ES2203585T3 - Procedimiento de extraccion mediante un disolvente de compuestos activos de la achicoria. - Google Patents
Procedimiento de extraccion mediante un disolvente de compuestos activos de la achicoria.Info
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Abstract
Procedimiento de extracción por un disolvente de compuestos activos de la achicoria, caracterizado porque: - se hace macerar la achicoria en dicho disolvente a una temperatura comprendida entre 0ºC y 6ºC, durante un periodo de al menos doce horas; y - se filtra el jugo de maceración con un umbral de hendidura de un valor al menos igual a 0,22 m.
Description
Procedimiento de extracción mediante un
disolvente de compuestos activos de la achicoria.
La presente invención se refiere a un
procedimiento de extracción por un disolvente de compuestos activos
de la raíz de achicoria y principalmente de la achicoria tostada. La
presente invención se refiere igualmente al extracto obtenido por
este procedimiento y que presenta propiedades particularmente
interesantes en el ámbito de la higiene bucal. La presente invención
se refiere, además, a un dentífrico y a un enjuague que contienen el
extracto de la invención.
La raíz de la achicoria silvestre o del café
denominado también Cichorium Intybus Linn (resumido a
continuación del presente texto en C.I.L.) se utilizaba durante la
Antigüedad en el ámbito alimenticio y por sus propiedades
medicinales.
En el ámbito alimenticio, la raíz de la achicoria
es utilizada normalmente después del tueste. Por el contrario, en el
campo farmacéutico, son las raíces secas al aire caliente las que se
utilizan de forma exclusiva.
En 1983, Patel y Venkatakrishna han mostrado las
propiedades del extracto de raíz de achicoria tostada para la
prevención de la placa dental y el tratamiento de la gingivitis. El
extracto utilizado por estos autores se obtuvo por la extracción en
caliente a partir de polvo bruto de raíz de achicoria secada y
tostada en presencia de agua o etanol en un extractor de
Soxhlet.
El extracto así obtenido se presenta en forma de
un líquido viscoso de color negro. Este extracto de achicoria
utilizado en masaje permite disminuir en gran medida la inflamación
gingival, presenta propiedades antimicrobianas y se comprueba que es
un inhibidor eficaz de la placa dental.
La presente invención propone un procedimiento de
extracción por un disolvente de compuestos activos de la achicoria
diferente de estos descritos anteriormente.
Según el procedimiento de extracción por un
disolvente de la invención, de manera característica, se hace
macerar la achicoria en un disolvente a una temperatura comprendida
entre 0ºC y 6ºC, durante un periodo superior o igual a 12 horas y se
filtra el jugo de maceración con un umbral de hendidura de un valor
al menos igual a 0,22 \mum.
La filtración en un umbral de hendidura de este
tipo permite obtener a partir de cualquier jugo de maceración de
achicoria, un extracto limpio y activo, lo que no es evidente debido
al hecho de que los compuestos activos de la achicoria no están
identificados hasta ahora. Sin embargo, no se excluye,
particularmente si la limpieza no es redhibitoria, realizar la
filtración con un umbral de hendidura más elevado o realizar la
separación del extracto y de los residuos sólidos por otras técnicas
de separación.
Es posible igualmente según la invención, en
función de la cantidad de materias sólidas extraídas, proceder a una
o varias etapas de separación de sólido-líquido,
eventualmente por filtración, antes de llevar a cabo la etapa de
filtración del jugo de maceración con un umbral de hendidura de un
valor al menos igual a 0,22 \mum.
Partiendo de que la solubilidad de los compuestos
contenidos en la achicoria, por ejemplo, la inulina, (y sus
coeficientes de difusión) aumenta con la temperatura, es
sorprendente, por lo tanto, que sea posible extraer compuestos
activos de la raíz de la achicoria a las temperaturas previstas por
el procedimiento de la invención. Las temperaturas bajas del
procedimiento de extracción de la invención permiten también una
buena conservación del extracto obtenido, sin añadir conservante,
puesto que a las temperaturas de extracción del procedimiento de la
invención, se desarrollan poco las bacterias. Además, el
procedimiento de la invención evita cualquier degradación térmica de
la achicoria que podría desnaturalizar eventualmente los compuestos
activos.
