen. El término oligonucleótido engloba aquellos polímeros que tienen bases o azúcares químicamente modificados y/o que tienen sustituyentes adicionales, incluyendo, pero sin limitarse a los mismos, grupos lipófilos, agentes intercalantes, diaminas y adamantano. Preferiblemente, dichos oligonucleótidos tendrán de 5 a 50 nucleótidos, lo más preferiblemente de 17 a 35 nucleótidos. El término complementario significa que tiene la capacidad de hibridarse con una región o gen genómico, o con su transcrito de ARN en condiciones fisiológicas. Dicha hibridación es normalmente el resultado de la unión mediante enlaces de hidrógeno entre cadenas complementarias, preferiblemente para formar pares de bases de Watson-Crick o de Hoogsteen, aunque también pueden dar lugar a la hibridación otras formas de unión mediante enlaces de hidrógeno, así como el apilamiento de bases. En la práctica, dicha hibridación puede deducirse observando la inhibición de la expresión de genes específicos. La secuencia del gen o la secuencia del transcrito de ARN, a la que es complementaria la secuencia del oligonucleótido modificado, dependerá del efecto biológico que se busca modificar. En algunos casos, la región o gen genómico, o su transcrito de ARN puede provenir de un virus. Los virus preferidos incluyen, sin limitarse a los mismos, virus de la inmunodeficiencia humana (de tipo 1 ó 2), virus de la gripe, virus herpes simple (de tipo 1 ó 2), virus de Epstein-Barr, citomegalovirus, virus respiratorio sincicial, virus de la gripe, virus de la hepatitis B, virus de la hepatitis C y virus del papiloma. En otros casos, la región o gen genómico, o su transcrito de ARN puede provenir de un ADN cromosómico endógeno de mamífero (incluido el hombre). Los ejemplos preferidos de dichas regiones, genes genómicos o de sus trasncritos de ARN incluyen, sin limitarse a los mismos, secuencias que codifican el factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF), beta-amiloide, ADN-metiltransferasa, proteína-quinasa A, proteína ApoE4, glicoproteína p, proteína c-MYC, proteína BCL-2 y CAPL. En aún otros casos, la región o gen genómico, o su transcrito de ARN puede provenir de un patógeno procariótico o eucariótico, incluidos, sin limitarse a los mismos, Plasmodium falciparum, Plasmodium malarie, Plasmodium ovale, Schistosoma spp. y Mycobacterium tuberculosis.
Además del oligonucleótido modificado según la invención, la composición de material para la inhibición de la expresión génica, con menos efectos secundarios, puede opcionalmente contener cualquiera de los excipientes o diluyentes bien conocidos, aceptables desde el punto de vista farmacéutico. Esta composición de material puede contener además uno o más oligonucleótidos adicionales según la invención, pudiendo ser dichos oligonucleótidos adicionales un oligonucleótido híbrido invertido o un oligonucleótido quimérico invertido. Alternativamente, esta composición puede contener una o más oligonucleótidos antisentido tradicionales, tales como un oligonucleótido con enlaces fosforotioato, un oligonucleótido híbrido o un oligonucleótido quimérico, o puede contener cualquier otro agente farmacológicamente activo.
Según la invención, la composición de material comprende oligonucleótidos híbridos invertidos que tienen una región de ARN 2'-O-substituido de 4-13 nucleósidos entre dos regiones de oligodesoxirribonucleótidos con enlaces fosforotioato de 5-46 desoxirribonucleótidos. La región de ARN 2'-O-substituido está entre dos regiones de oligodesoxirribonucleótidos con enlaces fosforotioato, una estructura que está "invertida" en comparación con los oligonucleótidos híbridos tradicionales. Por tanto, los oligonucleótidos según la invención se denominan oligonucleótidos híbridos invertidos. La región de ARN 2'-O-substituido tiene preferiblemente de 4 a 13 nucleósidos 2'-O-sustituidos unidos entre sí por enlaces internucleosídicos 5' a 3'. Preferiblemente, el tamaño total del oligonucleótido híbrido invertido será de 15 a 35 ó 50 nucleótidos. Lo más preferible es que los ribonucleósidos 2'-O-sustituidos estén unidos entre sí mediante un enlace 5' a 3' de fosforotioato, fosfotriéster o fosfodiéster. A los efectos de la invención, el término "2'-O-sustituido" significa la sustitución de la posición 2' del grupo pentosa con un grupo -O-alquilo inferior que contiene 1-6 átomos de carbono saturados o insaturados, o con un grupo -O-arilo o alilo que tiene 2-6 átomos de carbono, en el que dicho grupo alquilo, arilo o alilo puede estar no sustituido o puede estar sustituido, por ejemplo, con grupos halo, hidroxi, trifluorometilo, ciano, nitro, acilo, aciloxi, alcoxi, carboxilo, carbalcoxilo o amino; pero no con un grupo 2'-H. La región o regiones flanqueadas por fosforotioato tienen de 5 a 46 nucleósidos unidos entre sí por enlaces fosforotioato 5' a 3', y preferiblemente de 5 a 26 de tales nucleósidos unidos con enlaces fosforotioato. Lo más preferible es que las regiones de fosforotioato tengan de 5 a 15 nucleósidos unidos con enlaces fosforotioato. Los enlaces fosforotioato pueden ser enantiómeros R_{p} y S_{p} mezclados, o pueden ser estereorregulares o sustancialmente estereorregulares en forma R_{p} o S_{p} (véase Iyer et al., Tetrahedron Asymmetry 6: 1051-1054 (1995)).
Las regiones de ribonucleótidos 2'-O-sustituidos pueden incluir un enlace internucleosídico no iónico o estar formadas en su totalidad por enlaces internucleosídicos no iónicos. Además, los oligonucleótidos según la invención pueden contener combinaciones de una o más regiones de ribonucleótidos 2'-O-sustituidos y una o más regiones no iónicas. (Véase Nucleosides & Nucleotides 14: 1031-1035 (1995) para las técnicas de síntesis pertinentes.)
En un segundo aspecto, la invención proporciona un método para la preparación de un medicamento para modular la expresión génica en un mamífero, con menos efectos secundarios. En el método según este aspecto de la invención, se proporciona una composición de material según la invención para su administración al mamífero, en la que el oligonucleótido es complementario a un gen que se expresa en el mamífero. Preferiblemente, dicha administración puede ser parenteral, oral, intranasal o intrarrectal. Tras la administración de la composición de material, se realizan una o más mediciones de los efectos secundarios biológicos seleccionados a partir del grupo formado por activación del complemento, mitogénesis e inhibición de la formación de coágulos por la trombina.
En un tercer aspecto, la invención proporciona un método para la preparación de un medicamento para el tratamiento terapéutico, con menos efectos secundarios, de una enfermedad causada por la expresión génica aberrante, comprendiendo el método el suministro de una composición de material, según la invención, para su administración a un individuo que tenga la enfermedad, en el que el oligonucleótido es complementario a un gen que se expresa de modo aberrante, en el que dicha expresión aberrante causa la enfermedad. En este contexto, la expresión génica aberrante significa expresión en un organismo hospedador de un gen necesario para la propagación de un virus o de un patógeno procariótico o eucariótico, o expresión inapropiada de un gen celular del hospedador. La expresión génica inapropiada en la célula hospedadora incluye la expresión de un alelo mutante de un gen celular, o la infraexpresión o sobreexpresión de una alelo normal de un gen celular, de modo que la enfermedad es causada por dicha expresión génica inapropiada en la célula hospedadora. Preferiblemente, dicha administración debería ser parenteral, oral, sublingual, transdérmica, tópica, intranasal o intrarrectal. La administración de las composiciones terapéuticas puede realizarse utilizando procedimientos conocidos con dosificaciones y durante períodos de tiempo eficaces para reducir los síntomas o marcadores indirectos de la enfermedad. Cuando se administra por vía sistémica, la composición terapéutica se administra preferiblemente en una dosificación suficiente para alcanzar un nivel sanguíneo del oligonucleótido desde aproximadamente 0,01 micromolar hasta aproximadamente 10 micromolar. Para la administración localizada, pueden ser eficaces concentraciones mucho menores que éstas, y pueden tolerarse concentraciones mucho mayores. Preferiblemente, una dosificación total del oligonucleótido se situará desde aproximadamente 0,1 mg de oligonucleótido por paciente y día hasta aproximadamente 200 mg de oligonucleótido por kg de peso corporal y día. Puede ser deseable administrar de modo simultáneo o secuencial una cantidad terapéuticamente eficaz de una o más de las composiciones terapéuticas de la invención a un individuo, como un episodio único de tratamiento. Tras la administración de la composición de material, se realizan una o más mediciones de efectos biológicos seleccionados a partir del grupo formado por activación del complemento, mitogénesis e inhibición de la formación de coágulos por la trombina.
Los siguientes ejemplos sirven para ilustrar de modo adicional ciertas realizaciones preferidas de la invención y no pretenden limitar el alcance de la invención.
Ejemplo 1 Síntesis, desprotección y purificación de los oligonucleótidos
Los oligonucleótidos con enlaces fosforotioato se sintetizaron utilizando un sintetizador automático de ADN (Modelo 8700, Biosearch, Bedford, MA.) utilizando técnicas de beta-cianoetilfosforamidito en una escala de 10 micromoles. Para generar los enlaces fosforotioato, el enlace fosfito intermediario obtenido después de cada acoplamiento se oxidó utilizando 3H-1,2-benzoditiol-3H-ona-1,1-dióxido (Véase Beaucage, en Protocols for Oligonucleotides and Analogs: Synthesis and Properties, Agrawal (editor), Humana Press, Totowa, N.J., págs. 33-62 (1993).) Se utilizó una síntesis similar para generar los enlaces fosfodiéster, con la salvedad de que se realizó una oxidación estándar utilizando un reactivo de yodo estándar. Los oligonucleótidos híbridos invertidos se sintetizaron de modo similar, con la salvedad de que el segmento que contenía los 2'-O-metilrribonucleótidos se preparó utilizando 2'-O-metilrribonucleósidos con enlaces fosforamidito, seguido por la oxidación, hasta formar un enlace fosforotioato o fosfodiéster, como se ha descrito anteriormente. La desprotección y la purificación de oligonucleótidos se llevó a cabo según un procedimiento estándar, (Véase Padmapriya et al., Antisense Res. & Dev. 4: 185-199 (1994)),
Ejemplo 2 Reducción de la activación del complemento in vitro por oligonucleótidos híbridos invertidos
Para determinar el efecto relativo de la estructura híbrida invertida en el agotamiento del complemento mediado por oligonucleótidos, se realizaron los siguientes experimentos. Se extrajo sangre venosa de voluntarios humanos adultos sanos. Se preparó el suero para el ensayo de la actividad hemolítica del complemento recogiendo la sangre en recipientes al vacío (Becton Dickinson #6430 Franklin Lakes, N.J.) sin aditivos comerciales. Se dejó coagular la sangre a temperatura ambiente durante 30 minutos, se enfrió en hielo durante 15 minutos, después se centrifugó a 4ºC para separar el suero. El suero recogido se mantuvo en hielo, si el ensayo se realizaba el mismo día, o, alternativamente, se conservó a -70ºC. A continuación se incubaron el tampón, el oligonucleótido con enlaces fosforotioato o el oligonucleótido híbrido invertido, con el suero. Se realizó un ensayo CH50 estándar (véase Kabat y Mayer (eds): Experimental Immunochemistry, 2a Edición, Springfield, IL., C. C. Thomas (1961), p. 125) para la lisis, mediada por el complemento, de eritrocitos de oveja (Colorado Serum Co.) sensibilizados con anticuerpo contra eritrocitos de oveja (hemolisina, Diamedix, Miami, FL.), utilizando determinaciones duplicadas de por lo menos cinco diluciones de cada suero de prueba, y midiendo después la liberación de hemoglobina en los sobrenadantes exentos de células por espectrofotometría a 541 nm.