Del mismo modo, la Firma Solicitante ha puesto en
evidencia igualmente que una filtración hasta un umbral de hendidura
igual a 0,22 \mum permite obtener un extracto que comprende todos
los compuestos activos, un color y una limpieza óptima para su
utilización posterior.
Según la invención, la cantidad de achicoria
tostada utilizada es tal que las mezcla de disolvente más achicoria
antes de la maceración contiene al menos el 5% y, preferentemente
el 7,4% de materia seca. Tales cantidades permiten, en efecto,
obtener extractos que presentan o son susceptibles de presentar las
propiedades farmacológicas (eficacia antimicrobiana y
anti-inflamatoria) y físicas (turbiedad, porcentaje
de materia seca, color) óptimas para su utilización posterior.
La achicoria utilizada en el marco de la presente
invención no está limitada a una categoría específica de achicoria.
Se puede tratar, por ejemplo, de achicoria seca, tostada o incluso
achicoria soluble disponible en el comercio. Preferentemente, en el
caso de la achicoria tostada, ésta se obtiene al final de una
torrefacción cuya temperatura final no excede 170ºC. Además, las
temperaturas altas de torrefacción provocan, en efecto, cambios no
deseados, tales como una reducción de la fracción extraíble y del
pH, así como un gusto débil y picante.
Según la invención, la achicoria tostada se
presenta en forma de granos, granos molidos, polvo, líquido o pasta.
Sin embargo, para mejorar la cantidad de compuestos activos que es
posible extraer según el procedimiento de la invención, es
preferible utilizar la achicoria en polvo de modo que se lleva al
máximo la superficie de contacto entre la achicoria y el
disolvente.
Se puede obtener una limpieza del extracto
suficiente si se efectúa una filtración del jugo de maceración con
un umbral de hendidura inferior o igual a 10 \mum.
El disolvente utilizado según el procedimiento de
la invención no está limitado. Puede tratarse de disolventes
próticos como, por ejemplo, el agua o los alcoholes.
Preferentemente, se utiliza el agua a la vez por cuestiones de coste
y de inocuidad, lo que se comprueba interesante para las
utilizaciones últimas del extracto obtenido según el procedimiento
de la invención.
El extracto obtenido según el procedimiento de la
presente invención puede utilizarse principalmente para la
preparación de una composición destinada a la higiene bucal. Se
puede utilizar igualmente para la preparación de una composición
cosmética. En efecto, el extracto obtenido por el procedimiento de
la invención todas las propiedades conocidas del extracto de
achicoria obtenido por extracción en caliente, a saber, propiedades
antimicrobianas y anti-inflamatorias sin presentar
el color negro que limita la utilización.
Preferentemente, el enjuague de la invención
contiene una cantidad comprendida entre el 8% y el 12% y,
preferentemente igual o sensiblemente igual al 10% en masa del
extracto de achicoria obtenido según el procedimiento de la
invención.
De igual modo, el dentífrico de la invención
contiene una cantidad comprendida entre el 8% y el 12% y
preferentemente igual o sensiblemente igual al 10% en masa de
extracto de achicoria obtenido según el procedimiento de la
invención.
La presente invención se comprenderá mejor y sus
características y ventajas aparecerán mejor a partir de la lectura
de la descripción y de los ejemplos de realización que se
acompañan.
La achicoria tostada utilizada en este ejemplo
presenta las características físico-químicas
siguientes:
| Color: | 50 a 70 (color test Neuhaus) |
| Materia seca medida a 70ºC: | >95ºC |
| Granulometría media: | 90% <0,710 mm |
| pH en solución acuosa a 10%: | comprendida entre 4,0 y 4,5, |
| y las características bacteriológicas siguientes: | |
| Gérmenes aerobios mesófilos: | < 10/g |
| Levaduras: | 0/g |
| Mohos: | 0/g |
Se mezclaron 100 g de la achicoria en polvo
definida anteriormente en un reactor calentado con agua tratada por
ósmosis refrigerada a 4ºC. La mezcla se puso bajo agitación débil
durante aproximadamente un minuto con el fin de homogeneizarla. La
cantidad de agua utilizada fue tal que la materia seca de la mezcla
agua + achicoria representó el 7,4% en masa de la mezcla. La mezcla
se mantuvo a 4ºC durante 24 horas sin agitación. Se efectuó a
continuación una primera filtración de manera que se eliminaron las
materias en suspensión. Esta filtración se realizó, por ejemplo, por
medio de una tela de filtro de prensa que presentaba un umbral de
hendidura de 10-20\mum. Esta primera filtración
puede realizarse igualmente por centrifugación o por cualquier otra
técnica conocida de separación sólido-líquido.