Ejemplo 3 Reducción de la mitogenicidad in vitro de oligonucleótidos híbridos invertidos
Para determinar el efecto relativo de la estructura híbrida invertida en la mitogenicidad mediada por oligonucleótidos, se realizaron los siguientes experimentos. Se extrajo el bazo de un ratón CD1 macho (4-5 semanas, 20-22 g; Charles River, Wilmington, MA.). Se prepararon suspensiones de células únicas picando el tejido cuidadosamente con los bordes esmerilados de un portaobjetos. Las células se cultivaron después en medio RPMI completo [medio RPMI enriquecido con suero bovino fetal (FBS) al 10%, 2-mercaptoetanol (2-ME) 50 micromolar, 100 U/ml de penicilina, 100 microgramos/ml de estreptomicina, L-glutamina 2 mM]. Para reducir al mínimo la degradación de oligonucleótidos, el FBS se calentó primero durante 30 minutos a 65ºC (oligonucleótidos con enlaces fosfodiéster) o a 56ºC (todos los oligonucleótidos restantes). Las células se sembraron en placas de 96 pocillos a una densidad de 100.000 células por pocillo (volumen de 100 microlitros/pocillo). Se añadieron los oligonucleótidos en 10 microlitros de tampón TE (Tris-HCl 10 mM, pH 7,5, EDTA 1 mM) a cada pocillo. Tras 44 horas de cultivo a 37ºC, se añadió un microcurio de timidina tritiada (Amersham, Arlington Heights, IL.) en 20 microlitros de medio RPMI durante un período de marcado de 4 horas. Después se recogieron las células en un colector automático de células (Skatron, Sterling, VA.) y se evaluaron los filtros con un contador de centelleo. En experimentos testigo para valorar la mitogenicidad, se trataron las células de modo idéntico, con la salvedad de que se añadió a las células medio (testigo negativo) o concanavalina A (testigo positivo), en vez de los oligonucleótidos. Los resultados de estos estudios se muestran en la Figura 1. Todos los oligonucleótidos híbridos invertidos demostraron ser menos inmunogénicos que los oligonucleótidos con enlaces fosforotioato. Los oligonucleótidos híbridos invertidos que tenían enlaces fosfodiéster en la región 2'-O-metilo resultaron ser algo menos inmunogénicos que los que contenían enlaces fosforotioato en dicha región. No se observaron diferencias significativas en la mitogenicidad cuando la región de 2'-O-metilrribonucleótidos se redujo de 13 a 11 o a 9 nucleótidos. Estos resultados indican que la incorporación de la estructura híbrida invertida en un oligonucleótido puede reducir su mitogenicidad.
Ejemplo 4 Reducción de la inhibición de la coagulación in vitro por oligonucleótidos híbridos invertidos
Para determinar el efecto relativo de la estructura híbrida invertida en la mitogenicidad provocada por oligonucleótidos, se realizaron los siguientes experimentos. Se extrajo sangre venosa de voluntarios humanos adultos sanos. Se preparó el plasma para el ensayo del tiempo de coagulación recogiendo la sangre en recipientes al vacío siliconizados que contenían citrato de sodio (Becton Dickinson #367705), seguido por dos centrifugaciones a 4ºC para preparar el plasma bajo en plaquetas. Se mantuvieron partes alícuotas de plasma en hielo, se les añadieron varios compuestos de prueba y, o bien se analizaron inmediatamente o se congelaron rápidamente en hielo seco para su conservación posterior a -20ºC antes del ensayo de coagulación. Se midió el tiempo de tromboplastina parcial activada (TTPa) por duplicado en un aparato Electra 1000C (Medical Laboratory Automation, Mount Vernon, N.Y.) siguiendo las instrucciones recomendadas por el fabricante, utilizando Actin FSL (Baxter Dade, Miami, FL.) y calcio para iniciar la formación de coágulos, que se midió por fotometría. La prolongación del TTPa se consideró una indicación de la inhibición de la coagulación producida, como efecto secundario, por el oligonucleótido. Los resultados se muestran en la Figura 5, para los oligonucleótidos híbridos invertidos (y en la Figura comparativa 8 para los oligonucleótidos quiméricos invertidos). Los oligonucleótidos tradicionales con enlaces fosforotioato producen la mayor prolongación del TTPa, de entre todos los oligonucleótidos probados. Los oligonucleótidos híbridos tradicionales produjeron una prolongación algo reducida del TTPa. En comparación con los oligonucleótidos tradicionales con enlaces fosforotioato o con los oligonucleótidos tradicionales híbridos, todos los oligonucleótidos híbridos invertidos probados produjeron una prolongación significativamente reducida del TTPa. Los oligonucleótidos híbridos invertidos que tenían enlaces fosfodiéster en la región de ribonucleótidos 2'-O-sustituidos presentaron la máxima reducción en este efecto secundario, presentando uno de dichos oligonucleótidos que tenía una región de 2'-O-metil-ARN con enlaces fosfodiéster de 13 nucleótidos una muy escasa prolongación del TTPa, incluso a concentraciones de oligonucleótidos de 100 microgramos/ml. Estos resultados indican que los oligonucleótidos híbridos invertidos pueden presentar ventajas en la reducción del efecto secundario de inhibición de la coagulación cuando se administran para modular la expresión génica in vivo.
Ejemplo 5 Reducción en la activación del complemento in vivo por oligonucleótidos híbridos invertidos
Se aclimatan monos Rhesus (4-9 kg de peso corporal) a las condiciones del laboratorio durante por lo menos 7 días antes del estudio. En el día del estudio, se administra sedación leve a cada animal con ketamina-HCl (10 mg/kg) y diazepam (0,5 mg/kg). Se provoca la anestesia hasta el nivel quirúrgico y se mantiene durante el procedimiento por venoclisis continua de ketamina. El oligonucleótido con enlaces fosforotioato o el oligonucleótido híbrido invertido se disuelve en solución salina normal y se administra por infusión intravenosa con un catéter en la vena cefálica, utilizando una bomba de infusión programable a una velocidad de suministro de 0,42 ml/minuto. Para cada oligonucleótido, se administran dosis de oligonucleótidos de 0, 0,5, 1, 2, 5 y 10 mg/kg a dos animales durante un período de infusión de 10 minutos. Se toman muestras de sangre arterial 10 minutos antes de la administración de oligonucleótidos y 2, 5, 10, 20, 40 y 60 minutos tras el comienzo de la infusión, así como 24 horas después. Se utiliza el suero para determinar el complemento CH50, siguiendo el procedimiento convencional de lisis, dependiente del complemento, de eritrocitos de oveja (véase Kabat y Mayer, 1961, citado anteriormente). A la máxima dosis, el oligonucleótido con enlaces fosforotioato provoca un descenso en el complemento CH50 del suero comenzando en el plazo de 5 minutos tras el comienzo de la infusión. Se espera que los oligonucleótidos híbridos invertidos muestren, en estas condiciones, un descenso mucho más reducido, o indetectable, en el complemento CH50 del suero.
Ejemplo 6 Reducción de la mitogenicidad in vivo de oligonucleótidos híbridos invertidos
Se inyecta a ratones CD1, por vía intraperitoneal, una dosis de 50 mg/kg de peso corporal de oligonucleótidos con enlaces fosforotioato u oligonucleótidos híbridos invertidos. Cuarenta y ocho horas después, se sacrifican los animales y los bazos se extraen y se pesan. Se espera que los animales tratados con oligonucleótidos híbridos invertidos no muestren un aumento significativo en el peso del bazo, mientras que se espera que aquellos tratados con oligonucleótidos con enlaces fosforotioato presenten aumentos leves en el peso del bazo.
Ejemplo 7 Reducción de la inhibición de la coagulación in vivo por oligonucleótidos híbridos invertidos
Se tratan monos Rhesus como en el ejemplo 5. A partir de las muestras de sangre completa extraídas se prepara el plasma para el ensayo de coagulación, que se realiza como se ha descrito en el ejemplo 4. Se espera que la prolongación del TTPa esté sustancialmente reducida en el caso de los oligonucleótidos híbridos invertidos, en comparación con los oligonucleótidos tradicionales con enlaces fosforotioato.
Ejemplo 8 Efecto de la estructura híbrida invertida sobre la actividad de la RNasa H
Con el objeto de determinar la capacidad de los oligonucleótidos híbridos invertidos para activar RNasa H cuando se unen a una molécula de ARN complementario, se realizaron los siguientes experimentos. Cada oligonucleótido con enlaces fosforotioato u oligonucleótido híbrido invertido se incubó junto con una cantidad molar equivalente de oligorribonucleótido complementario (concentración de 0,266 micromolar de cada uno), en una cubeta que contenía un volumen final de 1 ml de tampón de RNasa H (Tris-HCl 20 mM, pH 7,5, MgCl_{2} 10 mM, KCl 0,1 M, glicerol al 2%, DTT 0,1 mM). Las muestras se calentaron hasta 95ºC, después se enfriaron gradualmente hasta la temperatura ambiente para permitir la hibridación y la formación de estructuras de cadena doble. Las estructuras de cadena doble hibridadas se incubaron durante 10 minutos a 37ºC, después se añadieron 5 unidades de RNasa H y se inició la recogida de datos durante un período de tres horas. Los datos se registraron utilizando un espectrofotómetro GBC 920 (GBC Scientific Equipment, Victoria, Australia) a 259 nm. La degradación por la RNasa H se determinó por desplazamiento hipercrómico.
Los resultados se muestran en la Tabla I siguiente.
TABLA I Degradación de oligonucleótidos por la RNasa H
Oligo nº (Características) Semivida Oligo nº (Características) Semivida
GEM91 (todo PO) 8,8 s Hyb115 (5' MP) 11,5 s
GEM91 (todo PS) 22,4 s Hyb116 (quimérico)* 9,7 s
GEM91H (híbrido) 32,7 s Hyb117 (quimérico)* 8,1 s
Hyb108 (híb. inv.) 15,4 s Hyb118 (quim. inv.) 11,5 s
Hyb109 (híb. inv.) 7,9 s Hyb119 (quim. inv.) 14,4 s
Hyb110 (híb. inv.) 10,4 s Hyb120 (quim. inv.) 9,3 s
Hyb111 (híb. inv.) 12,9 s Hyb121 (3' MP) 21,2 s
TABLA I (continuación)
Oligo nº (Características) Semivida Oligo nº (Características) Semivida
Hyb112 (híb. inv.) 12,5 s Hyb122 (quimérico)* 23,0 s
Hyb113 (híb. inv.) 10,9 s Hyb123 (quimérico)* 41,8 s
Hyb114 (híb. inv.) 20,3 s Hyb124 (quimérico)* no detect.
*= comparativo
Como se esperaba, los oligonucleótidos con enlaces fosfodiéster se comportaron como buenos cosustratos para la degradación de ARN, mediada por la RNasa H, con una semivida de degradación de 8,8 segundos. Los oligonucleótidos con enlaces fosforotioato produjeron un aumento en la semivida de 22,4 segundos. La introducción de un segmento de 2'-O-metilrribonucleótido en cualquiera de los extremos del oligonucleótido empeoró aún más la actividad de la RNasa H (semivida = 32,7 segundos). En contraposición, la introducción de un segmento de 2'-O-metilo en medio del oligonucleótido (estructura híbrida invertida) siempre dio lugar a una mejora en la degradación mediada por la RNasa H. Cuando una región de 13 2'-O-metilrribonucleósidos con enlaces fosfodiéster estaba flanqueada en ambos lados con ADN con enlaces fosforotioato, se observó la máxima actividad de la RNasa H, con una semivida de 7,9 segundos. La introducción de grandes bloques de nucleósidos unidos por enlaces metilfosfonato en el extremo 3' del oligonucleótido o bien no produjo ningún efecto o provocó un deterioro adicional de la actividad de la RNasa H incluso cuando se encontraban en una configuración quimérica. Sin embargo, la introducción de nucleósidos unidos por enlaces metilfosfonato en el extremo 5' aumentó la actividad de la RNasa H, particularmente en la configuración quimérica con un solo conector de metilfosfonato en el extremo 3' (la mejor semivida = 8,1 segundos). Todos los oligonucleótidos quiméricos invertidos con regiones principales de metilfosfonato (ejemplos comparativos) flanqueadas por regiones de fosforotioato dieron lugar a buenos resultados de la RNasa, con un intervalo de semivida de 9,3 a 14,4 segundos. Estos resultados indican que la introducción de la estructura híbrida invertida (o quimérica invertida) en oligonucleótidos que contienen fosforotioato puede restablecer parte o toda la capacidad del oligonucleótido para actuar como cosustrato de la RNasa H, una característica potencialmente importante para un agente antisentido eficaz.
Ejemplo 9 Efecto de la estructura híbrida invertida en la temperatura de fusión
Para determinar el efecto de la estructura híbrida invertida en la estabilidad de la estructura de cadena doble formada entre un oligonucleótido antisentido y una molécula diana, se realizaron los siguientes experimentos. Se registraron los datos de desnaturalización térmica (Tm) utilizando un espectrofotómetro GBC 920, que tenía seis cubetas de 10 mm montadas en un carrusel doble. En los experimentos de Tm se ajustó y controló la temperatura por medio de un controlador de temperatura de efecto Peltier conectado a un ordenador, utilizando el software suministrado por GBC, siguiendo las instrucciones del fabricante. Los datos de Tm se analizaron por el método de la primera derivada y por el método del punto medio, con ayuda del software. Los experimentos de Tm se realizaron en un tampón que contenía PIPES 10 mM, pH 7,0, EDTA 1 mM, NaCl 1 M. Se conectó un baño refrigerado VWR 1166 (VWR, Boston, MA.) al controlador de temperatura de efecto Peltier para absorber el calor. La concentración de cadenas de oligonucleótido se determinó utilizando los valores de absorbancia a 260 nm, teniendo en cuenta los coeficientes de extinción.