Después de esta primera filtración, se obtuvo un residuo sólido que
representaba aproximadamente el 18% en volumen de la mezcla inicial
y cuyo porcentaje de materia seca era de 16,5%. El jugo de
maceración obtenido igualmente representaba el 82% en volumen de la
mezcla inicial y presentaba un porcentaje de materia seca del orden
del 6%. Este jugo de maceración se diluyó con agua tratada por
ósmosis con el fin de llevarlo al volumen inicial de agua mezclada
con la achicoria. Después de esta solución, el porcentaje de materia
seca del jugo de maceración se situó en torno al 4,5%.
Se efectuó entonces una segunda filtración que
tenía principalmente por objeto obtener un jugo de maceración
limpio. Para hacer esto, se utilizaron placas de celulosa del tipo
K900, K300 o S80 que presentaban un umbral de hendidura medio
comprendido, respectivamente, entre 8 y 10 \mum, 4 \mum y 6
\mum y 0,22 \mum. Puede utilizarse igualmente cualquier otra
técnica análoga, como la filtración por membrana. El filtrado
obtenido correspondió con el extracto de compuestos activos de
achicoria de la presente invención.
Este extracto presentó las características
siguientes:
| Materia seca total: | de 4 a 5% |
| pH: | de 4 a 4,5% |
| Cenizas/materia seca: | de 4,4 a 5,6% |
| Proteínas/materia seca: | 3,1 a 4,1% |
| Coloración (medida a 420 nm): | de 1.500 a 1.700 |
| Turbiedad (medida a 600 nm): | 0,100 a 0,140 |
| Glucosa/materia seca: | de 7,5 a 8,0% |
| Fructosa/materia seca: | de 7,0 a 9,0% |
| DP2/materia seca: | de 14,0 a 16,0% |
| Inulina/materia seca: | de 6 a 9%. |
En el caso de un extracto obtenido después de
centrifugación por la separación de sólido-líquido y
filtración con un umbral de hendidura de 0,22 \mum, se obtuvo un
valor medio global de la coloración medida a 420 nm comprendida
entre 0,800 y 1,700 y un valor medio de turbiedad medida a 600 nm
comprendió entre 0,085 y 0,140.
El hecho de llevar a cabo la etapa de maceración
sin agitación, permitió influir en el balance de materia y la
distribución líquido/sólido. La Firma Solicitante ha observado, en
efecto, que el contenido en inulina del extracto obtenido fue más
pequeño sin agitación (inferior al 37%), mientras que el contenido
de azúcares libres del extracto fue independiente de la agitación.
Los resultados referentes a la influencia son reagrupados en las
tablas I a III adjuntas a la presente descripción.
La actividad antimicrobiana del extracto de la
invención ha sido sometida a ensayo igualmente.
Se redujeron en polvo mecánicamente 200 g de
C.I.L. en forma seca y se distribuyeron en dos lotes de 100 gramos
cada uno. Un primer lote denominado CIC/SEC/ED fue recuperado por
400 ml de agua destilada sometida a agitación magnética en cámara
refrigerada a 4ºC durante una noche. Puesto que la mezcla estaba
bastante inflada, se añadieron de nuevo 400 ml de agua destilada y
se recuperó la extracción acuosa. Después de 24 horas, la mezcla se
filtró y el material retenido fue lavado de forma abundante.
Un segundo lote denominado CIC/SEC/ALC fue
recuperado por 400 ml de etanol absoluto (99%) y se sometió a
agitación magnética en cámara refrigerada a 4ºC durante una noche.
La mezcla se filtró entonces y el material retenido fue lavado con
abundancia en etanol puro. El filtrado alcoholizado fue evaporado en
el rotovapor Buchi a vacío a 50ºC. El residuo pastoso fue recuperado
por 30 ml de agua destilada y puesto en diálisis contra el agua
destilada: la diálisis fue perseguida durante cuatro horas,
renovando el agua destilada de diálisis cada hora. El extracto fue
conservado entonces en congelación a -34ºC. Otros dos lotes
denominados respectivamente CIC/GRI/ED y CIC/GRI/ALC han sido
preparados conforme a este procedimiento a partir de achicoria
tostada, es decir, torrefactada.