Los resultados se muestran en la Tabla II siguiente.
TABLA II Estabilidad de la estructura de cadena doble de los oligonucleótidos
Oligo nº (Características) Tm (ºC)* Oligo nº (Características) Tm (ºC)*
GEM91 (todo PO) 72,0 Hyb115 (5' MP) 61,8
GEM91 (todo PS) 63,6 Hyb116 (quimérico)* 61,0
GEM91H (híbrido) 67,0 Hyb117 (quimérico)* 60,5
Hyb108 (híb. inv.) 76,4 Hyb118 (quim. inv.) 57,9
Hyb109 (híb. inv.) 80,0 Hyb119 (quim. inv.) 57,7
Hyb110 (híb. inv.) 74,2 Hyb120 (quim. inv.) 56,8
Hyb111 (híb. inv.) 76,9 Hyb121 (3' MP) 60,7
Hyb112 (híb. inv.) 72,1 Hyb122 (quimérico)* 60,5
Hyb113 (híb. inv.) 74,3 Hyb123 (quimérico)* 59,0
Hyb114 (híb. inv.) 71,3 Hyb124 (quimérico)* no detect.
*= comparativo
*= con ARN complementario
Estos resultados demuestran que la conversión de un oligonucleótido con enlaces fosfodiéster a un oligonucleótido con enlaces fosforotioato se traduce en una reducción de la estabilidad de la estructura de cadena doble, y que la introducción de enlaces metilfosfonato reduce aún más la estabilidad de la estructura de cadena doble. La estabilidad de la estructura de cadena doble puede restablecerse añadiendo 2'-O-metilrribonucleótidos, y puede superar a la del oligonucleótido con enlaces fosfodiéster cuando se utiliza una estructura híbrida invertida. A la inversa, la utilización de una estructura quimérica invertida se traduce en las mínimas temperaturas de fusión observadas para cualquiera de los oligonucleótidos con metilfosfonato que se hibridan, aunque se mantenía la estabilidad de la estructura de cadena doble incluso muy por encima de las temperaturas fisiológicas. En conjunto, estos resultados sugieren que la estructura híbrida invertida o la estructura quimérica invertida pueden utilizarse para el diseño a medida de oligonucleótidos para obtener estabilidades particulares deseadas de la estructura de cadena doble en aplicaciones experimentales o terapéuticas particulares.

Claims (8)

1. Oligonucleótido híbrido invertido que comprende una región de ribonucleótidos 2'-O-substituidos, en el que dicha región de ribonucleótidos 2'-O-substituidos tiene de 4 a 13 nucleósidos situados entre dos regiones de oligodesoxirribonucleótidos con enlaces fosforotioato, en el que dichas regiones de fosforotioato tienen de 5 a 46 desoxirribonucleótidos, donde "2'-O-substituido" significa la sustitución de la posición 2' del grupo pentosa con un grupo -O-alquilo inferior que contiene de 1 a 6 átomos de carbono saturados o insaturados, o con un grupo -O-arilo o alilo que tiene de 2 a 6 átomos de carbono, en el que dicho grupo alquilo, arilo o alilo puede estar no sustituido o puede estar sustituido.
2. Oligonucleótido híbrido invertido según la reivindicación 1, en el que el oligonucleótido tiene de 15 a 50 nucleótidos.
3. Oligonucleótido híbrido invertido según la reivindicación 1, en el que los ribonucleótidos 2'-O-substituidos están unidos entre sí por medio de un enlace 5' a 3' de fosforotioato, fosfotriéster o fosfodiéster.
4. Oligonucleótido híbrido invertido según la reivindicación 1, en el que la posición 2' del grupo pentosa está sustituida con un grupo -O-alquilo inferior.
5. Oligonucleótido híbrido invertido según la reivindicación 2, en el que la región de ribonucleótidos 2'-O-substituidos tiene de 4 a 10 nucleótidos.
6. Utilización de un oligonucleótido híbrido invertido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para la preparación de una composición farmacéutica para la inhibición de la expresión génica.
7. Composición farmacéutica que comprende un oligonucleótido híbrido invertido según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que el oligonucleótido es complementario a un gen que se expresa para modular la expresión génica en un mamífero.
8. Composición farmacéutica según la reivindicación 7, en la que el oligonucleótido es complementario de un gen que se expresa de modo aberrante.
ES96930536T 1995-08-17 1996-08-16 Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos. Expired - Lifetime ES2201198T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/516,454 US5652356A (en) 1995-08-17 1995-08-17 Inverted chimeric and hybrid oligonucleotides
US516454 1995-08-17

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2201198T3 true ES2201198T3 (es) 2004-03-16

Family

ID=24055671

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES96930536T Expired - Lifetime ES2201198T3 (es) 1995-08-17 1996-08-16 Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos.
ES03010207T Expired - Lifetime ES2315442T3 (es) 1995-08-17 1996-08-16 Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos.

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES03010207T Expired - Lifetime ES2315442T3 (es) 1995-08-17 1996-08-16 Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos.

Country Status (11)

Country Link
US (3) US5652356A (es)
EP (2) EP1019428B1 (es)
JP (1) JP4177455B2 (es)
AT (2) ATE411333T1 (es)
AU (1) AU6953896A (es)
CA (1) CA2229811C (es)
DE (2) DE69637718D1 (es)
DK (1) DK1019428T3 (es)
ES (2) ES2201198T3 (es)
PT (1) PT1019428E (es)
WO (1) WO1997006662A2 (es)

Families Citing this family (456)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6335434B1 (en) 1998-06-16 2002-01-01 Isis Pharmaceuticals, Inc., Nucleosidic and non-nucleosidic folate conjugates
US8153602B1 (en) 1991-11-19 2012-04-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. Composition and methods for the pulmonary delivery of nucleic acids
US6346614B1 (en) * 1992-07-23 2002-02-12 Hybridon, Inc. Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
US5523389A (en) * 1992-09-29 1996-06-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of human immunodeficiency virus
ATE247128T1 (de) 1993-09-03 2003-08-15 Isis Pharmaceuticals Inc Aminoderivatisierte nukleoside und oligonukleoside
US6420549B1 (en) 1995-06-06 2002-07-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotide analogs having modified dimers
US9096636B2 (en) * 1996-06-06 2015-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US5898031A (en) 1996-06-06 1999-04-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligoribonucleotides for cleaving RNA
US20080119427A1 (en) * 1996-06-06 2008-05-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double Strand Compositions Comprising Differentially Modified Strands for Use in Gene Modulation
US7812149B2 (en) 1996-06-06 2010-10-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. 2′-Fluoro substituted oligomeric compounds and compositions for use in gene modulations
US20030044941A1 (en) 1996-06-06 2003-03-06 Crooke Stanley T. Human RNase III and compositions and uses thereof
US5849902A (en) * 1996-09-26 1998-12-15 Oligos Etc. Inc. Three component chimeric antisense oligonucleotides
US5989912A (en) * 1996-11-21 1999-11-23 Oligos Etc. Inc. Three component chimeric antisense oligonucleotides
US20020165174A1 (en) * 1997-01-31 2002-11-07 Gill Parkash S. Methods and compositions for antisense VEGF oligonucleotides
US6291667B1 (en) 1997-01-31 2001-09-18 Parkash S. Gill Method and composition for treatment of kaposi's sarcoma
US6716625B1 (en) 1997-04-16 2004-04-06 Claude Selitrennikoff Histidine kinases of Aspergillus and other fungal species, related compositions, and methods of use
US6489304B2 (en) * 1997-05-01 2002-12-03 Hybridon, Inc. Hyperstructure-forming carriers
CA2294988C (en) 1997-07-01 2015-11-24 Isis Pharmaceuticals Inc. Compositions and methods for the delivery of oligonucleotides via the alimentary canal
ES2255732T3 (es) * 1997-08-19 2006-07-01 Idera Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotidos especificos de vih y procedimientos para su utilizacion.
US6013786A (en) * 1997-08-22 2000-01-11 Hybridon, Inc. MDM2-specific antisense oligonucleotides
US6306831B1 (en) 1997-09-12 2001-10-23 Qik Technologies, Inc. Transplacental delivery of oligonucleotides
US6127535A (en) 1997-11-05 2000-10-03 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Nucleoside triphosphates and their incorporation into oligonucleotides
US6617438B1 (en) 1997-11-05 2003-09-09 Sirna Therapeutics, Inc. Oligoribonucleotides with enzymatic activity
WO2000018885A1 (en) * 1998-09-29 2000-04-06 Gamida Cell Ltd. Methods of controlling proliferation and differentiation of stem and progenitor cells
AU3465599A (en) * 1998-04-01 1999-10-18 Hybridon, Inc. Mixed-backbone oligonucleotides containing pops blocks to obtain reduced phosphorothioate content
US7321828B2 (en) 1998-04-13 2008-01-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. System of components for preparing oligonucleotides
US20040186071A1 (en) 1998-04-13 2004-09-23 Bennett C. Frank Antisense modulation of CD40 expression
EP1071753A2 (en) 1998-04-20 2001-01-31 Ribozyme Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid molecules with novel chemical compositions capable of modulating gene expression
WO1999060012A1 (en) 1998-05-21 1999-11-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for non-parenteral delivery of oligonucleotides
WO1999060167A1 (en) 1998-05-21 1999-11-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for topical delivery of oligonucleotides
US6077709A (en) 1998-09-29 2000-06-20 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense modulation of Survivin expression
US6127124A (en) 1999-01-20 2000-10-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Fluorescence based nuclease assay
US20030220486A1 (en) * 1999-04-01 2003-11-27 Wen-Qiang Zhou Mixed backbone oligonucleotides containing pops blocks to obtain reduced phosphorothioate content
US7098192B2 (en) 1999-04-08 2006-08-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense oligonucleotide modulation of STAT3 expression
US6656730B1 (en) 1999-06-15 2003-12-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligonucleotides conjugated to protein-binding drugs
EP2314693A3 (en) * 1999-08-13 2012-11-28 Idera Pharmaceuticals, Inc. Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides
US6677445B1 (en) 1999-08-27 2004-01-13 Chiron Corporation Chimeric antisense oligonucleotides and cell transfecting formulations thereof
US20020082227A1 (en) * 1999-09-30 2002-06-27 Scott Henry Use of oligonucleotides for inhibition of complement activation
US7668658B2 (en) 1999-10-13 2010-02-23 Sequenom, Inc. Methods for generating databases and databases for identifying polymorphic genetic markers
US20020055479A1 (en) 2000-01-18 2002-05-09 Cowsert Lex M. Antisense modulation of PTP1B expression
US6261840B1 (en) 2000-01-18 2001-07-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of PTP1B expression
EP2093292A2 (en) 2000-03-24 2009-08-26 Methylgene, Inc. Inhibition of specific histone deacetylase isoforms
WO2001074346A2 (en) * 2000-04-03 2001-10-11 Hybridon, Inc. Sensitization of cells to cytotoxic agents using oligonucleotides directed to nucleotide excision repair or transcritpion coupled repair genes
US6680172B1 (en) 2000-05-16 2004-01-20 Regents Of The University Of Michigan Treatments and markers for cancers of the central nervous system
US7846733B2 (en) * 2000-06-26 2010-12-07 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for transcription-based nucleic acid amplification
US6958214B2 (en) 2000-07-10 2005-10-25 Sequenom, Inc. Polymorphic kinase anchor proteins and nucleic acids encoding the same
US8153121B2 (en) 2000-10-06 2012-04-10 Los Angeles Biomedical Research Institute at Harbor—UCLA Medical Center Diagnosis and therapy of antibody-mediated inflammatory autoimmune disorders
US8178304B2 (en) * 2000-10-06 2012-05-15 Smith Terry J Diagnostic methods relating to Graves' disease and other autoimmune disorders
CA2430329A1 (en) 2000-12-13 2002-06-20 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for generation of multiple copies of nucleic acid sequences and methods of detection thereof
US20030148970A1 (en) * 2001-01-12 2003-08-07 Besterman Jeffrey M. Methods for specifically inhibiting histone deacetylase-4
US20030152557A1 (en) * 2001-01-12 2003-08-14 Besterman Jeffrey M. Methods for inhibiting histone deacetylase-4
US7094536B2 (en) * 2001-03-09 2006-08-22 Nugen Technologies, Inc. Methods and compositions for amplification of RNA sequences
MXPA02012739A (es) * 2001-03-09 2004-04-20 Nugen Technologies Inc Metodos y composiciones para amplificacion de secuencias de arn.
US20030083292A1 (en) * 2001-05-11 2003-05-01 Macleod Alan Robert Inhibitors of DNA methyltransferase isoforms
PT2000545E (pt) 2001-06-20 2011-12-21 Genentech Inc Composições e métodos para o diagnóstico e tratamento do tumor pulmonar
US7803915B2 (en) 2001-06-20 2010-09-28 Genentech, Inc. Antibody compositions for the diagnosis and treatment of tumor
EP2221376B1 (en) 2001-06-21 2012-11-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of superoxide dismutase 1, soluble expression
US6964950B2 (en) 2001-07-25 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of C-reactive protein expression
US7425545B2 (en) 2001-07-25 2008-09-16 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of C-reactive protein expression
US20030096772A1 (en) 2001-07-30 2003-05-22 Crooke Rosanne M. Antisense modulation of acyl CoA cholesterol acyltransferase-2 expression
US7407943B2 (en) 2001-08-01 2008-08-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein B expression
US20040266718A1 (en) * 2001-08-06 2004-12-30 Zuomei Li Inhibition of specific histone deacetylase isoforms
US7227014B2 (en) 2001-08-07 2007-06-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of apolipoprotein (a) expression
US20030096781A1 (en) * 2001-08-31 2003-05-22 University Of Southern California IL-8 is an autocrine growth factor and a surrogate marker for Kaposi's sarcoma
DE60238143D1 (de) 2001-09-18 2010-12-09 Genentech Inc Zusammensetzungen und verfahren für die diagnose von tumoren
US6750019B2 (en) 2001-10-09 2004-06-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression
NZ585001A (en) 2001-10-09 2011-08-26 Isis Pharmaceuticals Inc Antisense modulation of insulin-like growth factor binding protein 5 expression
AU2002364945A1 (en) * 2001-10-25 2003-07-09 Neurogenetics, Inc. Genes and polymorphisms on chromosome 10 associated with alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases
US20030224380A1 (en) * 2001-10-25 2003-12-04 The General Hospital Corporation Genes and polymorphisms on chromosome 10 associated with Alzheimer's disease and other neurodegenerative diseases
US20030170678A1 (en) * 2001-10-25 2003-09-11 Neurogenetics, Inc. Genetic markers for Alzheimer's disease and methods using the same
ITMI20012367A1 (it) * 2001-11-09 2003-05-09 Visufarma S R L Oligonucleotidi antisenso che regolano l'espressione del gene antiapoptotico bcl-2
US20040091893A1 (en) * 2001-11-27 2004-05-13 Jeffrey Gordon Method for studying the effects of commensal microflora on mammalian intestine and treatments of gastrointestinal-associated disease based thereon
EP1529054A4 (en) * 2001-11-27 2005-12-28 Univ Washington THERAPEUTIC PROTEIN AND TREATMENTS
US6965025B2 (en) 2001-12-10 2005-11-15 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of connective tissue growth factor expression
AU2002367318B2 (en) 2002-01-02 2007-07-12 Genentech, Inc. Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
IL152904A0 (en) 2002-01-24 2003-06-24 Gamida Cell Ltd Utilization of retinoid and vitamin d receptor antagonists for expansion of renewable stem cell populations
WO2003062404A1 (en) 2002-01-25 2003-07-31 Gamida-Cell Ltd. Methods of expanding stem and progenitor cells and expanded cell populations obtained thereby
WO2003078567A2 (en) * 2002-03-18 2003-09-25 Gamida-Cell Ltd. Methods of inducing differentiation in ex vivo expanded stem cells
JP2005536190A (ja) 2002-04-16 2005-12-02 ジェネンテック・インコーポレーテッド 腫瘍の診断と治療のための組成物と方法
WO2003093296A2 (en) 2002-05-03 2003-11-13 Sequenom, Inc. Kinase anchor protein muteins, peptides thereof, and related methods
US7199107B2 (en) 2002-05-23 2007-04-03 Isis Pharmaceuticals, Inc. Antisense modulation of kinesin-like 1 expression
US20030220844A1 (en) * 2002-05-24 2003-11-27 Marnellos Georgios E. Method and system for purchasing genetic data
US20050221326A1 (en) * 2002-06-12 2005-10-06 Avi Orr-Urtreger Oligonucleotides antibodies and kits including same for treating prostate cancer and determining predisposition thereto
US20040072770A1 (en) * 2002-07-03 2004-04-15 Besterman Jeffrey M. Methods for specifically inhibiting histone deacetylase-7 and 8
US7229976B2 (en) 2002-09-26 2007-06-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of forkhead box O1A expression
US20060183106A1 (en) * 2002-10-18 2006-08-17 Adam Siddiqui-Jain Processes for identifying quadruplex-targeted antiviral molecules
CA2504720C (en) 2002-11-05 2013-12-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Chimeric oligomeric compounds and their use in gene modulation
US9150605B2 (en) * 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2′-modified nucleosides for use in gene modulation
AU2003291755A1 (en) 2002-11-05 2004-06-07 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomers comprising modified bases for binding cytosine and uracil or thymine and their use
US9150606B2 (en) 2002-11-05 2015-10-06 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions comprising alternating 2'-modified nucleosides for use in gene modulation
SI1569695T1 (sl) 2002-11-13 2013-08-30 Genzyme Corporation Protismiselna modulacija ekspresije apolipoproteina B
EP2336318B1 (en) 2002-11-13 2013-04-24 Genzyme Corporation Antisense modulation of apolipoprotein b expression
JP4555089B2 (ja) 2002-11-15 2010-09-29 モーフオテク・インコーポレーテツド ｉｎｖｉｔｒｏ免疫感作により創製されたハイブリドーマからの抗体の高生産量の生成方法
US7144999B2 (en) 2002-11-23 2006-12-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of hypoxia-inducible factor 1 alpha expression
EP2112229A3 (en) 2002-11-25 2009-12-02 Sequenom, Inc. Methods for identifying risk of breast cancer and treatments thereof
US7371840B2 (en) 2003-01-08 2008-05-13 The University Of Southern California Isolation and characterization of ECA1, a gene overexpressed in endometrioid carcinomas of ovary and endometrium
NZ541637A (en) 2003-02-11 2008-07-31 Antisense Therapeutics Pty Ltd Modulation of insulin like growth factor I receptor
US7803781B2 (en) 2003-02-28 2010-09-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of growth hormone receptor expression and insulin-like growth factor expression
US20040185559A1 (en) 2003-03-21 2004-09-23 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 1 expression
US20040198640A1 (en) * 2003-04-02 2004-10-07 Dharmacon, Inc. Stabilized polynucleotides for use in RNA interference
US7402386B2 (en) 2003-04-14 2008-07-22 Nugen Technologies, Inc. Global amplification using random priming by a composite primer
US7598227B2 (en) 2003-04-16 2009-10-06 Isis Pharmaceuticals Inc. Modulation of apolipoprotein C-III expression
US7399853B2 (en) 2003-04-28 2008-07-15 Isis Pharmaceuticals Modulation of glucagon receptor expression
JP4579911B2 (ja) 2003-06-03 2010-11-10 アイシス・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド スルビビン発現の調節
EP1644475A4 (en) * 2003-06-20 2009-06-03 Isis Pharmaceuticals Inc DOUBLE-STRAND COMPOSITIONS WITH A 3'-ENDO-MODIFIED STRING FOR USE IN GENE MODULATION
US7683036B2 (en) 2003-07-31 2010-03-23 Regulus Therapeutics Inc. Oligomeric compounds and compositions for use in modulation of small non-coding RNAs
US7825235B2 (en) 2003-08-18 2010-11-02 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of diacylglycerol acyltransferase 2 expression
WO2005074417A2 (en) * 2003-09-03 2005-08-18 Salk Institute For Biological Studies Multiple antigen detection assays and reagents
US20050053981A1 (en) 2003-09-09 2005-03-10 Swayze Eric E. Gapped oligomeric compounds having linked bicyclic sugar moieties at the termini
EP2256201A3 (en) 2003-09-18 2012-07-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E expression
CA2538252C (en) 2003-09-18 2014-02-25 Isis Pharmaceuticals, Inc. 4'-thionucleosides and oligomeric compounds
CA2541438C (en) 2003-10-10 2013-11-26 Meditech Research Limited The modulation of hyaluronan synthesis and degradation in the treatment of disease
US20050191653A1 (en) 2003-11-03 2005-09-01 Freier Susan M. Modulation of SGLT2 expression
DK2295073T3 (da) 2003-11-17 2014-07-28 Genentech Inc Antistof mod cd22 til behandling af tumor af hæmatopoietisk oprindelse
US20050120397A1 (en) * 2003-11-24 2005-06-02 Hermann Steller Compounds and methods for regulation of spermatid differentiation
WO2005062923A2 (en) * 2003-12-24 2005-07-14 Massachusetts Institute Of Technology Gene targets for enhanced carotenoid production
US7741070B2 (en) * 2003-12-24 2010-06-22 Massachusetts Institute Of Technology Gene targets for enhanced carotenoid production
US7608699B2 (en) * 2003-12-29 2009-10-27 Rockefeller University Synthetic nuclear localization signal derived from lentiviral integrase and methods of use thereof
EP1711606A2 (en) 2004-01-20 2006-10-18 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of glucocorticoid receptor expression
US7468431B2 (en) 2004-01-22 2008-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eIF4E-BP2 expression
WO2005078094A2 (en) * 2004-02-06 2005-08-25 Dharmacon, Inc. Stabilized rnas as transfection controls and silencing reagents
US8569474B2 (en) 2004-03-09 2013-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Double stranded constructs comprising one or more short strands hybridized to a longer strand
US8790919B2 (en) * 2004-03-15 2014-07-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for optimizing cleavage of RNA by RNase H
KR101147147B1 (ko) * 2004-04-01 2012-05-25 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 Ｒｎａ 간섭의 오프 타겟 효과 감소를 위한 변형된폴리뉴클레오타이드
US20050244869A1 (en) 2004-04-05 2005-11-03 Brown-Driver Vickie L Modulation of transthyretin expression
JP2007531794A (ja) 2004-04-05 2007-11-08 アルニラム ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド オリゴヌクレオチドの合成および精製に使用する方法および反応試薬
US8394947B2 (en) 2004-06-03 2013-03-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Positionally modified siRNA constructs
US8680062B2 (en) 2004-07-06 2014-03-25 Deliversir Ltd. System for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
ES2401114T3 (es) 2004-08-10 2013-04-17 Genzyme Corporation Modulación antisentido de la expresión de apolipoproteína B
US7884086B2 (en) 2004-09-08 2011-02-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Conjugates for use in hepatocyte free uptake assays
WO2006030442A2 (en) 2004-09-16 2006-03-23 Gamida-Cell Ltd. Methods of ex vivo progenitor and stem cell expansion by co-culture with mesenchymal cells
US7919472B2 (en) 2004-09-17 2011-04-05 Isis Pharmaceuticals, Inc. Enhanced antisense oligonucleotides
AU2005327506B2 (en) 2004-10-20 2010-07-08 Antisense Therapeutics Ltd Antisense modulation of integrin alpha4 expression
US7923207B2 (en) 2004-11-22 2011-04-12 Dharmacon, Inc. Apparatus and system having dry gene silencing pools