Cada uno de los extractos secos congelados en
coquilla se sometió a una liofilización. La liofilización se
comprobó larga pero no se observó ninguna descongelación precoz o
intempestiva de las muestras.
Al final de la liofilización, se midieron las
cantidades de materia seca.
| CIC/SEC/ED | CIC/GRI/ED | CIC/SEC/ALC | CIC/GRIA/ALC | |
| Peso(g) | 7,96 | 14,36 | 0,4462 | 0,6742 |
| Peso seco | 3,98% | 7,18% | 0,22% | 0,33% |
| del | ||||
| extracto/200 | ||||
| g de materia | ||||
| primaria |
Los extractos acuosos (CIC/SEC/ED Y CIC/GRI/ED)
fueron recuperados por 100 ml de agua destilada, mientras que los
extractos alcoholizados fueron recuperados por 10 ml de agua
destilada. Una solución de achicoria soluble del comercio ha sido
preparada igualmente a razón de 10 g por 100 ml de medio de cultivo
TGY. El medio TGY fue definido de este modo:
\newpage
- tripticasa: 30 g
- extracto de levadura: 10 g
- glucosa: 27 mM
- tampón Tris: 100 mM
- ácido clorhídrico csp: pH 7,5
- agua bi-destilada csp: 1000
ml
El medio así formado fue distribuido en tubos de
25 ml y esterilizado en autoclave.
Este medio TGY sirvió en el cultivo de
Streptococcus mutans IM 2201 y Bacterionoma
matruchotii IM 2219 procedentes ambos de la colección del
Institut Mérieux. Los cultivos introducidos en el medio TGY fueron
incubados a 37ºC durante 24 horas.
Por otro lado, placa dental humana recién
recuperada del paciente fue puesta en cultivo igualmente en el medio
líquido "cerebro-corazón". Después de 24 horas
de desarrollo, este producto aislado de placa fue transferido sobre
el medio descrito con anterioridad.
De igual modo, se cultivaron Prevotella
intermedia AIP N 161/79 (ex Bacteroides intermedius) y
Porphyromonas gingivalis ATCC 32277 procedentes de la
colección del Instituto Pasteur y de la colección americana en
condiciones anaerobias durante 24 horas y 48 horas a 37ºC en un
medio líquido que tenía la siguiente composición:
- tripticasa: 30 g
- extracto de levadura: 20 g
- cisteína: 0,5 g
- hemina: 5 mg
- glucosa: 180 mM
- agua destilada csp: 1000 ml.
Se prepararon medios de cultivo de ensayo. Los
tubos TGY de 25 ml recibieron respectivamente 0,5 ml de extracto de
achicoria seca acuosa (CIC/SEC/D = 0,15% p/v), 0,5 ml de extracto de
achicoria tostada acuosa (CIC/CRI/ED = 0,28% p/v), 1 ml de solución
de achicoria de comercio ( = 0,4% p/v), 0,5 ml de extracto de
achicoria tostada alcohólica (CIC/GRI/ALC = 0,09% p/v). Cada tubo de
cultivo suplementario en extracto acuoso contenía un equivalente de
1 g C.I.L. y 10 g para el extracto alcohólico. Todos estos tubos
fueron introducidos en un autoclave durante 30 minutos y conservados
a 4ºC. Hay que indicar que estas concentraciones eran compatibles
con las condiciones de utilización de la achicoria en alimentación
humana.
A cada uno de los medios de ensayo anteriormente
descritos, a los que se añadieron tubos de ensayo desprovistos de
cualquier traza de achicoria bajo cualquier forma que sea, se
incorporó en condiciones estériles 1 ml de cultivo con edad 24 h, o
bien Streptococcus mutans o bien de producto aislado de placa
bacteriana dental humana.
Los estudios estadísticos mostraron la actividad
del extracto de achicoria. Para tiempos que varían de 0 a 21 h, se
efectuaron tomas de 3 ml en cada tubo después de agitación vortical.
Cada toma fue sometida a centrifugación 500 x g durante 5 mn a 4ºC
(estas condiciones respecto a la integridad de los cuerpos
bacterianos). Los sobrenadantes fueron eliminados cuidadosamente y
en cada culote se añadieron 2 ml de agua destilada. El total fue
entonces sometido a agitación vortical con el fin de redispersar las
células bacterianas en la fase acuosa. La turbiedad que reflejó el
crecimiento bacteriano para el cultivo dado fue medida para cada
muestra en un espectrofotómetro Beckman DU5 (dispositivo de
aspiración a la temperatura regulada a 610 nm de longitud de
ondas).