US20060166234A1 (en) * 2004-11-22 2006-07-27 Barbara Robertson Apparatus and system having dry control gene silencing compositions
US7935811B2 (en) 2004-11-22 2011-05-03 Dharmacon, Inc. Apparatus and system having dry gene silencing compositions
US20070248535A1 (en) * 2005-02-07 2007-10-25 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods to treat or prevent hormone-resistant prostate cancer using siRNA specific for protocadherin-PC, or other inhibitors of protocadherin-PC expression or activity
ZA200707490B (en) 2005-03-10 2008-12-31 Genentech Inc Methods and compositions for modulatiing vascular integrity
CA2606270A1 (en) 2005-04-19 2006-10-26 Massachusetts Institute Of Technology Amphiphilic polymers and methods of use thereof
WO2007008300A2 (en) 2005-05-31 2007-01-18 ECOLE POLYTECHNIQUE FéDéRALE DE LAUSANNE Triblock copolymers for cytoplasmic delivery of gene-based drugs
WO2006138145A1 (en) 2005-06-14 2006-12-28 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
CA2621267A1 (en) * 2005-09-07 2007-03-15 Nugen Technologies, Inc. Improved nucleic acid amplification procedure
CN101321868A (zh) * 2005-09-16 2008-12-10 科利制药公司 通过核苷酸修饰调节短干扰核糖核酸(siRNA)的免疫刺激特性
US20090291437A1 (en) * 2005-11-02 2009-11-26 O'brien Sean Methods for targeting quadruplex sequences
CA2630602A1 (en) 2005-11-21 2007-05-31 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of eif4e-bp2 expression
US8846393B2 (en) 2005-11-29 2014-09-30 Gamida-Cell Ltd. Methods of improving stem cell homing and engraftment
JP5713377B2 (ja) 2005-12-28 2015-05-07 ザ スクリプス リサーチ インスティテュート 薬物標的としての天然アンチセンスおよび非コードｒｎａ転写物
EP1991677A2 (en) 2006-01-26 2008-11-19 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to huntingtin
US7569686B1 (en) 2006-01-27 2009-08-04 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for synthesis of bicyclic nucleic acid analogs
AU2007211082B2 (en) 2006-01-27 2012-09-27 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and compositions for the use in modulation of microRNAs
WO2007090071A2 (en) 2006-01-27 2007-08-09 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-modified bicyclic nucleic acid analogs
JP2009536222A (ja) 2006-05-05 2009-10-08 アイシス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド Ｐｃｓｋ９の発現を調節するための化合物および方法
AU2007249349B2 (en) * 2006-05-11 2012-03-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5'-Modified bicyclic nucleic acid analogs
US7666854B2 (en) * 2006-05-11 2010-02-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bis-modified bicyclic nucleic acid analogs
WO2007137300A2 (en) 2006-05-23 2007-11-29 Bellicum Pharmaceuticals, Inc. Modified dendritic cells having enhanced survival and immunogenicity and related compositions and methods
US8198253B2 (en) 2006-07-19 2012-06-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and their uses directed to HBXIP
AU2007299705B2 (en) 2006-09-22 2012-09-06 Dharmacon, Inc. Duplex oligonucleotide complexes and methods for gene silencing by RNA interference
EP1935428A1 (en) * 2006-12-22 2008-06-25 Antisense Pharma GmbH Oligonucleotide-polymer conjugates
EP2121987B1 (en) 2007-02-09 2012-06-13 Northwestern University Particles for detecting intracellular targets
US9556210B2 (en) 2007-04-23 2017-01-31 Sabag-Rfa Ltd. System for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
US9156865B2 (en) 2007-04-23 2015-10-13 Deliversir Ltd System for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
EP2144633B1 (en) * 2007-04-23 2014-07-16 Deliversir Ltd A system for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
EP2160464B1 (en) 2007-05-30 2014-05-21 Northwestern University Nucleic acid functionalized nanoparticles for therapeutic applications
CA2688321A1 (en) 2007-05-30 2008-12-11 Isis Pharmaceuticals, Inc. N-substituted-aminomethylene bridged bicyclic nucleic acid analogs
DK2173760T4 (en) 2007-06-08 2016-02-08 Isis Pharmaceuticals Inc Carbocyclic bicyclic nukleinsyreanaloge
US8097422B2 (en) 2007-06-20 2012-01-17 Salk Institute For Biological Studies Kir channel modulators
AU2008272918B2 (en) * 2007-07-05 2012-09-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. 6-disubstituted bicyclic nucleic acid analogs
KR101654007B1 (ko) 2007-08-15 2016-09-05 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 테트라하이드로피란 핵산 유사체
US7951785B2 (en) 2007-09-21 2011-05-31 California Institute Of Technology NFIA in glial fate determination, glioma therapy and astrocytoma treatment
US20100280098A1 (en) * 2007-10-05 2010-11-04 Juliano Rudolph L Receptor targeted oligonucleotides
WO2009064920A2 (en) 2007-11-13 2009-05-22 Isis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating protein expression
US8916531B2 (en) 2007-11-20 2014-12-23 Isis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of CD40 expression
WO2009067647A1 (en) * 2007-11-21 2009-05-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Carbocyclic alpha-l-bicyclic nucleic acid analogs
US7845686B2 (en) * 2007-12-17 2010-12-07 S & B Technical Products, Inc. Restrained pipe joining system for plastic pipe
WO2009091934A1 (en) 2008-01-17 2009-07-23 Sequenom, Inc. Single molecule nucleic acid sequence analysis processes and compositions
US20100119528A1 (en) * 2008-01-17 2010-05-13 Gobinda Sarkar Transport of Biologically Active Molecules into a Cell, Mitochondrion, or Nucleus
WO2009100320A2 (en) * 2008-02-07 2009-08-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexitol nucleic acid analogs
US8188060B2 (en) 2008-02-11 2012-05-29 Dharmacon, Inc. Duplex oligonucleotides with enhanced functionality in gene regulation
US8034568B2 (en) * 2008-02-12 2011-10-11 Nugen Technologies, Inc. Isothermal nucleic acid amplification methods and compositions
EP2271772B1 (en) * 2008-03-11 2014-07-16 Sequenom, Inc. Nucleic acid-based tests for prenatal gender determination
WO2009117698A2 (en) 2008-03-21 2009-09-24 Nugen Technologies, Inc. Methods of rna amplification in the presence of dna
WO2009117589A1 (en) * 2008-03-21 2009-09-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising tricyclic nucleosides and methods for their use
US9290534B2 (en) * 2008-04-04 2016-03-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds having at least one neutrally linked terminal bicyclic nucleoside
US8082730B2 (en) * 2008-05-20 2011-12-27 Caterpillar Inc. Engine system having particulate reduction device and method
JP2011529708A (ja) 2008-08-04 2011-12-15 ユニバーシティ オブ マイアミ 自然免疫応答の調節因子ｓｔｉｎｇ（インターフェロン遺伝子の刺激因子）
NZ601660A (en) 2008-08-25 2014-05-30 Excaliard Pharmaceuticals Inc Antisense oligonucleotides directed against connective tissue growth factor and uses thereof
US8962247B2 (en) 2008-09-16 2015-02-24 Sequenom, Inc. Processes and compositions for methylation-based enrichment of fetal nucleic acid from a maternal sample useful for non invasive prenatal diagnoses
US8476013B2 (en) 2008-09-16 2013-07-02 Sequenom, Inc. Processes and compositions for methylation-based acid enrichment of fetal nucleic acid from a maternal sample useful for non-invasive prenatal diagnoses
DK2361256T3 (da) * 2008-09-24 2013-07-01 Isis Pharmaceuticals Inc Cyclohexenyl-nukleinsyreanaloger
DK2356129T3 (da) * 2008-09-24 2013-05-13 Isis Pharmaceuticals Inc Substituerede alpha-L-bicykliske nukleosider
KR101773551B1 (ko) 2008-10-15 2017-08-31 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 인자 １１ 발현의 조정
US20120059045A1 (en) 2008-10-24 2012-03-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. Methods of using oligomeric compounds comprising 2'-substituted nucleosides
EP2447274B1 (en) 2008-10-24 2017-10-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds and methods
EP2365803B1 (en) 2008-11-24 2017-11-01 Northwestern University Polyvalent rna-nanoparticle compositions
ES2629630T3 (es) 2008-12-04 2017-08-11 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con eritropoyetina (EPO) mediante inhibición del transcrito antisentido natural a EPO
US20110237649A1 (en) 2008-12-04 2011-09-29 Opko Curna, Llc Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirtuin 1
US20110294870A1 (en) 2008-12-04 2011-12-01 Opko Curna, Llc Treatment of tumor suppressor gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to the gene
EP2376633A1 (en) 2008-12-17 2011-10-19 AVI BioPharma, Inc. Antisense compositions and methods for modulating contact hypersensitivity or contact dermatitis
US20100233270A1 (en) 2009-01-08 2010-09-16 Northwestern University Delivery of Oligonucleotide-Functionalized Nanoparticles
AU2010203474B2 (en) * 2009-01-08 2015-11-19 Northwestern University Inhibition of bacterial protein production by polyvalent oligonucleotide modified nanoparticle conjugates
KR101546673B1 (ko) * 2009-01-15 2015-08-25 삼성전자주식회사 전자 사진용 토너 및 그의 제조방법
WO2010087994A2 (en) 2009-01-30 2010-08-05 Whitehead Institute For Biomedical Research Methods for ligation and uses thereof
US20120021515A1 (en) 2009-02-06 2012-01-26 Swayze Eric E Oligomeric compounds and methods
US8536320B2 (en) 2009-02-06 2013-09-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tetrahydropyran nucleic acid analogs
ES2762610T3 (es) 2009-02-12 2020-05-25 Curna Inc Tratamiento de enfermedades relacionadas con el factor neurotrófico derivado de cerebro (BDNF) por inhibición de transcrito antisentido natural para BDNF
CN102439149B (zh) 2009-02-12 2018-01-02 库尔纳公司 通过抑制针对胶质细胞衍生神经营养因子(gdnf)的天然反义转录物来治疗gdnf相关的疾病
WO2010102058A2 (en) 2009-03-04 2010-09-10 Curna, Inc. Treatment of sirtuin 1 (sirt1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to sirt 1
CN102482677B (zh) 2009-03-16 2017-10-17 库尔纳公司 通过抑制nrf2的天然反义转录物治疗核因子(红细胞衍生2)‑样2(nrf2)相关疾病
WO2010107740A2 (en) 2009-03-17 2010-09-23 Curna, Inc. Treatment of delta-like 1 homolog (dlk1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to dlk1
WO2010118243A2 (en) 2009-04-08 2010-10-14 Genentech, Inc. Use of il-27 antagonists to treat lupus
EP3248618A1 (en) 2009-04-22 2017-11-29 Massachusetts Institute Of Technology Innate immune suppression enables repeated delivery of long rna molecules
EP2424987B1 (en) 2009-05-01 2017-11-15 CuRNA, Inc. Treatment of hemoglobin (hbf/hbg) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to hbf/hbg
CN103223177B (zh) 2009-05-06 2016-08-10 库尔纳公司 通过针对脂质转运和代谢基因的天然反义转录物的抑制治疗脂质转运和代谢基因相关疾病
ES2609655T3 (es) 2009-05-06 2017-04-21 Curna, Inc. Tratamiento de enfermedades relacionadas con tristetraprolina (TTP) mediante inhibición de transcrito antisentido natural para TTP
DK2432881T3 (en) 2009-05-18 2018-02-26 Curna Inc TREATMENT OF REPROGRAMMING FACTOR-RELATED DISEASES BY INHIBITING NATURAL ANTISENSE TRANSCRIPTS TO A REPROGRAMMING FACTOR