Se deduce de estos experimentos que los extractos
de C.I.L. de la invención perturban el crecimiento bacteriano
durante la fase logarítmica. Para Streptococcus mutans IM
2209, el efecto más sensible se manifestó en las primeras horas de
crecimiento.
El cultivo de Bacterionema matruchotii IM
2219 pareció que fue el más sensible a los extractos de C.I.L. de la
invención. El efecto inhibidor fue manifestado sobre todo en la
segunda fase de crecimiento entre 28 y 48 horas con todas las formas
de C.I.L. (seca acuosa, tostada acuosa, seca alcohólica, tostada
alcohólica, y achicoria de comercio).
La Firma Solicitante ha puesto igualmente en
evidencia este mismo efecto inhibidor sobre la placa bacteriana
dental humana puesta en cultivo con un retraso del crecimiento
global manifestado en la undécima hora, más pronunciado con el
extracto acuoso de achicoria tostada. Los gérmenes anaerobios
sometidos a ensayo fueron también sensibles a los extractos de
C.I.L. de la invención.
Con Prevotella Intermedia, este efecto fue
mucho más marcado con los extractos acuosos, pero permaneció
significativo con todas las formas utilizadas aquí compuestas con la
achicoria comercial. En cuanto a lo que se refiere a
Porphyromonas gingivalis, su crecimiento se efectuó a
incrementos de aproximadamente 10 a 20%.
Hay que indicar que las concentraciones de los
extractos de C.I.L. de la invención utilizados aquí fueron
comparables con el porcentaje consumido normalmente en alimentación
humana, o bien por una solución de medio de cultivo de 25 ml, el
equivalente de 1 g de materia prima (extracto acuoso) o 10 g
(extracto alcohólico).
En conclusión, el extracto de C.I.L. de la
presente invención redujo in vitro el crecimiento de las
especies bacterianas más representativas de la flora bucal. Su
crecimiento fue reducido por término medio de 10 a 50% según la
especies, la naturaleza de los extractos y los tiempos de cultivo
sobre el medio líquido.
El extracto de la invención utilizado para este
estudio fue obtenido después de maceración a 4ºC durante 24 horas
sin agitación de una mezcla de achicoria tostada en agua tratada por
ósmosis (que contenía 7,4% en masa de materia seca) y la filtración
del jugo de maceración así obtenida con un umbral de hendidura
comprendido entre 4 \mum y 10 \mum. La concentración en
achicoria de este extracto fue tal que contenía aproximadamente 4,5%
en masa de materia seca.
Este extracto fue utilizado para la preparación
de un enjuague y de una pasta dentífrica que contenía cada uno
aproximadamente el 10% en masa de este extracto.
La pasta gingival y el enjuague así obtenidos
fueron comparados con una pasta gingival a base de Sanguinarina, un
enjuague con clorhexidina y dos placebos (enjuague y pasta
gingival).
La clorhexidina es un compuesto empleado
comúnmente en la actualidad en parodontología; es un antiséptico
eficaz utilizado en numerosos ámbitos de la medicina a razón de su
débil toxicidad y de su gran espectro antibacteriano.
La sanguinarina es un antiséptico obtenido por
extracción alcohólica a partir de la planta Sanguinarina canadensis
originaria del norte de Canadá. Se mostró in vivo una
actividad de la sanguinarina sobre la inflamación gingival. Su
utilización fue sugerida frecuentemente en fase de mantenimiento del
tratamiento parodontal en complementación con medidas de higiene
oral.
El estudio siguiente fue llevado a cabo en 45
días para cada paciente durante un periodo que se entiende desde
septiembre de 1998 a octubre de 1999 y ha relacionado a 120
pacientes que responden a los criterios de inclusión. A cada
paciente se le atribuyó un expediente numerado. Los pacientes tenían
edades comprendidas entre los 35 y los 65 años y presentaban una
parodontitis de adulto según los criterios de la Academia Americana
de Parodontología y al menos una bolsa parondoltal superior a 3 mm
conformada por el examen radiográfico y clínico (criterios de
inclusión)
Los pacientes fueron separados de forma
arbitraria en seis grupos:
- achicoria de enjuague,
- achicoria de enjuague placebo,
- achicoria de pasta gingival,
- achicoria de pasta gingival placebo,
- pasta gingival con la sanguinarina
(PERIOGARD^{®})
- enjuague con la clorhexidina de 0,12%
(PAROEX^{®}).