CA2762987A1 (en) 2009-05-22 2010-11-25 Joseph Collard Treatment of transcription factor e3 (tfe3) and insulin receptor substrate 2 (irs2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to tfe3
KR101704988B1 (ko) 2009-05-28 2017-02-08 큐알엔에이, 인크. 항바이러스 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 항바이러스 유전자 관련된 질환의 치료
WO2010148050A2 (en) 2009-06-16 2010-12-23 Curna, Inc. Treatment of collagen gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a collagen gene
US8951981B2 (en) 2009-06-16 2015-02-10 Curna, Inc. Treatment of paraoxonase 1 (PON1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to PON1
WO2010151671A2 (en) 2009-06-24 2010-12-29 Curna, Inc. Treatment of tumor necrosis factor receptor 2 (tnfr2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to tnfr2
EP2446037B1 (en) 2009-06-26 2016-04-20 CuRNA, Inc. Treatment of down syndrome gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a down syndrome gene
EP3000481A3 (en) 2009-07-14 2016-05-11 Mayo Foundation for Medical Education and Research Peptide-mediated non-covalent delivery of active agent agents across the blood brain barrier
CN102762731B (zh) 2009-08-05 2018-06-22 库尔纳公司 通过抑制针对胰岛素基因(ins)的天然反义转录物来治疗胰岛素基因(ins)相关的疾病
US9012421B2 (en) 2009-08-06 2015-04-21 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic cyclohexose nucleic acid analogs
CA2771172C (en) 2009-08-25 2021-11-30 Opko Curna, Llc Treatment of 'iq motif containing gtpase activating protein' (iqgap) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to iqgap
EP2470656B1 (en) 2009-08-27 2015-05-06 Idera Pharmaceuticals, Inc. Composition for inhibiting gene expression and uses thereof
CA2772715C (en) 2009-09-02 2019-03-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
JP5819308B2 (ja) 2009-10-22 2015-11-24 ジェネンテック， インコーポレイテッド マクロファージ刺激タンパク質のヘプシン活性化を調節するための方法及び組成物
CA2779099C (en) 2009-10-30 2021-08-10 Northwestern University Templated nanoconjugates
EP2499248B1 (en) 2009-11-13 2017-01-04 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense antiviral compound and method for treating influenza viral infection
PH12012500982A1 (en) 2009-11-30 2019-07-10 Genentech Inc Antibodies for treating and diagnosing tumors expressing slc34a2 (tat211=seqid2)
JP6025567B2 (ja) 2009-12-16 2016-11-16 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド 膜結合転写因子ペプチダーゼ、部位１（ｍｂｔｐｓ１）に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるｍｂｔｐｓ１関連性疾患の治療
ES2577017T3 (es) 2009-12-22 2016-07-12 Sequenom, Inc. Procedimientos y kits para identificar la aneuploidia
RU2619185C2 (ru) 2009-12-23 2017-05-12 Курна, Инк. Лечение заболеваний, связанных с разобщающим белком 2 (ucp2), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта к ucp2
CN102869776B (zh) 2009-12-23 2017-06-23 库尔纳公司 通过抑制肝细胞生长因子(hgf)的天然反义转录物而治疗hgf相关疾病
ES2585829T3 (es) 2009-12-29 2016-10-10 Curna, Inc. Tratamiento de las enfermedades relacionadas con la proteína tumoral 63 (p63) por inhibición de transcripción antisentido natural a p63
EP2519633B1 (en) 2009-12-29 2017-10-25 CuRNA, Inc. Treatment of nuclear respiratory factor 1 (nrf1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf1
CA2785832A1 (en) 2010-01-04 2011-07-07 Curna, Inc. Treatment of interferon regulatory factor 8 (irf8) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to irf8
KR101853509B1 (ko) 2010-01-06 2018-04-30 큐알엔에이, 인크. 췌장 발달 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 췌장 발달 유전자와 관련된 질환의 치료
WO2011085102A1 (en) 2010-01-11 2011-07-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. Base modified bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
JP6027893B2 (ja) 2010-01-11 2016-11-16 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド 性ホルモン結合グロブリン（ｓｈｂｇ）に対する天然アンチセンス転写物の阻害による性ホルモン結合グロブリン（ｓｈｂｇ）関連疾患の治療
EP2529015B1 (en) 2010-01-25 2017-11-15 CuRNA, Inc. Treatment of rnase h1 related diseases by inhibition of natural antisense transcript to rnase h1
CN102844435B (zh) 2010-02-22 2017-05-10 库尔纳公司 通过抑制吡咯啉‑5‑羧酸还原酶1(pycr1)的天然反义转录物而治疗pycr1相关疾病
WO2011105900A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-alpha (c8-alpha) and uses thereof
MA34057B1 (fr) 2010-02-23 2013-03-05 Genentech Inc Compositions et methodes pour le diagnostic et le traitement d'une tumeur
WO2011105901A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 9 (c9) and uses thereof
WO2011105902A2 (en) 2010-02-23 2011-09-01 Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam Antagonists of complement component 8-beta (c8-beta) and uses thereof
EP3210611B1 (en) 2010-03-12 2019-08-21 The Brigham and Women's Hospital, Inc. Methods of treating vascular inflammatory disorders
US9068185B2 (en) 2010-03-12 2015-06-30 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of nuclear hormone receptors
US9193752B2 (en) 2010-03-17 2015-11-24 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5′-substituted bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
WO2011127337A2 (en) 2010-04-09 2011-10-13 Opko Curna Llc Treatment of fibroblast growth factor 21 (fgf21) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to fgf21
WO2011133931A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Genentech, Inc. Use of il-27 antagonists for treating inflammatory bowel disease
CA2797093C (en) 2010-04-26 2019-10-29 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of cysteinyl-trna synthetase
EP2563381B1 (en) 2010-04-27 2017-08-09 aTyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of isoleucyl trna synthetases
WO2011139699A2 (en) 2010-04-28 2011-11-10 Isis Pharmaceuticals, Inc. 5' modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2601204B1 (en) 2010-04-28 2016-09-07 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modified nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
CN103097524B (zh) 2010-04-28 2016-08-03 Atyr医药公司 与丙氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
EP2563383B1 (en) 2010-04-29 2017-03-01 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of valyl trna synthetases
CA2797374C (en) 2010-04-29 2021-02-16 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of asparaginyl trna synthetases
PL2563920T3 (pl) 2010-04-29 2017-08-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulacja ekspresji transtyretyny
SG185027A1 (en) 2010-05-03 2012-11-29 Genentech Inc Compositions and methods for the diagnosis and treatment of tumor
WO2011139387A1 (en) 2010-05-03 2011-11-10 Opko Curna, Llc Treatment of sirtuin (sirt) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a sirtuin (sirt)
AU2011248227B2 (en) 2010-05-03 2016-12-01 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-alpha-tRNA synthetases
CN103096925A (zh) 2010-05-03 2013-05-08 Atyr医药公司 与精氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
ES2668207T3 (es) 2010-05-03 2018-05-17 Atyr Pharma, Inc. Descubrimiento innovador de composiciones terapéuticas, de diagnóstico y de anticuerpos relacionadas con fragmentos de proteínas de metionil-ARNt sintetasas
JP6008844B2 (ja) 2010-05-04 2016-10-19 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド ｐ３８ＭＵＬＴＩ−ｔＲＮＡ合成酵素複合体のタンパク質フラグメントに関連した治療用、診断用および抗体組成物の革新的発見
CN103429739B (zh) 2010-05-12 2018-11-13 哥伦比亚大学纽约管理委员会 制备产生和分泌胰岛素的肠内分泌细胞的方法
CA3090304A1 (en) 2010-05-13 2011-11-17 Sarepta Therapeutics, Inc. Antisense modulation of interleukins 17 and 23 signaling
TWI531370B (zh) 2010-05-14 2016-05-01 可娜公司 藉由抑制ｐａｒ４天然反股轉錄本治療ｐａｒ４相關疾病
EP2568996B1 (en) 2010-05-14 2017-10-04 aTyr Pharma, Inc. Therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of phenylalanyl-beta-trna synthetases
US9034598B2 (en) 2010-05-17 2015-05-19 Atyr Pharma, Inc. Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of leucyl-tRNA synthetases
US8895528B2 (en) 2010-05-26 2014-11-25 Curna, Inc. Treatment of atonal homolog 1 (ATOH1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to ATOH1
CN103096913B (zh) 2010-05-27 2017-07-18 Atyr 医药公司 与谷氨酰胺酰‑tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
US8957200B2 (en) 2010-06-07 2015-02-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2580228B1 (en) 2010-06-08 2016-03-23 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 2'-amino and 2'-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
AU2011289831C1 (en) 2010-07-12 2017-06-15 Pangu Biopharma Limited Innovative discovery of therapeutic, diagnostic, and antibody compositions related to protein fragments of glycyl-tRNA synthetases
JP5998131B2 (ja) 2010-07-14 2016-09-28 カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド Ｄｉｓｃｓｌａｒｇｅｈｏｍｏｌｏｇ（ｄｌｇ）ｄｌｇ１への天然アンチセンス転写物の阻害によるｄｌｇ関連疾患の治療
CN103108650A (zh) 2010-08-25 2013-05-15 Atyr医药公司 与酪氨酰-tRNA合成酶的蛋白片段相关的治疗、诊断和抗体组合物的创新发现
DK2625197T3 (en) 2010-10-05 2016-10-03 Genentech Inc Smoothened MUTANT AND METHODS OF USING THE SAME
CN103210086B (zh) 2010-10-06 2017-06-09 库尔纳公司 通过抑制唾液酸酶4(neu4)的天然反义转录物而治疗neu4相关疾病
EP2625292B1 (en) 2010-10-07 2018-12-05 The General Hospital Corporation Biomarkers of cancer
KR101865433B1 (ko) 2010-10-22 2018-07-13 큐알엔에이, 인크. 알파-l 이두로니다아제 (idua)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 idua 관련된 질환의 치료
KR101913232B1 (ko) 2010-10-27 2018-10-30 큐알엔에이, 인크. 인터페론-관련된 발달성 조절물질 1 (ifrd1)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 ifrd1 관련된 질환의 치료
CA2817256A1 (en) 2010-11-12 2012-05-18 The General Hospital Corporation Polycomb-associated non-coding rnas
CA2817960C (en) 2010-11-17 2020-06-09 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of alpha synuclein expression
WO2012071238A2 (en) 2010-11-23 2012-05-31 Opko Curna Llc Treatment of nanog related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nanog
EP2663323B1 (en) 2011-01-14 2017-08-16 The General Hospital Corporation Methods targeting mir-128 for regulating cholesterol/lipid metabolism
EP2668199B1 (en) 2011-01-27 2017-09-06 Ramot at Tel Aviv University, Ltd. Glycogen synthase kinase-3 inhibitors
EP2668200B1 (en) 2011-01-27 2017-03-15 Ramot at Tel-Aviv University Ltd. Glycogen synthase kinase-3 inhibitors
DK2670404T3 (en) 2011-02-02 2018-11-19 Univ Princeton CIRCUIT MODULATORS AS VIRUS PRODUCTION MODULATORS
PT2670411T (pt) 2011-02-02 2019-06-18 Excaliard Pharmaceuticals Inc Compostos anti sentido visando um fator de crescimento do tecido conetivo (ctfg) para utilização num método de tratamento de queloides ou cicatrizes hipertróficas
US8877722B2 (en) 2011-03-25 2014-11-04 Idera Pharmaceuticals, Inc. Compositions for inhibiting gene expression and uses thereof
AU2012249531B2 (en) 2011-04-29 2017-06-29 Sequenom, Inc. Quantification of a minority nucleic acid species
KR102043422B1 (ko) 2011-06-09 2019-11-11 큐알엔에이, 인크. 프라탁신 (fxn)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 프라탁신 (fxn) 관련된 질환의 치료
WO2012170347A1 (en) 2011-06-09 2012-12-13 Isis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