Cada grupo comprendía 20 pacientes.
En el día "J0" del experimento, se efectuó
una desincrustación supra gingival para colocar los pacientes
en las condiciones de higiene inicial similares. Se revelaron tres
índices durante el estudio sobre seis dientes (16, 12, 24, 36, 32,
44);
- índices de la placa (Silness et Loe 1964) -
- índice gingival (Loe et Silness 1963 -
GI-),
- índice de sangrado (Mühlemann - HR - modificado
en 1981)
Para el grupo de achicoria de enjuague, la
disminución de los índices se pudo observar entre J15 y J45 para los
índices de placa, gingival y sangrado. La evolución de los índices
J15 a J45 fue de 0,93 a 0,53 (índice de placa), 1,01 a 0,52 (índice
gingival), 1,04 a 0,51 (índice de sangrado). Estas disminuciones
parecieron de una amplitud comparable con la obtenida con el
enjuague PAROEX^{®}.
Para el grupo que utiliza un enjuague
PAROEX^{®}, los índices evolucionaron todos favorablemente
confirmando la eficacia ya probada de la clorhexidina sobre los
parámetros clínicos de la inflamación y la reducción de la
acumulación de la placa bacteriana. La evolución de los índices J15
y J45 fue de 0,87 a 0,45 (índice de placa), 0,96 a 0,58 (índice
gingival), 0,97 a 0,62 (índice de sangrado).
Con relación al grupo placebo de enjuague, la
evolución de los índices J15 a J45 fue de 0,69 a 0,60 (índice de
placa), 0,79 a 0,66 (índice gingival), 0,97 a 0,71 (índice de
sangrado). El producto no pareció modificar de modo significativo el
índice de placa, tenía poca acción sobre el índice gingival a pesar
del efecto de cepillado y redujo el índice de sangrado. El estudio
estadístico precisará si estas variaciones fueron
significativas.
Para el grupo achicoria de pasta gingival, se
observó una bajada global sobre los tres índices clínicos. La
evolución de los índices de J15 a J45 fue de 0,84 a 0,48 (índice de
placa), 0,90 a 0,46 (índice gingival), 0,97 a 0,51 (índice de
sangrado).
Para el grupo PERIOGARD^{®}, la evolución de
los índices J15 a J45 fue de 0,60 a 0,49 (índice de placa), 0,65 a
0,61 (índice gingival), 0,83 a 0,68 (índice de sangrado).
Con relación al grupo placebo de pasta gingival,
la evolución de los índices de J15 a J45 fue de 0,80 a 0,81 (índice
de placa), 0,85 a 0,73 (índice gingival), 0,81 a 0,90 (índice de
sangrado). Los índices observados presentaron modificaciones débiles
o nulas entre J15 y J45 al final del estudio. El índice de sangrado
presentó un aumento sensible mostrando que se trataba de un grupo
placebo.
Los estudios estadísticos efectuados (ensayo de
Student) mostraron que las diferencias observadas fueron para todos
los índices significativos, muy significativas incluso altamente
significativas en el día J45 en el grupo "achicoria enjuague",
y el grupo "achicoria pasta gingival". De igual modo, las
variaciones observadas entre J15 y J45 fueron comparables, incluso
superiores (pasta gingival) a las observadas con los productos
activos utilizados en el grupo controlado.
Hay que indicar que el extracto de la invención
utilizado para la preparación del enjuague y de la pasta dentífrica
descritos anteriormente presentó un sabor y un color tales que
particularmente en la proporción indicada anteriormente (10%), la
pasta dentífrica y el enjuague obtenidos tenían todos una coloración
beige pálido aceptable para el consumidor y un gusto poco
pronunciado calificado como no molesto incluso agradable para los
pacientes usuarios. La utilización del extracto obtenido en caliente
no permitió obtener tales resultados.
Por otro lado, no se ha mostrado ninguna
coloración de los dientes ni de las mucosas malares, labiales y
gingivales.
La actividad anti-inflamatoria
del extracto de la invención fue sometida a ensayo igualmente in
vitro.