AU2012308302A1 (en) 2011-09-14 2014-03-20 Northwestern University Nanoconjugates able to cross the blood-brain barrier
AU2012308320C1 (en) 2011-09-14 2018-08-23 Translate Bio Ma, Inc. Multimeric oligonucleotide compounds
US10184151B2 (en) 2011-10-11 2019-01-22 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Micrornas in neurodegenerative disorders
JP2015502365A (ja) 2011-12-12 2015-01-22 オンコイミューニン，インコーポレイティド オリゴヌクレオチドのイン−ビボ送達
HK1202581A1 (en) 2012-02-13 2015-10-02 Gamida-Cell Ltd. Mesenchymal stem cells conditioned medium and methods of generating and using the same
EP2820129A1 (en) 2012-03-02 2015-01-07 Sequenom, Inc. Methods and processes for non-invasive assessment of genetic variations
HK1210211A1 (en) 2012-03-15 2016-04-15 科纳公司 Treatment of brain derived neurotrophic factor (bdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to bdnf
CA2907072A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Valerion Therapeutics, Llc Antisense conjugates for decreasing expression of dmpk
WO2013154799A1 (en) 2012-04-09 2013-10-17 Isis Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP2850092B1 (en) 2012-04-09 2017-03-01 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Tricyclic nucleic acid analogs
CN104704122A (zh) 2012-04-20 2015-06-10 艾珀特玛治疗公司 产热的miRNA调节剂
WO2013163628A2 (en) 2012-04-27 2013-10-31 Duke University Genetic correction of mutated genes
WO2013173652A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Rana Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating gene expression
SG11201407483YA (en) 2012-05-16 2014-12-30 Rana Therapeutics Inc Compositions and methods for modulating smn gene family expression
US10504613B2 (en) 2012-12-20 2019-12-10 Sequenom, Inc. Methods and processes for non-invasive assessment of genetic variations
US9920361B2 (en) 2012-05-21 2018-03-20 Sequenom, Inc. Methods and compositions for analyzing nucleic acid
KR20150016336A (ko) 2012-05-21 2015-02-11 더 스크립스 리서치 인스티튜트 리보솜 폴리뉴클레오티드 및 관련 발현 시스템
WO2013184209A1 (en) 2012-06-04 2013-12-12 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Mif for use in methods of treating subjects with a neurodegenerative disorder
US20140093873A1 (en) 2012-07-13 2014-04-03 Sequenom, Inc. Processes and compositions for methylation-based enrichment of fetal nucleic acid from a maternal sample useful for non-invasive prenatal diagnoses
US9567569B2 (en) 2012-07-23 2017-02-14 Gamida Cell Ltd. Methods of culturing and expanding mesenchymal stem cells
US9175266B2 (en) 2012-07-23 2015-11-03 Gamida Cell Ltd. Enhancement of natural killer (NK) cell proliferation and activity
WO2014022852A1 (en) 2012-08-03 2014-02-06 Aptamir Therapeutics, Inc. Cell-specific delivery of mirna modulators for the treatment of obesity and related disorders
CN104736551B (zh) 2012-08-15 2017-07-28 Ionis制药公司 使用改进的封端方案制备寡聚化合物的方法
US9029335B2 (en) 2012-10-16 2015-05-12 Isis Pharmaceuticals, Inc. Substituted 2′-thio-bicyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
AU2013336237A1 (en) 2012-10-22 2015-06-11 Sabag-Rfa Ltd A system for delivering therapeutic agents into living cells and cells nuclei
US11060145B2 (en) 2013-03-13 2021-07-13 Sequenom, Inc. Methods and compositions for identifying presence or absence of hypermethylation or hypomethylation locus
US9828582B2 (en) 2013-03-19 2017-11-28 Duke University Compositions and methods for the induction and tuning of gene expression
DK2992098T3 (da) 2013-05-01 2019-06-17 Ionis Pharmaceuticals Inc Sammensætninger og fremgangsmåder til modulering af hbv- og ttr-ekspression
JP6869720B2 (ja) 2013-06-13 2021-05-12 アンチセンス セラピューティクス リミテッド 併用療法
US9718859B2 (en) 2013-06-24 2017-08-01 Ramot At Tel-Aviv University Ltd. Glycogen synthase kinase-3 inhibitors
JP2016537965A (ja) 2013-10-11 2016-12-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｎｓｐ４阻害剤及び使用方法
US11162096B2 (en) 2013-10-14 2021-11-02 Ionis Pharmaceuticals, Inc Methods for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
CA2844640A1 (en) 2013-12-06 2015-06-06 The University Of British Columbia Method for treatment of castration-resistant prostate cancer
WO2015117010A2 (en) 2014-01-31 2015-08-06 Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education Bag3 as a target for therapy of heart failure
ES2694857T3 (es) 2014-02-04 2018-12-27 Genentech, Inc. Smoothened mutante y métodos de uso de la misma
EP3736344A1 (en) 2014-03-13 2020-11-11 Sequenom, Inc. Methods and processes for non-invasive assessment of genetic variations
EP3119789B1 (en) 2014-03-17 2020-04-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic carbocyclic nucleosides and oligomeric compounds prepared therefrom
EP3119888B1 (en) 2014-03-19 2021-07-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating ataxin 2 expression
US10006027B2 (en) 2014-03-19 2018-06-26 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating Ataxin 2 expression
HUE050704T2 (hu) 2014-04-01 2020-12-28 Biogen Ma Inc Összetételek a SOD-1 expressziójának modulálására
WO2015164693A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 Isis Pharmaceuticals, Inc. Oligomeric compounds comprising alpha-beta-constrained nucleic acid
EA036496B1 (ru) 2014-05-01 2020-11-17 Ионис Фармасьютикалз, Инк. Конъюгированные олигонуклеотиды для модулирования экспрессии фактора комплемента b
KR102524543B1 (ko) 2014-06-10 2023-04-20 에라스무스 유니버시티 메디컬 센터 로테르담 폼페병의 치료에 유용한 안티센스 올리고뉴클레오티드
EP3161159B1 (en) 2014-06-25 2020-08-05 The General Hospital Corporation Targeting human satellite ii (hsatii)
US10487314B2 (en) 2014-06-26 2019-11-26 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Inhibition of serotonin expression in gut enteroendocrine cells results in conversion to insulin-positive cells
WO2016033424A1 (en) 2014-08-29 2016-03-03 Genzyme Corporation Methods for the prevention and treatment of major adverse cardiovascular events using compounds that modulate apolipoprotein b
US10436802B2 (en) 2014-09-12 2019-10-08 Biogen Ma Inc. Methods for treating spinal muscular atrophy
EP3663403A1 (en) 2014-09-26 2020-06-10 University of Massachusetts Rna-modulating agents
US11213593B2 (en) 2014-11-21 2022-01-04 Northwestern University Sequence-specific cellular uptake of spherical nucleic acid nanoparticle conjugates
US9688707B2 (en) 2014-12-30 2017-06-27 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Bicyclic morpholino compounds and oligomeric compounds prepared therefrom
US10793855B2 (en) 2015-01-06 2020-10-06 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
US10538763B2 (en) 2015-01-16 2020-01-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulation of DUX4
WO2016130600A2 (en) 2015-02-09 2016-08-18 Duke University Compositions and methods for epigenome editing
US11129844B2 (en) 2015-03-03 2021-09-28 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating MECP2 expression
US10961532B2 (en) 2015-04-07 2021-03-30 The General Hospital Corporation Methods for reactivating genes on the inactive X chromosome
US10407678B2 (en) 2015-04-16 2019-09-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions for modulating expression of C9ORF72 antisense transcript
GB201507926D0 (en) * 2015-05-08 2015-06-24 Proqr Therapeutics N V Improved treatments using oligonucleotides
AU2016276981B2 (en) 2015-06-12 2022-10-06 Alector Llc Anti-CD33 antibodies and methods of use thereof
HK1252675A1 (zh) 2015-06-12 2019-05-31 Alector Llc 抗cd33抗体及其使用方法
CN108139375A (zh) 2015-06-26 2018-06-08 贝斯以色列女执事医疗中心股份有限公司 靶向髓样衍生的抑制细胞中的四跨膜蛋白33(tspan33)的癌症疗法
EP3314027A4 (en) 2015-06-29 2019-07-03 Caris Science, Inc. THERAPEUTIC OLIGONUCLEOTIDES
US10941176B2 (en) 2015-07-28 2021-03-09 Caris Science, Inc. Therapeutic oligonucleotides
US10072065B2 (en) 2015-08-24 2018-09-11 Mayo Foundation For Medical Education And Research Peptide-mediated delivery of immunoglobulins across the blood-brain barrier
KR20180054639A (ko) 2015-08-28 2018-05-24 알렉터 엘엘씨 항-siglec-7 항체 및 이의 사용 방법
EP4285912A3 (en) 2015-09-25 2024-07-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for modulating ataxin 3 expression
US12048753B2 (en) 2015-10-01 2024-07-30 Whitehead Institute For Biomedical Research Labeling of antibodies
EP4089175A1 (en) 2015-10-13 2022-11-16 Duke University Genome engineering with type i crispr systems in eukaryotic cells
CA3003458A1 (en) 2015-10-29 2017-05-04 Alector Llc Anti-siglec-9 antibodies and methods of use thereof
EP3370734B1 (en) 2015-11-05 2023-01-04 Children's Hospital Los Angeles Antisense oligo for use in treating acute myeloid leukemia
AU2016355178B9 (en) 2015-11-19 2019-05-30 Massachusetts Institute Of Technology Lymphocyte antigen CD5-like (CD5L)-interleukin 12B (p40) heterodimers in immunity
KR102787119B1 (ko) 2015-11-30 2025-03-27 듀크 유니버시티 유전자 편집에 의한 인간 디스트로핀 유전자의 교정을 위한 치료용 표적 및 사용 방법
EP3389670A4 (en) 2015-12-04 2020-01-08 Ionis Pharmaceuticals, Inc. METHODS OF TREATING BREAST CANCER
WO2017099579A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Erasmus University Medical Center Rotterdam Enzymatic replacement therapy and antisense therapy for pompe disease
AU2016381174A1 (en) 2015-12-31 2018-05-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing Ataxin-2 expression
CA3006599A1 (en) 2016-01-05 2017-07-13 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for reducing lrrk2 expression
EP3411396A1 (en) 2016-02-04 2018-12-12 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
JP7033072B2 (ja) 2016-02-25 2022-03-09 ザ ブリガム アンド ウィメンズ ホスピタル インコーポレイテッド Ｓｍｏｃ２を標的化する線維症のための治療方法
WO2017161168A1 (en) 2016-03-16 2017-09-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of dyrk1b expression
EP3429690A4 (en) 2016-03-16 2019-10-23 Ionis Pharmaceuticals, Inc. METHOD FOR MODULATING KEAP1
US10731166B2 (en) 2016-03-18 2020-08-04 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probes and uses thereof
US20190127713A1 (en) 2016-04-13 2019-05-02 Duke University Crispr/cas9-based repressors for silencing gene targets in vivo and methods of use
WO2017187426A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Aptamir Therapeutics, Inc. Inhibition of mir-22 mirna by apt-110
WO2017205686A1 (en) 2016-05-25 2017-11-30 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probes and uses thereof
AU2017286811A1 (en) 2016-06-17 2018-11-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of gys1 expression
WO2018013525A1 (en) 2016-07-11 2018-01-18 Translate Bio Ma, Inc. Nucleic acid conjugates and uses thereof
JP7490211B2 (ja) 2016-07-19 2024-05-27 デューク ユニバーシティ Ｃｐｆ１に基づくゲノム編集の治療適用
NL2017294B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Natural cryptic exon removal by pairs of antisense oligonucleotides.