El extracto utilizado para este estudio
correspondía con el extracto de la invención obtenido en el ejemplo
de preparación de un primer extracto de achicoria descrito
anteriormente. El objetivo principal del ensayo fue estudiar los
mecanismos de acción de la achicoria sobre la inflamación y el
efecto sobre la secreción de interleucina 1 alfa
\hbox{(IL-1 \alpha )} marcado precoz de
la inflamación.
El modelo in vitro utilizado fue de los
cultivos de queratocitos gingivales humanos normales. La
1L-1\alpha fue medida en los medios de incubación
de los queratocitos por dosis ELISA. Los efectos del extracto de
achicoria de la invención fueron comparados con los observados en
presencia de la dexametasona, utilizada como producto de referencia.
El extracto de achicoria sometido a ensayo en las concentraciones de
0,01 a 0,4% (P/V) mostró después de 24 horas de incubación, un
efecto que pudo ser calificado de anti-inflamatorio
en queratocitos gingivales humanos en cultivo. Los efectos
observados fueron comparables incluso superiores a los obtenidos en
presencia de la dexametasona, producto
anti-inflamatorio farmacológico de referencia.
Por otro lado, la Firma Solicitante ha confirmado
que la IL-1\alpha aumentaba la proteolisis de la
matriz extra celular de los fibroblastos gingivales humanos. Así
pues, el extracto de la achicoria de la invención que disminuye la
liberación de la IL-1\alpha a partir de las
células superiores de la mucosa bucal (los queratocitos) puede
pretender ejercer una protección anti-proteólisis de
la matriz extra celular de la encía en respuesta a una reacción
inflamatoria.
Claims (15)
1. Procedimiento de extracción por un disolvente
de compuestos activos de la achicoria, caracterizado
porque:
- se hace macerar la achicoria en dicho
disolvente a una temperatura comprendida entre 0ºC y 6ºC, durante un
periodo de al menos doce horas; y
- se filtra el jugo de maceración con un umbral
de hendidura de un valor al menos igual a 0,22 \mum.
2. Procedimiento según la reivindicación 1,
caracterizado porque la cantidad de achicoria utilizada es
tal que la mezcla disolvente más achicoria contiene al menos el 5%
y, preferentemente, el 7,4% de materia seca.
3. Procedimiento según una de las
reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque se efectúa,
previamente a la filtración con un umbral de hendidura de al menos
0,22 \mum, una primera filtración con un umbral de hendidura
comprendido entre 10 \mum y 20 \mum.
4. Procedimiento según la reivindicación 3,
caracterizado porque después de dicha primera filtración, se
diluye el filtrado de modo que la materia seca de dicho filtrado es
sensiblemente igual o igual al 4,5%.
5. Procedimiento según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque dicha achicoria
es tostada antes de la maceración.
6. Procedimiento según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque dicha achicoria
está en forma de polvo y porque se realiza una mezcla homogénea de
la achicoria y de dicho disolvente, bajo agitación débil.
7. Procedimiento según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque la fase de
maceración es realizada sin agitación.
8. Procedimiento según una de las
reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque se filtra el
jugo de maceración con un umbral de hendidura inferior o igual a 10
\mum.
9. Procedimiento según una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 8, caracterizado porque dicho disolvente
utilizado es agua.
10. Procedimiento según la reivindicación 9,
caracterizado porque se hace macerar dicha achicoria a una
temperatura sensiblemente igual o igual a 4ºC.
11. Procedimiento según la reivindicación 10,
caracterizado porque se hace macerar dicha achicoria durante
un periodo sensiblemente igual o igual a 24 horas.
12. Utilización del extracto obtenido según el
procedimiento de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, para
la preparación de una composición destinada a la higiene bucal.
13. Utilización del extracto de achicoria
obtenido según el procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 11, para la preparación de una composición
cosmética.
14. Enjuague que contiene una cantidad
comprendida entre el 8% y el 12% y, preferentemente, igual o
sensiblemente igual al 10% en masa del extracto de achicoria
obtenido según el procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 2 a 11.
15. Dentífrico que contiene una cantidad
comprendida entre el 8% y el 12%, y preferentemente igual o
sensiblemente igual al 10% en masa del extracto de achicoria
obtenido según el procedimiento de una cualquiera de las
reivindicaciones 2 a 11.
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