NL2017295B1 (en) 2016-08-05 2018-02-14 Univ Erasmus Med Ct Rotterdam Antisense oligomeric compound for Pompe disease
US11400161B2 (en) 2016-10-06 2022-08-02 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Method of conjugating oligomeric compounds
US11459568B2 (en) 2016-10-31 2022-10-04 University Of Massachusetts Targeting microRNA-101-3p in cancer therapy
JOP20190104A1 (ar) 2016-11-10 2019-05-07 Ionis Pharmaceuticals Inc مركبات وطرق لتقليل التعبير عن atxn3
WO2018102745A1 (en) 2016-12-02 2018-06-07 Cold Spring Harbor Laboratory Modulation of lnc05 expression
US11147249B2 (en) 2016-12-08 2021-10-19 Alector Llc Siglec transgenic mice and methods of use thereof
US11180756B2 (en) 2017-03-09 2021-11-23 Ionis Pharmaceuticals Morpholino modified oligomeric compounds
EP3609521A4 (en) 2017-04-14 2021-06-16 University of Massachusetts TARGETING OF CELL TROPISM RECEPTORS TO INHIBIT INFECTION BY THE CYTOMEGALOVIRUS
CA3060514A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
US12208140B2 (en) 2017-04-21 2025-01-28 The Broad Institute, Inc. Targeted delivery to beta cells
WO2018209270A1 (en) 2017-05-11 2018-11-15 Northwestern University Adoptive cell therapy using spherical nucleic acids (snas)
EP3625258A1 (en) 2017-05-16 2020-03-25 Alector LLC Anti-siglec-5 antibodies and methods of use thereof
BR112019023789A2 (pt) 2017-08-03 2020-07-28 Alector Llc anticorpos anti-cd33 e métodos de uso dos mesmos
WO2019036613A1 (en) 2017-08-18 2019-02-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. MODULATION OF THE NOTCH SIGNALING PATHWAY FOR THE TREATMENT OF RESPIRATORY DISORDERS
US10517889B2 (en) 2017-09-08 2019-12-31 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of SMAD7 expression
US11999953B2 (en) 2017-09-13 2024-06-04 The Children's Medical Center Corporation Compositions and methods for treating transposon associated diseases
TWI809004B (zh) 2017-11-09 2023-07-21 美商Ionis製藥公司 用於降低snca表現之化合物及方法
US11470827B2 (en) 2017-12-12 2022-10-18 Alector Llc Transgenic mice expressing human TREM proteins and methods of use thereof
US11459564B2 (en) 2017-12-21 2022-10-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulation of frataxin expression
WO2019140102A1 (en) 2018-01-10 2019-07-18 Translate Bio Ma, Inc. Compositions and methods for facilitating delivery of synthetic nucleic acids to cells
AU2019206731A1 (en) 2018-01-15 2020-07-30 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of DNM2 expression
EP3740580A4 (en) 2018-01-19 2021-10-20 Duke University GENOME ENGINEERING WITH CRISPR-CAS SYSTEMS IN EUKARYONTS
US11732260B2 (en) 2018-03-02 2023-08-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for the modulation of amyloid-β precursor protein
TWI840345B (zh) 2018-03-02 2024-05-01 美商Ionis製藥公司 Irf4表現之調節劑
JP7576835B2 (ja) 2018-03-22 2024-11-01 ボード・オブ・リージェンツ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・テキサス・システム 自己免疫疾患および癌を治療するための可溶性インターロイキン７受容体（ｓＩＬ７Ｒ）調節療法
WO2019183440A1 (en) 2018-03-22 2019-09-26 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Methods for modulating fmr1 expression
WO2019186514A2 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Rheinische Friedrich-Wilhelms-Universitat Bonn Aptamers for targeted activaton of t cell-mediated immunity
JP7522038B2 (ja) 2018-04-06 2024-07-24 ザ チルドレンズ メディカル センター コーポレーション 体細胞リプログラミングおよびインプリンティングのモジュレートのための組成物および方法
SG11202008660TA (en) 2018-04-11 2020-10-29 Ionis Pharmaceuticals Inc Modulators of ezh2 expression
EP4663758A3 (en) 2018-05-09 2026-04-29 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing atxn3 expression
CU20200082A7 (es) 2018-05-09 2021-06-08 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y métodos para la reducción de la expresión de fxi
US12582702B2 (en) 2018-05-11 2026-03-24 University Of Massachusetts Methods for improving leptin sensitivity for the treatment of obesity and diabetes
CN119841953A (zh) 2018-06-08 2025-04-18 艾利妥 抗siglec-7抗体及其使用方法
CA3103429A1 (en) 2018-06-14 2019-12-19 Don W. Cleveland Compounds and methods for increasing stmn2 expression
TWI833770B (zh) 2018-06-27 2024-03-01 美商Ionis製藥公司 用於減少 lrrk2 表現之化合物及方法
KR20210044771A (ko) 2018-07-02 2021-04-23 압타미르 테라퓨틱스, 인코포레이티드 인간 지방세포에 대한 치료제의 표적화 전달
US12496311B2 (en) 2018-07-17 2025-12-16 Aronora, Inc. Methods for safely reducing thrombopoietin
AR115847A1 (es) 2018-07-25 2021-03-03 Ionis Pharmaceuticals Inc Compuestos y métodos para reducir la expresión de la atxn2
US12258398B2 (en) 2018-07-27 2025-03-25 Alector Llc Anti-Siglec-5 antibodies and methods of use thereof
SG11202100928QA (en) 2018-08-02 2021-02-25 Dyne Therapeutics Inc Muscle targeting complexes and uses thereof for treating facioscapulohumeral muscular dystrophy
CA3110661A1 (en) 2018-08-29 2020-03-05 University Of Massachusetts Inhibition of protein kinases to treat friedreich ataxia
CR20210155A (es) 2018-08-31 2021-05-10 Alector Llc Anticuerpos anti-cd33 y métodos para usarlos
US12097239B2 (en) 2018-09-21 2024-09-24 President And Fellows Of Harvard College Methods and compositions for treating diabetes, and methods for enriching MRNA coding for secreted proteins
TW202028222A (zh) 2018-11-14 2020-08-01 美商Ionis製藥公司 Foxp3表現之調節劑
CR20210311A (es) 2018-11-15 2021-07-22 Ionis Pharmaceuticals Inc Moduladores de la expresión de irf5
US12281305B2 (en) 2018-11-21 2025-04-22 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing prion expression
BR112021013369A2 (pt) 2019-01-31 2021-09-21 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Moduladores de expressão de yap1
WO2020171889A1 (en) 2019-02-19 2020-08-27 University Of Rochester Blocking lipid accumulation or inflammation in thyroid eye disease
AU2020227824B2 (en) 2019-02-27 2025-07-10 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Modulators of MALAT1 expression
PT3947684T (pt) 2019-03-29 2025-05-19 Ionis Pharmaceuticals Inc Compostos e métodos para modular ube3a‑ats
WO2021021673A1 (en) 2019-07-26 2021-02-04 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating gfap
KR20220062517A (ko) 2019-08-15 2022-05-17 아이오니스 파마수티컬즈, 인코포레이티드 결합 변형된 올리고머 화합물 및 이의 용도
US12241830B2 (en) 2019-12-06 2025-03-04 Broad Institute, Inc. Living biosensors
CN120505310A (zh) 2020-02-28 2025-08-19 Ionis制药公司 用于调节smn2的化合物和方法
TWI901676B (zh) 2020-05-01 2025-10-21 美商Ionis製藥公司 調節ａｔｘｎ１之化合物及方法
CA3185019A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 Front Range Biosciences, Inc. Methods and compositions for pathogen detection in plants
EP4172338A4 (en) 2020-06-29 2025-06-11 Ionis Pharmaceuticals, Inc. COMPOUNDS AND METHODS FOR MODULATING PLP1
US20230002779A1 (en) 2020-06-29 2023-01-05 Front Range Biosciences, Inc. Characterization of plant cultivars based on terpene synthase gene profiles
CA3189922A1 (en) 2020-07-28 2022-02-03 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing app expression
IL300258A (en) 2020-08-07 2023-03-01 Ionis Pharmaceuticals Inc Compounds and methods for modulating SCN2A
LT4136092T (lt) 2020-11-18 2024-09-25 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Junginiai ir būdai, skirti angiotenzinogeno raiškos moduliavimui
WO2022133278A2 (en) 2020-12-18 2022-06-23 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for modulating factor xii
CA3202832A1 (en) 2020-12-31 2022-07-07 Romesh R. Subramanian Muscle targeting complexes and uses thereof for treating myotonic dystrophy
AU2022293556A1 (en) 2021-06-18 2024-01-18 Ionis Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for reducing ifnar1 expression
US20240376473A1 (en) 2021-09-16 2024-11-14 Qmine Co., Ltd. Antisense compound for modulating wfdc2 expression
CN120659627A (zh) 2022-07-29 2025-09-16 瑞泽恩制药公司 用于转铁蛋白受体（tfr）介导的脑和肌肉递送的组合物和方法
EP4577672A1 (en) 2022-08-26 2025-07-02 The General Hospital Corporation Methods and compositions for prognosis and treatment of dilated cardiomyopathy and heart failure
JP2025532127A (ja) 2022-09-23 2025-09-29 アイオーニス ファーマシューティカルズ， インコーポレーテッド Ｍｅｃｐ２発現を低減する化合物及び方法
EP4612184A1 (en) 2022-11-04 2025-09-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Calcium voltage-gated channel auxiliary subunit gamma 1 (cacng1) binding proteins and cacng1-mediated delivery to skeletal muscle
KR20250116795A (ko) 2022-11-14 2025-08-01 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 별아교세포로의 섬유아세포 성장 인자 수용체 3-매개된 전달을 위한 조성물 및 방법
WO2025090427A1 (en) 2023-10-23 2025-05-01 University Of Rochester Glial-targeted relief of hyperexcitability in neurodegenerative diseases
WO2025184318A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 The General Hospital Corporation Methods and compositions for prognosis and treatment of peripartum cardiomyopathy
WO2025184324A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 The General Hospital Corporation Methods and compositions for prognosis and treatment of cancer therapy-related cardiac dysfunction
WO2026080442A2 (en) 2024-10-07 2026-04-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Compositions and methods for treating fibrotic and inflammatory diseases

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5194428A (en) * 1986-05-23 1993-03-16 Worcester Foundation For Experimental Biology Inhibition of influenza virus replication by oligonucleotide phosphorothioates
US4806463A (en) * 1986-05-23 1989-02-21 Worcester Foundation For Experimental Biology Inhibition of HTLV-III by exogenous oligonucleotides
US5149797A (en) * 1990-02-15 1992-09-22 The Worcester Foundation For Experimental Biology Method of site-specific alteration of rna and production of encoded polypeptides
DE4110085A1 (de) * 1991-03-27 1992-10-01 Boehringer Ingelheim Int 2'-o-alkyl-oligoribonukleotide, verfahren zu deren herstellung und deren verwendung als antisense-oligonukleotide
WO1994008003A1 (en) * 1991-06-14 1994-04-14 Isis Pharmaceuticals, Inc. ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDE INHIBITION OF THE ras GENE
WO1993013114A1 (en) * 1991-12-24 1993-07-08 Isis Pharmaceuticals, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODULATING β-AMYLOID
JP3131222B2 (ja) * 1991-12-24 2001-01-31 アイシス・ファーマシューティカルス・インコーポレーテッド ギャップを有する２′修飾オリゴヌクレオチド
CA2126979A1 (en) * 1991-12-31 1993-07-22 Eliezer Rapaport Antiparasitic oligonucleotides active against drug resistant malaria
US5681747A (en) * 1992-03-16 1997-10-28 Isis Pharmaceuticals, Inc. Nucleic acid sequences encoding protein kinase C and antisense inhibition of expression thereof
US5652355A (en) * 1992-07-23 1997-07-29 Worcester Foundation For Experimental Biology Hybrid oligonucleotide phosphorothioates
ATE162198T1 (de) * 1992-07-27 1998-01-15 Hybridon Inc Oligonukleotid alkylphosphonothiate
WO1994007367A1 (en) * 1992-09-29 1994-04-14 Apollon, Inc. Anti-viral oligomers that bind polypurine tracts of single-stranded rna or rna-dna hybrids
JP3160105B2 (ja) * 1992-12-11 2001-04-23 三共株式会社 プシコフラノース及びプシコピラノース誘導体
NZ263985A (en) * 1993-03-31 1997-07-27 Hybridon Inc Oligonucleotide complementary to an essential amino acid sequence of influenza virus
DE69435005T2 (de) * 1993-05-11 2008-04-17 The University Of North Carolina At Chapel Hill Antisense Oligonukleotide die anomales Splicing verhindern und deren Verwendung
WO1995009236A1 (en) * 1993-09-28 1995-04-06 The General Hospital Corporation USING ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDES TO MODULATE NERVE GROWTH AND TO REVERSE β/A4 AMYLOID-INDUCED MORPHOLOGY

Also Published As

Publication number Publication date
EP1340765A2 (en) 2003-09-03
DK1019428T3 (da) 2003-09-22
WO1997006662A3 (en) 1997-06-19
ES2315442T3 (es) 2009-04-01
ATE243706T1 (de) 2003-07-15
EP1340765B1 (en) 2008-10-15
JP4177455B2 (ja) 2008-11-05
CA2229811A1 (en) 1997-02-27
JPH11512088A (ja) 1999-10-19
WO1997006662A2 (en) 1997-02-27
AU6953896A (en) 1997-03-12
EP1019428B1 (en) 2003-06-25
EP1340765A3 (en) 2006-06-21
EP1019428A2 (en) 2000-07-19
PT1019428E (pt) 2003-10-31
US5773601A (en) 1998-06-30
CA2229811C (en) 2012-01-03
ATE411333T1 (de) 2008-10-15
DE69628864T2 (de) 2004-05-06
US5973136A (en) 1999-10-26
DE69637718D1 (de) 2008-11-27
DE69628864D1 (de) 2003-07-31
US5652356A (en) 1997-07-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2201198T3 (es) Oligonucleotidos quimericos e hibridos invertidos.
JP7442574B2 (ja) Ｌｐａの遺伝子発現の阻害のための組成物及び方法
US5856462A (en) Oligonucleotides having modified CpG dinucleosides
US5585479A (en) Antisense oligonucleotides directed against human ELAM-I RNA
Galbraith et al. Complement activation and hemodynamic changes following intravenous administration of phosphorothioate oligonucleotides in the monkey
JP2023156455A (ja) 第ｘｉｉ因子の遺伝子発現を阻害するための組成物と方法
JP4718541B2 (ja) 改良された凝固因子調節剤
CA2153158A1 (en) Antisense inhibition of c-myc to modulate the proliferation of smooth muscle cells
TW201922264A (zh) 用於抑制類血管生成素蛋白-3(ANGPTL3)表現的RNAi藥劑及組合物及使用方法
US20230119360A1 (en) Pharmaceutical combination of a therapeutic oligonucleotide targeting hbv and a tlr7 agonist for treatment of hbv
JP2015518710A (ja) ヘモグロビン遺伝子ファミリー発現を調節するための組成物及び方法
KR20240101580A (ko) Hbv 치료를 위한 약학 조합물
US20030036516A1 (en) Method for using oligonucleotides having modified cpg dinucleotides
US5969117A (en) Modified protein kinase a-specific oligonucleotide
US6624293B1 (en) Modified protein kinase A-specific oligonucleotides and methods of their use
WO1997011171A9 (en) Modified protein kinase a-specific oligonucleotides and methods of their use
US20040072783A1 (en) Nucleozymes with endonuclease activity
JPH07501525A (ja) ｃ−ｍｙｂプロトオンコジーンに対するアンチセンスオリゴヌクレオチドによる黒色腫の処置
US6087343A (en) Antisense oligonucleotides targeted to β-1 adrenoceptor and methods of use
WO2016183370A1 (en) Synthetic immunosuppressive oligodeoxynucleotides reduce ischemic tissue damage
CN116670278A (zh) 用于降低z-aat蛋白水平的方法
EP0760666A1 (en) Use of oligonucleotide phosphorothioate for depleting complement and for reducing blood pressure
WO2016183371A1 (en) Methods for the treatment or prevention of ischemic tissue damage
US20050054600A1 (en) Modified protein kinase a-specific oligonucleotides and methods of their use